Drghici Alexandra Daniela

Caractere generale
Bacterii Gram-negative, ciliate, aerobe, facultativ anaerobe. Rspndire ubicuitar; Majoritatea fac parte din microbiota normal intestinal,

ns sunt i anumite tulpini patogene care cauzeaz infecii ale tractului urinar i boli gastrointestinale manifestate prin diaree.

Fig. nr. 1 Escherichia coli observat prin microscopie electronic i microscopie optic (http://remedic.ro/dosar-naturist/infectia-cu-escherichia-coli/ ) (http://judy-arbique.suite101.com/e-coli-and-e-coli-0157-a21591/)

Caractere de cultur i caractere biochimice

Specie bacterian care crete uor pe o mare varietate de medii (medii cu bulion, ap

peptonat, geloz, etc) Formeaz att colonii S ct i colonii R Geloz snge - Colonii hemolitice sau nehomolitice McConkey colonii lactozo pozitive Mediu Levine colonii cu aspect de luciu metalic Fermenteaz Glucoza, Lactoza i Zaharoza, nu produce H2S Produce indol, este mobil, nu produce ureaz i este citrat negativ

Fig. nr. 2 Caractere de cultur i caractere biochimice E. Coli (http://atlas.microumftgm.ro/bacteriologie/bactsp/coli.php)

Virulen i patogenitate

Antigen K Toxine enterotoxin, neurotoxin Hemolizine Adezine

n anumite condiii, E. coli poate da natere unor afeciuni locale

sau generale, cum ar fi: boli ale aparatului genito-urinar, infecii intestinale, endocardite, meningite, i chiar septicemie (Ronald A, 2003). Infeciile urinare sunt fie spontane, fie apar dup utilizarea unor sonde sau instrumente de exploatare a aparatului urinar. Aceste infecii sunt situate pe locul doi, ca cele mai comune infecii umane i sunt n principal cauzate de E. coli uropatogenic (Jadhav i colab, 2011).

Patotipuri
Specia E. coli enteric a fost clasificat n funcie de caracteristicile serologice i proprietile de virulen n:

Fig. nr. 4 Patotipuri E. coli (OSullivan J, 2007)

Patotipul E. coli
ETEC EPEC

Sindromul diareic
Diaree fr febr Diaree apoas, uneori sanguinolent, posibil frebr i stare de regurgitare

Factori de virulen
Adezine, enterotoxine: LT, ST Intimine, bfp, posibil i toxin shiga

Efect la nivel intestinal

Microvilii sunt nealterai Retragerea localizat a microvililor prin condensarea actinei

Invazivitate
Neinvazive Moderat invazive

EIEC

Diaree sever i febr, asemanator shigellozelor

Diaree sanguinolent, fr febr Diaree persistent, fr febr

Enterotoxina 1 i 2 de la Shigella sp.

Fimbrii, alpha hemolizin, toxina shiga 1 i 2 Fimbrii, alpha hemolizin, toxina shiga 1 i 2, enterotoxin ST Necunoscui

Retragerea microvililor, diseminarea la enterocitele nvecinate

Retragerea localizat a microvililor, similar EPEC Distrugerea complet a stratului microvilar i formarea unui biofilm la suprafaa enterocitelor Prelungirea microvililor la nivelul aderenei celulelor bacteriene

Invazive

EHEC

Moderat invazive Neinvazive

EAEC

DAEC

Potential cauzator al diareei infantile

Neinvazive

Tabel nr. 1 Patotipuri E. coli

Modul de aciune al toxinelor shiga

Fig. nr. 5 Schema aciunii toxinelor shiga la nivelul enterocitelor http://www.scribd.com/doc/57369133/E-Coli-acum-usor-de-diagnosticat-la-om-si-animale-prin-teste-rapide

Diagnostic
Pentru diagnosticul i tratamentul infeciilor bacteriene,

sunt foarte importani urmtorii parametri:

Numrul bacteriilor (ufc)

Tipul agentului patogen

Sensibilitatea la antibiotice

Diagnosticarea infeciilor cu E. coli devine din ce n ce mai

simpl, tehnicile de laborator evolund considerabil i scurtnd timpul efectiv de lucru al personalului laboratorului.

Urocultura
Metod de lucru utilizat n laboratoarele de microbiologie/bacteriologie clinic pentru analiza probelor de urin.

Metoda diluiilor n plci mediu lichid - bulion Metoda ansei calibrate mediu solid MacConkey Metoda uricult dip slideuri

Identificarea agentului patogen (TSI, MIU, MILF, CIT sau API, medii cromogene sau cu ajutorul aparatelor de identificare)

Metoda Uricult

Fig. nr. 6 Ilustraii pas cu pas metoda Uricult (http://e-learning.studmed.unibe.ch/)

Aceste dip slideuri contin 2 sau 3 medii de cultur (MK E. coli, Cled pentru streptococi, mediu pentru enterococi)

Fig. nr. 7 Vizualizarea optic a coloniilor (http://e-learning.studmed.unibe.ch/) (http://tidsskriftet.no/article/1953182)

Numarul total de bacterii n mijlocul fluxului de urin poate semnala o bacteriurie. >105 ufc/ml = bacteriurie semnificativ se cere realizarea unei culturi i antibiograma. 104-105 ufc/ml = densiti marginale. n cultura pur este recomandat realizarea culturii i antibiogramei. n cultur mixt, eventual, se poate realiza repetarea examenului. <104 ufc/ml = bacteriurie nesemnificativ (contaminare accidental).

Dxdipchip

Fig. nr. 8 Tehnica Dxdipchip (http://www.brucebryanmd.com/dxdipchip.htm)

Corprocultura
Coprocultura este o metod de lucru utilizat n laboratoarele de

microbiologie clinic n scopul cultivrii i identificrii agenilor patogeni existeni n intestinul omului.
agar MacConckey mediu AABTL(Bromthymol-blue Lactose Agar).

Dup obinerea culturii se repic pe aceleai medii cte 5-10

colonii lactozo-pozitive i se incubeaz 16-20 de ore. Aglutinarea pe lam cu ser polivalent anticolibacilar. n cazul aglutinrilor puternice i imediate, se va efectua aglutinarea monovalent. Tulpinile de E. coli izolate sunt apoi testate pentru sensibilitatea la antibiotice (www.focuslab.ro).

Diagnosticul infeciei cu E. Coli serotip O157:H7

Prin identificarea prezenei toxinei shiga 1 sau 2, sau prezena genei pentru aceasta toxin, precum i detectarea antigenului cu anticorpi specifici prin: Metoda imunohistochimic tehnica ELISA Metoda imunocromatografic Enteric Strip Metoda imunomagnetic Latex aglutinare

Enteric Strip

Fig. nr. 9 Modul de utilizare al Enteric Strip (http://www.corisbio.com)

Metoda imunomagnetic
Anticorpii sunt prini de particule paramagnetice IMS tradiional

Fig. Nr. 10 IMS tradiional (http://www.sanitech.ro/)

IMS cu PickPen (pipet multicanal cu magnei)

Fig. Nr. 11 IMS cu PickPen (http://www.sanitech.ro/)

 E. coli este sensibil la antibiotice precum streptomicin sau

gentamicin dar rezistent la penicilin.

Avnd n vedere faptul c microbiota intestinal normal este un

adevrat rezervor de gene pentru rezisten la antibiotice, precum i faptul c acest microorganism are numeroase oportuniti de a primi gene de virulen, se impune necesitatea descoperirii unor noi substane antimicrobiene cu proprieti superioare celor existente.

Bibliografie

http://atlas.microumftgm.ro/bacteriologie/bactsp/coli.php http://judy-arbique.suite101.com/e-coli-and-e-coli-0157-a21591/ http://remedic.ro/dosar-naturist/infectia-cu-escherichia-coli http://tidsskriftet.no/article/1953182 http://www.brucebryanmd.com/dxdipchip.htmhttp://elearning.studmed.unibe.ch/UroSurf/theory/microbiology.html?urosurf%7Ctheory%7Cmicrobiology http://www.corisbio.com/images/Products/Procedure/full/O157-Coli-Strip.jpg http://www.focuslab.ro/informatii/examen_materii_fecale_-_coprocultura.aspx http://www.sanitech.ro/Assurance%20GDS%20rom.pdf http://www.scribd.com/doc/57369133/E-Coli-acum-usor-de-diagnosticat-la-om-si-animale-printeste-rapide Jadhav S, Hussain A, Devi S, Kumar A, Parveen S, Gandham N, Wieler LH, Ewers C, Ahmed N (2011), Virulence Characteristics and Genetic Affinities of Multiple Drug Resistant Uropathogenic Escherichia coli from a Semi Urban Locality in India,n PLoS One, 6(3):e18063 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3064663/?tool=pmcentrez) OSullivan J, Bolton DJ, Duffy G, Baylis C, Tozzoli R, Wateson, Lofdahl S (2007), Methods for Detection and Molecular Characterisation of Pathogenic Escherichia coli (http://www.antimicrobialresistance.dk/data/images/protocols/e%20coli%20methods.pdf ) Ronald A (2003), Etiology of urinary tract infection: traditional and emerging pathogens, n Dis Mon, 49(2): 7182