Toxicologie Industriala

1
GHID PRIVIND

ASPECTE GENERALE DE TOXICOLOGIE
INDUSTRIALA
METODE DE ANALIZA UTILIZATE IN
TOXICOLOGIA INDUSTRIALA

Coordonatori:
Dr. Corneliu Neagu
Dr. chim. Mihaela Negru

2013

2

CUPRINS

I. INTRODUCERE
II. INVESTIGAREA CONDIIILOR DE MEDIU DE MUNC
II. 1. Documentare
II. 2. Identificarea noxelor la locul de munc
II. 3. Prelevarea probelor de la locul de munc
II. 4. Determinarea analitic a noxelor
II. 5. Exprimarea concentraiilor toxicelor profesionale
II. 6. Interpretarea rezultatelor
III. EVALUAREA BIOTOXICOLOGIC A PERSONALULUI EXPUS PROFESIONAL LA
AGENI CHIMICI
III. 1. Ptrunderea substanelor toxice n organism
III. 2. Fixarea, distribuia i depozitarea toxicelor profesionale
III. 3. Biotransformarea toxicelor profesionale
III. 4. Eliminarea din organism
III. 5. Determinarea substanelor chimice sau a metaboliilor n fluidele corpului
III. 6. Criterii de selectare a testelor biologice
III. 7. Interpretarea rezultatelor
III. 8. Aspecte analitice i etice
IV. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR AGENI CHIMICI N AERUL
ZONELOR DE MUNC
IV. 1. Determinarea metanolului prin GC
IV. 2. Determinarea aerosolilor alcalini
IV. 3. Determinarea acidului clorhidric
IV. 4. Determinarea acidului sulfuric i a sulfailor solubili
IV. 5. Determinarea hidrocarburilor alifatice N hexan
IV. 6. Determinarea aeroemulsiilor de uleiuri minerale
IV. 7. Determinarea unor metale
IV. 8. Determinarea unor compui organici volatili (hidrocarburi, alcooli, esteri, cetone) din
aerul locurilor de munc, prin GC
V. DETERMINAREA PULBERILOR N AERUL ZONELOR DE MUNC
V. 1. Aspecte teoretice
V. 2. Determinarea gravimetric a pulberilor inhalabile i respirabile
V. 3. Determinarea gravimetric a pulberilo toracice
VI. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR INDICATORI BIOTOXICOLOGICI
VI. 1. Determinarea acetonuriei
VI. 2. Determinarea tioeterilor urinari
VI. 3. Dereminarea cromului n urin prin GF-AAS
VI. 4. Determinarea porfirinelor totale urinare
VI. 5. Determinarea acidului delta aminolevulinic (DAL) urinar
VI. 6. Determinarea acidului hipuric i a acidului metilhipuric
VI. 7. Determinarea acidului mandelic
VI. 8. Determinarea fenolilor urinari
VI. 9. Determinarea carboxihemoglobinei n snge
VI. 10. Determinarea acidului glicolic n ser
VII. CONCLUZII
BIBLIOGRAFIE
3

I. INTRODUCERE

Lucrarea de fa se dorete a fi un ajutor pentru medici de medicina muncii, toxicologi
industriali, evaluatori de risc, angajatori n vederea evalurii expunerii profesionale la ageni
chimici i pulberi.
Expunerea profesional la astfel de ageni poate fi evaluat prin msurarea concentraiei
agentului toxic n aerul zonelor de munc i prin msurarea unor parametrii biologici la
personalul expus profesional.
n capitolul II se prezint modul de investigare a unui obiectiv industrial ( cunoaterea
procesului tehnologic, alegerea noxelor, prelevarea probelor, analiza i interpretarea acestora).
n capitolul III se prezint metodologia de evaluare biotoxicologic a personalului expus
profesional la noxe chimice.
n partea final a lucrrii sunt prezentate metode analitice de determinare a unor ageni
chimici n aerul zonelor de munc, a diferitelor fraciuni de pulberi (inhalabile, toracice i
respirabile ), precum i a unor indicatori biotoxicologici specifici.
Majoritatea acestor metode au fost adaptate i/sau verificate n cadrul urmtoarelor
laboratoare: laboratorul Toxicologie i Medicina Muncii- CRSP Bucureti, laboratorul Sntate
Ocupaional- CRSP Timioara , laboratorul ncercri Fizice, Chimice i Microbiologice CRSP
Trgu Mure i laboratorul Sntate Ocupaional CRSP Cluj Napoca.
Metodele prezentate pot fi utilizate de laboratoarele care fac evaluarea condiiilor de
munc i a strii de sntate a personalului expus la noxe chimice i pulberi.
Aceast ghid este rezultatul lucrrii din PN II Noxe profesionale (chimice i pulberi) cu
impact n expunerea profesional din Romnia Metode de determinare n aerul zonelor de
munc, indicatori biologici de expunere i/sau de efect efectuat n perioada 2011 2012.

4

II. INVESTIGAREA CONDIIILOR DE MEDIU DE MUNC
n abordarea determinrilor de noxe din aerul zonelor de munc sunt incluse mai multe
etape de studiu.
II.1. Documentare

Aceasta se refer la culegerea unor date asupra obiectivului luat n studiu i a proceselor
tehnologice ce au loc n acea unitate n vederea alegerii noxelor ce vor fi determinate , a
aparaturii i a celor mai adecvate metode de recoltare si analiz chimic ce urmeaz a fi folosite.
Studiul procesului sau proceselor tehnologice folosite n fiecare unitate va fi efectuat de
toxicologul industrial mpreun cu medicul de medicina muncii, angrennd i organele tehnice
din unitate, (responsabilul cu probleme de sntate, efii de secie etc.), deoarece investigaia
trebuie s se refere la ntreaga unitate i la ntreaga gam de ageni chimici ce intra i ies din
procesul de fabricaie.
n acest studiu se va completa un dosar de obiectiv cu urmatoarele date:
- coordonatele unitii;
- profilul i specificul ei (chimic, metalurgic, etc.);
- mrimea unitii, numrul seciilor, atelierelor;
- procesele tehnologice care se desfaoar n cadrul unitaii;
- noxele degajate pe secii i procese tehnologice;
- caracterul procesului tehnologic (continuu sau discontinuu, periodic n
funcie de nevoile pieii, etc.)

II.2. Identificarea noxelor la locul de munc

Pe baza studiului procesului tehnologic, a scopului determinrilor, se vor fixa noxele ce
urmeaz a fi cercetate, deoarece de natura acestora va depinde i aparatura i metodele de lucru
care vor fi folosite.
La alegerea noxelor se va ine seama n principiu de starea lor fizic, de agresivitatea lor,
de nivelul lor de concentraii probabile, existena unei singure sau a mai multor noxe n aer etc.
n cazul prezentei simultane a mai multor noxe n aer, se va ine seama de modul lor de
aciune i interaciune att din punct de vedere analitic (reacie chimic, interferena n
determinarea uneia sau alteia dintre noxe prin metodele de analiz chimic folosite) ct mai ales
a modului lor de aciune asupra organismului (sinergism prin adiie sau potenare, antagonism
etc.).
n alegerea noxelor ce urmeaz a fi cercetate se va ine seama att de material prima
folosit n fluxul procesului tehnologic, ct i de eventualele impuriti pe care le-ar putea
conine aceasta.
Un exemplu de impuritate care nu trebuie pierdut din vedere n cazul studierii condiiilor
de munc din industriile de metale neferoase, este arsenal din pirite.
Se vor studia att produii finii rezultai din procesul de producie ct i produii
intermediari, cei care ar putea lua natere n urma reaciilor chimice (hidrogen sulfurat, oxizi de
azot, ozon, acid cianhidric, hidrogen arseniat, hidrogen stibiat, etc.) deoarece agresivitatea
acestor produi poate fi uneori mult mai mare chiar dect cea a unor produsi finii extremi de
toxici. Alteori, dimpotriv, produii finii pot fi lipsii complet de toxicitate.
Se vor studia proprietaile fizico-chimice ale acestora: starea de agregare, (gaze, pulberi,
etc.) tensiunea de vapori de fierbere, solubilitatea n diveri solveni i ndeosebi n ap i grsimi
(pentru a putea aprecia absorbia sau eliminarea lor n cazul ptrunderii n organism pe cale
respiratorie, cutanat, digestive).
5

Pe de alt parte, se va aprecia i capacitatea laboratorului de a determina aceste noxe cu
metodele i aparatura recomandat n acest scop.
n concluzie, n funcie de numrul i nivelul concentraiei de noxe existente la un
moment dat n zona de lucru, pot apare mai multe variante de lucru.
n cazul prezenei unei singure noxe sau a unui numar redus de noxe n aer, se va alege
noxa dominant sau noxa major.
Prin aceasta se nelege substana cu cea mai mare rspndire n aer (noxa dominant) cu
cel mai nalt nivel al concentraiei ei, iar prin noxa major se nelege i noxa cu cel mai ridicat
potenial agresiv asupra organismului. De cele mai multe ori, acestea au i o reacie specific
asupra organismului.
Literatura de specialitate din ultimul timp susine i ncearc s demonstreze din ce n ce
mai des, c factorii de mediu care afecteaz starea de sntate a muncitorilor, potentialul nociv al
locurilor de munc n care acetia i duc activitatea zi de zi, este cu mult mai variat i mai
complex. De aceea, mediul nu mai poate fi caracterizat n majoritatea cazurilor i mai ales n
cazul prezenei mai multor noxe simultan n aer, prin determinarea unei singure noxe (noxa
dominant sau noxa major).
Este n consensul general de a considera c n cazul existenei concomitente n atmosfera
industrial a mai multor noxe chimice, apare un sinergism de adiie sau de potenare.
Pe de alt parte, n cazul n care substanele aflate n amestec, au un efect asemntor
asupra organismului, efectele lor se vor cumula.
Cunoaterea exact a modului lor de aciune asupra organismului, ca i gradul lor de
agresivitate este un lucru foarte important, deoarece de acestea poate depinde n mare msur i
sistemul de recoltare a noxelor din aer i metoda lor de determinare chimic.
Determinarea mai multor noxe coexistente la un moment dat n aer, impune i
multaneitate n recoltarea probelor de aer, deoarece numai n aceste condiii se poate face o
interpretare corect a datelor de mediu n vederea tragerii unor concluzii practice n urma crora
s se poat face recomandri valoroase nu numai de ordin medical, dar i etic i economic.
Deci, urmtoarea etap de studiu n vederea determinrii naturii i concentraiilor
substanelor din atmosfera locurilor de munca este recoltarea probelor de aer.
Principalii factori care impun luarea n studiu a unei metodologii de cercetare mai
complete, n cazul prezenei simultane a mai multor noxe n aer sunt:
- coexistena mai multor noxe n aerul zonelor de munc n cantitai suficient de mari ca
s-i ateste prezena att prin influenarea direct a organismului, ct i prin atingerea
sensibilitii metodelor curente de analiz chimic;
- existena mai multor noxe simultan n aer cu grade diferite de toxicitate, cu multiple
posibilitai de interreacie, care pot duce uneori la potenarea lor, prin formarea unor
produi mai toxici, ca i prezena n atmosfera zonelor de munc a unor concentraii mici
de substane toxice uneori sub sau n jurul concentraiilor maxime admise, valori ce sunt
trecute n mod obinuit cu vederea.

II.3. Prelevarea probelor la locul de munc

Dup alegerea noxei sau a noxelor ce urmeaz a fi determinate n aer, este necesar s se
stabileasc zonele de munc - locul de unde se vor recolta probele de aer.
Criteriile de alegere a locului de recoltare sunt variate.
Locurile de recoltare a probelor de aer pot fi puncte fixe, cum ar fi o masa de comanda,
lng o baie de decapare, lnga un agregat oarecare etc. n acest caz determinrile vor reprezenta
concentraia noxei sau eventualele variaii ale noxei n fluctuaii tehnologice, orare, diurne, etc.
n alte cazuri ele vor putea reprezenta poluarea de fond a acelui loc de munc. De aceea
este necesar s se aibe n vedere interveniile care fac destul de frecvent la unele instalaii i care
6

de asemenea contribuie la creterea concentraiilor de substane toxice n atmosfer, precum i
faptul c dac muncitorul lucreaz temporar sau permanent n acel loc.
n ceea ce privete alegerea i numrul punctelor de recoltare a probelor de aer n cazul
industriei chimice, n care hala ntreag reprezint un loc de munc deoarece noxele (n deosebi
cele gazoase) se rspndesc relativ uniform n ntreaga ncpere, este absolut necesar ca ele s fie
fixate n toate locurile n care se gsesc muncitorii n timpul procesului de munc. Ele pot fi
puncte fixe s-au puncte mobile indiferent dac este vorba de subsol, parter sau alte nivele ale
halei cuprinse n zona de munc.
b) Recoltrile de probe de aer prin puncte mobile reprezint determinri fcute n diferite
locuri alese dup anumite criterii. Unul dintre ele poate fi urmrirea unui muncitor de un anumit
profil, n toate locurile n care-i desfoar activitatea pe perioada celor 6 sau 8 ore de producie.
Interpretarea acestui gen de determinri poate fi foarte diferit n funcie de scopul care se
urmarete. De exemplu acest mod de recoltare prin puncte ar putea fi unul din mijloacele de
urmrire i demonstrare a expunerii reale la noxe nu numai a operatorului chimist dar i a unui
muncitor de alt profil cum ar fi de exemplu un electrician sau un lctu, care ia parte indirect n
procesul tehnologic justificnd i susinnd o eventual simptomatologie clinic sau de
laborator, suspect.
c) nalimea la care se recolteaz prizele de aer pentru cercetri tehnologice, este n
general nivelul de respiraie al muncitorului (1,5 m) considernd c acesta ar sta n picioare.
nalimea la care se recolteaz prizele de aer este condiionat i de ali factori, printre
care citm scopul alegerii locului de unde se iau probele de aer, poziia muncitorului n
momentul efecturii unei operaii din cadrul procesului tehnologic, etc. Astfel, nalimea poate fi
de 1 m n cazul n care muncitorul execut o operaie n poziie eznd sau de 2-3 m i mai mult
atunci cnd muncitorul se afl pe o scar.
Datorita faptul ca majoritatea toxicilor sint absorbiti in organism pe cale respiratorie, se
va tine seama de aceasta cale de patrundere a lor in organism, astfel recoltarea prizelor de aer
facindu-se la acest nivel.
Scopul determinrii poate constitui un alt criteriu care s hotrasc locul i nalimea
punctului de priz.
n cazul n care se urmrete de exemplu controlul eficienei unei ventilaii, verificarea
unor msuri tehnice luate cu scopul de a reduce nivelul eliminrilor de noxe n aer, sau defeciuni
ale unor instalaii, recoltarea probelor de aer se va face din locurile cele mai indicate de exemplu:
la gura exhaustoarelor, la locurile de mbinare a coturilor, la robinete etc.
ntotdeauna se va nota n buletinul de analiz i distana la care se afl aceste puncte de
recoltare faa de locul de emisie a noxelor din aer, sau distana la care se gasete gura de
ventilaie fat de locul de munc cercetat, pentru a se putea face interpretrile corecte ale
rezultatelor.
Pentru o apreciere ct mai real i o verificare a modului de recoltare a prizelor de aer, se
recomand prelevarea n paralel a cte dou probe de aer, simultan din acelai loc i numai dac
este posibil recoltarea a dou probe simultan, ele se vor succeda una dupa alta ntr-un timp
foarte scurt, inndu-se cont de acest lucru la interpretarea rezultatelor.
Se recomand de asemenea, ca recoltrile de aer s se efectueze simultan cel puin din
dou puncte diferite ale aceleai ncperi. Unul din puncte l va constitui locul propus iniial
pentru a fi caracterizat din punct de vedere toxicologic, n timp ce cellalt va fi ales ceva mai
departe n locuri mai puin poluate, pentru comparative.
Dac sursa eliminrii de noxe este slab i bine localizat n spaiu, ntre aceste dou
puncte de recoltare vor exista diferene mici de concentraii i diferenele vor fi cu att mai
semnificative cu ct sursa de poluare va fi mai mare.
Dac exist mai multe surse difuze de poluare a aerului n aceeai ncpere, diferenele
dintre punctele de recoltare ale aerului fiind mai mici, i mai putin semnificative unul faa de
7

cellalt, ele vor reprezenta totui un nivel oarecare de poluare al aerului de la un punct la altul,
sau de la o secie la alta cu acelai profil al ntreprinderii.
Odat stabilite locurile de expertizare i punctele de priz ale probelor de aer, adic
cercetarea n spaiu, apare necesitatea planificrii n timp a determinrilor. n vederea acestui
scop se va alctui profesiograma detailat a muncitorilor examinai. Numai pe baza
profesiogramei se va putea aprecia cu aproximaie, numrul de determinri necesare i
desfurarea n timp a recoltrilor pentru o caracterizare corect a condiiilor de munc.
Profesiograma reprezint fotografierea n timp, cronometrarea minut cu minut a ntregii
actriviti a muncitorului de un anumit profil. Profesiograma va releva n primul rnd, timpul real
de expunere a muncitorului la noxe n diferite faze ale procesului tehnologic ca i perioadele de
timp n care acesta este antrenat i n alte munci sau activiti.
O profesiogram bine facut va demonstra n primul rnd caracterul procesului
tehnologic, dac acesta este continuu sau discontinuu. Deci, n funcie de acest caracter al
procesului tehnologic se va alctui i planul de determinri la locul de munc.
Astfel, dac ne aflm ntr-o industrie cu un proces tehnologic continuu, determinrile
(recoltrile de aer) se vor putea face la prima or de la intrarea n tur a schimbului de dimineaa,
n perioada de mijloc a acestui schimb i la sfritul lui.
Determinrile se vor repeta dupa aceleai criterii i n celelalte schimburi de zi sau de
noapte. Se procedeaz n acest fel pornindu-se de la premiza c n condiiile unui proces continuu
eventualele modificri de concentraii ale noxelor n aer s-ar putea datora acumulrii de noxe n
timp, lipsei de ventilaie, schimbrii microclimatului exterior, precum i altor cauze.
Acesta va fi i orarul recoltrilor probelor de aer obligatoriu, n cazul determinrilor de
noxe n aerul zonelor de munc ntr-o industrie chimic modern, mecanizat i automatizat
construit n aer liber, deoarece modificrile de concentraii ale noxelor vor fi legate n primul
rnd de microclimatul diferitelor ore din zi sau din noapte.
Tot din profesiogram vor apare (ndeosebi n cadrul industriilor chimice) i alte
momente importante din punct de vedere al igienei muncii i crora trebuie s li se acorde
importana. De exemplu, pierderi de noxe n momentul prelevrii probelor pentru analizele de
laborator, necesare controlului procesului de producie, momente n care au loc deobicei creteri
ale concentraiilor la care vor fi expui muncitorii i explicaia intoxicaiilor acute profesionale
nregistrate adeseori.
n condiiile unui proces tehnologic discontinuu, prelevarea probelor de aer se va face
n mod obligatoriu pe faza de proces tehnologic i loc de munc, indiferent de timpul scurs de la
nceperea lucrului sau de la intrarea n tur a muncitorilor.
Sunt faze de proces tehnologic care pot ine minute i chiar fraciuni de minute, momente
n care eliminrile de noxe pot s ating concentraii n aer att de mari nct s depaeasc cu
mult expunerea i riscul de intoxicare a muncitorului, concentraii la care nu ar fi expus
muncitorul nici pe o perioada de 6 sau 8 ore de munc.
Reiese de aici c principalul factor care determin ritmicitatea recoltrii probelor de aer
este procesul tehnologic.
Dar frecvena i recoltarea probelor de aer este condiionat nu numai de noxe i de
nivelul concentraiei lor n aer, de procesul tehnologic i de sensibilitatea metodelor chimice de
analiz, ct i de alti factori legai de sistemul de recoltare a noxei (pe material filtrant sau n
soluie), de solubilitatea noxei sau reactivitatea ei cu soluia reactiv etc.
Principiul sistemului de recoltare al noxelor este esenial. Dac metoda de analiz
prezint suficiente garanii de sensibilitate, necesitnd pentru punerea n eviden a noxelor
recoltarea unor volume mici de aer, acestea vor permite recoltarea unui numr mare de probe de
aer ntr-o perioad relativ scurt de timp.
Din cele expuse mai sus, reiese faptul c i numrul probelor de aer ce trebuie recoltate
dintr-un punct care urmeaz a fi caracterizat din punct de vedere toxicologic nu este i nu poate
8

fi fix sau stabilit cu precizie dinainte. Numrul minim de probe recoltate dintr-un anumit punct
pentru evalurile de rutin poate fi de 3 pna la 5 pentru fiecare operaie, sau de ordinul a 15-20
de probe adic attea nct s permit o caracterizare precis i reala a unui proces tehnologic, a
unei operaii sau a unui moment oarecare din cadrul procesului de munc ce urmeaz a fi
caracterizat.
n principiu, dac procesul tehnologic este continuu i decurge n mod normal, dintr-un
punct de recoltare se vor lua probe de aer cel puin n 3 momente ale zilei: la nceputul lucrului
sau al unui schimb, la mijlocul i la sfritul schimbului.
n cazul n care muncitorul efectueaz i unele operaii obligatorii care determin
eliminri de noxe n aer, se vor recolta probe de aer i n aceste momente. Cu att mai mult n
cazul unor avarii sau n cazul verificrii unor agregate ca i n cazul unor procese tehnologice
discontinue, probele de aer recoltate trebuiesc s fie suficiente pentru a permite o caracterizare
corect a acestui loc de munc, operaie sau proces tehnologic. Fr ndoial c, cu ct numrul
de probe recoltate va fi mai mare, cu att i valoarea determinrilor va fi mai exacta mai real.
n general fiecare metod de analiz chimic prevede volumul minim de aer necesar
pentru o determinare.
Dar volumul minim de aer al unei probe care s permit dozarea unei noxe la limita
tolerabil (VLE) lucru deosebit de important n cazul necesitii de a determina o noxa noua din
aer, se poate calcula pornind de la urmtoarea formul:

V
mn
= S x 22400 760 273 + t , n care
M x VLE P 273

V
mn
= volumul minim de aer necesar determinrii probei exprimat n litri;
S = sensibilitatea metodei analitice, exprimat n mg;
M = greutatea molecular a substanei de cercetat;
VLE (CMA) = valoarea pragului recunoscut n ppm;
P = presiunea barometric exprimat n mm coloan de mercur;
t = temperatura aerului exprimat n grade Celsius.

Dac temperatura i presiunea nu sunt mult diferite de 25
0
C i 760 mm Hg se poate aplica
ecuaia simplificat.
Dispozitivele de recoltare pot fi individuale (personale) sau colective (pentru locul de
munc).
- metoda de recoltare: aerul de la locul de munc, care conine toxicul profesional (toxicele
profesionale) ce trebuie determinat, este aspirat ntr-un mediu absorbent , adsorbant sau filtrant
capabil s-l rein.
Mediul absorbent poate fi un lichid (ap, soluie chimic, etc.) mediul adsorbant poate fi
gel de siliciu, aluminiu, carbine, etc. iar ca mediu filtrant se folosesc diferite filtre. n general
mediile absorbente i adsorbante se folosesc la recoltarea probelor de aer ce conin toxicul
profesional sub forma de gaze sau vapori toxici, iar mediul filtrant la recoltarea pulberilor toxice.
Absorbitoare de tip macro i micro. Principiul recoltrii probelor de aer const n trecerea
lui printr-un lichid, sub form de bule ct mai mic, pentru a favoriza reinerea mecanic a
substanei n lichid sau pentru a fixa substana de cercetat printr-o reacie chimic cu soluia
absorbanta.
Absorbitoarele sunt de mai multe tipuri i poart denumirea celui care le-a propus, fie
una din caracteristicile lor. Astfel, se cunosc microabsorbitoarele de tip Petri, Cloez, Drexel sau
de tip impingiment a crui principiu de funcionare este cel de impact. Alte dispozitive sunt
cunoscute sub denumirea de absorbitoare cu placa poroasa, cu lulea, etc. Capacitatea lor utilizare
este de 10-20 ml soluie, iar debitul de aspiraie este ntre 0,5 i 20 l/minut.
9

Pentru o concentrare i mai mare a unor noxe aflate n mediul de munc se folosesc
microabsorbitoarele confecionate din sticla bazate pe acelai principiu cu absorbitoarele de mai
sus, dar coninnd volume i mai mici de soluie absorbant. n acest sens, deosebit de apreciate
sunt microabsorbitoarele n form de U cu capilar, n care se pot introduce la nevoie i bile
de sticl, i a cror capacitate este de 2 5 ml soluie, iar debitul de aspiraie a aerului sub 0,5
l/minut.
Pentru aerosoli cum ar fi: fum, cea, pulberi de diferite nature (minerale, animale sau
vegetale) se foloseste dispozitivul filtrante. Principiul lor de funcionare este de a filtra aerul de
cercetat printr-un material poros care poate fi hrtie de filtru, filtru de membrane, fibre de sticl,
etc. Porii acestor filtre fiind mici i eficiena reinerii cantitative a noxelor este cu mult mai mare
ca a celorlalte metode de aspiraie. n plus n acest caz intervin fortele electrostatice care mresc
cu mult eficiena reinerii.
Aparatura de recoltare const din dispozitive de aspiraie a aerului (aspiratoare), dispozitivul de
reinere (absorbitoare, plnii) i dispozitive pentru msurarea debitului sau a volumului de aer
(debitmetre,rotametre, gazometre).

II.4. Determinarea analitic a noxelor

Probele de aer de la locul de munc, recoltate prin una din metodele amintite, sunt
analizate. Pentru analiz se folosesc urmatoarele metode:
- metode spectrometrice: spectrometrie de absorbie atomic, spectrometrie de absorbie
molecular UV/VIS;
- metode cromatografice: cromatografie n faza gazoas sau faza lichid;
- alte metode: turbidimetrice, gravimetrice, electrochimice (potentiometrice, polarografice)
pot fi utilizate n unele cazuri;
- metode de determinare rapide, orientative ( tubuoare indicatoare);
- metode rapide automate - n acest scop sunt folosite analizoare de gaze sau de compui
organici volatili dotate cu senzori electrochimici sau celule fotoelectrice.

II.5. Exprimarea concentraiilor toxicelor profesionale

Concentraiile de toxic profesional gsite n aerul locului de munca se exprim n mg/m
3

sau n ppm (parti per million) .
De obicei, exprimarea pentru gaze i vapori se face n ppm (parti per million).
Dar, pentru o interpretare mai uoar de cele mai multe ori, concentraiile de toxic
profesional n aer sunt exprimate n concentraie masica (nu n volume) = mg/m
3
.
Conversia de la ppm la mg/m
3
i de la mg/m
3
la ppm se bazeaz pe condiii standard i
anume:
- presiunea atmosferica : 760 torri;
- temperature 25
0
C (77
0
F);
- volum molar : 24,45 l.
Conversia de la ppm la mg/m
3
i de la mg/m
3
la ppm se face conform formulelor:

- mg/m
3
= ppm masa moleculara a toxicului profesional
24,45

- ppm = mg/m
3
x 24,45____________________
masa moleculara a toxicului profesional

10

II.6. Interpretarea rezultatelor

Rezultatele obinute, exprimate n mg/m
3
, se compar cu valorile limit de expunere
profesional pentru agenii chimici (HG 1218/2006). Dac nu se specific astfel valoarea limit
de expunere profesional pentru agenii chimici, reprezint valoarea limit a mediei ponderate cu
timpul, pe o perioad specific (8 ore) i termen scurt (15 minute).
a) Modul de calcul al concentraiei medii ponderat cu timpul
Concentraia medie ponderat cu timpul pe durata unui schimb de lucru rezult dintr-un
numr reprezentativ de determinari la locul de munc respective, n diferite faze ale procesului
tehnologic, crora li se cunoate durata.
Formula:

(C
1
xT
1
) +(C
2
xT
2
) + (C
3
xT
3
)+..+ (C
n
xT
n
)

T
total

C
1
,C
2
,C
3
C
n =
concentraiile medii ale diferitelor faze specifice ale procesului tehnologic,
exprimate n mg/m
3

T
1
,T
2
,T
3
T
n =
durata diferitelor faze specifice ale procesului tehnologic la care s-au fcut
determinrile exprimate n minute.
T
total =
timpul total de lucru al schimbului de lucru: 480 minute sau 360 minute (8 sau 6 ore pe
zi).
b) Cazul n care se gsesc simultan n aerul locului de munc substane cu toxicitai
diferite i pentru care nu exist metode de determinare separate a acestora, se va lua n
considerare substana cu toxicitatea cea mai mare pentru aprecierea gradului de nocivitate a
zonelor de munc.
c) Cazul n care la locurile de munc se gsesc simultan mai multe substane toxice
avnd un efect sinergic de tip aditiv, i unde aprecierea riscului i msurilor de protecia muncii
necesare se face avnd n vedere aciunea combinat a acestora.
Se consider c au un efect sinergic de tip aditiv substanele toxice care au ca int a
agresisivitaii lor acelai organ sau sistem al organismului, ori care au acelai mecanism de
aciune. n aceste locuri de munc, aprecierea riscului, respectiv a nivelului noxelor n aer n
raport cu concentraiile admisibile, se va face aplicnd urmatoarea formula:

C
1
+ _ C
2
__ + + __C
n
_ = 1
CMA
1
CMA
2
CMA
n

C
1
,C
2
..C
n
= concentraiile gsite n aer pentru fiecare nox
CMA
1
, CMA
2
CMA
n
= concentraiile maxime admise pentru probele respective
Dac suma este <1 - amestecul de toxice profesionale din aer nu depete concentraia
admisibil.
Dac suma este >1 - amestecul de toxice profesionale din aer depete concentraia
admisibil, chiar dac pentru fiecare toxic concentraia admisibil nu este depit.

11

III. EVALUAREA BIOTOXICOLOGIC A PERSONALULUI EXPUS
PROFESIONAL LA AGENI CHIMICI

Sntatea ocupaional necesit o cercetare multidisciplinar pentru prevenirea
afecturii sntaii care poate rezulta n urma unei expuneri excesive, acute sau cronice la ageni
chimici. Detectarea timpurie a expunerilor duntoare poate scdea semnificativ apariia unor
efecte adverse prin reducerea nivelului de expunere i luarea unor msuri de prevenie.
Monitorizarea expunerii este un procedeu care const n evaluarea de rutin i interpretarea
parametrilor biologici i/sau ambientali n scopul detectrii riscurilor posibile pentru sntate.
Acest mod de abordare necesit :
a. definirea nivelelor limit de expunere, nivele care n acord cu actualele cunotine sunt
estimate s nu cauzeze efecte adverse n timpul vieii muncitorilor;
b. aprecierea obinuit a posibilelor riscuri pentru sntate asociate cu expunerea prin
compararea expunerii crescute sau integrate cu aceste limite de expunere permise.
Monitorizarea biologic a expunerii este de obicei rezervat pentru agenii chimici care
ptrund n organism i exercit efecte sistemice. Foarte puine teste biologice au fost propuse
pentru identificarea sau monitorizarea chimicalelor prezente la interfaa dintre mediu si organism
(piele, mucoasa gastrointestinal sau mucoasa tractului respirator). Exemple de astfel de teste ar
fi analiza nichelului n mucoasa nazal sau numrarea corpilor azbestozici n sput.
Pentru substanele active sistemic, monitorizarea expunerii reprezint abordarea cea mai eficace
pentru evaluarea riscului potenial pentru sntate deoarece, un indicator biologic este n mod
normal mai strns legat de un efect sistemic dect orice masurtoare de mediu.
Monitorizarea biologica a expunerii integreaz absorbia chimic pe toate cile
(pulmonar, oral, cutanat) i din toate sursele (profesionale, ambiental, alimentar etc.) lund
n consideraie i factorii individuali care pot influena ingestia sau absorbia substanelor
chimice cum ar fi : sexul, vrsta, activitatea fizic, etc.
Modul de aciune a substanelor toxice exogene asupra organismului uman are trei faze:
a. faza de expunere, cnd organismul intr n contact cu toxicul;
b. faza toxicocinetic, aciunea organismului asupra substanei toxice. Aceast faz conine:
absorbia, ditribuia, depozitarea sau acumularea, biotransformarea sau metabolizarea i
eliminarea substanei din organism;
c. faza toxicodinamic, aciunea organismului asupra noxei ce cuprinde fenomenele care au
loc n organism la diferite nivele, conducnd, n final, la efectul toxic.

III.1.Ptrunderea substanelor toxice n organism

Principalele ci de ptrundere a substanelor toxice n organism sunt:
- calea respiratorie;
- alte ci transmucoase;
- calea cutanat;
- calea digestiv;
- calea placentar;
- calea mamar.
Acestea sunt ci de ptrundere indirecte sau mediate. n afara acestor ci mai sunt i cile de
ptrundere directe (imediate sau parenterale) care asigur ptrunderea substanei n esut
printr-un mijloc mecanic, cum ar fi:
- calea intravenoas,
- calea subcutanat,
- calea intramuscular,
12

- calea intradermic,
i sunt utilizate n toxicologia industrial n experimentele pe animale de laborator.
n mediul industrial principala cale de ptrundere a substanelor toxice n organism este calea
respiratorie (80 90 % din intoxicaiile profesionale se produc pe aceast cale), apoi
transcutanat i gastrointestinal.
Ptrunderea substanelor din mediul exterior n interiorul organismului presupune
traversarea uneia sau mai multor membrane biologice nainte de a ajunge la centri activi.
Traversarea membranelor este condiionat de mai muli factori:
- natura chimic i organizarea moleculelor din compoziia membranei;
- proprietai fizico-chimici ale substanei toxice;
- structura fizico-chimic a moleculelor mediului de o parte i de cealalt a membranei.
Traversarea membranelor se poate face prin difuziune simpl (pasiva) sau prin transport activ.
Difuziunea simpl este caracteristic substanelor organice nencarcate electric. Singura barier
n traversarea unei membrane o constituie stratul lipidic membranar. Substanele cu coeficient
mare de repartiie lipide/ap difuzeaz cel mai rapid.
Prin difuziune simpl traverseaz membranele compui gazoi i volatili cu greutate moleculara
mica (halogeni i derivaii lor, HCH, CS
2,
CO, CO
2
, etc), compui organici volatili (hidrocarburi,
alcooli i fenoli, hidrocarburi alifatice clorurate, glicoli, nitro i aminoderivati, etc.) acizi
organici (acid oxalic, acid salicilic, etc.).
Transportul activ este caracteristic ionilor minerali pentru care membranele biologice sunt slab
permeabile.
Principalele substane care traverseaza prin acest mecanism sunt: As, Sb, Hg, Pb, Cr, Cd, floruri
i fluorosilicai, azotai, etc.) .
Att ftul ct i copilul mic nu au sistemul enzimatic bine format astfel nct sunt foarte
vulnerabili la aciunea unor substane chimice din mediul de munc.
a) Ptrunderea substanelor pe cale respiratorie
Ptrunderea noxelor profesionale prin arborele traheo-bronicalveolar are o mare
importan deoarece legtura ntre mediul extern i snge se face direct, iar suprafaa alveolar
este foarte mare ceea ce i confer o mare capacitate de absorbie pentru substane gazoase i
lichide cu tensiune de vapori mare, ca i pentru particulele fine, lichide i solide aflate n
suspensie stabile n aer (aerosoli, aeroemulsii sau ceaa, fumuri, etc.).
Deosebit de activi sunt aerosoli metalici care n aceast stare sunt ncrcai electric, nct se
menin n aer pna ce ajung la nivel alveolar, sarcinile electrice i mpiedic s se aglomereze i
astfel s fie reinui n cile aeriene superioare, ceea ce le-ar micora toxicitatea.
Gazele i vaporii ptruni n tractul respirator se comport diferit n funcie de solubilitatea i
reactivitatea lor chimic. Astfel, gazele solubile n ap se dizolv i acioneaz doar la nivelul
cilor respiratorii superioare.
Gazele i vaporii mai putin solubili ajung la nivelul alveolelor pulmonare unde se manifest
aciunea lor toxic.
Gazele i vaporii liposolubili traverseaz bariera alveolo-capilar i absorbia lor n
snge depinde de solubilitatea lor n snge, debitul sanguin, rata metabolizrii i ventilaiei.
Substanele au solubilitate mic n snge se elimin n procent mare tot prin respiraie
b) Ptrunderea substanelor pe cale cutanat
Transcutanat se absorb n special solvenii organici i pesticidele.Cnd o substana
chimic ajunge n contact cu pielea, pot exist patru aciuni:
- pielea i stratul de grsime i transpiraie care o acoper, se pot comporta ca o barier
efectiv prin care substana nu poate ptrunde;
- substana poate reaciona cu suprafaa pielii producnd iritaii (acizii, alcalii, solveni
organici);
13

- substana poate ptrunde prin piele i poate cauza sensibilizri (aldehida formic, nichelul,
anhidrida ftalic, etc.);
- agentul chimic poate ptrunde prin piele i trecnd n snge i execit aciunea toxic asupra
organismului (aniline, parathion, tetraetil de plumb).
Doar un mic numr de substane sunt absorbite prin piele n cantiti de risc.
Pentru a ptrunde prin piele, substana trebuie s urmeze unul sau mai multe din urmatoarele
trasee: celulele epidermale, glandele sebacee, glandele sudoripare, feliculii piloi.
Calea prin celulele epidermale i stratul cornean de dedesubtul acestora, pna n snge,
este probabil calea principal de penetraie deoarece acest esut constituie cea mai mare parte din
suprafaa pielii.
Absobia este mai rapid prin pielea zgriat sau inflamat, de aceea substanele chimice care n
mod normal nu sunt considerate riscuri pot fi periculoase pentru indivizii suferind de dermatoze
inflamatorii active.
c) Ptrunderea substanelor pe cale gastrointestinal
Calea gastrointestinal este mai puin important n condiiile expunerii profesionale,
deoarece cantitatea de toxic ptruns pe aceast cale, este n general mic i de asemenea
legtura cu circulaia sanguin se face prin intermediul ficatului care este principalul organ
detoxifiant al organismului.
Aceasta cale de ptrundere a substanelor toxice din mediul de munc este determinat n
principal de o igien individual inadecvat (miini murdare, alimente contaminate cu substane
chimice).
d) Ptrunderea substanelor pe cale transplacentar i pe cea mamar
Placenta constituie bariera prin care au loc schimburile ntre circulaiile sanguine materne
i fetale.Prin placent pot trece gaze i vapori volatili (alcooli, chloroform, eter), substane hidro-
solubile (Hg, Pb) i unele substane hidrosolubile ( benzene, eter).
Pe cale mamar prin secreia lactate pot trece i unele substane chimice la copilul alptat
la sn.
Att ftul ct i copilul mic nu au sistemul enzimatic bine format astfel nct sunt foarte
vulnerabili la aciunea unor substane chimice din mediul de munc.
e) Ptrunderea substanelor pe alte ci indirecte
Alte ci transmucoase prin care pot ptrunde n organism substane toxice sunt
conjunctiva, mucoasa bucala i mucoasa rinofaringian. Aceste ci sunt rar ntlnite n
expunerile profesionale.

III.2. Fixarea, distribuia i depozitarea toxicelor profesionale

Dupa absorbie, adic dup ptrunderea n snge sau n limfa circulant , substana
exogen rmne un timp scurt n aceast faz, fie sub form liber (dizolvat n lichidul
plasmatic), fie fixate pe hematii sau legate de proteinele plasmatice.
Capacitatea de fixare pe proteinele sanguine variaz cu natura substanei i cu specia
animal. Spre deosebire de receptori, care fixeaz numai substana cu o anumit structur,
proteinele plasmatice sunt capabile s fixeze molecule mici cu structuri foarte variate, deci
fenomenul nu este specific. Fixarea se realizeaz prin diferite tipuri de fore intermoleculare, n
funcie de distana, caracteristicile situsurilor de fixare de pe macromolecula proteic.
Astfel, unele metale (de exemplu Pb) se fixeaz, sub form de pulberi, vapori sau
compui anorganici, pe eritrocitele n proporie de 90 %. Numeroase medicamente i substane
toxice se leag de proteinele plasmatice: benzene, toluene, clorura de etil, barbiturice, unele
antibiotice, etc. ceea ce ntrzie biotransformarea i deci eliminarea acestora din organism.
Distribuia reprezint transportul sau transferul substanei din snge n esuturi i organe
sau n alte lichide de distribuie.Unele substane difuzeaz uniform n toate esuturile (de
14

exemplu alcoolul etilic). Majoritatea se distribuie nsa efectiv n anumite esuturi datorit faptului
c permeabilitatea membranei celulare din diferitele esuturi nu este aceeai pentru toate
substanele. De aici decurge o repartiie neuniform a aceleiai substane n esuturi diferite:
iodul se acumuleaz selectiv n glanda tiroid, zincul n oase etc.
Depozitarea poate avea loc n:
- esut adipos n cazul solvenilor organici, pesticide, organoclorurate, nitroderivai etc.;
- esut osos: Pb, Sc, Ba, Ca, F, P;
- celulele sistemului reticulo-endotelial joac rol n fagocitoz i pinocitoz, nglobnd
particule mari, ca virusuri, bacterii, particule coloidale etc.
- proteine tisulare se formeaz compleci cu constituienii diferitelor parenchime, apoi
acetia se disociaz lent, ca urmare a metabolismului proteic.
o fanere arsen, seleniu
o piele aur , argint
o lichidele necirculante normale ( lichid cefalorahidian) i patologice (lichid pleural
sau ascetic) pot depozita unele substane exogene.

III.3. Biotransformarea toxicelor profesionale

Biotransformarea sau metabolizarea substanelor exogene reprezint conversia
enzimatic a acestora n metabolii mai polari, mai uor excretabili (pentru ca strabtnd mai
greu barierele lipoidice, reabsobia tubular este mai redus) i de obicei mai puin toxici.
Compuii exogeni sunt acei compui care ptruni n organism nu sunt utilizai pentru
producerea de energie sau elaborarea componenilor tisulari: n general ei sunt strini cilor
metabolice normale ale organismului.
Organismul animal are posibilitatea de a metaboliza majoritatea structurilor chimice
cunoscute. Dintre compusii exogeni, doar dou categorii de substane nu sufer metabolizare i
sunt eliminate ca atare. Acetia sunt:
- compuii puternic polari ( acizii i bazele tari)
- unii compui nepolari cum ar fi eterul etilic, dieldrin, etc.
Metabolizarea substanelor toxice are loc de obicei n doua faze. Dupa Williams aceste
transferri s-ar prezenta astfel:
- un compus A (biologic active sau inactive) este transformat prin reacii de oxidare, reducere
sau hidroliz ntr-un compus, care fie este ultractiv B, fie este inactive B.
- n faza II, compuii A,B,B pot trece ntr-un compus C, inactive, n general rezultatul unei
sinteze. Exemplificarea acestor transformri este prezentat n figura urmtoare:

Fig. 1. Metabolismul calitativ (dupa Williamas)
15

Reaciile din faza I de metabolizare sunt reacii de oscilare reducere sau hidroliz prin
care se introduc n molecula grupri reactive, cu polaritate crescut: -OH; -COOH,-SH, -NH
2
.
Cea mai des ntlnit reacie din faza I de metabolizare este cea de oxidare. Totui pot fi
ntlnite i celelalte tipuri de reacii deoarece substanele exogene sufer biotransformri
multiple, dintre care una este calea principal, iar celelalte ci secundare.
Reaciile din faza I sunt prezentate n tabelele de mai jos:

REACII DE OXIDARE
REACIA EXEMPLE
hidroxilarea catenei alifatice toluen acid hipuric
hidroxilarea aromatic benzenul fenoli
N-oxidarea Trimetilamina trimetilamino-N-oxid
S-oxidarea Clorpromazina
O-dezalchilarea codeine morfina
N-dezalchilarea etilamina aniline acetaldehida
S-dezalchilarea metiltipurina- tiopurina
dezaminarea oxidative benzilamina-benzaldehida-amoniac
Desulfurarea parationul-paraoxonul
Epoxidarea aldrinul dieldrinul
oxidarea cu deschiderea ciclului nicotina-acid gamma(3piridil)-gamma-metil-aminobutiric

REACII DE REDUCERE
Aldehide alcool primar R-CHO-R-CH
2
OH
Cetone alcool secundar R-CO-R-R-CHOH-R
Saturarea dublei legaturi R-CH=CH-R-R-CH
2
-CH
2
-R
Nitroderivat nitrozoderivathidroxilaminaamina R-NO
2
-R-NO-R-NHOH-R-NH
2
Azoderivat hidrazoderivat amina R-N=N-R-R-NH-NH-R-R-
NH
2
+R- NH
2

Acid hidroxaminic amida R-CO-NHOH-R-CO- NH
2

Disulfura sulfhidrol R-S-S-R-R-SH+R-SH
As
+5
As
+3
R-AsO(OH)
2
R-As=O

REACII DE HIDROLIZ
Reacia Formul general Exemple
Dezesterificare R-COO-R-R-COOH=R-OH atropine acid atropic + tropanol
Dezaminare R-CONH-R-R-COOH+R-NH
2
lidocaina-etilenglicocol + xilina

Sediul metabolizrii poate fi, n principal, orice organ sau esut nsa, sediul principal este
ficatul. Sediul metabolizarii nu corespunde ntotdeauna cu sediul principal al aciunii toxice.
Astfel:
- metanolul se metabolizeaz n principal n ficat, dar efectul toxic se manifest la nivelul
retinei, SNC sau rinichiului.
- naftilamina se hidrolizeaz n ficat, dar efectul cancerigen apare la nivelul vezicii urinare;
- tetraetilul de plumb se metabolizeaz la trietil de plumb n ficat, dar acest metabolit este n
principal toxic pentru SNC.
Reacia de metabolizare a substanelor exogene sunt catalizate de enzime. Astfel de enzime ce
controleaz reaciile din faza I de metabolizare sunt:
- oxidaze sau hidrolaze (introduce gruparea OH n ciclurile aromatice sau catene alifatice);
- aminooxidaze (dezamineaz oxidative i nlocuiesc gruparea NH
2
cu cetona sau acid);
16

- N-metil sau O-metiltransferaze (favorizeaz ndeprtarea radicalilor);
- decarboxilare (elimin CO
2
din acizii organici);
- reductaze (reduce gruparea nitro);
- esteraze (hidrolizeaz esterii).
Efectele metabolizrii din faza I sunt importante din punct de vedere toxicologic,
deoarece:
- metaboliii sunt mai polari, dar nu n mod obligatoriu i mai puin toxici de aceea
termenul de biotransformare nu este sinonim cu detoxifiere;
- apariia unor metabolii mai toxici explic faptul c unele substane exogene sunt inactive
in vitro, dar active in vivo;
- apariia metaboliilor cu activitate diferit de a compusului initial;
- activarea sau inhibarea enzimelor microsomale sub aciunea xenobioticelor administrate
concomitent sau anterior, d natere la fenomenul de inducie respectiv inhibiie
enzimatic.
La unele substane chimice prin reaciile din faza I , li se reduce toxicitatea. Astfel,
toxicitatea benzenului pentru mduva hematoformatoare este suprimat prin hidroxilarea
inelului aromatic (fenolul si polifenolii ce se formeaz au o toxicitate redus pentru mduva
hematoformatoare).
Benz(a) pirenul (substana potential cancerigen) este transformat prin hidroxilarea
inelului aromatic 3 hidroxipiren respectiv 6 hidroxipiren care nu sunt cancerigene.
La alte substane, metaboliii rezultai din faza I de metabolizare sunt mai toxici dect
substanele iniiale.
Pb-tetraetilul nu are aciune asupra SNC, dar metabolitul sau Pb-trietil rezultat prin
dezetilare oxidativ, produce encefalopatia toxica. n cazul compuilor amino i nitro aromatici ,
aciunea methemoglobinizant este datorat metaboliilor formai prin oxidarea compuilor
amino sau prin reducerea compuilor nitro, metabolite identici pentru ambele categorii (cel mai
important fiind aminofenolul).
n faza a I I -a de metabolizare, gruprile reactive preexistente sau formate n faza I-a se
combin cu un compus endogen realizndu-se o conjugare sau sintez.Reaciile de conjugare
sunt prezentate n tabelul urmator.
Principala reacie de conjugare este glucuronoconjugarea probabil datorit faptului c
agentul de conjugare, nucleotidul i enzimele implicate sunt prezentate n majoritatea esuturilor
i de asemenea din cauza varietaii grupelor pe care acidul glucuronic le poate transfera.
Sulfoconjugarea are loc de obicei, n paralel cu glucuronoconjugarea. Gruparea sulfat
provine din tioaminoacizi (metionina, cisteina) i numai n mic masur din sulfat mineral.
Acetilarea este conjugarea specific compuilor cu grupri aminice. Radicalul acetil poate
proveni din oxidarea fiziologic a alcoolilor sau acizilor alifatici i este activat de coenzima A si
tiamina, nainte de conjugare.
Glicocoloconjugarea are rol de a bloca gruprile COOH legate la un nucleu aromatic
fie direct fie prin intermediul unei catene laterale.
Glucuronoconjugarea este ntlnit numai n cteva cazuri . metilarea este procesul
biologic normal al gruprilor NH
2
. gruparea metil este dat de bazele xantinice, betaina, colina,
metionina, etc.
n general metabolizarea substanelor exogene are loc n 2 faze aa cum se ntmpl n
cazul benzenului care n prima faz este oxidat la fenoli, iar n a doua faz acetia sunt conjugai
cu acid glucuronic sau un radical sulfat.
Dac compusul exogen posed una din grupele reactive, poate fi conjugat direct far
transformri prealabile prin reacii care caracterizeaz faza I de metabolizare. Astfel fenolul este
direct conjugat cu radical sulfat sau cu acid glucuronic, radicalul cian (din acid cianhidric sau
cianuri) este conjugat direct la tiocianat netoxic.
17

Unii compui chimici pot fi metabolizai n ntregime prin reaciile fazei I de
metabolizare pentru c produi de transformare nu sufer conjugare din cauza propritailor lor
fizico-chimice. Alcoolul etilic este metabolizat prin reacii ale fazei I la CO
2
. acidul acetic care
se formeaz ca intermediari n oxidarea alcoolului, posed grupa COOH care ar putea fi
conjugat, dar aceast reacie nu are loc probabil din cauza rapiditaii cu care acidul acetic se
metabolizeaz la CO
2
prin intermediul acetilcoenzimei A.

REACTI I DE CONJ UGARE
Reactia Compusii initiali Compusii finali Enzima
Glucurono-
conjugarea
Derivati hidroxilici , tiolici ,
carboxilici, aminici
O-glucuronide de tip eter Glucoronil-
transferaza
S-glucuronide de tip
tioeteri

O-glucuronide de tip
esteri

N-glucuronide
Sulfoconjugarea Derivati hidroxilici, tiolici,
aminici
Ester sulfurici,
tiosulfurici, sulfamati
Sulfo-transferaza
Acetilarea Amine aromatice ,
sulfonamide, hydrazine, acid
p-aminobenzoic
Derivati N-acetati N-acetil-transferaza
Glicocol-conjugarea Derivati carboxilici (COOH
fixat direct pe ciclul aromatic
sau prin intermediul unei
catene laterale)
Derivate ai aril-
glicocolului
Glicocol-N-acilaza
Glutamil -conjugarea Unii acizi aril-acetici Derivati ai fenil-acetil-
glutaminici

metilarea Derivati N-heterociclici, amine
aromatice endogene, fenoli,
tioli, As (Se,Te)
Derivati N, O, S-metilati metiltransferaza
Mercaptarea (cistein
sau glutation-
conjugarea)
Hidrocarburi aromatice,
derivati halogenati aromatici
Acizi aril-mercapturici Cistein-(glutation)-
transferaza
Sulfurizarea Acid cianhidric, cianuri, nitrili Sulfocianuri (tiocianati Rodanaza
(tiosulfat:cianuri-
sulf-transferaza)

III.4. Biotransformarea toxicelor profesionale

Eliminarea reprezint ndeprtarea din snge, limf, lichid interstiial, celule, esuturi, a
substanelor toxice i/sau a metaboliilor polari i ionizai.
Calea, viteza, durata i gradul eliminrii depind de factori fizico-chimici i biologici.
Oricum, nocivitatea unei substane toxice este cu att mai mare cu ct eliminarea sa este mai
lenta.
Cile principale de eliminare sunt: renal, digestiv, pulmonar, transcutanat.
Calea renal este principala cale de eliminare a substanelor toxice i hidrosolubile din
organism, eliminndu-se n general, cele cu mas moleculara pna la 400. Excreia renal se
realizeaz prin : filtrare glomerular, reabsorbie tubular i secreie tubular.

18

Viteza eliminrii urinare depinde de:
- debitul urinar care, la rndul sau, este dependent de parametri interni i externi;
- viteza de fixare pe proteinele plasmatice (cu ct substana toxic este legata ntr-un procent
mai mare, cu ct se elimin mai lent;
- pH-ul urinar o parte din substana toxic sau din metabolitul ei filtrate glomerular, se poate
reabsorbi tubular. Compuii cu molecule puin disociat se elimin n funcie de pH-ul urinei
tubulare, astfgel pH-ul alcalin favorizeaz eliminarea substanelor acide n forma ionizant,
iar pH-ul acid favorizeaz eliminarea substanelor bazice. Electroliii tari se elimina rapid,
indiferent de pH-ul urinar, deoarece ei sunt complet disociai.
- activitatea sau inhibarea enzimatic poate modifica ritmul normal al eliminarii urinare;
- vrsta, integritatea funciei renale, afectarea funciei renale poate cauza reducerea cantitii
eliminate i n consecina devine un factor de toxicitate.
Calea digestiv (sucurile digestive i bila) este caracteristica pentru compuii insolubili
sau, puin solubili cu mase moleculare de 400 500.
Calea pulmonar este caracteristic pentru gaze i substane volatile cu presiune mare de
vapori la temperatura corporal, care strbat prin membrane alveolocapilare i, ajungnd la
alveole, sunt evacuate prin expiraie.
Eliminarea respiratorie are loc att prin epiteliul alveolar, dar i prin secreie bronic sau
nazal.
Prin tegumente, fanere, glande sudoripare se elimina metale grele, arsen, halogenuri i
unele substane volatile.

III.5. Determinarea substanelor chimice sau a metaboliilor acestora n fluidele
corpului.

Majoritatea testelor accesibile pentru monitorizarea biologic a expunerii la agenii
chimici se bazeaz pe determinarea substanei sau a metaboliilor si, n mediile biologice. n
mod obinuit, materialele biologice folosite pentru analiz sunt: urina, sngele i aerul alveolar.
Analize n alte materiale biologice cum ar fi : lapte, grsime, fir de pr, fanere, placent
se fac n general n scop de cercetare stiinific, nu de monitorizare.
Urina este folosit n general pentru substanele anorganice (metale) sau organice care sunt
biotransformate rapid la compui mai hidrosolubili.
Cea mai simpla metod de exprimare a eliminarii unor compui n urin este masa per
unitatea de volum. Totui, concentraia urinei poate fluctua datorit multor factori externi i
interni care nu sunt datorai expunerii. De aceea este necesar minimalizarea influenei acestor
factori care pot confunda interpretarea expunerii.
Cea mai uzual este raportarea la creatinin. Raportarea la creatinin este atribuita pentru
prima data lui Hill in 1953, care a utilizat-o n analiza anilinei n urin.
Creatinina poate fi utilizat cu succes la corectarea concentraiei urinei atunci cnd
substana este eliminat n principal prin filtrare renala ,nu se poate utiliza nsa la substanele
care implic eliminarea pasiv i absorbia, procese care sunt dependente de concentraie.
Muncitorilor crora li se recolteaz urina trebuie bine hidratai cnd efectueaz aceast
operaie. Dac debitul urinar scade sub 1ml/min, colectarea urinei trebuie repetat dup ce
muncitorul a fost mai bine hidratat.
La recoltarea probelor de urin, cele foarte diluate sau foarte concentrate nu pot fi
utilizate i este necesar o noua recoltare de probe. Mecanismul eliminrii unor determinai
poate fi alterat dac proba de urin este foarte concentrat (greutate specifica > 1.03 si creatinina
> 3 g/l ) sau foarte diluat ( greutate specific < 1.01 i creatinina < 0.5 g/l).
19

Metoda cea mai folosit pentru determinarea creatininei este reactia Jaffe modificat
(reacia cu acidul picric n mediu alcalin).
Sngele este folosit pentru unele din substanele anorganice i pentru substanele organice care
sufera biotransformare nceata.
Aerul alveolar este folosit pentru determinarea substanelor volatile.

III.6 Criterii de selectare a testelor biologice

Testele de msurare a substanei sau a metaboliilor ei n material biologic pot fi clasificate
n dou categorii:
a. teste selective
b. teste neselective
a. Testele selective include majoritatea testelor folosite n mod curent n medicina
ocupational. Substana nemodificat este masurat in mediul biologic n urmatoarele situaii:
- cnd substana nu sufer procesul de biotransformare (cazul majoritaii substanelor
anorganice)
- cnd substana este puin metabolizat (de exemplu metilcloroformul sau
tetracloretilena);
- cnd expunerea este prea mica pentru ca o cantitate semnificativ de metabolit s fie
produs (de exemplu expunerea uoar la benzene);
- cnd se cere un grad mai mare de specificitate. Determinarea substanelor chimice
modificate poate avea o mai mare specificitate dect aceea a unui metabolit care
poate fi comun mai multor substane.
Majoritatea substanelor chimice organice sunt metabolizate rapid la compui mai solubili
i care sunt uor extractibili prin bil sau urin. Msurarea concentraiilor metaboliilor urinari
specifici este de obicei mai uor acceptat de ctre muncitori comparativ cu recoltarea de snge.
b. Testele neselective sunt utilizate ca indicatori specifici de expunere la un grup de
substane. Astfel de teste neselective sunt prezentate n continuare:
- determinarea metabolitilor diazopozitivi n urin test propus pentru monitorizarea
expunerii la amine aromatice;
- determinarea tioeterilor urinari excreia urinar de tioeteri este crescut n urma
expunerii la substane electrofile i de aceea a fost propus pentru monitorizarea
expunerii profesionale la substane cancerigene sau mutagene. Determinarea
tioeterilor poate fi aplicat cu success n industria cauciucului i a anvelopelor radiale;
la obinerea asfaltului, la gazele de eapament de la motoare Diesel, n expunerea la
compui alchilclorurati, etc.;
- determinarea activitaii mutagene a urinii - o activitate mutagen ridicat a fost
observat n urina muncitorilor din industria caucicucului, cocserii, muncitorilor
expui la epiclorhidrina, anestezice i medicamente citostatice. Ca i n cazul
tioterilor urinari i n cazul activitaii mutagene a urinii fumatul este un factor
important n cresterea acestei activitai.
Din cauza lipsei de specificitate i existena unei variabiliti individuale largi, testele
neselective nu sunt deosebit de relevante pentru expunere individual, totui, cnd se folosete
un grup de control adecvat, ele pot fi utile pentru identificarea grupelor de risc.
n practic numai cteva teste biologice pot fi folosite pentru monitorizarea expunerii la
chimicale industriale. nainte ca programul de monitorizare biologic s fie implementat,
parametrul (parametrii) cei mai adecvai trebuie selectai prin luarea n consideraie a
urmatoarelor condiii:
- specificitatea parametrului;
20

- sensibilitatea parametrului trebuie s fie o corelaie puternic ntre parametru i
expunerea extern;
- variabilitatea analitic i biologic a testului;
- aplicabilitatea estului incluznd costul i disconfortul pentru subieci.
Pe baza acestor consideraii, existenta unei valori limit biologic este un element
important care trebuie luat n consideraie cnd se selecteaza testul de monitorizare biologica a
expuilor profesional.

III.7. Interpretarea rezultatelor
Rezultatele testelor de monitorizare biologic pot fi interpretate n mai multe moduri:
1. interpretarea pe baza individual; acest mod de interpretare este posibil numai dac
variabilitatea inter individual a parametrilor este mica i specificitatea lui este mare;
2. interpretarea pe baza de grup - n situaia n care toate valorile observate sunt sub
valoarea limitei biologice tolerabile, se poate considera c exista condiii de munc
satisfacatoare la locul de munc investigat. Dac, toate sau majoritatea rezultatelor
sunt peste valoarea limitei, condiiile de expunere general trebuie sa fie corectate.
3. Cea de a treia situaie este atunci cnd majoritatea personalului expus poate s aib
valori sub nivelul de limit biologic, dar civa pot avea valori anormal de mari. n aceast
situaie pot fi doua interpretri:
a. fie subiecii cu valori mari desfaoar activiti care-i expun la nivele superioare de
nox, n care caz se pot identifica categoriile de meserii pentru care condiiile de
munc trebuie mbuntite;
b. fie muncitorii desfoar acelai tip de activiti cu cei care au valori mai mici i n
acest caz doza lor interna superioar poate rezulta din deprinderi igienice diferite.
La interpretarea rezultatelor trebuie inut cont c metabolismul xenobioticelor poate fi
influenat de factori endogeni i exogeni. Factorii endogeni pot fi genetici sau fiziologici cum ar
fi vrsta, sexul i starea de sntate . de exemplu, insuficiena hepatic poate fi asociat cu o
biotransformare sczut a xenobioticelor, n timp ce afeciunile renale pot tulbura eliminarea
acestor substane n urin.
Dintre factorii exogeni, un rol important n biotransformarea substanelor chimice, o au
alcoolul i fumatul.
Consumul de alcool a crescut n proporii considerabile n numeroase ri, ceea ce a dus
la multiplicarea problemelor legate de acesta ca de exemplu: mortalitatea prin ciroz hepatic
dependena de alcool i o multitudine de alte efecte nefaste cum ar fi: accidentele, criminalitatea,
etc.
n ultimii 10 ani acest consum a rmas relativ stabil n cteva ri i a diminuat n altele.
Cu toate aceste variaiuni n tendina naional, abuzul de alcool ridica probleme enorme
sanitare, sociale i juridice n numeroase ri din Europa i din lumea ntreag.
Alcoolul este o substana psihotrop considerat ca unul dintre cele mai vechi droguri ale
umanitii.Cu toate c este interzis consumarea buturilor alcoolice la locul de munc, un
consum rezonabil de bere sau buturi cu un coninut sczut de alcool este totui tolerat.
n mod frecvent muncitorii sunt expui simultan la diferii ageni chimici, biologici i
psiho-sociali, la care se adaug n plus terapia medicamentoas, tabagismul sau consumul de
alcool, care pot influena sensibilitatea individual la expuneri profesionale.
Alcoolul etilic este un agent narcotic, neurotoxic i hepatic care poate influena
toxicitatea unui numar mare de substane chimice.Combinarea diferiilor factori exogeni, n
mediul de munc sau n afara lui, pot avea un efect diferit de cel provocat de fiecare dintre aceti
factori luati izolat.
21

n condiiile expunerii muncitorilor la diferite noxe chimice, interaciunea acestora cu
alcoolul consumat depinde de mai muli factori cum ar fi:
- cantitatea de alcool consumat n relaie cu nivelul concentraiilor noxelor din aerul zonelor
de munc;
- perioada de timp a consmului de alcool n raport cu perioada expunerii profesionale;
- alte elemente extraprofesionale (consum alimentar, fumat, starea de sntate general precum
i cea a unor organe int comune, sistemul nervos central, ficat, rinichi, etc.).
Alcoolul etilic (etanolul) este absorbit n tractul gastrointestinal, prin difuzie simpl.
Absorbia alcoolului etilic este mai uoar la bere i vin dect la buturile distilate.
Difuzia acestui alcool n toate celulele organismului este uoar, datorit circulaiei
sanguine. Astfel etanolul din snge ajunge uor i rapid n esutul cerebral, ns distribuie mai
greu n muchii striai.
Metabolizarea hepatic a etanolului parcurge trei etape:
1. etanolul este oxidat n prezenta alcooldehidrogenazei sau catalazei la acetaldehida;
2. acetaldehida este convertit la acetate n mitocondrii;
3. acetatul produs n ficat este transferat n snge i oxidat n esuturile periferice la
dioxid de carbon, acizi grai i ap.
Consumul pe termen lung de etanol conduce la proliferarea reticulului endoplasmatic cu
modificarea nivelului citocromului P450 de ctre etanol este asociat cu modificarea
metabolismului (creterea) i n unele cazuri cu toxicitatea unor compui cum ar fi tetraclorura de
carbon, aniline, etc.
n contrast cu aceasta etanolul inhib metabolismul unor xenobiotice n vitro (stiren,
benzen, toluen, benz(a)piren, etc.). Exist doua posibiliti de explicare a acestui fenomen:
competiia direct a citocromului P450 sau descreterea cofactorului n sistemul monooxigenaza.
Agenia International pentru cercetarea cancerului (IARC) dedic n 1988 o
monografie a consumului de alcool. Se menioneaz astfel c pretratarea la animalul de laborator
cu alcool etilic modific metabolismul hepatic al unor ageni chimici ca de exemplu hidrocarburi,
alcooli, cetone, amine aromatice, etc.
Unele studii au evideniat c la persoanele expuse la tricloretilena, consumul anterior de
alcool etilic a dus la inhibarea cu 40 % a metabolizrii tricloretilenei n acid tricloracetic i
tricloretanol, iar concentraia tricloretilenei n snge a fost de aproximativ 2,5 ori mai mare dect
n cazul n care nu s-a ingerat alcool. Aceast interaciune a alcoolului n metabolizarea
tricloretilenei poate explica intolerana la alcool printre muncitorii expui profesional.
Consumul de alcool induce o forma de citocrom P450 care este luat din enzimele
microsomale. Aceast enzim P450, este caracterizat prin marea sa afinitate pentru substanele
cu mas molecular mica, inclusiv solveni organici. Deci, consumul de alcool este unul dintre
cei mai importani factori extraprofesionali care afecteaz toxicitatea solvenilor organici.
Consumul de alcool etilic stimuleaz i absorbia unor metale grele (plumb, cadmiu,
mangan) precum i depozitarea acestora n organele bogate n grsimi i deci ntrzie eliminarea
acestora din organism i crete riscul de intoxicaie profesional.
n literatura de specialitate se arat c, ntre expunerea profesional la ageni chimici i
consumul de alcool exist trei diferene majore.
1. Dupa ngerarea unei cantiti de aproximativ 12 g alcool etilic, concentraia acestuia
n snge este de cca. 1000 de ori mai mare dect concentraia substanelor chimice
inhalate sau absorbite dermal n timpul expunerii la noxe n limite admisibile.
2. Etanolul este ingerat, iar chimicalele industriale sunt inhalate sau ptrund prin piele.
n consecin, primul efect asupra ficatului apare la etanol, deci biodisponibilitatea
etanolului pentru metabolismul hepatic este mai mare dect cea a substanelor
chimice.
22

3. Metabolismul etanolului este mediat pe trei ci, dou dintre ele fiind catalizate de
enzime citozolice (alcool dehidrogenaza i catalaza) i una prin enzime microzomale.
Aceste enzime ns pot fi implicate i n metabolismul altor substane chimice.
n concluzie, efectele combinate ale consumului de alcool etilic i expunerea la noxe
chimice n mediul de munca, reprezint o problem de o importan deosebit pentru factorii de
decizie din unitaile economice.
Fumatul poate influena metabolizarea unor substane exogene (de exemplu
carboxihemoglobina ce se formeaz prin combinarea oxidului de carbon cu hemoglobina este
mult influenat de CO din fumul de igar) eliminarea de tioeteri urinari este de asemenea
crescut n cazul persoanelor fumatoare.
Ali factori exogeni ce pot influena (modifica) metabolismul xenobioticelor sunt dieta i
medicamentaia.

III.8 Aspecte analitice i etice

n orice program de monitorizare, aspectul analitic este destul de important. Parametrul
selectiv pentru a fi determinat trebuie s fie suficient de stabil pentru a permite transportul i
posibilitatea stocrii materialului biologic utilizat.
n final, trebuie luat n consideraie faptul c n monitorizarea biologic, oameni sunt
folosii ca un integrator de expunere. Aspectele etice trebuie s primeasc o mare atenie. n
particular, procedeul de investigare trebuie s fie fr riscuri pentru sntate. O informare corect
trebuie fcut subiecilor nainte i dup monitorizare i rezultatele individuale trebuie s ramn
confideniale.

IV. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR AGENI
CHIMICI N AERUL ZONELOR DE MUNC

IV.1. Determinarea metanolului prin GC

1. Domeniul de aplicare:
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea vaporilor de metanol prezeni n atmosfera
locurilor de munc. Metoda se aplica att n cazul prelevrii individuale a probelor de aer ct i
n cazul determinrilor la punct fix.
2. Referine normative:
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n :
o NIOSH Manual ofAnalytical Methods, Fourth Edition, 8/15/94.
o SR EN 1232: 2002 Atmosfera locului de munc Pompe pentru prelevarea individual
a agenilor chimici. Cerine i metode de ncercare.
o SR EN 1540: 2012 Atmosfera locului de munc Terminologie.
3. Principiu: Metanolul se determin prin gazcromatografie.
Reactivi i materiale
o Ap distilat
o Metanol
o Azot purificat
o Hidrogen purificat
o Aer fitrat
23

o Fiole de sticla 2 mL,
o Seringi 10 L capabile s citeasc la 0,1 L
o Sticlarie volumetrica 10 mL.
4. Aparatura
o Echipament de prelevare
Pomp personal de aspirare, 0,02 la 0,2 L/min, cu un tub flexibil de conectare.
Tub absorbant pentru recoltarea probelor, tub de sticla, 7 cm lungime, 4 mm diametrul interior
coninnd 2 seciuni de 20/40 mesh gel siliciu separate de o poriune de 2 mm de spum
uretanic ( n fa 100 mg, spate 50 mg). Un dop de vat de sticla sigilat precede partea din faa a
seciunii i un dop de 4 mm spum uretanic urmeaz n spatele seciunii. (Nota: la umiditate
relativa ridicat sau o concentraie ridicat de metanol se utilizeaz un tub mai larg: 15 cm
lungime, 8 mm diametrul interior, cu trei seciuni de silicagel (700 mg, 150 mg).
o Aparatura analitic
Gaz cromatograf echipat cu detector cu ionizare n flacara (FID), integrator i coloana de sticl,
2m x 2 mm ID 60/80 mesh Tenax 6C sau echivalent.Gaz purtator poate fi azot sau heliu 30
mL/min.
5. Prelevare
o Mod de prelevare
Se calibreaz fiecare pomp personal cu un dispozitiv de prelevare (tub de sticla) n linie. Se
rup capetele tubului de absorbie imediat naintea utilizrii. Se ataeaz tubul de absorbie la
pompa personal cu un tub flexibil. Se recolteaz cu un debir cuprins ntre 0,02 si 0,2 L/min,
volumul minim recoltat fiind de 1 L iar cel maxim de 5L. Se pune capac cu dop de plastic (nu
cauciuc) i se mpacheteaz n sigurana pentru transport.
6. Mod de lucru
o Prepararea probei
Se plaseaz cele doua seciuni ale substanei absorbante din tubul de absorbie din fa i din
spate n fiole separate. Se arunc vata de sticl i dopul de spum. Se adauga 1 mL apa distilat
n fiecare fiola. Se acoper fiecare recipient. Este permis s stea 4h cu agitare ocazional.
o Calibrare i controlul calitii
Se calibreaz zilnic cu cel puin 6 standarde de lucru la o rat de 0,01 la 6 mg metanol/proba. Se
adaug cantiti cunoscute de metanol n apa distilat n recipiente volumertice de 10 mL i se
dilueaz pn la semn. Se analizeaz mpreun cu probele i blancuri. Se fac 2 pn la 10
blancuri per set. Se pregtete graficul de calibrare. Se determin eficiena desorbiei (DE) cel
puin odat pentru fiecare lot de silicagel utilizat pentru recoltare n etapa de calibrare. Se prepar
trei tuburi la fiecare din cele 5 nivele plus 3 medii ale blancului. Se mut i se descarc seciunea
din spate a dispozitivului de luare a probelor pentru media blancurilor. Se mut i se descarc
seciunea din spate a dispozitivului de luare a probelor pentru media blancurilor. Se injecteaz
cantiti cunoscute de metanol direct n seciunea din fa a absorbantului cu o sering
microlitic. Se pune capac la tuburi. Se permite s stea peste noapte. Se desorb i se analizeaz
mpreun cu standardele de lucru. Se pregtete un grafic al DE n funcie de metanolul
recuperat. Se analizeaz 3 probe pentru controlul fondului i trei cu analit pentru a fi siguri c
graficul calibrrii i graficul DE sunt n parametrii.
o Msurare
Se seteaz gazcromatograful n acord cu recomandrile productorului. Se injecteaz un alicot al
probei manual sau automat. (Nota: daca aria pic-ului este deasupra domeniului liniar al
standardului de lucru, se dilueaz cu apa distilat, se reanalizeaz i se folosete un factor de
diluie potrivit pentru calcul.) Se masoar aria pic-ului.
o Mod de calcul
Se determin masa, mg (corectata pentru DE) a metanolului n faa probei (W
f
) i n spatele
(W
b
) seciunii absorbantului i media blancurilor (B
f
) din faa i spatele (B
b
) seciunii
24

absorbantului. (Nota: dac W
b
W
f
/10 indic un punct de ruptur i sunt posibile pierderi de
prob.)
7. Exprimarea rezultatelor
o Calcul
Se calculeaz concentraia, C, a metanolului n volumul de aer recoltat , V (L):
C=[(W
f
+ W
b
- B
f
- B
b
) x 10
3
] / V , mg/m
3

o Performante
Precizia metodei este de 0,032
o Selectivitate
Nu au fost identificate interferene. Uneori pot fi necesare identificri prin spectrometrie de
mas.
o Intervalul de lucru: este de 25 pn la 900 mg/m
3
(19 la 690 ppm) pentru 5L aer / proba.
Pentru concentraii mai mari de metanol sau pentru umiditate relativ ridicat este cerut un tub
de silicagel mai larg 700 mg seciunea frontal.
8. Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarele indicaii:
- numele i adresa unitii unde s-au efectuat determinrile;
- scopul efecturii determinrilor;
- locul de munc ( descriere, condiii);
- tipul de prelevare (individual sau la punct fix);
- metoda de analiz utilizat;
- tipul de pomp utilizat pentru prelevare;
- caracteristicile metodei de prelevare ( debit, volum i timp);
- momentul prelevrii probelor ( pe durata unui schimb de lucru);
- rezultatele determinrilor efectuate ( mg analit/m
3
aer);
- numele analistului;
- data recoltrii probelor;
- data prelucrrii probelor.
9. Bibliografie
- Documentation of the NIOSH Validation Test, U.S. Department of Health, Education,
and Wefare, publ. (NIOSH) 77-185 (1977).
- NIOSH Manual of Analytical Methods, V.2, S59, U.S. Department of Health, Education,
and Welfare, Publ. (NIOSH) 77-157-B (1983).

IV.2. Determinarea aerosolilor alcalini

1. Domeniul de aplicare:
Aceast metod este folosit la determinarea aerosolilor alcalini din aerul zonelor de munc. n
aceast categorie se includ NaOH, KOH, NH
4
OH, CaO, Ca(OH )
2 ,
Na
2
CO
3,
K
2
CO
3.
Aerosolii
alcalini existeni n aer sunt exprimai n NaOH.
2. Referine normative

La elaborarea acestei metode s-a inut cont de prevederile cuprinse n:
o SRISO 5725-1-1997, Exactitatea (justeea i fidelitatea) metodelor de msurare i a
rezultatelor msurrilor.
o Culegere de metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii, 1991.
o
25

3. Principiul metodei:
Soluia de acid sulfuric reacioneaz cu aerosolii din aer modificnd pH-ul. Observarea
schimbrii pH-ului se face cu verde de bromcrezol cu domeniul de viraj la pH=3,8-5,2. La
reacia cu aerosolii alcalini, soluia de acid sulfuric ce conine verde de brom crezol, i schimb
culoarea de la verde la albastru. Prin msurarea fotometric a extinciei soluiei nainte i dup
recoltare se poate determina cantitatea de aerosoli din aer.
4. Reactivi i materiale:
o Verde de bromcrezol, soluie 0,1% n alcool etilic 98%.
o Acid sulfuric 0,1 N.
o Soluie absorbant.ntr-un balon cotat de 1 litru se introduce ap distilat lipsit de CO
2
proaspat fiarta si racita, apoi 12 ml verde de bromcrezol.Se aduce la semn, apoi se adauga
acid sulfuric cu pictura pn ce soluia devine galben-verde (pH=4).
Absorbia optic a acestei soluii la lungimea de und =617 nm trebuie sa fie cuprins ntre
0,13-0,15.
o Soluie etalon: Hidroxid de sodiu N/200 proaspt preparat ap distilat fiart i rcit.
o Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pipete gradate, pipete automate reglabile)
i hrtie indicatoare de pH.
5. Aparatura
Pompa de recoltare a probelor din aer (debit de recoltare = 1-5 L/min.Absorbitoare din sticla
(pentru recoltarea vaporilor de aerosoli alcalini se folosesc 10 ml.soluie absorbant ) destinate
recoltrii aerosolilor alcalini se spal nainte de ntrebuinare cu soluie absorbant pn cnd
aceasta nu-i mai modific culoarea (n mod asemntor se procedeaz i cu dopurile de cauciuc
cu care se etaneizeaz absorbitoarele).Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la
pompa de recoltare (se folosesc doar cordoane din p.v.c.)
o Aparatura analitica
- Balana analitic
- Spectrofotometru UV/VIS
- Cuvete de sticl
6. Prelevare
Pompa de recoltare se calibreaz naintea efecturii unui set de determinri.Aerul de cercetat se
aspir prin absorbitor, care conine 10 ml. soluie absorbant.Debitul de recoltare : 1L/min.
Volumul minim de aer se apreciaz n timpul recoltrii dup modificarea culorii din verde n
albastru.Volumul maxim de aer este de 20 L.Dup recoltare, soluia absorbant se transvazeaz
n eprubeta cu dop splndu-se coninutul absorbitorului cu nc 1 ml. soluie absorbant.
Eprubetele bine nchise se vor transporta la laborator pentru analiz.
o Pregtirea echipamentului de prelevare
Se monteaz absorbitorul la pompa de recoltare, prin intermediul cordonului flexibil.Se fixeaz
debitul i se pornete pompa; se verific dac are loc barbotarea soluiei absorbante n absorbitor.
Se las pompa s funcioneze 1-3 min., pn la stabilizarea debitului. Se schimb absorbitorul i
se efectueaz recoltarea propriu-zis a probelor.
o Prelevarea propriu-zisa
n cazul prelevrii individuale, se va ataa dispozitivul de prelevare la nivelul respirabil al
muncitorului.n cazul prelevrii la punct fix, se poziioneaz absorbitorul la locul de munc unde
trebuie efectuat determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare.
o Transport
Se recomand ca eprubetele cu probe s fie transportate n poziie vertical, etichetate i ferite de
temperaturi extreme.Probele se vor lucra n aceeai zi.

26

7. Modul de lucru
Se msoar extincia la 617 nm n cuva de 1 cm. n compensaie cu soluia absorbant.
Se aspir din ncperea n care se citesc extinciile, aceeai cantitate de aer, aceasta constituind
proba martor.Valoarea extinciei probei se raporteaz la curba etalon pentru a obine cantitatea
C n g NaOH.
Curba de etalonare se face ntre 4-16 g prin puncte din 4 n 4 g. n 5 cilindrii gradai cu
dop rodat de 25 ml. sau n eprubete gradate cu dop rodat, care se cltesc cu soluie absorbant
nainte de folosire se introduc urmtoarele cantitai 0,02; 0,04; 0,06; 0,08 ml.soluie etalon. Se
completeaz la 10 ml. cu soluie absorbant i se citete absorbia la 617 nm n cuva de 1cm, n
compensaie cu soluia absorbant.
o Calcul
Rezultatele se exprim n mg NaOH/m
3
aer i se calculeaz dup formula :

C=cantitatea de NaOH n g din prob
V=volumul de aer recoltat (litri )
o Limita de detecie i intervalul de lucru
Limita de detecie analitic este de 0,99g/prob.
Intervalul de lucru : 0-20 g
9. Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarele:
- locul de munc (descriere, condiii );
- tipul de prelevare (individual, la punct fix );
- caracteristicile metodei de prelevare (debit, volum, timp );
- momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru )
- rezultatele determinrilor efectuate (mg NaOH/ m
3
aer) ;

Verificat n Laboratorul Toxicologie i Medicina Muncii CRSP BUCURETI

IV.3. Determinarea acidului clorhidric

1. Domeniul de aplicare
Acidul clorhidric se poate ntlni n aer sub form de gaz sau aerosoli.Aceast metod se
utilizeaz la determinarea acidului clorhidric i a clorurilor din aerul zonelor de munc.
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n:
o SRISO 5725-1-1997, Exactitatea ( justeea i fidelitatea) metodelor de msurare i a
rezultatelor msurrilor;
o Caiet metodologic Metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii, 1987.
mg NaOH/m
3
aer = C/V

27

3. Principiul metodei:
Ionul clor (Cl
-
) deplaseaz ionul SCN
-
din sulfocianura de mercur formnd complexul slab
disociat ( HgCl )
2-
. Sulfocianul eliberat reacioneaz cu fierul trivalent formnd sulfocianura
feric de culoare roie, colorimetrabil. Reacia este interferat de fluoruri i fosfai. n cazul
prezenei acestora n aer, naintea absorbitorului se monteaz un filtru pentru reinere.
4. Reactivi i materiale
o Hidroxid de sodiu soluie 0,01N;
o Sulfocianura mercuric, soluie 0,3% n alcool metilic;
o Alaun feriamoniacal - NH
4
Fe(SO4 )
2
12 H
2
O - soluie 6% n acid azotic 5N.
o Soluie etalon. Se dizolv ntr-un balon cotat de 50 ml. 0,2046 g KCl sau 0,1603 g NaCl
n ap distilat. 1ml din aceasta corespunde la 2 mg. HCl. Pentru lucru se iau 2,5 ml. din aceast
soluie i se dilueaz la 100 ml. cu ap distilat (1ml. solutie = 50 g HCl ).
o Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pahare Berzelius, pipete gradate, sticle
ceas, pahare Erlenmeyer, pipete automate ).
5. Aparatura
- Pompa de recoltare aprobelor de aer cu debit de recoltare de la 1-5L/min.
- Absorbitoare din sticl
- Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la pompa de recoltare
- Balana analitic
- Cuvete din sticl
6. Prelevare
o Mod de prelevare
Pompa de recoltare se calibreaz naintea efecturii unui set de determinri.Se aspir aerul de
analizat cu un debit de 1L/min. printr-un absorbitor ce conine 10 ml. soluie absorbant,
volumul minim de aer necesar este de 1 litru. Dup recoltare, soluia absorbant se transvazeaz
n eprubeta cu dop. Eprubetele bine nchise se vor transporta la laborator pentru analiz.
o Pregatirea echipamentului de prelevare
Se las pompa s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului. Se schimb absorbitorul
i se efectueaz recoltarea propriu-zis a probelor.
o Prelevarea propriu-zisa
trebuie efectuat determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare, pentru
fiecare prob. Se verific periodic stabilitatea debitului.Pe lng absorbitorul destinat recoltrii
de probe se vor prevedea nc dou absorbitoare cu soluie absorbant care se vor transporta n
teren, fr a se aspira aer prin ele i care vor constitui martorul de referin.
o Transport
Se recomand ca eprubetele cu probe s fie transportate n poziie vertical, etichetate i ferite
de temperaturi extreme.Probele se vor lucra n aceeai zi.
7. Modul de lucru
Coninutul absorbitorului se transvazeaz cantitativ intr-o eprubet gradat de 20 ml. i se aduce
la semn la 10 ml. cu soluie absorbant. Se adaug 2,5 ml. soluie de sulfocianur mercuric,
28

2,5 ml soluie alaun feriamoniacal, agitnd eprubeta dup adugarea fiecrui reactiv.Se
determin absorbia soluiei dupa 10min. la lungimea de und =470nm. i o grosime de strat de
1 cm. prin comparare cu un martor.Calculul concentraiei de HCl se face utiliznd curba de
etalonare.
Curba de etalonare se ntocmete ntre 0-50 g. Lund n lucru urmtoarele cantiti din soluia
etalon de lucru 0,2 ; 0,4 ; 0,6 ; 0,8 ; 1ml. Se completeaz volumul la 10 ml. cu NaOH soluie
0,01N , dup care se procedeaz conform tehnicii indicate mai sus.
o Calcul
Concentraia de HCl n aer, C(mgHCl/m
3
aer) se calculeaz astfel:

mgHCl/m
3
= C/V

unde,
C= cantitatea de HCl din proba exprimat n g
V= volumul de aer recoltat exprimat n litri
o Sensibilitatea metodei este de 1g/ml.
o Selectivitate
o Reacia este interferata de fluoruri i fosfati.
Limita de detecie : 2.67g/proba
Intervalul de lucru: 0-100 g HCl
9. Raport de analiz
- momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru );
3
aer ;
- data prelucrrii probelor


IV.4. Determinarea acidului sulfuric i a sulfailor solubili

Aceast metod se refer la determinarea acidului sulfuric i a sulfailor solubili din aerul
zonelor de munc.Acidul sulfuric i sulfaii solubili se pot ntlni n aer sub form de aerosoli.
29

o SRISO 5725-1-1997, Exactitatea ( justeea i fidelitatea ) metodelor de msurare i a
rezultatelor msurrilor;
o Caiet metodologic- Metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii, 1987.
3. Principiul metodei
Ionul sulfat formeaz cu azotatul de plumb un precipitat fin de PbSO
4
nefelometrabil.
o Hidroxid de sodiu, soluie 0,01N sau ap distilat
o Acid azotic soluie 1N
o Alcool etilic 96%
o Soluie etalon stoc : se cntresc la balana analitic 1,4800 g sulfat de sodium anhidru
(sau 1,815 g sulfat de potasiu anhidru ) i se dizolv n ap completnd cu ap distilat pn la
1000ml. 1 ml. soluie conine 1mg. ioni sulfat i corespunde la 1,021 mg. acid sulfuric.
Soluia etalon de lucru : 10ml. din soluia etalon stoc se dilueaz la 100ml. cu ap distilat. 1ml.
din aceast soluie conine 100g ioni sulfat i corespunde la 102,1g acid sulfuric.
o Azotat de plumb, soluie 10%.
o Sticlrie de laborator ( eprubete, baloane cotate, pahare Berzelius, pipete gradate, sticle
ceas, pahare Erlenmeyer, pipete automate ).
5. Aparatura
- Pompa de recoltare a probelor de aer ( D=1-5L/min.);
- Absorbitoare din sticla ( pentru recoltarea aerosolilor de H
2
SO
4
se folosesc 10 ml. soluie
NaOH 0,01N
- Cordoane flexibile pentru conectarea absorbitorului la pompa de recoltare.
- Balana analitic
- Cuvete de sticl
6. Prelevare
o Mod de prelevare
Pompa de recoltare se calibreaz naintea efecturii unui set de determinri. Probele de aer se vor
preleva cu un debit de 2L/min. printr-un absorbitor ce conine 10 ml. soluie NaOH 0,01N .
Volumul de aer necesar recoltrii pentru o prob este de minim 40 litri.Dup recoltare, soluia
absorbant se transvazeaz n eprubeta cu dop, splndu-se coninutul absorbitorilui cu nca 1ml.
soluie absorbant.Eprubetele bine nchise se vor transporta la laborator pentru analiz.
Se las pompa s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului. Se schimb absorbitorul
i se efectueaz recoltarea propriu-zis a probelor.
o Prelevarea propriu-zis
trebuie efectuat determinarea. Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare, pentru
fiecare prob. Se verific periodic stabilitatea debitului.
Pe lng absorbitoarele destinate recoltrii de probe se vor prevedea nc dou absorbitoare cu
NaOH care se vor transporta n teren fr a se aspira aer prin ele i care vor constitui martorul de
referin.
30

o Transport
Se recomand ca eprubetele cu probe s fie transportate n poziie vertical, etichetate i ferite de
temperaturi extreme.Probele se vor lucra n aceeai zi.
7. Modul de lucru
Din absorbitor se iau 5 ml. soluie (1/2 din proba ) ntr-o eprubet. Se adaug apoi cate 0,1 ml.
HNO
3
1N , cte 0,1ml. azotat de plumb 10% i dup ce se agit bine coninutul eprubetei, cte
1ml.alcool etilic 96% . Eprubetele se agit din nou.n mod asemntor se vor prelucra i probele
martor.
Dup 10min. probele pot fi citite la lungimea de unda =420nm, n cuva de 1cm., sau se compar
turbiditatea probelor cu scara de standarde pe un fond negru.
Atentie: nainte de citire fiecare prob se va amesteca prin rsturnare de 3 ori.
Curba de standarde se face ntre 20-100g.H
2
SO
4
prin puncte din 20 n 20g , n condiiile
descrise mai sus.Se obine astfel cantitatea C n g SO
4
2-
n proba dozat.
o Calcul
Exprimarea rezultatelor se face n mg/m
3
aer.

mg SO
4
2-
/m
3
aer=C/V

unde,
V= volumul de aer recoltat n litri
C= cantitatea de SO
4
2-
din proba, exprimata n g.
Deoarece pentru dozare s-a luat un alicot de 1/2 din prob, rezultatul se va nmuli cu 2.Pentru
exprimare n mg H
2
SO
4
se nmulete rezultatul cu 1,021, unde:
1,021= factorul de transformare al SO
4
2-
n H
2
SO
4
.
o Selectivitate
Metoda este specific ionului sulfat (SO
4
2-
).Sensibilitatea metodei este de 1g/ml.
o Intervalul de lucru
Intervalul de lucru: 20-200 g H
2
SO
4
/proba.
9. Raport de analiz
- momentul prelevrii probelor (pe durata unui schimb de lucru );
3
aer) ;


31

IV.5. Determinarea hidrocarburilor alifatice Nhexan

1. Domeniul de aplicare.
Metoda se utilizeaz pentru determinarea vaporilor de n-hexan prezeni n atmosfera zonelor de
munc.
o NIOSH Manualul de metode analitice
3. Principiu
N-hexan reinut pe carbune activ este desorbit n sulfura de carbon dup care este determinat
cromatografic.
4. Reactivi.
o eluent: sulfura de carbon de calitate cromatografic (sulfura de carbon este toxic i
foarte inflamabil, de aceea probele i standardele se prepar n locuri bine ventilate)
o reactiv grad analitic
o azot sau heliu, purificat
o hidrogen, prepurificat
o aer filtrat
5. Aparatura analitic i echipament de prelevare
o gaz cromatograf cu detector de ionizare n flacar
o tuburi de recoltare cu carbune activ (dou legate n serie)
o pompa de recoltare personal cu debit ntre 0,01 i 0,2 l/min
o sticlrie de laborator
6. Mod de lucru
- Calibrarea fiecrei pompe personale de recoltare
- Spargerea capetelor tubului de recoltare chiar nainte de recoltare; ataarea tubului
respectiv la pompa personala de recoltare cu un tub flexibil
- Recoltarea probelor cu un debit de la 0,01 la 0,2 l/min
- chiderea tuburilor i ambalarea lor asigurndu-se sigurana transportului
o Pregatirea probelor
- Se plaseaz seciunile de absorbie din primul i cel de-al 2-lea tub de recoltare flacoane
separate
- Se adaug 1,0 ml eluent n fiecare flacon
- Se las minim 30 min. agitnd ocazional
o Calibrarea i controlul calitii
- Se calibreaz zilnic minim 6 standarde de lucru
a. se adaug cantiti cunoscute de reactiv n eluent n baloane de 10 ml i se dilueaz la
semn
b. se analizeaz probele i blancurile (paii 6.10, 6.11, 6.12)
c. se realizeaz graficul de calibrare (aria peak-ului reactivului vs. mg reactiv/ prob)
- Se determin eficiena desorbiei ( DE ) cel puin odat pentru fiecare crbune utilizat la
recoltare ( 6.8 ). Se prepar 3 tuburi la fiecare din cele cinci nivele i 3 blancuri medii
a. se ndeprteaz seciunea de absorbie din al 2-lea tub
b. se injecteaz o cantitate cunoscut de reactiv direct n seciunea de absorbie din primul
tub
c. se nchide tubul. Se las s stea peste noapte.
32

d. desorbie ( 6.5 si 6.7 ) i analizare mpreun cu standardele de lucru ( 6.10, 6.11 i 6.12)
o Citire la gaz cromatograf
Timp de retenie aproximativ:
- 5,1 min. la temperatura coloanei de 40
0
C
- 2,2 min. la temperatura coloanei de 70
0
C
- 3,5 la temperatura programata a coloanei
- Injectarea manuala a alicotului prob
- Msurarea ariei peak
Determinarea masei, n mg (corectat pentru DE), a substanei din seciunile de absorbie din
primul tub (W
f
) i al 2-lea tub (W
b
) i media blancurilor seciunilor de absorbie din primul tub
(B
f
) i al doilea tub (B
b
)
o Calcularea concentraiei C:

C=(W
f
+ W
b
B
f
B
b
) x 10 / V, mg/m

unde,
V este volumul de aer recoltat (l)
8. Performana metodei
Interval de msurare : 3 - 16 mg cu o precizie de 0,014
9. Bibliografie
NIOSH, Manual of Analytical Methods, 4. Ed. , V.3., S 311 ,S343, S 378, S 379, U.S. Dept.
of Health , Education and Welfare, Publ. (NIOSH) 77-157-C (1994)
Code of Federal Regulations; Title 29 (Labor), Parts 1900 to 1910; U.s.Government Printing
Office, Washington, (1989); 29 CFR 1910.1000
NIOSH Recommendation for Occupational Safety and Health, US Department of Health and
Human Services, DHHS (NIOSH) Publication No. 92-100 (1982)
Threshold Limit Values for Chemical Substances and Physical Agents and Biological
Exposure Indices. ACGIH, Cincinnati, OH (2001)

IV.6. Determinarea aeroemulsiilor de uleiuri minerale

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea ceei ( aeroemulsiilor) de ulei mineral
prezent n atmosfera zonelor de munc. Metoda se aplic att n cazul prelevrii individuale a
probei de aer ct i n cazul determinrilor la punct fix.
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n :
o STAS nr.2720/1988 Uleiuri minerale neaditivate pentru tratamente termice;
o STAS nr.11257/1979 - Uleiuri minerale hidraulice.
3. Principii
Ceaa de ulei recoltat pe filtru din fibra de sticla, tip Whatman GF/A urmat de desorbie n
cloroform sau prelevare n 3ml de cloroform, prezint un maxim de absorbie n UV la lungimea
de und de 265nm.

33

o Cloroform p.a.
o Soluie etalon stoc: se prepar o soluie de ulei mineral (trebuie folosit exact uleiul cu
care se lucreaz la locul de munc) cu o concentraie de 1mg/ml, n cloroform.
o Soluie etalon de lucru: pentru lucru se dilueaz cu cloroform soluia stoc de 10 ori,
pentru a obine un etalon cu o concentraie de 100g/ml.
o Eprubete gradate (min 5,oo ml)
5. Aparatura
o Echipament de prelevare:
o Pompa de recoltare a probelor de aer (debit 2-4 litri/min);
o Cordoane flexibile pentru conectarea portfiltrelor la pompa de recoltare.
o Portfiltre speciale pentru recoltarea ceurilor de ulei mineral,coninnd filtre din fibr de
sticl,care se schimb la fiecare prob de aer recoltat.
o Aparatura analitic:
o Balana analitic;
o Spectrofotometru UV(maxim absorbie la 265nm).
o Cuvete de sticl
6. Prelevare
o Mod de prelevare
Pompa de recoltare se calibreaz naintea efecturii unui set de determinri.
Se aspir aerul de cercetat cu un debit de 2litri/min,printr-un filtru de fibr de sticl.Volumul
minim de aer necesar este de 20 litri.
Cnd concentraia de ulei mineral n aerul zonei de munc analizate este mare, atunci se folosesc
absorbitoarele, pentru reinerea ceei .Se aspir aerul de cercetat cu un debit de 0,2 litri/min,
printr-un absorbitor ce conine 3 ml cloroform.Volumul minim de aer necesar pentru o prob este
de 2 litri.
Dup recoltare, filtrele din fibra de sticl, pe care s-a absorbit uleiul mineral,se introduc n
cutiue de plastic, etane, unice pentru fiecare prob.
Se monteaz portfiltrul la pompa de recoltare, prin intermediul cordonului flexibil.Se fixeaz
debitul i se pornete pompa; se verific funcionarea acesteia i meninerea constant a
debitului.
Se las pompa s funcioneze 1-3 minute, pn la stabilizarea debitului.
n cazul prelevrii individuale,se va ataa dispozitivul de prelevare la centura sau buzunarul
persoanei monitorizate.
n caul prelevrii la punct fix, se poziioneaz portfiltrul la locul de munc unde se vor efectua
determinrile.
Se pornete pompa i se noteaz timpul de prelevare, pentru fiecare prob.Se verific periodic
stabilitatea debitului.
n paralel, pe durata recoltrilor, se menin dou probe martor, fr a fi conectate la pompa de
recoltare.
o Transport
Probele se transport etichetate.
7. Mod de lucru
Se spal filtrul din fibra de sticla, cu cloroform, de 2-3 ori i cantitatea de cloroform folosit se
colecteaz ntr-o eprubet gradat ,aducndu-se la 5,oo ml cu cloroform.
De asemenea, se transvazeaz coninutul absorbitorului, ntr-o eprubet gradat i se aduce la
5,ooml, n cazul recoltrii probelor de la locurile de munc, unde exist concentraii mari de ulei
34

mieral. Msurarea extinciei probei se face utiliznd cloroformul ca blanc, la un spectrofotometru
n UV, la lungimea de und de 265 nm.n acelai mod se citesc i probele martor.
Calculul concentraiei se face utiliznd curba de etalonare.
Curba de etalonare se face ntre 100-500g ulei mineral, prin puncte din 100 n 100 g.Att n
cazul soluiilor standard de lucru, ct i pentru blanc, se va ine cont de volumul soluiei
absorbante,respectiv 5,ooml.
Soluiile standard de lucru i blancul se prelucreaz la fel ca i probele.
o Calcul
Valorile extinciilor obinute, pentru probe se raporteaz la curba de etalonare, spre a obine
cantitateaC, n g ulei mineral, din proba dozat.
Concentraia de ulei mineral din proba dozat, se calculeaz,utiliznd formula:

C= c / V

unde,
c = g ulei mineral din proba dozat;
V= volumul de aer recoltat,n litri.
Exprimarea rezultatelor se face n mg/mc aer.
o Performane
Sensibilitatea metodei este de 20g/ml.
9. Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin urmtoarelele indicaii:
- numele i adresa unde s-au efectuat determinrile;
- locul de munc (descriere,condiii);
- tipul de prelevare (individual sau la punct fix);
- caracteristicile metodei de prelevare (debit,volum,timp);
- rezultatele determinrilor efectuate (mg/mc aer).
- data problelor.
10. Bibliografie
1.Detection precoce de laction aigue et on chronique des nephrotoxiques industriele.Cahiers
de medicine du Travail,vol.25,143-153.(1988).
2.Guidelines for the Control of Exposure to Metalworking Fluids,Publication Nr.78-
165,NIOSH(1976).

Adaptat i verificat n Laboratorul Toxicologie i Medicina Muncii CRSP BUCURETI

IV.7. Determinarea unor metale

Prezenta procedur se aplic pentru efectuarea determinrii coninutului total de metale a
particulelor n suspensie fracia inhalabil, din atmosfera locului de munc, prin spectrometrie
de absorbie atomic (cu atomizare n flacr sau n cuptor de grafit). Prelevarea se face prin
aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un substrat adecvat, de ex. un filtru. Metoda nu se
aplic pentru metale prezente ca gaze i vapori (de ex. mercur, arsen). Este aplicabil procedurilor
35

de msurare n care prelevarea i analiza sunt realizate n etape separate. Procedura se aplic
pentru probe prelevate din zona de respiraie a lucrtorului cu pompe de prelevare mobile, fixate
de lucrtor, pentru msurtori periodice, pentru compararea cu valorile limit pe termen lung i
scurt. Prezenta procedur descrie metoda de determinare pentru Cd, Cr, Fe, Mn, Ni i Pb.
Metoda poate fi validat n mod asemntor i pentru alte metale, innd cont de datele specifice
necesare pentru determinri cu spectrometrie de absorbie atomic.
o SR EN ISO/CEI 17025: 2005 Cerine generale pentru competena laboratoarelor de
ncercri i etalonri
o SR EN 481: 2003 Atmosfera locului de munc. Definiiile fraciilor dimensionale
pentru msurarea particulelor n suspensie din aer
o SR EN 482: 2012 Atmosfera locului de munc Cerine generale pentru performana
procedurilor de msurare a agenilor chimici
o SR EN 13890: 2010 Expunerea la locul de munc. Proceduri de msurare a metalelor i
metaloizilor din particule n suspensie. Cerine i metode de ncercare
o SR EN ISO 10882-1: 2012 Sntate i securitate n sudare i procese conexe;
Prelevarea particulelor din aer i a gazelor din zona respiratorie a operatorului; Partea 1:
Prelevarea particulelor din aer
o HG 1218/2006 privind stabilirea cerinelor minime de securitate i sntate n munc
pentru asigurarea proteciei lucrtorilor mpotriva riscurilor legate de prezena agenilor chimici
cu modificrile i completrile ulterioare
3. Termeni i definiii
Pentru termenii i definiiile utilizate n aceast procedur se aplic cele date n SR EN 482:2012
i respectiv SR EN 1540: 2012.
Un volum cunoscut de aer este aspirat cu debit controlat intr-o anumit perioad de timp.
Particulele n suspensie sunt reinute pe un filtru. Filtrul cu particulele depuse pe aceasta se
mineralizeaz cu acizi concentrai. Soluia rezultat se analizeaz prin spectrometrie de absorbie
atomic cu atomizare n cuptor de grafit sau n flacr.
5. Reactivi si materiale
Reactivi:
o Ap deionizat conform cu SR ISO 3696:1995/A99:2002
o HNO
3
69,5% pentru analize de spectrometrie de absorbie atomic
o HCl 37% pentru analize de spectrometrie de absorbie atomic
o Soluii etalon pentru metalele de interes cu un coninut de metal de 1000 mg/L
o Soluie MRC pentru controlul de calitate ce conine metalele de interes n concentraii
certificate.
o Acetilen dizolvat n aceton de puritate 2.6
o Argon de puritate 4.8
Materiale de laborator
o Pipete digitale de 10 mL
o Pipete gradate din sticl borosilicat clasa A de 1 mL, gradaia de 0,01 mL
o Baloane cotate din plastic (PP, PMP, PFA sau PTFE) de 25, 50, 100 i 1000 mL, clasa A
o Cilindru gradat de 500 mL
o Eprubete gradate cu dop (lif NS 19/26), de 25 mL, gradaia de 0,2 mL
36

o Tuburi refrigerente de lungime de aprox.40 cm cu lif NS 19/26 pentru eprubetele gradate
descrise la punctul 5.
o Seringi de unic folosin de 10 mL.
o Filtre din nylon pentru seringi de unic folosin de prozitate 0,45 microni i diametru
13 mm precum i echipament de laborator de uz general.
Toate vasele de laborator utilizate, dup splarea obinuit, trebuie imersate in acid azotic 10%
cel puin pentru 6 ore, dup care se cltesc temeinic cu ap deionizat. Aceast operaie trebuie
efectuat inclusiv pentru materialele de unic folosin (vrfuri de pipete, cuve pentru
autosampler)!
6. Aparatura
Echipament de prelevare
o Pomp de prelevare cu debit reglabil ntre 500-5000 mL, conform cu cerinele
specificate n SR EN 1232:2002
o tuburi de legtur flexibile (de ex. Tygon) de diametru corespunztor pentru a asigura
legarea etan a prelevatorului la pomp, de lungime de aproximativ 80 cm.
o prelevator pentru pulberi inhalabile (de ex. prelevator conic, IOM, caset cu fa nchis)
o casete de filtru corespunztoare prelevatorului de ex. 37 mm pentru prelevatorul conic
i 25 mm pentru prelevatorul IOM);
o filtre de membran din esteri celulozoici de porozitate 0,8 mm, i diametru corespunztor
casetei (de ex. 37 mm sau 25 mm).
o calibrator de debit portabil (de ex. rotametru, calibrator cu piston uscat).
o Termometru, cu domeniul 0-50 C, cu diviziuni de 1 C sau mai mic.
o Barometru
o adaptor pentru legarea orificiului de intrare a prelevatorului la calibratorul de debit.
o centur pentru fixarea echipamentului de prelevare pe lucrtor
Aparatura analitica
o Bloc de nclzire termostatat din aluminiu cu locauri de dimensiuni corespunztoare
dimensiunii eprubetelor gradate de la punctul o paragraful , cu temperatur reglabil la
125C 5C
o n loc de bloc de nclzire, se poate utiliza baie de nisip cu termostat, reglabil la
125C 5C
o Baie ultrasonic
o Spectrometru de absorbie atomic echipat corespunztor: atomizor cu flacra sau cuptor
de grafit, cu surse de radiaii monocromatic specific metalelor de interes (de exemplu lampa cu
catod cavitar) i sistem de corectarea fondului (de ex, cu lamp de deuteriu sau cu efect Zeeman),
autosampler pentru tehnica de atomizare n cuptor, precum i consumabile specifice aparatului
(tuburi de grafit, fiole de autosampler).
7. Prelevare
Strategia de prelevare se stabilete n funcie de scopul prelevrii n conformitate cu cele
prevzute n SR EN 689: 2003. n general pentru verificarea conformitii cu valorile limit
obligatorii de expunere profesional pt. 8h, condiiile de prelevare sunt urmtoarele:
- Prelevare personal din zona de respiraie a angajatului, cu pompa fixat de angajat
- Durata prelevrii: 2 h
- Debit: corespunztor prelevrii fraciei inhalabile pentru prelevatorul utilizat (de ex.
3,5L/min pentru prelevatorul conic, 2L/min pentru prelevatorul IOM i caseta cu fa
nchis)
Pregtire echipament de prelevare
nainte de deplasarea pe teren:
o se verific ca bateriile pompei s fie ncrcate, nct s fie capabile s funcioneze
corespunztor pe durata prelevrii;
37

o se regleaz debitul dorit:
se asambleaz echipamentul de prelevare, n prelevator se introduce o caset de filtru cu un filtru
identic cu cel folosit pentru prelevarea propriu zis (pe ct posibil din acelai lot). Cu ajutorul
adaptorului orificiul de intrare al prelevatorului se leag la orificiul de ieire al calibratorului, i
se regleaz debitul de prelevare corespunztor prelevatorului utilizat, in conformitate cu
instruciunile de utilizare al pompei. Este preferabil, ca nainte de reglarea debitului pompa s
funcioneze aproximativ 20 de minute.
La locul prelevrii:
o se asambleaz echipamentul de prelevare: prelevatorul n care n prealabil s-a montat
caseta cu filtru se leag cu ajutorul tubului flexibil de orificiul de aspirare al pompei;
o nainte de prelevare se verific debitul de prelevare reglat cu ajutorul calibratorului de
debit n acelai mod cum s-a efectuat reglajul n laborator. La nevoie se mai ajusteaz reglajul.
Se noteaz valoarea exact a debitului;
o se ndeprteaz caseta de filtru cu filtrul folosit la reglarea debitului, i se monteaz
caseta de filtru cu filtrul utilizat pentru prelevare;
o echipamentul de prelevare asamblat se fixeaz pe lucrtor, avnd grij ca prelevatorul s
fie fixat n zona de respiraie a lucrtorului.
Prelevare propriu-zisa
o Se pornete pompa de prelevare, i se noteaz ora de ncepere a prelevrii.
o n timpul prelevrii se observ modul de lucru al lucrtorului i se noteaz toate
evenimentele relevante, care ar putea influena rezultatul, precum i sursele de noxe.
o La expirarea duratei de prelevare propus, se oprete pompa, i se noteaz ora terminrii.
o Se calculeaz durata prelevrii n minute.
o Dup terminarea prelevrii, se repet verificarea debitului, i se noteaz valoarea citit.
Pentru calcule se folosete valoarea medie a debitelor citite nainte i dup prelevare.
Transport
Transportul probelor prelevate se face cu grij deosebit, pentru a se asigura ca materialul depus
pe filtru s nu se scuture n timpul transportului. n acest scop transportul se efectueaz n casete
nchise, cu faa prelevat orientat n sus.
8. Mod de lucru
o Pregtirea reactivilor
Din reactivii menionai la punctul se prepar urmtoarele soluii.
o Soluia de digestie: 2:1 HNO
3
65% : HCl 25% (270 mL acid azotic 69,5% + 100mL acid
clorhidric 37% 80 mL ap DI)
o Soluia de diluie pentru standarde 0,1% HNO
3
: 1 mL de HNO
3
69,5% la un balon cotat
de 1000 mL, adus la semn cu ap DI.
o Modificatori: Pd 1,6 g/L+ acid ascorbic 1 %
o Soluii etalon:
Pentru tehnica flacr:
Din soluiile etalon cu concentraia de 1000 mg/L se prepar urmtoarele soluii stoc
intermediare:
Cr: c= 100 mg/L; 2,5 ml de soluie etalon de 1000 mgCr/L ntr-un balon cotat de 25 mL adus la
semn cu soluia de diluie 0,1% HNO
3

Fe: c=350 mg/L; 17,5 ml de soluie etalon de 1000 mgFe/L ntr-un balon cotat de 50 mL adus la
3

Pb: c= 50 mg/L: 2,5 ml de soluie etalon de 1000 mgPb/L ntr-un balon cotat de 50 mL adus la
3

Aceste soluii se pot pstra la temperatura de +4 C timp de 6 luni.
38

Etaloane de lucru pentru flacr se prepar n baloane cotate de 25 respectiv 50 mL, se
completeaz cu soluie de diluie 0,1% HNO3, i se pot pstra la temperatura +4 C timp de 7
zile.
Nr. std.
Cr (balon cotat 25 mL) Fe (balon cotat 25 mL) Pb (balon cotat 50 mL)
c (mg/L) V
stoc
(ml) c (mg/L) V
stoc
(ml) C (mg/L) V
stoc
(ml)
1 0,8 0,2 7,0 0,5 0,5 0,5
2 2,4 0,6 14,0 1,0 1,0 1,0
3 4,4 1,1 28,0 2,0 2,0 2,0
4 6,4 1,6 49,0 3,5 3,5 3,5
5 8,0 2,0 70,0 5,0 5,0 5,0

Pentru tehnica flacr:
Etalon stoc pentru cuptor:
Din soluia etalon de 1000 mg/L (Cd, Ni, Mn) se prepar urmtoarele concentraii de soluii stoc
ntr-un balon cotat de 100 mL adus la semn cu soluia de diluie 0,1% HNO
3
,

Soluia aceasta se
poate pstra la temperatura de +4 C timp de 6 luni.
Cd Ni Mn
c (mg/L) V
etalon
(ml) c (mg/L) V
etalon
(ml) c (mg/L) V
etalon
(ml)
10 1 5 0,5 10 1
Pentru Cd se efectueaz nc o diluie de 1/100 n urma creia rezult un stoc intermediar de 0,1
mg/L din care se prepar etaloanele de lucru.
Etaloane de lucru pentru cuptor:
Nr. std.
Cd Mn Ni
c (mg/L) V
stoc
(ml) c (mg/L) V
stoc
(ml) c (mg/L) V
stoc
(ml))
1 0,20 100 6 30 5 50
2 0,40 200 12 60 10 100
3 0,80 400 24 120 20 200
4 1,40 700 42 210 35 350
5 2,00 1000 60 300 50 500
Etaloanele de lucru pentru SAA-CG se prepar n baloane cotate de 50 mL i se completeaz cu
soluie de diluie 0,1% HNO
3
; se pot pstra la temperatura +4 C timp de 7 zile.
o Pregtirea probelor
Digestia probelor se face in eprubete gradate (vezi specificaiile de la ). Filtrul prelevat se pune
n eprubet i se adaug 10 mL din soluia de digestie menionat la punctul o. Pentru fiecare serie
se prepar un filtru neutilizat din aceeai lot, care va fi proba martor. La eprubet se ataeaz
refrigerentul i se introduce n locaul blocului termostat (sau n baia de nisip). Probele se
fierb cu reflux la temperatura de 125 5 C timp de 2h. Dup rcire, probele se completeaz cu
ap deionizat pn la 20 mL. Este posibil ca digestia s nu fie complet, s rmn sediment.
Pentru analiz se folosete supernatantul. Dac sedimentarea nu este complet, nainte de analiz
se filtreaz o parte a soluiei de ex. folosind un filtru de unic folosin. Pentru analiz proba
astfel pregtita n funcie de concentraia estimat se poate dilua, n general este suficient un
raport 1/2 pn la 1/5. De raportul de diluie se ine cont la calculul rezultatelor.

o Condiii de analiz la spectrometrul de absorbie atomic

- Atomizare n flacr:
Element Cr Fe Pb
Lungime de und (nm) 357,9 372,0 283,3
39

Fant (nm) 0,2 0,2 0,5
Corecie D2 Nu Nu Da
Oxidant Aer Aer Aer
Tip flacr Reductor Oxidant Oxidant
Optimizare c(mg/L) pt. 0,2 abs 2 25 10
Domeniu de lucru: mg/L 0,8-8 7-70 0,5 - 5

- Atomizare n cuptor de grafit:
Element Cd Mn Ni
Lungime de und (nm) 228,8 403.1 232,0
Fant (nm) 0,5R 0,2R 0,2R
Corecie D2 Da Nu Da
Temperatur de calcinare: 350 700 1650
Temperatur de atomizare. 2000 2400 2500
10 20 10
Modificator Pd + VitC fr Pd + VitC
Optimizare c(g/L) pt. 0,2 abs 1,1 36 25
0,2-2 6- 60 5-50

Aceste valori sunt informative, trebuie inut cont de recomandrile productorului
instrumentului.
Rezultatele se exprim n unitile n care sunt exprimate valorile limit n HG 1218/2006 cu
modificrile ulterioare adic mg/m
3
. Dac pentru valoarea limit este specificat c se refer la
condiii standard de referin, (20 C i presiunea p=101,3 kPa), se face conversia volumului de
aer din condiiile actuale la condiia standard.
o Calcule
- Debitul mediu de prelevare (L/min) :
2
2 1 v v
v
q q
q ;
q
v1
, q
v2
debitele iniiale i finale de prelevare (L/min)

- Volumul de aer prelevat (L):
40

t q V
v
* ;
t durata prelevrii (minute);

- Volumul prelevat corectat pentru condiii de referin:
1
0
0
1
* *
T
T
p
p
V V
cor
;
p
1
presiunea atmosferic medie n timpul prelevrii (kPa);
p
0
presiunea atmosferic de referin (101,3 kPa);
T
1
temperatura ambiant medie n timpul prelevrii (K);
T
0
temperatura de referin (293 K);
- Masa analitului pe filtru:
0 0 1 1
* * * V c DF V c m ;
c
1
concentraia medie de analit n soluia de analizat (mg/L)
c
0
concentraia medie de analit n soluia martor (mg/L)
V
1
volumul soluiei de analizat (L)
V
0
volumul soluiei martor (L)
DF factorul de diluie utilizat (n absena diluiei DF=1)

- Concentraia masic n proba de aer (mg/m
3
):
cor
V
m
c

- Pentru a putea compara concentraia msurat cu valorile limit, trebuie calculat
concentraia medie ponderat cu timpul (MPT), n funcie de durata de expunere:
8
*
e
t c
MPT
t
e
durata de expunere
n cazul n care expunerea se ntinde pe toat durata unui schimb de lucru de 8 ore, MPT=c.
Dac valoarea limit care se aplic, se refer la oxizi (de ex. oxid feric sau oxid de cadmiu),
rezultatul trebuie nmulit cu factorul de conversie corespunztor.

41

Performanele metodei
NR.
CRT
DENUMIREA
PARAMETRU
VALORI ESTIMATE
Cd Cr Fe Mn Ni Pb
1.
Liniaritatea curbei de etalonare 10
nivele de concentraie (r
2
)
0,9993 0,9986 0,9993 0,9995 0,9989 0,9997
2.
Liniaritatea curbei de etalonare 5
nivele de concentraie (r
2
)
0,9988 0,9996 0,9996 0,9999 0,9999 1,0
3.
Coeficientul de variaie al metodei 4,7 % 3,1 % 2,2 % 1,8 % 2,7 % 1,5 %
4.
Domeniul de lucru analitic 0,2 2 g/L 0,8 8 mg/L 7-70 mg/L 6 60 g/L 5-50 g/L 0,5 5 mg/L
5.
Limita inferioar a domeniul de lucru
a metodei, pentru volumul de 420 L
aer (mg/m
3
)
0,00001 0,04 0,3 0,0003 0,0002 0,024
6.
Limita de detecie analitic 0,067 g/L 0,384 mg/L 2,461 mg/L 1,686 g/L 2,122 g/L 0,117 mg/L
7.
Limita de detecie a metodei (mg/m
3
) 0,000003 0,018 0,117 0,0001 0,0002 0,005
8.
Limita de cuantificare analitic 0,247 g/L 1,73 mg/L 9,036 mg/L 6,288 g/L 0,077 g/L 0,443 mg/L
9.
Limita de cuantificare a metodei
(mg/m
3
)
0,000012 0,82 0,43 0,0003 0,0008 0,02
10.
Recuperabilitate nivel 1 99,0 % 88,0 % 100,5 % 104,5 % 94,4 % 99,0 %
11.
12.
13.
Incertitudine sistematic prelevare 2,89 %
14.
Incertitudine aleatoare prelevare 2,93 %
15.
Incertitudine prelevare 4,12 %
16.
Incertitudinea analitic 4,22 % 5,36 % 6,72 % 5,22 % 5,40 % 4,22 %
17.
Incertitudinea compus a metodei de
analiz n condiii repetabile
5,89 % 6,76 % 7,88 % 6,65 % 6,79 % 5,90 %
18.
Incertitudinea extins a metodei de
analiz n condiii repetabile
11,78 % 13,52 % 15,76 % 13,3 % 13,58 % 11,79 %

42

10. Raport de analiz
Raportul de analiz trebuie s conin cel puin urmtoarele:
o Date de identificare beneficiar (denumire, adresa, nr.reg., CUI)
o Date despre prelevare:
- Numele celui care a efectuat prelevarea
- Reprezentantul beneficiarului care a participat la prelevare
- Identificarea lucrtorului a crui expunere a fost determinat (inclusiv numele, postul de
munca, secia)
- Scopul prelevrii
- Condiiile de lucru, date despre ventilaie i echipament individual de protecie purtat
- Sursele de emisie a noxelor
- Descrierea procesului de lucru
- Durata de expunere
- Data prelevrii
- Ora nceperii i ora terminrii prelevrii (ora, minute)
- Durata prelevrii (minute)
o Identificarea probei:
- Tipul i seria pompei de prelevare;
- Tipul i seria calibratorului de debit
- Tipul prelevatorului
- Tipul i marcajul filtrului de prelevare
- Debitul msurat nainte i dup prelevare (litri/min)
- Volumul de aer prelevat (litri)
o Date despre microclimat: temperatur, umiditate relativ, presiune atmosferic, viteza
curenilor de aer
o Orice observaie relevant care ar putea influena rezultatul
o Date despre modul de prelucrare a probei
o Data efecturii analizei
o Identificarea instrumentului de analiz (tip, nr. serie)
o Numele persoanei care a efectuat analiza
o Rezultatul i incertitudinea
o Media ponderat cu timpul
11. Bibliografie
1. Bernard Welz, Michael Sperling: Atomic Absorption Spectrometry, 3
rd
Completely
Revised Edition, 1999 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co KgaA, Weinheim, ISBN:
9783527285716
2. Ralph Hebisch, Hajo-Henning Fricke, J ens-Uwe Hahn, Majlinda Lahaniatis, Claus-
Peter Mashmeier, Markus Mattenklott: Sampling and determining aerosols and their chemical
components - The MAK-Collection Part III. Air monitoring methods, Vol.9. DFG, Deutsche
Forschungsgemeinschaft Copyright 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH & Co KgaA,
Weinheim, ISBN: 3-527-31138-6
3. http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.amsampaeroe0009/pdf
4. Method for the determination of cadmium The MAK-Collection Part III. Air
monitoring methods Vol.4. DFG, Deutsche Forschungsgemeinschaft Copyright 2005 WILEY-
VCH Verlag GmbH & Co KgaA, Weinheim, ISBN: 3-527-31138-6
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.am744043vere0004/pdf
5. Method for the determination of nickel The MAK-Collection Part III. Air monitoring
methods Vol.7. DFG, Deutsche Forschungsgemeinschaft Copyright 2005 WILEY-VCH
Verlag GmbH & Co KgaA, Weinheim, ISBN: 3-527-31138-6
6. http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/3527600418.am744002vere0007/pdf
43

7. Institut National de Recherche et de Scurit (INRS) Mtaux Mtallodes (Fiche 003),
in Mtrologie des Polluants valuation de lxposition Professionnelle Mthodes de
Prlvement et dAnalyse de lAir, INRS, Paris
http://www.inrs.fr/accueil/produits/bdd/metropol.html
8. Health and Safety Executive: MDHS6/3 Lead and inorganic compounds of lead in air
Laboratory method using flame or electrothermal atomic absorption spectrometry in
Occupational Medicine and Hygiene Laboratory: Methods for the Determination of Hazardous
Substances (MDHS) guidance http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs6-3.pdf
9. Health and Safety Executive: MDHS10/2 Cadmium and inorganic compounds of
cadmium in air Laboratory method using flame atomic absorption spectrometry or electrothermal
atomic absorption spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene Laboratory: Methods for
the Determination of Hazardous Substances (MDHS) guidance
http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs10-2.pdf
10. Health and Safety Executive: MDHS12/2 Chromium and inorganic compounds of
chromium in air Laboratory method using flame atomic absorption spectrometry in Occupational
Medicine and Hygiene Laboratory: Methods for the Determination of Hazardous Substances
(MDHS) guidance http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs12-2.pdf
11. Health and Safety Executive: MDHS42/2 Nickel and inorganic compounds of nickel in
air (except nickel carbonyl) Laboratory method using flame atomic absorption spectrometry or
electrothermal atomic absorption spectrometry in Occupational Medicine and Hygiene
Laboratory: Methods for the Determination of Hazardous Substances (MDHS) guidance
http://www.hse.gov.uk/pubns/mdhs/pdfs/mdhs42-2.pdf
12. OSHA: Metal & Metalloid Particulates In Workplace Atmospheres (Atomic Absorption)
ID 121 in OSHA - Sampling and Analytical Methods electronic version
http://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id121/id121.pdf
13. OSHA: Cadmium In Workplace Atmospheres ID 189 in OSHA - Sampling and
Analytical Methods electronic version
http://www.osha.gov/dts/sltc/methods/inorganic/id189/id189.pdf
14. INSHT - MTA/MA-025/A92 - Determinacin de metales y sus compuestos inicos en
aire - Mtodo de filtro de membrana /espectrofotometra de absorcin atmica in Mtodos toma
de muestras y anlisis
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/MetodosAnalisis/Fich
eros/MA/MA_025_A92.pdf

Adaptata i verificat n Laboratorul ncercari Fizice, Chimice i Microbiologice Toxicologie
I ndustriala - CRSP TRGU - MURE

IV.8. Determinarea unor compui organici volatili din aerul locurilor de munc ,
prin GC

1. Scop
Prezenta metodologie are drept scop prezentarea modului de prelevare a probelor i de
execuie a analizelor, prin cromatografie n faz gazoas, pentru determinarea concentraiei unor
compui organici volatili din aerul locurilor de munc. Sunt prezentate de asemenea
echipamentele i materialele utilizate, operaiunile prealabile i activitile finale .

44

Procedura se aplic pentru concentraii n aer ale compuilor organici volatili situate
aproximativ n domeniul cuprins ntre 0,2 mg/m3 pn la 2000 mg/m3 pentru un volum de
prelevare de 5 l. Metoda permite determinarea concentraiilor din aer a urmtorilor compui:
aceton, acetat de etil, acetat de n-butil, n-butanol, ciclohexan, etanol, metil-etil-ceton, n-
hexan, benzen, toluen, xilen. Metoda descris n procedur se aplic i la msurarea
concentraiilor din aer ale compuilor organici volatili prezeni n amestec. Metoda se poate
aplica i pentru determinarea altor compui organici volatili din aer, dar validitatea ei trebuie
verificat.
Modul de lucru este compatibil cu aparatura de prelevare a probelor individuale sau n punct fix
i se poate utiliza pentru calcularea concentraiei medii ponderate n funcie de timp, a vaporilor
de compui organici volatili din aer.
Compuii organici care au timp de retenie identici sau apropiai cu substanele analizate
pot s interfere.Interferenele pot fi minimizate prin alegerea corect a coloanelor cromatografice
i a condiiilor de separare, respectiv prin consultarea fielor de securitate de la locurile de
munc.
Determinrile descrise n prezenta procedur specific se efectueaz la solicitare sau n cadrul
unor Programe Naionale i Internaionale ale Ministerului Sntii i au drept scop evaluarea
expunerii ocupaionale la ageni chimici, datorat utilizrii compuilor organici volatili ca
solveni organici.
3. Documente de referin
o Manualul Calitii laboratorului
o Culegere de metode de investigaie n domeniul medicinii muncii. Determinarea gaz
cromatografic a unor solveni organici, Ministerul Sntii, Academia de tiine Medicale,
Institutul de Igien i Sntate Publica Bucureti, 1991
o SR ISO 9487-2001 Aerul locurilor de munc - Determinarea vaporilor de
hidrocarburi aromatice. Metoda de analiz prin tuburi cu crbune activ / desorbia solventului /
cromatografie n faz gazoas.
o SR EN 482 /2012 Expunere la locul de munca. Cerine generale pentru performana
procedurilor de msurare a agenilor chimici.
o SR EN 689 -2003 Atmosfera locurilor de munc. Ghid pentru evaluarea expunerii la
ageni chimici pentru compararea cu valori limit i strategia de msurare.
o SR EN 1076 / 2002 - Atmosfera locului de munc. Tuburi de adsorbie cu pompare
pentru determinarea gazelor i vaporilor. Cerine i metode de ncercare.
o SR EN 13649 / 2002 - Emisii de la surse fixe. Determinarea concentraiei masice a
compuilor organici gazoi individuali. Metoda prin carbon activ i desorbia solvenilor.
o SR EN 14662-2/2007 Calitatea aerului nconjurtor. Metoda standardizat pentru
msurarea concentraiei de benzen. Partea 2: Prelevarea prin pompare urmat de desorbia
termic i cromatografie n faz gazoas
o SE EN 1540 /2003 Atmosfera locului de munc Terminologie.
o NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Fourth Edition, 5/15/96
Volatile Organic Compounds
o NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Method 1500, Hydrocarbons,
36-126 0C BP
o NIOSH Manual of Analytical Methods ( NMAM), Method 1501, Hydrocarbons,
aromatic.
o OSHA Sampling and Analytical Methods, 3/19/04, Method 07- Organic Vapors
o OSHA Sampling and Analytical Methods, 3/19/04, Method PV 2028, Gasoline
o SR ENV 13005-2003 Ghid pentru exprimarea incertitudinii de msurare
o SR ISO 5725-1/1997 Exactitatea ( justeea i fidelitatea) metodelor de msurare i a
rezultatelor msurtorilor. Partea 1 Principii generale i definiii.
45

rezultatelor msurtorilor. Partea 2 Metoda de baz pentru determinarea repetabilitii i
reproductibilitii unei metode de msurare standardizate.
rezultatelor msurtorilor. Partea 3 Msurri intermediare ale fidelitii unei metode de msurare
standardizate.
rezultatelor msurtorilor. Partea 4 Metode de baz pentru determinarea justeei unei metode de
msurare standardizate.
rezultatelor msurtorilor. Partea 5 Metode alternative pentru determinarea fidelitii unei
metode de msurare standardizate.
rezultatelor msurtorilor. Partea 6 Utilizarea n practic a valorilor exactitii
o Gh. Toace, Ana Maria Toace Incertitudinea i validare, Ed. Medical, Buc.2008
o Gabriela Manca Validarea i incertitudinea: cerine pentru asigurarea calitii
metodelor analitice, Ed. Tehnic tiinific i Didactic Iai, 2003
4. Definiii
o Compui organici volatili(COV):substane organice care au punctul de fierbere
mic, respectiv volatilitatea crescut la temperatura ambiant.
o Solvent organic: orice compus organic volatil folosit separat sau n combinaie cu alte
substane ori preparate pentru a dizolva materii prime, produse sau deeuri ori utilizat ca agent
de curare, dizolvant, mediu de dispersie, regulator de vscozitate etc.
o Cromatografie n faza gazoas: metod instrumental de analiz de nalt
performan care permite determinarea individual a compuilor organici prezeni n amestecuri
complexe. Are la baz separarea acestora pe o coloan, deplasai fiind de un gaz purttor, urmat
de detecia, realizat, cel mai adesea, cu un detector cu ionizare n flacr (FID) sau cu
un spectrometru de mas (MS).
o Validare proces de evaluare a caracteristicilor de performan ale unei metode de analiz
i de verificare c este adecvat scopului n care va fi utilizat.
o Exactitate (acuratee) : caracteristic de performan a unei metode de analiz care
exprim gradul de apropiere (concordana) ntre rezultatul unei msurri i valoarea convenional
adevrat. Se exprim prin bias (deplasare).
o Bias : diferena ntre media rezultatelor obinute n condiii de repetabilitate i valoarea
convenional adevrat. Se exprim ca valoare absolut sau procentual(relativ).
o Precizie (fidelitate) : caracteristica de performan a unei metode de analiz care
exprim gradul de apropiere (concordan) ntre rezultatele individuale ale unei serii de
msurtori efectuate n condiii prevzute.
o Repetabilitate: precizia unui set de msurri efectuate cu aceeai metod pe elemente de
testare identice, cu acelai echipament, acelai lot de reactivi, acelai analist ntr-o perioad de
timp scurt. Se exprim prin deviaia standard relativ ( coeficient de variaie)
o Incertitudine : parametru asociat rezultatului unei msurri care caracterizeaz
dispersia valorilor ce, n mod rezonabil, pot fi atribuite masurndului.
o Etalonarea : ansamblu de operaii care stabilesc n condiii specificate, relaia dintre
valorile unei mrimi indicate de un aparat ori un sistem de msurare i concentraia unui etalon.
o Limit minim de detecie: cea mai mic valoare (cantitate, concentraie) care poate fi
detectat i distinct fa de blanc.
o Limit minim de msurare ( cuantificare ): cea mai mic valoare (cantitate,
concentraie) care poate fi determinat cantitativ cu un nivel acceptabil al repetabilitii i
exactitii.
46

o Domeniu de msurare: intervalul ntre nivelul inferior i cel superior de
concentraie de analit n care se demonstreaz liniaritatea curbei de etalonare.
o Interferent: orice compus nafara celor ce urmeaz a fi determinai, care afecteaz
rezultatul (msurrii) determinrii.
o Loc de munc: zon sau zone definite n care se desfoar o activitate.
5. Descrierea metodei
o Principiul metodei
Un volum cunoscut de aer posibil contaminat (proba) este aspirat printr-un tubuor de sticl sau
metal ce conine crbune activ. Vaporii organici sunt adsorbii de crbunele activ. Aceti
compui organici sunt apoi desorbii ntr-un solvent adecvat iar soluia rezultat este analizat cu
un gaz cromatograf echipat cu detector cu ionizare n flacr.
o Echipamente i ustensile de ncercri / msurri
o Gaz cromatograf, Model 4890 D, firma productoare Hewlet Packard,
echipat cu detector cu ionizare in flacara (FID) i coloan capilara de separare cromatografic.
o Pompa de prelevare prin aspirare model Apex Casella, debit 5-5000 ml / min;
o Incrctor pentru acumulatorul pompei;
o Cap de aspirare (cu clema) pentru tubuoare;
o Debitmetru cu pelicula de spun;
o Rotametru;
o Tubuoare adsorbante din sticla (lungime 7 cm, diametru interior 4 mm ) umplute cu
crbune activ de granulaie 20-40 mesh dispus in doua zone: zona adsorbant (100 mg) i zona
de rezerva (50mg). Zonele sunt separate, iar crbunele este fixat la capetele tubului, cu vat de
sticl sau alt material inert.
o Capace de polietilena pentru nchiderea tubuoarelor cu crbune;
o Pipete gradate de 1ml ( 0.007ml ), 2 ml ( 0.01 ml), 5 ml ( 0.003 ml)
clasa AS.
Pipete automate mecanice 1-5 ml ( eroare - 0,25%, imprecizie 0,13%) , de 0,1-1 ml i de 10-
100 l.
o Seringi cu volum de 5 l i de 10l , gradate n diviziuni de 0,1 l .
o Baloane cotate de 10 ml, 25 ml i 50 ml
o Flacoane pentru pstrarea soluiilor etalon: capacitatea de 10 ml, prevzute cu capac cu
filet i garnitur de cauciuc siliconic teflonat
o Flacoane de sticl prevzute cu capac cu filet i garnitur de cauciuc siliconic
teflonat, cu volum de 2 i 5 ml
o Reactivi i materiale consumabile
Se utilizeaz numai reactivi de calitate analitic recunoscut.
o disulfura de carbon de calitate cromatografic, verificat n prealabil, prin analiz gaz
cromatografic, pentru a evidenia posibilele interferene.
o etaloane de: benzen, toluen, xilen, etanol, aceton, metil-etil-cetona, acetat de etil,
acetat de n-butil, de cea mai inalta puritate.Pentru trasarea curbei de etalonare se prepar, prin
diluii succesive plecnd de la o soluie stoc preparat volumetric, soluii etalon cu coninut
variind ntre 5 g/ml i 1000 g/ml.n condiii de refrigerare (3 5
o
C) si pastrate in flacoane
inchise ermetic , soluiile etalon sunt stabile cel puin un an. Dac se observ o deteriorare
evident a lor, se refac.Domeniul de concentraii ale acestora trebuie s acopere domeniul
de concentraii al probelor desorbite.
o soluie etalon stoc de 50 000 g/ml : se introduc volumetric (tinind cont de densitati) cu
exactitate cte 500 mg din fiecare etalon pur, n balon cotat de 10 ml, se aduce la semn cu
disulfur de carbon i se omogenizeaz.
o soluie etalon de 1000 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 0,5 ml solutie etalon
stoc (3) intr-un balon cotat de 25 ml, se aduce la semn cu disulfura de carbon si se omogenizeaza
47

o soluie etalon de 500 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 5 ml soluie etalon de
1000 g/ml (4) ntr-un balon cotat de 10 ml, se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o soluie etalon de 250 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 5 ml de soluie etalon de
500 g/ml (5) ntr-un balon cotat de 10 ml., se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o soluie etalon de 100 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 4 ml soluie etalon de
250 g/ml (6) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o soluie etalon de 50 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 5 ml soluie etalon de 100
g/ml (7) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o soluie etalon de 5 g/ml : se introduc cu ajutorul unei pipete 1 ml soluie etalon de 50
g/ml (8) ntr-un balon cotat de 10 ml se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
Pentru verificarea curbei de etalonare se prepar urmtoarele soluii etalon de control:
o soluie etalon de control de 5 mg/ml : se introduc cu exactitate cate 50 mg din fiecare
component pur ntr-un balon cotat de 10 ml, se aduce la semn la disulfur de carbon i se
omogenizeaz.
o soluie etalon de control de 1 mg/ml : se introduc cu exactitate cte 50 mg din fiecare
component ntr-un balon cotat de 50 ml se aduce la semn cu disulfur de carbon i se
omogenizeaz. Soluiile etalon astfel preparate se pstreaz n flacoane speciale dedicate acestui
lucru.
o azot comprimat, puritate 99,999%
o hidrogen electrolitic comprimat
o aer comprimat
o vrfuri pentru pipete automate
o Prelevarea compuilor organici volatili
naintea efecturii prelevrilor, tubuoarele adsorbante se eticheteaz i li se d un numr .Dac
se folosesc tubuoare preparate n laborator, carbunele se activeaz suplimentar prin nclzire la
300
0
C timp de dou ore, iar apoi tubusoarele se pstreaz cu capetele nchise ermetic pn n
momentul recoltrii.
Se verific gradul de ncrcare al acumulatorului pompei, iar la nevoie se ncrc.
Pentru recoltarea compuilor organici volatili se regleaz debitul de aspirare al pompei, la
0,25 l /minut cu ajutorul unui debitmetru cu pelicul cu spun, pompa aspirnd aer n timpul
acestei operaii, printru-un tubuor identic cu cele ce urmeaz a fi utilizate.
Se utilizeaz pentru prelevri pompele Apex Casella .
Se asambleaz echipamentul de prelevare ( pompa de aspirare , tubul de plastic i capul de
aspirare). Se instaleaz acest echipament la punctual de prelevare ales ( prelevare personal sau
prelevare n punct fix).
Se deschid capetele tubuorului adsorbant, iar acesta se fixeaz n capul de aspirare, n poziie
vertical, respectnd sensul de curgere al aerului indicat pe tub. Se pornete pompa avnd grij
ca de fiecare dat timpul indicat s fie zero. Dup terminarea intervalului de timp setat pentru
aspirare pompa se oprete ( se poate opri i manual). Tubuorul cu crbune activ se scoate din
capul de prelevare i se renchid ermetic capetele sale cu capacele de polietilen.
Volumul de aer aspirat se stabilete prin debitul de aspirare al pompei i prin setarea (alegerea )
timpului de prelevare.
Se prepar probe martor prin utilizare unor tubuoare identice cu cele folosite pentru prelevri,
exceptnd operaia de aspirare a aerului prin ele.

48

o Execuia analizei
o Analiza gaz cromatografic
Gaz cromatograful se pune n funcie conform instruciunilor de utilizare ale aparatului. Analiza
se efectueaz n urmtoarele condiii:
- Detector cu ionizare n flacar
- Coloana de separare capilar BP-5 (L = 30m, d int = 0,32 mm)
- Regim de temperatur a coloanei; T init = 50 0 C, t init = 2 min, rata de cretere
r = 7 0 C / min, T final = 1250 C, t final = 0 min.
- Temperatura evaporatorului : 2500 C,
- Temperatura detectorului : 250 0 C,
- Gaz purttor: azot
- Gaze auxiliare: aer comprimat ; hidrogen electrolitic
- Volum de prob / soluie etalon injectat : 1 pn la 5 l
In condiiile folosirii unei coloane de separare cu alte caracteristici (alta faza stationara, alte
dimensiuni etc) regimul de temperatura al coloanei se va stabili astfel incit sa se asigure o
separare cit mai buna intr-un timp optim.
o Etalonare
Se analizeaz gaz cromatografic, de trei ori, fiecare soluie etalon, n condiiile descrise mai sus.
n acest scop se injecteaz n gaz cromatograf, n mod reproductibil, un volum cunoscut (1 5l)
din solutia etalon.
n cazul suprancrcrii sistemului cromatografic se injecteaz volume mai mici.
Se traseaz curba de etalonare reprezentnd grafic suprafaa picurilor corespunztoare
substanelor analizate corectate cu valoarea probei martor (disulfur de carbon) n funcie
de cantitatea injectata (exprimata in micrograme) sau de concentraiile soluiilor etalon ale
substanelor analizate, exprimate n micrograme / mililitru. Curbele de etalonare impreuna cu
coeficientii lor de regresie (corelare), trasate pentru COV care fac obiectul acestei metodologii,
sint atasate.
Curba de etalonare se traseaz o data pe an precum i dup orice modificare a parametrilor de
analiz (coloan se separare, regimul de temperatur al coloanei, debitele gazului purttor i al
gazelor auxiliare ) sau dup interveniile de service i de mentenan.
Se verific curba de etalonare prin analizarea soluiilor etalon de control. Dac diferena este mai
mare de 5% se efectueaz o nou etalonare.
Pentru calcularea concentraiilor de COV din probe i din soluiile etalon martor, se
utilizeaz curba de etalonare.
Curbele de etalonare i rezultatele se pstreaz pe suport magnetic i pe hrtie .
o Pregtirea soluiilor de probe prin desorbie n disulfur de carbon.
Pentru trecerea n soluie a vaporilor organici reinui pe crbunele activ din tubuoarele
recoltoare se efectueaz desorbia lor n disulfur de carbon. Se introduce cu ajutorul unei pipete
1 ml de disulfur de carbon ntr-un flacon de 2 ml prevzut cu capac cu filet i garnitur de
cauciuc siliconic teflonat, se nchide imediat. Se scot capacele de plastic cu care sint inchise
capetele tubuorului i se ndeprteaz dopurile cu care este fixat crbunele activ. Se transfer
crbunele din prima zon a tubuorului ( cantitatea mai mare) n flaconul cu disulfur de carbon
i se nchide etan. Se agit flaconul din cnd n cnd, timp de 30 min., la temperatura camerei,
pentru a se asigura o desorbie maxim. Se repet aceste operaii pentru a doua zon cu crbune a
tubuorului, zona de rezerv, cu un alt flacon cu disulfura de carbon.
Cnd se utilizeaz tubuoare recoltoare ce conin mai mult crbune dect 100 + 50 mg, se
utilizeaz pentru desorbie flacoane mai mari i un volum de disulfur de carbon mai mare ( de
ex. 400 mg crbune se desorb cu 4 ml de disulfur de carbon )
o Determinarea propriu-zis
n gaz cromatograful aflat n regimul de lucru menionat se injecteaz pentru analiz, acelai
volum din soluia rezultat la desorbie ca i volumul injectat pentru trasarea curbei de etalonare.
49

Se determin, din cromatograma, suprafaa picului substanei de determinat iar din curba de
etalonare se stabilete concentraia masic n micrograme / ml, a substanei analizate din proba
injectat.
Dac zona de rezerv conine mai mult de 10% substana analizat prin raportare la prima zon,
se consider ca proba nu este corespunztoare i se distruge.
n maniera descris se analizeaz i tubuorul martor, iar la fiecare set de probe se
analizeaz o soluie etalon ( calibrare n dou puncte).
Sint anexate cromatograma obtinuta prin analiza unui amestec etalon, respectiv a doua probe
prelevate din aerul locurilor de munca.
o I dentificarea componentilor
Identificarea compusilor separati din proba analizata si reprezentati in cromatograma
prin picuri se face pe baza timpului de retentie, comparind cromatograma probei cu
cromatograma unei solutii etalon. Valorile acestui parametru calitativ, pentru COV care fac
obiectul acestei metode, determinat in conditiile de separare descrise mai sus, sint prezentate in
tabel.Trebuie mentionat faptul ca, in conditiile de separare mentionate, pot aparea si anumite
interferente. Astfel, n-hexanul se poate suprapune in cromatograma peste acetatul de etil,
ciclohexanul peste benzen iar ciclohexanona si stirenul peste unul din izomerii xilenului. Pentru
identificarea cu siguranta, in astfel de cazuri, se impune consultarea fiselor de securitate de la
locul de munca sau identificarea compusilor prin spectrometrie de masa . De fapt sint foarte rare
cazurile in care sa fie prezenta in aerul locurilor de munca toata gama de COV.
o Calcul i exprimare rezultate
Concentraia masic a substanei analizate din proba de aer C, exprimat n mg compus/m3

C =

n care: C1 concentraia n g compus /ml a soluiei analizate corespunztoare primei zone de
crbune a tubuorului,
C2 - concentraia corespunztoare zonei de rezerv a tubuorului, n g/ml
C3 concentraia n g compus /ml a soluiei obinute prin desorbia mpreun a ambelor zone
de crbune ale tubuorului martor
V volumul de aer recoltat, n litri
Vd volum de disulfur de carbon utilizat pentru desorbie, n ml
A fost determinata si repetabilitatea analizelor de COV, analizind in acest scop o solutie etalon
de concentratie 50g/ml. Rezultatele, exprimate prin deviatia standard relativa, sint prezentate in
tabel.
o Erori care pot afecta determinarea si modalitati de evitare a lor
Principalele erori care pot afecta rezultatele determinrilor efectuate conform prezentei
proceduri pot fi cauzate de urmtorii factori:
o modificarea sensibilitii detectorului FID ca urmare e eventualelor depuneri de compui
pe unele componente ale sale sau n urma modificrii raportului dintre debitele gazelor auxiliare.
o inexactitate n etalonarea multi - punct i neliniaritate
o interferena / contaminarea probelor
o erori de blanc sau de matrice
o msurarea volumelor de reactivi, respectiv a aerului aspirat prin tubusoare
o efecte ale analistului
Evitarea i diminuarea erorilor de analiz se realizeaz prin:
o utilizarea de etaloane sau materiale de referin
o analiza unui martor la fiecare set de probe
o analiza unei soluii etalon la fiecare set de probe
50

o reetalonarea atunci cnd la verificarea cu soluii etalon de control apar diferene mai mari
de 5%
o verificarea i curarea anual sau la nevoie a detectorului FID

Adaptat i verificat n Laboratorul Sntate Ocupaional CRSP CLUJ NAPOCA

V. DETERMINAREA PULBERILOR N AERUL ZONELOR DE MUNC

V.1. Aspecte teoretice

Pulberile existente n aerul locurilor de munc reprezint sisteme disperse cu faza de
dispersie solid i mediul de dispersie gazos. Acest tip de sisteme disperse se mpart la rndul lor
n aerosoli i aero-emulsii, n funcie de dimensiunile fazei de dispersie.
Pulberile din aerul locurilor de munc fac parte, n general, din categoria aerosolilor, ai cror
particule au diametre care variaz ntre 0,001 i 100m i o contribuie de mas variind intre 10
-9

i 10g/m
3
de gaz.
Avnd n vedere aceste considerente, pulberile din mediul de munc pot fi definite ca
sisteme disperse (de tip aerosol) de particule solide heterogene aflate ntr-un gaz (aer), particule a
cror distribuie pe mrime este predominant aceea a unui coloid.
Exist o distincie clar ntre pulberi, fumuri (care fac parte din categoria aerosolilor) i
ceuri. Ceurile sunt sisteme disperse cu faz dispers lichid i mediul de dispersie gaz i se
numesc aero-emulsii.
Pulberile, fumurile i ceurile se deosebesc ntre ele i prin modul de formare i
dimensiuni. Astfel, pulberile se formeaz n general prin procesul de dezintegrare, un exemplu
tipic n acest sens reprezentnd mineritul, iar dimensiunile particulelor pot varia de la valori
submicronice la 1m. Fumurile sunt de dou tipuri: cele rezultate din reacii chimice
(fumes),,de exemplu: oxidri sau sublimri, ori distilri urmate de procese de condensare i
cele rezultate din arderea combustibililor fosili, lemnului sau materialelor asfaltice (smokes).
Dimensiunile particulelor variaz ntre 0,001 i 1m. Ceurile rezult din procesele de atomizare
sau condensare, ca de exemplu operaiile de tiere, mcinare, sprayare, iar dimensiunile sunt
cuprinse ntre civa m i 10m.
n conformitate cu Comitetul European de Standardizare (CEN 481/1993) i ACGIH
(American Conference of Governmental Industrial Hygienists), pulberile au fost definite astfel:
o fraciunea inhalabil este fraciunea masic din totalul de particule n suspensie din aer
care este inhalat pe gur, particule cu diamentrul aerodinamic ntre 1 i 100m
o fraciunea toracic este fraciunea masic a particulelor inhalate care ptrunde dup
laringe, particule cu diametrul ntre 0,1 i 35m
o fraciunea respirabil este fraciunea masic a particulelor inhalate care ptrunde pn la
cile neciliate, particule ntre 0,1 i 15 m.
Nu exist o metod unic de prelevare a pulberilor din aer, care s fie potrivit oricrei
situaii de expunere. S-au pus la punct diferite metode de recoltare a aerului i s-au construit
51

aparate de recoltare n limitele tehnologice existente, care s poat fi utilizate n diferite
circumstane de expunere.Pulberile care ptrund n organism au loc pe cale inhalatorie.
Deoarece pulberile se depun n diferite zone ale tractului respirator, n funcie de mrimea lor,
pentru evaluarea expunerii profesionale la pulberi, se impune prelevarea pulberilor din aer pe
fraciuni de mrime, adic este necesar s se msoare fraciunile: inhalabile toracic,
respirabil.(fig 1)

Fig.1 Regiunile aparatului respirator i fraciunile de praf reinute

Depunerea pulberilor n diferite zone ale aparatului respirator depinde de o serie de
factori fizici i chimici ai acestora (distribuia de mrime a particulelor, forma acestora,
solubilitatea n ap i lipide, reactivitatea chimic, sarcina electric datorat adsorbiei ionilor din
atmosfer sau frecrii n procesul de formare a pulberilor, proprietile adsorbtive fa de gaze
care au importan n diferite reacii chimice n organism), de condiiile de expunere
(concentraia pulberilor n aer, temperatur, umiditate relativ, viteza curenilor de aer), precum
i de caracteristicile individuale ale expuilor (sex, vrst, greutate, stare de santate, fumat).
Echipamentele de prelevare a pulberilor sunt n concordan cu directivele Comitetul
European de Standardizare (CEN 481/1993) i ACGIH (American Conference of Governmental
Industrial Hygienists), care au definit eficiena de reinere a unui dispozitiv de prelevare i
curbele de reinere pe filtre pentru cele trei fraciuni de praf: inhalabil, toracic i respirabil
(termenul inhalabil nlocuiete termenul total deoarece acesta se refer la concentraia
tuturor particulelor existente n aer).
Eficiena de prelevare a unui dispozitiv a fost definit ca fiind fraciunea de particule
reinute pe filtru, indiferent de orientarea filtrului fa de direcia curenilor de aer i este dat
pentru fraciunea inhalabil de relaia:

E
i
= 50 (1 + e
-0.06Da
) 10
(1)

unde:
Ei = eficiena de colectare (%) pentru fraciunea inhalabil
Da = diametrul aerodinamic al particulelor (m) (definit ca fiind diametrul unei sfere cu
densitatea egal cu unitatea, avnd aceeai vitez limit de cdere liber in cmp gravitaional ca
i particula studiat).

52

Pentru fraciunea toracic eficiena de prelevare, E
t
, este dat de relaia:

E
t
= E
i
[1 F(x)]
(2)

unde F(x) = funcia de probabilitate cumulat a variabilei normale standardizate x

ln (Da/D)
x = (3)
ln s

cu D = 11,64 m si s = 1,5

Pentru fraciunea alveolar eficiena de prelevare, E
a
, este dat de relaia:

Ea = Ei [ 1 F(x)]
(4)

unde F(x) i x au aceeai semnificaie ca in cazul fractiunii toracice, iar D = 4,25 m si s = 1,5.

Curbele teoretice de reinere pe filtre recomandate de ACGIH/ISO/CEN sunt
caracterizate de o eficien de reinere de 50% la diametrul aerodinamic de 10 1 m pentru
fraciunea toracic i de 4 1m pentru fraciunea respirabil; eficiena de reinere a prafului
respirabil este zero la valoarea de peste 10 m a diametrului aerodinamic (tabelul 1).

Tabel 1. Curbele teoretice de retinere pe filtre pentru cele trei fractiuni de praf:
respirabila, toracica si inhalabila

Diametrul
aerodinamic
al
particulelor
(m)
Praf
inhalabil
(%)

Diametrul
aerodinamic
al
particulelor
(m)
Praf
toracic
(%)

Diametrul
aerodinamic
al
particulelor
(m)
Praf
respirabil
(%)

0 100 0 100 0 100
1 97 2 94 1 97
2 94 4 89 2 91
5 87 6 80.5 3 74
10 77 8 67 4 50
20 95 10 50 5 30
30 58 14 23 6 17
40 54.5 16 15 7 9
50 52.5 18 9.5 8 5
100 50 25 2 10 1

Organismele internaionale de profil au stabilit criterii pentru aprecierea performanelor
aparatelor de prelevare selective n funcie de dimensiunea particulelor.
n acest sens, parametrul ce caracterizeaz eficiena de prelevare a acestor tipuri de
aparate l reprezint mrimea de particule recoltate cu o eficien de 50%, notat d
50
. n
conformitate cu criteriile ACGIH/ISO/CEN, d
50
are o valoare de 4m pentru dispozitivele de
prelevare a fraciunii respirabile de praf i de 10m pentru dispozitivele de prelevare a fraciunii
toracice; pentru fraciunea inhalabil, d
50
are valoarea de 100 m.
53

Cu alte cuvinte, aa cum reiese i din tabelul 1, eficiena de prelevare a fraciunii
respirabile este de 50 % pentru particulele avnd diametrul aerodinamic de 4 m; cnd
particulele au mrimea sub 4 m, eficiena de prelevare crete atunci cand D
a
scade iar pentru
particule mai mari de 4 m, eficiena de prelevare scade cu creterea D
a
. Similar, n cazul
fraciunii toracice, eficiena de prelevare este de 50% atunci cnd particulele au mrimea de
10m; pentru particule mai mici de 10m, eficiena de prelevare crete cu descreterea D
a
, iar
pentru particule mai mari de 10m eficiena de prelevare scade cu creterea D
a
. n cazul
fraciunii inhalabile, eficiena de prelevare are o valoare de 50% la dimensiunea de 100m; cnd
particulele au mrimi sub 100 m, eficiena de prelevare crete cu scderea D
a
, iar pentru
particulele cu mrimi peste 100 m eficiena de prelevare scade cu creterea D
a
.
Eficienele de prelevare (exprimate ca fraciuni de particule), n concordan cu criteriile
ACGIH/ISO/CEN, ale unui aparat de prelevare selectiv pe dimensiuni sunt artate n fig.2

Efectele asupra strii de sntate.
Cele mai multe pulberi industriale conin o gam mare de particule de diferite
dimensiuni. Comportamentul, depozitarea i soarta particulelor de la intrare n sistemul respirator
precum i efectul acestora depinde de mrimea particulelor. Este important s se ia n
considerare concentraiile de praf prezente n fraciuni de diferite dimensiuni.
Clasificare principalelor pulberi existente n aerul locurilor de munc, n funcie de
efectele lor asupra strii de sntate:
- pulberi de dioxid de siliciu i amestecuri ce conin dioxid de siliciu unde principala
mbolnvire profesional este silicoza, antracosilicoza i alte pneumoconioze mixte;
- pulberi de azbest i amestecuri ce conin azbest pot provoca azbestoz, plci pleurale,
mezoteliom, cancer bronho-pulmonar, cancerul cilor respiratorii superioare, cancerul altor
organe.
- Pulberi minerale artificiale pot provoca cancer pulmonar,boli pleurale benigne, efecte
iritative ale aparatului respirator etc
- Pulberi metalice i compui metalici . n funcie de metalul la care este expus personalul
muncitor pot provoca aluminoz (expunere la aluminiu), traheobronsit, pneumonie, afectare
renal, ulceraii i perforri ale septului nazal, astm bronic, cancer pulmonar, sideroz etc
- Pulberi organice vegetale i animale pot conduce la rinit alergic, astm bronic,bisinoz,
pneumoconioz necolagen etc
Aprecierea expunerii profesionale la pulberi se face utiliznd parametrul de ncrcare
extern, iar n unele cazuri se utilizeaz parametrul de ncrcare intern, care se refer la doza de
agent nociv absorbit.
Parametrul de ncrcare extern reprezint cantitatea de agent nociv la care este expus
organismul pe unitatea de timp (numrul de ore lucrate sptmnal). n cazul pulberilor, acest
54

parametru se bazeaz pe determinarea concentraiei medii ponderate cu timpul. Parametrul de
ncrcare extern se compar cu limita de expunere.
Evaluarea expunerii profesionale la pulberi ntr-un mod reprezentativ este necesar
pentru obinerea de informaii privind concentraia i proprietile pulberilor existente n aerul
unui loc de munc dat, ntr-o perioad de timp determinat, n vederea lurii de msuri adecvate
pentru reducerea riscului de mbolnvire al muncitorilor.
Evaluarea expunerii profesionale este dificil de realizat dat fiind variabilitatea mare a
proceselor tehnologice generatoare de pulberi i a tipurilor de pulberi care rezult din aceste
procese tehnologice.
Rezult, astfel c variabilitatea condiiilor de expunere este foarte mare. n acest context
complex, strategia de prelevare a pulberilor din aerul locurilor de munc este responsabil
pentru reprezentativitatea rezultatelor. De aceea, amplasamentul, momentul i durata prelevrii
unei probe precum i echipamentul de prelevare sunt elemente decisive pentru a garanta calitatea
evalurii.

V.2. Determinarea gravimetrica a pulberilor inhalabile i respirabile

Prezenta metod se refer la determinarea gravimetric a pulberilor fraciune inhalabil i
respirabil din atmosfera locurilor de munc. Metoda se aplic att n cazul prelevrii individuale
a probelor de aer ct i n cazul prelevrii la punct fix.
Domeniul de aplicare a metodei poate fi extins la toate particulele specifice de pulberi (metalice,
fum, praf de siliciu liber, etc), pentru a cror analiz este necesar determinarea gravimetric.
o SR ISO 5725 - 1 - 1997, Exactitatea (justeea i fidelitatea) metodelor de msurare a
rezultatelor masurarilor
o SR EN 481: 2003 Atmosfera Locului de munc Definirea fraciunilor dimensionale
o SR EN 482: 2010 Atmosfera Locului de munc Cerine generale pentru performana
instruciunilor de msurare a agenilor chimici
o SR EN 1232: 2002 Atmosfera Locului de munc Pompe pentru prelevarea
individual a agenilor chimici. Cerine i metode de ncercare.
o SR ISO 7708: 2000 Calitatea Aerului Definiiile fraciunilor dimensionale ale
particulelor pentru prelevarea legat de sntate
o SR EN 689: 2003 Atmosfera Locului de munc Ghid pentru evaluarea expunerii la
ageni chimici pentru compararea cu valori limit i strategia de msurare
o SR EN 13205:2001 - ATMOSFERA LOCULUI DE MUNC- Evaluarea performanei
instrumentelor pentru msurarea concentraiei de particule din aer
o Metode determinare a poluanilor din aer -1984
Aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un filtru. Prin cntrirea filtrului nainte i dup
filtrarea unui volum de aer se poate calcula cantitatea de pulberi aflate n suspensie n volumul de
aer filtrat.
o Ap bidistilat
o Filtre de membran din esteri ai celulozei (MCE) de porozitate 0,8m i cu diametrul
25mm
o Filtre din fibr de sticl cu diametrul 25mm
5. Aparatura
Echipamente de prelevare
55

o Pomp portabil de prelevare, conform cu cerinele formulate n SR EN 1232: 2002
debitul trebuie meninut cu o exactitate de 5 %
o Rotametru debitmetru extern
o Prelevator tip IOM pentru prelevare pulberi- fraciune nhalabil
o Prelevator tip ciclon Al i tip ciclon Higgins-Dewell din plactic (HD) pentru prelevri de
pulberi-fraciune respirabil
o Casete port-filtru
o Tub de legtur din plastic cu diametru potrivit, pentru a se realiza conexiunile ntre
prelevator , pompa i centura pentru ataarea pompei de corpul angajatului.
o Penset din material conductiv, cu vrf plat.
o Echipamente analiz
o Balan analitic cu un minim de sensibilitate de 0,01mg
o Exsicator
o Termometru
o Higrometru
6. Prelevare
Pregtirea echipamentului de prelevare
o Se cur prelevatoarelor nainte de utilizare. Se demonteaz prile care vin n contact cu
praful, se nmoaie in soluie de detergent, se cltesc bine cu ap bidistilat i se las s se usuce
nainte de reasamblare.
o Calibrarea se face pentru ntreg ansamblul de prelevare i nu numai pentru pomp. Prin
ansamblu de prelevare se nelege succesiunea de dispozitive legate n serie: caseta de prelevare
prevzut cu filtru, tub de legtur i pompa de aspiraie.
Procedura este urmtoarea:
a. se alctuiete ansamblul de prelevare;
b. se racordeaz prelevatorul la un debitmetru extern ( rotametru). Racordul de la prelevator
la debitmetru va fi ct mai scurt pentru a nu introduce cderi de presiune ce pot afecta
acurateea msurtorii.
c. se pornete pompa i se stabilete valoarea debitului prin ajustarea butonului de reglaj al
pompei i citire pe debitmetrul extern;
d. se detaeaz ansamblul de prelevare, se nlocuiete recoltorul cu unul identic i se
efectueaz prelevarea;
e. dup prelevare, se nlocuiete recoltorul utilizat la prelevare cu cel utilizat la calibrare i
se citete din nou valoarea debitului (debit post-prelevare). Valoarea sa nu trebuie s
difere cu mai mult de 5% fa de cea stabilit iniial. Dac se constat acest lucru,
pompa trebuie verificat i se reface prelevarea.
Not: unele pompe sunt prevzute cu rotametru. Acesta are rol de apreciere calitativ a
functionrii pompei i nu se utilizeaz la calibrarea debitului de prelevare.
Prelevarea propriu-zis
o Debitul de prelevare al probelor depinde de prelevatorul utilizat pentru fiecare fraciune
n parte. Pentru colectarea pulberi inhalabile se va folosi un prelevator tip IOM cu debitul de
recoltare de 2 l/min, iar pentru recoltarea pulberilor respirabile se vor folosi: prelevator tip
ciclon AL cu un debit de 2,5 l/min i prelevator ciclon tip Higgins-Dewell cu un debit de 2,2
l/min.
o Timpul de prelevare variaz in funcie de puterea de poluare a sursei, pentru a se evita
supraincrcarea filtrului cu praf (este recomandabil a nu se realiza o ncrcare peste 2 mg praf
total/filtru).
o Se vor preleva un numr de probe/schimb de lucru astfel nct s se acopere ntreaga
durat a schimbului de lucru.
o Volumul de aer care este recomandat pentru o prob de pulberi inhalabile este de minim
100 litri aer i pentru pulberi respirabile de 200 litri.
56

o n vederea prelevrii probelor de aer, caseta cu filtru se monteaz n prelevator, ntr-un
spaiu foarte curat, pentru a evita impurificarea i se vor lua msuri n timpul transportului n
scopul evitrii impurificrii.
o Pentru prelevarea corect a probelor, pompa se aeaz n spatele lucrtorului n dreptul
taliei prin fixare de o curea, astfel nct prelevatorul s fie n dreptul zonei de respiraie, la
aproximativ 30cm (la nivelul reverului).
o n cazul prelevrii la punct fix, se poziioneaz prelevatorul la locul de munc unde se
dorete a se efectua prelevarea.
o Se pornete pompa i se ncepe colectarea probei. Se urmrete periodic, dac pompa
funcioneaz corect n timpul de prelevare a probelor. n cazul n care sunt unele anomalii se
recalibreaz pomp i se anuleaz proba.
o n timpul prelevrii se verific periodic gradul de ncrcare al filtrului pentru evitarea
colmatrii sau supraincrcrii acestuia. Dac se constat colmatarea sau supraincrcarea filtrului
se oprete prelevarea i se monteaz un alt filtru, dup care se continu prelevarea.
o Pentru a determina dac s-a produs o contaminare a probelor n timpul prelevrii sau
manevrrii filtrelor, pentru fiecare serie de 1-10 probe se vor prepara doua filtre martor: acestea
vor fi montate n casete de filtru, vor fi transportate n teren, dar nu se va aspira aer prin ele.
Cnd se preleveaz peste 20 de probe, numrul de filtre martor trebuie s reprezinte 10% din
numrul probelor.
o Se oprete pompa de prelevare dup timpul (prestabilit), se scoate caseta cu filtru, se pune
capacul de protecie i se codific.
Transport i depozitare
Este recomandat ca transportul filtrelor s se fac n caseta n care acestea au fost prelevate,
avnd grij ca faa pe care s-au reinut particulele s fie orientat n sus. Cnd acest lucru nu este
posibil, filtrele se vor extrage cu grij din caseta n care au fost prelevate, cu ajutorul unei
pensete i se vor pune ntr-o alta caset de transport codificat.
7. Mod de lucru
o nainte de recoltarea probelor, filtrele se condiioneaz timp de 24 de ore ntr-un
exsicator.
o Dup cntrirea iniial filtrele se pun n casetele port-filtru, care se nchid cu capace de
protecie pentru prevenirea contaminrii accidentale i se codific. n cazul folosirii
prelevatorului IOM, filtrul se cntrete cu tot cu caseta, nainte i dup recoltare.
o Filtrele se cntresc la balana analitic cu o precizie de 0,01mg.
o Dup prelevare, filtrele recoltate se transport n laborator unde se pun n exsicator timp
de 24 ore, dup care se cntresc la aceeai balan la care s-a efectuat cntrirea iniial.
o nainte de fiecare cntrire se asigur c balana este la zero i se face reglarea ei dac
este necesar.
o Balana se calibreaz cu o greutate etalon- clasa M.
o n camera unde se efectueaz cntrirea la balana analitic, temperatura i umiditatea
relativ trebuie monitorizat, i meninute constante la valorile 20 1 C i 50 5 %.
Not: Este necesar ca ambele cntriri ale filtrului s fie realizate pe aceeai balan, de ctre
aceeai persoan i n aceleai condiii de mediu.
o Calcul concentraiei
Concentraia de pulberi se calculeaz cu urmtoarea formul:

t q
b b m m
m mg c
1000 ) ( ) (
) / (
1 2 1 2 3

(1)

57

unde:
m
1
masa filtrului nainte de prelevare, n mg
m
2
masa filtrului dup prelevare,n mg
b
1
masa filtrului martor nainte de prelevare, n mg
b
2
masa filtrului martor dup prelevare, n mg
q debitul pompei in L/minut
t durata prelevrii, n minute

Dac s-au efectuat mai multe prelevri pentru aceeai post de munc se calculeaz concentraia
medie ponderat cu timpul din mai multe rezultate pariale cu urmtoarea formul:

n
n n
t t t
t c t c t c
m mg c
...
...
) / (
2 1
2 2 1 1 3

(2)

unde:
c
1
, c
2
, ..., c
n
sunt rezultatele pariale
t
1
, t
2
, ..., t
n
sunt duratele de expunere corespunztoare concentraiilor c
1
, c
2
, ..., c
n
o Performantele metodei
- Sensibilitatea metodei de 0,01 mg.
- Limit de detecie depinde de balana analitic si poate fi estimat la 0,2 mg praf.
- Domeniul de lucru pentru pulberi inhalabile este de la 1 - 20mg/mc pentru 100 litri aer,
iar pentru pulberi respirabile intre 0,5 - 10mg/mc pentru 200 l aer.
9. Raport de analiz
Raportul de analiza trebuie sa conin urmtoarele indicaii:
- numele si adresa unitii unde s-au efectuat msurtorile;
- scopul procedurii de msurare;
- locul de munc;
- tipul de prelevare (individuala sau la punct fix) si identitatea persoanei din a crei zone
respiratorie a fost prelevat aerul (pentru o prelevare individuala) sau amplasarea punctului de
prelevare (pentru o prelevare la punct fix);
- metoda de analiza utilizata;
- tipul pompei utilizate pentru prelevare si identificarea acesteia (seria);
- momentul prelevrii: ora de ncepere, terminare si durata de prelevare;
- debitul utilizat, exprimat n litri/minut;
- volumul de aer prelevat la temperatura mediului ambiant, n litri;
- orice interferenta cunoscuta si/sau evenimentele sau factorii susceptibili a influenta
apreciabil rezultatele;
- descrierea conditiilor de munca, inclusiv conditiile de lucru din timpul masuratorilor;
- concentratiile expunerii profesionale (concentratii medii ponderate n functie de timp,
exprimate n mg/m3 de aer);
- rezultatul compararii concentratiilor masurate cu valoarea limita;
- data analizei
10. Bibliografie
o NIOSH. Nuisance dust, total. Manual of Analytical methods 3rd Ed. , Vol. 1, Method
0500 (1984).
o NIOSH. Nuisance dust, respirable. Manual of Analytical Methods. 3rd Ed. Vol. 1,
Method 0600 (1984).
58

o Health and Safety Executive General methods for sampling and gravimetric analysis of
respirable and total inhalable dust MDHS 14/2 HSE Books 1977 ISBN 0 7176 1295 3
o Health and Safety Executive Methods for the Determination of Hazardous Substances
MDHS Series HSE Books
o NF X 43-259 Qualit de lair - Air des lieux de travail - Prlvement individuel ou
poste fixe de la fraction alvolaire de la pollution particulaire - Mthode de sparation par
cyclone. (1)
o MDHS 14/3General methods for sampling and gravimetric analysis of respirable and
inhalable dust, february 2000
o Evaluarea expunerii profesionale la pulberi- ghid practic Rodica Stnescu Dumitru,
Ruxandra Carmen Artenie, Mircea Tat, 2002
o Determination of respirable and total inhalable dust in air-gravimetric method,
MTA/MA-014/R88
o Echantillonnage des aerosols Generalites- fiche HI , 15/03/2001
o Concentration ponderale dùn aerosol, fiche 002/V01/02, 18/05/2009

Verificat n Laboratorul Sntate Ocupaional CRSP TIMIOARA

V.3. Determinarea gravimetrica a pulberilor toracice
(Cadrul legislativ n Romnia nu prevede nc valoarea limit pentru expunerea la pulberi-
fraciunea toracic).

Prezenta metod se refer la determinarea gravimetric a pulberilor fraciune toracic din
atmosfera locului de munc.
2. Referinte normative
o SR ISO 5725 - 1 - 1997, Exactitatea (justetea si fidelitatea) metodelor de masurare si
a rezultatelor masurarilor
o SR EN 481: 2003 Atmosfera Locului de munc Definirea fraciunilor dimensionale
o SR EN 482: 2010 Atmosfera Locului de munc Cerine generale pentru performana
instruciunilor de msurare a agenilor chimici
o SR EN 1232: 2002 Atmosfera Locului de munc Pompe pentru prelevarea
individual a agenilor chimici. Cerine i metode de ncercare.
o SR ISO 7708: 2000 Calitatea Aerului Definiiile fraciunilor dimensionale ale
particulelor pentru prelevarea legat de sntate
o SR EN 689: 2003 Atmosfera Locului de munc Ghid pentru evaluarea expunerii la
ageni chimici pentru compararea cu valori limit i strategia de msurare
o SR EN 13205:2001 - ATMOSFERA LOCULUI DE MUNC- Evaluarea performanei
instrumentelor pentru msurarea concentraiei de particule din aer
o Metode determinare a poluanilor din aer -1984
Aspirarea unui volum cunoscut de aer printr-un filtru. Prin cntrirea filtrului nainte i dup
filtrarea unui volum de aer se poate calcula cantitatea de pulberi aflate n suspensie in volumul de
aer filtrat.
o Ap bidistilat
o Filtre de membran din esteri ai celulozei (MCE) de porozitate 0,8m si cu diametrul
25mm i 37mm
o Filtre din fibr de sticl cu diametrul 25mm i 37mm
59

5. Aparatura
Echipamente de prelevare
o Pomp portabil de prelevare, conform cu cerinele formulate n SR EN 1232: 2002
debitul trebuie meninut cu o exactitate de 5 %
o Rotametru debitmetru extern
o Prelevator tip GK2.69 care include ca preselector un ciclon
o Prelevator tip CIP10-T care include ca preselector un ciclon
o Casete port-filtru
o Tub de legtur din plastic cu diametru potrivit, pentru a se realiza conexiunile intre
prelevator, pompa i centura pentru ataarea pompei de corpul angajatului.
Penset din material conductiv, cu vrf plat.
Echipamente analiz
o Balan analitic cu un minim de sensibilitate de 0,01mg
o Exsicator
o Termometru
o Higrometru
6. Prelevare
Pregtirea echipamentului de prelevare
o Se cur prelevatoarelor nainte de utilizare. Se demonteaz prile care vin n contact cu
praful, se nmoaie in soluie de detergent, se cltesc bine cu ap bidistilat i se las s se usuce
nainte de reasamblare.
o Calibrarea se face pentru ntreg ansamblul de prelevare si nu numai pentru pompa. Prin
ansamblu de prelevare se nelege succesiunea de dispozitive legate n serie: caseta de prelevare
prevzut cu filtru, tub de legtura si pompa de aspiraie.
Procedura este urmtoarea:
a. se alctuiete ansamblul de prelevare;
b. se racordeaz prelevatorul la un debitmetru extern ( rotametru). Racordul de la prelevator
la debitmetru va fi cat mai scurt pentru a nu introduce cderi de presiune ce pot afecta
acurateea msurtorii.
c. se pornete pompa si se stabilete valoarea debitului prin ajustarea butonului de reglaj al
pompei i citire pe debitmetrul extern;
d. se detaeaz ansamblul de prelevare, se nlocuiete recoltorul cu unul identic si se
efectueaz prelevarea;
e. dupa prelevare, se nlocuiete recoltorul utilizat la prelevare cu cel utilizat la calibrare i
se citeste din nou valoarea debitului (debit post-prelevare). Valoarea sa nu trebuie sa
difere cu mai mult de 5% fa de cea stabilita iniial. Dac se constat acest lucru,
pompa trebuie verificata si se reface prelevarea.
Not:unele pompe sunt prevzute cu rotametru. Acesta are rol de apreciere calitativ a
functionrii pompei i nu se utilizeaz la calibrarea debitului de prelevare.
Prelevarea propriu-zis
o Debitul de prelevare al probelor depinde de prelevatorul utiliza.. Pentru colectarea
pulberi fraciune toracica se va folosi un prelevator tip GK2.69 cu debitul de recoltare de 1,6
L/min si un prelevator tip CIP10-T cu un debit de 7 L/min
o Timpul de prelevare variaz in funcie de puterea de poluare a sursei, pentru a se evita
supraincarcarea filtrului cu praf (este recomandabil a nu se realiza o incrcare peste 2 mg praf
total/filtru).
o Se vor preleva un numr de probe/schimb de lucru astfel inct sa se acopere intreaga
durata a schimbului de lucru.
60

o In vederea prelevrii probelor de aer, caseta cu filtru se monteaz in prelevator, intr-un
spaiu foarte curat, pentru a evita impurificarea i se vor lua masuri in timpul transportului in
scopul evitrii impurificrii.
o Pentru prelevarea corect a probelor, pompa se aeaz n spatele lucrtorului n dreptul
taliei prin fixare de o curea, astfel nct prelevatorul s fie n dreptul zonei de respiraie, la
aproximativ 30cm (la nivelul reverului).
o Se pornete pompa i se ncepe colectarea probei. Se urmrete periodic, dac pompa
funcioneaz corect n timpul de prelevare a probelor. In cazul in care sunt unele anomalii se
recalibreaz pomp i se anuleaz proba.
o In timpul prelevrii se verific periodic gradul de ncrcare al filtrului pentru evitarea
colmatrii sau supraincrcrii acestuia. Dac se constat colmatarea sau supraincrcarea filtrului
se oprete prelevarea i se monteaz un alt filtru, dup care se continu prelevarea.
o Pentru a determina daca s-a produs o contaminare a probelor in timpul prelevrii sau
manevrrii filtrelor, pentru fiecare serie de 1-10 probe se vor prepara doua filtre martor: acestea
vor fi montate in casete de filtru, vor fi transportate in teren, dar nu se va aspira aer prin ele.
Cnd se preleveaza peste 20 de probe, numarul de filtre martor trebuie sa reprezinte 10% din
numarul probelor.
o Se oprete pompa de prelevare dup timpul (prestabilit), se scoate caseta cu filtru, se pune
capacul de protecie i se codific.
Transport i depozitare
Este recomandat ca transportul filtrelor sa se fac in caseta in care acestea au fost prelevate,
avnd grij ca faa pe care s-au reinut particulele sa fie orientat in sus. Cnd acest lucru nu este
posibil, filtrele se vor extrage cu grij din caseta in care au fost prelevate, cu ajutorul unei
pensete si se vor pune intr-o alta caseta de transport codificat.
7. Mod de lucru
o nainte de recoltarea probelor, filtrele se condiioneaz timp de 24 de ore intr-un
exsicator.
o Dup cntrirea iniial filtrele se pun n casetele port-filtru , care se nchid cu capace de
protecie pentru prevenirea contaminrii accidentale i se codific.
o Filtrele se cntresc la balana analitic cu o precizie de 0,01mg.
o Dup prelevare, filtrele recoltate se transport n laborator unde se pun n exsicator timp
de 24 ore, dup care se cntresc la aceeai balan la care s-a efectuat cntrirea iniial.
o nainte de fiecare cntrire se asigur c balana este la zero i se face reglarea ei dac
este necesar.
o Balana se calibreaz cu o greutate etalon- clasa M.
o n camera unde se efectueaz cntrirea la balana analitic, temperatura i umiditatea
relativ trebuie monitorizat, i meninute constante la valorile 20 1 C i 50 5 %.
Not: Este necesar ca ambele cntriri ale filtrului s fie realizate pe aceeai balan, de ctre
aceeai persoan i n aceleai condiii de mediu.
o Calcul concentraiei
Concentraia de pulberi se calculeaz cu urmtoarea formul:

t q
b b m m
m mg c
1000 ) ( ) (
) / (
1 2 1 2 3
(1)

unde:
m
1
masa filtrului nainte de prelevare, n mg
m
2
masa filtrului dup prelevare,n mg
61

b
1
masa filtrului martor nainte de prelevare, n mg
b
2
masa filtrului martor dup prelevare, n mg
q debitul pompei in L/minut
t durata prelevrii, n minute
Dac s-au efectuat mai multe prelevri pentru aceeai post de munc se calculeaz concentraia
medie ponderat cu timpul din mai multe rezultate pariale cu urmtoarea formul:

n
n n
t t t
t c t c t c
m mg c
...
...
) / (
2 1
2 2 1 1 3

(2)

unde:
c
1
, c
2
, ..., c
n
sunt rezultatele pariale
t
1
, t
2
, ..., t
n
sunt duratele de expunere corespunztoare concentraiilor c
1
, c
2
, ..., c
n
o Performantele metodei
Sensibilitatea metodei de 0,01 mg.
9. Raport de analiz
Raportul de analiza trebuie sa conin urmtoarele indicaii:
- numele si adresa unitii unde s-au efectuat msurtorile;
- scopul procedurii de msurare;
- locul de munc;
- tipul de prelevare (individuala sau la punct fix) si identitatea persoanei din a crei zone
respiratorie a fost prelevat aerul (pentru o prelevare individuala) sau amplasarea
punctului de prelevare (pentru o prelevare la punct fix);
- metoda de analiza utilizata;
- tipul pompei utilizate pentru prelevare si identificarea acesteia (seria);
- momentul prelevrii: ora de ncepere, terminare si durata de prelevare;
- debitul utilizat, exprimat n litri/minut;
- volumul de aer prelevat la temperatura mediului ambiant, n litri;
- orice interferenta cunoscuta si/sau evenimentele sau factorii susceptibili a influenta
apreciabil rezultatele;
- descrierea conditiilor de munca, inclusiv conditiile de lucru din timpul masuratorilor;
- concentratiile expunerii profesionale (concentratii medii ponderate n functie de timp,
exprimate n mg/m3 de aer);
- rezultatul compararii concentratiilor masurate cu valoarea limita;
- data analizei
10. Bibliografie
o Health and Safety Executive Methods for the Determination of Hazardous Substances
MDHS Series HSE Books
o NF X 43-259 Qualit de lair - Air des lieux de travail - Prlvement individuel ou
poste fixe de la fraction alvolaire de la pollution particulaire - Mthode de sparation par
cyclone. (1)
o Echantillonnage individuel dùn aerosol par làppareil CIP 10, fiche H4 25,10/2002
o Evaluarea expunerii profesionale la pulberi- ghid practic Rodica Stnescu Dumitru,
Ruxandra Carmen Artenie, Mircea Tat, 2002
o Echantillonnage des aerosols Generalites- fiche HI , 15/03/2001

62

VI. METODE ANALITICE DE DETERMINARE A UNOR INDICATORI
BIOTOXICOLOGICI

VI.1. Determinarea acetonuriei

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea acetonei n urina muncitorilor expui
profesional la aceton.
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n Metode de investigare n
domeniul medicinii muncii M.S. 1978.
3. Principiu
Acetona da cu aldehida salicilic, n mediu alcalin, un produs de condensare galben portocaliu
colorimetrabil.
o Bisulfit de sodiu, solutie 0,5% (se prepara la ntrebuinare);
o Hidroxid de potasiu, soluie 64%;
o Aldehida salicilica, soluie 10% n alcool etilic 96% (se prepar la ntrebuinare);
o Acid sulfuric d=1,84, diluat 1:10 (in volume);
o Standard stoc: se face prin cntrire o soluie de aceton n bisulfit de sodiu, de ordinul a
1 mg aceton pe mililitru (sunt suficiente 2 3 picturi de aceton). Standard de lucru: se
dilueaz cu apa standardul stoc pentru a se obine o soluie cu 10 g aceton/mL.
o Celule de difuzie;
o Baloane cotate;
o Eprubete gradate;
o Pipete gradate;
o Pipete automate reglabile.
5. Aparatura
o Recipiente pentru recoltarea urinii.
Aparatura analitica
o Balana analitic;
o Spectrofotometru UV/VIS;
o Cuvete de sticl;
o Baie de ap;
o Etuva;
6. Prelevare
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urina, recoltat n timpul lucrului sau la scurt timp dup expunere.
Transport i conservare
Probele se transport n cel mai scurt timp la laborator, pe perioada transportului probele trebuie
s fie nchise etan, pot fi conservate pentru o perioad scurta de timp la 2-8C, se evit procesul
de congelare decongelare a probei.
7. Mod de lucru
Difuziunea este realizat n celule de difuzie. n compartimentul central al celulei se pune 1 mL
soluie de bisulfit de sodiu (4.1.) iar n cel periferic se pipeteaz succesiv: 1 mL urina, 5 mL ap
i 1 mL acid sulfuric (4.4.). Se in celulele 60 minute la etuva la 60C.
ntr-o eprubet gradat se reia cantitativ coninutul compartimentului central splnd cu poriuni
mici de soluie de bisulfit de sodiu. Se aduce volumul la 6 mL.
63

Se pipeteaz ntr-o eprubeta 3 mL (corespunzator prob) se adaug 2 mL hidroxid de potasiu
(4.2.) i 1 mL aldehida salicilica (4.3.). Se amestec i se ine 20 minute n baie de apa la 50C.
Se rcete i se msoar extincia la 455 nm n cuveta de 1 cm, n compensaie avnd un blanc al
reactivilor fr coninut de aceton.
o Calculul concentratiei
Se face utiliznd curba de etalonare.Se prepar cel puin cinci soluii standard de lucru, utiliznd
soluia standard stoc de aceton de 10 g/mL. Acestea trebuie s acopere domeniul de
concentraie cuprins ntre 5 25 g.
Soluiile standard de lucru i blancul se prelucreaz urmrind aceleai etape, ca i probele (pct.7).
o Calcul
Concentraia acetonei n urin se calculeaz pe baza curbei de etalonare.
o Selectivitate
La aceeai lungime de und pot interfera alte cetone.
o Limita de deteie i intervalul de lucru
Limita de detecie analitic este de aprox. 0.3 g/ prob.
Intervalul de lucru: 1 150 g aceton / prob.
9. Bibliografie
o Metode de investigare n domeniul medicinii muncii 1978.
o Elkins H. The Chemistry of Industrial Toxicology, New York, 1959

Metoda verificata n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucuresti

VI.2. Determinarea tioeterilor urinari

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea tioeterilor n urina muncitorilor expui
profesional la substane electrofile.
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n The applicability of the
measurement of urinary thioethers Aringer L., Lof A., Elinder C.G. 1991
3. Principiu
Tioeterii urinari sunt hidrolizai la gruparile SH care reacionez cu Reactivul Ellman rezultnd
un compus slab glbui spectrofotometrabil.
o N-acetil-L-cisteina sol. 1mM;
o Tompon fosfat 0,6M, pH 7,1. Se prepar prin adugarea de 110ml acid fosforic 0,6M la
890ml fosfat disodic 0,6M, sub control pH-metric;
o Citrat de sodiu 1%;
o Acetat de etil;
o Reactiv Ellman: 5,5ditiobis-(2-nitrobenzoic acid), DTNB. Se prepar prin dizolvarea a
0,4g de DTNB ntr-un litru de citrat de sodiu 1%. (Reactivul este stabil o sptmn pstrat la
ntuneric);
o Acid clorhidric 4M;
o Acid clorhidric 4M n tampon fosfat 0,4M pH 7,1 (preparat prin adaugare de HCl la
tampon fosfat 0,6M) ;
o Ac id ascorbic 2mM;
o Hidroxid de sodiu 4M;
64

o Pipete automate reglabile, baloane cotate, eprubete gradate, sticlue brune de 5ml, plnii
de separare.
5. Aparatura
o Recipiente pentru recoltarea urinii.
Aparatura analitic
o Balana analitic;
o Spectrofotometru UV/VIS;
o Cuvete de sticl;
o Baie de ap;
o Etuva;
o Butelie de azot.
6. Prelevare
Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urin, recoltat la sfritul schimbului de lucru.
Transport i conservare
s fie nchise etan, pot fi conservate pentru o perioad scurt de timp la -20C, se evit
procesul de congelare decongelare a probei.
7. Mod de lucru
Urina decongelat se centrifugheaz la 3000 x g timp de 10 minute. Se ia n lucru un alicot de
5ml de supernatant de urin care se pipeteaz ntr-o plnie de separare, se ajusteaz pH-ul la
1,6 1,9 cu HCl 4M i se adaug 8 ml acetat de etil. Plniile se agit puternic timp de 10
min.Dup separarea stratului organic ntr-o capsul, se repet procedeul de extracie a stratului
apos cu nc 8 ml de acetat de etil. Extractele de acetat se evapor la sec folosind un evaporator
rotativ sau pe baie de ap. Reziduul rezultat este dizolvat n 2ml acid abscorbic 2mM.
Pentru hidroliz se ia 1 ml soluie de extract care se transfer n sticlue de culoare nchis i se
amestec cu 0,5ml NaOH 4M. Aerul din sticlu este nlocuit cu azot prin trecerea unui curent
din acest gaz. Sticluele bine nchise sunt inute la 100
0
C timp de 60min. Ulterior probele sunt
rcite timp de 15 min i sunt neutralizate cu 0,5ml acid clorhidric 4M n tampon fosfat. Un alicot
de 0,5ml din soluia rezultat este transferat ntr-o alt sticlu n care se introduc 0,3ml reactiv
Ellman i 2ml tampon fosfat 0,6M.
Probele rezultate sunt inute la ntuneric timp de 30min i se citesc absorbantele la
spectrofotometru la 412nm.
o Calcul
Concentraia de tioeteri n urin se calculeaz pe baza curbei de etalonare. Curba de etalonare se
realizeaz cu N-acetil-L-cisteina de concentraii cuprinse ntre 0,1 0,5mM.
Pentru fiecare prob de urin se determin i creatinina prin reacia Jaffe. Concentraiile de
tioeteri se exprim n mmol/mol creatinin.
o Selectivitate
Metoda nu este specific, rezultatele pot fi influenate de ali factori exogeni cum ar fi: fumatul,
unele alimente ce conin sulf sau unele medicamente.
o Reproductibilitatea metodei, intervalul de lucru, limita de detecie
Coeficientul de variabilitate ntre determinrile efectuate n zile diferite este de 10,53% iar,
pentru cele din aceeai zi de 3,59%.
Intervalul de lucru: 0,1 0,5mM N-acetil-L-cistein.
Limita de detecie: 0,029mM N-acetil-L-cistein.
9. Bibliografie
o Aringer L., Lof A., Elinder C.G The applicability of the measurement of urinary
thioethers Int. Arch. Occup. Environ Health 1991,63: 341 - 346
65

o Burgaz S., Bayhan A., Karakaya A.E. Thioether excretion of workers exposed to
bitumen fumes. - Int. Arch. Occup. Environ Health 1988, 60: 347 349
o Antero A. M.D. Biological monitoring today and tomorow. Scand. J. Work Environ.
Health 1994, 20 special issue: 46 58

Metod adaptat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucuresti

VI.3. Determinarea cromului n urin prin GF- AAS

Cromul este ntre primele douzeci dintre cele mai abundente elemente n scoara terestr i este
larg rspndit n mediul nconjurtor. Niciodat nu se gsete n stare metalic i foarte rar n
stare hexavalent, cel mai larg rspndit fiind n stare trivalent ca oxid n combinaie cu oxizii
altor metale. Apa i aerul conin n mod frecvent urme de crom. Media cantitii de crom ingerate
zilnic de aduli a fost determinat i este de aproximativ 25g.
Indicatorii propui pentru monitorizarea biologic a muncitorilor expui la crom(VI) sunt:
concentraia de crom n urin(cea mai important) i eritrocite(se poate determina i cromul n
firele de pr, dar rezultatele sunt dificil de interpretat).
Ionii de crom trivaleni sunt rapid eliminai din snge. Ionii de crom hexavaleni sunt reinui mai
mult timp datorit ptrunderii n celulele roii ale sngelui. Urmeaz eliminarea din snge,
cromul fiind excretat n principal n urin.
WHO Guidelines -Biological monitoring of chemical exposure in the workplace- volumul I,
1996
Cromul n urin este determinat prin spectrometrie de absorbie atomic cu cuptor de grafit
(GF-AAS) cu corectarea fundalului. Probele pot fi analizate folosind metoda cu standard extern
sau metoda ce utilizeaz standard intern.
Pascal i Baily considera c efectul matriceal nu este destul de semnificativ astfel nct s
influeneze rezultatul final i prefera calibrarea folosind standarde apoase. Probele de urin se
dilueaz cu HNO
3
conc. (la 10ml de urin se adaug 0.1 ml de acid), iar msurarea absorbantei
se face cu ajutorul efectului Zeeman.
Proba de urin diluat este analizat direct, fr un tratament suplimentar.
Interferena cu matricea biologic poate fi uor eliminat prin folosirea coreciei
backgroundului(cu lampa de cuart cu halogen sau compensarea Zeeman) i procedeul cu
standard extern.
4. Reactivi i aparatura
Trebuie folosii doar reactivi cu grad mare de puritate:
o HNO
3
, conc.; HNO
3
1% (v/v)
o standard calibrare: 1g/l;
o sol de lucru 20g/l
o Mg(NO
3
) x 6 H
2
O sol. 0.1% n apa - modificator chimic
o Sticlrie de laborator uzual.
Aparatele necesare sunt:
o Spectrometru de absorbie atomic cu corectarea fundalului (efect Zeeman sau lampa de
cuart cu halogen);
o cuptor de grafit;
o lampa catodica specifica pentru crom;
o tub de grafit;
66

o nveli pirolitic.
5. Prelevarea probelor
Probele de urin trebuie recoltate la sfritul schimbului de lucru, iar subiectul trebuie s fie
expus cel puin 2 ore pentru ca rezultatul s fie semnifivativ pentru un schimb ntreg. Probele
trebuie s fie recoltate dup ce muncitorii i-au schimbat hainele, pentru a diminua contaminarea
probelor. Urina trebuie s fie recoltat n recipiente din polietilen i polipropilen n soluii
diluate de acid(se spal o data cu HNO
3
1mol/L i apoi cu ap ultrapur de dou ori, dup care se
usuc).
6. Conservare, transport i depozitare
Probele de urin ar trebui analizate ct mai curnd posibil dup colectare. Este recomandat
acidularea probelor cu HNO
3
sau CH
3
COOH. Conservanilor folosii pentru stabilizarea urinii
trebuie s li se verifice coninutul de crom nainte de utilizare. n cazul n care se supun analizei
n timp de 14 zile, probele pot fi refrigerate, altfel ele trebuie congelate. Odata decongelate
probele trebuie lucrate deoarece o noua congelare presupune modificarea proprietilor probei.
7. Procedeul de lucru
Probele de urin se aciduleaza ( la 10ml urin se adaug 0.1 ml acid azotic conc. )
Se prepar soluia standard de lucru de conc. 20g/l .
Se pun n locurile corespunztoare blancul (HNO
3
1%), soluia standard , modificatorul chimic i
probele de urin.
Spectrometru de absorbie atomic:
Lungimea de und - 357,9nm
Corectarea fundalului - compensarea Zeeman sau lampa de cuart cu halogen
Determinarea analitic - determinarea nlimii picului
Cuptor de grafit
Gaz inert - argon
Volumul injectat - 20L
Programul temperatur- timp n cazul cuptorului de grafit depinde de tipul aparatului i sunt n
meniul acestuia

Etapa Temperatura
0
C Timp rampa (s ) Timp retinere (s )
Uscare 90 5 10
Uscare 120 10 10
Piroliza 1500 5 20
Atomizare 2500 0 5
Curatire 2600 1 3
Racire 20 3 5

8. Criterii analitice de baza
Limita de detecie este de aproximativ 0,1g/L (2 nmol/L);
Capacitatea de recuperare a metodei este de 96%;
9. Surse de posibile erori
O atenie deosebit trebuie acordate pericolului contaminrii cu factori exogeni.Din acest motiv
se recomand curarea foarte strict a tuturor recipientelor, eprubetelor i a sticlriei folosite.
Substanele chimice folosite trebuie s fie de nalt puritate; blancurile reactivilor trebuie s fie
msurate pentru fiecare set de probe.Blancurile probelor din apa pur trebuie s fie stocate n
containere speciale.
10. Alte metode analitice
Alte metode pentru determinarea cromului n materiale biologice sunt:
o chemiluminescenta
o spectrometrie de absorbie atomic combinat cu plasma cuplat inductiv.

67

11. Interferene neanalitice
Solubilitate, valena i forma fizic (fum, praf, ceata) a cromului determin absoria, distribuia,
i eliminarea cromului din corp. Deci, muncitorii ce lucreaz ntr-o larg varietate de domenii pot
fi expui la concentraii asemntoare de compui cu crom, dar, datorit factorilor de mai sus vor
excreta diferit cromul. Distribuia i eliminarea cinetic a cromului acumulat sunt afectate de
durata expunerii ntr-o zi de lucru la fel ca i de perioada ct au fost expusi.
Determinarea concentraiei de crom n urin la sfritul zilei de munc pare s fie un bun
indicator de expunere la compuii solubili cu crom(VI); totui, ionii de crom(III) contribuie
probabil cel puin n aceeai msur la nivelul cromului n urin.
12. Bibliografie
o WHO Guidelines -Biological monitoring of chemical exposure in the workplace-
volumul I, 1996
o Paschal DC, Bailey GG. Determination of chromium in urine with graphite furnance
atomic absorbtion spectroscopy using Zeeman correction. Atomic Spectroscopy 1991;12:151-4.
o Burguera J.L., Burguera M., Rondon C., Rodriguez L., Carrero P., - Determination of
chromium in urine by electrothermal atomic absorption spectrometry using different chemical
modifiers, J. Anal. Atomic Spectrometry, 14, 821-825, 1999

Metod adaptat i verificat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucureti

VI.4. Determinarea porfirinelor totale urinare

Metoda se utilizeaz ca indicator de expunere n intoxicaiile cu plumb.
La elaborarea metodei s-a utilizat ca material de referin metoda Determinarea cromatografic-
spectrofotometric a porfirinelor totale, corespunzator tehnicii firmei FAR (Italia).
Porfirinele se absorb pe raina anionic coninut n dou coloane cromatografice.
Uro- i copro-porfirinele sunt luate mpreun din prima coloan i dup splarea cu tampon
acetat se separ uro-porfirinele din a doua coloan.
Porfirinele se determin cantitativ prin aplicarea formulei lui Allen.
o Acid hidrocloric, 3mol/l (Reactiv 1)
o Tampon acetate, 5mol/l (Reactiv 2)
o Carbonat de sodiu ,p.a
o Acid acetic glacial.
5. Aparatura
o Spectrofotometru cu selectarea exacta a lungimilor de und necesare msurrii
absorbantei porfirinelor (380nm, 400 407nm, 430nm).
o Baie de ap.
6. Prelevarea probelor
Se colecteaz urina din 24 ore i se pstreaz n spaiu ferit de lumina(pn la analiz). Se
recomand efectuarea analizei din urina proaspt recoltat sau cel mult pn la trei zile, dac este
condiionat la pH 6 9.
7. Modul de lucru
o Determinarea porfirinelor totale prin metoda cromatografic-spectrofotometric.
Se msoar volumul de urin colectat n 24ore.
Se face o soluie de carbonat de sodiu 1% (n urin).
68

Se pstreaz proba, astfel pregtit la temperatura camerei, la lumin, 24 ore, nainte de analiza
propriu-zis.
Proba astfel pregtit este stabil o sptmn.
Se corecteaz pH-ul urinar la pH = 5 cu acetid acetic i se fierbe, 30 minute, pe baie de ap.
o Analiza cromatografic
Se rup capetele coloanelor cromatografice.Se las s se scurg total lichidul coninut.
Pentru fiecare prob de urin sunt necesare dou coloane cromatografice.
Separarea consta n pipetarea n dou coloane dup modelul:

Coloana 1
(copro+uro)
Coloana 2
Urina 2,0 ml 2,0 ml Se ndeprteaz eluatul
Reactiv 2 - 20,0 ml Se ndeprteaz eluatul
Apa distilata 10,0 ml 2,0 ml Se ndeprteaz eluatul

Fiecare coloan se aeaz deasupra unor eprubete. Se pipeteaz n fiecare coloan cte 5,0ml
Reactiv 1. Eluatul se colecteaz n eprubet.Se pipeteaz nc cte 5,0ml Reactiv 1 i se
colecteaz eluatul. Eluatul final, corespunztor fiecarei coloane cromatografice trebuie s fie de
10,0ml.
Se agit eprubetele nainte de msurarea spectrofotometric.
Se citete densitatea optic a eluatelor (10ml) la 380nm i maxime de absorbie ntre
400 407nm i la 430nm, fa de Reactivul 1 (corecia Allen).
Observaii:
Datorit prezenei reactivilor 1 i 2, carbonatul de sodiu cu care s-a tratat urina poate produce
CO
2
, care apare sub forma unor bule de gaz n interiorul coloanei. Acestea se pot elimina
nclinnd uor coloana cromatografic.
8. Calculul i exprimarea rezultatelor
o Calculul i exprimarea rezultatelor pentru metoda cromatografic-spectrofotometric.
Se calculeaz diferena ntre valorile absorbantei (DA) msurate, aplicnd formula:

DA = 2A(400 407nm) [A(380nm) + A(430nm)]
unde
A==valoarea absorbantei.
Coloana 1
Porfirine totale (g/l) = DA x 3857
g porfirine totale/l x Volumul urinar/24h = g porfirine totale/24h
Coloana 2
Uroporfirine (g/l) = DA x 4266
g uroporfirine/l x Volumul urinar/24h = g uroporfirine /24h
coproporfirine (g/l) = porfirine totale (g/l) uroporfirine (g/l)
g coproporfirine/l x Volumul urinar/24h=g coproporfirine/24h.
o Valori de referin
porfirine totale < 220 g/24ore
coproporfirine 35 150 g/24ore
uroporfirine 15 50 g/24ore
o Msurarea
Calculul i exprimarea rezultatelor prin aplicarea metodei florimetrice.
o Sensibilitatea metodei
Spectrofotometric: 150 g/l
o Linearitatea metodei : pn la 13 mg/l.

69

9. Observaii
n unele cazuri,eliminarea coproporfirinelor nu se poate face n totalitate, datorit
caracteristicilor structurale, astfel nct o parte din acestea vor fi eluate mpreun cu
uroporfirinele.

Metoda verificata in cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucureti

VI.5. Determinarea acidului delta aminolevulinic (DAL) urinar

Metoda se utilizeaz ca indicator de expunere n intoxicaiile cu plumb.
n testele screening utilizate pentru evidenierea intoxicaiei cu plumb, la muncitorii expui
profesional, se recomand asocierea determinrii acidului delta-aminolevulinic (DAL) cu
porfobilinogenul (PBG) urinar.
2. Referinte normative
La elaborarea metodei s-a utilizat ca material de referina metoda Determinarea acidului delta
aminolevulinic urinar corespunztoare tehnicii firmei FAR (Italia).
Plumbul inhib activitatea DAL, n biosinteza hemoglobinei, cataliznd condensarea a dou
molecule de DAL cu formarea unei molecule de porhobilinogen (PBG).
La sinteza hemoglobinei particip o mic cantitate de DAL, restul fiind eliminat urinar, creterea
acesteia peste nivelul normal fiind un indicativ de expunere la plumb.
Determinarea DAL-ului, eliminnd interferenele date de PBG se face prin trecerea probei de
urin printr-o coloan cromatografic cu rasina schimbtoare de ioni, anionic; eluatul obinut se
dozeaz cantitativ printr-o reacie Ehrlich.
4.1. Acetat de sodiu (Reactiv 1)
4.2. Acetilacetona (Reactiv 2)
4.3/A DMAB (predozat_ - (flacon)
4.3/B acid acetic
4.3/C acid percloric
4.4. Standard de acid delta aminolevulinic (0,2g/l)
4.5. Microcoloane cromatografice
5. Aparatura
o Baie de ap (pentru 100
0
C)
o Spectrofotometru sau filtru fotometric de 553nm (52o 570nm).
6. Prelevare
Se colecteaz urina din 24 ore ,peste care se adaug acid clorhidric concentrat i se corecteaz
pH-ul urinii la 6.
Se agit bine, se msoar volumul de urin i se pstreaz la temperaturi cuprinse ntre 2-8
0
C.
Acidul delta-aminolevulinic este stabil cel mult o lun, n urina colectat, cu condiia de a fi
pstrat la t=2-8
0
C i pH-urinar <6.
Pregtirea reactivilor
o Reactivul 3 (3/A + 3/B)
Se dizolv coninutul flaconului de reactiv 3/A ntr-un flacon de reactiv 3/B i se amestec bine
pnp la solubilizarea complet. Reactivul obinut este stabil 6 luni, pstrat la temperaturi
cuprinse ntre 2-8
0
C.
o Reactivul Ehrlich (3 + 3?C)
70

Se adaug 1,9ml de reactiv 3/C la 10ml Reactiv 3 i se amestec bine, pn la obinerea unei
soluii omogene. Soluia obinut este suficient pentru 5 determinri. Dac este necesar, se va
prepara o cantitate mai mare. Fiecare microcoloan cromatografic necesit 2ml de reactiv.
Stabilitate: 6 ore la temperatura camerei.
7. Mod de lucru
o Analiza cromatografic
Se desface microcoloana i se rupe manual captul prin care se elimin eluatul. Se las s se
scurg tot lichidul din interiorul coloanei.
Se pipeteaz n coloan urmatoarele:

Apa distilat 10,0ml Se elimin coninutul
Urina 1,0ml Se elimin coninutul
Apa distilat 20,0ml Se elimin coninutul

Se aeaz microcoloana peste o eprubet goal i se pipeteaz:

Reactivul 1 10,0ml Se colecteaz eluatul DAL

o Analiza colorimetric
Se amestec bine eluatul colectat n eprubet i se aleg eprubete pentru:
R/B blancul reactivilor
S proba
ST standard

B reactiv Proba Standard
Eluat DAL - 2,0ml -
Reactiv 4 - - 0,02ml
Reactiv 1 2,0ml - 1,98ml
Reactiv 2 0,04ml 0,04ml 0,04ml

Se agit eprubetele i se incubeaza 10 minute n ap, la fierbere.
Se rcesc sub jet de ap rece, se agit bine i se continu analiza prin pipetarea n trei noi
eprubete, asfel:

B reactiv Proba Standard
Solutie preincubata 1,0ml 1,0ml 1,0ml
Reactiv Ehrlich 1,0ml 1,0ml 1,0ml

Se amestec i se incubeaz la temperatura camerei pentru 15 minute.
Probele se citesc n intervalul de 5 10 minute, prin citirea absorbiei probei i standardelor faa
de blancul reactivului.
Reacia colorimetric este total n maxim 15 minute i stabil pentru 15 minute, la lungimea de
unda = 553(520 570nm).
Acidul delta-aminolevulinic (DAL) se calculeaz astfel:

mg/100ml =
proba
/
standard
x 2
mg DAL/100ml x 10 x V
urinar
= mgDAL/24h.

= extinctia (valoarea absorbtiei spectrofotometrice)
71

V
urina
= volum urinar in 24ore.
o Valori de referin
Acid delta aminolevulinic pn la 0,60mg/100ml
o Grade de intoxicaie cu plumb, exprimate prin dozarea DAL urinar.

DAL (mg/100ml) Gradul de intoxicaie
Pn la 0,6 Absent
0,6 1,5 Moderat
1,5 3,00 Mare
3,00 6,00 Foarte mare
mai mult decat 6,00 Critic

o Sensibilitatea metodei este de 0,1mg/100ml.
o Fidelitatea metodei este stabilit pn la 6mg/100ml.

Metoda verificat n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucureti

VI.6. Determinarea acidului hipuric i acidului metilhipuric

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid hipuric i acid metilhipuric la
persoanele expuse profesional la toluen i respectiv xileni.
Determinarea cantitativ a acidului hipuric i a acidului metilhipuric n urin - FAR S. r. l Italia
3. Principiu
Acidul hipuric, acidul meta i para- metilhipuric formeaz cu clorura de benzensulfonil n
piridina un complex colorat care poate fi determinat colorimetric.
o Reactiv 1: piridina
o Reactiv 2: clorura de benzensulfonil
o Reactiv 3: acid hipuric standard 500 mg/l
o Alcool etilic 95%
o Cloroform
o Sticlrie de laborator
Nota: reactivii a, b si c se pstreaz nchii ermetic la temperaturi ntre 2 i 8
0
C.
5. Aparatura
o Centrifuga
o Spectrofotometru VIS
6. Prelevare
Se colecteaz urina din 24 ore ntr-un recipient care conine 45 ml cloroform.
7. Mod de lucru
Se centrifugheaz 2-3 ml urin la 3000 rot/min timp de 5 min.
Probele sunt stabile cel puin o sptmn la 2-8
0
C.
Pentru fiecare prob se pipeteaz n cte o eprubeta:
o 0,25 ml proba
o 0,25 ml reactiv 1
o 0,10 ml reactiv 2
Pentru standard se pipeteaz ntr-o eprubet:
o 0,25 reactiv 3
72

o 0,25 reactiv 1
o 0,10 reactiv 2
Se amestec i se las 30 min.
Se adaug 5,0 ml etanol 95% att n probe ct i n standard.
Se amestec, apoi se centrifugheaz 5 min. la 2500 3000 rot/min..
Se citete densitatea optic a probelor i a standardului faa de etanol 95% la o lungime de und
cuprins ntre 400 i 440 nm, de preferint la 410 nm.
8. Mod de calcul

Acid hipuric ( mg/l ) = ( A
proba
/ A
standard
) x 500

9. Performane
o Liniaritate metoda este liniar pn la 4 g/l
o Sensibilitatea metodei: 0,1 g/l
o Coeficient de variabilitate: 3,7%
10. Limite biologice tolerabile
o Acid hipuric 2 g/l
o Acid metilhipuric 3 g/l
11. Bibliografie
o K. Tomokuni si M. Ogata, Clin. Chem. 18, 349 ( 1972 )

Metoda verificata n cadrul Laboratorului de Toxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucureti

VI.7. Determinarea acidului mandelic

1. Domeniu de aplicare
Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid mandelic la persoanele
expuse la stiren.
Metode de investigare n domeniul Medicinii Muncii, 1978
3. Principiu
Acidul mandelic, extras din urina cu eter, reacioneaz cu un amestec de formaldehid i acid
sulfuric formnd un complex galben brun, care poate fi determinat colorimetric.
4. Reactivi si materiale
o Eter etilic
o Acid clorhidric, soluie 1N
o Reactiv de culoare se adaug, amestecnd, un volum formaldehid soluie 40% n 100
volume acid sulfuric d 1,84 ( se face numai cantitatea necesar pentru ziua curent deoarece nu
se conserv)
o Standard stoc. Se dizolva 100 mg acid mandelic n 100 ml ap.
o Standard de lucru: se dizolv standardul stoc 1/10 cu apa; conine 100 mg acid
mandelic/litru.
o Sticlrie de laborator
5. Aparatura
Spctrofotometru VIS
6. Prelevare
Se recolteaz urina din 24 ore, sau nainte i dup expunerea probabil la stiren; probele se
pstreaz la frigider.

73

7. Mod de lucru
o Extracia
ntr-o plnie de separare se pipeteaz 1 ml urin, 2 picturi acid clorhidric 1N i 5 ml eter etilic;
se scutur 5 min i se las s se separe; se scurge faza apoas n a doua plnie de separare n care
se adaug 2 ml eter i se scutur 30 sec.; se elimin faza apoas.Extrasele eterice din cele 2 plnii
se reunesc ntr-o eprubet; se evapor eterul innd eprubeta ntr-o baie de ap nclzit la maxim
55
0
C.
o Reacia de culoare
n eprubeta cu reziduul uscat se adaug 4 ml reactiv de culoare, lsnd s se scurg ncet
reactivul pe pereii eprubetei pentru a se relua tot reziduul.La fiecare serie se face i un standard
cu 1 ml standard de lucru, tratat la fel ca probele de urin.Se amestec prin rotire i dupa 30 min.
se msoar extincia probelor ( EP ) i a standardului ( ES ) faa de un blanc cu reactiv de
culoare, la 440 nm.
8. Mod de calcul
Avnd standardul de lucru cu 100 mg/l,
mg acid mandelic / litru urina = 100 EP / ES
Nota: - dac se gsesc concentraii mai mari de 400 mg/l se repet determinarea cu proba de 0,5
ml urin.
9. Performane
Limita de detecie este de 0,3 mg/l
10. Limite biologice tolerabile:
La sfritul schimbului de lucru 800 mg/g creatinin
La nceputul schimbului urmtor 300 mg/g creatinin
11. Bibliografie
o H. Ohtsuhi, M. Ikeda Amer. Industr. Ass. J. Med. 27 150, 1970

CRSP Bucuresti

VI.8. Determinarea fenolilor urinari

Aceast metod se utilizeaz ca test screening pentru monitorizarea biologic a expunerii la
benz i compui fenolici. Determinarea fenolilor n urin este i un mijloc de diagnostigare n
hipertiroidism, diabet zaharat cauzat de hipertiroidism i a tumorilor produse de catecholamine.
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n metoda de determinare
cantitativ colorimetric a compuilor fenolici din urina elaborat de FAR S.R.L.
3. Principiu
Compuii fenolici condenseaz cu 4-aminoantipirina i oxideaz cu fericianura alcalin rezultnd
un complex rou care se poate msura fotometric.
o 4 - aminoantipirina
o fericianura
o soluie de extracie
o Standard fenol 500 mg/L (Standardul se dilueaz n raport 1:10 cu apa distilat
obinndu-se un standard cu concentraia de 50 mg/L; stabilitatea acestei soluii este de o lun la
2 8 C.)
Aceti reactivi sunt stabili pn la data specificat pe etichet i se pstreaz n recipiente bine
nchise la 2 8 C.
74

o Sticlrie de laborator ( eprubete, pahare Berzelius, pipete automate, pahare Erlenmeyer,
pipete gradate.)
5. Aparatura
Recipiente pentru recoltarea urinii.
Aparatura analitica
o Centrifuga
o Spectrofotometru UV/VIS ( = 450 500 nm)
6. Prelevare
o Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe urina, recoltat n timpul lucrului sau la scurt timp dup expunere.
o Transport i conservare
s fie nchise etan, pot fi conservate pentru o perioad scurt de timp la 2-8C, se evita procesul
7. Mod de lucru
Se pipeteaz n trei eprubete de centrifug astfel:
Blancul reactivilor Proba Standard
Apa distilat 0.2 mL - -
Proba - 0.2 mL -
Reactiv 4.4 diluat - - 0.2 mL
Reactiv 4.1. 1.5 mL 1.5 mL 1.5 mL
Se agit energic i apoi se adaug:
Reactiv 4.2. 1.5 mL 1.5 mL 1.5 mL
Se agit i se las n repaus 3 minute, dup care se adaug:
Reactiv 4.3. 3.5 mL 3.5 mL 3.5 mL
Se agit energic i apoi se centrifugheaz la 2500 3000 rotatii/minut timp de 5 minute. Se
citete densitatea optic a supernatantului fa de blancul reactivilor.
o Calcul
Concentraia de fenoli n urin (n mg/L) se calculeaz astfel:

Fenoli (in mg/L) = (A
proba
/
Astandard
) x 50

unde,
A
proba
= densitatea optica a probei
A
standard
= densitatea optica a standardului
50 este concentraia reactivului 4.4 diluat
Limita biologic tolerabil este 50 mg/L.
Limita de detecie analitic este de aprox. 0.1 mg/ L.
Metoda este liniar pn la 200 mg/L
9. Bibliografie
o Y. Yamaguchi et C. Hayashi, Clin. Chem., 23/11, 2151 2154 (1977)

CRSP Bucureti

75

VI.9. Determinarea carboxihemoglobinei n snge

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea carboxihemoglobinei n snge ( metabolitul
oxidului de carbon).
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n metoda de determinare
cantitativ colorimetric a carboxihemoglobinei elaborat de FAR S.R.L.
3. Principiu
Proba de snge este incubat cu ditionit de sodiu care reduce oxihemoglobina i
methemoglobina, dar nu carboxihemoglobina. Pe acast cale se elimin interferena acestor
componente. COHb% se determin spectrofotometric folosind calculul tip Rodkey simplificat,
care este obinut prin soluia unui sistem cu dou ecuaii ce reprezint absorbia molar a Hb i
COHb aplicnd legea Lambert-Beer.
o Tampon fosfat pH=6,85
o Ditionit de sodiu
o Tampon fosfat 0,1 molar. Se transvazeaz reactivul 4.3. n sticlua cu reactiv 4.2., se
amestec i este gata de lucru.
o Sticlarie de laborator ( eprubete, pahare Berzelius, pipete automate, pahare Erlenmeyer,
pipete gradate.)
5. Aparatura
o Eprubete cu anticoagulant
Aparatura analitica
o Spectrofotometru UV/VIS ( = 350 500 nm)
6. Prelevare
o Mod de prelevare
Determinarea se efectueaz pe snge total, recoltat spre sfritul schimbului de lucru. Recoltarea
se face n zona locului de munc.
o Transport i conservare
s fie nchise etan, pot fi conservate pentru o perioad scurt de timp la 2-8C, se evita procesul
7. Mod de lucru
Se pipeteaz ntr-o eprubet:

Reactiv 4.1. 3000l
Proba 25L
Se amestec prin rsturnare de doua trei ori. Se las aproximativ 5 minute pentru liza celular
complet.
Determinarea de % COHb:
Se pipeteaz ntr-o eprubeta urmatoarele:

Reactiv 4.2. preparat 1150L
Proba hemolizata 100L
Se amestec cu atenie prin rsturnare i se incubeaz la temperatura camerei timp de 10 minute.
Se citete absorbanta la doua lungimi de und respectiv 420nm i 432nm fa de reactivul 4.2.
preparat.

76

o Calcul
Se calculeaz raportul A
r
=A
420
/A
432

Valoarea obinut se introduce n urmatoarea ecuaie:

%COHb=[1-(A
r
xF
1
)]x100%/[A
r
x(F
2
-F
1
)-F
3
+1]

unde,
F
1
=raportul absorbiilor molare Hb
432
/Hb
420

F
2
= raportul absorbiilor molare COHb
432
/Hb
420

F
3
= raportul absorbiilor molare COHb
420
/Hb
420
Dac spectrofotometru este calibrat putem s lum n consideraie

urmtoarele valori ale
absorbiilor molare publicate de Rodkey pentru hemoglobina uman:

Lungimea de und AHb ACOHb F1=1,3330
F2=0,4787
F3=1,9939
420nm
432nm
0,988 1,970
1,317 0,473

9. Bibliografie:
o E. Beutler et C. West, Clin. Chem., 30(6), 871-874(1984)
o G. Heinemann, K. Loschenkohl et H. Schivelbein, J. Clin. Chem. Clin. Biochem.,
17(10), 647-651(1979).

CRSP Bucureti

VI.10. Determinarea acidului glicolic n ser

Aceast metod se utilizeaz pentru determinarea nivelului de acid glicolic la persoanele expuse
profesional la etilenglicol .
La elaborarea metodei s-a inut seama de prevederile cuprinse n Colorimetric and gas
chromatographic procedures for glycolic acid in serum : the major toxic metabolite of ethylene
glycol Fraser A.D., MacNeil W.- Clinical Toxicology, 31(3), 397-405, 1993.
3. Principiu
Acidul glicolic reacioneaz cu acidul cromotropic, n prezena acidului sulfuric, formnd un
complex rou-violet colorimetrabil.
o Standard acid glicolic 25mmol/l . Se dizolv 200 mg acid glicolic n 10 ml ap distilat.
5ml din aceast soluie se dizolva n 50 ml ap distilat (25 mmol/l).
o Acid cromotropic
o Acid sulfuric concentrat - 100 mg acid cromotropic se dizolv n 50 ml acid sulfuric
concentrat.
o Acid tricloracetic 5%
o Sticlrie de laborator (eprubete, pahare Berzelius, pipete automate, pahare Erlenmeyer,
pipete gradate).
5. Aparatura
o Centrifuga
o Baie de ap
77

o Spectrofotometru VIS
6. Prelevare
Determinarea se efectueaz pe ser nehemolizat . Sngele recoltat prin puncie venoas este
centrifugat la 3000 rot/min timp de 10 min i se separ serul.
7. Mod de lucru
Se pun cte 0.5 ml de ser, standard i ap distilat (pentru blanc) n eprubete. n fiecare eprubet
se adaug 0.5 ml acid tricloracetic 5%, se amestec i se centrifugheaz la 3000 rot/min.
Se transfer cte 0.1 ml din supernatant n alte eprubete i se adaug cte 1.0 ml de acid
cromotropic. Se amestec i se introduc eprubetele n baie de ap la fierbere pentru 10 min. Dup
rcire se adaug 9.0 ml ap distilat , se agit i se citete extincia la 580 nm.
Curba de etalonare se fcea vnd concentraii ntre 1 i 20 mmol/l
8. Mod de calcul
Concentraia acidului glicolic n ser se calculeaz pe baza curbei de etalonare.
9. Performante
Liniaritate metoda este liniar n domeniul 0 25 mmol/l
Limita de detecie: 0.09 mmol/l;
Limita de cuantificare: 0.185 mmol/l
Exactitate sau acuratee: recuperare ntre 88% - 94%.
10. Limite biologice tolerabile
Conform literaturii de specialitate [3]: concentraie acid glicolic n ser < 1.0 mmol/l nici un
efect advers asupra sntii.
Laboratorul a efectuat determinri de acid glicolic seric la 57 de persoane sntoase clinic i a
obinut urmtoarele:
o concentraia medie 0.26 mmol/l ;
o 11 probe ( 19.2%) au avut concentraii sub limita de cuantificare;
o celelalte concentraii au variat ntre 0.19 i 0.55 mmol/l.
11. Bibliografie
o Fraser A.D., MacNeil W -Colorimetric and gas chromatographic procedures for glycolic
acid in serum : the major toxic metabolite of ethylene glycol Clinical Toxicology, 31(3), 397-
405, 1993.
o Carstens J., Csanady G.A., Faller T.H., Filsen J., G. - Human inhalation exposure to
ethlene glycol. Archi. Toxicol., 77(8), 425-432, 2003.
o Porter W. H., Rutter P. W., Bush B. A., Pappas A.A., Dunnington J.E. Ethylene glycol
toxicity: the role of serum glycolic acid in hemodialysis. J. Toxicol. Clin. Toxicol. 39(6), 607-
615, 2001.
o Hess R., Bartels M. J., Pottenger L. H. - Ethylene glycol: an estimate of tolerable levels
of exposure based on a review of animal and human data - Archi. Toxicol., 78(12), 671-680
2004.

Metoda adaptat i verificat n cadrul Laboratorului deToxicopatologie i Medicina Muncii
CRSP Bucureti

78

VII. CONCLUZII

n aceast lucrare sunt prezentate datele necesare investigrii din punct de vedere
toxicologic a expunerilor profesionale la noxe.
Evaluarea expunerii profesionale la noxe chimice presupune att investigare a condiiilor
de mediu de munc (cunoaterea proceselor tehnologice, alegerea noxelor, prelevarea probelor
de aer, tipurile de metode analitice utilizate n toxicologie, interpretarea rezultatelor, etc.) ct i
evaluarea biologic a expunerilor la substane chimice, respectiv comportarea toxicelor n
organism, principiile monitorizrii biologice a expunerii la substane chimice care cuprind
criteriile de selectare a testelor biologice, modul de interpretare a rezultatelor, influena unor
factori extraprofesionali cum ar fi alcoolul i fumatul asupra toxicitii substanelor chimice etc.
Pentru realizarea dezideratelor de mai sus, n lucrare sunt prezentate metodele analitice de
determinare a unor ageni chimici i a pulberilor n aerul zonelor de munc ct i a unor
indicatori biotoxicologici.
n concluzie, considerm c aceast lucrare poate fi utilizat ca un ghid cu informaii
necesare evalurii expunerilor profesionale la noxe.

79

BIBLIOGRAFIE

1. Antero A . - Biological monitoring today and Tomorow - Scand . J . Work Environ.
Health 20, 1994 .
2. Baselt R. C. - Biological monitoring methods for industrial chemicals- Biomedical
Publication Davis , California 1980 .
3. Bernard A. , Lauwerys R. - Biological monitoring of exposure to industrial chemicals ,
Arch. Med. Prof. 50 ( 1 ) , 1989 .
4. Bernstein J.A., Alexis N., Barnes C., Bernstein L., Nel A., Peden D., - Health effects of
air pollution, J. Allergy Clin Immunol, 114, 2004.
5. Boeniger M. F. , Lowry L. K . , Rosenberg J . - Interpretation of urine results used to
assess chemical exposure with Emphasis on Creatinine Adjustments : A Review - Am .
Ind . Hyg. Assoc . J . 54 ( 10 ) , 1993 .
6. Cotrau M. si colab. - Toxicologie , Ed. Didactica si Pedagogica Bucuresti , 1991 .
7. Jakubowski M., Trzcinka Ochocka M., - Biological Monitoring of Exposure: Trends
and Key Development, J. Occup. Health, 47, 22-48, 2005.
8. Lauwerys R. - Industrial Chemical Exposure : Guidelines for Biological Monitoring -
Biomedical Publication , Davis , California , 1993.
9. Leman A.,M., Omar A. R.,Yusof M. Z. M.,- Monitoring of Welding Work Environment
in Small and Medium Industries , IJRRAS, 5(1), 18-26,2010.
10. Mogos G. , Sitcai N . - Toxicologie clinica , vol. l , Ed. Medicala , Bucuresti , 1988
11. Niculescu T., - Caiet de Medicina Muncii , vol. l ,ll, lll Ed. Medmun , Buc. 2003.
12. Niculescu T., - Manual de Patologie Profesionala , vol. 1 si ll , Ed. Medicala , Bucuresti ,
1985 .
13. NIOSH - Manual of Analyrical Methods , 4th Edition , 1998 .
14. Omae K., Takebayashi T., Sakurai H.,- Occupational exposure limits based on biological
monitoring: the Japan Society for Occupational Health, Intern. Arch. Occup. Environ.
Health 72(4), 271- 273, 1999.
15. OMS - Biological Monitoring of Chemical Exposure in the Workplace , vol. 1 si 2 , 1996
16. Tat M. - Medicina Muncii - orientare, patologie si practica , Ed. Viata Medicala
Romaneasca , 1999.
17. Voicu V. - Toxicologia clinca , Ed. Albatros , Bucuresti , 1997 .
18. xxx Ministerul Sanatatii , Institutul de Igiena si Sanatate Publica,Bucuresti -Caiet
metodologic nr.2, 1987.

Toxicologie Industriala

Încărcat de

Informații document

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Toxicologie Industriala

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

1

S-ar putea să vă placă și