Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs nr.5
1
sunt caracteristice celulelor care delimiteazã unele cavitãți și obligã circulația moleculelor
prin polul apical, deoarece micșoreazã lumenul unor cavitãți și împiedicã trecerea lor prin
celulã.Un exemplu de joncțiuni strânse sunt acelea care realizeazã bariera hematoencefalicã
dintre celulele endoteliale ale vaselor din creier, protejându-l de unele substanțe toxice din
sânge și permite de asemenea, trecerea glucozei ca sursã de energie spre neuroni, și în sens
invers a CO2 rezultat din respirația celularã.
Sunt evidențiate în M.E. ca puncte de contact sau de sudură ale membranelor celulelor
diacente. Sunt formate dintr-o rețea ramificată de catene strânse, fiecare catenă fiind
independentă. Eficiența acestor joncțiuni în a preveni difuzia ionilor crește exponențial cu
numărul de catene componente.
Structura molecularã, stabilitã cu ajutorul microscopului electronic, este formatã dintr-
o rețea de șiruri de molecule proteice, anastomozate, care înconjoarã polul apical al fiecãrei
celule epiteliale. Aceste molecule proteice, care formeazã șiruri pe membrana unei celule, vin
în contact cu șirurile din membrana celulei adiacente. Astfel, se închide perfect spațiul
intercelular, care oprește difuzia liberã a moleculelor prin acest spațiu. Cu cât numãrul de
șiruri proteice este mai mare, capacitatea joncțiunilor strânse de a bloca trecerea ionilor prin
spațiul dintre celule, este mai mare (Fig. 5.1.). Speciile proteice majore sunt claudina si
ocludina, asociate cu proteine membranare periferice localizate pe fata citoplasmica a
membaranei plasmatice, care ancoreaza aceste catene proteice de citoscheletul de actina,
unind în acest fel citoscheletul de actina al celulelor adiacente.
Funcțiile joncțiunilor de ocluzie sunt:
- menținerea adeziunii intercelulare,
- menținerea polarității celulelor prin prevenirea difuziei laterale a proteinelor
integrale de membrană între zona apicală și cea bazală sau zonele laterale, permițând
menținerea funcțiilor specifice ale fiecărei suprafețe celulare: de exemplu endocitoza mediată
de receptor pe suprafața apicală și exocitoza pe suprafața bazolaterală (transportul
transcelular) sau antiportul Na / glucoză la nivelul celulelor epiteliului intestinal.
- prevenirea trecerii moleculelor sau ionilor prin spațiile intercelulare. Ionii sau
moleculele trebuie să pătrundă doar în celule prin difuzie sau transport activ. Această funcție
exercită control asupra transportului selectiv al particulelor, fiind nepermisiv pentru unele, ca
în cazul barierei hemato-encefalice, însă mecanismul de control nu este cunoscut, poate să se
datoreze unor breșe apărute prin mici discontinuități structurale sau prin pori multipli. În
funcție de permisivitatea față de moleculele de apă și soluții, epiteliile care conțin astfel de
joncțiuni se clasifică în epitelii impermeabile sau permeabile.
Aceste joncțiuni își pãstreazã integritatea în prezența concentrației fiziologice de Ca2+,
care atunci când scade sub normal, joncțiunile se dezintegreazã. Joncțiunile sunt distruse cu
tripsinã, ceea ce demonstreazã cã proteinele sunt componenta lor esențialã.
2
Fig. 5.1. Structura unei joncțiuni strânse
2. Joncțiunile de ancorare
Aceste joncțiuni mențin celulele într-o anumitã poziție, conferind rezistențã mecanicã
unor țesuturi, care rezistã la forțe mecanice mari, cum ar fi acelea din epitelii, mușchi cardiac,
epiderm, col uterin și altele.
Aceste joncțiuni se prezintã sub douã forme, diferite structural și funcțional și anume
a. joncțiuni din filamente de actină:
- joncțiunile de aderențã celulară, care prezintã în citoplasmã situsuri de conectare la
filamentele de actinã zonele de contact între celule sunt sub formã de centurã (benzi de
aderență);
- joncțiuni aderente prin contacte focale sau plăci de adeziune;
- joncțiuni septate (numai la nevertebrate).
b. joncțiunile din filamente intermediare (desmosomii și hemidesmosomii), care
prezintã în citoplasmã situsuri de conectare.
Toate joncțiunile de ancorare au la baza organizãrii lor douã tipuri de proteine
- proteine intracelulare de atașare, care conecteazã complexul joncțional la
elementele specifice ale citoscheletului (filamente de actinã sau filamente intermediare)
- glicoproteine transmembranare de legare, al cãror domeniu intracelular se leagã
la una sau mai multe proteine de atașare intercelulare.
În funcție de structurile aderente, joncțiunile conecteazã între ele celule (celulã-celulã)
sau conecteazã celulele de matricea extracelularã (celulã-matrice).
a. Joncțiunile din filamente de actină
Joncțiunile de aderență celulă-celulă. În epitelii joncțiunile de aderențã au forma unor benzi
ce înconjoarã ca un cordon polul apical al celulelor și care s-au denumit benzi de aderențã.
Celulele învecinate au benzile de aderențã la același nivel, astfel cã membranele lor
interacționeazã prin intermediul proteinelor cu afinitate pentru calciu, numite cadherine.
Proteinele de adeziune celulară (CAM) se clasifică în 4 grupe: selectine, integrine,
superfamilia imunoglobulinelor (numite aşa deoarece conţin domenii structurale
asemănătoare Ig) şi cadherine. Adeziunea celulară mediată de selectine, integrine şi cadherine
este dependentă de Ca2+ sau Mg2+ iar adeziunea celulară mediată de Ig este independentă de
Ca2+.
3
Caderinele, proteine transmembranare care formeaza homodimeri în maniera Ca-
dependentă cu moleculele de caderină ale celulelor adiacente. Cadherinele formează legături
homofile (molecule de adeziune de pe suprafaţa unei celule se leagă de aceeaşi moleculă de
pe suprafaţa altei celule), fiind implicate în adeziunea selectivă dintre celulele epiteliale
embrionare, cât şi în formarea joncţiunilor stabile între celulele dintre ţesuturi. De exemplu,
cadherina E prin legături homofile induce adeziunea selectivă între celulele epiteliale,
cadherina N (neuronală) şi cadherina P (placentară) mediază adeziunea selectivă dintre
diverse tipuri de celule (Tabel 5.1.).
E-caderina (epitelială) este cel mai bine studiată, este alcătuită din 5 domenii
repetitive (EC1 ~ EC5) în domeniul extracelular, un domeniu transmembranar și domeniul
intracelular care leagă p120 catenina și beta-catenina. Domeniul intracelular conține o regiune
înalt fosforilată care leagă beta-catenina, care la rândul sau leaga alfa-catenina cu rol în
reglarea citoscheletului de actină. E-caderina este exprimată și fosforilată în celule în cursul
diferențierii. În țesuturile adulte, E-caderina este exprimată în țesuturile epiteliale, cu un timp
de înjumătațire de 5ore. Pierderea funcției E-caderinei sau lipsa exprimării acestei
glicoproteine membranare este implicată în dezvoltarea tumorii canceroase și în metastazare,
deoarece în asemenea condiții descrește rigiditatea și stabilitatea tisulară și crește motilitatea
celulelor, ceea ce permite celulelor tumorale să penetreze membrana bazală și să invadeze
țesuturile din jur.
Joncțiunile intercelulare prin legarea homofilică a caderinelor au un rol esențial în
segregarea tisulară. Apariția și dispariția caderinelor specifice este corelată cu etapele
dezvoltării embrionare, când celulele se grupează și își modifică contactele pentru a forma noi
structuri tisulare. În timpul formării tubului neural din ectoderm, celulele pierd E-caderina și
sintetizează N-caderina, în timp ce celelalte celule din ectoderm continuă să sintetizeze E-
caderina. Când celulele crestei neurale migrează din tubul neural, caderinele menționate sunt
greu detectabile, în schimb sunt exprimate în aceste celule caderine-7 care mențin sub forma
de grupări celulele migrate prin adeziune intercelulară. În final, când aceste celule agregă
pentru a forma un ganglion nervos, ele exprima N-caderinele.
Dacă într-o cultură de celule există celule care exprimă diferite tipuri moleculare de
caderine, ele vor fi sortate și vor agrega separat în funcție de tipul de caderină exprimată,
caderinele legându-se preferențial de propriul lor tip molecular.
Asamblarea celulelor în epitelii poate fi reversibilă. Exprimarea E-caderinelor
determină adeziunea celulelor neatașate, dispersate, denumite celule mezenchimale, care pot
astfel forma un epiteliu. Invers, celulele epiteliale se pot detașa, se dispersează și își pot
schimba caracterele migrând din epiteliul parental. Această tranziție epiteliu-mezenchim are
un rol important în dezvoltarea embrionară normală, dar are un rol important în procese
patologice la adult, în cancer, multe tipuri de tumori maligne având originea în epitelii.
4
Proteinele p120 denumite delta-catenine leagă regiunea juxtamembranară a caderinei.
- β-catenina sau γ-catenina (plakoglobina) leagă caderina la nivelul regiunii ce
conține situsul specific de legare al cateninei.
- α- catenina leagă caderina indirect, prin β-catenină sau plakoglobină.
5
Fig. 5.2. Structura unui desmozom în patã1. tonofilamente care se ancoreazã în spațiul
intercelular, 2. disc proteic, 3. spațiu intercelular, 4. plasmaleme, 5. filamente de
keratinã
(dupã Alberts, 1989)
6
3. Joncțiunile comunicante permeabile.
Celulele animale care se aflã în contact una cu cealaltã au pe membrana lor regiuni
joncționale specializate, care se caracterizeazã prin apropierea membranelor, între ele
rãmânând totuși un spațiu de 15 nm. Joncțiunile comunicante permeabile conecteaza direct
citoplasma a două celule și permit trecerea ionilor și moleculelor între celule.
O astfel de joncțiune este formată din 2 conexoni sau hemicanale, care străbat
spațiul intercelular. Conexonii sunt formați din homo sau heterodimeri de conexină -
proteină constitutivă. La nivelul joncțiunilor de comunicare, spațiul intercelular este de 4 nm
și unitățile conexonilor aparținând celor 2 celule adiacente sunt aliniate. Joncțiunile formate
din două hemicanale identice sunt denumite homotipice, iar cele formate din hemicanale
diferite sunt heterotipice. Hemicanalele formate din conexine identice sunt homodimerice,
cele formate din cenexine diferite sunt heterodimerice. Compoziția chimică influențează
funcțiile acestor canale, care sunt:
7
și un tip la celulele vegetale.
- plasmodesmele.
Joncțiunile “gap“ sunt cele mai rãspândite tipuri de joncțiuni comunicante, care se gãsesc în
toate tipurile de țesuturi. Acestea sunt realizate din proteine transmembranare, cilindrice,
numite conexoni. Astfel, se creazã un canal (2-4 nm) prin ambele plasmaleme adiacente (Fig.
5.4.).
Fiecare conexon are 6 conexine aranjate într-o rețea hexagonalã denumitã “hexamer“.
Prin acest canal creat pot trece ioni și molecule mici de 1000-1500 Dalton (glucide, vitamine,
aminoacizi, hormoni, nucleotide), dar nu pot trece macromoleculele (proteinele și acizii
nucleici).
Un aspect important al fiziologiei joncțiunilor “gap“ este acela cã, în prezența unei
concentrații mari de ioni de Ca2+, canalele conexiunilor se închid. Aceasta înseamnã că, în
cazul celulelor lezate mecanic, Ca2+ pãtrunde în spațiul extracelular și determinã închiderea
canalelor de comunicare.
În unele țesuturi cuplarea celulelor prin joncțiunile “gap“ este esențialã. Mușchiul
cardiac este format din celule conectate prin acest tip de joncțiune.
Joncțiunile “gap“ participã și la cuplarea electricã și contracția mușchilor netezi
responsabili de mișcãrile peristaltice.
La embrionii vertebratelor, celulele sunt cuplate electric una de alta. În momentul în
care un grup specific de celule își începe diferențierea, ele se decupleazã de țesutul din jur. De
exemplu, conductul neural se închide, celulele sale se decupleazã de celulele vecine din
ectoderm. Deci, toate celulele dintr-un grup rãmân cuplate una cu cealaltã și tind sã devinã
astfel un ansamblu celular în care, toate urmeazã aceeași cale de dezvoltare într-o manierã
coordonatã.
8
Plasmodesmele
Țesuturile plantelor sunt organizate pe principii diferite de cele ale animalelor. Aceasta
pentru cã celulele plantelor sunt “închise“ în pereți celulari rigizi, compuși din matrice
extracelularã bogatã în celulozã (Fig. 5.5.).