C7

BIOTEHNOLOGIA POLIMERILOR
Biotehnologia polimerilor: polihidroxialcanoati, PHA

PHA

 Granule de PHB produse de Ralstonia eutropha PHB

Polihidroxialcanoatii, PHA, sunt polimeri produsi de mai multe microorganisme printre care
si Ralstonia eutropha (bacterie gram-negativa). Acest microorganism, in conditii
determinate poate forma acidul poli-(R)-3-hidroxibutiric (PHB) pana la 90% din masa uscata
a acestora. In cazul unor culturi, compozitia si structura polimerilor poate fi modificata prin
aditia in mediul de cultura a unor precursori precum, spre exemplu, acidul lactic.
2
Biotehnologia polimerilor

Ralstonia eutropha Poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate), PHB-co-PHV, BIOPOL

De interes tehnic este copolimerul PHB-co-PHV,

obtinut prin copolimerizarea acizilor 3-
hidroxibutanoic, PHB si 3-hidroxipentanoic, PHV
(BIOPOL). Acest polimer are proprietati similare
polipropilenei avand avantajul ca poate fi produs din
surse biologice si este biodegradabil.

PHB-co-PHV este produs in cantitati limitate fiind

utilizat in dozarea controlata a medicamentelor,
confectionarea implanturilor ortopedice, ambalajelor
etc. 3
Biotehnologia polimerilor

Ralstonia eutropha MG Poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoic), PHB-co-PHH, Aonilex

Un copolimer de uz practic este copolimerul PHB-co-PHH,

obtinut prin copolimerizarea acizilor 3-hidroxibutanoic si 3-
hidroxihexanoic, numit si PHPH sau Aonilex. Acest polimer
este produs de Ralstonia eutropha ce contine gene de la
Aeromonas caviae sau de o alta bacterie modificata genetic
Cupriavidus necata, bacterie gram-negativa.
PHPH, Aonilex
Acest polimer biodegradabil are o temperatura de topire de
pana la 160,0C. Este utilizat in confectionarea plasticului
biodegradabil.
4
Biotehnologia polimerilor
Materie prima in prepararea PHA: ulei vegetal si sursa de azot anorganic. Randamentul este
practic cantitativ.
Dupa terminarea procesului de fermentare, PHA se izoleaza din citoplasma bacteriei prin mai
multe metode: scindarea enzimatica a membranei celulare, extractia cu solventi organici
sau uscare si degranularea celulelor.

Ralstonia eutropha
Cultura heterotrofa

Procesare
Glucoza, acid propionic,
300C, 40 ore, aditie de mediu

Bioreactor
Hidroliza enzimatica a
peretelui celular

> 80g/L mediu de

cultura
Productivitate
> 2g/L*h
5
Biotehnologia polimerilor
Mai multe polizaharide precum amidonul, celuloza, guma arabica, pectinele, alginatii sunt
folosite in industria alimentara ca agenti de ingrosare si stabilizare.

Majoritatea polizaharidelor sunt izolate din plante si algele marine, unele fiind obtinute si
prin fermentare microbiana.

Polizaharidele obtinute prin fermentare sunt xantanul, dextranul si celuloza bacteriana.

Gradul de
polimerizare
10 000

Xantan

Dextran n = 50-14 000

6
Biotehnologia polimerilor
Gradul de Xantanul este format din 5 hexoze si are
polimerizare
10 000 masa moleculara 1.5-2.106 Da.
Numarul fragmentelor piruvat poate varia,
Xantan insa acest fapt nu influenteaza
considerabil viscozitatea polimerului.
Acest polimer se utilizeaza in special in
industria alimentara (agent de ingrosare)
si in industria farmaceutica (substanta
auxiliara).
In prezent se produc >100.000 tone anual
de xantan.

Precultura Biorector Procesare

> 120 m3, 40-80 ore, - Pasteurizare
Substrat: 280C, pH 7.0, agitare - Precipitare cu alcool
Glucoza sau speciala deoarece izopropilic.
Zaharoza,
Xanthomonas mediul are viscozitate In 60 ore se obtine 
campestris Sursa de N. inalta. 30 g/L xantan
Xanthomonas campestris este un agent patogen al plantelor, in manipularea acestuia se respecta gradul II
de securitate. Etapa de pasteurizare (tratare termica) este necesara pentru distrugerea bacteriei. 7
Biotehnologia polimerilor
Dextranul nativ sau prin derivatizare chimica este folosit in
medicina. Dextranul este un glucan format in majoritate din
fragmente de -1,6-D-glucoza si are masa moleculara 5.107 Da.
Unele fragmente pot prezenta legaturi 1,2-, 1,3- si 1,4.

Industrial dextranul este produs de bacteria Leuconostoc

mesenteroides, care poate produce pana la 200 g/L dextran in
24 ore prin fermentarea zaharozei. Dextranul se izoleaza prin
precipitare cu etanol.
Dextran
n = 50-14 000 Daca la izolare se adauga acid, atunci se obtin diferite fractii de
dextran care difera dupa masa moleculara. Acestea pot fi
separate prin precipitare fractionata.

Dextranul cu Mr 75 kDa (75 000 g/mol) este utilizat pentru

substituirea plasmei sanguine in cazul pierderilor unor cantitati
mari de sange.

Leuconostoc mesenteroides Dextranul cu Mr 40 kDa este utilizat ca agent antitrombotic

(previne formarea trombozelor sanguine) in interventiile
chirurgicale.
8
Biotehnologia polimerilor
Biorector
1. Cresterea
2. Faza de producere,
sursa de carbon -
zaharoza, Biosinteza :
Temperatura - 23,0C

Procesare
Dextran Precipitarea cu
n = 50-14 000 utilizarea etanolului,
acetonei sau a
metanolului.

Hidroliza
In prezent se produc >200 tone
Se obtine diferite anual de xantan si 600 tone de
fractii de dextran cu Mr derivati ai dextranului.
diferite.
Leuconostoc mesenteroides In 24 ore se obtine 
100 g/L dextran
Randament 45% in
raport cu zaharoza 9