Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Curs de Microbiologie Alimentara (NICOLE-LIVIA ATUDOSIEI, 2003) PDF
Curs de Microbiologie Alimentara (NICOLE-LIVIA ATUDOSIEI, 2003) PDF
NICOLE-LIVIA ATUDOSIEI
PAUL STEFANESCU
2003
UNIVERSITATEA BIOTERRA BUCURESTI
FACULTATEA DE CONTROL SI EXPERTIZA A
PRODUSELOR ALIMENTARE
NICOLE-LIVIA ATUDOSIEI
PAUL STEFANESCU
2003
PARTEA I
Capitolul 1
INTRODUCERE IN MICROBIOLOGIE
3
In unele ramuri industriale, microbiologia formeaza cvasitotalitatea
proceselor tehnologice. Se pot exemplifica astfel industriile fermentative,
panificatia, productia antibioticelor, s.a., domenii in care cunoasterea fiziologiei si a
metabolismului microorganismelor permite dirijarea corecta a proceselor
tehnologice in vederea obtinerii unor produse utile vietii si activitatii umane, de
calitate superioara si cu randamente ridicate.
Principalele ramuri subordonate ale microbiologiei, cu statut aparte si avand
preocupari specifice, sunt:
4
• microbiologia mediului - studiaza microorganismele prezente in sol, apa si
aer, ocupandu-se de solutionarea problemelor practice din domeniul sanitar;
• biotehnologia - include orice proces prin care oamenii utilizeaza
microorganisme sau procese biologice pentru obtinerea unui produs dorit;
• microbiologia industriala - utilizeaza microorganisme pentru a produce
cantitati mari de produsi utili ca: vitamine, aminoacizi, enzime, medicamente;
• ingineria genetica - implica tehnici care in mod deliberat modifica fondul
genetic al organismelor pentru a induce obtinerea de noi combinatii genice.
Reprezinta cel mai dinamic domeniu al microbiologiei moderne.
8
In Romania, doi savanti de renume mondial, VICTOR BABES si IOAN
CANTACUZINO au contribuit la fondarea Microbiologiei moderne.
VICTOR BABES (1854-1926) a lucrat in laboratorul lui Pasteur, iar mai
tarziu in laboratorul lui Koch. De formatie anatomo-patolog, si-a insusit tehnicile
microbiologice si a orientat investigatia medicala spre studiul actiunii reciproce
microorganism-gazda. A colaborat cu A.V. Cornil la primul Tratat de Bacteriologie
din lume aparut la Paris in 1885. A descoperit noi specii microbiene, a pus in
evidenta corpusculii Babes-Negri in celulele nervoase ale indivizilor morti de
turbare si corpusculii Babes-Ernst in bacilii difterici. In cercetarile sale asupra
antagonismului bacterian a anticipat descoperirea antibioticelor; a studiat
numeroase boli infectioase. Este creatorul Institutului "Victor Babes" din Bucuresti
si organizatorul primelor laboratoare de igiena si bacteriologie.
IOAN CANTACUZINO (1863-1936), format in laboratorul condus de
Mecinikov la Institutul Pasteur din Paris, a continuat cercetarile maestrului sau
privind imunitatea nevertebratelor. A studiat patogenia holerei, tuberculozei si a
altor boli, vaccinul si vaccinarea antiholerica . A creat Scoala contemporana de
microbiologie, initial in laboratorul de medicina experimentala al Facultatii de
Medicina din Bucuresti, apoi in Institutul de Cercetari Microbiologice pe care l-a
fondat in 1921.
Opera acestor doi mari savanti romani a fost continuata de alti savanti de
reputatie internationala: Constantin Levaditi, Dumitru Combiescu, Constantin
Ionescu-Mihaiesti, Stefan Nicolau, Mihai Ciuca, Gheorghe Zarnea si altii.
In perioada de dupa 1910, din totalul premiilor Nobel pentru medicina si
fiziologie, peste o treime au fost acordate microbiologilor si specialistilor in
discipline inrudite. Microbiologia continua sa progreseze in fiecare an cu ajutorul a
noi tehnici si noi date furnizate de cercetare.
9
Capitolul 2
2.1 DEFINITII
10
Clasificarea este aranjarea ordonata a organismelor in grupe, preferabil
intr-un sistem bazat pe relatii evolutive.
Nomenclatura este procesul de desemnare a numelor pentru diferitele
ranguri taxonomice ale fiecarei specii de microorganisme.
Identificarea este procesul de descoperire si inregistrare a trasaturilor
organismelor, asfel incat ele sa poata fi introduse intr-o schema taxonomica
globala.
Toti acesti termeni se aplica in sistematica, ce reprezinta studiul diversitatii
microorganismelor si al relatiilor intre ele.
12
2.4 SISTEMUL NATURAL, FILOGENETIC, DE ORGANIZARE A LUMII VII
13
Regnurile Plantae si Animalia nu includ microorganisme, fiind reprezentate de
organisme macroscopice, multicelulare. Plantele sunt alcatuite din celule eucariote
cu perete celular si sunt fotosintetizante. Celulele animalelor sunt lipsite de perete
celular, iar tipul de nutritie pentru acest regn este nutritia ingestiva.
Capitolul 3
MORFOLOGIA MICROORGANISMELOR
14
• ce sunt viroizii si prionii
3.1 DEFINITII
17
regula generala. Majoritatea celulelor au un singur nucleu, dar exista si celule
polinucleare in structuri biologice superioare.
Nucleul se compune din: nucleol, carioplasma (suc nuclear) si
membrana nucleara.
Nucleolul este o formatiune structurala din interiorul nucleului in compozitia caruia
intra ARN si ADN, rolul sau fiind acela de formare a ARN-ului pe care-l transfera in
citoplasma, transmitand acesteia informatia genetica continuta in ADN si
cromozomi.
Carioplasma*, sub aspect compozitional, este citoplasma continand in plus
cromatina **– formata din acizi nucleici legati de proteine filamentoase, constituind
substratul material al cromozomilor - si linina (acromatina)**.
*grec. haryon – fara nucleu
**grec. a – fara. Chroma- culoare; parti din nucleu care reactioneaza
sau nu la coloranti bazici caracteristici pentru cromozomi – W.
Fleming, 1879
Membrana nucleara este formata din trei straturi membranoase stratificate,
traversate de pori prin care are loc schimbul de substante intre nucleu si
citoplasma.
3.3 VIRUSURILE
19
Capsida
Invelis
Anvelopa (nu este prezenta la
toate virusurile)
Particula virala (virion)
3.4 BACTERIOFAGII
20
Exista unele virusuri care paraziteaza celulele bacteriene si provoaca
distrugerea lor. Acestea poarta denumirea de bacterioifagi, mancatori de bacterii
si sunt raspandite in toate mediile in care se gasesc bacterii. Caracteristic acestora
este forma de cireasa cu coada; capul rotund cuprinzand ADN inconjurat de un
invelis proteic,capsida,in care se afla o molecula de AND (sau ARN viral) iar
coada,pedicel, formata din proteine, are la partea terminala o zona enzimatica
capabila sa dizolve peretele celulei bacteriene, creand o bresa prin care infuzeaza
ADN propriu. In prezenta unei bacterii, fagul este absorbit la suprafata celulei
bacteriene,dizolva membrana, si prin pedicel injecteaza AND-ul fagic,care preia
toate functiile de multiplicare.Prin multiplicarea ADN-ului bacteriofagului are loc
dizolvarea celulei bacteriene si eliberarea virusului care poate ataca noi celule.
Aceasta comportare reprezinta ciclul litic sau vegetativ,iar bacteriofagul se
numeste virulent.. Daca sub aspect medical actiunea bacteriofagilor este benefica,
ei fiind folositi in combaterea unor infectii, in unele domenii de activitate, acolo
unde se utilizeaza bacterii, de exemplu in biotehnologii, virozarea cu bacteriofagi
poate avea efecte catastrofale, compromitand uneori in totalitate productiile. Din
acest motiv, cunoasterea fiziologiei si a morfologiei virusurilor bacteriofagi, a
conditiilor lor de dezvoltare, constituie un factor esential in salvarea productiei.
23
Morfologia propriu-zisa a bacteriilor se refera la: forma celulei, dispozitia
spatiala sau forma de existenta, dimensiunile si afinitatea tinctoriala.
Principalele forme celulare ale bacteriilor sunt: sferica, cilindrica si curba
- spiralata.
Forma sferica se refera la coci. Daca celulele formate prin diviziune se
separa si raman independente se numesc micrococcus; cand cocii sunt grupati
perechi sunt denumiti diplococcus; daca ei sunt dispusi in lant se numesc
streptococcus; dispunerea pe doua planuri perpendiculare a cocilor are
denumirea de tetrade, iar structura de ciorchine (grupuri neregulate) este
denumita staphylococcus.
Forma cilindrica – alungita, de bastonas – poate exista in doua forme si
anume: vegetativa – care reprezinta starea de viata activa a celulei cu toate
functiile normale, si sporulata – forma de rezistenta, de autoconservare, pana se
indeplinesc conditiile normale de transformare a sporului in forma vegetativa.
Sporul este o formatie endocelulara (in interiorul celulei) ce se formeaza pentru
asigurarea unei vieti latente a celulei pe timp mai indelungat. Bacteriile izolate
asporulate (nesporulate) sunt denumite bacterium, iar cele sporulate se
numesc bacillus. Ambele tipuri de bacterii pot fi dispuse spatial in lant, caz in care
se numesc streptobacterii in palisada (ca scandurile gardului), dar mai pot fi si
alte aranjamente spatiale.
Bacteriile spiralate au corpul format dintr-o jumatate de spira – ca semnul
virgulei – si se numesc vibrioni (vibrio), sau din mai multe spire – spirochete
(spirochet) nedeformabile – ex: genul Leptospira – si deformabile – ex: genul
Borrelia.
In afara acestor 3 forme majore de bacterii, mai exista si unele mai rar
intalnite in special la germenii saprofiti: forma patrata, elipsoidala denumirea fiind
cea de cocobacili,fusiforma, etc.
Dimensiunea diametrului cocilor variaza intre 1 – 5 micrometri, iar bacilii au
lungimea de 0,5 – 10 micrometri si diametrul între 0,3 si 0,5 micrometri, ei
putandu-se clasifica in: scurti, in lungime medie de 2 micrometri si lungi, la care
lungimea este de aproximativ 10 micrometri.
24
4.2 EXAMENUL MICROSCOPIC
25
Preparatele colorate prezinta avantajul ca sunt sterilizate prin fixare, sunt
usor de manipulat si de examinat si pot fi pastrate mult timp. Aceste preparate
permit diferentierea bacteriilor dupa afinitatea lor pentru anumiti coloranti si pot
evidentia unele elemente structurale (cili, capsula, spori, granulatii, etc.) prin
coloratii speciale.
Examinarea preparatelor colorate se face astfel: se centreaza lumina, se
ridica condensatorul, se lasa diafragma deschisa si se pune o picatura de ulei de
cedru pe frotiu.
Cu ajutorul macrovizei se coboara tubul optic si se introduce lentila frontala
a imersiei in ulei de cedru pana in imediata apropiere a frotiului. Punerea la punct
se face cu ajutorul vizei micrometrice, iar deplasarea lamei pentru schimbarea
campurilor microscopice se obtine cu ajutorul carului mobil.
Dupa examinare se ridica obiectivul, se sterge uleiul de cedru de pe imersie
si se scoate lama de pe platina microscopului.
Coloratiile simple
Coloratia cu albastru de metilen. Frotiul uscat si fixat apoi la flacara este
acoperit cu o solutie de albastru de metil timp de 1-2 minute. Se spala dupa aceea
frotiul cu apa de robinet, se lasa sa se usuce si se examineaza la microscop cu
obiectivul cu imersie.
Prin aceasta metoda, toate elementele din campul microsopic apar colorate
in albastru. Este o coloratie rapida, care pune in evidenta forma, gruparea si,
eventual, raporturile germenilor cu leucocitele sau cu alte elemente prezente in
frotiu.
Coloratia cu fucsina fenicata Ziehl diluata 1/10 se efectueaza in acelasi mod
ca si cea cu albastru de metilen. Elementele din frotiu apar colorate in rosu.
Coloratiile diferentiale
Coloratia Gram. Este o coloratie foarte utilizata in bacteriologie, deoarece
imparte bacteriile in doua mari categorii: bacterii Gram-pozitive si bacterii Gram-
negative.
Tehnica coloratiei este urmatoarea:
• frotiul uscat este fixat prin caldura;
• se acopera lama cu solutie apoasa de violet de gentiana si se lasa timp de 1-2
min.;
• se indeparteaza colorantul si se acopera lama cu solutie Lugol pentru 2 min.;
28
• se indeparteaza mordantul (solutia Lugol) si se trateaza frotiul cu alcool-acetona
timp de cateva secunde;
• se spala rapid lama cu apa de robinet si se acopera cu fucsina diluata 1/10 in
apa timp de 30 sec. pana la 1 min;
• se indeparteaza fucsina si se spala frotiul cu apa de robinet; dupa uscare se
examineaza la microscop cu obiectivul cu imersie.
Bacteriile Gram-pozitive rezista la decolorare, ramanand colorate in violet,
dar cele Gram-negative sunt decolorate de alcool-acetona si recolorate in rosu.
Coloratia Ziehl-Nielsen se aplica in cazurile mycobacteriilor care au in
compozitia peretelui celular acid micolic si le confera impermeabilitate la colorantii
folositi in tehnica gram. Pentru acesti germeni numiti acid-alcool rezistenti (AAL)
se foloseste aceasta tehnica speciala.
Tehnica folosita pentru coloratie:
• frotiul uscat se fixeaza la flacara;
• se acopera lama cu fucsina fenicata Ziehl si timp de 10 min se incalzeste
intermitent, cu ajutorul unei lampi de alcool sau cu flacara unui bec Bunsen
pana la emiterea de vapori, fara a se ajunge la fierbere; fucsina evaporata prin
incalzire se inlocuieste imediat;
• se indeparteaza colorantul, se spala frotiul cu apa de robinet si se decoloreaza
cu acid azotic diluat 1/3 sau acid sulfuric diluat 1/4;
• se indeparteaza acidul si se spala lama cu apa de robinet, dupa care se
decoloreaza frotiul cu alcool de 96o;
• se indeparteaza alcoolul si se spala frotiul din nou, cu apa de robinet, dupa care
se recoloreaza cu o solutie apoasa de albastru de metilen 1% timp de 1min.;
• se spala frotiul cu apa de robinet, se lasa sa se usuce si se examineaza la
microscop cu obiectivul de imersie.
Coloratii speciale
29
Metoda Burri. Pe o lama perfect curata se pun o picatura din susopensia de
bacterii capsulate si o picatura de tus de China. Dupa ce se omogenizeaza, se
face un frotiu prin etalarea amestecului cu o alta lama.
Se lasa sa se usuce si se examineaza la microscop cu obiectivul cu
imersie. Pe fondul negru al preparatului, bacteriile impreuna cu capsulele lor apar
incolore.
Coloratia Loeffler cu albastru de metilen se efectueaza cu o solutie
invechita de albastru de metilen Loeffler. Prin aceasta coloratie corpul bacterian se
coloreaza in albastru, iar capsula, in roz.
Coloratia pentru cilii bacterieni. Cilii nu pot fi vazuti la microscopul optic pe
preparatele native sau pe frotiurile cu coloratii obisnuite. Pentru a fi pusi in
evidenta se folosesc metode speciale de coloratie
Metoda Zettnow. Coloratia dupa aceasta metoda se esfasoara astfel:
• se prepara o suspensie diluata de germeni in apa distilata, astfel incat sa se
obtina pe frotiu celule izolate; din aceasta se iau 2-3 picaturi cu o pipeta Pasteur
si se depun pe o lamela degresata si flambata;
• se lasa frotiul sa se usuce, dupa care se fixeaza cu formol diluat 1/10, timp de
10 min.;
• se pune lamela in apa distilata timp de 3 min dupa care se introduce intr-o
solutie de tanin si de tartrat dublu de stibiu si potasiu, incalzita la 60-70oC, timp
de 10 min.;
• se scoate lamela cu o pensa si se clateste bine in apa distilata;
• se acopera frotiul cu o solutie de sulfat de argint si amoniac care se prepara in
momentul folosirii si se incalzeste usor la flacara, timp de 30 - 60 sec.;
• se spala frotiul cu apa distilata, se usuca si se monteaza in ulei de cedru, prin
aplicarea lamelei cu frotiul in jos pe o lama foarte curata, dupa care poate fi
examinata la microscop.
31
Unele bacterii au la exteriorul peretelui celular o structura complexa, ce
favorizeaza aderenta acestora la alte structuri sau mobilitatea celulelor.
Structurile externe, considerate structuri facultative, sunt capsula, flagelii
si pilii, aflati in afara invelisului bacterian.
Capsula, stratul ce acopera celula, este de natura mucopoliglucidica sau
mucoproteica. Stratul mucilaginos care poate ajunge la grosimi de 2 micrometri
imprima bacteriilor proprietati de aderenta si rezistenta la factori chimici si fizici
(antibiotice si lipsa de apa). Totodata, datorita calusului unele celule se pot asocia
dand formatiuni vizibile cu aspect gelatinos. Capsula reprezinta uneori, datorita
rezistentei la agentii fizico-chimici si biologici, un factor de patogenitate si de
specificitate antigenica.
Flagelii sunt formatiuni filamentoase prezente la unele bacterii, denumite mobile,
ca organe de locomotie. Unele bacterii au un singur flagel sau un manunchi de
flageli polarizat la un capat al celulei, la altele flagelii sunt amplasati pe intreaga
suprafata a celulei in numar foarte mare (de ordinul 100 si 1000), iar lungimea lor
poate atinge si 20 de micrometri, caz in care sunt cunoscuti sub numele de cili.
Cel mai adesea nu exista simultan cili si flageli.
Ca structura, flagelii sunt alcatuiti dintr-o proteina specifica, cu structura
helicoidala denumita flagelina. Datorita structurii helicoidale si a specificitatii,
flagelina este contractila. Ea se fixeaza la spatiul periplasmic cu ajutorul unor
formatiuni denumite carlig si discuri.
Flagelii se pot roti cu 40-60 de rotatii pe secunda in ambele sensuri de
rotire (dreapta, stanga), imprimand datorita structurii helicoidale o miscare de
deplasare a celulei bacteriene cu viteze de 2 pana la 100 de ori mai mare ca
lungimea celulei intr-o singura secunda (spre comparare, campionul mondial la
100 m plat este de numai 5-6 ori mai rapid in raport cu inaltimea sa). Celulele
mobile cu un singur flagel sunt numite monotriche, cele cu doi flageli, amfitriche,
multiflagelate polare, lofotriche, iar ciliatele peritriche.
Pilii sunt structuri proteice care acopera complet suprafata bacteriilor; pilii
comuni, au rol de aderenta bacteriana; altii sunt implicati in conjugarea bacteriana
permitand trecerea materialului genetic de la o bacterie la alta, fiind cunoscuti ca
pili sexuali (Factor F).
Pilii comuni – numiti si fimbrii, sunt apendici filamentari rigizi, ce nu
folosesc la deplasare, cu lungimi de aproximativ 1 micrometru si diametrul de
32
circa 3 nanometri; sunt compusi dintr-un singur tip de proteina cu molecula in
forma de filament helicoidal. Pe acesti pili exista receptori ce recunosc numai
anumite structuri din organism si, prin aceasta, intervin in patogenitate, avand
specificitate imuno-patogenica.
35
vechi dezintegrandu-se. In faza de spor matur, sporii elipsoidali sunt inlantuiti si
legati de filamentul vegetativ doar printr-o singura membrana.
Mai sunt si alte tipuri de spori, ca de exemplu cei de origine hifala
(artrospori)*, ce provin din ingrosarea peretilor celulelor vegetative si acumularea
de substante de rezerva, ori gonidiile rezultate prin contractia, condensarea si
divizarea protoplasmei unei celule vegetative avand rol de reproducere (la
Leptothrix ochracea), deosebindu-se intre ei atat structural, cat si prin rolul lor
biologic.
Apa reprezintă 70-80% din masa celulara si se gaseste sub doua forme:
apa libera si apa legata de compusii moleculari ai celulei bacteriene. Ea
constituie un mediu propice dispersarii componentelor celulare si participa la
reactiile biochimice din metabolismul bacterian. Metabolismul – schimbul de
substante chimice dintre celule si mediu - nu poate avea loc decat in solutii
adevarate sau coloidale. Continutul de apa al celulelor permite reglarea presiunii
osmotice celulare si utilizarea substantelor chimice la nivel atomic si molecular
prin dilutii, disocieri si polarizari. Prezenta apei in celula imprima acesteia
mobilitatea structurala, schimbarea formei si elasticitatea necesara adaptarii la
36
medii diferite. Intre formele vegetativa si sporulata exista diferente ale continutului
de apa, cu deosebire a apei libere, sporii avand doar 15-20% apa sub forma de
apa legata.
Proteinele participa cu o pondere de 30-80% in masa uscata a celulei
bacteriene, la structura careia participa mai mult de 23 aminoacizi, dintre care unii
specifici doar bacteriilor, cum sunt: Diaminopimelic, Aminopimelic, Theicoic,
sau izomerii seriei D ai Alaninei si Acidului glutamic. Proteinele se gasesc
sub forma de aminoacizi, peptide simple sau polipeptide sau participa ca proteine
complexe (heteroproteine).
Heteroproteinele prezinta cea mai mare importanta pentru fiziologia
celulara bacteriana datorita posibilitatii acestora de a realiza multiple combinatii
biochimice complexe in functie de necesitatile fiziologice. Se vor intalni astfel
combinatii binare sau polinomiale glucido-lipido-polipeptidice cum sunt
mucoproteinele, cromoproteinele, acizii nucleici, enzimele, s.a.
Rolul proteinelor in celula bacteriana este ,de asemenea, complex si
vizeaza atat constructia celulara propriu-zisa (rol plastic), cat si transmiterea
caracterelor genetice( energetic, antigenic, patogenic, enzimatic) etc.
Enzimele sunt derivati proteici avand rol biocatalitic; se formeaza in
celulele bacterie influentand desfasurarea reactiilor intracelulare (de exemplu
mitocondriale) si extracelulare (cu rol antigenic, patogenic) sau ectocelulare
(avand rol in permeabilitatea selectiva). Avand o specificitate de substrat, de grup
si sterica, enzimele din zestrea celulei bacteriene – cca. 2000 – fac parte din toate
clasele de enzime*: oxidoreductaze, hidrolaze, transferaze, liaze, izomeraze,
ligaze.
*C. Bodea – tratat de biochimie vegetala, vol. I, Ed. Academica
Bucuresti, 1964, clasificarea dupa Conp. V int. Biochimie , 1961
Enzimele pot aparea in fiziologia si metabolismul bacteriilor prin inductie,
ele numindu-se enzime inductive, existand numai la comanda si in prezenta
inductorilor specifici sau ca o zestre celulara, acestea fiind cunoscute sub numele
de enzime constitutive.
Glucidele reprezintă 15-20% din masa substantei uscate a bacteriilor, in
compozitia acesteia fiind cuprinse toate tipurile de glucide: omogene sau
neomogene, simple si complexe. Ele sunt foarte importante pentru bacteriile
anaerobe pentru care constituie singura sursa de nutritie. Rolul glucidelor in celula
37
bacteriana este plurivalent si anume: energetic, structural, antigenic, patogenic
sau de rezistenta celulara, etc. Este evident ca ele prezinta importanta capitala ca
sursa de energie si ca substanta plastica ce intra in constitutia cvasitotalitara a
tuturor partilor morfologice celulare. Ca o caracteristica specifica bacteriilor Gram-
pozitive este prezenta complexului poliglucidic neomogen – mureina.
Lipidele din bacterii variaza in limite foarte largi in raport cu specia
microorganismelor, dar si cu conditiile de mediu (metaboliti, substrat etc.) sau
stadiul de maturitate. In general, continutul de lipide este de 2-14% din substanta
uscata celulara, dar unele mycobacterii (Mycobacterium tuberculosis Koch)au si
mai mult(30%). Lipidele bacterine sunt omogene (acizi grasi, gliceride, ceruri)
si complexe (fosfolipide, lipoproteine, lipogliceni, etc.). Ceea ce-i specific
bacteriilor este prezenta in celulele lor, in peretele mycobacteriilor, a acizilor grasi
micoici (ac. Tuberculostearic , ac. Dicolipenic , ac. Micocerosic ) componenti ai
cerurilor. Pentru bacterii este caracteristica lipsa steridelor (esteri ai alcoolilor
policiclici numiti steroli). Totusi in Azobacter chroococcum, fixator de azot, s-a gasit
un sterol (Schifferd, Anderson, 1936) cu structura neprecizata.
Rolul lipidelor este divers, dar functiile energetice si de permeabilitate par a
fi preponderente in fiziologia celulara bacteriana. Lipidele complexe, cum sunt
fosfatidele, contin elemente structurale atat hidrofile, cat si lipofile, astfel ca
solutiile lor apoase, de natura coloidala, joaca un rol important in reglarea
permeabilitatii celulare. Fosfatidele pot absorbi glucide si protide, care pot fi
eliberate dupa nevoie, prin desorbtie. In acest fel, ele pot functiona si ca
transportori de substante in celulele bacteriene, iar alaturi de acizii ribonucleici au
rol in biosinteza proteinelor.
Continutul de substante minerale reprezinta 3-30% din substanta uscata a
bacteriilor, acesta variind in functie de specie si de varsta. Rolul substantelor
minerale rezida in primul rand din faptul ca formarea compusilor la nivel molecular
se face sub forma unor complecsi ce contin obligatoriu elemente minerale sub
forma ionica. Acestia (de ex. Ca, Mg) intra in structurile celulare, deci au rol
plastic, ori activeaza sistemele enzimatice (citocromoxidazele cu fier), participa la
formarea si transformarile acizilor nucleici (fosforul), regleaza presiunea osmotica
celulara si permeabilitatea celulara (sodiul, potasiul, sulful), precum si potentialul
de oxido-reducere la nivelul celular, etc. Oligo si microelementele minerale,
38
caracterizate prin reactivitate chimica ori labilitate electronica ridicate, sunt
intotdeauna intalnite in celulele bacteriene (de ex. K, Na, Fe, Ca, Mg, S, Cu s.a.).
Pentru organismul uman, bacteriile sunt o bogata sursa de vitamine,
deoarece ele sunt capabile sa sintetizeze aceasta categorie de substante, cu
deosebire vitaminele hidrosolubile din grupul B. Astfel, vitamina B1 (tiamina) este
sintetizata de bacterii in oxidarile intracelulare si metabolismul glucidelor, ca de
altfel si vitaminele B2 (riboflavina) si B3 (vitamina PP), vitamina B4 (adenina) ce
participa in calitate de cofactor in reactiile nucleatidelor.
Acidul folic (vitamina B9) este cunoscut ca un factor de crestere pentru mai
multe specii de bacterii (B.subtilis, Lactobacillus sp. etc.) fiind cofactor necesar
biosintezei compusilor purinici. Cresterea unor microorganisme bacteriene, ca de
exemplu Lactobacillus lactis Dorner, nu ar fi posibila fara prezenta vitaminei B12
(ciancobalamina). Vitamina H, acidul para amino benzoic, este denumit si
“vitamina vietii bacteriilor”, deoarece reprezinta pentru acestea un metabolit primar
absolut necesar vietii si inmultirii lor ,fiind si un factor de crestere.
In functie de specie, bacteriile pot sintetiza pigmenti, ce se intalnesc in
celula (bacterii cromofore), legati endocelular de perete, ca in cazul stafilococilor
(bacterii paracromofore) sau la exteriorul celulei bacteriene, ca la Pseudomonas,
bacteriile din aceasta grupa fiind numite cromopare.
Pigmentii pot fi sintetizati pentru un anumit scop (de protectie, ca de
exemplu carotenoizii, pentru functia de coenzima in sistemele transmitatoare de
electroni si de fosforilare oxidativa, de structura, pentru elementele functionale ale
mitocondriilor*, ca factor de crestere pentru unele bacterii) sau pot rezulta din
procesele catabolice.
* mitos – fir; chondros – graunte; mitocondrie – organit subcelular in
care se regaseste sediul fosfonilarii oxidative, absenta la procariote
Bacteriile mai pot avea o serie de substante avand rol bactericid sau
bacteriostatic asupra altor specii sau chiar impotriva propriei specii (substante
purtand numele de bacteriocine).
Metabolismul bacterian
40
majoritatea bacteriilor; anaerobe microaerofile - care contin in cantitati mici
catalaze si suporta unitati reduse de oxigen molecular.
** potentialul de oxido-reducere este diferenta de potential dintre un
electrod inatacabil (platina, aur, carbune) si un sistem de oxido-
reducere – care elibereaza electroni.
Metabolismul de sinteza reprezinta totalitatea proceselor metabolice cu
consum de energie care duc la sinteza unor produse necesare cresterii si
multiplicarii bacteriilor. In functie de modul de procurare a acestor substante, pot fi
deosebite 3 tipuri de bacterii: autotrofe* - care isi procura carbonul si aportul din
substante anorganice (CO2, NH3-, NO3-); heterotrofe* - la care sursele de C si N
provin din surse organice si isi pot sintetiza singure metabolitii esentiali; paratrofe*
- ce se dezvolta doar intracelular si nu isi pot sintetiza singure metabolitii esentiali.
*gr. autos – insusi; trephein – a hrani; heteros – altul; para – alaturi.
Bacteriile sunt niste fiinte vii si, astfel, ele cresc, se inmultesc si mor. Acest
proces complex nu se refera numai la indivizi, ci si la populatia bacteriana in
totalitate. In primul caz biologia cresterii si dezvoltarii este dirijata ereditar, in cel de
al doilea aceste fenomene depind cu precadere de conditiile de mediu.
Cresterea individului bacterian se caracterizeaza prin adaugarea de
protoplasma, ca rezultanta a fenomenelor predominant anabolice in raport cu cele
catabolice si are ca efect o crestere a suprafetei si a volumului sau. Intre aceste
doua caractere exista un raport strans corelat cu etapa de dezvoltare in care se
afla bacteria: pe masura ce bacteria creste, se mareste si volumul sau, in timp ce
suprafata sa devine proportional mai mica (ipoteza Leuckart – Spencer). Cand
acest raport creste in favoarea volumului, celula bacteriana tinde sa se divida, sa
se multiplice. Cum aparatul nuclear este activ mai ales in momentul diviziunii
celulei, volumul bacteriei creste semnificativ in perioada in care aparatul nuclear
este in repaus. Raportul volum/suprafata al bacteriei se schimba in favoarea
suprafetei odata ce diviziunea a luat sfarsit, dupa care se pregateste un nou ciclu
de crestere.
41
Multiplicarea bacteriilor inseamna cresterea numarului de indivizi intr-un
mediu de viata favorabil si se realizeaza prin diviziune. Populatia care rezulta prin
diviziunea bacteriilor creste in progresie geometrica cu ratia 2, timpul necesar
pentru dublarea populaţiei numindu-se timp de dublare sau timp de generatie. In
raport cu specia bacteriana, multiplicarea atinge un maximum de populatie care se
poate mentine o perioada oarecare dupa care incepe declinul ei. Multiplicarea se
petrece in faze succesive. Acestea sunt:
- faza de lag* sau faza de ajustare, ce se caracterizeaza prin diminuarea
numarului de indivizi care constituie inoculul, prin cresterea dimensiunilor
germenilor viabili.
*engl. Lag – intarziere, captusire
Este o faza de acomodare a germenilor la noile conditii de viata. Durata de lag
este, in general, apreciata pentru bacterii la aproximativ 2 ore, dar ea este in
functie de specia bacteriana, cantitatea initiala de inocul si conditiile de mediu. De
exemplu, bacteriile termofile si Escherichia coli au o faza de lag scurta (15-20
minute), in timp ce Mycobacterium are una mai lunga. In faza de lag cantitatea de
N-total, P-organic, ARN si O2 consumat cresc.
- faza logaritmica (exponentiala) de multiplicare este o faza de crestere
rapida, in progresie geometrica, a bacteriilor si se caracterizeaza printr-o serie de
manifestari cunoscute sub numele de “tinerete fiziologica"; microorganismele sunt
mai permeabile si mai sensibile la factorii de mediu. Faza dureaza in medie 2-3
ore (M. tuberculosis). Curba de multiplicare evolueaza exponential pana in
momentul in care una din substantele nutritive din mediu este consumata, iar in
mediu se acumuleaza metaboliti toxici. Metabolitii consumati si produsi in mediu
se numesc factori limitanti. In timpul acestei faze caracterele morfologice ale
bacteriilor se omogenizeaza, activitatea si echipamentul enzimatic sunt mai bine
dezvoltate, proprietatile biochimice si de metabolism se manifesta la parametrii
optimi, rezistenta germenilor la agentii fizici, chimici si biologici devine
caracteristica speciei.
- faza stationara caracterizata prin faptul ca raportul dintre germenii care
se divid si cei care mor ramane relativ constant, astfel incat numarul bacteriilor se
stabilizeaza. Faza de stationare este denumita si faza de concentratie “M”,
deoarece in aceasta etapa populatia bacteriana atinge un maximum in cultura.
42
- faza de declin (faza de moarte logaritmica) este etapa in care numarul
germenilor morti intrece numarul germenilor vii, deoarece consumarea substratului
nutritiv si acumularea de metaboliti toxici duc la moartea majoritatii bacteriilor, iar
timpul de generatie creste la cateve zile; celulele vii imbatranesc, nu-si mai
pastreaza caracteristicile, speciile patogene isi pierd patogenitatea si virulenta. In
aceasta faza apar tendintele de sporulare. Ea nu este valabila in cazul culturilor
bacteriene continue, caracterizate prin reinnoirea continua a substratului nutritiv si
prin recoltarea de asemena continua a germenilor in faza exponentiala. Culturile
continue se fac in scopuri productive si prezinta o deosebita importanta industriala,
biotehnologica in domenii de activitate de mare importanta economica si sociala.
In fapt, cultura bacteriana este rezultatul inmultirii, cresterii numarului de
germeni, intr-un mediu favorabil formandu-se o populatie avand caractere
asemanatoare. Aspectul culturii bacteriene depinde de specia, varsta indivizilor
precum si de mediul de cultura. Mediile de cultura bacteriana pot fi: artificiale,
create in scopul asigurarii tuturor conditiilor pentru dezvoltarea si multiplicarea
indivizilor si naturale (vii), avand provenienta animala (ou embrionat, animale de
experienta, tesuturi animale, culturi celulare, sange etc.) si vegetala (culturi
celulare, meristeme, parti din plante s.a.). Culturile bacteriene pot fi studiate in
vitro – pe medii de cultura artificiale sau in vivo – direct pe mediile naturale, mai
ales pentru germenii patogeni.
Culturile bacteriene se dezvolta pe medii artificiale lichide si solide. Primele
determina aparitia dupa o perioada de 18-20 ore a unei turbiditati (tulbureli) ce
poate fi omogena, datorata germenilor de varsta tanara, cu vigoare ridicata care
disperseaza uniform si rapid in mediu, denumita culturi S (smooth – netede) sau
neomogena, cu grade de turbiditate diferite si uneori chiar limpezi dar cu depuneri
pe vasele de cultura sau valuri de suprafata, purtand denumirea de culturi R
(rough – rugoase).
Culturile de medii solide sunt obtinute prin insamantarea germenilor
bacterieni rezultati din multiplicarea unei singure celule bacteriene si se numesc
colonii de culturi pure sau culturi clonare. Colonia bacteriana reprezinta cultura
pura aparuta dupa un timp de multiplicare de 2 - 6 ore, în care, din punct de
vedere genetic, indivizii sunt identici.
43
Dupa aspect, coloniile pot avea o forma geometrica regulata sau
neregulata, conturate sau difuze, colorate sau necolorate, lucioase sau rugoase,
limpezi, opace sau semimate, cu sau fara caracteristici specifice speciei.
Coloniile - S au aspect lucios, cu margini conturate, forma rotunda sau
ovoidala, diametru 1-2 mm, consistenta onctuoasa.
Coloniile - R au suprafata aspra, forme cu margini neregulate, crenelate,
uneori difuze in mediul de cultura, in general colorate si mate.
Coloniile - M sunt variante ale tipului S dar contin germeni cu capsula si
au o consistenta gelatinoasa sau mucilaginoasa, prezentand tendinta de a difuza
in mediu sau de jonctiune intre ele.
Coloniile - G sunt colonii pitice obtinute din germeni normali dar afectati de
interventii exterioare (ex. antibiotice, antiseptice, carente nutritionale, etc.).
Coloniile bacteriene se deosebesc intre ele prin anumite caracteristici de
cultura, care, singure sau impreuna, constituie criterii de departajare. Astfel,
diametrul coloniei bacteriene imparte coloniile in mari – cele care au diametrul mai
mare de 2 mm, mijlocii si mici – coloniile cu diametrul sub 1 mm. O alta
caracteristica este transparenta coloniilor. Sub acest aspect exista colonii
translucide, ca cele date de streptococi si opace, caracteristice, in general,
coloniilor de stafilococi. In functie de proprietatea de a produce pigmenti, bacteriile
pot fi pigmentogene (cromogene), daca produc pigmenti, caz in care: a)se
coloreaza doar colonia (cazul bacteriilor cromofore si paracromofore) – de
exemplu coloniile stafilococice colorate in alb, galben, auriu si b) se coloreaza si
mediul, fiind cazul bacteriilor cromopare la care pigmentul este eliberat in exteriorul
celulei – ca de exemplu bacilul piocianic care sintetizeaza si elibereaza in exterior
doi pigmenti: piocanina – albastra si pioverina – verde. Alte caracteristici ce pot
constitui criterii de identificare a coloniilor bacteriene, prezentate si anterior sunt:
forma coloniei, rugozitatea coloniei, consistenta, forma conturului marginal, etc.
44
4.6 CULTIVAREA BACTERIILOR
47
utilizat pentru izolarea germenilor anaerobi. Se insamanteaza produsul patologic in
profunzimea mediului lichefiat prin incalzire urmata de resolidificare prin racire.
Mediul Sabouraud solid se prepara din 1000 ml apa de robinet, 10 g
peptona, 20 g glucoza si 20 g agar de fibre. Se dizolva peptona in 250 ml apa la
fierbere, se autoclaveaza 30 min. la 120oC si se filtreza.. Se amesteca cele doua
solutii filtrate, se completeaza cu apa pana la 1000 ml si se adauga agarul spalat.
Se fierbe pana la topirea agarului, se filtreaza prin tifon, se repartizeaza dupa
necesitati si se sterilizeaza la 110oC timp de 30 min. - pH final 5,8 - 6,2. Un mediu
similar lichid se poate prepara din aceleasi ingrediente minus agarul. Aceste medii
se utilizeaza pentru izolarea si cultivarea ciupercilor microscopice.
Stabilirea si corectarea pH-ului mediilor de cultura este de o importanta
deosebita pentru cultivarea microorganismelor. Este cunoscut faptul ca prin
autoclavare pH-ul mediului scade. Pentru acest motiv sunt necesare operatiunile
de control si corectare a pH-ului. Determinarea pH-ului se poate face prin metoda
electrometrica cu ajutorul unui pHmetru, care este foarte precisa, dar cand nu
dispunem de aparatura necesara se poate utiliza metoda colorimetrica. Aceasta
din urma se bazeaza pe proprietatea unor substante numite indicatori, de a-si
modifica culoarea sau nuanta in functie de gradul de aciditate sau alcalinitate al
solutiei in care sunt dizolvate. Principiul metodei consta in compararea culorii
solutiei de cercetat in care s-a introdus un indicator, cu o serie de etaloane
colorate.
Practic, aparatul este compus dintr-un comparator Walpole (stativ cu locuri
pentru eprubete si orificii de observare prevazute cu geam mat) si o scara de
etaloane numita Scara Michaelis. Etaloanele sunt tuburi de sticla care contin solutii
indicator. In locurile 1, 2 si 3 ale comparatorului Walpole se introduc tuburi de
aceeasi grosime cu tuburile etalon din Scara Michaeelis. In tuburile 1 si 2 ale
comparatorului se pun cate2 ml mediu. In tubul 1 se mai pun 4 ml apa distilata si 1
ml metanitrofenol 0,3% iar in tubul 2 sa adauga numai 5 ml apa distilata. In tubul 3
se pun 7 ml apa distilata iar in locul 4 se pune un tub etalon din Scara Michaelis.
Privind apoi prin cele doua orificii laterale, comparam culoarea mediului cu
indicator cu aceea a etalonului. Daca nu se potriveste, se schimba tubul etalon cu
altul pana cand prin tuburile 1 si 3 vedem aceeasi culoare ca si prin tuburile 2 si 4.
Mediul cercetat are pH-ul care este scris pe tubul etalon respectiv.
48
In scop orientativ se poate utiliza metoda rapida a hartiei indicator care,
umectata cu solutia de cercetat isi modifica culoarea, dupa care este comparata
cu o scara etalon colorata.
Dupa verificarea pH-ului mediului de cultura, daca este necesar se
ajusteaza cu o solutie de NaOH sau HCl pana la obtinerea unui pH corespunzator.
50
Tehnica insamantarii in suprafata. Insamantarea pe suprafata mediilor
mediilor solide se poate face cu ansa. Cu bagheta de sticla indoita sub forma de L,
cu tampoane, cu pipete, etc. In cursul insamantarii se iau aceleasi precautiuni
pentru pastrarea sterilitatii ca si la operatiunile de insamantare in medii lichide.
Cand se insamanteaza medii care au fost solidifacte in tuburi, in pozitie
inclinata, se executa pe suprafata mediului miscari in zig-zag, de la baza catre
exterior, cu precautia de a nu zgaria suprafata mediului.
In cazul mediilor solidificate in coloana dreapta, insamantarea se face prin
intepare in profunzime.
In placi Petri, in care s-a turnat un strat de mediu gelozat, insamantarea se
poate face cu ansa, cu bagheta de sticla sau cu tamponul de recoltare. Placa se
tine in apropierea flacarii iar operatiunea de insamantare trebuie executata rapid
pentru a se evita patrunderea altor microorganisme din exterior.
Tehnica insamantarii prin incorporare. Se lichefiaza mediul prin incalzire la
80 C, se raceste la 50oC si se introduce produsul de insamantat cu o pipeta
o
51
Apoi, schimbandu-se pentru fiecare eprubeta pipetele, se trece succesiv dintr-o
eprubeta in cealalta cate o picatura.
Aceasta tehnica se completeaza cu efectuarea de treceri pe medii solide:
din fiecare tub insamantat se trece, de fiecare cu o alta pipeta, cate o picatura, pe
cate un tub sau o placa cu geloza.
Aceasta tehnica a dilutiilor succesive se poate face si in lichidul de
condensare al mediilor solide, urmand aceeasi metodologie.
Tehnica epuizarii ansei pe medii solide se realizeaza prin insamantari cu
ansa bacteriologica, incarcata o singura data cu amestecul de germeni, intr-un sir
de eprubete cu geloza inclinata, fara a steriliza sau a reincarca ansa bacteriologica
pe parcurs. Astfel se epuizeaza continutul ansei si, in final, se ajunge sa se
insamanteze numai cateva celule microbiene intr-un tub care prin incubare la
termostat vor da nastere la colonii microbiene izolate. O astfel de colonie trecuta
(replicata) pe un alt tub cu mediu, dupa incubare da nastere la o cultura pura.
Tehnica diseminarii (dispersiei) cu ansa pe medii solide. Cu ansa
bacteriologica incarcata cu produsul patologic se descriu pe suprafata unui mediu
solid, turnat intr-o placa Petri, niste striuri paralele. Dupa descrierea fiecarui grup
de striatiuni paralele, ansa bacteriologica va fi sterilizata prin incalzire la
incadescenta si nu va fi incarcata cu inoculul amestec decat o singura data la
inceput. In momentul intersectarii cu striurile precedente, ansa este reincarcata cu
o cantitate de inocul, dar o cantitate din ce in ce mai mica, pana ce se va ajunge la
cateva celule microbiene izolate ce vor fi diseminate pe placa si vor da nastere la
colonii microbiene izolate.
Tehnici speciale de izolare. Sunt utilizate cand urmarim izolarea anumitor
specii bacteriene dintr-un produs polimicrobian. Ele se realizeaza cu diverse
mijloace fizice, chimice sau biologice. Dintre mijloacele fixe, de izolare, mentionam
incalzirea o ora la 80oC, a amestecului de germeni, care se practica pentru a izola
germenii sporulati de formele vegetative de microbi. De asemenea, filtrarea printr-
un filtru bacteriologic permite izolarea unui virus ce strabate porii filtrului, dintr-un
amestec cu bacterii ce sunt retinute de acesta.
Ca metode chimice mentionam: mediile de cultura selective care contin un
agent inhibitor pentru flora de asociatie (mediul Lowenstein care contine verde
malachit inhiba flora de asociatie si permite izolarea bacilului Koch); mediile
elective care contin un substrat nutritiv ce, convenind preferential speciei ce dorim
52
sa o izolam, permite dezvoltarea sa mai rapida (mediul Loffler electiv pentru bacilul
difteric) si mediile diferentiale care permit relevarea unor caractere enzimatice
proprii germenilor vizati de a fi izolati din amestec (mediul Istrati-Meitert utilizat in
izolarea dintr-o coprocultura a unor enterobacterii lactozo pozitive sau negative).
Ca metode biologice de izolare mentionam metoda de insamantare pe
medii cu agenti biologici selectivi, deci utilizarea de medii selective pe baza de
antibiotice (mediul selectiv LCN pentru izolarea meningococului care contine
Lincomicina, Colimicina si Nistatin), si utilizarea unor animale de laborator pentru
izolarea unor specii bacteriene dintr-un amestec - de exemplu, inocularea
subcutanata a soarecelui alb cu o sputa in care se gaseste un pneumococ. Dupa
1-4 zile de la inoculare, soarecele face o infectie septicemica letala cu pneumococ,
putandu-se izola in cultura pura acest germen din sange. Un alt exemplu il
constituie inocularea subcutanata la un cobai a unui produs patologic in care se
gaseste bacilul Koch. Din viscerele acestui cobai dupa un interval variabil de timp,
1-6 luni, se va putea izola, in cultura pura, bacilul Koch.
Metoda izolarii unui singur microb prin micromanipulare se poate realiza cu
ajutorul unui micromanipulator, a unei aparaturi speciale si a unor
microinstrumente (pipete, anse, pense, seringi, etc.) dar metoda nu este de uz
curent, ea fiind utilizata exclusiv in scop de cercetare.
54
In cele ce urmeaza se vor sintetiza si sistematiza principalele aspecte,
notiuni si metode referitoare la genetica bacteriana.
Asadar, dupa cum s-a amintit mai inainte, zestrea genetica a unei bacterii
reprezentate printr-un set complet de cromozomi o constituie genomul bacterian
si este organizat nuclear (cromozomul) si extracromozomial, ambele materiale
genetice asigurand ereditatea, capacitatea de a transmite descendentilor
caracterele distinctive de specie.
Potentialul genetic, reprezentand informatia genetica a unei bacterii,
poarta denumirea de genotip, iar a celor exprimate, pentru ca nu toate caracterele
genetice potentiale se pot exprima real, se numeste fenotip.
57
(H sau h2) si se defineste ca fiind raportul dintre variatia genetica aditiva (VA) si
variatia biologica:
h 2 = VA VB =VA VG + VM
59
Capitolul 5
CIUPERCI MICROSCOPICE
60
CIUPERCILE MICROSCOPICE sunt larg raspandite in natura, avand
capacitatea de a putea sa se dezvolte pe medii diferite compozitional, dar cu
predilectie pe cele glucidice. Ele au efecte benefice sau daunatoare activitatii
umane. Printre cele folositoare se pot aminti: obtinerea ingrasamintelor naturale, a
composturilor vegetale din resurse neconventionale slab valorificate (scoarta
copacilor, resturile vegetale autumnale), producerea unor alimente de mare
importanta in alimentatia umana (painea dospita, branzeturile fermentate, vinul,
berea si alcoolul), obtinerea unor enzime cu utilitate industriala (amilazele) sau
medicala (de exemplu preparate de nucleaze cuplate pe dextran cu actiune
antitumorala) etc. Efectele daunatoare mai importante provocate de ciuperci sunt:
alterarea alimentelor, producerea unor toxine alimentare (aflatoxine), provocarea
unor boli de catre ciuperci (micoze), etc.
Ciupercile microscopice se raspandesc usor in natura, cu predilectie prin
spori, deoarece sporii produsi de un singur miceliu sunt numerosi, dispun de
mijloace ce permit propagarea, si, spre deosebire de sporii bacterieni, sunt in
primul rand forme de inmultire si nu de rezistenta. Ciupercile microscopice care
prezinta interes pentru agricultura, alimentatie si alte activitati umane fac parte din
Regnul Micelia, Subregnul Mycota, Ramura Eumiceta ce cuprinde Micomicete
unicelulare (drojdii si mucegaiuri inferioare) si micomicete pluricelulare
filamentoase (mucegaiuri superioare).
MUCEGAIURI (MICOMICETE)
Datorita capacitatii lor deosebite de adaptare la cele mai diverse conditii ale
mediului ambiant, mucegaiurile sunt raspandite in toate habitatele* naturale.
*lat. habitare – a locui; reprezinta conditiile mediului extern in care
61
traieste un organism sau un grup de organisme; sinonim cu biotop.
Aceasta capacitate naturala de adaptare se datoreaza faptului ca ele dispun de un
echipament enzimatic complex care le permite degradarea unor compusi
macromoleculari, foarte diferiti ca structura si compozitie, folositi ca substante
nutritiv-energetice. Totodata, necesitatile relativ modeste in privinta umiditatii, a
factorilor de crestere, a vitaminelor si a altor compusi nutritivi sau biocatalizatori,
contribuie la capacitatea lor de adaptare in aproape orice conditii de mediu.
Stratul superficial al solului constituie un habitat in care mucegaiurile
sporofite degradeaza compusii organici (hidrati de carbon omogeni si heterogeni,
protide, lipide s.a.) din resturile vegetale si animale moarte, fiind considerate
agenti tipici ai putrezirii. Prin degradarea compusilor din stratul superficial al
solului, mucegaiurile participa la circuitul natural al carbonului, imbogatind
solul in compusi cu molecule mai mici, ce reprezinta, la randul lor, mediu propice
de dezvoltare al altor microorganisme sau plante. Acestea continua degradarea
pana ce, in final, dioxidul de carbon si apa rezultate sunt prelucrate de plante si
transformate, in cadrul acestui circuit trofic, in hidrocarbonate, monoze si polioze,
prin fotosinteza.
Din sol, prin intermediul factorilor fizici si biologici, sporii mucegaiurilor,
reprezentand mijlocul principal de reproducere, sunt vehiculati in aer, unde pot
supravietui un timp indelungat, dupa care, in lipsa curentilor ,se pot depune pe
diverse alte medii in care sporii supravietuiesc perioade mari de timp, chiar zeci de
ani, pana se creeaza conditii favorabile de viata. In aceste conditii favorabile are
loc germinarea sporilor si dezvoltarea miceliului, vegetativ si producator.
Mucegaiurile pot fi intalnite ca parte constitutiva a microflorei epifite a plantelor,
unde pot produce alterarea fructelor, legumelor si semintelor.
O serie de mucegaiuri patogene gasesc conditii de dezvoltare pe tesuturi
vegetale si animale vii, carora le pot produce imbolnaviri (de exemplu malura,
rugina, fainarea, fuzariozele la plante, micoze respiratorii, tricofitia, epidermofitica,
flavisul la om si la animale).
Alte mucegaiuri sunt folosite de om ca agenti productivi de importanta
industriala si farmacodinamica in alimentatie, medicina, biotehnologii, obtinandu-se
cu ajutorul lor acizi organici (citric, lactic, malic, fumaric), vitamine hidrosolubile
(B12) liposolubile (ergosteroli), maturarea unor salamuri crude uscate(tip Sibiu) si
branzeturi fermentate (tip Roquefort, cu pasta albastra sau Camembert si Brie cu
62
pasta moale), amonificarea substantelor proteice in timpul compostarii
ingrasamintelor naturale (in care intervin mucegaiurile Trichoderma Konongi,
Aspergillus terricola, Botrytis sp., s.a.), productia de antibiotice (penicilina,
streptomicina etc.), ori producerea de proteina, folosindu-se ca materii prime
reziduurile petroliere (genurile Mucor, Aspergillus, Fusarium, Cephalosporium).
63
Partea vegetativa, numita tal, asigura cresterea mucegaiului si este
alcatuita din filamente miceline sau hife tubulare mai mult sau mai putin lungi si
ramificate. Ele pot fi septate si neseptate, adesea anastomozate* intre ele.
*anastomoza – unirea a doua sau a mai multor filamente.
Miceliul are o portiune aeriana si una rizoida* situata in mediul pe care se
dezvolta.
*grec. rhiza – radacina; eidos – forma; structura filamentoasa care
indeplineste rolul de radacina pentru fixarea talului).
Dupa cum s-a aratat, sporii se pot forma prin reproducere sexuata
(perfecta), care reprezinta conjugarea (contopirea) a doi gameti din care rezulta un
ou. Gametii se formeaza pe doua hife invecinate numite suspensori. Din cei doi
gameti rezulta un gametangiu* din care se dezvolta sporul ce are mai multe forme:
zigosporul – rezultat din conjugarea a doi gameti identici; oosporul – ca rezultat al
fecundarii a doi gameti heterozigoti (diferiti), numiti anteridium (mascul) si oogomun
(femel); ascosporul format din fuziunea a doua celule vecine din acelasi miceliu
sau din micelii diferite, in interiorul caruia se formeaza ascospori care se
raspandesc in mediul inconjurator; bazidiosporul – ce se formeaza in interiorul
64
unei bazidii** - celula binucleata la extremitatea unei hife – cuprinzand bazidiospori
prinsi cu un peduncul de bazidie.
*grec. gametes – sot, sotie; anggeion – vas, recipient;
**grec. basis – baza; idion – diminutiv.
67
In functie de utilizarea oxigenului, majoritatea mucegaiurilor sunt aerobe,
oxigenul fiind luat atat din aer, cat si din alte surse, ca oxigenul dizolvat in apa, sau
anaerobe (de exemplu genul Mucor foloseste oxigenul din hidratii de carbon din
mustul de struguri pe care-l poate fermenta pana la concentratii de 1% alcool). Un
numar limitat de mucegaiuri sunt microaerofile (provoaca, de exemplu, mucegairea
untului sau se dezvolta in camera de aer a oualelor).
Fata de umiditate, mucegaiurile sunt foarte putin pretentioase, rezista la
uscaciune chiar si sub forma vegetativa, cu atat mai mult in forma de sporulata, ele
fiind din acest punct de vedere xerofile, datorita membranei celulare mult ingrosata.
Ele pot, astfel, produce degradarea peretilor in incaperile cu condens, fiind capabile
sa absoarba apa din mediul ambiant.
In raport cu reactia mediului, mucegaiurile se pot dezvolta in limite largi de
pH de 2 – 10, dar, in general, valoarea optima a pH-ului este in domeniul slab acid
5,5 – 6,5.
Sub aspectul temperaturii, majoritatea mucegaiurilor sunt mezofile,
temperatura optima de dezvoltare fiind apropiata, in ambele sensuri de 250C. Un
numar restrans, in special cele patogene se dezvolta bine la temperaturi in jurul
valorii de 370C, iar altele, criofile, sunt adaptate la temperaturi negative
Mucegaiurile sunt mai putin rezistente la temperaturile ridicate (80 - 900C)
care le inactiveaza in timp scurt; astfel, la temperatura de 880C chiar formele
sporulate cele mai rezistente sunt distruse in 10 minute.
DROJDII (LEVURI*)
68
Fiind organisme heterotrofe cu metabolism mixt, oxidativ si fermentativ,
levurile sunt raspandite in diverse habitate naturale ca rezultat al capacitatii de
adaptare in diverse conditii de mediu (sol, apa, aer, produse vegetale si animale).
Importanta si rolul drojdiilor rezida din utilizarile lor pe scara larga,
industriala, in alimentatie, datorita capacitatii lor de a-si procura energia necesara
vietii prin reactii oxidative anaerobe si aerobe care transforma hidratii de carbon
naturali in produse de utilitate pentru om (bauturile alcoolice si nealcoolice
fermentate, painea dospita, acizii organici alimentari etc.). Unele specii de drojdii
sunt cultivate in scopul obtinerii de biomasa bogata in proteine sub forma de
izolate proteice, autolizate de de drojdii bogate in vitamine hidrosolubile (din grupul
B), liposolubile (din grupul D) si hormoni, utilizate ca aditivi alimentari, preparate
enzimatice (ex.: invertaza) sau produse farmaceutice (de ex.: interferonul cu efect
antiviral).
Alte specii de drojdii (de ex.: Candida albicans) prezinta interes datorita
caracterului lor patogen, cunoasterea morfologiei, fiziologiei si a metabolismului
acestora fiind necesara in combaterea diverselor boli pe care le pot produce.
70
In citoplasma se petrec in fiecare secunda cel putin 1500 de reactii diferite,
cu precizie mult superioara celor mai perfectionate masini cibernetice, in plus ea
avand si capacitatea de a se autoreproduce.
Componentele comune tuturor celulelor, aflate in citoplasma drojdiilor au
fost discutate la capitolul “mofologia celulara”. In randurile urmatoare vor fi aratate
organitele si incluziunile specifice mai importante:
Metabolism
72
Drojdiile cu metabolism fermentativ nu se pot dezvolta in anaerobioza
stricta decat in prezenta acidului oleic sau a ergosterolului. Ele se adapteaza la
anaerobioza obtinand o mica parte din energia necesara prin fermentarea
zaharurilor pe care le transforma in alcool si bioxid de carbon, dar inmultirea lor in
acest caz este redusa si lenta. In practica curenta a industriilor fermentative, care
utilizeaza asemenea tipuri de levuri, la inceputul fermentatiilor se asigura, din
acest motiv, dezvoltarea lor viguroasa prin insuflarea aerului in culturile pure o
perioada redusa de timp.
Drojdiile sunt, in general, acidofile, ele inmultindu-se in medii acide sau
neutre (3,5 – 7,5 pH), dar limitele superioare ale pH-ului pot atinge si 8,5 – 8,7,
deci domeniul bazic.
Temperaturile optime de dezvoltare sunt, in general, cuprinse intre 25 si
30oC, drojdiile fiind microorganisme mezofile. Exista specii si tulpini psihrotrofe
ce se dezvolta si se multiplica bine la temperaturi de refrigerare de pana la +5 oC
si chiar la valori usor negative, ele avand insemnatate mare la conservarea
alimentelor cu ajutorul frigului. Alte specii - in special drojdiile patogene – au
temperatura optima de dezvoltare la 37 oC. Temperaturi de 70-75o C aplicate pe o
durata de minimum 30 de secunde au efect inactivant sau sterilizant datorita
plasmolizarii (coagularii) proteinelor din citoplasma celulara.
Celulele de drojdie sunt sensibile la modificarea presiunii osmotice,
determinata de concentratia substantelor solubile in mediul intracelular.
Comportamentul lor in raport cu aceasta caracteristica este diferentiata, desi, o
mare parte dintre speciile de levuri sunt osmofile. Astfel, daca mediul de
dezvoltare a celulelor de levuri este hipotonic – concentratia mediului este mai
redusa ca cea intracelulara – apa din mediu patrunde in celula pana la stabilirea
izotoniei, aceasta se umfla – devine turgescenta*.
*lat. Turgescere – a umfla
In mediu hipertronic celula de drojdie isi reduce concentratia de apa pana
la izotonie. O concentratie a mediului in zaharuri mai mare de 65 % are ca urmare
detasarea membranei celulare, o stare de plasmoliza si moartea celulei. Acest
procedeu de conservare a unor produse alimentare (a sucurilor de fructe) prin
cresterea continutului de zahar in mediile de dezvoltare a drojdiilor se numeste
zaharoanabioza.
73
Cu toate acestea se cunosc specii de drojdii adaptate mediilor hipertronice (
de ex.: genul Zygosaccharomyces), continand 50-60 % zaharuri (osmotolerante),
utilizate in practica vinificatiei pentru obtinerea unor vinuri speciale cu continut
ridicat de alcool etilic.
Specii de drojdii din genurile Rhodotonela si Sporobolomyces au culoare
galbena, portocalie, rosie. Cultivarea unor asemenea specii este facuta in scopul
obtinerii unor vitamine, enzime sau pentru utilizarea lor in scopuri genetice.
Reproducerea levurilor
74
aceasta, asadar prin mitoza. Celula vegetativa, ramasa doar cu invelisul celular
poarta numele de asca care prin rupere elibereaza celulele haploide – ascosporii.
Ascosporii mai pot fi formati pe cale sexuata sau copulare, atunci cand
exista conditii favorabile si are loc intre doua celule ajunse la maturitate fiziologica.
Celulele mature capabile de conjugare numite gameti* vin in contact intr-o zona
comuna, zona in care se formeaza un canal de copulare; are loc procesul de
meioza si apoi mitoza, formandu-se, in cele doua celule un numar egal de
ascospori, de data aceasta diplozi.
Conjugarea poate fi izogama – intre celule de acelasi fel – sau heterogama
– intre celule din specii diferite, situatie in care ascosporii se acumuleaza in celula
cu volumul cel mai mare.
75
PARTEA a-II-a
MICROBIOLOGIE APLICATA
Capitolul 1
METABOLISMUL MICROBIAN
76
Caracteristicile principale ale metabolismului pot fi considerate urmatoarele:
77
Numim metaboliti produsele care participa la metabolism, atat cele ce sunt
metabolizate, cat si cele rezultate in urma metabolizarii.
Caile metabolice sunt dinamice, interdependente, se pot desfasura
secvential si (sau) simultan, desfasurarea lor fiind functie de mai multe variabile,
printre care:
1. caracteristicile si specificitatea microorganismului;
2. specificul, compozitia si concentratia substratului metabolizat;
3. caracteristicile mediului (temperatura, umiditate, etc.) in care isi desfasoara
activitatea microorganismul;
4. concentratia metabolitilor rezultati sau folositi in reactii;
5. prezenta sau absenta unor substante specifice activatoare, inhibitoare,
inductoare ale microorganismului sau a unor secvente metabolice.
78
sintetizate substantele compusilor nucleari, citoplasmatici, enzimele si alti
compusi specifici celulelor microorganismelor, acest tip de metabolism fiind
cunoscut sub numele de metabolism de biosinteza, sinonimele sale fiind
anabolismul si metabolismul convertiv.
Cele doua aspecte ale metabolismului reprezinta in fapt doua laturi contrarii
ale unui fenomen unitar, procesele de catabolism si anabolism se presupun
reciproc, se conditioneaza unul pe altul si se desfasoara simultan in celula
microorganismului. Interconditionarea celor doua tipuri de reactii este determinata
de faptul ca energia rezultata din reactiile catabolice exergonice este folosita sub
forma compusilor macroergici (grec. makros = mare, ergasthai = a lucra) in reactii
anabolice consumatoare de energie (sunt cunoscuti multi compusi organici care
inmagazineaza energia, printre care amintim: esterii fosforici ai acizilor nucleici,
nucleofosfatii ca adenozin, uridinfosfatii, acetil erenzima A, etc.). De asemenea, o
parte din metabolitii rezultati din reactiile catabolice pot constitui, partial sau total,
reactanti de initiere (substrat ce este folosit) a unor cai anabolice ce conduc la
sinteze de compusi celulari necesari dezvoltarii si existentei microorganismului.
Prin urmare, caile metabolice centrale , descrise mai inainte, care indeplinesc atat
functia energetica cat si cea de furnizoare a precursorilor pentru biosinteza, sunt
cunoscute sub denumirea de cai amfibiolice (grec. amphi = amandoua, dublu).
Atunci cand o cale metabolica centrala este blocata in functionarea ei,
datorita folosirii intermediarilor rezultati in procesele de biosinteza, apar noi cai
colaterale, auxiliare, cunoscute sub denumirea de cai metabolice anaplerotice.
Prin folosirea acestor cai, celula microbiana se adapteaza rapid la conditii foarte
diverse de mediu.
Functionarea si interactiunea celor patru tipuri de cai metabolice sunt
reglate de niste reactii de tip special (pace-maker), ce intersecteaza punctele
esentiale.
79
1. faza descompunerii enzimatice a macromoleculelor in partile lor constitutive:
aminoacizi, monoglucide, acizi grasi, etc., fara producere de energie utilizabila;
2. faza degradarii exergonice a constituientilor formati in prima faza, cu
producerea unor cantitati importante de energie, utilizabila in alte reactii
biochimice; energia este inmagazinata in compusi macroergici de tipul
nucleotid fosfatilor.
80
Fermentatia constituie modalitatea principala de procurare a energiei la
drojdii si bacterii anaerobe, glucidele (in principal glucoza) fiind cel mai des folosita
in metabolism, folosindu-se doua cai principale, si anume:
- ciclul glicolitic Embden - Mayerhoff - Parnas, cale folosita de majoritatea
microorganismelor, in care donorul de electroni este aldehida fosfoglicerica, iar
acceptorul final acidul piruvic, care ulterior este utilizat in mai multe tipuri de
reactie (vezi mecanismul fermentatiei alcoolice).
- calea glucofosfatilor Warburg - Dickens - Horecker, de natura strict aeroba,
prin care se inmagazineaza jumatate din energia ciclului glicolitic; ea este o cale
de scurtcircuitare (shuntare) a caii glicolitice, fiind folosita pentru sinteza
pentazofosfatilor necesari in sinteza nucletidelor si a altor acceptori de electroni.
82
anabolice, aceasta fiind o caracteristica a metabolismului, asa cum s-a aratat mai
pe larg la inceputul acestui capitol.
83
fosfotransferaze, care au legat fosfatul prin legaturi macroergice ce
inmagazineaza energia necesara procesului de transfer.
Capitolul 2
85
S.elegans, S.. ellipsoideus, S.. fructuus, S.. chevalieri, S.acidifaciens, S.
ludwigii,etc.
Anumite drojdii osmofile din genul Zygosaccharomyces suporta concentratii
mari de zahar, putand produce fermentarea siropurilor concentrate de zahar si a
mierii.
Se vor aminti in continuare cateva din alte categorii de microorganisme ce
pot produce prin fermentatie alcool etilic.
- mucegaiuri din fam. Mucoraceae, clasele Phycomycetes (Mucor Eumycetes
rouxianus sinonim Amylomyces rouxii, Mucor racemosus, Rhizopus
orizae),(Aspergillus orizae, Penicillium glaucum, Dematium pullulans);
- bacterii: Bacillus macerans, Bacillus etilicus, Bacillus gracile, etc.
86
mod esential. Se vor aminti, in continuare, cativa factori, considerati mai
importanti:
• temperatura, ca valoare medie si ca amplitudine intre valorile maxime si
minime, fiecare specie de microorganism avand o temperatura optima
specifica;
• concentratia ionilor de hidrogen (pH), drojdiile dezvoltandu-se in general pe
substraturi acide (pH = 3.5 - 4.7);
• potentialul redox, datorita faptului ca procesele de fermentare sunt, in
general, reactii de oxido-reducere;
•
presiunea osmotica - concentratiile ridicate de hidrati de carbon incetinesc
mecanismul fermentatiei, drojdiile obisnuite isi intrerup activitatea la presiuni
osmotice mai mari de 60 kgf/cm2
• concentratia de alcool rezultat - are actiune inhibitoare daca depaseste 4-5%
pentru drojdiile de fermentatie inferioare si 18% pentru cele de fermentatie
superioare;
• activatorii si inhibitorii microorganismelor: antiseptice, microelemente
minerale, alcoolul, dioxidul de carbon, oxigenul, etc.
MALTOZA ZAHAROZA
amilaze invertaza
GLUCOZA FRUCTOZA
GLUCOZO - 6 - FOSFAT
fosfoglucozoizomeraza
87
FRUCTOZO - 6 - FOSFAT
fosfofructozokinaza
ACID - 3 - FOSFOGLICERIC
fosfogliceromutaza
ACID - 2 - FOSFOGLICERIC
enolaza
ACID - FOSFOENOLPIRUVIC
ACID PIRUVIC
ACETIL CoA
alcooldehidrogenaza
88
ACID LACTIC ACIZI TRICARBOXILICI ALCOOL ETILIC
(Ciclul Krebs)
Definitie: prin fermentatie lactica se intelege procesul biologic din care rezulta ca
produs principal acidul lactic.
Fermentatia lactica este foarte frecvent intalnita in numeroase produse si
domenii agro-alimentare cu destinatie umana si zootehnica, fiind produsa in cele
mai multe cazuri de bacterii, dar si de drojdii si mucegaiuri.
Bacteriile care produc acid lactic fac parte din categoria cocilor (grec.
kokkos = bob) sau a bacililor (latin. bacillus = bastonas) si ca majoritatea
bacteriilor se dezvolta la temperaturi de 28 - 35oC (sunt mezofile). Exista insa si
specii termofile (cu temperaturi optime de dezvoltare intre 35 - 62oC) sau psihrofile
(care prefera temperaturi scazute, pana la 10oC). Procesul de fermentare poate
produce in final doar acid lactic, situatie in care bacteriile lactice se numesc
homofermentative, sau pe langa acid lactic, ca produs principal, si alti produsi
secundari: alcool etilic, bioxid de carbon, acid propionic, s.a., caz in care agentii de
fermentatie se numesc heterofermentativi.
89
Se vor da cateva exemple de agenti de fermentatie lactica, urmand sa se
descrie mai pe larg microorganismele la fiecare produs agro-alimentar a carui
biotehnologie va fi expusa in partea a 3-a a acestui curs.
• Termobacteriii lactice heterofermentative, (in paranteza se dau originea si
temperatura optima): Leuconostoc caucasicus (chefir, branza, 37 - 45oC),
Lactobacillus lactis (lapte, branza, 36 - 45oC), L. helveticus (branza, 37 - 45oC);
• Termobacterii lactice homofermentative: L. bulgaricus sinonim
o
Thermobacterium bulgaricum (iaurt, 45 - 62 C), L. thermophilus (iaurt, 45 -
62oC), L. acidophilus (fecale nou-nascuti, 37-45oC), L. delbruckii (plamezi
cereale, 50oC);
• Bacterii lactice mezofile heterofermentative: L. buchnerii (vin, plamezi
acide, melasa, 28-32oC), L. brevis (lapte, varza murata, 28-32oC), L.
pastorianus (bere, 28-32oC);
• Bacterii lactice mezofile homofermentative: L. casei (lapte, 28-32oC), L.
plantarum (lapte, 28-32oC);
• Bacterii lactice psihrofile.
Glucoza
90
Glucozo - 6 - fosfat Gluconat - 6 - fosfat
Piruvat
Lactat
91
Agenti ai fermentatiei propionice
Glucoza
Piruvat
(ac.malicdehidrogenaza)
Acid malic
(fumaraza)
Acid fumaric
92
(fumaratreductaza)
Acid succinic
Succcinil CoA
(metilmalonilCoAmutaza)
Metilmalonil CoA
(CoAtransferaza)
Propionil CoA
Acid propionic
93
crescuta a fructelor se reduce cu peste 30%, datorita faptului ca o parte din acidul
malic se transforma in dioxid de carbon (0.33g CO2/g acid malic).
94
rezidual. Ca principiu, se poate spune ca o fermentare lactica dirijata prin
selectionarea naturala a unor bacterii lactice heterofermentative va avea ca efect
favorizarea reducerii continutului de acid malic. Aceasta este posibila prin:
tragerea mai rapida a vinului de pe drojdie, agitarea mai energica a drojdiei,
sulfitarea mustului, mentinerea temperaturii in domeniul optim al bacteriilor
heterofermentative, diluarea mustului si suplimentarea concentratiei de zaharuri,
adaugarea unui vin cu pH sub 3,6 mustului ce fermenteaza, etc.
Definitie: prin acest tip de fermentatie are loc o degradare anaeroba a unor
reziduuri rezultate din activitatile gospodaresti si transformarea lor in metan,
hidrogen si alte produse combustibile, sub actiunea mai multor grupe de
microorganisme.
95
Importanta fermentatiei metanice
97
• genul Pectoclostridium - ataca glucidele, dar si compusii de degradare a
proteinelor, facand o jonctiune intre bacteriile butirice si cele de putrefactie.
Glucoza
Acid piruvic
Acid butiric
98
2.7 FERMENTATII OXIDATIVE (AEROBICE) - Fermentatia acetica
99
In cea mai mare parte, bacteriile acetice sunt mezofile, avand temperatura
optima in jurul valorii de 30oC (19 - 36oC), producand acid acetic in concentratii de
2% (Bacterium suboxidans) pana la 11% (B. schutzenbachii).
Dupa mediul in care se dezvolta, Hannenberg si Lazar (Citati de D. Motoc)
clasifica bacteriile acetice in:
• bacterii acetice izolate din plamezi amidonoase (Gluconobacter
suboxidans, Acetobacter industrium);
• bacterii acetice izolate din bere (Acetobacter kutzingianum, A.
Pasteurianum);
• bacterii acetice izolate din vin (A. Ascendens, A. Teurianum);
• bacterii acetice industriale (Bacterium acetigenum).
Alcool etilic
Acetil - CoA
Acid acetic
100
Fermentatia acetica prezinta importanta practica in activitatile gospodaresti
si industriale.
Principalul aspect practic legat de fermentatia acetica este obtinerea
otetului folosit la marinarea unor produse culinare si pentru conservarea legumelor
si fructelor. De asemenea, fermentarea boabelor de cacao, prin care acestea
capata aroma si alte caracteristici organoleptice specifice este acetica.
O importanta deosebita o prezinta cunoasterea caracteristicilor
microorganismelor acetice si a mecanismului fermentatiei acetice pentru
prevenirea si combaterea otetirii vinului.
In vinurile slabe se dezvolta bacterii acetice (mai importante fiind:
Acetobacter ascendens, A. orlenense, A. pasteurianus, A. vini acetati, A.
xylinoides, A. xylinum), care oxideaza, treptat, alcoolul din vin.
Conditiile favorizante ale otetirii vinurilor sunt urmatoarele: continut de
alcool sub 12%, aciditate volatila peste 1,4 g/l (in cazul vinurilor albe), respectiv
1,7 g/l (la vinurile rosii), accesul aerului, temperaturi ambiante de 19 - 38oC.
Otetirea vinului este o boala grava si periculoasa, deoarece, odata contaminat
vinul, nu mai exista remediu curativ. Prevenirea este necesara, in acest scop
folosindu-se acidul sulfuros liber, ca antiseptic.
Un rol important in raspandirea bacteriilor acetice il are musculita otetului
(Drosophyla melanogaster)..
101
Capitolul 3
102
• microflora aerului.
103
3.2 MICROFLORA APEI
Apa constituie cel de-al doilea mediu natural, dupa sol, pentru dezvoltarea
microorganismelor, datorita prezentei substantelor nutritive.
In acest caz, bacteriile sunt mai numeroase la circa 5-20 m adancime in
apa. La suprafata apar mai ales pe mil. Se intalnesc mai des:
a. Bacterii sulfuroase
b. Bacteriile fierului
c. Bacterii ce fermenteaza celuloza
d. Bacterii de putrefactie
e. Bacterii butirice
104
- sedimentare: se reduc cca 75% din microorganisme;
- coagulare: se reduc cca 90% din microorganisme;
- filtrare: se reduc cca 99% din microorganisme;
- tratare cu clor: se aplica numai dupa filtrare.
105
raspandit in sol si de mare importanta pentru agricultura, deoarece plantele
utilizeaza azotul sub forma de nitrati. Are loc sub actiunea a doua grupe de
microorganisme, numite generic " bacterii nitrificatoare ":
- prima etapa , cu obtinere de acid azotos, se realizeaza de catre bacteriile
nitroase, NITROSOBACTERII (genul Nitrosomonas, genul Nitrospira, genul
Nitrosocystis);
- a doua etapa, cu obtinere de acid azotic, se realizeaza de catre bacteriile
nitrice, NITROBACTERII (genul Nitrobacter).
• denitrificarea - a treia faza in care sarurile azotate sunt reduse la azot
molecular, sub actiunea microorganismelor: Bacillus subtilis, Bacillus
mycoides, Bacterium denitrificans, Pseudomonas denitrificans, Thiobacillus
denitrificans.
• fixarea azotului molecular - ultima veriga, care duce la imbogatirea solului in
azot, fenomen foarte important, determinat de faptul ca plantele verzi nu pot
asimila singure azot atmosferic. Astfel, prin acest proces, se mentine echilibrul
in azot. Fixarea azotului molecular se face cu ajutorul bacteriilor fixatoare de
azot nesimbiotice si simbiotice.
Dintre bacteriile fixatoare de azot nesimbiotice fac parte:
- genul Azotobacter - aerobe - (A. agilis, A. vinelanolii, A. nigricans)
- genul Clostridium - anaerobe - (C. pasteurianum, C. butyricum, C.
naviculum)
- genul Pseudomonas - (P. fluorescens, P. radiobacter)
Dintre bacteriile fixatoare de azot simbiotice fac parte cele din genul Rhizobium:
(R. phaseoli, R. trifoli, R. japonicum, R. meliloti, R. lupini, R. leguminosarum)
Aceste bacterii simbiotice se gasesc in nodozitatile plantelor leguminoase:
fasole, soia, mazare, lucerna, trifoi, aceste plante fiind numite " plante ce
imbogatesc solul in azot".
Circuitul sulfului - proces cu obtinere de acid sulfuric, este important prin faptul
ca formarea H2SO4 usureaza trecerea sarurilor minerale in stare solubila, crescand
astfel cantitatea de compusi minerali accesibili plantelor. Procesul este produs de
sulfo-bacterii si tiobacterii.
106
Circuitul fosforului - se realizeaza in trei etape:
• mineralizarea fosforului organic prin trecerea in fosfati - are importanta
deoarece compusii organici cu fosfor nu pot fi utilizati de catre plante;
• "mobilizarea fosforului" - se face prin actiunea bacteriilor nitrificatoare, a
tiobacteriilor;
• reducerea fosfatilor de catre bacteriile anaerobe, cu formare de acid fosforos,
acid hipofosfor si hidrogen sulfurat.
Acest proces duce la pierderea unor fosfati, elemente nutritive pentru plante;
poate fi evitat printr-o aeratie buna a solului. In acest sens, se poate folosi un
preparat cu bacterii, care imbunatateste nutritia cu fosfor a plantelor. Preparatul se
numeste "Fosfobacterin" si transforma fosforul din compusii organici in forma
minerala.
107
Capitolul 4
AGRICULTURA ECOLOGICA
108
Agricultura intensiva, de tip industrial, a contribuit si ea la degradarea si
poluarea mediului ambiant. Astfel, pe de o parte, "conceptia agrochimica" a dus la
neglijarea obligatiei de a intretine fertilitatea naturala a solului prin ingrasarea lui cu
materii organice corespunzatoare. Pe de alta parte, organizarea specializata, de
tip industrial, a crescatorilor mari de animale, a avut in vedere numai productia
animaliera comercializabila, neglijand productia de dejectii, reprezentand astfel o
rupere brutala a circuitelor biologice din natura.
In urma experientei acumulate in decurs de doua secole, omenirea a tras
invatamantul pretios al obligatiei de salvgardare a habitatului in calitate de
colaborator al naturii. In acest sens, sarcina principala a epocii actuale consta in
dezvoltarea de tehnologii corespunzatoare cu idealul umanist, astfel incat omul sa
poata deveni o fiinta cat mai deplin integrata in mediul social si ambianta cosmica.
Marele secret, cunoscut de catre antici, redescoperit si fundamentat de
stiinta moderna, il constituie tehnica formarii si mineralizarii humusului in practica
agricola.
O metoda biologica de fertilizare a ogorului consta in incorporarea resturilor
vegetale tocate (paie, coceni, tulpini) in aratura, asigurandu-se astfel cantitatea de
ingrasamant azotat necesara descompunerii resturilor vegetale.
La procesele biotransformarii materialelor organice in sol participa intr-un fel
sau altul intreaga microflora a solului.
Microorganismele au un rol important in solubilizarea elementelor minerale
indispensabile vietii plantelor: calciu, fosfor, potasiu. Se creaza astfel un circuit al
diferitelor elemente: carbon, azot, fosfor, sulf. In limbaj stiintific, pentru
desemnarea proceselor de descompunere a deseurilor organice si a dejectiilor
animale, circula 2 termeni:
109
hemiceluloza, xilani si pectine. in acelasi timp proteinele sunt scindate pana la
aminoacizi, iar grasimile in acizii grasi si alcoolii corespunzatori.
Aceste substante sunt metabolizate de microorganismele care populeaza
gramada de compost.
In timpul acestui proces, datorita respiratiei intense, temperatura atinge
+70oC. Aceste temperaturi mari asigura sterilizarea materialelor de agentii
patogeni pentru om, precum si distrugerea semintelor de buruieni.
Prin urmare, se numeste compostare, procesul de transformare pe cale
biologica a deseurilor celulozice si proteice, din surse menajere sau industriale,
precum si a dejectiilor de animale, intr-un produs nepoluant, cu mare valoare
nutritiva si energetica pentru microorganismele din sol si pentru plante, un
excelent amendament pentru sol.
Produsul obtinut prin compostare se numeste compost
Gunoiul de grajd supus fermentatiei este tot un compost, dar in vorbirea
curenta I se spune " gunoi fermentat sau putrezit".
110
sa nu lase ca amoniacul care rezulta din fermentatie sa se piarda in atmosfera,
conservand totodata si umiditatea.
Compostarea dureaza, in functie de felul deseurilor, intre 6 si 12 luni.
Compostul care rezulta este foarte apropiat prin compozitie de humusul
solului.
S-a constatat ca substantele solubile in apa, grasimile si pectinele sunt
primele care se descompun. Acestea sunt urmate de celuloza, iar lignina este cea
mai rezistenta la descompunere.
Medicul, chimistul si filozoful german Steiner a propus o tehnologie originala
de compostare a gunoiului de grajd. Steiner a enuntat principiile dupa care gunoiul
de grajd poate fi transformat intr-un ingrasamant organic concentrat cu efect
favorabil pentru mentinerea si cresterea fertilitatii solului.
Dirijarea proceselor de fermentare se realizeaza prin biopreparate .
Compostul biodinamic poate fi folosit in orice cantitati fara sa provoace
dereglari in procesul de crestere a plantelor.
111
desfacere si recladire a gramezii de compostare, avand grija sa se realizeze o
amestecare buna a straturilor superioare cu cele inferioare.
Prima remaniere a gramezii se face dupa 2-3 saptamani de compostare, a
doua remaniere facandu-se dupa alte 3 saptamani.
Temperatura in gramada trebuie mentinuta in jur de 60 oC.
Dupa 3 luni de compostare, umiditatea in gramada trebuie sa scada sub
40%, pentru ca procesele fermentative sa inceteze, temperatura scazand si ea la
30oC. Raportul C:N la acest tip de compost este de 18:1 - 20:1.
112
Capitolul 5
5.1 DEFINITII
113
factorii de mediu, stadiul de dezvoltare al fructelor si legumelor, gradul de coacere,
starea compozitionala a acestora, zona de amplasare a culturilor, starea de
sanatate si tratamentele fitosanitare aplicate livezilor si culturilor agricole.
Numarul lor variaza de la cateva zeci de mii de germeni pe gram pana la
cateva zeci de milioane de germeni pe gram (ex: la spanac s-au constatat intre 5 -
20 milioane germeni / gram)
Germenii de microorganisme fac parte din microflora saprofita (grec.
Sapros = putred, stricat). Aceasta este parazita, hranindu-se cu substantele
fructelor si legumelor in descompunere, dar nu produce, in conditii obisnuite,
imbolnaviri, sau patogena, adica, daunatoare sanatatii omului si animalelor.
Este dificil a se face o inventariere exhaustiva a microflorei epifite, astfel ca
se vor mentiona principalele categorii de microorganisme identificate pe fructe si
legume.
In general, fructele sunt invadate de mucegaiuri ce distrug, local, pericarpul,
permitand patrunderea in interiorul fructului a germenilor de suprafata. Printre cele
intalnite cu frecventa mare la mai toate fructele se amintesc genurile Monilia,
Phoma, Rhizopus, Penicillium, Oospora, Fusarium, Trichothecium, Aspergillus,
etc. (Specii mai importante: Penicillium glaucum, Rhrizopus nigricans, s.a.).
Mucegaiurile sunt detinatoarele unui echipament enzimatic foarte divers si eficace,
in sensul ca pot ataca aproape orice fel de substrat organic, fapt evidentiat si in
partea generala a acestui curs. Ele pot provoca putrezirea umeda si uscata
(Alternaria - provoaca putrezirea bruna, Botrytis cinerea - produce putrezirea
cenusie, Cladosporium - constituie agentul de putrezire negru-bruna la pepeni,
Fusarium si Trichothecium - patrund pe la codita fructelor si a legumelor
provocand putrezirea umeda, Penicillium - provoaca putrezirea umeda verde)
Prezenta drojdiilor din microflora epifita a fructelor si legumelor are ca efect
procese metabolice ce conduc la fermentatii, inmuierea pulpei si, in final, la
deprecierea calitativa a acestora. Multe specii de drojdii sunt utilizate in
fermentarea alcoolica sau acida a unor sucuri, in vederea obtinerii unor bauturi
fermentate. Printre acestea se amintesc: genurile Saccharomyces Rees,
Zygosaccharomyes, Torulaspora, Pichia, Saccharomycodes, Hansenula, etc.
In general, bacteriile actioneaza asupra fructelor si legumelor cu reactia
mediului slab acida, neutra sau alcalina. Exista si bacterii acido-tolerante (ex: cele
lactice), care se dezvolta asociate cu drojdiile de la care folosesc unii factori de
114
crester (biotina) sau metaboliti rezultati din activitatea drojdiilor. Bacteriile epifite
cuprind specii din toate categoriile (aerobe, anaerobe, facultativ aerobe, saprofite,
patogene, mezofile, termofile, acido-tolerante, etc.) si constituie o microflora
specifica legumelor si fructelor.
Informatiile referitoare la microflora patogena a fructelor si legumelor pot
constitui o baza suficient de bogata pentru lucrari stiintifice de mare amploare.
Lucrarea de fata nu-si propune decat abordarea rezumativa a acestui subiect, cei
interesati de acest domeniu putand consulta lucrari de bacteriologie sau
microbiologie medicala. Cu toate acestea, tinand seama de unele epidemii
declansate in ultimii ani, vom aminti pe scurt cateva informatii referitoare la
microflora patogena a fructelor si legumelor.
Consumarea sau prelucrarea fructelor si a legumelor fara spalarea si chiar
dezinfectarea acestora poate deveni periculoasa pentru oameni, din cauza
prezentei microflorei patogene epifite sau anaerobe. Unele fructe si legume contin
substante ce pot impiedica dezvoltarea acestor microorganisme, caz in care,
spalarea lor cu jet de apa sub presiune este suficienta. In alte situatii, simpla
spalare este insuficienta, caz in care este necesara dezinfectarea cu produse
speciale. Astfel, prin folosirea unor solutii in apa (1-3%) de hipoclorit de calciu
(clorura de var), cloramina, formalina, s.a., in care se cufunda timp de 5 - 30
minute produsele vegetale inainte de a fi prelucrate, se obtine un efect sterilizant
fara modificarea caracteristicilor organoleptice. Alteori, insa, este necesar sa fie
aplicate masuri speciale de sterilizare (termica) pentru a distruge germenii
sporulati rezistenti.
115
salmonazele, genurile Proteus, Aerobacter, Klebsiella si altele produc infectii
specifice.
Si familia Mycobacteriaceae cuprinde specii patogene pentru om. Specia
Mycobacterium tuberculosis din genul Mycobacterium provoaca infectia
tuberculoasa. Genul Brucella din familia Brucellaceae are specii ce produc infectia
bruceloasa, boala epidemica raspandita prin contaminare alimentara digestiva sau
prin contaminare indirecta si deosebit de periculoasa.
Dintre germenii de bacterii aerobe sau facultativ aerobe periculoase pentru
om, in microflora epifita a fructelor (in special) si a legumelor, importante sunt
bacteriile din genul Brucella, aflate in sol, praf si noroi, care produc infectia
bruceloasa. Din genul Bacillus, specia B. anthracis prezinta patogenicitate ridicata
pentru om si animale (ovine, in special), producand infectia carbunoasa (buba
neagra). Alte specii de Bacillus sunt nepatogene (B. megaterium, B. polymyxa, B.
brevis, s.a.).
Din microflora anaeroba, bacterii din genul Clostridium , multe specii sunt
patogene pentru om si animale, producand toxinfectii foarte grave. (Cl.
Perfringens, Cl.. septicum, Cl. botulinum, Cl. tetani, etc.).
Putrezirea amara se manifesta prin aparitia unor pete brune in interiorul fructelor
si legumelor, care capata un gust amar. Agentii imbolnavirii sunt mucegaiurile:
117
Gloeosporium fructigenus, Cephalothecium roseum, Trichothecium link,
Penicillium glaucum, P.italicum, Fusarium putrefaciens, s.a.
119
frecventa mai mare la tuberculii loviti, dar la umiditate mai mare de 80%. Aceiasi
agenti se dezvolta ca o pasla pe suprafata tuberculului care nu se usuca, ci din
contra, se inmoaie si se transforma intr-o pasta urat mirositoare. Limitele largi de
temperatura (5 - 30oC), in care isi poate desfasura activitatea, fac din acest
mucegai un periculos dusman al tuberculilor de cartof depozitati.
Un alt mucegai, Phytophtona infestans, provoaca mana cartofului, o boala
foarte raspandita si binecunoscuta de cultivatorii de cartof. Infectarea tuberculilor
se face prin conidiile ciupercii ce se formeaza pe frunze si ajung in sol cu apa de
ploaie. La recoltare, tuberculii bolnavi nu se deosebesc de cei sanatosi. In primul
stadiu al infectiei, pe suprafata lor apar pete mici maronii, putin adancite, care se
extind si brunifica tesuturile, inaintand in interiorul cartofului. Masurile profilactice si
de combatere a acestei periculoase boli sunt descrise pe larg in lucrarile
referitoare la aceasta leguma.
120
Fructele de tomate prinse in camp de temperaturile scazute din cauza
brumei devin sensibile la atacul mai multor ciuperci saprofite: Alternaria,
Penicillium, Mucor, etc.
Bolile curcubitaceelor
121
appendiculatus), vestejirea bacteriana (Corynebacterium flaccumfaciens),
patarea unghiulara (Sariopsis griseola sacc.) care defoliza plantele, mucegaiul
cenusiu (Botrytis cinerea), s.a.
Combaterea se face printr-un complex de masuri de protectie cuprinzand:
folosirea unor soluri rezistente la boli, tratarea semintei folosite, combaterea
chimica in perioada de vegetatie cu produse fungicide specifice, in dozele
prescrise de fitopatologi.
122
Dintre bacterioze, putregaiul moale, provocat de bacteria Erwinia
carotovora, este intalnit cu frecventa cea mai mare, mai ales in depozite, putand fi
prevenit daca in incinta temperatura este de 1oC si umiditatea relativa a aerului nu
depaseste 85%, impunandu-se o buna circulatie a aerului in jurul stivelor.
Tratamentul fitosanitar cu produse specifice (Tiradin, Cuzin) se face la seminte,
inainte de semanat.
Putregaiul alb are ca agent mucegaiul Sclerotinia sclerotirum. Alte boli mai
frecvente in timpul depozitarii sunt: fainarea (Erysiphe umbelliferarum), septorioza
(Septoria apiicola, S.levistici, S.petroselini), in care apar pete circulare brun-negre,
cu puncte albe in centru, ce patrund in adancimea radacinii, distrugand tesuturile,
si putregaiul negru, ce se manifesta prin aparitia, in timpul depozitarii, a unor
leziuni mari adancite. Tesuturile afectate se inmoaie si au pe suprafata un
mucegai paslos (Stemphylium radicinum). Tratamentul fitosanitar se face cu
Tiradin, Tecto, s.a., in timpul depozitarii.
123
pulverulent negru si fuzarioza cepei si usturoiului (Fusarium sq.), ce provoaca
putregaiul alb.
124
0.3m/s). In afara acestora, in cele mai multe cazuri se procedeaza la tratamente
profilactice si de combatere cu produse chimice recomandate de fitopatologi si
admise de legislatia romaneasca, atat in culturi cat si in depozite. Totodata,
trebuie sa se depoziteze numai fructe avand rezistenta genetica la atacul diversilor
agenti patogeni.
Una din micozele merelor, perelor si gutuilor este patarea cafenie, ai carei
agenti patogeni sunt mucegaiul Venturi inaequalis (sinonim Endostigme
inaequalis) V.pirina si Fusidadium dendriticum. Acestea ataca fructele in toate
stadiile de dezvoltare, producand pete circulare, la inceput cenusii, apoi brune, in
dreptul carora tesuturile crapa. Fructele tinere se deformeaza iar gustul pulpei
atacate este fad. Crapaturile de pe fructe constituie calea patrunderii sporilor de
Monilia fructigena, care produce putrezirea bruna sau monilioza, boala
cunoscuta de multa vreme in toata lumea si care produce pagube mari in livezi si
in depozite. Simptomele acestei boli se manifesta prin aparitia, inca din timpul
verii, pe fructele parguite, a unor pete brune ce se intind pe suprafata si cuprind
pulpa in adancime, fructul putrezind pana la urma in totalitate. Daca temperatura si
umiditatea ambientala sunt ridicate, pe suprafata fructelor, in dreptul zonei
putrede, apar sporii ciupercii, sub forma unor pernite dispuse in cercuri
concentrice. La temperaturile scazute din depozite, boala se poate extinde,
fructele putrezind si innegrindu-se fara ca pe suprafata lor sa mai apara vetrele cu
conidiofori. In aceasta faza, boala este cunoscuta sub denumirea de putregaiul
negru. Daca mucegaiul patrunde in interior pana la camera semintelor si de aici se
extinde in masa fructului, distrugand pulpa, putrezind-o complet, provoaca forma
de monilioza cunoscuta sub numele de putregaiul inimii.
Merele, perele si gutuile depozitate in spatii nearisite, calde si umede, sunt
atacate de mucegaiul Penicilium glaucum, care produce putrezirea albastra.
Aceasta boala se manifesta prin aparitia pe suprafata fructelor a unor micelii,
conidiofori si conidii de culoare verde-albastra, sub care pulpa fructului putrezeste.
La temperaturi scazute (sub 3oC), activitatea mucegaiului este oprita.
Adesea se intalneste la merele depozitate boala cunoscuta ca putregaiul
amar, provocata de mucegaiul Gloeosporium fructigenum, care patrunde prin
leziuni sau intepaturi de insecte. Boala se manifesta prin aparitia, pe fructe, a unor
pete brune ce se extind in intreaga pulpa, dandu-i acesteia un gust amar si o
culoare bruna. La acest putregai se asociaza si ciuperci saprofite, care grabesc
125
procesul de degradare. In conditii de temperatura si umiditate ridicate, merele,
perele si gutuile depozitate pentru iarna pot fi deteriorate de unele specii de
Fusarium, care patrund, prin rani sau intepaturi de suprafata, in interiorul pulpei,
provocand putrezirea fructelor, in timp ce la exterior se formeaza o pasla miceliana
alba sau roza.
Fructele de gutui pot fi imbolnavite de patarea bruna, manifestata prin
aparitia pe suprafata a unor pete circulare de 2 - 10 mm, avand, la inceput,
culoarea crem, iar mai tarziu, brun-roscata. Cand petele de fructe sunt grupate,
pulpa crapa, crapaturile inlesnind patrunderea altor microorganisme ce produc
putrezirea. Boala este urmare a atacului mucegaiului Fabraea maculata.
Piersicile, caisele si prunele sunt foarte sensibile la atacul unor
microorganisme ce le pot degrada complet, motiv pentru care, inaintea depozitarii
acestora peste iarna, se va face o sortare riguroasa pentru indepartarea oricarui
fruct bolnav, lovit sau ranit.
O bacterioza raspandita este ulceratia fructelor de piersic, cais si prun,
recunoscuta prin aparitia pe suprafata fructului a unor pete circulare avand
diametrul de cca 1 mm, culoare galben-portocaliu. Pulpa fructelor se crapa in
dreptul petelor, permitand accesul altor agenti de infectie si isi pierde valoarea
nutritiva si organoleptica. Boala este produsa de bacteria Pseudomonas syringae.
Putrezirea bruna sau monilioza la samburoase se manifesta pentru
fructele ajunse la maturitate prin putrezirea pulpei si aparitia unor pete mici -
sporodochiile, galben - cenusii sau brune, dispuse neuniform pe suprafata
fructului. Sporodochiile perforeaza epicarpul iar sucul zaharat se scurge ina afara,
lipind fructele in pachete de fructe, putrezite si mumificate. In acest mod, infectia
se extind rapid in intreaga populatie de fructe depozitate. Mare parte din pagubele
produse in depozite de aceasta boala pot fi evitate, adoptandu-se metoda de
depozitare in cofraje prin care poate circula aerul.
Agentul patogen este Monilia laxa.
Antractnoza nucului este cea mai raspandita si pagubitoare micoza la
nuc. Fructele de nuc pot fi atacate in toate stadiile de dezvoltare. Pe suprafata lor
apar, la inceput, pete mici brun-roscate si apoi cenusii, ce ating diametrul de 1 - 2
cm, extinzandu-se in faza finala a bolii. Miceliul agentului patologic Gnomonia
juglandis patrunde in miez, pe care il altereaza, formand ascospori care pot
germina la temperaturi cuprinse intre 5 - 31oC in conditii de umiditate relativa in
126
locurile de depozitare de peste 65%. O alta boala a fructelor de nuc, ce incepe din
timpul vegetatiei si continua pe timpul depozitarii este arsura bacteriana,
provocata de Xanthomonas juglandis. Ea se recunoaste datorita faptului ca
fructele se brunifica, pericarpul si endocarpul putrezesc si se innegresc, pe
suprafata fructelor ramanand un excedat apos reprezentat de colonia bacteriana.
Citricele (lamaile, portocalele, mandarinele) si bananele fac parte din grupa
fructelor perisabile. Durata lor de pastrare poate fi destul mde mare daca fructele
sunt depozitate la temperatura de 4 - 6oC si umiditatea relativa a aerului de 80 -
90%. In perioada transportului, prin manipulari repetate, citricele sunt lovite sau
ranite, prin leziunile formate putandu-se dezvolta microorganisme.
Cele mai des intalnite microorganisme sunt: Penicillium italicum si
P.digitatum, care la inceputul infectiei formeaza pe suprafata fructelor de citrice
pete circulare cu diametrul de cca. 5 mm, sub care tesutul este moale si capata
culoarea cenusie. La temperaturi de 8 - 10oC (temperatura din interiorul frigiderelor
casnice), petele evolueaza rapid, hifele de mucegai formand o pasla moale, la
inceput de culoare alba, apoi verde-albastruie sau chiar verde-brun, ceea ce arata
ca a inceput fructificarea mucegaiurilor. In aceasta faza, aspectul mucegaiului se
schimba, devenind pulverulent, astfel ca se poate extind foarte repede in ambalaje
si pe alte fructe sau in depozite. De aceea este recomandabil ca fructele atacate
de mucegai sa fie arse, iar depozitele si ambalajele dezinfectate cu solutii
dezinfectante (cloramina 2%, formol 1%, cloranil 1%, sulfat de cupru 1%). De
asemenea se poate face fumigarea depozitelor si ambalajelor prin arderea sulfului
(3-100g/m3) sau a unui amestec de hipermanganat de potasiu cu formol (1g la 10
l), in doze de 1 2 l/m3. Prin adaugarea de formalina peste hipermanganat, in
castroane sau farfurii imprastiate in depozit se formeaza un fum abundent,
inecacios, care se imprastie in intreaga incapere si in crapaturi, in cca. 12 ore
distrugand si formele sporulate ale microorganismelor. Tratamentul se va face cu
masca de gaze. Dupa mai mult de 12 ore de la tratament se aeriseste incaperea
pana nu se mai simte mirosul de formaldehida.
Bananele, pentru a putea rezista pana la comercializare, se depoziteaza
functie de gradul de coacere (recunoscut dupa culoarea fructelor) la 12 - 14oC si
umiditatea relativa a aerului de 90 - 95%, in camere speciale, aerisite si in
prezenta etilenei.
127
Unele boli produse de microorganisme strugurilor de masa
128
retele, care depreciaza gustul si valoarea comerciala a ciorchinilor. Strugurii
infectati de Oidium tuckeri nu se pot pastra deoarece sunt invadati destul de
repede de ciuperci saprofite care provoaca degradarea lor. In orice caz, pentru
pastrare este necesara o temperatura de -1oC pana la +1oC.
Mucegaiul cenusiu este produs de specii de Botrytis: B.cinerea,
B.fuckeliana. Acestea ataca toamna pe boabe, dupa ce se acumuleaza suficient
zahar in celule. Boala se produce, de regula, prin intepaturile insectelor, fiind
favorizate de rani si crapaturi existente in pielita boabelor, mai ales cand
umiditatea si temperatura ambiante sunt ridicate. Boala se manifesta prin
brunificarea pielitei, care se desprinde usor de pulpa, boaba putrezita acoperindu-
se in intregime cu o pasla cenusie. Ea evolueaza rapid prin invadarea altor boabe
de catre miceliile ciupercilor. In unele regiuni din Franta (ex. Valea Rinului) sau
Romania (Cotnari), ciuperca produce asa-zisul "putregai nobil", ce apare pe
ciorchinii cu expozitie solara si bine aerisiti. In acest caz, mucegaiul nu mai
fructifica, pielita boabelor se stafideste, capata o culoare vinetie si se subtiaza,
astfel incat evaporarea apei se intensifica, iar mustul din bob se concentreaza.
Sub influenta putregaiului nobil se pierde peste 50% din productie, prin
concentrarea mustului, in schimb se castiga foarte mult calitativ.
Prin dezvoltarea sa pe boabele de struguri, Botritis cinerea consuma
zaharul si acizii, dar, spre deosebire de alte tipuri de mucegaiuri, acizii organici
sunt consumati cu viteza mai mare decat zaharul. Prin fermentarea zaharurilor
rezulta glicerina si dextranul (poliglucan omogen), iar in anumite conditii din
glucoza se formeaza manita, acid citric, acid acetic, acid lactic si alcool etilic.
Musturile provenite di strugurii atacati de putregaiul nobil fermenteaza mai
incet, vinurile obtinute au un continut alcoolic mai redus si prezinta un buchet cu
totul deosebit, aproape imposibil de definit si cu tendinta de brunificare in timp.
Soiurile de struguri de masa au o sensibilitate diferita fata de atacul acestor
mucegaiuri nobile, foarte rezistente fiind cele de Coarna neagra, Italia, Afuz-Ali,
care trebuie preferate pentru evitarea pierderilor in depozite. Reducerea pierderilor
se poate realiza printr-o sortare severa atat la recoltare cat si la conditionare si
ambalare in vederea depozitarii, eliminand ciorchinii sau chiar boabele infectate.
O alta boala micotica este antracnoza strugurilor, produsa de Ensilnoe
ampelina cu forma conidiana Gloeosporium ampelophagum, se manifesta prin
aparitia pe pielita boabelor a unor pete mici circulare, de culoare bruna. In dreptul
129
petelor pielita se ingroasa, iar bobul se deformeaza din cauza cresterii inegale.
Strugurii infectati au aspect neplacut si sunt lipsiti de valoare comerciala. Soiurile
de struguri mai sensibile la antracnoza sunt Sultanina, Afuz - Ali, Regina viilor.
In timpul depozitarii strugurilor de masa pot aparea si alte infectii micotice,
dintre care amintim: putregaiul alb, provocat de Charinia diplodiella, putregaiul
negru, avand ca agent Phoma uvicola si amareala strugurilor data de
Melancolium fuligincum. Strugurii de masa mai pot fi degradati de diferite
mucegaiuri precum: Rhizopus stolonifer, Penicillium sp., Aspergillus sp.,
Chladosporium herbarum, a caror activitate este inhibata, insa, de temperaturi de
1oC pana la +0.5oC sau de gazare cu SO2.
130
Specia Conditiile ambientale Durata Punctul Caldura
temperatura umiditatea de pastrare de inghetare degajata
o
( C) (%) (oC) (kcal/zi)
Banane 12 - 14 90 8 - 10 zile -0.3 2700
verzi
Banane 14 - 15 90 2 - 5 zile -0.5 3400
mature
Caise -0.5 +0.5 90 2 - 4 sapt. -1 320
Gutui -0.5 - 0 90 2 - 3 luni -2 -
Grapefruit 10 - 15 85 - 90 3 - 6 luni -1 -
Lamai 11 - 15 85 - 90 1 - 4 luni -1.6 -
verzi
Lamai 0-5 85 - 90 3 - 6 luni -1.8 -
mature
Mandarine 2-7 85 - 90 3 - 6 luni -0.9 -
Mere soi 0 88 - 92 4 - 8 luni -2.3 110
rezistent
Mere soi 3 - 4 88 - 92 3 - 6 luni -2 430
sensibil
Pere soi -1 90 1 - 3 luni -1 160
timpuriu
Pere soi -0.5 90 3 - 6 luni -1.2 160
tarziu
Piersici -0.5 85 - 90 2 - 5 sapt. -0.7 100
Portocale 2-7 85 - 90 1 - 4 luni -0.4 430
Struguri -1 - 0 85 - 90 2 - 4 luni -2 200
Lutz M.S., Hardenburg R.E. : The commercial storage of fruits, vegetables and
florist and nurseystocks; U.S. Dept. Agr. Handbook, No.66, 1968
131
5.4 CATEVA INFORMATII GENERALE ASUPRA MICROFLOREI FRUCTELOR
SI LEGUMELOR DESHIDRATATE
132
Capitolul 6
133
In functie de produsul obtinut in urma fermentatiei fructelor, deosebim doua
categorii de bauturi de casa: fermentate, consumate sub forma binecunoscutelor
vinuri (fructine sau cidruri de imitatie) si distilate, obtinute prin distilarea intr-o a
doua etapa si cunoscute sub denumirea de rachiuri. Ambele categorii de bauturi
se pot obtine din orice fruct si leguma ce contine o cantitate mai mare sau mai
mica de zaharuri capabile a produce alcool prin fermentare, fie separat, fie in
amestec, iar uneori, "ajutate" prin adaosuri de zahar, glucoza si alte zaharuri,
avand concentratii si coeficienti de puritate variabile, provenite din alte surse, de
obicei industriale (zahar brut si rafinat, siropuri de glucoza, etc.).
Prepararea bauturilor de casa fermentate decurge, in general, intr-o
maniera comuna, adica cuprinde "operatii tehnologice" ce vor fi aratate, pe scurt,
in continuare.
La inceput fructele si legumele trebuie selectate, in sensul ca vor fi alese
numai fructele sanatoase, bine coapte, pentru a avea un continut cat mai mare de
zaharuri. Se evita, pe cat posibil, fructele necoapte, acre sau bolnave.
Intr-o a doua etapa tehnologica, fructele si legumele se spala pentru a
indeparta impuritatile organice si minerale de pe suprafata lor, precum si
eventuale urme de pesticide cu care au fost tratate in timpul vegetatiei. Spalarea
se face prin scufundarea in apa (pentru fructele cu textura tare: mere, pere, gutui,
etc.) si jet de apa pentru fructele mai moi (capsuni, cirese, visine, s.a.).
In etapa urmatoare se face maruntirea fructelor prin razuire, folosirea
masinilor de tocat in situatia fructelor tari si zdrobire sau presare (pasatricizare) in
cazul celor moi. Dupa posibilitati, in functie de "dotarea tehnica" a fiecarui
producator, (roboti de bucatarie, etc.), se alege procedeul cel mai convenabil.
Modul de dirijare al fermentatiei materiei prime este hotaratoare asupra
calitatii si randamentului bauturii de casa. Obtinerea unor bauturi cu concentratie
ridicata de alcool etilic, ca produs al fermentatiei principale, dar si a unor produse
secundare de fermentatie, importante in crearea "buchetului" specific bauturii
respective, reclama un anumit continut de zaharuri fermentescibile si prepararea
unui inocul (maiaua) de drojdii adecvat. De aceea, se recomanda folosirea unor
culturi de drojdii selectionate (de obicei, de tipul celor de bere sau spirt). Se pot
obtine rezultate bune si cu drojdii din specii spontane, daca li se asigura conditiile
de temperatura pentru inmultire si fermentare. Aceasta se poate realiza, in
134
prealabil, folosind cantitati reduse de must, similar celui ce va trebui fermentat,
asigurandu-se conditiile optime de inmultire viguroasa a drojdiilor (temperatura si
concentratia de zaharuri), asa cum se va arata in continuare:
Cidrul este o bautura fermentata obtinuta din mere. Productiile obtinute din
plantatiile de mere depasesc adeseori posibilitatile de valorificare si depozitare in
stare proaspata, obligand producatorii sa le transforme in bauturi fermentate,
denumite vinuri de mere sau cidruri. Franta este tara cu cea mai mare productie
din acest vin, care, in cea mai mare parte (85 - 90%) este supus distilarii pentru
obtinerea rachiului de mere invechit cunoscut sub numele de Calvados. Si la noi s-
a extins producerea rachiului de mere, insa el se obtine direct prin fermentarea
merelor si distilarea borhotului fermentat, fara a mai trece prin faza de must de
mere.
137
Merele din sortimente diferite, de preferat sortimente mai acrisoare dar
sanatoase, bine coapte si nelovite, sunt spalate si zvantate. Ele se maruntesc prin
diferite procedee si utilaje (zbrobitoare, razuitoare, masini de tocat, etc.) din inox
sau emailate, pregatindu-se in acelasi mod ca pentru obtinerea sucului de mere,
adica masa rezultata se transfera la o presa manuala de stors, in saculete de
panza rezistenta, sau la o pasatrice, extragandu-se cat mai mult suc (incalzirea
pana la 55 - 65oC mareste randamentul si inhiba o parte din enzimele ce provoaca
innegrirea mustului). Sucul rezultat se trateaza cu dioxid de sulf in solutie (2 - 3g
SO2/hl) sau metbisulfit de potasiu (4 - 5g/hl) ca antioxidanti care previn innegrirea
mustului obtinut, deoarece este stiut ca merele, perele, gutuile, prin maruntire se
innegresc in prezenta aerului transmitand acest defect si cidrului obtinut din ele.
Randamentul de extractie folosind utilajele amintite se ridica la 50 - 60%.
Mustul tratat este depozitat in incaperi racoroase sau camere frigorifice (la
temperaturi sub 10oC) timp de 8 - 12 ore pentru limpezire - deburbare
(fr.debourber = a curata). Partea limpede este colectata prin sifonare cu un furtun,
iar sedimentul se refoloseste cu alte sarje. Mustul limpede sulfitat, continand
zaharuri (cca. 50 - 100g/l) este supus corectarii concentratiei de zahar prin adaos
de zaharuri, tinand cont ca, teoretic, din 17g zahar rezulta 1o alcoolic la litru, iar
cidrul va trebui sa aiba o tarie alcoolica de cel putin 12%.
Adaosul de zahar in cazul descris va fi diferenta dintre continutul de
zaharuri existent in must (masurabil cu refractometrul de mana) si cel necesar
pentru taria de 12o alcoolice. Acest mod de calcul este valabil pentru toate
musturile din care se prepara bauturile fermentate de casa.
Mustul astfel pregatit este insamantat cu inoculul de drojdii pregatite in
prealabil din drojdii ce se comercializeaza sau din drojdiile de vin selectionate
chiar de producator. In ambele cazuri, este bine ca inoculul (maiaua) sa se
prepare separat, in cantitati mici la inceput (0.5 - 1l) si sa fie inmultit ulterior in 1 - 3
etape, inainte de a fi folosit in proportii de 3 - 7% pentru fermentarea cidrului.
Prepararea inoculului este foarte simpla si poate fi facuta de orice
persoana, indiferent de gradul de pregatire. O cantitate (50 - 100g) de drojdie
comerciala este introdusa in 0.5 - 1l must ajustat cu zahar (pana la 210g/l), avand
temperatura de 18 - 25oC. Pentru omogenizare se amesteca intr-o butelie de
sticla sau polietilena, colorata si inchisa cu un dop prevazut cu o mica gaura.
138
Butelia va plina doar trei sferturi. Se lasa la fermentat o perioada de 24 ore, timp in
care se agita, usor, de cateva ori.
Intr-un alt vas de 4 - 10 ori mai mare, prevazut cu dop si palnie de
fermentare, se pregateste un must asemanator celui ce se doreste a fi fermentat si
se transfera maiaua primara preparata, operandu-se in acelasi mod descris
anterior.
Maiaua secundara se foloseste ca inocul de productie, in proportiile amintite
pentru fermentarea mustului. Asadar, este necesar, ca inainte sa inceapa
vinificarea, sa se estimeze cantitatea de must ce urmeaza a fi prelucrata. Cu
aceasta ocazie se atrage atentia ca este posibil sa se adauge apa (in proportie ce
nu va depasi 30%), cu conditia ca apa sa fie in prealabil declorinata si sterilizata,
inainte de amestecare, prin fierbere minim 40 de minute si racita la temperatura de
25 - 30oC.
Durata fermentatiei zgomotoase in conditii normale dureaza cam 7 - 10 zile,
dupa care ea conyinua lent cateva zile. Cam la 2 - 3 saptamani dupa terminarea
fermentatiei, cidrul se limpezeste si se trage de pe drojdie, trecand partea limpede
intr-un vas afumat cu 1/4 - 1/2 baton de sulf si se infunda, ori se transfera in sticle
pentru a fi consumat ulterior, ingrijindu-se la fel ca si vinul din struguri. Un cidru
bine pregatit si ingrijit, cand este consumat dupa cativa ani, va crea
consumatorului senzatii de placere de neuitat, contribuind totodata la mentinerea
unui echilibru mineral-vitaminic, deoarece cidrul este bogat in magneziu, siliciu,
fier, potasiu, calciu, acid malic si vitaminele A, B si C.
Drojdia tulbure de pe fundul vasului se poate folosi drept inocul pentru alte
sarje de vin sau se valorifica in mai multe moduri: fabricarea picheturilor utilizate
pentru obtinerea rachiurilor distilate; amestecarea cu pulpa de mere, apa si
zaharsi reluarea fermentarii pantre obtinerea concomitenta a pichetului si a
borhotului din care prin distilare se obtine rachiul de mere; distilarea impreuna cu
alte drojdii si borhoturi pentru obtinerea rachiurilor naturale, etc.
In afara de cidrul original de mere, in gospodariile rurale, si nu numai, se
mai pot prepara si alte bauturi din fructe, denumite impropriu "vinuri de fructe",
deoarece notiunea de vin se refera exclusiv la cel obtinut din fructele vitei de vie.
Prin analogie, bauturile fermentate obtinute din alte fructe, ar putea purta numele
de fructinuri, completate cu denumirea fructei majoritare (in cazul unor combinatii
sau cupaje). Ele se prepara in acelasi mod cu cel descris in cazul merelor,
139
tinandu-se seama insa de unele caracteristici ale fructelor prelucrate:
(randamentul la presare - mai mare in cazul fructelor moi; continutul de zaharuri -
uneori mai mare sau mai mic ca in cazul merelor; aciditatea fructelor - mai redusa
in cazul unor fructe ca zmeura si capsuna, sau mai mare la visina si coacaza
alba). Alteori, pentru combaterea si ameliorarea unor caracteristici organoleptice si
fizico-chimice ale musturilor, se fac amestecuri (cupaje) din doua sau mai multe
fructe sau legume, ce ar putea deveni secretul producatorului.
140
Acest fructin este o bautura cu un buchet deosebit de apreciat, are o
culoare galben-aurie si, in functie de concentratia zaharului adaugat si de cum
este condusa fermentatia, se obtin sortimente cu tarii alcoolice diferite (intre 8o si
16o) si variante de desert, demiseci sau seci.
De asemenea pot fi realizate diferite cupaje, folosindu-se si alte fructe sau
musturi din fructe in amestec, avand caracteristici organoleptice specifice si chiar
anumite proprietati farmacologice (de ex. afrodisiace).
Fructinul din fructe de maces se prepara din fructe proaspete sau usacte
de maces. Fructele de maces sunt cunoscute si apreciate pentru continutul lor
ridicat de vitamina C si flavonoide (vit. P). Ele se recolteaza toamna, cand sunt
coapte. Apoi sunt curatate, spalate si uscate, iar daca se folosesc fructele
proaspete, acestea se maruntesc prin masina de tocat. Fructele uscate se
maruntesc prin spargere. Se mai poate folosi si pulpa de macese, fara samburi,
(feinschnitt), ce se procura de la magazinele de plante medicinale.
Ingrediente: 0.5 kg macese uscate (3.5 - 4 kg macese proaspete), 1.5 kg
zahar, 2 lamai, cca 20 g substante nutritive, 10 l apa.
Metoda de lucru: Fructele de maces, uscate sau proaspete se maruntesc.
Cele proaspete se transforma intr-o pasta grosiera din care este dificil sa se
extraga sucul si de aceea se adauga zahar pentru macerare (20% din cantitatea
totala de zahar necesar) si se amesteca bine. Amestecul rezultat se opareste cu 4
l apa fiarta, iar dupa racire se adauga drojdia de bere amestecata in prealabil in 2l
sirop racit la 20 - 25oC. Se ajusteaza cantitatea cu apa fiarta si racita. Vasul este
acoperit cu panza curata si pus la fermentare la 18 - 28oC, amestecandu-se zilnic.
Dupa 5 - 7 zile se adauga inca 1 - 2 l sirop, preparat din restul de zahar prevazut
in reteta, pentru inviorarea fermentatiei. Fermentatia continua inca cca. O
saptamana, iar dupa limpezire fructinul este transferat in recipientii de "asezare" a
sedimentului fin, avandu-se grija ca acestia sa fie complet plini. Dupa limpezire,
fructinul de macese este tras in buteliile sau recipientii de consum. Vasele de
limpezire se dezinfecteaza prin afumare cu bioxid de sulf sau metabisulfit, in
proportiile mentionate mai inainte, folosindu-se de obicei sticle incolore clatite in
prealabil cu bioxid de sulf, care se dopiuesc si se tin in camari racoroase, pentru
consumul curent. Pentru pastrari mai indelungate, sticlele se stivuiesc in pozitie
orizontala.
141
In vederea imbunatatirii buchetului se pot adauga, inainte de faza de
fermentare, flori de soc sau alte plante aromate, in cantitati mici (cca. 5 - 10 g la
10 l fructin). Modul de preparare poate fi simplificat in sensul folosirii intregii
cantitati de zahar inca de la inceput, inocularea de drojdii facandu-se dupa racirea
intregului amestec la temperatura de fermentare.
143
fermentare se scot si se pun dopuri fara sa fie presate, pentru a permite gazului
carbonic sa iasa afara.
145
Cand vinul este destul de colorat si suficient de astringent se face tragerea
vinului (ravacitul) de sub bostina, printr-o canea, iar bostina se preseaza
amestecandu-se vinul ravac cu vinul rezultat de la presare. Amestecul este "tras"
in vase curate si afumate cu sulf, prevazute cu palnii de fermentare pentru
fermentarea in continuare. Opreratiile urmatoare sunt similare cu cele de la
prepararea vinului alb.
Prepararea vinurilor aromate (tamaioase) se face in mod similar cu
metoda aplicata la vinurile rosii, cu deosebirea ca fermentarea mustului pe bostina
este de numai 2 - 3 zile. Recoltarea strugurilor tamaiosi (Muscat Ottonel,
Tamaioasa romaneasca, Busuioaca de Bohotin, Busuioaca roza, Muscat
Hamburg, s.a.) se face cand incep sa se stafideasca (au 250 - 280 g/l zaharuri).
Se pot obtine vinuri aromate si prin adaugarea la inceputul fermentatiei a unor flori
sau parti de plante aromate ale caror arome se armonizeaza cu buchetul vinului
(ex: flori de soc, iasomie, frunze de indrusain, busuioc, etc.). Aceasta metoda se
poate aplica cu bune rezultate la vinificarea hibrizilor direct producatori (hibridul
Noah sau Nova) din care se obtin vinuri cu un buchet specific - denumit foxat
(deoarece il apropie de mirosul neplacut cu care vulpile isi marcheaza teritoriul).
Vinul pelin este un sortiment de vin special, obtinut prin adaugarea florilor
uscate (200 - 300 g/hl in saculeti de panza) sau a maceratelor din flori de pelin in
146
mustul supus fermentarii, pentru a-i imprima gustul amarui si aroma de pelin.
Pentru ca vinul sa capete un gust mai placut, impreuna cu floarea de pelin se mai
adauga si o mica cantitate de gutui taiate felii, iar pentru a-l armoniza sub aspect
gustativ, el se cupajaza cu alt vin. Daca producatorul nu are inca experienta
necesara, este sfatuit sa faca in prealabil incercari pe microprobe, adaugand, la
inceput, cantitati reduse de extract, pe care le va mari progresiv, pana la obtinerea
gustului dorit.
Vinurile pelin se obtin in mai multe subsortimente: pelin sec, pelin dulce,
pelin "de mai".
Pelinul dulce se prepara din boabe de struguri care se pun la fermentat
intregi. In vase se adauga floare de pelin, gutui taiate si must proaspat. Dupa
umplere, vasul se infunda si se lasa sa fermenteze 3 - 4 luni, cand strugurii se scot
si se preseaza. El se mai poate prepara si dintr-un vin sec caruia i se adauga
macerat de pelin, must concentrat prin fierbere sau sirop de zahar (pana la o
concentratie de 180 - 200 g/l determinata refractometric).
Pelinul de mai se prepara din vin sec, must concentrat sau sirop de zahar
(15 - 20 g/l) si un macerat preparat din urmatoarele ingrediente (pentru 1 hl): 200 -
250 g flori de pelin (Artemisia absinthum), 50 g pelinita (Artemisia austriaca), 20 -
30 g samanta de coriandru (Coriandrum sativam), 20 g cuisoare (Caryophylli flos),
30 - 40 g scortisoara (Cinnamomi cortex) si 25 - 50 g coji de gutui (Cydonia
vulgaris). Ingredientele se macereaza in 2 l alcool 60% timp de 8 - 10 zile,
alcoolatura astfel obtinuta adaugandu-se peste un hectolitru din vinul pregatit asa
cum s-a aratat mai inainte.
Vermutul este o bautura alcoolica obtinuta din vin cu adaos de alcool etilic,
macerat aromat din plante si zahar, avand concentratia alcoolica de 16 - 18%,
continut de zaharuri de 100 - 180 g/l (vermutul sec numai 64 g/l) si un gust
caracteristic, placut si catifelat, predominant de pelin. Vermuturile pot fi albe sau
rosii, seci sau desert si se servesc atat ca bauturi aperitive cat si ca deserturi. Ele
se servesc bine racite, in pahar aperitiv sau tumbler (pahar mare), fara gheata, cu
o rondela de lamaie sau portocala ca decor pe marginea paharului si, la cerere, cu
sifon foarte rece. Cele mai renumite marci de vermut sunt cele franceze (Chastnet,
Chambery, Dubonnet, etc.) si italiene albe si rosii, seci si dulci (Cinzano, Martini,
Riccadonna, Gancia, etc.).
147
Pentru obtinerea vermutului, ingredientele componente (vinul, siropul,
esenta si alcoolul) se amesteca in vederea cupajarii in vase de sticla sau plastic, in
urmatoarea ordine: esenta din plante, alcoolul, siropul si vinul, si eventual
cantitatea de acid organic (tartric sau citric). Componentele se amesteca bine
pana la omogenizare. Se corecteaza gustul si aroma vermutului preparat si se
lasa la macerat 1 - 3 luni pentru maturare si armonizare. Dupa aceasta perioada
de timp, vermutul se decanteaza de pe sedimentul format si se trage in sticle.
Acestea se pastreaza in pivnite racoroase si uscate.
In continuare sunt expuse doua retete de vermut:
Rosu: 10 l vin rosu (12o), 0.94 l alcool (80o), 1.6 kg zahar, 0.2 l macerat de plante,
15 g acid tartric (citric), 5 - 10 g caramel.
Alb: 10 l vin alb (12o), 0.94 l alcool (80o), 1.6 kg zahar, 15 g acid tartric (citric), 10
g flori de pelin, 5 g coji de protocale, 2 g coji de grapefruit, 10 g samanta de
coriandru, 1 g cuisoare, 1 g seminte de anason (Pimpinella anisum).
Bitterul este un aperitiv preparat din vin alb sau negru, esente si macerate
din plante aromate, fructe de citrice, alcool si zahar. Continutul de alcool variaza
intre 25 si 30%, iar cel de zahar intre 50 si 200g/l.
Sunt cunoscute 3 grupe de bitter: aperitive (Camparri, Rossi), stomahice
(Fernet) si amestecuri (Orange, Amer, Peach, s.a.). Campari este bitterul cu cea
mai mare popularitate. El are 27% alcool si 160 g/l zahar. Bitterul este limpede,
cristalin, fara sedimente, are gust si miros fin, caracteristic produsului (amarui).
Exista nenumarate retete de bitter, unele mai complicate ca altele, astfel
incat, in continuare, vom prezenta unele retete mai usor de realizat in gospodariile
agroturistice: 50 g gentiana (Gentiana punctata, G.lutea), 20 g scortisoara, 10 g
flori de pelin, 3 g coji de portocala, 10 g coji de lamaie, 100 g miez de nuca, 10 g
samburi de migdale amare (Prunus amygdalus), 10 l vin rosu. Bitterul autohton
"Taina plantelor" (dupa Maria Pop) contine urmatoarele plante din care se face
extractul: aloe, ghintura, ienupar, smirna, angelica, iris, tintaura, origan, salvie,
sanziana, pedicuta, galbenele, salcam, sofran, frasin, mesteacan, troscot, afin,
nuc, soc, coada soricelului, coada calului, menta, sunatoare, maces, pelin,
cimbrisor, fenicul, coacaz, scortisoara. Conform declaratiilor autoarei, bitterul
preparat din aceasta esenta (si respectand probabil caracteristicile compozitionale
ale bitterului) are proprietati terapeutice deosebite: inlatura oboseala si stressul,
148
stimuleaza digestia, dezintoxica organismul, etc. Un bitter "fortifiant" se poate
prepara si din 100 l must proaspat in care se adauga un saculet cu urmatoarele
cantitati de plante uscate: 3 g gentiana, 100 g tintaura, 100 g coaja de portocala,
100 g floare de pelin, 5 g radacina de obligeana, 100 g miez de alune maruntit, ,
80 g ciumarea, 50 g pelin mic, 50 g salvie, 50 g radacina de stanjenel, 5 g chinina
galbena, 30 g scortisoara si 15 g cuisoare.
151
proportie de peste 70%: cruson de vin, cruson de sampanie, cruson de Madera.
Iata doua exemple:
1. vin rosu 2.5 l, lichior de cirese 200 ml, coniac 200 ml, fructe intregi si taiate
(cirese, piersici, caise, mere) in amestec 400 g se amesteca intr-un bol de
sticla cu capacitate adecvata. Se serveste rece, frapat.
2. vin alb 250 ml, vin rosu 750 ml, rom 50 ml, coniac 50 ml, zahar pudra 200 g,
fructe aromate (visine, caise, capsuni) 1 kg se amesteca, se frapeaza si se
serveste cu sifon rece in pahare aperitiv, tubulare sau cupe.
Cvasul este o bautura slab alcoolica, racoritoare, cu gust dulce acrisor,
preparata din fructe, cereale si apa, puse impreuna la fermentat timp de 12 - 14
ore la temperatura de 22 - 28oC. Apoi se trage in sticle unde fermenteaza in
continuare cateva zile la temperaturi mai scazute 10 - 15oC. Depozitarea se face
in incaperi reci. Gustul, aroma si culoarea sunt imprimate de fructele adaugate,
taria alcoolica este de 1.5 - 3.5%, aciditatea depaseste 10 g/l iar continutul de
zahar variaza, in functie de reteta folosita, intre 60 - 200 g/l. Sunt aratate, in
continuare, cateva retete de preparare a cvasului ce pot fi aplicate in gospodariile
rurale: 12 l apa, 1 kg paine de secara (paine neagra), 600 g miere (800 g zahar),
coaja unei lamai, 100 g stafide, 25 g drojdie de bere; painea taiata felii este uscata
in cuptor, feliile asezandu-se intr-un borcan de 15 l. Se pune coaja de lamaie
taiata marunt si se toarna deasupra apa clocotita. Se acopera cu o panza alba,
curata, lasandu-se la racit pana ajunge la 37 - 40oC. Intr-un alt borcan mic se
pregateste drojdia prin dizolvare in apa calduta (30oC) amestecata cu miere sau
zahar (250 g/l) pana cand se produce o spuma la suprafata, moment in care
ingredientele din reteta si drojdia preparata se amesteca cu apa calduta din
borcan. Dupa cca. 12 - 14 ore de fermentare, timp in care se amesteca cu o
lingura de lemn de 2 - 3 ori, mustul in fermentare este filtrat prin 2 panze avand un
strat de vata la mijloc si se transfera in buteliile de depozitare, in fiecare sticla
adaugandu-se 2 - 5 stafide. Sticlele se infunda cu dopuri ce se leaga cu sarma
pentru a rezista la presiune si se depoziteaza cateva zile in pivnite sau alte spatii
racoroase pentru fermentarea in buteliile de consum.
Cvas de lamaie: 5 l apa, 250 g zahar, 5 - 6 lamai, 2 linguri de miere,
drojdie de bere (5 g), stafide. Ingredientele, cu exceptia drojdiei, stafidelor si cojii
de lamaie, se fierb aproximativ o ora, dupa care se adauga coaja de lamaie si se
lasa sa se raceasca. Dupa racire se adauga drojdia si o parte din stafide si se lasa
152
la fermentat, restul operatiilor fiind aceseasi ca la cvasul clasic. Pentru prepararea
diverselor cvasuri se pot folosi si alte fructe si legume (visine, cirese, capsuni,
sfecla rosie, morcovi, telina, mere, pere, caise, etc.). Pentru reducerea aciditatii
este bine sa se adauge in amestec o jumatate de lingurita de bicarbonat de sodiu
alimentar.
153
consumul imediat al vinului, dar acest lucru trebuie sa se petreaca numai la
inceputul bolii. Fiind o fermentatie aeroba, vasele continand vinul trebuie sa fie
pline si etansate.
155
BIBLIOGRAFIE
156
• D. BARZOI - Microbiologia produselor alimentare de origine animala; Ed. Ceres,
Bucuresti, 1985
• I. MARINESCU - Microbiologie si Biochimie, manual pentru licee industriale; Ed.
Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1981;
• D. PANAITESCU, Al. BREZEANU - Microbiologie si parazitologie, manual pentru licee
sanitare; Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1976
• I.C.VOICULESCU, C.POPOVICI - Biologie, anul I de liceu; Ed. M.E.I, Bucuresti, 1974
• T.CRACIUN, LUANA-LEONORA CRACIUN - Dictionar de biologie; Ed. Albatros,
Bucuresti, 1989
• I.Gh.TUDOSE - Genetica microorganismelor; Editura Didactica si Pedagogica,
Bucuresti, 1982
• MARIA RABEGA, C.RABEGA - Vitamine, enzime si hormoni; Ed. Albatros, Bucuresti,
1983
• C. BODEA - Tratat de biochimie vegetala, Ed. Academiei, Bucuresti, 1964
• L.GAVRILA, Al. IONESCU - Biologia reproducerii, mediu si biodiversitate; Constanta,
1964
• VALENTINA DAN - Microbiologie, note de curs; Universitatea din Galati, 1993
• G. ZARNEA - Tratat de microbiologie generala I si II; Ed. Academiei, Bucuresti, 1984
• D. BUIUC - Microbiologie medicala; Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1992
• St. KISS si colegii - Enzimologia mediului inconjurator, enzimele si fertilitatea solului;
Ed. Ceres, Bucuresti, 1991
• V. STANESCU - Igiena si controlul alimentelor; Ed. Fundatiei Romania de maine,
Bucuresti, 1998
• AXENTA SEVER BANCIU, DELIA CIACOI-DIMITRIU - Descoperiri epocale in
biochimie; Ed. Albatros, Bucuresti, 1990
• VERONICA DINU, E.TRUTIA, ELENA POPA-CRISTEA, AURORA POPESCU -
Biochimie medicala, mic tratat; Ed. Medicala, Bucuresti, 1998
• VICTORIA HERLEA - Microbiologie generala; Ed. Univers, Bucuresti, 1998
• DORINA MARTIN, M. MARTIN - Bauturi de casa din fructe si legume; Ed. Ceres,
Bucuresti, 1986
• I. PUSCA - Bauturi spumante in gospodarie; Ed. Ceres, Bucuresti, 1988
• V. IONESCU-SISESTI, P. PAPACOSTEA, G. STEFANIC - Compostul, ingrasamant
din deseuri organice; Ed. Stiintifica si Enciclopedica, Bucuresti, 1980
• Al. IONESCU - Agricultura ecologica; Ed. Ceres, Bucuresti, 1982
• G. STEFANIC - Proteina direct din azotul atmosferic; Ed. Stiintifica si Enciclopedica,
Bucuresti, 1983
157
• G. BARBU - Turismul si calitatea vietii; Ed. Politica, Bucuresti, 1980
• IULIANA POPOVICI, D. LUPULEASA, ANISOARA HRISCU - Dictionar farmaceutic;
Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1997
• VIORICA ISTUDOR - Farmacognozie, fitochimie, fitoterapie, vol.I; Ed. Medicala, 1998
158
OBIECTIVELE, CONTINUTUL, CUVINTELE-CHEIE SI
REZUMATELE CAPITOLELOR CURSULUI – INTREBARI
AJUTATOARE PENTRU STUDENTI, IN SCOPUL INTELEGERII
NOTIUNILOR PREZENTATE IN FIECARE CAPITOL
Capitolul 1
INTRODUCERE IN MICROBIOLOGIE
Obiective urmarite:
• familiarizarea studentilor cu disciplina de microbiologie si cu impactul
acesteia asupra activitatii umane de zi cu zi din diferite domenii de
activitate;
• cunoasterea ramurilor subordonate ale microbiologiei si cu ce se ocupa
fiecare in parte;
• cunoasterea istoricului microbiologiei si a personalitatilor sale marcante, de
la primul sau pas – descoperirea microscopului – pana la aparitia celui mai
dinamic domeniu al microbiologiei moderne – ingineria genetica;
• intelegerea importantei acestei discipline pentru profilul ales de studenti.
Continut:
1.1. Definitia microbiologiei;
1.2. Scurta istorie a microbiologiei.
Cuvinte-cheie:
micros, bios, logos, bacteriologie, micologie, protozoologie, virologie,
parazitologie, algologie, microscop, biotehnologie
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
1
• microbiologia ca stiinta biologica, a rolului acesteia in diferitele domenii ale
activitatii umane: medicina, agricultura, alimentatie, biotehnologie etc.;
• ramurile subordonate ale microbiologiei, cu statut aparte si preocupari
specifice;
• domeniile aplicative ale microbiologiei;
• scurt istoric al microbiologiei, structurat in patru etape;
• personalitati marcante din lumea microbiologiei.
Bibliografie selectiva:
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti,
1998;
• G. ZARNEA – „Tratat de microbiologie generala I si II”; Ed. Academiei,
Bucuresti, 1984.
Intrebari:
1. Este microbiologia o stiinta a viitorului ?
2. Cand a aparut microbiologia ca stiinta individualizata ?
3. Exemplificati prin date semnificative etapele istoricului microbiologiei.
4. Cu ce se ocupa micologia ?
5. Importanta microbiologiei sanatatii publice si epidemiologice.
6. Importanta microbiologiei agricole.
Tema de casa:
7. Referat privind importanta microbiologiei pentru diferitele domenii ale
activitatii umane.
2
Capitolul 2
TAXONOMIE SI SISTEMATICA GENERALA
MICROORGANISMELOR
Obiective urmarite:
• intelegerea de catre studenti a clasificarii, nomenclaturii si identificarii
microorganismelor;
• cunoasterea semnificatiei numelui stiintific al speciilor si scrierii corecte a
acestuia;
• cunoasterea sistemului de organizare a lumii vii, alcatuite din cele 5 regnuri
de baza, in functie de tipul si structura celulara, organizarea celului si tipul
de nutritie a organismului.
Continut:
1.3. Definitia microbiologiei;
1.4. Nivele de clasificare;
1.5. Desemnarea numelui stiintific al speciilor;
1.6. Sistemul natural, filogenetic, de organizare a lumii vii.
Cuvinte-cheie:
taxon, tulpina bacteriana, colonie, sistem binominal, sistem filogenetic, regn
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• notiuni privind clasificarea, nomenclatura si identificarea microorganismelor;
• nivele de clasificare;
• desemnarea numelui stiintific al speciilor;
• sistemul natural, filogenetic de organizare a lumii vii.
Bibliografie selectiva:
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti,
1998;
3
• VALENTINA DAN – „Microbiologie – note de curs”, Universitatea din Galati,
1993.
Intrebari:
1. Ce reprezinta taxonomia ?
2. Definiti specia bacteriana.
3. Explicati numele stiintific binominal al microorganismelor, cu exemple.
4. Ce cuprinde regnul Procaryotae ?
5. Ce cuprinde regnul Fungi ?
6. Ce cuprinde regnul Animalia ?
Tema de casa:
1. Referat privind studiul diversitatii microorganismelor si importanta existentei
sistemului de recunoastere si definire a proprietatilor organismelor.
4
Capitolul 3
MORFOLOGIA MICROORGANISMELOR
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea de catre studenti a celulei de tip procariot si de tip eucariot;
• cunoasterea componentelor principale ale celulei eucariote, precum si a
sistemelor structurale subcelulare ale acesteia;
• cunoasterea virusurilor ca microorganisme acelulare, parazite obligatoriu
intracelular;
• modelul de organizare si de actiune al virusurilor;
• cunoasterea bacteriofagilor, a viroizilor si prionilor si a impactului acestora
cu lumea macro.
Continut:
1.7. Definitii
1.8. Structura celulei microorganismelor
1.9. Virusurile
1.10. Bacteriofagii
1.11. Viroizii si prionii
Cuvinte-cheie:
procariote, eucariote, citoplasma, nucleu, membrana celulara, virusuri,
virioni, bacteriofagi, viroizi, prioni
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• ce si cine sunt microorganismele;
• structura celulei microorganismelor;
• notiuni despre virusuri;
• ce sunt bacteriofagii;
• ce sunt viroizii si prionii.
5
Bibliografie:
• I. MARINESCU – „Microbiologie si Biochimie, manual pentru licee
industriale”; Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1981;
• NESTORESCU si colegii – „Bacteriologie medicala”; Ed. Medicala,
Bucuresti, 1965
• LUCIA DEBELEAC, M.C. POPESCU-DRANDA – „Microbiologie”, Ed.
Medicala Amaltea, Bucuresti, 1994
• D. MOTOC – „Microbiologia produselor alimentare”; Ed. Tehnica, Bucuresti,
1964
• D. BARZOI – „Microbiologia produselor alimentare de origine animala”; Ed.
Ceres, Bucuresti, 1985.
Intrebari:
1. Diferenta dintre celula procariota si cea eucariota.
2. Rolul ribozomilor.
3. Rolul nucleului celulei eucariote.
4. Explicati modul de organizare a unui virus.
5. Ce sunt bacteriofagii ?
6. Explicati importanta cunoasterii viroizilor si prionilor.
6
Capitolul 4
BACTERIILE
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea si intelegerea de catre studenti a morfologiei bacteriilor;
• cunoasterea fenomenului de sporogeneza bacteriana;
• intelegerea fiziologiei, biochimiei si metabolismului bacterian;
• cunoasterea notiunilor de genetica bacteriana.
Continut:
1.12. Morfologia bacteriilor
1.13. Structuri externe ale bacteriilor
1.14. Sporogeneza bacteriilor
1.15. Fiziologia, biochimia si metabolismul bacterian
1.16. Cresterea, multiplicarea si moartea bacteriilor
1.17. Elemente si notiuni introductive de genetica bacteriana.
Cuvinte-cheie:
coci, bacili, vibrioni, spirochete, coloratie Gram, coloratie Ziehl-Neelsen,
flageli, capsula, pili, spori, metabolism, medii de cultura, ereditate, cromozom
bacterian, mutatii, transductie, conjugare bacteriana
Rezumatul capitolului:
Acest capitol cuprinde:
• definitia, morfologia, structurile externe ale bacteriilor;
• sporogeneza bacteriilor;
• fiziologia, biochimia si metabolismul bacterian;
• elemente si notiuni introductive de genetica bacteriana.
Bibliografie selectiva:
• I.Gh.TUDOSE – „Genetica microorganismelor”; Editura Didactica si
Pedagogica, Bucuresti, 1982;
7
• VALENTINA DAN – „Microbiologie – note de curs”, Universitatea din Galati,
1993.
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti,
1998;
• G. ZARNEA – „Tratat de microbiologie generala I si II”; Ed. Academiei,
Bucuresti, 1984.
Intrebari:
1. Ce sunt stafilococii ?
2. Ce sunt bacilii ?
3. Dati exemple de tehnici de colorare a bacteriilor.
4. Diferenta dintre bacteriile capsulate si cele necapsulate.
5. Ce sunt flagelii ?
6. Ce reprezinta sporogeneza ?
7. Explicati multiplicarea bacteriilor.
8. Ce reprezinta metabolismul bacterian ?
9. Ce sunt bacteriile anaerobe ?
10. Explicati fenomenul de conjugare bacteriana.
Tema de casa:
11. Referat – exemplificati cateva medii de cultura pentru bacterii mai des
utilizate, dand si retetele acestora.
8
Capitolul 5
CIUPERCI MICROSCOPICE
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea si intelegerea de catre studenti a aspectelor benefice si
daunatoare ale microfungilor, respectiv drojdiilor si mucegaiurilor;
• cunoasterea morfologiei, reproducerii, sporularii mucegaiurilor si a
principalelor proprietati fiziologice ale acestora;
• cunoasterea importantei, morfologiei si fiziologiei drojdiilor.
Continut:
1.18. Definitie
1.19. Raspandirea mucegaiurilor
1.20. Morfologia mucegaiurilor
1.21. Reproducerea mucegaiurilor
1.22. Formarea sporilor
1.23. Proprietati fiziologice generale ale mucegaiurilor
1.24. Descriere generala, importanta, rol, raspandire drojdii
1.25. Morfologia levurilor
1.26. Fiziologia generala a levurilor
1.27. Reproducerea levurilor.
Cuvinte-cheie:
mucegaiuri, levuri, ascospori, sporangiospori, conidiofori, hialoplasma, ADN
extracromozomial, organisme heterotrofe
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
9
Bibliografie selectiva:
• I.Gh.TUDOSE – „Genetica microorganismelor”; Editura Didactica si
Pedagogica, Bucuresti, 1982;
• VALENTINA DAN – „Microbiologie – note de curs”, Universitatea din Galati,
1993;
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti,
1998;
• G. ZARNEA – „Tratat de microbiologie generala I si II”; Ed. Academiei,
Bucuresti, 1984.
Intrebari:
1. Definiti mucegaiurile.
2. Definiti levurile.
3. Explicati reproducerea sexuata la mucegaiuri.
4. Explicati importanta si rolul drojdiilor din industria alimentara.
5. Explicati inmultirea asexuata prin inmugurire a drojdiilor.
Tema de casa:
6. Referat – Importanta drojdiilor si mucegaiurilor pentru industria alimentara.
10
PARTEA II – NOTIUNI DE MICROBIOLOGIE APLICATA
Capitolul 1
METABOLISMUL MICROBIAN
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea si intelegerea de catre studenti a metablismului energetic si de
sinteza al microorganismelor;
• intelegerea notiunilor de microorganisme autotrofe si heterotrofe;
• intelegerea importantei transportului substantelor intre celula si mediul extern.
Continut:
.1. Definitie, caracteristici, cai metabolice
.2. Metabolismul energetic
.3. Metabolismul de biosinteza
.4. Transportul substantelor.
Cuvinte-cheie:
metabolism, autotrof, heterotrof, metaboliti, fermentatie, difuzie, anabolism,
catabolism
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• definitia, caracteristicile si caile metabolice ale metabolismului microbian;
• tipuri de metabolism: energetic si de sinteza;
• transportul substantelor.
Bibliografie selectiva:
• G. ZARNEA – „Tratat de microbiologie generala I si II”; Ed. Academiei,
Bucuresti, 1984;
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti, 1998;
• D. PANAITESCU, Al. BREZEANU – „Microbiologie si parazitologie, manual
pentru licee sanitare”; Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1976;
11
• D. BARZOI – „Microbiologia produselor alimentare de origine animala”; Ed.
Ceres, Bucuresti, 1985.
Intrebari:
1. Definiti anabolismul.
2. Explicati faza descompunerii enzimatice a metabolismului energetic.
3. Definiti fermentatia.
4. Explicati transportul substantelor prin difuzia pasiva.
5. Explicati transportul substantelor prin translocatie.
6. Definiti respiratia anaeroba.
Tema de casa:
7. Referat privind caracteristicile prinicipale ale metabolismului microbian.
12
Capitolul 2
TIPURI IMPORTANTE DE FERMENTATIE INTALNITE IN
DOMENIILE AGRO-ALIMENTAR SI AGROTURISTIC
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea principalelor tipuri de fermentatie si a factorilor de influenta ale
acestora;
• intelegerea mecanismului biochimic al fermentatiilor;
• intelegerea importantei fermentatiilor pentru domeniul agro-alimentar.
Continut:
1.28. Fermentatia alcoolica
1.29. Fermentatia lactica
1.30. Fermentatia propionica
1.31. Fermentatia malo-lactica
1.32. Fermentatia metanica
1.33. Fermentatia butirica
1.34. Fermentatia acetica
Cuvinte-cheie:
fermentatie, pH, activatori, inhibitori, mecanism biochimic, bacterii lactice,
fermentatii anaerobe, fermentatii oxidative
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• definitiile, agentii de fermentare si principalii factori de influenta ai
fermentatiilor;
• mecanismul fermentatiilor;
• importanta practica a fermentatiilor.
Bibliografie selectiva:
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti, 1998;
13
• D. BARZOI – „Microbiologia produselor alimentare de origine animala”; Ed.
Ceres, Bucuresti, 1985;
• AXENTA SEVER BANCIU, DELIA CIACOI-DIMITRIU – „Descoperiri epocale in
biochimie”; Ed. Albatros, Bucuresti, 1990;
• V. STANESCU – „Igiena si controlul alimentelor”; Ed. Fundatiei Romania de
maine, Bucuresti, 1998.
Intrebari:
1. Aratati diferenta dintre fermentatiile anaerobe si cele aerobe;
2. Care sunt agentii fermentatiei alcoolice ?
3. Factorii de influenta ai fermentatiei lactice.
4. Importanta fermentatiei malo-lactice.
5. Definiti mecanismul fermentatiei acetice.
6. Agenti ai fermentatiei acetice.
Tema de casa:
7. Descrieti, la alegere, un tip de fermentatie anaeroba si un tip de fermentatie
aeroba.
14
Capitolul 3
NOTIUNI GENERALE DESPRE MICROBIOLOGIA
SOLULUI, A APEI SI A AERULUI.
ROLUL MICROORGANISMELOR IN NATURA
Obiectivele urmarite:
• intelegerea si aprofundarea notiunilor generale privind microflora solului, a apei
si a aerului;
• intelegerea importantei microorganismelor pentru circuitul elementelor in
natura.
Continut:
1.35. Microflora solului
1.36. Microflora apei
1.37. Microflora aerului
Cuvinte-cheie:
microflora, bacterii fixatoare de azot, bacterii de putrefactie, purificare,
amonificare, nitrificare, denitrificare, fixarea azotului molecular
Rezumatul lucrarii:
In acest capitol va sunt prezentate:
• microflora solului si importanta acesteia;
• microflora apei - purificarea apei si a apei potabile;
• microflora aerului.
Bibliografie selectiva:
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti, 1998;
• Al. IONESCU – „Agricultura ecologica”; Ed. Ceres, Bucuresti, 1982.
15
Intrebari:
1. Cum se poate realiza autopurificarea apei ?
2. Explicati circuitul azotului in natura.
3. Explicati circuitul carbonului in natura.
4. Explicati circuitul sulfului in natura.
5. Explicati circuitul fosforului in natura.
Tema de casa:
6. Referat – Rolul microorganismelor in natura.
16
Capitolul 4
AGRICULTURA ECOLOGICA
Obiectivele urmarite:
• intelegerea notiunii de agricultura ecologica;
• intelegerea notiunii de compost, privit ca un fertilizant ideal nepoluant;
• cunoasterea principalelor metode de compostare folosite pe plan national si
international.
Continut:
1.38. Compostul – un fertilizant ideal nepoluant
1.39. Metode de compostare – tipuri de compost
Cuvinte-cheie:
ecologie, compostare, biotransformare, biodinamica, bioconversiune
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• definitia compostului - un fertilizant ideal, nepoluant;
• metode de compostare, tipuri de compost.
Bibliografie selectiva:
• Al. IONESCU - Agricultura ecologica; Ed. Ceres, Bucuresti, 1982;
• V. IONESCU-SISESTI, P. PAPACOSTEA, G. STEFANIC – „Compostul,
ingrasamant din deseuri organice”; Ed. Stiintifica si Enciclopedica, Bucuresti,
1980.
Intrebari:
1. Definiti notiunea de compostare.
2. Explicati metoda biodinamica de compostare
3. Explicati metoda de bioconversie a gunoaielor menajere.
17
Tema de casa:
1. Referat - Tehnica formarii si mineralizarii humusului in practica agricola.
18
Capitolul 5
MICROFLORA EPIFITA A FRUCTELOR SI LEGUMELOR
Obiectivele urmarite:
• intelegerea de catre studenti a notiunii de microflora epifita specifica pentru
categorii diferite de fructe si legume;
• importanta cunoasterii tipurilor de putrezire a fructelor si legumelor;
• importanta cunoasterii principalelor grupe de microorganisme epifite patogene;
• cunoasterea conditiilor ambientale din depozite in vederea cresterii duratei de
pastrare a produselor horticole.
Continut:
.1. Definitii
.2. Putrezirea fructelor si legumelor
.3. Deprecierea unor legume si fructe pastrate in depozitele gospodariilor
agricole si agroturistice provocata de microorganisme
.4. Cateva informatii generale despre microflora fructelor si legumelor
deshidratate.
Cuvinte-cheie:
microflora epifita, microflora patogena, putrezire, bacterioze, micoze,
umbelifere, caldura degajata, punct de inghetare, produse deshidratate
Rezumatul capitolului:
In acest capitol va sunt prezentate:
• ce reprezinta microflora epifita specifica;
• tipuri de putrezire a fructelor si legumelor;
• principalele boli care duc la depreciera legumelor si fructelor in conditii de
depozitare;
• conditiile ambientale din depozite, punctul de inghetare a fructelor si durata de
pastrare recomandate pentru unele fructe.
19
Bibliografie selectiva:
• VICTORIA HERLEA – „Microbiologie generala”; Ed. Univers, Bucuresti, 1998;
• D. MOTOC – „Microbiologia produselor alimentare”; Ed. Tehnica, Bucuresti,
1964
• T.CRACIUN, LUANA-LEONORA CRACIUN – „Dictionar de biologie”; Ed.
Albatros, Bucuresti, 1989
• IULIANA POPOVICI, D. LUPULEASA, ANISOARA HRISCU – „Dictionar
farmaceutic”; Ed. Didactica si Pedagogica, Bucuresti, 1997
Intrebari:
1. Clasificati tipurile de putrezire a fructelor si legumelor.
2. Dati exemple de boli produse de microorganisme la cartofi.
3. Dati exemple de boli produse de microorganisme la umbelifere.
4. Descrieti deprecierea unor fructe pomicole cauzate de microorganisme.
5. Dati exemple de boli produse de microorganisme strugurilor de masa;
6. Dati exemple de boli produse de microorganisme vinului.
Tema de casa:
1. Descrieti conditiile ambientale din depozite pentru urmatoarele fructe: mere,
pere, piersici, citrice, struguri, caise, banane.
20
Capitolul 6
PRODUSE SI BIOTEHNOLOGII TRADITIONALE IN GOSPODARIILE
RURALE, PENSIUNILE AGROTURISTICE
SI FERMELE AGRICOLE
Obiectivele urmarite:
• cunoasterea si intelegerea principalelor etape folosite in obtinerea vinurilor;
• cunoasterea principalelor factori ce influenteaza fermentatia alcoolica;
• cunoasterea metodei de preparare a maialei de drojdii uscate active;
• cunoasterea unor retete ecologice de obtinere a unor bauturi de casa
fermentate din fructe si legume.
Continut:
.1. Bauturi de casa fermentate din fructe si legume
.2. Bolile si efectele de origine microbiana ale bauturilor fermentate din
fructe si legume.
Cuvinte-cheie:
fermentatie alcoolica, distilate, fructine, cidruri, must, maia, vinuri
aromatizate, bitter, vermut, crusoane, microorganisme aerobe / anaerobe
Rezumatul capitolului:
• in acest capitol sunt prezentate principalele bauturi de casa obtinute in mod
ecologic, prin fermentatie, din fructe si legume;
• descrierea principalilor parametri ce favorizeaza desfasurarea in conditii optime
a fermentatiei alcoolice;
• exemplificarea principalilor agenti ai fermentatiei alcoolice;
• descrierea retetelor unor bauturi fermentate: cidrul din mere, fructinul de
coacaze, fructinul de pere si gutui, fructinul din macese, vinuri albe, vinuri rosii,
vinuri aromate, vinuri pelin;
• retete pentru bauturi-aperitiv: vermut, bitte;
21
• retete pentru obtinerea de vinuri speciale ameliorate: vinul de Xeres, vinul de
Malaga, vinul de Madeira, vinul de Porto;
• retete de crusoane si de cvas;
• descrierea bolilor si defectelor de origine microbiana ale bauturilor fermentate
din fructe si legume, datorate nerespectarii conditiilor de procesare si
depozitare.
Bibliografie selectiva:
• DORINA MARTIN, M. MARTIN – „Bauturi de casa din fructe si legume”; Ed.
Ceres, Bucuresti, 1986
• I. PUSCA – „Bauturi spumante in gospodarie”; Ed. Ceres, Bucuresti, 1988
• V. STANESCU – „Igiena si controlul alimentelor”; Ed. Fundatiei Romania de
maine, Bucuresti, 1998
• VALENTINA DAN – „Microbiologie, note de curs”; Universitatea din Galati,
1993.
Intrebari:
1. Care sunt principalii factori ce influenteaza fermentatia alcoolica ?
2. Descrieti prepararea maialei de drojdii uscate active necesare pentru
fermentatia alcoolica.
3. Particularitati in prepararea vinurilor aromatizate.
4. Ce determina amareala vinului ?
5. Ce determina otetirea vinului ?
6. Descrieti floarea numita „floarea vinului”.
Tema de casa:
1. Importanta obtinerii unor produse alimentare ecologice din fermentarea
alcoolica a unor fructe si legume. Exemple de retete.
22