ANALIZE FIZICO - CHIMICE ELECTROFOREZA

Electroforeza = metoda ce se bazeaza pe migrarea componentilor dintr-o proba, supusa unei diferente de potential, intr-o solutie sau printr-un suport solid poros (hartie cromatografica, gel), separarea explicandu-se prin vitezele de migrare diferite ale componentilor incarcati electric pozitiv sau negativ, care sunt atrasi de polii opusi ai campului electric, proportional cu natura, marimea si sarcina lor.

Mobilitatea electroforetica
= viteza cu care se deplaseaza particulele purtatoare de sarcini electrice, in camp electric in conditiile experimentale date
d 0 tE

In care: d = distanta de migrare parcursa in timpul t (m); E = gradientul de potential (V/m); 0 = mobilitatea electroforetica (m2/V/s).
3

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de : Factori ce depind de particula: marimea natura forma sarcina gradul de hidratare si disociere coeficientul de frecare

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de : Factori ce depind de solutia de electrolit: natura concentratia forta ionica pH-ul vascozitatea temperatura

Factori care influenteaza electroforeza

Natura moleculelor separate Marimea moleculelor Mobilitatea Natura Sarcina Aparatura suportul

Factori care influenteaza electroforeza

Curentul electric Deplasarea electroforetica este proportionala cu Mobilitatea Campul electric Timpul de trecere a campului electric

d U0 E t
d = distanta parcursa de particula U0 = mobilitatea particulei (V/cm) E = tensiunea (V) t = timpul de trecere al curentului

Factori care influenteaza electroforeza pH - ul In cazul acizilor si bazelor tari (electroliti tari) pH-ul nu influenteaza migrarea Natura solutiei natura sarurilor natura acizilor natura bazelor influenteaza natura altor substante mobilitatea existente in solutie
8

Electroforeza capilara
Cea mai noua si mai utilizata tehnica electroforetica utilizata pentru separarea speciilor incarcate cu sarcini electrice Pentru efectuarea separarilor se efectueaza un montaj automatizat ale carui elemente principale sunt:

tub capilar sistem de introducere a probei sistem de detectie electrozi de platina sursa de alimentare cu curent

Electroforeza capilara

10

Avantajele electroforezei capilare: timpi de analiza relativ scurti; volume mici de proba; cantitati mici de solventi (tampon); posibilitatea automatizarii intregului ciclu de analiza; poate opera atat in medii apoase cat si in medii neapoase; detectia se face in capilar (UV); sensibilitate inalta.
11

Miscarea unui analit incarcat pozitiv

+
+

Uep= mobilitatea electroforetica UR = mobilitatea rezultanta Ueo = mobilitatea electroosmotica

Miscarea unui analit neutru + -

Miscarea unui analit incarcat negativ

+
-

12

Separarea unui amestec de cationi

13

Separarea unui amestec de compusi aromatici

14

Separarea unui amestec de medicamente

15