JONCIUNILE CELULARE N

BIOLOGIA CELULAR I MOLECULAR

Celulele reprezint "crmizile" din care sunt constituite organismele
multicelulare. Aceste celule sunt reunite prin jonciuni care se stabilesc ntre celule
sau ntre celule i matricea extracelular secretat de acestea.
Arhitectonica tisular poate fi privit din punct de vedere mecanic: celulele
care compun un esut posed o reea citoscheletal tridimensional care este
conectat la elementele matricei extracelulare sau la elementele citoscheletale ale
altor celule prin intermediul unor complexe joncionale cu o structur i o
funcionalitate variat. Totui nu poate fi ignorat implicarea, din ce n ce mai
studiat, jonciunilor n mecanismele transduciei semnalelor biologice.
Majoritatea covritoare a jonciunilor poate fi ntlnit la nivelul
epiteliilor, unde ndeplinesc diferite funcii i unde pot fi clasificate dup criterii
funcionale.
CLASIFICAREA FUNCIONAL A JONCIUNILOR
1. Jonciuni ocluzive (jonciuni strnse)
2. Jonciuni de ancorare
a. cu situsuri de ataare a filamentelor de actin
- jonciuni de adezivitate ntre celule (aderene n centur)
- jonciuni de adezivitate ntre celule i matricea extracelular
- jonciuni septate (numai la nevertebrate)
b. cu situsuri de ataare a filamentelor intermediare
- jonciuni celul-celul (desmosomi)
- jonciuni celul-matrice (hemidesmosomi)
3. Jonciuni de comunicare:
a. jonciuni gap
b. sinapse chimice
c. plasmodesmata (numai la plante)

Jonciune
strns
Jonciuni de
adezivitate
Desmozom
macular

Apare ntre celulele epiteliale nvecinate i

mpiedic trecerea moleculelor printre acestea
Realizeaz legtura inele de filamente de actin la
acelai nivel din dou celule adiacente
Jonciuni sub form de "nituri" care ancoreaz
filamentele intermediare a 2 celule vecine

Jonciuni gap

Jonciuni intercelulare care permit trecerea

moleculelor mici, hidrosolubile i ioni
Ancoreaz filamentele intermediare din celule la
membrana bazal

Hemidesmozomi
Membrana bazal

1. Jonciunile strnse joac rolul unor bariere dotate cu permeabilitate

selectiv care separ dou medii fluide de o parte i de alta a dou celule aflate n
contact. mpreun cu jonciunile de adezivitate n band formeaz, la nivelul
celulelor epiteliale o unitate funcional denumit complex joncional apical.
Cu un secol n urm, bariera format de celulele epiteliale era acreditat
unor ngrori intercelulare denumite la acea vreme bar terminal, i care putea fi
vizualizat prin intermediul unei coloraii vitale la polul latero-apical celular (fig.
1)

Fig. 1. Jonciune strns: schem;

aspect pentalamelar

Studiile de microscopie electronic din anii 60 au identificat morfologia

barei terminale ca fiind compus din cteva tipuri de jonciuni intercelulare. Cel
mai apical sunt situate jonciunile impermeabile (strnse), fapt determinat cu
ajutorul unor trasori electronoopaci. n ultimele dou decenii au progresat i

tehnicile de determinare a structurii moleculare ale acestor jonciuni, cele mai

dificil de studiat din acest punct de vedere.
Ultrastructur:
n microscopia electronic, jonciunile strnse au un aspect pentalamenlar,
deoarece spaiul dintre cele dou celule este practic inexistent.
n microscopia electronic de transmisie ele apar ca i contacte focale ntre
monostraturile externe ale celulelor adiacente. Se pare c lanurile proteice care
intr n contact sunt formate din proteine transmembranare intricate i care
interacioneaz la nivelul spaiului intercelular.
n microscopia electronic de baleiaj se observ la nivelul jonciunilor
structuri de anastomozare complexe, formate din lanuri proteice care se constituie
n inele ce nconjoar polul apical al membranei celulelor epiteliale. Studii de
crioelectronomicroscopie evideniaz jonciunile strnse dintr-un punct diferit de
vedere (fig2).
Jonciunile strnse apar ca o reea interconectat de creste pe faa
citoplasmatic a membranelor adiacente. La magnificaii importante, aceste creste
apar formate din lanuri de proteine sferice de 3-4 nm diametru; la formarea
jonciunii strnse particip mai multe lanuri de proteine sferice de fiecare parte
(fig.3).

Fig. 2 Localizarea
jonciunilor strnse
(ME de baleiaj)

Fig. 3 Localizarea
jonciunilor strnse
(schem)

Structur molecular: lista proteinelor componente este n continu cretere.

Majoritatea membrilor componeni au fost doar identificai fr a li se preciza
funciile. De accea vom insista asupra celor cu funcionalitate precizat.
irurile care particip la formarea jonciunii sunt formate din proteine
transmembranare denumite ocludine. Acestea sunt conectate la alte proteine
localizate pe faa citoplasmatic de fiecare parte a jonciunii ZO-1 i ZO-2 acestea
din urm fac parte din familia proteinelor MAGUK (membrane associated guanilat
kinase), avnd roluri structurale i de semnalizare. Alte proteine fr roluri
funcionale bine precizate sunt cingulina, p130, 7H6, ZA-1TJ i simplekina.
La nivelul joniunii mai sunt localizate GTP-aze din clasa Rho, tirozinkinaze non-receptoare i PKC-.
Ocludina este o protein transmembranar, cu o greutate molecular de
65kDa care formeaz dou bucle extracelulare de aproximativ 47 aminoacizi i
legate la domeniile N i C terminale. Biochimia buclelor transmembranare este
destul de neobinuit; acestea posed un numr neobinuit de mare de reziduuri de
glicin i tirozin, ceea ce face ca aceste molecule s fie implicate n funcia de
barier i de adezivitate. Domeniile transmembranare se pot intrica asemenea
elementelor unui fermoar, determinnd un spaiu intercelular extrem de mic (2-8
A).
Proteinele din clasa MAGUK (ntre care este inclus recent i p130) i
anume ZO-1 i ZO-2 compun suportul pentru asamblarea moleculelor de ocludin
n cadrul jonciunilor strnse.
Cingulina, o protein asemntoare domeniilor cozilor moleculelor
miozinice pare a avea rolul de ataare a structurilor joncionale la filamentele de
actin ale citoscheletului.
Funciile jonciunilor strnse.
Bariera realizat de jonciunile strnse prin intermediul lanurilor proteice
compuse din ocludine constituie un element rezistiv n calea de transport
paracelular a solviilor. Astfel, 2 medii sunt separate aproape complet i selectiv n
funcie de starea funcional a jonciunilor strnse.
Joac un rol deosebit la nivelul celulelor epiteliului intestinal i al barierei
hematoencefalice.
La nivelul intestinului subire, joniunile strnse dintre enterocite realizeaz
separarea lumenului intestinal de sistemul vascular printr-o barier dotat cu
permeabilitate selectiv. Pentru a traversa aceast barier, moleculele simple, ionii
sau apa trebuie s urmeze 2 ci: transportul paracelular sau transportul
transcelular. Jonciunile strnse mpiedic tocmai transportul paracelular, dar nu
complet, deoarece chiar i la acest nivel, spaiul intercelular este de circa 2-8 A.
Astfel, apa poate trece de jonciunile strnse relativ uor n timp ce majoritatea
ionilor i a macromoleculelor mici sunt aproape complet blocate. Monozaharidele
i aminoacizii sunt incapabili de a traversa bariera pe cale paracelular, fiind
obligai s abordeze calea transcelular.

Jonciunile strnse contribuie la meninerea asimetriei membranare n

celulele epiteliale. Aceast asimetrie reprezint o necesitate a transportului
transcelular. n celulele epiteliale polarizate, compoziia plasmalemei polului
apical este diferit de cea a regiunii bazolaterale. Jonciunile strnse contribuie la
meninerea domeniilor proteice prin mpiedicarea difuziunii n planul membranei.
Meninerea domeniilor proteice permit transferul vectorial al moleculelor ntr-un
singur sens. De exemplu, glucoza este transportat din lumenul intestinal spre
fluxul sangvin i nu invers, deoarece transportorii de import sunt localizai la polul
apical iar cei de export sunt localizai la polul bazal.
Jonciunile strnse nu sunt identice din punct de vedere funcional.
Selectivitatea permeabilitii acestor jonciuni este raportat n special la
transportul de sodiu.
La nivelul barierei hematoencefalice aceste jonciuni sunt localizate ntre
celulele endoteliale capilare. Bariera hematoencefalic (celulele endoteliale
cuplate prin jonciuni strnse) permite trecerea unor substane ca glucoza,
drogurile, alcoolul din snge n LCR, CO2 din LCR n snge. Majoritatea
antibioticelor trec destul de dificil, de aceea pot aprea dificulti n tratamentul
patologiei infecioase la nivelul SNC.
Integritatea acestor jonciuni depinde de prezena ionului de Ca.
Exist o strns legtur funcional ntre jonciunile strnse i alte
jonciuni localizate n celul n imediata vecintate, spre polul lateroapical, cum ar
fi jonciunile de adezivitate n band. Formarea jonciunilor strnse n esuturile
embrionare sau n culturile celulare este dependent de formarea jonciunilor pe
baz de cadherine. Nu este nc destul de clar dac moleculele de cadherin
iniiaz formarea jonciunilor strnse sau dac sunt utilizate numai ca schele pentru
asamblarea jonciunilor menionate.

2. Jonciunile de adezivitate
La nivelul esuturior, celulele sunt meninute laolalt prin diverse tipuri de
jonciuni; dintre acestea, mai importante pentru adezivitatea fizic dintre celule sau
dintre acestea i mediu, prezentm mai jos jonciunile de adezivitate. Aceste
jonciuni joac roluri fundamentale n determinarea i meninerea organizrii
tisulare.
Cele mai importante jonciuni de adezivitate pot fi clasificate dup cum
urmeaz (Farquhar & Palade, 1963, Burridge & al., 1988, Garrod, 1993,
Gumbiner, 1996):
a. jonciuni cu situsuri de ataare pentru actin.
b. jonciuni cu situsuri de ataare pentru filamente intermediare.
n funcie de conectare i moleculele de cuplare transmembranare, jonciunile se
pot mpri n:
a. jonciuni celul-celul cuplare prin cadherine
b. jonciuni celul-matrice cuplare prin integrine
a. Jonciuni cu situsuri de fixare pentru actin.
Jonciunile celul-celul se mai numesc i aderene n centur (zonula
adherens ZA la nivelul celulelor epiteliale). Totui, aceste jonciuni iau diverse
forme n diferite tipuri celulare: regiuni de adezivitate la nivelul sinapselor n SNC
(Fannon&Colman, 1996), jonciuni autotipice la nivelul tecilor de mielin,
discurile intercalare situate ntre miocardocite (Volk & Geiger, 1986). Sistemele de
adezivitate cu cadherine funcioneaz i n celulele care prezint contacte
intercelulare extinse fr a prezenta jonciuni definibile din punct de vedere
morfologic.
Jonciunile de adezivitate se gsesc n special la nivelul celulelor epiteliale
unde formeaz o band continu (zonula adherens) care nconjoar interiorul
fiecrei celule din complex.
Sunt situate imediat sub jonciunile strnse. Ca i structur, fiecare celul
prezint la acest nivel un inel format dintr-un mnunchi de filamente de actin.
Inelul de actin este ataat la membran printr-un set de proteine ca: , ,
cateninele, vinculina, -actinina, i placoglobina. Ataametul intercelular (ntre
zonele unde inelele a dou celule nvecinate sunt adiacente) se face prin
intermediul unor proteine din clasa CADHERINELOR. Aceast "reea" poate
suferi i modificri de poziie datorit proteinelor motorii de tip miozinic,
intervenind ntr-un proces morfogenetic important - plierea structurilor epiteliale
n form de anuri-tuburi.
Cadherinele reprezint o superfamilie de glicoproteine transmembranare de
adezivitate Ca2+ dependente care reprezint suportul adezivitilor homofilice
celul-celul n toate esuturile solide ale organismului. De menionat c, teoretic,
moleculele de adezivitate se mpart n 3 superfamilii: cadherine, imunoglobuline i
selectine. Cadherinele mediaz recunoaterea intercelular, determin tranziiile

morfologice din cadrul modelrii i meninerii arhitectonicii tisulare. Cadherinele

mediaz adezivitatea celular de rezisten dar n acelai timp nu rmn insensibile
la semnalele reglrii funcionale, n special n perioada morfogenezei. Sunt
descrise cteva tipuri de cadherine (tabel 1).
Tabel 1. Tipuri de cadherine i distribuia acestora la mamifere
Molecul
Distribuie celular preponderent
Cadherina E
- Embrion preimplantare,
- Celule epiteliale - n special n jonciunile de adezivitate n band
Cadherina P
- Trofoblast
- cord
- plmn
- intestin
Cadherina N
- sistem nervos
- plmn
- cord
- mezodermul embrionar
- ectodermul neural
Cadherina R
- nervul optic
- celule gliale
Cadherina M
- mioblaste
- celule musculare striate mature

Moleculele de cadherin prezint 3 regiuni majore:

- extracelular care mediaz adezivitatea specific;
- transmembranar care traverseaz membrana;
- citoplasmatic este localizat n celul i este cuplat la filamentele
actinice, componente ale citoscheletului prin intermediul cateninelor.
Ataarea la citoschelet presupune i participarea unor proteine asociate
(fig.4).
Jonciuni celul-matrice se realizeaz sub forma contactelor focale (plci de
adezivitate). Ele fac legtura dintre elementele actinice i matricea extracelular.
Se ataeaz la aceast matrice prin proteine numite integrine. Ataarea integrinelor
la actin este mediat de proteine ca talina, -actinina, vinculina.

Fig.4. Jonciunile de adezivitate n band detaliu pentru o singur molecul de

cadherin; este evident structurarea cadherinei n trei regiuni
- extracelular cu 5 domenii (EC-1 la EC-5, legate ntre ele prin ioni de Ca 2+,
ceea ce asigur rigiditatea acestui segment)
- transmembranar (obturat pe imagine de plasmalem)
- citoplasmatic (legat de catenine ( i ) care fac legtura cu filamentele
de actin)

b. Jonciuni cu situsuri de fixare pentru filamentele intermediare.

Jonciuni celul-celul desmozomii. Sunt jonciuni n form de buton care
conecteaz 2 celule, avnd rolul de a distribui forele de traciune i de forfecare
care apar ntre acestea.
La nivelul lor se descriu o serie de structuri specializate care faciliteaz
conectarea citoscheletelor celor 2 celule. Astfel, prin intermediul desmozomilor
intr n contact filamentele intermediare ale celulelor adiacente.
n structura desmozomului intr 2 plci citoplasmatice, una de fiecare
celul n care sunt ancorate elemente ale citoscheletului fiecrei celule n parte
(filamentele de keratin n cazul celulelor epiteliale i filamentele de desmin n
cazul celulelor miocardice).
Proteinele de legtur transmembranare dintre cele 2 celule aparin unei
clase de proteine de aderen, dependente de Ca2+ i care sunt tot CADHERINE.

Plcile citoplasmatice reprezint elementul de conectare al elementelor

citoscheletului cu proteinele transmembranare de legare. Aceste plci proteinacee
au o grosime de 15-20 nm i sunt compuse din plakoglobin, o protein nrudit cu
vinculina proteina care conecteaz filamentele de actin ale citoscheletului
celular la proteinele transmembranare n cadrul jonciunilor de adezivitate (fig.
5,6).

Fig.5. Structura molecular a

unui desmozom macular
(schem)

Fig.6. Structura unui

desmozom macular
(electrono-microfotografie)

Proteinele transmembranare de legare (linker) sunt compuse din

desmocolin i desmoglein, dou proteine din familia cadherinelor E.
Filamentele intermediare care se ataeaz la placa citoplasmatic mai sunt
denumite i tonofilamente. Ele au form de ans, venind din citoplasm,
ancorndu-se la placa citoplasmatic i rentorcndu-se n citoplasm.
Jonciuni celul-matice: hemidesmozomii. Sunt similari desmozomilor cu
deosebirea c fac legtura dintre celul i matricea extracelular. Un exemplu sunt
hemidesmozomii care ataeaz celulele epiteliului intestinal (enterocitele) la
membrana bazal (o specializare a matricei extracelulare la limita dintre epiteliu i
esutul conjunctiv). La nivelul epiteliilor, hemidesmosomii determin o rigiditate
i o rezisten crescute.

Se consider c hemidesmozomii prezint jumtate din structura unui

desmozom. Totui, exist diferene importante ntre cele dou tipuri de jonciuni.
Astfel, placa citoplasmatic la hemidesmozom este dubl i nu prezint
plakoglobin (fig.7).

Fig.7. Hemidesmosom structur molecular

Linkerul transmembranar este reprezentat de integrine, cel mai frecvent

64, care cupleaz pe de o parte filamentele intermediare ale citoscheletului
celular iar pe de alt parte, laminina, component fibrilar important al matricei
extracelulare. Domeniul citoplasmatic al integrinelor 64 este compus din circa
1000 aminoacizi, fiind mult prelungit n citoplasm i interacionnd probabil cu
filamente intermediare.

3. Jonciuni de comunicare
- de tip GAP
- sinapse chimice
Jonciunile de tip GAP reprezint modaliti de comunicare direct ntre
celule i sunt distribuite pe suprafeele laterale ale celulelor adiacente, permind
schimbul de molecule mici. Astfel, prin aceste jonciuni trec ioni deci curent
electric eveniment important n evitarea ntrzierilor la nivelul sinapselor.
Jonciunile gap sunt prezente i n esuturile non-neuronale unde deservesc
procesele de integrare metabolic prin schimbul de ioni i molecule mici AMPc
(329Da), precursorii ADN i ARN, glucoza-6-fosfat (259Da).
Majoritatea celulelor animale prezint la nivelul zonelor laterale, regiuni
joncionale specializate caracterizate printr-un spaiu intercelular (gap) n care se
observ un set de particule cilindrice. Aceste particule cilindrice sunt de fapt
canale proteice fine prin care citoplasmele celor dou celule participante la
jonciune intr n contact. Canalele au un diametru de 1,2 nm i permit trecerea
moleculelor pn la 2000 Da. n majoritatea esuturilor, jonciunile gap sunt
aglomerate n clustere de circa 0,3 diametru (fig 8).

Fig.8. Jonciuni gap la nivel sinaptic (model i electronofotografie)

Sunt formate din 2 uniti proteice numite conexoni, unul de fiecare celul,
alctuite la rndul lor din cte 6 subuniti proteice de conexin 32, o protein de
32000 Da. Acetia realizeaz o reea hexagonal n planul plasmalemei i vor
forma prin apoziia celor 2 uniti (vezi figura 9,10) un canal ce strbate spaiul
intercelular, realiznd comunicarea dintre cele 2 celule. n cazul acestor jonciuni
spaiul intercelular este mult redus ca dimensiuni (pn la 2-4 nm). Proteinele care
reprezint baza structurii moleculare a conexonilor se numesc conexine (pondere

molecular 27.000 Da).

Fig.9. Jonciune gap

(schem)

a.
b.
c.

d.

Fig.10. Jonciune gap

(electronofotografie)

Funcii:
se gsesc n sinapsele electrice i au un rol important pentru funcionarea
acestora fiind de 10.000 de ori mai permeabile pentru ionii metalici dect restul
sinapselor.
comunicrile intercelulare prin jonciuni GAP au un rol important n
embriogenez (n perioada de organogenez).
aceste jonciuni se gsesc i la nivelul glandelor salivare, n ficat, rinichi, piele,
tiroid, prin intermediul lor realizndu-se o cooperare metabolic ntre celule.
n cadrul cooperrii metabolice o celul preia de la celulele vecine substane pe
care nu le poate sintetiza. Un component important care poate trece prin
jonciunile gap este AMPc care acioneaz ca mesager secund intracelular. Aa
cum s-a explicat anterior, creterea AMPc este consecutiv stimulrii
hormonale diverse. Trecerea AMPc are o semnificaie deosebit; astfel,
creterea concentraiei intracelulare post-stimulare a AMPc duce la creterea
concentraiei sale i n celulele vecine (de exemplu, n cadrul unui epiteliu),
iniiind simultan acelai tip de rspuns metabolic. Trecerea Ca 2+ prin
jonciunile gap permite contracia muchiului neted prin coordonarea
contraciei fibrelor individuale; exemplificnd, trecerea Ca 2+ prin jonciunile
gap permite sincronizarea contraciei celulelor musculare netede intestinale cu
determinarea peristalticii, sau contracia uterului n timpul naterii.
au un caracter dinamic, comunicarea prin intermediul lor fiind dependent de
Ca i pH. n mod normal, concentraia extracelular a Ca 2+ este destul de
ridicat (1x10-3 la 2x10-3M) n timp ce concentraia Ca2+ liber n citoplasm este

mai mic de 10-6 M. Dac se produce o efracie membranar la nivelul

plasmalemei sau a organitelor de stocare a Ca 2+, concentraia acestuia din urm
crete n citosol, rezultatul fiind nchiderea canalelor din jonciunile gap.
Astfel, deteriorarea unei celule mpiedic, prin nchiderea jonciunilor gap,
rspndirea mesajului biochimic de leziune, protejnd celulele vecine.