Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
PARAZITOLOGIE
SUPORT DE CURS
PENTRU SPECIALIZAREA
MEDICIN DENTAR
DIANA GHEEU
Doctor n Biologie
IAI
2011
UZ INTERN
Cuprins
I. Introducere n studiul organismelor patogene - metode clasice i moderne de investigare.
Ci de transmitere ale organimelor patogene. Tipuri de infecii
II. Infecia i rspunsul imun
III. Bacteriile morfologie, fiziologie, patogenitate.
IV. Coci i bacili patogeni
V. V.1 Leptospirele. Rickettsiile.
V.2 Micologie - noiuni generale. Dermatofiii.
VI. Candidoza i actinomicoza
VII. Microflora normal. Mecanismele aderenei, ocuprii i dezvoltrii microorganismelor
n cavitatea bucal
VIII. Microflora abcesului dentar. Microflora cariei dentare
IX. Microbiologia plcii dentare: formare i interaciuni microbiene.
X. Noiuni generale de parazitologie. Relaia gazd- parazit. Protozoonoze: ageni etiologici,
transmitere i combatere
XI. Helmintoze: ageni etiologici, transmitere i combatere
XII. XII. 1 Noiuni de entomologie medical
XII. 2Virusurile: structur, replicare.
XIII. Infeciile virale cu virusurile: poliomielitei, herpetice, gripale, hepatice; HIV
XIV. XIV. 1 Mecanisme de rezisten bacterian la substane antibacteriene.
XIV.2 Vaccinoterapia n infeciile virale
Bibliografie
1. Baumgartner, J.C., Microbiological and molecular analysis of endodontic infections,
Endodontic Topics, 2004, 7, 3551.
2. Buiuc, D., Negu, M., (sub redacia), Tratat de microbiologie c1inic, Ed. Medical,
1999.
3. Cajal, N., Tratat de virusologie, vol.l, Ed.Medical, 1990.
4. Cemescu, C., Virusologie medical, Ed.Medical, 1998.
5. Duca, R., .a , Microbiologie medical, Ed. Didactic, Bucureti, 1979.
6. Georgescu, M., Microbiologie medical i imunologie fundamental , I.M.F.,
Bucureti, 1983.
7. Harley, J.P., Prescott, L.M., Laboratory Exercises in Microbiology, Fifth Edition,
HarleyPrescott: The McGrawHill Companies, 2002
8. Markell, Edward, David John, Wojciech Krotoski. Medical Parasitology. Philadelphia:
W.B Saunders, 1999.
9. Nitzulescu, I. Gherman, Parazitologie Medical, Ed. Medical, Bucureti, 1986.
10. Pace, J.R. et al., Biofilms, Infection and Antimicrobial Therapy, Taylor & Francis
Group (Ed.) LLC, U.S., 2006.
11. Rdulescu, S., Meyer E., Diagnosticul bolilor parazitare. n Parazitologie medical, Ed.
All, Bucureti, 1992.
12. Shiba, C.R., et al., Atlas of medical parasitology, Kyokuseysia Co. Ltd., Japan, 2006
13. Titeica, M. (sub red), Practica laboratorului clinic I.M.F., Bucureti, 1981
14. Vojdani M., Zibaei MSc, Frequency of Bacteria and Fungi Isolated from Pumice in
Dental Laboratories, J Res Health Sci, 2006, Vol 6, No 1, pp. 33-38.
15. **Metode de laborator, vol. II, Ed. Medical, Ministerul sntii i Academia de
tiine Medicale, Bucureti, 1977
16. **Antibiograma difuzimetric: tehnica de lucru i citirea rezultatelor n Imunologie I.
Moraru, Ed. Medical, Bucureti, 1984
Curs I
Se ataeaz
Se multiplic
Modificri metabolice, morfologice, funcionale i clinice
Macroorganismul : aprare
Bariere naturale anatomice i fiziologice
Mijloace de aprare specifice i nespecifice
Figura 1. Schema procesului infecios.
3
Infeciile exogene sunt infeciile unde agentul infecios ptrunde n corp din exterior,
penetrarea se realizeaz prin: piele, mucoase, oral, uretral, vaginal i anal.
Pot exista infectii exogene excepionale i anume:
- infecii intrauterine,
- transplacentare
- infecia intrapartum.
n mod normal mucoasele i pielea posed mecanisme locale i sistemice de aprare:
strat protector, mucus, efectori umorali sau celulari ai imunitii. Dac organismul este slbit
datorit unor tulburri ale sistemului imun sau unor leziuni focale, ptrunderea agenilor
infecioi este uurat. Zonele frecvente de penetrare ai agentilor infecioi sunt: foliculii piloi,
glandele sudoripare i sebacee, minuscule leziuni ale pielii.
Infeciile endogene
Sunt generate de germenii care sunt deja existeni n organism.
Acestea apar la persoanele care au un sistem imunitar slabit, sau la persoane n vrst.
Att germenii virulenti ct i cei nevirulenti se pot multiplica n organismul uman, fr a
determina apariia bolii.
Atunci cnd sistemul imun i/ sau mecanismele de aprare local sunt deficitare, aceti gemeni
pot deveni infectioi.
Infeciile emergente
Sunt boli transmisibile, recent identificate i clasificate taxonomic i clinico-epidemiologic.
La sfritul secolului XX erau peste 30 de astfel de boli care pot s declaneze epidemii
periculoase i anume:
- infecia cu HIV,
- febra Ebola,
- sindromul pulmonar cu Hanta virus,
- febre virale hemoragice,
- infecia cu Campylobacter, Helicobacter,
- encefalopatiile spongiforme transmisibile,
- boala legionarilor,
- boala Lyme ( Borrelia burgdorferi).
Unele sunt boli nou aprute, altele existau de secole i au fost recunoscute doar recent din
cauza unor schimbri ecologice sau ambientale care au crescut riscul infeciilor umane.
Infeciile reemergente
Sunt boli infecioase vechi ca: tuberculoza i sifilisul, care au nregistrat o recrudescen
semnificativ din cauza schimbrilor complexului de condiii gazd-agent, etiologie-mediu.
Infeciile intraspitaliceti sunt afectiuni survenite n interiorul unui spital, afectnd
bolnavii spitalizai. Ele se mai numesc i infectii nosocomiale sau iatrogene sau infecii
ncruciate (cross infection). Aceste infecii apar n timpul spitalizrii, mai rar dup spitalizare,
n conditiile create de spitalizare i de actul medical sau chirurgical
Evolutiv infectia de spital a parcurs trei etape:
- prepasteurian (prevalen crescut i predominanta etiologic a germenilor nat
patogeni),
- pasteurian (datorit implementrii asepsiei i antisepsiei a sczut semnificativ
prevalena),
- modern i contemporan cu prevalent n cretere i implicarea predominant a
unor bacterii condiionat patogene.
Caracteristicile tulpinilor care dau aceste infecii sunt: rezistenta multipl la antibiotice i
antiseptice, capacitatea de colonizare i virulent crescut.
Cele mai ntlnite bacterii care dau aceste infecii i care alctuiesc fondul microbian
de spital sunt:
- enterobacteriile ( E. coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter spp.),
- Pseudomonas aeruginosa,
- Staphylococcus aureus, stafilococi coagulazo-negativi;
4
Organismele receptive se vor contamina i eventual infecta inhalnd: picturi, nucleosoli sau
praf septic.
- Aerul ncperilor poate fi contaminat cu intensitate variabil n funcie de: destinatia
acestora, densitatea surselor de agenti patogeni, i calitatea decontaminrii periodice.
- Prin aceast cale se pot transmite: difteria, gripa, scarlatina, tuberculoza etc.
Solul
Este o alt cale de transmitere a infeciei, 1 gram de sol poate conine 2-5x109germeni.
Solul nu este un mediu prielnic dezvoltrii agenilor patogeni.
In afar de bacteriile care sporuleaz, ceilali agenti
patogeni supravieuiesc o perioad limitat de timp zile sau luni).
In sol se pot ntlni: fungi, ou i larve de geohelmini.
Contaminarea i eventual infectarea omului se poate face prin:
- cale digestiv, consum ap sau vegetale crude nesplate,
- cale respiratorie prin inhalarea pulberilor din solul contaminat,
- prin tegumente cu integritate pierdut.
Prin aceast cale se pot transmite: tetanosul, poliomielita, salmoneloza, tuberculoza,
parazitozele.
Apa
4/5 din bolile cunoscute n lume sunt legate de insalubritatea apei.
Transmiterea agentilor patogeni se poate face:
direct
- de la sursele de ageni patogeni: dejecte (umane, animale), adparea animalelor bolnave,
scldarea (oamenilor sau animalelor), depunerea cadavrelor animalelor;
indirect are loc prin:
- aer, sol, alimente, recipiente
Transmiterea indirect se produce n: inundaii, averse de ploaie, cutremure, cataclisme.
n aceste momente apar defectiuni, avarii, cnd nu se face sau este insuficient decontaminarea
apei sau utilizarea neigienic a surselor de ap.
Prin aceast cale se pot transmite: febrele tifo-paratifoidice. dizenteria, holera, hepatita
A, poliomielita etc.
Alimentele
Atunci cnd nu sunt prelucrate igienic sau atunci cnd nu se respect circuitele. Contaminarea
lor poate fi:
- primar (de la origine) sau
- secundar (prin dejecte, animale bolnave sau purttoare, aer, ap, sol, insecte sau mini
murdare).
Prin alimente se pot transmite: trichineloza, tuberculoza, antraxul, bruceloza, salmoneloze
etc.
Obiectele
Pot constitui o alt cale de transmitere.
Ele pot transmite:
- direct (de la sursa de ageni patogeni prin produsele eliminate: secreii, sput, urin, fecale,
snge, puroi) sau
- indirect (prin aer, sol, ap, mini).
Prin aceast cale se pot transmite: salmoneloze, tuberculoza, hepatita A, parazitoze.
Transmiterea prin mini murdare.
Contaminarea poate fi
- direct (de la agenjii patogeni) sau
- indirect (prin germeni vehiculai prin: aer, ap, sol, alimente, obiecte, insecte).
Receptivitatea (gazdei)
Este starea organismului care nu-i confer acesteia posibilitatea de a nvinge o agresiune
microbian.
Gradul de receptivitate a unei populaii depinde de
- rezistena specific (imunitatea) care este dependent de prezena anticorpilor sau a unor
celule cu capacitate antiinfecioas.
- rezistent nespecific (general) este dependent de: integritatea barierelor cutanate i a
mucoaselor.
Imunitatea natural care se realizeaz fr intervenia omului i este de:
- specie omul i anumite animale fac anumite boli specifice;
- pasiv - urmare a transferului transplacentar de anticorpi,
- activ - imunitatea care apare dup trecerea prin boal.
Imunitatea artificial
Se realizeaz dup interventia omului, prin programe prevenionale.
Se utilizeaz produse biologice care ofer protectie specific.
Ea poate fi:
- activ - dup administrarea vaccinurilor;
- pasiv - dup administrarea de seruri imune sau de imunoglobuline (n acest caz
organismul este doar consumator).
Rezistena specific sau nespecific poate fi sporit prin utilizarea de: anticorpi monoclonali
cu aciune idiotipic i a sistemelor imunomodulatoare (imunostimulatoare ribozomale cu
aciune de aprare antiinfectioas).
Gradul de receptivitate depinde i de : vrst, alimentatie, profesie.
Manifestarea infeciilor n colectivitile umane
n funcie de: numrul, dispersia temporal i spaial a unor mbolnviri se disting patru
forme: sporadic, endemic, epidemic i pandemic.
1. n manifestarea sporadic, procesele morbide apar sub forma unui numr mic de
mbolnviri, distribuite pe un teritoriu ntins, la intervale mari de timp fr o legtur aparent
ntre ele.
2. n manifestarea endemic, morbiditatea este redus, mbolnvirile nu au legtur aparent
ntre ele, dar exist tendinta de concentrare spatial i temporal care pot duce la izbucnirea unor
epidemii.
Ele se pot ntlni n mod constant n anumite grupe de populatii, din unele zone geografice, sub
forma de cazuri dispersate care periodic pot crete ca frecvent (hepatita viral, dizenteria
bacilara, gua endemic).
Prin luarea unor msuri eficiente, o morbiditate endemic se poate transforma ntr-o
morbiditate sporadic sau poate fi eradicat pe teritoriul respectiv.
Sau cnd nu se iau msuri se poate transforma n morbiditate endemo-epidemic
Sau cnd nu se iau msuri se poate transforma n morbiditate endemo-epidemic
3. Manifestarea epidemic se caracterizeaz prin:
- natura debutului (exploziv, lent),
- extensivitate,
- severitate (complicatii i mortalitate),
- durata de evolutie (scurt, medie sau lung),
- modul de stingere (brusc, lent sau trenant) i
- perioada interepidemic (scurt, medie sau lung).
Ex. epidemii hidrice, aerogene, alimentare etc.
4. Manifestarea pandemic este o acumulare de epidemii cu caracter extensiv, intereseaz arii
mari de pe glob sau continente ntregi i n toate cazurile de imbolnviri exist legturi evidente.
Forme de exprimare :
1. Infecia inaparent : asimptomatic clinic, ns implic prezena agentului patogen i a
moficrilor imunologice. Exemple: poliomielita, hepatita acut viral, rubeola, infecia
meningococic.
9
Chiar i flora normal a organismului poate deveni patogen, mai ales dac printr-u accident,
sau o igien deficitar, ajunge n zone nespecifice (ex. E. coli din intestin dac ajunge n vezica
urinar poate s genereze infectii urinare).
O alt modalitate de infecie endogen este atunci cnd un germen i modific aspectul
patogen prin cptarea unor caractere sporite de patogenitate (virulen sau toxicitate).
Curs II.
apariia limfocitelot T sensibilizate (rspuns imun celular). Efectele acestui prim contact
poart numele de rspuns imun primar.
n desfurarea rspunsului imun (indiferent c este umoral sau celular) exist mai multe
etape:
recunoaterea Ag
activarea limfocitelor
meninerea memoriei Ag
RSPUNSUL IMUN UMORAL
Esena rspunsului imun de tip umoral este secreia de Ig (Ac) specifici ca urmare a
stimulrii antigenice a liniei limfocitare B.
Rspunsul imun care apare dup o prim expunere a unui organism la Ag se numete
rspuns imun primar. Ac sunt iniial de tip IgM, iar apoi nivelul acestora scade i apar Ac din
clasa IgG.
Rspunsul imun secundar se produce cnd acelai Ag se administreaz dup un
interval de timp. Aceast proprietate este posibil datorit faptului c n timpul desfurrii
procesului de difereniere, se desprinde un grup de celule care nu continu maturarea i
multiplicarea spre celule efectoare, ci rmn ntr-o etap timpurie de evoluie (n faza G1 a
ciclului mitotic). Rolul lor este acela de a pstra amintirea Ag, chiar dup totala sa eliminare,
de aceea poart numele de celule cu memorie. O nou stimulare antigenic produce
proliferarea i diferenierea n plasmocite a unora dintre celulele B cu memorie. Ac specifici
apar mai precoce, au o mai mare afinitate pt. Ag, nivelul lor seric crete mai rapid, iar secreia
este mai prelungit. Aparin clasei IgG. Acest rspuns imun presupune cooperarea intercelular
ntre limfocitele T i B, fr ajutorul altor celule.
Majoritatea Ag naturale, n special proteinele, necesit intervenia limfocitelor T pentru a determina un
rspuns imun umoral, de aceea se numesc Ag timodependente. Exist i Ag timoindependente, Ag care nu
necesit intervenia limfocitelor Th. n acest tip de proces nu se selecteaz celule cu memorie, nu exist rspuns
imun secundar, secreia este exclusiv de tip IgM, i dureaz luni de zile. Acest efect prelungit se explic i prin
faptul c odat format complexul Ag-Ac este fagocitat i digerat. Celulele fagocitare nu pot digera dect Ac,
elibernd Ag odat cu moartea celulei. Ag se va reinsera ntr-un nou ciclu.
Dup sinteza Ig, acestea se cupleaz cu Ag formnd complexele imune.
n cazul n care Ag este solubil, molecular, se formeaz complexe imune circulante care sunt epurate de
sistemul monocit/macrofag.
n cazul n care Ag face parte dintr-o membran celular, Ac se fixeax pe celul. Cuplarea ulterioar a
complementului duce la liza celulei sau la eliminarea celulei prin fagocitoz de ctre sistemul mononuclearfagocitic.
n unele situaii ns, rspunsul imun este inadecvat, exagerat, pierzndu-i rolul
protectiv i devenind nociv pentru organismul gazd. Ansamblul fenomenolor rezultate din
perturbarea proceselor imune, cu apariia unui rspuns imun capabil s produc leziuni
organismului gazd, poart denumirea de reacie imun. Pentru realizarea reaciei imune,
organismul face apel la o serie de factori nespecifici celulari i/sau serici. Aciunea lor este
complex i intricat, ei contribuind major la dezvoltarea inflamaiei locale, urmarea reaciei
imune.
Reaciile imune, prin caracterul lor sistemic, pot determina leziuni la nivelul tuturor
aparatelor i sistemelor organismului, iar cnd reacia este foarte intens poate produce chiar
moartea individului.
n funcie de mecanismul lor de producere, reaciile imune au fost mprite de Gell i
Coombs n patru tipuri principale:
- tipul I sau reacia anafilactic - contactul Ag-Ac este urmat de eliberarea de
substane biologic active ce acioneaz predominent pe muchuil neted i vase
- tipul II sau reacia citotoxic - Ac lezeaz direct celula alterndu-i structura sau
funcia i predispunnd-o la liz sau fagocitoz
- tipul III sau reacia prin complexe imune - depunerea tisular a CI i fixarea
complementului determin atragerea PMN i declanarea procesului inflamator
- tipul IV sau hipersensibilitatea tardiv - apare prin exagerarea rspunsului imun
celular.
Roitt descrie i tipul V de reacie imun, asemntor cu tipul II, dar n care Ac fixai pe
celul nu o distrug ci i modific numai funcia.
ORGANELE LIMFATICE
A. ORGANELE LIMFATICE PRIMARE sunt organele n care are loc diferenierea i
maturarea limfocitelor. Sunt considerate organe limfatice primare mduva osoas i ficatul,
responsabile de diferenierea limfocitelor B i timusul, sediul de difereniere al limfocitelor T.
1. Mduva osoas i ficatul:
Mduva osoas conine esutul hematopoetic i reprezint locul de origine al tuturor
celulelorsanguine la adult. Ea include i precursorii celulelor limfatice, seria limfoid
reprezentnd 5-15%.
Diferenierea celulei stem n elemente limfoide se face n trepte succesive, fenomenul fiind
independent de existena stimulrii antigenice, mduva osoas neavnd de altfel ci aferente i
modaliti de captare i prelucrare a antigenului. Proliferarea i maturarea precursorilor celulari
din mduva osoas se face sub influena unor citokine numite factori de stimulare ai coloniilor
(colony-stimulating factors). Ei sunt sintetizai de celule medulare stromale i de macrofagele
din mduv i creeaz un mediu local favorabil hematopoezei. Mduva osoas mai conine i
un procent variabil (ntre 5 i 15%) de plasmocite, formate la nivelul organelor limfatice
periferice ca o consecin a stimulrii limfocitelor B de ctre Ag.
Mduva osoas reprezint locul unde se desfoar post-natal diferenierea limfocitelor
numite B. La om, prenatal, acest proces se desfoar n ficat, n timp ce la psri el are loc
ntr-un organ limfo-epitelial numit "bursa lui Fabricius". De aici a provenit de altfel iniial i
denumirea acestor limfocite -B- bursodependente. Ulterior, cnd s-a vzut c procesul se
desfoar la om n mduv "bone marrow", denumirea acestui tip de limfocite s-a consolidat.
De menionat c limfocite provenind din mduv populeaz i timusul (mai ales corticala) unde
se pot diferenia n limfocite T.
Ficatul reprezint doar sediul primar, precoce de hematopoez, fiind locul prenatal de
difereniere i maturare a limfocitelor B. La adult, doar n unele circumstane patologice (cum
ar fi policitemia vera) ficatul i reia funcia hematoformatoare.
2. Timusul:
Timusul este un organ limfoepitelial care apare devreme n embriogenez, crete n
perioada intrauterin i atinge o dezvoltare complet la natere, pentru ca dup pubertate s
sufere un proces de involuie, probabil indus hormonal prin corticoizi i androgeni.
13
Situat n mediastinul anterior, timusul este format din 2 lobi, acoperii de o capsul
fibroas, fiecare lob este organizat n lobuli, separai ntre ei prin trabecule de esut conjunctiv.
Lobulii la rndul lor, prezint o zon periferic (corticala) i o zon central (medulara).
n cortical se gsesc predominent celule limfocitare mari, imature care i au originea n
mduva osoas (n perioada adult), caracterizate printr-o vie activitate de multiplicare. Pe
msur ce migreaz spre medular prolifereaz i sufer un proces de maturaie.
n medular se gsesc predominent celule epiteliale reticulare ce contin n citoplasm
granulaii bogate n hormoni timici, unele celule fiind aglomerate n grupuri constituind corpii
Hassall; tot n medular se gsesc limfocite mici, mature, asemntoare celor din sngele
periferic.
n esen, participare timusului la meninerea homeostaziei imune privete dou aspecte
fundamentale:
a. realizeaz maturaia precursorilor limfocitari T;
b. asigur distribuia limfocitelor T ctre anumite arii ale organelor limfatice periferice,
numite zone timodependente. Aceste zone sunt: zonele paracorticale ale ganglionilor limfatici
i zonele periarteriolare din pulpa alb a splinei. Acest lucru este realizat graie unor receptori
de tip "homing" pe care limfocitele T i achiziioneaz pe tot parcursul lor intratimic.
Formarea limfocitelor T mature este rezultatul unui ir complex de etape de proliferare,
difereniere i maturare, care implic exprimarea la suprafaa celulelor a unor receptori
eseniali n recunoaterea antigenelor (TCR, CD4, CD8), n activarea metabolic limfocitar
(CD28, CD45) sau n adeziunea intercelular ca (CD2, LFA1 etc.). Proliferarea este controlat
de citokinele eliberate local, iar diferenierea apare n urma contactului limfocitelor cu celulele
stromei timusului, contact ce asigur generarea unor celule imunocompetente i departajarea
funcional pe liniile helper, citotoxic, supresoare i contrasupresoare.
ns, dup ce limfocitele T exprim pe suprafaa lor aceti receptori, marea majoritate mor
in situ prin apoptoz = moarte celular programat. Acestea reprezint aa numitul contingent
distrus, distrugerea lui mpiedicnd apariia procesului de autoimunitate. Puinele limfocite
rmase viabile (contingentul posttimic), trec n circulaie dup un pasaj prin medular.
Distrucia celular prin apoptoz i nu prin necroz nu las s ptrund n mediul extracelular
diversele debriuri celulare care ar putea declana un rspuns local inflamator, protejnd astfel
structura i funcia acestui organ. n plus, celulele apoptotice exprim pe suprafaa lor receptori
care permit recunoaterea i ingestia lor de ctre macrofage i epurarea lor rapid.
B. ORGANELE LIMFATICE PERIFERICE reprezint sediul unde se iniiaz i se
desfoar rspunsul imun. n aceast categorie sunt incluse att organe capsulate ca splina i
ganglionii limfatici, ct i esuturile limfoide difuze, asociate tubului digestiv (notat GALT Gut Associated Lymphoid Tissue), cilor respiratorii (BALT - Branchial Associated Lymphoid
Tissue) sau esutului cutanat (SALT - Skin Associated Lymphoid Tissue).
1. Splina este cel mai mare organ limfatic; ea este delimitat la exterior de o capsul ce
conine fibre musculare netede, din care se desprind trabecule ce ptrund n parenchim i
compartimenteaz organul. n parenchimul splenic se disting dou sectoare, diferite att ca
structur ct i ca funcie:
-pulpa roie situat la periferia lobulilor, alctuit predominent din macrofage cu rol n
fagocitarea hematiilor senescente i care aparine sistemului mononuclear-fagocitic;
-pulpa alb situat n jurul arteriolei centrale care conine esut limfoid numit PALS Peiarteriolar Lymphoid Sheath); acesta la rndul ei are 2 zone, una strinc periarteriolar, ce
conine n special limfocite T i formeaz (cum spuneam mai devreme) zona timodependent a
splinei i alta la periferia PALS ce conine aproape exclusiv limfocite B, organizate sub form
de foliculi - zona timoindependent. Aceti foliculi pot fi primari sau secundari, formai din
celule B activate antigenic, caz n care poart denumirea de centrii germinativi.
ntre pulpa roie i cea alb, la periferia foliculilor limfatici, se gsesc sinusurile marginale,
unde exist att limfocite T ct i B, precum i magrofage i celule dendritice, absolut necesare
(cum vom vedea n continuare) pentru cooperarea celular din cadrul rspunsului imun.
Funcia imunologic a splinei se exprim n special n generarea unor rspunsuri imune fa
de Ag aflate n circulaia sistemic.
14
Rolul important pe care l joac splina n aprarea antiinfecioas este demonstrat de faptul
c la bolnavii splenectomizai apar infecii severe, mai ales cu germeni incapsulai (ca
pneumococii i meningococci).
2. Ganglionul limfatic constituie un adevrat filtru situat pe traiectul cilor limfatice. El
este de asemenea delimitat de o capsul fibroas ce trimite spre interior septuri fibroase
incomplete. Histologic, la nivelul ganglionului limfatic se disting trei zone:
- zona cortical - situat la periferie, alctuit din limfocite B aranjate sub form de foliculi
primari sau secundari (centrii germinativi), cu o structur asemntoare omonimilor lor din
PALS. Foliculii constituie zona timoindependent sau bursodependent.
- zona paracortical - situat sub cea cortical conine predominant limfocite T (din acest
motiv purtnd denumirea de zon timodependent), precum i un mare numr de macrofage.
- zona medular - situat parahilar i alctuit din vase sanguine, sinusuri limfatice,
limfocite B, T, plasmocite macrofage i celule dendritice.
Dup stimularea antigenic, limfocitele T i B migreaz unele spre altele, pierzndu-i
aceast repartiie anatomic. Limfocitele T activate prsesc ganglionul limfatic i ptrund n
circulaia sistemic, iar limfocitele B activate migreaz spre centrii germinativi unde
sintetizeaz anticorpi.
O atenie special este acordat segmentului vascular denumit venul postcapilar situat
paracortical, ale crei celule endoteliale sunt cilindrice i nalte i poart denumirea de High
Endothelial Venules - HEV. Aceast zon cu celule cilindrice este locul de trecere al
limfocitelor din circulaia sanguin n ganglion. Ele au pe suprafaa lor molecule de adeziune
numai pentru limfocite, fiind neutre fa de alte celule circulante.
3. Alte esuturi limfatice
Zone de esut limfatic exist n submucoasa unor poriuni din tractul digestiv (GALT) sau
respirator (BALT), precum i din tegument (SALT). n unele teritorii aceste colecii sunt
suficient de mari pentru a fi individualizate. Astfel, la nivelul tubului digestiv exist n jurul
faringelui inelul limfatic al lui Waldayer, compus din amigdalele faringiene, palatine, linguale,
iar la nivelul ileonului se gsesc plcile Peyer. Acestor structuri li se asociaz apendicele.
Colecii similare de esut limfatic se gsesc i la nivelul arborelui bronic (mai ales la bifurcaia
bronhiilor mijloci sau la jonciunea bronho-alveolar) i n tegument.
Importana acestui sistem imun rezid nu numai din faptul c el reprezint un mijloc
eficient de aprare la nivelul principalelor pori de intrare ale organismului, controlnd
contactul cu o multitudine de Ag cu poart de intrare digestiv, respiratorie i cutanat, ci i din
faptul c ele sunt organe limfopoetice importante i pot fi, la adult, surse de limfocite B sau T.
CELULELE SISTEMULUI IMUN
Celulele sistemului imun sunt: limfocitele, celulele prezentatoare de Ag (CPA) i celulele
efectoare
A. LIMFOCITELE
Limfocitele reprezint componentul celular major al sistemului imun. Ele constituie o
categorie de celule ce grupeaz mai multe populaii celulare similare morfologic, dar diferite
din punct de vedere funcional. Limfocitele provin din organele limfatice primare (timus,
mduva osoas i, n perioada intrauterin, ficatul). O parte din aceste celule trec n circulaia
periferic i migreaz ctre organele limfatice periferice. Restul rmn pentru o perioad n
circulaia general ca limfocite circulante unde totalizeaz aproximativ 25% din elementele
figurate albe. ntre cele dou sectoare exist o recirculaie permanet, asigurnd o
supraveghere imun competent i continu folosind un numr relativ mic de celule.
Recirculaia i migraia limfocitelor este reglat de moleculele de adeziune de pe suprafaa lor,
ce corespund unor alte molecule de adeziune de pe suprafaa celulelor endoteliale sau matricei
extracelulare, precum i de chemokinele secretate de la nivel tisular.
Durata de via a limfocitelor n sngele periferic variaz ntre 1 i 300 de zile, existnd i populaii
limfocitare care au o durat de via lung, de luni sau chiar ani, ele recirculnd n permanen ntre cele dou
sectoare ca celule cu memorie.
Limfocitele sunt singurele celule din organism capabile s recunoasc specific diferii determinani antigenici,
fiind astfel responsabile de dou dintre proprietile fundamentale ale rspunsului imun, specificitate i memorie.
15
1. Limfocitele T
La adultul sntos celulele T reprezint 60-80% din totalul limfocitelor, cea mai mare parte
avnd o durat de via lung, fiind celule intens recirculate. La microscopia optic
diferenierea dintre limfocitele T i B este practic imposibil. Prin prezena pe suprafaa lor a
unor receptori caracteristici, este posibil ns identificarea lor.
Care sunt acetia?
1. Receptorii limfocitului T, notai TCR (T cell receptor). Acetia au proprietatea fundamental de a
recunoate i a lega Ag. Sunt transmembranari i au o structur asemntoare poriunii Fab a moleculei de Ig,
fiind alctuii din 2 lanuri diferite de polipeptide, legate ntre ele prin puni disulfidice. Se cunosc 2 tipuri de
TCR: TCR1, primul care apare n timpul vieii intrauterine, compus din 2 lanuri i i TCR2 prezent pe
suprafaa a 95% din limfocitele T, alctuit din lanuri polipeptidice notate i . Ambele tipuri de receptori au un
domeniu variabil, n poriunea NH2-terminal, i unele constante. Aceti receptori sunt legai de membrana
limfocitelor T prin intermediul unui alt grup de 5 lanuri polipeptidice notate CD3 i care au rolul de a transmite
semnalul activator n interiorul celulei, formndu-se astfel un complex TCR-CD3 care are proprietatea de a se lega
att de Ag cu care vine n contact celula, ct i de moleculele Ag de histocompatibilitate.
Astfel, limfocitele T nu recunosc Ag native solubile (recunoscute de limfocitele B i Ac) ci numai pe acelea
cuplate cu MHC, fiind vorba de o recunoatere asociativ.
2. CD2 - unul dintre primii markeri de suprafa, prin care celula fixeaz n jurul ei un numr de eritrocite de
oaie cu formarea unor rozete (metoda este nc folosit pentru pentru identificarea i separarea limfocitelor T). E
prezent pe toate tipurile de limfocite T i pe NK. Are rol n aderarea limfocitelor T la APC sau celulele int (prin
legarea de contraligandul su LFA3) i rol accesor n activarea celular.
3. CD4 glicoprotein de suprafa situat predominent pe suprafaa celulelor Thelper (definitorie pentru
aceast clas de celule). CD4 reprezint receptorul T pentru moleculele MHC de tip II. Stabilirea legturii ntre
limfocitul T CD4+ i APC prin intermediul moleculei de MHC II contribuie esenial la recunoaterea Ag.
4. CD8 tot de natur glicoproteic, distribuit pe membrana limfocitelor T supresoare, contrasupresoare i
citotoxice. CD8 interacioneaz cu moleculele MHC I.
5. CD5 se gsesc pe toate limfocitele T i pe un subset de limfocite B.
6. CD28 prezent pe 95% dintre limfocitele T CD4+ i 50% din cele CD8+ are rol n activarea celular,
precum i rol de molecul de adeziune.
7. MHC I i II
8. Receptori limfocitari T cu funcie n adeziunea celular
Indiferent de particulariti, funciile efectorii ale diverselor celule imune implic n mod obligatoriu
adeziunea intercelular, proces cruia i se acord n ultima vreme o atenie tot mai mare. Adeziunea celular este
implicat att n funciile efectorii imune ct i n repartiia specific a diverselor tipuri de limfocite n anumite arii
ale sistemului imun. Principalii receptori limfocitari implicai n aderarea intercelular LFA (Ag asociat funciei
limfocitare), VLA , CD2 i CD4 pentru limfocitele Th i CD8 pentru limfocilele Tc. Astfel, moleculele de
adeziune au rol n:
-respingerea forelor electrostatice de respingere dintre 2 celule
-realizarea unui contact prelungit ntre celulele care urmeaz s coopereze
-favorizarea recunoaterii Ag
-rol accesor n activarea celular.
Clasificarea limfocitelor T se face dup funcia pe care o ndeplinesc, precum i dup tipul
markerilor de suprafa. Se deosebesc aslfel mai multe tipuri de celule T, cele mai importante
fiind:
a. Limfocitele T ajuttoare sau helper
- sunt CD4+ i recunosc Ag specifice asociate cu Ag HLA II.
- unele limfocite Th colaboreaz cu limfocitele B i macrofagele n inducerea rspunsului imun umoral, iar
altele colaboreaz cu alte celule T la producerea limfocitelor Tc intervenind n rspunsul imun celular.
- exist 5 subtipuri, 2 fiind mai bine cunoscute: Th1 care intervin n rspunsul imun celular prin stimularea
dezvoltrii limfocitelor Tc, creterea activitii macrofagice. Limfocitele Th2 care intervin n procesele atopice,
coordonnd secreia de IgE, IgA i IgG1, induc proliferarea eozinofilelor i a mastocitelor. Ele i exercit aciune
prin sinteza unor proteine numite citokine. Astfel, diferenierea lor nu se face pe criterii fenotipice ci n funcie de
16
b. Limfocite T supresoare
- sunt limfocite reglatoare care diminu att rspunsul imun umoral ct i pe cel celular
- majoritatea sunt celule CD8+
- formarea lor din din precursori este urmarea contactului cu Ag, fr implicarea MHC.
- recunosc determinanii Ag, elaboreaz factori supresori solubili cu funcie de contrareceptori blocani
- la rndul lor sunt supuse controlului inhibitor al limfocitelor T contrasupresoare.
- prin stimulare Ts de ctre Ag proprii (self) este prevenit procesul de autoimunitate.
c. Limfocitele T citotoxice
- sunt responsabile de citotoxicitatea mediat celular; ea este implicat n aprarea antiviral, antitumoral i
respingerea grefelor.
- provoac liza celulelor care poart pe suprafaa lor Ag
- au determinani antigenici de tip CD8+ i mai puin CD4+
- pentru ca Ag s fie recunoscut de ctre limfocitele Tc, el trebuie s fie asociat cu Ag MHC I, similar celui al
limfocitelor Tc. Acest fenomen poart numele de restricie HLA.
d. Limfocite T inductoare
- sunt CD4+, i recunosc Ag asociat cu MHC II
- stimuleaz activitatea altor limfocite T (helper, suppresor, citotoxice)
e. Limfocitele T cu memorie
- sunt formate n timpul rspunsului imun primar, sunt CD4+
-au o via lung, de peste 40 ani, dar perioada lor activ este de numai 10-15 ani.
Se poate astfel observa c limfocitele T joac un rol esenial n reglarea rspunsului imun, justificnd
afirmaia potrivit creia "Limfocitul T este dirijorul orchestrei imunologice"
2. Limfocitele B
Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor circulante; au o durat de via
scurt (cteva zile). Ele sunt precursorii celulelor care sintetizeaz Ac, plasmocitele.
3. Celule natural killer (NK)
Celulele NK reprezint un subset de limfocite care au capacitatea de a omor celule
infectate i celule care i-au pierdut moleculele MHC I. De asemenea, celulele NK stimuleaz
macrofagele s distrug microbii fagocitai. Termenul de natural killer provine de la faptul c
aceste celule i exercit funcia citotoxic fr a necesita o activarea prealabil. De asemenea,
spre deosebire de limfocitele Tc, celulele NK nu i recunosc specific inta, similitudinea ntre
Ag MHC de pe cele 2 tipuri de celule nefiind necesar. Activitate lor nu este deci supus
fenomenului de restriciei HLA.
Celulele NK au pe suprafaa lor i receptori pentru poriunea Fc a IgG (FcRIII-CD16).
Acest lucru explic proprietatea lor fundamental de citotoxicitate fa de celule care au fixat
pe suprafaa lor Ac specifici i de care se leag prin intermediul acestor receptori. Acest
fenomen poart denumirea de citotoxicitate mediat de Ac, la realizarea lui nefiind necesar
participarea complementului.
Activitatea celulelor NK este stimulat de citokine ca: IL-15, IL-12, IFN.
B. CELULE PREZENTATOARE DE AG
Celulele prezentatoare de Ag (CPA) sunt celule specializate n capturarea Ag,
prezentarea lui limfocitelor i declanarea unor semnale care favorizeaz activarea limfocitelor.
Exist 2 categorii de CPA:
a. "profesionale": macrofagele, celulele dendritice i LB
b. "ocazionale": PMN (m.a. neutrofilele), celulele endoteliale.
1. Macrofagele
Sistemul mononuclear fagocitic sau sistemul monocit/macrofag sau reticulo-endotelial
reunete celule (monocitul i macrofagul) care au origine medular comun, precum i
caractere histologice (sunt celule mononucleare) funcionale (capacitate de fagocitoz)
similare. Rolul lor fundamental este aprarea mpotriva bacteriilor intracelulare i a fungilor.
Au origine n seria monocitar a sistemului hematopoetic; precursorii lor sunt monoblastulpromonocitul-monocitul,
17
Monocitele reprezint 1-8% din leucocite, au un T1/2 de 8-72 ore, dup care prsesc
torentul circulator i migreaz tisular, difereniindu-se n macrofage. Ele au un diametru de 10
15 m, un nucleu mare i o citoplasm bogat n lizozomi, vacuole i filamente de
citoschelet. Procesul de difereniere presupune: creterea dimensiunilor celulare, amplificarea
aparatului mitocondrial i lizozomal, dezvoltarea proprietilor de fagocitoz i sintez, apariia
unor receptori pe suprafaa celulei.
Macrofagele tisulare sunt heterogene, avnd morfologie, funcii i capacitti metabolice
diferite, n funcie de esutul cruia i aparin. Macrofagul este o celul cu diametru de 10-25,
cu nucleu mare, cu multe granule lizozomale i vacuole n citoplasm. Ele au cptat denumiri
specifice, n funcie de locul de reziden: Mf din esutul conjunctiv se numesc histiocite, cele
din ficat - celule Kupffer, cele din esutul nervos - celule microgliale, cele din plmn macrofage alveolare, cele din os - osteoclaste, cele din articulaii - sinoviocite A, etc.
2. Celulele dendritice
Celulele dendritice reprezint o populaie leucocitar particular, caracterizat morfologic
de prezena unor prelungiri citoplasmatice, iar funcional prin capacitatea de a prezenta
antigenul (sunt celule prezentatoare de antigen profesioniste) i o extraordinar capacitate de a
stimula limfocitele T native i de a iniia un rspuns imun.
Celulele dendritice au origine i pot ndeplini rolul de CPA, datorit prezenei pe suprafa a moleculelor
MHC II i a receptorilor pentru Ag. Ele au capacitatea de a capta Ag i de a-l transporta la nivelul organelor
limfatice periferice. Dup sediul lor pot fi mprite astfel:
a. cele din organele nelimfatice:
-celulele Langerhans care se gsesc n special n tegument (formeaz o reea n stratul bazal i n epiteliul
scuamos), dar i la nivelul mucoasei bucale, faringe, col uterin. Pe suprafaa lor au molecule HLA II, receptori
pentru complement i pentru Fc. Ele pot fixa astfel complexele imune. Sunt implicate mai ales n
hipersensibilitatea cutanat de contact.
-celule interstiiale situate n plmn, tractul digestiv, cord, ficat, rinichi
b. cele din organele limfatice:
-celulele interdigitale - se gsesc n zonele limfatice bogate n limfocite T, cu care coopereaz (zonele
paracorticale ale ggl. limfatic, pulpa alb a splinei).
-celulele foliculare - se gsesc n foliculii limfatici din corticala ganglionilor limfatici i pulpa alb a splinei,
adic zone bogate n limfocite B. Multitudinea de arborizaii le permite un contact intim cu limfocitele B, ele
prezentnd acestora Ag ca atare, nedegradat sau n complexe imune, ntr-un proces independent de MHC.
C. CELULELE EFECTOARE
Limfocitele stimulate antigenic se transform n celule efectoare, al cror rol esenial este
acela de a elimina Ag. n aceast categorie sunt incluse: limfocitele T helper, limfocitele T
citotoxice i plasmocitele. Limfocitele T helper activate exprim receptori de suprafa i
secret numeroi produi care le permit s interacioneze cu alte celule. Limfocitele T
citotoxice activate dezvolt granule care conin proteine capabile s omoare celulele infectate
viral sau celulele tumorale. Limfocitele B stimulate antigenic se transform n celule capabile
s sintetizeze imunoglobuline, numite plasmocite. Morfologia acestora este diferit: nuclei
deni, citoplasm abundent, cu reticul endoplamatic bine reprezentat (acesta fiind sediul de
sintez al imunoglobulinelor) i complex Golgi perinuclear cu rolul de a converti
imunoglubulinele n forma final sub care sunt sintetizate.
IMUNOGLOBULINELE sau ANTICORPII
Imunoglobulinele (Ig) reprezint o familie de glicoproteine care au proprietatea de a
reaciona n mod specific cu Ag a crui recunoatere de ctre sistemul imun a condus la sinteza
lor, motiv pentru care li s-a conferit denumirea de Ac. Ele sunt sintetizate de limfocitele B fie
asociate membranei celulare unde joac rolul de receptori, fie sub form seric. Ig reprezint
aprox. 20% din proteinele plasmatice i migraz n cea mai mare parte n zona electroforetic
gamma. n afar de ser, o cantitate variabil de Ig se gsesc n lichidele extravasculare,
secreiile exocrine i esutul limfatic, dar nu depesc bariera hemato-encefalic.
Structura general a unei Ig
n alctuirea Ig, proporia glucidic reprezint doar 4-18%, restul fiind polipeptide. Fiecare
molecul de Ig este alctuit din cel puin o unitate monomeric de baz. O asemenea unitate
monomeric conine 4 lanuri polipeptidice, a cror coeziune este realizat prin puni
disulfidice. Aceste puni sunt dispuse att ntre lanuri (intercatenare) ct i n interiorul
aceluiai lan polipeptidic (intracatenare) i sunt eseniale pentru configuraia tridimensional a
moleculei. Forma este cea a unui Y.
Cele 4 lanuri sunt reprezentate de 2 lanuri grele notate cu H (de la heavy=greu) cu o greutate molecular
de 55 75 kD i 2 lanuri uoare notate L (de la light=uor) a cror greutate molecular este de aproximativ 24
kD. Aezarea lor este simetric. fiecare lan polipeptidic are o extremitate aminoterminal, denumit poriune
variabil (V) i un capt carboxi-terminal denumit poriune constatnt. Prin apropierea regiunilor variabile se
realizeaz o structur tridimensional numit situs combinativ sau paratop, care interacioneaz cu epitopul Ag
specific. n afara acestora se mai descriu i nite regiuni numite hipervariabile sau CDR (complementarity
Determining Region), caracterizate printr-o compoziie foarte variabil de amino-acizi, situate att pe lanutile H
19
Tipurile de Ig
Dup tipul de lan H, Ig se clasific n 5 tipuri, cu structuri i proprieti diferite, pe care,
foarte pe scurt, le vom trece n revist n continuare:
1. IgG
- reprezint clasa dominant din serul uman, adic 75% din totalul Ig
- au cea mai mare durat de via (3 sptmni).
- d.p.d.v. structural IgG este un monomer, alctuit din 2 lanuri H de tip i 2 lanuri uoare care pot fi de tip
sau . Lanurile H sunt mprite n 4 subtipuri notate 1, 2 , 3 i 4, care definesc cele 4 subtipuri de IgG: IgG1,
IgG2, IgG3 i IgG4.
3. IgM
- este cea mai mare Ig, fiind alctuit din 5 monomeri identici unii ntre ei prin lanuri J i
legturi disulfidice la nivelul fragmentelor Fc.
- lanul H este de tip , iar cele L sunt fie fie
- este principala Ig a rspunsului imun primar
- are cea mai puternic aciune de activare a cii clasice a complementului, o singur
molecul de Ig M fiind suficeint pentru a fixa C1q.
-se poate sintetiza i local, forma secretorie posednd ca i IgA o component suplimentar.
4. IgD
- reprezint < de 1% din Ig serice
- este un monomer, n care lanul H este de tip
- semnificaia lor fiziologic nu este deplin elucidat, dar s-a dovedit c IgD, ca i IgM au
rolul de receptor pnetu Ag la suprafaa membranei limfocitului B.
4. IgE
- se mai numesc i reagine
- au cel mai scrut timp de mjumtire (2-3 zile)
- sunt monomeri, lanul H este de tip
20
Activare PMN, Mf
Chemotaxie
Degranularea mastocitelor
ANTIGENELE
Antigenul este o substan, cel mai adesea strin organismului, capabil ca n
momentul ptrunderii sale n organism, s declaneze un rspuns imun (umoral sau celular) i
s reacioneze specific cu produii acestui rspuns imun (limfocite T sensibilizate sau Ig).
Se impun ns cteva meniunii fa de aceast definiie:
imunogenul este o substan capabil doar de a declana un rspuns imun
exist unele Ag care, n anumite condiii legate de calea de ptrundere sau concentraie,
pot induce inhibiia, supresia rspunsului imun ateptat, prin stimularea mecanismelor
supresoare. Acestea se numesc Ag tolerogene.
nu toate Ag sunt exogene. Exist i Ag endogene, cum ar fi autoantigenele (structuri
proprii devenite non-self) sau Ag tumorale.
Poriunea din Ag care interacioneaz cu Ac sau cu receptorii limfocitelor T poart
denumirea de determinant antigenic sau epitop. El este de fapt un subcomponent al
macromoleculei antigenice. Acesta poate avea o structur liniar (recunoscui numai de
limfocitele T) sau aminoacizii pot veni n contact fr ca pe lanul polipeptidic s fie alturai epitop conformaional- (recunoscui de limfocitele B). Epitopul poate fi situat la suprafaa
moleculei de Ag sau se poate gsi n interiorul acesteia, mai ales n structurile moleculare
complexe, caz n care se poate exprima numai dup degradarea parial i deplisarea restului
moleculei de Ag. O molecul de Ag poate avea mai muli determinani antigenici, fiecare
dintre acetia putnd induce sinteza unui Ac, proprietate numit plurivalen.
Caracteristicile fundamentale ale Ag sunt imunogenicitatea, specificitatea i
adjuvanticitatea.
A. Imunogenicitatea
Pentru ca o substan s fie imunogen ea trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
1. s fie strin organismului - cu ct ntre organismul gazd i cel cu ale crui
molecule nteracioneaz sunt mai diferite filogenetic, cu att acestea din urm sunt mai
imunogene. Exist nsi excepii n care substane strine organismului nu sunt antigenice, iar
altele proprii pot deveni antigenice n anumite condiii (aceast situaie este substratul bolilor
autoimune).
2. s aib o greutate molecular mare - n general molecule < de 5-10 kdaltoni nu sunt
imunogene. i n aceast privin exist ns excepii.
3. s aib o structur chimic complex - o molecul complex, cu un numr mare de
determinani antigenici, este mai imunogen. Cu excepia lipidelor pure, toate macromoleculele
sunt imunogene. Proteinele, mai ales cele bogate n aa aromatici, au cel mai puternic potenial
imunogen.
4. s fie digerabile - pt. a induce un rspuns imun, Ag trebuie s fie prelucrate de unele
celule (m.a. macrofagele). cele care nu pot fi digerate de echipamentul enzimatic al acestora nu
sunt imunogene.
5. s fie accesibil spaial - pentru a putea permite contactul cu paratopul
6. s aib o remanen mare n organul gazd - remanen legat de starea de
solubilitate. Cu ct o substan este mai insolubil, cu att este mai antigenic.
B. Specificitatea
22
III.1. Morfologie
Pentru descrierea i identificarea bacteriilor exist mai multe criterii: morfologia, afinitatea
tinctorial, sporogeneza, mobilitatea etc..
Morfologic, bacteriile prezint:
Capsul de natur polizaharidic complex cu molecule neramificate lipsite de miez
lipopolizaharidic, puternic hidratat (99% ap).
Membrana extern - stratul exterior al peretelui celular, este triplu stratificat.
Peretele bacterian -cu componenta principal mureina sau peptidoglicanul, polimeri micti,
din dou tipuri de hexoze: N-acetilglucozamina (G) i acidul N-acetilmuramic (M).
Membrana citolplasmatic - delimiteaz citoplasma cu componentele sale structurate:
o nucleoid- reprezentat de cromozomul bacterian,
o ribozomi, etc.
Flagel(i)- flexibil(i)- cu rol n micare.
Pili (Fimbrii) imobili.
Protoplatii sunt forme bacteriene lipsite de perete bacterian, create artificial, meninute n
medii osmotice capabile s protejeze de liz bacterian. In medii hipotone aceste celule se
sparg, iar la medii hipertone se ratatineaz. Protoplatii provin din bacterii Gram-pozitive.
Sferoplatii sunt forme bacteriene create artificial prin indeprtarea parial a peretelui.
Peretele este lipsit de murein, ns conine lipide, motiv pentru care au aspect sferic.
Sferoplatii provin bacterii Gram-negative.
Grupe morfologice de bacterii:
Sferic: cocii: stafilococi i streptococi;
pneumococi (form lanceolat);
meningococi i gonococi (reniformi).
Cilindrici: bacili: forma alungit, de bastona cu forme diferite:
24
Curb-spiralat: vibrioni, spirochete. Au corpul format din una sau mai multe spire:
jumate de spir: vibrion;
mai multe spire, nedeformabile: spirochete: genul Treponema i
Leptospira.
mai multe spire deformabile: genul Borrelia.
Cocobacili: forme intermediare: parvobacteriaceele
Filamentoase: Actinomicete: bacterii care n stadiul de culturi tinere formeaz filamente
lungi i ramificate, asemntoare unor micelii; ulterior se produce fragmentarea filamentelor
rezultnd forme bacilare cu lungimi diferite.
Leptospire (ME)
Vibrio (ME)
Bacteriile Gram-pozitive au un perete gros (200 - 800) alctuit dintr-un strat rigid de
peptidoglicani i din acid teichoic. Cantitatea mare de peptidoglicani (70-80%) ofer acestor
bacterii sensibilitate la lizozim i penicilin. Lizozimul hidrolizeaz specific peptidoglicanii ntre
N-acetil-glucozamin i acidul N-acetilmuramic. Penicilina inhib specific sinteza de
peptidoglicani.
Bacteriile Gram-negative au un perete mai subtire de 100 cu un continut mult mai mic de
peptidoglican (pn la 20%) i fr acid teichoic.
III.2 Fiziologia bacteriilor
Caracteristicile metabolismului bacterian
- este un metabolism unicelular, se desfoar ntr-o singur celul;
- este un metabolism necompartimentat, caracteristic procariotelor (lipsa unor organite
citoplasmatice).
- se caracterizeaz printr-o mare flexibilitate metabolic, o capacitate crescut de adaptare n
condiii foarte variate de mediu;
- este un metabolism de mare intensitate ceea ce asigur o multiplicare rapid cu timp de
generaie de 20' (celulele de mamifere au timp de generaie de cel puin 24 ore).
Metabolismul bacterian este reprezentat de totalitatea proceselor biochimice intracelulare
prin care substratul nutritiv este transformat n energie i constitueni celulari. Este de dou
tipuri:
- energetic - prin care se asigur respiraia bacterian i este realizat prin reacii catabolice;
- de sintez - prin care se asigur sinteza componentelor bacteriene i se realizeaz prin
reacii anabolice i catabolice (reacii biochimice de oxido-reducere, n cazul bacteriilor
chimiosintetizante).
Respiraia bacterian este:
n funcie de natura acceptorului final de hidrogen- exist tipuri de respiratii:
o aerob (oxibiotic) -acceptorul final este oxigenul atmosferic, 02, iar produsul rezultat este
apa.
26
o anaerob (anoxibiotic) - acceptorul final este orice substan anorganic diferit de oxigen,
ex. CO2 sau o substant organic (fermentaie).
n funcie de potenialul redox, bacteriile pot tri n medii cu cantitai variate de oxigen i se
mpart n patru tipuri respiratorii:
o
bacterii strict aerobe - cresc numai n prezena unei cantiti mari de oxigen;
o
bacterii strict anaerobe - cresc numai n absenta oxigenului, sunt lipsite de enzimele de mai
sus ;
o
bacterii aerobe, facultativ anaerobe - au posibilitatea ambelor tipuri de respiratie, n funcie
de existena oxigenului.
o
bacterii anaerobe microaerofile - tolereaz cantiti mici de oxigen, probabil prin achiziia
unor enzime de tip catalazic.
Metabolismul de sintez
Este suma proceselor metabolice, ce concur la procurarea de materiale convertibile n
energie i componente celulare, necesare creterii i multiplicrii bacteriene.
n functie de modul de procurare a acestor elemente, bacteriile sunt de trei tipuri :
Autotrofe: utilizeaz pentru sinteze azotul i carbonul din compui anorganici simpli: CO2,
NH3, NO2, NO3.
Heterotrofe: utilizeaz pentru sinteze azot i carbon din substane organice diferite, produi
de alte organisme, putndu-i sintetiza singure metaboliii eseniali (majoritatea)
Parotrofe: sunt bacteriile care nu-i pot sintetiza singure metaboliii esentiali. Ele se dezvolt
numai intracelular.Ex. Rickettsia prowazeki, agentul tifosului exantematic.
Unele bacterii sunt capabile s sintetizeze vitamine n cantiti att de mari nct servesc ca
materie prim pentru extragerea acestor vitamine. Biotina este sintetizat de specii ca: Proteus
vulgaris, Mycobacterium tuberculosis, Escherichia coli. Tiamina (vitamina Bl) este sintetizat
de: E. coli, B. subtilis, S. typhi, Shigella, C. diphteriae. Piridoxina (vitamina B6) este sintetizat
de unii lactobacili. Pentru om, flora microbian intestinal constituie o important surs de
vitamine (vitamine din grupul B, vitamina K).
Mediile de cultur pentru bacterii Pentru identificarea unei specii bacteriene, examenul
direct al produsului patologic recoltat de la bolnav este de cele mai multe ori insuficient.
Precizarea cauzei care a produs boala necesit cultivarea agentului patogen pe un complex de
substante nutritive adecvate care alctuiesc mediile de cultur.
Aceste medii de cultur trebuie s ndeplinease anumite conditii:
- s contin substane plastice i energetice necesare cultivrii microbului nsmnat, adic s
asigure surse de azot, hidrati de carbon, sruri minerale, ap, vitamine i factori de cretere
necesare creterii, dezvoltrii i reproducerii celulei bacteriene.
- s satisfac necesittile de aerobioz sau anaerobioz ale bacteriei, tiind c n timp ce
bacteriile aerobe pot folosi oxigenul molecular, cele anaerobe nu se pot dezvolta n prezenta 02
liber.
- s aib o concentraie de ioni de hidrogen (pH) optim.
- s fie sterile, pentru a permite izolarea n cultur pur a germenului respectiv.
Mediile de cultur sunt sub form lichid (bulion, ap peptonat, etc.) sau solid (medii
n care se ncorporeaz agar).
Cultura bacterian este rezultatul nmulirii germenilor ntr-un mediu favorabil.
Aspectul culturii depinde de: specie, de varsta culturii i de mediul de cultur i are rol n
identificare. Bacteriile pot fi cultivate pe: medii artificiale (acelulare), culturi celulare, ou
embrionat de gin, animale receptive (sisteme biologice sensibile -SBS).
Culturile bacteriene pe medii artificiale.
n medii lichide - determin apariia unei turbiditti (tulburri a mediului apos) dup 18-20
ore n condiii de crestere specifice bacteriei. n funcie de aspectul turbiditii culturile pot fi:
Culturi "S" (smooth)
turbiditate omogen,
germenii sunt tineri.
viruleni, care dispersez rapid i uniform.
27
nsmnarea
Medii de cultur
Figura 5. Medii i tehnici utilizate n microbiologie.
Antibiograma
Curs IV
Coci i bacili patogeni patogeni
Coci patogeni
Stafilococii sunt coci gram-pozitivi, aerobi, imobili, nesporulai ce se dispun caracteristic
n grmezi, ciorchini, att n produsele patologice ct i n culturile pe medii solide.
Genul Staphylococcus este mprit n: Staphylococcus aureus, epidermidis i
saprophyticus. Din punct de vedere clinic este mai important clasificarea patogen care creaz
dou mari categorii:
Stafilococii secretori de coagulaz (foarte patogeni);
Stafilococii coagulazo-negativi (mai puin patogeni, S. epidermidis, S. saprofiticus).
Staphilococcus albus
S. aureus
Figura 6. Colonii de Staphilococcus.
Caractere de cultur. Cresc pe medii simple i n special pe mediile hiperclorurate (1015% NaCI). Pe mediile solide formeaz colonii de tip "S" (smooth = neted). Elaboreaz
pigmeni endogeni:
- S. aureus elaboreaz pigment auriu
- S. epidermidis pigment alb
- S. saprophyticus pigment galben.
Streptococii fac parte din familia Streptococcaceae, genul Streptococcus, unele specii
sunt patogene, altele fac parte din flora indigen a orofaringelui, tractului intestinal, pielii.
Cele mai importante specii pentru patologia uman sunt:
- Streptococcus pyogenes,
- Streptacoccus agalactiae,
- Enterococcus,
- Streptococii viridans,
- Streptococcus pneumoniae
Morfologie:
Sunt coci dispui n lanuri, Gram pozitivi, sunt saprofii, patogeni sau condiionat
patogeni. Au dimensiuni de 0,5-1 m, au n peretele bacterian o concentratie de murein mare
(80%), sunt imobili, nesporulai, uneori pot prezenta capsul, ce le confer o mare virulen.
Habitat: sunt ubiquitari (ntlnii peste tot) i n special pe tegumente i mucoase.
Caractere de hemoliz
Dimensiunile coloniilor de streptococ sunt mult mai mici (cca. 0,5 mm) dect de
stafilococ (care au un diametru de 0,5-2 mm), sunt incolore i dau hemoliz. n funcie de
elaborarea hemolizinei streptococii se mpart n 4 categorii. Streptococii hemolitici (elaboreaz
hemolizina ), dau hemoliz beta, care este complet, foarte ntins, coloniile avnd marginile
clare. Din aceast categorie fac parte serogrupurile: A (care este totdeauna patogen), C. G.
Rezistena
- au rezisten scazut sunt distrui de razele ultrviolete, dezinfectante i antiseptice la
concentraii uzuale (sunt distrusi la 55oC timp de 20 min.);
- streptococul din grupa A este sensibil la pencilina G, care se administreaz parenteral/oral
- streptococul din grupa B este rezistent la concentntii mari de NaCI 6.5%, la variatii mari de
temperetura, la aciunea bilei i a srurilor biliare i la actiunea multor antibiotice.
Patogenitate
Streptococii grup A pot da infecii acute ale: tractului respirator (forma eruptivscarlatina, forma neeruptiv: angina, faringita, etc); otita medie, sinuzita, meningita, pneumenie,
bronhopneumonie, pleurezie, endocardita acut.
Localizarea cutanat a infeciei streptococice este mai frecvent n zonele calde:
intertrigo impetigo, zablu (infecia comisurii bucale), abcese. flegmoane.
Erizipelul este o infecie streptococic cu localizare cutanat (atunci cnd exist o soluie
de continuitate): la nivelul gambelor, feei, cu caracter recidivant.
Virulena streptococilor piogeni este dat n special de proprietatea antifagocitar, care
depinde de prezena componentelor celulare de suprafaa: acidul hialuronic capsular i proteina
M.
Streptococcus pneumoniae (pneumococul)
Este o bacterie comensal, care colonizeaz n mod normal tractul respirator superior, dar
i tractul intestinal i mucoasele uro-genitale. Procentajul de purttori oro-faringieni sntoi n
populaie este estimat la 30-70%. Bacteria este condiionat patogen, putnd provoca
mbolnviri n anumite condiii. Este unul din principalii ageni patogeni infecioi la vrsta
copilriei, precum i la persoanele vrstnice i/sau care au boli cronice sau triesc n condiii
speciale.
Morfologie
- Sunt coci lanceolati dispui n diplo cu dimensiuni de 1/1,5m, pneumococii virulenti au
capsul care nconjur ambele celule, dispui cu capetele rotunjite fat in fat.
- Sunt imobili, nesporulai, Gram pozitivi, majoritatea sunt saprofiti, dar sunt i tulpini patogene
nu se gsesc n natur.
30
Caractere de cultur: Cresc numai pe medii ce conin snge, cei ncapsulati dau colonii
de tip S'. Sunt hemolitici, coloniile sunt mici, transparente i nconjurate de o zon de hemoliz
a, ca la streptococii viridans.
Rezisten: Sunt sensibili n mediul extern, sunt distrui de razele solare, de
dezinfectante la concentraii uzuale. Majoritatea tulpinilor sunt sensibile la penicilin.
Structur antigenic. Are antigene somatice i solubile, cel mai important este Ag SSS
(Substanta Solubil Specific), din constituia capsulei, avnd o structur polizaharidic. Ag SSS
mparte pneumococii n 83 de serotipuri (serotipul 3 d cea mai mare capsul).
Caractere de patogenitate. Pneumococii ncapsulai sunt patogeni prin multiplicare i
invazivitate, nu au capacitate de toxigenez. Determin pneumonia franc lobar (localizat doar
la nivelul unui singur lob).
Decesul pacientului poate surveni n 24-36 ore, dac nu se face tratamentul corespunztor.
Neisseria gonorrhoeae (gonococul)
Neisseria-gonorrhoeae sau gonococul produce infecia gonococic. Aceast bacterie a
fost descris de ctre Albert Neisser n 1879 n uretrite acute la brbai i n conjunctivita nounscuilor. N. gonorrhoeae este un parazit strict pentru specia uman. Se grefeaz pe celulele
mucoasei genitale i accidental pe alte mucoase: rectal, faringian, conjunctival. Conjunctivita
care poate ajunge pn la oftalmia gonococic la nou-nscut este o infecie exogen Produs n
timpul naterii atunci cnd mama are vaginit gonococic. La brbat principala form de boal
este uretrita gonococic, la femei vaginita i metrita.
Caractere morfo-tinctoriale. Sunt coci ovalari de 0,6-1,0 m, n diplo, cu prtile concave
adiacente, asemntori boabelor de cafea. Sunt Gram negativi, imobili, nesporulai, nconjurati
de o capsul comun. La suprafafaa celulei au pili cu rol determinant n ataarea bacteriei de
celula gazdei, deci se gsesc la speciile virulente, lipsind la cele nevirulente sau la cele din
colectiile vechi. Caractere de cultur. Gonococul nu se dezvolt pe medii simple, este germenul
cel mai greu de cultivat dintre toate Neisseriile.
Bacilii patogeni
Genul Escherichia face parte din familia Enterobacteriaceae1, sunt bacterii saprofite sau
condiionat patogene. Cea mai important specie este Escherichia coli. n caz de boal aceasta
poate fi pus n evident n: snge, urin, puroi, fecale, etc..
Sunt bacili Gram negativi, lungi de 2-3m i groi de 0,5m, ciliai, ceea ce face ca
majoritatea s fie mobili; ei nu sunt sporulai.
Cei mai multi colibacili nu sunt patogeni. Virulena i toxicitatea bacteriilor patogene
sunt legate de prezena Ag K i a unor toxine (enterotoxina, neurotoxina etc.) precum i
producerea hemolizinei i factorului citotoxic necrotizant.
n anumite conditii E. coli poate s dea natere la diferite afeciuni locale sau generale:
- afeciuni genito-urinare (85 % patotipuri uropatogene datorat unor adezine, hemolizine,
aerobactinei, care au receptori pe tractul urinar),
- infectii intestinale.
Sunt 6 patotipuri diareigene:
ETEC(enterotoxigen),
EHEC (enterohemoragic),
1
EIEC (enteroinvaziv),
EAggEC (enteroagregativ),
EPEC(enteropatogen),
DAEC (enteroaderent difuz).
Mai poate genera: endocardite, meningite, septicemii. Rspunsul imun este slab.
Genul Salmonella. Este un grup al familiei Enterobacteriaceae, tribulul 2, format din bacili
Gram negativi, mobili, nesporulai, ce au o structur antigenic complex i patogenitate ridicat
pentru om.
Clasificarea pe baza structurii antigenice a fost alctuit o schem de diagnostic n care genul
Salmonella a fost mprtit n grupuri (cu antigene somatice comune) fiecare grup este format
din specii care se diferentiaz prin antigenele flagelare specifice. Germenii din acest gen se
ntlnesc la omul bolnav sau purttorii de germeni, la mamifere, reptile, n mediul extern: ape,
sol, alimente.
Caractere morfologice i tinctoriale. Sunt bacili cu lungime de 2-3 m i groi de 0,6 m,
mobili, cu cili peritrichi bine dezvoltai, nu formeaz spori, majoritatea speciilor nu au capsule,
sunt Gram negativi.
Caractere de cultur
Sunt germeni aerobi, facultativi anaerobi.
Cresc pe medii de cultur simple (bulion, ap peptonat, geloz nutritiva).
Cresc sub forme S" care tulbur uniform mediile lichide i formeaz colonii netede,
rotunde, lucioase pe medii solide; sau sub form R", care sedimenteaz n mediile lichide i dau
natere la colonii zbrcite, cu margini neregulate, pe medii solide.
Salmonella typhi este cea mai patogen specie, i sintetizeaz totdeauna un flagel din
proteine specifice, de aceea poate identificat. Kauffman i White au stabilit c Salmonella cu
Ag O" = 9 sau 12 i cu Ag"H" = d, este Salmonella typhi, iar cu Ag"H"= g sau m este
Salmonella enteritidis. Acest fapt are mare importan practic deoarece cu ajutorul serurilor
imune specifice se poate pune diagnosticul. Antigenul solubil este endotoxina, ea are un rol
patogen mult mai important la salmonelele cu caracter invaziv, deoarece sunt puse n circulaie,
ducnd la generalizare (febra tifoid). Produsele patologice care se examineaz sunt: sngele,
mduva oaselor, materiile fecale, urina, bila, lichidul din petele lenticulare, n cazuri letale i
sngele din mduv, fragmente din organe (ficat, splin, ganglioni mezenterici).
Caractere de patogenitate. Toate salmonelele sunt patogene, prin multiplicare i
endotoxinogenez, iar cele ce prezint i o pseudocapsul (Ag Vi") au i caracter de invazivitate.
La om salmonelozele sunt sub dou forme principale:
- Boli septicemice, cu evolutie grav i mortalitate ridicat, cum sunt febra tifoid (produs de
bacilul tific) i febrele paratifoide A. B i C (produse de bacili parotidici A, B i C).
- Boli localizate, mai ales la nivelul tubului digestiv (toxiinfectiile alimentare i enteritele), cu o
durat mai scurt i de o gravitate mai redus.
Imunitatea
Fotii bolnavi de febr tifoid i parotifoid dobndesc o imunitate destul de solid, care poate
dura toat viaa.
Imunitatea n toxiinfeciile alimentare i a enteritelor este slab.
Imunitatea antitifoparatifoidic se poate dobndi i in mod artificial, prin vaccinare.
Diagnosticul de laborator n infeciile tifo-paratifoidice este bacteriologic i imunologic
Dup boala sistemic apar anticorpi care protejeaz cel puin 5-10 ani.
Bacilul dizenteric (Shigella dizenteriae)
Germenii genului Shigella produc dizenteria bacilar. Bacilii dizenterici sunt gsii n
materiile fecale ale bolnavilor de dizenterie i ale purttorilor. De asemenea se pot gsi n unele
alimente contaminate, ape poluate.
Caractere morfo-tinctoriale. Sunt bacili Gram negativi, imobili i nu sunt capsulai.
Genul Shigella are 4 subgrupuri serologice: A, B, C, D.
- Subgrupul A (Shigella dizenteriae) cuprinde 12 serotipuri. Acest grup este cel mai patogen.
Shigella Shiga este cel mai patogen dintre toate tipurile, elaboreaz exotoxina neurotrop.
33
34
Genul MYCOBACTERIUM Germenii din acest gen apartin familiei Mycobacteriaceae. Aceast
familie cuprinde mai multe specii, fiind aproape toate saprofite cu excepia speciilor: Mycobacterium tuberculosis i
Mycobocterium leprae.
In anul 1882 Robert Koch descoper bacilul tuberculozei; tot n acelasi an Paul Ehrlich descoper acidorezistena bacilului tuberculozei. In anul 1884 Robert Koch obine cultura baciluli tuberculozei pe ser coagulat.
In 1891 tot R. Koch semnaleaz fenomenul Koch i tuberculina. A. Calmette i C. Gurin in perioada
1908-1921 au cultivat prin treceri la 21 zile, n bulion cartof glicerinat i biliat o tulpin de Mycobocterium bovis
virulent izolat din lapte. In urma acestor treceri s-a obinut o tulpin fr patogenitate, dar capabil s determine
rezistenta fa de infecia tuberculoas, caracterele morfologice,tinctoriale, nutriionale, de cultur au rmas cele
iniiale. Aceast tulpin (tulpina BCG - bacilul Calmette i Guerin) a fost utilizat ca vaccin mpotriva tuberculozei
ncepnd din 1921; n 1927 se organizeaz laboratoare de producie a vaccinului BCG n 26 de tri , inclusiv n
Romnia.
3
Anthrakis (gr)= crbune
35
zonele expuse ale pielii: tegumentul feei i al membrelor superioare. La poarta de intrare apare o
macula mica, rosie care ulterior va evolua catre forma de pustula si ulceratie, cu necroza si
edem. Iniial apare prurit (mancarime) iar catre final leziunea nu doare. De obicei pacienii nu
prezinta febr. Vindecarea spontan se produce in peste 90% din cazuri, dar exista si forme
severe de boal, care netratate se vor finaliza prin deces. Contactul in antecedente cu animale sau
produse de animale potential contaminate, orienteaza diagnosticul catre infectia cu bacilul
antrax.
Antraxul prin inhalaie (boala lnarilor). Dupa cateva zile, simptomele se acutizeaza: febra
crescuta, dispnee si hipotensiune arteriala. La examenul radiologic pulmonar, se observa
largirea simetrica a mediastinului (mediastinita hemoragica).
Antraxul gastrointestinal. Se constat o simptomatologie variabila: febra, greturi, varsaturi,
dureri abdominale, scaune diareice cu sange sau chiar ascita (lichid in cavitatea peritoneala).
Diareea severa determina deshidratare masiva si hemoconcentratie. Daca bacteria se localizeaza
la nivelul faringelui va determina: febr, disfagie (nghiire dificil a alimentelor), durere n gt
i adenopatie regional.
Bacilul tetanic (Clostridium4 tetani) Este un bacil Gram pozitiv anaerob, cu capete
nerotunjite de 3-4/0.4 m, sporul terminal nu prinde colorani obinuii diametrul transversal
depete de 2-4 ori pe cel al corpului bacterian, are un contur refringent, o form rotund, mai
rar ovalar. Bacilul tetanic este foarte mobil, prezentnd fenomenul de "crare' pe supafaa
gelozei, n condiii de anaerobioz, asemntor cu cel al proteusului n condiii aerobe.
Patogenitatea este determinat de o exotoxin pe care orice tulpin de Cl. tetani dup 4872 ore, n mediul lichid, o produce i este suficient pentru a provoca o intoxicaie tetanic
mortal la animalul de laborator. Aciunea biologic a toxinei tetanice se exercit prin fixarea
exclusiv i ireversibil pe sistemul nervos mai ales central (SNC).
Bacilul botulinic (Clostridium botulinum5). Este un bacil lung i gros 4-6/0,8-1,2 m,
Gram pozitiv, mobil datorit cililor peritrichi, cu spor subterminal, deseori cultura poate pune n
libertate muli spori.
Este lipsit de virulen, incapabil de multiplicare n organism, produce n afara
organismului cea puternic toxin cunoscut, a crei ingestie provoac boala.
Este rspndit n sol i se gsete n intestinul omului i animalelor.
Sunt apte serotipuri tipuri de Cl. botulinum (A, B, C, D, E, F, G) la noi este mai
rspndit tipul B, foarte rar tipul A.
Gangrena gazoas (Miozita clostridian). Infecie difuz necrozant deosebit de grav a
esutului muscular, cu extensie rapid favorizat de prezena esuturilor devitalizate. Clostridiile
gangrenei gazoase cele mai frecvente specii sunt: Cl. perfringens, Cl. histolyticum, Cl.
oedematiens, Cl. septicum, Cl. sporogenes. Pot provoca la om tabloul clinic al gangrenei
gazoase:
- mai frecvent la muchii membrelor,
- infecia uterin postabortum,
- infecia post-operatorie, post-colecistectomie,
- abces cerebral, infecie sinuzal, poate afecta orice esut sau organ.
Genul Clostridium cuprinde numeroase specii, majoritatea sunt saprofite, dar un numr redus sunt
patogene. Sunt bacili Gram pozitivi, mobili datorit unor cili peritrichi (n afar de CI. perfringens) cu dimensiuni
mari, strict anaerobi, formeaz spori ovoizi sau sferici care au dimensiuni mai mari dect grosimea bacilului,
deformndu-l, sunt rspndii n mediul exterior mai ales n sol (anaerobi telurici). Patogenitatea este dat de
invazivitate dar i de toxigenez. Anaerobii patogeni se mpart n dou grupe:
- anaerobi productori de toxine histotrope, clostridiiie gangrenei gazoase:
Cl. perfringens, Cl. histolyticum, Cl. oedematiens, Cl. septicum, CI. sporogenes, etc.;
- anaerobi productori de toxine neurotrope: Cl. botulinum i Cl. tetani.
5
Botulus = crnat n limba latin. Clostridium botulinum a fost izolat n 1896 de Van Ermengem n cursul unei
intoxicaii cu crnai.
36
Curs 5
37
Boala are o evoluie cronic, apar leziuni de tip proliferativ numite granuloame.
Gronuloamele se observ la nivel cutanat, n ficat, splin,. sistem nervos, boala fiind o
septicemie cu evoluie lent.
Rickettsiile sunt microorganisme care se situeaz la grania dintre bacterii i virusuri. Se
asemr cu bacteriile prin: dimensiuni, morfologie, organizare celular intern, compoziie
chimic, multiplicare prin divziune direct. Se aseamn cu virusurile deoorece nu cresc pe
medii acelulare, ele se multiplic numai in esuturi vii, ca virusurile.
Familia cuprinde trei genuri: Rickettsia, Coxiella i Ehrlichia. Aceste microorganisme
sunt transmise de artropode (pduche, purice, cpu) multiplicndu-se n corpul acestora.
Specia tip al acestei familii este Rickettsia prowazeckii, care este specific omului, celelalte
specii au ca surs animalele.
Boala se transmite prin contact sexual i mult mai rar nesexual (cel mult 57, din cazuri, in
urmatoarek situaii: doic sntoas alptnd copil cu sifilis congenital sau doic bolnav
alptnd copil sntos, transfuzie, medic consultnd sau tratnd fr masuri de protecie bolnavi
de sifilis).
Sifilisul este o boal cronic care n lipsa tratamentului (sau un tratament inadecvat) evolueaz
in 3 perioade distincte:
1. Sifilisul primar apare dup inocularea in timpul actului sexual
Bacteriile ptrund n organism prin leziuni fine ale pielii i mucoaselor datorit mobilitlii lor,
treponemele ajung pe calea vaselor limfatice in ganglionii limfatici regionali i apare
bacteriemia.
La locul de inoculare apare dup 3 sptmni (ntre 10-60 zile ancrul "dur", care apare dup
multiplicarea treponemelor la locul de inoculare, atunci cand ating o concentraie local de 107
germeni/ml.
De obicei ancrul este unic i este totdeauna nsoit de adenopatie regional, care este dur
nesupurativ.
Fenomenele locale caracteristice leziunii primare se vindec spontan dup patru-ase
sptmni, fr a lsa i alte semne clinice de boal.
Anticorpii devin evideniabili n a doua jumtate a perioadei primare.
2. Sifilisul secundar la 2-3 luni de la contactul infectant (45-50 zile de la producerea
ancrului) apar leziuni maculo-papuloase, neulcerative la nivelul tegumentelor i mucoaselor.
Apar papule umede i palide mai ales n regiunea ano-genital, axilar, gur.
Se produc i alte manifestri ca: meningita sifilitic, carioretinit, nefrit, periostitii.
n aceast faz se gsesc treponeme in tot organismul, bolnavul este foarte contagios.
Dup cteva luni (mai rar 1-3 ani) leziunile secundare se vindec spontan, urmnd o
ndelungat faz de sifilis latent care poate dura ani sau zeci de ani.
- 25% din bolnavi se vindec definitiv
- n aceast faz 25% dintre bolnavi rmn lateni toat viaa.
- 50% dintre bolnavi progreseaz ctre sifilisul teriar.
3. Sifilisul teriar este rspunsul imun celular la prezena Tr. pallidum n organism i a
produilor lor metabolici. Apare dup 5-40 ani de la contactul infectant, intervalul pn la
debutul fazei teriare se numete perioada de laten aparent, fr simptome, dar cu un titru
mare de anticorpi. se caracterizeaz prin:
leziunile granulomatoase (gome), tegumentare i osoase,
modificri degenerative n sistemul nervos central (paralizie general progresiv),
leziuni cardiovasculare (aortit, insuficien valvular aortic), hepatice.
Tratament
Se administreaz penicilin.
Eficacitatea tratamentului se verific prin diagnosticul serologic.
Dac tratamentul este eficace, dispar anticorpii din serul de cercetat.
a
c
b
Figura 10. Agentul etiologic Treponema pallidum (a) i manifestarea sifilisului la nivel
tegumentar (b, c) (http://www.lib.uiowa.edu/hardin/MD/cdc/syphilis33.html).
Ascospori ramn n celula n care s-au format i poarta numele de ASC. Acest tip de spori se
intlneste la clasa Ascomycetes.
Bazidiospori iau natere pe o formatiune specializat numita bazidie, caracteristici fungilor din
clasa Bazidiomycetes.
Oospori se formeaz din fuziunea a 2 celule de sex opus de pe hife vecine. Aparatul hifal se
numete oogonie.
Zigospori.
Sporii asexuai: se formeaz prin simpla derivare din celule vegetative prin fragmentarea unei
hife specializate sau a hifei modificate caracteristic pentru a forma corpi reproducatori.
Zoospori se foremaz n celule speciale denumite zoosporangi din care se elimin prin ruperea
peretelui sporangial.
Sporangiospori apar n sporange care se dezvolt la capatul terminal al unei hife denumite
sporangiofor. Sporii se elibereaz prin ruperea peretelui.
Conidiospori sunt aezai la capatul unei hife fertile numita conidiofor n lanuri din care se
desprind usor. Sunt caracteristici fungilor din clasa Ascomycetes.
Clamidiosporii iau natere prin dezvoltarea unui perete gros, rezistent, in jurul unei celule din
interiorul unei hife; se intalnesc la toti fungii.
Artrosporii se formeaza la fungii care au miceliu septat prin fragmentarea unei hife miceliene;
nu sunt rezistenti la uscaciune.
Sporii fungilor sunt n general colorai i dau coloniilor mature o culoare caracteristic;
se desprin usor de pe miceliu. Sporii adaptai la mediu acvatic sunt mobili cu ajutorul unor
flageli. Au via latent i o rezisten mare la uscciune, presiune osmotic, temperatur i
radiaiiUV.
Dermatofiii produc infecii care afecteaza zonele superficiale ale corpului: epiderma i
fanere (pr, unghii). Principalii ageni etiologici implicai in producerea dermatomicozelor
aparin genurilor Epidermophyton, Microsporum i Tricophyton.
TRICOFIIA este caracterizat de leziuni supurative ale pielii i firelor de pr, cu
caracter inflamator, cauzate de Tricophyton. Transmis de la animale, se numete i sicosis
parazitar sau kerion celsi. Frecvent la copii, tricofiia capului apare sub form de placard
rotund, bine delimitat, eritematoas sau eritemato-vezicular, de 2-4 cm pe msura extinderii.
40
Microsporum canis
M. audouini
Tricophyton rubrum
41
a
b
c
d
Figura 15. Aspecte structurale la fungi: a, b- conidii cu conidiofori; c- miceliu septat, d- Aspergillus fumigatus.
Aspergillus flavus
Aspergillus niger
Aspergillus ochraceous
Aspergilom
Figura 14. Aspecte structurale diferite specii de fungi i infecie
Genul Aspergillus este unul din cele mai bogate i mai raspndite genuri din natur.
Unele specii sunt duntoare omului, animalelor i plantelor, altele sunt folositoare fiind utilizate
la producerea unor enzime, acizi organici, pigmeni, antibiotice, diverse buturi din orez,
brnzeturi i altele. Aspergillus prezint hife ramificate, incolore sau colorate n nuane deschise
i numai la cateva specii hifele sunt colorate n brun sau de alta culoare. Conidioforii sunt lungi
cu perete neted de culoare brun inchis. Sterigmele sunt uniseriate si sunt dispuse paralel cu axul
conidioforului. Conidiile sunt sferice dispuse n lanuri.
Aspergillus fumigatus este una din cele mai comune specii de Aspergillus care cauzeaza
boli la oamenii cu un sistem imunitar slbit. Se poate gsi aproape oriunde n mediul
nconjurator n special n materiile organice n descompunere. Are un genom stabil, fr cicluri
sexuale cunoscute; se reproduce prin formarea sporilor care sunt eliberai n mediul nconjurtor.
Se izoleaz pe medii uzuale, la temperatura de 25C i spre deosebire de alte specii de
Aspergillus el este termofil (se dezolta bine la 48C ).
Este capabil s se dezvolte la temperatura corpului uman; sporii sunt inhalai de aproape
42
toata populaia i n mod normal eliminai rapid de catre sistemul imunitar. Este agentul cauzal al
diverselor aspergiloze intalnite la om cu localizari diverse: pulmonare, nazale, oculare, cerebrale,
osoase, cardiovasculare si viscerale. n aspergiloza pulmonar simptomele pot include: febra,
slbiciune general, dureri de piept, pierderi de greutate, snge n urina, linii roii subiri sau
vase de snge sparte sub unghii.
Alternaria alternata este un mucegai de interior (se dezvolta n spaiile nchise), destul de
comun. Intr-un studiu efectuat a fost gsit n 87% din casele examinate. Este considerat unul
dintre cele mai importani alergeni; Alternaria alternata a fost implicat n cazurile de alergie la
persoanele care au fost expuse la lemn, ori rumegu de lemn, de asemenea cauzeaz pete maronii
pe plante.
CURS VI
Candidoza i actinomicoza
Candidoza bucal este determinat cel mai frecvent de Candida albicans, dar pot fi
implicate i alte genuri precum Candida tropicalis, Candida krusei, Candida parapsilosis sau
Candida glabrata. Inmulirea acestei ciuperci este controlat de o serie de bacterii prezente la
nivelul mucoasei bucale. Apariia unei noi bacterii la nivelul gurii ce rupe echilibrul dintre
microorganismele deja prezente aici, va permite ciupercii s se inmueasca n mod necontrolat.
Candidoza bucal este mai frecvent la nou-nascui, sugari i batrni.
Unele medicamente permit ciupercilor s se nmuleasca necontrolat:
- antibioticele, n special cele cu spectru larg (de exemplu, tetraciclina);
- contraceptive orale (pilulele);
- medicamente ce scad capacitatea de aprare a organismului precum corticosteroizii.
Modul de transmitere a ciupercii ce determina candidoza bucal difer n funcie de
vrst.
Figura 16. Candida albicans: agent etiologic (a-MO, b-ME) i aspect al infeciei n candidoza bucal (c).
Candidoza bucal, n forma sa uoar, poate ramne asimptomatic. In formele medii sau
severe apar simptomele.
La sugari
- pete (depozite) de culoare alb localizate la nivelul gurii i pe limba cu aspect brnzos.
Candidoza bucal poate fi confundata cu depozitele de lapte ce raman dupa alaptare. Aceste pete
alb-branzoase sunt aderente la mucoasa si nu pot fi indepartate cu usurinta. Daca sunt frecate,
pot sangera - limba si gura devin dureroase si pot apare dificultati la inghitire;
- scderea apetitului: sugarul poate refuza masa, mama confundnd uor acest simptom cu starea
de saietate (lipsa foamei) a copilului. In aceste conditii, sugarul poate deveni agitat;
- eritemul fesier: apare atunci cand infecia micotic se extinde si la nivel intestinal, ciuperca
fiind prezenta n scaunul sugarului;
- mameloane dureroase i eritematoase (roii) la mam: candidoza bucal a sugarului poate trece
neobservat pn n momentul n care mameloanele mamei devin roii i dureroase, n special n
timpul sau dup alptare.
La aduli
- senzaie de arsur la nivelul gurii i a gtului (de obicei acestea sunt simptome incipiente);
- pete albe aderente de mucoasa gurii i a limbii. esutul din jurul acestor depozite albicioase
43
este rou i dureros. Daca este frecat (n timpul periajului dinilor, de exemplu) poate sngera;
- apariia unui gust neplcut sau a dificultilor de a gusta alimentele.
Dac infecia micotic nu este tratat sau nu se remite spontan exist riscul ca aceasta s
afecteze i alte organe: la nivelul gatului (esofagului), a vaginului sau a pielii.
Pentru a preveni apariia candidozei bucale ar trebui urmate recomandarile de mai jos:
- meninerea unei igiene orale riguroase, aceasta implicnd perierea dinilor, curarea acestora cu
a dentar i folosirea unei ape de gur antiseptice zilnic. Daca pacientul a prezentat n
antecedente o infecie micotica a gurii, se recomanda schimbarea periuei de dinti;
- splarea minilor;
- dac se foloseste un antibiotic lichid se recomand cltirea gurii cu ap imediat dup
administrarea acestuia;
- tratarea afeciunilor medicale ce favorizeaza apariia candidozei, precum diabetul zaharat,
neoplasmele sau HIV;
- folosirea unui spacer pentru a administra corticosteroizii inhalatori, se recomanda cltirea gurii
cu ap dup fiecare administrare;
- la pacienii cu SIDA se recomand clatirea zilnic a gurii cu o soluie antiseptic.
candidoz genito-urinar care se manifest (uneori femeia poate purta fr nici o manifestare o
infecie cu Candida).
Tratament - dupa un examen la un medic specialist care a indicat i obinut rezultatele
unui examen microscopic ce pune n eviden ciuperca, tratamentul se poate ncepe cu o gama
foarte larga de antimicotice: Amfotericina B, Nistatin, Natamicina, Terbinafina, Itraconazol,
Fluconazol, Butoconazol, Clotrimazol, Ketoconazol, Flucitozina, Ciclopiroxolamina, etc.
Tratamentul se efectueaz concomitent la ambii parteneri sexuali. Tratamentul cu
antimicotice trebuie susinut i de o foarte bun igien local prin splturi zilnice (chiar de mai
multe ori pe zi) cu spunuri care sunt neutre sau bazice, splturi n care s-a dizolvat bicarbonat
de sodiu (chiar din cel alimentar - 2 - 3 linguri la un lighena de ap), soluii antiseptice pentru
splturi vaginale din comer.
Actinomicoza este o boal parazitar cutanat (dermatomicoz) sau visceral
(visceromicoz), provocat de microorganisme (Actinomyces ex. A. israelii, Actinobacillus),
comun omului i animalelor (n special a bovinelor, dar care apare i la cai, porci, cini i
pisici). Se manifest pe piele mai ales n regiunea capului, n jurul cavitii bucale i a gtului
sau, mai rar, la nivelul organelor (plmni, creier, inim, intestin, amigdale, mucoase bucale,
glande salivare, etc) prin apariia unor nodoziti subcutanate. Cel mai frecvent, infecia se
localizeaz la nivelul maxilarului inferior. Nodozitile sunt dure la nceput, apoi se nmoaie i
excret puroi cu granule galbene (puroiul conine filamentele i sporii microorganismului
parazitar). Limba se umfl i se rigidizeaz (limb de lemn).
46