Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
TIPURI DE ELECTROFOREZE
ȘI APLICAȚIILE EI ÎN
TEHNICI DE DIAGNOSTICARE
POPESCU Sofia
M2119
1. Definiții;
CUPRINS
2. Electroliza de afinitate;
3. Electroliza capilară;
4. Electroforeză pe gel de poliacrilamidă;
5. Electroliza pe gel de agaroza;
6. Electroblotare;
7. Focalizare izoelectrică;
8. Electroforeză cu câmp pulsat;
9. Electroforeza în gel de poliacrilamidă bidimensională;
10.Electroforeza de imunofixare;
11.Concluzie;
12.Bibliografie;
Electroforeza - mișcarea particulelor dintr- un
gel sau fluid dintr-un câmp electric
relativ uniform.
.
ELECTROFOREZA DE AFINITATE
Tip de electroforeză
în care particulele
sunt separate pe baza
formării complexe
sau a interacțiunii
biospecifice
ELECTROFOREZA CAPILARĂ
Tip de electroforeză utilizată pentru
separarea ionilor în funcție în
principal de raza atomică, sarcină și
vâscozitate. După cum sugerează și
numele, această tehnică este de
obicei realizată într-un tub de
sticlă. Oferă rezultate rapide și o
separare de înaltă rezoluție.
ELECTROFOREZĂ PE GEL DE POLIACRILAMIDĂ
(PAGE)
Electroforeza pe gel de poliacrilamidă este cel mai comun tip de
electroforeză. Este o metodă ieftină, reproductibilă și rapidă
pentru cuantificarea, compararea și caracterizarea
proteinelor, peptidelor și acizi nucleici. Separarea puterii
gelului și greutatea moleculară depinde de raportul
acrilamidă/bisacrilamidă.
Polimerizarea acestor două substanțe creează pori în gel.
PAGE este utilizat pentru a controla puritatea proteinelor, determinarea
greutății moleculare și concentrația lor.
Electroforeza pe gel de agaroză
(AE)
Electroforeza pe gel de agaroză a fost aplicată cu succes
pentru analiza proteinelor serice, variantelor hemoglobinei,
izoenzimelor, lipoproteinei fractii. Este de obicei folosit
pentru a separa fragmente de ADN sau ARN lungimi
diferite. În această metodă, moleculele sunt separate după
lungimea, mărimea și structura lor. Electroforeza pe gel de
agaroză este utilizată pe scară largă în diverse domenii ale
biotehnologiei, laboratoare biomedicale si criminalistice.
Este o tehnică folosită în mod obișnuit în laboratoarele clinice pentru a detecta
anomaliile proteice în diverse fluide biologice
(ser, urină, lichid cefalorahidian)
ELECTROBLOTARE -
Electroblotarea este o tehnică utilizată pentru
recuperarea acizilor nucleici sau a proteinelor în
urma electroforezei prin transferarea acestora
pe o membrană. Polimerii fluorură de
poliviniliden (PVDF) sau nitroceluloză sunt
utilizați în mod obișnuit. Odată ce specimenul a
fost recuperat, acesta poate fi analizat în
continuare folosind pete sau sonde. Western blot
este o formă de electroblotare utilizată pentru a
detecta proteinele specifice folosind anticorpi
artificiali.
FOCALIZAREA IZOELECTRICĂ
Este o formă de electroforeză care separă moleculele pe baza
diferitelor puncte izoelectrice. IEF se realizează cel mai adesea
pe proteine, deoarece încărcarea lor electrică depinde de PH.
PRINCIPIU DE FUNCȚUINE