Laborator 3

TEHNICA EFECTUARII SECTIUNILOR SI PREPARATELOR

MICROSCOPICE PROVIZORII DE MATERIAL VEGETAL

Orice material biologic ce urmeaza a fi studiat le microscop, trebuie pregatit in prealabil pentru
a putea fi cercetat. Majoritatea obiectelor vegetale trebuiesc studiate in sectiuni fine pentru a
putea capata transparenta necesara examinarii la microscopul optic. Efectuand sectiuni in
diferite planuri ne putem da astfel seama, la analiza sectiunilor, de structura tridimensionala a
tesutului respectiv. Cea mai frecventa sectionare este cea transversala, dar ea poate fi:
• Longitudinala
• Oblica sau
• Tangentiala (perpendiculara pe raza)

In cazul organelor plane, de ex. lamina frunzelor (lamina partea principală a frunzei, este foarte
variabilă ca formă ), sectiunile se fac paralel sau perpendicular fata de suprafata organului.

1
Sectiunile se pot face cu un brici (sectiuni de mana) sau cu ajutorul microtomului (Fig. 1).

Fig. 1. Brici (stanga); Microtom (dreapta)

Microtomul realizează secţionarea fragmentelor de organe, prelucrate în prealabil şi incluse în
parafină, răşini sau metacrilat, în vederea realizării de preparate histologice. Grosimea sectiunii
se poate seta intre 0 si 60 µm in diviziuni de 0.5, 1, 2 sau 5 µ.
In functie de starea celulelor de studiat, preparatele microscopice se clasifica in :
 Preparate proaspete – se realizeaza atunci cand vrem sa studiem structura unui tesut
sau organ in stare proaspata (vie). In acest caz, materialele botanice trebuie sa prezinte
o consistenta potrivita sectionarii; sau
 Preparate permanente sau durabile (frotiuri), ele rezista in timp si care permit un
studiu amanuntit al celulelor pe piese fixate si colorate.
MOD DE LUCRU
• Obiectul de sectionat se tine intre degetul mare, cel aratator si degetul mijlociu al
mainii stangi, iar cu cealalta mana se tine briciul. Pentru a evita tremuratul mainilor
se aseaza ambele coate pe masa de lucru.
• Obiectul de sectionat trebuie sa prezinte in primul rand o suprafata de taiere neteda.
Pentru aceasta se sectioneaza cu lama o portiune subtire de la suprafata obiectului.
• Se realizeaza mai multe sectiuni care se pun in cateva picaturi de apa pe lama de unde
pot fi luate cu ajutorul unei pensete sau cu o pensula.
• Peste sectiuni se pun 1-2 picaturi dintr-un colorant specific, in care se mentin cateva
minute, pana cand sectiunile incep sa capete culoarea corespunzatoare colorantului
utilizat.
• Observatii microscopice.