Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Eugen ULEA
Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar
Ion Ionescu de la Brad Iai
MICROBIOLOGIE
(SUPORT DE STUDIU I.D)
Iai - 2015
9
CUPRINS
INTRODUCERE
U.I. 1 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE ....................................................................................... 21
1.1. Poziia microorganismelor n lumea vie .................................... 24
1.2. Prionii ....................................................................................... 26
1.3. Virusurile .................................................................................. 28
1.3.1. Morfologia virusurilor ....................................................... 28
1.3.2. Structura virusurilor........................................................... 29
1.3.3. Virusurile plantelor............................................................ 30
1.3.4. Bacteriofagii ...................................................................... 31
1.3.5. Fagii filamentoi................................................................ 36
1.3.6. Cianofagii.......................................................................... 36
1.3.7. Micovirusurile ................................................................... 36
1.3.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea virusurilor ........ 37
U.I. 2 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE ............................................................................................40
2.4. Bacteriile ............................................................................. 41
2.4.1. Morfologia bacteriilor........................................................ 42
2.4.2. Structura celulei bacteriene ................................................ 46
2.4.3. Compoziia chimic a bacteriilor ....................................... 54
2.4.4. Creterea i multiplicarea bacteriilor .................................. 55
2.4.5. Nutriia bacteriilor ............................................................. 57
2.4.6. Respiraia microorganismelor ............................................ 58
2.4.7. Grupe particulare de bacterii .............................................. 58
2.4.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea bacteriilor ......... 61
2.4.9. Rolul bacteriilor n natur .................................................. 62
2.5. Cyanobacteriile (algele albastre-verzi) ...................................... 63
2.5.1. Morfologia cyanobacteriilor .............................................. 63
2.5.2. Structura cyanobacteriilor .................................................. 63
2.5.3. Sistematica cyanobacteriilor .............................................. 64
2.5.4. Rolul cyanobacteriilor n natur ......................................... 65
U.I. 3 - CARACTERELE GENERALE I POZIIA MICROORGANISMELOR
N LUMEA VIE .............................................................................................67
3.1. Protozoarele .............................................................................. 68
3.1.1. Morfologia i fiziologia protozoarelor ............................... 68
3.1.2. Structura protozoarelor ...................................................... 68
3.1.3. Reproducerea protozoarelor ............................................... 69
3.1.4. Nutriia protozoarelor ........................................................ 70
3.1.5. Sistematica protozoarelor .................................................. 70
3.1.6. Rolul protozoarelor n natur ............................................. 71
3.2. Diatomeele................................................................................ 71
3.2.1. Morfologia diatomeelor ..................................................... 71
3.2.2. Structura diatomeelor ........................................................ 72
10
12
INTRODUCERE
Microbiologia este tiina care se ocup cu studiul microorganismelor.
Microorganismele constituie un grup foarte mare de organisme, diferite ca natur,
form i activitate biologic, cu o organizare unicelular i o structur intern
relativ simpl, avnd ns caractere comune dimensiunile microscopice, care le
fac invizibile cu ochiul liber.
Din grupul microorganismelor fac parte bacteriile, ciupercile microscopice
(mucegaiurile i levurile), algele unicelulare i protozoarele. Lumii
microorganismelor i-au fost alturate i virusurile, care sunt entiti infecioase,
alctuite din componentele chimice eseniale ale organismelor vii, proteine i acizi
nucleici cu o organizare acelular, care le fac inapte de a se multiplica n afara
unei celule vii, fapt ce le oblig la un parazitism intracelular absolut.
Dei Microbiologia este o tiin relativ tnr, datorit domeniului de
studiu foarte vast, n cadrul ei s-au difereniat o serie de discipline microbiologice
independente. Acestea pot fi grupate dup mai multe criterii:
A. Dup grupul taxonomic studiat:
Virologia (virusologia) este tiina ce se ocup cu studiul virusurilor i
aciunea lor asupra organismelor vii.
Bacteriologia se ocup cu studierea, identificarea i cultivarea bacteriilor,
14
15
Fig. 3 Antony van Leeuwenhoek. (a) Microscop cu lentil (1), dispozitiv de fixare (2) i
uruburi de reglaj (3, 4). (b) Tipuri morfologice de bacterii desenate de Leeuwenhoeck.
"Chaos".
Terehovski, folosind pentru prima dat
metode experimentale, public, n anul 1775,
lucrarea "De Chao infusorii Linnaei", n care
demonstreaz c fiinele foarte mici, observate
n diferite infuzii bogate n substane organice,
cresc, se divid i se mic datorit unor fore
interne proprii, ajungnd la concluzia c aceste
organisme sunt adevrate animale n miniatur.
Louis Pasteur (1822-1895), savant
francez, prin lucrrile sale stabilete principiile
care stau i azi la baza acestei tiine.
Primele cercetri ale lui Pasteur au fost
legate de fenomenul asimetriei moleculare. La
acidul tartric racemic, compus inactiv pentru
Fig. 5 Louis Pasteur
lumina polarizat, demonstreaz c este un
amestec echimolecular de acid dextrogir i acid levogir, ale crui cristale sunt de
forme asimetrice i enantiomorfe. De asemenea, a observat c, dac n amestecul
16
Fig. 5 Experimentul lui Pasteur prin care combate teoria generaiei spontane. A:
mediul nutritiv este introdus ntr-un balon; B. curbarea gtului balonului (gt de
lebd"); C. sterilizarea mediului nutritiv; D. mediul nutritiv rmne steril fiind protejat
de ptrunderea microorganismelor din atmosfer prin forma gtului.
20
21
Procariote
Bacterii
Cyanobacterii
Fr membran proprie
O singur molecul de
ADN dublu catenar,
nelegat de histone
Lipsit de steroli
(cu excepia
micoplasmelor)
Face parte din membrana
citoplasmatic sau
mezozomi
Absent sau asociat
membranei citoplasmatice
Tip 70 S
Abseni
Conine peptidoglicani
(murein)
Absent
Direct (sciziparitatea)
23
Eucariote
Alge, Fungi, Protozoare,
Plante, Animale
Cu membran proprie
Unul sau mai muli
cromozomi. ADN dublu
catenar, legat de histone
Conine steroli
Mitocondrii
Cloroplaste
Tip 80 S
Prezeni
Cnd este prezent conine
celuloz, chitin, silice
Prezent
Mitoz
Material nuclear
(ADN)
Citoplasm
Plasmid
Ribozom
Fimbrii
Flageli
Incluziune
Capsul
Perete celular
Membran
citoplasmatic
Vacuol
Riboszomi
(liberi)
Cloroplast
Ribozomi
(ataai)
Membran
celular
Perete
celular
Membran
nuclear
Nucleol
Aparat Golgi
Nucleu
Mitocondrie
1. Regnul Plantae;
2. Regnul Animalia.
B. Sistemul lui Hogg i Haeckel (1866):
1. Regnul Monera;
2. Regnul Plantae;
3. Regnul Animalia.
C. Sistemul lui Copeland (1938):
1. Regnul Procaryotae (Monera);
2. Regnul Protista;
3. Regnul Plantae;
4. Regnul Animalia.
D. Sistemul lui Whittaker (1969):
1. Regnul Procaryotae (Monera)
(bacterii, cianobacterii = alge albastre-verzi);
2. Regnul Protista (protozoare, diatomee);
3. Regnul Fungi (ciuperci);
4. Regnul Plantae (alge verzi, brune, roii, brofite, traheofite);
5. Regnul Animalia (animale multicelulare).
Astzi, majoritatea specialitilor din domeniul microbiologiei au acceptat
sistemul de clasificare elaborat de Whittaeker (Fig. 17) n anul 1969, care
corespunde necesitilor actuale.
25
Organisme
eucariote
Organisme
procariote
LUMEA VIE
Fig. 17 mprirea lumii vii n cinci regnuri (dup Whittaker, 1969)
1.2. Prionii
Prionii sunt ageni infecioi neconvenionali de natur proteic, lipsii de
orice tip de acid nucleic, care produc un grup de boli neurodegenerative,
transmisibile la animale i om, numite boli prionice. Procesul care declaneaz
boala este reprezentat de conversia unei proteine normale, sintetizat n mod
natural n creierul tuturor mamiferelor (PrPc), ntr-una mutant, patogen (PrPSc).
Prima semnalare a unei boli de natur prionic a fost fcut n Anglia, n
anul 1732, la ovine.
Astzi, sunt cunoscute ca boli certe, produse de prioni, urmtoarele:
26
- la animale:
1. encefalopatia spongiform la ovine, denumit popular scrapie (engl.);
tramblanta (fr.). n Romnia mai este utilizat, impropriu, termenul de "cpiala"
oilor, dar aceasta este o boal bine cunoscut i este produs de un parazit animal.
Medicii veterinari avizai folosesc termenul francez de tramblanta oilor.
2. encefalopatia spongiform bovin (BSE sau "boala vacii nebune");
3. encefalopatia spongiform la
feline;
4. encefalopatia spongiform la
nurci;
5. encefalopatia spongiform la
hamsteri.
- la om:
1. Boala "Kuru". Aceasta este
prima semnalat i cel mai bine
studiat. A fost depistat la un trib
Fig. 18 Proteina prionic (huPrP)
local n Papua - Noua Guinee. Dup
responsabil pentru o serie de boli prionice la
interzicerea consumului de carne n
om (www.itqb.unl.pt).
stare proaspt, aceast boal a fost
eradicat.
2. Boala Creutzfeldt-Jacob (CJD);
3. Sindromul Alpers (la copii);
4. Sindromul Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS);
5. Insomnia fatal familial (FFI).
Agentul infecios
n prezent, se consider c agentul infecios este o molecul proteic, cu
greutatea molecular de 28 kilodaltoni, alctuit dintr-un lan de 208-220 de
aminoacizi, n funcie de specie, i care prezint o configuraie spaial,
asemntoare unui metru de tmplrie, parial destins. Prezint un capt NH2terminal, o regiune central i un capt COOH-terminal.
Aceast protein a fost izolat din creierul tuturor cazurilor bolnave studiate.
Surpriza a sosit n momentul studierii n paralel (la oi) a creierului la animale
sntoase i care prezint o protein celular similar. Lanul de aminoacizi este
identic cu excepia unui singur aminoacid (schimbat).
Proteina celular normal (PrPc) prezint o configuraie spaial
asemntoare unui resort. Specialitii din biochimie consider c, prin schimbarea
unui singur aminoacid din lan, nu se poate modifica configuraia spaial. n
acelai timp, proteina infecioas (PrPSc) rezist la atacul proteazelor celulare.
Se consider c procesul infecios se desfoar astfel: celula prepar
proteina celular normal care se acumuleaz n lizozomi, acetia o transport la
exteriorul celulei i n momentul n care aceast protein ptrunde din nou n
celul este degradat de proteaze.
27
28
29
Capsid
Acid nucleic
(ADN sau ARN)
nveli extern
(peplos)
Spicule
FIBRELE COZII
COADA
FAGULUI
Croetele cozii
PLACA
BAZAL
Gulerul fagului este situat ntre dopul proteic i coada fagului i are forma
unui disc hexagonal de 1,5 nm grosime cu de 3,6 nm.
Placa bazal este un disc hexagonal cu de 40 nm i este prevzut la
partea inferioar cu ase crlige (croetele cozii sau spicule), care sunt uniti
integrale de fixare a fagului pe bacterie.
n momentul contraciei, placa bazal ia forma de stea cu diametrul mrit la
60 nm i este lipsit de dopul central.
Fibrele cozii sunt structuri filamentoase, proteice, de 130 nm lungime, fixate
cu unul dintre capete pe placa bazal, iar cu cellalt capt pe gulerul fagului, cea
de-a doua legtur fiind mai slab.
Aceste fibrile formeaz o reea, care mbrac teaca contractil a cozii i,
care, n perioada premergtoare fixrii fagului, se desprind de pe guler i rmn
legate numai pe placa bazal, notnd libere n mediu, avnd aspectul unor
picioare de pianjen.
Structura genomului
Bacteriofagii prezint, n majoritate, un genom format dintr-o singur
molecul de acid nucleic (ADN m.c., ADN d.c. , ARN m.c.), cu o singur
excepie, fagul 6 de la Pseudomonas phaseolicola, care are un genom ARN
segmentat, format din trei segmente.
Genomul bacteriofagilor se deosebete de genomul virusurilor animale i
vegetale prin prezena unor baze nucleice neobinuite, cum ar fi la bacteriofagii
32
Proteine virale
35
1.3.6. Cianofagii
Cianofagii (sin. ficovirusuri, algofagi) sunt ageni virali, capabili s produc
infecii la numeroase specii de cianobacterii (alge albastre-verzi), influennd,
astfel, dinamica acestor populaii, n sensul meninerii unui echilibru n bazinele
acvatice naturale.
Sunt similari ca structur i evoluie cu bacteriofagii T-impar, genomul fiind
reprezentat de ADN dublu catenar de 13,2 m.
1.3.7. Micovirusurile
Sunt virusuri care atac fungii, fiind cunoscute i sub denumirea de
micofagi. Din cele peste 50 de genuri atacate menionm: Penicillium,
Aspergillus, Mucor, Fusarium, Saccharomyces, Candida etc.
36
Structura micovirusurilor. Cel mai bine studiat este virusul care infecteaz
specia Penicillium chrysogenum, care se prezint sub forma unor mici particule
poliedrice, cu de 33-41 nm. Genomul este reprezentat de o molecul de ARN
d.c.
La fungi, virusurile sunt, n general, latente, celulele se dezvolt mai lent,
dar nu lizeaz constant. Micovirusurile au fost evideniate i n sporii fungilor.
Transmiterea micovirusurilor, n general, se face n urma plasmogamiei
(heterocarioza).
1.3.8. Sistematica, nomenclatura i identificarea virusurilor
Prima clasificare a virusurilor poart numele de sistemul LHT i a fost
realizat n anul 1962 de ctre cercettorii Lowoff, Horn i Tournier. Sistemul
ofer o prim clasificare tiinific a virusurilor, bazat pe urmtoarele criterii:
1) natura materialului genetic;
2) tipul de simetrie a capsidei;
3) prezena sau absena nveliului extern;
4) dimensiunea virionului i a capsidei.
n prezent, exist dou sisteme principale utilizate pentru clasificarea
virusurilor:
1. Sistemul de clasificare ICTV . Centrul Internaional de Taxonomie a
Virusurilor (ICTV = International Comitee on Taxonomy of Viruses) a elaborat, la
nceputul anilor 1990, un sistem de clasificare i nomenclatur a virusurilor. ICTV
are sarcina de a actualiza i de a menine un sistem taxonomic universal.
Conform acestui sistem, la clasificarea virusurilor se ine cont de
urmtoarele aspecte :
proprieti morfologice (mrimea i forma virionului, structura i simetria
capsidei, etc.);
proprieti fizico-chimice i fizice (greutatea molecular, coeficientul de
sedimentare);
genomul (tipul acidului nucleic, monocatenar sau bicatenar);
organizarea i replicarea genomului;
proprietile antigenice;
proprieti biologice (spectrul de gazde, modul de transmitere n natur, relaiile
cu vectorii).
Unitile taxonomice pentru virusuri ncep la nivel de ordin i fiecare taxon
prezint sufixul, scris cursiv ntre paranteze.
Ordin (-virales)
Familie (-viridae)
Subfamilie (-virinae)
Gen (-virus)
Specie
Conform datelor publicate n 2010 de Centrul Internaional de Taxonomie a
Virusurilor, n schema taxonomic sunt cuprinse: Sase ordine, 87 familii, 19
subfamilii, 348 genuri i 2285 specii de virusuri. Cele ase ordine stabilite de
37
Mononegavirales,
Nidovirales,
38
Rezultatele corecte:
1 - a; 2 - b; 3 - a; 4 - b
Rezumat (U.I. 1)
Poziia microorganismelor n lumea vie
1. Regnul Procaryotae
(bacterii, cianobacterii = alge albastre-verzi);
2. Regnul Protista (protozoare, diatomee);
3. Regnul Fungi (ciuperci);
4. Regnul Plantae (alge verzi, brune, roii, brofite, traheofite);
5. Regnul Animalia (animale multicelulare).
Prionii sunt molecule proteice cu greutatea molecular de 27 kilodaltoni, alctuite
dintr-un lan de cca. 240 de aminoacizi.
Virusurile sunt entiti infecioase constituite din protein i un acid nucleic.
Morfologia virusurilor
-form cilindric-alungit sau de bastona;
-form sferic (izometric);
-form paralelipipedic;
-form de cartu sau obuz;
-form de mormoloc, sau cirea cu coad;
Dimensiunile virusurilor = 17 nm - 2500 nm.
Structura virusurilor
Genomul viral (ADN sau ARN, niciodat ambele) i capsida viral
alctuit din subuniti proteice
40
41
Sarcina, la care planurile de diviziune sunt orientate dup cele trei direcii ale
spaiului i reciproc perpendiculare unul pe altul, rezultnd o grupare de celule sub
form de cub (ex. Sporosarcina ureae).
43
2. Bacteriile cilindrice, cunoscute sub denumirea de bacili (lat. bacillus bastona), au form de bastonae, cu raportul ntre cele dou axe foarte diferit, de
la forme cu aspect filamentos, pn la unele cu aspect aproape sferic (cocobacili,
ex. Pasturella pestis). Bacilii sunt drepi sau uor curbai la mijloc sau la una din
extremiti, iar capetele lor pot fi tiate drept (Bacillus anthracis) sau rotunjite
(Escherichia coli). Marginile laterale ale celulei sunt, de obicei, paralele, dar pot fi
i apropiate la extremiti, n form de suveic (Fusiformis fusiformis), sau
ndeprtate i rotunjite la una sau ambele extremiti, n form de mciuc sau de
picot (Corynebacterium sp.). Unele dintre bacteriile cilindrice au proprietatea de
a forma spori.
Bacilii pot fi (Fig. 35):
izolai
grupai cte doi (diplobacili), n form de V, X, Y (Mycobacterium sp.);
n lanuri, cu lungimi variate (streptobacili);
n palisd, ca scndurile unui gard, celulele ramnnd apropiate i paralele n
sensul axului lung, aezarea fiind rezultatul unei micri de basculare a celuleifiice, avnd ca punct de sprijin peretele transvers recent separat;
grupai n form de rozet sau de stea (Agrobacterium stellulatum, Ag.
radiobacter, Phyllobacterium stappi).
44
Fig. 35 Bacterii cilindrice: (a) cocobacil; (b) bacil izolat; (c) diplobacil;
(d) streptobacil; (e) bacili grupai n palisad.
45
47
48
Lipopolizaharide
Acid lipoteichoic
Acid teichoic
Peptidoglican
Porine
Fosfolipide
Membran
extern
Peptidoglican
Spaiu periplasmic
Membran
plasmatic
Protein
Protein
Membran
plasmatic
Lipoproteine
Protein
(b)
(a)
Protein
Fig. 43 Structura peretelui celular la bacterii: (a) Gram pozitive; (b) Gram negative.
gsete ap sau gaz (cianobacterii, bacterii fotosintetizante roii i verzi etc.). Cele
cu ap au rol n meninerea presiunii osmotice n raport cu mediul extern i n
depozitarea substanelor de rezerv, n timp ce vacuolele cu gaz au rol de flotaie
sau rol protector (fa de intensitatea luminoas).
8. Incluziunile sunt formaiuni inerte, care apar n citoplasm la sfritul
periodei exponeniale de cretere a celulei. Ele pot fi formate din glicogen,
amidon, carbonat de calciu i fosfat anorganic.
9. Sporul bacterian este o formaiune care deriv din celula vegetativ a
bacteriilor, n anumite condiii de via. Sporul este o form de conservare a
speciei la condiiile nefavorabile de mediu i concentreaz, ntr-un volum redus,
toate componentele eseniale ale celulei din care provine. Bacteriile sporogene, cu
excepia genului Desulfotomaculum (Gram variabil), sunt Gram pozitive, iar
forma sporului poate fi sferic sau oval.
Sporul apare ca o structur constant la bacteriile anaerobe, aparinnd
genului Clostridium, n mod facultativ la bacteriile aerobe din genul Bacillus i
foarte rar la coci (Sporosarcina ureae).
Dispunerea sporului n celula vegetativ poate fi central (Bacillus
anthracis), subterminal (Bacillus cereus), terminal (Clostridium tetani) sau
lateral (Fig. 46).
(a)
(b)
(c)
(d)
Celul vegetativ
Cortex
Membran citoplasmatic
nveli sporal
Membran citoplasmatic
ADN
Spor liber
nveli sporal
Cortex
53
54
Numr de
diviziuni
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
8. Faza final de declin ncheie evoluia unei culturi prin moartea n ritm
lent a celulelor pn la sterilizarea complet a culturii.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1.
Timp
fermentaie, iar cele care utilizeaz o surs organic de azot mai sunt denumite
bacterii de putrefacie.
n concluzie, autotrofele, prin sintezele lor genereaz substana organic,
plecnd de la compui minerali simpli, pe cnd heterotrofele nu-i pot realiza
sintezele proprii, dect dac dispun de substane organice, pe care le descompun
pn la produi mai simpli i pe care i utilizeaz n metabolismul lor.
2.1.6. Respiraia microorganismelor
Dup exigenele fa de oxigenul molecular, microorganismele se grupeaz
n patru tipuri respiratorii:
1. Microorganisme strict (obligatoriu) aerobe, care folosesc oxigenul ca
acceptor final de hidrogen, avnd nevoie de prezena continu a oxigenului
atmosferic.
2. Microorganisme strict (obligatoriu) anaerobe, care nu se pot dezvolta n
prezena oxigenului molecular, putnd fi cultivate numai pe medii srcite n
oxigen. Ele nu dispun de enzimele respiratorii din categoria citocromilor.
Anaerobioza lor strict const n faptul c n prezena oxigenului, care se
comport ca acceptor final de hidrogen, se formeaz peroxidul de hidrogen
(compus toxic) i nu ap.
3. Microorganisme facultativ anaerobe, care sunt capabile s-i orienteze
metabolismul spre respiraie sau spre fermentaie, n funcie de disponibilitile de
oxigen i care au, n mod obinuit, un metabolism anaerob, fr a fi ns sensibile
la prezena oxigenului.
Unele microorganisme cu acest tip respirator (levurile) pot trece de la un
metabolism aerob la unul anaerob, n funcie
de condiiile de mediu.
4. Microorganismele microaerofile au
nevoie de o concentraie de oxigen mai mic
dect cea din aerul atmosferic. Aceast
particularitate se datoreaz sensibilitii
unora dintre enzimele lor la condiiile de
oxidare puternic.
2.1.7. Grupe particulare de bacterii
1. Bacterii glasogene
Apa pur din punct de vedere chimic i biologic, poate rmne n stare
lichid pn la -40oC. Supus la temperaturi inferioare pragului de 0oC, nu
nghea dect n prezena nucleelor glasogene. Aceste nuclee pot fi reprezentate
de particulele minerale, care provoac congelarea, ncepnd de la -10oC. La
temperaturi cuprinse ntre -10 i 0oC, gheaa nu se formeaz la plante dect n
prezena bacteriilor specifice, ce posed n membrana lor nuclee glasogene.
Suele bacteriene n cauz aparin speciilor Pseudomonas syringae (Fig. 50)
i Erwinia herbicola; ele pot fi saprofite (epifite) sau parazite pe organele
58
plantelor n cauz (frunze, flori, fructe). Proporia de nuclee glasogene este ridicat
la Ps. syringae (60 %) i mai mic la E. herbicola (1-5 %). Puterea glasogen a
bacteriilor se exprim "in vitro" sau n "in vivo" pe organele plantelor. Pe de alt
parte, suele inductoare de ghea se multiplic abundent pe organele necrozate
prin nghe, ceea ce le ofer un avantaj selectiv considerabil.
Cnd o suspensie de bacterii glasogene este pulverizat pe frunze apar
simptomele ngheului cu ofilirea ireversibil, dac sunt plasate (inute) o or la 5oC, pe cnd plantele martor netratate cu bacterii rmn imune la toate alterrile
vizibile.
La via de vie s-a observat o corelaie ridicat ntre numrul de bacterii
glasogene prezente pe muguri i pierderile cauzate de frig, la temperaturi
apropiate de 0oC. Bacteriile glasogene, care provoac nghearea, au fost observate
la plante foarte diverse (pin, cire, piersic, prun, cais, forsiia, fasole, porumb,
tomate, cpun).
Suele bacteriene active, datorit capacitii de a induce formarea gheii,
prezint o gen specific, care codeaz o protein foarte particular n membrana
lor. Proteina este format din 1200 de aminocizi, cu o structur repetitiv foarte
accentuat. Compus din 1200 de aminoacizi, acest polipeptid comport repetiii n
mai mult de 100 exemplare. Reducerea numrului de repetiii n lanul
polipeptidic reduce activitatea glasogen.
Alte proteine cu structur repetitiv sunt prezente n sngele unor specii de
animale din regiunile polare, unde au un efect antigel.
Bacteriile glasogene joac un rol important n practic, deoarece provoac
nghearea n primvar a numeroase plante, n special pomii fructiferi i via de
vie. Stoparea aciunii negative a acestor bacterii se ncearc pe diferite ci:
tratamente chimice cu antibiotice, pulverizri cu ap, fumigaii, folosirea
bacteriofagilor, a microorganismelor antagoniste, aplicarea de polimeri care
limiteaz schimburile termice cu exteriorul etc.
n ultimii ani s-au obinut prin inginerie genetic sue neglasogene de Ps.
syringae, care, aplicate pe plante, inhib dezvoltarea speciilor glasogene.
n sens pozitiv, specia Ps. syringae glasogen este utilizat pentru obinerea
zpezii artificiale (Snow max).
2. Micoplasmele reprezint un grup particular de bacterii lipsite de perete
celular, celula fiind delimitat de o membran lipoproteic cu o compoziie
chimic asemntoare celulei animale.
Sunt considerate cele mai mici organisme capabile de cretere autonom pe
medii acelulare.
Micoplasmele sunt grupate n clasa Mollicutes (moli - moale, pliabil i cute piele) cu dou genuri:
Mycoplasma creterea speciilor din acest gen este dependent de prezena
sterolilor n mediu.
Acholeplasma cuprinde specii care se dezvolt independent de steroli.
59
Metabolism.
O
particularitate
a
fiziologiei actinomicetelor este modul lor de
nutriie omnivor, care le permite s se dezvolte
pe substraturi organice dintre cele mai diferite.
n condiii naturale, pe resturi vegetale,
actinomicetele ncep s se dezvolte numai
dup ce bacteriile i ciupercile au ncetat s se
Fig. 51 Streptomyces sp
mai multiplice, atunci cnd toate substanele
uor asimilabile din resturile vegetale au fost
descompuse de predecesorii lor.
Capacitatea lor de a degrada substanele organice dintre cele mai complexe
le confer un rol important n natur, n special n descompunerea substanelor
organice din nmoluri i sol. n sol, acestea particip la degradarea biologic i
mineralizarea substanelor organice.
Importana lor practic este legat, n mod deosebit, prin intermediul
speciilor genului Streptomyces (Fig. 51), de producerea de substane antibiotice
(sunt cunoscute peste 500 de antibiotice distincte).
Aproximativ 50 % din tulpinile izolate n natur produc antibiotice.
Unele actinomicete produc boli la plante, animale i om.
2.1 .8. Sistematica, nomenclatura i identificarea bacteriilor
La baza clasificrii bacteriilor stau o serie de caractere, care constitue criterii
de ncadrare a acestora n mai multe categorii taxonomice, avnd la baz specia.
n succesiunea lor, aceste categorii sunt: specia, genul, familia, ordinul, clasa i
diviziunea (ncrengtura).
Rangurile taxonomice sunt indicate de cte un sufix:
Ordin (-ales)
Subordin (-ineae)
Familie (-aceae)
Subfamilie (-oidiae)
Unitatea de lucru efectiv este tulpina (sua) bacterian, care este o cultur
pur, constituit dintr-o singur specie, avnd la origine o colonie, ce provine
dintr-o singur bacterie, care s-a multiplicat. Tulpina sau sua se noteaz cu un
simbol sau un numr i se pstreaz n colecii tiinifice.
Cercetrile ce stau la baza identificrii i clasificrii bacteriilor sunt
numeroase i in cont de urmtoarele aspecte:
caractere morfologice: form, dimensiune, cilii, capsula i comportarea
tinctorial fat de coloraia Gram;
caractere culturale: creterea pe medii de cultur lichide sau solide, forma i
tipul coloniei, pigmentaia etc;
caracterele biochimice se refer la capacitatea de utilizare a surselor de carbon
i azot, tipul de respiraie etc;
caractere antigenice (serologice);
caractere de patogenitate, privind virulena i toxicitatea speciilor patogene;
61
Clasa
1. Scotobacteria - bacterii non-fotosintetice
2. Anoxyphotobacteria - bacterii fotosintetice anaerobe
3. Oxyphotobacteria - bacterii fotosintetice aerobe
(cyanobacterii)
1. Firmibacteria - coci i bacili
2. Thallobacteria - bacterii filamentoase (actinomicete)
1. Mollicutes - bacterii lipsite de perete celular
(micoplasme)
1. Archaebacteria bacterii cu perete celular, lipsit de
stratul peptidoglican
(a)
(b)
(c)
Fig. 52 Cyanobacterii: (a) Chroococcus sp.; (b) Oscillatoria sp.; (c) Anabena sp.
64
Rezultate corecte:
1 - c; 2 - b; 3 - c; 4 - c, 5-a.
65
Rezumat (U.I. 2)
Bacteriile
Sunt organisme unicelulare cu o structur complex de tip procariot.
Morfologia bacteriilor
- bacterii sferice (coci);
- bacterii sub form de bastona (bacili);
- bacterii spiralate;
- bacterii filamentoase;
- bacterii ptrate;
Structura celulei bacteriene
Structura extraparietal format din: capsul; cilii sau flagelii; aparatul
fimbrial i pilii de sex.
Peretele celular.
Structura intraparietal compus din: membrana citoplasmatic,
mezozomii, citoplasm, aparatul nuclear, incluziunile, ribozomii,
vacuolele, sporul bacterian.
Grupe particulare de bacterii
Bacteriile glasogene
Micoplasmele
Actinomicetele
Cyanobacteriile (algele albastre-verzi)
Sunt organisme procariote, fotoautotrofe, chimiosintetizante.
67
Instruciuni (U.I. 3)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaugalte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la memorarea
i nelegerea noiunilor legate de morfologiei i structurii protozoarelor,
diatomeelor si a ciupercilor (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o
lucrare de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n
format electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din
sem. I.
3.1. Protozoarele
Protozoarele (gr. protos primul, zoon animal) sunt organisme unicelulare
de tip eucariot, variate ca form i dimensiune, la care se cunoate un anumit ciclu
evolutiv i care reprezint vieuitoare complete i independente.
Sunt caracterizate de prezena unor organite, numite cili, care particip la
locomoie i la obinerea hranei. Hrnirea este exclusiv heterotrof; triesc libere
n mediul acvatic (majoritatea triesc n ape dulci, dar pot fi ntlnite i specii de
ap srat), precum i n soluri umede.
3.1.1. Morfologia i fiziologia protozoarelor
Protozoarele sunt variate ca form, iar dimensiunile variaz, n funcie de
specie, ntre 1 i 2000 m.
Valorile de temperatur optime pentru cretere i dezvoltare sunt cuprinse
ntre 18oC i 25oC, iar chitii speciilor din Cl. Rhizopoda (Sarcodina) rezist pna
la 70oC. Protozoarele prefer un pH neutru, dar se pot dezvolta ntr-un interval
mai larg, cuprins ntre 3,5 i 9. n raport cu oxigenul, majoritatea protozoarele din
sol sunt strict aerobe.
68
70
(b)
(a)
(c)
Fig. 53 Protozoare: (a) Euglena sp.; (b) Amoeba sp.; (c) Paramoecium sp.
72
73
Mitoz
Fig. 60 Reproducerea asexuat la diatomee (dup MacDonald, 1869 i Pfitzer, 1869)
74
ajutorul unui mucilagiu. Valvele sunt circulare sau eliptice cu relieful ondulat
tangenial sau concentric. Specii marine, salmastre sau dulcicole. Unele se fixeaz
pe diferite suporturi umede sau pe soluri (Fig. 55).
2. diatomee cu raf
Exemplu: Fam. Naviculaceae cuprinde diatomee penate, care la ambele
valve prezint cte o raf bine dezvoltat, sub forma unor fisuri. Rafa este situat
pe o caren. Cuprinde 29 de genuri de ap dulce, salmastr sau marin. Unele
specii se fixeaz pe soluri umede, pe ziduri sau pe diferite suporturi umede (Fig.
57).
76
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
Fig. 62 Tipuri de aparate vegetative la ciuperci: (a) gimnoplast; (b) plasmodiu; (c)
dermatoplast; (d) sifonoplast; (e) tal filamentos; (f) tal masiv (dup Lazr i colab.,
1977).
Rizoizi
dezvoltare anual, cum este Erysiphe graminis, care, ntr-o singur perioad de
vegetaie, i desvrete ntreg ciclul biologic.
O a doua categorie o constituie ciupercile bianuale, care se dezvolt pe
plante multianuale sau pe dou gazde diferite, cum este Puccinia graminis.
Exist i ciuperci plurianuale, care au ca gazde plante perene, ca pomii
fructiferi sau arborii de pdure, pe a cror organe atacate corpii de fructificare
dureaz un numr mai mare de ani. Aa sunt ciupercile macromicete ce atac
scoara i lemnul ca Stereum purpureum.
La un mare numr de ciuperci din subncrengturile Ascomycotina i
Basidiomycotina corpii de fructificare sau unele organe de rezisten sunt alctuii
din filamente miceliene mai strns sau mai lax ntreesute, ce alctuiesc false
esuturi, denumite plectenchime.
Plectenchimele, care constituie taluri masive ale unor ciuperci macromicete,
ndeplinesc funcii diferite i alctuiesc false esuturi, de cretere, de protecie,
mecanice, de conducere, de rezerv, de excreie, de micare etc.
Falsele esuturi de cretere sau formatoare sunt constituite din celule cu
caracter embrionar, cu membrana subire, foarte bogate n citoplasm, care se
divid activ i ndeplinesc funcia de cretere a talului.
Falsele esuturi de protecie se gsesc la suprafaa talului masiv, venind n
contact cu mediul extern. Elementele care alctuiesc aceste esuturi au membrana
ngroat, prezentnd, uneori, i anumite excrescene, ornamentaii sau peri.
La ciuperci, se pot deosebi mai multe feluri de esuturi de protecie i
anume:
Derm este o estur format din celule dispuse perpendicular pe suprafaa
organelor ciupercii.
Cutis este estura de protecie, ale crei elemente constitutive sunt dispuse
paralel cu suprafaa organelor ciupercii.
Cortex este o estur de protecie compact, dispus, de regul, la suprafaa
unor fructificaii, apotecii, basidiofructe sau a scleroilor.
Falsele esuturi mecanice au rol n susinerea talului, cum ar fi piciorul
ciupercilor macromicetelor, i sunt constituite din elemente mecanice bine
difereniate, formate din celule cu membrana puternic ngroat, lipsite de
coninut, ce sunt comparabile sclereidelor.
Falsele esuturi conductoare se aseamn i au acelai rol cu esuturile de la
plantele vasculare. Elementele ce alctuiesc aceste formaiuni sunt celule vii mult
alungite, cu perei transversali subiri, prevzui cu pori i care prezint dilatri n
dreptul septului.
Falsele esuturi de rezerv au rolul de a nmagazina apa, hidraii de carbon,
substanele proteice, grsimile etc..
Celulele n care se depune apa se numesc cistide, dar aceasta, n unele
cazuri, se poate gsi i n spaiile intercelulare.
Glicogenul i grsimile se depun n celule sub form de picturi, iar n
membrane se depune hemiceluloza. La ciuperci, se cunoate c amidonul nu se
gsete ca substan de rezerv. Pe lng aceste false esuturi de rezerv, ca
81
organe speciale, mai au rol n acest proces i scleroii, bulbilii i rizomorfele, care
sunt i organe de rezisten.
Falsele esuturi de excreie sunt acelea prin care se face eliminarea unor
produse de metabolism sub form de secreii sau excreii.
Din categoria produselor de secreie amintim enzimele i hormonii, ce se
elimin din corpul ciupercilor n procesul de parazitism.
Substanele de excreie, ca oxalatul de calciu, carbonatul de calciu, unele
substane gomoase, formate n procesul de asimilaie i de dezasimilaie, se
elimin permanent din corpul ciupercilor pe msura formrii lor.
Falsele esuturi de micare pot fi influenate de un excitant extern i pot
provoca micri, denumite tropisme i tactisme. Pe lng acestea se mai cunosc
la ciuperci i micri autonome, numite nastii.
ntre tropisme se pot deosebi:
Geotropismul, care poate fi pozitiv, n cazul organelor de fixare i de absorbie,
cum sunt rizoizii, sau negativ, n cazul carpoforilor de la Hymenomycetales.
Fototropismul este influena produs de lumin asupra unor organe de ciuperci;
el poate fi pozitiv i se manifest asupra ascelor de la unele Discomycetes, care au
tendina de a se orienta ctre lumin, sau a sporangioforilor de Pilobolus
cristalinus, care, de asemenea, manifest aceeai tendin.
Chemotropismul reprezint tendina de atragere sau de respingere a unor
organisme de ciuperci fa de unele substane chimice. Chemotropism pozitiv
manifest numeroase ciuperci fa de glucide i zaharuri.
Hidrotropismul este influena umiditii asupra ciupercilor. Se tie c, n diferite
faze biologice, acestea au nevoie de o atmosfer aproape saturat n vapori de ap
sau chiar de picturi pentru micarea i germinarea sporilor i iniierea procesului
de infeciune.
Haptotropismul reprezint micrile specifice pe care le exercit unele ciuperci
ce au tendina de a apuca sau nlnui alte filamente, ca n cazul de la Peziza sp.
Tactismele sunt micri libere ale sporilor mobili (zoosporilor) ale unor
ciuperci sub influena unui excintant extern. n funcie de factorul excitant, putem
avea: chemotactism, fototactism i hidrotactism.
Nastiile sunt, de asemenea, micri autonome, dar care nu sunt provocate de
un excitant extern.
De exemplu, se consider ca nastii micrile de deschidere a fructificaiilor
la unele Gasteromycete, a ecidiilor de la Uredinales, precum i micrile de
eliminare a ascosporilor din asce sau de proiectare a bazidiosporilor de pe bazidii.
3.3.4. Formele de rezisten ale ciupercilor
n situaia cnd condiiile de via nceteaz s mai fie favorabile, ciupercile
au posibilitatea de a supravieui, trecnd n forme de rezisten, la care miceliul
prezint membrana celular ngroat, coninutul citoplasmei mai bogat n
substane de rezerv iar cel al apei este mai redus.
n acest fel, ritmul metabolismului devine mai lent i permite supravieuirea
pn la revenirea condiiilor favorabile. Uneori, apar i unele forme de rezisten
82
Blastospor
84
Spori endogeni sau endospori, care se gsesc n interiorul unor organe speciale.
Astfel, ciupercile din clasa Zygomycetes formeaz spori imobili n interiorul unor
sporangi.
La ciupercile din clasa Oomycetes, sporii sunt mobili i se formeaz n
zoosporangi caduci, denumii, n mod curent, i false conidii.
Exist i unele cazuri la ciupercile din subncrengtura Ascomycotina cnd o
categorie de spori imobili se formeaz n organe speciale - ascele; formarea
acestor spori este n legtur cu procesul sexual i ei se numesc ascospori.
Sporii exogeni sau exosporii se formeaz la exteriorul unor organe speciale,
difereniate n funcie de faza n care se gsesc ciupercile respective. Aa, unii
spori haploidali se formeaz la captul unor filamente cu conformaie deosebit,
ce se numesc conidiofori, iar sporii poart numele de conidii (Fig. 66).
Sporii exogeni, denumii basidiospori, se ntlnesc la subncrengtura
Basidiomycotina; ei se formeaz la exteriorul basidiilor, dup procesul de
sexualitate (meioza), i ca i ascosporii sunt spori haploidali.
Spori (conidii)
Spori (conidii)
(a)
(b)
Fig. 66 nmulire asexuat prin spori la genurile Aspergillus (a) i Penicillium (b)
88
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Protozoarele sunt:
a) animale unicelulare
b) plante
c) organisme unicelulare independente
2. Ciupercile au o nutriie:
a) autotrof
b) heterotrof
c) paratrof
3. Majoritatea ciupercilor pot s se dezvolte ntr-o zon de pH cuprins
ntre:
a) 7 i 8
b) 4,5 i 8
c) 3i 7
Rezultate corecte:
1 - c; 2 b; 3-b.
92
Rezumat (U.I. 3)
Protozoarele. Sunt organisme unicelulare, mobile, heterotrofe, eucariote.
Ciupercile. Sunt organisme heterotrofe, eucariote.
Morfologia ciupercilor. Aparatul vegetativ poate fi: gimnoplast,
plasmodiu, sifonoplast, tal filamentos, tal masiv.
Reproducerea ciupercilor se poate realiza: vegetativ, asexuat, sexuat.
Nutriia. Dup felul substratului folosit ciupercile se mpart n: saprofite,
facultativ parazite, facultativ saprofite, parazite.
93
94
96
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
1. Din punct de vedere al preferinei fa de anumite valori de pH,
microorganismele se mpart n:
a) microorganisme indiferente i neutrofile
b) microorganisme acidofile i bazofile
c) xerofile
2. n funcie de nevoile de ap, microorganismele se mpart n mai
multe grupe:
a) microorganisme hiperxerofile, xerofile i hidrofile
b) microorganisme acidofile i bazofile
c) microorganisme indiferente i neutrofile
3. Radiaiile electromagnetice includ:
a) radiaiile herziene, infraroii, vizibile
b) ultraviolete X i Y
c) nici un rspuns corect.
99
Rezultate corecte:
1 a i b ; 2 a; 3- a i b.
Rezumat (U.I. 4)
Din punct de vedere al preferinei fa de anumite valori de pH,
microorganismele se mpart n mai multe grupe:
Microorganismele indiferente
Microorganismele neutrofile
Microorganismele acidofile
Microorganismele bazofile
Radiaiile ultraviolete au o aciune antimicrobian net, ale crui efect
depinde de intensitatea i durata iradierii.
n ara noastr, cercetri de peste 20 de ani fcute de Papacostea au scos n
eviden existena n solurile romneti a unor microorganisme indicatoare, care
sunt caracteristice diferitelor tipuri de sol i care au permis din acest punct de
vedere clasificarea solurilor n trei grupe.
1. Soluri cu Mucor rammanianus.
2. Soluri cu Pseudomonas acidophilus i Pseudomonas aureofaciens.
3. Solurile cu Pseudomonas lemonieri i Pseudomonas aureofaciens.
Avnd n vedere influena pe care aeraia o exercit asupra activitii
biologice din sol, se constat c numrul genurilor de specii aerobe scade odat cu
adncimea, avnd loc, n paralel, o cretere a numrului de specii anaerobe i/sau
facultativ anaerobe.
101
Instruciuni (U.I. 5)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de interrelaiile ecologice ntre
organisme (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de
verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format
electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
110
111
Litosfer
46,29
27,61
7,81
5,40
3,77
2,68
2,36
2,40
0,21
0,22
0,10
0,08
0,03
0,01
Podzol
Cantitatea n %
69,7
13,4
4,3
0,7
1,1
1,2
3,0
2,2
0,39
1,1
-
115
Cernoziom
76,1
15,2
5,6
2,6
2,2
1,3
3,3
4,6
1,10
2,2
-
Dup definiia dat de Thaer Humusul este produsul materiei vii i izvorul
acesteia sau dup cum afirm Waksman, Humusul este o rezerv i un
stabilizator al vieii organice pe pmnt.
6.4. Populaia solului
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
Macropopulaia solului este mprit n dou componente majore:
1. Macroflora solului este format din prile subterane ale plantelor
superioare (rdcini, tulpini i frunze ajunse n sol), care furnizeaz solului cea
mai important surs de materie organic. Rdcinile plantelor, prin eliminarea a
numeroase substane (n special enzime) n cadrul procesului de adsorbie, au un
rol important n modificarea concentraiei soluiei solului, intervenind, pe aceast
cale, n mod direct n activitatea microorganismelor. Datorit acestor condiii
specifice, numrul de microorganisme aflate n jurul rdcinilor (rizosfer)
depete cu mult pe cel aflat n restul solului.
2. Macrofauna solului cuprinde o diversitate mare de organisme, dintre care
amintim: rme (90-500 kg/ha), furnici, coleoptere, nematozi (circa 10 mii/mp),
viermi inelai i diverse vertebrate. Acestea, prin activitatea lor, mbogesc solul
n materie organic, ce va fi utilizat ulterior de ctre populaiile de
microorganisme.
Micropopulaia solului este reprezentat de microflor i microfaun.
1. Microflora solului constituie populaia cea mai important pentru viaa
solului. Ea este format din bacterii, cyanobacterii, ciuperci microscopice i alge.
Activitatea microorganismelor din sol poate fi determinat prin raportarea
numrului lor la unitatea de volum, de greutate sau de suprafa. Valoarea
absolut a unor microorganisme, raportat la un gram de sol, variaz ntre 1
milion-1 miliard de bacterii, ntre 5000 i 50000 la ciuperci, ntre 3000 i 30000 la
actinomicete i 500 i 5000 la alge (la adncimea de 2-5 cm).
2. Microfauna solului este constituit din protozoare monocelulare (ntre
100-1000 indivizi/g sol), dintre care majoritatea aparin clasei Flagellata
(Mastigophora). Dei aciunea lor este cunoscut, rolul protozoarelor n sol nu
este pe deplin clarificat.
Numrul microorganismelor din sol i componena lor sistematic constituie
un important criteriu practic n aprecierea activitii biologice a acestora dar
pentru o edificarea ct mai exact a acestei activiti este necesar i cunoaterea
activitii biochimice a microorganismelor care alctuiesc populaia solului.
118
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
Rezultate corecte:
1 a i b ; 2 a i b; 3- a, b i c.
Rezumat (U.I. 6)
n alctuirea solului intr trei pri i anume:
partea solid (mineral i organic);
partea lichid sau soluia solului;
partea gazoas sau aerul din sol.
Procesul de formare a solului ncepe imediat ce roca ia contact cu mediul
extern, cu agenii fizici i chimici, precum i cu aciunea microorganismelor vii.
Procesele de dezagregare i sintez, care au drept rezultat formarea
complexelor humice, se datoreaz aciunii bacteriilor aerobe i anaerobe, a
actinomicetelor i a ciupercilor microscopice.
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
119
BIBLIOGRAFIE (U.I. 6)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992
120
121
Instruciuni (U.I. 7)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate la rolul microorganismelor n
circuitul materiei n natur (rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i
o lucrare de verificare. Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei,
n format electronic sau prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni
din sem. I.
122
126
128
Plant leguminoas
Perior absorbant
Apariia
nodozitilor
Nodozitate
Legarea ireversibil a
bacteriilor de periorii
absorbani; deformarea
periorului radicular i
ptrunderea bacteriilor
n celule.
Bacteriile se transform n
bacteroizi, iar celulele i
mresc dimensiunile.
130
rubiacearum, iar de ctre ali autori, drept specii de Flavobacterium sp. sau de
Klebsiella sp.
7.1.2. Amonificarea
Substanele organice azotate, reprezentnd 99 % din rezervele totale de N2
din sol, constau din rezerve humice i din ali compui acumulai n mod natural
n sol prin procesul de fixare biologic a N2 i prin cel de degradare a resturilor
organice vegetale i animale, a ngrmintelor verzi i a blegarului.
Celulele bacteriene reprezint ele nsele o mas de substan organic,
predominant proteic, de aproximativ 6 t/ha, la care se adaug circa 20 de tone,
reprezentate de restul microflorei i microfaunei. Dac acest N2 organic ar rmne
ca atare, rezervele de N2 accesibile plantelor s-ar micora n fiecare an i nu ar mai
permite creterea plantelor.
n mod normal, ns, aceste substane sufer un proces de mineralizare, la
sfritul cruia sunt aduse n stare de amoniac (NH3).
Procesul de amonificare propriu-zis este precedat de descompunerea
moleculelor proteice prin hidroliz, cu ajutorul proteazelor extracelulare, eliberate
de numeroasele specii de microorganisme aerobe i anaerobe, dup formula
general:
protein
H 2O
peptone
H2O
proteinaze
peptide
H2O
aminoacizi
peptidaze
1. Dezaminarea hidrolitic
2. Dezaminarea hidrolitic i decarboxilare
3. Dezaminarea reductoare
4. Dezaminarea reductoare cu decarboxilare (anaerob)
5. Dezaminarea oxidativ cu decarboxilare
6. Dezaminarea cu desaturare.
Din asemenea reacii, n afar de amoniac (NH3), pot rezulta acizii: acetic,
formic, propionic, butiric, valerianic. n funcie de condiiile de mediu i natura
microflorei, aceti acizi pot fi oxidai complet la CO2 i H2O (n mediul aerob),
acumulai ca atare, transformai n alcooli.
Amonificarea n sens strict poate fi definit, deci, ca un proces biologic n
care se elibereaz n sol amoniac (NH3), ca rezultat al aciunii microflorei solului
asupra aminoacizilor, rezultai din descompunerea substanelor proteice. n acest
sens, nu este inclus n amonificare eliberarea de NH3 sub aciunea micoflorei
temporare de putrefacie.
n acest proces, NH3 poate fi refolosit ca atare de o serie ntreag de
microorganisme. Cea mai mare parte din el sufer n continuare o transformare
absolut necesar pentru viaa din sol, n forme accesibile plantelor, iar restul poate
fi fixat n sol, mai ales n soluri acide sau se evapor n atmosfer.
Microflora capabil s produc amonificarea substanelor proteice este
numeroas, diferit i acioneaz n timp, dup cum urmeaz:
La nceputul procesului intervin bacterii obligat aerobe, cum sunt: Bacillus
cereus var. micoides, B. subtilis, B. thermoproteolyticus, specii nesporulate, ca
Serratia marcescens, Arthrobacter sp. etc. i specii facultativ anaerobe, cum sunt:
Proteus vulgaris, Pseudomonas fluorescens, Escherichia coli, Sarcina lutea etc.
Dup 2-3 zile, intr n aciune specii obligat anaerobe, cum sunt: Clostridium
putrefaciens, Clostridium perfringens i unele actinomicete, ca Streptomyces
violaceus i Micromonospora chaleea, care ncep s predomine i fac ca degajarea
de NH3 s fie maxim.
ncepnd cu ziua a 4-a, mediul este invadat de mucegaiuri i degajarea de
amoniac (NH3) descrete, datorit faptului c acestea folosesc amoniacul pentru
sinteza proteinelor proprii i produc mult acid, care neutralizeaz amoniacul.
Hidroliza ureei este realizat de un grup numeros de microorganisme,
capabile s produc enzima ureaza. n acest grup ntlnim specii din genurile:
Achromobacter, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Pseudomonas,
actinomicete i microfungi filamentoi. La acestea se adaug grupul
urobacteriilor, caracterizate prin rezistena la concentraii mari de uree i pH
alcalin dar i prin capacitatea de a elibera cantiti mari de NH3. Din grupa
urobacteriilor fac parte: Bacillus (Urobacillus) pasteuri, Micrococcus ureae,
Planosarcina ureae etc.
Activitatea amonificatoare a urobacteriilor este foarte important, deoarece
ureea conine 47 % azot, care ar fi altfel neutilizat de plante. Cantitatea de uree
eliminat n natur este mare, atingnd cteva zeci de milioane de tone pe an. Se
estimeaz c populaia uman ar elimina n 24 ore circa 15.000 t azot ureic, iar
animalele circa 1.500.000 tone. La aceste cantiti se mai adaug ngrmintele
133
cu uree, aplicate prin tehnologiile actuale sub form de cianamid de calciu. Acest
compus, fabricat din N2 din aer i carbur de calciu, nu este asimilabil de ctre
plante. Compusul sufer n sol unele transformri abiotice i biotice enzimatice
pn la amoniac.
7.1.3. Nitrificarea
Nitrificarea este un proces de oxidare a amoniacului (NH3) i a altor forme
reduse ale azotului anorganic eliberate n sol n cursul procesului de amonificare
n nitrai, care reprezint forma asimilabil pentru majoritatea plantelor verzi.
n acelai timp ns, nitraii reprezint i forma sub care azotul din sol este
pierdut deoarece, fiind solubili, sunt splai de ploaie sau redui la NH3, nitrii sau
chiar la azot molecular (N2) prin denitrificare.
Natura biologic a acestui proces a fost demonstrat prin suprimarea sa n
urma sterilizrii solului prin nclzire la 110oC sau prin tratarea cu vapori de
cloroform. n laborator s-a demonstrat c procesul se desfoar n dou faze:
a. Nitritarea reprezint procesul de oxidare a amoniacului pn la nitrii (NO2-).
NH3 + O2
NO2- + H2O
134
7.1.4. Denitrificarea
Nitraii (NO3-) acumulai n sol, ca rezultat al procesului de nitrificare, sunt,
n parte, consumai de plantele superioare, iar o cantitate variabil este splat de
apele de infiltrare i iroire. Nitraii pot fi folosii i de microorganisme, fie c
sunt asimilai n cursul proceselor de sintez a protoplasmei acestora (asimilarea
nitriilor), fie c sunt redui pentru oxidarea unei substane organice sau minerale.
Denitrificarea reprezint un proces care nchide circuitul prin ntoarcerea
azotului molecular (N2) n natur.
Reducerea nitrailor n procesul de denitrificare se face fie pn la N2 sau
amoniac (NH3), fie pn la stadii intermediare ca nitrii (NO2-), acidul hiponitros
(HNO3-) etc. Condiiile optime de producere ale acestui proces sunt realizate n
solurile saturate cu ap i n structurile profunde n care pot aciona mai multe
grupuri de microorganisme. Astfel, bacteriile denitrificatoare propriu zise, ce
reduc nitraii (NO3-) la azotul atmosferic (N2), sunt: Pseudomonas stutzeri i
Pseudomonas denitrificans.
Dintre microorganismele din flora general a solului, capabile s reduc
nitraii (NO3-) la nitrii (NO2-), sunt Bacillus megaterium, Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa etc., precum i unele bacterii sulfuroase ca:
Thiobacillus denitrificans.
Semnificaia procesului de denitrificare este nc controversat, acesta fiind
considerat de unii autori ca un fenomen patologic, inconstant i relativ rar n
condiii naturale ale solurilor de cultur. Este sigur c reducerea nitrailor pn la
N2 gazos reprezint, pentru solul respectiv, o pierdere real care poate ajunge pn
la 120 kg N2/ha/an, cu toate c o parte din N2 degajat poate fi preluat de fixatorii
de N2 anaerobi, cum sunt: Clostridium pasteurianum.
n acelai timp, reducerea incomplet, pn la stadiile intermediare, de nitrii
i NH3, este mai puin duntoare pentru fertilitatea solului respectiv deoarece
NH3 poate fi folosit de unele microorganisme heterotrofe, n timp ce nitriii sunt
preluai de nitratbacterii i reoxidri n nitrai.
137
Celuloza
%
28,50
25,43
37,27
37,67
30,56
Pentozani
(hemiceluloze)
13,52
21,33
21,67
31,50
23,54
Lignina
%
28,25
20,40
21,21
14,70
15,13
Grsimi i
cear
2,00
2,02
0,67
1,37
0,77
Proteine
%
9,31
4,30
3,00
2,11
3,50
Celuloz
%
18,06
26,9
30,59
36,26
Pentoze
%
16
21,18
22,71
22,90
Lignin
%
9,9
11,8
18
17,1
Grsimi i
ceruri
2,4
2,6
1,7
1,26
N total
%
2,5
1,76
1,01
0,24
140
R-CHOH-COOH
144
sulfoficarea poate avea i efecte negative din punct de vedere agricol. n solurile
inundate se formeaz cantiti mari de sulfuri, datorit desulfoficrii. n urma
drenrii i desecrii acestor soluri, sulfurile se oxideaz rapid la sulf pe cale
chimic, iar acesta la H2SO4, datorit microorganismelor sulfoficatoare. Ca
rezultat, pH-ul acestor soluri ajunge la valori de 3,2 - 2,2, care pericliteaz viaa
plantelor. Pentru a preveni acest efect negativ este necesar aplicarea
amendamentelor calcaroase.
3. Desulfoficarea este procesul de reducere dezasimilatorie a sulfailor pn
la H2S. Acest proces are loc n condiii anaerobe i se datoreaz, n primul rnd,
speciilor din genul Desulfovibrio, precum D. desulfuricans.
Bacteria reduce sulfaii la H2S cu ajutorul hidrogenului din substanele
organice, ca lactatul i piruvatul, care servesc att ca surse de energie dar i ca
surs de carbon.
Putem trage concluzia c sulfoficarea duce la acidifiere, n timp ce
desulfoficarea produce alcalinizarea solului.
n procesul de obinere a H2S rezultat din desulfoficare, nu se ating
concentraii toxice pentru plante, deoarece Fe2+ din sol ndeprteaz H2S sub
form de FeS care precipit. n solurile srace n Fe2+ i irigate cu ape bogate n
sulfai, H2S produs n cantiti mari produce efecte toxice la orez i la alte plante.
7.4. Circuitul fierului
Fierul intr n compoziia hemienzimelor, a hemoglobinei, leghemoglobinei,
F-S-proteinelor, iar circuitul su cuprinde patru etape microbiene ce se succed
astfel:
1. Mineralizarea fierului organic se petrece n paralel cu celelalte procese de
mineralizare a substanelor organice. Microorganismele mineralizatoare atac
partea organic a compuilor cu fier iar acest element se elibereaz sub form
mineral, bi- sau trivalent. Microorganismele respective pot fi bacterii din
genurile Pseudomonas, Bacillus, Corynebacterium, Mycobacterium etc.; mai pot
fi actinomicete din genurile Nocardia sau Streptomyces, precum i ciuperci, toate
ca organisme chimioorganoheterotrofe.
Compuii organici cu Fe din humus pot fi atacai de bacterii ce aparin
genurilor Metallogenium, Pedomicrobium i Seliberia. Pe suprafaa celulelor
respective se depune, sub form de precipitat, hidroxidul feric Fe(OH)3.
2. Formarea compuilor organici de fier este un proces opus mineralizrii
fierului organic. Aici, microorganismele sintetizeaz compui organici solubili,
deintori de fier, bi- sau trivalent.
Fierul poate fi sintetizat de unii compui organici ca acidul acetic sau
compleci, ca acizii citrici, acidul 2-ceto-D- gluconic, acizii humici etc.
Microorganismele capabile de formarea compuilor organici cu fier sunt
unele bacterii i mucegaiuri (ciuperci) precum i unii licheni. Mineralizarea i
formarea microbian a compuilor organici cu Fe joac un anumit rol n procesul
de podzolire a solului. Sub aciunea microorganismelor, n orizontul A se
formeaz Fe organic solubil care migreaz spre orizontul B, unde, sub aciunea
146
147
148
149
7.9.1. Manganul
Se gsete n sol n form bivalent ionic (Mn2+) la pH mai mic de 5,5 i
sub form de Mn trivalent i, mai ales, tetravalent la pH mai mare de 8, datorit
autooxidrii Mn2+.
Transformrile microbiene ale manganului se produc n zona valorilor de
pH de 5,5-8. n condiii aerobe acioneaz unele bacterii heterotrofe din genurile
Bacillus, Corynebacterium, Metallogenium, actinomicetele din genul
Streptomyces, precum i ciupercile din genurile Curvularia, Cladosporium etc.
Aceste microorganisme oxideaz Mn2+, precipitndu-l sub form de MnO(OH)2
(hidroxid de mangan trivalent).
Procesul de oxidare a Mn2+ poate duce la apariia n sol a carenei de
mangan asimilabil i are ca efect apariia unor boli de nutriie la plante.
n condiii anaerobe, n prezena substanelor organice uor asimilabile,
unele bacterii reduc mangan tetravalent la mangan bivalent; MnO2 servete ca
acceptor de electroni, nlocuind O2. Totodat, acizii produi de microorganisme,
att n condiii aerobe, ct i anaerobe, deviaz echilibrul chimic dintre manganul
bivalent i cel tetravalent n direcia formrii Mn2+.
7.9.2. Seleniul
n plante, seleniul este prezent sub form de selenio-aminoacizi, n care
seleniul nlocuiete sulful n structura metioninei i Se-metilcistein. Ambii Seaminoacizi din resturile vegetale se mineralizeaz sub aciunea microorganismelor
din sol. Seleniul apare sub form de selenii (SeO32-) i selenai (SeO42-).
Microorganismele din sol sunt capabile i de oxidarea seleniului metalic i
al seleniurilor (Se2-) la selenai.
O alt transformare microbian a seleniului n sol este reducerea seleniilor
i selenailor la seleniul metalic. Aceast capacitate a fost demonstrat la unele
bacterii, cum sunt Clostridium, Corynebacterium i ciuperci ca Rhizobium,
precum i la unele levuri i mucegaiuri.
Compuii cu Se (selenii, selenai, Se-aminoacizi) pot fi metilai sub form
de produs gazos, numit dimetilselein (CH3-Se-CH3). Acest proces poate fi
realizat de unele ciuperci, ca Aspergillus, Cephalosporium, Fusarium,
Penicillium, ca i de unele bacterii.
7.9.3. Zincul
Microorganismele, n urma descompunerii resturilor vegetale, elibereaz
zincul sub form solubil (Zn2+). Microflora solului realizeaz aceast solubilizare
prin acizii minerali i organici produi. n sens invers, prin diminuarea aciditii,
microorganismele micoreaz solubilitatea zincului. Tiobacilii oxideaz sulful din
ZnS la acid sulfuric i elibereaz zincul sub form de Zn2+ care rmne n soluie,
datorit acidului sulfuric. H2S, produs de microorganisme, ndeprteaz zincul
prin formarea de ZnS, care precipit.
150
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
Rezultate corecte:
1 b i c; 2 - c; 3 - a; 4- c.
Rezumat (U.I. 7)
n alctuirea solului intr trei pri i anume:
partea solid (mineral i organic);
partea lichid sau soluia solului;
partea gazoas sau aerul din sol.
Procesul de formare a solului ncepe imediat ce roca ia contact cu mediul
extern, cu agenii fizici i chimici, precum i cu aciunea microorganismelor vii.
Procesele de dezagregare i sintez, care au drept rezultat formarea
complexelor humice, se datoreaz aciunii bacteriilor aerobe i anaerobe, a
actinomicetelor i a ciupercilor microscopice.
Totalitatea vieuitoarelor din sol, indiferent de dimensiuni, organizare
celular, forme, apartenen sistematic i activitate biologic, reprezint
populaia solului. Cele vizibile cu ochiul liber, datorit dimensiunii lor, sunt
studiate nc din cele mai vechi timpuri i formeaz macropopulaia solului.
Celelalte organisme formeaz micropopulaia solului i au putut fi observate i
analizate dup perfecionarea mijloacelor de mrire a imaginii.
Circuitul azotului n natur se desfoar pe parcursul a mai multor etape,
care implic desfurarea unor multiple activiti biochimice; unele au loc n
anaerobioz, iar altele n prezena oxigenului.
Etapele circuitului azotului n natur:
I. Fixarea azotului molecular
II. Amonificarea
III. Nitrificarea
IV. Denitrificarea
Carbonul organic are, n principal, origine vegetal, fiind introdus n sol prin
procese multiple i sub forme variate. Prin procese naturale este introdus sub
form de esuturi vegetale moarte, rdcini, frunze, care ajung n sol odat cu
moartea plantelor. Prin procese artificiale este introdus n sol prin ncorporarea
unor vegetale parial metabolizate, sub form de gunoi natural i artificial.
Circuitul fosforului se desfoar n mai multe faze, dup cum urmeaz:
1. Mineralizarea fosforului organic
2. Mobilizarea ortofosfailor insolubili
3. Transformarea meta-, piro- i polifosfailor este realizat sub aciunea
4. Oxidarea fosfailor i hipofosfailor are loc sub aciunea unor
5. Reducerea ortofosfailor
152
153
MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR
Cuprins (U.I.8)
Instruciuni (U.I.8)
Aceast unitate U.I. necesit cca. 4 ore de studiu individual (S.I.), la care
se adaug alte 4 ore de activiti asistate (A.A.). n cuprinsul acestei uniti de
nvare este inserat un test de autoevaluare, cu scopul de a v ajuta la
memorarea i nelegerea noiunilor legate de microbiologia fermentaiilor
(rspunsurile corecte sunt date la finalul testului ) i o lucrare de verificare.
Aceasta din urm se va transmite pe adresa disciplinei, n format electronic sau
prin pot, pn la sfritul celei de-a IV-a sptmni din sem. I.
154
MICROBIOLOGIA FERMENTAIILOR
Microbiologia fermentaiilor studiaz caracteristicile biologice i
biochimice, precum i condiiile optime de activitate ale microorganismelor care
produc transformri chimice n diferite substraturi, cu formarea unor cantiti
relativ mari de substane cu valoare util sau economic. De asemenea, ea
studiaz rolul microorganismelor n apariia unor modificri utile a diferitelor
produse alimentare, modalitile de a dirija aceast activitate microbian, ca i
posibilitile de combatere a microorganismelor duntoare pentru evoluia
normal a proceselor fermentative sau pentru buna conservare a produselor
alimentare.
Fermentaiile sunt procese biochimice, determinate de enzimele unor
microorganisme, cum sunt bacteriile, levurile, mucegaiurile care au proprietatea
de a degrada n condiii de anaerobioz diferii compui organici ai carbonului cu
formarea de substane cu o condiie chimic mai simpl. Din descompunerea
anaerob a hidrailor de carbon rezult o serie ntreag de produi finali cu 1, 2, 3
sau 4 atomi de carbon, care apar, obinuit, prin degradarea glucozei pn la acid
piruvic.
De cele mai multe ori, unul dintre produii rezultai predomin cantitativ i,
ca atare, caracterizeaz procesul de fermentaie alcoolic, lactic, butiric,
propionic etc.
Termenul generic al fermentaiei (lat. fervere = a fierbe) a fost ales pentru a
indica aspectul de lichid care fierbe, caracteristic pentru faza de intensitate
maxim a procesului fermentativ, aceea n care, datorit eliberrii CO2 sub form
de bule de gaz, se produce o efervescen a mediului lichid, n special n vasele
foarte mari (de exemplu, la mustul de struguri care fermenteaz).
Iniial, fermentaiile se produceau sub aciunea micoflorei "spontane",
slbatice, care se gsete pe suprafaa sau n interiorul produsului supus
fermentaiei. Aceste microorganisme sunt slab sau inegal active sau pot fi n
amestec cu specii duntoare, a cror activitate diminueaz calitatea produsului
final. n prezent, pentru a se preveni aceste inconveniene, se recurge la
microorganisme selecionate, cu ajutorul crora se obin produse de calitate
superioar, se mbuntete randamentul i se scurteaz durata procesului
tehnologic.
Microorganismele utilizate n procesele fermentative de tip industrial au
urmtoarele caliti, ce pot fi astfel sintetizate:
cresc rapid i pot fi uor cultivate n cantiti mari, pe medii ce conin
substanele organice corespunztoare;
au capacitatea de a-i menine constant proprietile fiziologice, n anumite
condiii de cultur, producnd uor i n cantiti mari enzimele necesare pentru
transformarea substratului n sensul dorit;
realizeaz aceste modificri, cu formarea unor produi folositori, n condiii
relativ simple i puin costisitoare.
Microorganismele de utilitate industrial sunt astzi folosite pentru procese
ca:
155
biosinteza a diferite substane chimice (alcooli, acid acetic, acid lactic, acid
citric, aceton, antibiotice);
producerea pe cale fermentativ a unor alimente (produse lactate, brnzeturi), a
unor buturi alcoolice (vin, bere) i a furajelor nsilozate;
obinerea de produse folosite n industria textilelor (fibre de in, cnep prin
topire).
Microbiologia industrial mai studiaz i aplic metodele de combatere a
alterrilor microbiene a alimentelor cu ajutorul conservrii prin refrigerare,
sterilizare, fermentaii i alte procese tehnice.
8.1. Fermentaia alcoolic
Este un proces anaerob, prin care glucidele fermentescibile sunt
metabolizate prin reacii de oxido-reducere sub aciunea echipamentului enzimatic
al drojdiei n produi principali (alcool etilic i CO2), produi secundari (alcooli
superiori, acizi, aldehide etc) i energie.
Alcoolul etilic sau etanolul (CH3-CH2-OH) se obine prin fermentarea
complet, n special de ctre unele drojdii, a diferite zaharuri, urmat de separarea
prin distilare i purificare a alcoolului obinut.
Fermentaia alcoolic este una dintre cele mai importante fermentaii
industriale, deoarece alcoolul este ntrebuinat curent n industria alimentar,
chimic, farmaceutic, a parfumurilor i cauciucului.
Materiile prime folosite la fabricarea alcoolului sunt ieftine, abundente n
natur i sunt grupate astfel:
materii prime amidonoase, rezultate din cartof, porumb, orz, secar, care se pot
utiliza dup transformarea hidrolitic a amidonului din compoziia lor n zaharuri
mai simple, fermentabile de ctre levuri;
materii prime zaharoase, provenite din sfecla pentru zahr sau trestia de zahr,
sucurile de fructe, melasa, rezultat ca deeu de la fabricarea zahrului i a leiilor
sulfitice, ce rezult ca deeu de la fabricarea celulozei, cu coninut sczut de 1-5
% zahr;
materii prime celulolitice, rezultate din industria hrtiei, ca lemnul i stuful,
care, prin fierbere cu acizi sub presiune, se hidrolizeaz cu formarea de hidrai de
carbon mai simpli, fermentabili.
nainte de folosirea lor n fermentaiile industriale, amidonul, celuloza i
hemiceluloza trebuie hidrolizate sau convertite n zaharuri cu molecule relativ
simple i fermentabile. n acest scop, se folosesc fie preparate enzimatice, ca
malul de cereale sau enzime de natur microbian, provenite de la bacterii i
mucegaiuri, fie anumite substane chimice, ca acizii diluai sau aciunea asociat a
unora dintre aceti ageni.
Microorganismele care produc fermentaia alcoolic a zaharurilor sunt
reprezentate de:
ciuperci, n principal din genul Saccharomyces;
unele bacterii ca: Zymomonas mobilis, Thermobacterium mobile, Bacillus
macerans, Sarcina ventriculi, Bacillus acetosetilycus etc.
156
157
levuri perfecte sau telemorfice care au stadii sexuate distincte, exprimate fie ca
asc, fie ca bazidie;
levuri imperfecte sau anamorfice sunt cele la care lipsesc stadiile sexuate i se
reproduc numai prin nmugurire sau diviziune.
Majoritatea levurilor aparin acestui ultim grup. S-a demonstrat, totui, c
anumite levuri imperfecte pot fi nrudite fie cu levurile ascomicete, fie cu cele
bazidiomicete, pe baza unor caracteristici, cum ar fi ultrastructura peretului
celular, formarea conidiilor i compoziia peretului celular.
n prezent, metodele de identificarea a levurilor presupun o abordare
complex ce vizeaz tehnici moderne de genetic microbian, biochimie, biologie
molecular i imunologie.
Tehnicile de biologie molecular au fcut posibil compararea informaiei
inclus n ADN, artnd c pentru fiecare organism, compoziia n baze purinice
este constant i caracteristic. Tehnica hibridrii ADN este foarte important
pentru a explora omologia genetic a multor grupuri de levuri. Aceasta este util
doar pentru organisme strns nrudite, aparinnd aceluiai gen sau preferabil
aceleiai specii.
Structura primar a proteinelor enzimatice izofuncionale poate fi diferit.
Datorit acestui fapt pot coexista dou levuri cu manifestri metabolice
funcionale identice, asigurate de enzime cu structuri tridimensionale similare, dar
difer n detalii ale secvenei aminoacizilor.
S-a constatat, de asemenea, existena unor diferene semnificative att
cantitativ, ct i calitativ, ntre genurile de levuri, pornind de la componena
peretului celular. Implicarea peretului celular n taxonomia levurilor se explic
prin participarea unei mari poriuni a genomului celular la sinteza acestuia, n
comparaie cu relaiile simple de fermentaie i asimilaie, care sunt sub incidena
unui numr limitat de gene.
Deoarece, semnificaia imunologic a antigenilor microbieni depinde de
structura stereomolecular a peretului celular, este evident corelaia dintre
rezultatele analizelor chimice ale peretului celular i cele ale analizelor serologice
pentru diferenierea levurilor.
S-a demonstrat utilitatea criteriilor serologice pentru specii dificil de
difereniat i imunitatea din punct de vedere biologic a diviziunii, la numeroase
specii a unor sue similare biologic. Deoarece s-au constatat asemnri n
structura antigenic a unor levuri fr nici o corelaie cu alte trsturi ale acestora,
taxonomia realizat exclusiv pe baz serologic nu este acceptat deocamdat.
Prin aprofundarea studiilor serologice, acestea vor putea fi luate n considerare
pentru elucidarea relaiilor taxonomice i filogenetice ntre levuri.
Prin mbinarea cunotinelor de genetic, biochimie i biologie celular au
fost stabilite noi tehnici de identificare a levurilor: ECP-ul (Electroforse Champ
Puls), ce se bazeaz pe separarea celor 16 cromozomi ai levurii, PCR-ul
(Polymerase Chain Reaction), tehnic bazat pe amplificarea fragmentelor de
ADN specifice, urmat de separarea lor prin electroforez, RFLP (Restriction
Fragment Lenght Polymorphism), ce face, n mod egal, apel la tehnica PCR, dar
secvenele amplificate sunt degradate prin enzime de restricie, nainte de
159
acesteia este de 7,3 i numai n momentul scderii acestuia din diferite motive,
devin active.
12. Peroxizomii sunt organite sferice cu o membran simpl n care sunt
localizate oxidaze cu rol n adaptarea celulei de drojdie la condiii aerobe.
Perete celular
162
164
C. Bacteriile vinului
Bacteriile prezint o mare importan pentru calitatea vinurilor. Unele dintre
ele, n anumite condiii, pot contribui prin activitatea lor la mbuntirea acesteia;
166
cele mai multe pot provoca vinurilor transformri nedorite i chiar mbolnviri
grave.
n perioada recoltrii strugurilor, pe pielia boabelor, pe lng levuri i
mucegaiuri, se gsesc i bacterii, dar pot fi ntlnite, de asemenea, n crame i
pivnie, ndeosebi pe suprafaa intern a butoaielor i cisternelor n care se
fermenteaz mustul sau se pstreaz vinul i care nu au fost corect curate i
ntreinute.
Dup procesele pe care le declaneaz, bacteriile au fost grupate n:
I. Bacterii acetice, microorganisme aerobe, care se ntlnesc att pe strugurii
sntoi, ct i pe cei vtmai, precum i n musturi sau vinuri, mai ales cnd sunt
pstrate n vase incomplet pline.
Bacteriile acetice care se dezvolt n vin formeaz, la suprafaa acestuia, un
vl sau o pelicul, care, uneori, poate fi alburie, subire, aproape transparent, cu
reflexe irizante i care poate urca rapid pe pereii vasului.
Alteori, acest vl este mai gros, uleios, hidrofob i se coloreaz, pe msura
mbtrnirii, n brun.
ntr-un al treilea caz, vlul format atinge mai muli milimetri grosime, este
vscos, greu de desfcut i, care, cu timpul, cade la fundul vasului, cunoscut i sub
numele de cuib de oet.
Genul Acetobacter. Acest gen grupeaz specii cu celule sub form de
bastonae, dispuse izolat, n perechi sau lanuri, ce sunt imobile sau prevzute cu
cili dispui peritriche.
Speciile genului Acetobacter produc oxidarea etanolului pn la acid acetic,
la un pH de aproximativ 4, precum i a acidului acetic a lactaiilor i
aminoacizilor. Ciclul Krebs este prezent i activ. Se dezvolt la temperaturi
cuprinse ntre 5 i 42oC, cu un optim de 30oC.
Speciile cele mai importante sunt: Acetobacter aceti; Acetobacter
pasteurianus i Acetobacter peroxydans.
Genul Gluconobacter cuprinde bacterii asemntoare din punct de vedere
morfologic cu speciile genului Acetobacter. Singurul criteriu de difereniere l
reprezint flagelaia, cnd aceasta exist. Astfel, speciile genului Gluconobacter
sunt lofotriche (3-8 cili la fiecare pol), fa de ciliaia peritriche la Acetobacter.
Produc oxidarea moderat a etanolului pn la acidul acetic la un pH=4,5.
Temperatura optim de dezvoltare este 25-30oC, dar variaia acesteia poate fi
cuprins ntre 7 i 41oC. Fiziologic, se deosebete de genul Acetobacter prin
urmtoarele proprieti:
ciclul Krebs nu este complet;
nu oxideaz acidul acetic i lactaii pn la CO2.
II. Bacterii lactice
Reprezentanii acestui grup sunt facultativ-anaerobi i particip la o serie de
transformri n vin i anume:
167
169
acid lactic
lactat de calciu
172
TEST DE AUTOEVALUARE
Alegei rspunsul corect (1-3 variante corecte pentru fiecare ntrebare)
Rezultate corecte:
1 c; 2 - c; 3 - b; 4- c.
Rezumat (U.I. 8)
Microbiologia fermentaiilor studiaz caracteristicile biologice i biochimice,
precum i condiiile optime de activitate ale microorganismelor care produc
transformri chimice n diferite substraturi, cu formarea unor cantiti relativ mari
de substane cu valoare util sau economic.
Fermentaia alcoolic- Este un proces anaerob, prin care glucidele
fermentescibile sunt metabolizate prin reacii de oxido-reducere sub aciunea
echipamentului enzimatic al drojdiei n produi principali (alcool etilic i CO2),
produi secundari (alcooli superiori, acizi, aldehide etc) i energie.
Fermentaia lactic - Este un fenomen cunoscut nc din antichitate, ce a
fost explicat de L. Pasteur odat cu descoperirea bacteriilor lactice. Acidul lactic
rezultat din aceast fermentaie este un produs foarte util n medicin, industria
alimentar, la tbcirea pieilor, ca mordant n industria textil etc. Dup natura
produilor finali din fermentaie, bacteriile lactice pot fi mprite n dou grupuri:
I. Bacterii lactice homofermentative
II. Bacterii lactice heterofermentative
Fermentaia acetic
175
1. Fermentaia alcoolic
Materiile prime folosite la fabricarea alcoolului sunt:
- materii prime amidonoase.
- materii prime zaharoase.
- materii prime celulolitice.
2. Utilizarea microorganismelor n vinificaie
Levurile
Principalele levuri ntlnite n vin
Levuri sporogene
Saccharomyces spp
Pichia spp..
Saccharomycoides sp.
Hanseniospora spp
Levuri nesporogene
Torulopsis sp
Brettonomyces sp
Candida sp.
Kloeckera sp
Rhodotorula sp.
Mucegaiurile
Mucor spp.
Rhizopus sp
Aspergillus spp.
Penicillium spp
Merulius sp.
Cladosporium sp.
Botryotinia sp
Bacteriile vinului
Bacteriile acetice
Genul Acetobacter
Genul Gluconobacter
Bacterii lactice
Genul Pediococcus
Genul Leuconostoc
Genul Lactobacillus
176
BIBLIOGRAFIE (U.I. 8)
Baker H. F., Rosalind M. Ridley Prion diseases, Ed. Humana Press, New
Jersey, USA, 1996
Baker S., Nicklin Jane, Khan N., Killington R. Microbiology, Ed. Taylor
& Francis, Oxford, Marea Britanie, 2007
Kingsley R.S. Introductory-Plant biology, Ed. Wm. C. Brown Publishers,
U.S.A, 1991
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992
177
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
Ldder J., Kreger Van Rij N. J. W. The yeasts, a taxonomic study, Ed.
North Holland Publishing Company, Amsterdam, 1952
Ldder J., Kreger Van Rij N. J. W. The yeasts, a taxonomic study-second
edition, Ed. North Holland Publishing Company, Amsterdam, 1970
Lwoff A., Horne R., Tournier P. A system of viruses. Cold Spring Harb
Symp Quant Biol., 27, 51-55, 1962
Madigan M. T., Martinko J. M., Parker J. Biology of microorganisms, Ed.
Prentice Hall International Inc., SUA, 1997
Mzreanu C. Microbiologie general, Ed. Alma Mater, Bacu, 1999
Mihescu G., Gavril L. Biologia microorganismelor fixatoare de azot,
Ed. Ceres, Bucureti, 1989
Murray P.R., Ellen Jo Baron, Pfaller M.A., Tenover F.C., Yolken R.H.
Manual of Clinical Microbiology, Ed. ASM Press, USA, 1995
Pamfil D. Microbiologie, Ed. Genesis, Cluj Napoca, 1999
Papacostea P. Biologia solului, Ed. tiinific i Enciclopedic, Bucureti,
1976
Popa I. A., Teodorescu C. t. Microbiologia vinului, Ed. Ceres, Bucureti,
1990
Priest F., Austin B. Modern bacterial taxonomy, Ed. Chapman & Hall,
Londra, Marea Britanie, 1993
Prusiner S. B. - Prion Biology and Diseases, CSHL Press, Danvers, USA,
2004
Ross F. C. Introductory microbiology, Editura Charles E. Merrill
Publishing Company, USA, 1983
Schlegel H.G. Allgemeine Mikrobiologie, Ed. Thieme, Germania, 1992
esan Tatiana Eugenia, Tnase C. Mycobiota- Sisteme de clasificare, Ed.
Universitaii Alexandru Ioan Cuza Iai, 2006
esan Tatiana Eugenia, Tnase C. Ciuperci anamorfe fitopatogene, Ed.
Universitii din Bucureti, 2007
Tnase C. Micologie, Ed. Universitii Alexandru Ioan Cuza Iai, 2002
Tnase C., esan Tatiana Eugenia Concepte actuale n taxonomia
ciupercilor, Ed. Uniersitii Alexandru Ioan Cuza, Iai, 2006
Tofan Clemansa Microbiologie alimentar, Ed. Agir, Bucureti, 2004
Topal N.D. Microbiologie general, vol. I, II. Universitatea Al. I. Cuza,
Iai, 1978
Tortora G. J., Funke B. R., Case Christine Microbiology - an introduction,
Editura The Benjamin/Cummings Publishing Company, INC., SUA, 1992
Ulea E., Iacob Viorica, Ilisescu Izabela The lignicole micromycetes of
cherry and plum trees from Central Area of Moldavia, USAMV Iai, Lucrari
Stiintifice, Seria Horticultura , 48, 665-670, 2005
Ulea E., Ilisescu Izabela, Mocanu Aliona., Sava D. The effect of the
fertilization with Vinassa Rompak product on the biological activity of the
cultivated soils, J. Central European Agr, 7, 297-300, 2006
179
180