celulară sunt: - Lisosomii - Peroxisomii. LISOSOMII Lisosomii sunt organite de formă ovoidală, delimitate de o membrană lipoproteică, având diamentrul cuprins între 0.2-4μm. Ei sunt alcătuiţi din două componente structurale: membrană delimitantă şi matricea lisosomală. Membrana lisosomală Asemănătoare ca structură celorlalte citomembrane este unică şi conţine o proteină transportoare de protoni (ioni de hidrogen). Aceasta consumă ATP pentru efectuarea sarcinii de pompare a protonilor în interiorul lisosomului. Se asigură un pH intralisosomal de aproximativ 5.0 necesar pentru activitatea hidrolazelor acide prezente în acest compartiment (proteaze, nucleaze, glicozidaze, lipaze, fosfolipaze, fosfataze, sulfataze). Membrana lisosomală şi pH-ul acid constituie bariera împotriva efectelor nocive ale hidrolazelor asupra restului celulei. Ocazional au fost observaţi lisosomi cu membrane duble sau lisosomi ale căror membrane prezintă pe foiţa externă mici proeminenţe sau spiculi cu o înălţime de 60 Å şi distanţaţi prin spaţii de cca 100 Å. Matricea lisosomală Poate să fie omogenă sau să prezinte un aspect polimorf. Lisosomii omogeni sunt de obicei de talie mică (0.2-0.4μm) şi au un conţinut bogat în enzime hidrolitice. Ei se numesc LISOSOMI PRIMARI sau LISOSOMI DE ACUMULARE ENZIMATICĂ. În afară de lisosomii primari, relativ omogeni, compartimentul lisosomal cuprinde şi lisosomi secundari, de mare diversitate şi mărimi variabile. Ei conţin, pe lângă hidrolaze şi substanţe macromoleculare sau complexele suprastructurate (pe care le vor digera). Lisosomii cu aspect polimorf sunt de talie mare (0.4-4μm). Matricea lor conţine variate materiale de incluzie ca: macromolecule de origine extracelulară, resturi de organite celulare, reprezentate cel mai adesea de membrane mitocondriale, citomembrane rugoase sau netede etc. Lisosomii cu matricea de aspect polimorf iau naştere din lisosomii primari printr-un proces de acumulare a unor materiale de provenienţă diferită şi au fost denumiţi LISOSOMI SECUNDARI. După provenienţa materialelor acumulate în lisosomii secundari, aceştia au fost împărţiţi în două categorii:
1. Heterolisosomi, în care sunt incluse
materialele din afara celulei, se formează ca urmare a procesului de endocitoză; veziculele de endocitoză şi vacuolele de fagocitoză care conţin macromolecule şi particule fagocitate, fuzionează cu lisosomii primari formând lisosomii secundari. Endocitoza constă în transportul substanţelor din afara celulei înăuntrul ei, prin invaginarea membranei celulare (fagocitoză, pinocitoză, coloidopexie etc.) Heteroliza facilitează: funcţia de nutriţie, procesele de apărare împotriva bacteriilor sau virusurilor care sunt incluse în celulă prin fagocitoză, catabolismul proteinelor înglobate în hepatocite sau nefrocite, distrugerea hematiilor îmbătrânite care sunt înglobate în fagolisosomii macrofagelor din splină etc. 2. Autolisosomi, care înglobează materiale luate din citoplasmă, vacuole autofage care conţin fragmente de membrane, mitocondrii, ribosomi. Aceste zone din citoplasmă delimitate de citomembrane în care sunt incluse diferite organite citoplasmatice degradate sunt denumite autofagosomi şi prin unirea cu lisosomii primari formează autolisosomii. Şi în autolisosomi au loc procese de degradare a componentelor celulare (în special organite celulare uzate). O formă particulară de autofagie o reprezintă CRINOFAGIA, proces întâlnit în glandele cu secreţie internă şi externă în care granulele de secreţie în exces, ce nu sunt eliminate din celulă, se unesc cu lisosomii urmând a fi digerate, pentru a nu sufoca celula. În cursul proceselor de heteroliză, autoliză şi crinofagie, în mod obişnuit materialele incluse în lisosomi sunt degradate până la molecule mici care pot difuza în citoplasmă. Tot în grupa lisosomilor secundari mai sunt incluşi şi corpii reziduali în care se acumulează şi se depozitează materiale de natură diferită, precum şi corpii multiveziculari. Corpii reziduali se formează în cazul în care substanţele nu pot fi degradate si sunt încărcaţi cu materiale de natură foarte diferită (lipofuscină, ceroide, săruri de fier etc.) ce părăsesc celula printr-un proces de exocitoză (inversul pinocitozei). Structura biochimică Lisosomii conţin hidrolaze acide precum: fosfataza acidă, enteraza, arilsulfataze, glucozidaze, peptidaze, lipaze etc. Enzimele hidrolitice acide sunt menţinute în interiorul membranei lisosomale în stare de latenţă, activitatea lor litică nu se manifestă atât timp cât membrana lisosomală este integră. Conţinutul în enzime hidrolitice al lisosomilor variază în limite largi cu specia, tipul de ţesut, tipul de celulă, gradul ei de maturitate sau momentul de activitate. PEROXISOMII (glioxisomii) Sunt organite celulare prezente în citosolul tuturor celulelor animale şi vegetale şi se pot evidenţia prin utilizarea reactivului 3-3’- diaminobenzidină (DAB). Li se atribuie şi termenul de glioxisomi deoarece o parte din peroxisomi conţin pe lângă catalaze şi alte enzime peroxisomale, mai conţin şi cel puţin două enzime ale ciclului glioxilat. Numele de peroxisomi se datorează prezenţei de enzime oxidative activatoare ale oxigenului molecular (O2); activarea acestuia duce la formarea de peroxid de hidrogen (H2O2). Numărul peroxisomilor diferă de la un tip celular la altul, iar în aceeaşi celulă este diferit în funcţie de momentul ei de activitate şi ocupă aproximativ 1% din volumul celular. Diametrul peroxisomilor este situat între 0.1-1.5 μm. Mărimea peroxisomilor este apropiată de cea a lisosomilor, după talie deosebindu-se două categorii de peroxisomi: MACROPEROXISOMI (0.5 – 1.5 μm diametru); MICROPEROXISOMI (0.1 – 0.4 μm diametru). Organizarea ultrastructurală Peroxisomii se prezintă sub formă de vacuole sferice sau ovale, uneori au forme neregulate cu prelungiri. Sunt alcătuiţi dintr-o matrice delimitată de o citomembrană. Matricea peroxisomală este alcătuită din proteine structurale şi enzime caracteristice: catalaza (enzimă marker), peroxidaza, uricaza, oxidazele D-aminoacizilor. Citomembrana peroxisomului prezintă o compoziţie asemănătoare cu a RE, dar şi diferită de aceasta prin unele polipeptide şi enzime din structura sa. Uneori apare o continuitate între membrana RE şi a peroxisomului, dar mai adesea între membranele a doi peroxisomi formând un „RETICUL PEROXISOMAL” diferit de reticulul endoplasmic. Funcţiile peroxisomilor Intervin în metabolismul apei, sunt implicaţi în degradarea purinelor (adenina şi guanina) şi prin aceasta în metabolismul acizilor nucleici; La celulele plantelor, peroxisomii intervin în metabolismul acidului glioxilic; Peroxisomii conţin un sistem enzimatic activ pentru beta-oxidarea acizilor graşi. Procesul beta-oxidării peroxisomale este crescut în ficat după o dietă bogată în lipide; ei intervin şi în sinteza glicerolipidelor; Se presupune că peroxisomii ar avea rol şi în termogeneză, producând căldură şi adaptarea la frig. Numărul lor este crescut în ţesutul adipos brun. INCLUZIUNILE CELULARE În citosol se pot acumula în mod normal produşi ai metabolismului sub formă de depozit temporar sau definitiv. Aceste depuneri se numesc INCLUZIUNI şi ele pot fi de diferite tipuri: proteine, lipide, glucide, pigmenţi, cristale şi cristaloizi. Proteinele sunt depozitate în granule secretorii ale celulelor specializate. Ele se colorează în coloraţiile de rutină în funcţie de caracterul acid sau bazic; pot de asemenea fi identificate cu ajutorul unor anticorpi marcaţi împotriva proteinelor specifice, prin tehnica de imunocitochimie. Lipidele apar sub formă de picături de diverse mărimi, de obicei sferice care se pot evidenţia prin coloratii speciale precum SUDAN, SCHARLACH, OSMIU etc. În general, prezenţa lipidelor sub formă de picături mici indică o celulă foarte activă, cu un mare turnover metabolic. Glucidele apar sub formă de glicogen în celulele animale, în special în celulele hepatice şi musculare. Se evidenţiază cu CARMIN BEST sau prin metoda PAS. La ME, glicogenul apare sub formă de particule mici cu aspect de bastonaşe lungi de 20-30 nm, fie sub formă de particule mari, sub formă de rozetă sau de formă neregulată. În bolile de depozit sau în diabet, incluziunile glucidice apar nu numai în citosol ci şi în nucleu. Pigmenţii sunt reprezentaţi de granulele de melanină (pigment brun) în celulele pigmentare sau sub formă de lipofuscină (pigment galben) în celulele nervoase, în celule ale corticosuprarenalei (pigment de uzură). Cristalele şi cristaloizii apar în mod normal în citosolul celulelor Sertoli şi Leydig din testicul, dar pot apărea şi în nucleii unor hepatocite, iar în fagocite s-au evidenţiat incluziuni de fier.