7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

ANALIZE

FIZICO - CHIMICE
ELECTROFOREZA

http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 1/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Electroforeza = metoda ce se bazeaza pe

migrarea componentilor dintr-o proba, supusa
unei diferente de potential, intr-o solutie sau
printr-un suport solid poros (hartie
cromatografica, gel), separarea explicandu-se
prin vitezele de migrare diferite ale
componentilor incarcati electric pozitiv sau
negativ, care sunt atrasi de polii opusi ai
campului electric, proportional cu natura,
marimea si sarcina lor.

2
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 2/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Mobilitatea electroforetica

= vitezadecusarcini
purtatoare care seelectrice,
deplaseaza particulele
in camp electric in
conditiile experimentale date
d 
 0 

t   E 


In care:
d = distanta de migrare parcursa in timpul t (m);
E = gradientul de potential (V/m);
µ 0 = mobilitatea electroforetica (m2/V/s).

3
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 3/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

•
Factori ce depind de particula:
marimea •

natura •

forma
• sarcina
• gradul de hidratare si disociere
•

coeficientul de frecare

4
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 4/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

• Factori ce depind de solutia de electrolit:

natura •

•
concentratia
forta ionica
• pH-ul
• vascozitatea
• temperatura

5
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 5/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Factori care influenteaza electroforeza

Natura moleculelor separate

Marimea moleculelor
–

Mobilitatea
–

Natura
Sarcina
–

Aparatura 
suportul
–

6
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 6/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Factori care influenteaza electroforeza

Curentul electric
• Deplasarea electroforetica este proportionala cu
Mobilitatea •

Campul electric•

•
Timpul de trecere a campului electric
d   U 0  E  t  

d = distanta parcursa de particula

U0 = mobilitatea particulei (V/cm)
E = tensiunea (V)
7
t = timpul de trecere al curentului
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 7/15
7/30/2019

Factori care influenteaza electroforezaCurs 5 Electroforeza Capilara

pH - ul
• In cazul acizilor si bazelor tari (electroliti tari)
pH-ul nu influenteaza migrarea
Natura solutiei
• natura sarurilor
• natura acizilor
• natura bazelor influenteaza
• natura altor substante mobilitatea
existente in solutie

8
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 8/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Electroforeza capilara
• Cea mai noua si mai utilizata tehnica electroforetica
utilizata
electricepentru separarea speciilor incarcate cu sarcini
Pentru efectuarea separarilor se efectueaza un
montaj automatizat ale carui elemente principale sunt:
–

tub capilar
– sistem de introducere a probei
– sistem de detectie
–

electrozi de platina
– sursa de alimentare cu curent

9
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 9/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Electroforeza capilara

10
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 10/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Avantajele electroforezei capilare:

• timpi de analiza relativ scurti;
• volume mici de proba;
• cantitati mici de solventi (tampon);
• posibilitatea automatizarii intregului ciclu de
analiza;
• poate opera atat in medii apoase cat si in medii
neapoase;
•
detectia se face in capilar (UV);
• sensibilitate inalta.

11
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 11/15
7/30/2019
Miscarea unui analit incarcat pozitiv  Curs 5 Electroforeza Capilara

Uep= mobilitatea electroforetica 

+ +
- UR = mobilitatea rezultanta

Ueo = mobilitatea electroosmotica

Miscarea unui analit neutru

+ -

Miscarea unui analit incarcat negativ 

+ - -

12
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 12/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Separarea unui amestec de cationi

13
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 13/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Separarea unui amestec de compusi

aromatici

14
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 14/15
7/30/2019 Curs 5 Electroforeza Capilara

Separarea unui amestec de medicamente

15
http://slidepdf.com/reader/full/curs-5-electroforeza-capilara 15/15