Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Masterand:
Oana-Elena PASCARIU
2020
BRUNIFICAREA ENZIMATICĂ
A FRUCTELOR ŞI LEGUMELOR – lucrare practică
MATERIALE
- pahare din sticlă;
- cuțit de inox, pensă de inox;
- cântar, cană gradată;
- pipetă 1 mL;
- apă distilată;
- miere polifloră;
- acid acetic, acid ascorbic, acid citric.
MATERIAL VEGETAL UTILIZAT: mere, pere, banane, cartofi albi, cartofi roz.
MOD DE LUCRU
1. Pregătirea soluțiilor.
2. Se taie felii din fructele analizate, cu ajutorul unui cuţit de inox.
3. Pe o bucată uscată de şerveţel se plasează o felie considerată “martor”.
4. Cu ajutorul unei pense de inox sau plastic se imersează timp de 30” câte o felie în fiecare soluţie de
lucru şi apoi se plasează pe un şerveţel uscat şi curat. Se notează timpul în tabelul pentru consemnarea
rezultatelor şi se evaluează gradul de brunificare la intervalele de timp menţionate în tabel.
REZULTATE
Martor Apă Acid ascorbic Acid citric Acid acetic Acid acetic Acid ascorbic și
TIMP 0,1% 0,1% 0,1% 1% miere polifloră
(minute) M P B CA CR M P B CA CR M P B CA CR M P B CA CR M P B CA CR M P B CA CR M P B CA CR
T0 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
10 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
20 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
30 2 1 2 1 1 2 1 2 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 2 1 2 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1
40 2 1 2 1 1 2 1 2 1 1 2 1 2 1 1 2 1 1 1 1 2 1 2 1 1 2 1 1 1 1 2 1 1 1 1
50 2 1 2 1 1 2 1 2 1 1 2 1 2 1 1 2 1 1 1 1 2 1 2 1 1 2 1 1 1 1 2 1 2 1 1
60 3 1 3 1 1 3 1 2 1 1 3 1 2 1 1 3 1 1 1 1 3 1 2 1 1 2 1 2 1 1 3 1 2 1 1
INTERPRETAREA REZULTATELOR
În urma lucrării practice efectuate am constatat faptul că probele martor au prezentat cel mai intens grad de brunificare a merelor și bananelor, datorat
oxidării polifenolilor. Probele martor de pară și cartofi nu au prezentat apariția brunificării.
Imesarea în apă a avut efecte pozitive asupra încetinirii procesului de brunificare. Rata de transformare a polifenolilor în melanină fiind mai mică
datorită formării unei bariere între suprafața secționată și oxidenul atomic, prin hidratarea și gonflarea celulelor.
Acidularea soluțiilor a avut, de asemenea, efecte pozitive. Soluțiile cu pH mai ridicat (acid ascorbic 0,1 %, acid citric 0,1 % și acid acetic 0,1%) au
determinat ca fructele și legumele imersate în acestea să prezinte o brunificare tardivă, fiind cunoscut faptul că acizii ascorbic și citric au rol antioxidant.
Soluția cu pH scăzut (acid acetic 1%) a fost cea mai eficientă în procesul de inactivare a polifenolazelor, având cel mai puternic efect antioxidant. La
aceasta nu a contribuit natura acidului, ci concentrația sa în soluție. Aciditatea mediului mărește și rezistența acidului ascorbic din componența fructului
față de acțiunea oxigenului.
Soluția de acid ascorbic și miere polifloră a avut efect antioxidant datorită acidului menționat, dar și a acizilor organici din compoziția mierii.
ÎNTREBĂRI CURS
1. Precizați care sunt principalele modificări care apar în timpul coacerii fructelor și legumelor.
-fructe climacterice: au nevoie de etilenă pentru coacere, de ex: roșie, măr, banană, mango, piersică,
pară, avocado, pepene galben;
-fructe non-climacterice: nu au nevoie de etilenă pentru coacere, de ex: citrice, struguri, pepene verde,
căpșuni;
La fructele climacterice, respirația este intensificată, crește producția de etilenă, fructele de
desprind de pe ramuri (măr, caisă, banană, guava, kiwi). La fructele non-climacterice, respirația nu
este modificată, se produce mai puțină etilenă, coacerea se face în pom/vrej (cireșe, castravete,
strugure, grapefruit, lămâie).
- sucroză;
amidonul
fruct - glucoză;
coacere
- fructoză.
ENZIMELE
1. Generalități
Enzimele pot îmbunătăți sau modifica proprietățile funcționale și senzoriale ale alimentelor și
ale componentelor alimentare. Utilizarea enzimelor în alimentele tradiționale precum berea, brânza
sau preparatele alimentare fermentate este un proces vechi. Cu toate acestea, odată cu progresele
biotehnologiei de-a lungul anilor, enzimele au jucat un rol major în procesarea și producerea
alimentelor, permițând avantaje într-o gamă largă de procese industriale. În ciuda utilizării pe scară
largă a enzimelor în industria alimentară, aceste cunoștințe au fost utilizate recent pentru a optimiza
procedurile și pentru a crea noi feluri de mâncare în domeniul culinar.
Există dovezi privind utilizarea umană a enzimelor începând cu 6000 î.C., când chinezii,
egiptenii și sumerienii au elaborat diverse alimente și băuturi, precum brânză, iaurt și chefir, pâine,
bere, oțet, vin și alte băuturi fermentate.
La sfârșitul secolului optsprezece, când procesele enzimatice au început să câștige
popularitate, Lazzaro Spallanzani a afirmat: carnea a fost transformată în lichid datorită acțiunii
lichidelor digestive în stomacul păsărilor.
La începutul secolului al XIX-lea, Jean François Persoz și Anselme Payen, doi chimiști care
lucrau într-o fabrică de zahăr, au descoperit un extract din orz încolțit, care era capabil să transforme
pasta de amidon într-un lichid dulce și transparent. Tot în secolul al XIX-lea, Louis Pasteur a folosit
termenul de ferment pentru a denumi drojdia care transformă zahărul în alcool. Wilhelm Kühne a fost
prima persoană care a introdus termenul enzimă. La sfârșitul secolului al XIX-lea, Eduard Buchner a
făcut o distincție între termenul enzimă și termenul ferment făcut de Pasteur, indicând că fermentația
a apărut doar atunci când microorganismul este viu. [1]
În zilele noastre, Comisia Europeană definește enzimele drept „proteine naturale care
îmbunătățesc reacțiile biochimice” și enzima alimentară drept „produs obținut din plante, animale sau
microorganisme sau produse ale acestora, inclusiv un produs obținut printr-un proces de fermentație
folosind microorganisme: care conține una sau mai multe enzime capabile să catalizeze o reacție
biochimică specifică și adăugate la alimente în scop tehnologic în orice etapă de fabricație, prelucrare,
preparare, tratare, ambalare, transport sau depozitare a alimentelor ”(Parlamentul European și
Consiliul, 2008). [1]
Atunci când consumăm alimente, enzimele prezente în acestea sunt activate la contactul cu
umezeala și căldura din cavitatea bucală și, alături de enzimele produse natural de organism digeră o
parte din mâncare înainte ca aceasta să ajungă în stomac. În stomac dau de alte enzime care le
mărunțesc și mai mult pentru ca mai apoi să intre în scenă enzimele metabolice care să folosească
nutrienții extrași din alimente pentru a face să funcționeze toate procesele din corp de la organe și
țesuturi la principalele sisteme (circulator, pulmonar, nervos, renal).
Enzimele au o importanță deosebită în organism, de exemplu, pentru a degrada molecule mari,
cum ar fi proteine (proteaze), amidon (amilaze) sau lipide (lipaze) în molecule mai mici. Pe lângă
rolurile menționate anterior, enzimele luate din alimente sau suplimente alimentare pot fi de ajutor în
tratarea unor probleme de sănătate. [1]
În ciuda faptului că enzimele sunt benefice la orice nivel (atunci când sunt produse de
organism), cele ingerate nu au fost studiate îndeajuns. Mai jos sunt câteva dintre beneficiile enzimelor,
așa cum reiese din studiile științifice:
a) Ajută în sindromul de intestin iritabil – o enzimă cunoscută sub numele de pancrelipază poate
reduce din simptomele asociate problemelor intestinale. Potrivit unui studiu publicat în 2011, un grup
de persoane a primit pancrelipază iar celălalt un placebo. Rezultatele au arătat o reducere mai mare a
simptomelor în cazul celor care au luat enzima. Un alt studiu, a conchis că administrarea unui
supliment pe bază de beta-glucan și inositol, două enzime digestive, ajută la reducerea durerii
abdominale, a balonării și a flatulenței.
b) Reduce din simptomele colitei (boala inflamatorie intestinală) – în acest caz, administrarea
bromelainei s-a dovedit a fi un succes. Un studiu realizat pe rozătoare a arătat că bromelaina reduce
inflamațiile colonului asociate persoanelor afectate de colită. Mai mult, cercetătorii au arătat că
enzimele (în cazul de față, beta-glucan, inositol și enzime digestive) reduc simptomele bolii
inflamatorii intestinale.
c) Ameliorează simptomele artritei – potrivit unui raport care a analizat nouă studii care vizau legătura
dinte enzime și artrită a arătat că luarea de bromelaină reduce durerea și că efectele persistă similar
administrării medicamentelor tipice în astfel de cazuri (de exemplu, diclofenac).
d) Reduce oboseala musculară de după activitățile sportive intense – potrivit studiilor, administrarea
de protează ajută la refacerea musculară, reduce riscul de accidentare și grăbește vindecarea.
Enzimele pot scădea energia de activare, care este energia necesară pentru a transporta toate
moleculele unei reacții chimice la starea reactivă, prin urmare, enzimele cresc rata de reacție. Fiecare
enzimă catalizează doar o reacție specifică sau un grup de reacții strâns legate.
Enzima se potrivește temporal cu molecula asupra căreia acționează, numită și substrat
enzimatic, pentru a forma substratul enzimatic complex. Când are loc reacția, produsul este eliberat și
enzima se întoarce la starea sa inițială, gata pentru reacție cu un alt substrat.
Consumul excesiv de alimente cu enzime poate acutiza simptomele deja existente.
Bromelaina conținută în ananas poate afecta circulația sângelui, astfel că nu ar trebui
consumată de persoanele care iau medicație pentru afecțiuni ale sistemului cardio-vascular. Gravidele
si femeile care alăptează ar trebui să vorbească cu doctorul înainte de a introduce suplimente pe bază
de enzime sau de a introduce în dietă fructe noi doar pentru a avea mai multe enzime. Enzimele sunt
esențiale funcționării normale a organismului iar lipsa lor sau funcționarea deficitară se soldează mai
ales cu probleme ale sistemului digestiv (balonare, dureri abdominale, diaree).
Activitatea enzimatică este determinată de mai mulți factori, cum ar fi concentrația enzimei,
concentrația substratului, temperatura, pH-ul, concentrația cofactorului (necesară pentru funcționarea
anumitor enzime, de exemplu, ionul de calciu) și concentrația de coenzime (de asemenea, necesară
pentru activitatea enzimatică, de ex. acid folic sau NADH). [1]
Putem diferenția trei moduri de obținere a enzimelor în funcție de sursă. Primul mod ar fi de
la animale. Aceste enzime sunt secretate de diferite organe de la animalul însuși. Unele dintre cele
mai remarcabile exemple sunt amilaza din salivă, pepsina din secreția stomacală și proteza, amilaza
și lipaza din secreția pancreatică. A doua sursă sunt plantele, care sunt și o sursă istorică de enzime
alimentare:
Ananas – conține bromelaină, o enzimă care facilitează absorbția proteinelor;
Papaya – similar ananasului, conține protează necesara digestiei proteinelor însă spre
deosebire de ananas, papaya conține o protează specifică, papaina. Studiile au arătat că
administrarea de suplimente pe bază de papaină reduce simptomele sindromului de intestin
iritabil. Merită știut că fructele de papaya crude sau semi-coapte trebuie evitate de gravide
deoarece stimulează contracțiile;
Mango – conține amilază (enzima necesară fragmentării alimentelor cu amidon), cele mai
bune fiind fructele de mango foarte coapte;
Miere – conține un număr mare de enzime; diastază (transformă amidonul în maltoză),
amilază, invertază, protează (fragmentează proteinele în aminoacizi);
Banane – conține amilază și glucozidază, două enzime care “sparg” carbohidrații complecși în
zaharuri;
Avocado – conține lipază, o enzimă necesară procesării alimentelor cu cantități mari de
grăsimi. Consumul de avocado înlesnește digestia dacă mănânci gras;
Kiwi – conține actinidaină, o protează care ajută digestia proteinelor;
Supa miso – tipică bucătăriei japoneze, această supă conține lactază, lipază, protează și
amilază;
Ghimbir – conține proteaze (mai ales, zinzibaină) iar consumul sub formă naturală sau de ceai
ajută în cazurile de indigestie.
A treia sursă, care este mult mai versatilă sunt microorganismele (ciuperci, bacterii și drojdii).
Microbii au fost folosiți de secole ca responsabili pentru procesele de fermentare a alimentelor, de
exemplu transformarea zahărului în alcool, care se întâmplă în vin.
Enzimele pot fi endogene atunci când sunt secretate de animale sau când sunt prezente în mod
natural în fructe și legume, sau pot fi exogene atunci când sunt izolate și purificate de ciuperci, bacterii
sau drojdii, prin metode biotehnologice. Dezbaterea apare atunci când enzimele endogene ca ficina
din smochin, care ar trebui să acționeze în procesul de maturare a fructului, sunt utilizate în procese
exogene precum coagularea laptelui. Cu toate acestea, enzimele exogene funcționează după aceleași
principii ca cele endogene și au, de asemenea, nevoie de substratul și condițiile adecvate pentru a-și
desfășura activitatea. [1]
Aplicarea enzimelor purificate din surse microbiene a început atunci când au fost descoperite
drept principalii responsabili ai procesului de fermentare. După 1980, mulți oameni de știință au
început să folosească tehnici de inginerie genetică pentru a îmbunătăți producția de enzime și, de
asemenea, pentru a modifica proprietățile enzimelor prin inginerie proteică. Abia în 1926, prima
enzimă a fost obținută în formă pură și a trebuit să aștepte până în 1960 când începe producția de
protează utilizând Bacillus licheniformis la scară comercială. [2]
Biotehnologia microbiană a crescut atât de mult în acest domeniu, încât, în 2004, a fost
sintetizată prima enzimă cu proiectarea computerului, permițându-ne să alegem lanțul de aminoacizi,
structura tridimensională și, în consecință, activitatea proteolitică a acestuia. În plus, aceste noi
microorganisme sunt utilizate pentru a obține enzime din deșeuri sau subproduse și chiar pentru a
obține compuși cu aplicații alimentare din alge sau alte surse. Acest domeniu este extrem de
promițător, iar evoluțiile și oportunitățile în inginerie de tulpini microbiene pentru producerea de noi
enzime și cocktail-uri enzimatice trebuie să îmbunătățească în continuare procesarea alimentelor în
viitorul apropiat. [2]
1. Ana Collados, Víctor Conversa, Marta Fombellida, Silvia Rozas, Jong Hun Kim, Juan Carlos
Arboleya, Manuel Román, Laura Perezábad, „ Applying food enzymes in the kitchen”, International
Journal of Gastronomy and Food Science, 2020, 21, https://doi.org/10.1016/j.ijgfs.2020.100212 .
2. Marie Deckers, Kevin Vanneste, Raf Winand, Marijke Hendrickx, Pierre Becker, Sigrid C.J.D.E.
Keersmaecker, Dieter Deforce, Fraiture Marie-Alice, Nancy Hc Roosens, „Screening strategy
targeting the presence of food enzyme-producing fungi in food enzyme preparations”, Food Control,
2020, https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2020.107295 .