Cursul Disciplinei de Biofizica

si Fizica Medicala

Prof. dr. C. Stefanescu, Sef. lucr. dr. I. Grierosu, Prof. dr. V. Rusu
2016 - 2017

CURSUL 4
 Curs de Biofizică

Vă rugăm: gândiţi!

Disciplina de Biofizică
şi Fizică medicală
04/24/20 2
 Metode
electrokinetice:
electroforeza,
electrofocalizarea,
imunoelectroforeza

04/24/20 3
 I. Electroforeza şi
aplicaţiile sale pentru
diagnostic
I.1.Principiul fizic al electroforezei
I.2.Dispozitivul
I.3. Electroforeza proteinelor serice

04/24/20 4
I.1.Principiul fizic al electrof
orezei
 Metoda de separare prin migrarea particulelor încărcate
electric în câmp electric

ANOD CATOD

+ -
Electrozi
+- ++ -+
-- --
+ -
+ +

04/24/20 5
 Forţe care acţionează asupra
particulei în câmp electric:
_
+ pH _
+ Ff Ze Fe
+
_
+ _
+
+ _

Ze E
 Fe = F f
v=
 ZeE= 6rv
6r
04/24/20 6
 Explicarea termenilor:

 Fe = forţa electrică
 Ff = forţa de frecare
 Ze = sarcina electrică a particulei
E = intensitea câmpului electric
Fe = Z e E


 η = viscozitatea mediului
Ff = 6rv  r = raza particulei
 v = viteza particulei

04/24/20 7
 FACTORI DE DEPENDENŢĂ
AI VITEZEI PARTICULEI :

sarcina electrică (pH-ul mediului)

raza particulei (deci dimensiunile) +
forma

viscozitatea mediului

intensitatea câmpului electric

Ze E
v=
6r
04/24/20 8
04/24/20 9
 I. Electroforeza şi
aplicaţiile sale pentru
diagnostic
I.1.Principiul fizic al electroforezei
I.2.Dispozitivul
I.3. Electroforeza proteinelor serice

04/24/20 10
I.2.Dispozitivul

04/24/20 11
 pipetă

deplasare
tampon l

Electro-
fore-
grama:

Schema electroforezei

04/24/20 12
04/24/20 13
 I. Electroforeza şi
aplicaţiile sale pentru
diagnostic
I.1.Principiul fizic al electroforezei
I.2.Dispozitivul
I.3. Electroforeza proteinelor serice

04/24/20 14
 I.3. Electroforeza
proteinelor serice

04/24/20 15
 Electroforeza =
migrare diferenţială în câmp electric,
deci posibilitate de separare a

 AMINOACIZILOR
 PEPTIDELOR
 PROTEINELOR
 ACIZILOR NUCLEICI

04/24/20 16
 Electroforeza
proteinelor serice
- separarea proteinelor în 5 fracţiuni.

04/24/20 17
 Electroforegrama normală

04/24/20 18
Benzile proteice separate pot fi cuantificate
prin densitometrie sau fotocolorimetrie

04/24/20 19
Electroforegrama normală - valori:

Albumine 54 - 66 %
Alfa-1 globuline 2-4%
Alfa-2 globuline 6 -12 %
Beta- globuline 8 -14 %
Gamma globuline 13 - 22 %

04/24/20 20
 Aplicaţie:
electroforegrama patologică
(exemple):

04/24/20 21
04/24/20 22
 Normal

 Boala hepatică:
pacient în vârstă de 46 ani, diagnosticat cu ciroză
hepatică, secundară abuzului cronic de alcool.
Decedează 5 luni după acest rezultat.

04/24/20 23
 Normal

 Proces inflamator acut:

gamma diminuate, alfa2 mare

04/24/20 24
04/24/20 25
 Electroforegramă urinară

Electroforeza de urina este tehnica de electie pentru

identificarea proteinei Bence-Jones, la pacienţii cu mielom
multiplu.
Aceasta trebuie sa fie întotdeauna efectuata în comparatie
cu electroforeza serica, astfel încât rezultatele să poată fi
comparate direct.
04/24/20 26
 II. Alte tehnici
electrokinetice:
 Focalizarea izoelectrică
 Imunoelectroforeza

04/24/20 27
Focalizarea izoelectrică: electroforeză în gradient de pH,
migrarea şi separarea depinde doar de pI (punctul izoelectric)
Principiul fizic:
Dacă un amestec de proteine este supus unei electroforeze în
gradient de pH, fiecare proteină va migra până în locul unde pH-ul
mediului corespunde pH-ului său izoelectric (când proteina va
avea sarcină globală nulă).

04/24/20 28
04/24/20 29
 II.2. Imunoelectroforeza

Principiul fizic:
 2 etape:

1. electroforeza
2. imunodifuzie.
+ formare de complexe
Ag-Ac

04/24/20 30
 Imunoelectroforeza (rezultate)

 Grosimea şi poziţia
arcurilor de precipitare.

 Aplicaţie frecventă:
gamapatia monoclonală.

04/24/20 31
 Bibliografie selectivă
 Aurengo A., Grémy F., Petitclerc T. - Biophysique, Médecine-Sciences
Flammarion, Paris, 1998.
 Dimoftache C., Herman S. – Principii de Biofizică umană, Ed. Universitară
“Carol Davila”, Bucureşti, 2003.
 Duncan G, Physics in the Life Sciences, Blackwell Scientific Publications, The
Alden Press, Oxford, 1990.
 Durand A., Escanyé J-M., Naoun A. La biophysique en 1001 QCM, Ed.
Ellipses, 2004.
 Goldfarb D. Biophysics DeMYSTiFieD. McGraw-Hill Companies, 2011.
 Herman S. Aparatura medicală. Principiile fizice ale aparaturii medicale
moderne,Ed.Teora,Bucureşti, 2000.
 Nölting, Bengt. Methods in Modern Biophysics. Springer. 2003.
 Pascu M., Rusu V., Vasile C., Spectrometria in IR in medicina si farmacie ,
Editura BIT, 2003.
 Popescu A., Bazele Opticii, Ed. Universităţii „Al. I. Cuza”, Iaşi, 1988.
 Rusu V., Baran T., Brănişteanu D. D. - Biomembrane şi patologie, vol. I, Ed.
Medicală, Bucureşti, 1988, 63-92, 286-292.
 Rusu V. Note de curs. 2010.
 Rusu V. – Nobel – Retrospectivă 1905 – 1995 – Laureaţii premiului pentru
fiziologie şi medicină, Ed. Omnia, Iaşi, 1996.
 Rusu V si colab. Lucrări practice şi demonstraţii de Biofizică şi Fizică
Medicală, Ed. „Gr. T. Popa” Iaşi, 2003.
 Rusu V. – Dicţionar medical, Ed. Medicală, Bucureşti, ed. IV, 2011.
 Skoog D. A., Holler F. J., Nieman T. A., Principes d’analyse instrumentale,
De Boeck Université, Paris, 2003.
 Ştefănescu C, Rusu V. Biophysics and Medical Physics: An Introduction , Ed.
04/24/20 Tehnopress, 2008. 32