Sunteți pe pagina 1din 172

Prof.dr.

Eugen ULEA
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar
Ion Ionescu de la Brad Iai

MICROBIOLOGIE
(SUPORT DE STUDIU I.D)

Iai - 2015
9

CUPRINS
INTRODUCERE
U.I. 1 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE ....................................................................................... 21
1.1. Poziia microorganismelor n lumea vie .................................... 24
1.2. Prionii ....................................................................................... 26
1.3. Virusurile .................................................................................. 28
1.3.1. Morfologia virusurilor ....................................................... 28
1.3.2. Structura virusurilor........................................................... 29
1.3.3. Virusurile plantelor............................................................ 30
1.3.4. Bacteriofagii ...................................................................... 31
1.3.5. Fagii filamentoi................................................................ 36
1.3.6. Cianofagii.......................................................................... 36
1.3.7. Micovirusurile ................................................................... 36
1.3.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea virusurilor ........ 37
U.I. 2 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE ............................................................................................40
2.4. Bacteriile ............................................................................. 41
2.4.1. Morfologia bacteriilor........................................................ 42
2.4.2. Structura celulei bacteriene ................................................ 46
2.4.3. Compoziia chimic a bacteriilor ....................................... 54
2.4.4. Creterea i multiplicarea bacteriilor .................................. 55
2.4.5. Nutriia bacteriilor ............................................................. 57
2.4.6. Respiraia microorganismelor ............................................ 58
2.4.7. Grupe particulare de bacterii .............................................. 58
2.4.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea bacteriilor ......... 61
2.4.9. Rolul bacteriilor n natur .................................................. 62
2.5. Cyanobacteriile (algele albastre-verzi) ...................................... 63
2.5.1. Morfologia cyanobacteriilor .............................................. 63
2.5.2. Structura cyanobacteriilor .................................................. 63
2.5.3. Sistematica cyanobacteriilor .............................................. 64
2.5.4. Rolul cyanobacteriilor n natur ......................................... 65
U.I. 3 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE .............................................................................................67
3.1. Protozoarele .............................................................................. 68
3.1.1. Morfologia i fiziologia protozoarelor ............................... 68
3.1.2. Structura protozoarelor ...................................................... 68
3.1.3. Reproducerea protozoarelor ............................................... 69
3.1.4. Nutriia protozoarelor ........................................................ 70
3.1.5. Sistematica protozoarelor .................................................. 70
3.1.6. Rolul protozoarelor n natur ............................................. 71
3.2. Diatomeele................................................................................ 71
3.2.1. Morfologia diatomeelor ..................................................... 71
3.2.2. Structura diatomeelor ........................................................ 72
10

3.2.3. Reproducerea diatomeelor ................................................. 73


3.2.4. Sistematica diatomeelor ..................................................... 75
3.2.5. Rolul diatomeelor n natur ............................................... 77
3.3. Ciupercile ................................................................................. 77
3.3.1. Morfologia ciupercilor ....................................................... 77
3.3.2. Structura celular a ciupercilor .......................................... 78
3.3.3. Organele de fixare i de absorbie ale ciupercilor ............... 80
3.3.4. Formele de rezisten ale ciupercilor.................................. 82
3.3.5. nmulirea ciupercilor ........................................................ 83
3.3.6. Alternana de faze la ciuperci............................................. 89
3.3.7. Nutriia ciupercilor ............................................................ 89
3.3.8. Originea i evoluia parazitismului la ciuperci ................... 90
3.3.9. Cerine fa de mediu......................................................... 91
3.3.10. Sistematica ciupercilor..................................................... 91
U.I
.4
INFLUENA
FACTORILOR
ECOLOGICI
ASUPRA
MICROORGANISMELOR ...................................................................... 94
4.1. Influena pH-ului ...................................................................... 95
4.2. Influena temperaturii ................................................................ 95
4.3. Influena apei ............................................................................ 97
4.4. Influena energiei radiante ......................................................... 97
4.5. Activitatea microbian a diferitelor soluri ................................. 99
4.6. Profilul microbian al solului ...................................................... 99
U.I. 5 - INTERRELAIILE ECOLOGICE NTRE ORGANISME
........................................................................................................... 101
5.1. Interrelaiile dintre populaiile de microorganisme .................. 102
5.2. Interrelaiile dintre plantele superioare i microorganismele
din sol ..................................................................................... 105
5.2.1. Influena sistemului radicular al plantelor asupra
microflorei solului............................................................ 105
5.2.2. Natura secreiilor radicelare i influena lor
asupra structuriilor taxonomice a microflorei solului ........ 107
5.2.3. Vrsta plantelor i efectul de rizosfer ............................. 107
5.2.4. Micorizele ....................................................................... 107
5.2.5. Interrelaiile ntre ciuperci i plante n cazul micorizelor .. 109
U.I. 6 - SOLUL CA MEDIU DE EXISTEN PENTRU
MICROORGANISME................................................................................111
6.1. Alctuirea general a solului ................................................... 112
6.2. Reacia solului ........................................................................ 114
6.3. Formarea solului ..................................................................... 114
6.3.1. Compoziia chimic a solului........................................... 115
6.3.2. Rolul microorganismelor n formarea i evoluia
materiei organice.............................................................. 116
11

6.3.3. Teoria microbiologic a formrii humusului .................... 116


6.4. Populaia solului ..................................................................... 118
U.I. 7 - ROLUL MICROORGANISMELOR N CIRCUITUL MATERIEI N
NATUR ............................................................................................... 121
7.1. Circuitul azotului .................................................................... 122
7.1.1. Fixarea azotului molecular............................................... 124
7.1.2. Amonificarea ................................................................... 132
7.1.3. Nitrificarea ...................................................................... 134
7.1.4. Denitrificarea .................................................................. 135
7.2. Circuitul carbonului ................................................................ 135
7.2.1. Metabolismul carbonului mineral .................................... 136
7.2.2. Metabolismul carbonului organic..................................... 137
7.3. Circuitul sulfului ..................................................................... 144
7.4. Circuitul fierului ..................................................................... 146
7.5. Circuitul fosforului ................................................................. 147
7.6. Circuitul potasiului ................................................................. 149
7.7. Transformrile microbiene ale calciului .................................. 149
7.8. Transformrile microbiene ale magneziului............................. 149
7.9. Transformrile microbiene ale microelementelor .................... 149
7.9.1. Manganul ........................................................................ 150
7.9.2. Seleniul ........................................................................... 150
7.9.3. Zincul .............................................................................. 150
7.9.4. Cuprul ............................................................................. 151
U.I. 8 - MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR................................. 154
8.1. Fermentaia alcoolic .............................................................. 156
8.1.1. Utilizarea microorganismelor n vinificaie ...................... 157
8.1.2. Utilizarea microorganismelor n industria berii ................ 158
8.2. Fermentaia lactic .................................................................. 168
8.2.1. Rolul microrganismelor n obinerea produselor
lactate .............................................................................. 170
8.2.2. Rolul microorganismelor lactice n conservarea
alimentelor murate .......................................................... 171
8.2.3. Rolul microorganismelor n producerea furajelor
nsilozate .......................................................................... 172
8.3. Fermentaia acetic ................................................................. 172
BIBLIOGRAFIE SELECTIV .............................................................. 178

12

INTRODUCERE
Microbiologia este tiina care se ocup cu studiul microorganismelor.
Microorganismele constituie un grup foarte mare de organisme, diferite ca natur,
form i activitate biologic, cu o organizare unicelular i o structur intern
relativ simpl, avnd ns caractere comune dimensiunile microscopice, care le
fac invizibile cu ochiul liber.
Din grupul microorganismelor fac parte bacteriile, ciupercile microscopice
(mucegaiurile i levurile), algele unicelulare i protozoarele. Lumii
microorganismelor i-au fost alturate i virusurile, care sunt entiti infecioase,
alctuite din componentele chimice eseniale ale organismelor vii, proteine i acizi
nucleici cu o organizare acelular, care le fac inapte de a se multiplica n afara
unei celule vii, fapt ce le oblig la un parazitism intracelular absolut.
Dei Microbiologia este o tiin relativ tnr, datorit domeniului de
studiu foarte vast, n cadrul ei s-au difereniat o serie de discipline microbiologice
independente. Acestea pot fi grupate dup mai multe criterii:
A. Dup grupul taxonomic studiat:
Virologia (virusologia) este tiina ce se ocup cu studiul virusurilor i
aciunea lor asupra organismelor vii.
Bacteriologia se ocup cu studierea, identificarea i cultivarea bacteriilor,

precum i cu aplicaiile lor n medicin, agricultur, industrie i


biotehnologie. Micologia (gr. mykes - ciuperc) studiaz morfologia,
genetica, taxonomia, proprietile biochimice i ecologia ciupercilor.
Algologia (ficologia) este tiina ce se ocup cu studiul algelor.
Protozoologia este ramura microbiologiei care studiaz morfologia,
genetica i taxonomia protozoarelor.
B. Dup activitatea microorganismelor n raport cu mediul n care triesc:
Microbiologia acvatic se ocup cu studiul microorganismelor care triesc
n mediu acvatic i care particip la transformarea substanelor organice i
anorganice din mri i oceane.
Microbiologia solului studiaz activitatea microbiotei solului i rolul ei n
nutriia mineral a plantelor, fertilitatea solului, geneza i formarea
structurii solului.
C. Dup natura problemelor studiate:
Fiziologia
microorganismelor
studiaz
procesele
vitale
ale
microorganismelor (respiraie, nutriie etc).
Ecologia microorganismelor studiaz legitile generale de evoluie i
interaciunea microorganismelor n natur, interaciunile i interrelaiile
dintre micro i macroorganisme.
Genetica microorganismelor se ocup cu studiul ereditii i variabilitii
microorganismelor precum i cu mecanismele de transfer al materialului
genetic.
13

D. Dup aplicaiile practice:


Microbiologia medical uman i veterinar studiaz microorganismele
patogene i relaiile ecologice care se stabilesc cu organismele infectate.
Imunologia studiaz starea de rezisten sau de imunitate fa de agenii
infecioi precum i diferite funcii i proprieti ale celulelor i esuturilor
organismelor animale i vegetale care determin prezena i apariia sau
modificarea acestei stri.
Microbiologia industrial (microbiologia tehnic sau a fermentaiilor)
studiaz rolul microorganismelor n obinerea pe cale fermentativ a unor
substane chimice utile ca: alcoolul etilic, alcoolul butiric, acetona, acidul acetic,
glicerina, antibioticele. n industria alimentar, microorganismele au rol n
panificaie, la conservarea alimentelor i furajelor, precum i n procese
industriale ca topitul inului i cnepei pe cale biologic, tbcirea pieilor etc.
Microbiologia solului (agricol) se ocup de microflora natural din sol i
de rolul acesteia n circuitul elementelor n natur, n asigurarea fertilitii solului,
n geneza i formarea structurii solului, precum i de relaiile microorganismelor
cu plantele. Cunoaterea microflorei solului i a activitii ei biologice permite
dirijarea unor procese naturale din sol i folosirea lor n scopul sporirii produciei
agricole.
Microbiologia insectelor studiaz microflora normal a insectelor i, n
general, a artropodelor, relaiile sale cu organismele gazd, mecanismele de
transmitere a unor ageni patogeni la om, animale i plante, precum i
microorganismele ce sunt patogene insectelor duntoare agriculturii i omului.
Microbiologia geologic se ocup cu studiul rolului unor organisme n
formarea unor depozite geologice (fier, mangan, sulf) n geneza rocilor calcaroase,
a hidrocarburilor, a zcmintelor de petrol, crbuni, gaze naturale i coroziunea
rocilor; ea studiaz, de asemenea, folosirea bacteriilor n detectarea depozitelor de
petrol etc.
Microbiologia marin (pelagic) studiaz rolul microorganismelor n
transformarea substanelor organice i anorganice din mri, influena lor asupra
productivitii biologice a mrilor i n formarea diferitelor roci biogene i a
minereurilor organogene n mri.
Microbiologia cosmic este ramura cea mai nou a microbiologiei aplicate
ce studiaz probleme legate de influena spaiului cosmic asupra viabilitii i
variabilitii microorganismelor, precum i de posibilitatea exportului i
importului de microorganisme.
Patologia vegetal (Fitopatologia) se ocup cu studiul microorganismelor
ce produc boli la plante, stabilind simptomatologia, cile de transmitere, relaiile
imunologice ale gazdelor, precum i profilaxia i tratamentul infeciilor produse
plantelor cultivate i celor din flora spontan.
Date selective privind istoricul Microbiologiei

14

Microbiologia este o tiina relativ tnr, datorit faptului c, din lipsa


mijloacelor de investigaie, oamenii de tiin s-au ocupat, n primul rnd, de
vieuitoarele vizibile. Existena microorganismelor ca ageni etiologici ai unor boli
era ns bnuit nc din antichitate.
Hipocrat (460-370 .H.), ntemeietorul medicinei, considera doi factori
responsabili de aceste boli: unul intrinsec, reprezentat de contribuia bolnavului, i
altul extrinsec, constnd dintr-o alterare necunoscut a
aerului, care devine nociv.
Aceast prim ipotez asupra etiologiei bolilor
infecioase a persistat mult vreme sub forma teoriei
miasmelor (gr. miasma = emanaie putred, murdrie).
Varon (100 .H.) considera c alterarea aerului
(gr. malaria = aer ru) este determinat de animale
foarte mici, invizibile, care ptrund n organism prin
gur i prin nri.
Fig. 1 Hipocrat
Fracastor (1488-1553) intuiete foarte corect
una dintre caracteristicile eseniale ale bolilor produse de microorganisme i
anume contagiozitatea lor. El arat c "infecia este aceeai pentru cel care a
primit-o i pentru cel care a dat-o" i c ea este
produs de "particule mici i imperceptibile", care
trec de la un organism bolnav la altul sntos ("De
Contagione", 1546).
Antony van Leeuwenhoek (1632-1723)
reuete descoperirea microorganismelor, folosind ca
microscop un sistem de lentile biconvexe de
construcie proprie, cu o putere de mrire de 40-275x.
El observ protozoare, alge, nematozi, levuri i
Fig. 2 Fracastoro
bacterii, pe care le descrie i le deseneaz n lucrarea
sa "Arcana naturae ope microscopiorum detecta" (Tainele naturii descoperite cu
ajutorul microscoapelor, 1675). Dei, descoperirile lui Leeuwenhoek au strnit
admiraia i interesul oamenilor de tiin, studiul microorganismelor a rmas n
continuare empiric, constituind doar o preocupare a amatorilor de curioziti ale
naturii. n felul acesta se acumuleaz numai date disparate cu privire la forma,
structura, mrimea i distribuia n natur a acestor microorganisme.

15

Fig. 3 Antony van Leeuwenhoek. (a) Microscop cu lentil (1), dispozitiv de fixare (2) i
uruburi de reglaj (3, 4). (b) Tipuri morfologice de bacterii desenate de Leeuwenhoeck.

Karl Linnaeus, celebru botanist, n opera sa "Systema naturae" (1735)


ncearc o sistematizare a vieuitoarelor cunoscute, reunind toate
microorganismele
ntr-un
grup,
denumit
semnificativ

Fig. 4 Karl Linnaeus (1707 - 1778) i lucrarea "Systema naturae".

"Chaos".
Terehovski, folosind pentru prima dat
metode experimentale, public, n anul 1775,
lucrarea "De Chao infusorii Linnaei", n care
demonstreaz c fiinele foarte mici, observate
n diferite infuzii bogate n substane organice,
cresc, se divid i se mic datorit unor fore
interne proprii, ajungnd la concluzia c aceste
organisme sunt adevrate animale n miniatur.
Louis Pasteur (1822-1895), savant
francez, prin lucrrile sale stabilete principiile
care stau i azi la baza acestei tiine.
Primele cercetri ale lui Pasteur au fost
legate de fenomenul asimetriei moleculare. La
acidul tartric racemic, compus inactiv pentru
Fig. 5 Louis Pasteur
lumina polarizat, demonstreaz c este un
amestec echimolecular de acid dextrogir i acid levogir, ale crui cristale sunt de
forme asimetrice i enantiomorfe. De asemenea, a observat c, dac n amestecul
16

racemic, inactiv din punct de vedere optic, se dezvolt un mucegai (Penicillium


glaucum), soluia devine optic activ, deviind, de ast dat, spre stnga planul
luminii polarizate. Mucegaiul degradeaz izomerul dextrogir, lsndu-l intact pe
cel levogir, care, astfel, poate fi izolat n stare pur. Aceast descoperire, pe lng
faptul c furniza un procedeu simplu de separare a izomerilor optici, a demonstrat
i intervenia unei caracteristici fizice, ca disimetria molecular n fenomenele
chimice ale vieii, dar, mai ales a atras atenia lui Pasteur asupra unui fenomen
spre care se va ndrepta n continuare curiozitatea sa de cercettor:
microorganismele produc transformri ale substanelor organice printr-o
activitate selectiv foarte specific.
Cercetrile lui Pasteur asupra fermentaiei vinului i berii l-au condus la
urmtoarele concluzii fundamentale:
fermentaiile sunt procese biologice, determinate de aciunea unor
microorganisme anaerobe, deci fermentaia este via fr aer;
fiecare fermentaie este produs de un anumit tip de microorganism, care este
specific, n sensul c determin o anumit transformare a mediului pe care crete;
dezvoltarea unui microorganism strin n mediul unde acioneaz un
microorganism cu aciune fermentativ specific deviaz cursul normal al
fermentaiei n dauna calitii (prin apariia compuilor nedorii) i a
randamentului ei n produs util, determinnd o aa-numit "boal" a fermentaiei;
microorganismele strine care produc bolile vinului i ale berii sunt
consecina contaminrilor din aer, de pe vasele sau din ingredientele folosite n
producie, iar multiplicarea lor poate fi prevenit prin nclzire, procedeu utilizat
sub denumirea de pasteurizare.
Pn la Pasteur, ideea participrii microorganismelor la determinarea unor
boli era respins, ca nefiind probat pe cale experimental. Pasteur extinde
noiunea de specificitate din domeniul fermentaiilor n acela al patologiei omului
i animalelor, n sensul c orice boal infecioas este rezultatul activitii vitale a
unui anumit microorganism specific, care se dezvolt ca parazit n organismul
animal respectiv. Ulterior, cercetrile acestuia au demonstrat principiul vaccinrii
i stabilirea bazelor tiinifice ale preparrii vaccinului, contribuind, n acelai
timp, la descoperirea fenomenului de imunitate.
Studiind boala "holera ginilor", Pasteur observ c agentul ei patogen i
pierde complet, prin nvechirea culturii, capacitatea sa specific de a produce
aceast boal, adic devine avirulent. Inoculat la psri sntoase, cultura
avirulent le confer ns rezistena fa de holer, n sensul c ele nu se mai
mbolnvesc nici dac sunt infectate cu o cultur proaspt, virulent, psrile
"vaccinate" devenind "imune".
Pe acelai principiu, Pasteur a mai preparat i utilizat cu succes vaccinul
anticrbunos (1881), apoi vaccinul antirabic (1885).
L. Pasteur rezolv i problema generaiei spontane (Fig. 5). Ignorarea unor
principii eseniale care, mai trziu, au stat la baza microbiologiei experimentale, n
ceea ce privete sterilizarea i asepsia, a fcut posibil concluzia fals c
microorganismele pot lua natere prin organizarea spontan a substanelor
organice din produsele supuse fermentaiei sau putrefaciei. Folosind baloane
17

speciale cu "gt de lebd", Pasteur demonstreaz c un mediu de cultur


sterilizat, n spe bulionul de carne, poate rmne steril timp ndelungat, dac se
evit contaminarea sa cu germeni din aer. Dac prin nclinarea unui asemenea
balon, mediul "spal" poriunile incurbate ale gtului rmas descoperit, poriunile
n care s-au depus bacteriile din aer, bulionul se infecteaz. Faptul c n baloanele
cu mediu steril, nchise ermetic, nu apar niciodat microorganisme, n timp ce
acelai mediu se infecteaz, dac este lsat n contact cu aerul, dovedete c
microorganismele nu iau natere spontan din materia organic inanimat, ci numai
se nmulesc n ea, pornind de la organisme similare, provenite din mediul
nconjurtor.

Fig. 5 Experimentul lui Pasteur prin care combate teoria generaiei spontane. A:
mediul nutritiv este introdus ntr-un balon; B. curbarea gtului balonului (gt de
lebd"); C. sterilizarea mediului nutritiv; D. mediul nutritiv rmne steril fiind protejat
de ptrunderea microorganismelor din atmosfer prin forma gtului.

L. Pasteur a adoptat pentru


denumirea organismelor microscopice
termenul de "microb" (trad. via scurt),
creat de medicul francez Sedillot, iar
noua tiin, care studiaz microbii, a
rmas cu numele de microbiologie.
Robert Koch (1843-1910) a adus
n dezvoltarea microbiologiei ca tiin,
contribuii de ordin tehnic i teoretic
deosebit de valoroase, ntre care
conceptul de "cultur pur", respectiv de
organism cultivat ntr-un mediu lipsit de
alte organisme. Realizarea culturilor pure
Fig. 6 Robert Koch (1843-1910)
este facilitat prin introducerea n tehnica
microbiologiei de ctre Koch, a mediilor
de cultur solidificate (cu gelatin sau agar).
Pe lng faptul c a descoperit mai multe specii de bacterii patogene, ntre
care bacilul tuberculozei (Mycobacterium tuberculosis) i vibrionul holerei, Koch
demonstreaz, fr echivoc, c bacteria carbonoas (Bacillus anthracis) este
agentul patogen al bolii denumit antrax sau crbune, pe care l cultiv "in vitro"
n ser sanguin, studiind formarea de spori termorezisteni, alternana de sporulare
i germinare, precum i faptul c infecia natural a animalelor provine din sol
prin iarba contaminat.
18

Pe baza acestor cercetri, R. Koch stabilete criteriile indispensabile pentru


ca un microorganism izolat dintr-un organism afectat de o anumit boal s poat
fi considerat n mod justificat ca agentul cauzal al bolii respective. Aceste criterii,
cunoscute sub numele de postulatele lui Koch, sunt urmtoarele:
microorganismul incriminat s poat fi pus ntotdeauna n eviden n toate
cazurile bolii respective, iar distribuia lui s corespund leziunilor caracteristice
bolii;
s poat fi utilizat n cultur pur, pe medii
artificiale;
dup ce este cultivat "in vitro", mai multe generaii s
reproduc boala i leziunile specifice la animalele
sensibile, de la care s poat fi reizolat.
Postulatele lui Koch au reprezentat i reprezint
nc un principiu eficace de lucru, a crui respectare
previne interpretrile eronate, n materie de diagnostic
bacteriologic sau de identificare a unor ageni
infecioi.
Fig. 8 Dimitri Ivanovski
Ilia Metchnikoff (1845-1916), biolog rus,
studiind digestia intracelular la echinoderme, demonstreaz capacitatea anumitor
celule de a capta i ngloba diferite particule
cu care vin n contact i emite ipoteza c
celulele cu funcii asemntoare, denumite de
el "fagocite", ar putea exista i n organismul
altor animale.
Ulterior (1884), studiind infecia
crustaceului Daphnia magna cu ciuperca
Monospora (Metschnikowia) bicuspidata,
observ c sporii aciculari ai levurii ptrund
odat cu hrana n tubul digestiv al dafniei, de
unde, strpungnd peretele acestuia, trec n
cavitatea general, unde sunt atacai de celule
mobile. Cnd infecia este moderat,
amoebocitele nglobeaz i diger toi sporii
Fig. 7 Ilia Metchnikoff
ciupercii i, astfel, crustaceul supravieuiete.
Cnd ns infecia este masiv, sporii rmai nefagocitai germineaz i dau
natere formei vegetative a ciupercii, care, prin multiplicare, invadeaz tot
organismul dafniei, determinndu-i moartea.
Metchnikoff extinde rezultatele acestor observaii la animalele superioare i
la om, demonstrnd prezena i importana celulelor cu proprieti fagocitare n
reaciile de aprare ale organismului fa de bacteriile patogene, stabilind, astfel,
bazele imunitii celulare.
Dimitri Ivanovski (1864-1920) demonstreaz c mozaicul tutunului este
produs de un agent patogen invizibil la microscop, care traverseaz filtrele
bacteriene i poate fi transmis de la o plant bolnav la una sntoas prin
intermediul filtratului acelular al trituratului de frunze, cu leziuni.
19

Martinus Beijerinck (1851-1931) confirm n 1898 filtrabilitatea agentului


patogen i intuiete natura deosebit a agentului patogen, pe care l considera ca
agent
contagios
viu
(contagium vivum fluidum).
Aceast intuiie a fcut din
Beijerinck
adevratul
intemeietor al virologiei ca
tiin.
Frederick
Twort
(1877-1950)
i
Felix
d'Herelle
(1873-1949)

Fig. 10 Alexander Fleming

descoper, n perioada 1915-1917, bacteriofagii (trad.


mnctor de bacterii) i fenomenul bacteriofagic.
Sergei Winogradsky (1856-1953), lucrnd la
Institutul Pasteur din Paris, a descris procesul de
asimilare la organismele chimiosintetizante i
fenomenul de fixare a azotului atmosferic de ctre
microorganisme. n acelai timp el a elaborat metode
speciale
pentru
cercetarea
activitii
Fig. 11 Stanley Prusiner
microorganismelor din sol, fiind considerat
intemeietorul Microbiologiei solului.
Alexander Fleming (1881-1955), observ n anul 1929 c unele culturi de
Penicillium, elaboreaz o substan cu proprieti microbiene specifice
penicilina. Acest prim antibiotic a fost mai trziu purificat de Florey i Chain
(1940). Prin lucrrile sale, Fleming deschide era antibioticelor, de o importan
excepional n medicin i biologie.
Stanley Prusiner (1942- ), neurolog i
biochimist american, laureat al Premiului Nobel n
1997. A descoperit c encefalopatia spongiform
la bovine i boala Creutzfeldt-Jakob la om sunt
produse de particule infecioase de natur proteic,
pe care le-a numit prioni.

Fig. 9 Martinus Beijerinck

20

coala romneasc de Microbiologie


Victor Babe (1854-1926), fondatorul colii romneti de microbiologie, a
desfurat o prodigioas activitate de cercettor, studiind numeroase boli ale
omului, printre care lepra, tuberculoza, holera, febra tifoid i, mai ales, turbarea.
n colaborare cu Cornil, este autorul
primei lucrri de sintez n bacteriologie
i anatomie patologic din lume, aprut
n 1885: Bacteriile i rolul lor n
etiologia,
anatomia
i
histologia
patologic a bolilor infecioase.
A studiat, de asemenea, asociaiile
microbiene, fiind primul cercettor care,
dup Pasteur, i-a dat seama de
importana terapeutic a antagonismului
microbian.
Ioan Cantacuzino (1863-1934)
Fig. 13 Ioan Cantacuzino
este
creatorul
Institutului
de
Microbiologie, care i poart numele, i al colii contemporane de microbiologie
din ara noastr. Cele mai importante lucrri sunt referitoare la aparatele i
funciile fagocitare n regnul animal i problema imunitii la nevertebrate.
Cantacuzino a studiat, de asemenea, diferite boli ca
holera, febra tifoid, scarlatina, tuberculoza, crend
i organiznd condiiile produciei de seruri i
vaccinuri n ara noastr.
Constantin Ionescu-Mihieti (1883-1962) a
adus contribuii tiinifice valoroase n domeniul
virologiei, imunologiei i microbiologiei generale.
Dumitru
Combiescu
(1887-1961)
a
desfurat o ampl activitate n domeniul
rickettsiozelor i zoonozelor.
Mihai Ciuc (1883-1969) este autorul unor
lucrri deosebit de importante n domeniul
bacteriofagilor, paludismului,
salmonelozelor,
Fig. 12 Victor Babe
difteriei.
tefan Nicolau (1896-1967) este creatorul colii romneti de virologie i
fondatorul institutului respectiv. A publicat numeroase lucrri originale n
domeniul herpesului, turbrii, febrei aftoase, febrei galbene, hepatitelor virale.
Traian Svulescu (1889-1963) este creatorul i ndrumtorul colii
romneti de fitopatologie. Este autorul unor lucrri de sintez ca Monografia
uredinalelor, Monografia ustilaginalelor i al unor lucrri originale n
fitopatologie i n domeniul imunitii plantelor fa de bolile bacteriene.

21

Unitatea de nvare nr. 1:

CARACTERELE GENERALE I POZIIA


MICROORGANISMELOR N LUMEA VIE
Cuprins (U.I. 1)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 1)...22


Instruciuni (U.I. 1).23
1.1. Poziia microorganismelor n lumea vie ..24
1.2. Prionii.........................................................................................................26
1.3. Virusurile..28
1.3.1. Morfologia virusurilor.......................................................................28
1.3.2. Structura virusurilor...........................................................................29
1.3.3. Virusurile plantelor.............................................................................30
1.3.4. Bacteriofagii ......................................................................................31
1.3.5. Fagii filamentoi.................................................................................36
1.3.6. Cianofagii...........................................................................................36
1.3.7. Micovirusurile.....................................................................................36
1.3.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea virusurilor .................37
Test de autoevaluare38
Rezumat (U.I. 1) ...39
Lucrare de verificare nr. 1 .... ..39
Bibliografie (U.I. 1) ..39

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 1)


Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare poziia microorganismelor n lumea vie
precum i a celor referitoare la prioni i virusuri. Dup finalizarea studiului
acestei uniti de nvare, vei dispune de competene pentru:
- descrierea microorganismelor precum: prionii, virusurile, bacteriofagii, fagii
filamentoi, cianofagii i micovirusurile.
- descrierea sistematicii, nomenclaturii i identificarea virusurilor
Instruciuni (U.I. 1)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de prioni i virusuri (rspunsurile
corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de verificare. Aceasta din urm
se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot, pn
la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.
22

CARACTERELE GENERALE I POZIIA


MICROORGANISMELOR N LUMEA VIE
Microorganismele, cu excepia celor cu structur acelular (virusurile), au
ca unitate elementar de baz celula. Celula la microorganisme, asemntoare, n
general, cu celula vegetal i animal, prezint unele particulariti n funcie de
grupul de microorganisme considerat.
Aceste particulariti structurale i funcionale au determinat mprirea
microorganismelor n dou grupe (Chatton, 1932 i Stanier, 1970). ntre
microorganismele procariote i eucariote exist diferene eseniale, structurale,
funcionale i de compoziie.
Diferenele dintre celula procariot i celula ecucariot
Caracterul
Nucleul
Dispunerea ADN
Compoziia chimic a
membranei citoplasmatice
Sistemul respirator
Aparatul fotosintetizant
Ribozomii
Curenii citoplasmatici
Peretele celular
Reticulul endoplasmatic
Tipul de diviziune

Procariote
Bacterii
Cyanobacterii
Fr membran proprie
O singur molecul de
ADN dublu catenar,
nelegat de histone
Lipsit de steroli
(cu excepia
micoplasmelor)
Face parte din membrana
citoplasmatic sau
mezozomi
Absent sau asociat
membranei citoplasmatice
Tip 70 S
Abseni
Conine peptidoglicani
(murein)
Absent
Direct (sciziparitatea)

23

Eucariote
Alge, Fungi, Protozoare,
Plante, Animale
Cu membran proprie
Unul sau mai muli
cromozomi. ADN dublu
catenar, legat de histone
Conine steroli

Mitocondrii
Cloroplaste
Tip 80 S
Prezeni
Cnd este prezent conine
celuloz, chitin, silice
Prezent
Mitoz

Material nuclear
(ADN)

Citoplasm

Plasmid
Ribozom
Fimbrii

Flageli
Incluziune
Capsul
Perete celular
Membran
citoplasmatic

Fig. 15 Structura celulei procariote

Reticul endoplasmatic neted

Vacuol

Riboszomi
(liberi)
Cloroplast
Ribozomi
(ataai)

Membran
celular
Perete
celular

Membran
nuclear

Nucleol
Aparat Golgi
Nucleu
Mitocondrie

Reticul endoplasmatic rugos

Fig. 16 Structura celulei eucariote

1.1. Poziia microorganismelor n lumea vie


Dup acumularea a numeroase cunotine asupra microorganismelor a fost
necesar introducerea acestora ntr-un grup taxonomic. Iniial microorganismele
au fost incluse n regnul Plantae, iar ulterior au fost incluse n diferite sisteme de
clasificare.
A. Sistemul tradiional:
24

1. Regnul Plantae;
2. Regnul Animalia.
B. Sistemul lui Hogg i Haeckel (1866):
1. Regnul Monera;
2. Regnul Plantae;
3. Regnul Animalia.
C. Sistemul lui Copeland (1938):
1. Regnul Procaryotae (Monera);
2. Regnul Protista;
3. Regnul Plantae;
4. Regnul Animalia.
D. Sistemul lui Whittaker (1969):
1. Regnul Procaryotae (Monera)
(bacterii, cianobacterii = alge albastre-verzi);
2. Regnul Protista (protozoare, diatomee);
3. Regnul Fungi (ciuperci);
4. Regnul Plantae (alge verzi, brune, roii, brofite, traheofite);
5. Regnul Animalia (animale multicelulare).
Astzi, majoritatea specialitilor din domeniul microbiologiei au acceptat
sistemul de clasificare elaborat de Whittaeker (Fig. 17) n anul 1969, care
corespunde necesitilor actuale.

25

Organisme
eucariote

Organisme
procariote

LUMEA VIE
Fig. 17 mprirea lumii vii n cinci regnuri (dup Whittaker, 1969)

Din punct de vedere taxonomic, subdiviziunile regnului sunt: ncrengtura,


subncrengtura, clasa, ordinul, familia, genul, specia.
Unitatea de lucru efectiv este specia, la care denumirea este n sistemul
binominal, numele organismului fiind derivat din latin sau greac.
n sistemele de clasificare prezentate anterior sunt cuprinse numai
organismele care au ca unitate de baz, celula, eucariot sau procariot, nefiind
introduse entitile infecioase, cum sunt virusurile sau prionii, i care au fost
"alturate" acestor sisteme de clasificare.

1.2. Prionii
Prionii sunt ageni infecioi neconvenionali de natur proteic, lipsii de
orice tip de acid nucleic, care produc un grup de boli neurodegenerative,
transmisibile la animale i om, numite boli prionice. Procesul care declaneaz
boala este reprezentat de conversia unei proteine normale, sintetizat n mod
natural n creierul tuturor mamiferelor (PrPc), ntr-una mutant, patogen (PrPSc).
Prima semnalare a unei boli de natur prionic a fost fcut n Anglia, n
anul 1732, la ovine.
Astzi, sunt cunoscute ca boli certe, produse de prioni, urmtoarele:
26

- la animale:
1. encefalopatia spongiform la ovine, denumit popular scrapie (engl.);
tramblanta (fr.). n Romnia mai este utilizat, impropriu, termenul de "cpiala"
oilor, dar aceasta este o boal bine cunoscut i este produs de un parazit animal.
Medicii veterinari avizai folosesc termenul francez de tramblanta oilor.
2. encefalopatia spongiform bovin (BSE sau "boala vacii nebune");
3. encefalopatia spongiform la
feline;
4. encefalopatia spongiform la
nurci;
5. encefalopatia spongiform la
hamsteri.
- la om:
1. Boala "Kuru". Aceasta este
prima semnalat i cel mai bine
studiat. A fost depistat la un trib
Fig. 18 Proteina prionic (huPrP)
local n Papua - Noua Guinee. Dup
responsabil pentru o serie de boli prionice la
interzicerea consumului de carne n
om (www.itqb.unl.pt).
stare proaspt, aceast boal a fost
eradicat.
2. Boala Creutzfeldt-Jacob (CJD);
3. Sindromul Alpers (la copii);
4. Sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS);
5. Insomnia fatal familial (FFI).
Agentul infecios
n prezent, se consider c agentul infecios este o molecul proteic, cu
greutatea molecular de 28 kilodaltoni, alctuit dintr-un lan de 208-220 de
aminoacizi, n funcie de specie, i care prezint o configuraie spaial,
asemntoare unui metru de tmplrie, parial destins. Prezint un capt NH2terminal, o regiune central i un capt COOH-terminal.
Aceast protein a fost izolat din creierul tuturor cazurilor bolnave studiate.
Surpriza a sosit n momentul studierii n paralel (la oi) a creierului la animale
sntoase i care prezint o protein celular similar. Lanul de aminoacizi este
identic cu excepia unui singur aminoacid (schimbat).
Proteina celular normal (PrPc) prezint o configuraie spaial
asemntoare unui resort. Specialitii din biochimie consider c, prin schimbarea
unui singur aminoacid din lan, nu se poate modifica configuraia spaial. n
acelai timp, proteina infecioas (PrPSc) rezist la atacul proteazelor celulare.
Se consider c procesul infecios se desfoar astfel: celula prepar
proteina celular normal care se acumuleaz n lizozomi, acetia o transport la
exteriorul celulei i n momentul n care aceast protein ptrunde din nou n
celul este degradat de proteaze.
27

n cazul proteinei infecioase, aceasta se acumuleaz n lizozomi n mod


continuu, pn cnd acetia "crap". Enzimele din interiorul lor degradeaz
componentele celulare i, n final, ntreaga celul nervoas. n locul acesteia
rmne un orificiu. Din acest motiv, dup un timp, creierul atacat arat ca un
burete (cu numeroase orificii). n stadiul final al bolii, creierul degenereaz
complet, avnd dimensiunea unei nuci.
Studiile cele mai ample sunt efectuate la animale, la om ele fiind extrem de
puine, deoarece boala poate fi studiat numai dup moartea individului.
Prionii pot rezista la aciunea multor factori fizico-chimici, dintre care
amintim: formol 10% (timp de 28 de luni), caldur (rezist la fierbere timp de 3
ore), factori inhibitori ai acizilor nucleici, precum i la aciunea radiaiilor UV.
1.3. Virusurile
Virusurile (lat. virus otrav, infecie, lichid otrvitor) reprezint o
categorie specific de ageni infecioi, structural i fiziologic fundamental diferii
de oricare dintre microorganismele cunoscute (Zarnea, 1983).
1.3.1. Morfologia virusurilor
Din punct de vedere morfologic (Fig. 19), virusurile pot aparine
urmtoarelor tipuri principale: form cilindric-alungit sau de bastona (virusul
mozaicului tutunului - Tobamovirus); form sferic (izometric), sferoidal
(virusul gripal - Myxovirus), form paralelipipedic (virusul variolei Parapoxvirus), form de cartu sau obuz (virusul piticirii galbene la cartof Nucleorhabdovirus), form de mormoloc, spermatozoid sau cirea cu coad (unii
bacteriofagi).
Dimensiunile virusurilor: 17 - 2500 nanometri (1 nm = 10-9 m).

28

Fig. 19 Tipuri morfologice de virusuri: (a) form cilindric (Tobamovirus); (b)


form izometric (Myxovirus); (c) form paralelipipedic (Parapoxvirus); (d) form de
cartu (Nucleorhabdovirus); (e) form de cirea cu coad (bacteriofagul T4).

1.3.2. Structura virusurilor


Dei diferitele virusuri se deosebesc mult ca form i dimensiuni, ele sunt
constituite dup principii comune. Particula viral matur (virionul) este alctuit
din dou componente eseniale (Fig. 20): genomul viral i capsida, precum i un
constituent accesoriu, nveliul extern (peplos).
Genomul viral este reprezentat, n mod obinuit, printr-o molecul de acid
nucleic (ADN sau ARN, niciodat ambele). Virusurile cu genom ADN sunt
numite dezoxiribovirusuri, iar cele cu genom ARN ribovirusuri. Genomul viral
poart informaia genetic necesar replicrii n sensul sintezei constituenilor
virali i a precursorilor acestora.
Capsida viral (gr. kapsa cutie) acoper genomul, fiind alctuit din
subuniti proteice, denumite capsomere. Capsomerele sunt constituite din
molecule proteice, aezate n mod regulat, formnd, n ansamblu, structura
specific a virusului. Capsida protejeaz materialul genetic.
Capsida i genomul viral formeaz nucleocapsida.

29

La unele virusuri, nucleocapsida este acoperit de o structur trilamelar,


numit nveli extern sau peplos (gr. peplos manta), ce poate prezenta la
exterior nite proeminene de suprafa, denumite spicule.

Capsid
Acid nucleic
(ADN sau ARN)

nveli extern
(peplos)
Spicule

Fig. 20 Structura unor virusuri i denumirea constituenilor virali

1.3.3. Virusurile plantelor


Virusurile plantelor au o mare importan ca ageni patogeni, datorit marii
lor rspndiri i faptului c acelai virus poate infecta plante, care aparin de
diferite familii botanice.
Bolile produse de virusuri la plante sunt denumite viroze. Pn n prezent
sunt cunoscute cteva sute de boli virale, produse de virusuri, care aparin la 25
genuri distincte. Majoritatea virusurilor plantelor au genom ARN monocatenar.
Din punct de vedere morfologic, virusurile plantelor aparin la dou grupuri:
grupul virusurilor izometrice (izodiametrice) sau sferice i grupul virusurilor
alungite.
n general, virusurile plantelor au o structur chimic mai simpl dect
virusurile animale i bacteriofagii.
Mecanismul de transmitere
Virusurile se pot transmite de la planta bolnav la planta sntoas pe mai
multe ci:
A - transmitere mecanic: prin contact ntre frunze; anastomoze radiculare;
unelte de lucru; altoire.
B - transmiterea prin vectori se realizeaz prin intermediul insectelor
(cca..400 specii): afide i cicade. Relaia dintre virus - insect vectoare este
variabil i corespunde urmtoarelor trei situaii:
Virusuri nepersistente pot fi transmise pn la circa 4 ore de la achiziie.
Virusuri semipersistente au capacitatea de infectare variabil de la 10-100 ore
de la achiziie.
Virusuri persistente cu o capacitate de infectare de peste 100 ore (uneori chiar
toat durata de via a vectorului).
n funcie de rspndirea i comportarea virusurilor n corpul vectorului,
acestea se mpart n trei categorii:
30

Virusuri localizate pe stilet (virusuri nepersistente).


Virusuri circulante (virusuri persistente) pot fi transmise timp ndelungat
ajungnd n hemolimfa insectei.
Virusuri propagative (virusuri persistente) se multiplic n corpul vectorului
fiind transmise toat viaa insectei.
C - transmiterea prin intermediul ciupercilor fitopatogene din sol, (ex.
Polymyxa betae transmite virusul rizomaniei la sfecla pentru zahr).
D - transmiterea prin intermediul nematozilor.
E - transmiterea prin semine (cca.. 1/3 din virusuri).
Circulaia virusurilor n interiorul plantelor se realizeaz prin parenchim
(plasmodesme), prin floem i prin xilem.
1.3.4. Bacteriofagii
Bacteriofagii (gr. bakterion bastona; gr. phago ein a mnca) sunt
virusuri adaptate la viaa parazitar n celulele bacteriene i, care, prin
multiplicare, produc liza acestora.
n anul 1915, Twort descoper fenomenul de liz transmisibil, dar nu poate
explica cu exactitate cauza acesteia. D'Herelle (1917) demonstreaz natura
particular a fagului i l consider ca virus, determinndu-l bacteriofag (mnctor
de bacterii). n anul 1940, ia fiin un grup de cercettori, denumit "grupul fag",
condus de Delbrck, sistemul bacterie-bacteriofag fiind folosit ca model
experimental pentru cele mai importante studii de genetic molecular.
Structura fagilor difer de la un grup la altul, n majoritate acetia
ncadrndu-se n dou tipuri de baz i anume:
tipul icosaedric (poliedric);
tipul filamentos.
Datele cele mai numeroase, cunoscute n prezent, sunt cele referitoare la
fagii din seria T, ndeosebi la fagi T-par (T2, T4, T6).
Anatomia fagilor T-par
Particula viral matur a fagilor T-par cu g.m. 2,2x1010 este alctuit din
ADN i protein i, din punct de vedere anatomic, prezint urmtoarele
componente: cap, guler, coad, plac bazal i fibrele cozii (Fig. 21).
Capul fagului, la microscop, prezint o form poliedric, iar n seciune are
o form hexagonal, cu o lungime de 100 nm i o lime de 65 nm. Acesta este
constituit din capsomere cu diametrul de 4 nm, dar nu este cunoscut, nc,
numrul i modul de aezare al acestora.
n interiorul capului, se gsete genomul, alctuit dintr-o molecul de ADN
d.c., liniar, cu lungimea de 50 m, ce cuprinde 200 gene, fiind mpachetat foarte
strns.
n partea bazal a capului, la locul de prindere al cozii, se afl un dop
proteic, cu rol de articulare mecanic.
ntre acest dop i placa bazal se gsete un tub lung de 120 nm, reprezentat
de cilindrul axial al cozii. El are un diametru de 7,5 nm i un canal central cu
31

diametrul de 2 nm, prin care trece ADN-ul n momentul introducerii n celula


bacterian.
La exteriorul cilindrului axial se gsete teaca contractil a cozii, care n
stare extins are o lungime de 80 nm, iar cnd se contract, teaca se scurteaz la
, respectiv 35 nm. Teaca este constituit din 24 de inele suprapuse i, datorit
aranjamentului capsomerelor, formeaz o helice.
Capsida
CAPUL
FAGULUI
Acid nucleic (ADN)
GULER
Cilindrul axial al cozii
Teaca contractil

FIBRELE COZII
COADA
FAGULUI

Croetele cozii
PLACA
BAZAL

Fig. 21 Structura bacteriofagilor T4

Gulerul fagului este situat ntre dopul proteic i coada fagului i are forma
unui disc hexagonal de 1,5 nm grosime cu de 3,6 nm.
Placa bazal este un disc hexagonal cu de 40 nm i este prevzut la
partea inferioar cu ase crlige (croetele cozii sau spicule), care sunt uniti
integrale de fixare a fagului pe bacterie.
n momentul contraciei, placa bazal ia forma de stea cu diametrul mrit la
60 nm i este lipsit de dopul central.
Fibrele cozii sunt structuri filamentoase, proteice, de 130 nm lungime, fixate
cu unul dintre capete pe placa bazal, iar cu cellalt capt pe gulerul fagului, cea
de-a doua legtur fiind mai slab.
Aceste fibrile formeaz o reea, care mbrac teaca contractil a cozii i,
care, n perioada premergtoare fixrii fagului, se desprind de pe guler i rmn
legate numai pe placa bazal, notnd libere n mediu, avnd aspectul unor
picioare de pianjen.
Structura genomului
Bacteriofagii prezint, n majoritate, un genom format dintr-o singur
molecul de acid nucleic (ADN m.c., ADN d.c. , ARN m.c.), cu o singur
excepie, fagul 6 de la Pseudomonas phaseolicola, care are un genom ARN
segmentat, format din trei segmente.
Genomul bacteriofagilor se deosebete de genomul virusurilor animale i
vegetale prin prezena unor baze nucleice neobinuite, cum ar fi la bacteriofagii
32

T-par, n loc de citozin prezint 5-hidroximetilcitozin, iar la fagii de la Bacillus


subtilis, 5-hidroximetilluracil i 5-4,5 hidroximetiluracil.
Legat de acest aspect s-a emis ipoteza c aceste baze nucleice ar avea rol de
protecie a acidului nucleic fagic mpotriva aciunii unor enzime virale (nucleaze)
care atac numai acidul nucleic strin i, n felul acesta, poate degrada selectiv
cromozomul bacterian n cursul sintezei de virus.
Infecia celulei bacteriene. Replicarea
ntre fagi i bacteriile infectate se pot stabili dou tipuri de relaii, funcie de
ciclul de via al bacteriofagilor.
Dac bacteriofagii sunt viruleni, infectarea bacteriei duce la formarea de
noi virioni, care, n urma fenomenului de liz bacterian, sunt eliberai n mediu.
Acest tip de relaie poart numele de ciclu litic i faciliteaz formarea i eliberarea
a 100-200 de virioni, n aproximativ 20 de minute.
n cazul n care bacteriofagii sunt temperai, genomul acestora se integreaz
n cromozomul bacterian, se replic concomitent cu acesta i se distribuie la
celulele fiice, fr a-i manifesta funciile virale. Aceast manifestare poart
numele de ciclu lizogenic, iar genomul fagic integrat n genomul celulei
bacteriene a fost numit profag (provirus). Dup mai multe generaii, profagul se
desprinde de cromozomul bacterian i devine fag litic care lizeaz celula
bacterian i elibereaz n mediul nconjurtor virioni lizogeni.
Ciclul de replicare vegetativ (ciclul litic) a fagului are urmtoarele etape:
I. Adsorbia reprezint procesul de fixare a particulelor virale pe suprafaa
bacteriilor. Dup o serie de ciocniri ntmpltoare, fagul se fixeaz pe peretele
celular prin intermediul fibrelor cozii, realiznd faza de fixare iniial, care poate
fi reversibil. Urmeaz faza de fixare ireversibil, realizat prin intermediul
croetelor, care este condiionat de prezena receptorilor de fag (Fig. 22). Acetia
sunt reprezentai de orice structur existent la suprafaa celulei bacteriene sau pe
pilii i flagelii acesteia, iar sinteza lor este controlat de gene bacteriene.

Material nuclear bacterian

Fig. 22 Adsorbia particulelor virale pe suprafaa bacteriilor

II. Injectarea genomului viral n celula bacterian. Dup fixarea ireversibil


pe peretele celular are loc o contracie a cozii fagului, axul central al acesteia
ptrunznd n adncimea peretelui celular 12 nm, iar genomul este injectat prin
intermediul cilindrului axial tubular (Fig. 23). Nu se cunosc nc forele care
33

proiecteaz genomul viral n interiorul celulei, injectarea fcndu-se rapid (15


secunde la T4).

Fig. 23 Injectarea genomului viral n celula bacterian

III. Replicarea bacteriofagilor. Dup ptrunderea genomului fagic n


interiorul celulei bacteriene au loc procese coordonate de cele 200 de gene, care
i ncep activitatea ealonat n mai multe faze (Fig. 23-25):
1 - formarea proteinelor timpurii cu rol n:
a - "astuparea" gurilor produse la intrare n peretele celular;
b - blocheaz transcrierea informaiei de ctre ARNm al celulei gazd, rolul
fiind preluat de ARNm viral;

Proteine virale

Fig. 23 Sinteza proteinelor virale

c - degradarea ADN gazd, de ctre unele proteine , fiind frmiat pn la


nucleotide n segmente de ADN d.h. mici de 1/100 din cromozomul originar, care
sunt degradate n continuare la nucleotide, formndu-se un stoc, din care cel puin
1/3 sunt utilizate la formarea fagilor progeni.
2. replicarea genomului viral, care este semiconservativ, i nu prin
efectuarea de copii identice, repetate ale genomului originar;

Fig. 24 Replicarea genomului viral

3. formarea proteinelor tardive. Sinteza acestora devine predominant cnd


ADN viral a ajuns la rata maxim de replicare. Proteinele tardive sunt grupate n
trei categorii:
a - proteine structurale ale virusului;
b - proteine active n procesul de morfogenez;
34

c - enzime necesare lizei celulei bacteriene.


4. asamblarea i morfogeneza virusului este dirijat de 50 de gene din cele
200. Fagul este constituit din trei poriuni distincte, care se formeaz separat pe
trei linii principale, care duc independent la formarea capului, a cozii i a fibrelor
cozii.
n treptele urmtoare, compuii finii se combin pentru a forma particula
viral.
ncorporarea genomului are loc naintea unirii celor trei componente.,
ncorporarea este activat de unele proteine care asigur "aspirarea" ADN n
precap, formarea capului fagic nefiind definitiv.
ADN se ruleaz ca o bobin, al crui ax este perpendicular fa de cel al
cozii. Bobinarea are loc de la exterior la interior, ultima spir fiind prima care iese
n momentul infeciei virale.
Concomitent cu mpachetarea ADN, capul fagului crete n volum i devine
matur. Urmeaz unirea celor trei componente, cap, coad, fibrele cozii,
desvrindu-se fagul matur.

Fig. 25 Asamblarea i morfogeneza virusului (dup Tortora i colab., 1992)

IV. Liza bacterian i eliberarea fagului. Liza bacterian se datoreazaciunii


unei enzime (endolizina), a crei sintez este indus de prezena fagului n celula
bacterian. La un moment dat, cnd coninutul n endolizin este maxim,
metabolismul celular nceteaz brusc i are loc o distrugere masiv a peretelui
celular, cu un caracter exploziv, fagii fiind expulzai n exterior (Fig. 26).

35

Fig. 26 Liza bacterian

1.3.5. Fagii filamentoi


Fagii filamentoi (Fig. 27), care infecteaz E. coli, au forma unor bastonae
flexibile cu diametrul de 6 nm i o lungime de 1000-2000 nm.
Structura este aceea a unui cilindru proteic gol, deschis la capete (capsid),
n interior aflndu-se genomul fagic,
format din ADN m.c., o molecul
circular.
Fagii filamentoi infecteaz numai
bacteriile cu caracter mascul, ca i fagii cu
ARN, adsorbia fcndu-se pe receptori
speciali situai la extremitatea liber a
pililor de sex.
Fagii maturi sunt eliminai, fr ca
bacteria s fie lizat, prin intermediul unor
Fig. 27 Structura bacteriofagului M13
pori, care se formeaz n membrana
citoplasmatic. Bacteria continu s se divid pentru o perioad de timp, iar
ulterior coninutul celular al acesteia trece la exterior prin porii deschii de virioni.

1.3.6. Cianofagii
Cianofagii (sin. ficovirusuri, algofagi) sunt ageni virali, capabili s produc
infecii la numeroase specii de cianobacterii (alge albastre-verzi), influennd,
astfel, dinamica acestor populaii, n sensul meninerii unui echilibru n bazinele
acvatice naturale.
Sunt similari ca structur i evoluie cu bacteriofagii T-impar, genomul fiind
reprezentat de ADN dublu catenar de 13,2 m.
1.3.7. Micovirusurile
Sunt virusuri care atac fungii, fiind cunoscute i sub denumirea de
micofagi. Din cele peste 50 de genuri atacate menionm: Penicillium,
Aspergillus, Mucor, Fusarium, Saccharomyces, Candida etc.
36

Structura micovirusurilor. Cel mai bine studiat este virusul care infecteaz
specia Penicillium chrysogenum, care se prezint sub forma unor mici particule
poliedrice, cu de 33-41 nm. Genomul este reprezentat de o molecul de ARN
d.c.
La fungi, virusurile sunt, n general, latente, celulele se dezvolt mai lent,
dar nu lizeaz constant. Micovirusurile au fost evideniate i n sporii fungilor.
Transmiterea micovirusurilor, n general, se face n urma plasmogamiei
(heterocarioza).
1.3.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea virusurilor
Prima clasificare a virusurilor poart numele de sistemul LHT i a fost
realizat n anul 1962 de ctre cercettorii Lowoff, Horn i Tournier. Sistemul
ofer o prim clasificare tiinific a virusurilor, bazat pe urmtoarele criterii:
1) natura materialului genetic;
2) tipul de simetrie a capsidei;
3) prezena sau absena nveliului extern;
4) dimensiunea virionului i a capsidei.
n prezent, exist dou sisteme principale utilizate pentru clasificarea
virusurilor:
1. Sistemul de clasificare ICTV . Centrul Internaional de Taxonomie a
Virusurilor (ICTV = International Comitee on Taxonomy of Viruses) a elaborat, la
nceputul anilor 1990, un sistem de clasificare i nomenclatur a virusurilor. ICTV
are sarcina de a actualiza i de a menine un sistem taxonomic universal.
Conform acestui sistem, la clasificarea virusurilor se ine cont de
urmtoarele aspecte :
proprieti morfologice (mrimea i forma virionului, structura i simetria
capsidei, etc.);
proprieti fizico-chimice i fizice (greutatea molecular, coeficientul de
sedimentare);
genomul (tipul acidului nucleic, monocatenar sau bicatenar);
organizarea i replicarea genomului;
proprietile antigenice;
proprieti biologice (spectrul de gazde, modul de transmitere n natur, relaiile
cu vectorii).
Unitile taxonomice pentru virusuri ncep la nivel de ordin i fiecare taxon
prezint sufixul, scris cursiv ntre paranteze.
Ordin (-virales)
Familie (-viridae)
Subfamilie (-virinae)
Gen (-virus)
Specie
Conform datelor publicate n 2010 de Centrul Internaional de Taxonomie a
Virusurilor, n schema taxonomic sunt cuprinse: Sase ordine, 87 familii, 19
subfamilii, 348 genuri i 2285 specii de virusuri. Cele ase ordine stabilite de
37

ICTV sunt: Caudovirales, Herpesvirales,


Picornavirales i Tymovirales.

Mononegavirales,

Nidovirales,

2. Sistemul de clasificare Baltimore. Clasificarea Baltimore, iniiat de


biologul american David Baltimore (1971), separ virusurile n apte grupe. Are la
baz mprirea n funcie de tipul genomului viral, sens, precum i metoda de
replicare. Aceasta clasificare este deseori preferat datorit uurinei de
identificare a diferitelor familii de virusuri:
Tipul I: Virusuri cu genom ADN, dublucatenar: Fam. Herpesviridae, Fam.
Poxviridae, Fam. Adenoviridae i Fam. Papovaviridae
Tipul II: Virusuri cu genom ADN monocatenar. Familiile: Circoviridae i
Parvoviridae
Tipul III: Virusuri cu genom ARN dublucatenar. Familiile: Reoviridae i
Birnaviridae
Tipul IV: Virusuri cu genom ARN(+), monocatenar. Familiile: Astroviridae,
Caliciiridae, Coronaviridae, Flaviviridae, Picornaviridae, Arteriviridae i
Togaviridae
Tipul V: Virusuri cu genom ARN monocatenar (-). Familiile:
Orthomyxoviridae,
Arenaviridae,
Paramyxoviridae,
Bunyaviridae
i
Rhabdoviridae.
Tipul VI: Virusuri diploide cu genom ARN monocatenar: Fam. Retroviridae.
Tipul VII: Virusuri cu genom ADN dublucatenar cu molecula de ARN
monocatenar ca intermediar: Fam. Hepadnaviridae.
Pentru identificarea virusurilor se utilizeaz metode moderne, bazate pe
studiul componentelor genomului viral, pe clonri i hibridri nucleare i
enzimatice de tip ELISA sau PCR.

TEST DE AUTOEVALUARE U.I. 1


Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Virusurile sunt:
a) organisme acelulare
b) organisme procariote
c) organisme eucariote
2. Genomul viral este format din:
a) ADN i ARN
b) ADN sau ARN
c) ADN
3. Ptrunderea virusului n celula bacterian are loc:
a) prin fore proprii
b) printr-un vector activ
c) prin "nglobare", de ctre celul

38

4. Pentru sinteza capsidei virale se utilizeaz:


a) proteine existente n citoplasm
b) proteine sintetizate de ARN gazd
c) proteine sintetizate de AN viral

Rezultatele corecte:
1 - a; 2 - b; 3 - a; 4 - b
Rezumat (U.I. 1)
Poziia microorganismelor n lumea vie
1. Regnul Procaryotae
(bacterii, cianobacterii = alge albastre-verzi);
2. Regnul Protista (protozoare, diatomee);
3. Regnul Fungi (ciuperci);
4. Regnul Plantae (alge verzi, brune, roii, brofite, traheofite);
5. Regnul Animalia (animale multicelulare).
Prionii sunt molecule proteice cu greutatea molecular de 27 kilodaltoni, alctuite
dintr-un lan de cca. 240 de aminoacizi.
Virusurile sunt entiti infecioase constituite din protein i un acid nucleic.
Morfologia virusurilor
-form cilindric-alungit sau de bastona;
-form sferic (izometric);
-form paralelipipedic;
-form de cartu sau obuz;
-form de mormoloc, sau cirea cu coad;
Dimensiunile virusurilor = 17 nm - 2500 nm.
Structura virusurilor
Genomul viral (ADN sau ARN, niciodat ambele) i capsida viral
alctuit din subuniti proteice

Lucrare de verificare nr. 1


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Prezentai diferentele dintre celula eucariota si celula procariota (4
puncte);
2. Descrieti morfologia i structura virusurilor (6 puncte).
BIBLIOGRAFIE (U.I. 1)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
39

Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.


Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

Unitatea de nvare nr. 2:

CARACTERELE GENERALE I POZIIA


MICROORGANISMELOR N LUMEA VIE
Cuprins (U.I. 2)

Obiectivele i competenele profesionale specific (U.I. 2)41


Instruciuni (U.I. 2) 41
2.1. Bacteriile............................................................................................41
2.1.1. Morfologia bacteriilor..............................................................42
2.1.2. Structura celulei bacteriene.......................................................46
2.1.4. Creterea i multiplicarea bacteriilor........................................55
2.1.5. Nutriia bacteriilor....................................................................57
2.1.6. Respiraia microorganismelor..................................................58
2.1.7. Grupe particulare de bacterii..................................................58
2.1.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea bacteriilor..............61
2.1.9. Rolul bacteriilor n natur.......................................................62
2.2. Cyanobacteriile (algele albastre-verzi).....................................63
2.2.1. Morfologia cyanobacteriilor.....................................................63
2.2.2. Structura cyanobacteriilor.........................................................63
2.2.3. Sistematica cyanobacteriilor.....................................................64
2.2.4. Rolul cyanobacteriilor n natur...............................................65
Test de autoevaluare65
Rezumat (U.I. 2) ..66
Lucrare de verificare nr. 2 .... 66
Bibliografie (U.I. 2) ....66

40

Obiectivele i competenele profesionale specific (U.I. 2)


Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n cunoaterea
microorganismelor precum bacteriile i a cyanobacteriile. Dup parcurgerea
acestei uniti de nvare vei dobndi competene pentru:
- descrierea celulei bacteriene;
- descrierea morfologiei bacteriilor i a cyanobacteriilor (alge albastre-verzi);
- descrierea sistematicii bacteriilor i cyanobacteriilor;
- identificarea bacteriilor i a cyanobacteriilor.
Instruciuni (U.I. 2)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaugalte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de bacterii i cyanobacterii
(rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de verificare.
Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau
prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.
2.1. Bacteriile
Sunt organisme unicelulare, cu o structur complex, care au un metobolism
propriu, datorit unui aparat enzimatic complex, ce le asigur desfurarea
proceselor vitale. n linii generale, bacteriile au o serie de caractere generale, ce
pot fi sistematizate astfel:
Nucleul celulei bacteriene este de tip procariot, adic lipsit de membran, iar
afinitile tinctoriale nu sunt deosebite fa de citoplasm.
Bacteriile au un polimorfism accentuat, putnd mbrca mai multe aspecte
morfologice, ca forme sferice, cilindrice, spiralate sau helicoidale, filamentoase
i ptrate.
Micarea la speciile mobile este asigurat de organite speciale, numite cili sau
flageli.
Bacteriile sunt lipsite de clorofil, dar unele grupe au pigmeni sintetizani i, ca
atare, pot folosi energia luminoas.
Altele i procur energia necesar sintezelor celulare i altor manifestri vitale
dezintegrnd diverse substane chimice prin intermediul proceselor fermentative,
fiind, din acest punct de vedere, organisme chimiosintetizante (Chemotrofe).
Se nmulesc prin sciziparitate, dar se cunosc la unele grupe i forme de
conjugare de tip parasexuat, cu formare de celule sexuate de sens diferit; forma
de sciziparitate rmne ns forma esenial de reproducere.
Bacteriile pot forma spori, ce constituie un mijloc de conservare a speciei, la
unele grupe.

41

2.1.1. Morfologia bacteriilor


Forma exterioar a bacteriilor (Fig. 28) este un caracter controlat genetic, iar
din acest punct de vedere se disting cinci tipuri de baz, dup cum urmeaz:
bacterii sferice, denumite coci, cu genul principal Coccus;
bacterii cilindrice, denumite bacili, sub form de bastona drept sau uor curbat,
din care face parte genul Bacillus;
bacterii spiralate sau elicoidale, n care se cuprind trei categorii de germeni i
anume: vibrion, spiril i spirocheta;
bacterii filamentoase, cu celule alungite, reprezentate de actinomicete;
bacterii ptrate, ntlnite n apele hipersaline.

Fig. 28 Tipuri morfologice de bacterii: (a) sferice (coci); (b) cilindrice


(bacili); (c) spiralate (elicoidale); (d) filamentoase; (e) ptrate.

Dup forma celulelor i modul de grupare n urma procesului de diviziune,


bacteriile se mpart n urmtoarele tipuri i subtipuri morfologice:
1. Bacteriile sferice sau cocii (gr. kokkos - bob) au form sferic, ovoidal,
elipsoidal sau reniform, cu cele dou diametre aproximativ egale. n funcie de
poziia celulelor fiice dup diviziune, cocii prezint urmtoarele moduri de
grupare (Fig. 29-34):
Cocul simplu, izolat, la care celulele rmn independente dup diviziune (ex.
Micrococcus ureae).

Fig. 29 Cocul simplu (Micrococcus ureae)

Diplococul, la care diviziunea se face dup planuri succesive paralele, celulele


rezultate rmnnd grupate cte dou (ex. Diplococcus pneumoniae).
42

Fig. 30 Diplococul (Diplococcus pneumoniae)

Streptococul, la care diviziunea se face dup planuri succesive paralele, iar


celulele rezultate formeaz lanuri de lungimi variabile (ex. Streptococcus lactis).

Fig. 31 Streptococul (Streptococcus lactis)

Tetracocul sau tetrada, la care planurile de diviziune sunt perpendiculare unele


fa de altele, iar celulele rezultate sunt dispuse cte patru la un loc (ex. genul
Gafkia).

Fig. 32 Tetracocul (Gafkia tetragena)

Sarcina, la care planurile de diviziune sunt orientate dup cele trei direcii ale
spaiului i reciproc perpendiculare unul pe altul, rezultnd o grupare de celule sub
form de cub (ex. Sporosarcina ureae).

Fig. 33 Sarcina (Sarcina lutea)

Stafilococul, la care planurile succesive de diviziune sunt dispuse n mai multe


direcii, iar celulele rezultate se grupeaz ca un ciorchine (ex. Staphyllococcus
aureus).

43

Fig. 34 Stafilococul (Staphyllococcus aureus)

2. Bacteriile cilindrice, cunoscute sub denumirea de bacili (lat. bacillus bastona), au form de bastonae, cu raportul ntre cele dou axe foarte diferit, de
la forme cu aspect filamentos, pn la unele cu aspect aproape sferic (cocobacili,
ex. Pasturella pestis). Bacilii sunt drepi sau uor curbai la mijloc sau la una din
extremiti, iar capetele lor pot fi tiate drept (Bacillus anthracis) sau rotunjite
(Escherichia coli). Marginile laterale ale celulei sunt, de obicei, paralele, dar pot fi
i apropiate la extremiti, n form de suveic (Fusiformis fusiformis), sau
ndeprtate i rotunjite la una sau ambele extremiti, n form de mciuc sau de
picot (Corynebacterium sp.). Unele dintre bacteriile cilindrice au proprietatea de
a forma spori.
Bacilii pot fi (Fig. 35):
izolai
grupai cte doi (diplobacili), n form de V, X, Y (Mycobacterium sp.);
n lanuri, cu lungimi variate (streptobacili);
n palisd, ca scndurile unui gard, celulele ramnnd apropiate i paralele n
sensul axului lung, aezarea fiind rezultatul unei micri de basculare a celuleifiice, avnd ca punct de sprijin peretele transvers recent separat;
grupai n form de rozet sau de stea (Agrobacterium stellulatum, Ag.
radiobacter, Phyllobacterium stappi).

44

Fig. 35 Bacterii cilindrice: (a) cocobacil; (b) bacil izolat; (c) diplobacil;
(d) streptobacil; (e) bacili grupai n palisad.

3. Bacteriile spiralate (elicoidale)


cuprind trei subtipuri morfologice (Fig.
Fig. 37 Sphaerotilus nutans
36):
Vibrionul, n form de virgul, cu un singur tur de spir (ex. Vibrio cholerae);
Spirilul, n form de spiral cu mai multe ture de spir, rigide ca un baston (ex.
Spirillum voluntas);
Spirocheta, n form de spiral cu mai multe ture flexibile, care se poate strnge
i relaxa ( ex. Borrelia sp., Treponema sp. i Leptospira sp.).

Fig. 36 Bacterii spiralate: (a) vibrion; (b) spiril; (c) spirochet.

4. Bacteriile filamentoase pot fi neramificate (Ord. Caryophanales), cu


ramificaii false (Ord. Chlamydobacteriales) sau cu ramificaii adevrate (Ord.
Actinomycetales).
Sunt microorganisme cu asemnri morfologice cu fungii, ce au
particularitatea de a forma hife, cu tendin de ramificare, de unde i aspectul lor
de miceliu.

45

n unele cazuri, spre exemplu la Sphaerotilus nutans (Fig. 37), aspectul


filamentos este determinat de aezarea celulelor individuale n lanuri de celule,
reunite printr-o teac delicat cu perete neted.
5. Bacteriile ptrate, evideniate n apele hipersaline din peninsula Sinai, au
forma unor ptrate cu latura de 1,5-11 m i o grosime inegal (0,1 m sau chiar
mai mic n regiunea central i 0,2-0,5 m la periferie).
Multiplicarea se face prin diviziune direct (ex. Quadra sp.). n unele
cazuri, fiecare bacterie ptrat crete pn ia form unui dreptunghi, care se divide
n dou ptrate egale. Alteori, diviziunea se face n dou planuri, ce alternez n
unghi drept, iar celulele rezultate din diviziune formeaz placarde de 8-16 celule
(Fig. 38).
n afara acestor cinci tipuri morfologice de baz exist bacterii cu forme
particulare:
Bacterii stelate - bacterii sub form de stea; se nmulesc prin sciziparitate
(Stella sp.);
Bacterii care formeaz trichoame - grupare de celule care n urma diviziunii se
prezint sub forma unui filament multicelular, n care celulele adiacente au o
suprafa relativ mare de contact i sunt meninute ntr-un nveli parietal comun
(Beggiatoa sp., Caryophanon sp., Sphaerotilus sp.);
Bacteriile prostecate (gr. prosteka adaos) prezint o complicaie morfologic
sub forma unui apendice semirigid, situat n continuarea celulei procariote
(Caulobacter sp). Diametrul acestui apendice este mai mic dect al celulei
bacteriene mature;
Bacteriile cu apendice acelulare prezint un aspect filamentos, datorit
apendicelor acelulare (substane secretate sau excretate), nedelimitate de peretele
celular (Gallionella sp.).
Dimensiunile bacteriilor se exprim
n micrometri (1 m = 10-6 m) i, n
medie, au 0,5-1 x 3-6 m. Cele mai mici
bacterii aparin genului Mycoplasma
(diametrul = 125-250 nm), iar cele mai mari
pot ajunge la 10-150 m lungime
Fig. 38 Bacterii ptrate
(Beggiatoa sp.). n cazul formelor
filamentoase, dimensiunile bacteriilor ajung n mod excepional la 500 m lungime
(Saprospira grandis).
Sub raportul dimensiunilor, cele mai mici bacterii se suprapun virusurilor mari
(Poxvirus), vizibile la microscopul fotonic, iar cele mai mari depesc mrimea celor
mai mici protiste eucariote.
2.1.2. Structura celulei bacteriene
Celula bacterian este o entitate morfologic i funcional echivalent cu
celulele organismelor superioare, cu o structur complex, format din
46

urmtoarele componente, de la exterior ctre interior, lund ca reper peretele


celular:
Structura extraparietal, format din: capsul; cilii sau flagelii; aparatul
fimbrial i pilii de sex;
Peretele celular;
Structura intraparietal, compus din: membrana citoplasmatic, mezozomii,
citoplasm, aparatul nuclear, incluziunile, ribozomii, vacuolele, sporul bacterian.
I. Structura extraparietal:
1. Capsula (Fig. 39) este o
secreie, care apare la exteriorul unor
celule bacteriene, i constituie un
nveli n jurul acestora. n funcie de
raportul fa de celula bacterian,
capsula este de mai multe feluri:
microcapsula este un strat mucoid
foarte fin, cu grosimea de pn la 0,2
m
i care poate fi pus n eviden prin
metode imunologice;
Fig. 39 Capsula bacterian
capsula propriu-zis are grosimea
cuprins ntre 0,2-2 m;
stratul mucos este caracterizat prin prezena unei mase amorfe, neorganizate n
jurul celulei;
zooglea se prezint ca un strat mucos, neorganizat, care nglobeaz mai multe
celule microbiene.
Compoziia chimic a capsulei difer n funcie de specia bacterian la care
apare i de condiiile de mediu, fiind format din 98 % ap i ali constitueni ca
polizaharidele i polipeptide.
Funciile biologice ale capsulei sunt urmtoarele:
- funcia de protecie mpotriva fagocitelor la bacteriile patogene;
- funcia de virulen;
- funcia de protecie mpotriva desicaiei.
2. Cilii sau flagelii sunt formaiuni filamentoase, cilindrice, lungi, subiri,
situate la suprafaa celulei bacteriene i reprezint organite de micare ale
acesteia. Prezena cililor este caracteristic numai speciilor de bacterii mobile, iar
numrul acestora este variabil funcie de specie, de la unu pn la o sut.
Dup modalitatea de inserie pe corpul bacteriei, cilii pot avea urmtoarele
poziii (Fig. 40):
monotrih, un cil la un singur pol (ex. Pseudomonas aeruginosa);
amfitrich, cu cte un cil la ambii poli ai celulei (ex. Spirillum volutans);
lofotrich, cu cili dispui la un pol sub form de mnunchi (ex. Escherichia
coli);
peritrich, cu cili dispui n jurul bacteriei (ex. Proteus vulgaris).

47

Fig. 40 Tipuri de ciliaie bacterian:


monotrich
(Pseudomonas aeruginosa); (b)
Fig. 41 (a)Aparat
fimbrial
amfitrich (Spirillum volutans); (c) lofotrich (E. coli); (d) peritrich (Proteus vulgaris).

Cilii sunt organite lungi de 16-18 m, cu diametrul de 0,01-0,02 m pe toat


lungimea, de obicei ondulai. Implantarea lor se face n citoplasm printr-un corp
bazal, situat ntre peretele celular i membrana citoplasmatic. La bacteriile Gram
pozitive, corpusculul bazal este format din dou discuri (inele), angrenate
mpreun sub forma butonilor de manet.
Lungimea cililor depete pe cea a celulei, n mod excepional pn la de
10 ori. Cu ajutorul cililor, bacteriile se pot deplasa linear sau se pot rostogoli.
Viteza de naintare este mare, parcurgnd ntr-o secund o distan de la 10 pn
la 40 ori mai mare decat diametrul longitudinal al bacteriei.
3. Aparatul fimbrial
Fimbriile (lat. fimbra franjure) sunt formaiuni filamentoase scurte (1-20
m), prezente n numr mare (100-400) pe suprafaa bacteriilor imobile sau
mobile. Ele au o poziie radial i nu servesc la micare, ci au rol de fixare pe
diferite substraturi solide sau pe hematii, pe care le aglutineaz. Fimbriile (Fig.
41) sunt de natur intracelular, deoarece, dup ndeprtarea peretelui celular,
rmn fixate pe protoplati.
4. Pilii (Fig. 42) sunt apendici filamentoi, tubulari, flexibili, care au un
canal prin care se face transferul cromozomului bacterian de la celula mascul
(F+) la celula femel (F-). Mai sunt denumii i "pili de sex", iar procesul de
transfer se numete conjugare bacterian.

Fig. 42 Pili de sex la E. coli

48

5. Spinii sunt formaiuni extraparietale tubulare i rigide, prezente la


suprafaa unor bacterii Gram negative. Numrul lor variaz ntre 1 i 15 i au o
distribuie ntmpltoare, perpendicular pe suprafaa celular. Prezint rol
taxonomic.
II. Peretele celular este invizibil sau foarte greu vizibil la microscopul
fotonic i reprezint aproximativ 20% din greutatea uscat a celulei i 25% din
volumul ei.
Peretele celular are rol:
de susinere mecanic;
asigur individualitatea morfologic;
ofer protecie fa de ocul osmotic;
particip la procesul de diviziune celular;
conine receptori de virus;
mediaz schimbul de substane cu mediu.
Peretele celular este absent la genul Mycoplasma.
Peretele celular (Fig. 43) reprezint o structur macromolecular, format
dintr-un mucopeptid numit peptidoglican (murein) i substane care formeaz un
matrix, n care este nglobat structura parietal bazal i prezint o compoziie
chimic particular, n raport cu grupa de bacterii analizat.
Coloraia Gram are o importan deosebit n taxonomia bacterian i a fost
decoperit n 1844 de Hans Christian Gram. Aceast metod pornete de la
observaia c unele bacterii, colorate cu derivai bazici din grupul trifenil
metanului (violetul de geniana, violetul de metil, cristal violet) i mordansate cu
iod, rezist la decolorarea cu anumii solveni organici (alcool sau aceton), n
timp ce altele nu rezist. De aici, necesitatea recolorrii frotiului cu o culoare de
contrast (fucsin, safranin), care s recoloreze bacteriile, care nu au reinut
primul colorant.
Coloraia Gram permite clasificarea bacteriilor n funcie de structura i
compoziia chimic a peretelelui celular n dou mari categorii: Gram pozitive
(G+, violet) i Gram negative (G-, rou). ntre cele dou categorii exist diferene
mari de compoziie chimic i anume:
Peptidoglicanul (mureina) este prezent la majoritatea bacteriilor, fiind de mai
multe tipuri moleculare. Reprezint 60-90% din greutatea uscat a peretelui
celular la bacteriile Gram pozitive, n timp ce la bacteriile Gram negative
reprezint 10-20% i se afl n zona median a peretelui.
Acizii teichoici (gr. teichos - perete) sunt foarte abundeni la bacteriile Gram
pozitive i lipsesc la bacterille Gram negative. Aceti acizi sunt legai de straturile
de peptidoglican sau de membrana citoplasmatic.
Acizii lipoteichoici sunt ntlnii la bacteriile Gram pozitive, asociai la
membrana citoplasmatic, dar se gsesc i n peretele celular.
Acizii teichuronici sunt caracteristici bacteriilor Gram pozitive.
Lipopolizaharidele caracterizeaz bacteriile Gram negative i sunt responsabile
de primul control al permeabilitii celulare. Bacteriile Gram negative sunt, n
49

general, mai rezistente la inhibitori


Glicolipde
(peniciline, colorani) dect cele
Glicoproteine
Gram pozitive.
Lipoproteinele sunt ntlnite la
bacteriile Gram negative sub
forma unui strat lax, format din
grupri lipidice i proteice. Sunt
situate pe suprafaa superioar a
peptidoglicanului.
Canalicul
Protein
Fosfolipidele sunt tipice pentru
Strat fosfolipidic
bacteriile Gram negative.
Fig. 44 Seciune prin membran
Acizii grai se gsesc sub forma
unor
lanuri lungi la nivelul peretelui celular la actinomicete i la bacteriile
coryneforme.
Bacterie Gram negativ

Bacterie Gram pozitiv

Lipopolizaharide

Acid lipoteichoic

Acid teichoic
Peptidoglican

Porine

Fosfolipide

Membran
extern

Peptidoglican
Spaiu periplasmic
Membran
plasmatic

Protein
Protein

Membran
plasmatic

Lipoproteine

Protein

(b)

(a)

Protein

Fig. 43 Structura peretelui celular la bacterii: (a) Gram pozitive; (b) Gram negative.

III. Structura intraparietal:


1. Membrana citoplasmatic, acoper citoplasma bacteriilor i o separ de
faa intern a peretelui celular (Fig. 44). Are o grosime de 8-10 nm, este
constituit din dou straturi fosfolipidice i reprezint 10-20% din greutatea uscat
a celulei.
Analiza chimic a membranei evideniaz trei tipuri de molecule: lipide
(fosfolipide), proteine i glucide (polizaharide legate cu proteine glicoproteine
sau lipide - glicolipide). Membrana citoplasmatic este o barier osmotic de
permeabilitate, care regleaz ptrunderea n celul i eliminarea selectiv a
diferitelor substane.
Ea menine n celul o concentraie ridicat de macromolecule, molecule
mici i chiar ioni, mpedicndu-le difuzarea n mediu, dei concentraia
extracelular este mai mic. Conine permeazele care asigur transportul activ n
interiorul celulei a unor substane organice polare din mediu.
Membrana citoplasmatic are rol n creterea i diviziunea celular; la
nivelul su ia natere semnalul care declaneaz iniierea replicrii cromozomului
bacterian.
50

n sfrit, membrana citoplasmatic este suportul enzimelor care particip la


sinteza ATP (la eucariote aceste enzime se afl n mitocondrii).
2. Mezozomii sunt formaiuni care deriv din membrana citoplasmatic sub
forma unor invaginri, legate de ADN celular. Aceste organite celulare joac un
rol important n diviziunea nucleului i n formarea septului, care separ cele dou
celule fiice.
La bacteriile purpurii, mezozomii conin pigmeni clorofilieni. La bacteriile
fixatoare de azot, nitrogenaza, care este inhibat de O2, este protejat de
mezozomi. Bacteriile nitrificatoare prezint numeroase invaginri ale membranei
citoplasmatice care mresc suprafaa de schimb enzimatic.
3. Citoplasma este un sistem coloidal, constituit din sruri minerale,
compui solubili de natur lipoproteic, nucleoproteine, lipide i ap. Are un pH
cuprins ntre 7 i 7,2.
Citoplasma poate fi caracterizat ca un complex de stri fizice ntr-o
continu transformare, n funcie de starea fiziologic i vrsta celulei.
4. Ribozomii sunt formaiuni citoplasmatice, sferice. O celul bacterian
conine, n medie, 18.000 ribozomi de tip 70 S, cu un diametru de 10-30 nm.
Fiecare ribozom se disociaz n dou subuniti, 30 S i 50 S (Fig. 45). Fiecare
subunitate 50 S este legat de o subunitate 30 S prin intermediul legturilor ARN protein i protein-protein. Ribozomii 70 S joac un rol precis n cursul
traducerii lanurilor de ARN n proteine.
Conin 50% ap, iar substana lor uscat se compune din circa 60% ARN
(ARN ribozomal) i circa 30% proteine. O parte din ribozomi sunt liberi n
citoplasm, iar ceilali sunt fixai de suprafaa intern a membranei citoplasmatice.
5. Materialul nuclear ("nucleul") este constituit dintr-un cromozom format
dintr-o bucl de ADN, aflat suspendat n citoplasm. Lungimea acestuia este
mare, ajungnd la Escherichia coli la 1 mm, ceea ce implic o rsucire foarte
accentuat. Din punct de vedere chimic, materialul nuclear conine 60% ADN,
30% ARN i 10% proteine.
6. Plasmidele sunt
considerate material genetic
50S
30S
70S
+
extracromozomial,
fiind
independente de nucleu.
Plasmidele nu sunt
Fig. 45 Structura ribozomilor bacterieni
indispensabile pentru viaa
celular, dar pot aduce un avantaj selectiv. Ele poart informaia pentru
degradarea unor substraturi i pentru rezistena la antibiotice.
Replicarea plasmidelor se produce n dou momente diferite: atunci cnd
celula se divide i atunci cnd se produce procesul de conjugare.
Bacteriile pot conine mai multe plasmide. Escherichia coli, de exemplu,
posed pe cromozom unul sau dou plasmide conjugate i 10-15 plasmide
neconjugate.
7. Vacuolele sunt formaiuni sferice, nconjurate la periferie de o membran
lipoproteic, numit tonoplast, i care apar n citoplasm n faza de cretere activ
a celulelor bacteriene. Numrul lor variaz ntre 6 i 20, iar n interiorul lor se
51

gsete ap sau gaz (cianobacterii, bacterii fotosintetizante roii i verzi etc.). Cele
cu ap au rol n meninerea presiunii osmotice n raport cu mediul extern i n
depozitarea substanelor de rezerv, n timp ce vacuolele cu gaz au rol de flotaie
sau rol protector (fa de intensitatea luminoas).
8. Incluziunile sunt formaiuni inerte, care apar n citoplasm la sfritul
periodei exponeniale de cretere a celulei. Ele pot fi formate din glicogen,
amidon, carbonat de calciu i fosfat anorganic.
9. Sporul bacterian este o formaiune care deriv din celula vegetativ a
bacteriilor, n anumite condiii de via. Sporul este o form de conservare a
speciei la condiiile nefavorabile de mediu i concentreaz, ntr-un volum redus,
toate componentele eseniale ale celulei din care provine. Bacteriile sporogene, cu
excepia genului Desulfotomaculum (Gram variabil), sunt Gram pozitive, iar
forma sporului poate fi sferic sau oval.
Sporul apare ca o structur constant la bacteriile anaerobe, aparinnd
genului Clostridium, n mod facultativ la bacteriile aerobe din genul Bacillus i
foarte rar la coci (Sporosarcina ureae).
Dispunerea sporului n celula vegetativ poate fi central (Bacillus
anthracis), subterminal (Bacillus cereus), terminal (Clostridium tetani) sau
lateral (Fig. 46).

(a)

(b)

(c)

(d)

Fig. 46 Localizarea sporului bacterian: (a) central;


(b) subterminal; (c) terminal; (d) lateral.

Dimensiunile sporilor variaz ntre 0,2 i 2 m, iar diametrul acestora poate


fi mai mic (spor nedeformant sau bacteridie) sau mai mare (spor deformant sau
clostridie) dect diametrul transversal al celulei n care se formeaz.
Dup modul de formare, structur i rezisten la factorii de mediu, sporul
bacterian poate fi de mai multe tipuri:
Endosporul (sporul propriu-zis) apare n interiorul unei celule vegetative,
numit "sporangiu", i prezint o mare rezisten la condiiile nefavorabile de
mediu, n special la variaiile temperaturii. O celul vegetativ poate forma un
singur endospor. Bacteriile susceptibile de a produce endospori aparin genurilor:
Bacillus, Clostridium, Desulfatomaculum, Sporosarcina, Sporolactobacillus,
Thermoactinomyces.
Artrosporii se formeaz prin fragmentarea unor celule vegetative. Au o form
neregulat i o rezisten intermediar ntre cea a endosporului i celula
vegetativ. Artrosporii sunt caracteristici bacteriilor actinomicete.
Chitii sunt stadii de repaus sau supravieuire, formate ca rspuns la
modificrile de mediu i provin din transformarea unei celule vegetative, prin
ngroarea pereilor i acumularea de material de rezerv. Au o rezisten mai
mic dect endosporul i nu sunt termorezisteni. (ex. Azotobacter sp.)
52

Gonidia apare endocelular prin condensarea i fragmentarea protoplasmei unei


celule vegetative, numit gonidangiu. n interiorul unei celule apar, de regul, mai
multe gonidii, care sunt eliberate n mediu prin ruperea peretelui gonidangiului.
Principala lor funcie privete capacitatea de reproducere, neavnd rezistena
caracteristic sporului (ex. Leptothrix ochracea).
Compoziia chimic a sporului. ntre forma vegetativ i forma sporulat a
unei specii bacteriene exist deosebiri de ordin calitativ i cantitativ. Astfel, din
punct de vedere cantitativ, sporii sunt bogai n Ca2+, Cu2+ i Mg2+ i sraci n P i
n substane proteice. De asemenea, sporii au un coninut mai sczut n H2O i
ARN, comparativ cu formele vegetative. n plus, sporii mai conin, n cortexul
sporului, acidul dipicolinic sub form de dipicolinat de Ca.
Compoziia chimic a sporului duce, implicit, la unele deosebiri n legtur
cu rezistena sa fa de agenii fizici i chimici.
Semnificaia biologic a sporului
Sporul bacterian, prin rezistena sporit fa de factorii de mediu, are rolul
de conservare a speciei. El concentreaz ntr-un volum redus toate componentele
eseniale ale celulei, sporogeneza fcnd parte dintr-un ciclu vital obligatoriu.
nsuirile de rezisten ale sporului pot fi sintetizate astfel: rezistena la
temperatur, rezistena la uscciune, rezistena fa de factorii chimici.
Metabolismul sporului este mult mai redus ca al celulei vegetative i nu permite
multiplicarea.
Citologia formrii sporului
n interiorul celulei bacteriene, formarea sporului presupune crearea unei
noi celule diferite de cea vegetativ, care se produce n mai multe faze (Fig. 47):
Stadiul preparator viitorul nucleu al sporului ia natere prin detaarea unui
segment din cromozomul bacterian, iar n jurul acestuia, ulterior, are loc
condensarea citoplasmei;
ADN Perete celular Membran citoplasmatic

Celul vegetativ

Cortex

Membran citoplasmatic

nveli sporal
Membran citoplasmatic
ADN
Spor liber
nveli sporal

Cortex

nveli sporal n formare

Fig. 47 Procesul de sporogenez la bacterii

Stadiul depresor n care nucleul sporului, format i nconjurat cu un strat de


citoplasm condensat, se separ de restul citoplasmei prin septul sporal;
Stadiul apariiei nveliurilor sporale, tunica i cortexul sporului;

53

Stadiul de maturare const n migrarea sporului la locul definitiv n celula


bacterian. n aceast etap are loc reducerea dimensiunilor sporale, dar i
maturizarea sporului.
Infrastructura sporului (Fig. 48) prezint urmtoarele componente:
1. nveliul sporal extern (tunica) nconjoar cortexul i prezint o structur
multistratificat, alctuit din trei straturi: extern (exina), mijlociu i interior
(intina).
2. Cortexul sporului
3. Celula sporal propriu-zis (protoplast sporal) este constituit din
sporoplasm (citoplasm granular) i nucleoplasm (material nuclear).
Unele specii bacteriene (Bacillus cereus, Bacillus anthracis) prezint, la
exteriorul nveliului sporal, un exosporium cu structur simpl sau complex,
care acoper sporul.
2.1.3. Compoziia chimic a bacteriilor
Compoziia chimic a celulei bacteriene nu difer prea mult de cea a
celorlalte organisme vii. Ea conine cca.. 600 molecule diferite, organice i
anorganice.
Apa este mediul biogen esenial i reprezint 78 % din greutatea medie a
celulei bacteriene. Se gsete sub form de ap liber sau legat de diferite
componente celulare. Apa ndeplinete numeroase funcii:
este solvent al compuilor hidrosolubili;
este mediu de dispersie pentru constituenii chimici insolubili n ap;
condiioneaz activitatea enzimelor;
asigur transportul elementelor de metabolism.
Srurile minerale reprezint 2-20 % din greutatea uscat a bacteriilor i sunt
reprezentate de principalele elemente. Cel mai bine este reprezentat fosforul ( 45
%). Substanele minerale au rol n:
reglarea presiunii osmotice;
activeaz unele sisteme enzimatice;
regleaz pH-ul;
influeneaz permeabilitatea peretelui celular;
intr n compoziia unor constitueni celulari.
Exosporium
nveli sporal
Acizii nucleici. ADN se gsete sub
Cortex
forma unei singure molecule circulare, dublu
helicale. Reprezint 1/5 din coninutul celular.
ARN reprezint cca. 17% din greutatea uscat a
celulei bacteriene i se gsete localizat n
citoplasm sub trei forme: ARN mitocondrial
Membrana
(ARNm), ARN transfer (ARNt) i ARN sporoplasmei
ribozomal (ARNr).
Proteinele reprezint cca.. 60% din
greutatea uscat a bacteriilor i se gsesc sub
Fig. 48 Structura sporului
form de holoproteine i heteroproteine.
bacterian

54

Proteinele au rol structural, iar unele ndeplinesc funcia de enzime.


Glucidele reprezint 4-25% din greutatea uscat a celulei bacteriene i se
gsesc sub form de glucide simple (mono i dizaharide) i polizaharide.
Glucidele simple particip la metabolismul bacterian, iar polizaharidele au
rol structural, energetic sau de material de rezerv.
Lipidele se gsesc n proporie de 1-20% din greutatea uscat a bacteriilor,
iar aceast variaie este specific, depinznd de vrsta celulei i compoziia
mediului de cultur. Lipidele se gsesc n membrana citoplasmatic i sub form
de granule intracitoplasmatice.
Pigmenii sunt substane colorate care se gsesc n citoplasma bacteriilor
cromogene. Dup localizarea pigmenilor fa de celul, bacteriile se mpart n
dou categorii:
bacterii cromopare, la care pigmentul este eliminat n mediul pe care l
coloreaz (ex. Pseudomonas fluorescens);
bacterii cromofore, la care pigmentul rmne localizat n celula bacterian (ex.
Staphylococcus aureus).
Pigmenii pot fi de mai multe tipuri, dup compoziia chimic:
bacterioclorofite, pigmeni carotenoizi (roii, galbeni, portocalii), antocianici,
pigmeni melanici (brun sau negru).
Pigmenii pot avea rol n fotosintez, rol antibiotic, de protecie mpotriva
radiaiilor luminoase i ultraviolete, rol de vitamine.
Enzimele bacteriene constituie o grup de proteine cu importan biologic
deosebit, de catalizatori ai celulei vii, fiind solubile n ap, termolabile, criolabile
i sensibile la aciunea radiaiei ultraviolete.
Dup substratul asupra cruia acioneaz, enzimele se clasific n:
exoenzime, care sunt eliberate n mediul nconjurtor, acionnd asupra unui
substrat din afara celulei; acestea sunt angrenate n procesele de catabolism;
Endoenzime, care sunt secretate intracelular i particip la reaciile de sintez
(anabolism).
Dup viteza de aciune, enzimele pot fi de dou categorii:
enzime constitutive, care sunt preexistente i care acioneaz rapid asupra unui
substrat. Sunt sintetizate n tot cursul vieii bacteriei;
enzime adaptive, care acioneaz lent, deoarece celula trebuie s se adapteze la
substrat, apariia enzimelor fiind legat de mediu.
2.1.4. Creterea i multiplicarea bacteriilor
Ciclul de dezvoltare al bacteriilor se compune din dou faze: creterea i
multiplicarea.
Prin cretere se nelege procesul de neoformare, n condiii favorabile, n
protoplasma bacteriei, a substanei de constituie. Aceast cretere se continu
pn la atingerea unei limite, cnd survine diviziunea celular.
Prin multiplicare se nelege sporirea numrului de indivizi, care se face
prin diviziune celular.
Diviziunea celular poate fi:
55

izomorf, cnd celulele fiice rezultate sunt egale;


heteromorf, cnd celulele fiice rezultate nu sunt egale;
n afara diviziunii celulare, multiplicare se mai poate realiza prin:
fragmentarea coninutului celular n mai multe elemente;
prin nmugurire.
Evoluia unei culturi bacteriene.
Studiile privind multiplicarea bacteriilor pe medii artificiale, au artat c
acest proces se realizeaz n mai multe faze succesive (Fig. 49):
1. Faza de lag sau cretere zero este cuprins ntre momentul nsmnrii
bacteriilor i momentul nceperii multiplicrii, cnd numrul bacteriilor din inocul
nu crete, iar cultura nu este vizibil macroscopic. Aceast faz dureaz
aproximativ 2 ore i este o etap de adaptare la noile condiii de cultur.
2. Faza de accelerare a ritmului de cretere corespunde nceperii
multiplicrii, a crei vitez crete progresiv i n care celulele sunt tinere.
3. Faza exponenial sau de multiplicare logaritmic este cea n care
procesul se accentueaz n progresie geometric, iar durata unei generaii este
minim.
Creterea exponenial a unui organism unicelular ce realizeaz o generaie
la 20 minute (dup Stanier, 1966)
Timpul
(minute)
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200

Numr de
diviziuni
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Numr de microorganisme exprimat n:


nr. aritmetic
log2
log10
1
0
0,000
2
1
0,301
4
2
0,602
8
3
0,903
16
4
1,204
32
5
1,505
64
6
1,806
128
7
2,107
256
8
2,408
512
9
2,708
1024
10
3,010

4. Faza ncetinirii ritmului de cretere, cnd rata multiplicrii ncepe s


scad progresiv.
5. Faza staionar, cu ritm de cretere zero, care se caracterizeaz prin faptul
c numrul celulelor rmne constant din cauza echilibrului ce se stabilete ntre
numrul celulelor ce mor i al celor ce apar n urma unei diviziuni foarte lente.
Aceast faz corespunde celulelor mature.
6. Faza iniial de declin, n care numrul celulelor viabile scade progresiv,
prin moartea unora dintre ele. Aceast faz corespunde celulelor btrne, cu forme
de involuie, cnd apar numeroi spori.
7. Faza intermediar de declin, n care numrul celulelor continu s scad,
cu un ritm de dispariie constant.
56

8. Faza final de declin ncheie evoluia unei culturi prin moartea n ritm
lent a celulelor pn la sterilizarea complet a culturii.
2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

Numr microorganisme (log)

1.

Timp

Fig. 49 Evoluia unei culturi bacteriene

Oprirea multiplicrii bacteriilor i, n cele din urm, moartea acestora se


datoreaz unei serii de factori ca:
lipsa substanelor nutritive eseniale din mediul nutritiv;
competiia pentru oxigen sau activitatea slab a substanelor folosite pentru
procesele respiratorii;
modificrile fizico-chimice ale mediului de cultur (acumulare de acizi, alcooli
etc.);
acumularea produilor de catabolism i a toxinelor n concentraii incompatibile
cu viaa celulelor.
2.1.5. Nutriia bacteriilor
Bacteriile pot folosi pentru manifestrile lor vitale fie energia radiant
luminoas, n cazul celor capabile de fotosintez, fie energia eliberat prin reacii
chimice oxidative, la ntuneric, n cazul celor chimiotrofe.
Dup sursa de energie, bacteriile pot fi clasificate astfel:
fototrofe (fotosintetizante), a cror surs primar de energie este lumina;
chemotrofe (chimiosintetizante), a cror surs de energie este obinut la
ntuneric, n urma reaciei de oxido-reducere a unor substane organice sau
anorganice.
paratrofe, la care creterea este dependent de energia furnizat de celula
parazitat.
n funcie de capacitatea de sintez a metaboliilor eseniali, bacteriile
prezint urmtoarele tipuri de nutriie:
Autotrofia corespunde capacitii de sintez a tuturor constituenilor celulari
prin mijloace proprii, pornind de la surse simple anorganice de carbon i azot ca:
CO2, NH3, NO2-, NO3-.
Heterotrofia implic incapacitatea de sintez a unor metabolii eseniali i, de
aceea, este nevoie de prezena substanelor organice ca surs de carbon sau azot.
Bacteriile care folosesc o surs organic de carbon sunt denumite bacterii de
57

fermentaie, iar cele care utilizeaz o surs organic de azot mai sunt denumite
bacterii de putrefacie.
n concluzie, autotrofele, prin sintezele lor genereaz substana organic,
plecnd de la compui minerali simpli, pe cnd heterotrofele nu-i pot realiza
sintezele proprii, dect dac dispun de substane organice, pe care le descompun
pn la produi mai simpli i pe care i utilizeaz n metabolismul lor.
2.1.6. Respiraia microorganismelor
Dup exigenele fa de oxigenul molecular, microorganismele se grupeaz
n patru tipuri respiratorii:
1. Microorganisme strict (obligatoriu) aerobe, care folosesc oxigenul ca
acceptor final de hidrogen, avnd nevoie de prezena continu a oxigenului
atmosferic.
2. Microorganisme strict (obligatoriu) anaerobe, care nu se pot dezvolta n
prezena oxigenului molecular, putnd fi cultivate numai pe medii srcite n
oxigen. Ele nu dispun de enzimele respiratorii din categoria citocromilor.
Anaerobioza lor strict const n faptul c n prezena oxigenului, care se
comport ca acceptor final de hidrogen, se formeaz peroxidul de hidrogen
(compus toxic) i nu ap.
3. Microorganisme facultativ anaerobe, care sunt capabile s-i orienteze
metabolismul spre respiraie sau spre fermentaie, n funcie de disponibilitile de
oxigen i care au, n mod obinuit, un metabolism anaerob, fr a fi ns sensibile
la prezena oxigenului.
Unele microorganisme cu acest tip respirator (levurile) pot trece de la un
metabolism aerob la unul anaerob, n funcie
de condiiile de mediu.
4. Microorganismele microaerofile au
nevoie de o concentraie de oxigen mai mic
dect cea din aerul atmosferic. Aceast
particularitate se datoreaz sensibilitii
unora dintre enzimele lor la condiiile de
oxidare puternic.
2.1.7. Grupe particulare de bacterii

Fig. 50 Pseudomonas syringae

1. Bacterii glasogene
Apa pur din punct de vedere chimic i biologic, poate rmne n stare
lichid pn la -40oC. Supus la temperaturi inferioare pragului de 0oC, nu
nghea dect n prezena nucleelor glasogene. Aceste nuclee pot fi reprezentate
de particulele minerale, care provoac congelarea, ncepnd de la -10oC. La
temperaturi cuprinse ntre -10 i 0oC, gheaa nu se formeaz la plante dect n
prezena bacteriilor specifice, ce posed n membrana lor nuclee glasogene.
Suele bacteriene n cauz aparin speciilor Pseudomonas syringae (Fig. 50)
i Erwinia herbicola; ele pot fi saprofite (epifite) sau parazite pe organele
58

plantelor n cauz (frunze, flori, fructe). Proporia de nuclee glasogene este ridicat
la Ps. syringae (60 %) i mai mic la E. herbicola (1-5 %). Puterea glasogen a
bacteriilor se exprim "in vitro" sau n "in vivo" pe organele plantelor. Pe de alt
parte, suele inductoare de ghea se multiplic abundent pe organele necrozate
prin nghe, ceea ce le ofer un avantaj selectiv considerabil.
Cnd o suspensie de bacterii glasogene este pulverizat pe frunze apar
simptomele ngheului cu ofilirea ireversibil, dac sunt plasate (inute) o or la 5oC, pe cnd plantele martor netratate cu bacterii rmn imune la toate alterrile
vizibile.
La via de vie s-a observat o corelaie ridicat ntre numrul de bacterii
glasogene prezente pe muguri i pierderile cauzate de frig, la temperaturi
apropiate de 0oC. Bacteriile glasogene, care provoac nghearea, au fost observate
la plante foarte diverse (pin, cire, piersic, prun, cais, forsiia, fasole, porumb,
tomate, cpun).
Suele bacteriene active, datorit capacitii de a induce formarea gheii,
prezint o gen specific, care codeaz o protein foarte particular n membrana
lor. Proteina este format din 1200 de aminocizi, cu o structur repetitiv foarte
accentuat. Compus din 1200 de aminoacizi, acest polipeptid comport repetiii n
mai mult de 100 exemplare. Reducerea numrului de repetiii n lanul
polipeptidic reduce activitatea glasogen.
Alte proteine cu structur repetitiv sunt prezente n sngele unor specii de
animale din regiunile polare, unde au un efect antigel.
Bacteriile glasogene joac un rol important n practic, deoarece provoac
nghearea n primvar a numeroase plante, n special pomii fructiferi i via de
vie. Stoparea aciunii negative a acestor bacterii se ncearc pe diferite ci:
tratamente chimice cu antibiotice, pulverizri cu ap, fumigaii, folosirea
bacteriofagilor, a microorganismelor antagoniste, aplicarea de polimeri care
limiteaz schimburile termice cu exteriorul etc.
n ultimii ani s-au obinut prin inginerie genetic sue neglasogene de Ps.
syringae, care, aplicate pe plante, inhib dezvoltarea speciilor glasogene.
n sens pozitiv, specia Ps. syringae glasogen este utilizat pentru obinerea
zpezii artificiale (Snow max).
2. Micoplasmele reprezint un grup particular de bacterii lipsite de perete
celular, celula fiind delimitat de o membran lipoproteic cu o compoziie
chimic asemntoare celulei animale.
Sunt considerate cele mai mici organisme capabile de cretere autonom pe
medii acelulare.
Micoplasmele sunt grupate n clasa Mollicutes (moli - moale, pliabil i cute piele) cu dou genuri:
Mycoplasma creterea speciilor din acest gen este dependent de prezena
sterolilor n mediu.
Acholeplasma cuprinde specii care se dezvolt independent de steroli.

59

Morfologie. Datorit lipsei peretelui celular, micoplasmele au o plasticitate


natural foarte mare, fiind descrise mai multe tipuri morfologice ca: sfericecocoidale, diplococi, filamentoase.
Cu toate acestea, cultivate n condiii de mediu bine definite, fiecare specie
are o morfologie caracteristic, astfel nct pleomorfismul acestora nu trebuie
confundat cu polimorfismul, care implic, obligatoriu, existena a mai mult de o
form celular distinct n cursul vieii unui organism.
Micoplasmele sunt Gram-negative, iar dimensiunile lor variaz de la 125250 nm la formele sferice, pn la 1-2 m la cele filamentoase.
Lipsa peretelui celular este rspunztoare de instabilitatea morfologic i de
alte proprieti, cum ar fi:
sensibilitatea osmotic;
rezistena la antibioticele care acioneaz asupra sintezei peretelui celular
(penicilina);
tendina de ptrundere i cretere n profunzimea mediilor;
capacitatea de a traversa filtrele bacteriene.
Multiplicarea micoplasmelor se poate realiza la aceeai specie prin
diviziune, nmugurire i fragmentarea filamentelor.
n condiii naturale, micoplasmele sunt parazite, instalarea lor n diferite
organisme fiind uurat de natura chimic a membranei, similar membranelor
gazdei. Micoplasmele produc peste 40 de boli la plante, dar i la animale i om.
3. Actinomicetele constituie un grup mare de bacterii filamentoase, imobile,
Gram pozitive, caracterizate printr-o mare varietate morfologic.
Mult vreme, actinomicetele au fost considerate ca fcnd parte din
categoria ciupercilor, deoarece au particularitatea de a forma hife (filamente)
ramificate i spori de diseminare.
Din punct de vedere taxonomic, actinomicetele sunt incluse n divizia
Firmicutes, clasa Thallobacteria. n sol, se gsesc mai ales actinomicete ce aparin
familiior Frankiaceae, Nocardiaceae, Streptomycetaceae (cca..70% din total) i
Micromonosporaceae.
Morfologie. Majoritatea actinomicetelor au o form alungit filamentoas,
cu tendin de ramificare, de unde i aspectul lor de miceliu. Filamentele
miceliene au un diametru cuprins ntre 0,5 i 2 m i prezint o structur de tip
procariot, corespunznd unor celule foarte lungi, multinucleate, fr perei
transversali.
Pe medii de cultur solide formeaz colonii dense cu aspect cartilaginos sau
cretos, aderente la substrat. Pe aceste colonii se formeaz sporofori cu spori.
Sporoforii sunt diferii ca form: spiralai, drepi sau curbai.
Sporii sunt, de asemenea, variai ca form, fiind sferici ovali, alungii sau
cilindrici. Suprafaa sporilor este neted sau prezint diverse ornamentaii.
Actinomicetele produc pigmeni, care dau miceliului aerian culori diferite
(galben, portocaliu, rou, violet pn la albastru sau cenuiu). La unele specii,
pigmenii difuzeaz n mediu.
60

Metabolism.
O
particularitate
a
fiziologiei actinomicetelor este modul lor de
nutriie omnivor, care le permite s se dezvolte
pe substraturi organice dintre cele mai diferite.
n condiii naturale, pe resturi vegetale,
actinomicetele ncep s se dezvolte numai
dup ce bacteriile i ciupercile au ncetat s se
Fig. 51 Streptomyces sp
mai multiplice, atunci cnd toate substanele
uor asimilabile din resturile vegetale au fost
descompuse de predecesorii lor.
Capacitatea lor de a degrada substanele organice dintre cele mai complexe
le confer un rol important n natur, n special n descompunerea substanelor
organice din nmoluri i sol. n sol, acestea particip la degradarea biologic i
mineralizarea substanelor organice.
Importana lor practic este legat, n mod deosebit, prin intermediul
speciilor genului Streptomyces (Fig. 51), de producerea de substane antibiotice
(sunt cunoscute peste 500 de antibiotice distincte).
Aproximativ 50 % din tulpinile izolate n natur produc antibiotice.
Unele actinomicete produc boli la plante, animale i om.
2.1 .8. Sistematica, nomenclatura i identificarea bacteriilor
La baza clasificrii bacteriilor stau o serie de caractere, care constitue criterii
de ncadrare a acestora n mai multe categorii taxonomice, avnd la baz specia.
n succesiunea lor, aceste categorii sunt: specia, genul, familia, ordinul, clasa i
diviziunea (ncrengtura).
Rangurile taxonomice sunt indicate de cte un sufix:
Ordin (-ales)
Subordin (-ineae)
Familie (-aceae)
Subfamilie (-oidiae)
Unitatea de lucru efectiv este tulpina (sua) bacterian, care este o cultur
pur, constituit dintr-o singur specie, avnd la origine o colonie, ce provine
dintr-o singur bacterie, care s-a multiplicat. Tulpina sau sua se noteaz cu un
simbol sau un numr i se pstreaz n colecii tiinifice.
Cercetrile ce stau la baza identificrii i clasificrii bacteriilor sunt
numeroase i in cont de urmtoarele aspecte:
caractere morfologice: form, dimensiune, cilii, capsula i comportarea
tinctorial fat de coloraia Gram;
caractere culturale: creterea pe medii de cultur lichide sau solide, forma i
tipul coloniei, pigmentaia etc;
caracterele biochimice se refer la capacitatea de utilizare a surselor de carbon
i azot, tipul de respiraie etc;
caractere antigenice (serologice);
caractere de patogenitate, privind virulena i toxicitatea speciilor patogene;
61

sensibilitatea fa de bacteriofagii specifici;


posibilitatea de transfer genetic prin bacteriofag sau prin fenomene parasexuale;
raportul guanin (G) + citozin (C) sau raportul G/C % fa de masa genomului.
Speciile nrudite au un coninut de G/C % aproape identic.
caractere ecologice: habitatul natural al microorganismului i relaiile lui cu
mediul natural.
Dintre ncercrile de sistematizare a bacteriilor se amintesc cele realizate de
Ehrenberg (1839), Lehman i Neuman (1927), Pribram (1933), Kluyver i Van
Niel (1936), Prevot (1957, 1961), Krasilnicov (1959), Skerman (1967) i Murray
(1974).
Societatea bacteriologilor americani, pe baza lucrrilor lui Buchanan (19161918) i Winslow (1920), a stabilit un sistem de clasificare, prezentat n 1923 de
David-Hendricks Bergey n prima ediie a Bergeys Manual of Determinative
Bacteriology. Acest determinator, adoptat de majoritatea microbiologilor, se afl
la a noua ediie (1994) i clasific bacteriile n baza caracterelor fenotipice
comune (caractere morfologice, de cultur, fiziologice, biochimice etc.) n patru
divizii i 35 de seciuni:
Divizia
I. Gracilicutes bacterii
Gram negative
II. Firmicutes bacterii
Gram pozitive
III. Tenericutes
IV. Mendosicutes

Clasa
1. Scotobacteria - bacterii non-fotosintetice
2. Anoxyphotobacteria - bacterii fotosintetice anaerobe
3. Oxyphotobacteria - bacterii fotosintetice aerobe
(cyanobacterii)
1. Firmibacteria - coci i bacili
2. Thallobacteria - bacterii filamentoase (actinomicete)
1. Mollicutes - bacterii lipsite de perete celular
(micoplasme)
1. Archaebacteria bacterii cu perete celular, lipsit de
stratul peptidoglican

Cel mai nou sistem de clasificare bacterian a aprut n perioada 2001-2011


i este prezentat n cinci volume ale celei de-a doua ediii din Bergeys Manual of
Systematic Bacteriology. Acest sistem clasific bacteriile dup particularitile
genotipice (gradul de omologie al secvenelor nucleotidice ale ARN ribozomal,
gradul de omologie al secvenelor nucleotidice ale ADN, coninutul relativ de
guanin+citozin (GC%) al ADN purificat etc.).
2.1.9. Rolul bacteriilor n natur
Bacteriile care triesc n natur joac un rol important n mineralizarea
compuilor organici, contribuind, astfel, la realizarea circuitului elementelor n
natur (azotul, fosforul, potasiul, calciul, magneziul i microelementele).
Bacteriile contribuie i la formarea substanelor humice, mbogind solul n
materie organic.
Prin unele substane bacteriene de natur mucilaginoas, cum sunt
polizaharidele capsulare, acestea contribuie la agregarea particulelor de sol, deci
la mbuntirea structurii solului.
62

Unele specii bacteriene au capacitatea de a produce antibiotice, care pot


limita dezvoltarea unor grupe de microorganisme din sol, deci menin sau schimb
echilibrul biologic din sol.
Unele grupe de bacterii triesc n simbioz cu plantele superioare,
producnd nodoziti i realizeaz fixarea azotului atmosferic; altele activeaz n
zona rdcinii plantelor, contribuind la dezvoltarea acestora i la sporirea
activitii rizosferice.
n medii specifice, unele grupe de bacterii produc procese fermentative utile,
ca fermentaia amidonului, a pectinelor, fermentaia lactic, butiric, propionic
etc., n timp ce altele au capacitatea de a secreta enzime extracelulare, cu care
lizeaz unele bacterii sau ciuperci.

2.2. Cyanobacteriile (algele albastre-verzi)


Cyanobacteriile (gr. kyans albastru) sunt microorganisme procariote,
cunoscute, iniial, sub denumirea de alge verzi-albastre, care folosesc apa ca
donator de electroni i n prezena luminii produc oxigen. Mecanismul lor
fotosintetic este identic cu cel al algelor eucariote, pigmenii fotosintetizani fiind
reprezentai numai de clorofila "a" i deficobiliproteine (alloficocyanina,
ficocyanina i, uneori, ficoeritrina).
Cyanobacteriile sunt strict fotoautotrofe i nu se pot dezvolta numai n
prezena substanelor organice, nu au nevoie de vitamine ca factori de cretere, iar
ca surs de azot folosesc azotaii, srurile de amoniu, iar unele specii folosesc
azotul molecular, fiind fixatoare de azot (genurile Nostoc i Anabaena).
Sunt mult rspndite n sol, n apele dulci i in apele srate din mri i
oceane. Sunt mai tolerante fa de condiiile extreme nefavorabile dect algele
eucariote.
2.2.1. Morfologia cyanobacteriilor
Unele cyanobacterii sunt unicelulare, iar altele filamentoase, formnd lanuri
de dimensiuni variabile. Forma celulei este specific sau bacilar, cu dimensiuni
cuprinse ntre 1 i 60 m.
2.2.2. Structura cyanobacteriilor
Celulele prezint un perete rigid, multistratificat, asemntor cu cel de la
bacteriile Gram-negative. Peretele celular poate fi acoperit la exterior cu o teac
gelatinoas sau fibroas. Cele mai multe cyanobacterii sunt mobile ntr-un anumit
stadiu de dezvoltare, avnd o mobilitate de tip glisant, asemnndu-se cu
bacteriile filamentoase glisante de tip Beggiatoa.
n citoplasm se observ 2-5 saci tilacoizi, ntre care se afl ficobilisomii,
implicai n procesul de fotosintez; genomul, alctuit dintr-o molecul de ADN
dublu catenar; granule de cianoficin, care conin acid aspartic i arginin;
glicogen; polifosfat i vacuole cu gaz, ce au rol de flotaie. Ficobilisomii conin
63

pigmeni asimilatori, reprezentai, n principal, de ficocyanin, alloficocyanin i,


uneori, de ficoeritrin i ficoeritrocianin.
Heterochitii, ntlnii la speciile din ordinele Nostocales i Stigonematales,
sunt celule vegetative, care au suferit un proces de difereniere structural i
funcional. Astfel, ei au pierdut capacitatea de a realiza fotosinteza oxigenic, dar
conin enzime specifice procesului de fixare a azotului molecular (nitrogenaza,
hidrogenaza). Prezint un perete celular ngroat i o legtur cu celulele
vegetative adiacente. n schimbul azotului organic furnizat de ctre heterochiti,
celulele vegetative furnizeaz metabolii organici.
Akineii reprezint structuri de rezisten, care se formeaz prin creterea n
dimensiune i deformarea unor celule vegetative, simultan cu depunerea unor
straturi fibrilare dense la exterior. Conserv capacitatea vital a speciei pentru o
perioad lung de timp i ofer protecie la aciunea unor factori fizici
(temperatur).
2.1.3. Sistematica cyanobacteriilor
Cyanobacteriile (Fig. 52) sunt ncadrate n Regnul Procaryotae, Divizia
Gracilicutes, Cl. Oxyphotobacteria i, pe baza caracterelor morfologice, au fost
clasificate n cinci ordine:
Chroococca.les cuprinde reprezentani unicelulari, grupai n asociaii coloniale.
Ex: genurile Chroococcus, Cyanobacterium i Gloeocapsa.
Pleurocapsales cuprinde specii unicelulare, capabile s formeze spori interni.
Ex: genurile Chroococcidiopsis, Pleurocapsa i Stanieria.
Oscillatoriales cuprinde genuri, n care celulele sunt grupate n asociaii
filamentoase, fr a prezenta, ns, i celule difereniate, numite akinei i
heterociti. Ex: genurile Oscillatoria, Plectonema i Spirulina.
Nostocales cuprinde specii filamentoase cu celule difereniate, numite akinei i
heterociti. Ex: genurile Anabaena, Nostoc i Cyanospira.
Stigonematales cuprinde specii filamentoase cu celule difereniate, numite
akinei i heterociti. Acest ordin, spre deosebire de Ord. Nostocales, include i
cyanobacteriile, care formeaz trichoame adevrate. Ex: genurile Capsosira,
Mastigocladus i Stigonema.

(a)

(b)

(c)

Fig. 52 Cyanobacterii: (a) Chroococcus sp.; (b) Oscillatoria sp.; (c) Anabena sp.

64

2.1.4. Rolul cyanobacteriilor n natur


Acestea constituie primele organisme ce populeaz rocile dezagregate,
participnd la procesul de solificare, i favorizeaz dezvoltarea n masa lor
mucilaginoas a unor bacterii fixatoare de azot, ntre care Azotobacter sp. i
Clostridium sp.
Dintre cyanobacterii, mai rspndite n natur sunt genurile Gloeocapsa i
Chroococcus, care sunt organisme unicelulare. Alte grupe sunt filamentoase ca:
Oscillatoria i Lyngbia. Genurile Nostoc i Anabaena, ce au capacitate de a fixa
azotul molecular, triesc n solurile umede din orezrii, unde asigur N2 necesar
plantelor.
TEST DE AUTOEVALUARE U.I. 2
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Bacteriile sunt organisme:
a) pluricelulare
b) acelulare
c) unicelulare
2. Bacteriile prezint:
a) nucleu complet
b) nucleu fr membran
c) nu prezint nucleu
3. Celula bacterian este protejat de:
a) membran celular
b) membran citoplasmatic
c) perete celular
4. Bacteriile au dimensiuni care se msoar n:
a) mm
b) cm
c) m
5. Cyanobacteriile sunt:
a) procariote
b) eucariote
c) entiti infecioase

Rezultate corecte:
1 - c; 2 - b; 3 - c; 4 - c, 5-a.

65

Rezumat (U.I. 2)
Bacteriile
Sunt organisme unicelulare cu o structur complex de tip procariot.
Morfologia bacteriilor
- bacterii sferice (coci);
- bacterii sub form de bastona (bacili);
- bacterii spiralate;
- bacterii filamentoase;
- bacterii ptrate;
Structura celulei bacteriene
Structura extraparietal format din: capsul; cilii sau flagelii; aparatul
fimbrial i pilii de sex.
Peretele celular.
Structura intraparietal compus din: membrana citoplasmatic,
mezozomii, citoplasm, aparatul nuclear, incluziunile, ribozomii,
vacuolele, sporul bacterian.
Grupe particulare de bacterii
Bacteriile glasogene
Micoplasmele
Actinomicetele
Cyanobacteriile (algele albastre-verzi)
Sunt organisme procariote, fotoautotrofe, chimiosintetizante.

Lucrare de verificare nr. 2


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei morfologia i modul de nutriie al bacteriilor (5puncte);
2. Descriei cyanobacteriile i precizai care este rolul acestora n natur (5puncte)
BIBLIOGRAFIE (U.I. 2)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
66

Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill


Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

Unitatea de nvare nr.3:

CARACTERELE GENERALE I POZIIA


MICROORGANISMELOR N LUMEA VIE
Cuprins (U.I.3)
Obiectivele i competenele profesionale specific (U.I. 3)68
Instruciuni (U.I. 3)68
3.1. Protozoarele ...............................................................................68
3.1.1. Morfologia i fiziologia protozoarelor....................................68
3.1.2. Structura protozoarelor............................................................68
3.1.3. Reproducerea protozoarelor....................................................69
3.1.4. Nutriia protozoarelor............................................................70
3.1.5. Sistematica protozoarelor........................................................70
3.2. Diatomeele..........................................................................................71
3.2.1. Morfologia diatomeelor ........................................................71
3.2.2. Structura diatomeelor ............................................................72
3.2.3. Reproducerea diatomeelor......................................................73
3.2.4. Sistematica diatomeelor..........................................................75
3.2.5. Rolul diatomeelor n natur...................................................77
3.3. Ciupercile............................................................................................77
3.3.1. Morfologia ciupercilor..............................................................77
3.3.2. Structura celular a ciupercilor...............................................78
3.3.3. Organele de fixare i de absorbie ale ciupercilor....................80
3.3.4. Formele de rezisten ale ciupercilor......................................82
3.3.5. nmultirea ciupercilor..............................................................83
3.3.6. Alternana de faze la ciuperci................................................89
3.3.7. Nutriia ciupercilor..................................................................89
3.3.8. Originea i evoluia parazitismului la ciuperci...................90
3.3.9. Cerine fa de mediu...............................................................91
3.3.10. Sistematica ciupercilor............................................................91
Test de autoevaluare92
Rezumat (U.I. 3) ..93
Lucrare de verificare nr. 3 .... 93
Bibliografie (U.I. 3) ....93

67

Obiectivele i competenele profesionale specific (U.I. 3)


Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n prezentarea
morfologiei i structurii protozoarelor, diatomeelor si a ciupercilor. Dup
parcurgerea acestei uniti de nvare vei dobndi competene pentru:
- descrierea morfologiei i structurii protozoarelor, diatomeelor si a
ciupercilor;
- descrierea modului de reproducere al protozoarelor i diatomeelor precum i
a modului de nmulire al ciupercilor;
- identificarea ciupercilor i descrierea sistematicii acestora.

Instruciuni (U.I. 3)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaugalte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la memorarea
i nelegerea noiunilor legate de morfologiei i structurii protozoarelor,
diatomeelor si a ciupercilor (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o
lucrare de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n
format electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din
sem. I.
3.1. Protozoarele
Protozoarele (gr. protos primul, zoon animal) sunt organisme unicelulare
de tip eucariot, variate ca form i dimensiune, la care se cunoate un anumit ciclu
evolutiv i care reprezint vieuitoare complete i independente.
Sunt caracterizate de prezena unor organite, numite cili, care particip la
locomoie i la obinerea hranei. Hrnirea este exclusiv heterotrof; triesc libere
n mediul acvatic (majoritatea triesc n ape dulci, dar pot fi ntlnite i specii de
ap srat), precum i n soluri umede.
3.1.1. Morfologia i fiziologia protozoarelor
Protozoarele sunt variate ca form, iar dimensiunile variaz, n funcie de
specie, ntre 1 i 2000 m.
Valorile de temperatur optime pentru cretere i dezvoltare sunt cuprinse
ntre 18oC i 25oC, iar chitii speciilor din Cl. Rhizopoda (Sarcodina) rezist pna
la 70oC. Protozoarele prefer un pH neutru, dar se pot dezvolta ntr-un interval
mai larg, cuprins ntre 3,5 i 9. n raport cu oxigenul, majoritatea protozoarele din
sol sunt strict aerobe.

3.1.2. Structura protozoarelor

68

Celula unui protozor se compune din membran, protoplasm i unul sau


mai muli nuclee, cu forme i structuri diferite (Fig. 54).
Pe membrana plasmatic se gsesc fibrile chitinoase, calcaroase sau
silicoase, ce asigur coeziunea celulei. Unele specii din clasa Rhizopoda
(Sarcodina) prezint o capsul prevzut cu una sau mai multe deschideri, cu rol
protector.
Protoplasma este un sistem
Cili
coloidal cu permeabilitate volutina
selectiv, format din ecto- i
Membran
endoplasm. n ea se gsesc organite
Macronucleu
cu funcie vital specific, cum sunt
Micronucleu
incluziunile granulare, condriozomii,
vacuolele, nucleul sau nucleii (Cl.
Vacuol pulsatil
Ciliata), precum i diferite substane
de rezerv. Ca substane de rezerv n
celulele de protozoare s-au descoperit:
amidonul, glicogenul, leucozina,
Orificiul bucal (citostom)
grsimi i substane proteice de
Citofaringe
Vacuol digestiv
rezerv.
Orificiul anal (citoproct)
Speciile binucleate din Cl.
Trochocist
Ectoplasma
Ciliata conin un micronucleu diploid,
Endoplasma
responsabil cu reproducerea sexuat,
precum i un macronucleu poliploid,
responsabil cu reglarea activitilor
Fig. 54 Structura unui protozoar ciliat
celulare.
Unele protozoare prezint n ectoplasm organite aciculare sau sub form de
bastonae (trichite i trichociti), ce sunt proiectate n exterior n momentul
atacului sau al aprrii.
Organitele care servesc la deplasarea protozoarelor sunt pseudopodele, cilii
i flagelii. Pseudopodele iau natere din corpul plasmatic prin modificri ale
tensiunii superficiale, iar cilii i flagelii sunt organite permanente cu aspect
specific. Cu ajutorul pseudopodelor, protozoarele se deplaseaz pe substrat solid,
iar cu ajutorul cililor i flagelilor, n mediul lichid.
Resturile nedigerate sunt eliminate la cele cu pseudopode prin orice parte a
membranei plasmatice, iar la celelate protozoare prin anusul celular (citoproct).
3.1.3. Reproducerea protozoarelor
nmulirea protozoarelor se face pe cale asexuat prin fisiune, sciziparitate
sau nmugurire. Reproducerea prin sciziparitate (diviziune direct) presupune
mprirea celulei n dou pri aproape egale, n urma acestui proces rezultnd
dou celule fiice.
nmulirea sexuat are loc dup mai multe diviziuni simple, prin copulare
ntre gamei sau, n cazul speciilor din Cl. Ciliata, prin conjugare.
69

Copularea const n unirea a doi gamei identici (isogamie) sau diferii


(heterogamie) din punct de vedere morfologic, cu formarea unui zigot. n urma
contopirii gameilor iau natere zigoii, care, n condiii neprielnice, se transform
n zigochiti sau chiti de repaus, care au o mare rezisten la temperaturi
nefavorabile, concentraii mari de sruri solubile, uscciune sau acumulare n
mediul ambiant al unor factori nocivi. La revenirea condiiilor favorabile, din
zigochiti apar indivizi obinuii.
Conjugarea apare la ciliate i const n unirea temporar printr-o punte
plasmatic a doi indivizi, realizndu-se, astfel, un schimb reciproc de nuclee
urmat de o contopire a nucleului introdus cu cel preexistent n celul.
3.1.4. Nutriia protozoarelor
Nutriia este autotrof, la speciile care conin clorofil (Cl. Flagellata), i
heterotrof (osmotrof sau fagotrof), n cazul celorlalte protozoare. Speciile
heterotrofe pot fi:
saprozoice, utilizeaz substanele organice moarte;
holozoice, se hrnesc cu microorganisme (bacterii, alge i protozoare).
Majoritatea protozoarelor sunt holozoice i, prin aceasta, pot limita
populaia bacterian a solului. Amoebele nglobeaz hrana cu ajutorul
extensiunilor plasmatice iar ciliatele i procur hrana prin invaginri de diferite
forme (citostom, citofaringe). Digestia hranei solide se face n vacuole digestive
iar hrana lichid este absorbit osmotic.
3.1.5. Sistematica protozoarelor
n actualul sistem de clasificare, protozoarele sunt ncadrate n Regnul
Protista, ncrengtura Protozoa cu clasele:
Flagellata (Mastigophora) sunt protozoare prevzute cu flageli ca organite de
micare (gr. mastigos flagel). n condiii nefavorabile, unele specii i pot pierde
flagelii i se pot deplasa pe stratul solid printr-o micare de curgere (trre),
caracteristic rizopodelor. Flagelatele includ grupe de organisme cu apartenen
fie la regnul vegetal (fitoflagelate), fie la regnul animal (zooflagelate). Ca
reprezentani sunt genurile Bodo i Euglena.
Rhizopoda (Sarcodina) sunt protozoare care au corpul celular nud, cu form
instabil, care formeaz chiti. Ele emit pseudopode temporare, care le servesc
att pentru deplasare, ct i pentru nglobarea hranei. Unele specii pot fi protejate
de o cochilie cu una sau mai multe deschideri. Cele mai rspndite genuri sunt
Negleria i Amoeba.
Ciliata (Infusoria) cuprinde protozoare care se mic cu ajutorul a numeroi cili,
care sunt excrescene protoplasmatice. Ciliatele prezint cel puin dou nuclee
diferite, att morfologic, ct i funcional. Din acest grup, ca reprezentani, citm:
Paramoecium, Balantiophorus i Colpoda.

70

Sporozoa include organisme unicelulare parazite, caracterizate prin apariia n


timpul ciclului de dezvoltare al stadiului de spor. Ca reprezentani sunt genurile
Lankesterella i Schellackia.
Cnidosporidia (Amoebosporidia) cuprinde specii unicelulare parazite.

(b)

(a)

(c)

Fig. 53 Protozoare: (a) Euglena sp.; (b) Amoeba sp.; (c) Paramoecium sp.

2.6.6. Rolul protozoarelor n natur


Rolul protozoarelor n sol este secundar fa de cel al bacteriilor i
ciupercilor. Ele sunt, n majoritate, prdtori, ce se hrnesc cu bacterii i se gsesc
n sol, pn la 15 cm adncime, ntr-o densitate care variaz ntre cteva sute i
pn la 10.000 de exemplare la 1 gram de sol. Ca microprdtori, protozoarele
contribuie la diminuarea numrului de bacterii n sol.
n acelai timp, s-a constatat c, prin moartea lor, protozoarele pun la
dispoziia microorganismelor surse nutritive, care stimuleaz creterea numrului
acestora n sol.
n unele experiene cu Azotobacter, n culturile la care s-au adugat
protozoare (Colpidium colpoda), s-a fixat mai mult azot dect la culturile martor.
De aici, se trage concluzia c protozoarele, fagocitnd bacteriile, foreaz colonia
s produc mai multe celule tinere, care sunt mai active n fixarea azotului
molecular. Pe de alt parte, se presupune c protozoarele ar elimina n mediu de
cultur unele substane stimulatoare pentru dezvoltarea bacteriilor.
Dup ali autori, n afar de aciunea indirect asupra biologiei solului,
protozoarele ar contribui i la formarea humusului.
3.2. Diatomeele
Diatomee (gr. dia de-a cureziul; temnein a tia) clas de alge
fotosintetizante, unicelulare, brune-glbui, care particip la formarea
fitoplanctonului. Prezint o nutriie de tip autotrof, iar nucleul este de tip eucariot.
3.2.1. Morfologia diatomeelor
Diatomeele sunt microorganisme solitare sau unite n colonii sub form de
filament sau fund (Fragillaria spp.), evantai (Meridion spp.), zig-zag (Tabellaria
spp.) sau stea (Asterionella spp.). Multe diatomee secret o substan
mucilaginoas, care acoper peretele silicios i care servete ca mijloc de ataare a
celulelor n colonii. Substana mucilaginoas poate fi utilizat i pentru ataarea
71

diatomeelor de substrat. Celulele mai pot fi unite n colonii prin diferite


excrescene ale frustulei.
Dimensiunea diatomeelor variaz de la un m la mai mult de 2000 m, dar
cele mai multe se ncadreaz n intervalul 10 - 100 m.
3.2.2. Structura diatomeelor
O trstur caracteristic a algelor diatomee este c acestea sunt nchise ntrun perete celular pectocelulozic, format din dou teci silicioase (epiteca i
hipoteca), numit frustula (schelet extern). Fiecare teac este format dintr-o valv
i un inel conectival. Epiteca este mai mare comparativ cu hipoteca, astfel c cele
dou teci se suprapun asemenea unei plci Petri, mbinarea realizndu-se prin
marginile libere ale inelelor conectivale (Fig. 58).
Frustula poate prezenta o serie de elemente structurale: puncte, striuri,
coaste, cutri sau loje alungite, deschise n cavitatea celular. Suprafaa valvei
poate fi reticulat, cu o serie de caviti, numite areole. Peretele areolei poate
prezenta pori, prin care citoplasma comunic cu exteriorul. La unele specii din
Ord. Pennales se observ prezena unor fisuri, care permit comunicarea
citoplasmei cu mediul extern i
care poart numele de raf. La
celelalte specii ale ordinului se
gsete o pseudoraf.
Frustulele de diatomee sunt,
de obicei, foarte complicate i
variate,
iar
modelele
de
ornamentaie reprezint un criteriu
taxonomic
important
de
clasificare.
Membrana
citoplasmatic
separ citoplasma de peretele
celular (faa intern a frustulei).
Fig. 58 Frustul de diatomee
Citoplasma diatomeelor prezint
(CRPGL, Luxembourg)
cureni citoplasmatici, iar n
interiorul ei se gsesc organitele citoplasmatice. Nucleul este bine dezvoltat, are o
form sferic sau lenticular i prezint 1-2 nucleoli. Citoplasma conine
cromoplastide (cromatofori) n care, alturi de clorofil (a i c), se gsete caroten, fucoxantin, lutenin i diatomin, pigmeni ce dau o culoare galbenbrun. Din punct de vedere filogenetic, se crede c diatomeele fac trecerea spre
algele brune, datorit existenei pigmentului diatomin (feofil), care mascheaz
prezena clorofilei.

72

Fig. 59 Structura la Melosira spp. (dup Margulis i colab., 1999)

Diatomeele sunt organisme autotrofe, capabile de sinteza tuturor


constituenilor celulari prin mijloace proprii, pornind de la surse simple
anorganice de carbon i azot.
Deplasarea diatomeelor cu raf se poate realiza prin glisare cu ajutorul
citoplasmei, care exud la nivelul acesteia. Speciile care nu prezint rafa, nu se
pot deplasa i sunt dispersate pasiv de cureni n straturile de suprafa ale
oceanelor. Adaptrile care favorizeaz plutirea includ: forma frustulelor i
procesele care mresc raportul arie/volum, formarea coloniilor i nmagazinarea
de grsimi sau uleiuri n celul (reduc greutatea specific total). Celula
diatomeelor nu prezint flageli, cu excepia gameilor flagelai din timpul
perioadei de reproducere sexuat.
Din punct de vedere chimic, algele diatomee conin 80-90% SiO2.
3.2.3. Reproducerea diatomeelor
Diatomeele se nmulesc asexuat prin diviziune binar i sexuat prin
oogamie, isogamie sau anisogamie (heterogamie).
Reproducerea prin diviziune binar (Fig. 60) presupune scindarea celor
dou teci dup un plan paralel, astfel nct fiecare dintre cele dou celule fiice
rezultate va avea cte o teac de la celula mam. Cealalt teac va fi rapid
secretat de protoplast.
Deoarece hipoteca celulei mam devine epiteca pentru celul fiic, creterea
numeric a populaiei de diatomee determin o reducere a dimensiunii medii. Ca
urmare a acestui fapt, jumtate din celulele nou formate vor suferi o reducere
continu a dimensiunilor, iar celelalte celule vor avea aceleai dimensiuni,
comparativ cu celula parental. Reproducerea asexuat se poate repeta de pn la
opt ori pe zi, factorii limitativi fiind cantitatea de silice existent n mediu i
dimensiunea celulei mam.

73

Mitoz
Fig. 60 Reproducerea asexuat la diatomee (dup MacDonald, 1869 i Pfitzer, 1869)

Dup o serie de diviziuni succesive, algele diatomee vor ajunge la o


dimensiune minim (<1/3 din celula iniial), caz n care mitoza nu mai poate
avea loc. Acest lucru induce reproducerea sexuat, care va restabili dimensiunea
maxim a celulei de diatomee.
Reproducerea sexuat (Fig. 61) este diferit la diatomeele centrice (Ord.
Centrales) i penate (Ord. Pennales) i se realizeaz prin oogamie, isogamie sau
anisogamie (heterogamie). Ciclul de via al diatomeelor este preponderent
diploid (2n), stadiul haploid (n) fiind de scurt durat (n timpul nmulirii
sexuate).
Oogamia este un tip de proces sexuat caracteristic pentru diatomeele
centrice, care const n contopirea gametului femel imobil cu gametul mascul
mobil (prezint un flagel).
n cazul diatomeelor penate, reproducerea sexuat se realizeaz prin
isogamie sau, mai rar, prin anisogamie. Isogamia este o form de nmulire
sexuat, n care cei doi gamei care particip la fecundare sunt identici din punct
de vedere morfologic, n timp de anisogamia (heterogamie) se realizeaz prin
copulaia a doi gamei diferi i ca mrime i form. n cazul Ord. Pennales, cu
excepia genului Rhabdonema, reproducerea sexuat se realizeaz prin
intermediul unor gamei imobili, nedifereniai din punct de vedere morfologic.
Reproducerea sexuat este declanat de reducerea n dimensiune a
frustulei. Cnd celulele vegetative (2n) ajung la dimensiunea minim, se iniiaz
fenomenul de meioz, n urma cruia sunt produi gamei masculi i femeli. Dup
fuziunea celor dou nuclee, diferite din punct de vedere sexual, rezult zigotul,
care ncepe s creasc n volum pn ajunge la dimensiunea celulei caracteristice
pentru specia respectiv. Stadiul final poart numele de auxospor (gr. auxein a
crete, sporos germen) i este caracterizat prin absena frustulei silicioase i prin
capacitatea de a forma o nou celul vegetativ prin germinare.

74

Fig. 61 Reproducerea sexuat la diatomee: A reproducerea sexuat la Ord. Centrales;


B - reproducerea sexuat la Ord. Pennales (dup Hasle and Syvertsen, 1997).

3.2.4. Sistematica diatomeelor


Whittaker (1969) i Bayard (1978) plaseaz diatomeele n Cl.
Bacillariophyceae, alturi de algele din Cl. Chrysophyceae (alge maro-aurii) i Cl.
Xanthiophyceae (alge galben-verzi). Cele trei clase sunt ncadrate taxonomic n
ncr. Chrysophyta, Regnul Protista i se caracterizeaz prin formarea de chiti
endoplasmatici asemntori, secreia de silice, acumularea de grsimi i existena
unui perete celular bipartit n anumite stadii de dezvoltare. Ali cercettori (Woese
i colab., 1990; Margulis i Schwartz, 2000) subliniaz diferenele existente ntre
clasele enumerate anterior (n special structura frustulei de diatomee) i au ridicat
diatomeele la rang de ncrengtura separat, Bacillariophyta (sin. Diatomeae).
O mare parte din sistematica diatomeelor este bazat pe tipurile i modelele
ornamentaiilor, care apar pe scheletul extern opalin sau frustula. Aceasta frustul
are form de cutie cu teci (valve) suprapuse, cea mai mare fiind numit epiteca,
iar cea mai mic, hipoteca. Structurile cele mai importante sunt reprezentate de
pori (areole), arii hialine (clare), spini marginali i submarginali.
Sunt cunoscute peste 250 genuri de diatomee (70 genuri fosile); acestea
cuprind aproximativ 100.000 specii, dintre care peste 10.000 existente. Dintre
genurile mai comune menionm: Amphipleura, Asterionella, Biddulphia,
Coscinodiscus, Cymbella, Diatoma, Diploneis, Fragilaria, Melosira, Meridion,
Navicula, Nitzschia, Pinnularia, Surirella i Thalassiosira.
Diatomeele sunt divizate n dou ordine (dup Whittaker, 1969 i Bayard,
1978):
Ord. Centrales prezint simetrie radiar (centrul structural este reprezentat de
un punct).
Ex: Fam. Coscinodiscaceae cuprinde specii cu frustule discoidale,
lenticulare sau globuloase, unite n colonii filamentoase. Celulele se prezint sub
form de disc sau de tob, libere sau fixate, solitare sau unite n colonii laxe cu
75

ajutorul unui mucilagiu. Valvele sunt circulare sau eliptice cu relieful ondulat
tangenial sau concentric. Specii marine, salmastre sau dulcicole. Unele se fixeaz
pe diferite suporturi umede sau pe soluri (Fig. 55).

Fig. 55 Cyclotella meneghiniana


(www.pae.ugent.be)

Ord. Pennales prezint simetrie bilateral (centrul structural este reprezentat de


o linie). Acest ordin cuprinde:
1. diatomee fr raf
Exemplu : Fam. Fragilariaceae cuprinde diatomee penate de ape dulci i
marine, ale cror celule sunt izolate sau reunite n colonii. Celulele pot fi alungite,
drepte sau curbate, cu valve ornamentate cu striuri sau coaste transversale.
Frustula este lipsit de zone intercalare i de septuri (Fig. 56).

Fig. 56 Fragilaria capucina var. amphicephala


(http://craticula.ncl.ac.uk)

2. diatomee cu raf
Exemplu: Fam. Naviculaceae cuprinde diatomee penate, care la ambele
valve prezint cte o raf bine dezvoltat, sub forma unor fisuri. Rafa este situat
pe o caren. Cuprinde 29 de genuri de ap dulce, salmastr sau marin. Unele
specii se fixeaz pe soluri umede, pe ziduri sau pe diferite suporturi umede (Fig.
57).

76

Fig. 57 Navicula hamiltonii (http://craticula.ncl.ac.uk)

2.7.5. Rolul diatomeelor n natur


Se gsesc n toate mediile marine, salmastre i de ap dulce, dar i n sol
(adncimi < 0,25 - 1 m), ghea sau ataate de roci i alte substraturi din zonele de
spargere a valurilor de lng ape. n oceanele actuale (adncimi <100 m),
diatomeele sunt printre cei mai importani productori primari, iar o abunden
ridicat a diatomeelor este tipic pentru cele mai fertile arii ale oceanelor.
Diatomeele pot fi folosite pentru monitorizarea condiiilor mediului i n studiul
calitii apei.
3.8. Ciupercile
Ciupercile sunt organisme eucariote, heterotrofe, ubiquiste, extrem de
bogate n specii ce prezint structuri i caractere biologice foarte diverse, adaptate
modurilor de via saprofite, parazite sau simbiotice, fiind lipsite de pigmeni
asimilatori.
3.3.1. Morfologia ciupercilor
Aparatul vegetativ al diferitelor grupe taxonomice de ciuperci este divers
constituit (Fig. 62). Astfel, la cele mai primitive ciuperci din clasa
Chytridiomycetes, corpul vegetativ este unicelular, sub forma unei celule nude,
format numai din citoplasm i nucleu i poart numele de gimnoplast.
La un alt grup de ciuperci inferioare din cl. Plasmodiophoromycetes, corpul
vegetativ este constituit dintr-o mas citoplasmatic mai dezvoltat, n care se
gsesc numeroase nuclee neindividualizate n celule, ce poart numele de
plasmodiu.
Un alt tip de aparat vegetativ mai evoluat, denumit sifonoplast, se ntlnete
la ciupercile din clasele Zigomycetes i Oomycetes, la care acesta se prezint sub
form de tuburi simple sau ramificate continuie, fr perei transversali, care
conin o mas de citoplasm i numeroase nuclee, nedifereniate n celule,
denumit i sifonoplast cenocitic.
La
ciupercile superioare din subncrengturile Ascomycotina,
Basidiomycotina i Deuteromycotina, aparatul vegetativ poate fi unicelular ca la
Fam. Saccharomycetaceae i poart numele de dermatoplast, iar la marea
77

majoritate se prezint sub form de filamente simple sau ramificate, cu perei


transversali sau septe, care separ celulele ntre ele. Filamentele acestea se numesc
taluri filamentoase, carora li se mai d denumirea de micelii, iar ramificaiilor,
aceea de hife miceliene. Septele sau pereii transversali, ce despart celulele talului
filamentos, sunt prevzute cu un por central, prin care se face comunicarea ntre
celulele vecine, prin masa de citoplasm.
Cel mai evoluat tip de aparat vegetativ este alctuit dintr-o mpletire de
taluri filamentoase, poart numele de tal masiv i este caracteristic ciupercilor din
subncrengtura Basidiomycotina i unor ciuperci din subncrengtura
Ascomycotina. Prin mpletirea filamentelor apar esuturi false, numite
plectenchime, ce pot ndeplini diferite funcii (de protecie, de absorbie, de
rezerv etc.).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

Fig. 62 Tipuri de aparate vegetative la ciuperci: (a) gimnoplast; (b) plasmodiu; (c)
dermatoplast; (d) sifonoplast; (e) tal filamentos; (f) tal masiv (dup Lazr i colab.,
1977).

3.3.2. Structura celular a ciupercilor


Celula fungic este format din dou feluri de componente i anume din
elemente neprotoplasmatice, cum sunt, membrana, vacuomul i substanele de
rezerv, i din componente protoplasmatice, ca citoplasma, nucleul etc.
1. Peretele celular, examinat la microscopul optic, apare ca o structur
omogen, ns la o examinare cu microscopul electronic prezint o structura
stratificat.
78

Dup Hunsley i Burnett, spre exemplu, miceliul matur la Neurospora


crassa este constituit din mai multe straturi, dup cum urmeaz: stratul exterior,
compus din glucan amorf este urmat de un alt strat reticular din glucan n amestec
cu protein; al treilea strat este constituit, n principal, din protein, iar cel de-al
patrulea este format din protein, n care sunt cuprinse i microfibrile de chitin.
2. Membrana citoplasmatic acoper citoplasma celulelor fungice i o
separ de faa interioar a peretelui celular. Apare la microscopul electronic
tristratificat, are o grosime variabil i funcioneaz ca o membran osmotic
selectiv.
3. Vacuolele, puse n eviden prin colorarea cu rou neutru, sunt mai
numeroase n celulele tinere, dar, cu vrsta, conflueaz ntr-o vacuol mare, ce
ocup centrul celulei. Sunt separate de citoplasm printr-o membran simpl,
denumit tonoplast, iar n interiorul lor se acumuleaz substane de rezerv sau
care rezult n urma procesului metabolic.
4. Citoplasma celulelor de ciuperci se prezint sub form lichid, hialin,
omogen, refringent i, uneori, la maturitate, cu aspect granular. n compoziia ei
intr: lipide, glicogen, acid ribo nucleic, enzime, acizi organici, fosfai de
fitosterine, zaharuri etc. n citoplasm, al crei coninut n ap este nsemnat, se
desfoar majoritatea proceselor de metabolism; tot aici se gsesc vacuolele,
ribozomii, reticolul endoplasmatic, mitocondriile i anumite vezicule
subglobuloase, mici, cu substane de rezerv.
5. Nucleul, la ciuperci, este nconjurat de o membran nuclear dubl, ce
prezint, din loc n loc, orificii. n interior se afl nucleoplasma i unul sau mai
muli nucleoli. Substana caracteristic nucleului este acidul dezoxiribonucleic
(ADN) iar numrul de cromozomi este mic i difer n funcie de specie. Avnd
nuclee bine conturate, ciupercile sunt organisme eucariote. Nucleele la ciuperci
sunt, de obicei, de form sferic sau ovoid i au dimensiuni relativ mici, ntre
0,75 m la Venturia inaequalis, 1-2 m la Mucoraceae i pot ajunge pn la 20
m.
La ciupercile inferioare, cu aparatul vegetativ un plasmodiu, n citoplasma
acestuia se gsesc mai multe nuclee ca i n sifonoplastul care nu prezint septe
transversale.
La ciupercile superioare din subncrengturile Ascomycotina i
Basidiomycotina se pot gsi n celule un singur nucleu n faza haploidal i dou
nuclee n cea dicariotic.
6. Reticulul endoplasmatic este alctuit din dou membrane, separate printrun lumen; el poate fi sub form tubular sau sub form lamelar, mai evident n
celulele tinere i n legtur cu membrana nuclear.
7. Ribozomii, denumii i granulele lui Palade, sunt formaiuni
citoplasmatice, asociate reticului endoplasmatic. Ei sunt formai din ARN n
proporie de pn la 65 %, numit i ARN ribozomal (ARNr), i din 35 % protein.
8. Aparatul Golgi este prezent n celulele ciupercilor, fiind format din uniti
structurale morfologice, numite dichtiozomi, ce se gsesc n citoplasm. Are rol n
procesul de sintez a polizaharidelor, particip la procesul de formare i cretere a
79

membranei celulare i a vacuolelor, fiind ntlnit, mai ales, la ciupercile


Oomycetes.
3.3.3. Organele de fixare i de absorbie ale ciupercilor
Ciupercile saprofite se fixeaz pe substrat cu ajutorul unor filamente
ramificate, numite rizoizi, cu ajutorul crora i extrag i substanele nutritive.
Ciupercile parazite ptrund n esuturile gazdei, dar miceliul rmne n
spaiile intercelulare trimind n celule haustorii care au rolul de a extrage din
celule substanele hrnitoare (Fig. 63).
Haustori

Rizoizi

Fig. 63 Organe de fixare i absorbie la ciuperci

Haustorii sunt constituii dintr-un gt subire, format n momentul


ptrunderii n celula parazitat, dup care urmeaz o parte mai dilatat-terminal,
ce poate avea forme sferice, ca la Cystopus sp., ramificate sau digitate, ca la
genurile Peronospora, Erysiphe sau Puccinia.
Unele ciuperci parazite, care se dezvolt la suprafaa organelor atacate ale
plantei gazd, se numesc ectoparazite, iar miceliul lor este epifit. Aa este cazul
ciupercilor din Fam. Erysiphaceae, la care miceliul se fixeaz de substrat cu
ajutorul unor formaiuni ca nite ventuze, numite apresorii, din care se dezvolt
mai departe micelii fine, ce strbat membrana celular a gazdei i formeaz apoi
haustoriile n interiorul celulei parazitate.
n ceea ce privete rspndirea miceliului parazit n esuturile gazdelor la
ciupercile endoparazite, acesta are o dispersie limitat, provocnd infecii
localizate, ca n cazul petelor produse de Polystigma rubrum. La alte grupe de
ageni patogeni, infecia este generalizat, afectnd planta n totalitate sau mari
pri din aceasta, ca n cazul atacului de Puccinia recondita sau Erysiphe
graminis.
n alte cazuri, spre exemplu la Verticillium dahliae, se produce o infecie a
vaselor conductoare n zona coletului, provocnd o tracheomicoz, iar efectul
parazitar este de vetejire, ce afecteaz toat planta.
Un alt aspect ce trebuie menionat este durata de via a aparatului vegetativ
al agentului patogen n gazd. Din acest punct de vedere, exist ciuperci cu
80

dezvoltare anual, cum este Erysiphe graminis, care, ntr-o singur perioad de
vegetaie, i desvrete ntreg ciclul biologic.
O a doua categorie o constituie ciupercile bianuale, care se dezvolt pe
plante multianuale sau pe dou gazde diferite, cum este Puccinia graminis.
Exist i ciuperci plurianuale, care au ca gazde plante perene, ca pomii
fructiferi sau arborii de pdure, pe a cror organe atacate corpii de fructificare
dureaz un numr mai mare de ani. Aa sunt ciupercile macromicete ce atac
scoara i lemnul ca Stereum purpureum.
La un mare numr de ciuperci din subncrengturile Ascomycotina i
Basidiomycotina corpii de fructificare sau unele organe de rezisten sunt alctuii
din filamente miceliene mai strns sau mai lax ntreesute, ce alctuiesc false
esuturi, denumite plectenchime.
Plectenchimele, care constituie taluri masive ale unor ciuperci macromicete,
ndeplinesc funcii diferite i alctuiesc false esuturi, de cretere, de protecie,
mecanice, de conducere, de rezerv, de excreie, de micare etc.
Falsele esuturi de cretere sau formatoare sunt constituite din celule cu
caracter embrionar, cu membrana subire, foarte bogate n citoplasm, care se
divid activ i ndeplinesc funcia de cretere a talului.
Falsele esuturi de protecie se gsesc la suprafaa talului masiv, venind n
contact cu mediul extern. Elementele care alctuiesc aceste esuturi au membrana
ngroat, prezentnd, uneori, i anumite excrescene, ornamentaii sau peri.
La ciuperci, se pot deosebi mai multe feluri de esuturi de protecie i
anume:
Derm este o estur format din celule dispuse perpendicular pe suprafaa
organelor ciupercii.
Cutis este estura de protecie, ale crei elemente constitutive sunt dispuse
paralel cu suprafaa organelor ciupercii.
Cortex este o estur de protecie compact, dispus, de regul, la suprafaa
unor fructificaii, apotecii, basidiofructe sau a scleroilor.
Falsele esuturi mecanice au rol n susinerea talului, cum ar fi piciorul
ciupercilor macromicetelor, i sunt constituite din elemente mecanice bine
difereniate, formate din celule cu membrana puternic ngroat, lipsite de
coninut, ce sunt comparabile sclereidelor.
Falsele esuturi conductoare se aseamn i au acelai rol cu esuturile de la
plantele vasculare. Elementele ce alctuiesc aceste formaiuni sunt celule vii mult
alungite, cu perei transversali subiri, prevzui cu pori i care prezint dilatri n
dreptul septului.
Falsele esuturi de rezerv au rolul de a nmagazina apa, hidraii de carbon,
substanele proteice, grsimile etc..
Celulele n care se depune apa se numesc cistide, dar aceasta, n unele
cazuri, se poate gsi i n spaiile intercelulare.
Glicogenul i grsimile se depun n celule sub form de picturi, iar n
membrane se depune hemiceluloza. La ciuperci, se cunoate c amidonul nu se
gsete ca substan de rezerv. Pe lng aceste false esuturi de rezerv, ca
81

organe speciale, mai au rol n acest proces i scleroii, bulbilii i rizomorfele, care
sunt i organe de rezisten.
Falsele esuturi de excreie sunt acelea prin care se face eliminarea unor
produse de metabolism sub form de secreii sau excreii.
Din categoria produselor de secreie amintim enzimele i hormonii, ce se
elimin din corpul ciupercilor n procesul de parazitism.
Substanele de excreie, ca oxalatul de calciu, carbonatul de calciu, unele
substane gomoase, formate n procesul de asimilaie i de dezasimilaie, se
elimin permanent din corpul ciupercilor pe msura formrii lor.
Falsele esuturi de micare pot fi influenate de un excitant extern i pot
provoca micri, denumite tropisme i tactisme. Pe lng acestea se mai cunosc
la ciuperci i micri autonome, numite nastii.
ntre tropisme se pot deosebi:
Geotropismul, care poate fi pozitiv, n cazul organelor de fixare i de absorbie,
cum sunt rizoizii, sau negativ, n cazul carpoforilor de la Hymenomycetales.
Fototropismul este influena produs de lumin asupra unor organe de ciuperci;
el poate fi pozitiv i se manifest asupra ascelor de la unele Discomycetes, care au
tendina de a se orienta ctre lumin, sau a sporangioforilor de Pilobolus
cristalinus, care, de asemenea, manifest aceeai tendin.
Chemotropismul reprezint tendina de atragere sau de respingere a unor
organisme de ciuperci fa de unele substane chimice. Chemotropism pozitiv
manifest numeroase ciuperci fa de glucide i zaharuri.
Hidrotropismul este influena umiditii asupra ciupercilor. Se tie c, n diferite
faze biologice, acestea au nevoie de o atmosfer aproape saturat n vapori de ap
sau chiar de picturi pentru micarea i germinarea sporilor i iniierea procesului
de infeciune.
Haptotropismul reprezint micrile specifice pe care le exercit unele ciuperci
ce au tendina de a apuca sau nlnui alte filamente, ca n cazul de la Peziza sp.
Tactismele sunt micri libere ale sporilor mobili (zoosporilor) ale unor
ciuperci sub influena unui excintant extern. n funcie de factorul excitant, putem
avea: chemotactism, fototactism i hidrotactism.
Nastiile sunt, de asemenea, micri autonome, dar care nu sunt provocate de
un excitant extern.
De exemplu, se consider ca nastii micrile de deschidere a fructificaiilor
la unele Gasteromycete, a ecidiilor de la Uredinales, precum i micrile de
eliminare a ascosporilor din asce sau de proiectare a bazidiosporilor de pe bazidii.
3.3.4. Formele de rezisten ale ciupercilor
n situaia cnd condiiile de via nceteaz s mai fie favorabile, ciupercile
au posibilitatea de a supravieui, trecnd n forme de rezisten, la care miceliul
prezint membrana celular ngroat, coninutul citoplasmei mai bogat n
substane de rezerv iar cel al apei este mai redus.
n acest fel, ritmul metabolismului devine mai lent i permite supravieuirea
pn la revenirea condiiilor favorabile. Uneori, apar i unele forme de rezisten
82

cu o anumit structur, cum sunt: gemele, stromele, scleroii, rizomorfele sau


clamidosporii.
1. Gemele sunt forme de rezisten ce apar, mai ales, la ciupercile din cl.
Oomycetes, la care poriuni de sifonoplast se nconjoar cu o membran ngroat,
coninutul n ap se reduce i, n acelai timp, cel al substanelor de rezerv
sporete. Privite la microscop, gemele apar mai strlucitoare, mai refringente
dect miceliul vegetativ.
2. Clamidosporii sunt asemntori cu gemele, dar se formeaz la ciupercile
superioare, ca de exemplu la genul Fusarium.
3. Stromele reprezint formaiuni uneori de dimensiuni mai mari, rezultate
din mpletirea miceliilor vegetative, lund aspectul de crust, ce se formeaz pe
organele atacate ale plantelor. Stromele adpostesc adesea forme conidiene sau
sexuate de nmulire i sunt viu colorate sau n brun ntunecat.
4. Scleroii (Fig. 64) sunt organe de rezisten, ce reprezint o mpletire de
filamente miceliene difereniat, n stratul extern mai dens, paraplectenchimul, i
mai lax n interior, ce reprezint prozoplectenchimul. Scleroii se formeaz fie n
locul ovarelor florilor, fie la exteriorul i n interiorul altor organe ale plantelor
atacate.
Din germinarea scleroilor pot rezulta micelii vegetative, forme conidiene
sau, la unele specii, apotecii cu asce i ascospori.
5. Rizomorfele sunt formaiuni ce rezult din nmnuncherea a mai multe
filamente miceliene strns asociate, ce se formeaz pe prile subterane ale
plantelor atacate.
3.3.5. nmulirea ciupercilor
La ciupercile inferioare nu
exist o diferen tranant ntre
aparatul vegetativ i organele de
mnulire. Astfel, la ciupercile din
clasele
Chytridiomycetes
i
Plasmodiophoromycetes,
gimnoplatii
i,
respectiv,
Fig. 64 Scleroi de Sclerotinia sclerotiorum
plasmodiile capt rol de nmulire,
transformndu-se,
pe
cale
holocarpic, n sporangi, ce conin spori asexuai.
La ciupercile superioare, pe organele vegetative se formeaz, n mod
difereniat, organe de reproducere, pe cale eucarpic.
Ciclurile biologice ale diferitelor grupe taxanomice sunt foarte diversificate
i se succed n timp n cadrul alternanei de faze.
Formele de reproducere sunt denumite cu un termen generic spori, iar
procesul de nmulire se poate realiza pe cale vegetativ asexuat i sexuat.
I. nmulirea vegetativ este o form nespecializat, ce se realizeaz prin
fragmente de miceliu, ce se disemineaz fie pe cale natural, fie n mod artificial
de ctre om.
83

Spre exemplu, odat cu lucrrile solului, unele fragmente de miceliu sunt


desprinse i purtate cu piesele active ale agregatelor la distane uneori importante.
Factorii naturali meteorologici au ca efect acelai rezultat.
Alteori, unele specii de ciuperci, prin separarea celulelor miceliului, aa cum
s-ar produce deirarea unui irag de mrgele, formeaz spori, cum sunt artrosporii,
aleurisporii sau clamidosporii, care contribuie, de asemenea, la diseminare.
Artrosporii sunt poriuni delimitate de miceliu, ce se nconjoar cu o
membran groas i servesc ca organe de propagare. Un asemenea caz se
ntlnete la Neurospora sitophila sau la Oidium lactis.
Aleurisporii se formeaz terminal pe filamentele miceliene i se ntlnesc la
genurile Aleurisma, Sepedonium etc.
Clamidosporii se formeaz intercalar prin fragmentarea hifelor ciupercii,
sunt prevzui cu perete gros i rezistent, adeseori cu ornamentaii specifice.
Dermatoplatii ciupercilor din Fam. Saccharomycetaceae nmuguresc, iar
aceste formaiuni poart numele de blastospori (Fig. 65).

Blastospor

Fig. 65 nmulirea vegetativ la drojdia de bere (Saccharomyces cerevisiae)

II. nmulirea asexuat


Acest mod de nmulire se realizeaz prin organe difereniate, ce se
formeaz n strns dependen de condiiile de nutriie i de clim, ntr-un
moment determinant din dezvoltarea ciclului biologic al ciupercii. Organele de
nmulire asexuat sunt denumite n termeni generici spori.
Acetia au rol de nmulire i de propagare i reproduc faza asexuat,
putnd, uneori, s ia i rolul de gamei i s contribuie la nmulirea sexuat.
Dup posibilitile de micare, sporii ciupercilor pot fi de dou feluri;
Sporii imobili sau aplanospori sunt lipsii de flageli sau cili i sunt dispersai n
natur n mod pasiv;
Sporii mobili sau planospori sunt prevzui cu 1-2 flageli, care asigur
dispersarea n mediul acvatic.
Din punct de vedere al modului cum se formeaz, sporii pot fi de dou
feluri:

84

Spori endogeni sau endospori, care se gsesc n interiorul unor organe speciale.
Astfel, ciupercile din clasa Zygomycetes formeaz spori imobili n interiorul unor
sporangi.
La ciupercile din clasa Oomycetes, sporii sunt mobili i se formeaz n
zoosporangi caduci, denumii, n mod curent, i false conidii.
Exist i unele cazuri la ciupercile din subncrengtura Ascomycotina cnd o
categorie de spori imobili se formeaz n organe speciale - ascele; formarea
acestor spori este n legtur cu procesul sexual i ei se numesc ascospori.
Sporii exogeni sau exosporii se formeaz la exteriorul unor organe speciale,
difereniate n funcie de faza n care se gsesc ciupercile respective. Aa, unii
spori haploidali se formeaz la captul unor filamente cu conformaie deosebit,
ce se numesc conidiofori, iar sporii poart numele de conidii (Fig. 66).
Sporii exogeni, denumii basidiospori, se ntlnesc la subncrengtura
Basidiomycotina; ei se formeaz la exteriorul basidiilor, dup procesul de
sexualitate (meioza), i ca i ascosporii sunt spori haploidali.
Spori (conidii)
Spori (conidii)

(a)

(b)

Fig. 66 nmulire asexuat prin spori la genurile Aspergillus (a) i Penicillium (b)

III. nmulirea sexuat


Asupra problemei sexualitii la ciuperci s-au elaborat nc din secolul al
XIX-lea i n cursul celui de al XX-lea lucrri, studii importante i sinteze, cum
sunt cele ale unor autori ca: Clausen (1906), Guillermond (1913), Killian (1921),
Kniep (1928), Gumann (1940), Moreau (1952), Ainsworth i Sussman (1973)
etc.
Ca i la organismele mai evoluate i n ciclul de via al ciupercilor exist
dou faze i anume, o faz haploidal sau haplofaza, reprezentat prin celule cu n
cromozomi i faza diploid sau diplofaza cu celule cu 2n cromozomi. Trecerea de
la faza haploidal la cea diploid se face prin procesul de fecundaie (F) iar prin
meioz - diviziunea reductoare (R) - se face trecerea de la diplofaz din nou la
haplofaz.
n procesul de fecundaie se ntlnesc dou etape i anume: plasmogamia (P)
care const n contopirea citoplasmelor gameilor i kariogamia (K) care const n
fuzionarea celor dou nuclee. Celulele n care are loc desvrirea procesului
sexuat prin kariogamie se numesc zeugite, iar acelea n care se produce diviziunea
reductoare - meioza (R) se numesc gonotoconte. Aceste dou procese se produc
n mod diferit i anume la ciupercile inferioare din cl. Chytridiomycetes i
85

Plasmodiophoromycetes kariogamia urmeaz imediat dup plasmogamie,


rezultnd un nucleu diploid al zigotului.
La aceste ciuperci, diplofaza este variabil ca durat, dup care, prin
diviziunea reductoare, se revine la faza haploidal.
La ciupercile mai evoluate din subncrengturile Ascomycotina i
Basidiomycotina, plasmogamia este separat de kariogamie n timp i spaiu, ntre
ele intercalndu-se o faz intermediar, denumit dikariofaza, ce este reprezentat
prin miceliu secundar cu celule cu cte dou nuclee.
Aceast faz intermediar - dikariofaza este foarte scurt la ciupercile din
clasele Zygomycetales i Oomycetales, este de mai lung durat la Ascomycotina,
fiind reprezentat prin hifele ascogene, i este de lung durat la Basidiomycotina
unde constituie miceliul secundar i miceliul teriar al carpoforilor.
Sexualitatea ciupercilor este caracterizat printr-o particularitate i anume
existena multipolaritii. Din acest punct de vedere, ciupercile pot fi homotalice i
heterotalice, fenomen descoperit de Blakeslee la Mucoraceae. Autorul a
demonstrat c ciuperca Sporodinia grandis este homotalic, pentru c poate forma
zigoi n culturi monosporale, ceea ce denot c organele sexuale + i - se gsesc
pe acelai tal.
Alte ciuperci, ca Mucor mucedo, Mucor racemosus, Rhizopus nigricans, nu
pot forma zigoi. Pentru a se produce fructificaii sexuate trebuie puse n contact
dou culturi provenite din spori de sexe diferite i atunci zigoii se formeaz la
zona de confluen a miceliilor de sexe diferite. Altfel, ciupercile heterotalice
formeaz numai sporangi ce reprezint faza asexuat de dezvoltare.
Heterotalismul este un fenomen care nu se ntlnete numai la ciupercile din
subncrengtura Zygomycotina, ci i la cele din subncrengturile Ascomycotyna i
Basidiomycotina. Acest fenomen se datoreaz segregrii caracterelor sexuale ce
are loc atunci cnd se produce diviziunea reductoare (meioza) n timpul
germinrii zigotului, n asc i n basidie.
Pe lng bipolaritatea sexual a numeroase ciuperci se mai cunoate i
sexualitatea tetrapolar, aa cum se ntlnete la Schizophyllum commune. Acest
fenomen nu trebuie confundat cu dimorfismul sexual al ciupercilor inferioare,
singurele la care se mai manifest deosebiri morfologice ntre sexe.
Dup Hartmann i Gumann, formele sexualitii la ciuperci sunt de patru
tipuri fundamentale, ntre care se deosebesc amfimixis, automixis, pseudomixis i
apomixis, fiecare dintre acestea cuprinznd mai multe forme:
1. Amfimixis este procesul ce se produce prin copularea a dou celule
sexuale nenrudite ntre ele; aici sunt cuprinse formele de procese sexuale:
Merogamia sau gametogamia ce se realizeaz prin copularea ntre doi gamei,
ca la ciupercile Synchytrium sau Olpidium.
Gametangiogamia sau gametangia, la care copularea se face ntre gametangii,
ca la ciupercile din clasele Zygomycetes i Oomycetes sau la ciupercile superioare
din subncrengtura Ascomycotina.
Hologamia la care ntreg corpul vegetativ se transform n organ de nmulire,
aa cum se ntmpl la ciupercile inferioare.
86

2. Automixis este procesul ce se produce ntre dou celule sexuale nrudite


sau dou nuclee sexuale. Aici exist dou posibiliti i anume:
Partenogamia la care copularea are loc ntre dou celule ale filamentului
ascogenal, ca la Ascobolus citrinus.
Autogamia la care are loc copularea celor dou nuclee, ca la Humaria
granulata.
3. Pseudomixis la care copularea se face ntre dou celule vegetative;
aceasta poate fi de mai multe feluri:
Pseudogamie sau somatogamie, la care are loc copularea a dou celule
vegetative ale miceliului ca la Corticium serum.
Pedogamia la care copularea are loc ntre o celul matur i una tnr, ca la
Saccharomycetaceae.
Adelfogamie la care copularea se produce ntre celula mam i o celul fiic, aa
cum se ntmpl la Zygosaccharomyces chevalieri.
4. Apomixis la care se produce dispariia copulrii i celulele sexuale se
dezvolt mai departe pe cale vegetativ; aici sunt dou situaii:
Partenogeneza la care se produce dezvoltarea celulelor sexuale haploide.
Apogamia la care se realizeaz dezvoltarea celulelor sexuale diploide.
Pentru a ilustra cele mai obinuite moduri de nmulire la ciuperci, vom lua
cteva cazuri, ncepnd cu cele mai puin evoluate pn la cele superioare.
Astfel, la clasa Chytrydiomycetes, procesul sexual este o merogamie sau
gametogamie i are loc ntre doi gamei mobili, identici ca form, deci izogamei.
La genul Allomyces sunt anisogamei, deci difereniai morfologic.
Aceste ciuperci inferioare
sunt adaptate la viaa acvatic sau
triesc n medii interne ale
gazdelor, unde umiditatea este
Zigot
asigurat.
La ciupercile mai evoluate
care s-au desprins de mediul
acvatic i s-au adaptat la mediul
terestru, se ntlnete procesul
sexual
sub
form
de
Fig. 67 nmulire sexuat la Rhizopus sp.
cu formarea zigotului
gametangiogamie care reprezint
un proces de fecundaie superior.
Astfel, la subncrengtura Zygomycotina gametangiile identice
(izogamentangii) conin fiecare mai multe nuclee. Mai nti are loc copularea ntre
gametangii, iar ulterior nucleele fuzioneaz cte dou; n urma fecundaiei rezult
un zigot cenocitic cu nuclee diploide (Fig. 67).
La ciupercile din clasa Oomycetes din Familia Peronosporaceae,
gametangii sunt difereniai din punct de vedere morfologic- heterogametangii.
Gametangiul femel - oogonul conine o mas de ooplasm multinucleat, iar
gametangiul mascul - anteridia, de asemenea, conine mai multe nuclee.
Gametangiile intr n contact printr-un canal de conjugare prin care anteridia i
87

vars coninutul n oogon. n urma fecundaiei rezult un oospor ce poate fi


cenocitic, ca la Cystopus bliti, sau conine un singur nucleu diploid, ca la Pythium
de Baryanum.
La ciupercile mai evoluate din subncrengtura Ascomycotina, procesul
sexual se produce tot ntre gametangii, n care gametangiul femel, numit ascogon,
conine o mas de citoplasm i numeroase nuclee, iar gametangiul mascul,
denumit anteridie, este, de asemenea, multinucleat. Procesul de copulare ntre
gametangii are loc prin intermediul trichoginului n dou etape n care prima este
plasmogamia (P), n urma creia apare faza intermediar - dikariofaza,
reprezentat prin miceliu secundar al hifelor ascogene. Kariogamia se produce
mai trziu n asca tnr, prin unirea a dou nuclee, cnd apare diplofaza.
Exemplul tipic al acestui mod de nmulire l constituie ciuperca Pyronema
confluens la care procesul a fost studiat de ctre Harper (1900).
Treptat, la Ascomycetele superioare se observ o reducere progresiv, n
special a anteridiei, rolul acesteia fiind luat de celulele vegetative, ca n cazul de la
Taphrina (Fig. 68).

Fig. 68 nmulirea sexuat la Taphrina deformans cu formarea ascelor libere.

La ciupercile din subncrengtura Basidiomycotina, ordinele Ustilaginales,


Uredinales i Hymenomycetales, nu se mai difereniaz gametangii pe miceliul
vegetativ haploid i copularea are loc ntre celule vegetative sub form de
somatogamie sau pseudogamie.
n concluzie, pe msur ce ciupercile sunt mai evoluate procesul sexual se
simplific, organele sexuale se reduc i sunt nlocuite prin celule vegetative care
preiau funcia sexual, aa cum se ntmpl la ascomicetele superioare i, mai
ales, la Basidiomycotina.
Simplificarea procesului sexual la ciuperci reprezint o adaptare la via n
mediul terestru precum i la cel saprofitic sau parasitic din natur.
n funcie de evoluie, rezultatul procesului de fecundaie la ciuperci capt
aspecte morfologice difereniate i denumiri corespunztoare. Astfel, la cl.
Chytridiomycetes i Plasmodiophoromycetes, produsul de fecundaie se numete
zigozoospor, la subncrengtura Zygomycotina poart denumirea de zigot, la clasa
Oomycetes este denumit oospor, la subncrengtura Ascomycotina se numete
asc, la subncrengtura Basidiomycotina este basidia.

88

3.3.6. Alternana de faze la ciuperci


Haplofaza, dikariofaza i diplofaza se succed n cursul ciclului de dezvoltare
ntr-o alternan de faze care este specific anumitor grupe de ciuperci. Schema
general a acestei alternane, reprezentat dup Guman, se prezint dup cum
urmeaz. Astfel, ciupercile din subncrengturile Mastigomycotina i
Zygomycotina triesc n haplofaz, sunt deci haplobionte; dikariofaza este aici
absent.
Ciupercile din subncrengtura Ascomycotina triesc, n cea mai mare parte,
n haplofaz dar prezint i dikariofaz ce este reprezentat prin filamente
ascogene; la acest grup, diplofaza este de scurt durat.
La ciupercile din subncrengtura Basidiomycotina, durata dikariofazei este
preponderent asupra haplofazei; acestea se numesc ciuperci haplo-dikariobionte.
Tot n aceast grup se mai ncadreaz ciupercile din ordinul Taphrinales.
O categorie aparte o constituie grupa ciupercilor haplodiplobionte, la care
dikariofaza este foarte scurt, iar diplofaza este preponderent asupra haplofazei.
Acest tip de alternan de faze se ntlnete la unele Saccharomycetaceae.
Ciupercile din subncrengtura Deuteromycotina, neavnd ciclul biologic
complet, sunt lipsite de faza de nmulire sexuat. Unele, fiind mai atent studiate,
sunt trecute n uniti sistematice superioare, dup ce li se descoper ciclul
complet.
3.8.7 Nutriia ciupercilor
Ciupercile sunt organisme vegetale lipsite de pigment trofic, deci nu sunt
capabile de a face sinteza substanelor nutritive i, din aceast cauz, se dezvolt
pe substrat organic viu sau neviu, fiind heterotrofe.
Corpul ciupercilor este constituit din macroelemente, ntre care sunt:
carbonul, oxigenul, hidrogenul, azotul, fosforul, sulful, siliciul, potasiul, sodiul,
calciul, magneziul, fierul, manganul etc. De asemenea, n compoziia corpului lor
se mai gsesc i microelemente ca: borul, florul, aluminiul, titanul, cobaltul,
nikelul, zincul ce au rol de catalizatori ai proceselor de metabolism.
Unele elemente, ca mercurul, cuprul, plumbul, argintul etc. sunt nocive
pentru ciuperci servind ca baze toxice la prepararea fungicidelor.
Principala surs de carbon o constituie glucidele i zaharurile, dintre care, n
special, sunt utilizate hexozele i pentozele. Unele specii de Fusarium pot folosi i
alcoolii ca: alcoolul etilic, metilic, propilic sau butilic.
Alte ciuperci pot descompune unele polizaharide ca: amidonul, celuloza sau
hemiceluloza sau pot folosi i carbonul din unele lipide.
Ca surs de azot, ciupercile pot utiliza azotul atmosferic, azotul amoniacal,
azotul nitros i nitric sub form de nitrii i nitrai ca i azotul organic sub form
de amide, amine, aminoacizi, peptone i proteine.
ntre ciupercile ce pot utiliza azotul atmosferic sunt: Aspergillus niger,
Penicillium glaucum, Alternaria tennuis, Rhizopus nigricans, Cladosporium
herbarum etc.
89

Azotul amoniacal sub form de sruri de amoniu este folosit de unele


Saccharomycetaceae, Mucoraceae, precum i de Botrytis cinerea sau de
Aspergillus niger dar unele Mucoraceae pot folosi i azotul nitric sub form de
nitrai.
n ceea ce privete azotul organic, pot fi utilizate de ctre ciuperci fie ureea,
acidul uric sau guanidina, dintre compuii simpli sau aminoacizii, peptonele i
albuminele sub form de compui mai compleci.
Ca surse de fosfor, sunt utilizai fosfaii din sol sau surse organice ca lecitina
i fitina.
Sulful este folosit ca produs mineral sub form de sulfai de fier, zinc,
amoniu, sodiu etc. sau ca sulf organic din produse ca cistein, cistin, glutation,
peptone etc.
Elementele necesare ciupercilor trebuie utilizate n concentraii optime,
dozele prea mari fiind nocive iar cele prea mici nefiind suficiente pentru
desfurarea normal a metabolismului.
Ciupercile mai au nevoie pentru edificarea organismului lor i de unele
substane stimulatoare de cretere ce intr n compoziia mediilor nutritive n
cantiti foarte mici, ntre care sunt vitaminele, hormonii, auxinele, numite i
factori auximoni.
Unele ciuperci sunt capabile s sintetizeze unele vitamine, ca B, B1, B2, B6,
C, K, D etc., ele dezvoltndu-se bine pe medii artificiale. Alte ciuperci, care nu-i
pot sintetiza aceste vitamine, nu se dezvolt dect dac n mediile nutritive se
adaug vitaminele respective.
Dup modul lor de nutriie, ciupercile se mpart n patru categorii i anume:
Ciupercile parazite obligate duc o via strict parazitar, neputndu-se dezvolta
pe substrate nevii i nu pot fi, deci, cultivate pe medii artificiale. Din aceast
categorie fac parte Peronosporaceele, Erysiphaceele i Uredinalele.
Ciupercile saprofite facultative duc, de obicei, o via parazitar, dar, n anumite
condiii, pot tri i pe substraturi nevii, ca n cazul speciilor: Phytophthora
infestans, Pythium de baryanum, Endostigme inaequalis.
Ciupercile parazite facultative se comport, n mod obinuit, ca saprofite i
devin parazite n anumite condiii, cum sunt diferite specii ale genurilor:
Fusarium, Verticillium, Cladosporium, Alternaria etc.
Ciupercile saprofite obligate se dezvolt exclusiv pe substraturi nevii, cum sunt
numeroase specii de Mucoraceae, Aspergillaceae, unele specii din
subncrengtura Ascomycotina i din Basidiomycotina.
3.3.8. Originea i evoluia parazitismului la ciuperci
Prin fenomenul de parazitism se nelege convieuirea nearmonioas ntre
dou organisme ce sunt unul fa de altul n stare de dezechilibru biologic,
organismul parazit fiind acela ce ia de la gazda sa substanele nutritive de care are
nevoie.
Cu ct relaiile de parazitism sunt mai evoluate, cu att raporturile dintre cei
doi parteneri sunt mai strnse.
90

O prezentare sintetic a problemei parazitismului a fost fcut de Kuprevici,


n lucrarea sa: Fiziologia plantei bolnave n legtur cu problemele generale de
parazitism.
Nutriia saprofit se consider a fi cea iniial, iar formele parazite deriv
din cele saprofite.
Apariia parazitismului s-a produs prin modificarea i adaptarea la modul de
hrnire pe substraturi diferite, pe baza variabilitii sistemului de fermeni,
secretai de ciuperci.
La ciupercile saprofite, sistemul de fermeni este mai bogat, n timp ce la
cele parazite sistemul enzimatic este mai restrns i mai specializat.
n prezent, se consider c, la ciuperci, treptele de trecere de la saprofitism
la parazitism sunt urmtoarele: saprofite obligate - parazite facultative - saprofite
facultative - parazite obligate.
n acest cadru, se consider c, n scara parazitismului, ciupercile cu o
specializare larg i cu stadii saprofite n ontogenez sunt forme inferioare, n
timp ce paraziii obligai, cu o specializare ngust, sunt cele superioare.
Creterea filamentelor miceliene este strict apical, comparativ cu creterea
intercalar, cunoscut la alte organisme filamentoase. Apexul hifelor este bogat n
vezicule ce conin hidrolaze i sintezaze, necesare creterii n lungime.
Acumularea apical a veziculelor implic o circulaie acropetal a coninutului
citoplasmatic, afluxul de elemente nutritive realizndu-se din regiunile mature n
zonele de cretere.
Dac veziculele purttoare de enzime de cretere sunt prea numeroase, apar
ramificaii laterale la civa m distan de apex. La un moment dat, apare o
concuren trofic ntre axul principal i ramificaiile principale, secundare sau
teriare, dat, n principal, de coninutul mai sczut al mediului n elemente
nutritive.
3.3.9. Cerine fa de mediu
Temperatura. Majoritatea ciupercilor sunt mezofile, cu un optim de cretere
situat ntre 25 - 35oC. Unele specii sunt termotolerante (20 - 50oC).
Temperatura maxim limit de dezvoltare este de 60 - 62oC. Ciupercile
termofile joac un rol important n procesele de degradare a compostului.
PH-ul. Majoritatea ciupercilor pot s se dezvolte ntr-o zon de pH cuprins
ntre 4,5 i 8. Optimul fiind situat ntre 5,5 i 7,5.
Exist specii de ciuperci acidofile cu cretere la un pH inferior lui 4,5 sau
acido-tolerante.
Aeraia.Unele specii de ciuperci sunt microaerofile, altele sunt strict
anaerobe, dar majoritatea sunt aerobe.
3.3.10. Sistematica ciupercilor
Ciupercile cunoscute i descrise pn acum pe plan mondial depesc cifra
de 100.000 de specii i mereu apar contribuii micologice noi, care sporesc acest
numr.
91

Unitile sistematice crora aparin ciupercile ncep de la regnul Fungi,


ncr. Eumycota i continu cu subncrengtura, clasa, ordinul, familia, genul i
specia. n afar de acestea, la ciupercile parazite mai sunt formele specializate,
rasele fiziologice sau biotipurile, acestea din urm deosebindu-se numai prin unele
caractere biologice n legtur strns cu specia, cultivarul sau liniile plantelor
gazde, obinute n procesul de ameliorare.
n decursul timpului au fost elaborate mai multe sisteme de clasificare ale
unor autori, dintre care menionm: Greis (1943), Moreau (1953), Gumann
(1964), Goidanich (1963-1964), Alexopoulos (1966), Robert i Bouthroyd (1972).
n prezenta lucrare se folosete sistemul de clasificare elaborat de
Ainsworth, Sparow i Sussman (1973), dup care ciupercile se ncadreaz n ncr.
Eumycota i subncr. Mastigomycotina, Zigomycotina, Ascomycotina,
Basidiomycotina i Deuteromycotina.

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Protozoarele sunt:
a) animale unicelulare
b) plante
c) organisme unicelulare independente
2. Ciupercile au o nutriie:
a) autotrof
b) heterotrof
c) paratrof
3. Majoritatea ciupercilor pot s se dezvolte ntr-o zon de pH cuprins
ntre:
a) 7 i 8
b) 4,5 i 8
c) 3i 7

Rezultate corecte:
1 - c; 2 b; 3-b.

92

Rezumat (U.I. 3)
Protozoarele. Sunt organisme unicelulare, mobile, heterotrofe, eucariote.
Ciupercile. Sunt organisme heterotrofe, eucariote.
Morfologia ciupercilor. Aparatul vegetativ poate fi: gimnoplast,
plasmodiu, sifonoplast, tal filamentos, tal masiv.
Reproducerea ciupercilor se poate realiza: vegetativ, asexuat, sexuat.
Nutriia. Dup felul substratului folosit ciupercile se mpart n: saprofite,
facultativ parazite, facultativ saprofite, parazite.

Lucrare de verificare nr. 3


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei protozoarele (5puncte);
2. Precizai care este modul de nutriie al ciupercilor i care sunt cerinele fa de
mediu ale acestora. (5puncte).
BIBLIOGRAFIE (U.I. 3)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

93

Unitatea de nvare nr. 4:

INFLUENA FACTORILOR ECOLOGICI ASUPRA


MICROORGANISMELOR
Cuprins (U. I. 4)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 4)...94


Instruciuni (U.I. 4).94
4.1. Influena pH-ului........................................................................................95
4.2. Influena temperaturii.................................................................................95
4.3. Influena apei..............................................................................................97
4.4. Influena energiei radiante..........................................................................97
4.5. Activitatea microbian a diferitelor soluri..............................................99
4.6. Profilul microbian al solului.....................................................................99
Test de autoevaluare99
Rezumat (U.I. 4) .....100
Lucrare de verificare nr. 4 .... 100
Bibliografie (U.I. 4) ..100

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 1)


Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare la influena factorilor ecologici asupra
microorganismelor.
Dup finalizarea studiului acestei uniti de nvare, vei dispune de
competene pentru:
- descrierea factorilor ecologici care influeneaz activitatea mcroorganismelor;
- descrierea activitii microbiene din diferite soluri
- determinarea profilului microbian din soluri.
Instruciuni (U.I. 1)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.),
la care se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti
de nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de influena factorilor ecologici asupra
microorganismelor (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului) i o lucrare
de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format
electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.

94

4.1. Influena pH-ului


Majoritatea microorganismelor care alctuiesc micropopulaia solului
prefer valori de pH ct mai aproape de neutru. Aa se explic faptul c n solurile
cu reacie neutr se ntlnete cea mai bogat, mai variat i, n acelai timp, mai
valoroas microflor.
Din punct de vedere al preferinei fa de anumite valori de pH,
microorganismele se mpart n mai multe grupe:
Microorganismele indiferente. n aceast categorie intr unele bacterii i
majoritatea ciupercilor care, n culturi pure, se dezvolt n limite largi de pH. Ex. :
Penicilium aculeatum prefer valori de pH cuprinse ntre 2 i 6, iar Trichoderma
viride ntre 2 i 8.
Microorganismele neutrofile prefer valori de pH ct mai aproape de neutru sau
uor bazice. n aceast grup intr cel mai mare numr de microorganisme i cele
mai importante specii i grupe pentru fertilitatea solului. Ex: genurile Azotobacter,
Nitrosomonas, Nitrosococcus, Nitrobacter, Nitrococcus, Cytophaga, Bacillus,
Streptomyces etc.
Microorganismele acidofile. Acestea au dezvoltarea maxim la valori de pH 2-3
i cuprind specii bacteriene care oxideaz sulful (ex. Thiobacillus thiooxidans) i
fierul (ex. Thiobacillus ferrooxidans).
Microorganismele bazofile au cea mai bun dezvoltare la valori de pH peste 8;
n aceast categorie intr bacteriile ce descompun ureea ( ex. Bacillus ureolitici).
Ca o aplicaie practic, corectarea reaciei solurilor acide prin calcarizare
stimuleaz activitatea microorganismelor valoroase i acest efect este cu att mai
puternic cu ct solul neamendat a avut valori mai sczute de pH.
Ciupercile microscopice sunt microorganisme care suport uor (chiar
prefer) reacia acid a solului, concurnd, astfel, toate celelalte microorganisme
din solurile acide. n aceast situaie, pH-ul solului este un factor de reglaj al
competiiei pentru hran.
De asemenea, s-a observat c ntre coninutul de substane nutritive i
reacia solului exist o corelaie dovedit prin schimbul de ioni. Acest raport de
schimb ntre ionii de hidrogen produi de rdcinile plantelor este echivalent cu
bazele absorbite prin schimb cu mineralele argiloase i coloizii organici. n cadrul
descompunerii substanelor organice, procesul de dezalcalinizare i formare a
acizilor duce la acidifierea solului, care este contracarat prin fenomene de
mineralizare, degradare i unele msuri de fertilizare. Acidifierea solurilor
produce o restructurare a grupelor de microorganisme, favoriznd ciupercile i
bacteriile anaerobe.
4.2. Influena temperaturii
Studiul influenei temperaturii asupra microorganismelor prezint dou
aspecte importante
- cunoaterea temperaturile cardinale, adic minima (Tm), optima (To) i maxima
(TM), care permit creterea i dezvoltarea microorganismelor;
95

- cunoaterea temperaturile letale, care impiedic dezvoltarea sau produce moartea


microorganismelor.
Temperatura este un factor foarte important pentru cantitatea de humus
format n solurile din regiunile umede cu clim temperat. Referindu-ne la
dinamica sintezei i descompunerii humusului, s-a constatat c odat cu scderea
temperaturii scade i activitatea microbiotei solului.
Limitele optime ale temperaturii pentru microorganismele din sol variaz
ntre 20 i 30C, iar din punct de vedere al oscilaiilor de temperatur bacteriile au
un grad foarte ridicat de adaptabilitate.
Se tie c fiecare specie microbian are o anumit temperatur optim de
cretere i anumite limite ntre care se desfoar n condiii normale viaa
acesteia. n funcie de adaptarea la factorul termic, microorganismele pot fi:
Microorganisme psihrofile, cu o temperatura optim de cretere inferioar
valorii de 20C, au drept caracteristice urmatoarele valori de temperatur: Tm=
10 .... +5C; To = 10 15C i TM = 20 25C.
Din aceast grup fac parte majoritatea bacteriilor din genurile
Pseudomonas, Flavobaterium, Alcaligenes, Acromobacter, Staphilococcus i
Salmonella; drojdiile din genurile Candida i Rhodothorula i fungii filamentoi
din genurile Alternaria, Cladosporium i Botrytis.
Bacteriile adaptate la temperaturi sczute prezint anumite particulariti:
coninut ridicat n lipide care intr n structura peretelui celular i a membranei
citoplasmatice; coninut ridicat n acizi grai nesaturai; mobilitate ridicat;
prezint capacitatea de a produce enzime care sunt mai active la temperaturi
sczute.
Microorganisme mezofile. Temperatura optim (To) este cuprins ntre 25 i
40C i nu se dezvolt n afara limitelor de 15 - 45C. n acest grup sunt
cuprinse marea majoritate a bacteriilor, actinomicetelor i a drojdiilor
fermentative. Ciupercile filamentoase au temperatura de cretere n jurul valorii de
26C, iar cea de sporulare de 30C.
Microorganisme termofile sunt reprezentate de specii al cror metabolism este
intens la temperaturi relativ ridicate. Au drept caracteristice urmatoarele valori de
temperatur: Tm = 20 - 30C; To = 40 60C i TM = 70 90C. ntre bacteriile din
aceast grup ntlnim bacteriile amonificatoare, celulolitice (Clostridium
termocellulolyticum Clostridium termosaccharoliticum, Bacillus cellulosae
hydrogenicus i Methylomonas methanica), amilolitice, sulfato-reductoare i
altele. Dintre fungi, amintim Aspergillus fumigatus i Penicillium duponti.
Trebuie subliniat c aceast clasificare este relativ deoarece multe
microorganisme se dezvolt bine n limite largi de temperatur.
Rezistena microorganismelor la temperaturi letale sau termorezistena
acestora se refer la posibilitatea celulelor microbiene de a rezista pentru o
perioad mai scurt sau lung de timp la temperaturi de 90 - 100C sau peste
100C.

96

4.3. Influena apei


Activitatea biologic a unui sol tinde s se diminueze odat cu scderea
coninutului n ap, dar contrar celor observate la plante, punctul de ofilire (pF =
4,2) nu constituie un prag indicator al ncetrii activitii microbiene. Se apreciaz
c limita superioar oricrei activiti biologice corespunde la pF= 5,5-5,6.
Uscarea solului peste aceste valori antreneaz moartea tuturor microorganismelor.
Aceast particularitate a microorganismelor fa de plantele superioare se
explic, n primul rnd, prin presiunea osmotic mai ridicat din celulele
microbiene; n al doilea rnd, bacteriile din sol nu pierd ap prin transpiraie ca
plantele superioare, iar n al treilea rnd, suprafaa de absorbie la microorganisme
fa de masa protoplasmatic egal este mai mare ca la plante.
Moartea microorganismelor la umiditate sczut este determinat de mai
muli factori, ca durata i nivelul uscrii, tipul microorganismului, tipul de sol i
structura solului.
n funcie de nevoile de ap, microorganismele se mpart n mai multe
grupe:
Microorganismele hiperxerofile sunt germeni al cror prag este superior valorii
pF = 4,9. Aici, majoritatea microorganismelor sunt cele amonificatoare,
amilolitice i cele care degradeaz substanele vegetale complexe.
Microorganismele xerofile sunt cele al cror prag este cuprins ntre pF = 4,9 i
4,2. Aici se includ germenii care degradeaz celuloza, cei care oxideaz sulful, o
parte dintre microorganismele amilolitice, amonificatorii ureei i cei care produc
nitrificarea sulfatului de amoniu.
Microorganismele hidrofile includ germeni care au pragul pF = 2. Aici se
gsesc ageni care descompun carboximetilceluloza ce fixeaz azotul atmosferic
precum i o parte dintre nitrificatorii sulfatului de amoniu.
Existena pragurilor diferite ridic probleme de ordin practic, deosebit de
importante pentru agricultur. Astfel, una dintre consecine este predominarea
selectiv a unor procese microbiene asupra altora. Aceasta se ntmpl n cazul
umiditii situate n vecintatea punctului de ofilire, cnd predominarea proceselor
de celuloliz asupra amonificrii are drept urmare imobilizarea total sau parial
a azotului mineral.
De asemenea, n cazul umiditii sczute predomin procesele de
amonificare, fapt ce antreneaz o acumulare de azot amoniacal, remarcat n
solurile n curs de uscare.
Diferitele grupe de microorganisme au un grad variat de rezisten fa de
uscciune. Astfel, ciupercile i bacteriile sunt mai sensibile, comparativ cu
actinomicetele.
4.4. Influena energiei radiante
Radiaiile electromagnetice au un spectru larg, includ radiaiile herziene,
infraroii, vizibile, ultraviolete X i Y ce sunt caracterizate fiecare printr-o
anumit lungime de und. Ele au dublu caracter, de fenomen ondulatoriu i de
fascicol discontinuu de mici cuante de energie.
97

Iradierea reprezint un bombardament cu fascicole de cuante de energie iar


efectele ei asupra materialului iradiat sunt determinate de absorbia de ctre
acestea a energiei radiaiilor i depind de energia cuantei i de natura materialului
absorbant.
Radiaiile herziene i infraroii cu lungimea de und mare ( >12.000 ) au
un coninut de energie slab, astfel nct sunt incapabile s modifice chimic
substanele pe care le absorb i, ca atare, energia lor este transformat n cldur.
Radiaiile cuprinse ntre 12.000 (infrarou apropiat) i 2.000
(ultraviolet ndeprtat) au un coninut energetic suficient de ridicat, pentru a
produce modificri fotochimice ale moleculelor care sunt absorbite.
Radiaiile cu lungime de und sub 2.000 (X, Y i cosmice) au un coninut
energetic att de ridicat, nct provoac ionizarea moleculelor pe care le ntlnesc,
de unde i denumirea de radiaii ionizante.
Efectul biologic al radiaiilor depinde de lungimea lor de und i de doza de
iradiere. n funcie de aceti doi factori, iradierea poate avea dou efecte distincte
i anume efectul letal asupra microorganismelor i efectul mutagen, ce const n
modificarea unor caractere genotipice.
Radiaiile luminoase acioneaz asupra celulelor prin intermediul unor
reacii fotochimice cu constituenii celulari. Dintre acestea sunt bine cunoscute
cele implicate n procesul de fotosintez i n fenomenele de fototoxie, ce se
ntlnesc la microorganismele fototrofe. Lumina solar direct este bactericid,
datorit nu att radiaiilor ultraviolet, ct nclzirii prin radiaiile infraroii i
deshidratrii celulelor expuse. Radiaiile ultraviolete provenite de la soare sunt
reinute, n majoritate, de stratul de ozon din partea superioar a atmosferei.
Radiaiile ultraviolete au o aciune antimicrobian net, ale crui efect
depinde de intensitatea i durata iradierii.
n cazul unei iradieri slabe i de scurt durat, se produc fie alterri limitate
la nivelul materialului genetic, care se traduc prin apariia de mutaii, materializate
prin pierderea unui caracter de lizogenie al celulei bacteriene sau o inactivare
reversibil a unor procese metabolice. Acestea au ca efect blocarea temporar a
multiplicrii celulare, deoarece, n urma unei iradieri intense, n celul survin
modificri profunde, ireversibile, cu efect letal.
Radiaiile ultraviolete cuprinse ntre 2300 i 2800 sunt cele mai active din
punct de vedere biologic. Spectrul de aciune antimicrobian al acestora seamn
foarte mult cu spectrul de absorbie al UV de ctre ADN, ceea ce a sugerat ipoteza
cunoscut sub numele de teoria intei. Conform acesteia, efectul iradierii se
exercit, n cea mai mare msur, prin intermediul ADN-ului. Radiaiile lovesc
direct acest constituent celular i determin reacii fotochimice selective cu bazele
din structura lui.
Radiaiile corpusculare, ca razele gamma, dar i radiaiile electromagnetice
Y i X produc efecte legate de bombardarea general a celulei. Cnd ntlnesc un
microorganism, particulele active lovesc succesiv o serie de atomi din structura
sa, desprinznd electroni de pe particulele respective. Se creeaz, n felul acesta,
eseniale pentru celul i blocarea a diferite sinteze sau inhibarea procesului
de diviziune.
98

4.5. Activitatea microbian a diferitelor soluri


Variaia microflorei n funcie de factorii mai sus amintii duce la o
difereniere a activitii biologice a diferitelor tipuri de sol.
n ara noastr, cercetri de peste 20 de ani fcute de Papacostea au scos n
eviden existena n solurile romneti a unor microorganisme indicatoare, care
sunt caracteristice diferitelor tipuri de sol i care au permis din acest punct de
vedere clasificarea solurilor n trei grupe.
1. Soluri cu Mucor rammanianus - de la cele foarte acide (de sub pajitile alpine)
pn la cele acide, brune (de sub pdurea de molid).
2. Soluri cu Pseudomonas acidophilus i Pseudomonas aureofaciens, cum sunt
solurile podzolite pseudogleizate.
3. Solurile cu Pseudomonas lemonieri i Pseudomonas aureofaciens, care sunt
formate n climat mai uscat, n zone cu precipitaii ntre 400 i 600 mm pe an.
4.6. Profilul microbian al solului
Avnd n vedere influena pe care aeraia o exercit asupra activitii
biologice din sol, se constat c numrul genurilor de specii aerobe scade odat cu
adncimea, avnd loc, n paralel, o cretere a numrului de specii anaerobe i/sau
facultativ anaerobe. Nu putem ns atribui scderea numrului de germeni numai
aeraiei; aceast distribuie reflect, n mare msur condiiile de nutriie pe care
microorganismele le gsesc n sol i care sunt mai bine satisfcute n orizonturile
de suprafa, datorit cantitii mai mari de humus i aprovizionrii mai frecvente
cu resturi organice.

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Din punct de vedere al preferinei fa de anumite valori de pH,
microorganismele se mpart n:
a) microorganisme indiferente i neutrofile
b) microorganisme acidofile i bazofile
c) xerofile
2. n funcie de nevoile de ap, microorganismele se mpart n mai
multe grupe:
a) microorganisme hiperxerofile, xerofile i hidrofile
b) microorganisme acidofile i bazofile
c) microorganisme indiferente i neutrofile
3. Radiaiile electromagnetice includ:
a) radiaiile herziene, infraroii, vizibile
b) ultraviolete X i Y
c) nici un rspuns corect.
99

Rezultate corecte:
1 a i b ; 2 a; 3- a i b.
Rezumat (U.I. 4)
Din punct de vedere al preferinei fa de anumite valori de pH,
microorganismele se mpart n mai multe grupe:
Microorganismele indiferente
Microorganismele neutrofile
Microorganismele acidofile
Microorganismele bazofile
Radiaiile ultraviolete au o aciune antimicrobian net, ale crui efect
depinde de intensitatea i durata iradierii.
n ara noastr, cercetri de peste 20 de ani fcute de Papacostea au scos n
eviden existena n solurile romneti a unor microorganisme indicatoare, care
sunt caracteristice diferitelor tipuri de sol i care au permis din acest punct de
vedere clasificarea solurilor n trei grupe.
1. Soluri cu Mucor rammanianus.
2. Soluri cu Pseudomonas acidophilus i Pseudomonas aureofaciens.
3. Solurile cu Pseudomonas lemonieri i Pseudomonas aureofaciens.
Avnd n vedere influena pe care aeraia o exercit asupra activitii
biologice din sol, se constat c numrul genurilor de specii aerobe scade odat cu
adncimea, avnd loc, n paralel, o cretere a numrului de specii anaerobe i/sau
facultativ anaerobe.

Lucrare de verificare nr. 4


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei grupele de microorganisme n funcie de preferinele fa de anumite
valori ale pH-ului (5puncte);
2. Precizai care este influena apei i a energiei radiante asupra microorganismeor
(5puncte).
BIBLIOGRAFIE (U.I. 3)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
100

Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,


2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

Unitatea de nvare nr. 5:

INTERRELAIILE ECOLOGICE NTRE ORGANISME


Cuprins (U.I. 5)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 5)...101


Instruciuni (U.I. 5).102
5.1. Interrelaiile dintre populaiile de microorganisme .................................102
5.2. Interrelaiile dintre plantele superioare i microorganismele din sol........105
5.2.1. Influena sistemului radicular al plantelor asupra microflorei
solului....................................................................................................105
5.2.2. Natura secreiilor radicelare i influena lor asupra structuriilor
taxonomice a microflorei solului..........................................................106
5.2.3. Vrsta plantelor i efectul de rizosfer .......................................107
5.2.4. Micorizele...................................................................................107
5.2.5. Interrelaiile ntre ciuperci i plante n cazul micorizelor....109
Test de autoevaluare109
Rezumat (U.I. 5) ..110
Lucrare de verificare nr. 5 .... 110
Bibliografie (U.I. 5) ..110

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 5)


Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare la interrelaiile ecologice ntre organisme.
Dup finalizarea studiului acestei uniti de nvare, vei dispune de
competene pentru:
- descrierea interrelaiilor dintre populaiile de microorganisme;
- descrierea interrelaiilor dintre plantele superioare i microorganismele din
sol.

101

Instruciuni (U.I. 5)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de interrelaiile ecologice ntre
organisme (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de
verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format
electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.

5.1. Interrelaiile dintre populaiile de microorganisme


Rspndirea foarte larg a microorganismelor n natur face ca, frecvent, s
se gseasc, n acelai habitat, mai multe specii ntre care se stabilesc interrelaii
de complexitate variat.
Aceste interrelaii ntre dou populaii microbiene pot fi:
indiferente sau neutrale;
pozitive sau sinergice;
negative sau antagonice.
I. Neutralismul poate fi definit ca relaie de indiferen ntre dou sau mai
multe specii, datorit distanei mari ntre populaiile respective sau deosebirilor
mari n ceea ce privete exigenelor nutritive, fapt ce le face s nu intre n
competiie pentru acelai substrat.
II. Interrelaiile sinergice sunt relaii benefice care cuprind o mare varietate
de forme de la comensalism (sau metabioz) i mutualism (sau simbioz
nutriional) pn la simbioza propriu-zis.
1. Comensalismul microbian sau metabioza este caracterizat prin creterea
mpreun a dou specii de microorganisme ntr-un tip de relaie, n care una
profit de asociere, pe ct vreme cealalt, n aparen, nu profit, dar nici nu este
influenat negativ. Interrelaiile comensalice sunt, la rndul lor, de mai multe
feluri, dup modul de aciune a unuia dintre parteneri:
Un microorganism produce un metabolit sau un factor de cretere esenial
pentru un alt microorganism.
Astfel, bacteriile care oxideaz nitriii la nitrai (genurile Nitrobacter,
Nitrospira, Nitrococcus) nu se pot dezvolta n sol dect n prezena bacteriilor care
oxideaz amoniacul la nitrii (genurile Nitrosomonas, Nitrosococcus, Nitrosospira
i Nitrosolobus) i care le furnizeaz substana necesar nutriiei.
Un anumit microorganism poate degrada sau neutraliza un factor microbian
activ asupra unei alte specii de microorganism.
Biodegradarea bacterian i fungic a fenolilor, a acidului benzoic sau a
antibioticelor face posibil dezvoltarea microorganismelor sensibile la aciunea
toxic a acestor substane. Unele microorganisme pot s sintetizeze i s elimine
n mediu enzime (panicilinaza) care degradeaz anumite antibiotice, protejnd, n
felul acesta, microorganismele penicilino-sensibile.
102

Un anumit microorganism modifica proprietile fizice i chimice ale


habitatului i creeaz condiii de cretere pentru microorganismul asociat.
Spre exemplu, bacteriile aerobe consum din mediu oxigenul, crend, n
acest fel, condiii favorabile microorganismelor anaerobe. O parte dintre
microorganisme altereaz mediul din punct de vedere fizic, crend condiii de
cretere pentru alte specii.
Drojdiile osmofile, ce cresc n soluii concentrate de zahr, modific aceste
soluii prin fermentaii sau oxidri, permind, astfel, dezvoltarea
microorganismelor neosmofile sau mai puin osmotolerante.
Un anumit microorganism poate modifica substratul nutritiv, fcndu-l
accesibil altui microorganism.
Spre exemplu, relaiile comensale ntre bacteriile celulozitice i speciile
genului Azotobacter. Primele hidrolizeaz celuloza pn la compui intermediari
(monozaharide, acizi organici, alcooli), asimilabili de ctre Azotobacter sp.
2. Mutualismul sau simbioza nutriional const n exercitarea de influene
favorabile bilaterale ntre specii diferite, ce se dezvolt simultan pe acelai
substrat. Acest tip de interrelaie se deosebete de simbioza propriu-zis prin fapul
c nu este obligatorie, permanent.
El prezint un tip de interrelaie nutriional ntre dou specii de
microorganisme, care au nevoie una de alta pentru realizarea unor metabolii
eseniali, pe care niciuna dintre specii nu-i poate sintetiza.
Astfel, Mucor ramanianum i Rhodotorula rubra nu se pot dezvolta separat
pe medii lipsite de tiamin (vitamina B1). Dac sunt ns cultivate mpreun, nu
necesit adugarea vitaminei B1 n mediu, deoarece Mucor sp. sintetizeaz o parte
din vitamina B1 i anume nucleul tiazolic, iar Rhodotorula sp. cealalt parte
nucleul pirimidinic.
Un alt exemplu este cel referitor la interrelaiile dintre Lactobacillus
arabinosus i Streptococcus faecalis pe un mediu lipsit de fenilamina
(indinspensabil pentru Lactobacillus) i acid folic (indinspensabil pentru
Streptococcus), cnd fiecare bacterie sintetizeaz factorul de cretere necesar
celeilalte.
3. Simbioza microbian
Dou sau mai multe tipuri de microorganisme, ce se gsesc mpreun n
acelai mediu, pot avea activiti combinate sinergic, diferite cantitativ sau
calitativ de activitile acelorai organisme, crescute separat pe mediul respectiv.
n urma acestui tip de asociere pot fi sintetizai unii compui organici cu
structur complex sau pot fi degradate unele substane complexe. Fenomene de
simbioz pot fi observate n asociaii de microorganisme de tipul lichenilor, la
care se formeaz anumii acizi organici, pigmeni i corpi reproductori
compleci, care nu pot fi elaborai de niciunul dintre cei doi parteneri considerai
separat.
III. Relaii de tip antagonic. n cadrul acestor relaii, cunoscute sub numele
de antagonism microbian sau de relaii antagonice, una dintre specii se comport
ca agresor i profit de pe urma asociaiei cu cealalt care este prejudiciat. Un
microorganism sau o populaie de microorganisme poate avea o aciune negativ,
103

de inhibare sau de distrugere a altui microorganism ori micropopulaii, prin


diferite mecanisme:
modificarea condiiilor de mediu;
De exemplu, din activitatea microflorei solului pot rezulta cantiti mari de
CO2, care inhib dezvoltarea altor microorganisme sensibile (Rhizobium sp.) i
modific pH-ul mediului (devine acid). Astfel, sunt eliminate speciile sensibile la
pH acid, cum ar fi cele din genurile Azotobacter, Nitrosomonas, Nitrobacter i
unele actinomicete. Pe de alt parte, scderea potenialului oxido-reductor
elimin din mediu numeroase specii aerobe.
Ca alt exemplu amintim apariia alcoolului etilic sau a acidului lactic sau
butiric n timpul unor procese fermentative, compui care provoac dispariia
celorlalte micoorganisme din mediu fermentat.
competiie;
n natur, substanele nutritive se gsesc n cantiti limitate, iar
microorganismele, adesea, intr n competiie pentru procurarea acestora. Acest
tip de interrelaie poart numele de competitivitate nutritiv. Cnd mediul este
bogat n substane nutritive dar este limitat ca spaiu, poate s apar i o
competiie pentru spaiu.
Capacitatea competitiv a microorganismelor este determinat, n special, de
viteza lor de cretere. Astfel, microorganismele cu o cretere rapid epuizeaz
disponibilitile nutritive ale mediului i mpiedic dezvoltarea speciei cu cretere
lent. Spre exemplu, unele bacterii nesporulate mpiedic dezvoltarea
actinomicetelor.
elaborarea unor substane toxice sau inhibatoare;
Cele mai multe relaii antagonice se manifest prin producerea i eliberarea
n mediu de ctre o specie microbian (specie antagonist) a unor substane
inhibatoare sau toxice pentru o singur specie sau un grup de specii, situate n
imediata lor apropiere. Efectele acestor substane pot fi bacteriostatic sau
fungistatic i bactericid sau fungicid bacteriolitic.
n mediile naturale, antagonismul prin antibiotice este foarte frecvent.
Microflora solului conine numeroase microorganisme productoare de
antibiotice: actinomicete (Streptomyces, Nocardia, Micromonospora), bacterii
(Bacillus i Pseudomonas) i fungi (Penicillium, Aspergillus, Trichoderma,
Fusarium, Sclerotinia).
parazitism;
Parazitismul este acel tip de relaie n care un microorganism este distrus,
lizat, de un alt microorganism, care se dezvolt n interiorul i pe seama sa. n
aceast relaie, parazitul este ntotdeauna mai mic dect gazda i rmne viu cel
puin o scurt perioad de timp, multiplicndu-se n celula microorganismului
gazd.
Exemplu clasic de parazitism este infecia unei bacterii cu un bacteriofag
virulent, care are ca efect final liza celulei bacteriene. De asemenea, se cunosc
bacterii micolitice, care au capacitatea de a elibera chitinaza, o enzim ce distruge
peretele celular al unor ciuperci microscopice, producnd moartea acestora.
104

Multiplicarea microorganismului agresor are loc pe seama constituenilor celulari


ai gazdei sale.
prdtorism.
Prdtorismul este o manifestare de agresiune, n care unele microorganisme
mobile, lipsite de perete celular rigid, capteaz, ingereaz i diger
microorganisme de dimensiuni mai mici. Ca exemplu tipic avem protozoarele,
care se hrnesc cu bacterii vii.
n lumea microorganismelor, prdtorismul este limitat numai la speciile
capabile de fagocitoz. Bacteriile, fungii i algele sunt excluse din cauza peretelui
celular rigid, care mpiedic nglobarea altor microorganisme sau macromolecule.
5.2. Interrelaiile dintre plantele superioare i microorganismele din sol
Plantele, dezvoltndu-se n mediul lor natural (solul) intr n concuren
pentru hran cu microorganismele.
nc din 1895, Caron a emis ideea c prezena bacteriilor n sol ar putea s
aib un efect favorabil asupra plantelor de cultur i invers, c plantele, la rndul
lor, ar avea o aciune favorabil asupra florei bacteriene din sol.
5.2.1. Influena sistemului radicular al plantelor asupra microflorei solului
Pentru a putea prezenta relaiile care se stabilesc ntre sistemul radicular al
plantelor i microbiota din sol este necesar s definim cteva noiuni:
spermatosfer i rizosfer.
Spermatosfera este zona de sol care nconjoar seminele n curs de
germinare. Numrul microorganismelor din aceast zon (n special bacterii) este
mult mai mare, comparativ cu zona cu semine aflate n repaus germinativ,
deoarece, microorganismele utilizeaz substanele eliminate de semine n timpul
germinrii lor i produc, la rndul lor, fitohormoni, care stimuleaz germinarea i
apoi creterea plantei. Ulterior, spermatosfera se transform n rizosfer.
Rizosfera este zona de sol care nconjoar rdcinile i este influenat de
acestea din punct de vedere fizic, chimic i biologic, datorit aciunilor specifice
dintre microorganismele solului i plantele superioare.
Analiza probelor de sol recoltate de la diferite distane fa de rdcin i
chiar de la suprafaa rdcinii a demonstrat influena favorabil pe care o are
sistemul radicular asupra bacteriilor. Existena zonalitii n rspndirea
microorganismelor din sol, n jurul rdcinilor plantelor, a determinat pe
cercettori s mpart rizosfera n mai multe zone.
Astfel, Berezova (1950) distinge n cadrul rizosferei trei zone care se
deosebesc ntre ele prin densitatea microbian dar i prin structura speciilor de
microorganisme:
Prima zon, numit rizoplan, rizosfera intern (rizosfera propriu-zis), zon
radicular sau zon radicelar, are o raz de 0-0,5 cm i cuprinde microorganisme
de la suprafaa rdcinilor;
105

A doua zon, numit zona periradicular, cuprinde microorganismele ce se


gsesc la o distan de 0,5 cm fa de rdcin;
A treia zon, numit rizosfera extern, zona rizosferic sau edafosfer, cuprinde
microorganisme ce se gsesc la o distan mai mare de 0,5 cm fa de rdcin.
Aceast mprire nfieaz aspectul cantitativ al efectului de rizosfer dar
influena rdcinilor asupra microflorei din sol se manifest i prin modificarea
raportului ntre grupele de microorganisme, ceea ce duce la modificarea
echilibrului microbian din sol. Prezena mai multor microorganisme (n special
bacterii) n rizosfer dect n solul nerizosferic (fr rdcini) se numete efect
rizosferic. Intensitatea efectului rizosferic la bacterii se exprim prin raportul R/S
(rizosfer/sol nerizosferic). La actinomicete, ciuperci, alge i protozoare R/S este
ntre 2 i 3.
Concentraia speciilor bacteriene din rizosfer poate fi influenat de mai
muli factori, dintre care amintim:
specia plantei;
coninutul solului n substane nutritive;
faza de vegetaie;
distana dintre suprafaa rdcinii i particulele de sol;
zonele rdcinii.
Creterea plantelor provoac schimbri n echilibrul dintre grupe de nutriie.
Sunt stimulate microorganisme cu cerine nutritive simple i cele care folosesc
aminoacizi; sunt inhibate cele ce depind de substane mai complexe, coninute de
extractul de sol. Cook i Lockhead (1959) constat, de asemenea, c numrul de
bacterii care necesit substane biologice active este din ce n ce mai mic pe
msur ce se afl mai aproape de rdcin iar bacteriile capabile s le sintetizeze
au fost mai numeroase.
Rovira (1956), n scopul de a demonstra c efectul de rizosfer se datoreaz
secreiilor radiculare, n special, a adugat solului soluia nutritiv care coninea
substanele eliberate n ea a rdcinilor de mazre, n timp ce, n paralel, alte
probe s-au tratat numai cu soluia nutritiv simpl. El constatat c stimularera
bacteriilor G sporogene este unul din cele mai stabile criterii de apreciere a
efectului de rizosfer.
n rizosfera plantelor predomin bacteriile nesporogene, G-, din genurile
Pseudomonas, Flavobacterium, Achromobacter i Agrobacterium (n rizosfera
plantelor leguminoase se regsesc i Rhizobium sp., Azotobacter sp., Azospirillum
sp.).
5.2.2. Natura secreiilor radicelare i influena lor asupra structuriilor
taxonomice a microflorei solului
nc de la primele observaii privind existena densitii diferite a
microorganismelor n jurul rdcinilor, Hiltner trage concluzia c secreiile
eliberate de plantele leguminoase determin proliferarea altor grupe de
microorganisme, comparativ cu cele de la plantele de mutar.
106

Landergadh i Stenlind, lucrnd cu rdcini extirpate, au gsit c grul a


secretat o serie de substane, ca glucoza, flavonoli i nucleotide, n timp ce
mazrea a secretat numai glucoz i nucleotide.
Rovira, analiznd compoziia materialului secretat de rdcinile de mazre
i ovz, stabilete c mazrea elimin prin rdcini cantiti mai mari de
aminoacizi dect ovzul; totodat, seria aminoacizilor este mai variat la mazre,
cuprinznd un numr mai mare de compui aminici.
Substanele biologic active sunt, de asemenea, eliminate de rdcini,
contribuind la stimularea nmulirii n rizosfer a microorganismelor. Au fost puse
n eviden tiamina (B1), biotina, riboflavina (B2), acidul pantotenic, acidul folic i
acidul nicotinic.
O analiz critic a rezultatelor i concluziilor la care au ajuns cercettorii
care s-au ocupat cu studiul microbiologic i chimic al rizosferei plantelor scoate n
eviden urmtoarele aspecte:
n jurul rdcinilor plantelor care vegeteaz normal exist un numr de
microorganisme, care este mai mare de 10 ori, comparativ cu numrul celor
existente n sol fr rdcini;
mecanismul stimulrii microflorei se bazeaz pe capacitatea plantelor de a
elimina prin rdcini substane cu rol energetic, plastic i de stimulare a creterii;
n rizosfer predomin bacteriile G, nesporogene din genul Pseudomanas;
selecia n cadrul microflorei rizosferice apare ca un efect al interaciunii
microbiene. Microorganismele cu un potenial ridicat de sintez a substanelor
biologic active, dotate cu capacitate mare de nmulire i capabile s se hrneasc
cu produsele eliminate de rdcini, precum i cele care n cursul metabolismului
lor produc substane care inhib nmulirea altora, ajungnd dominante n structura
microbiologic a rizosferei.
secreiile radiculare ale plantelor sunt influenate de condiiile de nutriie, de
condiiile climatice (umiditatea solului, reacia mediului, lumin, temperatur,
aeraie etc.).
5.2.3. Vrsta plantelor i efectul de rizosfer
n stadiile timpurii, plantele nu influeneaz puternic microflora rizosferic,
acest lucru realizndu-se dup ce plantele au atins stadiul de dezvoltare maxim.
Krasilnikov (1958) i ali autori au gsit c numrul microorganismelor
atinge apogeul cnd plantele sunt n stadiul de cretere activ, mai ales n faza de
nflorit.
Diferenele de rezultate se datoreaz metodologiei folosite i modului de
interpretare dar, n principiu, efectul de rizosfer crete odat cu dezvoltarea
plantelor i prezint fluctuaii n funcie de condiiile de mediu.
5.2.4. Micorizele
Sub denumirea de micoriz (gr. mikes ciuperc, rhiza rdcin) se
nelege o asociaie de tip benefic ntre ciupercile filamentoase i rdcinile sau
107

rizoizii dicotiledonatelor superioare (plante lemnoase i ierboase), ntre ciupercile


filamentoase i rdcinile unor monocotiledonate (orhidee), precum i cu muchii
(Bryophyte) i ferigile (Pteridophyta).
Ciupercile de micoriz se dezvolt numai n solul din jurul rdcinii,
ajungnd cel mult la suprafaa i n interiorul celulelor corticale radiculare.
Prezena micorizelor se exteriorizeaz prin apariia pe rdcinile laterale ale
plantei gazd a unor excrescene scurte i ramificate care nlocuiesc periorii
absorbani i formeaz o psl de miceliu fungic care alctuiete, cu timpul, un
adevrat manon periradicular, colorat variabil, ncepnd de la alb pn la brun
sau negru. Rdcinle invadate de ciuperci sunt mai scurte dect cele normale i
prezint o hipertrofie a celulelor corticale.
Plantele furnizeaz ciupercilor de micoriz substane nutritive organice
(glucide, vitamine .a.) i acestea favorizeaz, n schimb, absorbia apei i a
substanelor nutritive minerale (P, N, K .a.).
Micorizele sunt asociaii temporare, deoarece ciupercile mor la sfritul
perioadei de cretere vegetativ a plantei. Dezvoltarea micorizei este determinat
de nsuirile fiziologice ale partenerilor simbiozei i de condiiile de mediu,
precum i de nsuirile fizice i chimice ale solului. Ciupercile care constituie
micorize au o poziie sistematic diversificat, putnd fi ncadrate n urmtoarele
subncrengturi: Mastigomycotina, Ascomycotina, Basidiomycotina sau
Deuteromycotina.
Dup raporturile ce se stabilesc ntre ciuperc i plant, micorizele sunt de
trei feluri:
Micorize ectotrofe. Ciuperca emite hife spre exterior (sol) i spre interior
(rdcin), formnd, n acest mod, un manon micelian n jurul rdcinilor. Hifele
emise spre interior ptrund n stratul cortical al rdcinilor la nivelul spaiilor
intercelulare, formnd o reea, numit "mpletitura lui Harting (exemple: Boletus,
Psalliota, Lactarius, Rusula, Marasmius). Sunt frecvente la arborii din familiile
Pinaceae, Betulaceae i Fagaceae deoarece rdcinile lor nu prezint periori
radiculari.
Micorize endotrofe. n acest caz, miceliul ciupercii se dezvolt aproape exclusiv
n interiorul celulelor corticale (scoar i epiderm) ale gazdei, dar pot fi ntlnite
i n spaiul intercelular. Ele sunt mai frecvente dect cele ectotrofe i sunt
ntlnite la plantele ierboase i lemnoase ale cror rdcini prezint periori
radiculari (Rhizoctonia repens la orhidee i Phoma sp. la Calluna vulgaris iarba
neagr).
Prezena ciupercii se manifest prin tuberizarea rdcinii, ca la orhidee. De
obicei, ciuperca poate fi distins la examenul microscopic al rdcinii, n care
formeaz structuri caracteristice sub form de arbusculi i umflturi terminale
vezicule. n aceste structuri se depun grsimi de rezerv la nivelul celulelor
corticale ale rdcinii.
Pe msur ce ciuperca se dezvolt, creterea n lungime a rdcinilor
infectate este inhibat, iar periorii absorbani dispar. n cele din urm,
ramificaiile sub form de arbusculi, situate n grosimea parenchimului cortical,
sunt, la rndul lor, digerate de celulele radiculare infectate. Aceasta sugereaz c,
108

n timp ce micorizele ectotrofe prezint particularitile unei simbioze adevrate,


cele endotrofe apar mai curnd ca o form de parazitism controlat (dup Pochon).
Micorizele ectoendotrofe sau peritrofe reprezint o form de tranziie,
caracterizat prin faptul c, pe lng aspectul ectotrof, reprezentat de dezvoltarea
abundent a ciupercii n rizosfer i la suprafaa rdcinii, se observ i
ptrunderea hifelor n celulele radiculare.
5.2.5. Interrelaiile ntre ciuperci i plante n cazul micorizelor
Prezena micorizelor are un efect favorabil asupra dezvoltrii plantelor, fapt
semnalat nc din 1886 de Kmenski. Aceast aciune se exercit printr-un
mecanism complex, constnd din mai multe aspecte:
favorizarea absorbiei apei i a elementelor minerale de ctre plant, deoarece
ciupercile de micoriz mresc suprafaa absorbant a rdcinilor, stimulnd,
astfel, creterea ramificaiilor i mpiedicnd suberificarea lor;
intensificarea activitii metabolice generale a plantei, creia ciuperca i
furnizeaz azotul sub form de acid glutamic; spre exemplu, n prezena azotului
amoniacal, speciile genului Pinus cu micorize au un coninut dublu de azot fa de
speciile care nu prezint micorize; aceasta se datoreaz faptului c srurile de
amoniu ptrund n cantitate mare n ciuperc, de unde trec, apoi, n rdcinile
plantei;
crearea posibilitii de folosire de ctre plant a unor substane greu solubile
care conin azot i fosfor, prin solubilizarea lor de ctre ciuperci;
absorbia substanelor nutritive necesare plantei din sol, prin intermediul hifelor
i transportul lor de ctre ciuperc n esutul cortical al rdcinii; datorit acestui
proces, plantele cu micoriz se dezvolt mai bine dect cele lipsite de ea.
relaiile n cazul micorizelor sunt benefice i pentru ciuperc, deoarece aceasta
preia din organismul plantei gazde diferite substane nutritive (hidrai de carbon,
vitamine, factori de cretere).

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)

1. Interrelaii ntre dou populaii microbiene pot fi:


a) indiferente sau neutrale
b) pozitive sau sinergice
c) negative sau antagonice

2. Micorizele reprezint simbioza dintre plante i:


a) ciuperci
b) bacterii
c) alge
109

3. Dup raporturile ce se stabilesc ntre ciuperc i plant, micorizele


sunt:
a ) ectotrofe.
b) endotrofe
c) ectoendotrofe
Rezultate corecte:
1 a, b i c ; 2 a; 3- a, b i c.

Lucrare de verificare nr. 5


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei cum influeneaz sistemul radicular al plantelor microflora solului
(5puncte).
2. Ce sunt micorizele? (5puncte).
BIBLIOGRAFIE (U.I. 5)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

110

Unitatea de nvare nr. 6:

SOLUL CA MEDIU DE EXISTEN PENTRU


MICROORGANISME
Cuprins (U.I. 6)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 6)...111


Instruciuni (U.I. 6).111
6.1. Alctuirea general a solului....................................................................112
6.2. Reacia solului..........................................................................................114
6.3. Formarea solului.......................................................................................114
6.3.1. Compoziia chimic a solului.........................................................115
6.3.2. Rolul microorganismelor n formarea i evoluia materiei
organice....................................................................................................116
6.3.3. Teoria microbiologic a formrii humusului...............................116
6.4. Populaia solului.......................................................................................118
Test de autoevaluare.119
Rezumat (U.I. 6) ...119
Lucrare de verificare nr. 6 .... .120
Bibliografie (U.I. 6) ..120

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I.6)


Obiectivele specifice aceastei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare la sol ca mediu de existen pentru
microorganisme. Dup finalizarea studiului acestei uniti de nvare, vei
dispune de competene pentru:
- descrierea alctuirii generale a solului
- descrierea formrii solului
-stabilirea rolului microorganismelor n formarea i evoluia materiei organice.
Instruciuni (U.I. 6)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de sol ca mediu de existen pentru
microorganism (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare
de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format
electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.

111

Solul reprezint stratul superficial afnat al litosferei care, ndelung i


continuu transformat prin aciunea formaiilor vegetale succesive, a agenilor
atmosferici i a altor factori naturali, n condiii caracteristice mediului geografic
din care face parte, a acumulat, treptat, elementele nsuirii specifice, numite
fertilitate, devenind, astfel, capabil s ntrein viaa plantelor superioare.
6.1. Alctuirea general a solului
n alctuirea solului intr trei pri i anume:
partea solid (mineral i organic);
partea lichid sau soluia solului;
partea gazoas sau aerul din sol.
I. Partea solid a solului
Partea mineral a solului deine ponderea cea mai mare (90-95%), ea
provenind din rocile pe care s-a format, prin transformarea acestora sub influena
proceselor de dezagregare i alterare.
Dezagregarea este fenomenul fizic de simpl mrunire a rocilor sub
influena variaiilor termice, a apei, vntului i organismelor. n urma procesului
de dezagregare rezult roci afnate, alctuite din fragmente i particule de diferite
dimensiuni. Acest complex de dezagregare nu reprezint nc solul, ci numai o
faz premergtoare n formarea acestuia. Totui, rocile mrunite posed o
nsuire nou fa de roca iniial, dur masiv i anume sunt afnate, ceea ce le
face permeabile pentru aer i ap.
Alterarea este procesul complex de modificare a mineralelor i rocilor, care
se manifest printr-o serie de procese simple de hidratare, dizolvare, hidroliz,
carbonare i oxido-reducere. Rezultatul alterrii const n faptul c o parte din
elementele minerale de nutriie a plantelor trec n forme asimilabile simple,
ndeosebi n sruri minerale. n acelai timp, ns, iau natere i compui minerali
compleci, de natura celor care intr n alctuirea argilelor (minerale argiloase).
Partea mineral a solului rezult n urma proceselor de dezagregare i n
timpul solidificrii propriu-zise, fiind reprezentat, n principal, prin sruri
(cloruri, sulfai, carbonai, azotai, fosfai etc.), oxizi i hidroxizi (fier, mangan,
aluminiu, siliciu, etc.), minerale argiloase, care formeaz argila din sol
principalul coloid mineral al solului, praf sub form de particule cu diametrul
cuprins ntre 0,2 i 0,002 mm i nisip cu particule cu diametrul ntre 2 i 0,2 mm.
La unele soluri se pot aduga i fragmente cu diametrul de peste 2 mm sub form
de pietri, pietre, bolovani.
Partea organic a solului deine un procent mai mic dect cea mineral,
circa 5-10% n greutate, dar are o importan esenial n formarea, evoluia i
proprietile solului. Aceasta este reprezentat de resturile vegetale i animale,
netransformate sau transformate sub aciunea microorganismelor. Principalul
constituent al prii organice din sol l reprezint humusul, materie organic
coloid-dispers, de culoare brun sau brun-negricioas.
112

Humusul este alctuit din compui de resintetizare biochimic a produselor


finale de descompunere a materiei organice, acizii humici, la care se pot aduga
produse intermediare de descompunere a materiei organice. Humusul, component
specific al solului, format sub aciunea microorganismelor asupra resturilor
organice, constituie principala rezerv de substan nutritiv pentru plante; el
determin cele mai importante proprieti ale solului. Ca o consecin a procesului
de alterare a prii minerale a solului i de descompunere a materiei organice, se
pun n libertate o serie de elemente ca: N, P, S, Mg, K, Ca, Fe, Al, Mn, Na etc.
Dintre acestea, o parte ajung n soluia solului, unde sunt asimilate de ctre plante,
iar o alt parte se fixeaz n sol prin fenomene de reinere, constituind un rezervor
de elemente nutritive.
II. Partea lichid a solului
Partea lichid sau soluia solului este reprezentat de apa din sol, n care se
gsesc dizolvate substane minerale i organice n stare de dispersie ionic,
molecular sau coloidal.
Importana fazei lichide a solului const n aceea c ea conine elemente
nutritive n form accesibil plantelor i microorganismelor, adic sub form de
sruri solubile, care disociaz n anioni i cationi.
n urma proceselor de reinere, pe suprafaa particulelor coloidale ale fazei
solide se creeaz o rezerv de elemente nutritive absorbite, care se elibereaz n
soluie, pe msura consumrii lor de ctre organismele vii. Cantitatea global de
sruri nutritive din soluia solului este, n general, suficient pentru satisfacerea
cerinelor trofice ale plantelor superioare i ale microorganismelor (1,1 2,5 g/l).
Din punct de vedere calitativ, n soluia solului se regsesc i numeroase
microelemente necesare pentru desfurarea n bune condiii a proceselor vitale
din sol: Br, Li, I, Co, Ni, Cr, Pb, V, Zn, Cu, Ag, Au.
Compoziia soluiei solului este variabil i depinde de condiiile climatice,
de activitatea microorganismelor etc. n ceea ce privete soluia solului, pentru
dezvoltarea microorganismelor, o importan deosebit o prezint activitatea
osmotic a fazei lichide. n general, presiunea osmotic de 3-6 atmosfere, pe care
o posed celulele majoritii microorganismelor, este suficient pentru dezvoltarea
normal a acestora n soluri, funcie de gradul de aprovizionare a acestora.
III. Partea gazoas a solului este reprezentat de aerul care ocup spaiile
libere, lsate de ctre ap. Compoziia aerului din sol se deosebete de cea a
aerului atmosferic prin raportul cantitativ ntre gazele obinute. Astfel, oxigenul se
gsete n concentraie mai mic, comparativ cu cel din atmosfer, deoarece este
consumat n activitatea microorganismelor i n procesul de respiraie al
rdcinilor plantelor superioare. Din aceast cauz, proporia de oxigen n aerul
solului scade, fa de circa 21% n atmosfer, la numai 10-18%.
Procentul de CO2 n aerul din sol este de cel puin 10 ori mai mare dect n
aerul atmosferic, datorit eliberrii sale sub aciunea de descompunere, exercitat
de microorganisme asupra substanelor organice (0,15-0,65% n sol, fa de 0,03%
n atmosfer).
113

Cantitatea de azot din aerul solului variaz puin, de la 76 la 79%, fa de


aerul atmosferic, unde este de 79%.
Consumul de azot molecular din aerul solului este foarte redus, el fiind
folosit numai de ctre unele microorganisme azotofixatoare. n unele soluri, n
special n cele mltinoase, n aerul solului se pot gsi i produsele gazoase ale
metabolismului bacterian ca: NH3, CH4, H2S i H.
Compoziia aerului din sol nu difer totui prea mult fa de cea a aerului
atmosferic, datorit schimbului permanent, care este n funcie de permeabilitatea
solului, aceasta din urm fiind determinat de porozitatea necapilar a acestuia.
6.2. Reacia solului
Dezvoltarea normal a microorganismului depinde nu numai de elementele
chimice necesare desfurrii normale a metabolismul acestora, ci i de unele
condiii fizico-chimice, dintre care cea mai important este reacia solului.
Majoritatea microorganismelor se dezvolt optim la un pH apropiat de
neutru (pH = 7), dar reacia solului variaz n funcie de tipul de sol, de la pH = 4
n podzoluri-soluri acide pn la pH = 9 n soloneuri, care sunt soluri srturoase.
Fiecare tip de sol are o reacie caracteristic, pe care i-o menine datorit
capacitii de tamponare, determinat, n principal, de complexul coloidal al
solului. n funcie de reacia i tipul de sol, microorganismele se gsesc rspndite
difereniat, n funcie de capacitatea lor de a rezista la reacii extreme, foarte acide
sau alcaline.
6.3. Formarea solului
Procesul de formare a solului ncepe imediat ce roca ia contact cu mediul
extern, cu agenii fizici i chimici, precum i cu aciunea microorganismelor vii.
Caracteristica principal a solidificrii const n acumularea materiei
organice i a humusului, care determin capacitatea de reinere a substanelor
nutritive. Elementele chimice eliberate n urma alterrii au tendina de a fi splate
(levigate) spre structurile mai adnci ale rocii dezagregate i alterate. Pe de alt
parte, organismele vii - plantele superioare i microorganismele - se opun acestui
proces, ducnd la reinerea i chiar la acumularea substanelor minerale n partea
superioar a solului sub form de materie organic i de humus.
n cursul solidificrii, se ntlnesc o serie de procese n urma crora ia
natere solul ca sistem complex i biologic, n care se desfoar permanent
fenomene contradictorii, de al cror echilibru depind proprietile solului. Astfel,
n toate solurile se desfoar procesul de alterare a unor minerale primare i
secundare, concomitent cu formarea altor minerale secundare caracteristice;
descompunerea resturilor vegetale i animale paralel cu sinteza acizilor humici;
levigarea substanelor n paralel cu bioacumularea; procesul de acumulare a apei
n sol i pierderea ei prin evaporare i prin transpiraia plantelor; absorbia
energiei solare ce duce la nclzirea solului, paralel cu iradierea i deci pierderea
acestei energii.
114

n felul acesta, intervenia organismelor vii asupra rocii dezagregate


marcheaz nceputul procesului de solidificare i aduce modificri importante n
marele circuit geologic, ce se desfoar n natur. Intervenia organismelor face
ca peste marele circuit geologic s se suprapun micul circuit biologic, care este
de sens contrar cu primul. Ca rezultat al acestui proces, descompunerile
substanelor organice i minerale sunt nsoite de intense procese de sintez
organic, efectuate de organismele vii. Astfel, se acumuleaz diferitele elemente
necesare nutriiei plantelor i, n special, azotul, element important, care lipsete
din rocile iniiale.
6.3.1. Compoziia chimic a solului
Raporturile ntre microorganisme i sol sunt determinate de compoziia
chimic a acestuia, n comparaie cu aceea a litosferei, a rocilor de origine.
Comparnd datele din coloanele tabelului prezentat mai jos, constatm
acumularea n soluri a unor elemente biogene eseniale, cum sunt, n primul rnd,
carbonul (n litosfer 0,22%, iar n soluri pn la 45%), i azotul (n litosfer
inexistent, n soluri pn la 1,5%). De asemenea, n solurile destinate agriculturii
se acumuleaz cantiti importante de magneziu, fosfor i alte elemente chimice,
indispensabile vieii, i care, n litosfer, exist n cantiti insuficiente.
Elementele chimice existente n sol se distribuie ntre cele trei pri ale
solului, solid, lichid i gazoas, care, mpreun constituie un sistem
microeterogen, organomineral, polidispers, structurat i poros.
Compoziia chimic a litosferei n % pn la adncimea de 10 m n unele
soluri
Denumirea
elementelor
Oxigen
Siliciu
Aluminiu
Fier
Calciu
Mangan
Sodiu
Potasiu
Hidrogen
Carbon
Fosfor
Magneziu
Sulf
Clor

Litosfer
46,29
27,61
7,81
5,40
3,77
2,68
2,36
2,40
0,21
0,22
0,10
0,08
0,03
0,01

Podzol
Cantitatea n %
69,7
13,4
4,3
0,7
1,1
1,2
3,0
2,2
0,39
1,1
-

115

Cernoziom
76,1
15,2
5,6
2,6
2,2
1,3
3,3
4,6
1,10
2,2
-

6.3.2. Rolul microorganismelor n formarea i evoluia materiei organice


Materia organic este reprezentat din resturile vegetale, care sunt
mineralizate de ctre microorganisme, dar, mai ales, prin humus, care este un
complex de substane amorfe n stare coloidal, rezultat din transformri
biochimice - descompuneri i sinteze - ale resturilor organice, vegetale i animale
sub aciunea microflorei solului.
Substanele organice vegetale i animale, ajunse n sol dup moartea
organismelor, nu sunt n ntregime supuse degradrii complete pn la compuii
finali (CO2, H2O, NH3). O parte din ele sunt transformate n produi noi, mai mult
sau mai puin rezisteni la descompunerea de ctre microorganisme substanele
humice. Acestea se acumuleaz n cantiti mari ca rezerve, condiionnd
proprietatea cea mai important a solului fertilitatea. n felul acesta, pe lng
aciunea lor de distrugere a substanelor organice vegetale i animale,
microorganismele contribuie la formarea unor tipuri noi de substane organice.
Datorit acestui fenomen, paralel cu dezagregarea enzimatic a substanelor
organice, microorganismele din sol efectueaz sinteza unor compui noi, care se
acumuleaz temporar n sol, formnd adevrate rezerve de C,N, P, S, K etc.,
absolut necesare vieii din sol.
Dar, microorganismele solului particip nu numai la formarea substanelor
humice de rezerv, ci contribuie i la descompunerea lor lent, prin care se asigur
plantelor elementele indispensabile pentru noile sinteze organice.
6.3.3. Teoria microbiologic a formrii humusului
Procesele de dezagregare i sintez, care au drept rezultat formarea
complexelor humice, se datoreaz aciunii bacteriilor aerobe i anaerobe, a
actinomicetelor i a ciupercilor microscopice.
Bacteriile anaerobe acioneaz asupra substanelor organice aflate sub form
de mase dense n profunzimea solului. Procesul este inhibat n momentul cnd
cantitatea de acid ulmic acumulat este att de mare, nct oprete dezvoltarea
microorganismelor respective i este reluat dup degradarea acestuia. n condiii
naturale, denaturarea acidului ulmic se produce dup aciunea frigului, iarna.
Datorit acestui fapt, sinteza anaerob a compuilor humici are un caracter
periodic, fiind mai activ primvara i vara i scznd n intensitate spre toamn i
iarn.
Acest proces reprezint forma cea mai important de acumulare a
substanelor humice n natur.
Sinteza aerob a substanelor humice se realizeaz n straturile mai
superficiale ale solului i cu condiia ca acumularea substanelor organice vegetale
s se fi fcut n masa afnat. Ea este efectuat de bacterii, n cazul resturilor de
plante ierboase, i de ciupercile microscopice, atunci cnd substana organic
provine din plante lemnoase. n urma acestui proces rezult acizi humici, care nu
omoar microorganismele, deoarece sunt neutralizai de NH3, format n paralel.
116

Compoziia chimic a humusului este variabil i heterogen, neputnd fi


definit prin nicio formul chimic; ea const din acizi ulmici i fulvici (70-80%)
i din reziduu insolubil (20-30%).
Coninutul bogat n N al humusului, n jur de 5% cu raportul C : N = 10:1,
denot caracterul su de produs de sintez. El conine, n special, acid ulmic (acid
humic brun), rezultat din aciunea bacteriilor anaerobe, i acid humic (acid humic
negru), produs de ciuperci.
Una dintre particularitile cele mai importante ale substanelor humice este
aceea de a fi mai stabile, n condiii termodinamice date, dect substanele
naturale din care s-au format. n acelai timp, ele sunt ntr-o permanent evoluie;
pe de o parte, pornind de la diferite substane organice animale i vegetale se
formeaz substane noi sub aciunea microorganismelor, iar pe de alt parte,
complexele humice sintetizate sunt mineralizate de microflora solului.
Datorit acestui proces continuu, formarea humusului se poate afla n
diferite stadii de evoluie, sub form de:
substane prohumice, capabile s agrege particulele de sol;
humus activ, cel mai important pentru fertilitate, care, prin descompunere,
formeaz uor substane nutritive pentru plante i reprezint aproximativ 1% din
greutatea solului;
humus stabil care cimenteaz agregatele de sol dar se descompune greu i nu
particip activ la nutriia plantelor;
humus inactiv, cu capacitate redus de mineralizare i fr rol n nutriia
plantelor sau n formarea structurii stabile a agregatelor de sol.
Humusul ndeplinete numeroase funcii de importan excepional, din
care se poate deduce rolul microorganismelor care particip la sinteza i
descompunerea sa. Astfel, humusul formeaz n sol rezerve imense de N, C, P, S,
K, Fe, care pot fi folosite dup mineralizarea prealabil. Dup Waksman,
cantitatea de substane organice sub form de humus depete cu mult pe cea
prezent n toate formele vii.
Humusul favorizeaz nutriia plantelor superioare, furnizndu-le substane
nutritive, rezultate din descompunerea sa treptat i lent de ctre
microorganisme.
Humusul influeneaz caracteristicile fizice ale solului, cruia i confer
structura granular i culoarea ntunecat, care favorizeaz absorbia razelor solare
i determina creterea temperaturii. De asemenea, reduce vscozitatea argilelor i
uureaz formarea de agregare care amelioreaz aerarea i drenajul solului,
mrind, n acelai timp, capacitatea de reinere a apei din sol.
Humusul influeneaz proprietile chimice ale solului, prin faptul c
menine echilibrul general ntre ionii adsorbii i cei dizolvai i d solului putere
tampon.
Prin participarea sa la sinteza i transformrile substanelor humice,
microflora solului ndeplinete un rol de o importan vital, deoarece, datorit
proprietilor amintite, humusul confer solului proprietatea sa de baz
fertilitatea care-l deosebete de roca steril.
117

Dup definiia dat de Thaer Humusul este produsul materiei vii i izvorul
acesteia sau dup cum afirm Waksman, Humusul este o rezerv i un
stabilizator al vieii organice pe pmnt.
6.4. Populaia solului
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
Macropopulaia solului este mprit n dou componente majore:
1. Macroflora solului este format din prile subterane ale plantelor
superioare (rdcini, tulpini i frunze ajunse n sol), care furnizeaz solului cea
mai important surs de materie organic. Rdcinile plantelor, prin eliminarea a
numeroase substane (n special enzime) n cadrul procesului de adsorbie, au un
rol important n modificarea concentraiei soluiei solului, intervenind, pe aceast
cale, n mod direct n activitatea microorganismelor. Datorit acestor condiii
specifice, numrul de microorganisme aflate n jurul rdcinilor (rizosfer)
depete cu mult pe cel aflat n restul solului.
2. Macrofauna solului cuprinde o diversitate mare de organisme, dintre care
amintim: rme (90-500 kg/ha), furnici, coleoptere, nematozi (circa 10 mii/mp),
viermi inelai i diverse vertebrate. Acestea, prin activitatea lor, mbogesc solul
n materie organic, ce va fi utilizat ulterior de ctre populaiile de
microorganisme.
Micropopulaia solului este reprezentat de microflor i microfaun.
1. Microflora solului constituie populaia cea mai important pentru viaa
solului. Ea este format din bacterii, cyanobacterii, ciuperci microscopice i alge.
Activitatea microorganismelor din sol poate fi determinat prin raportarea
numrului lor la unitatea de volum, de greutate sau de suprafa. Valoarea
absolut a unor microorganisme, raportat la un gram de sol, variaz ntre 1
milion-1 miliard de bacterii, ntre 5000 i 50000 la ciuperci, ntre 3000 i 30000 la
actinomicete i 500 i 5000 la alge (la adncimea de 2-5 cm).
2. Microfauna solului este constituit din protozoare monocelulare (ntre
100-1000 indivizi/g sol), dintre care majoritatea aparin clasei Flagellata
(Mastigophora). Dei aciunea lor este cunoscut, rolul protozoarelor n sol nu
este pe deplin clarificat.
Numrul microorganismelor din sol i componena lor sistematic constituie
un important criteriu practic n aprecierea activitii biologice a acestora dar
pentru o edificarea ct mai exact a acestei activiti este necesar i cunoaterea
activitii biochimice a microorganismelor care alctuiesc populaia solului.

118

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)

1. Humusul este alctuit din:


a) compui de resintetizare biochimic a produselor finale de
descompunere a materiei organice
b) acizii humici, la care se pot aduga produse intermediare de
descompunere a materiei organice.
c) rocile pe care s-a format, prin transformarea acestora sub influena
proceselor de dezagregare i alterare

2. Macrofauna solului cuprinde:


a) protozoare monocelulare
b) rme, furnici, coleoptere, nematozi
c) viermi inelai i diverse vertebrate
3. Solul este alctuit din urmtoarele pri :
a) partea solid (mineral i organic)
b) partea lichid sau soluia solului
c) partea gazoas sau aerul din sol

Rezultate corecte:
1 a i b ; 2 a i b; 3- a, b i c.

Rezumat (U.I. 6)
n alctuirea solului intr trei pri i anume:
partea solid (mineral i organic);
partea lichid sau soluia solului;
partea gazoas sau aerul din sol.
Procesul de formare a solului ncepe imediat ce roca ia contact cu mediul
extern, cu agenii fizici i chimici, precum i cu aciunea microorganismelor vii.
Procesele de dezagregare i sintez, care au drept rezultat formarea
complexelor humice, se datoreaz aciunii bacteriilor aerobe i anaerobe, a
actinomicetelor i a ciupercilor microscopice.
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
119

Lucrare de verificare nr.6


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Care este compoziia chimic a solului. (5 puncte)
2. Descriei procesul de formare al solului. (5puncte).

BIBLIOGRAFIE (U.I. 6)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

120

Unitatea de nvare nr. 7:

ROLUL MICROORGANISMELOR N CIRCUITUL


MATERIEI N NATUR
Cuprins (U.I.7)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 7)...121


Instruciuni (U.I. 7)122
7.1. Circuitul azotului......................................................................................122
7.1.1. Fixarea azotului molecular.............................................................124
7.1.2. Amonificarea..................................................................................132
7.1.3. Nitrificarea.....................................................................................134
7.1.4. Denitrificarea..................................................................................135
7.2. Circuitul carbonului..................................................................................135
7.2.1. Metabolismul carbonului mineral..................................................136
7.2.2. Metabolismul carbonului organic...............................................137
7.3. Circuitul sulfului.......................................................................................144
7.4. Circuitul fierului.......................................................................................146
7.5. Circuitul fosforului...................................................................................147
7.6. Circuitul potasiului...................................................................................149
7.7. Transformrile microbiene ale calciului.................................................149
7.8. Transformrile microbiene ale magneziului..........................................149
7.9. Transformrile microbiene ale microelementelor.................................149
7.9.1. Manganul........................................................................................150
7.9.2. Seleniul...........................................................................................150
7.9.3. Zincul.............................................................................................150
7.9.4. Cuprul.............................................................................................151
Test de autoevaluare151
Rezumat (U.I. 7) ..152
Lucrare de verificare nr. 7 .... ..153
Bibliografie (U.I. 7) ..153
Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 7)
Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare la rolul microorganismelor n circuitul
materiei n natur. Dup finalizarea studiului acestei uniti de nvare, vei
dispune de competene pentru:
- descrierea circuitului azotului i corbonului n natur.
- identificarea transformarilor micobiene ale micro i macroelementelor.

121

Instruciuni (U.I. 7)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate la rolul microorganismelor n
circuitul materiei n natur (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i
o lucrare de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei,
n format electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni
din sem. I.

7.1. Circuitul azotului


Azotul este un element esenial pentru existena vieii n biosfer, deoarece
este inclus n structura tuturor proteinelor i a acizilor nucleici. Dei este prezent
n natur n cantiti foarte mari, se gsete aproape invariabil n forme
inaccesibile direct, plantelor i animalelor.
Circuitul azotului n natur (Fig. 69) se desfoar pe parcursul a mai multor
etape, care implic desfurarea unor multiple activiti biochimice; unele au loc
n anaerobioz, iar altele n prezena oxigenului.
Aceste etape sunt:
I. Fixarea azotului molecular se poate realiza pe cale abiotic i biotic.
Pe cale abiotic, fixarea se realizeaz prin iradieri, descrcri electrice i
prin intermediul precipitaiilor.
Pe cale biotic, fixarea azotului molecular este un proces lent i continuu,
prin care, sub aciunea a peste 100 genuri de bacterii diferite, azotul gazos
atmosferic este convertit la forme fixe (NH4-, NO3-, NO2-), care sunt folosite de
plante i introduse n forme organice, utiliznd energia obinut prin fotosintez.
Bacteriile care particip la aceast fixare au fost grupate astfel:
bacterii fixatoare de azot molecular (N2) libere aerobe;
bacterii fixatoare de azot molecular (N2) libere anaerobe;
bacterii fixatoare de azot molecular (N2), care triesc n asociaie cu plantele.
n cazul celui de-al treilea grup, n funcie de relaia care se stabilete ntre
cei doi parteneri, ntlnim patru tipuri de simbioz:
simbioza Rhizobium leguminoase;
simbioza Actinomicetae neleguminoase;
simbioza asociativ;
simbioza foliar.
II. Amonificarea const n mineralizarea azotului proteic pn la amoniac (NH3).
III. Nitrificarea prezint dou trepte: nitritarea i nitratarea, n care are loc
oxidarea amoniacului (NH3) pn la nitrii (NO2-) respectiv nitrai (NO3-).
IV. Denitrificarea este procesul prin care are loc reducerea azotului nitric pn la
azot molecular, ncheindu-se, n acest mod, circuitul azotului.

122

Fig. 69 Reprezentarea schematic a principalelor etape ale circuitului azotului n natur


(dup Delviche, 1977).

Toate procesele desfurate pe parcursul celor patru etape sunt mediate


numai de bacterii, cu excepia unei etape premergtoare amonificrii, proteoliza,
n care pot aciona i microfungii.
n timp ce n ecosistemele naturale, circuitul azotului este un proces
echilibrat, n sensul c pierderile de azot din sol sunt compensate de procesele de
fixare, n sistemele supuse procesului de agricultur, pierderile depesc ritmul de
nlocuire.
Dac rezervele de azot din sol sunt limitate, fapt ce duce la apariia unor
frecvente dezechilibre ntre nevoia de azot i posibilitatea de a o satisface, din
contr, rezerva de azot atmosferic, este practic inepuizabil, calculele artnd c
aceasta ar putea asigura necesarul pentru cel puin 800.000 ani. Din pcate,
aceast imens cantitate este inaccesibil n mod direct organismelor vii i mai cu
seam plantelor superioare.
n cursul ultimilor decenii, datorit nevoilor crescnde de hran pentru o
populaie n permanent dezvoltare, cantitile de ngrminte chimice cu azot
aplicate au crescut continuu. Dei, o perioad de timp, ngrmintele chimice cu
azot au ndreptit speranele rezolvrii i pe viitor a satisfacerii nevoilor nutritive
pentru populaie, criza energetic a ultimilor ani i apariia unor efecte secundare
nedorite au impus reconsiderarea acestei posibiliti.
Azotul atmosferic este convertit industrial n amoniac (NH3), prin procedeul
Haber. Reacia are loc la temperaturi ridicate de cca.. 500oC i la o presiune de
300-600 atmosfere, ceea ce presupune un consum ridicat de energie de cca..
22000 kcal/kg.
123

n acelai timp, excesul de ngrminte chimice cu azot are efecte negative


asupra mediului i, uneori, asupra omului, prin produsele vegetale pe care acesta
le consum.
Creterea coninutului n protein la plante sub influena ngrmintelor cu
azot are loc n limita potenialului genetic al speciei sau soiului. De aceea, excesul
de azot duce la o serie de deranjamente i la acumularea de azot nitric n plante.
Aceste acumulri n plantele furajere sau alimentare provoac intoxicaii grave, ce
pot duce chiar la moartea individului.
La copii, nitraii sunt redui la nitrii, care, fiind absorbii de snge, reduc
capacitatea acestuia de a transporta oxigenul prin formarea metahemoglobinei.
La aduli, nitraii sunt convertii la nitrosamin, care, de asemenea, este
otrvitoare.
Folosirea n doze excesive a azotului duce la splarea acestuia n straturile
profunde ale solului i la mbogirea n nitrai a pnzei de ap freatic care poate
fi utilizat ca ap potabil sau la adpatul animalelor. De asemenea, utilizarea
intensiv a ngrmintelor chimice duce la creterea coninutului solului n unele
elemente (Zn, Pb, Ni, Cr etc.) care anterior se gseau n forme solubile doar ca
urme. Creterea concentraiei acestora peste o anumit limit are efecte toxice
asupra plantelor i microorganismelor (Davidescu, 1974).
Datorit crizei energetice i efectelor secundare ale ngrmintelor chimice
cu azot, o atenie tot mai mare se acord n ultimul timp mecanismelor naturale de
fixare a azotului n sol i, n special, a fixrii biologice.
Prin procesele de fixare biologic sunt introduse n sol cantiti foarte mari
de azot. Microorganismele fixatoare de azot posed un complex enzimatic,
denumit nitrogenaz, capabil s activeze tripla legtur a moleculei de azot, care
poate fi astfel redus la amoniac.
Procesul se desfoar la o temperatur relativ sczut, de 15-40oC, frecvent
ntlnit n sol i la presiune atmosferic normal. n funcie de numeroi factori,
dar mai ales de planta de cultur, cantitatea de azot atmosferic fixat biologic
variaz ntre limite foarte largi.
Legat de acest aspect, n anul 1971, Hank a sintetizat rezultatele din
literatura de specialitate pentru diferite ecosisteme, astfel:
- culturi de cmp 7-28 kg N/ha;
- angiosperme i alte plante neleguminoase 7-114 kg N/ha;
- leguminoase 73-865 kg N/ha;
- pdure 58-594 kg N/ha;
- puni 13-99 kg N/ha;
- ape 70-250 kg N/ha.
Fenomenul de fixare a azotului de ctre microorgansime a fost pus n
eviden n anul 1888 de ctre Berthelot. Acesta a urmrit, n paralel, variaia
azotului n vase cu sol nesteril i n vase cu sol steril, constatnd c, n solul
nesteril, coninutul n azot crete iar n vasele cu sol sterilizat nu.
7.1.1. Fixarea azotului molecular
124

1. Fixarea azotului molecular (N2) de ctre microorganisme libere aerobe


n anul 1901, Beijerinck reuete izolarea din sol a dou specii de bacterii
care au capacitatea de fixare aerob a azotului molecular. Ulterior, cercetrile au
evideniat existena i a altor specii capabile s realizeze acest proces.
Dintre cele mai cunoscute specii putem enumera:
- Azotobacter chroococcum;
- Azotobacter vinelandii;
- Azotobacter agile;
- Azotobacter insigne;
- Azotobacter macrocytogenes;
- Azotobacter mobile;
- Azotobacter fluminensis;
- Beijerinckia indica;
- Derxia gummosa;
- Rhodospirillum sp.;
- Rhodopseudomonas sp.
Dintre acestea, cele mai rspndite i mai cunoscute sunt cele din genul
Azotobacter.
Bacteriile din genul Azotobacter sunt rspndite n natur mai ales n
solurile cultivate, bogate n humus, cu reacie neutr i se gsesc rar n solurile
acide, podzolice, turboase i mltinoase. Morfologia lor este foarte variabil, n
funcie de condiiile de mediu, fapt ce explic descrierea la un moment dat a
numerose specii separate, care, ulterior, au fost considerate ca sinonime. Dintre
speciile genului Azotobacter, cea mai rspndit i mai eficace este Azotobacter
chroococcum.
Azotobacter chroococcum prezint o serie de aspecte morfologice
considerate ca fcnd parte dintr-un ciclu de evoluie corelat cu vrsta.
n funcie de vrsta coloniei, celulele apar difereniat:
1. Celulele tinere au aspect de bastonae groase de 2 x 4 m, cu capetele
rotunjite, izolate sau n perechi.
2. Celulele adulte sunt sferice sau ovale ca nite coci mari de 2 x 1,2 m,
coninnd numeroase granulaii, constituite din lipide, volutin, glicogen etc.
3. Celulele btrne, care apar n a 5-a zi de dezvoltare a culturii, sunt
aproape sferice i au dimensiuni mai mici de 1,5 x 1,3 m. n condiii
nefavorabile de mediu apar chitii.
4. Chitii sunt prevzui cu un perete gros, format din dou straturi, i apar
prin modificarea celulelor adulte sau a celulelor btrne. Acetia mai poart
numele de macrochiti. Citoplasma lor este constituit din protein concentrat.
Chistul este o form latent, de rezisten a germenului, care, sub aceast form,
se menine viabil mai multe luni sau chiar ani. Prin germinare, din chiti iau
natere celule tinere care reiau ciclul descris.
n condiii de cultur, pe medii lichide, Azotobacter formeaz un vl gros la
suprafa, albicios, care cade treptat la fund, formeaz un depozit dens albicios i,
care, mai trziu, devine brun-negru.
125

Pe mediile solide (Fig. 70) formeaz colonii lucitoare, la nceput incolore,


vscoase, cu tendina de scurgere prin glisare pe suprafaa mediului. Cu timpul,
acestea se coloreaz n brun-negru, datorit pigmentului melanic.

Fig. 70 Azotobacter chroococcum

Bacteria se dezvolt la temperatura cuprins ntre 9 i 35oC i la un pH ntre


5,8 i 8,5, fiind foarte sensibil la aciditate sub pH=5,8.
Este strict aerob, Gram negativ i oxideaz complet hidraii de carbon
pn la CO2, fr a produce n mediu metabolii intermediari. n condiii optime
fixeaz aproximativ 20 mg N2 pentru fiecare gram de glucoz oxidat.
Randamentul fixrii este variabil de la o tulpin la alta, dup natura sursei de
carbon. Deosebirile dintre diferitele tulpini constau n viteza aciunii lor, unele
fiind n stare s fixeze n 3 zile 100 % din concentraia final, n timp ce altele
realizeaz fixarea ntregii cantiti doar dup 12 zile.
2. Fixarea azotului molecular (N2) de ctre microorganisme libere anerobe
Fixarea anaerob a N2 a fost evideniat nc din 1893 de Winogradski, care
a reuit izolarea i cultivarea pe un mediu nutritiv lipsit de azot a speciei
Clostridium pasteurianum, specie mult rspndit n sol.
Ulterior, au fost descrise i alte specii anaerobe, care aparin genurilor
Desulfovibrio, Desulfatomaculum i Methanobacillus.
Clostridium pasteurianum (Fig. 71) face parte din grupul bacteriilor
butirice. Se prezint, n cazul formelor tinere vegetative, sub form de bastona
Gram pozitiv, cu capetele rotunjite, cu dimensiuni variabile, cuprinse ntre 1,5 i 8
x 0,8 i 1,3 m. Este o specie mobil, cu cili dispui peritrichi, adesea fuziform.
La celulele btrne apar forme de involuie, filamentoase sau cocoide, iar
coninutul celulelor este granulos i se coloreaz n violet cu soluie iodurat
Lugol, coninnd substane iodofile.
Bacteria prezint un spor central, cu diametrul de 1-1,3 m; este un
microorganism anaerob obligat, care se dezvolt n condiii optime la 20 - 30oC i
la un pH = 7,3 - 8,9.

126

Cultivat pe un mediu ce conine substane hidrocarbonate, dar lipsit de azot,


obine energie din fermentarea acestora i fixeaz N2 atmosferic. Cantitatea de
azot fixat este proporional cu cantitatea de glucoz fermentat i este de
aproximativ 3 mg pe gramul de glucoz consumat.
Randamentul fixrii azotului de ctre Clostridium pasteurianum este maxim
cnd este asociat cu bacteriile celulolitice anaerobe, care pun la dispoziie hidrai
de carbon solubili, ca glicerina sau manita, care se gsesc n sol n concentraii
mici.
Fixare anaerob a N2 are un rol esenial n solurile puin aerate sau invadate
de ap (mlatini, orezrii), unde Clostridium pasteurianum este principalul fixator
de azot.
n ceea ce privete proporia dintre cele dou specii descrise, Fedorov arat
c, n soluri Azotobacter
chroococcum a fost gsit
numai n 30 % din cazuri,
n
timp
ce
Clostridium
pasteurianum n 70 %,
avnd
deci
o
preponderen mai mare.
3. Bacterii fixatoare de
azot
molecular
(N2),
care
triesc n asociaie cu
plantele
Fig. 71 Clostridium pasteurianum
Simbioza Rhizobium
leguminoase
n solurile cultivate cu leguminoase, n afar de fixarea azotului atmosferic
(N2) de ctre bacteriile libere aerobe sau anaerobe, se mai produce i fixarea de
ctre microorganismele simbiotice care triesc n nodozitile de pe rdcinile
acestor plante.
Dei formarea de nodoziti pe rdcinile plantelor leguminoase se cunoate
din antichitate, fenomenul era considerat ca un proces patologic, tumoral sau
datorat unor nepturi de insecte. Abia n 1865, Voronin a descris nodozitile i
corpusculii ce-i conin, iar n 1887, Beijerinck a izolat i descris bacteriile pe care
le produc.
Biologia bacteriilor de nodoziti
Bacteriile care produc nodoziti la leguminoasele cu care triesc n
simbioz aparin genului Rhizobium care cuprinde mai multe specii distincte, cu
capacitatea de a infecta numai anumite plante gazde (Fig. 72), dup cum urmeaz:
- Rhizobium leguminosarum mazre, bob, linte;
- Rhizobium trifolii trifoiul;
- Bradyrhizobium japonica (sin. Rhizobium japonicum) soia;
- Rhizobium phaseoli fasolea;
- Rhizobium lupini lupinul;
127

- Rhizobium meliloti lucerna.

Fig. 72 Nodoziti formate de Rhizobium sp. la plantele leguminoase

Activitatea diferitelor specii de Rhizobium este variabil de la o specie la


alta, n funcie de dou proprieti biologice importante: infeciozitatea, care
reprezint capacitatea de a produce nodoziti, i eficiena, care se refer la
capacitatea de a fixa azotul molecular (N2).
Bacteriile ajung n zona rizosferic la nivelul periorilor absorbani, fiind
stimulate de secreiile radiculare, care au rol chimiotactic pozitiv, dup care are
loc un proces de recunoatere a celor doi parteneri. Recunoaterea se realizeaz
prin intermediul unor substane specifice, denumite generic lectine. Dup legarea
ireversibil are loc deformarea periorului radicular, care ia form de crlig, sub
aciunea unor substane eliminate de bacterii.
Ulterior, peretele periorului absorbant este dizolvat sub aciunea unor
enzime secretate de bacterii i acestea ptrund n interior, formnd un cordon de
infecie care ajunge n celulele parenchimului cortical. Cordonul este format la
nceput dintr-o matrice mucoas n care se gsesc bacterii i care, treptat, se
acoper cu o teac celulozic. Acest manon este constituit din secreii ale ambilor
parteneri.
Pe msur ce cordonul infecios nainteaz, bacteriile se multiplic continuu
i sunt eliberate fie prin unele fisuri ale acestuia, fie prin extremitatea sa distal i
se aaz la periferia celulelor unde se multiplic activ. n acelai timp, celulele
cortexului radicular infectat se multiplic rapid, transmind infecia bacterian
celulelor fiice.
Rezultatul acestei proliferri este nodozitatea, care la nceput este inclus n
cortexul radicular, apoi l deformeaz pe msur ce crete i n cele din urm l
rupe. Ea apare ca rezultat al invadrii i multiplicrii bacteriilor n celulele gazde
i al aciunii unor substane stimulente de tipul auxinei (acid indolilacetic)
secretate de bacterii (Fig. 73).
La leguminoasele erbacee anuale nodulul este o structur efemer, n timp
ce la cele perene dureaz 5-6 ani, dup care sufer modificri degenerative care
duc la necrozarea i detaarea sa de rdcin.

128

Plant leguminoas

Perior absorbant

Apariia
nodozitilor

Nodozitate

Bacterii din Rhizobium sp.


Bacteroizi
Cordon infecios

Legarea ireversibil a
bacteriilor de periorii
absorbani; deformarea
periorului radicular i
ptrunderea bacteriilor
n celule.

Bacteriile se transform n
bacteroizi, iar celulele i
mresc dimensiunile.

Fig. 73 Fixarea simbiotic a azotului molecular n nodozitile leguminoaselor


(dup Tortora i colab., 1992).

S-a constatat c n procesul fixrii N2 nu toate nodozitile sunt la fel de


active, ele mprindu-se n dou categorii:
Nodozitile "eficiente" sunt relativ puin numeroase i se formeaz, mai
ales, pe rdcinile principale; sunt mai voluminoase i au o suprafa neted sau
rugoas. Aceste nodoziti conin un pigment rou, de natur proteic, numit
leghemoglobin (hemoglobina leguminoaselor).
Nodozitile eficiente au o structur caracteristic, fiind constituite din mai
multe regiuni:
- regiunea periferic este reprezentat de cortexul nodozitilor, format din
mai multe straturi de celule, compacte, cu rol de protecie;
- regiunea meristematic este situat n regiunea distal a nodozitii, fiind
format din celule diploide neinfectate i asigur creterea nodozitilor prin
diviziune;
- regiunea central este alctuit din celule poliploide, ncrcate cu
bacteroizi i prezint trei zone distincte:
a. zona de invazie, situat sub meristem, format din celule neinfectate i
celule mrite, infectate;
b. zona simbiotic ocup poriunea cea mai mare din nodoziti i prezint
dou subzone:
- subzona simbiotic timpurie, cu celule ce conin bacterii care nc
mai prolifereaz;
- subzona simbiotic tardiv, conine celule mrite pline cu bacterii
care nu mai prolifereaz numite bacteroizi. Este zona de fixare activ
a azotului molecular (N2).
129

c. zona de senescen, corespunde celulelor vegetale i bacteroizilor n curs


de degenerare sau moarte.
Nodozitile "neeficiente" sunt mai numeroase, mai mici, cu suprafaa
neted i sunt rspndite pe tot sistemul radicular. Infecia lor este foarte limitat,
coninnd foarte puine bacterii. Activitatea lor dureaz numai cteva zile, iar fa
de celelalte sunt nepigmentate.
Mecanismul simbiozei plant-bacterie
Bacteriile simbiotice iau energia necesar asimilrii azotului molecular prin
procedee de degradare a substanelor hidrocarbonate, furnizate de planta gazd.
La rndul lor, bacteriile asimileaz N2 atmosferic pn la stadiul de acid aspartic,
care este preluat de plant. Aceasta, prin transaminare enzimatic n prezena
acidului piruvic, sintetizeaz alanina. n continuare, planta gazd sintetizeaz
ceilali aminoacizi, prin transaminare, pornind de la alanin i diferii acizi
cetonici.
Leghemoglobina este singurul reprezentant al hemoglobinelor din regnul
vegetal; aceasta apare n stadiul activ al fixrii, numai n nodulii eficieni, aflai la
maturitate, ca rezultat al simbiozei ntre bacterii i leguminoase. n acest sens,
bacteriile aduc nucleul "hem", iar planta "proteina". Pigmentul nu poate fi
sintetizat separat nici de bacterii, nici de planta gazd i fixarea N2 este
proporional cu concentraia pigmentului din nodoziti.
Simbioza Frankia sp. - neleguminoase (Actinorizele)
Actinorizele reprezint asociaii simbiotice fixatoare de azot molecular (N2)
la aproximativ 200 specii de angiosperme, care sunt plante leguminoase
caracteristice zonelor cu deficit de azot.
Bacteriile care triesc n simbioz cu aceste plante aparin genului Frankia,
fam. Frankiaceae, ord. Actynomycetales. Cele mai cunoscute genuri de plante n
Romnia sunt : Hippophae (Fig. 74) i Elaeagnus.
Formarea nodozitilor
Modul de recunoatere ntre cei doi parteneri i infecia sunt asemntoare
ca la simbioza dintre bacteriile genului Rhizobium i plantele leguminoase.
Evoluia procesului infecios determin apariia unor nodoziti laterale pe
suprafaa rdcinilor. Formaiunile simple originale au o asemnare extern
evident cu nodozitile de leguminoase. Dup 10-15 zile, pe suprafaa nodulului
simplu originar apar lobi noi, situai n partea apical. Repetarea acestui proces de
ramificare i producerea anual de noi noduli pe rdcini duce la apariia unei
grupri compacte cu aspect coraloid, fiecare lob reprezentnd o nodozitate
individual.

130

Fig. 74 Simbioza Frankia sp. cu rdcinile de Hippophae rhamnoides.

Importana deosebit a actinorizelor decurge n primul rnd din faptul c


cele mai multe plante gazd sunt specii pionier. Ele populeaz terenurile cu deficit
mare de azot, terenurile mltinoase, solurile srace, dunele de nisip, pietri,
regiuni subalpine, zone de deert.
n al doilea rnd sunt importante prin larga rspndire a plantelor gazd,
prezente n regiunile arctice, temperate, subtropicale, tropicale i de la regiunile de
es pn la cele subalpine.
Simbioza asociativ
Prima semnalare a fixrii azotului de ctre microorganisme asociative a fost
fcut n anul 1974 (Fig. 75). n Romnia, prima semnalare a fost realizat n anul
1980, de ctre Hera.
Cercetrile efectuate au pus n eviden existena mai multor specii de
bacterii ale genurilor Azospirillum, Bacillus i Klebsiella, care triesc n asociaie
cu rdcinile unor graminee. Astfel, au fost identificate urmtoarele simbioze
asociative:
- Azospirillum lipoferum - porumb;
- Azospirillum brasilense - gru, orez;
- Bacillus macerans - porumb;
- Klebsiella pneumoniae - Poa pratensis.
Fixarea asociativ este mai rspndit de aproximativ 5 ori n zonele
tropicale fa de zona temperat.
Simbioza foliar
Simbiozele foliare au fost descrise pentru prima dat n anul 1902, de ctre
Zimmermann, la reprezentanii a trei familii de plante superioare, rspndite n
zonele tropicale i subtropicale: Rubiaceae, Myrsinaceae (i Dioscoreaceae.
Astfel, frunzele mai multor specii poart nodoziti superficiale, cuprinznd
bacterii. Cei mai mari noduli ating dimensiunile unei gmlii de ac (500 - 2000
m n diametru), pot fi cilindrici sau sferici i sunt localizai n funcie de gen i
specie, pe lamin, nervura median sau pe peiol.
Bacteriile ptrund prin ostiolele stomatelor i se multiplic apoi n mezofil.
Aceti germeni care iniial au form de bastonae i devin apoi claviformi sau
ramificai, au fost denumii din 1912, de ctre Faber, Mycobacterium
131

rubiacearum, iar de ctre ali autori, drept specii de Flavobacterium sp. sau de
Klebsiella sp.

Fig. 75 Simbioz asociativ

7.1.2. Amonificarea
Substanele organice azotate, reprezentnd 99 % din rezervele totale de N2
din sol, constau din rezerve humice i din ali compui acumulai n mod natural
n sol prin procesul de fixare biologic a N2 i prin cel de degradare a resturilor
organice vegetale i animale, a ngrmintelor verzi i a blegarului.
Celulele bacteriene reprezint ele nsele o mas de substan organic,
predominant proteic, de aproximativ 6 t/ha, la care se adaug circa 20 de tone,
reprezentate de restul microflorei i microfaunei. Dac acest N2 organic ar rmne
ca atare, rezervele de N2 accesibile plantelor s-ar micora n fiecare an i nu ar mai
permite creterea plantelor.
n mod normal, ns, aceste substane sufer un proces de mineralizare, la
sfritul cruia sunt aduse n stare de amoniac (NH3).
Procesul de amonificare propriu-zis este precedat de descompunerea
moleculelor proteice prin hidroliz, cu ajutorul proteazelor extracelulare, eliberate
de numeroasele specii de microorganisme aerobe i anaerobe, dup formula
general:
protein

H 2O

peptone

H2O

proteinaze

peptide

H2O

aminoacizi

peptidaze

Aminoacizii rezultai din aceast degradare ptrund n interiorul celulelor


bacteriene, unde sufer un proces de dezaminare, din care rezult amoniac (NH3)
i acidul organic corespunztor. Se ntlnesc mai multe tipuri de dezaminare i
anume:
132

1. Dezaminarea hidrolitic
2. Dezaminarea hidrolitic i decarboxilare
3. Dezaminarea reductoare
4. Dezaminarea reductoare cu decarboxilare (anaerob)
5. Dezaminarea oxidativ cu decarboxilare
6. Dezaminarea cu desaturare.
Din asemenea reacii, n afar de amoniac (NH3), pot rezulta acizii: acetic,
formic, propionic, butiric, valerianic. n funcie de condiiile de mediu i natura
microflorei, aceti acizi pot fi oxidai complet la CO2 i H2O (n mediul aerob),
acumulai ca atare, transformai n alcooli.
Amonificarea n sens strict poate fi definit, deci, ca un proces biologic n
care se elibereaz n sol amoniac (NH3), ca rezultat al aciunii microflorei solului
asupra aminoacizilor, rezultai din descompunerea substanelor proteice. n acest
sens, nu este inclus n amonificare eliberarea de NH3 sub aciunea micoflorei
temporare de putrefacie.
n acest proces, NH3 poate fi refolosit ca atare de o serie ntreag de
microorganisme. Cea mai mare parte din el sufer n continuare o transformare
absolut necesar pentru viaa din sol, n forme accesibile plantelor, iar restul poate
fi fixat n sol, mai ales n soluri acide sau se evapor n atmosfer.
Microflora capabil s produc amonificarea substanelor proteice este
numeroas, diferit i acioneaz n timp, dup cum urmeaz:
La nceputul procesului intervin bacterii obligat aerobe, cum sunt: Bacillus
cereus var. micoides, B. subtilis, B. thermoproteolyticus, specii nesporulate, ca
Serratia marcescens, Arthrobacter sp. etc. i specii facultativ anaerobe, cum sunt:
Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, Escherichia coli, Sarcina lutea etc.
Dup 2-3 zile, intr n aciune specii obligat anaerobe, cum sunt: Clostridium
putrefaciens, Clostridium perfringens i unele actinomicete, ca Streptomyces
violaceus i Micromonospora chaleea, care ncep s predomine i fac ca degajarea
de NH3 s fie maxim.
ncepnd cu ziua a 4-a, mediul este invadat de mucegaiuri i degajarea de
amoniac (NH3) descrete, datorit faptului c acestea folosesc amoniacul pentru
sinteza proteinelor proprii i produc mult acid, care neutralizeaz amoniacul.
Hidroliza ureei este realizat de un grup numeros de microorganisme,
capabile s produc enzima ureaza. n acest grup ntlnim specii din genurile:
Achromobacter, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Pseudomonas,
actinomicete i microfungi filamentoi. La acestea se adaug grupul
urobacteriilor, caracterizate prin rezistena la concentraii mari de uree i pH
alcalin dar i prin capacitatea de a elibera cantiti mari de NH3. Din grupa
urobacteriilor fac parte: Bacillus (Urobacillus) pasteuri, Micrococcus ureae,
Planosarcina ureae etc.
Activitatea amonificatoare a urobacteriilor este foarte important, deoarece
ureea conine 47 % azot, care ar fi altfel neutilizat de plante. Cantitatea de uree
eliminat n natur este mare, atingnd cteva zeci de milioane de tone pe an. Se
estimeaz c populaia uman ar elimina n 24 ore circa 15.000 t azot ureic, iar
animalele circa 1.500.000 tone. La aceste cantiti se mai adaug ngrmintele
133

cu uree, aplicate prin tehnologiile actuale sub form de cianamid de calciu. Acest
compus, fabricat din N2 din aer i carbur de calciu, nu este asimilabil de ctre
plante. Compusul sufer n sol unele transformri abiotice i biotice enzimatice
pn la amoniac.
7.1.3. Nitrificarea
Nitrificarea este un proces de oxidare a amoniacului (NH3) i a altor forme
reduse ale azotului anorganic eliberate n sol n cursul procesului de amonificare
n nitrai, care reprezint forma asimilabil pentru majoritatea plantelor verzi.
n acelai timp ns, nitraii reprezint i forma sub care azotul din sol este
pierdut deoarece, fiind solubili, sunt splai de ploaie sau redui la NH3, nitrii sau
chiar la azot molecular (N2) prin denitrificare.
Natura biologic a acestui proces a fost demonstrat prin suprimarea sa n
urma sterilizrii solului prin nclzire la 110oC sau prin tratarea cu vapori de
cloroform. n laborator s-a demonstrat c procesul se desfoar n dou faze:
a. Nitritarea reprezint procesul de oxidare a amoniacului pn la nitrii (NO2-).

NH3 + O2

NO2- + 3H+ + 2e-

b. Nitratarea reprezint procesul de transformare al nitriilor (NO2-) pn la


nitrai (NO3-).

NO2- + H2O

NO3- + 2H+ + 2e-

Microorganismele nitrificatoare sunt autotrofe chimiosintetizante, care i


procur, prin reacii chimice oxidative, energia necesar pentru producerea
substanelor celulare proprii.
Ele sunt aerobe stricte, rspndite, practic, n toate tipurile de sol i folosesc
ca surs de carbon carbonul mineral din CO2 i carbonai, iar ca surs de azot,
amoniacul sau nitriii.
ntre bacteriile nitroase sau nitrit bacterii putem cita: Nitrozomonas
europaea, Nitrosococcus oceanus, Nitrosospira briensis i Nitrosolobus
multiformis, care transform srurile amoniacale n nitrii.
Bacteriile nitrice (nitrat bacteriile) frecvent ntlnite sunt: Nitrobacter
Winogradskii, Nitrospira gracilis i Nitrococcus mobilis, care realizeaz nitratarea
ce const n oxidarea nitriilor pn la nitrai.
Nitrificarea, care reprezint a III-a faz a circuitului azotului n natur, este
un proces de importan excepional, deoarece aduce substanele azotate n forma
cea mai uor accesibil plantelor. De altfel, s-a observat c, n general, numrul
microorganismelor nitrificatoare este proporional cu fertilitatea solului, putnd
ajunge n solurile fertile pn la un milion de bacterii pe gramul de sol. Numrul
mare de nitrificatori din solurile fertile, comparativ cu solurile nelenite, se
datoreaz i faptului c primele sunt lucrate i, deci, bine aerate.

134

7.1.4. Denitrificarea
Nitraii (NO3-) acumulai n sol, ca rezultat al procesului de nitrificare, sunt,
n parte, consumai de plantele superioare, iar o cantitate variabil este splat de
apele de infiltrare i iroire. Nitraii pot fi folosii i de microorganisme, fie c
sunt asimilai n cursul proceselor de sintez a protoplasmei acestora (asimilarea
nitriilor), fie c sunt redui pentru oxidarea unei substane organice sau minerale.
Denitrificarea reprezint un proces care nchide circuitul prin ntoarcerea
azotului molecular (N2) n natur.
Reducerea nitrailor n procesul de denitrificare se face fie pn la N2 sau
amoniac (NH3), fie pn la stadii intermediare ca nitrii (NO2-), acidul hiponitros
(HNO3-) etc. Condiiile optime de producere ale acestui proces sunt realizate n
solurile saturate cu ap i n structurile profunde n care pot aciona mai multe
grupuri de microorganisme. Astfel, bacteriile denitrificatoare propriu zise, ce
reduc nitraii (NO3-) la azotul atmosferic (N2), sunt: Pseudomonas stutzeri i
Pseudomonas denitrificans.
Dintre microorganismele din flora general a solului, capabile s reduc
nitraii (NO3-) la nitrii (NO2-), sunt Bacillus megaterium, Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa etc., precum i unele bacterii sulfuroase ca:
Thiobacillus denitrificans.
Semnificaia procesului de denitrificare este nc controversat, acesta fiind
considerat de unii autori ca un fenomen patologic, inconstant i relativ rar n
condiii naturale ale solurilor de cultur. Este sigur c reducerea nitrailor pn la
N2 gazos reprezint, pentru solul respectiv, o pierdere real care poate ajunge pn
la 120 kg N2/ha/an, cu toate c o parte din N2 degajat poate fi preluat de fixatorii
de N2 anaerobi, cum sunt: Clostridium pasteurianum.
n acelai timp, reducerea incomplet, pn la stadiile intermediare, de nitrii
i NH3, este mai puin duntoare pentru fertilitatea solului respectiv deoarece
NH3 poate fi folosit de unele microorganisme heterotrofe, n timp ce nitriii sunt
preluai de nitratbacterii i reoxidri n nitrai.

7.2. Circuitul carbonului


Dac a fost relativ uor s se realizeze o descriere destul de schematic a
ciclului azotului n sol, pentru circuitul carbonului nu este la fel de simplu,
deoarece, acesta din urm nu are verigile bine individualizate ca ale primului.
Mai nti, trebuie s artm c sursele de carbon introduse n sol sunt
numeroase: carbonul mineral al CO2 atmosferic i carbonaii telurici, urmeaz
apoi carbonul organic al vegetalelor i animalelor sub forme multiple, de la
glucide simple pn la substane polimerizate ca celuloze, sau cu structuri
complexe, ca lignina.
Metabolismul acestor forme diverse este mult diferit n sol din mai multe
cauze i anume:
datorit structurii substanelor carbonate;
135

datorit florei multiple zimogene, care acioneaz asupra acestor substane.


Aceste diferene se traduc prin viteza de atac diferit i prin produii de
metabolism intermediari obinui. Dac produii finali ai oxidrii i mineralizrii
carbonului organic sunt n mod constant CO2 i H2O (i metanul, CH4, n condiii
de anaerobioz), produsele intermediare sunt foarte variate, prezentndu-se sub
form de acizi organici i zaharuri mai mult sau mai puin complexe.
De fapt, mineralizarea carbonului organic este, n mod excepional, realizat
ntr-o singur etap i, ca regul general, numeroase grupuri de bacterii i
ciuperci intervin n mod succesiv pentru a ajunge la produse simple terminale.

Fig. 76 Circuitul carbonului n natur (www.wikipedia.com)

Acest ciclu al carbonului (Fig. 76) este complicat nc prin faptul c


substanele hidrocarbonate sunt totdeauna asociate n proporie variabil cu
substane azotate (proteice), lipide, precum i cu lignina, cerurile, rinile,
taninurile etc. Proporia relativ a acestor diverse substane modific n mod
profund metabolismul produilor hidrocarbonai.
Metabolismul mai variaz i n funcie de structura fizic i chimic a
solului, de clim (temperatur, umiditate), de sistemul de cultur etc.
Ultimul factor ce complic situaia este acela c, n acelai timp, cnd
substanele hidrocarbonate sunt degradate, microorganismele realizeaz i sinteza
pentru propriul lor corp a unor produi (ex. hemiceluloza).
Este ca atare dificil de tiut care sunt produii intermediari de degradare i
care sunt cei de sintez. n orice caz, att unii, ct i alii se pot combina pe cale
chimic sau fizic ntre ei, precum i cu ali compui din sol pentru a forma
substanele de rezerv humic.
Pentru o mai clar prezentare a problemei, se va lua n considerare mai nti
metabolismul carbonului mineral i apoi al celui organic.
7.2.1. Metabolismul carbonului mineral
136

Se tie c majoritatea bacteriilor au nevoie pentru metabolismul propriu de


gazul carbonic (CO2), dar acesta intr n ciclul biologic n cantiti relativ mici.
Exist grupri fiziologice de bacterii care nu pot metaboliza dect carbonul
mineral, cum sunt autotrofele sau litotrofele, care joac un anumit rol n sol.
ntre acestea, n primul rnd, sunt bacteriile ce posed pigment asemntor
cu clorofila (bacterioclorofil) i algele care posed clorofil i care sunt
organisme fototrofe. Metabolismul acestora este asemntor cu cel al plantelor
superioare, energia fiind furnizat de ctre radiaiile luminoase.
Sunt apoi bacteriile lipsite de pigment, de tip clorofilian, care i iau energia
din oxidri ale substanelor minerale reduse (n mod esenial NH3 i SH2); aceast
energie le permite s reduc CO2 i s metabolizeze carbonul, fiind organisme
chimiolitotrofe. Printre ele se afl bacteriile nitrificatoare i unele care intervin n
circuitul sulfului i al fierului. Cu ajutorul carbonului mineral metabolizat cu apa
i cu substanele minerale luate din sol, aceste autotrofe realizeaz sinteza
protoplasmatic, triesc, respir i, ca urmare, elimin CO2; n felul acesta, ciclul
mineral al carbonului se ncheie.
Dac importana teoretic a metabolizrii carbonului mineral este foarte
mare, din punct de vedere cantitativ nu are dect un rol restrns, comparativ cu cel
al circuitului organic, ce provine de la vegetale i animale.
7.2.2. Metabolismul carbonului organic
Carbonul organic are, n principal, origine vegetal, fiind introdus n sol prin
procese multiple i sub forme variate. Prin procese naturale este introdus sub
form de esuturi vegetale moarte, rdcini, frunze, care ajung n sol odat cu
moartea plantelor. Prin procese artificiale este introdus n sol prin ncorporarea
unor vegetale parial metabolizate, sub form de gunoi natural i artificial.
Carbonul organic de origine animal este din punct de vedere cantitativ mai
puin important, fiind format din vieuitoarele faunei telurice dup moartea
acestora, sub form de cadavre. n acest caz, descompunerea se realizeaz prin
fenomene de putrefacie, unde rolul carbonului este foarte slab, datorit raportului
C/N foarte sczut.
Ca atare, se va lua n considerare n mod esenial compoziia esuturilor
vegetale care reprezint o mas foarte nsemnat de materie organic n natur.
Plecnd de la carbonul mineral atmosferic, de la ap i srurile din sol, vegetalele
au fcut sinteza constituenilor celulari. n ceea ce privete substanele carbonate,
esuturile vegetale sunt constituite din:
glucide ca monoze (hexoze-pentoze); dioze trioze, polioze, amidon, inulin,
dextrin, hemiceluloz;
glucozizi ca acizi organici fici i volatili; grsimi, ceruri i rini; lignin.
Principalii constitueni din diferitele produse vegetale sunt prezentai n tabelul
urmtor.

137

Constituenii esuturilor vegetale


Substana
Fn
Paie de ovz
Paie de gru
Porumb ciocli
Porumb boabe

Celuloza
%
28,50
25,43
37,27
37,67
30,56

Pentozani
(hemiceluloze)
13,52
21,33
21,67
31,50
23,54

Lignina
%
28,25
20,40
21,21
14,70
15,13

Grsimi i
cear
2,00
2,02
0,67
1,37
0,77

Proteine
%
9,31
4,30
3,00
2,11
3,50

Mai important din punct de vedere agrobiologic dect clasificarea chimic


a produilor hidrocarbonai este aceea care ine seama de solubilitatea acestora, de
care este legat viteza de descompunere din sol. Avem, din acest punct de vedere,
clasificarea urmtoare:
substane foarte solubile, ntre care sunt cuprinse glucidele simple i acizii
organici;
substane puin solubile, cum este hemiceluloza;
substane insolubile, cum sunt: amidonul, celuloza, lipidele, cerurile i rinile;
dintre acestea lignina formeaz o substan aparte, datorit gradului su de
rezisten la agenii biologici i care are tendine de a se acumula n sol.
Constituenii hidrocarbonaii mai importani din punct de vedere cantitativ
ai esuturilor vegetale, redai n % de substan uscat, sunt prezentai n tabelul
urmtor, din care reiese c aceast compoziie este variabil n funcie de
dezvoltarea plantei, adic de vrst.
Compoziia esuturilor la secar n funcie de vrst
Stadiul de
cretere
30 mm
nspicare
nflorire
Maturitate

Celuloz
%
18,06
26,9
30,59
36,26

Pentoze
%
16
21,18
22,71
22,90

Lignin
%
9,9
11,8
18
17,1

Grsimi i
ceruri
2,4
2,6
1,7
1,26

N total
%
2,5
1,76
1,01
0,24

n decursul creterii cerealelor, se produce o sporire a proporiei de celuloz,


hemiceluloz i lignin, corelat cu scderea proteinelor i, mai ales, a fraciunilor
solubile. Ca urmare, esuturile plantelor mature vor fi mai dificil i mai lent
descompuse n sol comparativ cu cele provenite de la plantele tinere.
Concentrarea n substane superioare polimerizate este nc i mai
accentuat la plantele lemnoase, unde proporia medie a acestei componente este
urmtoarea:
- Celuloz = 45 - 55%;
- Grsimi, ceruri i rini = 3 - 5%;
- Hemiceluloze = 20 - 30%;
- Lignin = 25 - 30%;
- Proteine = 0,5 - 1%.
Lemnul este dificil fermentescibil n sol i rolul ligninei este, din acest punct
de vedere, important prin mbogirea acestuia cu materie organic. Legturile
acestor produse cu celuloza i gruprile uronice ale hemicelulozelor fac aceste
138

glucide foarte rezistente la aciunea microbilor din sol. n continuare, vor fi


prezentate, succesiv, procesele de degradare biologic n sol ale diverilor
constitueni hidrocarbonai i ale esuturilor vegetale n funcie de solubilitate, de
la glucidele simple, substanele solubile n ap, hemiceluloza, amidonul, peptina,
celuloza, lignina etc.
I. Degradarea glucidelor simple i a substanelor solubile n ap
Dup ce resturile de esuturi vegetale sunt ncorporate n sol, glucidele i
substanele solubile sunt primele atacate de microorganisme i dispar n cteva
zile, ajungndu-se la produii finali CO2 i H2O. Etapele intermediare sunt ns
diferite, n funcie de umiditatea, aeraia i temperatura solului care condiioneaz
intervenia fie a bacteriilor aerobe, fie a celor anaerobe sau a ciupercilor.
n cazul atacului bacterian aerob se formeaz, pe parcurs, acizii piruvic,
lactic, acetic, acetaldehida, iar ca produi finali CO2 i H2O. n cazul interveniei
ciupercilor aerobe se produc, pe parcurs, acizii gluconic, citric, oxalic, fumaric,
succinic etc.
Atacul bacteriilor anaerobe are ca rezultat intermediar formarea de acizi
volatili ca acidul lactic, hidrogenul, metanul i CO2. n urma aciunii fungilor
anaerobi se produc acid fumaric i alcool.
Aceste procese au fost urmrite n condiii de laborator dar n natur situaia
este mult mai complex. Astfel, produii intermediari formai sunt fie metabolizai
imediat de ctre alte grupe de microorganisme, cum este cazul la Azotobacter sp.,
care utilizeaz alcoolii i acizii organici pentru sinteza proprie a compuilor
celulari, fie mineralizai complet, pn la CO2 i H2O.
n ceea ce privete produii solubili n ap, a fost studiat problema
zaharozei care este descompus de flora zimogen. Mai nti, intervine Bacillus
megaterium, care formeaz acid oxi-butiric, i apoi prolifereaz genul
Pseudomonas, care utilizeaz acest acid eliberat de primul, producndu-se i aici o
reacie n lan.
Reaciile de degradare sunt, n mod cert, cuplate cu cele de sintez, cci
produsele mai simple rezultate sunt folosite de anumii germeni pentru
constituirea capsulei gomoase, format din substane poliozide cu greutate
molecular ridicat, de tipul hemicelulozelor.
II. Degradarea hemicelulozelor
Cantitatea hemicelulozelor n resturile vegetale variaz ntre 6 i 30% din
greutatea uscat, n funcie de specie i vrsta plantei. Hemicelulozele sunt
polizaharide ce nsoesc celuloza n esuturile vegetale i care sunt grupate n
pentoze i hexoze. Din pentoze fac parte xilanul, format din resturi de xiloz, i
arabanul, din resturi de arabinoz. Din hexoze fac parte mananele, constituite din
resturi de manoz, glucomananele, alctuite din resturi de glucoz i manoz,
precum i galactamanele, formate din resturi de galactoz i manoz.
Dintre hemiceluloze galactanele sunt mai rezistente la atacul microbian, n
timp ce xilanele i mananele sunt mai repede metabolizate, fiind descompuse de o
flor nespecific.
139

Viteza de descompunere a acestor substane depinde de cantitatea de azot


accesibil i se produce n mod ealonat i n ritm diferit. Astfel, n primele 4 zile,
din paiele de ovz, care conin circa 23% hemiceluloz, se descompun 10% , n
urmtoarele 4 zile alte 8,5% i numai 4,50% n ultimele 8 zile.
Microorganismele care descompun hemiceluloza se succed ntr-o anumit
ordine, ncepnd cu bacilii nesporulai, bacilii sporulai i cocobacilii.
Aproape constant apare i Azotobacter sp. care nu prezint specii capabile s
atace direct hemicelulozele, dar folosesc produii intermediari de metabolism,
formai de celelalte grupe de bacterii. Dintre ciuperci s-au identificat n acest
proces Zygorhynchus sp., Cuninghamella sp., Rhizopus sp., Trichoderma sp.,
Humicola sp., Aspergillus niger i Aspergillus fumigatus. Actinomicetele au fost
identificate, de asemenea, ca fiind active n descompunerea hemicelulozelor.
Unele bacterii polifage sunt capabile s atace i hemicelulozele. Printre
acestea se numr: Alcaligenes sp., Pseudomonas sp., Bacillus circulans i
Sporocytofaga myxococcoides, care este o bacterie celulolitic autentic.
Activitatea microflorei hemicelulolitice este foarte variat, n funcie de tipul de
sol i coninutul n substan organic al esuturilor vegetale. Numrul bacteriilor
hemicelulolitice este cel mai mare n solurile neutre i apoi n cele acide.
III. Degradarea amidonului
Concentraia de amidon din esuturile vegetale este, n principal, sczut, cu
excepia seminelor (max. 70% din greutatea uscat) i a tuberculilor de cartof.
n funcie de natura solului, greu sau uor, de umiditate i de temperatur,
procesul de amiloliz se desfoar n mod diferit. Astfel, n terenurile de cultur
mijlocii, bine aerate i semisaturate n umiditate, la temperatura de 18C, intervin
n degradarea amidonului unele bacterii i ciuperci, aparinnd genurilor
Aspergillus, Fusarium i Rhizopus.
n solurile saturate n ap i cu celelalte condiii asemntoare, se gsesc
bacterii aerobe i facultativ anaerobe din genul Bacillus, mai ales B. macerans, B.
subtilis i B. cereus.
n aceste condiii, fenomenul este mai rapid. n aceleai condiii, dar la o
temperatur mai ridicat, pn la 33C, intervin bacteriile strict anaerobe, de tip
Clostridium, i amiloliza este, n aceste din urm condiii, foarte rapid. Se
ntlnesc bacteriile Clostridium butyricus, Clostridium perfringens, dar i
Clostridium pasteurianum, care, pe lng degradarea amidonului, fixeaz i azotul
atmosferic.
n lumina acestor condiii, se pare c amiloliza n sol este rezultatul
activitii unei flore zimogene destul de polifage, cu o dubl constituie. O
microflor abundent, puin specializat, bacterian i fungic, care degradeaz
amidonul pn la stadiul de dextrin, apoi dextrina este metabolizat de alte
microorganisme. O microflor mai restrns i mai specializat hidrolizeaz
amidonul pn la acizi, alcooli i gaze. n ansamblu, aceast activitate merge n
paralel cu fertilitatea aparent a solului i cu bogia microflorei totale.

140

IV. Degradarea pectinei


Coninutul n pectin al esuturilor vegetale este cuprins ntre 10 i 30%, n
funcie de specie, de organe i de vrsta plantelor. Pectinele sunt substane cu
greutate molecular ridicat, care aparin grupului poliuronidelor.
Ele formeaz, n condiii favorabile, geluri n contact cu apa i se mpart n
mai multe grupri:
protopectine derivaii ale acidului poligalacturonic, legate prin anumii
constitueni cu membrana celular;
acidul pectic sau pectina propriu-zis, care este acid poligalacturonic esterificat
de alcoolul metilic;
acidul pectic sub form de acid poligalacturonic neesterificat.
Acestor trei compui le corespund enzime specifice ca: protopectinaza,
pectinesteraza i, respectiv, poligalacturonidaza. La descompunerea substanelor
pectice particip unele bacterii, actinomicete i ciuperci, bacteriile anaerobe fiind
agenii principali de descompunere.
Bacteriile pectinolitice anaerobe sunt reprezentate prin speciile de
Clostridium, cum sunt:
Clostridium aurantibutyricum ce atac att pectina purificat, ct i pectina din
resturile vegetale.
Clostridium felsineum care atac numai pectina din resturile vegetale.
ntre speciile aerobe de bacterii se ncadreaz Bacillus polymyxa, B.
macerans i reprezentani ai genurilor Pseudomonas, Arthrobacter i
Corynebacterium.
ntre actinomicetele pectinolitice se situeaz genurile Streptomyces i
Micromonospora.
Dintre ciupercile pectinolitice fac parte mai multe genuri ca: Aspergillus,
Fusarium, Alternaria, Botrytis, Monilia etc. O alt specie, ciuperca Pullularia
pululans, descompune, toamna, pectina din frunzele czute, uurnd mineralizarea
acestora.
V. Descompunerea celulozei
Celuloza reprezint 45-80% din greutatea uscat a resturilor vegetale i, ca
atare, constituie cea mai important parte a substanelor organice care se ntorc n
sol.
Fedorov apreciaz cantitatea de carbon gsit n sol sub form de celuloz la
350 milioane tone n compoziia organelor vii i la 700 miliarde tone n sol i
turb.
Celuloza este un polizaharid (C6H10O5), format dintr-un lan de 1:4 D
glucopiranoz (celobioz), care constituie scheletul peretelui celular la plante.
Celuloza este foarte rezistent la degradare, exceptnd descompunerea produs
sub aciunea microorganismelor, datorit creia plantele ar primi la hectar
aproximativ 15 tone CO2 pentru nutriia lor carbonat.
n acest fel, degradarea i mineralizarea microbian a celulozei reprezint i
din punct de vedere cantitativ unul dintre procesele cele mai importante ce se
petrec pe suprafaa globului.
141

Degradarea biologic a celulozei a fost evideniat prima dat de


Omelianschi care a studiat fenomenele descompunerii aerobe iar apoi
Vinogradscki a stabilit i rolul deosebit al degradrii anaerobe.
Din hidroliza celulozei rezult glucoz i celobioz iar celobioza, la rndul
ei, n final, este descompus n glucoz. Aceti compui apar numai excepional n
sol, deoarece procesele biologice merg pn la stadiile de combustie incomplet,
cu eliberare de acizi i alcooli sau complet, pn la CO2 i H2O a glucozei.
Microorganismele se dezvolt direct pe fibrele de celuloz de care se
fixeaz i produc hidroliza enzimatic a celulozei, n cursul creia fibrele i pierd
consistena, se gonfleaz i se transform ntr-o mas cu o consisten pstoas i
gelatinoas.
A. Degradarea aerob a celulozei poate fi realizat de bacterii i ciuperci.
Bacteriile celulolitice pot fi puse n eviden nsmnnd particule de sol pe gel
de siliciu impregnat cu o substan azotoas. Dup cteva zile de incubare la 30C
apar colonii colorate diferit, n galben, crmiziu, brun-deschis, roz- portocaliu,
verde i foarte rar brun-deschis i negru. Culoarea coloniilor variaz n funcie de
vrsta culturii i de specie.
Microorganismele celulolitice pot fi criofile, adic rezistente la temperaturi
sczute, mezofile sau termofile. Cele mai multe dintre acestea sunt mezofile sau
termofile i se mpart, la rndul lor, n microorganisme aerobe i anaerobe. ntre
microorganismele celulolitice mezofile aerobe sunt cuprinse o serie de bacterii,
actinomicete i ciuperci.
Bacteriile celulolitice sunt reprezentate prin mai multe genuri ce aparin ord.
Cytophagales, genul Cytophaga ce se prezint sub form de bastonae scurte sau
elongate, flexibile sau ca filamente cu dimensiuni de 0,3-0,7 x 5-50 m, cu
capetele bastonaelor rotunjite sau ascuite. Celulele i coloniile sunt colorate n
nuane de galben, oranj sau rou. Cea mai rspndit specie este Cytophaga
hutchinsonii. Genul Sporocytophaga se prezint sub form de celule asemntoare
cu Cytophaga dar formeaz microchisturi rezistente la uscciune, specia cea mai
comun fiind Sporocytophaga myxococcoides.
Din ord. Myxobacteriales produc descompunerea celulozei speciile
Sorangium compositum i Polyanginum celullosarum.
Din fam. Pseudomondaceae face parte i specia Cellvibrio ochracea
bacterie celulolitic foarte activ.
Se mai cunosc ca bacterii celulolitice i specii din genurile Cellulomonas,
precum i Bacillus ca B. vagans i B. soli.
Dintre actinomicetele celulolitice citm speciile: Streptomyces cellulosae,
Streptomyces violaceus, Micromonospora chalcea i Nocardia cellulans.
Ciupercile celulolitice sunt ageni activi ai descompunerii celulozei i, mai
ales, a celulozei din materialul lemnos. Dintre cele mai rspndite genuri amintim:
Chaetomium, Aspergillus, Penicillium, Myrothecium i Trichoderma.
n cursul descompunerii aerobe a resturilor vegetale se disting dou etape
succesive:
142

n prima faz se produce descompunerea prilor vegetale mai uor


atacabile, cu participarea predominant a speciilor de Cellvibrio i Myxococcus.
n a doua faz urmeaz descompunerea prilor mai rezistente la degradare,
cu predominana speciilor Cytophaga i a ciupercilor microscopice.
Din punct de vedere chimic, celuloliza are loc tot n dou etape. La nceput
se produce hidroliza celulozei pn la celobioz (C12H22O11) i ali produi mai
compleci, dup care, prin oxidarea acestor produi, se formeaz, ulterior, acizi
uronici.
Dac hidroliza celulozei este mai puternic, mergnd pn la formarea
glucozei, aceasta este mai departe oxidat pn la CO2 i H2O, trecnd prin stadiul
de oxiacizi:
(C6H10O5)n + nH2O + O2

R-CHOH-COOH

CO2 + H2O + x cal.

Formarea de hidrai de carbon solubili i de oxiacizi ca produi intermediari


de degradare a celulozei are mare importan n sol, deoarece stimuleaz
dezvoltarea fixatorilor de N2, care i folosesc n hran.
Degradarea aerob a celulozei se realizeaz n condiii optime n solurile
bine lucrate, aerate, bogate n azot i cu climat temperat. n aceste condiii,
bacteriile i ciupercile celulolitice sunt active pn la adncimea de 30 cm, ceea ce
corespunde, practic, zonei pentru dezvoltarea culturilor agricole.
B. Degradarea anaerob a celulozei
Acest proces se realizeaz, n special, n zonele umede, mai profunde ale
solului, cnd resturile vegetale sunt n mase compacte, dense , neaerate.
Din punct de vedere chimic, ea reprezint o hidroliz a celulozei sub
aciunea celulazelor i a celobiazei microbiene, cu formare de glucoz, din
descompunerea creia rezult acizi volatili, ca formic, butirici, acetic, acizi
nevolatili, ca succinic i lactic, precum i alcool etilic i gaze (CO2, H2 i metan).
Bacteriile celulolitice anaerobe din sol sunt reprezentate prin Bacillus
cellulosae hydrogenicus i Methylomonas methanica, care elibereaz metan.
Fermentarea celulozei cu degajare de H2 este nsoit de formarea acidului
butiric i a CO2, dup reacia:
(C6H10O5)n + nH2O

CH3CH2COOH + CH3COOH + H2 + CO2 + x cal.

n fermentaia metanic a celulozei, cantitatea de gaze eliberat reprezint


aproximativ 1/2 din greutatea celulozei descompuse.
Schema general a reaciei ar fi urmtoarea:
(C6H10O5)n + nH2O

CH3CH2COOH + CH3COOH + CO2 + CH4

Unele specii de bacterii celulolitice anaerobe sunt adaptate s triasc n


intestinul uman i al animalelor unde determin descompunerea celulozei din
alimente. Bacteriile celulolitice se dezvolt la temperatura optim de 55-70C i
sunt prezente n medii bogate n celuloz i azot organic i mineral, cum sunt
blegarul i nmolurile oreneti.
143

Unele bacterii termofile, cum sunt Clostridium termocellus i Clostridium


termocellulolyticum, degradeaz celuloza cu formare de acizi volatili i fici,
alcooli i gaze, n special metan.
Microorganismele celulolitice mai pot contribui la distrugerea hrtiei n
bibliotecile i depozitele ru aerisite i umede, provocnd pagube nsemnate.

VI. Descompunerea ligninei


Descompunerea ligninelor are importan deosebit pentru circulaia
carbonului ntruct aceasta reprezint cea de-a doua surs a acestui element n
natur: 25-30% din corpul plantelor lemnoase i 15-20% din corpul plantelor
ierboase.
Ligninele reprezint, totodat, complexul vegetal mai rezistent i, din
aceast cauz, se acumuleaz continuu n sol, lund parte la formarea humusului.
Ligninele sunt substane macromoleculare, provenite prin condensarea unor
alcooli aromatici cu o structur complex reticular care necesit o mare cantitate
de energie pentru a fi scindat.
Agenii principali ai descompunerii ligninei sunt ciupercile din ord.
Agaricales, mai ales acelea ce produc putregaiul alb al lemnului care pot ataca
i celuloza.
Un alt grup de ciuperci cauzeaz putregaiul brun al lemnului dar acesta nu
atac lignina.
Ciupercile ligninoclastice pot fi grupate n trei tipuri i anume:
tipul Polyporus versicolor atac la nceput lignina i apoi celuloza;
tipul Armillaria vera atac la nceput celuloza apoi lignina;
tipul Ganoderma applanatum atac simultan, att lignina, ct i celuloza.
Lignina se descompune mai repede n condiii aerobe, n care acioneaz
ciupercile, i mai lent n anaerobioz cnd acioneaz mai mult, bacteriile.
VII. Metabolismul taninurilor, lipidelor i cutinei
Taninurile sunt descompuse, n special, de ctre ciupercile din genurile
Aspergillus i Penicillium. n cazul cnd ating o anumit concentraie n sol, ele au
o aciune antimicrobian.
Lipidele sunt hidrolizate cu uurin de ctre microorganisme.
Cutina este descompus de bacterii din genul Pseudomonas n ritm lent.
7.3. Circuitul sulfului
Circuitul sulfului (Fig. 77) este, alturi de cele ale azotului i carbonului,
unul dintre cele mai importante circuite din punct de vedere biologic. Sulful intr
n componena aminoacizilor metionin i cistein, a unor vitamine, glicozide,
plizaharide, alcaloizi etc.

144

Fig. 77 Circuitul sulfului n natur (www.scritube.com).

Transformarea microbiologic a sulfului n sol se face n trei faze


principale:
1. Mineralizarea sulfului organic, ce se petrece paralel cu mineralizarea
azotului i fosforului organic sub aciunea unor microorganisme, ca Proteus
vulgaris, Serratia marcesens, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis i
Clostridium sporogenes din categoria bacteriilor anaerobe i de ctre unele
ciuperci ca Scopulariopsis brevicaulis i Aspergillus niger.
n cursul mineralizrii, sulful se elibereaz sub form de hidrogen sulfurat
(H2S), metilmercaptan (CH3-SH) sau de sulfat (SO42-).
2. Sulfoficarea este procesul de oxidare a H2S, S, S2O32- (tiosulfailor),
S4O62- (tetrationailor), SO32- (sulfiilor) pn la acid sulfuric, respectiv sulfai.
Aceast faz este produs de sulfobacterii chimiolitoautotrofe nefilamentoase, ca
Thiobacillus sp. i Sulfolobus sp. i filamentoase ca Beggiatoa sp.
Mai este produs de bacteriile purpurii Chromatium sp. i bacteriile verzi
Chlorobium sp.
Spre exemplu, Thiobacillus thioxidans oxideaz sulful elementar la acid
sulfuric:
S + 3/2O2 + H2O H2SO4
Bacteria Beggiatoa sp. oxideaz H2S la S:
H2S + 1/2O2 S + H2O
Sulful se acumuleaz n celulele microbiene sub form de incluziuni. n
lips de H2S, bacteria oxideaz sulful din aceste incluziuni pn la H2SO4.
Folosirea sulfului elementar poate avea aplicaii practice pentru
mbuntirea solurilor alcaline. Astfel, sulful este oxidat de microorganismele
sulfoficatoare pn la acid sulfuric, care micoreaz pH-ul mediului. Dar
145

sulfoficarea poate avea i efecte negative din punct de vedere agricol. n solurile
inundate se formeaz cantiti mari de sulfuri, datorit desulfoficrii. n urma
drenrii i desecrii acestor soluri, sulfurile se oxideaz rapid la sulf pe cale
chimic, iar acesta la H2SO4, datorit microorganismelor sulfoficatoare. Ca
rezultat, pH-ul acestor soluri ajunge la valori de 3,2 - 2,2, care pericliteaz viaa
plantelor. Pentru a preveni acest efect negativ este necesar aplicarea
amendamentelor calcaroase.
3. Desulfoficarea este procesul de reducere dezasimilatorie a sulfailor pn
la H2S. Acest proces are loc n condiii anaerobe i se datoreaz, n primul rnd,
speciilor din genul Desulfovibrio, precum D. desulfuricans.
Bacteria reduce sulfaii la H2S cu ajutorul hidrogenului din substanele
organice, ca lactatul i piruvatul, care servesc att ca surse de energie dar i ca
surs de carbon.
Putem trage concluzia c sulfoficarea duce la acidifiere, n timp ce
desulfoficarea produce alcalinizarea solului.
n procesul de obinere a H2S rezultat din desulfoficare, nu se ating
concentraii toxice pentru plante, deoarece Fe2+ din sol ndeprteaz H2S sub
form de FeS care precipit. n solurile srace n Fe2+ i irigate cu ape bogate n
sulfai, H2S produs n cantiti mari produce efecte toxice la orez i la alte plante.
7.4. Circuitul fierului
Fierul intr n compoziia hemienzimelor, a hemoglobinei, leghemoglobinei,
F-S-proteinelor, iar circuitul su cuprinde patru etape microbiene ce se succed
astfel:
1. Mineralizarea fierului organic se petrece n paralel cu celelalte procese de
mineralizare a substanelor organice. Microorganismele mineralizatoare atac
partea organic a compuilor cu fier iar acest element se elibereaz sub form
mineral, bi- sau trivalent. Microorganismele respective pot fi bacterii din
genurile Pseudomonas, Bacillus, Corynebacterium, Mycobacterium etc.; mai pot
fi actinomicete din genurile Nocardia sau Streptomyces, precum i ciuperci, toate
ca organisme chimioorganoheterotrofe.
Compuii organici cu Fe din humus pot fi atacai de bacterii ce aparin
genurilor Metallogenium, Pedomicrobium i Seliberia. Pe suprafaa celulelor
respective se depune, sub form de precipitat, hidroxidul feric Fe(OH)3.
2. Formarea compuilor organici de fier este un proces opus mineralizrii
fierului organic. Aici, microorganismele sintetizeaz compui organici solubili,
deintori de fier, bi- sau trivalent.
Fierul poate fi sintetizat de unii compui organici ca acidul acetic sau
compleci, ca acizii citrici, acidul 2-ceto-D- gluconic, acizii humici etc.
Microorganismele capabile de formarea compuilor organici cu fier sunt
unele bacterii i mucegaiuri (ciuperci) precum i unii licheni. Mineralizarea i
formarea microbian a compuilor organici cu Fe joac un anumit rol n procesul
de podzolire a solului. Sub aciunea microorganismelor, n orizontul A se
formeaz Fe organic solubil care migreaz spre orizontul B, unde, sub aciunea
146

microorganismelor mineralizatoare, se elibereaz sub form anorganic fierul


trivalent.
3. Oxidarea fierului bivalent. La aceste procese particip ferobacteriile
(bacteriile feroginoase i siderobacteriile). Acestea sunt organisme acvatice dar
unele se pot dezvolta i n soluri, unde se prezint sub form filamentoas sau
nefilamentoas.
La ferobacteriile filamentoase, ca Leptothrix ochracea, celulele individuale
sunt incluse ntr-o teac organic comun n care se acumuleaz Fe(OH)3.
Ferobacteriile nefilamentoase cuprind unele bacterii pedunculate, ca
Gallionella ferruginea, capsulate, ca Siderocapsa treubii, i nependulate i
necapsulate, ca Ferrobacillus thiooxidans, la care Fe(OH)3 se depoziteaz pe
penduncul, n capsul i, respectiv, pe suprafaa celulelor.
Aceste bacterii sunt considerate n prezent chimiolitoorganoheterotrofe, cu
excepia lui Thiobacillus ferrooxidans. Acest tiobacil oxideaz nu numai sulful
elementar, sulfurile i tiosulfaii dar i Fe2+ i asimileaz CO2, dezvoltndu-se n
medii acide cu un pH = 2 6,5. Oxidnd pirita (FeS2) sau calcopirita (CuFeS2),
Thiobacillus ferrooxidans produce sulfat feric.
ntr-o prim etap, pirita este oxidat la sulfat feros:
2FeS2 + 7O2 + 2H2O 2FeSO4 + 2H2SO4 + energie
n continuare, sulfatul feros este oxidat la sulfat feric:
2FeSO4 + 1/2 O2 + H2SO4 Fe2(SO4)3 + H2O + energie
La rndul su, sulfatul feric poate oxida pirita cu forme de sulfat feros i
acid sulfuric:
7Fe2(SO4)3 + FeS2 + S H2O 15 FeSO4 + S H2SO4
Dezvoltarea lui Thiobacillus ferrooxidans duce la acidifierea mediilor,
datorit acidului sulfuric produs. La rndul su, acidul sulfuric poate solubiliza
cuprul i alte metale grele din mineralele ce le conin. Din aceast cauz,
dezvoltarea speciei Thiobacillus ferrooxidans duce la acumularea de concentraii
fitotoxice pentru plantele de cultur, a acidului sulfuric i a metalelor grele n
haldele de steril luate n cultur.
4. Reducerea fierului trivalent. Acest produs se datoreaz unor bacterii
facultativ sau obligat anaerobe, ca Bacillus circulans, Bacillus polymyxa,
Enterobacter aerogenas, Clostridium butyricum etc. Acestea, n prezena
substanelor organice, ca glucoza, reduc fierul trivalent (Fe3+) la fierul bivalent
(Fe2+), fierul trivalent servind ca acceptor de electroni.
Mai sunt capabile de reducerea fierului trivalent i unele ciuperci din sol.
Toate aceste microorganisme fier-reductoare sunt chimioorganoheterotrofe.
Trebuie s menionm c oxidarea bivalent i reducerea fierului trivalent n
sol se pot produce i fr participarea direct a microorganismelor.
7.5. Circuitul fosforului

147

Fosforul este un element absolut necesar vieuitoarelor i intr n compoziia


acizilor nucleici, a unor proteine, a unor compui macroergici (ATP), a
fosfolipidelor, a fosfozaharidelor, a fitinei etc.
Circuitul fosforului (Fig. 78) se desfoar n mai multe faze, dup cum
urmeaz:
1. Mineralizarea fosforului organic se desfoar n paralel cu mineralizarea
compuilor organici cu azot (amonificarea), sub aciunea acelorai grupe de
microorganisme. Unul dintre microorganismele foarte active n mineralizarea
fosforului organic este Bacillus megaterium var. phosphaticus. n urma
mineralizrii, fosforul se elibereaz sub form de ortofosfat solubil, asimilabil de
ctre plante i microorganisme; n acelai timp, ns, ortofosfatul solubil poate
trece n ortofosfai de Ca, Fe, Al, Mg, Cu i Ni, care sunt insolubili.
Compuii organici cu fosfor reprezint 15-85% din cantitatea total de
fosfor din diferite soluri.
ntre compuii organici cu fosfor ai solului predomin fitina i acizii
nucleici. Fitina este de origine vegetal, iar acizii organici provin de la
microorganisme, plante i animale. Fitina constituie ntre 10 i 80% din cantitatea
total de fosfor organic din soluri. Ea este sarea de Mg i Ca a acidului fitic, iar
descompunerea ei hidrolitic este catalizat de fitoz.

Fig. 78 Circuitul fosforului n natur (www.scritube.com).

2. Mobilizarea ortofosfailor insolubili este procesul de solubilizare a


fosfatului tricalcic, a ortofosfailor de Fe, Al, Mg, Mn, Cu, Ni, ce are loc sub
aciunea acizilor produi de microorganisme i de cei excretai de rdcinile
plantelor. Aici intr acizii azotos i azotic, produi de microorganismele
nitrificatoare, acidul sulfuric, produs de microorganismele sulfoficatoare, acidul
carbonic i acizii organici, produi de microorganisme, precum i de rdcinile
plantelor.

148

Dintre acizii organici acidul 2-ceto-D-gluconic joac un rol deosebit n


solubilizarea ortofosfailor insolubili. Mai contribuie la solubilizare i acizii citric,
succinic, malic, oxalic, tartric, lactic, precum i acizii humici.
3. Transformarea meta-, piro- i polifosfailor este realizat sub aciunea
unor bacterii ca Pseudomonas fluorescens, Sporocytophaga cauliformis i a unor
ciuperci ca Aspergillus sp. i Penicillium sp. Aceste reacii sunt catalizate de
enzime, dar ele pot avea loc i sub aciunea aciditii, iar transformarea meta- i
pirofosfailor poate fi catalizat i de MnO2.
4. Oxidarea fosfailor i hipofosfailor are loc sub aciunea unor
microorganisme aerobe i este, de asemenea, catalizat de enzime.
5. Reducerea ortofosfailor este produs de microorganisme aerobe, reacia
respectiv fiind de natur enzimatic. n prezena nitrailor i sulfailor, reducerea
ortofosfailor este inhibat, deoarece nitraii i sulfaii sunt utilizai mai uor ca
acceptori de electroni.
7.6. Circuitul potasiului
Microorganismele elibereaz ionii de K+ prin descompunerea srurilor de
potasiu a acizilor organici (ex. acidul acetic sau acidul butiric). Ionii de K+
reacioneaz cu anionii de HO3-, PO42-, SO42-, CO32- i formeaz sruri accesibile
plantelor i microorganismelor sau sunt fixai de ctre coloizii solului.
Microorganismele mai pot elibera potasiul i prin solubilizarea silicailor.
Bacteriile care sunt capabile de aceast aciune au fost denumite silicatbacterii.
Printre acestea este i Bacillus mucilaginosus var. siliceus, care, dup unii autori,
ar fi o tulpin de Bacillus circulans. Unele ciuperci, ca Aspergillus niger i
Penicillium nigrescens, pot, de asemenea, elibera K+ din silicai.
Eliberarea K+ din silicai sub aciunea silicatbacteriilor se datoreaz acizilor
(H2CO3 i acizii organici), pe care aceste microorganisme i produc. Sistemul
radicular al plantelor produce, de asemenea, acizi care joac acelai rol.
7.7. Transformrile microbiene ale calciului
Descompunerea microbian a compuilor organici cu calciu duce la
eliberarea Ca2+, care, ca i K+, poate reaciona cu anionii minerali, formnd sruri
solubile i insolubile sau sunt fixai de ctre coloizii solului. i aici, acizii minerali
i organici, produi fie de microorganisme sau de rdcini, solubilizeaz srurile
de Ca insolubile.
7.8. Transformrile microbiene ale magneziului
Acestea sunt asemntoare cu cele ale calciului, magneziul activnd unele
procese microbiene din sol, ndeosebi nitrificarea i fixarea azotului atmosferic.
7.9. Transformrile microbiene ale microelementelor

149

7.9.1. Manganul
Se gsete n sol n form bivalent ionic (Mn2+) la pH mai mic de 5,5 i
sub form de Mn trivalent i, mai ales, tetravalent la pH mai mare de 8, datorit
autooxidrii Mn2+.
Transformrile microbiene ale manganului se produc n zona valorilor de
pH de 5,5-8. n condiii aerobe acioneaz unele bacterii heterotrofe din genurile
Bacillus, Corynebacterium, Metallogenium, actinomicetele din genul
Streptomyces, precum i ciupercile din genurile Curvularia, Cladosporium etc.
Aceste microorganisme oxideaz Mn2+, precipitndu-l sub form de MnO(OH)2
(hidroxid de mangan trivalent).
Procesul de oxidare a Mn2+ poate duce la apariia n sol a carenei de
mangan asimilabil i are ca efect apariia unor boli de nutriie la plante.
n condiii anaerobe, n prezena substanelor organice uor asimilabile,
unele bacterii reduc mangan tetravalent la mangan bivalent; MnO2 servete ca
acceptor de electroni, nlocuind O2. Totodat, acizii produi de microorganisme,
att n condiii aerobe, ct i anaerobe, deviaz echilibrul chimic dintre manganul
bivalent i cel tetravalent n direcia formrii Mn2+.
7.9.2. Seleniul
n plante, seleniul este prezent sub form de selenio-aminoacizi, n care
seleniul nlocuiete sulful n structura metioninei i Se-metilcistein. Ambii Seaminoacizi din resturile vegetale se mineralizeaz sub aciunea microorganismelor
din sol. Seleniul apare sub form de selenii (SeO32-) i selenai (SeO42-).
Microorganismele din sol sunt capabile i de oxidarea seleniului metalic i
al seleniurilor (Se2-) la selenai.
O alt transformare microbian a seleniului n sol este reducerea seleniilor
i selenailor la seleniul metalic. Aceast capacitate a fost demonstrat la unele
bacterii, cum sunt Clostridium, Corynebacterium i ciuperci ca Rhizobium,
precum i la unele levuri i mucegaiuri.
Compuii cu Se (selenii, selenai, Se-aminoacizi) pot fi metilai sub form
de produs gazos, numit dimetilselein (CH3-Se-CH3). Acest proces poate fi
realizat de unele ciuperci, ca Aspergillus, Cephalosporium, Fusarium,
Penicillium, ca i de unele bacterii.
7.9.3. Zincul
Microorganismele, n urma descompunerii resturilor vegetale, elibereaz
zincul sub form solubil (Zn2+). Microflora solului realizeaz aceast solubilizare
prin acizii minerali i organici produi. n sens invers, prin diminuarea aciditii,
microorganismele micoreaz solubilitatea zincului. Tiobacilii oxideaz sulful din
ZnS la acid sulfuric i elibereaz zincul sub form de Zn2+ care rmne n soluie,
datorit acidului sulfuric. H2S, produs de microorganisme, ndeprteaz zincul
prin formarea de ZnS, care precipit.
150

Insolubilizarea microbian a zincului provoac, la pomii fructiferi, o caren


manifestat prin micorarea limbului frunzelor, boal ce poate fi prevenit prin
tratarea solului cu sulfat de zinc (ZnSO4).
7.9.4. Cuprul
Descompunerea microbian a resturilor vegetale poate duce la micorarea
concentraiei cuprului solubil, datorit unei reacii chimice n care sunt implicai
produii microbieni, formai n cursul descompunerii.
Tiobacilii pot solubiliza cuprul din minereuri sulfuroase, cum este
calcopirita (CuFeS2), iar Thiobacillus ferrooxidans poate oxida att sulful, ct i
cuprul monovalent din Cu2S. Hidrogenul sulfurat (H2S), format pe cale
microbian, poate precipita Cu2+ sub form de CuS.
Microorganismele din sol au capacitatea de transformare i a altor
microelemente ca: Mo, V, Co, Ni, Pb, Cd, Si.

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)

1. Fixarea N2 este realizat de:


a) virusuri
b) bacterii
c) cyanobacterii

2. Azotul este utilizat de plantele superioare sub form de:


a) azot molecular (atmosferic)
b) nitrii
c) nitrai
3. Fixarea aerob a azotului molecular este realizat de:
a) Azotobacter chroococcum
b) Clostridium pasteurianum
c) Rhizobium leguminosarum
4. Nodozitile "eficiente" de pe rdcinile de leguminoase conin un
pigment:
a) galben
b) albastru
c) rou
151

Rezultate corecte:
1 b i c; 2 - c; 3 - a; 4- c.

Rezumat (U.I. 7)
n alctuirea solului intr trei pri i anume:
partea solid (mineral i organic);
partea lichid sau soluia solului;
partea gazoas sau aerul din sol.
Procesul de formare a solului ncepe imediat ce roca ia contact cu mediul
extern, cu agenii fizici i chimici, precum i cu aciunea microorganismelor vii.
Procesele de dezagregare i sintez, care au drept rezultat formarea
complexelor humice, se datoreaz aciunii bacteriilor aerobe i anaerobe, a
actinomicetelor i a ciupercilor microscopice.
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
Circuitul azotului n natur se desfoar pe parcursul a mai multor etape,
care implic desfurarea unor multiple activiti biochimice; unele au loc n
anaerobioz, iar altele n prezena oxigenului.
Etapele circuitului azotului n natur:
I. Fixarea azotului molecular
II. Amonificarea
III. Nitrificarea
IV. Denitrificarea
Carbonul organic are, n principal, origine vegetal, fiind introdus n sol prin
procese multiple i sub forme variate. Prin procese naturale este introdus sub
form de esuturi vegetale moarte, rdcini, frunze, care ajung n sol odat cu
moartea plantelor. Prin procese artificiale este introdus n sol prin ncorporarea
unor vegetale parial metabolizate, sub form de gunoi natural i artificial.
Circuitul fosforului se desfoar n mai multe faze, dup cum urmeaz:
1. Mineralizarea fosforului organic
2. Mobilizarea ortofosfailor insolubili
3. Transformarea meta-, piro- i polifosfailor este realizat sub aciunea
4. Oxidarea fosfailor i hipofosfailor are loc sub aciunea unor
5. Reducerea ortofosfailor

152

Lucrare de verificare nr.7


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei circuitul azotului n natur. (5 puncte)
2. Descriei procesul de formare al solului. (5puncte).
BIBLIOGRAFIE (U.I. 7)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

153

Unitatea de nvare nr. 8:

MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR
Cuprins (U.I.8)

Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 8)...154


Instruciuni (U.I.87).154
8.1. Fermentaia alcoolic................................................................................156
8.1.1. Utilizarea microorganismelor n vinificaie..............................157
8.1.2. Utilizarea microorganismelor n industria berii........................168
8.2. Fermentaia lactic....................................................................................168
8.2.1. Rolul microrganismelor n obinerea produselor lactate..............170
8.2.2. Rolul microorganismelor lactice n conservarea alimentelor
murate.......................................................................................................171
8.2.3. Rolul microrganismelor n producerea furajelor nsilozate.......172
8.3. Fermentaia acetic...................................................................................172
Test de autoevaluare174
Rezumat (U.I. 8) ..175
Lucrare de verificare nr. 8 .... 176
Bibliografie (U.I. 8) ..176
Obiectivele i competenele profesionale specifice (U.I. 8)
Obiectivele specifice acestei uniti de nvare constau n familiarizarea
studenilor cu noiunile referitoare la microbiologia fermentaiilor. Dup
finalizarea studiului acestei uniti de nvare, vei dispune de competene
pentru:
- descrierea fermentaiei alcoolice;
- descrierea fermentaiei lactice;
- descrierea fermentaiei acetic.

Instruciuni (U.I.8)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de microbiologia fermentaiilor
(rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de verificare.
Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau
prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.

154

MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR
Microbiologia fermentaiilor studiaz caracteristicile biologice i
biochimice, precum i condiiile optime de activitate ale microorganismelor care
produc transformri chimice n diferite substraturi, cu formarea unor cantiti
relativ mari de substane cu valoare util sau economic. De asemenea, ea
studiaz rolul microorganismelor n apariia unor modificri utile a diferitelor
produse alimentare, modalitile de a dirija aceast activitate microbian, ca i
posibilitile de combatere a microorganismelor duntoare pentru evoluia
normal a proceselor fermentative sau pentru buna conservare a produselor
alimentare.
Fermentaiile sunt procese biochimice, determinate de enzimele unor
microorganisme, cum sunt bacteriile, levurile, mucegaiurile care au proprietatea
de a degrada n condiii de anaerobioz diferii compui organici ai carbonului cu
formarea de substane cu o condiie chimic mai simpl. Din descompunerea
anaerob a hidrailor de carbon rezult o serie ntreag de produi finali cu 1, 2, 3
sau 4 atomi de carbon, care apar, obinuit, prin degradarea glucozei pn la acid
piruvic.
De cele mai multe ori, unul dintre produii rezultai predomin cantitativ i,
ca atare, caracterizeaz procesul de fermentaie alcoolic, lactic, butiric,
propionic etc.
Termenul generic al fermentaiei (lat. fervere = a fierbe) a fost ales pentru a
indica aspectul de lichid care fierbe, caracteristic pentru faza de intensitate
maxim a procesului fermentativ, aceea n care, datorit eliberrii CO2 sub form
de bule de gaz, se produce o efervescen a mediului lichid, n special n vasele
foarte mari (de exemplu, la mustul de struguri care fermenteaz).
Iniial, fermentaiile se produceau sub aciunea micoflorei "spontane",
slbatice, care se gsete pe suprafaa sau n interiorul produsului supus
fermentaiei. Aceste microorganisme sunt slab sau inegal active sau pot fi n
amestec cu specii duntoare, a cror activitate diminueaz calitatea produsului
final. n prezent, pentru a se preveni aceste inconveniene, se recurge la
microorganisme selecionate, cu ajutorul crora se obin produse de calitate
superioar, se mbuntete randamentul i se scurteaz durata procesului
tehnologic.
Microorganismele utilizate n procesele fermentative de tip industrial au
urmtoarele caliti, ce pot fi astfel sintetizate:
cresc rapid i pot fi uor cultivate n cantiti mari, pe medii ce conin
substanele organice corespunztoare;
au capacitatea de a-i menine constant proprietile fiziologice, n anumite
condiii de cultur, producnd uor i n cantiti mari enzimele necesare pentru
transformarea substratului n sensul dorit;
realizeaz aceste modificri, cu formarea unor produi folositori, n condiii
relativ simple i puin costisitoare.
Microorganismele de utilitate industrial sunt astzi folosite pentru procese
ca:
155

biosinteza a diferite substane chimice (alcooli, acid acetic, acid lactic, acid
citric, aceton, antibiotice);
producerea pe cale fermentativ a unor alimente (produse lactate, brnzeturi), a
unor buturi alcoolice (vin, bere) i a furajelor nsilozate;
obinerea de produse folosite n industria textilelor (fibre de in, cnep prin
topire).
Microbiologia industrial mai studiaz i aplic metodele de combatere a
alterrilor microbiene a alimentelor cu ajutorul conservrii prin refrigerare,
sterilizare, fermentaii i alte procese tehnice.
8.1. Fermentaia alcoolic
Este un proces anaerob, prin care glucidele fermentescibile sunt
metabolizate prin reacii de oxido-reducere sub aciunea echipamentului enzimatic
al drojdiei n produi principali (alcool etilic i CO2), produi secundari (alcooli
superiori, acizi, aldehide etc) i energie.
Alcoolul etilic sau etanolul (CH3-CH2-OH) se obine prin fermentarea
complet, n special de ctre unele drojdii, a diferite zaharuri, urmat de separarea
prin distilare i purificare a alcoolului obinut.
Fermentaia alcoolic este una dintre cele mai importante fermentaii
industriale, deoarece alcoolul este ntrebuinat curent n industria alimentar,
chimic, farmaceutic, a parfumurilor i cauciucului.
Materiile prime folosite la fabricarea alcoolului sunt ieftine, abundente n
natur i sunt grupate astfel:
materii prime amidonoase, rezultate din cartof, porumb, orz, secar, care se pot
utiliza dup transformarea hidrolitic a amidonului din compoziia lor n zaharuri
mai simple, fermentabile de ctre levuri;
materii prime zaharoase, provenite din sfecla pentru zahr sau trestia de zahr,
sucurile de fructe, melasa, rezultat ca deeu de la fabricarea zahrului i a leiilor
sulfitice, ce rezult ca deeu de la fabricarea celulozei, cu coninut sczut de 1-5
% zahr;
materii prime celulolitice, rezultate din industria hrtiei, ca lemnul i stuful,
care, prin fierbere cu acizi sub presiune, se hidrolizeaz cu formarea de hidrai de
carbon mai simpli, fermentabili.
nainte de folosirea lor n fermentaiile industriale, amidonul, celuloza i
hemiceluloza trebuie hidrolizate sau convertite n zaharuri cu molecule relativ
simple i fermentabile. n acest scop, se folosesc fie preparate enzimatice, ca
malul de cereale sau enzime de natur microbian, provenite de la bacterii i
mucegaiuri, fie anumite substane chimice, ca acizii diluai sau aciunea asociat a
unora dintre aceti ageni.
Microorganismele care produc fermentaia alcoolic a zaharurilor sunt
reprezentate de:
ciuperci, n principal din genul Saccharomyces;
unele bacterii ca: Zymomonas mobilis, Thermobacterium mobile, Bacillus
macerans, Sarcina ventriculi, Bacillus acetosetilycus etc.
156

Fermentaia alcoolic poate fi spontan, produs de drojdiile slbatice,


prezente n natur, sau dirijat, prin introducerea n materialul de fermentat a unor
sue de drojdii selecionate ce au capacitate superioar de fermentaie.
Temperatura optim de activitate este de 28-32oC. Tulpinile selecionate au
capacitatea de a suporta concentraii mari de alcool i de a consuma cantiti mari
de hidrocarbonate pentru sintezele lor proprii.
Aceste drojdii au un echipament enzimatic foarte bogat, graie cruia obin
n mediu anaerob energia necesar manifestrilor vitale, prin procesul de
fermentaie alcoolic a hidrailor de carbon, dup relaia global:
C6H12O6 2 CH3CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP (118 kJ/mol)

8.1.1. Utilizarea microorganismelor n vinificaie


Vinul este o butur alcoolic nedistilat, cunoscut din cele mai vechi
timpuri care se obine prin fermentaia alcoolic a mustului de struguri.
Fermentaia mustului, obinut prin zdrobirea strugurilor recoltai la maturitate, se
face n vase speciale deschise, sub aciunea drojdiilor din flora natural sau a unor
tulpini selecionate.
Pe struguri, n must i, respectiv, n vin, exist un numr nsemnat de
microorganisme, bacterii i ciuperci, care iau parte la procesul de fermentaie,
avnd fie un rol pozitiv, n cazul fermentaiilor normale, fie un rol negativ, de
"mbolnvire" a vinului, cnd declaneaz unele procese fermentative, care duc la
efecte nedorite.
A. Levurile (drojdii)
Levurile sunt ciuperci microscopice, care au capacitatea de a produce
fermentaia caracteristic a mediilor ce conin zaharuri (levere = a ridica). Ele sunt
grupate din punct de vedere sistematic n subncr. Ascomycotina, fam.
Saccharomycetaceae i n subncr. Deuteromycotina (Fungi imperfecti), fam.
Cryptococca.ceae.
Rspndirea levurilor
Levurile sunt larg rspndite n natur, ntlnindu-se n sol, ape, pe plante,
flori, fructe etc.
Solul este considerat rezervorul principal al levurilor, unde numrul lor este
n medie de 250.000 celule pe gramul de sol.
n general, se ntlnesc n stratul superficial cuprins ntre 2 i 10 cm, iar n
solurile podgoriilor pn la 30-40 cm, att ca forme vegetative, ct i ca forme de
rezisten.
Levurile apar pe boabe n timpul maturrii acestora i sunt rspndite de
insecte (n special Drosophylla sp.), prin intermediul particulelor de praf i, nu n
ultimul rnd, odat cu stropii provocai de ploi.

157

Levurile ce se gsesc pe struguri ce aparin mai multor specii, proporia


dintre ele fiind diferit n funcie de mai muli factori: condiiile climatice, starea
de sntate a recoltei, coninutul n zahr al mustului etc.
Sistematica levurilor
Sistemul taxonomic al levurilor utilizat astzi este rezultatul dezvoltrii i
integrrii a trei moduri distincte de abordare. Primul dintre acestea a fost stabilit
de Myen Ress n 1870, care a ncercat s clasifice levurile, atunci cunoscute, pe
baza formei celulelor i a modului de reproducere. Astfel, Myen Ress a pus bazele
utilizrii caracterelor morfologice n taxonomia levurilor.
A doua contribuie fundamental pentru taxonomie a fost adus de Emil
Christian Hansen n 1883, care a evideniat faptul c tulpinile de levuri difer n
ceea ce privete capacitatea lor de a fermenta hidraii de carbon. Practica modern
a utilizrii caracterelor fiziologice, pentru diferenierea speciilor de levuri, a fost
facilitat prin aceast descoperire. Avantajele mult mai importante ale caracterelor
fiziologice au fost subliniate de ctre savanii olandezi de la coala lui Kluyver din
Delft: L.M. Stelling-Dekker (1931) i J. Ldder (1934, 1952).
Al treilea mod a fost iniiat trziu, n secolul al XX-lea, de ctre A.
Guilliermond, cnd a nceput studii asupra reproducerii sexuate i filogeniei
levurilor ascogene.
Aceste moduri distincte de abordare au constituit, de fapt, suportul studiilor
clasice asupra geneticii i al conceptului modern al sexualitii i filogeniei
levurilor.
De la aparaia ediiei a doua a monografiei The Yeasts, a taxonomic study
(J. Ldder, 1970) au fost nregistrate progrese pe mai multe direcii, acordndu-se
un rol primordial n sistematizarea levurilor, caracterelor fiziologice, fie de
fermentare, fie de asimilare, rezervnd un rol secundar caracterelor morfologice i
extrem de reduse celor ecologice.
O clasificare de referin a levurilor, acceptat i n prezent, este cea a lui
N.J.W. Kregger van Rij (1984) care prezint unele modificri fa de cea propus
de J. Ldder (1970). Astfel, n clasificarea propus de J. Ldder sunt cuprinse 39
de genuri i 349 de specii, n timp ce n clasificarea actual sunt incluse 60 de
genuri i 500 de specii.
Un studiu complet al evoluiei principiilor de taxonomie a levurilor a fost
fcut de P. Ribereau-Gayon .a. i Kurtman n 1998. Pe baza acestor clasificri i
a unor rezultate proprii, M.K. Grossmann (1999) prezint un studiu referitor la
metodele de identificare a levurilor, n general, i a celor din genul
Saccharomyces, n special.
Multe specii de levuri imperfecte sunt foarte asemntoare speciilor perfecte
i difer ntre ele numai prin capacitatea de a forma spori sexuai. Speciile care
sporuleaz sunt indicate ca stare perfect (telemorf) a speciilor nesporulate i
acestea din urm ca stare imperfect (anamorf) a celor sporulate. Diferenierea
generic a levurilor imperfecte se bazeaz pe caracteristici fiziologice, cum ar fi
producerea de acid i asimilarea inositolului.
n prezent, taxonomitii recunosc dou grupe de levuri:
158

levuri perfecte sau telemorfice care au stadii sexuate distincte, exprimate fie ca
asc, fie ca bazidie;
levuri imperfecte sau anamorfice sunt cele la care lipsesc stadiile sexuate i se
reproduc numai prin nmugurire sau diviziune.
Majoritatea levurilor aparin acestui ultim grup. S-a demonstrat, totui, c
anumite levuri imperfecte pot fi nrudite fie cu levurile ascomicete, fie cu cele
bazidiomicete, pe baza unor caracteristici, cum ar fi ultrastructura peretului
celular, formarea conidiilor i compoziia peretului celular.
n prezent, metodele de identificarea a levurilor presupun o abordare
complex ce vizeaz tehnici moderne de genetic microbian, biochimie, biologie
molecular i imunologie.
Tehnicile de biologie molecular au fcut posibil compararea informaiei
inclus n ADN, artnd c pentru fiecare organism, compoziia n baze purinice
este constant i caracteristic. Tehnica hibridrii ADN este foarte important
pentru a explora omologia genetic a multor grupuri de levuri. Aceasta este util
doar pentru organisme strns nrudite, aparinnd aceluiai gen sau preferabil
aceleiai specii.
Structura primar a proteinelor enzimatice izofuncionale poate fi diferit.
Datorit acestui fapt pot coexista dou levuri cu manifestri metabolice
funcionale identice, asigurate de enzime cu structuri tridimensionale similare, dar
difer n detalii ale secvenei aminoacizilor.
S-a constatat, de asemenea, existena unor diferene semnificative att
cantitativ, ct i calitativ, ntre genurile de levuri, pornind de la componena
peretului celular. Implicarea peretului celular n taxonomia levurilor se explic
prin participarea unei mari poriuni a genomului celular la sinteza acestuia, n
comparaie cu relaiile simple de fermentaie i asimilaie, care sunt sub incidena
unui numr limitat de gene.
Deoarece, semnificaia imunologic a antigenilor microbieni depinde de
structura stereomolecular a peretului celular, este evident corelaia dintre
rezultatele analizelor chimice ale peretului celular i cele ale analizelor serologice
pentru diferenierea levurilor.
S-a demonstrat utilitatea criteriilor serologice pentru specii dificil de
difereniat i imunitatea din punct de vedere biologic a diviziunii, la numeroase
specii a unor sue similare biologic. Deoarece s-au constatat asemnri n
structura antigenic a unor levuri fr nici o corelaie cu alte trsturi ale acestora,
taxonomia realizat exclusiv pe baz serologic nu este acceptat deocamdat.
Prin aprofundarea studiilor serologice, acestea vor putea fi luate n considerare
pentru elucidarea relaiilor taxonomice i filogenetice ntre levuri.
Prin mbinarea cunotinelor de genetic, biochimie i biologie celular au
fost stabilite noi tehnici de identificare a levurilor: ECP-ul (Electroforse Champ
Puls), ce se bazeaz pe separarea celor 16 cromozomi ai levurii, PCR-ul
(Polymerase Chain Reaction), tehnic bazat pe amplificarea fragmentelor de
ADN specifice, urmat de separarea lor prin electroforez, RFLP (Restriction
Fragment Lenght Polymorphism), ce face, n mod egal, apel la tehnica PCR, dar
secvenele amplificate sunt degradate prin enzime de restricie, nainte de
159

separarea fragmentelor prin electroforez i tehnica AFLP (Amplified Fragment


Lenght Polymorphism). Metoda AFLP de identificare a levurilor presupune ca
fragmentele ADN ale levurii degradate prin enzime de restricie, s fie amplificate
prin PCR i n final separate prin electroforez (A. Popa i colab., 2004).
Caracterele morfologice generale
Celulele drojdiilor msoar, n medie, 4-14 m, iar forma poate fi sferic,
oval sau cilindric. n schimb, speciile pot fi monomorfe, dimorfe sau polimorfe.
Forma i dimensiunea sunt caractere de gen i specie i depind de vrsta acestora,
starea fiziologic i condiiile de cultivare.
Formele caracteristice ale unor genuri cu importan deosebit:
form oval - Saccharomyces sp.;
form sferic - Torulopsis sp.;
form apiculat Kloeckera sp..; Hanseniospora sp.;
form cilidric - Candida sp.;
form de sticl Saccharomycoides sp.
Cultivate n medii lichide, drojdiile produc tulbureala mediului, formarea de
spum, apoi depunerea de sedimente i limpezirea supernatantului.
Pe medii solide, se formeaz colonii cu caractere morfologice specifice,
avnd diametrul cuprins ntre 0,2 i 2 cm, cu aspect cremos, lucioase sau mate, n
general de culoare alb-crem. Unele formeaz colonii rou-portocaliu, datorit
pigmenilor carotenoizi (Rhodotorula sp.).
Structura celulei la levuri
Drojdiile prezint o celul de tip eucariot, care se difereniaz puin fa de
celula animal (Fig. 79). Comparativ cu celula vegetal, nu prezint cloroplaste i
nveli celulozic.
Cunoaterea organizrii celulare la drojdii este necesar pentru a nelege
potenialul funcional al diferitelor componente.
1. Peretele celular are o grosime de cca.. 25 nm i reprezint 5-15 % din
masa uscat a celulelor. Are un aspect lamelar i este alctuit din dou straturi:
- stratul extern, are o suprafa rugoas i prezint n anumite zone cicatrici
mugurale; n compoziia stratului extern predomin mananul cuplat cu proteine;
ncrctura electric este, n mare parte, negativ, cu rol important n stabilirea
dispersiilor de drojdii i n comportarea celulelor n timpul fermentaiei.
- stratul intern are o suprafa ornamentat cu riduri proeminente, constituite
din glucan, care formeaz complexe cu proteine i asigur rigiditatea sau
elasticitatea peretelui celular.
Funciile peretelui celular sunt:
sediul unor enzime, cum ar fi invertaza, fosfataza i permeaza, implicate n
biosinteza peretelui celular i n procesul de transfer al substanelor;
asigur forma celulei;
asigur protecia fa de factorii de mediu;
particip la creterea i reproducerea celular.
160

2. Membrana citoplasmatic (plasmalema) reprezint un strat lamelar cu o


grosime de 8-9 nm, care delimiteaz protoplastul de faa intern a peretelui
celular. Este construit din dou straturi lipidice, n care moleculele de lipide sunt
orientate cu partea hidrofob spre exterior i cu partea hidrofil spre interior.
Funciile plasmalemei sunt de:
barier osmotic cu permeabilitate selectiv;
sediu al enzimelor ce regleaz procesul de cretere i nmulire.
3. Citoplasma este un sistem coloidal cu un coninut de 75-85 % ap, n care
substanele componente se afl sub form de sol sau gel.
Principalele substane organice sunt:
proteinele cu rol structural sau catalitic;
lipidele cu rol plasmatic;
glucidele cu rol energetic;
ARN (mesager, de transfer, ribozomal), dar i ARNK (killer), implicat n sinteza
unor proteine cu aciune toxic pentru celelalte sensibile;
ADN extracromozomial din plasmide.
4. Incluziunile reprezint forma sub care se acumuleaz substane de
rezerv, n principal sub form de:
glicogen granule care este metabolizat cnd celula este n stare de nfometare;
sferozomii care sunt incluziuni lipidice, ce conin fosfolipide i acizi grai
nesaturai i care sunt metabolizai dup liza enzimatic a membranei celulare n
condiii de malnutriie.
5. Nucleul reprezint spaiul n care are loc stocarea, replicarea i
transmiterea informaiei celulare. Are form sferic sau oval i este protejat de o
membran nuclear cu pori. n interior se afl nucleoplasma, iar la exterior se
continu cu reticulul endoplasmatic.
6. Mitocondriile sunt organite care ocup cca.. 25 % din volumul
citoplasmei, fiind n numr de 10-15/celul. Au rol n ciclul Krebbs i n sinteza
ATP.
7. Vacuolele sunt formaiuni sferice, care apar n faza staionar de cretere
a celulei, i conin ap, n care se solubilizeaz aminoacizi, proteine, enzime. Are
rol de reglare a presiunii osmotice, de meninere a stabilitii chimice a
citoplasmei, dar i n hidroliza unor proteine i lipide.
8. Reticulul endoplasmatic este sediul unor enzime cu rol n biogeneza
sferozomilor, vacuolelor, aparatului Golgi.
9. Aparatul Golgi este un sistem alctuit din uniti denumite dictiozomi,
care fac legtura ntre reticulul endoplasmatic i membrana citoplasmatic. Este
considerat un aparat de sortare i dirijare a proteinelor i componentelor
membranei spre locul de destinaie.
10. Ribozomii sunt particule nucleoproteice, implicate n sinteza proteinelor
celulare.
11. Lizozomii sunt structuri veziculare bogate n enzime: fosfataze, proteaze,
lipaze .a., active la pH=5, cu rol n digestia unor compui ai celulei vii, care nu
mai funcioneaz eficient. Enzimele nu devin active n citoplasm, deoarece pH-ul
161

acesteia este de 7,3 i numai n momentul scderii acestuia din diferite motive,
devin active.
12. Peroxizomii sunt organite sferice cu o membran simpl n care sunt
localizate oxidaze cu rol n adaptarea celulei de drojdie la condiii aerobe.
Perete celular

Fig. 79 Celula levurian (dup Gaillardin i Heslot, 1987).

Principalele levuri ntlnite n vin


I. Levuri sporogene
1. Saccharomyces ellipsoideus (sin. Sacch. cerevisiae) prezint importana
cea mai mare pentru fermentaia mustului. Levurile acestei specii au form
elipsoidal sau globuloas (Fig. 80).
La fermentarea mustului prezint un randament ridicat, realiznd, n medie,
1 ml alcool pur din 1,7 g glucoz consumat, i rezist pn la concentraii de 16
% vol. alcool, uneori chiar mai mult.
Temperatura optim este de 20-25oC i suport concentraii de pn la 250300 mg/l SO2 total.
Dup declanarea fermentaiei, ele pun stpnire rapid pe mediu, pentru ca
la sfritul procesului, numrul lor s scad foarte mult.

162

Fig. 80 Saccharomyces ellipsoideus (Sacch. cerevisiae)

2. Saccharomyces oviformis se prezint sub form oval, uneori rotund.


Aceast levur este specific regiunilor calde, unde strugurii realizeaz
concentraii ridicate n zahr. Prezint acelai randament n alcool, dar are o
putere alcooligen mai mare dect Sacch. Ellipsoideus, depind, uneori 18 % vol.
alcool.
Specia devine dominant spre sfritul fermentaiei i suport concentraii
de pn la 300 mg/l SO2 total i 100 mg/l SO2 liber.
Este considerat o bun levur de finisaj la prepararea vinurilor seci,
obinute din musturi bogate n zahr. n schimb, trebuie inactivat sau nlturat
din vinurile demiseci, demidulci i dulci, ntruct majoritatea accidentelor de
refermentare se datoreaz acestei specii.
3. Zygosaccharomyces bailii. Specie rezistent la concentraii mari de SO2,
putndu-se dezvolta pn la concentraii de 12 % vol. alcool. Provoac
mbolnvirea vinurilor demiseci i dulci sulfitate.
Contaminarea este facilitat de proprietatea ei de a fermenta cu uurin
fructoza, lsnd neatins glucoza.
Cum majoritatea levurilor fermenteaz mai nti glucoza, n vinurile dulcilicoroase zahrul restant este constituit n principal din fructoz.
4. Saccharomyces chevalieri se aseamn sub raporul activitii
fermentative cu Saccharomyces ellipsoideus dar sunt puin ntlnite n vinuri.
5. Saccharomyces bayanus este prezent n toate regiunile viticole, dar se
ntlnete n proporii foarte mici la fermentarea mustului, cnd formeaz proporii
mrite de acizi volatili i glicoli.
6. Saccharomyces italicus, Sacch. uvarum i Sacch. florentinus sunt levuri
specifice, n general, regiunilor viticole meridionale, au proprieti asemntoare
speciei Sacch. ellipsoideus dar cu o fermentare mai lent dect aceasta.
7. Saccharomyces rosei este o levur prezent constant pe struguri i n
musturi care fermenteaz. Are proprietatea de a fermenta lent dar regulat, cantiti
importante de zahr, fr formarea de acizi volatili. Este folosit pentru obinerea
vinurilor cu un coninut de pn la 12 % vol. alcool, pentru vinuri cu rest de zahr,
precum i pentru recolte atacate de man i putregai cenuiu, la care obinerea de
vinuri cu aciditate volatil sczut este o problem dificil.
163

8. Pichia membranefaciens, P. fermentans i Hansenula anomala sunt


levuri cu putere alcooligen slab, ncadrate n categoria levurilor patogene, care,
n condiii oxidative, provoac vinurilor boala denumit "floare". De asemenea,
afecteaz calitatea vinurilor prin proporii ridicate de esteri, acetat de etil, acetat
de amil, pe care i formeaz i care imprim mirosuri neplcute.
9. Saccharomycoides ludwigii este o levur de dimensiuni mari, de form
apiculat, rar ntlnit pe struguri i n musturi normale. Excepional de rezistent
la SO2 (700-1000 mg/l), este specific musturilor pstrate cu doze mari din acest
antiseptic. Este o levur patogen pentru vinurile demiseci sau dulci, aflate n
butoaie sau sticle, crora le provoac refermentri.
10. Hanseniospora valbyensis, H. uvarum, H. osmophila. Levur apiculat,
specific zonelor calde, provoac declanarea fermentaiei, aa cum n regiunile
rcoroase acest proces este declanat de Kloeckera apiculata. Are capacitate mare
de a asimila azotai.
II. Levuri nesporogene
1. Torulopsis stellata este o levur prezent pe strugurii stafidii, n urma
apariiei mucegaiului nobil. Prezint o rezisten mai mare dect levurile apiculate
la concentraii de SO2 i alcool, dar mai sczut dect Sacch. ellipsoideus.
2. Brettanomyces intermedius. Numele genului se datoreaz aciunii unor
specii de a imprima berii britanice gust i arom caracteristice, n urma unor
procese secundare de fermentaie.
Speciile acestui gen sunt ntlnite n proporii mici n musturi i vin. Mai
frecvent se ntlnesc n vinurile bolnave de floare, oetite. Prezena lor favorizeaz
formarea de acetat de etil i ali compui ce dau mirosuri intense, cu iz de oarece.
3. Candida vini (sin. Candida micoderma, Mycoderma vini). Speciile
acestui gen sunt cunoscute sub denumirea de "levuri de floare", producnd boala
denumit floarea vinului, caracterizat prin formarea unei pelicule la suprafaa
vinurilor slab alcoolice, pstrate n vase incomplet pline.
4. Kloeckera apiculata, cunoscut i sub denumirea de levur slbatic, este
extrem de rspndit pe toate fructele n regiunea cu climat temperat-rcoros.
Prezint celule sub form de lmie, avnd unul sau ambele capete ascuite (Fig.
81).
n practic, sunt cunoscute sub denumirea de levuri apiculate. Acestea apar
pe bace la faza de prg, iar la maturitatea deplin a strugurilor reprezint 99 %
din totalul levurilor existente n acest moment.
Ele declaneaz fermentaia mustului, avnd o capacitate foarte mare de
nmulire, randamentul n alcool este mai sczut dect al levurilor eliptice. Ele
consum pentru 1 ml alcool pur 2,1 g glucoz.
Puterea alcooligen este redus, realiznd 4-5 % vol. alcool, concentraie
maxim pn la care aceast specie poate rezista. Prezint o sensibilitate mai mare
dect levurile eliptice la SO2.

164

Fig. 81 Kloeckera apiculata

5. Rhodotorula mucilaginosa, Rh. glutinis i Rh. rubra sunt levuri denumite


i mucilaginoase, deoarece produc mucilagii n musturile i vinurile tinere, srace
n aciditate, i formeaz pigmeni carotenoizi galbeni pn la roii.
Se ntlnesc n pivniele de vinuri, n care formeaz, mpreun cu unele
bacterii i alte ciuperci, depuneri mucilaginoase pe pereii umezi. Dei sensibile la
alcool, prezint o rezisten mare la temperaturi ridicate (50-60oC) i la aciunea
substanelor alcaline (fosfat trisodic 1 %). Rezist la aciunea acidului boric pn
la concentraia de 3 %.
B. Mucegaiurile
Ciupercile care formeaz colonii pufoase, vizibile cu ochiul liber, sunt
denumite n practic mucegaiuri.
Mucegaiurile, obinuit aerobe, sunt foarte rspndite n natur, ntlnindu-se
aproape n toate mediile, datorit capacitii mari de nmulire i de rspndire,
precum i a rezistenei mari la condiiile mai puin prielnice de mediu.
Sunt frecvent ntlnite n plantaiile viticole, pe frunze, boabe, n sol, pe
utilajele i pereii pivnielor, precum i la suprafaa mustului, n primele etape de
vinificaie.
Mucor racemosus produce n plantaii, pe vreme ploioas, infecia
strugurilor. n cazul n care se afl complet scufundat n must, ciuperca se
prezint sub form de fragmente de sifonoplast; are capacitatea de a produce
fermentarea mustului pn la 5-7 % vol. alcool. Mucor circinelloides este o alt
specie, care este folosit la fabricarea berii. Mucor piriformis oxideaz parial
glucidele, cu formarea acizilor citric, oxalic, gluconic etc.
Rhizopus nigricans este frecvent pe strugurii vtmai, n pivnie sau pe
utilajele folosite n vinificaie, formnd pe suprafaa substratului degradat un
mucegai de culoare negricioas. Prezint capacitate mic de fermentaie.
Aspergillus niger se dezvolt n crame i pivnie, pe vase vinicole, dopuri,
formnd un mucegai negru. Aspergillus glaucus se ntlnete, mai frecvent, pe
suporturi lemnoase din pivnie.
Penicillium glaucum produce putrezirea boabelor incomplet maturate sau a
strugurilor vtmai de insecte sau grindin. n cazul n care contaminarea se
165

extinde devreme, se pot produce pierderi de recolt importante, boabele atacate


fiind complet distruse. Cnd atac strugurii copi, mustul obinut are gust amar. n
crame i pivnie se dezvolt pe dopuri, vase vinicole etc., ptrunznd n lemnul
doagelor. n timpul fructificrii secret esteri cu gust i miros caracteristic de
mucegai, ce se transmit vinului.
Genul Merulius cuprinde specii extrem de pgubitoare, care se dezvolt n
pivnie, pe butoaie, czi, pe rafturi, stelaje i orice obiect din lemn, pe care se
formeaz un miceliu alb, cu aspect buretos. Speciile genului Merulius formeaz
substane cu miros specific neplcut, unele atac numai celuloza, altele numai
lignina, transformnd lemnul ntr-o mas moale, de culoare brun sau alb.
Merulius lachrymans, denumit popular ciuperca igrasiei sau buretele de
cas, formeaz un mucegai alb-cenuiu i filamente izolate sau cordoane
compacte.
Cladosporium cellare se dezvolt pe toate substraturile lemnoase, dar i pe
pereii pivnielor i chiar pe ramele de fier, grilaje, srme etc., datorit capacitii
acesteia de a provoca microcondensarea pe suprafaa hifelor sale, a moleculelor
compuilor organici i anorganici n stare de vapori, existeni n aerul din pivni.
n unele pivnie, acest mucegai se dezvolt pe perei ntr-un strat gros cu
aspect de catifea i, datorit capacitilor sale de a purifica aerul i de a regla
umiditatea atmosferic, realizeaz condiii deosebite pentru maturarea i
nvechirea vinurilor.
Botryotinia fuckeliana prezint ca form conidian Botrytis cinerea i
produce "putregaiul cenuiu al strugurilor".
Aceast boal apare la intrarea n prg i este favorizat de crparea sau
rrirea pieliei boabelor, producia n unii ani putnd fi diminuat cu 60-90 %.
Vinurile obinute din strugurii atacai de aceast ciuperc sunt slab alcoolice,
neplcute la gust, cu miros specific de mucegai i care se mbolnvesc uor.
n unele toamne secetoase, cu diminei nelipsite de rou, apare aa- numitul
"putregai nobil", care conduce la obinerea unui must de nalt calitate. n acest
caz, scade mult coninutul boabelor n ap i crete concentraia n zahr (de la
200-220 pn la 400-500 g/l). Producia scade mult, uneori cu peste 40 %, dar se
obin vinuri cu o arom buchet deosebit i foarte plcut.

Fig. 82 Botryotinia fuckeliana

C. Bacteriile vinului
Bacteriile prezint o mare importan pentru calitatea vinurilor. Unele dintre
ele, n anumite condiii, pot contribui prin activitatea lor la mbuntirea acesteia;
166

cele mai multe pot provoca vinurilor transformri nedorite i chiar mbolnviri
grave.
n perioada recoltrii strugurilor, pe pielia boabelor, pe lng levuri i
mucegaiuri, se gsesc i bacterii, dar pot fi ntlnite, de asemenea, n crame i
pivnie, ndeosebi pe suprafaa intern a butoaielor i cisternelor n care se
fermenteaz mustul sau se pstreaz vinul i care nu au fost corect curate i
ntreinute.
Dup procesele pe care le declaneaz, bacteriile au fost grupate n:
I. Bacterii acetice, microorganisme aerobe, care se ntlnesc att pe strugurii
sntoi, ct i pe cei vtmai, precum i n musturi sau vinuri, mai ales cnd sunt
pstrate n vase incomplet pline.
Bacteriile acetice care se dezvolt n vin formeaz, la suprafaa acestuia, un
vl sau o pelicul, care, uneori, poate fi alburie, subire, aproape transparent, cu
reflexe irizante i care poate urca rapid pe pereii vasului.
Alteori, acest vl este mai gros, uleios, hidrofob i se coloreaz, pe msura
mbtrnirii, n brun.
ntr-un al treilea caz, vlul format atinge mai muli milimetri grosime, este
vscos, greu de desfcut i, care, cu timpul, cade la fundul vasului, cunoscut i sub
numele de cuib de oet.
Genul Acetobacter. Acest gen grupeaz specii cu celule sub form de
bastonae, dispuse izolat, n perechi sau lanuri, ce sunt imobile sau prevzute cu
cili dispui peritriche.
Speciile genului Acetobacter produc oxidarea etanolului pn la acid acetic,
la un pH de aproximativ 4, precum i a acidului acetic a lactaiilor i
aminoacizilor. Ciclul Krebs este prezent i activ. Se dezvolt la temperaturi
cuprinse ntre 5 i 42oC, cu un optim de 30oC.
Speciile cele mai importante sunt: Acetobacter aceti; Acetobacter
pasteurianus i Acetobacter peroxydans.
Genul Gluconobacter cuprinde bacterii asemntoare din punct de vedere
morfologic cu speciile genului Acetobacter. Singurul criteriu de difereniere l
reprezint flagelaia, cnd aceasta exist. Astfel, speciile genului Gluconobacter
sunt lofotriche (3-8 cili la fiecare pol), fa de ciliaia peritriche la Acetobacter.
Produc oxidarea moderat a etanolului pn la acidul acetic la un pH=4,5.
Temperatura optim de dezvoltare este 25-30oC, dar variaia acesteia poate fi
cuprins ntre 7 i 41oC. Fiziologic, se deosebete de genul Acetobacter prin
urmtoarele proprieti:
ciclul Krebs nu este complet;
nu oxideaz acidul acetic i lactaii pn la CO2.
II. Bacterii lactice
Reprezentanii acestui grup sunt facultativ-anaerobi i particip la o serie de
transformri n vin i anume:
167

transformarea glucidelor n acid lactic i ali produi secundari (glicerol, alcool


etilic, acid acetic etc);
fermentaia malolactic;
degradarea acidului tartric, citric;
degradarea glicerolului i a altor componeni.
Genul Pediococcus cuprinde bacterii Gram (+) cu aspect sferic, grupate sub
form de diplococi sau tetracoci. Sunt nesporulate, imobile, homofermentative.
Fermenteaz glucidele, iar acidul malic numai la pH ridicat. Nu degradeaz acidul
citric i tartric, din acest motiv nu sunt considerate duntoare.
Prezint dou specii importante:
- Pediococcus cerevisiae;
- Pediococcus pentosacens.
Genul Leuconostoc cuprinde bacterii Gram (+) cu celule de form sferic,
ovoid sau alungit, dispuse sub forma unor iraguri de mrgele, ca i streptococii.
Produc fermentaia malolactic numai n vinuri foarte acide, nesulfitate sau cu un
coninut redus de SO2.
Principalele specii:
- Leuconostoc gracile este specia cea mai frecvent n vinuri. Descompune
energic acidul malic i, n msur mai mic, acidul citric.
- Leuconostoc oinos

Genul Lactobacillus grupeaz bacterii Gram (+) i cuprinde :


- specii homofermentative: Lactobacillus acidophillus, Lactobacillus
helveticus.
- specii heterofermentative: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei,
Lactobacillus brevis.
8.1.2. Utilizarea microorganismelor n industria berii
n procesul de fermentaie a mustului de mal, obinut din cariopsele de orz
sau orzoaic, se utilizeaz dou tipuri diferite de levuri:
levuri de fermentaie inferioar - au proprietatea de a fermenta n condiii
submerse, iar la final levurile se depun la baza recipientului. Ex: Saccharomyces
carlsbergensis i Saccharomyces uvarum.
levuri de fermentaie superioar - au proprietatea de a fermenta la suprafaa
mustului. Ex: Saccharomyces cerevisiae.
8.2. Fermentaia lactic
Fermentaia lactic este un fenomen cunoscut nc din antichitate, ce a fost
explicat de L. Pasteur odat cu descoperirea bacteriilor lactice. Acidul lactic
rezultat din aceast fermentaie este un produs foarte util n medicin, industria
168

alimentar, la tbcirea pieilor, ca mordant n industria textil etc. Dup natura


produilor finali din fermentaie, bacteriile lactice (Fig. 83) pot fi mprite n
dou grupuri:
I. Bacterii lactice homofermentative transform substanele glucidice i
formeaz numai acid lactic cu un randament de 90-100%. Dintre acestea, cele mai
importante sunt: Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii, Lactobacillus
delbrueckii ssp. lactis, Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus
helveticus, Lactobacillus acidophilus, Pediococcus cerevisiae, Pediococcus acidi
lactici, Streptococcus lactis, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus etc.
II. Bacterii lactice heterofermentative formeaz cantiti mici de acid
lactic i cantiti nsemnate de acizi volatili i CO2. Cele mai obinuite sunt:
Lactobacillus buchneri, Lactobacillus casei, Lactobacillus brevis Lactobacillus
sake, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermenti, Lactobacillus bifidum,
Leuconostoc mesenterioides ssp. cremoris, Leuconostoc paracitrovorum .a.

Fig. 83 Lactobacillus sp. (www.wikipedia.com)

Pentru prepararea acidului lactic pe cale fermentativ se folosesc, ca materie


de baz, amidonurile, melasele, cerealele, zerul etc. Amidonul este, n prealabil,
zaharificat cu ajutorul malului din smna de orz germinat artificial. Plmada
dulce, care conine maltoz zaharificat de mal, se nclzete la 80 C pentru
omorrea microflorei, dup care este nsmnat cu o cultur de bacterii termofile
Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii.
Fermentaia dureaz 8-10 zile, timp n care microorganismele transform n
acid lactic pn la 98% din zahrul fermentat. Aceast fermentaie se produce
printr-un mecanism similar cu cel al fermentaiei alcoolice, adic tot prin formarea
iniial a unei aldehide (metilglioxal), urmat de transformarea acesteia n acid,
realizat pe cale enzimatic n mai multe trepte succesive:
1. C6H6O6 2 CH3-CO-CHO + 2H2O
glucoz metilglioxal
2. CH3-CO-CHO + 2H2O 2 CH3-CHOH-COOH
metilglioxal
acid lactic

169

Pentru a asigura multiplicarea mai departe a microorganismelor, acidul


lactic este neutralizat cu hidroxid de calciu pe msur ce se formeaz, dup reacia
:

acid lactic

lactat de calciu

Produsul final este lactatul de calciu.


Dac acidul lactic nu ar fi neutralizat, fermentaia s-ar opri, ntruct bacterile
lactice nu suport aciditatea. Din lactat, acidul lactic este separat prin adugarea
de H2SO4 , care precipit calciul sub form de CaSO4. Soluia diluat de acid lactic
obinut este evaporat n vid pn la concentraia de 50-80% acid lactic.
Fermentaia lactic are numeroase aplicaii practice n industria alimentar,
la prepararea laptelui acru, a iaurtului i kefirului, la conservarea legumelor i la
prepararea nutreului nsilozat.
8.2.1. Rolul microrganismelor n obinerea produselor lactate
Iaurtul este produsul obinut prin fermentarea laptelui cu o cultur mixt de
dou specii de bacterii lactice, Streptococcus salivarius ssp. thermophilus i
Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus n raport de 1:1. Rolul streptococilor i
lactobacililor la obinerea iaurtului const n acidifierea laptelui, sinteza de
compui de arom, dezvoltarea texturii i a vscozitii.
Bioiaurtul conine, pe lng bacteriile specifice, i Lactobacillus
acidophillus i Bifidobacterium bifidum. Acest produs are efect benefic
suplimentar, deoarece are efect de ameliorare a creterii bacteriilor, care, n mod
normal, fac parte din microbiota intestinal i ar putea ajuta la protecia fa de
unele boli, cum ar fi, cancerul i bolile coronariene. Bifidobacteriile se dezvolt la
o temperatur optim de 36-38oC.
Pentru fabricarea untului se poate utiliza smntn dulce sau fermentat,
care este sterilizat prin pasteurizare i, dup rcire, este inoculat cu culturi mixte
de bacterii lactice, aromatizante. Dintre acestea fac parte Lactococcus lactis ssp.
cremoris, Lactococcus lactis biovar. diacetylactis i Leuconostoc mesenteroides
ssp. cremoris, Lactococcus lactis ssp. lactis.
Pentru obinerea brnzeturilor se poate folosi lapte crud, n care bacteriile
lactice trebuie s reprezinte peste 50 % din totalul microbiotei i care se
pasteurizeaz, avnd grij s nu se produc denaturarea proteinelor din lapte.
Dup rcire, se face inocularea cu monoculturi sau culturi mixte specifice,
iar etapele tehnologice urmresc s dirijeze activitatea util a culturilor starter.
170

Principalele culturi de bacterii lactice folosite drept culturi de producie


pentru diferite tipuri de brnzeturi n Romnia sunt:
brnz proaspt de vaci: Lactococcus lactis, Lactococcus lactis var.
diacetylactis.
telemea: Lactococcus lactis, Lactobacillus casei.
cacaval: Lactococcus lactis, Lactobacillus casei, Streptococcus salivarius ssp.
thermophilus.
vaier: Streptococcus salivarius ssp. thermophilus, Lactobacillus delbrueckii
ssp. bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis, Lactobacillus helveticus,
Propionibacterium sp.
8.2.2. Rolul microorganismelor lactice n conservarea alimentelor murate
Una dintre aplicaiile practice importante ale fermentaiei lactice este
conservarea alimentelor prin murare. Astfel, varza murat se obine prin
fermentarea natural a sucului, care conine zahr i care este extras din frunze
prin adugarea de sare 2-3%, proces ce se petrece n mai multe faze:
Faza preliminar se petrece la nceputul fermentaiei, cnd se multiplic
microflora normal de bacterii Gram pozitive cu preponderena celor
heterofermentative de pe suprafaa verzei, din vas i din ap. Preponderent este
n aceast faz bacteria Leuconostoc mesenteroides, care descompune incomplet
zahrul din varz, cu formarea de acizi lactic i acetic plus diferii esteri, care dau
un gust i o arom particulare.
Faza primar sau principal ncepe cnd cantitatea de acid din mediu
atinge 0,7%. Se dezvolt sub influena bacteriilor homofermentative, care produc
mari cantiti de acid lactic; sub influena acestor concentraii, bacteriile i
nceteaz aciunea. Fermentaia este terminat de Lactobacillus brevis (specie
heterofermentativ), care produce acid lactic, alcool etilic, metilen i CO2 i care
este rezistent la un pH foarte sczut. ntregul proces dureaz 7-8 zile la
temperatura optim de 21C i nceteaz cnd cantitatea de acid acetic a ajuns la
1,5%.
Faza secundar se ntlnete cnd fermentaia nu decurge n condiii
normale i unele bacterii, drojdii i mucegaiuri produc denaturri i alterri ale
verzei murate ca nmuierea, putrezirea, bloirea (acoperirea cu un strat vscos) i
apariia de pete roii sau negre, nsoite de un miros dezagreabil.
n cazul castraveilor murai n saramur se petrec trei tipuri de fermentaii i
anume:
fermentaia determinat de Lactobacillus plantarum, din care rezult acid lactic
cu efect prezervant;
fermentaia produs de Aerobacter sp. cu eliminarea de ap i CO2;
fermentaia sub aciunea unor levuri cu formarea de CO2 i alcool.
Microorganismele se gsesc pe castravei i n mediul ambiant i produc
fermentarea zaharurilor extrase din soluie de saramur n 2-6 sptmni. Unele
microorganisme provoac alterarea castraveilor murai. Bacillus subtilis produce
171

nmuierea, datorit transformrii protopectinei n pectin solubil, i Bacillus


subtilis var. niger produce nnegrirea acestora.
8.2.3. Rolul microrganismelor n producerea furajelor nsilozate
nsilozarea sau murarea este cel mai bun mijloc de conservare a furajelor
suculente, mai ales a celor verzi, cu pstrarea calitii nutritive.
Procesul se bazeaz pe fermentaia lactic n condiii de anaerobioz a
zaharurilor ce intr n constituia plantelor, cu formarea de CO2, ap i o cantitate
variabil de acid lactic.
Plantele destinate nsilozrii sunt recoltate n perioada cnd produc cea mai
mare cantitate de mas verde i conin maximum de substane nutritive. Masa
vegetal este tocat i aezat n silozuri construite special sau n gropi, unde se
pstreaz pentru ndeprtarea aerului.
n prima perioad, oxigenul rmas n spaiile din siloz este consumat de
celulele vegetale i este nlocuit cu CO2, care creeaz condiii optime pentru
fermentaia anaerob. Paralel cu acest fenomen i mai ales pe msur ce
diminueaz procesele enzimatice din celulele plantelor supuse conservrii, ncepe
dezvoltarea florei epifite, format din Pseudomonas fluorescens i a unor bacterii
din sol ca Bacillus subtilis, Bacilllus megaterium, Clostridium sporangenes i
altele. Multiplicarea acestor bacterii nceteaz pe msura acumulrii acidului
lactic, produs de bacteriile lactice, prezente i ele n frunze.
Deoarece, la nceput, cantitatea natural de acid lactic este mic, se adaug
n masa nsilozat culturi de Lactobacillus delbrueckii ssp. delbrueckii i
Lactobacillus plantarum, precum i o soluie de melas 1% pentru grbirea
fermentaiei. n ara noastr exist un biopreparat, denumit Lactobacterin, care
este o cultur de Lactobacillus plantarum. Dup 2-3 sptmni, cnd reacia
mediului a atins pH = 4,4, fermentaia nceteaz.
Silozul astfel obinut poate fi pstrat chiar pn la 3 ani, cu condiia s fie
ferit de mucegaiurile care descompun acidul lactic.
Dac nsilozarea s-a fcut defectuos, se produce, pe lng fermentaia
lactic, i o fermentaie butiric, i furajele capt un miros neplcut, fiind
refuzate de animale.
8.3. Fermentaia acetic
Acest proces este, de fapt, impropriu numit fermentaie, deoarece acidul
acetic se obine n condiii de aerobioz, prin oxidarea alcoolului n prezena
oxigenului gazos de ctre bacterii, aparinnd genului Acetobacter.
Dei oetul este cunoscut din cele mai vechi timpuri, abia n 1837, Ktying a
emis ipoteza c transformarea alcoolului n acid acetic este produs de
microorganisme. Ulterior, n 1868, Pasteur a confirmat ipoteza i a descris, pentru
prima dat, microorganismul Mycoderma aceti.

172

Dezvoltarea spontan a bacteriilor acetice n timpul pstrrii unor produse


alcoolizate, ca vinul sau berea, este duntoare, deoarece produce oetirea
buturilor .
Pentru prepararea industrial a acidului acetic se folosesc culturi de bacterii
selecionate, care pot produce pn la 10% acid acetic de calitate.
Bacteriile acetice sunt microorganisme aerobe, din genul Acetobacter, care
triesc la suprafaa mediilor alcoolizate, formnd o pelicul bacterian groas
(Fig. 84).

Fig. 84 Acetobacter aceti (www.vinegarman.com)

Cele mai folosite bacterii n producerea oetului sunt grupate n patru


categorii, funcie de mediul din care au fost izolate:
I. Bacterii acetice izolate din plmad:
Gluconobacter oxidans, izolat din sticle de bere fermentat;
Gluconobacter oxidans ssp. Industrium, izolat din drojdia uscat.
II. Bacterii acetice din bere:
Acetobacter aceti suport pn la 11% alcool i poate produce 4-6% acid
acetic;
Acetobacter pasteurianum suport 9,5% alcool i produce 6,2% acid acetic;
Termobacterium aceti este prezent n depozitele de bere;
Acetobacter kutzingianum este izolat din sake.
III. Bacteriile izolate din vin cuprind cteva specii ca:
Acetobacter orleanensis formeaz un vl subire, adeseori roz, i care are
tendine de a se nla pe pereii vasului. Poate produce 9,3% acid acetic. Oetul
provenit din aceast specie este parfumat i limpede.
Acetobacter ascendens este izolat din oetul de vin; formeaz un voal ce se
rupe uor;
Acetobacter xylinum este izolat din oet de vin; suport alcool i produce
4,1% acid acetic.
IV. Bacterii acetice fermentative rapide:
Acetobacter acetigenu se prezint ca celule rotunde, ce nu formeaz lanuri i
produce numai 3% acid acetic.
Acetobacter schtzenbachii se prezint sub form de bastonae de 1,6-3,6
m lungime x 0,3-0,4 m grosime i poate produce 11-14% acid acetic.
173

Acetobacter curvum produce un voal subire, uor de rupt, cu numeroase pete


albe.
Reacia probabil de transformare a alcoolului n acid acetic const, iniial,
n dehidrogenarea alcoolului cu formare de acetaldehid; ulterior, acetaldehida
fixeaz o molecul de ap, formnd hidrat de acetaldehid, iar prin hidrogenare
rezult acid acetic.
n oetul produs pe cale natural mai apar urme de diferii esteri, ca acetatul
de etil i cantiti mici de alcool, glicerin, uleiuri volatile, care dau aroma plcut
caracteristic.
Materia prim folosit n producie este orice produs capabil s produc prin
fermentaie alcool etilic, care, ulterior, este supus fermentaiei acetice. Se folosesc,
deci, vin, bere, sucuri de fructe, siropuri de zahr i materiale amidonoase
hidrolizate iar calitatea produsului final este n funcie de compoziia materiei
prime utilizate.
Exist mai multe metode de preparare a oetului:
1. Metoda francez (orleanez sau lent) folosete ca materie prim un
amestec de vin cu 4% alcool i oet cu 2% acid acetic. Se pune n butoaie de 200
litri jumtate din volum oet i 10-15 l vin. Dup fiecare 7 zile, timp de 4
sptmni, se adaug cte 10-15 l vin. Adaosul de oet are ca scop s mpiedice
dezvoltarea microflorei normale din mediu.
Producerea oetului are loc lent, pentru c bacteriile vin n contact cu aerul
numai la suprafaa luchidului; acesta face ca n oet s se formeze substane
aromatice, care dau acestuia un buchet aparte. Dup 5-6 sptmni, se ajunge la
concentraia de 5-6 % acid acetic, se recolteaz 10-15 litri oet i se adaug o
cantitate egal de vin, dup care procesul se repet.
2. Metoda german, rapid, folosete un amestec de lichid format din alcool
etilic 3% i oet 6%, un adaos nutritiv pentru bacterii, care este introdus n butoaie
de lemn.
n vas se gsete talaj fin de lemn de fag, care mrete suprafaa de oxidare;
se adaug bacterii selecionate, ca Acetobacter orleanense, Acetobacter
schtzenbachii, Acetobacter acetigenum, i se asigur circulaia aerului.
Amestecul de alcool-acid acetic este turnat pe la partea superioar a vasului,
se filtreaz prin stratul de talaj, unde alcoolul se oxideaz, iar la partea inferioar
se colecteaz un lichid bogat n acid acetic (9%) i aproape lipsit de alcool. Pentru
ca oxidarea s fie complet, acelai lichid se trece de trei ori prin stratul de talaj.

TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)

1. Fermentaia alcoolic a mustului este realizat de:


a) bacterii acetice
b) mucegaiuri
c) levuri
174

2. Specia cu putere alcooligen cea mai mare este:


a) Candida vini
b) Kloeckera apiculata
c) Saccharomyces oviformis
3. Fermentaia malolactic a vinului este produs de:
a) levuri
b) bacterii lactice
c) bacterii acetice
d) mucegaiuri

4. Putregaiul nobil al strugurilor este produs de:


a) Merulius lachrymans
b) Aspergillus niger
c) Botryotinia fuckeliana

Rezultate corecte:
1 c; 2 - c; 3 - b; 4- c.

Rezumat (U.I. 8)
Microbiologia fermentaiilor studiaz caracteristicile biologice i biochimice,
precum i condiiile optime de activitate ale microorganismelor care produc
transformri chimice n diferite substraturi, cu formarea unor cantiti relativ mari
de substane cu valoare util sau economic.
Fermentaia alcoolic- Este un proces anaerob, prin care glucidele
fermentescibile sunt metabolizate prin reacii de oxido-reducere sub aciunea
echipamentului enzimatic al drojdiei n produi principali (alcool etilic i CO2),
produi secundari (alcooli superiori, acizi, aldehide etc) i energie.
Fermentaia lactic - Este un fenomen cunoscut nc din antichitate, ce a
fost explicat de L. Pasteur odat cu descoperirea bacteriilor lactice. Acidul lactic
rezultat din aceast fermentaie este un produs foarte util n medicin, industria
alimentar, la tbcirea pieilor, ca mordant n industria textil etc. Dup natura
produilor finali din fermentaie, bacteriile lactice pot fi mprite n dou grupuri:
I. Bacterii lactice homofermentative
II. Bacterii lactice heterofermentative
Fermentaia acetic

175

Acest proces este, de fapt, impropriu numit fermentaie, deoarece acidul


acetic se obine n condiii de aerobioz, prin oxidarea alcoolului n prezena
oxigenului gazos de ctre bacterii, aparinnd genului Acetobacter

1. Fermentaia alcoolic
Materiile prime folosite la fabricarea alcoolului sunt:
- materii prime amidonoase.
- materii prime zaharoase.
- materii prime celulolitice.
2. Utilizarea microorganismelor n vinificaie
Levurile
Principalele levuri ntlnite n vin
Levuri sporogene
Saccharomyces spp
Pichia spp..
Saccharomycoides sp.
Hanseniospora spp
Levuri nesporogene
Torulopsis sp
Brettonomyces sp
Candida sp.
Kloeckera sp
Rhodotorula sp.
Mucegaiurile
Mucor spp.
Rhizopus sp
Aspergillus spp.
Penicillium spp
Merulius sp.
Cladosporium sp.
Botryotinia sp
Bacteriile vinului
Bacteriile acetice
Genul Acetobacter
Genul Gluconobacter
Bacterii lactice
Genul Pediococcus
Genul Leuconostoc
Genul Lactobacillus

176

Lucrare de verificare nr.8


(se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau prin pot,
pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din semestrul I)
1. Descriei fermentaia alcoolic. (5 puncte)
2. Prezentai care este modul de utilizare al microorganismelor n vinificaie.
(5puncte).

BIBLIOGRAFIE (U.I. 8)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992

177

BIBLIOGRAFIE SELECTIV

Anghel I., Toma M., Voica C., Cojocaru I. Biologia i tehnologia


drojdiilor, Vol. I - 1989, Vol. II - 1991, Vol. III -. Ed. Tehnic, Bucureti, 1993
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Buchanan R.E., Gibbons N.E. Bergeys manual of determinative
Bacteriology, Ed. Wiliams, USA, 1975
Cardon Zoe G., Whitbeck Julie L. The rhizospherean ecological
perspective, Ed. Academic Press, San Diego, USA, 2007
Carp-Crare M. Microbiologie, Institutul Agronomic Ion Ionescu de la
Brad Iai, 1991
Coman I., Mare M. Micologie medical aplicat, Ed. Junimea, Iai, 2000
Constantinescu O. Metode i tehnici n micologie, Ed. Ceres, Bucureti,
1974
Dan Valentina Microbiologia produselor alimentare, Ed. Alma, Galai,
Vol. I, II, 1999, 2000
Delfini C. Scienza e tecnica di microbiologia enologica, Ed. Il Lievito,
Italia, 1995
Eliade Gh., Ghinea L., tefanic Gh. - Bazele biologice ale fertilitii
solului, Edit. Ceres, Bucureti, 1983
Gaillardin C., Heslot H. La levure, Ed. La Recherche, 188 (18) 586-596,
1987
Graham H. Fleet Wine microbiology and biotechnology, Ed. Harwood
Academic Publishers, Switzerland, 1993
Grodzinsky A. M. Allelopathy in soil sickness, Ed. Scientific Publisher
(India), Jodhpur, 2006
Hatman M. Microbiologie - lucrri practice, Universitatea Agronomic
Iai, Centrul de multiplicare, Iai, 1990
Hatman M., Ulea E. Microbiologie Curs, Universitatea Agronomic
Iai, Centrul de multiplicare, Iai, 1993
Hughes M.N., Poole R.K., 1989 Metals and Micro-organisms, Ed.
Chapman & Hall, Londra, New York.
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Kiss t., tefanic Gh., Pasca Daniela, Drgan-Bularde Zborovschi, Crian
R. - Enzimologia mediului nconjurtor, Ed. Ceres, Vol. I - 1991, Vol. II - 1993.
Korn R. Microbiologia laptelui i produselor lactate, Ed. Ceres,
Bucureti, 1989
Leclerc H. Microbiologie, Ed. Doin Deren & Cie, France, pag. 341-531,
1976
178

Ldder J., Kreger Van Rij N. J. W. The yeasts, a taxonomic study, Ed.
North Holland Publishing Company, Amsterdam, 1952
Ldder J., Kreger Van Rij N. J. W. The yeasts, a taxonomic study-second
edition, Ed. North Holland Publishing Company, Amsterdam, 1970
Lwoff A., Horne R., Tournier P. A system of viruses. Cold Spring Harb
Symp Quant Biol., 27, 51-55, 1962
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Mzreanu C. Microbiologie general, Ed. Alma Mater, Bacu, 1999
Mihescu G., Gavril L. Biologia microorganismelor fixatoare de azot,
Ed. Ceres, Bucureti, 1989
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Pamfil D. Microbiologie, Ed. Genesis, Cluj Napoca, 1999
Papacostea P. Biologia solului, Ed. tiinific i Enciclopedic, Bucureti,
1976
Popa I. A., Teodorescu C. t. Microbiologia vinului, Ed. Ceres, Bucureti,
1990
Priest F., Austin B. Modern bacterial taxonomy, Ed. Chapman & Hall,
Londra, Marea Britanie, 1993
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
esan Tatiana Eugenia, Tnase C. Mycobiota- Sisteme de clasificare, Ed.
Universitaii Alexandru Ioan Cuza Iai, 2006
esan Tatiana Eugenia, Tnase C. Ciuperci anamorfe fitopatogene, Ed.
Universitii din Bucureti, 2007
Tnase C. Micologie, Ed. Universitii Alexandru Ioan Cuza Iai, 2002
Tnase C., esan Tatiana Eugenia Concepte actuale n taxonomia
ciupercilor, Ed. Uniersitii Alexandru Ioan Cuza, Iai, 2006
Tofan Clemansa Microbiologie alimentar, Ed. Agir, Bucureti, 2004
Topal N.D. Microbiologie general, vol. I, II. Universitatea Al. I. Cuza,
Iai, 1978
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992
Ulea E., Iacob Viorica, Ilisescu Izabela The lignicole micromycetes of
cherry and plum trees from Central Area of Moldavia, USAMV Iai, Lucrari
Stiintifice, Seria Horticultura , 48, 665-670, 2005
Ulea E., Ilisescu Izabela, Mocanu Aliona., Sava D. The effect of the
fertilization with Vinassa Rompak product on the biological activity of the
cultivated soils, J. Central European Agr, 7, 297-300, 2006

179

Ulea E., Lipa F. D. Analysis of microbial community on mine tailings


from the national park of Climani mountain (Eastern Carpathians), Research
Journal of Agricultural Science, vol. 41 (1), p. 518-522, 2009
Ulea E., Lipa F.D., Chiriac Irina Paraschiva, Coroi Irina Gabriela Effects
of chlorsulfuron on soil microbial population, Universitatea de tiine Agricole i
de Medicin Veterinar Ion Ionescu de la Brad Iai, Lucr. t. Seria Agronomie,
vol. 53(1), p. 157-161, 2010
Ulea E., Lipa F.D., Chiriac Irina Paraschiva, Coroi Irina Gabriela
Acetochlor influence on soil microbial communities, Universitatea de tiine
Agricole i de Medicin Veterinar Ion Ionescu de la Brad Iai, Lucr. t. Seria
Agronomie, vol. 53(1), p. 153-157, 2010
Ungureanu Elena, Ulea E., Iacob Viorica On the biocide properties of
some products based on natural aromatic compounds. Cellulose Chemistry and
Technology, 42 (7-8), 381-386, 2008
Van Elsas J. D., Jansson Janet, Trevors J. T. Modern soil microbiology
second edition, CRC Press, SUA, 2007
Whittaker R. H. New concepts of kingdoms or organisms. Evolutionary
relations are better represented by new classifications than by the traditional two
kingdoms. Science, 163(863):150-60, 1969
Widmer F., Beffa R. Aide-mmoire de biochimie et de biologie
molculaire, Editions Mdicales Internationales, ISBN: 2- 7430-0175-5, Frana,
1997
Wood M. Soil biology. Ed. Blackie, New York, SUA, 1989
Zamfirache Maria-Magdalena, Toma C., 2000 Simbioza n lumea vie, Ed.
Univ. Alexandru Ioan Cuza Iai.
Zarnea Gh. Tratat de microbiologie general, Ed. Academiei Romne,
Bucureti, Vol. I - 1983, Vol. II - 1984, Vol. III - 1986, Vol. IV - 1990,Vol. V 1994.

180