CURS Nr.

11 Electroforeza

Definiia metodei
Descrierea metodei

Electroforeza- metoda de laborator ce permite separarea n cmp electric a diferitelor

componente ale unei soluii (separarea fraciunilor proteice ale serului, care se deplaseaz cu
viteze diferite: albumina 50-60%, alfa 1 globulina 3-4%, alfa 2 globulina 9-11%, beta 12-14%,
gama ) sau imunoglobulinele cu proprieti imunitare: IgG, IgM, IgA, IgD, IgE).15-18%
Valori patologice:
- nefroza lipoidic (scad albuminele, cresc alfa 2)
- colagenoza (crete gama)
- ciroza (scad albuminele, cresc beta i gama)
- RAA, tuberculoza (crete alfa 2)
n prezent electroforeza reprezint principala metod de separare a moleculelor n
cadrul laboratoarelor de biologie celular.
Termenul de electroforez descrie migrarea unei particule ncrcate sub influena unui
cmp electric. Deoarece n cmp electric moleculele se deplaseaz cu o vitez ce depinde de
sarcina lor electric precum i de form sau mrimea lor, electroforeza a fost dezvoltat
pentru separea diferitelor molecule.
Electroforeza este utilizat pentru analiza i purificarea moleculelor foarte mari cum
sunt proteinele i acizii nucleici, dar se aplic i altor molecule ca glucide, aminoacizi, peptide.
Denumirea de electroforez provine din asocierea cuvntului grec electron (electric) cu
cel latin phore (purttor), evideniindu-se astfel rolul esenial al cmpului electric n procedeul
descris.
Electroforeza este o metod de analiz i separare bazat, n principal pe criterii de
sarcin electric i mas molecular. Migrarea diferenial a particulelor ncrcate electric se
face sub aciunea unui cmp electric continuu.
Electroforeza proteinelor pe gel de agaroz este tehnica cea mai uoar i mai puin
costisitoare, implicnd o cantitate limitat de materiale, un timp de lucru scurt i o
1

reproductibilitate foarte bun. Separarea electroforetic a proteinelor serice prezint un

interes major n testele clinice, datorit importantelor informaii pe care le ofer acestea n
diverse afeciuni, precum i asupra modalitilor de tratare a acestora.

Electroforeza Proteinelor
Proteinele pot fi separate i purificate. Metodele de separare a proteinelor se bazeaz
pe proprietile acestora ( sarcin, mrime, solubilitate ) care variaz de la o protein la alta.
Deoarece multe proteine se lipesc de alte biomolecule, ele pot fi separate i n baza
proprietilor de legare. Sursa proteinelor este n general esutul sau celulele microbiene.
Celula trebuie spart i proteina trebuie eliberat ntr-o soluie numit extract crud.
Cromatografia prin schimb de ioni poate fi folosit pentru a separa proteinele cu sarcini
diferite (similar aminoacizilor), aa cum alte metode cromatografice bazate pe alte proprieti
pot fi folosite.

Electroforeza Proteinelor serice

Prin electroforeza hemoglobinei pot fi detectate fraciuni normale sau patologice,
poziia benzilor obinute fiind comparat cu cea a benzilor standard furnizate de materialul de
control.
n cazul hemoglobinelor anormale modificarea structural duce la modificarea sarcinii
electrice, ceea ce permite migrarea i separarea lor electroforetic. Electroforeza de Hb
folosind ca suport de migrare gelul agar este o metod rapid i sensibil, permind
separarea Hb fiziologice i patologice, inclusiv a fraciilor minore.

Electroforeze orizontale - Aparate n gel de agaroza

Electroforeze verticale - Analiza proteinelor i a aciziloe nucleici