Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
COCI, Parvobacterii
COCI, Parvobacterii
GENUL STAPHYLOCOCCUS
CARACTERE DE PATOGENITATE
Caracterele de patogenitate ale stafilococilor sunt reprezentate de:
1. Capacitatea de aderenţă. Capacitatea de a adera la mucoase,
epitelii şi endotelii este rezultanta mai multor caracteristici structurale şi
biochimice.
- Prezenţa acidului lipoteichoic, cu rol în aderenţa la epitelii.
- Receptorul pentru fibronectină, cu structură proteică, situat la
nivelul peretelui celular.
- Clumping factorul (coagulaza legată), receptor pentru fibrinogen.
2. Activitatea antifagocitară a unor componenete celulare
(numite şi agresine): structuri capsulare, proteina A, alte proteine
hidrofobe, coagulaza legată.
3. Capacitatea hipersensibilizantă a unor componente ale
peretelui celular, cum sunt proteina A, acizii teichoici, ce pot determina
hipersensibilizarea, care explică în mare măsură caracterul frecvent
recidivant al infecţiilor stafilococice.
4. Prezenţa plasmidelor de rezistenţă la antibiotice (factori R).
- grupul heterogen de factori R responsabili de sinteza -
lactamazei
- asocierea mai multor plasmide la tulpinile stafilococice cu
polirezistenţă.
5. Enzime şi toxine, extrem de numeroase, pe care
Staphylococcus aureus le elibereazã în mediu:
a) Enzime
1). COAGULAZA LIBERĂ
- Activeazã o globulină plasmatică asemănătoare protrombinei
(coagulase reacting-factor).
- Determinã coagularea plasmei umane şi de iepure recoltată pe
anticoagulant: heparină, citrat, EDTA.
2) COAGULAZA LEGATĂ (CLUMPING FACTOR)
- Insolubilã –“legatã” de suprafaţa corpului bacterian (face parte
din structura acestuia)
- Se leagă de fibrinogen
- Favorizeazã depunerea de fibrinã pe suprafaţa bacteriei, cu rol
antifagocitar
- Coaguleazã fibrina în jurul leziunii şi în vasele limfatice, formând
un perete ce limiteazã procesul infecţios.
3). FIBRINOLIZINA (STAFILOKINAZA)
- Activator al plasminogenului
- Lizeazã cheagul de fibrinã poate juca un rol în formarea de
embolusuri septice.
4). HIALURONIDAZA hidrolizeazã acidul hialuronic, fluidificând
substanţa fundamentală a ţesutului conjunctiv, scade pH, creşte
permeabilitatea tisulară.
5) NUCLEAZA TERMOREZISTENTÃ (TERMONUCLEAZA)
distruge nucleii celulari.
6) LIPAZELE descompun lipidele din membranele celulare şi
lipidele tegumentare, scad pH, au rol în tropismul cutanat.
7) LECITINAZA A scindeazã lecitinele din membranele celulare.
8) CATALAZA inactivează peroxidul de hidrogen produs de
neutrofilul activat, cu rol bactericid (îl descompune în apă şi O2).
b) Toxine
1). HEMOLIZINE:
ALFATOXINA (- HEMOLIZINA), cea mai importantă, are un efect
citotoxic şi citolitic asupra mai multor tipuri de celule: hematii de om,
iepure, berbec, leucocite, fibroblaşti. Se inseră în membrana
citoplasmatică a celulelor ţintă şi formează pori.
Alte hemolizine stafilococice sunt:
BETATOXINA (-HEMOLIZINA)
GAMA-TOXINA(-HEMOLIZINA)
DELTA TOXINA(DELTA –HEMOLIZINA)
2) LEUCOCIDINE
Au o acţiune citoliticã selectivã asupra polimorfonuclearelor
neutrofile şi macrofagelor. Inhibă chemotactismul leucocitelor.
3) ENTEROTOXINE
Inhibă reabsorţia apei din lumenul intestinal şi stimulează
receptorii emetici de la nivelul mucoasei digestive, fiind implicate în
toxiinfecţiile alimentare.
EPIDEMIOLOGIE
PATOGENITATE
Stafilococul auriu determină infecţii superficiale şi profunde, fiind
considerate prototipul infecţiei piogene: produce un puroi gros,
cremos, gălbui.
I . Infecţii localizate
- Cutanate superficiale: pustule, foliculita, impetigo
- Cutanate profunde: furuncule, abcese, flegmoane
- Hidrosadenita (infecţia glandelor sudoripare)
-Infecţii ale unghiilor
- Infecţii de plagă
- Conjunctivite
- Sinuzite, otite, mastoidite
II. Bacteriemie sau septicemie
III. Localizări metastatice (secundare): osoase, pulmonare,
cardiace, renale
B. Boli produse de toxine:
Toxiinfecţii alimentare, după consumul de alimente
contaminate.
Epidermoliza buloasă a nou-născutului (sindrom Lyell infecţios,
sindromul de piele oparită al nou născutului).
Sindromul de şoc toxic stafilococic, descris pentru prima oară
în 1978, la femeile care utilizează tampoane intravaginale.
Stafilococii coagulază - negativi pot determina următoarele
infecţii:
- infecţii de catater
- infecţii oculare după intervenţii chirurgicale oftalmologice
- endocardite pe valve artificiale
- infecţii urinare (la femei)
- infecţii la subiecţi imunodeprimaţi.
Diagnosticul de laborator
Examenul direct.
Din produsele patologice se pot efectua frotiuri colorate Gram,
care se examineazã la microscopul optic, cu obiectivul 100 x cu imersie.
Stafilococii sunt coci Gram pozitivi, cu diametrul de 0.8-1
micrometri, izolaţi sau grupaţi tipic în grãmezi şi în ciorchine.
Caractere de culturã
Stafilococii sunt bacterii nepretenţioase, care cresc şi pe geloză
simplă, nutritivă, dar se preferă geloza sânge pentru observarea
hemolizei.
Nu este indicată la prima izolare folosirea unui mediu selectiv
(Chapmann sau Baird -Parker), care ar putea falsifica rezultatele prin
selectarea exclusivă a S.aureus, chiar în cantitate mică, neputându-se
face deosebirea dintre o colonizare şi un proces infecţios real.
Dacă produsul patologic este lichid de vărsătură, materii fecale,
sau alimente, în cazurile de toxiinfecţie alimentară, atunci este indicată
folosirea mediilor selective hiperclorurate Chapmann lichid şi solid.
După o incubaţie de 18-24h la 37oC se obţine o cultură abundentă
şi caracteristică.
Cultura pe geloză -sânge: colonii cu diametrul de 1-3 mm, de tip S
(smooth), bombate, lucioase, opace, cu consistenţa cremoasă.
Pigmentul auriu, caracteristic speciei S. aureus apare după 24 sau 48h.
S. epidermidis formează colonii albe, opace. Alte specii care pot
produce colonii pigmentate sunt: S. saprophiticus (citreus), S. hominis,
S. haemoliticus şi S. hyicus, subsp. chromogenes. Pigmenţii sunt
carotenoizi, iar culoarea variază de la galben la oranj. Există tulpini de S.
aureus nepigmentate sau care şi-au pierdut capacitatea de a produce
pigment datorită unor factori nefavorabili din mediu. De aceea testul
coagulazei este obligatoriu.
Hemoliza: pe mediul geloză - sânge, coloniile de S.aureus pot fi
înconjurate de o zonă clară de hemoliză completă.
Identificarea biochimică poate fi făcută pe galerii cu citire
automată (API, VITEK).
Teste de evidenţiere a caracterelor de patogenitate.
1. Coagulaza.
Coagulaza legatã (clumping factor) - se determinã printr-o
reacţie de aglutinare pe lamã.
Coagulaza liberã se determinã printr-o reacţie de coagulare în
tuburi.
2. Prezenţa proteinei A
Proteina A se identificã printr-o reacţie de latex-aglutinare, singurã
sau împreună cu clumping factor.
3. Determinarea DNA-azei termostabile
Metoda clasicã - printr-o reacţie de culoare - se utilizează geloza
cu adaus de ADN şi albastru de toluidinã ca indicator de pH;
STREPTOCOCCUS PYOGENES
MORFOLOGIE
CARACTERE DE CULTURĂ
INFECTII TOXIGENE
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
ANTIBIOTERAPIA
HABITAT
MORFOLOGIE
STRUCTURA
Au în perete polizaharidul C, care îl defineşte ca grup, dar îi
lipsesc proteinele M, T şi R. Sunt încapsulaţi, fapt care duce la
împărţirea speciei în tipuri antigenice.
PATOGENITATEA
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
ANTIBIOTERAPIA
ENTEROCOCCUS
PATOGENITATEA
HABITAT
DIAGNOSTICUL DE LABORATOR
STREPTOCOCII NEGRUPABILI
STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
STRUCTURA
PATOGENITATEA
N. meningitidis (meningococul)
N. meningitidis are ca habitat mucoasa căilor aeriene superioare
(aproximativ 10% din populaţie) şi se transmite mai ales aerogen. Local
determină rinofaringite, dar în condiţiile unei imunodepresii poate
produce o bacteriemie cu localizări secundare meningeale. În cursul
bacteriemiei este caracteristică apariţia rashului peteşial.
Genul Haemophilus
Genul Haemophilus este încadrat în Familia Pasteurellaceae,
având strânse înrudiri cu genurile Actinobacillus şi Pasteurella. În
prezent genul cuprinde peste 15 specii, unele dependente de factorii X
şi V, confirmate ca hemofili (H. haemoglobinophilus, H. parasuis, H.
paragallinarum), altele nu (H. somnus, H. Agni). Speciile a căror creştere
este dependentă numai de factorul V, exceptând H. segni, sunt numite
cu ajutorul sufixului para - H. parainfluenzae etc.
H.influenzae a fost descris pentru prima oară de către Pfeiffer, fiind
considerat în mod greşit agentul etiologic al pandemiei de gripă din
perioada 1890-1892, motiv pentru care se mai numeşte şi “bacilul
Pfeiffer”.
Caractere generale:
Genul Haemophilus cuprinde cocobacili, Gram negativi, cu un
polimorfism accentuat, imobili, nesporulaţi, aerobi, facultativ anaerobi,
care atacă fermentativ zaharurile, dependenţi de factorii de creştere X
(hemina şi alte porfirine) şi/sau V (NAD sau NADP) prezenţi în sânge.
Habitat:
Unele dintre speciile genului Haemophilus au habitat uman, altele
sunt găzduite de diverse animale. Hemofilii izolaţi la om sunt saprofiţi,
condiţionat patogeni ai tractului respirator, dar pot fi prezenţi şi la nivelul
intestinului, vaginului sau uretrei anterioare. H aegyptius şi H. ducreyi,
patogeni ai mucoasei conjunctivală, respectiv genito-urinară, nu au fost
izolaţi la persoane sănătoase.
Hemofilii colonizează tractul respirator din a 4-a zi până la 2 ani
după naştere, când constituie 10 % din flora orofaringiană, fiind
reprezentaţi în special de tulpinile neîncapsulate; numai în 5% din
subiecţi sunt colonizaţi cu tulpini încapsulate, în condiţii normale.
În nazofaringe găzduim frecvent H.influenzae şi mai rar H.
haemolyticus. În cavitatea bucală şi faringe sunt uzual prezenţi H.
parainfluenzae şi H. parahaemolyticus. Membri frecvenţi ai plăcii dentare
sunt: H. aphrophilus, H. paraphrophilus şi H.segni. În microflora vaginală
apare ocazional H. parainfluenzae.
Diagnostic de laborator
Produsele patologice sunt diferite în funcţie de localizarea
infecţiei: exsudat nazofaringian, secreţie conjunctivală, spută, L.C.R,
sânge, lichid sinovial, lichid pleural, secreţie otică, secreţie urogenitală.
Prelevarea probelor se face în recipiente sterile prevăzute cu
capac sau cu ajutorul unui tampon steril, iar transportul acestora se
face rapid, fie în recipientele în care au fost recoltate (spută, L.C.R, etc),
fie în mediu universal de transport Stuart sau Amies (cele recoltate pe
tampon). Până în momentul însămânţării, probele pot fi păstrate pentru
scurt timp la temperatura camerei, nu în frigider.
Caractere microscopice:
În frotiurile din produsele patologice hemofilii sunt sub forma
unor cocobacili gram-negativi, polimorfi, nesporulaţi, imobili.
Caractere de cultură:
Hemofilii sunt bacterii pretenţioase, care pot fi izolate pe medii de
cultură îmbogăţite cu sânge, geloză chocolat, geloză Levinthal, geloză
Fildes sau Hemophilus Test Medium; prin adaos de antibiotice mediile
pot deveni selective. Sângele din geloză este hemolizat prin încălzire
treptată, până la 800C, timp de 30 min. Cultura poate apare târziu, până
la 48 de ore de la incubare la 370C, în atmosferă de CO2 5-10%.
Bacteriile acestui gen necesită prezenţa în mediu a factorilor
esenţiali de creştere:
Factorul X (hemina, protoporfirina IX) - termostabil (rezistă
45 de min. la 1200C)
Factorul V-termolabil (rezistă 15 min. la 900C); are în
componenţa sa fie NAD, fie NADP.
Haemophilus influenzae
Epidemiologie
Bacteriile sunt transmise pe cale respiratorie, prin intermediul
picăturilor Pflugge sau prin contact direct cu secreţiile infectate ale
tractului respirator. Receptivitatea este prezentă la orice vârstă.
Structura antigenică
Antigene capsulare
H.influenzae posedă antigene capsulare polizaharidice, care
reprezintă suportul esenţial al virulenţei manifestate în cursul proceselor
invazive. Tulpinile încapsulate au fost clasificate în 6 serotipuri: a, b, c, d,
e şi f. Tipul b este cel mai frecvent implicat în apariţia meninigitei şi a
epiglotiei la copil. Prezintă înrudiri antigenice cu Streptococcus
pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis, Enterococcus faecium şi E.coli K1.
Antigene lipooligozaharidice (LOSs) - pe baza cărora se fac
subtipările
Proteinele membranei externe
Proteine fimbriale(pilii)
Patogenitate
Bacteria este patogenă prin capacitatea de multiplicare la poarta
de intrare şi prin toxigeneză, datorită eliberării endotoxinei. Principalii
factori de virulenţă sunt reprezentaţi de polizaharidele capsulare, pilii de
adeziune şi IgA proteazele.
Infecţiile produse de H.influenzae sunt mai frecvente la copii, însă
pot apare, cu o frecvenţă mai scăzută, şi la adulţi, în special la vârstnici
şi imunodeprimati. Acestea debutează, de obicei, ca o rinofaringită
acută, probabil în asociere cu o infecţie virală la nivelul tractului
respirator, urmate de epiglotită, laringotraheită, otită, sinuzită, mai rar de
pneumonie dar şi de meningită acută purulentă la copiii mici, prescolari.
Prin extensie locală pot fi afectate sinusurile sau urechea medie.
Meningita reprezintă una dintre cele mai severe afecţiuni întâlnită
la copiii cu vârsta cuprinsă între 6 luni şi 3 ani, provocată de forma
încapsulată, H.influenzae tip b. Forma clasică este precedată, de obicei,
de semnele unei infecţii ale căilor respiratorii superioare. H. influenzae
împreună cu Streptoccocus pneumoniae şi Neisseria meningitidis
constitue principalele cauze de meningită bacteriană.
Epiglotita, întâlnită la copiii cu vârsta cuprinsă între 2-7 ani, poate
fi fatală prin fenomenele obstructive produse de către inflamaţia locală şi
edem.
Bacteriemia poate să apară la copii cu vârsta cuprinsă între 6-36
de luni, în special la cei splenectomizaţi.
Ocazional, H.influenzae serovarul b, biotipul I este implicat în
producerea celulitei, osteomielitei sau a artritelor septice.
Tulpinile netipabile de Haemophilus influenzae au fost izolate în
otite medii acute, sinuzite la copii şi au fost asociate infecţiilor tractului
respirator (pneumonii, bronhopneumonii,etc) la copii şi adulţi.
Diagnostic de laborator
Caractere microscopice
În frotiurile din lichid cefalorahidian H. influenzae prezintă
polimorfism, majoritatea bacteriilor fiind localizate extraleucocitar.
Formele neîncapsulate din spută au aspect filamentos.
Pe frotiurile colorate Gram realizate din culturile de izolare şi
identificare, apare sub forma unor cocobacili gram-negativi, bacili scurţi,
subţiri, drepţi, rar încurbaţi, de 0,5-0,8 µm, uneori polimorfi, cu sau fără
filamente, care pot fi încapsulaţi (halou clar în jurul bacteriei). În culturile
vechi se pierde capsula şi apar probleme de diagnostic diferenţial
microbiologic.
Caractere de cultură
Pe mediile de cultură: îmbogăţite cu sânge, geloză chocolat (fig.
XII. 1), geloza Levinthal (conţine factorii X şi V), geloza Fildes sau
Hemophilus Test Medium, incubate la 370C, în atmosferă de CO2 5-
10%, după 24 h se formează colonii mici (1-2mm), semiopace, gri,
nehemolitice, de tip S. Pe geloză - sânge se poate observa fenomenul
de satelitism în jurul coloniilor de stafilococ, H.influenzae formând colonii
de dimensiuni descrescânde pe măsură ce se îndepartează de acesta.
(fig. XII. 2).
Genul Pasteurella
Genul Pasteurella este încadrat în Familia Pasteurellaceae şi
prezintă înrudiri cu membri ai genului Actinobacillus.
Microorganismele din genul Pasteurella sunt responsabile de boli
ale animalelor, transmise ocazional omului. Louis Pasteur este cel care
a identificat una dintre speciile genului responsabilă de producerea
holerei la găini, realizând şi un vaccin împotriva acesteia.
Cea mai comună specie asociată cu zoonoze este Pasteurella
multocida, însă interes medical prezintă şi P.haemolytica, P.dagmatis şi
P.ureae.
Caractere generale:
Genul Pasteurella cuprinde cocobacili Gram-negativi, oxidazo-
pozitivi, facultativ anaerobi, imobili, nesporulaţi, care pot fi încapsulaţi.
Habitat
Bacteriile acestui gen sunt întâlnite, cu o frecvenţă înaltă, la nivelul
cavităţii bucale şi al căilor respiratorii superioare la numeroase specii de
animale, importante surse de infecţie pentru om fiind câinele şi pisica.
Persoanele care vin în contact strâns cu aceste animale pot fi purtătoare
ale bacteriei la nivelul nazo-faringelui.
Epidemiologie
Incapabilă să supravieţuiască pentru mult timp în mediul extern,
Pasteurella este, în general, transmisă la om în urma muşcăturii de către
un animal sau pe cale respiratorie, prin inhalarea particulelor infectate.
Adiţional, o parte din infecţiile cu Pasteurella se produc în absenţa unui
contact direct cu animalele, probabil prin transmitere de la om la om.
Structură antigenică
Pasteurella multocida prezintă antigene capsulare, care au
permis clasificarea în 5 serotipuri (A, B, C, E, F), tulpinile implicate în
patologia umană aparţinând tipului A şi mai rar tipului D, antigene
somatice şi lipopolizaharidul, constituent al membranei externe, care
se comportă ca endotoxină.
Patogenitate
P. multocida este patogenă în special prin multiplicare şi
invazivitate, însă există tulpini capabile să producă o citotoxină
dermonecrotică şi osteolitică. Microorganismul prezintă capacitatea de a
se multiplica atât intra - cât şi extracelular.
Produce boli grave la animale.
La om produce:
Pasteurelloza de inocular - apărută după muscătura sau lingerea
unei plăgi de către animalul infectat. Manifestările locale, după
aproximativ 6-24 h de incubare, debutează cu durere locală,
însoţită de inflamaţie, limfangită, adenopatie. Semnele locale
scad în intensitate în câteva ore, însă adenopatia poate persista
câteva săptămâni. Dacă muşcăturile sunt profunde şi nu se
administrează tratament leziunea poate evolua spre osteită sau
artrită supurată.
Infecţii respiratorii - sub formă de rinite atrofice, farigite, sinuzite,
bronşite, pneumonii, etc.
Infecţie generalizată – apărută la pacienţii imunocompromişi, în
special la cei cu afecţiuni hepatice severe.
Diagnosticul de laborator
Produsele patologice sunt reprezentate de puroi, spută, lichid
pleural, sânge pentru hemocultură, L.C.R.
Caractere microscopice
În frotiul din produsul patologic pot fi observaţi cocobacili, Gram-
negativi, nesporulaţi, coloraţi bipolar, polimorfi, de 1-2 µm / 0,3-0,4 µm
(pot fi întâlnite şi forme lungi de 3-5 µm), care pot fi încapsulaţi.
Caractere de cultură
Pasteurella creşte pe medii de cultură simple sau îmbogăţite cu
5% sânge de berbec, la o temperatură cuprinsă între 220 - 440C, cu o
valoare optimă la 370C. După incubare în atmosferă de CO2, pentru 24-
48 h, formează colonii mici, de 1-2 mm, strălucitoare, uneori mucoase
(speciile încapsulate).( fig.XII. 3).
Fig. XII. 3. Pasteurella multocida-mediu – geloză sânge de
berbec 5% (sursa- Color Atlas of Diagnostic Microbiology-Luis M.
de la Maza, Marie T. Pezzlo, Ellen Jo Baron)
Genul Brucella
Genul Brucella face parte din Familia Brucellaceae şi cuprinde 6
specii: B.melitensis, B. abortus, B.suis, B. canis, B.neotomae şi B.ovis.
Primele trei specii sunt implicate în patologia umană, producând
antropozoonoze.
Caractere generale
Bacteriile genului Brucella sunt cocobacilli Gram-negativi, imobili,
uneori încapsulaţi, nesporulaţi, care se colorează bipolar, strict aerobi,
catalazo-pozitivi, oxidazo-negativi.
Habitat
Habitatul brucellelor este reprezentat de organismul animalelor
bolnave (ovine, caprine, porcine, bovine, etc), la care determină
bacteriemii urmate de localizări în sistemul monocito-fagocitar şi la
nivelul tractusului genital. La animalele gestante determină avorturi
spontane, urmate de secreţia de brucelle prin lapte un timp îndelungat.
Epidemiologie
Principala sursă de infecţie o constituie animalele infectate, omul
putându-se contamina accidental prin contact direct sau indirect cu
acestea (contactul cu produse contaminate, ingestia de lapte infectat,
ape contaminate cu Brucella, etc.) sau prin inhalarea aerosolilor ce
conţin brucelle. Bruceloza este o boală profesională, apărând în general
la cei care lucrează cu animale.
Structură antigenică
Cele trei specii implicate în patologia umană se remarcă printr-o
structură antigenică relativ complexă: un antigen capsular, un antigen
lipopolizaharidic, care prezintă două fracţiuni, A şi M, a căror proporţie
este diferită în funcţie de specie - la B.melitensis predomină fracţiunea
M, la B.abortus predomină fracţiunea A, iar la B. suis cele două fracţiuni
sunt egale, precum şi un antigen L asemănător antigenului Vi de la
Salmonella. Ag O diferă de cel al altor bacterii Gram-negative prin
compoziţia sa în acizi graşi şi prin faptul că este strâns legat de proteine.
Patogenitate
Patogenitatea este dată prin multiplicare şi invazivitate.
Bacteriile genului Brucella sunt microorganisme capabile să
determine infecţii acute, cronice sau inaparente. Cronicizarea depinde
de capacitatea de multiplicare intracelulară, putând persista un timp
îndelungat în organismul infectat, în special la nivelul sistemului reticulo-
endotelial. Au afinitate pentru placentă şi ţesuturile fetale ale animalelor
gestante, metabolizând eritriolul prezent la acest nivel.
La om determină bruceloza, o septicemie de origine limfatică.
Leziunile determinate sunt de tip granulomatis.
De la poarta de intrare, reprezentată de tegumentul lezat sau
tractul digestiv, mai rar de conjunctivă sau de calea respiratorie, bacteria
ajunge la nivelul nodulilor limfatici unde se multiplică, apoi, pe cale
sangvină sau limfatică, ajunge în sistemul reticulo-endotelial.
După o perioadă de incubaţie de 2-4 săptămâni, boala debutează
de obicei insiduos.
Forme clinice:
Forma inaparentă - fără semne clinice de boală, depistată
numai prin determinarea anticorpilor specifici
Forma septicemică - caracterizată prin febră ondulantă
„sudoro-algică”, accesele febrile fiind însoţite de frisoane,
oboseală, scădere în greutate, artralgii, adenopatie şi
splenomegalie.
Forma localizată - localizările pot fi multiple: osteoarticulare
(vertebrale, artrite seprice, etc), la nivelul endocardului,
neuro-meningeale, pulmonare, hepatice, splenice, cutanate.
Forma cronică - apărută datorită rezistenţei la antibiotice, prin
capacitatea de multiplicare intracelulară.
Diagnosticul de laborator
Produsele patologice sunt reprezentate de material de puncţie
ganglionară, sânge pentru hemocultură, lichid cefalorahidian, lichid
sinovial, bilă, urină, puroi. La animale se examinează avortonul.
Caractere microscopice
Brucellele pot fi detectate greu microscopic; sunt cocobacili, Gram-
negativi, imobili, nesporulaţi, izolaţi sau dispuşi în perechi, cu lungimea
de 1 µm şi lăţimea de 0,3 µm, coloraţi bipolar. (fig. XII. 4)
Caractere de cultură
Brucella este o bacterie pretenţioasă, cu multiplicare lentă, care
necesită pentru izolare şi identificare medii de cultură speciale, cu
extract de ficat, geloză îmbogăţită cu eritritol, geloza-sânge; pentru
hemoculturi se foloseşte sistemul bifazic Castaneda. Pentru produsele
bogate în flora de asociaţie se folosesc medii selective (cu polimixină,
bacitracină, ciclohexidină).
Culturile sunt incubate la 370C, în atmosferă de 5-10% CO2, pentru
4-6 săptămâni. Coloniile sunt mici (0,5 mm diametrul), nepigmentate,
transparente, de tip S.
Genul Bordetella
Genul Bordetella face parte din Familia Alcaligenaceae şi cuprinde
nouă specii: B.pertussis, B.parapertussis, B.bronchiseptica, B.avium,
B.hinzii, B.holmesii, B.petrii, B.trematum şi B.ansorpii.
Importanţă în patologia umană au B.pertussis, agentul etiologic al
tusei convulsive, B.parapertussis şi B.bronchiseptica, care produc forme
uşoare de tuse convulsivă.
Caractere generale
Bacteriile din genul Bordetella sunt cocobacili Gram-negativi,
nesporulaţi, imobili (4 specii) sau mobili (5 specii), dispuşi izolaţi sau în
lanţuri scurte, strict aerobi.
Habitat
Bordetelele implicate în patologia umană sunt microorganisme cu
tropism pentru epiteliul respirator, întâlnite la animalele cu sânge cald,
inclusiv la om. B.pertussis şi B.parapertussis sunt agenţi infecţioşi
specific umani, pe când B.bronchiseptica a fost localizată la animale,
păsări şi la om.
Bordetella pertussis
Epidemiologie
Izvorul de infecţie este exclusiv uman, fiind reprezentat de
bolnavul cu forme tipice sau atipice de boală. Transmiterea se
realizează pe cale aeriană, prin picături Pflugge, receptivitatea fiind
mare, în special în primii trei ani de viaţă.
Structură antigenică
Structura antigenică este complexă, incluzând:
Antigen capsular
Hemaglutinină fimbrială de natură proteică, implicată în aderenţa
la celulele epiteliale
Antigen somatic termostabil, corespondent endotoxinei
În afară de aceste antigene , B. pertussis mai prezintă:
Toxina pertussis - toxină de natură proteică care determină
limfocitoză.
Adenilat ciclaza calmodulin - dependentă, care prezintă activitate
hemolitică.
Toxina dermonecrotică, teromolabilă.
Citotoxina traheală.
Patogenitate
Patogenitatea este dată prin multiplicare şi toxigeneză.
Bordetella pertussis determină boala cunoscută sub denumirea de
tuse convulsivă, afecţiune cu evoluţie uşoară la adult, dar severă la
copii.
După o perioadă de incubaţie de 7-12 zile, debutează
manifestările clinice, care vor evolua în trei etape:
Stadiul cataral sau de colonizare a epiteliului
respirator, în care manifestările clinice sunt uşoare,
necaracteristice: strănut, catar, tuse, febră. În acest stadiu, cu
durata de aproximativ 10 zile, pacienţii sunt contagioşi.
Stadiul convulsiv caracterizat prin alterarea
progresivă a stării generale şi apariţia acceselor de tuse
spasmodică, epuizantă la care se adaugă cianoza, convulsiile,
vărsăturile. Pe parcursul acestui stadiu, a cărui durată este de
2-4 săptămâni, apare limfocitoza periferică şi hipoglicemia.
Bacteria este rareori izolată în această fază, iar tratamentul cu
antibiotoc nu influenţează progresia bolii.
Convalescenţa, cu durata de cca 4 săptămâni, în care
accesele de tuse scad în intensitate.
Diagnostic de laborator
Produsele patologice sunt reprezentate secreţie nazală,
prelevată cu un tampon steril, spută, picături traheobronşice prelevate
pe “placa tuşită”. Acestea se transportă cât mai rapid la laborator sau,
dacă nu se inoculează plăcile la patul bolnavului, se foloseşte mediul de
transport Amies.
Caractere microscopice
Bordetella pertussis este un cocobacil Gram-negativ, încapsulat,
nesporulat, imobil, colorat bipolar, mai bine observaţi după prelungirea
până la 2 minute a colorării cu fucsină bazică.
Prin metoda imunofluorescenţei se poate detecta un număr mic de
bacili în produsul patologic.
Caractere de cultură
Bordetella pertussis este un bacil pretenţios care creşte numai pe
medii de cultură îmbogăţite (mediul Bordet - Gengou – mediu cu cartof
glicerat şi sânge; geloză – sânge – cazeină - cărbune activat). Incubarea
se face la 35-370C pentru 3-7 zile, în atmosferă umedă.
Coloniile sunt mici, transparente, perlate, cu strălucire metalică,
înconjurate de o zonă de hemoliză difuză.
Identificarea presupune testarea mobilităţii, producerii de
cartalază, oxidază, urează, reducerea nitraţilor la nitriţi, utilizarea
citratului.
Diagnostic imunologic
Diagnosticul imunologic constă în reacţii de aglutinare pe lamă cu
seruri specifice, reacţia de fixare a complementului, ELISA, etc.
Tratament
Antibioticele folosite în tratamentul tusei convulsive sunt
reprezentate de eritomicină, cloramfenicol, tetraciclină. Terapia
medicamentoasă trebuie completată tratamentul simptomatic, în special
cu susţinerea funcţiei respiratorii.
Profilaxia nespecifică constă în izolarea sursei de infecţie şi
creşterea rezistenţei nespecifice.
Profilaxia specifică, la noi în ţară, constă în administrarea
vaccinului DTP, care conţine anatoxină difterică, tetanică şi vaccin
corpuscular pertussis inactivat.
Genul Francisella
Genul Francisella, a cărui încadrare taxonomică este incertă, este
format din două specii: F.tularensis şi F.philomiragia.
F.tularensis, descoperită de Mac Coy şi Chapin în 1911, este
agentul etiologic al antropozoonozei tularemia.
Caractere generale
Bacteriile genului Francisella sunt cocobacili Gram-negativi,
aerobi, facultativ anaerobi, imobili, încapsulaţi, polimorfi, care necesită
pentru creştere cisteină şi cistină.
Habitat
F.tularensis cunoaşte o largă răspândire în rândul animalelor, fiind
întâlnită în special la rozătoare şi la animalele mici.
Epidemiologie
Sursa de infecţie este reprezentată de animalele bolnave,
transmiterea la om producându-se accidental în urma contactului direct
cu acestea, înţepăturii de către insecte hematofage (căpuşe, în
organismul cărora bacteria poate persista 2-3 ani, ţânţari, tăuni), sau prin
apă, aer, alimente contaminate.
Structură antigenică
Bacteria prezintă în structura sa antigenul capsular, antigenul
somatic O (endotoxina), antigene a căror structură proteică este
asemănătoare cu antigenele aglutinante ale tulpinilor de Brucella şi
Yersinia enterocolitica O:3.
Patogenitate
F.tularensis este un microorganism facultativ intracelular, ai cărui
factori de patogenitate nu sunt foarte bine definiţi, însă un rol important
este acordat capsulei bacteriene şi endotoxinei.
După 4 - 6 zile de incubare, la nivelul inoculării bacteriene
(cutanat, ocular, faringian), prin multiplicarea microorganismului, se
dezvoltă eritem local, care evoluează spre papulă, pustulă, ulceraţie.
Infecţia ajunge, pe cale limfatică, la nivelul ganglionilor locali, unde
formează bubonul tularemic, apoi, în urma bacteriemiei tranzitorii, este
diseminată în organism formând noduli granulomatoşi, la nivelul
organelor parenchimatoase, care se pot necroza.
Forme clinice:
Forma ulcero-ganglionară este cea mai frecventă, întâlnită
de obicei la nivelul membrelor superioare, asociată cu leziuni
veziculare şi adenopatie regională voluminoasă. Alte
manifestări clinice: frison, febră, cefalee, greaţă, vărsături,
afectarea stării generale.
Forma oculară – rară, manifestată prin conjunctivită
unilaterală dureroasă şi adenopatie preauriculară.
Forma orofaringiană manifestată prin stomatită, faringită cu
adenopatie cervicală
Forme severe – abdominală şi tifoidică
Diagnostic de laborator
Produsele patologice sunt reprezentate de: exsudat din ulcerul
cutanat, aspirat ganglionar, secreţie conjunctivală, exsudat faringian,
spută, sânge pentru hemocultură.
Caractere microscopice
Pe frotiurile din cultură, F.tularensis apare ca un cocobacil Gram-
negativ, de 0,7-1 µm / 0,3µm, polimorf, slab colorat bipolar.
Caractere de cultură
F.tularensis creşte pe medii de cultură îmbogăţite: mediul Francis
(geloză- sânge cu glucoză şi cistină), sau Mac Coy (mediu cu gălbenuş
de ou coagulat în pantă). Cultivarea se realizează la 370C, în aerobioză.
După 48-72 h se formează colonii mici, transparente, lucioase.
Identificarea constă în evidenţierea producerii de catalază,
oxidază, de H2S, fermetarea zaharurilor (glucoză şi maltoză),
producerea de citrulinureidază şi fermentarea glicerolului.
Diagnostic serologic
Se practică aglutinarea în tuburi, hemaglutinarea sau reacţii de tip
ELISA.
Tratament
Speciile genului sunt sensibile la diferite antibiotice de tipul
aminoglicozidelor, teraciclinei, fluorochinolonelor sau a cloramfenicolului.
Profilaxia presupune evitarea contactului cu animalele infectate,
iar la persoanele cu risc crescut se poate administra intradermic un
vaccin viu atenuat. Răspunsul imun umoral persită 3-5 ani, iar cel celular
un timp mai îndelungat după vaccinare.