INTRODUCERE

Termenul de otrăvire alimentară poate fi folosit pentru a descrie rezultatul de a consuma organisme patogene sau
alimente contaminate cu toxine. Lista de agenți cauzali pentru boala alimentară poate să fie destul de lungiă, inclusiv
agenți infecțioși (de exemplu bacterii, viruși și paraziți), toxine naturale (de exemplu, toxine bacteriene, micotoxine,
otrăvuri pentru crustacee și otrăvuri ale plantelor).Veterinarii și proprietarii utilizează adesea termenul de intoxicare cu
gunoi pentru a descrie situația în care animalele, în special câinii, să mănânce alimentele aruncate sau păstrate în alt
mod, prost conservate; să dezvolte ulterior un sindrom compus în principal din vărsături severe și diaree. Acest capitol
este axat pe efectele enterotoxinelor, care sunt definite ca cele bacteriene exotoxinelor care sunt specifice cauzarea
tractului intestinal, vărsături, diaree și durere abdominală. Deși multe organismele produc enterotoxine cele produse de
Staphylococcus aureus vor fi subliniate în acest capitol.

Enterotoxine

Toxinele sunt otrăvuri produse de organismele vii. Enterotoxina B stafilococică (SEB) este o exotoxină excretată de
bacteria Staphylococcus aureus. Speciile de stafilococi se dezvoltă și produc toxine în carnea frigorifică, lactate și
produse de panificație. În mod normal, SEB își exercită efectul asupra intestinelor și, prin urmare, se numește
enterotoxină. Nu toate toxinele au un rezultat letal, dar pot duce la o morbiditate semnificativă.

Enterotoxina B stafilococică (SEB) este toxina cea mai frecvent asociată cu otrăvirea clasică a alimentelor. De asemenea,
s-a demonstrat că provoacă un sindrom de șoc toxic nemenstrual (TSS). SEB a fost studiat ca un potențial agent de război
biologic deoarece poate fi ușor aerosolizat; este foarte stabil; și poate cauza daune sistemice pe scară largă, eșecul
sistemelor multiorganice și chiar șocul și moartea atunci când sunt inhalate la doze foarte mari. Cu toate acestea, SEB
este clasificat ca un agent incapacitant deoarece, în majoritatea cazurilor, expunerea la aerosoli nu are ca rezultat
moartea.

Fiziopatologie

Mecanismul de toxicitate

Multe dintre efectele enterotoxinei B stafilococice (SEB) sunt stimularea imediată a limfocitelor T de către sistemul
imunitar al gazdei. Toxina se leagă direct la proteinele clasice de histocompatabilitate complexă (MHC) clasa II pe
celulele țintă, stimulând ulterior proliferarea unui număr mare de limfocite T. SEB este un "superantigen bacterian",
deoarece poate forma o "punte" între MHC II pe celulele care prezintă antigenul și pe receptorii celulelor T atât pe celule
T CD4 cât și CD8, ocolind mecanismul normal de prelucrare și prezentare a antigenului. Acest efect de legare provoacă
eliberarea unor cantități masive de citokine, în mod specific interleukină 2 (IL-2), factor de necroză tumorală β (TNF-ß) și
interferoni.

fig. Enterotoxine
Citokinele nu numai că afectează recrutarea de celule inflamatorii suplimentare, dar există o activare relativă deficitară a
buclelor negative de reacție de contra-reglementare. Ingestia SEB produce simptome gastrointestinale profunde (GI),
incluzând anorexie, greață, vărsături și diaree, despre care se crede că sunt mediate prin eliberarea citokinelor din
celulele T în lamina propria a intestinelor. Studiile la animale au arătat că edemul pulmonar sever asociat cu expunerea
la aerosoli este probabil secundar proliferării celulelor T în mucoasa respiratorie și nu toxina în sine.

Enterotoxina B din stafilococul B (SEB) constă din 239 de resturi de aminoacizi și are o greutate moleculară de 28 kd. Este
una din cele 6 proteine enterotoxine distincte cel puțin din punct de vedere antigenic care au fost identificate (A, B, C, D,
E, G). SEB are 2 domenii distincte, "împachetate", care au o structură terțiară foarte complexă. Această structură
compactă permite SEB să fie foarte rezistentă la proteaze, incluzând tripsina, chymotripsina și papaina, care se găsesc
toate în lumenul intestinal.

Enterotoxina B de stafilococi B (SEB) este un compus relativ stabil care este ușor solubil în apă. Este rezistent moderat la
fluctuațiile de temperatură și poate rezista la fierbere la 100 ° C timp de câteva minute. În starea liofilizată, SEB poate fi
depozitat mai mult de un an. Pentru expunerea la aerosoli, doza eficientă sau ED50 (doză capabilă de incapacitate a 50%
din populația umană expusă) este de 0,0004 mcg / kg, iar doza letală sau LD50 este de 0,02 mcg / kg
1. Microbiologie

1.1. Genul Staphylococcus

Genul Staphylococcus este compus din bacterii Gram-pozitive cu diametre de 0,5-1,5 μm, caracterizate de cocci
individuali care se împart în mai multe planuri pentru a forma clustere asemănătoare strugurilor. Aceste bacterii sunt
anaerobe facultative non-motile, care prezintă o cerință nutrițională complexă pentru creștere, un conținut scăzut de G
+ C din ADN (în intervalul 30-40 mol%), o toleranță la concentrații mari de sare și rezistență la căldură.

Genul Staphylococcus este divizat în mod tradițional în două grupe bazate pe capacitatea bacteriană de a produce
coagulază, o enzimă care provoacă coagularea sângelui: stafilococi coagulaza-pozitivi, care include cele mai cunoscute
specii Staphylococcus aureus; și stafilococi negativi cu coagulază (CoNS), care sunt comenzi comune ale pielii.

Fig. Staphylococcus aureus

1.2. Staphylococcus aureus este cea mai patogenă specie din genul Staphylococcus, fiind implicată atât în infecțiile
comunitare, cât și în cele nosocomiale. Adesea colonizează asimptomatic pielea și membranele mucoase ale unor
indivizi sănătoși, în special ale narelor anterioare. De fapt, s-a estimat că aproximativ 20-30% din populație este
colonizată permanent de această bacterie, în timp ce alte 30% sunt transportatori tranzitorii. Această colonizare
reprezintă un risc crescut de infecție prin furnizarea unui rezervor din care sunt introduse bacteriile atunci când apărarea
gazdei este compromisă. Datorită importanței infecțiilor cu S. aureus și a prevalenței crescânde a tulpinilor rezistente la
antibiotice, această bacterie a devenit cea mai studiată specie stafilococică. Numele aureus se referă la faptul că
coloniile formate pe medii bogate în substanțe solide au o culoare aurie, provocată de prezența carotenoidelor, în
opoziție cu coloniile albe, translucide formate de CoNS.

1.3. Exprimarea determinanților de virulență în S. aureus S. aureus este cunoscut pentru capacitatea sa de a provoca o
gamă largă de infecții importante la om. Această capacitate este legată de exprimarea unei game de factori care
participă la patogeneza infecției, permițând acestei bacterii să adere la suprafețe/ țesuturi, să evite sau să invadeze
sistemul imunitar și să producă efecte toxice nocive asupra gazdei. Acești factori sunt cunoscuți ca factori de
determinare a virulenței.
Factori de suprafață celulară

S. aureus exprimă mai mulți factori de suprafață celulară care joacă un rol în virulența sa. Acestea includ componente de
suprafață microbiană care identifică molecule de matrice adezivă (MSCRAMM), polizaharide capsulare și stafiloxantină
(pigment carotenoid).

Factorii secretați (exotoxine)

O caracteristică importantă a lui S. aureus este abilitatea de a secreta toxine care, spre deosebire de rolul protector și
pasiv al factorilor de virulență asociate peretelui celular menționați mai sus, joacă roluri active în dezarmarea imunității
gazdă. Într-adevăr, ele perturbă celulele și țesuturile gazdă și interferează cu sistemul imunitar gazdă pentru a elibera
substanțele nutritive și pentru a facilita diseminarea bacteriilor. Acești factori secretați pot fi împărțiți în patru categorii:

 superantigeni;
 toxine citolitice (poreforming);
 diverse exoenzime;
 proteine diverse.

 Superantigeni

Superantigenii sunt un grup de proteine imunostimulatoare puternic secretate, capabile să inducă o varietate de boli
pentru oameni, inclusiv sindromul șocului toxic (TSS).

 Citinetice (toxine care formează pori)

S. aureus secretă un număr mare de toxine citolitice care, deși diferiți din punct de vedere structural și cu specificitate
țintă diferită, au o funcție similară celulelor gazdă. Aceste toxine formează pori β-barili în membranele citoplasmatice ale
celulelor țintă și cauzează scurgerea conținutului celulei (în cazul dozelor mici) și liza celulară (la doze mari).

 Exoenzimele diferite

Aproape toate tulpinile de S. aureus secretă câteva enzime extracelulare a căror funcție este considerată a fi
întreruperea țesuturilor gazdă și/ sau inactivarea mecanismelor antimicrobiene gazdă (de exemplu, lipide, defensine,
anticorpi și mediatori de complement) pentru a obține substanțe nutritive pentru creșterea bacteriană și pentru a
facilita bacteriile diseminare. Aceste exoenzime includ lipaze, nucleaze, proteaze (serină, cisteină (de exemplu,
staphopină), aureolizină), hialuronidază și stafilokinază (SAK).

 Proteine diverse

S. aureus are, de asemenea, alte proteine specifice care pot avea un impact profund asupra sistemului imunitar innascut
și adaptativ.

Aceste proteine includ inhibitor de complement al stafilococului (SCIN), proteina de legare a fibrinogenului extracelular
(Efb), proteina inhibitoare a chemotaxisului de S. aureus (CHIPS), proteina inhibitoare a receptorului peptidic formil-1

(FLIPr) și proteina de aderare extracelulară (EAP).

Mecanisme de reglementare a determinanților de virulență în S. aureus

Gama variată de componente ale peretelui celular și extracelulare implicate în virulența S. aureus implică faptul că
patogenitatea acestei bacterii este un proces complex care necesită exprimarea strâns coordonată a acestor factori în
timpul diferitelor etape ale infecției (adică colonizarea, evitarea apărării gazdei, creșterea și diviziunea celulară și
răspândirea bacteriană)

Într-adevăr, reglarea genelor virulente în S. aureus pare să urmeze o strategie care începe cu stabilirea bacteriei în
gazdă, urmată de atacul apărării sale. Pentru aceasta, S. aureus incepe prin reglarea expresiei genelor care codifica
proteinele de suprafață implicate în adeziune și apărare împotriva sistemului imunitar gazdă; și numai cu întârziere în
infecție începe să reglementeze producția de toxine care facilitează răspândirea țesuturilor

Pentru a controla producerea determinanților de virulentă în timpul infecției, S. aureus are mai multe sisteme de
reglementare care răspund la densitatea celulelor bacteriene (senzor de cvorum) și indicii de mediu (de exemplu
disponibilitatea nutrienților, temperatura, pH, osmolaritatea și tensiunea de oxigen). Aceste sisteme pot fi împărțite în
două categorii largi: două sisteme de transducție de semnal și regulatoare globale de transcripție.

Diversitatea / heterogenitatea populației

Bacteriile din cadrul gazdei umane suferă modificări genetice, morfologice și fiziologice pentru a supraviețui pentru
perioade lungi de timp sub presiunea selectivă provocatoare impusă de sistemul imunitar și tratamentele antibiotic. S.
aureus este un agent patogen uman de succes, deoarece acesta poarta virulenta mecanica care il face capabil sa
colonizeze tesuturile gazda si sa evite raspunsurile imune. S. aureus poate supraviețui și se poate adapta la mediul uman
care declanșează circuite predeterminate ale senzorilor de efect ca răspunsul clasic la stres prin reglarea expresiei genei
prin factorii sigma (σA și σB ) [60]. Cu toate acestea, această reglementare a genei este insuficientă pentru a face față
stresurilor imprevizibile. Prin urmare, bacteriile utilizează mecanisme alternative, cum ar fi generarea eterogenității
microbiene la o populație. Producția de diversitate microbiană generează mai multe variante, unele dintre ele fiind "mai
sigure" și, astfel, mai bine adaptate la un mediu nou decât ceilalți membri ai populației [61-64]. În acest fel, bacteriile
asigură supraviețuirea populației, menținând sau amplificând funcționarea acestora împotriva fluctuațiilor de mediu și,
în consecință, persistența infecției.

Epidemiologia Staphylococcus aureus este dinamică și s-a schimbat semnificativ de-a lungul anilor. Capacitatea dovedită
a Staphylococcus aureus de a dobândi gene de rezistență este o preocupare în rândul medicilor din întreaga lume.
Căutarea de noi alternative terapeutice asociate cu politicile de control al utilizării antibioticelor și a infecțiilor dobândite
în spitale, ghidate de studii de supraveghere epidemiologică, ar trebui să fie obiceiuri constante între profesioniștii din
domeniul sănătății și spitale, ca o alternativă pentru a minimiza problema. Ceea ce a fost descris anterior este important
de mentionat ca un factor cheie pentru succesul lui S. aureus ca agent patogen este capacitatea remarcabila de a obtine
rezistenta la antibiotice. Prin urmare, din punct de vedere clinic, problema majoră pe care medicii trebuie să o facă
atunci când tratează infecțiile cu S. aureus este rezistența la antibiotice, datorită probabilității eșecului terapeutic și, în
consecință, a prognosticului slab.
Stafilococul a fost identificat pentru prima dată în 1880 în Aberdeen, Scoția, de către chirurgul Sir Alexander Ogston, în
puroi, de la un abces chirurgical la articulația genunchiului. [2] Acest nume a fost modificat ulterior la Staphylococcus
aureus de către Friedrich Julius Rosenbach, [3] care a fost creditat de sistemul oficial de nomenclatură la vremea
respectivă. Se estimează că 20% până la 30% din populația umană sunt purtători pe termen lung ai S. aureus [4] [5] care
se găsesc ca parte a florei cutanate normale, în nări [4] [6] și un locuitor normal al tractului reproductiv inferior al
femeilor. Este una dintre cele cinci cele mai frecvente cauze ale infecțiilor dobândite în spital și este adesea cauza
infecțiilor la răni după intervenție chirurgicală. În fiecare an, circa 500.000 de pacienți din spitalele din Statele Unite
contractează o infecție stafilococică, în principal de S. aureus. [10] Peste 50.000 de decese în fiecare an în SUA sunt
legate de infecțiile cu S. aureus [11].

S. aureus este, de asemenea, o bacterie anaerobă gram-pozitivă cunoscută sub numele de "staph" și "oro staphira". S.
aureus nu este motila și nu formează spori. [14] În literatura medicală, bacteria este deseori menționată ca S. aureus,
Staph aureus sau Staph A. [15] S. aureus apare ca stafilococi (clustere asemănătoare strugurilor) atunci când este privit
printr-un microscop și are colonii mari, rotunde, de culoare galben-aurie, adesea cu hemoliză, când este crescută pe
plăci cu agar sanguin. S. aureus reproduce asexuat prin fisiune binară. Separarea completă a celulelor fiice este mediată
de autolizina S. aureus, iar în absența sau inhibarea țintei, celulele fiice rămân atașate una de alta și apar ca si grupuri.
[17]

Pată Gram a celulelor S. saprophyticus care apar în mod obișnuit în grupuri

Coloniile galbene de S. aureus pe o placă cu agar sanguin, notează regiuni de curățare în jurul coloniilor cauzate de liza
celulelor roșii în agar (hemoliza beta)

Proprietăți biochimice.

Majoritatea stafilococilor fermentează fără producere de gaz, glucoza, lactoza, zaharoza, manitolul. Practic se
examinează activitatea enzimatică faţă de manitol, ca indicator de patogenitate, dar care are totuşi o valoare
aproximativă. În cursul metabolismului aerob, stafilococii produc catalază, o enzimă caracteristică, ce permite
diferenţierea de alţi coci patogeni, ca streptococul şi pneumococul, care sunt catalazo-negativi (Răpuntean et al., 2005).
Una dintre cele mai importante caracteristici folosite în clasificarea stafilococilor este capacitatea lor de a produce
coagulaza (enzimă care provoacă formarea cheagurilor de sânge). Majoritatea tulpinilor de S. aureus sunt coagulazo-
pozitive, însă unele sunt atipice (coagulazo-negative).

Proprietăți biochimice. Majoritatea stafilococilor fermentează fără producere de gaz, glucoza, lactoza, zaharoza,
manitolul. Practic se examinează activitatea enzimatică faţă de manitol, ca indicator de patogenitate, dar care are totuşi
o valoare aproximativă. În cursul metabolismului aerob, stafilococii produc catalază, o enzimă caracteristică, ce permite
diferenţierea de alţi coci patogeni, ca streptococul şi pneumococul, care sunt catalazo-negativi (Răpuntean et al., 2005).
Una dintre cele mai importante caracteristici folosite în clasificarea stafilococilor este capacitatea lor de a produce
coagulaza (enzimă care provoacă formarea cheagurilor de sânge). Majoritatea tulpinilor de S. aureus sunt coagulazo-
pozitive, însă unele sunt atipice (coagulazo-negative).
Stafilococul este diferit de genul Streptococcus similar numit și relevant din punct de vedere medical. Transformarea
genetică naturală este un proces de reproducere care implică transferul ADN dintr-o bacterie în alta prin mediul care
intervine și integrarea secvenței donatoare în genomul receptorului prin recombinare omoloagă. S. aureus s-a dovedit a
fi capabil de transformare genetică naturală, dar numai la frecvență redusă în condițiile experimentale utilizate. [20]
Studiile ulterioare au sugerat că dezvoltarea competenței pentru transformarea genetică naturală poate fi substanțial
mai mare în condiții adecvate, dar trebuie descoperită [21].

Caracteristicile de creștere și de supraviețuire

Creșterea și supraviețuirea S. aureus depinde de o serie de factori de mediu cum ar fi temperatura, activitatea apei (aw),
pH-ul, prezența oxigenului și compoziția acestuia alimente (consultați tabelul 1). Acești parametri de creștere fizică
variază pentru tulpini de S. aureus diferite (Stewart 2003).

Intervalul de temperatură pentru creșterea S. aureus este de 7-48 ° C, cu un optim de 37 ° C. S. aureus este rezistent la
îngheț și supraviețuiește bine în alimentele păstrate sub -20 ° C; in orice caz, viabilitatea este redusă la temperaturi de -
10 până la 0 ° C. Creșterea S. aureus are loc în intervalul pH de 4,0-10,0, cu un optim de 6-7 (ICMSF 1996, Stewart 2003).

S. aureus este rezistent în mod unic la condițiile adverse, cum ar fi conținutul scăzut de alcool, conținutul ridicat de sare
și stresul osmotic. Ca răspuns la valoarea aw scăzută, mai mulți compuși se acumulează în celula bacteriană, care scade
intracelularul aw pentru a se potrivi cu exteriorul aw (Montville and Matthews 2008). Cele mai multe tulpini de S. aureus
pot crește peste o gamă aw de 0,83 până la> 0,99 (FDA 2012). S. aureus este un anaerob facultativ, astfel încât poate să
crească sub ambele conditii aerobe și anaerobe. Cu toate acestea, creșterea se produce într-un ritm mult mai lent în
condiții anaerobe (Stewart 2003).

Tabelul 1: Limitele de creștere a producției de S. aureus și enterotoxină atunci când sunt alte condiții aproape optim
(ICMSF 1996)

Creșterea bacteriană Producția de enterotoxine

Optim Optim
Gamă Gamă
Temperatura (° C) 37 7-48 40-45 10-48

pH 6-7 4-10 7-8 4.5-9.6

0.98 0.83-0.99 0.98 0.87-0.99
Activitatea apei
TAXONOMIE

Genul Staphylococcus a fost desprins din familia Micrococcaceae datorită conținutului distinct al bazelor ADN (conținut
G+G de 30- 39 mol % la Micrococcus), compoziția peretelui celular, al spectrului diferit de sensibilitate la antibiotice

Schema 1- Proprietăți biochimicce pentru dferențierea cocilor Gram pozitivi aerobi (după Răpuntean Gh., 2001)

Coci Gram pozitivi

OF Glucoza

Oxidativ Fermentativ

catalază
+

Genul Micrococcus Genul Staphylococcus Genul Streptococcus

Schema 2- Proprietăți biochimice pentru diferențierea cocilor Gram pozitivi aerobi (după Răpuntean Gh., 2001)

Catalaza
Slab pozitiv sau negativ

Pozitiv
Aerococcus viridans
Dextroza

Fermentativ
Oxidativ

Gen Micrococcus
Gen Staphylococcus

Coagulază

Pozitiv Negativ

Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis

În cadrul genului se alfă specii patogene pentru om și animale, doar pentru animale și specii nepatogene. Specia tip a
acestui gen este considerate Staphylococcus aureus.

Genul include urmatoarele specii:

 Staphylococcus aerogenes
 Staphylococcus arlettae
 Staphylococcus aureus, subspecia anaerobius
 Staphylococcus aureus, subspecia aureus
 Staphylococcus auricularis
 Staphylococcus capitis subspecia capitis
 Staphylococcus capitis subspecia ureolyticus
 Staphylococcus caprae
 Staphylococcus carnosus subspecia carnosus
 Staphylococcus carnosus subspecia utilis
 Staphylococcus caseolyticus
 Staphylococcus chromogenes
 Staphylococcus cohnii
 Staphylococcus cohnii subspecia urealyticum
 Staphylococcus condimenti
 Staphylococcus delphini
 Staphylococcus epidermidis
 Staphylococcus equorum
 Staphylococcus felis
 Staphylococcus gallinarum
 Staphylococcus haemolyticus
 Staphylococcus subspecia hominis
 Staphylococcus hycus
 Staphylococcus hycus subspecia chromogenes
 Staphylococcus intermedius
 Staphylococcus kloosi
 Staphylococcus lactis
 Staphylococcus lentus
 Staphylococcus lugdunensis
 Staphylococcus lutrae
 Staphylococcus lugdunensis
 Staphylococcus lutrae
 Staphylococcus muscae
 Staphylococcus pasteuri
 Staphylococcus piscifermentas
 Staphylococcus pulvereri
 Staphylococcus pyogenes albus
 Staphylococcus saccharolyticus
 Staphylococcus saprophyticus subspecia saprophyticus
 Staphylococcus schleiferi subspecia coagulans
 Staphylococcus schleiferi subspecia schleiferi
 Staphylococcus sciuri subspecia lentus
 Staphylococcus sciuri subspecia sciuri
 Staphylococcus simulans
 Staphylococcus sp
 Staphylococcus staphylolyticus
 Staphylococcus warneri
 Staphylococcus xilosus
Pentru patologia animala cele mai importante specii de stafilococi sunt:

Staphylococcus aureus:

Subsp. anaerobius

Subsp. aureus

Staphylococcus hycus

Subsp. hycus

Subsp. chromogenes

Staphylococcus intermedius

Speciile nepatogene sau cu patogenitate scazută izolate de la animale fac parte:

Staphylococcus epidermidis

Staphylococcus caprae

Staphylococcus felis

Staphylococcus gallinarum

Staphylococcus delphini

Simptomele bolii

Simptomele de otrăvire a alimentelor stafilococice au, în general, un debut rapid, care apare în jur la 3 ore după ingestie
(intervalul 1-6 ore). Simptomele frecvente includ greață, vărsături, crampe abdominale și diaree. În cazurile severe, pot
apărea cefalee, crampe musculare și schimbări tranzitorii ale tensiunii arteriale și ale ratei pulsului. Recuperarea este de
obicei între 1-3 zile. Fatalitățile sunt rare (0,03% pentru publicul larg), dar uneori sunt raportate la copiii mici și la
vârstnici (rata mortalității de 4,4%).
S. aureus poate provoca diverse probleme de sănătate, cum ar fi inflamațiile pielii, mastita, infecțiile respiratorii, sepsisul
rănilor și sindromul șocului toxic.
Staphylococcus aureus este una dintre cele mai frecvente cauze ale otrăvirii alimentare în produsele lactate. Principalii
agenți etiologici sunt enterotoxinele stafilococice (SE). Există diferite tipuri de SE; tipurile A (SEA) și B (SEB) sunt cele mai
importante enterotoxine din punct de vedere clinic. Produsele lactate tradiționale sunt încă produse în loturi mici și
vândute de unii furnizori fără permis de la Ministerul Sănătății.

Rolul bolii

În timp ce S. aureus acționează de obicei ca o bacterie comensă, colonizând asimptomatic aproximativ 30% din populația
umană, ea poate provoca uneori boli. În special, S. aureus este una dintre cele mai frecvente cauze ale bacteriemiei și
endocarditei infecțioase.

Infecțiile cu S. aureus se pot răspândi prin contactul cu puroiul de la o rană infectată, contactul piele cu pielea cu o
persoană infectată și contactul cu obiectele folosite de o persoană infectată, cum ar fi prosoape, foi, îmbrăcăminte sau
echipament atletic.

La microscop, stafilococul auriu, este de culoare oranj-gălbui, de aici îi vine și numele.

Practic, toate problemele medicale ce țin de infecția stafilococică sînt legate anume de acest microorganism.
Numai Staphylococcus aureus dispune de toate caracteristicile patogene despre care am vorbit
anterior (capsulă protectoare, perete celular, fermenți specializați, hemolizine și toxine puternice) .
Stafilococul este înconjurat de capsulă, care îl protejează de atacul fagocitelor (Celulă sangvină a organismelor
animale care apără organismul de infecție, digerând elementele străine pătrunse în el), astfel, datorită acestui
“ambalaj”microbul pătrunde în țesuturile organismului.
Peretele celular, al microbului provoacă inflamații și reacții alergice, neutralizează imunoglobulinele și
imobilizează fagocitele.
Stafilococul dispune de un set solid de fermenți care distrug structura celulelor, neutralizează antibioticele. În
plus, stafilococul produce hemolizine (de patru tipuri) – substanțe care descompun și dizolvă eritrocitele
(eliberând ,astfel, hemoglobina), leucocitele și multe alte celule.
Pe lîngă tot acest arsenal, stafilococul, eliberează toxine foarte puternice, care sînt mai multe de zece la număr
și care pot dăuna grav organismului.
Astfel, vedem că stafilococul nu are concurență, în lumea microbilor, în vederea “armamentului” de care
dispune pentru atac. Anume prin aceasta se explică spectrul larg de boli provocate de acest agent patogen:
meningite, otite, amigdalite, pneumonii, sepsisuri, infecții intestinale (colite, enterocolite), abcese, etc.
Anume din acest motiv el este un inamic greu de combătut. Numai Staphylococcus aureus e în stare în mod
abil și perseverent să facă față antibioticelor și antisepticilor. El atacă orice persoană, indiferent de sex, vîrstă,
fie bătrîn, adult sau nou născut. Toți sînt sensibili la acest agent patogen. Stafilococul auriu este acel microb
care poate pătrunde în orice organ al omului și să provoace un proces inflamatoriu. Multe dintre cele mai
periculoase boli, sînt legate anume de acest microb.

Stafilococul auriu poate provoca boli grave. Principalele infecții sunt cele purulente la nivelul diferitor organe
ale organismului: furuncule, acnee, mastite, hidrosadenite, abcese, faringite, bronșite, pneumonii,
empiemeartrite, osteomielite,meningite, septicemii, endocardite,etc.
Septicemia stafilococică
Microbul are capacitatea de a produce un ferment special numit coagulaza (acest ferment este numai la acest
microb). Cînd de pe suprafața pielii stafilococul auriu pătrunde într-un flux sangvin stafilococul auriu produce
coagulaza și sub acțiunea acestui ferment are loc închegarea sîngelui și bacteriile nimeresc în interiorul
microtrombelor – ascunse bine de factorii imunității.
În așa mod poate apărea septicemia stafilococică, alt scenariu ar fi ca microbul, poate pătrunde în orice organ
al omului (prin intermediul fluxului sangvin) și să inducă procese purulente și inflamatorii.
Septicemia stafilococică, de cele mai multe ori începe de la un focar mic de infecție, cum ar fi un simplu coș
(inflamarea folicului de păr). Din acest focar mic, microbul, prin sînge, conform mecanismului descris mai sus,
ajunge și în alte organe. În acest sens, cea mai vulnerabilă zonă este cea a triunghiului format de colțurile gurii
și nas. Din această parte a corpului infecția poate să se răspândească foarte ușor spre creier, ceea ce constituie
un pericol real pentru viață. Această complicație este asociată cu faptul că în această zonă a feței (colțurile gurii
și nas) nu există bariere mecanice sigure în fața infecției, vene fără valve care ar împiedica ca sîngele să circule
în sens invers, musculatura feței, este practic continuu în mișcare ceea ce favorizează răspîndirea microbului.

De cele mai multe ori stafilococul induce pneumonii, ataca valvele inimii, ulcere pot apărea oriunde: în ficat,
creier, rinichi, poate induce ostiomielita (inflamarea țesutului osos).
De pe piele, stafilococul auriu poate pătrunde în glandele mamare (anume el e vinovatul principal în apariția
mastitelor), de pe mucoase poate pătrunde în căile respiratorii superioare, în ureche, în sinusurile paranazale, să
coboare în jos, spre plămîni, provocînd pneumonie.

sindromul stafilococic al pielii opărite

Stafilococii produc toxine foarte puternice, care pot provoca boli grele. Unul dintre aceste toxine
este exfoliatina care afectează nou născuții. Otrava acționează asupra pielii pe care apar bule similare celor
generate de arsuri. Această boală e cunoscută sub numele de sindromul stafilococic al pielii opărite.
Pacienții cu diabet zaharat, utilizatorii de droguri injectabile și persoanele cu afecțiuni cardiace ar trebui să ia măsuri
suplimentare pentru a evita intrarea în contact cu Staphylococcus aureus, deoarece acestea prezintă cel mai mare risc. O
serie de măsuri preventive sunt spălarea mâinilor de multe ori cu săpun.

S. aureus este o cauză semnificativă a infecțiilor cronice de biofilm pe implanturile medicale, iar represorul de toxine
face parte din calea infecției [25].

S. aureus poate sta latente în organism de ani de zile nedetectate. Odată ce simptomele încep să apară, gazda este
contagioasă timp de încă două săptămâni, iar boala globală durează câteva săptămâni. Dacă nu este tratată, boala poate
fi mortală. [26]

Infecțiile profund penetrante cu S. aureus pot fi severe.

Infecții cutanate

Infecțiile cutanate sunt cele mai comune forme de infecție cu S. aureus. Aceasta se poate manifesta în diverse moduri,
incluzând, foliculită, celulită și infecții mai severe, invazive ale țesuturilor moi. S. aureus este extrem de răspândit la
persoanele cu dermatită atopică. Acesta se găsește cel mai adesea în locuri fertile, active, incluzând axile, părul și
scalpul. Pupulele mari care apar în acele zone pot exacerba infecția dacă sunt lărgite. Acest lucru poate duce la
sindromul pielii arsuri stafilococice, o formă severă a căreia poate fi observată la nou-născuți [27]. Prezența S. aureus la
persoanele cu dermatită atopică nu este o indicație pentru tratamentul cu antibiotice orale, deoarece dovezile nu au
demonstrat că acest lucru aduce beneficii pacientului [28]. [29] Relația dintre S. aureus și dermatita atopică este neclară.
[28]

Intoxicație alimentară

S. aureus este, de asemenea, responsabil pentru otrăvirea alimentară. Este capabil să genereze toxine care produc
intoxicații alimentare în corpul uman. Perioada de incubație durează între una și șase ore, boala însăși trăind oriunde, de
la treizeci de minute la trei zile. Măsurile preventive pe care le puteți lua pentru a preveni răspândirea bolii includ
spălarea temeinică a mâinilor cu săpun și apă înainte de prepararea alimentelor. Stați departe de orice mâncare dacă
sunteți bolnav și purtați mănuși dacă există răni deschise pe mâini sau încheieturi în timpul preparării alimentelor. Dacă
depozitați alimente mai mult de 2 ore, păstrați alimentele peste 140 grade Fahrenheit sau sub 40 grade Fahrenheit.
TRADUCERE ENGLEZA

Staphylococcus aureus și toxinele sale legate de intoxicații alimentare: caracterizarea și investigarea focarelor

Starea de intoxicare a alimentelor stafilococice (SFP) este una dintre cele mai frecvente boli provocate de alimente și
rezultă din ingestia enterotoxinelor stafilococice (SE) preformate în alimente de tulpinile enterotoxigenice de
Staphylococcus aureus. Până în prezent au fost descrise mai mult de 20 SE-uri: SEA la SEV. Toate acestea au activitate
superantigenică, în timp ce jumătate dintre ele s-au dovedit emetice, reprezentând un potențial pericol pentru
consumatori. Această revizuire, împărțită în patru părți, se va concentra asupra următoarelor aspecte: (1) povestea
globală a izbucnirilor SFP, (2) caracteristicile și comportamentul S. aureus în mediul alimentar, (3) condițiile toxinogene și
caracteristicile SE, și (4) Focare SFP incluzând simptomatologia, apariția în Uniunea Europeană și metodele disponibile în
prezent pentru a caracteriza focarele stafilococice.

Stafilococi coagulaza-pozitivi, enterotoxine stafilococice, otrăvire alimentară cu stafilococi

Subiect:

•Staphylococcus aureus

•intoxicație alimentară

• focare de boală

•Uniunea Europeana

•alimente

• stafilococ

• toxine

• enterotoxine stafilococice

• cunoașterea socială și evaluarea emoțională

O revizuire la nivel mondial a focarelor legate de stafilococi coagulaza-pozitivi si toxinele lor: povestea

Staphylococcus aureus (SFP) este una dintre cele mai frecvente boli provocate de alimente din lume, după ingerarea
enterotoxinelor stafilococice (SE) care sunt produse de tulpini enterotoxigenice de stafilococi coagulaza-pozitivi (CPS), în
special Staphylococcus aureus (Jablonski & Bohach , 1997) și foarte ocazional de alte specii de stafilococi cum ar fi
Staphylococcus intermedius (Genigeorgis, 1989; Khambaty și colab., 1994).
Când au apărut focare în timpul unor evenimente sociale mari, au apărut situații haotice care necesitau implementarea
rapidă a îngrijirii medicale pentru un număr mare de cazuri (Bonnetain et al., 2003; Do Carmo et al., 2004).

Iată câteva exemple de focare SFP (SFP).

Prima descriere a bolii provocate de alimente care implică stafilococi a fost investigată în Michigan (SUA) în 1884 de
către Vaughan și Sternberg. Acest eveniment de otrăvire a alimentelor a fost cauzat de consumul de brânză contaminată
de stafilococi. Autorii au declarat: "Se pare că nu este improbabil ca principiul otrăvitor să fie o pataină dezvoltată în
brânză ca rezultat al activității vitale a Micrococcusului menționat sau a altor microorganisme care au precedat-o și
probabil că a fost ucisă de propria sa produse otrăvitoare "

Zece ani mai târziu, Denys (1894) a concluzionat că boala unei familii care a consumat carne de la o vacă care a murit de
febră vitrulară a fost datorată prezenței stafilococilor pyogenici.

În 1907, Owen a recuperat stafilococi din carnea de vită uscată implicată într-un focar care prezintă caracteristicile
simptomatologiei SFP (Dack et al., 1930).

Dovada implicării stafilococilor în intoxicația alimentară a fost inițial adusă de Barber în 1914. El a demonstrat cu
certitudine că stafilococii au fost capabili să provoace otrăvire prin consumul de lapte neîncălzit de la o vacă care suferea
de mastită, o inflamație datorată stafilococilor. Cu toate acestea, corelația dintre produsele alimentare care conțin
stafilococi și simptomatologia nu a fost recunoscută până când alte exemple de intoxicații alimentare au avut loc mai
târziu în secolul al XX-lea.

Baerthlein a fost raportat la un focar uriaș care a implicat 2000 de soldați ai armatei germane în timpul Primului Război
Mondial, care a stabilit în 1922 rolul posibil al bacteriilor. "Voi raporta cazul unei demonstrații extinse a cârnaților
otrăviți (aproximativ 2000 de cazuri) ținute în primăvara anului 1918 în timpul campaniei militare a lui Verdun, care ar
avea probabil consecințe militare catastrofale. La începutul lunii iunie 1918, demonstrații bruște și masive care au
apariția unei gastroenterite acute și, în unele cazuri, grave, asemănătoare cu holera, au afectat trupele din jurul lui
Verdun; întreaga întreprindere a fost dezactivată, cu excepția câtorva persoane, iar în două zile aproximativ 2000 de
bărbați au fost afectați. Simptomele au fost atât de grave încât unele trupe (mai mult de 200) trebuiau să fie transferate
în spitale de câmp. Suspiciunea de intoxicații alimentare a fost menționată deoarece, potrivit rapoartelor bolnavilor,
boala a avut loc 2 sau 3 ore (unele dintre simptome au apărut după 6 până la 8 ore) după ce au mâncat un vas de
cârnați. Numai trupele care nu au mâncat masa au fost cruțate, cum ar fi soldații care s-au întors la sediu pentru a primi
ordine, soldații care, din alte motive, nu mâncau cârnați și soldații care se aflau în concediu și / sau în urma unei
alimentații diferite. Cu toate acestea, a fost surprinzător faptul că printre trupele care nu erau prezente pe front, cum ar
fi măcelarii, care au mâncat același cârnați cu două zile mai devreme, nu am observat niciun caz de boală ".

În 1930, Dack et al. a constatat că un tort de burete a fost responsabil pentru intoxicarea a 11 indivizi; el a subliniat că
boala a fost probabil legată de o toxină numită "enterotoxină" produsă de stafilococul hemolitic galben. Filtre de cultură
de broască din această tulpină au fost administrate intravenos la un iepure și pe cale orală la trei voluntari umani.
Iepurele a murit, după ce a dezvoltat pentru prima dată diaree de apă, iar cei trei voluntari au dezvoltat greață, răceală și
vărsături după 3 ore. În același an, Iordania a arătat că diferitele tulpini de stafilococi prezintă proprietăți culturale de a
genera o substanță care a fost purificată din bulion și, atunci când a fost administrată pe cale orală, a produs tulburări
gastro-intestinale.
Câțiva ani mai târziu, în 1934, Jordan și Burrows au observat nouă epidemii legate de prezența stafilococilor în resturile
alimentare, în timp ce Dolman (1934) a explicat că "substanța otrăvită de alimente este probabil produsă doar de câteva
tulpini de stafilococi și că este un metabolit special a cărui formare și excreție este favorizată în laborator de condiții de
mediu, cum ar fi un mediu semifluid și o atmosferă care conține un procent ridicat de dioxid de carbon, condiții care
favorizează, respectiv, creșterea abundentă și creșterea permeabilității celulare cu tamponare parțială ".

Unul dintre primele izbucniri SFP bine documentate a fost descris de Denison în 1936. Acest focar a apărut în rândul
elevilor de liceu după ce au mâncat niște smocuri smălțuite. El a descris simptomele tipice de 122 de cazuri, după cum
urmează: "În 2 - 4 ore de la masă, a fost observat mai întâi un sentiment de greață. Crampele abdominale severe s-au
dezvoltat și au fost rapid urmate de vărsături severe și au continuat la intervale de 5-20 minute timp de 1-8 ore [...] O
diaree de 1-7 scaune lichide a început de obicei cu vărsături și a continuat câteva ore după debutul [...] În timpul
stadiului acut temperatura a fost normală sau subnormală, pulsul a crescut considerabil, au existat transpirații reci,
înrăutățirea a fost severă și pacienții au fost cu siguranță într-o stare de șoc. Cefaleea a fost ușoară și de scurtă durată.
Stresul muscular [...] a fost prezent în majoritatea cazurilor. Deshidratarea a fost marcată în unele. În timp ce
simptomele acute au durat de obicei numai 1-8 ore, recuperarea completă [...] a fost amânată timp de 1-2 zile "

Simptomatologia simptomatologică a otrăvurilor alimentare a fost studiată în special de armata americană: într-un
izbucnire naturală a personalului armatei americane, care implică 400 din 600 de bărbați, DeLay (1944) a raportat că
aproximativ 25% dintre cazuri au fost clasificate drept cazuri severe sau șocante. Numeroase focare SFP au fost descrise
de la sfârșitul celui de-al doilea război mondial. De exemplu, Brink & Van Metter (1960) de la Institutul de Cercetare
Cooperatistă de la Universitatea din Pennsylvania a scris un raport lung despre izbucnirea otrăvirii alimentare cu SE, care
sa întâmplat în 1960: "Într-o după-amiază sâmbătă la mijlocul verii, o epidemie a otrăvirii alimentare cu enterotoxină
stafilococică a avut loc la un picnic de două mile de la Gabriel, un mic oraș din Midwestern. (Numele orașului și alte
nume din acest raport sunt fictive, în conformitate cu angajamentele față de respondenții Task Surprise.) Aproximativ
1700 de persoane au participat la picnic, o afacere anuală sponsorizată de Johnson Co., din Croydon, departe.
Dimineața, cu aproximativ șapte ore înainte de începerea picnicului, un camion necondiționat și neîncălzit, care conținea
o mare cantitate de sandwich-uri de șuncă, era parcat la picnic. Camionul a fost expus la căldură de lumina directă a
soarelui, în timp ce temperatura mediului ambiant pentru zi a fost aproape de 100 de grade Fahrenheit. În acest mediu,
organismele stafilococice care elaborează toxina se înmulțesc rapid. În timpul epidemiei care a urmat, aproximativ 1100
de persoane s-au îmbolnăvit ". O selecție de 24 de focare care implică SE este prezentată în tabelul 1.

TABELUL 1

Extras din otrăvirile alimentare prezentate în literatură

Number of
Year Location Incriminated food cases References
 Number of
Year Location Incriminated food cases References

1968 School children, Texas Chicken salad 1300 Anonymous (1968)

Sausages rools, ham

1971 UK army sandwiches 100 Morris et al. (1972)

Eisenberg et al.
1975 Flight from Japan to Denmark Ham 197 (1975)

1976 Flight from Rio to NYC Chocolate eclairs 80 Anonymous (1976)

1980 Canada Cheese curd 62 Todd et al. (1981)

North Carolina and Ham and cheese sandwich;

1982 Pennsylvania stuffed chicken 121 Anonymous (1983a)

1983 Caribbean cruise ship Dessert cream pastry 215 Anonymous (1983b)

1984 Scotland Sheep's milk cheese 27 Bone et al. (1989)

Woolaway et al.
1985 France, UK, Italy, Luxembourg Dried lasagna 50 (1986)

1985 School children, Kentucky 2% chocolate milk > 1000 Evenson et al. (1988)

1986 Country Club, New Mexico Turkey, poultry, gravy 67 Anonymous (1986)

1989 Various US states Canned mushrooms 102 Anonymous (1989)

Thaikruea et al.
1990 Thailand Eclairs 485 (1995)
 Number of
Year Location Incriminated food cases References

1992 Elementary school, Texas Chicken salad 1364 Anonymous (1992)

1997 Retirement party, Florida Precooked ham 18 Anonymous (1997)

Chicken, roasted beef, rice and Do Carmo et al.

1998 Minas Gerais, Brazil beans 4000 (2004)

2000 Osaka, Japan Low-fat milk 13 420 Asao et al. (2003)

Coco nut pearls (Chinese Hennekinne et al.

2006 Ile de France area, France dessert) 17 (2009)

Fitz-James et al.
2007 Scouts’ camp, Belgium Hamburger 15 (2008)

2007 Elementary school, Austria Milk, cacao milk, vanilla milk 166 Schmid et al. (2009)

De Buyser &
Hennekinne,
Weeding dinner, Ile de France pers. commun.
2008 area, France Carribean meals 47

De Buyser &
Hennekinne,
pers. commun.
2008 French district Pasta salad 100

Nagoya university festival,

2009 Japan Crepes 75 Kitamoto et al. (2009)

2009 Various districts, France Raw milk cheese 23 Ostyn et al. (2010)
Principalul punct evidențiat de aceste rapoarte este că orice produs alimentar care furnizează un mediu convenabil
pentru creșterea CPS poate fi implicat într-un focar SFP (SFP). Alimentele cele mai frecvent implicate diferă foarte mult
de la o țară la alta, probabil datorită obiceiurilor alimentare diferite (Le Loir et al., 2003). De exemplu, în Marea Britanie
sau în Statele Unite, carnea sau produsele pe bază de carne sunt vehiculele alimentare implicate în cea mai mare parte
în SFP (Genigeorgis, 1989), deși păsările de curte, salate și produse de panificație umplute cu smântână reprezintă alte
exemple bune de alimente care au fost implicat (Minor & Marth, 1972). În Franța, diferite tipuri de alimente au fost
asociate cu SFPO, dar consumul de brânzeturi nepasteurizate este mult mai comun decât în țările anglo-saxone,
produsele pe bază de lapte sunt mai frecvent implicate decât în alte țări (De Buyser et al., 2001 ).

Pentru a încheia această secțiune, deoarece SFP este o boală pe termen scurt și, de obicei, are ca rezultat recuperarea
completă, medicii nu o iau foarte în serios, mai ales atunci când focarul afectează doar câțiva oameni. Deși astfel de
epidemii ar trebui raportate autorităților sanitare, această situație duce la sub-raportare (De Buyser et al., 2001). Cu
toate acestea, mulți cercetători consideră că SFP este una dintre cele mai frecvente boli provocate de alimente la nivel
mondial (Balaban & Rasooly, 2000).

Caracteristicile și comportamentul S. aureus în mediul alimentar

Staphylococcus este o bacterie sferică, nesportivă, nonmotilă (coccus) care, observată sub microscop, apare în perechi,
lanțuri scurte sau clustere asemănătoare strugurilor. Aceste bacterii aero-anaerobe facultative sunt pozitive prin gram și
catalază. Stafilococii sunt omniprezenți în mediul înconjurător și pot fi găsiți în aer, praf, canalizare, apă, suprafețe de
mediu, oameni și animale.

Pana in prezent, mai mult de 50 de specii si subspecii de stafilococi au fost descrise in functie de potentialul lor de a
produce coagulaza. Clasificarea acestora face distincția între tulpinile producătoare de coagulază, denumite stafilococi
coagulaza-pozitivi (CPS) și tulpini producătoare de noncoagulază, numite stafilococi coagulaz-negativi (CNS). Între SNC,
se știe că unele specii joacă un rol important în fermentarea produselor pe bază de carne și produse pe bază de lapte și,
prin urmare, sunt considerate ca produse alimentare. Potențialul enterotoxigenic al SNC a fost întotdeauna un subiect
de controversă. Mai multe cercetări nu au reușit să detecteze producția de enterotoxină sau genă asemănătoare
enterotoxinei în SNC (Rosec et al., 1997; Becker și colab., 2001). Cu toate acestea, unele studii au constatat că anumite
tulpini de SNC au fost capabile să producă enterotoxine care ar putea duce la intoxicații alimentare (Vernozy-Rozand et
al., 1996; Zell et al., 2008). Mai recent, un alt studiu a demonstrat că, dintre cele 129 tulpini de SNC izolate din
alimentele fermentate, numai unul a transportat genele SE (Even et al., 2010). Cu toate acestea, deoarece numai
tulpinile CPS au fost evidențiate în incidentele de otrăvire a alimentelor, această revizuire se va concentra pe aceste
specii.

Dintre cele șapte specii descrise aparținând grupului CPS (Tabelul 2), S. aureus ssp. aureus este agentul principal cauzal
descris în SFPO. Printre alte CPS, Becker și colab. (2001) a evidențiat potențialul enterotoxigenic al S. intermedius.
Potențialul enterotoxigenic (în special pentru SEC) al acestei specii a fost demonstrat în tulpinile izolate de câini (Hirooka
și colab., 1988). Prezența în mediu a tulpinilor producătoare de toxine generează un pericol posibil pentru sănătate, în
special atunci când este transportată de animale cum ar fi câinii care intră în contact strâns cu oamenii. Staphylococcus
intermedius a fost implicat într-un singur focar cauzat de margarina și untul amestecat, implicând peste 265 de cazuri în
Statele Unite în octombrie 1991 (Khambaty et al., 1994; Bennett, 1996).

Staphylococcus aureus aparține florei normale găsite pe piele și pe mucoasele mamiferelor și păsărilor. Această bacterie
poate fi diseminată în mediul gazdei și supraviețuiește pentru perioade lungi de timp în aceste zone. Au fost descrise mai
multe biotipuri izolate din gazde diferite (om, păsări de curte, bovine și ovine / caprine) în specia S. aureus care
demonstrează adaptarea strictă a bacteriei la gazda acesteia. Acestea au fost identificate în conformitate cu patru teste
biochimice (stafilokinază, producția de ß-hemolizină, coagularea plasmei bovine și tipul de creștere pe agar de cristal
violet) urmând schema de biotyping simplificată descrisă de Devriese (1984). Cu toate acestea, multe tulpini nu pot fi
atribuite acestor biotipuri specifice gazdei și aparțin unor biotipuri non-specifice (NHS), adică acelea asociate cu mai
multe gazde. Mai târziu, un biotype de păsări de curte asociat cu produse din carne și lucrătorii din carne a fost
desemnat ca un biotype de "abator" de Isigidi et al. (1990). Într-adevăr, introducerea unui test biochimic suplimentar,
producția de proteină A și tastarea fagului a permis cercetătorilor să diferențieze biotype de păsări de curte de la acest
nou biotype. Cu toate acestea, deoarece testul pentru proteina A nu mai este disponibil în comerț și deoarece nu se
poate utiliza în mod obișnuit tastarea fagelor, aceste două biotipuri nu pot fi distinse cu ușurință. Au fost întâlnite mai
multe capcane atunci când se aplică metoda biotyping: rezultate dezordonate datorate varietății parametrilor de
testare, lipsa reactivilor standardizați, interpretări problematice pentru testele "hemolizină", "coagularea plasmei
bovine" și "violet cristal" atunci când sunt aplicate unor tulpini și, după cum sa menționat anterior, lipsa testelor
disponibile în comerț pentru a face distincția între biotipurile descrise. În ciuda acestor dezavantaje, biotyping-ul S.
aureus a fost util în urmărirea sau estimarea originii acestui organism în diferite produse alimentare (Devriese et al.,
1985, De Buyser și colab., 1987, Rosec și colab., 1997). (Isigidi et al., 1990), precum și pentru investigațiile
epidemiologice ale focarelor de otrăvire a alimentelor (Hennekinne et al., 2003, Kerouanton et al., 2007). Într-un studiu
recent, Alves și colab. (2009) a efectuat electroforeza în gel de câmp pulsatoriu (PFGE) a tulpinilor S. aureus izolate din
rumegătoare mici (n = 88) și mari (n = 65). Autorii au efectuat o analiză moleculară și au confirmat că tulpinile de ovine și
caprine care nu au putut fi distinse unul de celălalt au fost totuși diferite de tulpinile de bovine. Pentru a sugera sursa de
contaminare (origine animală sau umană), metodele bazate pe moleculă au fost folosite de diverși autori pentru
studierea focarelor de otrăvire a alimentelor (Chiou și colab., 2000, Shimizu et al., 2000, Wei & Chiou, 2002; Kerouanton
și colab., 2007; Ostyn și colab., 2010). Dintre aceste metode, PFGE și tastarea genei (SPA) a proteinei A de
Staphylococcus au fost utilizate singure sau în asociere, furnizând informații suplimentare pentru a evidenția originea
contaminării cu S. aureus.

Mijloace de contaminare

Condiția prealabilă a SFP este că produsele alimentare sau unul dintre ingredientele lor sunt contaminate cu o tulpină
enterotoxigenică de Staphylococcus spp. Mai mult, pentru a induce SFP, sunt necesare condiții pentru creșterea
stafilococilor și producerea de enterotoxine.

Sunt necesare cinci condiții pentru a induce SFPO: (1) o sursă care conține stafilococi producătoare de enterotoxină:
materii prime, un purtător sănătos sau infectat, (2) transferul de stafilococi de la sursă la alimente, de exemplu unelte de
preparare a alimentelor necurate, (3) compoziția alimentară cu caracteristici fizico-chimice favorabile pentru creșterea și
toxinogeneza S. aureus, (4) temperatură favorabilă și timp suficient pentru creșterea bacteriilor și producția de toxine și
(5) ingestia de alimente care conțin cantități suficiente de toxină pentru a provoca simptome. Majoritatea SFPO apar
datorită unor practici de igienă slabe în timpul procesării (Asao et al., 2003), prepararea sau distribuirea produsului
alimentar (Pereira et al., 1996). În plus, după contaminare, răcirea inadecvată a alimentelor poate induce creșterea
stafilococilor și / sau stimula producerea toxinelor, ceea ce duce la intoxicații alimentare (Barber, 1914; Anonymous,
1997).

Stafilococii se găsesc în mod obișnuit într-o mare varietate de mamifere și păsări, iar transferul de alimente de S.
aureusto are două surse principale: transportul uman în timpul procesării alimentelor și a animalelor de lapte în caz de
mastită. Tulpinile umane sunt implicate în principal în SFPO. Cu toate acestea, animalele sunt, de asemenea, cunoscute
ca fiind o sursă potențială de contaminare primară. De exemplu, în cazul mastitei stafilococice a rumegătoarelor, cum ar
fi vacile, caprele sau oile, S. aureus poate fi transportat din uger în lapte. Într-un studiu efectuat pe 178 tulpini S. aureus
asociate cu 31 SFPO izolate, Kerouanton și colab. (2007) a demonstrat pentru prima dată că tulpinile de animale au fost
responsabile de două focare.

Numeroase exemple de SFPO sunt descrise în literatura de specialitate din ultimele decenii (Tabelul 1). Printre aceste
exemple, cazul care a avut loc în 1997, în Florida, în cursul unei petreceri de pensionare în care a fost servit un sunca
prefiert (Anonymous, 1997), oferă o demonstrație interesantă a celor cinci condiții necesare pentru a provoca SFPO: la
27 septembrie 1997, un spital comunitar din Florida de Nord-Est (SUA) a notificat Departamentul de Sănătate despre
mai multe persoane care au fost tratate în camera de urgență datorită bolilor gastro-intestinale suspectate de a fi
asociate cu o masă comună ingerată la 26 septembrie 1997.

La 25 septembrie, un preparator de alimente a cumpărat o șuncă ambalată în prealabil de 16 lire sterline, a făcut-o la
domiciliu la 204 ° C timp de 1,5 ore și a transportat-o la locul de muncă, o bucătărie instituțională mare; în cele din urmă,
a tăiat șunca în timp ce era fierbinte cu ajutorul unui feliuitor comercial. Preparatorul de alimente a declarat că nu are
nici o tăietură, răni sau răni infectate pe mâini. Ea a raportat că a curățat în mod obișnuit mașina de tăiat în loc să o
demonteze și să o curățească conform procedurilor recomandate și că nu a folosit un dezinfectant aprobat. Toate cele
16 kilograme de ciocolată feliată au fost plasate într-un container de 14 inch cu o înălțime de 12 inch cu un recipient de
plastic de 3 inch care a fost acoperit cu folie și depozitat într-un răcitor de mers pe jos timp de 6 ore și apoi transportat
înapoi la casa preparatorului și refrigerat peste noapte . Șunca a fost servită rece la petrecere a doua zi. Alimentele
rămase au fost colectate și trimise pentru analize de laborator. Din cei aproximativ 125 de persoane care au participat la
petrecere, 98 au completat și au returnat chestionarele. Dintre acestea, 31 de persoane au participat la eveniment, dar
nu au mâncat nimic și niciunul nu sa îmbolnăvit; acestea au fost excluse din analiza ulterioară. Un total de 18 (19%)
persoane au avut boli care au întrunit definiția cazului, inclusiv 17 participanți la petrecere și o persoană care a mâncat
alimentele aduse acasă de la petrecere. Optzeci de persoane au raportat grețuri (94%), vărsături (89%), diaree (72%),
slăbiciune (67%), transpirație (61%), frisoane (44%), oboseală (39%), mialgii (28%). , cefalee (11%) și febră (11%). Debutul
bolii a avut loc la o medie de 3,4 ore după masă (interval: 1-7 ore); simptomele au durat o mediană de 24 de ore
(interval: 2-72 ore). Șapte persoane au căutat tratament medical, iar două dintre aceștia au fost spitalizați peste noapte.
Boala a fost puternic asociată cu șunca consumată (raportul risc = 26,8). Din cele 18 persoane bolnave, 17 (94%) au
mâncat șuncă. Persoana bolnavă care nu a participat la petrecere a mâncat numai șuncă rămasă. Niciuna dintre celelalte
alimente care au servit la petrecere nu au fost asociate semnificativ cu boala. O probă de șuncă gătită rămasă și o probă
de pilaf de orez rămas au fost analizate prin aglutinare latex pasivă inversă (RPLA) pentru a identifica SE și au fost
pozitive pentru SEA.

Posibilitatea contaminării și transmisiei cu Staphylococcus aureus (MRSA) cu rezistență la meticilină

Alimentele sunt, de asemenea, un factor important pentru transferul de rezistență antimicrobiană. Un astfel de transfer
se poate realiza prin intermediul reziduurilor de antibiotice din alimente, prin transferul de agenți patogeni rezistenți la
alimente sau prin ingerarea tulpinilor rezistente ale microflorei alimentare originale și transferul de rezistență la
microorganismele patogene (Khan et al., 2000, Pesavento et al., 2007). Cele mai multe animale pot fi colonizate cu S.
aureus, dar numai tulpini de MRSA au fost izolate recent de la mai multe animale de producție alimentară, inclusiv porci,
bovine, pui și alte animale (Huijsdens et al., 2006; În special, porcii, precum și fermierii de porci și familiile lor, au fost
colonizați cu SAMR, iar în Olanda, contactul cu porcii este acum recunoscut ca un factor de risc pentru transportul MRSA
(Van Duijkeren et al., 2007). Sa sugerat o asociere între apariția tulpinilor de MRSA la porci și utilizarea antibioticelor în
fermele de porci (de Neeling et al., 2007, Wulf & Voss, 2008). În timpul sacrificării animalelor cu SAMR pozitiv, poate
apărea contaminarea carcaselor și a mediului cu SAMR și, prin urmare, carnea din aceste animale poate deveni
contaminată. Tulpinile de MRSA au fost detectate în diferite alimente, inclusiv lapte și brânză bovină (Normanno et al.,
2007), produse din carne (Van Loo et al., 2007; de Boer et al., 2008) și carne de pui brut (Kitai et al ., 2005, Kwon și
colab., 2006). Aceste studii au evidențiat frecvențele scăzute de izolare pentru SAMR în alimente. Kitai și colab. (2005) au
izolat două tulpini de MRSA (0,5%) de la 444 de produse din carne de pui brut prelevate în supermarketuri din Japonia.
Un studiu efectuat în Coreea, incluzând 930 de probe de carne de abator și de vânzare cu amănuntul, a arătat prezența
MRSA în două probe de carne de pui (0,2%), dar nu și în probe de carne de porc sau carne de vită (Kwon et al., 2006).
Într-un sondaj italian de 1634 probe de produse alimentare, șase (0,4%) tulpini MRSA au fost izolate din lapte și brânză
bovină (Normanno et al., 2007), în timp ce Van Loo et al. (2007) a găsit două (2,5%) tulpini de MRSA în 79 de probe de
carne de porc și carne de vită.

În ceea ce privește implicarea MRSA în SFP, Jones și colab. (2002) a raportat pentru prima dată un focar de boală gastro-
intestinală cauzată de SAMR dobândită în comunitate. În acest focar, diferite tulpini de S. aureus au fost izolate de
resturile alimentare, de persoanele afectate și de persoanele care manipulează alimente. Dintre aceste tulpini, s-a
produs enterotoxina C stafilococică și s-a identificat ca fiind SAMR. Acest izolat a fost rezistent la penicilină și oxacilină,
dar sensibil la toate celelalte antibiotice testate. Din informațiile noastre, puține date sunt disponibile cu privire la
apariția SAMR în SFP. Într-un studiu efectuat în Franța cu privire la alimentele incriminate în SFPO, Kerouanton et al.
(2007) a evidențiat două tulpini MRSA din cele 33 testate. Ei au concluzionat că, în ceea ce privește izolatele clinice
umane, tulpinile SFPO au fost mai susceptibile la antibiotice (cu excepția a două care au fost rezistente la meticilină).

Factorii care influențează creșterea CPS

Microorganismele din alimente sunt afectate de o multitudine de parametri descriși ca factori intrinseci și extrinseci și
efecte de procesare. Unii dintre acești parametri vor fi discutate mai târziu. Cu toate acestea, trebuie subliniat faptul că,
în medii complexe, cum ar fi produsele alimentare, acești factori interacționează într-o mare măsură. Multe dintre
datele prezentate aici au fost derivate din experimentele de laborator în care toate celelalte condiții alături de factorul
de testat au fost ideale. Tabelul 3 rezumă câțiva dintre factorii care afectează creșterea și producția SE de S. Aureus.

TABEL

Activitatea apei (aw)

În ceea ce privește stafilococii, activitatea apei (aw) are o importanță deosebită, deoarece aceste bacterii pot să crească
într-o gamă mult mai largă decât alte agenți patogeni asociate cu alimentele. După cum se poate observa din tabelul 3,
bacteriile pot crește la minimum aw de 0,83-0,86 (echivalent cu aproximativ 20% NaCl, Troller & Stinson, 1975) cu
condiția ca toate celelalte condiții să fie optimale. Valoarea optimă aw este> 0,99 (Smith și colab., 1983). Condițiile
pentru producția SE sunt oarecum diferite de cele pentru creștere, în funcție de tipul de toxină. Producția SEA și SED are
loc în aproape toate condițiile aw care permite creșterea S. aureus atâta timp cât toate celelalte condiții sunt optime.
Producția de SEB este foarte sensibilă la reducerea valorii apei și aproape că nu este produsă la 0,93 în ciuda creșterii
extinse. Efectul lui aw asupra producției SEC urmează același model ca și producția SEB (Ewald & Notermans, 1988; Qi &
Miller, 2000). Thota și colab. (1973) a constatat producția SEE în mediu conținând 10% NaCI (în conformitate cu Troller,
1971, această concentrație corespunzând aw 0,92). Factorii importanți care afectează creșterea și producția SE sunt, de
asemenea, umectanții utilizați pentru a reduce valoarea aw, pH-ul, compoziția atmosferică și, de asemenea,
temperatura de incubare (Tabelul 3). Astfel, condițiile de creștere și de producție a SE în mediile de laborator și,
respectiv, în alimente pot diferi într-o anumită măsură. Studiile asupra strategiilor osmoadaptive ale S. aureus au arătat
că, atunci când celulele sunt cultivate într-un mediu scăzut, ei răspund prin acumularea anumitor compuși cu greutate
moleculară mică, numiți soluții compatibile. Glucina betaină, carnitină și prolină s-au dovedit a fi solute principale
compatibile acumulate în celulele S. aureus cu stres osmotic, iar acumularea lor rezultă din sistemele de transport
dependente de sodiu (Gutierrez și colab., 1995; Qi & Miller, 2000). Există dovezi puternice că substanțele solubile
compatibile stimulează nu numai creșterea, dar și sinteza toxinelor. De exemplu, producția SEB a fost semnificativ
stimulată la valori scăzute atunci când prolină a fost disponibilă în bulion (Qi & Miller, 2000).
pH

Cele mai multe tulpini de stafilococi cresc la valori ale pH-ului între 4 și 10, cu o valoare optimă de 6-7 (tabelul 3). Când
ceilalți parametri culturali au devenit neoptimali, intervalul de toleranță la pH este redus. De exemplu, cel mai scăzut pH
care a permis creșterea și producția SE prin tulpini S. aureus cultivate în aerobi a fost de 4,0, în timp ce cele mai scăzute
valori ale pH-ului care au susținut creșterea și producția SE în culturi anaerobe au fost 4,6 și 5,3 (Smith și colab., 1983).
Alți parametri importanți care influențează răspunsul lui S. aureus la pH sunt dimensiunea inoculului, tipul de mediu de
creștere, concentrația NaCl (aw), temperatura și atmosfera (Genigeorgis, 1989). Majoritatea tulpinilor de S. aureus
testate au produs cantități detectabile de SE aerobic la un pH de 5,1. Totuși, în condiții anaerobe, cele mai multe tulpini
nu au reușit să producă SE detectabil sub pH 5.7 (Tatini, 1973; Bergdoll, 1989; Smith și colab., 1983).

Potențialul redox

Potențialul redox optim și intervalele pentru creștere și formarea SE sunt prezentate în Tabelul 3. Stafilococul aureus
este o bacterie facultativă anaerobă care crește cel mai bine în prezența oxigenului. Cu toate acestea, în condiții
anaerobe, creșterea este mult mai lentă și, chiar și după câteva zile, numărul de celule nu ajunge la cele obținute în
condiții aerobe. Astfel, culturile aerate au produs aproximativ 10 ori mai mult SEB decât culturile incubate într-o
atmosferă de 95% N2 + 5% CO2. În mod similar, producția SEA, SEB și SEC a crescut semnificativ, în comparație cu
culturile statice. Nivelul oxigenului dizolvat joacă un rol foarte important (Bergdoll, 1989; Genigeorgis, 1989). În condiții
stricte anaerobe, creșterea S. aureus a fost mai lentă decât atunci când a fost cultivată în aerobi. În bulion incubat la 37 °
C, timpul de generare anaerobă a fost de 80 min, comparativ cu 35 min pentru cultura aerobă. Cu o creștere anaerobă
mai lentă, sa produs mai puțin SEA decât în condiții aerobe, dar în ambele cazuri, toxina a fost detectată după 120 de
minute de incubare (Belay & Rasooly, 2002). S-a menționat deja că minimul aw și pH-ul minim pentru creștere, precum
și pentru formarea SE sunt influențate de atmosferă.

Temperatura

Staphylococcus aureus crește între 7 și 48 ° C, temperatura fiind optimă la aproximativ 37 ° C (Tabelul 3). Efectul
temperaturii depinde de tulpina testată și de tipul mediului de creștere. Într-un studiu extins (Schmitt et al., 1990),
folosind 77 de tulpini izolate din diferite alimente, temperatura de creștere optimă nu variază în general în intervalul 35-
40 ° C. Temperaturile minime de creștere au fost distribuite neregulat între 7 și 13 ° C și maxim între 40 și 48 ° C.
Temperaturile minime pentru producția de SE au variat destul de neregulat într-o gamă largă de temperaturi cuprinse
între 15 și 38 ° C, iar temperaturile maxime de la 35 la 45 ° C. Pentru limita inferioară de temperatură pentru producția
SE, a fost observată producția de cantități mici de toxină după 3-4 zile. Mai mult, formarea SE la 10 ° C a fost raportată
de Tatini (1973) (Tabelul 3) fără a indica condițiile experimentale detaliate.

Una dintre cele mai eficiente măsuri pentru inactivarea S. aureus în produsele alimentare este încălzirea. Bacteria este
ucisă în lapte dacă se aplică un tratament termic adecvat. Staphylococcus aureus a fost complet inactivat în lapte după
aplicarea următoarelor condiții de temperatură / timp: 57,2 ° C / 80 min, 60,0 ° C / 24 min, 62,8 ° C / 6,8 min, 65,6 ° C /
1,9 min și 71,7 ° C / 0,14 min (Bergdoll, 1989). În cazul inactivării termice în alte produse lactate, totuși, trebuie reținut
faptul că stafilococii devin probabil mai rezistenți la căldură, în timp ce aw este redus până la un aw între 0,70 și 0,80 și
rezistența începe să scadă (Troller, 1986) .
Factorii nutriționali și antagonismul bacterian

Creșterea producției de S. aureus și SE este, de asemenea, influențată de factorii nutriționali. Unele date sunt prezentate
în Tabelul 4.

TABEL

Staphylococcus aureus nu crește bine în prezența unei flore competitive. Inhibarea sa se datorează în principal
produselor acide, scăderii pH-ului, producerii de H2O2 sau a altor substanțe inhibitoare cum ar fi antibioticele, compușii
volatili sau competiția nutrițională (Haines & Harmon, 1973; Genigeorgis, 1989). Factorii importanți care afectează
gradul de inhibare sunt raportul numărului de concurenți la numărul de S. aureus, precum și temperatura (Smith et al.,
1983, Genigeorgis, 1989).

Culturile inițiale utilizate în producția de produse lactate fermentate, cum ar fi brânza, iaurtul, zară și altele, pot preveni
în mod eficient creșterea formării S. aureus și SE. În cazul unei eșecuri a acestor culturi, totuși, agentul patogen nu va fi
inhibat și produsul poate fi periculos.

Proprietăți

Enterotoxinele stafilococice sunt rezistente la condițiile de mediu (înghețare, uscare, tratament termic și pH scăzut) care
distrug ușor tulpina producătoare de enterotoxină. Ele sunt, de asemenea, rezistente la enzimele proteolitice care își
păstrează activitatea în tractul digestiv după ingerare (Bergdoll, 1989). Rezistența termică depinde de puritatea relativă a
preparatului SE. SEA brut în tampon a fost redusă de la 21 pg ml-1 până la <1 pg mL-1 după încălzirea la 100 ° C timp de
130 min. Totuși, SEA purificată (0,2 mg ml-1) a fost complet inactivată în tampon după încălzirea la 80 ° C timp de 3
minute sau 100 ° C timp de 1 min. În general, SEB brut pare a fi considerabil mai rezistent la căldură decât SEA purificată
(Minor & Marth, 1972). Rezultatele inactivării termice a SEA și SED în lapte și produse lactate sunt prezentate în Tabelul
6 (Tatini, 1976). În general, tratamentele termice utilizate în mod obișnuit în procesarea alimentelor nu sunt eficiente
pentru distrugerea completă a SE atunci când este prezentă inițial la niveluri așteptate să se găsească în alimentele
implicate în focarele de intoxicații alimentare (0,5-10 μg pe 100 ml sau 100 g) (Bergdoll, 1989) . Cu toate acestea, trebuie
avut în vedere că inactivarea termică este deseori determinată de pierderea reactivității serologice a SE. Activitatea
biologică poate fi pierdută înainte de activitatea serologică. Pe de altă parte, unele focare rezultă din consumul de
alimente care au fost încălzite după ce a fost produs SE (Bergdoll, 1989). Stabilitatea termică a SE este influențată de
natura alimentului, pH-ul, prezența NaCl etc., precum și de tipul de toxină. SEA, de exemplu, este relativ mai stabilă la
încălzire la pH 6,0 sau mai mare decât la pH 4,5-5,5. SED este relativ mai stabil la pH 4,5-5,5 decât la pH 6,0 sau mai mare
(Tatini, 1976). Dacă SE nu este complet inactivată prin căldură, reactivarea poate să apară în anumite circumstanțe cum
ar fi gătitul, depozitarea sau incubarea (Tatini, 1976).

TABEL6
Aceste proteine au fost denumite în funcție de activitatea lor emetică (Lina et al., 2004) după administrarea orală într-un
model primat. Unele au fost redenumite toxine asemănătoare SE (SEl), deoarece fie nu au fost detectate proprietăți
emetice, fie nu au fost testate în modelele de primate (Lina et al., 2004, Thomas et al., 2007). SE aparțin familiei largi de
superantigeni de toxină pirogenică (Van den Bussche et al., 1993). Superantigeni (SAgs), spre deosebire de antigeni
convenționali, nu trebuie să fie procesați de celule care prezintă antigen (APC) înainte de a fi prezentate celulelor T. Ei
pot stimula direct celulele T prin reticularea moleculelor complexe de histocompatibilitate complexă (MHC) clasa II pe
APC cu porțiunea variabilă a lanțului β al receptorului antigenului T (TCR Vβ) sau a lanțului α al receptorului antigenului T
pentru SE ( TCR Vα), prin inducerea proliferării celulare policlonale (Li și colab., 1999; Pumphrey și colab., 2007, Thomas
și colab., 2009). Locurile de legare la SAg se află în afara canelurii de legare a peptidei și, prin urmare, nu depind de
specificitatea antigenică a celulelor T, ci mai degrabă de regiunea Vβ și / sau Vα a TCR (Dellabona și colab., 1990, Li și
colab., 1999; Pumphrey și colab., 2007). Aceasta conduce la activarea unui număr mare de celule T, urmată de
proliferarea și eliberarea masivă a chemokinelor și a citokinelor proinflamatorii care pot conduce la un sindrom de șoc
toxic potențial letal (Balaban & Rasooly, 2000).

SAG-urile pot interacționa cu celulele epiteliale care conduc la transportul transepitalic, activarea celulelor și inducerea
stării inflamatorii. În primul rând, cele mai multe SAG au capacitatea dependentă de doză de a traversa peretele
intestinal și de a produce o acțiune locală și sistemică asupra sistemului imunitar. Acest transport este favorizat prin
producerea unor elemente asemănătoare citokinelor proinflamatorii (McKay & Singh, 1997). Un motiv de proteine
(adică KKKVTAQELD) puternic conservat printre SE și localizat în aminoacizii 120-130 și 144-161 pentru TSST1 și respectiv
SE a fost identificat și este implicat în această transcytoză (Shupp et al., 2002). Stimularea celulelor epiteliale intestinale
de către SEA induce, de asemenea, o creștere a concentrației calciului intracelular prin eliberarea de rezerve de calciu
celulare care conduc la activarea lor. Acest mecanism implică o sintază de oxid nitric inductibilă de TNF-a (Hu et al.,
2005). În cele din urmă, stimularea superantigenică a celulelor epiteliale intestinale induce un răspuns inflamator.
Activarea celulelor T84 (o linie celulară epitelială umană) de către SAgs induce producerea (1) proteinei 1
chemoattractante monocitare (MCP-1) și (2) reglată pe proteina exprimată și secretizată (RANTES) normală activată de
celule T. Aceste chemokine promovează recrutarea celulelor mononucleare imune, care pot explica rolul SAG în
patogeneza bolilor inflamatorii gastro-intestinale (Jedrzkiewicz et al., 1999). În plus, SEA și SEB se leagă de
miofibroblastele intestinale cu molecule MHC clasa II (Pinchuk et al., 2007). Cu toate acestea, numai SEA induce un
răspuns imun cu eliberarea MCP-1, interleukinele 8 și 6 (IL-8 și IL-6), factorul de stimulare a coloniilor de macrofage
granulocitare (GM-CSF) și factorul de stimulare a coloniilor de granulocite -CSF).

Deși activitatea superantigenică a SE a fost bine caracterizată, așa cum sa prezentat anterior, mecanismele care conduc
la activitatea emetică sunt mai puțin documentate. În ciuda eforturilor considerabile de a identifica aminoacizii și
domeniile specifice în SE, care ar putea fi importante pentru emesis, rezultatele sunt încă limitate și controversate. De
exemplu, SElL și SElQ sunt nonemetice, în timp ce SEI prezintă o activitate emetică slabă (Ono et al., 2008). Aceste toxine
nu conțin bucla disulfidică găsită în mod caracteristic la vârful domeniului N-terminal al altor SE. Cu toate acestea, bucla
însăși nu pare a fi o cerință absolută pentru emesis, deși poate stabiliza o conformație crucială importantă pentru
această activitate (Hovde et al., 1994). Harris și colab. (1993) a examinat corelația dintre activitățile emetice și cele de
stimulare a celulelor T ale SEA și SEB unde aminoacizii au fost înlocuiți. În majoritatea cazurilor, mutațiile genetice care
au dus la pierderea activității superantigenului au determinat, de asemenea, pierderea activității emetice. Cu toate
acestea, deoarece nu exista o corelație perfectă între activitățile imunologice și cele emetice în toate mutantele, acest
studiu a sugerat că aceste două activități ar putea fi disociate.

Spre deosebire de alte enterotoxine bacteriene, celulele și receptorii specifici din sistemul digestiv nu au fost în mod clar
legați de intoxicația orală de către un SE. Sugiyama & Hayama (1965) a sugerat că SE stimulează nervul vag în viscera
abdominală, care transmite semnalul către centrul emetic. Susținând această idee, receptorii pe neuronii vagali aferenți
sunt esențiali pentru emesisul declanșat de SEA (Hu et al., 2007). În plus, SE sunt capabili să penetreze căptușeala
intestinală și să activeze răspunsurile imunitare locale și sistemice (Shupp et al., 2002). Diareea uneori asociată cu
intoxicația cu SE poate fi atribuită inhibării reabsorbției de apă și electrolitică în intestinul subțire (Sullivan, 1969;
Sheehan și colab., 1970). Într-o încercare de a lega cele două activități distincte ale SE, adică superantigenicitatea și
emesisul, s-a presupus că activitatea enterotoxinului ar putea facilita transcitoza, permițând toxinei să intre în sânge și
să circule prin corp, permițând astfel interacțiunea cu APC și T celule care conduc la activitate superantigen (Hamad et
al., 1997; Balaban & Rasooly, 2000). În acest fel, circulația SE în urma ingerării SE, precum și răspândirea lor de la un situs
de infecție cu S. aureus ar putea avea efecte mai profunde asupra gazdei decât în cazul în care toxina rămâne localizată
(Larkin et al., 2009).

Determinanți genetici și reglarea expresiei

Locațiile genei enterotoxin (tabelul 5) sunt numeroase (Argudin et al., 2010). Acestea pot fi purtate de plasmidele (seb,
sed, sej, ser, ses, set) (Shalita et al., 1977, Bayles & Iandolo, 1989; Onoe et al. (2008), fag (temperat pentru mare, defect
pentru a vedea) (Betley & Mekalanos, 1985, Couch și colab., 1988; Coleman et al., 1989) sau prin insule genomice (seb,
sec, seg, seh, sei , sec, sel, sem, sen, seo, sep și seq). Codificarea genei pentru sec poate fi localizată pe o plasmidă sau pe
o insulă de patogenitate în funcție de originea izolatului (Fitzgerald et al., 2001). Jarraud și colab. (2001) a subliniat
existența unui operon, egc (grupul de gene de enterotoxină), care codifică mai multe SEs ca SEG, SEI, SEM, SEN și SEO.
Ecu conține de asemenea două pseudogene (pent1 și φent2). Acest locus joacă probabil rolul unei gene de pepinieră,
deoarece fenomenele de duplicare și recombinare dintr-o genă ancestrală comună ar putea explica noi forme de toxine.
Acest lucru a fost demonstrat prin identificarea genelor care codifică pentru seu, seu2 și sev în egc (Letertre și colab.,
2003, Thomas și colab., 2006).

Localizarea genelor se pe elementele genetice mobile poate avea ca rezultat transferul orizontal al genei între tulpinile S.
aureus. De exemplu, gena seb este localizată pe cromozom în unele izolate clinice (Shafer & Iandolo, 1978), în timp ce
are o localizare plasmidică în alte tulpini de S. aureus (Shalita et al., 1977). Un sistem principal de reglementare care
controlează expresia factorilor de virulență în S. aureus este agrSystem (regulator de gena accesoriu, Kornblum și colab.,
1990). Acest sistem funcționează în combinație cu sistemul sar (regulator accesoriu stafilococ, Cheung și colab., 1992,
Novick și colab., 2001). Majoritatea, dar nu toată, expresia SE este controlată de sistemul agr. De exemplu, expresiile
genelor seb, sec și sed sunt dependente de agr, în timp ce expresiile de mare și sej sunt independente de agr (Tremaine
și colab., 1993; Zhang și colab., 1998). Vojtov și colab. (2002) a demonstrat că SEB este un regulator global negativ al
expresiei genelor exoproteinelor care acționează prin sistemul agr. Expresia agresistei este strâns legată de senzația de
cvorum (Novick et al., 2001). Într-un studiu recent efectuat pe 28 de tulpini enterotoxigene de S. aureus izolate din
focare de otrăvire a alimentelor sau biblioteci de referință pentru a înțelege mai bine expresia genei, Derzelle și colab.
(2009) a demonstrat patru modele diferite de exprimare folosind PCR cantitativ de transcriere inversă. Primul model
pentru mare, vezi, sej, sec, sepand seq a indicat că abundența mRNA a fost independentă de fazele de creștere
bacteriană. În al doilea model, nivelele transcripției pentru seg, sei, sem, sen, seo și seu au scăzut ușor în timpul creșterii
bacteriale. Al treilea model a indicat o inducție imensă și rapidă de seb, sec și seh la sfârșitul fazei de creștere
exponențială, în timp ce ultimul a subliniat o creștere modestă postexponențială a exprimării sed, ser și sel.

Pentru a încheia această secțiune, SE cunoscute în prezent formează un grup de proteine extracelulare serologice
distincte care împărtășesc proprietăți importante, și anume, (1) capacitatea de a provoca emesis în modelul primat; (2)
superantigenicity printr-o activare nespecifica a limfocitelor T neterminată (ca fiecare se leagă la un SE subgrup de
lanțuri VB), urmată de eliberarea de citokine și șoc sistemic (Marrack & Kappler, 1990; Papageorgiou & Acharya, 2000);
3. rezistența la căldură și la digestia cu pepsină; și (4) similarități structurale (Dinges și colab., 2000).

SFPO: simptomatologie; sistem de raportare care include controlul UE; sisteme de monitorizare; apariția și metodele
analitice utilizate

Simptomatologie și doză toxică

Perioada de incubație și severitatea simptomelor observate depind de cantitatea de enterotoxine ingerate și de

susceptibilitatea fiecărei persoane. Simptomele inițiale, greața, urmată de vărsături caracteristice incoerente (în
spurturi), apar după 30 minute-8 ore (în medie, 3 ore) după ingerarea alimentelor contaminate. Alte simptome descrise
frecvent sunt: dureri abdominale, diaree, amețeli, frisoane și slăbiciune generală, uneori asociate cu febră moderată. În
cele mai severe cazuri, s-au raportat dureri de cap, prostație și tensiune arterială scăzută. În majoritatea cazurilor,
recuperarea are loc în 24-48 de ore fără tratament specific, în timp ce diareea și slăbiciunea generală pot dura 24 de ore
sau mai mult. Moartea este rară (0,02 ‰ în funcție de Mead și colab., 1999), care a apărut la persoanele cele mai
sensibile la deshidratare, cum ar fi copiii și persoanele în vârstă (Do Carmo și colab., 2004) și persoanele afectate de o
boală care stau la baza.

În ceea ce privește doza de toxină, majoritatea studiilor vizate de SEA. Notermans și colab. (1991) a demonstrat
fezabilitatea unui material de referință care conține aproximativ 0,5 μg de enterotoxină A stafilococică (SEA), deoarece
sa sugerat că această doză poate provoca simptome cum ar fi vărsături (Bergdoll, 1989). Mossel și colab. (1995) a indicat
o valoare emetică a dozei 50 de aproximativ 0,2 μg SE per kg de greutate corporală umană. Ei au concluzionat că un
adult ar trebui să ingereze aproximativ 10-20 μg de SE pentru a suferi simptome. Alți autori (Martin et al., 2001) au
considerat că <1 μg SE pot provoca simptome de otrăvire a alimentelor la persoanele sensibile. Evenson și colab. (1988)
a estimat că cantitatea de SEA necesară pentru a provoca vărsături și diaree a fost de 0,144 μg, cantitatea recuperată
dintr-o cutie de jumătate de pint (aproximativ 0,28 L) dintr-un lapte de ciocolată 2%. În SFP în Japonia, aportul total de
SEA în laptele cu conținut scăzut de grăsimi pe cap de locuitor a fost estimat în principal la aproximativ 20-100 ng (Asao
și colab., 2003; Ikeda și colab., 2005). Într-un SFPO care implică "perle de nucă de cocos" (un desert chinezesc bazat pe
tapioca), Hennekinne et al. (2009) a estimat aportul total de SEA per organism la aproximativ 100 ng. În cele din urmă,
Ostyn și colab. (2010) a investigat SFPO din cauza SEE și a estimat că aportul total de ESE per organism a fost de 90 ng, o
doză în conformitate cu cele menționate anterior.

Sistemul de raportare, care apare la nivelul Uniunii Europene

Raportarea focarelor de origine alimentară a fost obligatorie pentru statele membre ale Uniunii Europene (UE) începând
cu 2005. În plus, începând cu anul 2007, au intrat în vigoare noi specificații armonizate privind raportarea acestor focare
la nivel comunitar (Anonymous, 2007a). Cu toate acestea, sistemele de investigație și raportare a focarelor de produse
alimentare la nivel național nu sunt armonizate în cadrul UE. Prin urmare, diferențele în ceea ce privește numărul
focarelor raportate, tipurile de focare și agenții cauzali nu reflectă neapărat niveluri diferite de siguranță alimentară între
statele membre ale UE. Numărul mare de focare raportate poate reflecta eficiența crescândă a sistemelor UE-SM în
investigarea și identificarea focarelor.

Autoritatea Europeană pentru Siguranța Alimentară (EFSA) este responsabilă cu examinarea datelor privind zoonozelor,
rezistenței antimicrobiene și a focarelor de origine alimentară prezentate de statele membre în conformitate cu
Directiva 2003/99 / CE (Anonymous, 2003) și pentru pregătirea Raportului rezultatele. Datele au fost produse în
colaborare cu Centrul European de Control al Bolilor (ECDC), care oferă informații despre cazurile de zoonoză la om.
Centrul de colaborare pentru zoonoze (ZCC - contractat de EFSA) la Institutul Național pentru Alimentație al Universității
Tehnice din Danemarca a asistat EFSA și ECDC în această sarcină (figura 1).
Metode analitice pentru detectarea SE (Fig.3)

Diagnosticul SFP este în general confirmat fie prin recuperarea a cel puțin 105S. aureus g-1 din resturile alimentare sau
prin detectarea SE în resturile alimentare. În unele cazuri, confirmarea SFP este dificilă deoarece S. aureus este sensibil la
căldură, în timp ce SE nu este. Astfel, în matricele de alimente tratate termic, S. aureus poate fi eliminat fără a inactiva
SEs. În astfel de cazuri, nu este posibil să se caracterizeze un focar de otrăvire a alimentelor prin enumerarea CPS în
resturile alimentare sau prin detectarea unor gene în tulpini izolate.

În timp ce S. aureus este de obicei enumerat utilizând tehnici microbiologice cu medii dedicate, cum ar fi Baird Parker
sau agar de fibrinogen plasmatic de iepure, trei tipuri de metode sunt utilizate pentru a detecta toxinele bacteriene din
alimente: bioteste, biologie moleculară și / sau tehnici imunologice.

Bioîncercările

Biotestele se bazează pe capacitatea unui extract de alimente suspectate de a induce simptome cum ar fi vărsături,
simptome gastro-intestinale la animale și / sau acțiune superantigenică în culturi celulare. Din punct de vedere istoric, SE
s-au depistat pe baza activității lor emetice în testele de hrănire cu maimuțe și pisoi-intraperitoneale (Surgalla et al.,
1953; Bergdoll, 1989) și, mai recent, folosind modele animale cum ar fi scorțișoara de mosc Suncus murinus al., 2003;
Ono și colab., 2008). Simptomele SFP apar dacă doza de SEA ingerată de animale este mai mare de 2,3 μg, o cantitate
considerabil mai mare decât cea implicată în intoxicația cu alimente umane (Asao et al., 2003; Ostyn et al., 2010). Astfel,
această tehnică nu este adecvată pentru caracterizarea SFPO.

Metode moleculare

Metodele de biologie moleculară implică adesea reacția în lanț a polimerazei (PCR). Aceste metode identifică de obicei
gene care codifică enterotoxine în tulpini de S. aureus izolate din alimente contaminate. Cu toate acestea, aceste
metode au două limitări majore: în primul rând, tulpinile stafilococice trebuie izolate de alimente și, în al doilea rând,
rezultatele informează cu privire la prezența sau absența genelor care codifică SE, dar nu oferă nicio informație cu privire
la exprimarea acestor gene în produsele alimentare . Prin urmare, această metodă nu poate fi singura metodă de a
confirma S. aureus ca agent cauzator în focar. Cu toate acestea, abordarea PCR este o metodă specifică, extrem de
sensibilă și rapidă care poate caracteriza S. aureusstrains implicate în SFPO, oferind astfel informații foarte valoroase. În
focare descrise de Ostyn și colab. (2010), SEE a fost găsită în vehiculul sursă comună și gena vezi a fost prezentă în S.
aureus izolate testate. Într-un astfel de caz, determinarea genei se confirmă rolul unui SE rar întâlnit. Eforturi foarte
recente au fost îndreptate spre determinarea directă a genelor care se găsesc în alimente suspectate. În urma
evenimentului imens de SFP care a avut loc în Japonia în iulie 2000 (peste 13 000 de persoane au fost intoxicate cu lapte
praf sau lichid), Ikeda et al. (2005) a elaborat o metodologie bazată pe PCR prin care gene de mare, seg, seh și sei pot fi
detectate în laptele praf degresat inactiv, deși S. aureus cultivat nu a fost recuperat din eșantion.

În plus, pentru a evalua potențialul toxic al tulpinilor izolate din SFPO, diferiți autori (Lee et al., 2007; Akineden et al.,
2008; Derzelle și colab., 2009) au conceput recent primeri pentru a efectua PCR și transcripția inversă PCR -PCR) pentru
gene se.

În cele din urmă, Duquenne și colab. (2010) a elaborat o metodă eficientă de extragere a ARN-ului bacterian accesibil
pentru PCR RT-cantitativ (RT-qPCR) din brânză și a adaptat o metodă simplă, sensibilă și reproductibilă pentru
cuantificarea nivelelor relative de transcripție pentru a evalua expresia genei enterotoxin de S. aureus în timpul fabricării
brânzei . Aceste abordări demonstrează posibila transcriere a ARNm din acele gene, dar nu indică dacă aceste tulpini au
fost capabile să producă nivele detectabile sau otrăvitoare de toxine în alimente.

Metode imunologice

Metoda a treia și cea mai frecvent utilizată pentru detectarea SE în alimente se bazează pe utilizarea anticorpilor
policlonali sau monoclonali anti-enterotoxină. Kiturile disponibile comercial au fost dezvoltate în conformitate cu două
principii diferite: (1) imunoteste enzimatică (EIA) cuprinzând ELISA și testul fluorescent enzima-legat (ELFA); și (2) RPLA.
Este larg recunoscut faptul că utilizarea metodelor imunologice pentru detectarea contaminanților în matricele
alimentare este o sarcină dificilă, în principal din cauza lipsei de specificitate și sensibilitate a testului. Multe dezavantaje
împiedică dezvoltarea și utilizarea acestor tehnici pentru detectarea SE. În primul rând, toxinele foarte purificate sunt
necesare pentru a ridica anticorpi specifici pentru a elabora o EIA; toxinele purificate sunt dificile și costisitoare de
obținut. Mai mult decât atât, până în prezent, au fost disponibile doar anticorpi împotriva SEA către SEE, SEG, SEH și
SElQ (Schlievert & Case, 2007). Testul ELISA nu va detecta celelalte SE, ceea ce ar putea explica parțial motivul pentru
care unele focare au rămas necharacterizate fără un agent etiologic cunoscut. Un alt dezavantaj este specificitatea
scăzută a unor truse comerciale, în care pot să apară fals pozitive în funcție de componentele alimentare (Wieneke,
1991), deoarece este bine cunoscut faptul că unele proteine, cum ar fi proteina A, pot interfera cu legarea la fragmentul
Fc într-o măsură mai mică, fragmente Fab) în imunoglobulină G de la mai multe specii de animale, cum ar fi șoarece sau
iepure, dar nu șobolan sau capră. Alte interferențe sunt asociate cu enzime endogene, cum ar fi fosfatază alcalină sau
lactoperoxidază.

Oricare ar fi metoda de detectare utilizată și datorită cantității reduse de SE prezente în alimente, este esențial să se
concentreze extractul înainte de efectuarea testelor de detectare. În acest scop au fost testate diverse metodologii
(Macaluso et al., 1998; Meyrand și colab., 1999; Lapeyre și colab., 2001). Dintre acestea, numai extracția, urmată de
concentrarea în dializă, a fost aprobată de către Uniunea Europeană pentru extracția SE de la alimente (Anonymous,
2007b).

Cu toate acestea, până în prezent, după ce au fost enumerate tulpinile CPS, diagnosticul concludent al SFP sa bazat, în
principal, pe demonstrarea prezenței ES în alimente utilizând kituri EIA comerciale proiectate pentru a detecta SEA în
SEE (Bennett, 2005) sau folosind o confirmare ELISA internă (Lapeyre et al., 1988) pentru diferențierea și cuantificarea
acestor tipuri de SE.

Metode bazate pe spectrometrie de masă

Datorită dezavantajelor cu metodele de detectare disponibile în prezent și a lipsei de anticorpi disponibili împotriva SE
descrise recent, alte strategii bazate pe tehnici fizico-chimice au fost dezvoltate foarte recent. Dintre acestea,
spectrometria de masă (MS) a apărut recent ca o tehnică foarte promițătoare și adecvată pentru analiza amestecurilor
de proteine și peptide (Mamone et al., 2009). Este una dintre cele mai sensibile tehnici disponibile în prezent, deoarece
oferă o cuantificare analitică specifică, rapidă și fiabilă a cantității de enterotoxine (Brun et al., 2007). Dezvoltarea a două
metode de ionizare moale, cum ar fi ionizarea prin electrospray (ESI) și desorbția / ionizarea laserului asistată de matrice
(MALDI), și utilizarea analizorilor de masă adecvați, cum ar fi timpul de zbor (TOF), au revoluționat analiza
biomoleculelor. Având în vedere gama largă de metodologii disponibile, o singură tehnică MS nu poate fi utilizată pentru
toate proteinele. Metoda MS necesită astfel dezvoltarea unei serii de tehnici, adaptate individual pentru fiecare caz
particular.

În cazul analizei produselor alimentare, situația este complexă deoarece matricea poate conține multe proteine, lipide și
multe alte specii moleculare care interferează cu detectarea toxinei vizate și pot distorsiona cuantificarea. Pregătirea
probelor rămâne etapa critică a analizei. Mai mulți autori au încercat să îmbunătățească această etapă, de exemplu prin
optimizarea parametrilor de digestie (Norrgran et al., 2009) sau prin adăugarea unei etape de purificare (Oeljeklaus et
al., 2009). A fost de asemenea dezvoltată strategia de încorporare a unui etalon intern marcat izotopic în eșantioane. În
cazul detecției SE, unii autori au dezvoltat instrumente MS pentru a detecta aceste toxine în supernatantele de cultură și
în eșantioane spicate, cum ar fi apa sau sucul de mere. De exemplu, Bernardo și colab. (2002) a elaborat o metodă
MALDI-TOF pentru detectarea factorilor de virulență S. aureus, cum ar fi enterotoxinele, și a demonstrat că această
tehnică a fost adecvată pentru detectarea altor SE decât SEA în SEE în supernatantele de cultură. Callahan și colab.
(2006) a detectat și a cuantificat SEB utilizând cromatografia lichidă cuplată cu detecția ESI / MS în sucul de mere folosit
ca model de matrice alimentară. În acest studiu, tipurile de enterotoxine SEA și SEB au fost detectate în brânză spiked.
Mai recent, Brun și colab. (2007) a dezvoltat o abordare bazată pe SM capabilă să realizeze cuantificarea absolută a SEA
și TSST1 în probe de apă sau urină. Pentru a îmbunătăți caracterizarea și cuantificarea SE, ultima metodologie a fost
utilizată cu succes pentru a realiza cuantificarea absolută a SEA într-o probă de brânză contaminată natural (Dupuis et
al., 2008) și a fost aplicată într-un caz recent de focar de otrăvire alimentară (Hennekinne et al. , 2009). În acest focar,
instrumentele MS în combinație cu instrumentele prezentate mai devreme au fost utilizate de laboratorul de referință al
Uniunii Europene pentru CPS. Această metodă bazată pe MS a depășit limitele tehnice specifice ale ELISA existente
pentru caracterizarea SE, însă performanța sa și costul pe analiză au fost comparate nefavorabil cu ELISA (650 EUR față
de 280 EUR). Această ultimă metodă a fost, fără îndoială, standardul de aur al tehnicilor cu costuri reduse și de înaltă
performanță pentru detectarea și cuantificarea compușilor proteici până la concentrații subnanomolar în cohortele mari
de eșantioane. Cu toate acestea, intervalul de timp pentru dezvoltarea testului ELISA a fost de ordinul 1 an, iar costurile
de dezvoltare ridicate au împiedicat optimizarea sistematică ELISA. Acest cost a făcut, de asemenea, ELISA mai puțin
potrivit pentru caracterizarea panourilor mici, cum ar fi elucidarea SFP. În acest sens, versatilitatea și costul redus al
dezvoltării metodologiei de cuantificare absolută au plasat-o drept o alternativă bună la ELISA pentru aceste aplicații
specifice, ținând cont de faptul că și standardele SEs purificate au fost necesare pentru a stabili acuratețea și
specificitatea metodelor bazate pe SM.

Astfel, combinarea microbiologiei clasice pentru enumerarea tulpinilor CPS cu tehnici imunologice, biologie moleculară
și metode bazate pe spectrometrie de masă, diagnosticul a fost întărit și aceste focare ar putea fi atribuite prezenței SE.

Concluzii finale

Starea de otrăvire a alimentelor stafilococice este una dintre cele mai frecvente boli provocate de alimente, care rezultă
din ingestia de SE produse în alimente de tulpini enterotoxigene de stafilococi, în principal CPS și numai ocazional SNC.
Din 2006 până în 2008, Autoritatea Europeană pentru Siguranța Alimentară a raportat că SE au fost implicate în 5% din
focarele de intoxicații alimentare, dar acest procentaj este cu siguranță subestimat din cauza performanțelor analitic
slabe în detectarea și identificarea SE în resturile alimentare.

Prevenirea intoxicației cu stafilococ alimentar se bazează pe măsuri de igienă pentru evitarea sau reducerea
contaminării alimentelor de către S. aureus. Aceste proceduri trebuie să includă controlul materiilor prime, manipularea
corectă, curățarea și dezinfectarea echipamentului de la fermă la furculiță. Cu toate acestea, deoarece aceste cerințe nu
sunt de obicei suficiente, este necesar să se distrugă stafilococi prin tratament adecvat, termic sau altfel, pentru a
preveni creșterea acestora în condiții de refrigerare. Respectarea lanțului rece este esențială în ceea ce privește
stafilococii, în special pentru alimentele servite la întâlniri mari, cum ar fi evenimentele sociale.

Pentru a îmbunătăți caracterizarea SFPO, diferite tehnici, cum ar fi metodologiile imunologice și moleculare, au fost
integrate în strategia de diagnosticare. Abordarea PCR este cunoscută pentru a furniza informații despre prezența sau
absența genelor care codifică SE, dar nu despre expresia lor. Pentru a completa caracterizarea SFPO, instrumentele MS
au fost de asemenea utilizate în combinație cu cele prezentate mai devreme. Astfel, o abordare generală care combină
microbiologia clasică cu enumerarea tulpinilor CPS cu tehnici imunologice, biologie moleculară și metode bazate pe
spectrometrie de masă oferă o alternativă interesantă pentru atribuirea focarelor la SE (fig.3). Deși metoda cantitativă a
SM depășește limitele tehnice specifice ale metodelor ELISA existente pentru detectarea și cuantificarea SE,
performanța sa și costul pe analiză se compară nefavorabil cu ELISA. Din acest motiv, atunci când metoda bazată pe SM
devine disponibilă pentru toate SE implicate în SFPO, aceasta nu va fi utilizată pentru analiza de rutină, ci numai în cazuri
speciale pentru a confirma focarele cauzate de SE.