2 Determinarea grupelor sanguine prin metoda Beth-Vincent cu ser

antiA antiB
Hematia uman are un numr foarte mare de antigene pe suprafaa sa.
Anticorpii respectivi poart numele de aglutinine pentru faptul c provoac
reacii de aglutinare.
Aglutininele sunt anticorpi naturali i se gsesc n serul sanguin. D e o importan deosebit
sunt aglutinogenele A i B, precum i aglutinogenul Rh.
Fa de aglutinogenele A i B, n sngele altor persoane exist anticorpi naturali =
aglutininele (alfa) (ANTI-A) i (beta) (ANTI-B). Coexistena unui aglutinogen cu aglutinina
corespunztoare (A , B ) la aceeai persoan nu este compatibil cu viaa, deoarece
prezena aglutinogenului i aglutininei omoloage produce aglutinarea globulelor roii.
Studierea fenomenului de hemaglutinare a fcut posibil descoperirea grupelor sanguine
de baz - sistemul O.A.B. (zero, A, B)
Sistemul sanguin O.A.B. cuprinde patru grupe de snge. Grupele se noteaz dup
numele aglutinogenului, deosebindu-se astfel: grupa: 0 (zero) A, B i AB. Un alt cercettor
clasific grupele sanguine notndu-le cu cifre romane: I, II, III, IV.
Astzi, pentru a nltura posibilitatea unei interpretri greite a grupelor sanguine de baz,
ambele clasificri au fost unificate, sistemul sanguin OAB fiind reprezentat astfel:
grupa
0 (zero unu)
A II (A-doi)
B III (B-trei)
AB IV (AB-patru)

aglutinogen (antigen)

aglutinine (anticorp)

A
B
AB

Dup cum se vede, grupa 0 (I) nu are nici un aglutinogen (zero aglutinogen), celelalte
au aglutinogen A sau B, sau amndou - AB.
Determinarea grupelor sanguine se face prin dou metode:
1) metoda direct Beth-Vincent (aglutinine cunoscute i aglutinogen necunoscut);
2) metoda invers - Simonin (aglutinogen cunoscut i aglutinine necunoscute) .
Transfuzia de snge nu se poate efectua fr determinarea grupei sanguine.
Metoda Beth-Vincent cu ser anti-A anti-B
Anticorpii monoclonali ANTI A i ANTI B sunt de tip IgM i produc aglutinarea direct, pe
lam, la temperatura camerei, a antigenelor omoloage A, respectiv B. Reactivii au fost
testai prin mai multe metode, sunt specifici, au o aviditate mult mai mare dect cele de surs

uman.
Metoda de lucru:
Se folosete snge venos 3-4 ml.
Pe o lam cu godeuri, se picur cte o pictur de ser ANTI A respectiv ANTI B;
alturi, n dreptul fiecrei picturi de ser, se adaug cte o pictur de eritrocite de
determinat (pictura de 10 ori mai mic dect pictura de ser); picturile de ser se
omogenizeaz cu cele de eritrocite, cu colul unei lame sau cu bagheta de sticl; dup 34 secunde, apar primele semne de aglutinare, iar reacia este complet dup un minut.
1. Dac aglutinarea nu se produce, nseamn c sngele cercetat nu are aglutinogenul.
Aparine grupei 0I.
2. Dac aglutinarea se produce n serul ANTI A, nseamn c sngele cercetat are
aglutinogen A. Sngele aparine grupei AII.
3. Dac aglutinarea se produce n serul ANTI, B, nseamn c sngele de cercetat are
aglutinogen B. Snge/e aparine grupei B III.
4. Dac aglutinarea se produce n ambele seruri-test, nseamn c sngele conine att
aglutinogen A, ct i aglutinogen B ; Face parte, deci, din grupa AB IV.
Important: simultan cu determinarea antigenelor A i B, prin metoda de mai sus, este
obligatorie i determinarea anticorpilor, prin metoda Simonin:
Metoda de determinare a aglutininelor
Pentru metoda Simonin se folosesc hematii test care se obin de la fiecare punct de
transfuzie; valabilitatea hematiilor este de maximum 3 zile.
Avem, deci, aglutinogen cunoscut i aglutinine necunoscute.
Materialele necesare sunt aceleai ca i la proba direct(seruri-test, lam cu 3 godeuri,
lame de sticl curate i uscate, pipete pentru fiecare ser hemotest n parte, pipete pt.sngele
de cercetat, materiale pentru recoltat sngele) dar, n loc de seruri-test, se folosesc eritrocitetest. Este nevoie, de asemenea, de ser sau plasm, deci nu este suficient recoltarea numai
prin neparea pulpei degetului, ci trebuie s se recolteze snge prin puncie venoas.
Tehnica :

cu o pipet Pasteur, pune cte o pictur din serul sau plasma de cercetat n dou godeuri;

deasupra fiecrei picturi de ser de cercetat, aflat pe lam, se pune o picatur din
hematiile test - cu aglutinogenul cunoscut, respectiv hematii - test AII i BIII;

Atenie! i prin aceast metod, cantitatea de ser este de 10 ori mai mare dect cea de
hematii.

- se efectueaz omogenizarea.
interpretarea rezultatelor
- Dac aglutinarea s-a produs n ambele picturi omogenizate, nseamn c n serul de cercetat
se afl ambele aglutinine ( i ) ; Serul de cercetat face, deci, parte din grupa 0I.
- Dac aglutinarea se produce numai n pictura de ser n care am pus eritrocite - test BIII nseamn c aglutinogenul B s-a ntlnit cu aglutinina omoloag ; Deci serul aparine grupei
AII.
- Dac aglutinarea se produce numai n pictura de ser n care am pus eritrocite - test A II nseamn c s-a ntlnit cu aglutinina a, care a aglutinat hematiile-test. Serul aparine
grupei B III.
- Dac aglutinarea nu s-a produs n nici una din picturile serului de cercetat nseamn c serul
nu are aglutinine, deci face parte din grupa ABIV.