Modificari structurale ale interfeei materno-fetale
i evoluia postnatal a copilului
Conductor tiinific : Prof. Univ. Dr. Anastasiu Doru Mihai
Doctorand Dr. Ilie Rodica
CUPRINS
LISTA DE ABREVIERI INTRODUCERE CAPI TOLUL I INTERFAA MATERNO-FETAL, DATE DIN LITERATUR
1.1 Implantarea interaciunea embrio-matern 1.1.1. Stadiile iniiale ale dezvoltrii embrionare 1.1.2. Dialogul materno-embrionic 1.1.3. Factorii necesari unei implantri corecte 1.2 Consideraii imunologice privind interfaa materno-fetal 1.2.1. Imunologia implantrii i formarea mai multor interfee materno-fetale 1.2.2. Trofoblastul fetal i expresia HLA 1.2.3. Eschivarea imun a trofoblatilor 1.2.4. Populaiile de celule imunologice de la nivelul IMF 1.2.5. Reglarea imun specific fetal de ctre celulele T materne 1.3 Interfaa materno-fetal 1.3.1. Structura interfeei materno-fetale 1.3.2. Morfologia structurilor ce asigur schimburile materno-fetale 1.4 Homeostazia interfeei materno-fetale
CAPI TOLUL I I HIPOXIA FETAL, AFECTAREA PLACENTAR I RCIU
1. Modificri hemodinamice n hipoxia fetal 2. Hipoxia fetal cronic si stresul oxidativ 3. RCIU
CAPI TOLUL I I I STUDI I PERSONALE
CAPI TOLUL I V MATERIAL SI METOD
4.1 MATERIALUL DE STUDIU - SELECIA CAZURILOR
4.2. METODE DE PRELUCRARE HISTOLOGIC A PLACENTEI 4.2.1. Metode de colorare convenionale 4.2.2. Metode imunohistochimice
4.3 METODE DE PRELUCRARE A DATELOR
CAPI TOLUL V REZULTATE
5.1. HIS 5.1.1 Leziunile placentare din HI S, prin coloraii histologice uzuale 5.1.2 Leziunile placentare din HI S, prin coloraia imunohistochimic 5.1.3 Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu HI S
5.2 DZG 5.2.1. Leziunile placentare din DZG, prin coloraii histologice uzuale 5.2.2. Leziunile placentare din DZG, prin coloraia imunohistochimic 5.2.3. Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu DZG
5.3 SCORUL GIP
CAPI TOLUL VI DISCUII
6.1. LEZIUNI HISTOLOGICE PLACENTARE, PRIN COLORATII UZUALE 6.1.1. Semnificaia leziunilor histologice din HIS 6.1.2. Semnificaia leziunilor histologice din DZG
6.2. LEZIUNILE PLACENTARE PRIN COLORARE IMUNOHISTOCHINICA PENTRU ANTICORPI MONOCLONALI 6.2.1. Leziunile placentare din HIS, prin coloraia imunohistochimic 6.2.2. Leziunile placentare din DZG, prin coloraia imunohistochimic
6.3. DATELE CLINICE ALE NOU-NASCUILOR
CAPI TOLUL VI I CONCLUZI I
7.1. CONCLUZIILE STUDIULUI HISTOLOGIC 7.2. EVOLUIA POSTNATAL PRECOCE CONSECINELE AFECTRII INTERFEEI MATERNO-FETALE 7.3 PROPUNERI DE INVESTIGAIE SISTEMATIC PLACENTAR, PRIN PROTOCOALE DE EXAMINARE
BI BLI OGRAFI E
LISTA DE ABREVIERI
HIS = Hipertensiunea indusa de sarcin DZG = Diabet zaharat gestaional IMF = Interfaa materno-fetal RCIU = Retardul de cretere intrauterin GIP = Gradul de Insuficien Placentar VG = Vrsta Gestaional GN = Greutatea la Natere DZ = Diabet Zaharat LS = Lot de Studiu LC = Lot de Control
4
INTRODUCERE Primul organ care se formeaz ntr-o sarcin, este placenta, organ temporar, de legatur ntre mam i copil. Placenta controleaz schimburile metabolice i de oxigen dintre mam i ft, produce factorii i hormonii de cretere i asigur transferul nutrienilor care susin creterea fetal.Succesul sarcinii presupune evitarea respingerii acesteia de ctre sistemul imunitar matern. Celulele fetale i materne vin n contact direct n decidua, care este o membran mucoas foarte specializat, ce joac un rol cheie n tolerana fetal, i permite dezvoltarea interfeei materno- fetale (IMF). Cheile de baz pentru o sarcin uman de succes sunt conversia fiziologic a arterelor spiralate, i consecutiv, perfuzia placentar adecvat. O placentaie defectuoas, cu invazie trofoblastic diminuat i insuficien de remodelare a arterelor spiralate determin un rezultat nefavorabil al sarcinii cu urmri ca pierderea precoce a acesteia, retardul de cretere intrauterin (RCIU) sau/i HIS. Aceste complicaii ale sarcinii constituie factorii predispozani, cu un impact major, n dezvoltarea bolilor din viaa adultului. Funcia placentar anormal constnd n creterea rezistenei vasculare, transportul impropriu de nutrieni i gene imprimate epigenetic are un impact important asupra adaptrii fetale a programrii.
STUDII PERSONALE Ipoteza de lucru i obiectivele studiului Cercetarea placentei ar trebui s reprezinte pentru ntreaga comunitate medical o problem prioritar, deoarece reprezinta un jurnal valoros al evoluiei prenatale a fiinei umane. La natere, acest organ trebuie studiat sistematic, i conservat o perioad lung de timp, pentru a extinde cercetarea sa anatomopatologic, n cazul evoluiei nevaforabile a nou-nscutului. n ara noastr cercetarea placentei este n prezent o problem aproape ignorat.Pornind de la aceste premize, cercetarea personal i propune s realizeze urmtoarele obiective:
1. Delimitarea a dou grupe majore de afeciuni materne cu impact major asupra placentaiei, dezvoltrii placentare, i implicit, a dezvoltrii fetale: HIS i DZG.
2. Realizarea pe baza unor criterii de includere i excludere, a dou loturi omogene de nou- nscui prin selectarea celor cu cel mai ridicat grad de risc, pentru ambele afeciuni.
3. Prelevarea placentelor pentru studiul morfopatologic, pentru ambele categorii patologice.
5
4. Realizarea a dou grupe egale de nou-nscui, reprezentnd loturile de control (modelul de studiu CAZ-CONTROL), precum si prelevarea placentelor corespunztoare, realizndu-se astfel, si cele dou loturi de studiu histologic de control; 5. Identificarea i evaluarea principalelor leziuni specifice ale IMF care susin o concordan cu patologia perinatal, pentru fiecare grup n parte.
6. Validarea ipotezei prognozate, c placenta este un martor important al unor evenimente patologice ale perioadei prenatale, cci anumite modificri morfologice ale IMF, devin un marker specific al unor dereglri din perioadei sarcinii, cu consecine patologice, postnatal. Cercetarea morfologic placentar a fost focalizat pe IMF, structur de schimb deosebit de complex, care aparine att mamei, ct i ftului, structur a crei lezare i suferin are determinism n patologia perinatal, i n unele aspecte ale patologiei adultului.
7. Realizarea unui scor al gradului de insuficien placentar (GIP), prin a crui utilizare s se poat realiza la momentul nasterii, corelaii rapide (absolut necesare neonatologului in urgene) ntre complexul lezional al IMF, i manifestrile patologice postnatale.Cercetarea pleac de la dovezile a numeroase studii, care susin c hipoxia precoce determin multiple tulburri vasculare, imunologice i metabolice materno-fetale, urmate n final de modificri structurale ireversibile. Acestea, reunite ntr-un scor GIP, studiat imediat dup natere au scopul de a ncerca stabilirea retrospectiv a gradului afectrii hipoxice a nou-nscutului, cu prevenirea i/sau corecia modificrilor clinice, nainte de a fi prea trziu.
MATERIALUL DE STUDIU
Studiul s-a realizat la Clinicile de Obstetric-Ginecologie i Neonatologie ale Spitalului Clinic Judeean de Urgen Timioara, cu avizul conducerii acestora. De asemenea, a fost avizat de Comisia de etica a UMF Victor Babe din Timioara i a Spitalului Clinic Judeean de Urgen Timioara. PRELEVAREA SPECIMENELOR
Specimenele de studiu pentru HIS i DZG au provenit din fragmentele recoltate imediat dup natere de la cele 68 de placente ale pacientelor cu HIS, i respectiv, gravidele normotensive (control), iar alte 30 de placente au furnizat fragmentele recoltate de la gravidele cu DZG, i respectiv, de la gravidele cu sarcin normal (control).
Pentru fiecare placent, s-au prelevat cte 5 fragmente de seciune, din urmtoarele zone distincte, ale fiecarei placente faa fetal, seciunea median, faa matern, amnion i corion.
Eantioanele astfel prelevate, au fost fixate n formalin tamponat n concentraie de 10%, timp de 24-48 de ore, fiind utilizate apoi pentru prelucrarea lor specific corespunznd celor 3 tipuri de coloraii histologice convenionale, i respectiv, 3 tipuri de anticorpi monoclonali, prin meto- de imunohistochimice.
6
SELECTI A CAZURI LOR Pentru nou-nscutii rezultai din mame cu HIS: Criteriile de includereau fost urmtoarele: Vrsta Gestaional (VG) 28 sptmni; Greutatea la Natere (GN) 1000g i <2500 g; mama cu HIS, fr complicaii; sarcin unic; evoluie neonatal favorabil, cu externare la domiciliu; prezena n grade variabile a unei patologii hipoxice neonatale conform cotaiei SARNAT Criteriile de excludereau fost urmatoarele: VG < 28 sptmni; GN < 1000 g; sarcin gemelar; deces n perioada neonatal; patologie grav asociat (infecie, malformaii congenitale, asfixie perinatal); mama cu HIS cu complicaii. S-a realizat astfel un lot de studiu de 34 nou-nscui din mame cu HIS i un lot de control egal, corespunztor (conform modelului de studiu CAZ-CONTROL). Aceste loturi au fost definite ca Lot de Studiu (LS) i Lot de Control (LC). Pentru nou-nascutii rezultati din mame cu DZG: Criteriile de includere au fost urmtoarele: VG < 37 saptamni; mama cu DZG necomplicat (au fost excluse cazurile de DZ preexistent sarcinii); sarcin unic; evoluie neonatal favorabil, cu externare la domiciliu; prezena n grade variabile a unei patologii hipoxice neonatale conform cotaiei SARNAT. Criteriile de excludere au fost urmtoarele: sarcina gemelar; deces in perioada neonatal; mama cu DZ complicat; patologie grav asociat a nou- nscutului. S-au constituit astfel cele dou loturi de nou-nscui din mame cu DZG, adic LS format din 15 nou-nscui, i respectiv, LC, egal ca numr. Diagnosticul de suferin neonatal hipoxic s-a bazat pe datele clinice incluse n Clasificarea SARNAT, pe examenul neurologic al nou-nscutului i pe evo-luia sa ulterioar. Pe aceste baze s-au putut clasifica nou-nscuii cu manifestri hipoxice n forme uoare, moderate i severe. Pentru ambele categorii de patologie, au fost analizai comparativ, un numr de 15 parametri care au vizat indicatorii fizici i de maturitate ai nou-nscuilor precum i problemele de adaptare i patologie hipoxic neonatal ale acestora
METODELE DE STUDIU
METODELE DE PRELUCRARE HISTOLOGIC A PLACENTELOR
Metodele de colorare convenionale
Cele 5 fragmente de seciuni, recoltate ca specimene de studiu (descrise anterior), au fost supuse tehnicilor corespunztoare coloraiilor Hematoxilin-Eozin , Trichrom Masson i respectiv, Van Gieson.
7
Metodele imunohistochimice
Am decis fixarea timp de 48 de ore n soluie de formalin tamponat 10%, fragmentele recoltate imediat dup natere, pentru un numr de 15 placente ale pacientelor cu HIS, i respectiv, 7 placente, pentru DZG. Dup deparafinare i rehidratare, specimenele au fost pregtite pentru procedura de imunohistochimie.
Pentru demascarea antigenului CK 7 s-a efectuat tratamentul tesutului de studiat pentru a induce epitopul de demascare, folosind soluia pentru demascarea antigenului cu pH 6, pentru CK 5 timp de 30 minute, la 99 grade C iar pentru vimentin timp de 5 minute, la 99 grade C. Dup pasul de blocare a peroxidazei endogene, specimenele au fost incubate timp de 30 de minute la temperatura camerei, dup cum urmeaz : CK 5 (monoclonal oarece, clona XM26, RTU, Leica Microsystems), CK 7 (monoclonal oarece, clona RN7, Leica Microsystems), i respectiv, Vimentine (clona V9, RTU, Dako Carpinteria USA). S-a continuat cu NOVOLINK Polymer System, iar drept cromogen am utilizat Diamino-bezidina. Supracolorarea s-a efectuat folosind Hematoxilina modificat Lillie. Pentru negativ control, nu a fost adaugat anticorpul marker. Reacia pozitiv a fost evaluat pentru toi marcherii ca moderat la nivel membranar, i intens la nivelul citoplasmatic, iar reprezentarea pentru scala :1 cm n figur reprezint 50 m in-situ.
METODE DE PRELUCRARE A DATELOR
Prelucrarea datelor histologice si imunohistochimice. Pentru examinrile microscopice ale specimenelor recoltate, am utilizat microscopia optic folosind un microscop AmScope, folosind dup structura de evideniat, obiective cu o mrire, de x10, x20, x40 i x100. Imaginile au fost capturate cu o camer digital de tip High speed de 1.3 Megapixeli, si prelucrate apoi pe un computer (ce avea instalat program Windows 7), prin intermediul programului ACDSee Pro 5.
Prelucrarea statistic a datelor clinice ale nou-nscuilor. Baza de date a fost construit ntr- un fiier Excel, prin introducerea secvenial a datelor, dup documentele (foaia de observaie) fiecrui pacient. Studiul statistic al datelor a fost efectuat cu ajutorul programului SPSS 17.0. Pentru prelucrarea statistic s-au utilizat metode parametrice i neparametrice.
Rezultatele au fost considerate semnificative statistic la p<0,05, pentru un interval de ncredere de 95%, si puternic semnificative statistic la p<0,01, pentru un interval de ncredere de 99%. REZULTATE Leziunile histologice placentare din HI S, prin coloraii histologice uzuale Scopul examinrilor histologice a constat, n principal, n studierea structurii I MF, a leziunilor vilozitilor terminale, a arteriolelor spiralate ale deciduei materne mai ales tunicile intim i medie ale acestora a amnionului i a corionului, urmrind decelarea leziunilor lor, precum i a altor degenerri semnificative.
8
Prin compararea placentelor din cele dou loturi prelevate de la mamele cu HIS, cel de control, am obinut rezultatele statistice ale leziunilor histologice din (Graficul 1), astfel :
Grafic 1. Leziunile histologice ale placentei n HI S
Grupa leziunilor degenerative este cea mai pregnant semnificativ histologic, fiind de 4,54,8 ori mai frecvent comparativ cu lotul de control. Intre subgrupele acestui tip lezional scderea numeric i micorarea vilozitar (pn la viloziti fantom), ngroarea endoteliilor capilarelor vilozitilor terminale i necroza fibrinoid de la nivelul arteriolelor spiralate, diferenele sunt practic, nesemnificative statistic.
Grupa leziunilor proliferative prezint un vrf de 3,9 ori mai mare decat lotul de control, prin subgrupul hipertrofiei musculaturii netede a arteriolelor bazale; fibrozrile prin pierderea capilarelor i rarefacia hialin stromal vilozitar, i respectiv, modificrile sinciiale prin aglutinare, sunt de 2,3 ori mai mici fa de vrful de grup, i de 2 ori mai mari fa de control, la care sunt absente.
Grupa leziunilor circulatorii nfaieaz subgrupul leziunilor endoteliale de 4,5 ori mai mare fa de control, dar subgrupele trombozelor i/sau infarctelor arteriolelor spiralate de 2,2 ori mai mici, i respectiv, ateromatozei endoteliale deciduale de 3,3 ori mai mici fa de virf, ns absente la control.
9
Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu HI S
Parametrii luai n studiu au fost analizai comparativ, ntre LS i LC.
Datele prezentate i ilustrate consemneaz un impact major al HIS asupra creterii i dezvoltrii fetale, cu afectarea considerabil a greutii fetale cu o diferen medie a acestui parametru de peste 1000 g ntre cele dou loturi.
Gradul de suferin cronic cu restricie de cretere intrauterin precum i naterea prematur semnificativ mai frecvente la cazurile LS au influenat i ali parametri precum : adaptarea neonatal (scorul APGAR), necesitatea reanimrii la natere i necesitatea ventilaiei mecanice n primele 24 ore de via.
Datele anamnestico-clinice au fost focusate pe patologia hipoxic neonatal a crei inciden a fost semnificativ mai mare la cazurile LS vs cazurile LC.
Leziunile placentare din DZG, prin coloraii histologice uzuale
Scopul acestui studiu histopatologic a constat, n principal, n analizarea injuriilor care pot contribui la modificrile patologice ale IMF, la pacientele cu DZG insulino-controlat. Regiunile investigate au fost vilozitile terminale, capilarele vilozitare, sinciiotrofoblastul vilozitar i extravilozitar, membranele trofoblastice, celulele Hofbauer, amnionul, corionul, urmrind decelarea leziunilor lor, precum i alte zone cu degenerri semnificative.
Prin compararea histologiei placentelor celor dou loturi, de la mamele cu DZG, i respectiv, cel de control, am obinut rezultatele statistice ale leziunilor din Graficul 2, astfel:
10
Grafic 2. Leziuni histopatologice ale placentei n DZG
Grupa leziunilor inflamatorii este cea la care leziunile au fost absente la control, i doar cte 1 dat mai mare, pentru cele dou subgrupe vilita, i respectiv, amnionita.
Grupa leziunilor degenerative este cea mai pregnant semnificativ histologic. Intre subgrupele acestui tip lezional, ngroarea membranei bazale trofoblastice este vrful de grup fiind de 4 ori mai mare fa de control, la care este absent. Fibroza vilozitar i edemul stromal sunt doar cte 1 dat mai mari fa de control, la care sunt absente. Necroza fibrinoid este de 3 ori mai mare fa de control. Calcificrile placentare, ubicuitar dispuse, sunt de 2 ori mai multe, iar degenerarea hialin, de respectiv, 0,3 ori mai mare fa de control.
Grupa leziunilor proliferative prezint un vrf de 4 ori mai mare fa de lotul de control, la care lipsesc, prin subgrupul fibrozrilor intra- i perivilozitare. Modificrile sinciiale prin aglutinare, sunt de 3 ori mai mari fa de control, iar hiperplazia celulelor Hofbauer este de 2 ori mai mare fa de control, la care este absent. Corangioza am decelat-o egal cu cea a lotului de control.
Grupa leziunilor circulatorii nfieaz ca vrf, subgrupul hematiilor nucleate de 4 ori mai mare fa de control, la care lipsesc, spre deosebire de edemul intimal i corial la care leziunile au fost absente la control, i doar 1 dat mai mari. Hemoragiile interstiiale (intervilozitare) le-am decelat de 3 ori mai crescute dect la control.
11
Date clinice privind nou-nscuii provenii din mame cu DZG
Parametrii luai n studiu au fost analizai comparativ, ntre LS i LC.
Nu s-au nregistrat diferene semnificative ntre LS i LC n privina parametrilor fizici ai creterii i dezvoltarii fetale, respectiv greutatea, talia i perimetrul cranian.
La aceste cazuri nu vorbim de RCIU ci de o cretere i dezvoltare mai mare dect cea corespun- ztoare VG.
Gradul de suferin fetal (esenial hipoxic i metabolic) cu afectarea creterii i dezvoltrii fetale, prematuritatea, semnificativ mai frecvent la aceast categorie au influenat i ali parametri ai evoluiei postnatale precum: adaptarea neonatal (scor APGAR), necesitatea reanimrii neonatale precum i necesitatea ventilaiei mecanice n primele 24 h de via la cazurile LS comparativ cu cazurile LC.
SCORUL GIP
Aa cum am remarcat din analiza modificrilor histologice placentare, att pentru HIS ct i pentru DZG, exist multe modificri comune, att ntre cele dou afeciuni ct i ntre placentele patologice i cele de control (acestea din urm fiind normale). Aceste modificri au permis elaborarea unui scor care s aprecieze Gradul de Insuficien Placentar (GIP).
Aa cum se remarc in Tabelul 6 , acest scor are o scar de 4 grade de insuficien placentar, crora le corespund modificri histologice apreciate de anatomopatologul ce examineaz fiecare placent dup natere; n funcie de prezena sau absena modificrile constatate, se introduce n grila 0 sau 1, rezultnd prin sumare, un punctaj cresctor (gradul I V oferind cel mai nalt grad de risc lezional i cel mai mare grad de risc hipoxic postnatal). La apariia unor simptome hipoxice ale nou-nscutului, n perioada postnatal precoce exist o evaluare retrospectiv de ansamblu, a gradului unei afectri fetale n sarcin, ce poate orienta neonatologul, spre o atitu- dine terapeutic rapid.
12
Tabel 6 Scorul GIP (Gradul de Insuficien Placentar)
Acest scor pe care l-am denumit Scor GIP a fost imaginat astfel nct s fie aplicat rapid att pentru condiiile patologice din sarcinile cu HIS i DZG, ct i pentru orice situaie patologic a mamei care ar conduce la realizarea unei insuficiene placentare cu consecine majore n creterea, dezvoltarea i oxigenarea fetal. Scorul GIP ofer i posibilitatea de a valida ipoteza prognozat, c placenta este un martor important al unor evenimente patologice ale perioadei prenatale determinante pentru evoluia postnatala i , mai ales pentru manifestrile hipoxice ale perioadei neonatale. n acest sens am utilizat Scorul GIP la toate cazurile studiate vs. Cazurile grupului de control pentru a stabili sensibilitatea (senzitivitatea) i specificitatea acestei cotaii. Analiza comparativ a Scorului GIP a dovedit c exist diferene nalt semnificative (p<0,001) ntre placentele patologice studiate (HIS + DZG) i placentele de control. Aceast constatare a permis aprecierea sensibilitii i specificitii scorului ca cel mai important indicator de validare a rezultatelor lucrrii. Cu o sensibilitate de 100% i o specificitate de 42,86%, pentru un interval de ncredere de 95%, Scorul GIP elaborat poate reprezenta un ghid valoros de apreciere a insuficienei placentare, cu o mare valoare practic i cu o cot important de apreciere a prognozei pentru gravitatea suferinei hipoxice postnatale a copilului. Avnd o cot de predictivitate pozitiv de 63,64% i una de predictivitate negativ de 100%, Scorul GIP ne arat c este de utilitate maxim n predictivitatea absenei insuficienei placentare (100%), dar are i o cot foarte mare de predictivitate a prezenei insuficienei placentare (63,64%).
13
n concluzie, se poate afirma c Scorul GIP elaborat pe baza acestei lucrri este valoros pentru practicianul anatomo-patolog n evaluarea retrospectiv de ansamblu a placentei, oferindu-i acestuia un mijloc util i rapid de apreciere a insuficienei placentare ca urmare a afectrii IMF, dar i neonatologului, pentru cota important de prognozare precoce a gravitii hipoxiei nou-nscutului n perioada postnatal, dup gradul afectrii fetale n sarcin.
CONCLUZII
1. HIS i DZG reprezint un adevrat cap de serie al bolilor materne cu impact major asupra ftului i nou-nscutului prin modificrile morfologice ale placentei.
2. Ipoteza de lucru prognozat a fost aceea c placenta este un martor important al unor evenimente ale perioadei prenatale, modificrile sale morfologice fiind un marker al unor manifestri patologice ale perioadei perinatale i postnatale.
3. Cercetarea morfologic placentar a fost focalizat pe IMF, adic structura de schimb a crei lezare genereaz patologia perinatal i suferina postnatal a nou-nscutului. Se argumenteaz astfel, prin cercetrile personale, c modificrile morfologice ale IMF au drept consecin direct hipoxemia i hipoxia feto/neonatal, cu consecine imediate i viitoare n dezvoltare, n special cea neurologic.
4. Cercetarea modificrilor histologice din HIS s-a efectuat pe un numar de 34 de placente provenite de la mame care au prezentat aceast patologie i au nscut copii cu restricie de cretere intrauterin i/sau prematuri. Pentru comparaie au fost cercetate un numar egal de placente provenite de la mame fr HIS, conform modelului de studiu controlat.
5. Rezultatele cercetrii histologice placentare n HIS au ilustrat o inciden semnificativ a leziunilor degenerative, i proliferative (p<0,05), i o inciden moderat a leziunilor circulatorii (p<0,001), asociate sau nu, n comparaie cu leziunile placentelor lotului de control.. 6. Coloraia imunohistochimic pentru HIS a evideniat retardul de dezvoltare vilozitar datorat n principal hipoxiei. Aglutinarea vilozitar cu compromiterea IMF este confirmat de reaciile deosebit de intense ale Ac anti-CK7 n membranele citotrofoblatilor vilozitari, intens, n zonele de necroz fibrinoid i moderat, n aglomerrile sinciiale de orice tip (muguri, noduri, puni sau poduri), din vilozitaile terminale devenite avasculare, demonstreaz compromiterea schimburilor de oxigen, nutriente i deeuri, la nivelul IMF al unui numr foarte mare de viloziti. 7. Comparativ cu lotul de control nou-nscuii rezultai din mame cu HIS au prezentat cu o inciden semnificativ mai mare (p<0,05) a unor probleme de adaptare si patologie neonatal.
14
8. Corobornd rezultatele cercetrii modificrilor morfologice placentare cu cele ale manifestrilor clinice ale nou-nscuilor rezultai din mame cu HIS, am remarcat c impactul major al modificrilor morfologice placentare la nivelul I MF vizeaz:
reducerea numrului de viloziti terminale insoit de reducerea sau atrofia capilarelor acestora; reducerea oxigenrii fetale, cu creterea incidenei patologiei hipoxice neonatale; reducerea nutriiei fetale cu consecine directe asupra creterii i dezvoltrii fetale prin incidena crescut a RCI U, asociate sau nu cu prematuritatea.
9. Rezultatele cercetrii histologice placentare n DZG au ilustrat o inciden semnificativ a leziunilor degenerativeale structurilor care reprezint IMF, deoarece fiecare caz a prezentat cel puin o modificare histologic degenerativ, fa de control. Dei semnificativ comparativ cu lotul de control, incidena leziunilor proliferativei circulatorii a fost moderat (fa de cea a leziunilor degenerative).
10. Coloraia imunohistochimic pentru DZG, a permis decelarea fragmentelor epitopice exprimate dup degenerarea lezional prin suferina cronic a IMF.
11. Comparativ cu lotul de control, nou-nscuii rezultai din mame cu DZG au prezentat cu o incident semnificativ mai mare (p<0,05), a unor probleme de adaptare i patologie neonatal.
12. Corobornd rezultatele cercetrii modificrilor morfologice placentare cu cele ale manifestrilor clinice ale nou-nscuilor rezultai din mame cu DZG, am remarcat c impactul major al modificrilor morfologice placentare la nivelul IMF vizeaz:
alterarea funciilor metabolice si hormonale placentare, prin cresterea numrului de vilozitai terminale si a capilarelor acestora; exacerbarea dezechilibrat a nutriiei fetale cu consecin direct asupra creterii i dezvoltrii fetale (macrosomie fetal); paradoxal, reducerea oxigenrii fetale datorate leziunilor degenerative ale IMF, cu creterea semnificativ a incidenei patologiei hipoxice neonatale, are ca rezultat nou- nscutul mare pentru vrsta gestaional, cu hipoxie perinatal i adaptare dificil, datorit vulnerabilitailor metabolice (uriaul cu picioare de lut).
13. Rezultatele microscopiei, au consemnat multe modificri asemntoare (i/sau comune) pentru placentele din HIS i DZG, pentru cele trei grupe lezionale principale, mai ales la nivelul IMF. Aceasta a permis elaborarea unui scor morfologic care s permit aprecierea GIP pentru placentele examinate i validarea rezultatelor cercetrii. Scorul GIP cu o specificitate de 100% i o senzitivitate de 42,86%, si avnd i o cot foarte mare de predictivitate a prezenei insuficienei placentare (63,64%), ofer o bun posibilitate de apreciere a evoluiei postnatale a nou-nscuilor cu risc crescut, rezultai din mame cu HIS i DZG, deoarece insuficiena placentar determin imposibilitatea placentei de a asigura necesarul de oxigen i nutrieni unui ft n cretere.
15
14. Aplicarea scorului GIP la cazurile studiate a ilustrat cu certitudine corelaia pozitiv semnificativ dintre GIP i tulburrile hipoxice peri i postnatale n special pentru scorurile mari, existnd o mare concordan ntre scorurile mari ale cotaiei SARNAT i scorurile mari GIP (3). La scorurile mai mici, scorul GIP devine un argument morfologic important pentru suspiciunea clinic i prevenirea tulburrilor neurologice care debuteaz mai trziu, ndeosebi pentru nou-nscuii cu evoluie postnatal aparent favorabil.