UNIVERSITATEA DE STAT DE MEDICINĂ ȘI FARMACIE ,,Nicolae Testamițanu,,

TIPURI DE ELECTROFOREZE
ȘI APLICAȚIILE EI ÎN
TEHNICI DE DIAGNOSTICARE

Bețișor Ariadna
M2317
1. Definiții;
CUPRINS
2. Electroliza de afinitate;
3. Electroliza capilară;
4. Electroforeză pe gel de poliacrilamidă;
5. Electroliza pe gel de agaroza;
6. Electroblotare;
7. Focalizare izoelectrică;
8. Electroforeză cu câmp pulsat;
9. Electroforeza în gel de poliacrilamidă bidimensională;
10.Electroforeza de imunofixare;
11.Concluzie;
12.Bibliografie;
Electroforeza - mișcarea particulelor dintr- un
gel sau fluid dintr-un câmp electric
relativ uniform.
.
 ELECTROFOREZA DE AFINITATE
Tip de electroforeză
în care particulele
sunt separate pe baza
formării complexe
sau a interacțiunii
biospecifice
 ELECTROFOREZA CAPILARĂ
Tip de electroforeză utilizată pentru
separarea ionilor în funcție în
principal de raza atomică, sarcină și
vâscozitate. După cum sugerează și
numele, această tehnică este de
obicei realizată într-un tub de
sticlă. Oferă rezultate rapide și o
separare de înaltă rezoluție.
ELECTROFOREZĂ PE GEL DE POLIACRILAMIDĂ
(PAGE)
Electroforeza pe gel de poliacrilamidă este cel mai comun tip de
electroforeză. Este o metodă ieftină, reproductibilă și rapidă
pentru cuantificarea, compararea și caracterizarea
proteinelor, peptidelor și acizi nucleici. Separarea puterii
gelului și greutatea moleculară depinde de raportul
acrilamidă/bisacrilamidă.
Polimerizarea acestor două substanțe creează pori în gel.
PAGE este utilizat pentru a controla puritatea proteinelor, determinarea​
greutății moleculare și concentrația lor.​
 Electroforeza pe gel de agaroză
(AE)
Electroforeza pe gel de agaroză a fost aplicată cu succes
pentru analiza proteinelor serice, variantelor hemoglobinei,
izoenzimelor, lipoproteinei fractii. Este de obicei folosit
pentru a separa fragmente de ADN sau ARN lungimi
diferite. În această metodă, moleculele sunt separate după
lungimea, mărimea și structura lor. Electroforeza pe gel de
agaroză este utilizată pe scară largă în diverse domenii ale
biotehnologiei, laboratoare biomedicale si criminalistice.
Este o tehnică folosită în mod obișnuit în laboratoarele clinice pentru a detecta
anomaliile proteice în diverse fluide biologice ​
(ser, urină, lichid cefalorahidian)​
 ELECTROBLOTARE -
Electroblotarea este o tehnică utilizată pentru
recuperarea acizilor nucleici sau a proteinelor în
urma electroforezei prin transferarea acestora
pe o membrană. Polimerii fluorură de
poliviniliden (PVDF) sau nitroceluloză sunt
utilizați în mod obișnuit. Odată ce specimenul a
fost recuperat, acesta poate fi analizat în
continuare folosind pete sau sonde. Western blot
este o formă de electroblotare utilizată pentru a
detecta proteinele specifice folosind anticorpi
artificiali.
FOCALIZAREA IZOELECTRICĂ
Este o formă de electroforeză care separă moleculele pe baza
diferitelor puncte izoelectrice. IEF se realizează cel mai adesea
pe proteine, deoarece încărcarea lor electrică depinde de PH.
PRINCIPIU DE FUNCȚUINE

Dacă un amestec de proteine

este supus electroforezei în
gradient de PH fiecare proteină
va migra până la locul unde
PH-ul mediului corespunde PH-
ului izoelectric.
ELECTROFOREZĂ CU CÂMP PULSAT
Este utilizată pentru separarea macromoleculelor, cum ar fi ADN-ul,
prin schimbarea periodică a direcției câmpului electric aplicat unei
matrice de gel. Motivul pentru care se schimbă câmpul electric este că
electroforeza tradițională pe gel nu este capabilă să separe în mod
eficient molecule foarte mari, care toate tind să migreze
împreună. Schimbarea direcției câmpului electric conferă moleculelor
direcții suplimentare de deplasare, astfel încât acestea să aibă o cale
prin gel. Tensiunea este în general comutată între trei direcții: una care
rulează de-a lungul axei gelului și două la 60 de grade pe ambele
părți. Deși procesul durează mai mult decât electroforeza tradițională
pe gel, este mai bine să separe bucăți mari de ADN.
 Cel mai semnificativ diferența dintre PFGE și alte tehnici de
electroforeză este că câmpul electric aplicat nu este constant,
PFGE este folosit pentru caracterizarea multor specii bacteriene
care cauzează boli, testarea sensibilității antimicrobiene,
serotiparea și mărimea genomului.
 ELECTROFOREZA ÎN GEL
DE POLIACRILAMIDĂ BIDIMENSIONALĂ
(2-DE)​
Acestă metodă folosește IEF (focalizare izoelectrică) în
prima dimensiune. În a doua dimensiune, SDS-PAGE dependent de
greutatea moleculară - se utilizează electroforeza în gel
sulfat poliacrilamidă.
În această metodă, este nevoie de suport informatic pentru a interpreta
sau compara punctele care indică prezența unui număr mare de
proteine ​pe gel după colorare. Un diagnostic complet al bolii poate fi
obținut prin analizând proteinele prezente atât în ​celulele sau țesuturile
normale, cât și în cele bolnave.
2 DE - definește structura, locația, cantitatea, post-translațională
modificări, funcții ale țesuturilor și celulelor tuturor proteinelor
și ale acestora interacțiunea cu alte proteine ​și macromolecule.
Este metoda principală pentru proteomica.
 ELECTROFOREZA DE IMUNOFIXARE
(IFE)
Este un standard biochimic de aur tehnică utilizată pentru a
ghida diagnosticul, urmări și trata gamopatiile monoclonale.
IFE este o metodă preferată pentru diagnostic și urmărirea
mielomului multiplu, a paraproteinemiilor în cercetarea
medicală și în studii genetice.
Electroforeza de imunofixare este în două etape:
Pasul 1: Separarea proteinelor în gel de agaroză
Pasul 2: Imunosupresie.
Imunofixația serului colectat de la 4 pacienți
 CONCLUZIE
Electroforeza reprezintă o metodă de analiză și separare
bazată pe migrarea particulelor solide dispersate într-un lichid
sub acțiunea unui câmp electric. Electroforeza este folosită și
în diagnosticare și în supravegherea terapeutică, prin
separarea proteinelor într-un câmp electric. Un exemplu de
astfel de test frecvent utilizat pentru diagnostic
este electroforeza proteinelor serice.
 BIBLIOGRAFIE
 file:///C:/Users/Lenovo/Downloads/ElectrophoresisApplicationsUsedinMedicine.pdf
 https://ro.wikipedia.org/wiki/Electroforez%C4%83
 https://ro.scribd.com/document/186522620/Electroforeza-APB-3-Inginerie-Medicala