Microbiologie medical

Definiii
Microbiologia = tiina care se ocup cu studiul
microorganismelor. Microorganism = organism unicelular care poate fi pus n eviden numai cu ajutorul microscopului optic sau electronic.

Istoric

sute de ani existena microbilor a fost bnuit dar prezena lor a putut fi documentat doar odat cu apariia microscopului;

Istoric

1665 Robert Hooke, un tnr cercettor englez, a fost primul care a vzut i descris fungii cu ajutorul unui microscop rudimentar.

Istoric

n 1673 Antonius van Leeuwenhoek, cercettor olandez, a observat primele microorganisme tot la un microscop propriu, rudimentar. Este considerat printele microbiologiei

Istoric

Desenele cu animalculi publicate la Londra n 1784 au zdruncinat lumea tiinific de atunci. A fost pentru prima dat cnd bacteriile au putut fi vzute.

Teoria generaiei spontane sau a heterogeniei

Francesco Redi, un filosof italian, a artat c viermii nu se nasc spontan din carne, ci din oule depuse de mute.

Teoria generaiei spontane

John Needham, un preot englez, susinea c moleculele inerte din lichidele biologice se pot grupa formnd animalculi Lazaro Spallanzani, n 1765, a demonstrat c un bulion fiert, lsat n contact cu aerul, dup cteva zile se tulbur, dar rmne limpede dac balonul este nchis Disputele, experimentele, au continuat pn la experimentul lui Rober Koch.

Biblio: pg 1-3, Microbiologie medical, D Buiuc (ed), 2003, Editura Gr. T. Popa Iai

Combaterea teoria generaiei spontane

n 1859 chimistul francez Louis Pasteur discrediteaz definitiv aceast teorie prin conceperea balonului cu gt de lebd n care aerul nu avea acces i bulionul fiert putea fi pstrat indefinit fr ca n el s se devolte microorganisme.

Combaterea teoriei generaiei spontane

Istoric

Consecinele acestor experimente au fost:

imaginarea primului mediu de cultur pentru bacterii bulionul de carne - folosit i astzi; elaborarea unor metode simple de dezinfecie (distrugerea tuturor microorganismelor dar nu i a sporilor); introducerea conceptului manipulrii aseptice a obiectelor, produselor patologice, etc. (la adpost de microorganisme);

Intemeietorii microbiologiei:

Luis Pasteur (1822-1895) - Pune bazele sterilizrii i metodicii lucrului

aseptic.

- Descoper natura microbian a proceselor de fermentare anormal a vinului. Face legatura ntre bolile vinului i unele boli infectocontagioase la animale i om. Descoper numeroi ageni etiologici ai acestora. Realizeaz vaccinuri prin inactivarea sau atenuarea patogenitii unor microorganisme (rabie, antrax, holera ginilor).

Istoric

n 1776, Edward Jenner, medic englez, realizeaz prima vaccinare experimental mpotriva variolei. In prezent, variola este singura boal infeioas eradicat.

Istoric

n 1841, cu 30 de ani nainte de formularea teoriei germenilor, Ignaz Semmelweis introduce pentru prima dat n lume splatul pe mini i folosirea halatelor curate n maternitatea pe care a condus-o la Viena (prima aplicaie practic a antisepsiei).

Teoria germenilor
ncepnd cu 1870 Robert Koch, medic german, a evideniat agentul etiologic al antraxului, holerei i tuberculozei; Public n 1876 rezultatele experimenteloro care au stat la baza formulrii postulatelor lui Koch

Robert Koch (1843-1910)

- A examinat microorganismele n preparate -

fixate prin caldur i colorate cu colorani bazici. A introdus mediile solide n practica diagnosticului microbiologic. A reprodus experimental boli infecioase prin inocularea agentului etiologic la animale de laborator.

Robert Koch
A descris secvene experimentale pentru susinerea relaiei cauzale ntre un microorganism i manifestrile de boal (postulatele lui Koch): microorganismul care a determinat boala este depistat la toi bolnavii iar distribuia n organism corespunde leziunilor caracteristice bolii; - Consecine practice microorganismul care a determinat boala poate fi izolat n cultur pur i subcultivat pentru a fi studiat; - Consecine practice cultura pur inoculat la un animal receptiv reproduce boala cu leziuni specifice de unde poate fi reizolat. - Consecine practice, excepii

Istoric

Chirurgul englez Joseph Lister a folosit principiile antiseptizrii i asepsiei i a redus, n 1860, la 15% mortalitatea datorat interveniilor chirurgicale.

Alte descoperiri importante:

1884 - Cristian Gram dezvolt o metod de colorare i difereniere a bacteriilor; 1887 - Petri realizeaz plcile Petri; 1892 - Ivanovski descoper virusurile; 1910 - Paul Ehrlich descoper salvarsanul primul chimioterapic folosit n terapia sifilisului;

Alte descoperiri

1928 Alexander Fleming descoper penicilina; 1977 Gilbert i Sanger secvenializeaz ADN-ul; 1983 Mullis pune bazele reaciei de amplificare genic (PCR); 1983 Luc Montaigner i Robert Gallo descoper HIV; Microbiologi romni: Victor Babe (co-autor la primul tratat de bacteriologie) i Ion Cantacuzino (creatorul colii de microbiologie n Romnia).

Disciplinele Microbiologiei
-

Microbiologia are numeroase discipline si sub-discipline. In principal, ne vom adresa cunoaterii: Virusologiei Bacteriologiei Geneticii microbiene Parazitologiei (modul separat)

Ca discipline ale MICROBIOLOGIEI, putem enumera: - Fiziologia microorganismelor - Genetica microbian - Microbiologie celular - Microbiologia medical - Microbiologia veterinar - Microbiologia mediului -Microbiologia industrial -Microbiologia aerului, alimentului -Microbiologie farmaceutic
-Aceste domenii presupun cunoaterea unor noiuni privind nutriia i metabolismul microorganismelor, mecanisme de reproducere, vaccinologie, etc.

Conexiuni inter-disciplinare

Biochimie Fiziologie Genetic Imunologie Histologie Semiologie medical i chirurgical Cariologie Paradontologie

Lumea microorganismelor

- Microorganisme cu structur celular:

Eucariote (regnul Eucaryota), constituite din
celule cu structur evoluat: fungi i protozoare; Procariote (regnul Procaryotae), constituite din celule cu structur primitiv: bacterii i alge albastre-verzi.

- Entiti acelulare, la limita viului: virusuri (strict

parazite intracelular).

Clasificarea bacteriilor
1. 2.

3.

Clasificarea fenotipic; Clasificarea analitic; Clasificarea genotipic; Taxonomie: clasificarea sistematic a bacteriilor n grupe ordonate.

Clasificarea fenotipic
Dup afinitatea tinctorial: Gram pozitive; Gram negative; Dup form: Sferice sau ovalare coci; Alungite bacili; Virgul vibrioni; Spiralate spirochete;

Coloratia Gram

Stafilococi: microscopie

Neisseria frotiu Gram

Bacili Gram pozitiv, sporulai, spor sferic, situat terminal

Bacili Gram- negativ

Clasificarea fenotipic
Dup caracterele de cultur: Hemoliza, pigmentogeneza, forma, mrimea coloniilor, mirosul degajat de o cultur; Dup prezena sau absena unor markeri biochimici specifici. Serotipare: anticorpii formai fa de antigenele bacteriene unice pot fi folosii pentru identificarea lor. Dup comportamentul fa de antibiotice (patern de rezisten).

Clasificarea analitic
Regn ordin familie gen- specie subspecie. Ex. Ordin: Eubacteriales Ex. Familie: Enterobacteriaceae Ex. Gen: Escherichia Ex. Specie: Escherichia coli Ex. Specie: Fusobacterium nucleatum subsp. nucleatum

Clasificarea genotipic
Analiza materialului genetic: Raportul guanin citozin Hibridizarea ADN Analiza secvenelor nucleotidice Analiza plasmidelor Ribotipare (analiza fragmentului ARN-16S, de la

nivelul subunitii 30S aribozomilor )

Analiza

ADN-ului cromosomal.

Lumea microorganismelor

Bacteriile au dimensiuni cuprinse ntre 1 i 10 m i sunt observate la microscopul optic.

Structura celulei bacteriene

Structuri constante material nuclear sau nucleoid citoplasm membran citoplasmatic perete celular Structuri facultative glicocalix flageli pili comuni (fimbrii) i pili sexuali endospor

Structura celulei bacteriene schematic

STRUCTURA BACTERIILOR

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear Citoplasma

Membrana citoplasmatica
Peretele bacterian (exceptie:

Mollicutes - Mycoplasma)

Material nuclear
echivalentul nucleului celulelor eucariote, fr
membran nuclear i nucleol; molecul circular unic de ADN (1000-2000 m) cu structur bicatenar complementar i antiparalel; pentru a ocupa un spaiu ct mai redus, dublul helix este rulat n sens negativ sub efectul ADN-girazei;

unele bacterii au n citoplasm plasmide, molecule

mici, circulare de ADN, care confer avantaje selective (e.g. rezistena la antibiotice, producerea de toxine, etc.); plasmidele reprezint informaie genetic extracromozomal.

Material nuclear

funcii:
- reprezint suportul genetic al caracterelor ereditare; transmite informaia genetic la celulele fiice prin autoreplicare; transmite informaia catre ribozomi prin heteroreplicare;

Cromozomul bacterian i plasmidele

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear Citoplasma

Membrana citoplasmatica
Peretele bacterian (exceptie:

Mollicutes)

Citoplasma

hidrogel coloidal care prezint: - o faz dispersant ce conine ap, substane organice i sruri anorganice; - o faz dispersat reprezentat de: ribozomi, mai mici dect la celulele eucariote (50S i 30S), sediul sintezelor proteice; incluzii, acumulri de substane organice sau anorganice prezente la unele bacterii (reprezint depozite de nutrieni; pot avea carcater taxonomic e.g. granulaiile de volutin prezente la Corynebacterium diphteriae).

Ribozomii

Ribozomii

Sintetizarea proteinelor

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear Citoplasma

Membrana citoplasmatic
Peretele bacterian (excepie:

Mollicutes - Mycoplasma, Ureaplasma).

Membrana citoplasmatic

mrginete la exterior citoplasma; constituit din dou straturi fosfolipidice n

care floteaz molecule proteice;

nu conine steroli (excepie micoplasmele);

Membrana citoplasmatic

Membrana citoplasmatic la b.g.n.

Membrana citoplasmatic

funcii:

- barier osmotic, cu proprieti de permeabilitate

i transport selective; - sediul metabolismului energetic; - include enzime implicate n sinteza unor structuri celulare; - rol n chimiotaxie; - structura i funcionalitatea pot fi afectate de unele antibiotice i dezinfectante.

STRUCTURI ESENTIALE:
Materialul nuclear Membrana citoplasmatica

Citoplasma
Peretele bacterian (excepie: nu

este prezent la Mollicutes: Mycoplasma, Ureaplasma)

Peretele celular

structur particular celulelor procariote; nvelete protoplastul n contact intim cu

membrana citoplasmatic; structura sa diferit condiioneaz comportamentul bacteriilor n coloraiile difereniale: Gram i Ziehl-Neelsen; peptidoglicanul sau mureina reprezint constituentul de baz, constant prezent la bacterii (excepie chlamidiile i micoplasmele).

Compoziia peretelui dicteaz comportamentul diferit in coloraia Gram

Coloraia Gram
Gram negativ (roii) Gram pozitiv (violet)

Bacterii Gram pozitiv Streptococcus (coci sferici, n lanuri)

Bacterii Gram negativ b.g.n.

(Ex. Escherichia, Salmonella) (b.g.n., celule inflamatorii)

Coloraia Ziehl- Neelsen (b.a.a.r i ne-a.a.r.)

Peretele bacteriilor Gram (+)

Peretele bacteriilor Gram (-)

Structura peptidoglicanului

reea macromolecular alctuit din lanuri glicanice

legate prin puni peptidice; este mai bine reprezentat cantitativ la bacteriile grampozitive; lanurile glicanice sunt formate din alternana a dou aminozaharuri: N-acetilglucozamina i acidul Nacetilmuramic; lanurile tetrapeptidice constituite din alternana unor aminoacizi n forma L sau D se leag de gruprile carboxil ale acidului N-acetilmuramic ; la bacteriile gram-pozitive unitile tetrapeptidice ale lanurilor glicanice adiacente sunt legate prin puni transversale polipeptidice.

Peptidoglicanul - BGN bidimensional; puntea pentaglicanica, BGP tridimensional; puni polipeptidice

Reeaua macromolecular alctuit din lanuri glicanice legate prin puni peptidice

L-alanine D-glutamic acid L-lysine/Diaminopimelic acid D-alanine D-alanine

Peptidoglycan

Muramic acid

Glucosamine

Peptidoglican- schematic

(sunt proteinele de legare ale penicilinei PLP analog strutural de Dala-D-ala, se fixeaz pe PLP si inhib sinteza peptidoglicanului)

Sinteza peptidoglicanului controlat de enzime de pe suprafaa extern a membranei citoplasmatice

Citoplasma

Membrana celulara
undecaprenol

Perete celular

zahar amino acid

Sinteza peptidoglicanului

Controlat de enzime de pe suprafaa extern a membranei citoplasmatice: - transglicozilazele, leag cele 2 zaharuri; - transpeptidazele, catalizeaz formarea subunitilor i punilor peptidice structuri care conin dipeptidul D-alanin-D-alanin. Peretele bacterian este ancorat n MC, prin lanurile de glican in formare.

Sinteza peptidoglicanului

Enzimele care controleaz sinteza peptidoglicanului sunt denumite:

PLP analog strutural de D-ala-D-ala; Penicilina se fixeaz pe PLP si inhib sinteza peptidoglicanului penicilina face parte dintrre antibioticele care acioneaz asupra bacteriilor prin distrugerea peretelui.

proteinele de legare ale penicilinei

Funciile petidoglicanului

structur rigid i rezistent, previne explozia

protoplastului n medii hipotone echilibreaz presiunea osmotic intracelular (5-20 atm); confer forma stabil caracteristic: coci, bacili, cocobacili, spirili, spirochete; particip la diviziunea celular; reprezint inta de aciune pentru lizozim i unele antibiotice.

Interes medical
sensibilitatea la lizozim; este inta unor antibiotice active asupra peretelui bacterian (e.g. penicilinele); are proprieti antigenice i de adjuvant imunologic.

Forma bacteriilor

Structuri speciale ale peretelui la bacterii gram-pozitive

acizi teichoici (legai de peptidoglican) i

lipoteichoici (legai de membrana citoplasmatic)

polizaharide neutre (e.g. antigenele Lancefield la

streptococi)

proteine de suprafa cu funcie de - adezine (implicate n ataare) sau cu - efect antifagocitar (proteina M, proteina A, proteine de
legare la fibronectin etc)

Structuri speciale ale peretelui la bacterii gram-pozitive

acizi teichoici (legai de peptidoglican) i lipoteicoici

(legai de membrana citoplasmatic)

apar ca structuri fibrilare pe suprafaa celulei au urmtoarele funii: Ag de specificitate; leag ioni de Mg i enzime autolitice; se ataeaz de suprafaa celulelor eucariote (factori de

ataare/colonizare); se leag de receptori de pe suprafaa macrofagelor, cu eliberare de citokine proinflamatorii; prezint receptori pentru bacteriofagi (virusuri ale bacteriilor) sau bacteriocine (antibiotice produse de bacterii);

Structuri speciale ale peretelui la bacterii gram-negativ membrana extern reprezentat de

2 straturi asimetrice din fosfolipide; stratul extern care include LPS (lipopolizaharidul), molecul complex cu trei regiuni: lipidul A (endotoxina); core (miez) sau Ag R, de natur polizaharidic; Ag O, cu specificitate de grup, format din uniti oligozaharidice repetate; lipoproteine care leag membrana extern de peptidoglican;

Structuri speciale ale peretelui la bacterii gram-negativ

- porine, molecule proteice n triplet, care -

formeaz pori pentru pasajul unor molecule hidrofile; proteine cu rol n transportul specific al unor molecule (vit. B12, aa, nucleozide); proteine receptor pentru complexul Fesiderofor, pentru bacteriofagi sau bacteriocine; proteine cu rol n patogenitate (adezine sau cu efect antifagocitar).

Membrana extern
* Membrana extern oprete accesul spre
protoplast a unor substane cu greutate molecular mare i a unor molecule hidrofobe potenial nocive. * In consecin, bacteriile gram-negative sunt mai rezistente dect cele gram-pozitive la dezinfectante, antiseptice, antibiotice.

Spaiul periplasmic

situat ntre membrana extern i membrana

degradare a unor antibiotice);

citoplasmatic; conine peptidoglican, lipoproteine, proteine de transport i enzime degradative (hidrolaze, enzime de

enzimele stocate n spaiul periplasmic sunt

eliberate dup necesiti in mediul extracelular, spre deosebire de bacteriile gram-pozitive care le elibereaz imediat dup ce au fost sintetizate.

Structuri speciale ale peretelui la bacterii a.a.r.

arabinogalactan, polizaharid cu unele proprieti ale endotoxinei; acizi micolici acizi grai cu catene lung (C70-C90) Complexul arabinogalactan acizi
micolici confer:

- comportarea particular n coloraia Ziehl-Neelsen; - rezistena la factori de mediu (desicaie,

dezinfectante, antibiotice);

lipide de suprafa micozide

Structuri speciale ale peretelui la bacterii a.a.r.

lipide de suprafa (sulfolipide, fosfolipide, cord

factor), cu rol in patogenitate; - complexul lipoarabinoglican si fosfilipide, induce reacia tisular caracteristi (formarea de granuloame, metaplazierea macrofagelor n celule gigante (celule Langhans) i celule epitelioide)

micozide (sunt peptidoglicolipide, glicolipide), formeaz la

exterior un nveli care contribuie la supravieuirea in celule fagocitare (rezistent la enzimele lizozomale din fagolizozomul macrofagelor) sunt bacterii facultativ intracelulare.

Bacterii cu perete modificat

protoplati (la bacterii gram-pozitive) i sferoplati

(la bacterii gram-negative);

- apar sub efectul unor ageni inhibitori ai peptidoglicanului (lizozim, antibiotice); - pot supravieui n medii hipertone, pot fi metabolic active dar nu pot s se multiplice; - sferoplatii, n absena agentului inductor, pot reveni la
forma de origine.

forme L

- apar spontan sau sub efectul unor ageni inductori (oc osmotic sau termic, antibiotice); - pot s se multiplice (mai lent), dnd colonii cu aspect particular (aspect de ou prjit); - pot fi reversibile sau stabile.

Consecine
Este posibil ca n medulara renal, sub efectul unor antibiotice beta-lactamice s apar sferoplati care pot explica recderi ale infeciei renale dup ntreruperea antibioterapiei.

Structura celulei bacteriene

Structuri constante material nuclear sau nucleoid citoplasm membran citoplasmatic perete celular Structuri facultative glicocalix flageli pili comuni (fimbrii) i pili comuni endospor

Glicocalix

a treia structur de nveli, constiuit din polizaharide (la Bacillus anthracis structur polipeptidic); se prezint sub dou forme: - capsula (glicocalix dens: nu poate fi separat prin centrifugare, nu

este penetrat de colorani, deci este vizibil doar in coloraii negative cu tu de India sau nigrozin) penetrat de particule colorate vizibil in ME, dup coloraii speciale rou ruteniu)

- glicocalix lax (slime: poate fi separat prin centrifugare, este

funcii: - confer rezisten la fagocitoz i ageni chimici (antibiotice); - ligant la receptorii de pe suprafaa celulelor eucariote sau suprafee inerte; - Ag de specificitate (Ag K)

Structura celulei bacteriene

Structuri constante material nuclear sau nucleoid citoplasm membran citoplasmatic perete celular Structuri facultative glicocalix flageli pili comuni (fimbrii) i pili comuni endospor

20.10

Flageli
structuri filamentoase lungi i subiri, de natur proteic (flagelina); constituii din filament flagelar flexuos, articulat printr-un croet
la corpusculul/complexul bazal - cilindru axial asociat cu unul sau dou perechi de inele (la gram-pozitivi: inelul M si S, respectiv gram-negativi: inelele M si S, la care se adaug P i L); M- flotant in ME, S supramembranar; P n stratul de peptidoglican; L flotant n ME

numrul i dispoziia flagelilor reprezint un caracter taxonomic; confer mobilitate bacteriilor (bacili, vibrioni, spirili, spirochete); prezint Ag cu specificitate de tip (Ag H).

FLAGELI (ME)

Structura celulei bacteriene

Structuri constante material nuclear sau nucleoid citoplasm membran citoplasmatic perete celular Structuri facultative glicocalix flageli pili comuni (fimbrii) i pili sexuali endospor

Fimbrii (pili comuni)

structuri fibrilare , mai scurte dect

flagelii, prezeni pe toat suprafaa unor bacterii gram-negative; constituite din subuniti proteice (pilina); ader la receptori specifici celulari (importani factori de colonizare); pot funciona ca Ag specifice.

Pili sexuali

structuri fibrilare

n numr mai redus, mai lungi dect flagelii, cu extremitatea liber butonat; au rol n transferul ADN prin conjugare.

Structura celulei bacteriene

Structuri constante material nuclear sau nucleoid citoplasm membran citoplasmatic perete celular Structuri facultative glicocalix flageli pili comuni (fimbrii) i pili sexuali endospor

Endospor

celul bacterian inactiv metabolic, cu citoplasma

deshidratat, protejat de structuri de suprafa suplimentare (cortex, tunic, exosporium); protoplastul deshidratat conine cantiti mari de dipicolinat de Ca (confer termorezistena); sporul este deosebit de rezistent la factori de mediu (ageni fizici i chimici); prezena, forma i dispoziia sporului constituie criteriu taxonomic; poate germina n condiii favorabile de mediu, genernd bacteria de origine.

Sporularea versus germinarea

Sporularea -transformarea bacteriei n spor n stare deshidratat, supravieuire ndelungat. Condiii favorabile germinarea: este activat o autolizin a cortexului; apa i nutrienii difuzeaz spre protoplast rehidratare ruperea nveliurilor sporale eliberarea bacteriei sub form vegetativ.

Fungi-caractere generale

Fungii sunt un grup mare de organisme multinucleate, cu nuclei de tip eucariot, dispersai ntr-un cenocit micelial (mas citoplasmatic continu, multinucleat) si acoperit cu un perete celular polizaharidic (hemiceluloz, chitin), adesea septat.

Majoritatea fungilor sunt microorganisme saprofite care triesc pe materie organic moart. Circa 100 specii de fungi determin boli ale omului si animalelor numite micoze.

Fungii pot fi: - levuri; - fungi filamentoi; - fungi dimorfi.

Levuri
celule ovalare sau poligonale (3-6 microni) care prin nmugurire formeaz celule fiice numite blastoconidii; - acestea se pot alungi, ramnnd nlnuite i formeaz pseudohife. - Levurile din genul Candida sunt cel mai frecvent implicate in infecii la om determin candidoze.
-

Candida albicans levuri nmugurite cu pseudohife (1000x)

Fungi filamentoi (mucegaiuri)

cresc sub forma de formaiuni tubulare numite hife (cu diametru intre 2 -20 microni) care conin o masa celulara multinucleat; - prin cretere si ramificare formeaz micelii. - Fungii dermatofii (Trichophyton, Epidermophyton, Microsporum) determin micoze ale suprafeelor cheratinizate ale organismului - epiderm, pr, unghii
-

Trichophyton rubrum

Fungii dimorfi
cresc sub form de levuri la 37 C (forma patogen) i sub form filamentoas la 20 C (forma saprofit). - Fungii dimorfi (Histoplasma, Blastomyces, Sporotrix) pot determina micoze profunde sau sistemice.
-

Blastomyces dermatitis (levuri)

asociat frecvent cu infectii la imunosupresai

Histoplasma capsulatum nmulire prin

nmugurire; coloraie special (histoplasmoz pulmonar sau sitemic)

Inmulirea fungilor se poate face asexuat sau sexuat, n ambele forme de nmulire sporularea joaca un rol important.

Fungii pot produce structuri de nmulire i propagare numite conidii.

Unii fungi produc spori ca forme de nmulire i de rezisten (spre deosebire de endosporii bacterieni care au numai funcie de rezisten, sporii fungici sunt organe de nmulire, de propagare i de rezisten).

Inmulirea fungilor
-

n condiii favorabile conidiile sau sporii germineaz pentru a forma levuri sau hife. Modul de sporulare i tipul sporilor sunt criterii de clasificare si de identificare a fungilor.

Forme clinice de candidoz oral

Candida albicans levuri nmugurite (1000x)

Candida albicans levuri nmugurite cu pseudohife (1000x)

Trychophyton mentagrophytes aspecte clinice,

(hife, microconidii, macroconidii)

cultur, microscopie

Protozoare caractere generale

Microorganisme eucariote unicelulare mai mari, asemntoare celulelor animale Prezint o form de via activ numit trofozoit i o form de rezisten, cu viat latent, numit chist

Majoritatea sunt mobile prin structuri variate: cili, flageli, pseudopode Unele protozoare prezint capacitatea de a ngloba particule alimentare prin pseudopode altele, prezint un citostom
Se nmulesc att asexuat cat si sexuat

Protozoare parazite pentru om:

Rizopode (protozoare cu corpul deformabil, care emit pseudopode)

Flagelate (au drept caracteristic prezena flagelilor cu care se deplaseaz)

Sporozoare
Giardia lamblia Trichomonas (T. vaginalis, T. tenax)

Entamoeba (E. histolytica, E. gingivalis)

Ciliate (protozoare care se deplaseaz cu ajutorul cililor vibratili)

Balantidium coli

Plasmodium determina malaria (P. falciparum, P. vivax) Toxoplasma gondii - determina toxoplasmoza

Parazii cu rol neprecizat n sistematic Blastocystis hominis Pneumocystis carinii

Trichomonas vaginalis trofozoit secreie vaginal

(1000x - dr) i schematic (stg)

Trichomonas vaginalis microscopie electronic

Giardia lamblia chist materii fecale (400x)

Entamoeba gingivalis comensal al cavitii orale

trofozoit microscopie electronic
(de regul, fagociteaz neutrofile)

Entamoeba histolytica
(de regul, fagociteaz eritrocite RBC)

(ciclul n natur i infecii determinate)

Entamoeba histolytica

Plasmodium falciparum determin malaria

Toxoplasma gondii
- pisicile - gazde defintive (omul gazd intermediar)

determina toxoplasmoza

Virusuri caractere generale

virusuri = particule infecioase acelulare, cu dimensiuni foarte mici (20-300 nm), lipsite de capaciti proprii de metabolism, care nu cresc i nu se divid, fiind replicate de o celul gazd (parazite obligator intracelular); pot parazita celule animale, vegetale, fungi, protozoare, bacterii; observarea i/sau aprecierea dimensiunii particulei virale prin microscopie elecronic, ultrafiltrare, ultracentrifugare.

Anatomia funcional a virusurilor

Genomul viral

reprezentat de o molecul ARN (cele mai numeroase virusuri) sau ADN; deine informaia necesar replicrii; ADN-ul are cel mai frecvent o structur bicatenar (monocatenar la parvovirusuri), liniar (circular la papovavirusuri i hepadnavirusuri); ARN-ul are cel mai frecvent o structur monocatenar (bicatenar la reovirusuri), cu polaritate pozitiv (funcioneaz ca ARNm) sau polaritate negativ (are asociat o ARN-polimeraz); constituit la unele virusuri din mai multe segmente (orthomixovirusuri, reovirusuri).

Capsida viral

- constituit din molecule proteice repetitive

(capsomere) codificate de genomul viral; capsomerele au o dispoziie simetric

helical, n jurul spiralei de acid nucleic (orto-i para

mixovirusuri, rhabdovirusuri); icosaedric (cubic), fiind difereniate n
* pentone (n fiecare vrf al icosaedrului), * hexone (pe feele i muchiile icosaedrului);

complex (poxvirusuri).

Virus rabic simetrie helical

Adenovirusuri simetrie cubic (icosaedric)

Poxvirusuri simetrie complexa

Funciile capsidei virale

protejeaz acidul nucleic viral, confer forma caracteristic virusului, fixeaz virusul la receptorii specifici de pe suprafaa celulelor, conine determinani antigenici fa de care gazda reacioneaz prin rspuns imun.

Anvelopa (peplos)

- prezent la virusuri cu simetrie helical i la unele

virusuri cu simetrie icosaedric; deriv din sistemul membranar al celulei gazd (membrana citoplasmatic, membrana nuclear, reticul endoplasmatic); include glicoproteine codificate de genomul viral (peplomere) cu rol de:

liganzi la receptori celulari (ex. Hemaglutinine

A/H1N1); receptori pentru Fc i C3b (la herpesvirusuri); enzime (ex hialuronidaza, neurmanidaza - A/H1N1).

Replicarea virusurilor

- proces desfurat numai n celula vie parazitat; - genomul viral subordoneaz metabolismul energetic
i de biosintez al celulei pentru sinteza proteinelor virale i replicarea acidului nucleic viral; metabolismul celular poate fi subordonat total sau poate continua paralel cu sinteza componentelor virale

Replicarea parcurge mai multe etape:

- adsorbia, - penetrarea n celul, - decapsidarea, - biosinteza proteinelor precoce - replicarea genomului viral, - biosinteza proteinelor tardive, - morfogeneza particulei virale, - eliberarea din celul.

Replicarea particular a unor virusuri

Retrovirusuri

- genomul viral de tip ARN (+) este transcris ntr-o caten ADN cu participarea unei reverstranscriptaze; o polimeraz celular determin sinteza unui pregenom ADN d.c. care se integreaz n genomul celulei gazd; sub efectul unor stimuli, o ARN-polimeraz celular transcrie una din catene n ARN m.c. (+) care funcioneaz att ca ARNm ct i ca genom viral.

Virusul hepatitei B

- genomul viral este reprezentat de ADN parial d.c.; - o ADN-polimeraz viral completeaz dublul helix; - replicarea genomului viral are loc cu sinteza unui

pregenom ARN care servete ca tipar pentru sinteza ADN parial d.c. cu participarea unei reverstranscriptaze.

Replicarea HIV

Taxonomia viral

Familie include n denumire sufixul - viridae; (Eg.

Hepadnaviridae) Subfamilie include n denumire sufixul - virinae; (Eg. Herpesvirinae) Gen include n denumire sufixul - virus. Criterii de clasificare forma i mrimea virusului, numrul i aranjarea capsomerelor, prezena sau absena peplosului, structura genomului, sediul i modul de replicare, structura antigenic, sensibilitatea la ageni fizici i chimici.