METODE TERMICE APLICATE N

ANALIZA MEDICAMENTULUI
CIATC (Confederaia Internaional de Analiz
Termic i Calorimetrie)

grup de tehnici care msoar o proprietate
fizic a unei substane n funcie de
temperatur, cnd acea substan este supus
unui program controlat de temperatur"
Definiie
2
Programul de temperatur la care poate fi supus proba:

nclzire (sau rcire) constant (ex. 10Kmin);

Isotermic;

Program complex de temperatur (ex. 10 min la 25C nclzire
la 200C cu 10Kmin 30 min la 200 C rcire la 50C cu
5Kmin )

nclzirea poate fi controlat n funcie de comportamentul
probei
Principii
3
Proprieti fizice msurate:
Capacitatea de nclzire specific
Schimbul de energie
Schimbrile de mas sau greutate
Proprieti mecanice (dimensiunea, deformarea)
Proprieti optice (reflectana, transmitana,
luminescena)
Natura gazului rezultat din analiz

Proprieti termice:
nclzirea
Topirea
Oxidarea
Descompunerea

Principii
4
Tehnici de analiz termic
A. Frecvent utilizate n analiza medicamentelor:
1. Analiza Termic Optic (Termomicroscopia) (ATO)

2. Analiza Termogravimetric (TGA)

3. Analiza Termic Diferenial (TDA)

4. Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)

5
Tehnici de analiz termic
B. Moderne:
1. Analiza Termic Mecanic (TMA)

2. Analiza Mecanic Dinamic (MDA)

3. Dilatometria

4. Termoluminescena
6
Analiza Termic Optic (ATO)
Thermomicroscopy

Permite observarea schimbrilor de faz ale unei
substane (desolvatarea, topirea) care au loc sub
aciunea unei nclziri programate atunci cnd
aceasta este aezat ntre lama i lamela unui
microscop

Termomicroscopul- placa nclzit dup un regim
programat de temperatur

Analiza fenomenului de topire a substanei
7
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
1. Observarea schimbrilor de faz

2. Determinarea temperaturii de topire i a
domeniului de topire

3. Determinarea puritii

4. Studiul interaciunilor
8
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
1. Observarea schimbrilor de faz
Modificri cristaline

Topirea parial a unei forme cristaline

Sublimarea (s.m. organice)

Polimorfismul (compui minerali i organici)

Aspectul cristalelor (sfere, prisme, tablete)- criteriu
de identificare
9
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
2. Determinarea temperaturii de topire i a
intervalului de topire
Punctul de topire al unei s.m. pure
temperatura la care aceasta este n echilibru cu faza sa lichid sub presiunea
vaporilor si saturai

Intervalul de topire
ntre temperatura la care apar primele picturi de lichid i cea la care au
disprut ultimele cristale

Criteriu de identitate
Criteriu de puritate- impuritile scad punctul de
topire i lrgesc domeniul de topire
10
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
3. Determinarea puritii
a) Topirea prematur a unor cristale datorit prezenei
unei cantiti mici de impuritate

b) Topirea la temperatura eutectic i la o temperatur
diferit pentru o cantitate mai mare de impuritate

11
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
4. Studiul interaciunilor
Determinarea temperaturii eutectice a unui amestec
A+B
(A- principiul activ, B- substan de referin)

Viteza de nclzire-3C/min

Temperatura de topire eutectic:
Criteriu de identitate
Diferenierea a doi compui cu p.t. identice
(ex. Aminofenazona p.t.=106,4C, 4- aminofenazona p.t.=106,3C)
Aminofenazona + acetanilida = 1:1 eutectic cu p.t.=61C;
4- aminofenazona + acetanilida= 1:1 eutectic cu p.t.=63C;
12
Analiza Termic Optic (ATO) - Aplicaii
1. Observarea schimbrilor de faz

2. Determinarea temperaturii de topire i a
domeniului de topire

3. Determinarea puritii

4. Studiul interaciunilor
13
ANALIZA TERMOGRAVIMETRIC (TGA)
Principiu
Aplicaii n analiza medicamentului
14
Analiza termogravimetric (TGA)
Thermogravimetry (TGA)

nregistrarea variaiei masei substanelor n
funcie de temperatur n cursul nclzirii lor
continue i uniforme

Msurtorile se realizeaz ntr-o atmosfer bine definit (inert sau
reactiv)

Evenimente termice nsoite de variaia masei: desorbia, absorbia,
sublimarea, evaporarea, oxidarea, reducerea, descompunerea;

Evenimente termice care nu sunt nsoite de variaia masei: topirea,
cristalizarea
15
Analiza termogravimetric (TGA)
Termograma TGA: m(mg) = f(T)










Variaia descreterii masei n funcie de
temperatur: dmdt= f(T)
16
Analiza termogravimetric (TGA)
Aparatura:
Termobalana
Microbalan electronic
Cuptor
Programator al temperaturii
Calculator pentru nregistrarea datelor

Creuzete
alumin (Al
2
O
3
)
,
platin, aluminiu,
quartz, safir

17
Analiza termogravimetric (TGA)
Forma curbelor TGA depinde de:
1. cantitatea de prob
mic, n limitele de rezoluie ale microbalanei

2. mrimea particulelor probei
ct mai mici, pentru ca echilibrul s se ating pe o suprafa ct
mai mare

3. viteza de nclzire
10K/min pn la 30K/min
viteza de nclzire mare rezoluia temperaturii mic
viteza de nclzire mic cresc timpii de analiz i scade
pierderea de mas pe unitatea de timp
18
Analiza termogravimetric (TGA)
Forma curbelor TGA depinde de:
4. natura i presiunea atmosferei n camera cu proba:
Gaze folosite: aer, Ar, CO
2
, H
2
, N
2
, He, O
2

Gaze reactive: O
2
Gaze inerte: N
2
, He
Debit: 15-50 mL/min
19
Analiza termogravimetric (TGA)
Forma curbelor TGA depinde de:
5. forma i natura creuzetului:
Compoziia
creuzetului
Volum Reacia cu
proba
P.t.
Alumin
(Al
2
O
3
)
70L, 150L
900L, reutilizabile
inert > 1700C
Platin
30L ,70L, 150L
reutilizabile
Poate aciona ca
i catalizator
1770C

Aluminiu
40L ,100L inert 660C
Safir
70L, reutilizabile inert > 1700C

20
Analiza termogravimetric (TGA).
Aplicaii
1. Determinarea temperaturii de descompunere
2. Studiul cineticii proceselor de descompunere
Termograma TGA a
atenololului
21
Analiza termogravimetric (TGA).
Aplicaii
3. Determinarea coninutului (ap, substane
volatile, cenu)
Ex. Substane care conin ap de cristalizare
(betaciclodextrina-BCD)

Metoda TGA:
creuzete: alumin, 70L;
gaz de purjare: N
2
, 50mL/min
interval de temperatur:25- 600 C;
rata de nclzire:5C/min
22
Analiza termogravimetric (TGA).
Aplicaii
Termograma TGA a
BCD
23
Analiza termogravimetric (TGA).
Aplicaii
1. Determinarea temperaturii de descompunere

2. Studiul cineticii proceselor de descompunere

3. Determinarea coninutului (ap, substane
volatile, cenu)
24
ANALIZA TERMIC DIFERENIAL (TDA)
Principiu
Aplicaii n analiza medicamentului
25
Analiza Termic Diferenial (TDA)
nregistrarea variaiilor de entalpie survenite n
prob n cursul unei nclziri uniforme

nregistrarea diferenei de temperatur (dT) ntre
substana de analizat i o substana de referin (inert
din punct de vedere termic, nu prezint schimbri de
faz pe domeniul de temperatur al experimentului)
26
Analiza Termic Diferenial (TDA)
Transformri fizice i chimice cu sau fr
modificarea masei:
Tranziii endoterme: deshidratare, topire, sublimare, transformri
polimorfice
Tranziii exoterme: descompunere, recristalizare, degradare oxidativ
Ex. Degradarea oxidativ a gruprilor alcoxil dintr-un
gel de silice
dT=0, n prob nu are loc nici o transformare
27
Analiza Termic Diferenial (TDA).
Aplicaii
1. Determinarea identitii

2. Determinarea puritii

3. Determinarea cantitativ:
T= G/KdH/dT
G = cantitatea de substan din prob
K = conductibilitatea termic a probei;
dH/dT = cantitatea de cldur consumat sau degajat pe unitatea
de timp prin transformarea termic a unui gram de substan
28
ANALIZA CALORIMETRIC DIFERENIAL
(DSC)
Principiu
Aplicaii n analiza medicamentului
29
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Principiu
Differential Scaning Calorimetry (DSC)
msurarea energiei calorice care nsoete
schimbrile de faz ca urmare a unei variaii de
temperatur pentru o prob meninut la
acelai regim de temperatur cu o prob de
referin

Scanare- analizare
Calorimetru- instrument pentru msurarea cldurii
sau a fluxului de cldur
Diferenial- se folosesc dou calorimetre (prob,
referin) cu acelai transfer de cldur
30
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Principiu
Dac apare o diferen de temperatur ntre prob i referin, datorat
unei schimbri de faz ce apare n prob, este nlocuit energia pn cnd
aceast diferen de temperatur este mai mic dect o valoare de baz (<
0,01K);
Se obin curbe: debitul de cldur (mW) = f (T) sau f (t)
31
Analiza Calorimetric Diferenial
(DSC)
Aparatura
Analizor calorimetric diferenial

Senzori pentru temperatur:
FRS5 (Full Range Sensor)- 56
termocupluri
Domeniul de temp.:-150-700C
HSS7 (High Sensitive Sensor)- 120
termocupluri
Domeniul de temp.:-150-500

Principiul de funcionare al senzorilor:
Legea lui Ohm:
=T/R = debitul de cldur
T = variaia de temperatur (T
P
-T
R
)
R = rezistena termic
FRS5
HSS7
32
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Aparatura
Sisteme de rcire:
Aer: 25C
Criostat: -40C
Intracooler: -75C
Azot lichid: -150C

Comutator de gaze
Creuzete
Aluminiu (20l, 40l, 100l, 160l);
cupru, alumin (Al
2
O
3
)
,
platin, aur, sticl, oel
cu sau fr capac

Pres
Calculator pentru programare i pentru
nregistrarea rezultatelor
33
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Prepararea probelor
Probe curate, pstrate corespunztor;

Probe solide, pulberi, dure, paste, lichide, fibre

Instrumente de lucru curate;

Viteza de nclzire: 0,1- 60K/min;

Autosampler;

Atmosfera din jurul probei:
nu exist schimb de gaze (creuzet nchis ermetic);
schimb liber de gaze (creuzet deschis);
schimb redus de gaze (creuzet nchis dar cu gaur n capac).
34
Analiza Calorimetric Diferenial
(DSC)
Prepararea probelor
Alegerea creuzetelor:
Aluminiu standard 40L cu capac gurit;

Pentru o bun separare a picurilor:
aluminiu 20L, He, N
2
- gaz de purjare;

Probe ce conin umiditate sau solvent:
Creuzet standard nchis ermetic;
Dac intereseaz evaporarea: capac cu gaur i gaz de purjare.

Probe ce reac. cu Al:
Creuzet de Au, sticl, Pt, ceramic
35
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Pregtirea analizei
1. Ce informaii se ateapt?
Proprieti fizice;
Tranziii de faz, polimorfism;
Reacii chimice, descompunere.

2. Se realizeaz mai nti o analiz TGA

3. Programul de temperatur:
Temperatura de nceput i de sfrit
Organice: 25-350C;
Anorganice: 25- 600C;
Viteza de nclzire.
4. Se alege tipul de creuzet:
Al, Pt;
Deschis, nchis, capac cu gaur

5. Atmosfera:
Gaz de purjare (inert sau reactiv)- N
2

6. Prepararea probei:
Geometria probei;
Cantitatea:
Organice: 1-10mg;
Anorganice: 10-30mg
36
Analiza Calorimetric Diferenial (DSC)
Aplicaii
Determinarea identitii;

Determinarea polimorfismului;

Determinarea puritii;

Determinarea interaciunilor medicamentelor n
stare solid.
37
Aplicaii DSC. Determinarea identitii
Picuri endo-, exoterme- schimbri de faz:
modificri cristaline, topire, desolvatare
Ex. Termograma DSC atenolol- topire (~150C)
38
Aplicaii DSC. Determinarea identitii
Termograma DSC betaciclodextrin:
Deshidratare (~100C)
Topire cu descompunere (~300C).
39
Aplicaii DSC. Determinarea identitii
Termograma TGA betaciclodextrin:
Deshidratare (~100C)
Topire cu descompunere (~300C).
40
Aplicaii DSC. Determinarea identitii
Termograma DSC, TG indapamid:
Deshidratare (~100C)
Topire (167,95C)
Descompunere (peste 212 C)
41
Polimorfii (ghid FDA-ANDAs: Pharmaceutical Solid
Polymorphism. July 2007):
Diverse forme cristaline,
Diverse forme amorfe,
Solvai ai diverselor forme cristaline
ale unei substane medicamentoase

Polimorfismul:
Influeneaz stabilitatea,
solubilitatea, biodisponibilitatea unui
medicament
Afecteaz calitatea, sigurana i
eficacitatea unui produs
medicamentos
Analiza termic (Analiza calorimetric diferenial (DSC), Analiza
termogravimetric (TG))- metode folosite n scopul caracterizrii
polimorfilor unei substane medicamentoase
Aplicaii DSC. Determinarea
polimorfismului
Reprezentarea schematic
a diverselor tipuri de forme solide
42
Obinerea i analiza diverselor forme
solide ale indapamidului
Indapamidul (IDP):







4-Cloro-N-[(2-metil-2,3-dihidro-1H-indol-1-il]-3-
sulfamoilbenzamida
Diuretic din clasa diureticelor nrudite cu tiazidele
Tratamentul hipertensiunii arteriale eseniale

S
O O
Cl
N
H
O
N
H
CH
3
H
2
N
43
Obiective:
Obinerea de forme polimorfice ale indapamidului (IDP)
prin recristalizarea acestuia din diveri solveni/amestecuri
de solveni

Evidenierea obinerii acestor noi forme polimorfice ale IDP
i caracterizarea lor folosind analiza termic:
Analiza calorimetric diferenial (DSC),
Analiza termogravimetric (TG)

Obinerea i analiza diverselor forme
solide ale indapamidului
44
Substan de referin/solveni pentru recristalizare:
Indapamid (IDP) (Pharmazell, Germania)
Metanol, Tetraclorur de carbon, Acetat de etil, Acid acetic
glacial, Acetonitril (Merck)
Diclormetan, Dietileter (Sigma Aldrich)

Prepararea formelor solide ale IDP prin recristalizare
din:
Metanol
Acetat de etil
Acetonitril
Metanol+tetraclorur de carbon
Acetonitril+diclormetan
Acetonitril+dietileter
Obinerea i analiza diverselor forme
solide ale indapamidului
45
Echipamente i metode de analiz:
Metoda DSC
Echipament Mettler Toledo DSC 822
creuzete: aluminiu, 40L
gaz de purjare: N
2
, 50mL/min
interval de temperatur: 25- 400C
vitez de nclzire: 10C/min

Metoda TG
Echipament Mettler Toledo TGA/SDTA 851e
creuzete: alumin, 70L
gaz de purjare: N
2
, 50mL/min
interval de temperatur: 25- 600C
vitez de nclzire: 10C/min

Obinerea i analiza diverselor forme
solide ale indapamidului
46
Analiza DSC evideniaz obinerea unei noi forme solide a
IDP n urma recristalizrii din acetonitril+eter etilic i de
asemenea evideniaz mici modificri i n cazul IDP
recristalizat din acetonitril


n cazul recristalizrii IDP din acetonitril+diclormetan,
metanol, metanol+tetraclorur de carbon, acetat de etil,
acid acetic glacial+tetraclorur de carbon, tehnica DSC nu
a evideniat modificri fa de compusul iniial
47
Principiile active- supuse la cicluri de nclzire- rcire;
Dup rcire apar picuri endoterme la temp. diferite fa de cele ale prod.
iniial- topirea polimorfului aprut n cursul recristalizrii

Ex. Sulfapiridina

Metoda DSC:
creuzete: aluminiu, 40L
gaz de purjare: N
2
, 50mL/min
interval de temperatur: 40- 200C (mai nti rcire brusc)
rata de nclzire: 5C/min
48
Aplicaii DSC. Determinarea
polimorfismului
Termograma DSC a
sulfapiridinei
49
Aplicaii DSC. Determinarea
polimorfismului
Aplicaii DSC. Determinarea puritii
Impuritile:
Scad p.t. al produsului iniial;
Modific aspectul curbei de topire sau recristalizare;

Determinarea catitativ a impuritilor- ecuaia
Vant Hoff:

T = RT
0
2
X
2
Hf

T = T
0
-T
m
;
R = const. gazelor perfecte;
T
0
= temp. de topire a subst. pure;
T
m
= temp de topire a probei analizate;
X
2
= fracia molar de impuritate;
Hf = entalpia de topire a probei (Kcal/mol).
50
Aplicaii DSC. Determinarea
interaciunilor medicamentelor n stare
solid
A. Studierea interaciunilor medicamentelor cu
excipienii
B. Studierea interaciunilor medicamentelor cu
ciclodextrine

Dovezi ale apariiei interaciunilor:
Apariia de picuri suplimentare
Dispariia unor picuri fa de substanele pure
Modificarea temperaturilor la care apar anumite
picuri fa de cele ale subst. pure
51
O formulare farmaceutic este considerat corespunztoare n lipsa
interaciunilor substan medicamentoas-excipient sau excipient-
excipient

Existena unor posibile incompatibiliti ntre substana medicamentoas
i excipieni este o problem studiat n cadrul etapei de preformulare a
unei forme farmaceutice

Formularea cu succes a unei forme farmaceutice stabile i eficiente
depinde de selectarea corect a excipienilor

Analiza calorimetric diferenial DSC- metod folosit n scopul
evidenierii prezenei sau absenei incompatibilitilor substan
medicamentoas-excipient
Aplicaii DSC. Studierea interaciunilor
medicamentelor cu excipienii
52
Studii de compatibilitate indapamid/excipieni n etapa de
preformulare a comprimatelor IR 2,5mg/cp
Obiective
Caracterizarea indapamidului i a excipienilor

Evidenierea compatibilitii ntre indapamid i
excipieni n etapa de preformulare a comprimatelor cu
cedare imediat (2,5 mg/cp)

Folosind:
Analiza calorimetric diferenial (DSC)
Analiza termogravimetric (TG)
53
Substan de referin/Excipieni:
Indapamid (Pharmazell, Germania)
Excipieni:
lactoza monohidrat (Meggle, Germania)
celuloza microcristalin (JRS Pharma, Germania)
amidonglicolat de sodiu (JRS Pharma, Germania)
polivinilpirolidona (BASF, Germania)
aerosil (Degusa, Germania)
stearatul de magneziu (Union Derivan, Spania)

Amestecurile binare ale IDP cu fiecare
excipient n parte, obinute prin omogenizare
n mojar.
Studii de compatibilitate indapamid/excipieni
n etapa de preformulare a comprimatelor IR
2,5mg/cp
54
Aplicaii DSC. Studierea interaciunilor
medicamentelor cu ciclodextrine
Ciclodextrinele:
oligozaharide ciclice obinute prin degradarea
enzimatic a amidonului
parte exterioar hidrofil -
solubilitate n ap
cavitatea intern hidrofob gazde
pentru molecule lipofile

Compleci de incluziune:
modificri favorabile ale proprietilor fizico-
chimice (solubilitate), stabilitate, caracteristici
organoleptice i biofarmaceutice
(biodisponibilitate) ale substanelor incluse
55
Structura chimic i forma toroidal
a moleculelor de ciclodextrin
Obiectiv:
Obinerea i analiza unor compui de incluziune ai
metoprololului n ciclodextrin (BCD)
Obinerea i analiza unor compui de incluziune ai
metoprololului n ciclodextrin (BCD)
Metode de preparare ale amestecurilor binare
IDP/BCD (1:1, m/m):
Amestecare fizic
Frmntare
Coprecipitare
Liofilizare

Metoda de analiz (DSC):
creuzete: aluminiu, 40L;
gaz de purjare: N
2
, 50mL/min
interval de temperatur: 50- 400 C;
rata de nclzire: 10C/min
56
Analiza produilor rezultai n urma analizei
termice:

1. Spectrometrie de mas (SM);

2. Spectroscopie IR cu transformant Fourier (FT-IR);

3. Gaz cromatografie (GC).
Tehnici de analiz termic cuplate
57
Tehnica
Abreviere Proprietatea
nregistrat
Fenomene
analizate
Analiza termic optic
(Termomicroscopia)

ATO Proprieti optice Topirea
Desolvatarea
Analiza
termogravimetric
TGA Variaia de mas Descompunere
Oxidare,
deshidratare
Analiza termic
diferenial
TDA Variaia de entalpie Schimbri de faz
Reacii chimice
Analiza calorimetric
diferenial
DSC Debitul de cldur Schimbri de faz
Reacii chimice
Capacitatea caloric
Tehnici de analiz termic
58