Sunteți pe pagina 1din 81

UNIVERSITATEA TEFAN CEL MARE SUCEAVA

FACULTATEA DE INGINERIE ALIMENTAR


SPECIALIZAREA : INGINERIA PRODUSELOR ALIMENTARE

INFLUENA ANTIOXIDANILOR
NATURALI ASUPRA PRODUSELOR
LACTATE ACIDE

COORDONATOR,
Conf. dr. Ing. Vladislav REITCO

ABSOLVENT,
Cristina Elena C. FEDOR

2009
CUPRINS

INTRODUCERE ...........................................................................................................................................4
CAPITOLUL 1. PRODUSE LACTATE ACIDE........................................................................6
1.1. Aspecte generale ..............................................................................................................................6
1.2. Clasificare ........................................................................................................................................8
1.3. Materii prime pentru obinerea produselor lactate acide ...........................................................9
1.3.1. Compoziia chimic a laptelui .......................................................................................................................................... 9
1.3.2. Condiiile care trebuie s le ndeplineasc laptele destinat fabricrii produselor lactate acide ........................... 11
1.4. Bacterii starter utilizate n biotehnologia produselor lactate acide ..........................................11
1.5. Principale tipuri de produse lactate acide fabricate n Romnia..............................................18
1.5.1. Lapte btut ......................................................................................................................................................................... 18
1.5.2. Lapte acidofil..................................................................................................................................................................... 21
1.5.3. Chefir.................................................................................................................................................................................. 23
1.6. Caracteristicile nutriionale ale produselor lactate acide ..........................................................27
1.7. Valoarea biologic a produselor lactate acide ............................................................................28
CAPITOLUL 2. TEHNOLOGIA DE OBINEREA A IAURTULUI............................ 30
2.1. Microbiologia iaurtului .................................................................................................................30
2.2. Tehnologia de fabricaie a iaurtului ............................................................................................32
2.3. Caracteristicile produsului finit ...................................................................................................37
2.4. Elaborarea planului HACCP pentru iaurt .................................................................................38
2.5. Valoarea nutritiv i terapeutic a iaurtului ..............................................................................46
CAPITOLUL 3. ANTIOXIDANI NATURALI FOLOSII N OBINEREA
PRODUSELOR LACTATE ACIDE ................................................................................................. 47
3.1. Consideraii generale ....................................................................................................................47
3.2. Tocoferolii (Vitamina E) ...............................................................................................................48
3.2.1. Structur chimic i propriti........................................................................................................................................ 48
3.2.2. Tocoferolii n natur ........................................................................................................................................................ 50
3.2.3. Aciunea antioxidant a tocoferolilor ........................................................................................................................... 52
3.3. Acidul ascorbic sau Vitamina C (E300) ......................................................................................52
3.3.1. Structur chimic i proprieti...................................................................................................................................... 52
3.3.2. Mecanismul antioxidant ................................................................................................................................................. 53
3.3.3. Surse de vitamina C ......................................................................................................................................................... 53
3.3.4. Sintez chimic artificial............................................................................................................................................... 54
CAPITOLUL 4. ANALIZA PRODUSELOR LACTATE ACIDE .................................. 55
4.1. Material de cercetat ......................................................................................................................55
4.2. Controlul produselor lactate acide ..............................................................................................55
4.2.1. Controlul calitii laptelui................................................................................................................................................ 56
Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura
Academica, Galai, 2005, p. 384 ......................................................................................................................................................... 56
4.2.2. Verificarea calitii produselor lactate acide................................................................................................................ 56
4.3. Metode i materiale utilizate n experimentri ...........................................................................57
4.3.1. Determinarea proprietilor fizico-chimice a laptelui cu ajutorul aparatului Lactostar.................................. 57
4.3.2. Determinarea densitii laptelui..................................................................................................................................... 58
4.3.3. Determinarea aciditii laptelui i a produselor lactate acide (metoda prin titrare) .............................................. 59
4.3.4. Determinarea substanelor proteice (determinarea titrului proteic metoda rapid) .......................................... 60
4.3.5. Determinarea coninutului de substan uscat din lapte (metoda prin uscare la etuv).................................... 61
4.3.6. Detreminarea coninutului de grsime din lapte (metoda acid-butirometric cu butirometrul Gerber) ....... 63
4.3.7. Determinarea pH-ului laptelui i al produselor lactate acide ................................................................................... 64
2
4.3.8. Determinarea cenuii din lapte ...................................................................................................................................... 64
4.3.9. Determinarea coninutului de grsime din produsele lactate acide......................................................................... 65
4.3.10. Determinarea coninutului de substan uscat din produsele lactate acide ......................................................... 65
4.3.10.1. Determinarea prin uscare la etuv....................................................................................................... 65
4.3.10.2. Determinarea coninutului de substan uscat cu Balana digital de msurare a umiditii (AND
seria AD 4714), metoda rapid .................................................................................................................................... 66
4.3.11. Controlul microbiologic al produselor lactate acide................................................................................................... 66
4.4. Rezultate i discuii........................................................................................................................67
4.4.1. Caracteristicile fizic-chimice ale laptelui folosit pentru obinerea iaurtului ......................................................... 67
4.4.2. Determinarea aciditii iaurtului ................................................................................................................................... 67
4.4.3. Determinarea pH-ului iaurtului .................................................................................................................................... 69
4.4.4. Determinarea coninutului de grsimi din iaurt ......................................................................................................... 69
4.4.5. Determinarea substanei uscate totale din iaurt .......................................................................................................... 70
4.4.6. Determinarea umiditii din iaurt.................................................................................................................................. 71
4.4.7. Analiza microbiologic.................................................................................................................................................... 72
CONCLUZII ................................................................................................................................................. 78
BIBLIOGRAFIE ......................................................................................................................................... 80

3
INTRODUCERE
Produsele lactate acide sunt extrem de populare n ntreaga lume att datorit
caracteristicilor senzoriale plcute, ct i potenialului pe care l au pentru meninerea i chiar
mbuntirea sntii consumatorilor. Consumul de produse lactate n general i de produse
lactate acide n particular a atins o nou dimensiune n ultimii ani, datorit efectelor benefice
asupra sntii, efecte demonstrate de ani de cercetri nutriionale i medicale. Corelaiile
dintre consumul de iaurt i kefir i buna funcionare a sistemelor digestiv, circular i chiar
imunitar sunt doar cteva dintre motivele pentru care consumatorii din ntreaga lume sunt din
ce n ce mai atrai de aceste alimente.
Obinerea de produse la nivel calitativ mondial, diversificarea fr precedent a gamei
sortimentale de produse lacatate acide presupun utilizarea de ingrediente i procese noi, mai
puin familiare sectorului de prelucare a laptelui din ar. Tipurile de microorganisme
fermentative, proprietile lor fermentative i rolul lor n dezvoltarea caracteristicilor de gust
i textur ale produselor finite, precum i aspecte legate de efectele probiotice ale unor
bacterii lactice sunt de asemenea abordate. Recunoscnd c nainte de toate orice produs
alimentar trebuie s fie sigur pentru consum, trebuie avut n vedere o evaluare atent a tuturor
riscurilor ce ar putea fi asociate cu producia de produse lactate fermentate, o analiz a
punctelor critice de control i recomandri privind msurile preventive necesare pentru ca
toate produsele care ajung pe masa consumatorului s fie lipsite de patogeni sau substane
duntoare sntii.
Biotehnologia produselor lactate acide, n forma sa empiric, a existat ca o metod
cunoscut de mii de ani pentru conservarea laptelui prin protecie acid. De mult vreme i
mai ales dup lucrrile lui Mecinicov, laureat al premiului Nobel pentru medicin, i a altor
numeroi cercettori s-a stabilit c produsele lactate fermentate au importante beneficii pentru
sntate. Dezvoltarea consumului de produse lactate fermentate i perspectivele determinate
de orientarea consumatorilor spre produsele lactate probiotice poate justifica apariia a tot mai
multe lucrri n care autorii prezint att proprietile i valoarea nutriional a produselor
lactate fermentate ct i efectul acestora asupra sntii consumatorului.
Produsele lactate acide sunt considerate ca fiind alimente sntoase n special
datorit efectelor fiziologice asupra organismului uman, care pot fi grupate n trei categorii:
efectele directe ale bacteriilor lactice folosite n fabricaie.
efectele metaboliilor produi de bacteriile lactice.
efectele unor componente rezultate din transformri ale laptelui materie prim supus
aciunii bacteriilor lactice.
Asocierea dintre alimentaie i bolile adultului din ce n ce mai frecvente, mai ales
ca rezultat al unei alimentaii dezechilibrate, a fost studiat de mult vreme. nc din urm cu
dou decenii s-au abordat lucrri referitoare la corelaia dintre flora intestinal, bolile
adultului i mbtrnirea precoce a organismului. O serie de autori au evideniat faptul c
activitatea metabolic a bacteriilor lactice utilizate la fabricarea produselor lactate acide au
proprieti antitumorale, efecte hipotensive sau anticolesteroleminate.

4
Produsele lactate acide din comer sunt de obicei contaminate cu diverse
microorganisme strine. Se nelege prin aceasta ali germeni dect culturile specifice
introduse pentru fermentare. n funcie de gradul de contaminare i de natura
microorganismelor se influeneaz negativ calitatea produselor lactate acide i
conserviabilitatea acestora.
Studiind aceast problem Kurman consider c se poate obine o durat de
conservare a iaurtului de cel puin 4 sptmni printr-o biostabilizare bazat pe tehnologia
clasic de fabricaie nelegnd prin aceasta dirijarea diferiilor factori care influeneaz
conserviabilitatea, n scopul ncetinirii sau chiar al opririi transformrilor de origine
enzimatic i chimic, fr modificarea calitilor naturale ale produsului. Pentru aceasta este
necesar s se ia o serie de msuri pe parcursul procesului tehnologic, de la materie prim i
pn la depozitare i transport. Pentru moment, maximum de rezultate se pot obine folosind
culturi anume selecionate i luptnd contra infeciilor microbiene.
n ultimii ani s-au introdus o serie de procedee avnd drept scop prelungirea duratei de
conservare a iaurtulu. Acestea sunt:
uperizarea laptelui;
tehnica tratrii aseptice;
congelarea sau uscarea produsului finit.
Este foarte greu de realizat fabricaia n condiii de lips absolut de infecie.
Aceste metode permit aducerea de soluii noi n procesul tehnologic de fabricaie i
distribuire a unor produse lactate acide cu conserviabilitate ndelungat. Automatizarea a inut
cont de aceste transformri, n special la reglarea parametrilor tehnologici, mergnd pn la
cuprinderea ntregului proces de producie.
Studiul ameliorrii conserviabilitii produselor lactate acide prezint actualmente un
interes deosebit.

5
CAPITOLUL 1. PRODUSE LACTATE ACIDE

1.1. Aspecte generale


Produsele lactate acide sunt originare din Asia Central i rile situate n bazinul
Mediteranean. Procedeele tehnologice moderne au permis diversficarea din ce n ce mai
accentuat a acestor produse. ntre cele 400 de sortimente de produse lactate acide cunoscute
unele sunt obinute la nivel local, prin procedee tradiionale, obinute aproape exclusiv prin
fermentaie lactic, altele fac obiectul unui comer internaional fiind realizate prin metode
industriale. Studiile efectuate n diferite ri au demonstrat creterea interesului fa de acest
tip de produse. Un studiu efectuat n Frana a demonstrat creterea consumului de produse
lactate acide cu aproape 20% ntr-un interval de 5 ani (Paccalin J. i col., 1986). n general,
diferite tipuri de produse lactate acide sunt clasificate dup metodele de fermentare i/sau
prelucrare care sunt dependente de microoragnismele folosite. Fiecare tip de produs se obine
cu microorganisme specifice, ns ntre tehnologiile de fabricaie exist strnse asemnri.
Produsele lactate acide sunt fabricate din lapte i/sau produse lactate prin aciunea
unor microorganisme specifice care determin reducerea pH-ului i coagularea.1
Microorganismele utilizate trebuie s fie viabile, active i n numr important n
produsul finit n momentul vnzrii la consumator.
Laptele i produsele lactate utilizate n fabricaie trebuie s fie tratate termic, cel puin
prin pasteurizare. Produsele lactate acide pot s conin aditivi adugai nainte sau dup
fermentare. Fiind clasificate n categoria produselor lactate proaspete, durata de conservare a
produselor lactate acide este limitat (n mod normal pn la 30 de zile) n condiii de
refrigerare (7 10 oC) pe ntreg parcursul reelei de distribuie.
Nu se admite ca dup fermentare produselor lactate acide s li se aplice un tratament
termic prin nclzire. De asemenea, dup fermentare nu se va elimina zerul din produs, cu
excepia unor tipuri speciale de iaurt concentrat.
Procesele fizico-chimice i biochimice care au loc la fabricarea produselor lactate
acide sunt: fermentarea lactozei sub aciunea microorganismelor; scderea pH-ului ca urmare
a acumulrii de acid lactic; formarea produselor de arom i acumularea de alcool (n unele
cazuri); coagularea cazeinei; proteoliza cu acumulare de substane cu mas molecular mai
mic.
Componentele eseniale ale produselor lactate acide sunt materiile prime i culturile
microbiene.
Materii prime. Pot fi utilizate n fabricaie laptele proaspt sau reconstituit din lapte
praf, integral, parial sau total degresat. Coninutul de substan uscat poate fi sporit prin
concentrare termic sau prin separare pe membrane.

1
Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura Academica, Galai,
2005, p. 1
6
Culturi microbiene. Pentru fermentaie se folosesc microorganisme specifice,
nepatogene i netoxice.
Adaosuri facultative. Aceste adaosuri nu trebuie s depeasc 30% din masa total a
produsului finit.
Zaharuri toi ndulcitorii pe baz de hidrai de carbon, n afara polizaharidelor.
Produse aromatizate fructe i legume (proaspete, congelate, tratate termic,
uscate); sucuri, pireuri sau pulpe de fructe i legume (concentrate sau nu);
conserve de fructe i legume; cereale, miere, ciocolat, cacao, nuci, cafea,
condimente i alte produse aromatizate naturale fr nocivitate.
Substane aromatizate aromatizani naturali, substane aromatizante identice cu
substanele naturale sau artificiale care figureaz n Codex Alimentarius (vol. XIV)
n lista aditivilor a cror inocuitate la folosirea n alimente a fost evaluat.
Clorura de sodiu.
Colorani de calitate alimentar
Colorani de caramel
Rou de coenil sau acid carminic
Ali colorani extrai din fructe i legume naturale
Stabilizatori
Agar agar
Caragenan
Gum de guar
Gum de caroube
Carboximetilceluloz de Na
Alginai de Na, K i Ca
Gum xanthan
Amidonuri modificate (care figureaz n Codex Alimentarius)
Ageni conservani (provenii exclusiv din substane aromatice prin transfer).
Acid sorbic i srurile sale de sodiu, de potasiu i de calciu, anhidrid sulfuroas i
acid benzoic n concentraii autorizate de normele Codex individuale sau de max.
50g/kg produs finit.
ndulcitori
Acesulfam K
Aspartan
Ciclamai
Zaharine
Sorbitol
Sirop de sorbitol.
Antioxidani Acidul ascorbic (Vitamina C), Tocoferolii (vitaminele E).

7
1.2. Clasificare
Laptele acidifiat natural a fost probabil unul dintre primele produse lactate, care a
condus implicit la prelungirea duratei de conservare a laptelui. Aceste produse au fost
dezvoltate n principal pentru motive climatice i ecologice, fiind elaborate numeroase
sortimente cu specific regional, ulterior acceptate pe plan internaional. ntre acestea se
menioneaz iaurtul din Bulgaria i chefirul din Caucaz.
Produsele lactate acide sunt clasificate n 4 categorii dup caracteristice lor specifice2:
Proprieti de textur consisten, cremozitate la agitare, capacitate de curgere;
Tipul culturii de acidificare de ex. Bacterii mezofile pentru lapte acru, bacterii
termofile pentru iaurt, amestec de bacterii i drojdii pentru chefir;
Prezena/absena fructelor ca aditivi (iaurt cu fructe, iaurt natural);
Concentraia de grsime din produs (lapte fermentat similar smntnii, iaurt
integral, iaurt degresat).
Kasikowski (1977) a propus un mod de clasificare a produselor lactate acide, dar din
cauz c sunt larg rspndite, ntr-o varietate mare de produse, ca i datorit implicrii lor n
nutriie, sntate i fiziologie, este destul de dificil s se formuleze o clasificare simpl i clar
definit. Totui, el a propus clasificarea produselor lactate acide n dou grupe dup tipul
fermentaiei:
Produse lactate acide n care are loc numai fermentaia lactic, prin care se obine,
de exemplu, iaurt i smntn acidifiat.
Produse lactate acide realizate prin fermentaie mixt, lactic i alcoolic, utilizat
la fabricarea chefirului i cumsului.
Ulterior, Kuman (1984) a mprit grupul produselor lactate acide obinute prin
fermentaie lactic n dou tipuri, dup temperatura de dezvoltare a bacteriilor lactice folosite:
Termofile
Mezofile
Kosikowski (1971), Gordin (1980) i Tamime i Robinson (1978), n studiile lor
asupra produselor lactate acide, le-au clasificat i n alte categorii:
Produse lactate acide n care nu se produce CO2 sau alcool;
Produse lactate acide filante;
Produse lactate acide ne-filante;
Tipuri de produse lactate acide asemntoare laptelui concentrat.
Clasificarea produselor lactate acide este dificil i ridic probleme, ns este relativ
uor s se aprecieze limitele generale ale tipurilor de iaurt normal i produsele lactate acide
obinute n prezent, prin mprirea lor dup metoda de fermentare i forma de prezentare
(tabelul 1.1).

2
Spreer, E., - Milk and Diary Products Technology, Marcel Bekker, Inc. New York, 1998
8
Tabelul 1.1 Tipuri de lapte fermentat dup metoda de fermentare i forma de prezentare
Metoda de fermentare Form Procesare/tratament Aditivi
Fermentare n tanc Tip coagulat Condensare/ Fr aditivi
(tip pre-fermentare) Tip amestecat Concentrare Fr aditivi
Tip fluid Fructe
Fermentare dup dozare n Tip congelat Hidroliza lactozei ndulcitori
ambalaje Tip deshidratat Pasteurizare Aromatizatori
(tip post-fermentare)
Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate Fermentate ,
Editura Academica, Galai, 2005, p. 6

FIL/ISO/AOAC au elaborat, printr-un grup de experi (1992), o norm general de


compoziie pentru produsele lactate acide n care acestea sunt clasificate dup cum urmeaz:
Produse fermentate cu microoragnisme termofile
Cu bacterie unic - de exemplu, lapte acidofil (Lactobacillus acidophilus)
Cu culturi bacteriene mixte de exemplu, iaurt (Streptococcus thermophilus
i Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus), produs ATB (Lactobacillus
acidophilus, Bifidobabacterium sp. i Streptococcus thermophilus)
Produse fermentate cu microorganisme mezofile
Fermentaie lactic de exemplu, lapte acru (Lactococcus lactis i subsp. i
biovariante i/sau Leuconosctoc mesenteroides i subspeciile sale)
Fermentaie lactic i fermentaie alcoolic de exemplu, chefir (granule de
chefir), cums (Lactobacillus delbrueckii subs bulgaricus i Kluyveromyces
marxianus)
Pe lng produsele menionate anterior exist produse lactate acide n care n afar
de bacteriile lactice sunt cultivate mucegaiuri de exemplu, viili (Lc. lactis subsp.
lactis, Lc. lactis subsp. lactis biovar diacetylactis, Ln. mesenteroides subsp.
cremoris i Geotrichum candidum).3

1.3. Materii prime pentru obinerea produselor lactate acide


Laptele de vac este utilizat pe scar larg pentru fabricarea produselor lactate acide,
laptele de oaie fiind folosit ca materie prim doar n cteva ri balcanice. Deseori, n
fabricaie se folosete lapte praf reconstituit dei Fao/Oms i FIL au reineri privind aceast
utilizare.

1.3.1. Compoziia chimic a laptelui


Laptele este un lichid de culoare alb-glbuie secretat de glanda mamar a mamiferelor.
Din punct de vedere fizic, laptele reprezint un sistem complex, putnd fi considerat o
emulsie de tipul U/A, n care U reprezint faza gras format din globule de grsime, iar A
este faza apoas care conine substane sub form coloidal (proteinele) sau sub form

3
Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura Academica, Galai,
2005, p. 4 8
9
dizolvat (lactoz, sruri minerale, vitamine hidrosolubile). Faza gras conine i vitaminele
liposolubile, care pot fi legate i de proteine, n pricipal de cazein.4
Datorit diversitii componentelor, laptele de vac are o compoziie complex, care
schematic poate fi reprezentat astfel:

Ap
Gliceride
Substan
gras Fosfatide
Alte grsimi
Steroli
Lactoz
Substan
Lapte uscat Cazein
integral Preoteine Albumin
Globulin
Substan Substane
negras azotoase Aminoacizi
Neproteice Uree
Amide .a.

Sruri minerale, vitamine, enzime, .a.


Gaze

Dup cum rezult din schema prezentat cel mai important component al laptelui este
substana uscat ce este format din: substana gras, substane gazoase, lactoz, sruri
minerale, vitamine, enzime, .a., toate acestea determinnd valoarea nutritiv a acestui produs
deosebit de valoros.
Componenii ce formeaz substana uscat sunt dizolvai n apa din lapte sub diferite
forme:
n emulsie: grsimile, vitaminele liposolubile
n dispersie coloidal: substanele proteice;
n soluie: lactoza, srurile minerale, vitaminele hidrosolubile.
Laptele are un coninut variabil de gaze nglobate ce reprezint cca. 7 8% din volum,
format din dioxid de carbon, azot i oxigen. Imediat dup mulgere coninutul de gaze este mai
mare i predomin n principal dioxidul de carbon, iar ulterior, ca urmare a manipulrilor la
care este supus (transvazare, filtrare, agitare) i a contactului cu aerul mediului nconjurtor,
acesta scade dar n schimb crete cel de oxigen i azot. Coninutul de gaze al laptelui nu
prezint nici o importan deosebit i acestea sunt ndeprtate n timpul prelucrrii
(pasteurizrii) laptelui. Trebuie avut n vedere c prezena n cantitate prea mare a oxigenului

4
Banu, C. coord. Tratat de industrie alimentar, ASAB, Bucureti, 2009, p.17
10
poate determina apariia unor defecte de gust i contribuie la diminuarea coninutului de
vitamina C.5
Compoziia chimic a laptelui variaz ntre anumite limite, fiind influenat de mai
multe factori dintre care mai importani sunt: rasa, individualitatea, vrsta, starea de sntate a
vacilor productoare de lapte, precum i perioada de lactaie, modul de hrnire, condiiile de
ntreinere, metodele de mulgere, .a.
Prin prelucrarea laptelui n produse lactate acide se mbuntete considerabil
valoarea nutritiv i biologic a acestuia.
Sub raportul valorii nutritive, produsele lactate acide conin toate componentele
laptelui, dar ntr-o form mai zor digestibil. Lactoza este scindat n acid lactic. Conform
normativelor Uniunii Europene, cantitatea de acid lactic liber din produs n momentul vnzrii
este de minimum 0,6 0,8 g%, n funcie de sortiment. Srurile minerale i ndeosebi Ca se
gsesc sub form de complexe organice (lactat de calciu), fiind mrit substanial
biodisponibilitatea acestuia. Lactatul de calciu este foarte uor metabolizat i asimilat, motiv
pentru care este recomandat n terapia unor boli de nutriie i metabolism.
Proteinele laptelui sunt parial hidrolizate, prin aciunea proteolitic a culturii starter.
n aceast form ele unt asimilate mai bine de ctre organism.

1.3.2. Condiiile care trebuie s le ndeplineasc laptele destinat fabricrii


produselor lactate acide
Calitatea laptelui folosit la prepararea produselor lactate acide determin n mare
msur calitatea produselor finite. Rezult c trebuie recepionat numai laptele de prim
prospeime, deci cu un grad de contaminare ct mai redus i cu o compoziie normal (se
exclude laptele care conine i colostru, lapte falsificat, lapte provenit de la animale tratate cu
antibiotice, lapte mamitic .a.).
n cazul laptelui de vac, acesta trebuie s corespund urmtoarelor cerine:6
Densitate, minimum 1,029;
Aciditate, maximum 17 - 19T;
Titru proteic, minimum 3,2;
Proba reductazei (durata de decolorare a albastrului de metilen) minimum 3 ore.

1.4. Bacterii starter utilizate n biotehnologia produselor lactate acide


Conform noilor concepte moderne privind extinderea producerii pe scar larg a
alimentelor funcionale, numeroi oameni de tiin, pediatri, fiziologi i nutriioniti
consider diferitele tipuri de lapte fermentat ca fiind produse din aceast categorie, ce
beneficiaz de activitatea biochimic complex a culturilor de microorganisme, ntre care
speciile dominante sunt bacteriile lactice. 7

5
Codoban, J., Codoban, I. Procesarea laptelui n secii de capacitate mic, Editura Cetatea Doameni, Piatra
Neam 2008, p. 2
6
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 212-213
7
Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura Academica, Galai,
2005, p. 12
11
n biotehnologia produselor lactate acide diversitatea produselor deriv din activitatea
specific a culturilor selecionate de bacterii lactice care acioneaz asupra componentelor
laptelui. Activitatea culturilor pure sau a culturilor mixte este dirijat prin diferite raporturi
ntre cantitile de inocul, durata i temperatura favorizant unui tip de activitate metabolic.
Numeroase studii au demonstrat c prin consumul de produse fermentate se pot obine
beneficii majore pentru sntate. Acestea sunt induse att de celulele microbiene, care
ingerate i meninute viabile induc modificri i influene pozitive n mediul intestinal, ct i
de metaboliii formai prin activitatea lor fermentativ n laptele utilizat ca substrat.
Produsele lactate acide tradiionale, cum sunt iaurtul sau laptele acidofil, sunt produse
a cror tehnologie este bine coordonat beneficiind de activitatea unor bacterii specifice,
utilizate n monoculturi sau culturi multiple diverse. Taxomania i morfologia acestor bacterii
sunt bine cunoscute, ceea ce face ca ele s fie uor de detectat i difereniat.
Recent s-a dezvoltat generaia nou de produse lactate acide, pentru realizarea crora
alturi de culturi tradiionale sunt utilizate bacterii lactice cu proprieti fermentative i
fiziologice specifice, unele cu proprieti profilactice, cum sunt de exemplu specii ale genului
Bifidobacterium, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei etc., cunoscute sub
denumirea de culturi probiotice.
Ca urmare a particularitilor metabolice i tehnologice ale acestor microorganisme,
diferite de cele ale culturilor tradiionale, a fost necesar elaborarea unor proceduri specifice
de producie i control care prevd:
monitorizarea evoluiei fiecrei specii pe parcursul procesului de fabricaie;
controlul interaciunilor dintre diferitele specii aflate n culturi multiple;
adoptarea unor proceduri selective i ct mai eficiente pentru diferenierea
speciilor.
Principale grupe de bacterii ce se regsesc n compoziia culturilor starter utilizate
pentru producerea produselor lactate acide sunt prezentate n tabelul 1.2.
Tabelul 1.2 Bacterii starter pentru produse lactate acide i rolul lor biotehnologic
Genul Tip de produs lactat acid Produse de metabolism
Lactobacillus
L. delbrueckii subsp. delbrueckii Buturi fermentate lactic Acid lactic
L. delbrueckii subsp. lactis Buturi fermentate lactic Acid lactic
L. delbrueckii subsp. bulgricus Iaurt; Produse lactate tradiionale n Acid lactic + Aldehid acetic
Bulgaria
L. helveticus Chefir; Cums Acid lactic
L. acidophulus Lapte scidofil; Chefir Acid lactic
L. paracasei subsp. paracasei Buturi fermentate lactic Acid lactic
L. rhamnosus Chefir Acid lactic
L. plantarum Chefir Acid lactic
L. kefir Chefir Acid lactic
L. kefiranofaciens Chefir Acid lactic
L. brevis Chefir Acid lactic + CO2
L. fermentum Chefir Acid lactic + CO2
Lactococcus
L. lactis subsp. lactis Lapte btut; Chefir Acid lactic

12
Genul Tip de produs lactat acid Produse de metabolism
L. lactis subsp. cremoris Lapte btut; Chefir Acid lactic
L. lactis subsp. diacetylactis Lapte btur; Chefir Diacetil + Acid lactic
Streptococcus
S. thernophilus Iaurt Acid lactic + Aldehid acetic
Leuconostoc
L. mesenteroides subsp. Chefir Diacetil + Acid lactic
mesenteroides
L. mesenteroides subsp. cremoris Chefir Diacetil + Acid lactic
L. mesenteroides subsp. Chefir Diacetil + Acid lactic
dextranicum
Bifidobacterium
B. adolescentis Buturi fermentate lactic Acid lactic + Acid acetic
B. bifidum Produse derivate din iaurt Probiotic
B. breve Probiotic
B. infantis Probiotic
B. longum Probiotic
Pediococcus
P. acidilactici Biokys Acid lactic
P. pentosaceus
Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate Fermentate ,
Editura Academica, Galai, 2005, p. 14

Microorganismele lactice din cultura starter sintetizeaz cantiti relativ nsemnate de


vitamine, mai ales in complexul B (B1 tiamina i B2 riboflavina).
Din punct de vedere microbilogic, flora specific produselor lactice acide exercit
efecte multiple asupra organismului consumatorului. Bacteriile lactice componente ale
microflore sunt vii/viabile n momentul consumului produsului i se afl ntr-un numr
impresionant (cel puin 100 milioane/gram produs). La nivel intestinal, microflora lactic
nlocuiete parial microflora obinuit a tubului digestiv, reprezentat n special de bacterii de
fermentaie i bacterii de putrefacie. Acest lucru este posibil prin intervenia unor fenomene
de concuren, exemplu edificator n acest sens fiind concurena ntre bacteriile lactice i
enterobacteriacee, efectul de inhibare a microflorei obinuite se realizeaz prin dou tipuri de
mecanisme: scderea pH-ului intestinal i sinteza de ctre bacteriile lactice a unor antibiotice,
cunoscute sub denumirea generic de bacteriocine. Cele mai cunoscute bacteriocine sunt
nizina i diplocina. Studiile efectuate au demonstrat faptul c ele au efecte inhibatoare chiar
asupra dezvoltrii unor bacterii patogene.8
Analiza compoziiei n aminoacizi i a altor elemente de structur a permis ncadrarea
bacteriocinilor n grupe: n funcie de structura terminal i unele proprieti fizico-chimice,
unele clase pot fi divizate n subclase.
Prima clas, cunoscut i sub denumirea generic de lantibiotice include bateriocinele
cu o greutate molecular mic (sub 5 Kda), formate dintr-un numr relativ redus de
aminoacizi. Reprezentative pentru aceast clas sunt nizina, lacticina 481 i carnocina UI 49.

8
Bondoc, I. Tehnologia i controlul calitii laptelui i produselor lactate, vol. I, Editura Ion Ionescu de la
Brad, Iai 2007, p.161
13
Nizina a fost primul lantibiotic studiat, structura ei fiind stabilit cu precizie nc din 1988.
Sub raport biochimic i structural, nizina este o peptid cu o greutate molecular de 3,38 Kda,
format din 34 aminoacizi. n molecula nizinei sunt prezeni unii aminoacizi mai puin
obinuii, de tipul lantioninei i al metillantioninei.
Lacticina 481, lantibiotic generat de aceeai specie microbian, are o structur relativ
diferit de cea a nizinei. Sub raport biochimic i structural lacticina 481 este o peptid format
din 21 de aminoacizi, cu o secvenialitate diferit de cea a nizinei.
Cea de a doua clas include bacteriocine cu o greutate molecular mic (< 10 Kda),
dar care, spre deosebire de prima grup, nu conin lantionin. n funcie de structur i
proprieti, n cadrul clasei 2 se disting 3 subcalse: IIa, IIb i IIc.
Subclasa IIa include bateriocine cu o secven scurt comun ctre extremitatea
terminal NH2, aa cum sunt: pediocina, sakacina, curvacina .a. Subclasa IIb include
bacteriocine de tipul lactococinei G, lactocinei F .a., iar subclasa IIc include bacteriocine cu
o structur peptidic asemntoare primelor dou subclase, dar care includ grupri tiol n
molecula lor.
Clasa a treia este reprezentat de bacteriocine cu greutate molecular mare (> 30 Kda),
de tipul helveticinei J, al acidophlucinei A i al termofilinei ST-1. Aceasta din urm a fost
purificat i descris relativ recent, plecnd de la o su de Streptococcus theormophillus
izolat dintr-un iaurt tradiional grecesc.
Clasa a patra este reprezentat de bacteriocine complexe, formate din proteine asociate
cu pri glucidice sau lipidice, necesare activitii biologice. Ca exemple de bacteriocine din
acest grup se pot cita: plantaricina S, leuconococina S, pediocina SJ-1 .a.
Produsele lactate acide, cu o concentraie mare de bacterii lactice, se administreaz
concomitent cu antibiotice, pe cale oral, pentru a menine n echilibru microflora intestinal
i pentru a preveni dezvoltarea unor microorganisme rezistente la antibiotice care ar putea
conduce la micoze. Unele produse lactate acide, cele recomandate a se administra n cazul
mbolnvirilor cu manifestri gastrointestinale sunt obinute cu microorganisme izolate din
surse intestinale (bifidobacterii care reprezint 90% din microflora intestinal a sugarilor).
Culturile selecionate destinate obinerii de produse lactate acide se obin n
laboratoare de cercetare specializate, n care se selecioneaz culturi pure cu activitate
superioar, destinate productorilor din aceast ramur.
Culturile pure pot fi livrate n diferite forme:
1. Culturi lichide obinute prin inoculare de cultur activ, n lapte de bun
calitate, pasteurizat la 90 95C/1820 h streptococci 13% i termostatare la 30C/1820 h
sau lactobacilli 12% i termostatare la 4245C/46 h. S-a constat c concentraia de celule
este maxim cnd s-a produs coagularea laptelui i atunci se realizeaz omogenizarea,
repartizarea n recipient, pstrarea n condiii de refrigerare i livrare.
Pentru a preveni, pe timpul verii, acidifierea n exces a culturilor lichide, la
pasteurizare n prob se adaug CaCO3, care va neutraliza excesul de acid lactic astfel nct
viabilitatea celulelor va crete.

14
2. Culturile uscate au un termen de pstrare mai ndelungat i se obin prin
folosirea laptelui cu substan uscat de 16%, pasteurizat i inoculat cu cultur pur sau mixt
de celule. n momentul n care s-a ajuns la densitatea maxim de celule, se face
omogenizarea, neutralizarea aciditii i uscarea menajat pentru a evita inactivarea celulelor.
3. Concentratele bacteriene se obin n mod identic pn la atingerea densitii
maxime n cultura inoculat. Se face apoi centrifugarea care s aduc concentratele bacteriene
la o densitate de 5x109 celule/g. Aceste concentrate bacteriene se livreaz imediat sau se
pstreaz congelate.
4. Culturi liofilizate se obin prin inoculare i cultivare pe mediu optim,
repartizare n recipiente, congelare (congelare lent 1C/min pn la -17C, urmat de
congelare rapid pn la -70C) i evaporarea apei din produsul congelat. n proba liofilizat
procentul de ap maxim admis este de 1%.
Culturile liofilizate se livreaz n sticlue obturate aseptic, n care procentul de celule
rmase vii este de 3060%, stare n care cultura se poate menine un timp destul de mare
dependent de condiiile de liofilizare i de sensibilitate a culturii.
5. Culturile fungice sunt livrate sub form de suspensii concentrate de spori n
lichid cu o concentraie de substane dizolvate n izotonie cu presiunea osmotic intrasporal.
Un exemplu n acest sens l constituie culturile de Penicillium roquefortii.9
Din culturile obinute n laboratoarele de cercetare i livrate ctre ntreprinderile de
produse lactate, dup reactivare, prin pasaje succesive se obin:
cultura primar (maiaua primar sau maiaua-mam);
cultura secundar (maiaua secundar);
cultura teriar (maiaua teriar), care poate fi utilizat drept cultur starter de
producie (maiaua de producie).10
Cultura primar. Se obine prin inocularea laptelui pasteurizat i rcit cu cultura pur
(inoculum) primit de la laboratorul de specialitate. Felul culturii, proporia de inoculare,
temperatura i durata de termostatare difer n funcie de felul produsului pentru fabricarea
cruia se folosete cultura respectic. Imediat dup termostatare, cultura se rcete rapid i se
depoziteaz la 12C pn a doua zi.
Cultura secundar. Se obine din cultura primar (a doua zi), dar avnd n vedere c
aceast cultur secundar reprezint a doua transplantare (pasaj), ea se constituie ca un stadiu
mai avansat de reactivare a culturii pure (inoculum) i de aceea din cultura primar se
inoculeaz n laptele destinat culturii secundare o cantitate mai mic din cultura primar, iar
durata de termostatare este ceva mai redus. i aceast cultur se pstreaz la 12C, timp de
12 ore.
Cultura teriar sau de producie. Se prepar din cultura secundar (a treia zi), dup
aceeai tehnic ca i n cazul culturii primare, ns din punct de vedere cantitativ aceast
cultur trebuie s satisfac necesarul produciei, iar din punct de vedere calitativ trebuie s

9
Rotar, R. Microbiologia produselor alimentare, Editura Universitii Suceava, Suceava 2004, p. 125-126
10
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 209-210
15
prezinte caracteristicile produsului respectiv de bun calitate (aspect, consisten, gust miros,
.a.).
Cultura starter teriar sau de producie se inoculeaz zilnic i tot zilnic se controleaz
chimic, senzorial i microbilogic. La folosirea culturii starter de producie trebuie s avem n
vedere urmtoarele:
cultura s fie pur (s nu conin microorganismele specifice);
cultura s fie activ (s produc fermentaia specific n timp normal i s asigure o
anumit aciditate);
cultura s-i menin n timp nsuirile iniiale;
cultura s fie meninut 56 ore nainte de folosire, la 12C, pentru a se favoriza
acumularea substanelor aromatizante;
s nu fie cultur starter de producie mai veche de 48 ore.
Schema tehnologic de obinere a culturilor starter de producie pentru iaurt i lapte
btut este prezentat n figura 1.1.
n unele cazuri, impuse de producie sau de calitatea necorespunztoare a culturii, este
necesar s se mreasc necesarul de pasaje (culturi) intermediare, n aceleai condiii ca la
cultura secundar, n vederea corectrii unor defecte. Acest lucru se impune, n principal, la
cultura pentru iaurt, n vederea refacerii raporturilor simbiotice dintre microorganisme.
Dac cultura primar prezint caracteristici foarte bune, ea poate fi folosit direct la
prepararea culturii starter de producie (cazul folosirii culturilor pure stoc lichide).

16
Controlul calitativ al laptelui

Pasteurizarea laptelui

Rcirea laptelui la temperature de nsmnare

IAURT LAPTE BTUT LAPTE ACIDOFIL

nsmnare la 45C nsmnare la 2628C nsmnare la 45C


cu cultur pur de laborator cu cultur pur de laborator cu cultur pur de laborator
2% 2% 2%
Cultur
primar Termostatare la 4042C Termostatare la 2628C Termostatare la 3740C
pn la coagulare pn la coagulare pn la coagulare
34 ore 8 ore

Rcire i pstrare la Rcire i pstrare la Rcire i pstrare la


12C/24 ore 12C/24 ore 1014C/24 ore

nsmnare la 45C nsmnare la 2628C nsmnare la 45C


cu cultur primar 11,5% cu cultur primar 25% cu cultur primar 1%
Cultur
secundar Termostatare la 4045C/3 ore Termostatare la 2426C/1012 ore Termostatare la 3740C/1216 ore

Rcire i pstrare la 12C/24 ore Rcire i pstrare la 12C/24 ore Rcire i pstrare la 1014C/24 ore

nsmnare la 45C nsmnare la 2628C nsmnare la 45C


cu cultur scundar 1% cu cultur scundar 25% cu cultur scundar 1%
Cultur teriar
(de producie) Termostatare la 4042C/22,5 ore Termostatare la 2426C/1012 ore Termostatare la 3740C/1216 ore

Rcire i pstrare la 12C/24 ore Rcire i pstrare la 12C/24 ore Rcire i pstrare la 1014C/24 ore

Control Control Control

Fig. 1.1 Schem tehnologic de obinere a culturilor starter de producie pentru iaurt, lapte btut i lapte acidofil
Sursa: Prelucrare dup Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui , Editura Tehnic, Bucureti, 1998, p. 211
1.5. Principale tipuri de produse lactate acide fabricate n Romnia

Iaurtul, laptele btut i chefirul sunt principalele sortimente de produse lactate acide
care se fabric n prezent n cantiti mari n ara noastr i care se obin prin fermetarea
controlat a laptelui, datorit nsmnrii cu culturi de bacterii lactice selecionate.

1.5.1. Lapte btut


Dup iaurt, laptele btut este sortimentul cel mai apreciat de ctre consumatori, fiind
fabricat n cantiti nsemnate. Aceasta datorit calitilor pe care le are exprimate printr-un
gust plcut, rcoritor i o valoare nutritiv ridicat, uor asimilabil n organism. Este indicat ca
aliment dietetic precum i n alimentaia zilnic a unor categorii mari de consumatori.11
Laptele btut se obine prin fermentarea laptelui pasteurizat cu ajutorul unor culturi
selecionate de streptococi lactici, n principal Lactococcus lactis ssp. lactis i Lactococcus
lactis ssp. diacetylactis.
Sortimentul de lapte btut se fabric n 4 tipuri:
gras, cu 2% grsime;
slab, cu 0.1% grsime;
sana, cu 3.6% grsime, i
extra , cu 4% grsime.12
Tehnologia de fabricaie a laptelui btut
Tehnologia de obinere presupune parcurgerea acelorai etape generale, cu unele
diferene. Astfel, nsmnarea cu cultura starter se face la temperatura de 2628C sau puin
mai mare, n funcie de sortoment.
Termostatarea se face la temperaturi apropiate de cea de nsmnare, iar durata de
fermentare este de circa 1218 ore. Pentru obinerea unui produs cu o consisten
asemntoare smntnii i cu o arom plcut, se indic fermentarea la 2428C.
Dup termostatare i fermentare, laptele btut se rcete la temperatura de 24C i se
depoziteaz n spaii cu aceeai temperatur, maximum 2448 ore.13
Schema tehnologic este prezentat n figura 2.2.
Caracteristicile produsului finit
Laptele btut are urmtoarele caracteristici:
senzoriale:
aspect i consisten: coagul fin dispersat cu fluiditatea smntnii proaspete. La
sana coagulul are consisten fin, compact;
culoare: alb;

11
Codoban, J., Codoban, I. Procesarea laptelui n secii de capacitate mic, Editura Cetatea Doameni,
Piatra Neam 2008, p. 78
12
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 221
13
Bondoc, I. Tehnologia i controlul calitii laptelui i produselor lactate, vol. I, Editura Ion Ionescu de la
Brad, Iai 2007, p. 166
gust i miros: plcut, caracteristic, acru rcoritor.
chimice:
Tabelul 1.3 Proprietile fizico-chimice ale laptelui btut
Parametri Condiii de admisibilitate
Tip extra Tip I Sana Tip II Tip II
Grsime, % minimum 40,1 3,60,1 20,1 max 0,1
Aciditate, T maximum 120 120 120 120
Substane proteice, % minimum 3,2 3,2 3,2 3,2
Temperatura de livrare, C 8 8 8 8
Sursa: Prelucrare dup Codoban, J., Codoban, I.. Procesarea laptelui n secii de capacitate mic, Editura
Cetatea Doamnei, Piatra-Neam 2008, p.93
microbiologice:
bacterii patogene lips;
bacterii coliforme maximum 5/ml la ambalajele mici i maximum 50/ml la
bidon.

19
LAPTE Cultur starter de producie
pregtit conform schemei din
Curire fig. 1,1
CCP-1

Normalizare
CCP-2 sau 12%
Pasteurizere n van la
8595C, cu meninere nsmnare n
2030 min lapte pasteurizat la
9095C/30 min i rcit
Rcire lapte la 2528

Pentru Pentru Pentru


lapte btut1 lapte btut2 sana Termostatare la
la 3032C la 2628C la 2628C 2526C/1214 ore

1,53%
CCP-3
nsmnare Rcire la 10C
CCP-4
Distribuie n ambalaje Depozitare la
de desfacere 12C/24 ore
CCP-5 1,53%
Termostatare Cultur starter
de producie
de tip
Durata scurt Durata lung Sana cuaternar
3035C/610 ore 2428C/1216 ore 2427C
(Lapte btut1) (Lapte btut2) 1216 ore

Prercire la 1820C
CCP-6

Rcire la 28C
CCP-7
Depozitare
(28C/min. 6 ore)

Livrare

Fig. 1.2 Schem tehnologic de fabricare a laptelui btut


Sursa: Prelucrare dup Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui , Editura Tehnic,
Bucureti, 1998, p. 221

20
1.5.2. Lapte acidofil
Microbiologia laptelui acidofil
Laptele acidofil se obine prin fermentarea laptelui cu o cultur starter de producie
care conine numai Lactobacillus acidophilus. La fabricarea laptelui acidofil trebuie s avem
n vedere urmtoarele:
Lactobacullus acidophilus este o bacterie de origine intestinal care se aclimatizeaz
uor n organism, deci consumul de lapte acidofil va realiza o mbogire a microbiotei
(microflorei) intestinale cu bacterii lactice cu rol profilactic n derajamentele intestinale i,
respectiv, va restabili echilibrul microbiotei (microflorei) intestinale n urma tratamentului cu
antibiotice;
Lactobacillus acidophilus este ns foarte sensibil la bacteriile de infecie, ceea ce
impune o pasteurizare riguroas a laptelui destinat laptelui acidofil i chiar aceasta s se
nlocuiasc cu sterilizarea, iar procesul tehnologic s se desfoare aproape n condiii
cvasichirurgicale.
Tehnologia de fabricaie a laptelui acidofil
Procesul tehnologic pentru produsele acidofile prezint unele particulariti deoarece
Lactobacillus acidophilus se dezvolt relativ lent n lapte, iar acidul lactic se produce n
consecin. (fig. 1.3)
Normalizarea laptelui se face la 2,5% grsime.
Pasteurizarea trebuie s fie sever: 8595C / minimum 30 minute, iar dup
pasteurizare trebuie s fie pstrate cele mai bune condiii de igien n toate verigile procesului
tehnologic.
Rcirea laptelui se face la 4042C i se nsmneaz (inoculeaz) cu 35% cultur
de Lactobacillus acidophilus, tulpini filante i nefilante. Adaosul de cultur starter de
producie de pasaj teriar sau cuaternar se face n exces fa de cantitatea stabilit teoretic.
Termostatarea pentru fermentare are loc la 3740C, timp de 58 ore, i se consider
terminat cnd aciditatea a ajuns la 90T. Depirea parametrilor de termostatare conduce la
diminuarea calitii produsului dar i la micorarea numrului bacterii acidofile, ceea ce
nseamn reducere a valorii terapeutice.
Rcirea se face n dou etape i anume la 1820C i la 1014C. Rcirea la 1014C
n a doua etap este necesar pentru a nu se produce degenerarea lui Lactobacillus
acidophilus care este sensibil la temperaturi sczute.
Depozitarea laptelui acidofil se face, de asemenea, la 1014C, maximum 12 ore, att
pentru obinerea consistenei dorite ct i pentru evidenierea aromei. Depirea duratei de
depozitare conduce la scderea numrului de lactobacili viabili, deci la scderea valorii
terapeutice. n plus, lactobacilli rmai viabili nu mai au activitate performant i nici nu se
mai pot aclimatiza bine n tractusul intestinal, n special n colon.14

14
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 222-223
21
LAPTE Cultur starter de producie
pregtit conform schemei
prezentate n fig. 1.1
Recepia calitativ i
cantitativ a laptelui

Curire 1%

35%
CCP-1
Normalizare

Pasteurizare la 8595C,
CCP-2
cu o meninere n van nsmnare
2030 min lapte pasteurizat la
9095C/30 min i rcit
la 40C
Rcire la 4042C

Termostatare la
CCP-3
nsmnare la 4042C 3740C/1216 ore

CCP-4
Distribuire n ambalaje 35% Rcire la 10C

CCP-5

Termostatare la 3740C/58 ore Depozitare la 48C

Prercire la 1820C

CCP-6
Cultur starter de producie
Rcire la 1014C de pasaj cuaternar
CCP-7

Depozitare la 1014C/max. 12 ore

Livrare

Fig. 1.3 Schem tehnologic de fabricare a laptelui acidofil


Sursa: Prelucrare dup Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui , Editura Tehnic,
Bucureti, 1998, p. 223

22
Caracteristicile produsului finit
Produsul finit trebuie s prezinte urmtoarele caracteristici:
senzoriale:
aspect i consisten: coagul cu consisten cremoas, omogen, fin asemntoare
smntnii;
culoare: alb, uniform n toat masa produsului;
gust i miros: de fermentaie lactic, specific laptelui acidofil.
chimice:
grsime, % minimum 2;
aciditate, T 90100.
microbiologice:
bacterii patogene lips;
bacterii coliforme 5/ml.

1.5.3. Chefir
Istoria chefirului este veche de secole; cuvntul kefir se spune c i are originea din
cuvntul keif care nseamn stare de bine.15
Chefirul a fost produs de sute de ani n zona munilor Caucaz, tradiional n burdufuri
de piele, butoaie de stejar sau vase de lut. Laptele de vac sau capr a fost adugat n aceste
vase dup golirea unei producii anterioare de chefir. n urma unei utilizri prelungite,
suprafaa interioar a recipientelor s-au format granule de chefir insolubile, asemntoare ca
aspect cu orezul fiert. Chefirul tradiional este cunoscut n diverse ri i sub alte denumiri:
Kefyr, Kephir, Kefer, Kiaphur, Keppi i Kippi. Acesta este relativ acru, are o nuan distinct
de gust de drojdie i o structur spumant determinat de prezena CO2. Uscate la aer,
granulele de chefir i menin capacitatea de a fermenta laptele timp de 1218 luni. La
sfritul secolului 19, s-a dezvoltat producia de de chefir n rile fostei Uniuni Sovietice la
nivel industrial, devenind cea mai popular butur lactat. n prezent chefirul este produs n
multe ri din Europa Central i de Est, ntre care Ungaria i Polonia, Suedia, Norvegia,
Finlanda, Germania, Grecia, Austria, Brazilia, Israel, Romnia. Popularitatea acestui produs
este n cretere n SUA i Japonia.
n ara noastr, n prezent, se fabric mai puin, cu toate c are unele proprieti
organoleptice i dietetice deosebite, pe care celelalte sortimente de produse lactate acide nu le
au. Este indicat a se consuma de ctre persoanele suferinde, avnd unumite afeciuni cum
sunt: anemiile, deschinezie biliar, hepatite cronice, boli renale .a. precum i de persoanele
sntoase care doresc s aib un regim de alimentaie raional. Cunoscut fiind c acest
produs are o mare valoare nutritiv, este uor de asimilat de organism, amelioreaz digestia i
mrete pofta de mncare.

15
www.adevarul.ro
23
Microbiologia chefirului
Chefirul este o butur lactat acid n care, pe laptele pasteurizat a fost inoculat un
amestec de streptobacterii mezozofile asociate cu drojdii din genul Torulopsis,
microorganisme care sunt fixate pe aglomeratele de cazein coagulat sub forma granulelor
de chefir. Pe lng fermentaia lactic are loc i o fermentaie alcoolic, astfel nct n
produsul final se vor regsi 0,10,6% alcool etilic.
Senzaia plcut la consumarea acestei buturi lactate este dat i de CO2-ul format i
degajat n urma fermentaiei alcoolice.
Cultura folosit la fabricarea chefirului este una mixt, n care speciile se afl n
simbioz, fixate pe granulele de cazein, aranjate sub form de fragmente de conopid, ca
nite inflorescene.16
Granulele de chefir
Granulele de chefir cu dimensiunea de 0,22 cm sau mai mult, au o form neregulat
i o suprafa neuniform cutat, asemntoarei conopidei. Au o consisten elastic, fiind de
culoare alb care se transform n nuan crem dup splare i uscare. Cnd sunt splate cu
ap apoi pstrate la rece ntr-o soluie salin, granulele rmn intacte cel puin o lun.
Microflora granulelor de chefir este fixat ntr-o matrice gelatinoas, spongioas format din
polizaharide, proteine din lapte i produi ai autolizei populaiei microbiene. Granulele conin
8590% ap, iar substana uscat este format din ~57% hidrai de carbon, ~33% proteine,
~4% grsime i 6% cenu.
Granulele de chefir reprezint un complex de microorganisme format din asocierea a
aproximativ 30 de specii de bacterii i drojdii.
Compoziia granulelor depinde foarte mult de ara de origine, modul de cultivare i
conservare, dar raportul dintre celulele vii de drojdii i bacteriile lactice este relativ sczut.
Proporia dintre speciile hetero i homofermentative ca i dintre speciile mezofile i termofile
este de asemenea destul de constant.
Tehnologia de fabricaie a chefirului
Tehnologia de fabricarea a chefirului cuprinde dou etape principale:
cultivarea granulelor de chefir;
fabricarea propriu-zis a chefirului (fig. 1.4).
Chefirul poate fi obinut prin procedeul clasic sau procedeul de fermentare n van
(care poate fi: procedeu n van cu granule de chefir i procedeu n van cu culturi starter).
Procedeul clasic de fabricare a chefirului const n urmtoarele operaii:
Standardizarea (normalizarea) laptelui la 1,2 sau 3,3% grsime.
Tratament termic la 8587C/510 minute sau la 9295C/2030 minute (tratamentul
termic mai sever mbuntete consistena chefirului deoarece se denatureaz mai tare
proteinele serice care vor participa mpreun cu cazeina la formarea coagulului). Se poate

16
Rotar, R. Microbiologia produselor alimentare, Editura Universitii Suceava, Suceava 2004, p. 128
24
chiar dubla nclzirea, adic se face nclzire la 87C/510 minute, rcire la 77C cu
meninere 30 minute, nclzire la 87C/510 minute.
Rcire la temperatura de termostatare i anume: 1020C vara i 2123C iarna.
Amestecarea laptelui timp de 35 minute, pentru a se asigura o bun distribuie a
granulelor de chefir n masa laptelui.
Distribuirea n sticle i nchiderea ermetic a acestora n vederea reinerii n produs a
ntregii cantiti de CO2 format, care imprim gustul i consistena specifice chefirului.
Fermentarea se realizaz n dou faze:
prima faz la temperatura de 1820C, timp de 1620 ore, asigur condiiile pentru
feremtaia lactic;
a doua faz, la temperatura de 1020C, timp de 12 zile, pentru a se produce
fermentaia alcoolic.
n timpul procesului de fermentare, sticlele cu chefir sunt meninute n poziie
orizontal, agitndu-se zilnic, n vederea intensificrii fermentaiei alcoolice i formarea unui
coagul ct mai fin i omogen.17
Caracteristicile produsului finit
Chefirul produsul finit trebuie s prezinte urmtoarele caracteristici:
senzoriale:
aspect i consisten: coagul fin, omogen, consisten cremoas (asemntoare
smntnii dulci), dar efervescent;
culoare: alb-glbuie, uniform n toat masa produsului;
gust: acrior, plcut, uor neptor i rcoritor;
miros: de drojdie, de alcool.
Gustul i mirosul sunt n principal date de acidul lactic (0,9%), formic, succinic,
acetic, propionic, aldehida acetic, alcool etilic, diacetil (0,080,2%).
chimice:
grsime: 1,2 sau 3,3%;
aciditate: 90, 105, 110120T, n funcie de tipul de chefir, adic slab, mediu sau
tare;
alcool: 0,2; 0,5; 0,8%, n funcie de tipul de chefir, adic slab, mediu sau tare.

17
Banu, C. i col. Manualul inginerului din industria alimentar, vol. II, Editura Tehnic, Bucureti 1999,
p. 20
25
LAPTE
Cultur de producie

Recepia calitativ
i cantitativ a laptelui

Curire

CCP-1

Normalizare

Omogenizare la 150 bar

CCP-2

Pasteurizare la 8595C
cu meninere n van 2030 min

Rcire la 2226C

CCP-3 58%
nsmnare

CCP-4

Ferementarea I la 2024C/812 ore

CCP-5

Fermentarea a II-a la 1214C/612 ore

CCP-6

Distribuire n sticle i nchidere

CCP-7

Depozitare la 48C/ min. 12 ore

Livrare

Fig. 1.4 Schem tehnologic de obinere a chefirului (procedeul cu fermentare n van)


Sursa: Prelucrare dup Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui , Editura Tehnic,
Bucureti, 1998, p. 229

26
1.6. Caracteristicile nutriionale ale produselor lactate acide
Alimentele cu rspuns fiziologic pozitiv sunt denumite alimente funcionale sau
nutraceutice. Laptele i o serie de produse lactate sunt excelente surse pentru dezvoltarea unei
game largi de alimente, care, intrnd n mod curent n viaa consumatorilor, au efecte benefice
pentru sntate. O serie de tehnologii care se bazeaz pe utilizarea culturilor de
microorganisme, fermentaii sau pe ambele sunt eficiente pentru crearea unui spectru larg de
arome i texturi n produsele lactate.
O serie de studii clinice temeinice subliniaz efectele benefice ale consumului unor
tipuri de culturi, ale metaboliilor acestora, sau ale ambelor. (fig. 4.1).
Valoarea nutriional a produselor lactate acide este dependent de disponibilitatea i
digestibilitatea constituenilor nutritivi, precum i de modificrile acestor constitueni,
provocate de dezvoltarea bacteriilor lactice i de activarea lor metabolic.
Dei valoarea energetic a produselor lactate acide este aproximativ aceeai ca i cea a
materiei prime (laptele), totui valoarea nutriional este mbogit datorit:
modificrile suferite de proteine: prin hidroliza proteinelor se formeaz ~7% peptide i
~2% aminoacizi liberi, n cazul chefirului;
creterii azotului proteic prin dezvoltarea masei de celule de bacterii lactice;
producerii de substane noi prin dezvoltarea i activarea metabolic a bacteriilor lactice:
acizi organici, produse de arom; vitamine .a.18
PRODUSE LACTATE ACIDE

Beneficii pentru Beneficii


sntate nutriionale

Celule de Proteine Vitamine Minerale Energie


probiotice i
bacterii benefice
Creterea digestibilitii i biodisponibilitii
componenilor alimentelor
Liz

Perei Enzime Ingestia de


celulari -galacturonaz celule intacte

Restaurarea balanei
ecologice a florei
intestinale

Modularea Diminuarea Reducerea


sistemului Detoxifierea de formrii produilor Suprimarea patogenilor nivelului
imunitar produi nocivi finali cancerigeni vehiculai de alimente coslesterolului

Fig. 1.5 Beneficiile nutriionale i de sntate ale produselor lactate acide


Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate Fermentate , Editura
Academica, Galai, 2005, p. 14

18
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 233
27
1.7. Valoarea biologic a produselor lactate acide
Valoarea biologic a produselor lactate acide este mbuntit deoarece proteinle
acestor produse sunt predigerate de ctre microorganismele din culturile starter.
Efectul cumulativ al aminoacizilor eseniali din proteinele laptelui i proteinele
celulelor microbiene se reflect n calitatea proteinelor (valoarea biologic) produsului
respectiv Dac alturi de culturile starter de bacterii lactice se vor folosi i culturi starter de
bacterii propionice (Propionibacterium shermanii), calitatea proteinelor din produsul
fermentat va fi mai bun.
Proteine din produsele lactate fermentate au un grad de digestibilitate mai ridicat
deoarece:
dimensiunile proteinelor din materia prim (lapte) sunt micorate;
cantitatea de proteine solubile este mai mare;
coninutul de azot neproteic este mai mare;
coninutul de aminoacizi liberi este mai mare;
coagulul este mai moale i mai fin datorit tratamentului termic aplicat, ct i datorit
aciunii bacteriilor lactice.
Proteinele din produsele lactate acide sunt de dou ori mai digestibile dect cele din
laptele ca atare. Totodat, proteinele lactate acide mresc i secreia salivar de enzime
digestive.
Coninutul de vitamine al produselor lactate acide. Laptele, ca atare, este bogat n
vitamina A, D i n unele vitamine din complexul B, Coninutul n vitamine al laptelui este
nfluenat de ras, climat, aria geografic, hran, perioada de lactaie.
n literatura de specialitate sunt date contradictorii privind scderea sau creterea
coninutului de vitamine din produsele lactate acide. Exist unele culturi starter care urmresc
coninutul produselor lactate acide n: tiamin, acid folic i folinic, riboflavin, ca o
consecin a biosintezei lor de ctre cultura starter (iaurt, lapte btut, chefir, .a.).
O cultur mixt format din Lactococcus lactis ssp. cremoris, Lactococcus lactis ssp.
lactis, Propionibacterium shermanii, mrete coninutul de riboflavin, acid folic i B12 cu
50%, 3000% i respectiv 200%, n comparaie cu coninutul vitaminelor respective din lapte
materie prim.
n plus, bacteriile propionice stimuleaz creterea bacteriilor lactice i accelereaz
coagularea laptelui fr a afecta caracteristicile senzoriale ale produsului finit.
Dac culturile starter de bacterii lactice se folosesc mpreun cu culturi de drojdii,
produsele respective vor conine de asemenea mai mult tiamin, riboflavin, acid folic.
Digestibilitatea lactozei i grsimii. n timpul fermentaiei lactice, coninutul n
lactoz al laptelui este redus cu 1-2% i transformat n acid lactic. n produsele lactate acide se
formeaz mai mult acid lactic L(+) dect D(+), acidul lactic L(+) fiind mai bine digerat n
tractusul intestinal al omului. Lactoza inainte ns de a fi fermentat n acid lactic este
transformat n glucoz + galactoz i, respectiv, glucoz+galactoz 6P.
Culturile starter de bacterii lactice avnd i o slab activitate lipolitic vor lipoliza ntr-
o msur nesemnificativ i lipidele (trigliceridele), ceea ce va favoriza digestia.
28
Biodisponibilitatea calciului i fosforului (msurat prin absorbia intestinal) este
cu 7% i, respectiv, 11% mai mare n cazul produselor lactate acide i aceasta datorit faptului
c att complexele de calciu i fosfor coloidal ct i acidul lactic din produsul lactat mresc
absorbia acestor elemente.

29
CAPITOLUL 2. TEHNOLOGIA DE OBINEREA A
IAURTULUI
Cuvntul iaurt vine din limba turc, cuvntul turc youghurmak avnd semnificaia
a ngroa. Cuvntul iaurt sau yogurt este utilizat n mod curent, att n America de Nord,
ct i n Europa, fiind versiunea modern a laptelui prins de altdat.
Originar din Asia Mic i Peninsula Balcanic, iaurtul se bucur de cea mai mare
apreciere din partea consumatorilor, fiind produsul lactat acid ce se fabric cel mai mult n
ara noastr, precum i n multe alte ri din ntreaga lume, sub diferite denumiri i forme de
prezentare. Dei era cunoscut din timpuri strvechi, valoarea deosebit dietetic a acestui
produs a fost pus n eviden abia la nceputul sec. XX de ctre savantul biolog Metchnikov,
care, n urma cercetrilor efectuate, a atribuit longevitatea unor popoare din zona balcanic,
consumului constant i n cantiti mari a iaurtului.
La nceput, iaurtul se obinea din lapte de oaie, n prezent acesta se fabric cel mai
mult din lapte de vac, n mai multe tipuri ce se deosebesc prin coninutul dse grsime i
substan uscat. n ultimii ani producia realizat pe plan mondial, precum i n ara noastr,
a crescut foarte mult ca urmare a perfecionrii tehnologiei de fabricaie, a mbuntirii
condiiilor de ambalare i a diversificrii formelor de prezentare, precum i a fabricrii unor
noi sortimente (cu diferite ingrediente i arome). Toate acestea fac produsul mai atractiv,
satisfcnd diferitele preferine ale consumatorului.19

2.1. Microbiologia iaurtului


Iaurtul reprezint produsul obinut prin fermentarea laptelui cu o cultur mixt
obinut din dou specii de bacterii termofile: Streptococcus salivarius ssp. thermophillus i
Lactobacillus delbruieckii ssp. bulgaricus.20 Prezenaa drojdiilor i eventual a mucegaiurilor
este nedorit, aceasta constituind microflora de infecie a iaurtului.
Lactobacillus delbruieckii ssp. Bulgaricus se dezvolt la o temperatur de 4050C,
acidifiind puternuc mediul, iar Streptococcus salivarius ssp. Thermophillus se dezvolt la 37
40C, acidifiind uor mediul, producnd ns substane aromatizante care dau produsului
caliti organoleptice particulare. n maiaua de producie cele dou specii de bacterii sunt
prezente n cantiti egale.
Streptococcus salivarius sp. Thermophillus se prezint sub form de lanuri alctuite
din coci, de form uor alungit mai mult sau mai puin regulat. Lactobacillus delbruieckii
ssp. Bulgaricus se prezint sub form de bastoane cu capete rotunite, adesea sub form de
lanuri. Se constat la aceti bacili prezena granulaiunilor de volutin, care la microscop apar
ca puncte colorate intens, repartizate pe toat lungimea bastonaului, Dup prearea unor
autori formarea acestor granulaiuni i persistena lor indic degradarea culturii respective,
impunnd nlocuirea ei.

19
Codoban, J., Codoban, I. Procesarea laptelui n secii de capacitate mic, Editura Cetatea Doameni,
Piatra Neam 2008, p. 78
20
Rotar, R. Microbiologia produselor alimentare, Editura Universitii Suceava, Suceava 2004, p. 127
30
ntre Lactobacillus delbruieckii ssp. Bulgaricus i Streptococcus salivarius ssp.
Thermophillus exist un raport de simbioz n prima faz a dezvoltrii lor i de antibioz cnd
fermentarea este prelungit peste durata normal, aciunea de inhibare fiind exercitat de
lactobacili asupra cocilor prin excesul de acid lactic cel formeaz.
Simbioza const n faptul c Streptococcus salivarius ssp. Thermophillus, avn vitez
de nmulire mai mare dect lactobacilii, este primul care ncepe s se dezvolte, consum
aminoacizii liberi din lapte i pregtete condiiile de dezvoltare pentru lactobacili prin
eliminarea oxigenului prin iniierea proteolizei, cu producere de compui azotai mai uor
asimilabili pentru lactobacili.
La rndul lor, lactobacilii hidrolizeaz proteinele laptelui mai profund, favoriznd
stimularea creterii streptococilor.
Streptococii produc arom oarecum asemntoare cu cea a untului care n combinaie
cu cea produs de lactobacili formeaz aroma specific iaurtului.

acid lactic

acid formic peptide mici i


aminoacizi
< 4 mg O2 / kg formarea acidului lactic
formarea factorilor de
cretere
CO2 stimulare
inhibare
Streptococcus Lactobacillus
Thermophilus delbruekii
ssp. Bulgaricus

lapte
Fig. 2.1 Schem proceselor de stimulare i inhibare a multiplicrii bacteriilor din iaurt
Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate Fermentate , Editura
Academica, Galai, 2005, p. 116

Deosebit de important este meninerea raportului cantitativ ntre cele dou specii
microbiene. Acest raport este de 1:1. Aceast proporie rmne stabil pn la nsmnri
repetate, dac incubarea este ntrerupt la o aciditate de 90T, adic pn la formarea unui
coagul compact.
n momentul coagulrii raportul ntre Lactobacillus delbruieckii ssp. Bulgaricus i
Streptococcus salivarius ssp. Thermophillus este de 1:15, ca dup depozitare la frig, s ajung
la 1:1.
Raportul dintre lactobacili i streptococi depinde de temperatura de incubare i de
cantitatea de maia introdus.
Cunoaterea acestor aspecte permite meninerea raportului optim ntre bacili i
streptococi prin ntreruperea fermentrii n anumite faze sau prelungirea ei, modificarea
temperaturilor de incubare sau a cantitilor de maia folosit la nsmnari.
31
O cultur bun pentru iaurt se prezint sub forma unui coagul compact cu gust
proaspt, acrior i aromat. La examenul microscopic trebuie s apar numai streptococi i
lactobacili.
Rolul streptococilor i lactobacililor la obinerea iaurtului const n acidifierea laptelui,
sinteza de compui de arom, dezvoltarea texturii i a vscozitii. Componentele cu influene
majore sunt urmtoarele:
Acidul lactic ambele bacterii formeaz acid lactic din lactoz. Galactoza rezult
prin descompunerea lactozei rmne netrasformat, astfel nct concentraia
molar a galactozei crete pe msur ce coninutul de lactoz se reduce. n mod
normal coninutul de acid lactic este de 0,7 0,8% (80 100 mM);
Aldehida acetic acest substan este esenial pentru aroma caracteristic a
iaurtului. Coninutul de aldehid acetic din iaurt este de 10 mg/kg (0,2 mM);
Diactilul S. Thermophilus i ntr-o msur mai redus, L. Debrueckii ssp.
bulgaricus formeaz diacetil pe aceeai cale ca i leuconostocii sau Lactococcus
lactis ssp. lactis biovar. diacetilactis. Coninutul de diacetil din iaurt este cuprins
ntre 0,8 i 1,5 mg/kg (0,01 0,02 mM);
Polizaharide au rol important pentru consistena iaurtului, n special pentru tipul
de iaurt fluid.

2.2. Tehnologia de fabricaie a iaurtului


Tehnologia clasic de obinere a iaurtului presupune parcurgerea urmtoarelor etape:
Recepia calitativ i cantitativ a laptelui
Normalizare
Omogenizare
Pasteurizare
Rcire la temperatura de nsmnare
nsmnare
Ambalare
Termostatare
Prercire
Rcire
Depozitare

32
LAPTE Cultura starter de
producie obinut
Recepia calitativ conform schemei
i cantitativ a laptelui din fig. 1.1

Curire var. I sau var. II -1%


CCP-1

Normalizare nsmnare n
lapte pasteurizat la
Prenclzire la 5065C 9095C/30 min i
rcit la 45C
Omogenizare

LAPTE PENTRU LAPTE PENTRU


IAURT TIP GRAS IAURT EXTRA Termostatare la
I SLAB 4345C/22,5 ore
CCP-2 CCP-2

Pasteurizare Pasteurizare Pasteurizare


la aparat cu plci n van la n aparat cu plci
la 8590C 9095C/2030 min la 8590C
Rcire la 10C
Meninere n Concentrare
van la 8590C; pn la 15% s.u.
2030 min
Depozitare la
12C/24 ore
Rcire la 4548C
0,52%

nsmnare cu CCP-3
0,52% Cultur starter
cultur starter de de producie de
producie tip cuaternar
CCP-4

Vitamie

Distribuire n ambalaje
de desfacere
CCP-5

Termostatare la 4345C/2,53 ore

Prercire la 1820C
CCP-6
Rcire la 28C
CCP-7

Depozitare la 28C

Livrare

Fig. 2.2 Schem tehnologic de fabricare a iaurtului


Sursa: Prelucrare dup Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui , Editura Tehnic,
Bucureti, 1998, p. 214

33
a) Recepia calitativ i cantitativ a laptelui
Iaurtul se fabric din lapte de vac, oaie sau bivoli. Laptele materie prim trebuie s
fie propriu consumului uman, stabil la nclzire (aciditate de maximum 19T) i s nu conin
reziduuri de antibiotice.

b) Normalizarea (standardizarea)
Laptele utilizat n prcesul tehnologic poate fi lapte crud integral, lapte parial sau total
degresat sau lapte mbogit cu unii constitueni. Normalizarea laptelui se face n funcie de
tipul dorit de iaurt:
Iaurt slab, din lapte smntnit cu maxim 0,1% grsime;
Lapte gras, din lapte cu 2,8% grsime;
Iaurt foarte gras, special, din lapte cu 6,0% grsime.
n afar de aceste sortimente, n standardul produsului se mai prevede un sortiment de
iaurt extra, foarte gras, din lapte cu 4% grsime i 15% substan uscat, ce se obine prin
concentrarea parial a laptelui, operaiune ce poate fi fcut doar n fabrici sau secii dotate
cu instalaii de concentrare cu vacuum, special prevzute n acest scop.

c) Omogenizarea
Omogenizarea se face n scopul de a mpiedica separarea grsimii i de a conferi
produsului caliti organoleptice superioare. Prin fragmentarea globulelor de grsime i a
miceliilor de cazein sunt asigurate premizele formrii unor particule fine de coaguli, abia
sesizabile la examenul organoleptic. Repartizarea grsimii se realizeaz uniform, cazeina este
mai uor digestibil, iar eliminarea zerului este redus.
Omogenizarea se realizeaz prin trecerea laptelui nclzit uor (cca. 2060C), printr-
un aparat special, la o presiune de cca. 150 atm.

d) Pasteurizarea.
Pasteurizarea laptelui materie prim reprezint o etap extrem de important, care
influeneaz att salubritatea, ct i proprietile organoleptice ale produsului finit. n sistemul
clasic, psteurizarea se realizeaz prin nclzirea laptelui la 8090C, timp de 2030 minute sau
la 9095C, timp de 5 minute. Pasteurizarea laptelui se face n vane cu pereii dubli sau n
instalaii de pasteurizare.
Normele de temperatur i timp sunt mult superioare pasteurizrii obinuite. Acest
lucru este absolut necesar din mai multe considerente, att de ordin microbiologic, ct i de
ordin tehnologic.
Din punct de vedere microbilogic, nclzirea laptelui la asemenea temparaturi asigur
distrugerea tuturor bacteriilor lactice i a bacteriilor de poluare (cel puin formele vegetative).
Acest lucru este absolut necesar deoarece supravieuirea n lapte a levurilor, a miceilor i a
unor bacterii aerobe are efecte negative asupra conservabilitii acestuia. n plus, prin

34
aplicarea unor temperaturi ridicate are loc distrugerea substanelor naturale inhibatoare din
lapte i reducerea potenialului redox al laptelui, prin eliberarea unor aminoacizi i scderea
cantitii de oxigen dizolvat.
Toate aceste elemente concur la crearea unui mediu aproape ideal pentru
multiplicarea i aciunea microorganismelor din cultura starter.
Din punct de vedere tehnologic, aplicarea unor temperaturi nalte conduce la
denaturarea parial/total a proteinelor solubile. n consecin, crete capacitatea de hidratare
a proteinelor laptelui, fapt care conduce la formarea unui coagul cu o consisten relativ
ferm, dar cremoas, apreciat de ctre consumatori.
Cnd pasturizarea se realizeaz n vane, laptele este agitat continuu n scopul
uniformizrii temperaturii i prevenirii fenomenului Maillard.
Ca etap intermediar, dup pasteurizare, poate interveni concentrarea laptelui, care
are ca scop atingerea unui coninut optim de substan uscat i de grsime, i indirect,
obinerea unui coagul cu proprieti organoleptice superioare. Concentrarea parial asigur
reducerea volumului iniial al laptelui cu cca. 1020%, astfel nct coninutul de substan
uscat ajunge la cca. 15%, iar densitatea atinge 1,0341,036 (se indic n special la obinerea
iaurtului din lapte degresat, a iaurtului extra i a iaurtului crem).

e) Rcirea laptelui la temperatura de nsmnare


Dup expirarea timpului de meninere la temperaturi ridicate (8090C sau 9095C),
n vanele de fermentare sau n rezervorul instalaiei de pasteurizare, laptele este rcit la
temperatura de 4548C pentru nsmnare cu culturi lactice. Operaiunea se realizeaz prin
introducerea de ap rece de la reea ntre pereii dubli sau canalele spirale ale vanei, sub
agitare continu a laptelui. Temperatura la care se face rcirea laptelui, depete cu puin
temperatura optim de dezvoltare a microflorei specifice iaurtului care este de 4345C,
depire ce se face cu scopul de a acoperi pierderile de cldur ce se produc n mod inevitabil
n timpul peamabalrii i a ,manipulrii ambalajelor cu lapte nsmnat, pn la introducerea
n termostat.

f) nsmnarea laptelui
Pentru fermentarea laptelui i obinerea produsului cu proprieti specifice, laptele se
nsmneaz cu o cultur liofilizat de bacterii lactice prin inoculare direct ce are n
componen bacteriile lactice termofile: Streptococcus termophilus i Lactobacillus
delbrueckii ssp. bulgaricus. De asemenea nsmnarea laptelui mai poate fi fcut cu maia de
bacterii lactice selecionate.
n timpul adugrii culturilor starter i dup aceea, laptele va fi agitat, pentru a asigura
o repartizare ct mai uniform a acestora. Un aspect important ce trebuie avut n vedere la
nsmnarea laptelui este corelarea cantitilor de lapte din van cu capacitatea termostatului,
n sensul c, ntreaga cantitate de lapte nsmnat i ambalat, rezultat dintr-o van, s intre n
totalitate n camera de termostat xistent. De asemenea, la stabilirea cantitilor de lapte ce se
nsmneaz se va ine seam de capacitatea mainii de ambalare, astfel ca operaiunea s nu

35
dureze prea mult (cel mult o or), ntruct, o durat prea mare ar putea s duneze procesului
de coagulare a laptelui.

g) Ambalarea laptelui nsmat


Lapte nsmnat destinat fabricrii iaurtului, poate fi ambalat n:
Pahare din material plastic, cu capacitate de 125500 g, nchise prin termosudar cu
capace din folie de aluminiu;
Flacoane din material plastic (PET), nchise cu capac nfiletat, avnd capacitatea de
2501000 g;
Gletue din material plastic, nchise cu capc aplicat, sigilat i prevzute cu mner
flexibil, avnd capacitatea de 1000 g.
Condiiile care trebuie s le ndeplineasc ambalajele folosite sunt, n general aceleai
ca la ambalarea laptelui de consum. De asemenea, se vor respecta prevederile din normele
igienico-sanitare pentru alimente i Norma sanitar veterinar referitoare la materialele
folosite la confecionarea ambalajelor, precum i condiiile n care se face ambalarea
produsului n secia de fabricaie.
Operaiunea de ambalare propriu-zis se face n mod diferit, n funcie de felul
ambalajelor i a utilajelor folosite.

h) Termostatarea pentru fermentare


Recipientele n care a fost ambalat laptele sunt introdus n camere speciale de
termostatare. Termostatarea asigur condiii optime pentru multiplicarea i aciunea celor
dou specii bacteriene.
Cultura starter termofil realizeaz sub raport tehnologic dou aciuni principale:
prima const n transformarea lactozei n acid lactic, iar cea de a doua const n modificarea
proprietilor iniiale ale laptelui i apariia altora noi, caracteristice produsului format. Cele
dou specii care compun cultura starter acioneaz sinergetic, stimulndu-se una pe cealalt.
Multiplicarea lui Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus este nsoit de eliberarea i
acumularea unor produsi rezultai din metabolizarea unor aminoacizi, produi necesari
creterii i multiplicrii celei de a doua specii. n acelai timp. Streptococcus salivarius ssp.
thermophilus acioneaz favorabil lactobacililor prin scderea concentraiei de oxigen i
generarea unor cantiti de acid formic.
Aciunea acidifiant a lactobacililor este mult mai intens dect cea a streptococilor:
practic, lactobacilii pot produce acid lactic pn la 4%, comparativ cu 0,61,1% n cazul
streptococilor.
Acumularea progresiv a acidului lactic contribuie la scderea pH-ului i solubilizarea
calciului coloidal. Atingerea punctului izoelectric al cazeinei (pH 4.6) antreneaz coagularea
cazeinei. Acidul lactic acumulat inhib dezvoltarea microorganismelor indezirabile,
generatoare de gaze sau putrefiante. Acidifierea este intens i determinant n cazul iaurtului,
ca produs lactat acid. Activitatea fermentativ a celor dou specii bacteriene se soldeaz cu

36
acumularea de acid lactic i aldehid acetic, substane care imprim aroma specific
iaurtului.
Termostatarea se realizeaz prin meninerea recipienilor la 4345C, timp de 2,53
ore. Activitatea bacterian se soldeaz cu acidifierea amestecului, formarea coagulului
caracteristic i apariia aromei specifice.
Fermenatarea se ntrerupe cnd coagulul este bine format, iar aciditatea are valori de
8090T (pH 4,64,7).

i) Rcirea produsului
Dup terminarea termostatrii, se procedeaz la rcirea produsului, operaiune ce se
face n dou faz:
Prercirea pn la temperatura de 1820 este indicat s se realizeze chiar n
camera de termostatare, prin ntreruperea agentului de nclzire i ventilarea
aerului. Aceast operaiune are rolul de a ntri coagolul, prevenindu-se astfel
unele defecte privind consistena produsului ce s-ar putea datora manipulrii cu
ocazia introducerii n camera frifgorific.
Rcirea la temperatura de 28C ce se realizeaz de regul n camere frigirifice. Ca
urmare, iaurtul sufer un proces de maturare fizic, coagolul devenind mai
compact, aroma se accentueaz, iar gustul este plcut.
La seciile de capacitate mic, ce realizeaz zilnic, ntr-un singur ciclu o producie de
iaurt mai redus, este deosebit de util folosirea unor camere de termostatare care sunt
prevzute, pe lng instalaia de nclzire i cu posibiliti de rcire la temperaturile necesare.
n acest caz, n aceeai ncpere se realizeaz termostatarea, prercirea i rcirea profund a
produsului.

j) Depozitarea produsului
Iaurtul se depoziteaz la temperatura de 28C n camere frigorifice curate,
dezinfectate i lipsite de mirosuri strine. De asemenea, la depozitarea iaurtului se vor
respecta condiiile prevzute de Normele de igien i Norma sanitar veterinar.
Caracteristicile calitative optime ale iaurtului se obin dup 1012 ore de meninere la
temperatura de depozitare, motiv pentru care, nu este indicat livrarea naintea expirrii
acestei perioade de pstrare.21

2.3. Caracteristicile produsului finit


Produsul finit trebuie s corespund urmtoarelor caracteristici:
senzoriale:
aspect i consisten: coagul compact, omogen, fr bule de gaze i fr zer
eliminat cu aspect de porelan la rupere (se admite maximum 2% zer eliminat la
iaurtul foarte gras i maximum 5% la cel gras i slab);

21
Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura Tehnic, Bucureti 1998, p. 78 87
37
culoare: alb, cu nuan glbuie, mai ales cnd iaurtul este fabricat din lapte de
vac;
gust i miros: plcut, acrior, aromat.
chimice:
Tabelul 2.1 Proprietile fizico-chimice ale iaurtului
Tipul de iaurt
Parametrii Extra Gras Slab
Grsime, % minimum 4 2,8 -
Substan uscat, % minimum 11,3 11,3 8,5
Aciditate, T 75 145 75 140 75 140
Substane proteice, % minimum 3,2 3,2 3,2
Temperatura de livrare, C, maximum 8 8 8
Zer, % maximum 3 5 5
Sursa: Prelucrare dup Codoban, J., Codoban, I.. Procesarea laptelui n secii de capacitate mic, Editura
Cetatea Doamnei, Piatra-Neam 2008, p. 88
microbiologice:
bacterii patogene lips;
bacterii coliforme 5 pentru iaurtul n ambalaje de desfacere i 50 pentru iaurtul n
bidoane.

2.4. Elaborarea planului HACCP pentru iaurt


Programul HACCP dintr-o ntreprindere constituie o parte fundamental de operare a
unitii, presupunnd importante investiii de timp i resurse materiale.
Implementarea sistemului HACCP presupune o activitate complex, susinut i
secrealizeaz parcurgnd mai multe etape:
Decizia managerului de a utiliza sistemul HACCP;
Elaborarea politicii, a obiectivelor HACCP;
Constituirea i instruirea echipei HACCP;
Elaborarea planului HACCP pentru un singur produs;
Implementarea experimental a planului HACCP pentru un singur produs;
Evaluarea rezultatelor aplicaiei experimentale i corectarea eventualelor deficiene;
Aplicarea planului verificat i modificat;
Implementarea de planuri HACCP pentru toate produsele;
Verificarea, revizuirea i actualizarea sistemului HACCP pentru fiecare produs n
parte.
Conducerea la vrf elaboreaz politica HACCP. mpreun cu managerii celorlalte
departamente, conducerea stabilete obiectivele programului HACCP. Att politica ct i
obiectivele trebuie formulate clar, n termeni ct mai simpli. Pentru succesul implementrii,
aciunile vor fi planificate i organizate din timp, cu stabilirea clar a responsabilitilor i
termenelor.
Implementarea sistemului HACCP ncepe cu elaborarea planului HACCP un
document redactat n conformitate cu principiile HACCP pentru a asigura controlul riscurilor.

38
Trebuie subliniat c sistemul HACCP are un grad nalt de specificitate. Un plan
HACCP se realizeaz pentru un anumit produs, fabricat ntr-o anumit ntreprindere, cu o
anumit dotare i un anumit personal.
Planul HACCP st la baza elaborrii procedurilor, instruirii personalului n vederea
aplicrii sistemului n producie i este folosit drept referin pentru conducerea auditului
sistemului HACCP. Planul elaborat de echipa HACCP trebuie s fie simplu i s conin
instruciuni uor de aplicat de ctre personalul organizaiei.
Pentru elaborarea planului HACCP trebuie parcurse urmtoarele etape (Codex
Alimentariu, 1997):
definirea termenilor de referin;
descrierea produsului i a distribuiei acestuia;
identificarea utilizrii intenionate consumatorii;
construirea diagramei de flux a procesului;
verificarea pe teren a diagramei de flux;
conducerea analizei riscurilor;
identificarea punctelor critice de control (CCP);
stabilirea limitelor critice pentru fiecare CCP;
stabilirea unui sistem de monitorizare pentru fiecare CCP;
elaborarea planului de aciuni corective;
stabilirea sistemului de pstrare a documentaiei;
stabilirea planului i modului de verificare a sistemului HACCP;
validarea planului HACCP.
Punct critic (CP) este orice punct/etap a procesului n care pot fi controlate riscurile
biologice, chimice sau fizice.
Punct critic de control (CCP) este acel punct / etap n care, dac se instituie controlul
asupra riscului, acesta este prevenit, eliminat sau redus pn la un nivel acceptabil.
Comisia Internaional de Specificaii Microbiologice pentru Alimente a mprit
punctele critice de control n dou categorii:
PCC1 punctele critice de control de gradul I n care riscul potenial este complet
controlat;
PCC2 puncte critice de control de gradul al-II-lea n care riscul este controlat parial

39
Tabelul nr. 2.1 Plan de analiz a riscurilor, msuri preventive de control i determinarea punctelor critice de control
Aceste
riscuri
poteniale
Ingrediente Ce msuri trebuie s fie aplicate
trebuie De ce? (Justificarea deciziei n coloana Este aceast
sau etap a Riscuri poteniale introduse n proces pentru controlul riscului potenial
introduse n precedent) etap CCP?
procesului (prevenire, eliminare sau reducere)
planul
HACCP
(Da/Nu)?
Prezena acestor microorganisme
Microbiologice patogene n lapte crud a fost evideniat n
Mycobacterium turbeculosis, Salmonella, literatura tiinific i de ctre inspeciile
Da Pasteurizare ntr-o singur etap Nu
E. Coli patogen, Staphylococcus aureus, sanitare. Aceste microorganisme patogene
Brucella, Campylobacter .a. se pot dezvolta datorit temperaturii
necorespunztoare de dpozitare
Recepie Chimice Program eficient de selecie a furnizorilor
lapte integral Antibiotice, pesticide, metale toxice, bazat pe determinarea reziduului de
crud nitrai, substane de falsificare a laptelui, Da pesticide, metale grele. Programul Screening-ul reziduurilor de antibiotice CCP1(C)
substane de igenizare, micotoxine, preliminar referitor la achiziia laptelui nu
hormoni de cretere. d garania absenei inhibatoare.
Nu este normal ca laptele la recepie s
Fizice conin impuriti fizice. n caz c ele
Nu
Pr, paie, etc. exist se elimin la filtrare nainte de
intrarea n galactometru
Microbiologice Nu
Cultur DVS Chimice Nu
Fizice Nu
Microbiologice Nu
Ingredient aprivizionat de la furnizori de
ncredere, aprobai de ntreprindere.
Chimice
Vitamine Nu Ingredientul este conform specificaiei.
Ingredient nealimentar
Improbabil recepia unui ingredient
nealimentar.
Fizice Nu
Microbiologice Nu
Nivelul igienizanilor controlat prin
Standardizare Chimice
Nu programe de igienizare eficient (SSOP).
Igienizani
Improbabil s afecteze consumatorii.
Aceste
riscuri
poteniale
Ingrediente Ce msuri trebuie s fie aplicate
trebuie De ce? (Justificarea deciziei n coloana Este aceast
sau etap a Riscuri poteniale introduse n proces pentru controlul riscului potenial
introduse n precedent) etap CCP?
procesului (prevenire, eliminare sau reducere)
planul
HACCP
(Da/Nu)?
Fizice Nu
Microbiologice Exist posibilitatea redus de contaminare
Enteropatogeni, Staphylococcus aureus, Nu datorit eficienei programului de Pasteurizare n etapa ulterioar Nu
etc. igienizare.
Omogenizare Exist posibilitatea redus de contaminare
Chimice
Nu datorit eficienei programului de
Igienizani
igienizare.
Fizice Nu
Este singura etap unde se aplic
Microbiologice Pasteurizare pentru distrugerea
Da tratament termic cu suficient control CCP1(M)
Patogeni (supravieuire forme vegetative) patogenilor
pentru distrugerea patogenilor.
Pasteurizare Urmele de igienizani sunt controlate prin
Chimice
Nu SSOP eficiente. Improbabil s dubeze
Igienizani
consumatorilor.
Fizice Nu
Posibilitate de recontaminare de la laptele
Microbiologice ntreinerea i exploatarea
Da crud n zona de recuperare a CCP1(M)
Patogeni din laptele crud corespunztoare a pasteurizatorului
Rcire pasteurizatorului cu plci.
Chimice Nu
Fizice Nu
Posibilitate de contaminare din
mediu,utilaje i posibilitatea dezvoltrii E.
Microbiologice
Coli 0157:H7, Staphylococcus aureus cu Cultur activ
Staphylococcus aureus, E. Coli Da CCP2(M)
producerea endotoxinei, dac acidifierea Controlul temperaturii
Inoculare enteropatogeni, Listeria monocytogenes
laptelui nu este corespunztoare (date din
Fermentare
literatura tiinific).
Urmele de igienizani sunt controlate prin
Chinice
Nu SSOP eficiente. Improbabil s duneze
Igienizani
consumatorilor.

41
Aceste
riscuri
poteniale
Ingrediente Ce msuri trebuie s fie aplicate
trebuie De ce? (Justificarea deciziei n coloana Este aceast
sau etap a Riscuri poteniale introduse n proces pentru controlul riscului potenial
introduse n precedent) etap CCP?
procesului (prevenire, eliminare sau reducere)
planul
HACCP
(Da/Nu)?
Fizice Nu
Microbiologice Improbabil dezvoltarea acestora n iaurt
Nu
Patogeni (din recontaminare) (pH sczut, durat scurt)
Rcire
Chimice Nu
Fizice Nu
Microbiologice Exist posibilitatea de contaminare, dar
SSOP eficiente
Salmonella, E. coli, Staphylococcus dezvoltarea dar dezvoltarea patogenilor
Da Ambalaje de calitate, depozitate CCP2(M)
aureus .a. (de la instalae, ambalaje, aer, este limitat de durata scurt a opraiei i
corespunztor
personal) de pH-ul sczut.
Ambalare Exist posibilitatea de contaminare, dar
Chimice dezvoltarea dar dezvoltarea patogenilor
Nu
Igienizani de pe instalaii este limitat de durata scurt a opraiei i
de pH-ul sczut.
Fizice Nu
Datele microbiologice nu probeaz
dezvoltarea majoritii patogenilor n
Program eficient de control a
Microbiologice condiii de pH sczut i la temperaturi de
Da temperaturii de depozitare CCP2(M)
Patogeni (dezvoltare) refrigerare controlate; exist totui
Depozitare Controlul duratei de depozitare
posibilitatea dezvoltrii unor mucegaiuri
toxicogene
Chimice Nu
Fizice Nu

42
Tabelul nr. 2.2 Plan HACCP, iaurt clasic
Punctul Monitorizare
Limite Aciune
critic de Riscul Verificare Document
critice Ce Cum Frecvena Cine corectiv
control
Recepia Chimic 0 Prezena Screening-ul Fiecare laborant Dirijarea laptelui Compartimentul Fie de
laptelui Antibiotice i inhibatorilor, reziduurilor de transport recepie ctre alt AC verific fiele nregistrare a
CCP2(C) ali inhibatori nitrai antibiotice destinaie (de ex. de nregistrare rezulttelor
(kituri lapte de consum) zilnic testelor
Delvotest, n cazul
Penzyme) cantitilor reduse
de inhibatori
Pasteurizare Microbiologic Temperatura Temperatura nregistrator de n timpul operator Recircularea Responsabilul AC Diagrama
CCP1(M) Patogeni produsului produsului la temperatur la pasteurizrii pasteurizate automat i verific zilnic termic. Fi
(supravieuire 74C, durata eirea din zona ieirea din repasteurizare. diagrama termic. de nregistrri
forme 20s de meninere, zona de Dac valva de Lunar se verific ale
vegetative valva meninere, deviere se valva de deviere calibrrilor.
valv automat defecteaz, i calibrarea Fie de aciuni
de dirijare a produsul se reine termometrului. corective.
laptelui i se Lingimea i
repasteurizez. diametrul tubului
Dac indicaiile de meninere se
termometrului nu testeaz anual
corespund cu ale pentru a valida
nregistratorului se durata de
ajusteaz meninere.
disfuncionalitatea; Operatorul de
produsul afectat se pasteurizare
depoziteaz pentru compar
evaluare. indicaiile
termometrului cu
ale
nregistratorului
de dou ori pe z

43
Sigiliul pompei Observarea nainte de operator Recalibrarea i Compartimentul Fie de aciuni
de alimentare a vizual a nceperea pasteurizare resigilarea pompei AC verific corective
postului sigiliului operaiei n cazuk ruperii aciunile
sigiliului ntreprinse
Rcire Microbiologic 0 Funcionarea i Observarea La demontare operator Oprirea instalaiei Responsabilul AC nregistrri
CCP1(M) Patogeni din ntreinera vizual a strii i n pasteurizare i remediere. verific aciunile privind
laptele crud corect a armturilor, funcionare Pstrarea ntreprinse i aciunile
pasteurizatorului plcilor, a produsului afectat nregistrrile corective
(plci, garnituri) scurgerilor de pentru evaluare ntreprinse
lapte din (pentru
pasteurizator instalaie,
produs
afectat).
Ambalare Microbiologic Igiena Observaie La nceputul maistru Igienizare Teste de Fie de
CCP2(M) Patogeni vizual SSOP i n timpul operator corespunztoare a sanitaie zilnice nregistrare a
(contaminare) n secie i lucrului ambalare seciei (instalaie, aer, rezultatelor
instalaie perei, secie) monitorizrilor
zilnice i verificrilor
Verificarea
temperaturii i
concentraiilor
soluiilor de
splare
dezinfecie
Fermentare Microbiologic Igiena n spaiile Observaie La nceputul maistru Igienizare Teste de sanitaie Fie de
CCP2(M) Patogeni de producie vizual SSOP i n timpul operator corespunztoare a zilnice nregistrare a
(contaminare, n secie lucrului fermentare seciei monitorizrii
dezvoltare) Temperatur Temperatura Msurare Fiecare van operator Introducere agent Verificarea temperaturii,
4345C temperatur i fermentare de nclzire/rcire zilnic a duratei,
Durata 3 ore Durata durata de pentru corectarea nregistrrilor aciditii/ pH-
Aciditate operaiei fermentare temperaturii ului, testelor
95-100T Iciditate final Determinarea laborant de sanitaie i
pH <4.6, pH final aciditii sau aciunilor
4.4 pH corective

44
Depozitare Microbiologic Temperatur Temperatura Msurare Fiecare lot Operator Readucerea Responsabilul AC Diagrama
CCP2(M) Patogeni produs n depozit temperatur i depozit parametrilor n verific termic a
(dezvoltare) depozitat durat depozit la valorile nregistrrile depozitelor
4C specificate zilnice, sau fie de
Durata 12 Durata diagramele nregistrare a
ore depozitrii termice temperaturii i
duratei
depozitrii

45
2.5. Valoarea nutritiv i terapeutic a iaurtului
Iaurtul are o valoare nutritiv egal cu a laptelui folosit la prepararea lui, cu unele
eventuale modificri produse de microorganismele ntrebuinate i de procesul de prelucrare.
Sub aspectul coninutului n vitamine, iaurtul conine tiamin i riboflavin n cantiti
sensibil egale cu ale laptelui.
n timpul depozitrii iaurtului, pierderile de vitamine sunt neglijabile. Pierdirile de
vitamina C n timpul pstrrii sunt relativ reduse, circa 10% n primele 24 de ore de la
fabricare i maximum 33% n urmtoarele zile. Rezultate bune s-au obinut n ncercrile de
vitaminizare a iaurtului pe cale natural prin folosirea de culturi de bacterii lactice
productoare de vitamine.
n ceea ce privete digestibilitatea iaurtului, s-a constatat pe baza experienelor
practice c este superioar laptelui obinuit, ca urmare a modificrilor substanelor proteice.
Valoarea dietetic a iaurtului rezult din modificarea pH-ului n tubul digesticv sub o
limit la care dezvoltarea bacteriilor de putrefacie este oprit. Astfel, se mpiedic procesele
de putrefacie din tubul digestic, se reduce cantitatea de toxine rezultate din aceste procese i
se evit sensibilitatea precoce provocat de prezena n organism a produselor de putrefacie.
S-a urmrit aciunea antimicrobian a tulpinilor de streptococi i lactobacili fa de
diferite bacterii patogene: Staphylococcus albus, Staphylococcus aureus, Pyocyneus,
Enterococcus, Diphterae, Salmonella paratyphi A i B. S-a stabilit c att iaurtul proasp ct
i cel vechi exercit aciune antimicrobian asupra germinilor patogeni cercetai.
n ultimul timp, n urma tratamentelor cu antibiotice i sulfamide care distrug nu
numai bacteriile duntoare ci i flora intestinal folositoare, s-a recurs la refacerea acesteia
prin consum de iaurt.
S-a constatat ns c o cur exagerat ca durat cu iaurt poate duce la modificri
nedorite ale microflorei intestinale, determinnd unele deranjamente n procesele fiziologice
din organisme. n tubul digestiv exist o microflor util pentru organism care inhib
dezvoltarea germinilor patogeni ce ptrund n organism prin tractul gastrointestinal, realizeaz
sinteza unor vitamine (biotin, acid paraaminibenzoic, acid folic, riboflavin, acid pantotenic,
vitamina K) i secret o serie de enzime care ndeprteaz toxinele produse de alte
microorganisme.
CAPITOLUL 3. ANTIOXIDANI NATURALI FOLOSII
N OBINEREA PRODUSELOR LACTATE ACIDE

3.1. Consideraii generale


Antioxidanii sunt substane care prelungesc durata de pstrare (durata de via) a
produselor alimentare, prin protejarea lor fa de deteriorarea cauzat de oxidare (rncezire i
modificarea de culoare)22.
Antioxidanii se pot clasifica dup funcia lor principal i dup natura lor:
Dup fucia lor principal antioxidanii pot fi:
antioxidani propriu-zii;
substane care au aciune antioxidant, dar care prezint n egal msur alte funcii.
Dup natura lor antioxidanii pot fi:
antioxidani naturali, care cuprind, n principal, tocoferolii;
antioxidani de sintez.
Antioxidanii sunt capabili s blocheze autooxidarea, putnd interveni la diferite
niveluri. n primul rnd, antioxidanii preventivi sunt capabili de a absorbi oxigenul prezent,
aa cum face ascorbilpalmitatul. Ali antioxidani ntrerup lanul de reacii ale oxidrii. n
aceast categorie intr fenolii substituii, care sunt capabili s reacioneze cu un radical liber
peroxidic prin cedare de hidrogen de la o grupare OH. 23
Autooxidarea lipidelor nesaturate se desfoar dup un mecanism radical, etapa de
iniiere constnd n captarea de energie luminoas sau termic cu formarea unui radical liber,
prin scoaterea unui atom de H+ de la gruparea -metilenic a acidului gras nesaturat.
Radicalul liber rezultat devine sensibil la atacul oxigenului atmosferic i va conduce la
formarea unui radical peroxil (ROO). Acesta, la rndul su, joac rol de iniiator i
propagator de oxidri ulterioare, astfel nct degradarea oxidativ a lipidelor nesaturate apare
ca o reacie n lan, autocatalitic i ireversibil. Etapa final a propagrii o reprezint
formarea de hidroperoxizi (ROOH) care sunt molecule foarte instabile, mai ales la temperaturi
ridicate i n prezena urmelor de metale, descompunndu-se n:
radicali hidroxil (OH);
radicali alcoxil (RO);
radicali peroxil (ROO).
Aceti radicali vor fi la originea altor reacii de oxidare, dar i la reacii de scindare,
restructurare, ciclizare, polimerizare. De asemenea, hidroxiperoxizii formai vor da natere,
prin scindare, la compui volatili (hidrocarburi, aldehide, cetone, alcooli, acizi etc.), unele din
acestea conferind produsului miros i gust rnced. De asemenea, din hidroxiperoxizi se pot
forma monomeri ciclici i polimeri.24

22
Banu, C., Buu, N., Lungu, C., Alexe, P., Rsmeri, D., Vizireanu, C. Aditivi i ingrediente pentru
industria alimentar, Editura Tehnic, Bucureti, 2000, p. 109
23
Banu, C., Buu, N., Lungu, C., Alexe, P., Rsmeri, D., Vizireanu, C. Aditivi i ingrediente pentru
industria alimentar, Editura Tehnic, Bucureti, 2000, p. 110-111
24
Idioiu, C. Aditivi aimentari note de curs
47
Schematic autooxidarea lipidelor are loc n 3 etape:
a) Etapa de iniiere n care acidul gras nesaturat (RH) se transform ntr-un radical liber sub
aciunea energiei luminoase sau termice:

RH + h R + H+

b) Etapa de propagare

R + O2 ROO

ROO + RH ROOH + R

Etapa de terminare

R + R RR
ROO + R ROOR

Aciunea antioxidanilor poate fi prelungit n prezena agenilor reductori.


Antioxidanii sunt, deci, regenerai pn n momentul n care agentul reductor este epuizat.
Substanele sinergetice care, n general, sunt acizi organici sau srurile lor, sunt
capabile s cheleze ionii metalici cum ar fi cei de cupru i fier, cu formare de complexe
inactive. n acest fel se prelungete etapa de iniiere a autooxidrii.

3.2. Tocoferolii (Vitamina E)


3.2.1. Structur chimic i propriti
Tocoferolii sau vitaminele E se mai numesc vitaminele antisterilitii sau ale
fecunditii. Tocoferolii au ca structur de baz tocolul, un derivat al cromanului cu un metil
i un radical saturat cu 16 atomi de carbon substituii n poziia 2 i un hidroxil n poziia 6.
Din tocol deriv prin metilri 6 tocoferoli naturali, dintre care doar trei sunt mai activi:
, i -tocoferolii.
Toi tocoferolii sunt substane uleioase, vscoase, care cu acidul azotic se coloreaz n
rou, iar cu clorura feric n rou glbui.25
Cei folosii ca antioxidani se prezint sub dou forme i anume:
sub form de lichide relativ vscoase, limpezi, aproape incolore. Tocoferolii de sintez ,
i sunt sub forma DL, insolubili n ap, dar miscibili n alcool etilic. Prin expunerea la
aer i lumin se oxideaz i i intensific culoarea;

25
Segal, R. Biochimia produselor alimentare, Editura cademica, Galai 2006, p. 165-166
48
sub form de concentrat, care se prezint ca un lichid vscos de culoare brun-rocat ce
trebuie s conin minimum 34% tocoferoli totali, din care minimum 50% trebuie s fie
DL--tocoferol.
Pentru ambele produse se cer urmtoarele condiii: arsen < 3 mg/kg; plumb < 5mg/kg;
metale grele 10 mg/kg.26
TOCOFEROLUL: C30H47O2
Structura i biosinteza -tocoferolului a fost stabilit de M. Ewans, E. Fernholz, M.
Geohan, P. Karrer i I. Topp i este 2,5,7,8-tetrametil-1,2,6-hidroxicroman. Biosinteza
tocoferolilor i deci a -tocoferolului are loc n cloroplastele plantelor verzi, probabil din Z-
tocoferolului, care hidrogenai la tocoferoli i apoi metilai.
CH3
HO CH3

H3C O CH3 CH3


CH3 CH3
CH3

Fig. 3.1 Formula structural a Tocoferolului (5,7,8-trimetil-tocol)

Proprietile fizico-chimice ale -tocoferolului:


Se prezint sub form uleioas, caracterizndu-se prin:
maximul de absorbie n ultraviolet la 292 nm;
optic activ, indicele de refracie este egal cu 1,5052;
densitatea egal cu 0,953 la 150C;
greutatea molecular este egal cu 430,72;
posed centri asimetrici n poziiile 2,4 minute i 8 minute;
este insolubil n ap, dar solubil n solveni organici (eter, alcool) i n grsimi;
n timpul preparrii alimentare nu este distrus;
n lipsa oxigenului rezist la temperatura de peste 2500C.
Acizii minerali diluai nu afecteaz -tocoferolul, n schimb este distrus n soluiile
alcaline, chiar la concentraii foarte mici, la temperaturi mai mari de 40 0C. De asemenea,
acidul azotic, ca i clorul, bromul, azotatul de argint, permanganatul de potasiu i ali ageni
oxidani l distrug foarte reepede. Radiaiile ultraviolete, grsimile rncede, clorura de fier
distrug -tocoferolul. Prezena grupei hidroxil a dat posibilitatea de formare a esterilor i a
paranitrofenilluretanilor. -tocoferolul, prin tratarea termic, duce la formarea 2,3,5,6-
tetrametil-hidrochinon, iar prin descompunere cu acid iorhidric rezult 2,3,5-trimetil-fenol.
De asemenea, prin oxidarea cu acidul cromic sau anhidrid cromic se obine un hidroacid
care trece foarte uor n lacton. Supus unei oxidri mai puternice, -tocoferolul se transform
ntr-o ceton care, supus unei noi oxidri cu acidul cromic, se transform n acidul respectiv.

26
Banu, C., Buu, N., Lungu, C., Alexe, P., Rsmeri, D., Vizireanu, C. Aditivi i ingrediente pentru
industria alimentar, Editura Tehnic, Bucureti, 2000, p. 117
49
Prin oxidarea -tocoferolului cu azotat de argint s-a obinut tocoferilchinona, care a fost
redus la hidrochinon, prin acidulare cu acid clorhidric, trece din nou n -tocoferol.
Sinteza -tocoferolului:
Chiar nainte de a se stabili structura -tocoferolului, Karrer P., n 1938, a reuit s i
fac sinteza pornind de la 2,3,5-trimetilhidrochinon i bromur de fitil. Din aceasta, n
prezenaclorurii de zinc, care are rol de catalizator, s-a obinut D,L- -tocoferolul. Procedeul
de sintez indicat de Karrer P. a fost transformat n tocoferol cu ajutorul fitolului natural, a
bromurii de fitil n prezena clorurii de zinc sau a clorurii de aluminiu.
De asemenea, N. Manich arat c metaxilenolul poate fi transformat ntr-un derivat
dimetil-amino care, dup Adkins, poate fi redus la 2,3,5-trimetilfenol, n prezena
catalizatorilor de crom i cupru. Prin nitrare sau cuplare cu sruri de diazoniu se poate
introduce n poziia patru o funcie nitroc care, prin reducere, s dea o grupare aminic.
Supus unei oxidri slabe se obine chinona, care se poate reduce la forma 2,3,5-
trimetilhidrochinon. Fitolul natural se obine prin hidroliza clorofilei din fina de urzici.
Izofitolul se poate sintetiza total prin condensarea acetilenei i acetonei n toluen sau xilol n
mediu alcalin, dup care se hidrolizeaz catalitic cu paladiul. Rezultanta acestor sinteze este
tocoferolul racemic.
Astzi se cunosc numeroase procedee de sintez a tocoferolilor, prin condensarea
trimetilhidrochinonei cu fitolul natural, cu cel de sintez sau cu derivaii lor. n sinteza
trimetilhidrochinonei se pornete de la urmtoarele materii prime: pseudocumen, cumen,
metaxilenol i paraxilenol.
Prepararea -tocoferolului din vegetale:
Se face o extracie din uleiul de germeni ai seminelor. Pentru obinerea uleiului se
folosesc germenii proaspei, ntruct rncezirea micoreaz concentraia tocoferolilor, care
sunt n proporie de 0,015-0,50%. Solvenii utilizai pentru extracie sunt: benzenul, eterul,
benzina, etanolul fierbinte, furfurolul i propanolul lichid. Dup evaporarea solvenilor
rmne un ulei de culoare nchis, care este saponificat cu hidroxid de potasiu, n soluie de
alcool metilic, la 20-300C. Poiunea nesaponificat este extras cu eter de petrol, care apoi se
supune distilrii.
Reziduul se trateaz cu pentan, care extrage -tocoferolul; acesta rmne sub form de
ulei dup evaporarea solventului. Pentru obinerea -tocoferolului pur se folosete absorbia
pe coloan cu oxid de aluminiu din soluie benzenic. Prin metoda extraciiei din vegetale se
obin concentrate cu un coninut de numai 4-65% -tocoferol. Uleiul de ctin conine
vitamina E ntr-o proporie de 200 mg% mai mare dect n soia (120 mg%), porumb (100%)
i floarea-soarelui (100 mg%). n industrie se folosesc metode de sintez din
durohidrochinon i bromur de fitil, ntrucat sunt mai rapide, mai puin complicate, produsul
are un coninut mult mai mare de -tocoferol i sunt mai economice.

3.2.2. Tocoferolii n natur


n natur, tocoferolii sunt rspndii mai ales, n regnul vegetal, biosintetizndu-se prin
intermediul acidului mevalonic. Vitamina E din alimente rezist la prepararea termic, dar nu

50
n grasimile rncede, care o distrug imediat. Vitamina E a fost gsita i n polen n diferite
proporii.
Tabelul nr. 3.1 - Cantitatea medie de tocoferoli (mg/100g):
Alimentul Proporia de tocoferol
Fin de gru 25
Pine neagr 2.2 - 5
Pine alb 1.3
Ulei de porumb 95
Ulei de msline 23
Ulei de floarea soarelui 6
Ulei de germeni de porumb 220
Unt 6.8 - 12
Ou de gin 3-5
Brnz 1-3
Carne de vit 0.9 - 3
Ficat de vit 1.5 7
Lapte de vac 0.2 - 0.8

Tabelul nr. 3.2 - Cantitatea medie de tocoferoli a unor legume i fructe (mg/100g produs):
Alimentul Proporia de tocoferoli
Arahide 20.2
Ardei verde 0.65
Castravei 0.20
Fasole boabe 2.3
Fasole verde 0.28
Mazre 3 - 18
Morcovi .07
Ptrunjel 1.8
Pepene 0.10
Spanac 2.5
Roii 0.49
Varz roie 2.5
Vinete 0.03
Caise 0.5
Cpuni 0.22
Ciree 0.27
Coacze 1
Lmi 0.8
Ridichi, gutui -
Msline -
Mandarine -
Mere 0.57
Migdale 26.10
Pstrnac 1

51
Tabelul nr. 3.3: Coninutul n tocoferoli a diferitelor uleiuri:
Uleiuri Tocoferol(total, mg/g)
Germeni
2.55 56 33.5 - -
de gru
Tre 3.2 11 5.5 - -
Porumb 0.91 11 - 89 -
Rapi 0.56 27 - 73 -
Soia 1.18 13.5 - 59 7.5
Mutar 0.32 26.8 - 55 18
Bumbac 0.81 58 - 42 -
Orz 2.38 15.33 - 6 -
Arahide 0.195 35.5 - 64.5 -
Secar 2.48 39 - 5 -
Ovz 0.61 28 - 36 10
Orez - 47 - - -

3.2.3. Aciunea antioxidant a tocoferolilor


Aciunea antioxidant a tocoferolilor este invers proporional cu rolul de vitamin.
Activitatea antioxidant se datoreaz OH din C-6 i se manifest numai dac aceast grup
funcional este liber.27
Datorit proprietilor lor antioxidante, tocoferolii blocheaz oxidarea acizilor grai
nesaturai la peroxizi, anulnd efectul inhibator pe care aceti compui l-ar avea asupra
enzimelor celulare.
O metod de extindere a beneficiilor tocoferolilor este utilizarea lor sinergic cu acid
ascorbic, acid citric, ascorbil palmitat i lecitin, despre care se crede c recicleaz
tocoferolii, prin donarea de atomi de hidrogen. Un dezavantaj al utilizrii tocoferolilor (sub
form de tocoferil-acetai) sau a altor vitamine liposolubile la alimente limpezi cum ar fi
anumite buturi sau geluri este posibila apariie a fenomenului turbiditii aprut din cauza
diferenelor de densitate.
Tocoferolii sunt mai eficieni n cazul n care sunt folosii alturi de extract de
rozmarin. Acesta din urm a ctigat o larg popularitate n ultima perioada, prezentnd n
plus fa de antioxidanii uzuali o arom specific. Este eficient chiar i n concentraii
sczute, cnd aroma sa nu este sesizabil, ceea ce face posibil utilizarea sa i n cazul
produilor alimentari n care aceasta nu este dorit. n plus, extractul de rozmarin este solubil
n grsimi.

3.3. Acidul ascorbic sau Vitamina C (E300)


3.3.1. Structur chimic i proprieti
Acidul ascorbic (a = fr, scorbic = scorbut) sau vitamina C este un factor activ, n
lipsa cruia apare o boal grav numit scorbut. Prin structura sa, acidul ascorbic este un

27
Avrmiuc, M. Biochimie, vol. I, Editura Universitii Suceava, Suceava 2001, p.155
52
derivat al glucidelor (hexozelor).28 Acidul ascorbic este -lactona acidului 2,3-dienol-L-
gulonic, care se poate prezenta i sub o form cetonic la carbonul C2. Acest compus cu
reacie puternic acid are proprieti reductoare; prin dehidrogenare reversibil (n mediu
alcalin) se transform n acid dehidroascorbic, activ bilogic.29
Are formula brut C6H8O3 i cea structural prezentat n fig. 3.5.
OH

HO CH2 CH O O

HO OH
Fig. 3.5 Formula structural a acidulului ascorbic

Este un agent antioxidant, natural, se obine din fructe i vegetale, iar pe cale sintetic
se obine din glucoz. Se prezint sub form de cristale incolore aciculare sau foie precum i
ca pulbere alb cristalin. Este inodor, cu gust acid (acrior). Dac este perfect anhidru, acidul
ascorbic este stabil n contact cu aerul, iar n caz contrar, prin expunere la aer i lumin, se
oxideaz cu uurin. Alcaliile i fierul favorizeaz oxidarea acidului ascorbic. Are mas
molecular de 176,12, densitate de 1,65, punctul de topire la 190192C (cu descompunere) i
rotaia specific de +23 (n ap).
Acidul ascorbic este solubil n ap (1:3 n ap la 20C), n alcool absolut (1:50) i n
glicerin (1:100).30

3.3.2. Mecanismul antioxidant


Ascorbatul se compor ca un antioxidant prin disponibilitatea sa de a se oxida n
condiii energetice favorabile. Oxidanii (numii tiinific specii de oxigen reactiv) precum
redicalul hidroxil (format din peroxid de hidrogen), conin un orbital monoelectronic i de
aceea sunt foarte reactivi i duntori oamenilor i plantelor la nivel molecular. Acest lucru
are loc datorit interaciei lor cu acizii nucleici, proteinele i lipidele. Speciile de oxigen
reactiv pot 'extrage' un atom hidrogen din ascorbat, care devine astfel monodehidroascorbat,
dar imediat ctig un alt electron pentru a redeveni dehidroascorbat. Speciile de oxigen
reactive sunt reduse la ap, n timp ce formele de ascorbat oxidat sunt relativ stabile i
nereactive, necauznd nici un ru celulei.

3.3.3. Surse de vitamina C


Fructele de mce sunt o surs foarte bogat n vitamina C.
Fructele citrice (lmie verde, lmie, portocal, grepfrut), tomatele i cartofii sunt
surse comune i foarte bune de vitamina C. Alte alimente care sunt bune surse de vitamina C
includ papaya, broccoli, varz de Bruxelles, coacze, cpuni, conopid, spanac, pepene
galben i kiwi. De asemenea, merioarele i ardeii iui sunt surse bogate n vitamina C.
Cantitatea de vitamina C din alimente provenite din plante depind de:

28
Avrmiuc, M. Biochimie, vol. I, Editura Universitii Suceava, Suceava 2001, p.170
29
Segal, R. Biochimia produselor alimentare, Editura cademica, Galai 2006, p. 183
30
Banu, C., Buu, N., Lungu, C., Alexe, P., Rsmeri, D., Vizireanu, C. Aditivi i ingrediente pentru
industria alimentar, Editura Tehnic, Bucureti, 2000, p. 114
53
varietatea exact a plantei,
condiiile solului
climatul n care s-a dezvoltat,
perioada de timp dintre recoltare i consumare,
condiiile de pstrare,
metoda de preparare.
Abia n anii 1920 s-a realizat c i unele buci de carne sunt, de asemenea, o surs de
vitamina C. Muchiul i grsimea, care reprezint baza alimentaiei occidentale moderne, sunt
surse proaste.
Stabilitatea vitaminei C depinde n mare msur de produsul n care se gsete i de
condiiile de mediu. Sub form cristalizat are o bun rezisten att la aciunea oxigenului,
ct i la temperaturi nalte. n schimb, n soluii, se oxideaz rapid. Procesul de oxidare este
nfluenat de pH, temperatur, lumin i este catalizat de metalele grele. Valoarea pH-ului are
o importan determinant, oxidarea fiind mai lent cu ct pH-ul este mai acid. Temperatura
accelereaz procesul de oxidare.
Metalele grele, n special cuprul, exercit un efect catalitic. Radiaiile ultraviolete
provoac distrugerea acidului ascorbic, efectul fiind mai puternic n prezena lactoflavinei.
n produsele naturale exist substane care apr acidul ascorbic de oxidare, dar sunt i
alte substane n prezena crora se produce oxidarea. Astfel, din prima grup fac parte
substanele reductoare, diferii aminoacizi, n special aminoacizii cu sulf (cisteina), substane
proteice, diferite enzime (catalaza, ascorbicreductaza). n cea de-a doua grup intr
ascorbicoxidaza, polifenoloxidaza, peroxidazele.
Stabilitatea acidului ascorbic n plante se datoreaz gruprilor sufhidril (-SH) i a
faptului c vitamina C se gsete n proporie destul de mare legat ntr-un complex cu
proteinele, sub form de ascorbinogen, foarte stabil la oxidare. Ascorbinogenul se disociaz n
mediu acid dnd natere vitaminei C.31

3.3.4. Sintez chimic artificial


Vitamina C este produs din glucoz prin dou metode principale. Procesul
Reichstein, dezvoltat n anii 1930, folosete o singur pre-fermentare, urmat de o cale pur
chimic. Procesul de fermentaie modern n doi pai este originar din China, dezvoltat n anii
1960, i folosete fermentaia adiional pentru a nlocui parial paii chimici urmtori.
Ambele procese transform n vitamina C aproximativ 60% din glucoza introdus.
n 1934, compania farmaceutic elveian Hoffmann-La Roche a fost prima care a
produs sintetic, industrial, vitamina C, sub numele de marc Redoxon. Principalii productori
de astzi sunt BASF/Takeda, Roche, Merck i China Pharmaceutical Group Ltd. din
Republica Popular Chinez. China devine ncetul cu ncetul furnizorul mondial majoritar
pentru c preurile sale sunt mai mici dect cele ale productorilor americani sau europeni.32

31
Poroch-Serian, M. Igiena alimentaiei , Editura Universitii Suceava, Suceava 2006
32
http://ro.wikipedia.org/wiki/Vitamina_C
54
CAPITOLUL 4. ANALIZA PRODUSELOR LACTATE
ACIDE
Prin specificul lor, produsele lactate acide se analizeaz prin msurtori de parametri
fizico-chimici, ncrctur microbiologic i proprieti organoleptice. Primul grup de
parametri se supun cu suficient rigurozitate controlului prin msurtori de caracteristici
specificate n normele de producie, n contractele de livrare sau alte nscrisuri ce
reglementeaz relaiile productor-consumator-sigurana alimentaiei. Acest control se poate
efectua pe fluxul tehnologic sau pe produsele ce se livreaz spre consum.

4.1. Material de cercetat


n cadrul studiului realizat s-au obinut cinci variante de iaurt: un iaurt clasic i patru
probe de iaurt n care s-au adugat diferite cantiti de tocoferol i acid ascorbic, dup cum
urmeaz:
Proba nr. 1 obinut din 250 ml lapte i un un adaos de vitamine format din 100 mg
de tocoferol i 5 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 0,5g acid ascorbic);
Proba nr. 2 obinut din 250 ml lapte i un un adaos de vitamine format din 200 mg
de tocoferol i 5 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 0,5g acid ascorbic);
Proba nr. 3 obinut din 250 ml lapte i un un adaos de vitamine format din 400 mg
de tocoferol i 10 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 1g acid ascorbic);
Proba nr. 4 obinut din 250 ml lapte i un un adaos de vitamine format din 400 mg
de tocoferol i 10 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 1g acid ascorbic).
Produsele au fost obinute conform tehnologiei descrise n capitlul 2. Cultura starter
utilizat a fost furnizat de firma Enzimes & Derivates Romania i este format din
Lactobacillus delbruieckii ssp. Bulgaricus i Streptococcus salivarius ssp. Thermophillus.
Pe parcursul unui interval de 15 zile am urmrit variaia unor parametri din lapte i din
probele de iaurt obinute.

4.2. Controlul produselor lactate acide


Controlul produselor lactate acide implic analiza materiile prime, analize pe fluxtul
tehnologic i determinarea compoziiei produselor pentru consum.
Controlul calitii se face prin:
analiz senzorial, pentru evaluarea caracteristicilor organoleptice;
analiz fizico-chimic, pentru evaluarea caracteristicilor fizice, compoziionale, structurale,
n raport cu valorile impuse i standardele de producie;
analiz microbiologic, pentru evidenierea compoziiei microbiene a laptelui,
ingredientelor, culturilor starter i produsului finit i pentru evaluarea siguranei
microbiene.33

33
Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura Academica, Galai,
2005, p. 383
55
4.2.1. Controlul calitii laptelui
Este unanim recunoscut importana laptelui n fabricarea produselor lactate acide.
Laptele materie prim influeneaz decisiv calitatea produselor fabricate, conservabilitatea
acestora, consumurile specifice, costurile de fabricaie.
Din punct de vedere structural laptele este un sistem fizico-chimic complex, schematic
putnd fi considerat ca o emulsie de grsimi ntr-o soluie coloidal. Laptele este compus din
4 faze: o faz gazoas, o faz gras, o faz coloidal i o faz apoas.
Din punct de vedere fizilogic laptele este definit ca produsul de secreie al glandei
mamare a femelelor, dup actul partnutriiei i care servete pentru hrana puilor.
Din punct de vedere igienic, prin lapte se nelege, produsul biologic scos din ugerul
animalelor sntoase, printr-un muls complet i nentrerupt, n aa fel nct n acesta s ajung
ct mai puine impuriti (de la uger, mini, utilaje i aer).
n general noiunea de lapte se definete i se nelege laptele de vac.
Pentru evaluarea calitii laptelui se analizeaz prin metode tradiionale sau
instrumente moderne caracteristicile fizico-chimice i microbiologice. n plus trebuie
efectuate determinri pentru a evidenia eventualele falsificri, poluri sau contaminri.
Tabelul 4.1 Metode folosite n analiza laptelui
Caracteristicile fizico-chimice
Metoda
ale laptelui
Densitate Areometric termolactodensimetru
Aciditate Titrare cu NaOH 0,1 n
pH pH-metru
Temperatur Termometru
Substan uscat total Termogravimetric, uscare cu IR
Grsime Gerber/Rose-Gottlieb, Milko-tester, Milkoscan, Infratec
Proteine Kjeldahl, Kjel-Foss-Automatic, spectroscopie n IR apropiat, fotometric-
Pro-Milk
Lactoz Polarimetric, iodometric, Bertrandt-Schoorl, spectroscopie n IR apropiat
Adaos ap Criosopic (determinarea punctului de congelare), analiz IR
Sursa: Prelucrare dup Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate ,
Editura Academica, Galai, 2005, p. 384

4.2.2. Verificarea calitii produselor lactate acide


Verificarea calitii acestor produse se face pentru a stabili conformitatea cu
specificaiile i sigurana n consum. Aprecierea calitii include:
evaluarea senzorial: aspect, culoare, textur, consisten, vscozitate, arom, gust,
miros;
aciditate titrabil;
pH-ul
compoziia: substan uscat, grsime, etc.;
producerea acetaldehidei;
teste pentru coliformi, drojdii, mucegaiuri;
teste pentru Salmonella;
consideraii asupra aspectelor legale;
conformitate de tip;
56
pstrarea calitii i siguranei la depozitare: teste de conservabilitate la 5C i 26C.
Verificarea microbiologic a produselor lactate acide vizeaz:
evaluarea riscurilor tehnologice i de stabilitate (microorganismele de alterare);
evaluarea siguranei n consum (absena microorganismele patogene i prezena n
limitele admise, a celor cu rol de indicatori igieno-sanitari).
Tabelul 4.1 Metode folosite n analiza produselor lactate acide
Caracteristicile fizico-chimice ale Metoda de analiz
iaurtului
Substan uscat Termogravimetric, uscare cu IR
Grsime Gerber/Rose Gottlieb, Soxhlet
Aciditate Titrare cu NaOH 0,1 n
pH pH-metru
Numr de bacterii Cultivare pe medii selective
Bacterii coliforme Metode selective de cultivare, Petri-filmTM3MTM CTT-VRBL
E. coli enteropatogen 0157:H7 ELISA, kit HEC
Salmonella ELISA, PCR (Polymerase Chain Reaction)
Drojdii i mucegaiuri Cultivare pe medii agar selective, pH neutru (de ex. Rose Bengal
cloramfenicol RBC), metode epiflourescent modificat, ELISA,
lame Biokar, Petri-filmTM-BCIP-OGA.
Sursa: Prelucrare Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate fermentate , Editura
Academica, Galai, 2005, p. 388

4.3. Metode i materiale utilizate n experimentri


4.3.1. Determinarea proprietilor fizico-chimice a laptelui cu ajutorul
aparatului Lactostar

Fig. 4.1 Aparatul Lactostar

Analizatorul de lapte Lactostar este un aparat folosit pentru determinarea rapid a


constituenilor din lapte. Modul de operare este simplu i uor de utilizat, datorit unui meniu
foarte bine explicat. Calibrarea aparatului se face n dou puncte, automat, cu lapte cu valori
cunoscute. Schimbarea de la o prob la alta se face imediat, fr a mai fi necesar
recalibrarea.

57
Principiul de msurare: Determinarea se bazeaz pe o procedur combinat termo-
optic. Proba de lapte (12 20 ml) este pompat n dou uniti diferite: o unitate optic
(BlueBox) i o unitate termic sau caloric (RedBox), care folosesc procedee de analiz
complet diferite.
Cu ajutorul unitii BlueBox, ce folosete turbiditatea ca principiu de msur, se
determin suma dintre grsime i protein (F+P), iar cu ajutorul unitii RedBox, care
folosete efectele calorice ca principiu de msurare, se detremin coninutul de grsime i
substana uscat fr grsime (SNF-ul) din prob.

4.3.2. Determinarea densitii laptelui


Prin densitatea relativ a laptelui se nelege raportul dintre greutatea (masa) unui
volum de lapte la 20C i greutatea (masa) aceluiai volum de ap la temperatura de +4C.
n cazul laptelui integral individual, densitatea variaz ntre 1,0261,034. Vizual,
densitatea laptelui se determin cu lactodensimetru sau cu termolactodensimetrele (metoda
areometric). Lactodensimetrele i termolactodensimetrele sunt areodensimetre adaptate
pentru lapte.
n cazul utilizrii lactodensimetrelor, temperatura laptelui se msoar separat, cu
termometrul, care se introduce i se menine n lapte timp de 5 minute. Trebuie stabilit faptul
c citirea temperaturii se face innd termometrul n lapte (termometrul nu se scoate din lapte
pentru citirea temperaturiui). Pentru determinare este bine ca temperatura laptelui s fie ct
mai apropiat de 20C, nefiind permis determinarea densitii dect n intervalul de
temperatur de 205C.
Tija areodensimetrelor pentru lapte este gradat obinuit de la 15 la 40, gradaiile
reprezentnd ultimele dou cifre ale densitii (gramele care se adaug la 1 kg lapte pentru a
se obine greutatea unui litru de lapte).
Principiul metodei
Determinarea densitii relative a laptelui se face lsnd s pluteasc liber
lactodensimetrul ntr-un vas (cilindru de sticl) coninnd lapte i dup ce se ajunge n
echilibru, se citete pe tija gradat a lactodensimetrului densitatea relativ a laptelui, n grade
densimetrice.34

=
1000
Mod de lucru
Determinarea densitii laptelui se face dup cel puin 2 ore de la mulgere. n
momentul determinrii.
ntr-un cilindru gradat cu dimensiuni apropiate de acelea ale lactodensimetrului, curat
i uscat, se toarn laptele de analizat, n prealabil omogenizat, evitnd formarea spumei. Se
introduce ncet lactodensimetrul pn ce ajunge la diviziunea 30 i apoi se las s pluteascp
liber, fr s ating pereii cilindrului. Distana de la corpul densiometrului pn la pereii

34
STAS 6347-61
58
cilindrului trebuie s fie de cel puin 5 mm. Citirea temperaturii i a densitii se face dup 1
2 minute, cnd poziia lactodensimetrului devine stabil.
Diviziunea citit la marginea superioar a meniscului reprezint densitatea laptelui, la
temperatura la care s-a fcut citirea. Dac temperatura este diferit de 20C, numrul de grade
citit se corecteaz conform datelor din anex.
Densitatea relativ se calculeaz cu formula:

20 = 1 +
1000
n care C reprezint numrul de grade lactodensimetrice, corectat.
Corecia gradelor lactodensimetrice citite la temperaturi diferite de +20C se poate
face cu aproximaie i prin calcul, astfel:
20 = + 0,2
n care:
D20 grade lactodensimetrice la 20C;
DC grade lactodensimetrice citite pe lactodensimetru;
0,2 factor de corecie care se adaug pentru fiecare grad de temperatur peste 20C
i se scade pentru fiecare grad de temperatur peste 20C;
n diferena algebric, n C, ntre temperatura la care s-a fcut citirea i 20C (pentru
care e gradat lactodensimetrul.
Pentru o determinare ct mai corect este bine ca proba s fie omogenizat prin
rsturnarea lent de cteva ori a recipientului, s fie nclzit la aproximativ 45C,
omogenizat din nou i rcit la 20C.35
Conform normativelor actuale, densitatea laptelui recepionat de unitile de prelucrare
trebuie s aib o valoarea minim de 1,029 la vac.36

4.3.3. Determinarea aciditii laptelui i a produselor lactate acide (metoda


prin titrare)
Aciditatea reprezint principalul indicator de prospeime al produselor lactate acide.
Principiul metodei
Aciditatea liber se titreaz, dup diluarea prealabil a produsului, cu o soluie de
hidroxid de sodiu. Aciditatea se exprim n grade Thorner, care reprezint volumul de ml de
soluie de hidroxid de sodiu 0,1n necesar pentru neutralizarea aciditii din 100ml n cazul
produselor lichide sau din 100g n cazul produselor solide, n prezena fenolftaleinei ca
indicator.37
n principal, aciditatea laptelui este dat de acidul lactic format prin fermentarea
lactozei. Surse secundare de aciditate mai sunt cazeinatul de calciu i fosfaii.
Admitnd c acidul care se neutralizeaz este acidul lactic, reacia de neutralizare este
urmtoarea:
CH3-CHOH-COOH + NaOH CH3-CHOH-COONa + H2O

35
Banu, C. i col. Manualul inginerului din industria alimentar, vol. II, Editura Tehnic, Bucureti 1999
36
Ordinul Ministerului Sntii 975/1998 Privind aprobarea normelor igienico-sanitare pentru alimente
37
STAS 6353-61
59
Fenolftaleina servete ca indicator al sfritului reaciei datorit prorpietii sale de a fi
incolor n mediul acid i roie n mediul bazic.
Reactivi
Hidroxid de sodiu, NaOH, soluie 0,1n;
Fenolftalein, soluie alcoolic 1%;
Ap distilat, proaspt fiart i rcit, lipsit de CO2.
Mod de lucru
Cu o pipet se iau 10 ml din proba de analizat i se introduc ntr-un vas Erlenmeyer de
100ml.
Se adaug 20 ml ap distilat, trecnd-o prin pipeta folosit la msurarea probei i 3
picturi de fenolftalein. Se amestec bine i se titreaz cu hidroxid de sodiu soluie, agitnd
mereu, pn la apariia unei coloraii roz-deschis, care nu dispare timp de 1 minut.
Calculul
Aciditate = 10 x V grade Thorner
- n care V reprezint volumul de hidroxid de sodiu, soluie 0,1n, ntrebuinat la titrare, n
ml.
ntre dou determinri paralele se admite o diferen de 1T.
Conform normativelor actuale, aciditatea maxim admis a laptelui maxim admis a
laptelui crud integral, recepionat n vederea prelucrrii este de: 19T, iar aciditatea iaurtului
s fie cuprins ntre 75 i 145T.38

4.3.4. Determinarea substanelor proteice (determinarea titrului proteic


metoda rapid)
Principiul metodei
Metoda se bazeaz pe proprietatea gruprilor aminice ale proteinelor de a reaciona cu
aldehida formic, elibernd astfel gruprile carboxilice care se titreaz cu ajutorul alcaliilor.39
Proteinele sunt substane amfotere datorit existenei n structura lor a gruprilor NH2
i COOH, de trii aproximativ identice, n numr aproximativ egal.
Cazeina, principalul component al proteinelor laptelui, are o reacie slab acid datorit
prezenei n numr mare a gruprilor COOH.
Grupele NH2 pot fi condensate cu formaldehid, astfel c proteina, n asamblul su,
devine acid datorit grupelor COOH. Punerea ei n eviden se va face prin titrare cu soluie
NaOH, soluie 0,143 n.
Concentraia este astfel stabilit nct rezultatul va fi citit direct n procente de
protein. Reacia care are loc este:
R-CH-NH2 + O=CH2 R-CH-N=CH2 + H2O

COOH COOH

38
Bondoc, I., indilar, E.V. Controlul sanitar al calitii i salubritii alimentelor, vol. I, Editura Ion
Ionescu de la Brad, Iai 2002
39
STAS 6355-61
60
Aparatur i reactivi
Microbiuret
Vase Erlenmeyer de 100, 200 ml
Pipet de 50 ml
2 pipete de 1 ml
Hidroxid de sodiu, NaOH, soluie 0,143 n, lipsit de CO2. ntr-un litru de ap fiart i
rcit se dizolv 5,75g de NaOH. Titrul soluiei se stabilete cu ajutorul unei soluii de
acid oxalic 0,143n (9 g acid oxalic la litru).
Fenolftalein, soluie alcoolic 2%
Sulfat de cobalt, CoSO4, soluie 5%
Oxalat de potasiu (neutru), K2(COO)2, soluie 28%
Formaldehid, CH2O, soluie 37% (cantitatea de formaldehid, necesar pentru
determinrile din aceeai zi, se neutralizeaz cu soluie de hidroxid de sodiu 0,1n).
Mod de lucru
n dou vase Erlenmeyer se introduc cu pipeta cte 50 ml lapte, apoi cte 2 ml soluie
de oxalat de potasiu i se agit.
ntr-unul din vase, constituind proba martor, se introduce 1 ml soluie de sulfat de
cobalt i se agit. Apare coloraia roz.
n al doilea pahar se introduce 1ml soluie de fenolftalein i se adaug, picurnd din
microbiuret, soluie de hidroxid de sodiu, pentru neutralizarea aciditii libere, pn se obine
o coloraie roz a probei ca a probei martor.
Se adaug 10 ml soluie de formaldehid i se agit. Coloraia roz dispare. Se las 30
secunde n repaus, se agit i se titreazp din nou pn la apariia coloraiei asemntoare cu
proba martor.
Calculul

= ,
2
- n care V reprezint volumul soluiei de hidroxid de sodiu 0,143 n, n ml, folosit la a doua
titrare.
Titrul proteic al laptelui integral are n general valori cuprinse ntre 3,03,5g%.40

4.3.5. Determinarea coninutului de substan uscat din lapte (metoda


prin uscare la etuv)
Prin definiie, substana uscat total reprezint masa de substan rmas dup
tratarea termic specific a probei analizate41. Coninutul de substan uscat total se exprim
n procente masice (SUT, %). Dac din SUT% se scade coninutul de grsime (G%), rezult
substana uscat negras (SUN%).

40
Bondoc, I., indilar, E.V. Controlul sanitar al calitii i salubritii alimentelor, vol. I, Editura Ion
Ionescu de la Brad, Iai 2002
41
Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate Fermentate , Editura Academica, Galai,
2005, p. 107
61
Principiul metodei
Principiul metodei analitice pentru determinarea SUT% const n evaporarea apei la
etuv termostatat la 1022C n prezena oxidului de Zn (ZnO).
Substana uscat este compus din substane proteice, grsimi, lactoz i sruri
minerale. Din aceasta lipsesc apa i srurile volatile existene n lapte.
Substana uscat variaz datorit variaiei coninutului de grsime n timp ce substana
uscat negres are o valoare aproximativ constant.
Aparatur i reactivi 42
Balan analitic
Etuv electric
Exucator
Fiole de cntrire de form joas, cu diametrul de circa 5 cm
Baghete subiri de sticl
Pipete de 10 ml
Nisip calcinat: nisip cernut cu granulaia de 0,150,3 mm, tratat prin fierbere timp de
30 minute cu acid clorhidric concentrat, splat cu ap pn la reacia neutr, uscat i
calcinat.
Mod de lucru
ntr-o fiol de cntrire se introduc circa 10 g nisip i o baghet uscat de sticl. Se
usuc la 102105C, se rcete n exicator i apoi se cntrete cu precizie de 0,001g. Uscarea
n etuv i rcirea se repet pn la mas constant. Diferena ntre dou cntriri consecutive
nu trebuie s depeasc 0,004g.
Se introduc, cu o pipet, n fiol, 10 ml lapte i se cntrete din nou. Se amestec
laptele cu nisipul cu ajutorul unei baghete i se evapor la 5060C timp de 23 ore,
amestecnd des coninutul pn la obinerea unei mase sfrmicioase. Apoi se introduce fiola
n etuv i se ine la 102105C timp de 45 ore.
Se scoate apoi fiola din etuv, se rcete n exicator i se cntrete. Se repet uscarea
n etuv timp de 30 minute i rcirea pn la mas constant. Diferena dintre dou cntriri
nu trebuie s depeasc 0,004g.
Calculul i exprimarea rezultatelor
2 0
% (%) = 100
1 0
- n care:
m2 masa fiolei cu nisip, baghet i reziduul dup uscare, n g;
m0 masa fiolei cu nisip i baghet, n g;
m1 masa fiolei cu nisip, baghet i produsul luat pentru analiz, n g.
Diferena ntre rezultatele procentuale a 2 determinri nu trebuie s depeasc 0,05.
Substana uscat negras se calculeaz astfel:
% (%) =
- n care:

42
STAS 6344-61
62
SUT% substana uscat total, n procente;
G grsime, citit la butirometru, n procente

4.3.6. Detreminarea coninutului de grsime din lapte (metoda acid-


butirometric cu butirometrul Gerber)
Principiul metodei
Medota acid-butirometric se bazeaz pe separarea grsimii, butirometre, prin reacia
aacidului sulfuric concentrat, cazein i srurile de calciu.43
H2N-R(COO)6Ca3 + 3H2SO4 H2N-R(COOH)6 + 3CaSO4
H2N-R(COOH)6 + H2SO4 H2SO4-H2N-R(COOH)6
Procesul de separare a grsimii este favorizat de aciunea alcoolului amilic, nclzire i
centrifugare.
Aparatur i reactivi
Butirometru Gerber pentru lapte
Pipet de 10 ml pentru acid sulfuric, cu bul sau automat
Pipet pentru lapte de 11 ml
Pipet de 1 ml pentru alcool amilic, obinuit sau automat
Centrifug tip Gerber cu 8001200 rot/minut
Baie de ap
Acid sulfuric, H2SO4, densitate relativ 1,8151,820: 10,1 ml ap distilat + 100 ml
acid sulfuric d = 1,834.
Alcool izoamilic, densitate relativ 0,8100,812 (temperatura de fierbere 128130C).
Mod de lucru
Se introduc n butirometru 10 ml acid sulfuric fr a atinge gtul butirometrului, apoi
se introduc cu pipeta 11 ml din proba de analizat, lsndu-se s se preling ncet pe peretele
interior al butirometrului. Se adaug 1 ml alcool izoamilic. Se astup butirometrul cu un dop
uscat de cauciuc, se nfoar cu un ervet i se agit prin rsturnare pn la completa
dizolvare a coninutului, apoi se centrifugheaz timp de 5 minute.
Dup centrifugare se las butirometrul timp de 5 minute n baia de ap la 6570C. Se
citete, la aceast temperatur, coninutul de grsime pe poriunea gradat a butirometrului,
lund n considerare partea inferioar a meniscului, dup ce se manevreaz dopul aducnd
coloana de grsime la o diviziune fix (punctul zero). Pe scara butirometrului se citete
numrul de grame de grsime din 100 ml produs.
Exprimarea rezultatelor
Fiecare diviziune minor de pe scala tijei corespunde (n cazul butirometrului pentru
lapte) la 0,1% grsime, iar fiecare diviziune major corespunde 1% grsime. Diviziunile
majore sunt notate.
Laptele crud trebuie s aib un coninut minim de 3,2% grsime.44

43
STAS 6352-61
44
Ordinul Ministerului Sntii 975/1998 Privind aprobarea normelor igienico-sanitare pentru alimente
63
4.3.7. Determinarea pH-ului laptelui i al produselor lactate acide
Pentru msurarea pH-ului se pot utiliza fie pH-metre universale, fie pH-metre
portative. Principiul de funcionare al acestor aparate este acelai, indiferent de tipul lor.
Msurarea pH-ului se face cu ajutorul unui sistem format din doi electrozi din care
unul este de msur, iar cellalt este de referin.
Sistemul de electrozi utilizat pentru msurarea pH-ului laptelui i al produselor lactate
acide const dintr-un electrod de sticl (pentru msurare) i un electrod de comparaie (de
referin).
Aparatur i reactivi
pH-metru de laborator
Sistem de electrozi
Soluie tampon din soluie de fosfat monoacid de potasiu 0,025M i soluie de fosfat
diacid de sodiu 0,0025M. La temperatura de 20C soluia tampon are pH-ul egal cu
6,88
Soluie tampon constituit din oxalat acid de potasiu 0,0,5M. La 20C soluia are pH-
ul de 4,00.
Mod de lucru
nainte de efectuarea msurtorilor cu pH-metrul, instrumentul trebuie reglat folosind
soluiile tampon standard, prin respectarea succesiunii operaiilor:
Se nclzete aparatul timp de 30 de minute;
Se spal electrozii cu ap distilat, picturile scurse se vor absoarbe cu hrtie de filtru;
Se toarn n paharul pH-metrului 40 ml soluie tampon i se aduce temperatura la
201C;
Se introduc electrozii n pahar; dup 12 minute se va citi indicaia. Cu ajutorul
peteniometrului de reglaj se va regla indicaia instrumentului.
Dup fiecare determinare electrozii trebuiesc splai cu ap distilat.
Pentru determinarea pH-ului probei de analizat, paharul va fi umplut 2/3 cu produs, iar
electrozii vor fi imersai complet.
Paharul se va roti uor n jurul axei sale pentru uniformizarea probei. Valoarea va fi
citit dup 1520 secunde de la imersare.

4.3.8. Determinarea cenuii din lapte


Cenua reprezint substanele minerale nevolatile din lapte, n mod normal laptele
conine 0,75% cenu.
Principiul metodei
Metoda se bazeaz pe calcinarea reziduului obinut prin evaporarea pe baie de ap, la
sec, a unei cantiti de lapte.
Mod de lucru
Se cntresc 11,5g de lapte ntr-o capsul de platin sau de porelan. Peste lapte se
adaug cteva picturi de acid acetic pentru precipitarea proteinelor i se evapor pe baia de
ap, la sec.

64
Reziduul este calcinat ntr-un cuptor electric la 53020C, timp de 1,52 ore.
Creuzetul cu cenu se rcete n exicator, se recntrete i se calculeaz Cenua, % ca i
n cazul substanei uscate.

Calculul
2 0
% = 100
1 0
- n care:
m2 masa creuzetului i a reziduului dup uscare, n g;
m0 masa creuzetului, n g;
m1 masa creuzetului i a produsului luat pentru analiz, n g.

4.3.9. Determinarea coninutului de grsime din produsele lactate acide45


Coninutul de grsime se determin prin metoda acid-butirometric, folosind
butirometrul pentru lapte Gerber.
Aparatur i reactivi
H2SO4, cu d = 1,8201,825
Alcool izoamilic, d = 8,810
Pipete automate de 10 ml i 1 ml pentru acid sulfuric i pentru alcool izoamilic
Butirometru Gerber
Mod de lucru
n butirometru se introduc 10 ml H2SO4 i 5 ml produs lactat acid bine omogenizat n
prealabil. Pipeta cu care s-a luat proba de analizat se cltete cu 6 ml ap distilat i se adaug
n butirometru, apoi se adaug 1 ml alcool izoamilic i se continu determinarea ca n cazul
laptelui.

4.3.10. Determinarea coninutului de substan uscat din produsele


lactate acide
Coninutul de substan uscat din produsele lactate acide se determin prin uscare la
etuv sau prin metoda rapid cu Balana digital de msurare a umiditii (AND seria AD
4714).
4.3.10.1. Determinarea prin uscare la etuv
Aparatur necesar
Etuv electric
Balan analitic
Exicator
Fiol de cntrire cu baghet i capac
Pipet gradat 1025 ml
Nisip calcinat

45
STAS 6352-1/88
65
Mod de lucru
n fiola de cntrire care conine nisip i bagheta, uscat la etuv, rcit n exicator i
cntrit la balana analitic, se introduce cu ajutorul pipetei circa 1 g produs lactat acid.
Se omogenizeaz proba cu nisipul din fiol cu ajutorul baghetei i apoi se introduce
fiola n etuv unde se menine 30 minute la 105C (capacul se pune alturi de prob n etuv).
Dup rcire n exicator, fiola se recntrete.

Exprimarea rezultatelor
Diferena dintre cntrire nainte i dup uscare, raportat la 100 g produs, va da
coninutul procentual n substan uscat a probei de analizat.
2 0
% (%) = 100
1 0
- n care:
m2 masa fiolei cu nisip, baghet i reziduul dup uscare, n g;
m0 masa fiolei cu nisip i baghet, n g;
m1 masa fiolei cu nisip, baghet i produsul luat pentru analiz, n g.
4.3.10.2. Determinarea coninutului de substan uscat cu Balana digital
de msurare a umiditii (AND seria AD 4714), metoda rapid
Mod de lucru
Se aeaz balana pe o suprafa plan, solid, s fie perfect orizontal (se verific
amplasarea cu ajutorul rotielor de pe soclu, vizualiznd bula de aer).
Se conecteaz la reeaua de curent i se d drumul din ntreruptor. Va aprea pe ecran
Busy apoi TC i T min, programate n sesiunea anterioar.
Se apas T/T/Ent i cu sgei se seteaz temperatura i timpul de uscare, apoi se apas
iar T/T/Ent.
Se plaseaz foaia de staniol i se apas Tare/Reset i va aprea scris 0 g.
Se aeaz proba pe foia de staniol i apare masa n g.
Se apas Start/Stop i va aprea umiditatea (pornind de la 0%) i timpul rmas.
Cnd operaia este ncheiat se va auzi un semnal sonor (15 secunde). Se apas pe
Start/Stop i se citete valoarea umiditii.
Se nchide de la ntreruptor i de la reea.

4.3.11. Controlul microbiologic al produselor lactate acide


Produsele lactate acide lucrate corect nu ridic probleme microbiologice din cauza
aciditii lor mari, care inhib sau omoar majoritatea bacteriilor patogene i de alterare.
Examenul microbiologic al acestor produse se efectueaz pentru decelarea germenilor
patogeni, pentru a aprecia dac s-a lucrat n condiii igienice, fr a fi contaminate cu
microorganisme strine i dac conin microflora industrial prevzut de tehnologia fiecrui
produs.
n mod curent, la asemenea produse se cerceteaz prezena bacteriilor patogene
(Salmonella, E. coli, S. aurens, C. perfrigens) i a bacteriilor coliforme. n produsele lucrate

66
n condiii igienice i tehnologice corespunztoare, nici una din aceste categorii de
microorganisme nu trebuie s fie prezent.
Determinarea numrului total de microorganisme la produsele lactate acide nu se
practic n mod obinuit. Numrul total la aceste produse este format exclusiv, sau aproape
exclusiv, de microflora industrial folosit. Totui, n anumite situaii, se execut aceast
determinare, mai ales la laptele acidofil i la iaurt sau alte produse la care se folosesc
amestecuri de specii i tulpini, pentru a vedea proporia dintre acestea sau pentru a explica
apariia unor defecte de consisten, structur i arom. La iaurt se determin numrul total de
lactobacili i streptococi/ml, folosind agarul nutritiv cu zer (lactoz) i incubarea la 40C.
Paralel, se determin numrul de streptococi termofili (S. termophilus) folosind agarul nutritiv
cu lactoz (zer) i albastru de China cu pH 7,0, cu incubare la 40C. Pe acest mediu
streptococii formeaz colonii punctiforme albastre. Scznd numrul total, determinat pe
agarul nutritiv cu lactoz (zer) numrul de streptococi, determinat pe agarul nutritiv cu lactoz
(zer) i albastru de China, se stabilete numrul de lactobacili (L. bulgaricus)/ml i se poate
calcula raportul dintre aceste dou specii de bacterii. Acest raport trebuie s fie la un produs
normal de 1 parte S. termophilus (cca. 200.000.000/ml) i 2 pri L. bulgaricus (cca.
400.000.000/ml).46

4.4. Rezultate i discuii


4.4.1. Caracteristicile fizic-chimice ale laptelui folosit pentru obinerea
iaurtului
n urma analizelor efectuate s-au obtinut rezultatele prezentate n tabelul 4.1.
Tabelul nr. 4.1 Caracteristicile fizico-chimice ale laptelui
Caracteristicile fizico-chimice ale
Valori individuale Valoarea admis STAS
laptelui
Aciditate (T) 18 15 19
pH 6.5 6.4 6.6
Coninutul de grsime (g%) 3.3 minimum 3.2
Proteine (g%) 3.38 minimum 3.2
Densitate (g/cm3) 1.0306 1.028 1.033
Substan uscat negras (%) 9 minimum 8.5
Substan uscat total (%) 12.3 11.9 14.2
Umiditate (%) 87.7 maximum 87.3
Lactoz (%) 4.51 4.8
Cenu (%) 0.09 maximum 0.7
Punct de congelare (C) - 0.54 -0.54 - 0.57
Conform datelor din tabelul 4.1 laptele utilizat corespunde condiiilor pe care trebuie
s le ndeplineasc pentru a putea fi folosit la obinerea iaurtului.

4.4.2. Determinarea aciditii iaurtului


Valorile obinute sunt redate n tabelul de mai jos.

46
Brzoi, D., Apostu, S. Microbiologia produselor alimentare, Editura Risoprint, Cluj-Napoca, 2002
67
Tabelul nr. 4.2 Evoluia aciditii timp de 15 zile
Evoluia aciditii
Rezultate (T) Valoarea
Numr zile Proba maxim
Proba nr. 1 Proba nr. 2 Proba nr. 3 Proba nr. 4
martor admis
2 93 95 105 110 110
5 113 114 114 115 115
8 121 117 117 117 118 145
10 126 124 123 123 123
12 131 129 129 128 129
15 142 137 135 138 138

Evoluia aciditii
160 Valoarea maxim
140 admis
Proba martor
120
Aciditate (T)

100 Proba nr. 1


80
Proba nr. 2
60
40 Proba nr. 3
20
Proba nr. 4
0
2 5 8 10 12 15
Numr zile

Fig. 4.1 Reprezentarea grafic a evoluiei aciditii timp de 15 zile

Dup cum se vede din tabelul 4.2 i din reprezentarea grafic (figura 4.1), dup dou
zile de la obinerea probelor de iaurt cu adaos de vitamine, aciditatea acestora este uor mai
mare fa de aciditatea probei martor. Acest lucru se datoreaz n special adaosului de acid
ascorbic, care a favorizat creterea aciditii acestor produse. n urmtoarele zile aciditatea
iaurturilor ncepe s se echilibreze ajungnd la valori apropiate de cele ale probei martor, ca
dup 15 zile, aciditatea acestora s fie sensibil mai mici fa de aciditatea probei martor.
Aciditatea probelor de iaurt cu adaos de vitamine crete n raport cu cantitatea de acid
ascorbic adugat, astfel se poate observa c valoarea cea mai mare a aciditii este atins de
probele cu numrul 3 i 4 n care s-au adugat 10 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 1 g de
acid ascorbic).
Comparnd aceste valori cu aciditatea maxim admis (145T), se constat c toate
probele se ncadreaz n limitele normale prevzute de legislaia n vigoare.

68
4.4.3. Determinarea pH-ului iaurtului
Tabelul nr. 4.3 Evoluia pH-ului timp de 15 zile
Evoluia pH-ului
Rezultate Valoarea
Numr zile Proba maxim
Proba nr. 1 Proba nr. 2 Proba nr. 3 Proba nr. 4
martor admis
2 4.75 4.73 4.71 4.68 4.68
5 4.63 4.66 4.66 4.66 4.66
8 4.58 4.61 4.61 4.61 4.62 4,8
10 4.51 4.55 4.53 4.53 4.53
12 4.47 4.52 4.51 4.51 4.51
15 4.42 4.46 4.47 4.48 4.47

4.9

4.8

4.7
Valoarea maxim admis
4.6 Proba martor
pH

4.5 Proba nr. 1


Proba nr. 2
4.4
Proba nr. 3
4.3
Proba nr. 4
4.2
2 5 8 10 12 15
Numr zile

Fig. 4.2 Reprezentarea grafic a evoluiei pH-ului timp de 15 zile

Dup cum se observ din datele rezultate valoarea pH-ului probelor supuse analizelor
scade pe msura trecerii timpului, n corelaie cu creterea aciditii acestora. La fel ca i la
determinarea aciditii se observ c n primele zile valorea pH-ului produselor, n care s-au
adugat diferite concentraii de antioxidani, este mai mic de dect cea a probei etalon, ca
apoi aceasta s devin mai mare.
Cel mai mic pH a fost nregistrat de proba de iaurt cu numrul 1.

4.4.4. Determinarea coninutului de grsimi din iaurt


Att laptele ct i iaurtul sunt bogate n grsimi. Pentru laptele de vac coninutul n
grsimi este cuprins n medie ntre 3545g/l, ceea ce asigur pn la 50% din valoarea
caloric a laptelui.

69
Tabelul nr. 4.4 Coninutul de grsimi
Grsime (g%) Grsime (g%)
Produs Valoare admis STAS
Valori individuale
Proba martor 2.8
Proba nr. 1 3.1
Proba nr. 2 3.2 minimum 2.8
Proba nr. 3 3.4
Proba nr. 4 3.4
Dup cum se observ din tabelul nr. 4.4 coninutul de grsimi, fa de proba martor
crete n raport cu creterea concentraiei de tocoferol adugat n produsul analizat.

4.4.5. Determinarea substanei uscate totale din iaurt


Tabelul nr. 4.5 Evoluia susbtanei uscate totale timp de 15 zile
Evoluia substanei totale uscate
Rezultate (%) Valoarea
Numr zile Proba maxim
Proba nr. 1 Proba nr. 2 Proba nr. 3 Proba nr. 4
martor admis
2 14.79 14.60 15.50 13.40 12.81
5 14.61 15.70 14.80 14.50 13.80
8 13.41 14.60 14.00 14.20 14.01 11.30
10 12.81 14.90 14.42 14.00 14.08
12 13.00 13.89 13.30 13.32 13.69
15 13.71 14.00 13.72 12.11 12.50

18

16

14
Substan uscat total (%)

12
Valoarea minim admis
10 Proba martor

8 Proba nr. 1
Proba nr. 2
6
Proba nr. 3
4
Proba nr. 4
2

0
2 5 8 10 12 15
Numr zile

Fig. 4.3 Reprezentarea grafic a evoluiei substanei uscate totale timp de 15 zile

Dup cum se observ din tabelul nr. 4.5 i din figura 4.3 coninutul de substan uscat
total din probele de iaurt variaz n limite destul mici. Substana uscat total variaz astfel:
70
Proba martor ntre 12,81 14,79%, cu o medie artimetic = 13,72
Proba nr. 1 ntre 13,89 15,70%, cu o medie artimetic = 14,62
Proba nr. 2 ntre 13,30 15,50, cu o medie artimetic = 14,29
Proba nr. 3 ntre 12,11 14,50%, cu o medie artimetic = 13,59
Proba nr. 4 ntre 12,50 14,08%. cu o medie artimetic = 13,48
Aceste diferene dintre rezultatele obinute n primele zile i urmtoarele zile se
datoreaz n principal unei deficiene a omogeniozrii probelor din lipsa unui omogenizator
profesional.
Diferena dintre coninutul de substan uscat a probei martor i celelalte probe este
dat de adaosul de vitamine din acestea.
Avnd n vedere faptul c valoarea minim admis pentru substana uscat total la
iaurturi este de 11,30% se observ din tabelul 4.5 c valorile obinute se ncadreaz n aceast
limit.

4.4.6. Determinarea umiditii din iaurt


n general n produsele alimentare apa se prezint sub diferite stri i anume:
apa liber, solventul substanelor dizolvate n aliment i care conserv proprietile apei
pure;
apa capilar i apa absorbit n suprafaa care reprezint forme intermediare, mdiu
reactive;
apa puternic absorbit, cunoscut i sub numele de ap de constituie, intim legat de
componenii biochimici de care nu poate fi separat dect prin tehnici laborioase.
Tabelul nr. 4.5 Evoluia umiditii timp de 15 zile
Evoluia umiditii
Rezultate (%) Valoarea
Numr zile Proba maxim
Proba nr. 1 Proba nr. 2 Proba nr. 3 Proba nr. 4
martor admis
2 85.21 85.40 84.50 86.60 87.19
5 85.39 84.30 85.20 85.50 86.20
8 86.59 85.40 86.00 85.80 85.99 88.70
10 87.19 85.10 85.58 86.00 85.92
12 87.00 86.11 86.70 86.68 86.31
15 86.29 86.00 86.28 87.89 87.50

71
89.00

88.00

87.00
Valoarea maxim admis
Umiditate (%)

86.00 Proba martor


Proba nr. 1
85.00
Proba nr. 2
84.00
Proba nr. 3
83.00 Proba nr. 4

82.00
2 5 8 10 12 15
Numr zile

Fig. 4.4 Reprezentarea grafic a evoluiei umiditii timp de 15 zile

Umiditatea probelor analizate variaz invers proporional cu substana uscat total i


se ncadreaz n limitele prevzute de lege.

4.4.7. Analiza microbiologic


Problema esenial n conservarea iaurtului este cerina din numeroase ri ca
microorganismele speficife iaurtului s fie vii. Microorganismele utilizate trebuie s fie
viabile, active i n numr important n produsul finit.
Prezena lactobacililor i streptococilor a fost evideniat prin realizarea de preparate
uscate (frotiuri) i const n etalarea iaurtului pe lam cu ajutorul firului metalic steril astfel
nct s se obin o distribuie foarte fin i omogen.
Apoi are loc uscarea care se efectueaz deasupra becului de gaz la 20 30 cm, urmat
de fixare, operaie realizat prin trecerea lamei cu faa preparatului prin flacra becului de gaz.
Apoi se adaug cteva picturi de fuxin, care se cltete n jeturi subiri de ap. Surplusul de
ap este ndeprtat cu ajutorul hrtiei de filtru i se adaug o pictur de ulei de cedru i se
observ la microscop cu ajutorul obiectivului x100.

72
Fig. 4.5 Analiza microscopic a Probei de iaurt etalon dup 2 zile

Fig. 4.6 Analiza microscopic a Probei de iaurt nr. 1 dup 2 zile

73
Fig. 4.7 Analiza microscopic a Probei de iaurt nr. 2 dup 2 zile

Fig. 4.8 Analiza microscopic a Probei de iaurt nr. 3 dup 2 zile

74
Fig. 4.9 Analiza microscopic a Probei de iaurt etalon dup 15 zile

Fig. 4.10 Analiza microscopic a Probei de iaurt nr. 1 dup 15 zile

75
Fig. 4.12 Analiza microscopic a Probei de iaurt nr. 3 dup 15 zile

Dup analiza microscopic a probelor de iaurt obinute se observ o cretere a


numrului de lactobacili i streptococi din compoziia acestor produse. Aceast cretere este
mai mare pentru proba de iaurt nr. 3, prob format din lapte cu un adaos de 400 mg de
tocoferol i 10 ml soluie apoas de acid ascorbic (~ 1 g acid ascorbic). Acest lucru este
datorat faptului c bacteriile lactice sunt microorganisme deosebit de pretenioase n privina
cerinelor nutritive. Ele au nevoie pentru dezvoltare, n afar de un zahr fermentescibil, acizi
aminai, de un sistem tampon capabil de a neutraliza cantiti mari de acid produs m timpul
dezvoltrii i de mai multe vitamine.
De asemenea, nu se observ prezena n probele de iaurt analizate a bacteriilor
patogene i a bacteriilor coliforme.

Analiza rezultatelor experimentale obinute n urma determinrilor efectuate la lapte i


probele de iaurt fabricate, unde s-au urmrit civa parametri importani, ne putem permite s
formulm cteva concluzii:
laptele utilizat corespunde condiiilor pe care trebuie s le ndeplineasc pentru a putea
fi folosit la obinerea iaurtului, conform STAS 2418-61.
aciditatea probelor n care au fost adugai antioxidani naturali, n diferite
concentraii, este n primele zile mai mare dect aciditatea titrabil a probei martor,
apoi devine uor mai mic dect aciditatea probei luate ca etalon. Ea se incadreaz sub
limita prevzut de STAS 3685-80
pH probelor este invers proporional cu aciditatea titrabil.
coninutul de grsime al probelor cu adaos de tocoferol crete uor, n funcie de
cantitatea de extras uleios de tocoferol adugat n probele cercetate.
coninutul de ap din variantele de iaurt obinute se nscrie n limitele prevzute de
norme.

76
numrul lactobacililor i streptococilor crete mai ales n probele de iaurt cu adaos de
vitamine.
n ceea ce privete substana uscat total, aceasta variaz invers proporional cu
coninutul de ap al probelor analizate. i acest parametru se nscrie n limitele
prevzute de norme.

77
CONCLUZII
Avnd n vedere importana deosebit a produselor lactate acide pentru organismul
uman i interesului deosebit privind studiul ameliorrii conserviabilitii acestor produse, n
lucrarea de fa s-a urmrit obinerea unor variante de iaurt n care s-a adugat diferite
cantiti de antioxidani naturali (reprezentai de -tocoferol i acid ascorbic) i s-a urmrit
influena acestora prin urmrirea variaiei unor parametri fizico-chimici i comparea lor cu
parametrii unei probe martor de iaurt.
Iaurtul fabricat n condiii convenionale are o durat de minimum 8 10 zile la o
temperatur de 10C obinuit n reeaua comercial. Tendina de concentrare a produciei i
de extindere a comerului cu acest tip de produse necesit creterea duratei de conservare la 3
4 sptmni.
Studiind aceast problem Kurman consider c se poate obine o durat de
conservare a iaurtului de cel puin 4 sptmni printr-o biostabilizare bazat pe tehnologia
clasic de fabricaie nelegnd prin aceasta dirijarea diferiilor factori care influeneaz
conserviabilitatea, n scopul ncetinirii sau chiar al opririi transformrilor de origine
enzimatic i chimic, fr modificarea calitilor naturale ale produsului. Pentru aceasta este
necesar s se ia o serie de msuri pe parcursul procesului tehnologic, de la materie prim i
pn la depozitare i transport. Pentru moment, maximum de rezultate se pot obine folosind
culturi anume selecionate i luptnd contra infeciilor microbiene.
n ultimii ani s-au introdus o serie de procedee avnd drept scop prelungirea duratei de
conservare a iaurtulu. Acestea sunt:
uperizarea laptelui;
tehnica tratrii aseptice;
conservarea chimic;
conservarea ternic.
Este foarte greu de realizat fabricaia n condiii de lips absolut de infecie.
Titlul lucrrii este Influena antioxidanilor naturali asupra produselor lactate acide.
Aceast lucrare este structurat pe 4 capitole.
n capitolul 1 denumit Produse lactate acide s-au prezentat unele aspecte generale
ale acestor produse, compoziia chimic a materiei prime din care sunt obinute acestea,
culturile starter utilizate, precum i importana produselor lactate acide asupra corpului uman.
n capitolul 2 intitulat Tehnologia de obinerea a iaurtului s-a descris schema
tehnologic de fabricaie a iaurtului prin adaos de tocoferoli i acid ascorbic, folosii ca
antioxidani naturali, precum i elaborarea planului HACCP.
n capitolul 3 denumit Analiza produselor lactate acide s-a prezentat metodele ce au
stat la baza realizrii prii experimentale acestei lucrri. S-au determinat o serie de parametri
cum ar fi: aciditatea titrabil, pH-ul, coninutul de grsime, coninutul de ap i substan
uscat total. n urma acestor determinri am desprins urmtoarele concluzii:
laptele utilizat corespunde condiiilor pe care trebuie s le ndeplineasc pentru a putea
fi folosit la obinerea iaurtului, conform STAS 2418-61.

78
aciditatea probelor n care au fost adugai antioxidani naturali, n diferite
concentraii, este n primele zile mai mare dect aciditatea titrabil a probei martor,
apoi devine uor mai mic dect aciditatea probei luate ca etalon. Ea se incadreaz sub
limita prevzut de STAS 3685-80.
pH probelor este invers proporional cu aciditatea titrabil.
coninutul de grsime al probelor cu adaos de tocoferol crete uor, n funcie de
cantitatea de extras uleios de tocoferol adugat n probele cercetate.
coninutul de ap din variantele de iaurt obinute se nscrie n limitele prevzute de
norme.
numrul lactobacililor i streptococilor crete mai ales n probele de iaurt cu adaos de
vitamine.
n ceea ce privete substana uscat total, aceasta variaz invers proporional cu
coninutul de ap al probelor analizate. i acest parametru se nscrie n limitele
prevzute de norme.
n final s se poate afirma c se observ o uoar ameliorare a conservibilitii
produselor lactate acide cu adaos de antioxidani fa de proba folosit ca etalon.

79
BIBLIOGRAFIE

1. Avrmiuc, M. Biochimie, vol. I, Editura Universitii Suceava, Suceava


2001
2. Bahrim, G., Borda, D., Costin, Gh. M., i col. Produse lactate
fermentate , Editura Academica, Galai, 2005,
3. Banu, C. i col. Biotehnologii n industria alimentar, Editura Tehnic,
Bucureti 2000,
4. Banu, C. i col. Manualul inginerului din industria alimentar, vol. II,
Editura Tehnic, Bucureti 1999,
5. Banu, C. i col. Tratat de industrie alimentar, Editura ASAB, Bucureti
2009,
6. Banu, C., Buu, N., Lungu, C., Alexe, P., Rsmeri, D., Vizireanu, C.
Aditivi i ingrediente pentru industria alimentar, Editura Tehnic,
Bucureti, 2000,
7. Banu, C., Vizireanu, C. Procesarea industrial a laptelui, Editura
Tehnic, Bucureti 1998,
8. Brzoi, D., Apostu, S. Microbiologia produselor alimentare, Editura
Risoprint, Cluj-Napoca, 2002
9. Bondoc, I. Tehnologia i controlul calitii laptelui i produselor lactate,
vol. I, Editura Ion Ionescu de la Brad, Iai 2007,
10. Bondoc, I., indilar, E.V. Controlul sanitar al calitii i salubritii
alimentelor, vol. I, Editura Ion Ionescu de la Brad, Iai 2002,
11. Chintescu, G. Produse lactate tradiionale, Editura Ceres, Bucureti
1998,
12. Codoban, J., Codoban, I. Procesarea laptelui n secii de capacitate
mic, Editura Cetatea Doameni, Piatra Neam 2008,
13. Gu, C. Laptele i produsele lactate, Editura Risoprint, Cluj Napoca
2002,
14. Gutt, S. Aditivi n industria alimentar note de curs
15. Idioiu, C. Aditivi aimentari note de curs
16. Iurca, I.M. Laptele i produsele lactate, Editura I.C.I.P.A.F., Cluj-
Napoca, 1998,
17. Ordinul M.S. 975/1998 Privind aprobarea normelor igienico-sanitare
pentru alimente,

80
18. Ptracu, C., Ptracu, Al. Laptele aliment i materie prim, Editura
Tehnic, Bucureti 1995,
19. Poroch-Serian, M. Igiena alimentaiei, Editura Universitii Suceava,
Suceava 2006
20. Reico, V. Tehnologia laptelui note de curs
21. Rotar, R. Microbiologia produselor alimentare, Editura Universitii
Suceava, Suceava 2004
22. Segal, R. Biochimia produselor alimentare, Editura cademica, Galai
2006,
23. Spreer, E. - Milk and Diary Products Technology, Marcel Bekker, Inc.
New York, 1998
24. Instruciuni tehnologice, lapte i produse lactate, Bucureti 1997,
25. www.adevrul.ro.
26. http://ro.wikipedia.org

81

S-ar putea să vă placă și