Universitatea de Vest “Vasile Goldiș “ – Arad

Facultatea de Medicină

REFERAT
Diferențe între microscopie electronică de transmisie( TEM) și microscopia
electronica cu baleaj(SEM)

Lector univ. dr. Mihali Ciprian Valentin student Piț Ioana

2020

Pagină 1 din 8
 Cuprins

1. Introducere

2. Aspecte generale privind microscopia electronică

3. Diferențe între TEM și SEM

4. Concluzii

5. Bibliografie

Pagină 2 din 8
 1. Introducere

Prezenta lucrare prezintă câteva date despe diferențele dintre microscopia electronica cu
transmisie ( TEM) și microscopia electronica cu baleaj ( SEM).

2. Aspecte generale privind microscopia electronică

Comparativ cu un microscop optic, microscopul electronic realizează o rezoluție și o

mărire mult mai mare profitând de aspectul de undă al electronilor. Lungimea de undă a unui
electron este în mod obișnuit de 1/10000 a luminii vizibile. S-au obținut rezoluții de mărire de
50 pm și 10 milioane-X, mult mai bune decât rezoluția de 200 mm și mărirea 2.000X a unui
microscop optic de laborator.[https://www.testandmeasurementtips.com/the-difference-
between-scanning-electron-microscopes-and-tunneling-scanning-electron-microscopes-faq].

Microscopia electronică (EM) este o tehnică pentru obținerea de imagini de înaltă

rezoluție a specimenelor biologice și non-biologice. Este utilizat în cercetarea biomedicală
pentru a investiga structura detaliată a țesuturilor, celulelor, organelor și complexelor
macromoleculare. Rezoluția înaltă a imaginilor EM rezultă din utilizarea de electroni (care au
lungimi de undă foarte scurte) ca sursă de radiație iluminatoare. Microscopia electronică este
utilizată împreună cu o varietate de tehnici auxiliare (de exemplu, secțiune subțire, etichetare
imuno, colorare negativă) pentru a răspunde la întrebări specifice. Imaginile EM oferă
informații cheie privind baza structurală a funcției celulare și a bolii celulare
[https://www.umassmed.edu/cemf/whatisem].

Deși microscoapele electronice sunt costisitoare și necesită mult mai mult spațiu pentru
instalarea echipamentului, micrografele electronice pe care le generează justifică investițiile
de capital. Ele dau mai multe detalii despre structurile biologice decât datele generate prin
EM.

Există cinci etape de bază implicate în toate microscoapele electronice și anume:

1. Un flux de electroni de înaltă tensiune (de obicei 5-100 KeV) este format de sursa de
electroni (de obicei un tungsten încălzit sau un filament cu emisii de câmp) și accelerat
în vid spre epruvetă folosind un potențial electric pozitiv;
2. Acest flux este limitat și focalizat folosind deschideri metalice și lentile magnetice
într-un fascicul subțire, focalizat, monocromatic;
3. Acest fascicul este focalizat pe eșantion folosind un obiectiv magnetic;
4. Interacțiunile au loc în interiorul eșantionului iradiat, afectând fasciculul de electroni;
5. Aceste interacțiuni și efecte sunt detectate și transformate într-o imagine,
[www.va.gov/DIAGNOSTICEM/What_Is_Electron_Microscopy_and_How_Does_It_
Work.asp].

Pagină 3 din 8
 3. Diferențe între TEM și SEM

Există mai multe tipuri de microscoape electronice, clasificate în funcție de utilizarea lor
finală. Microscopul electronic de transmisie și microscopul electronic de scanare sunt două
dintre cele mai frecvente tipuri de microscop electronic. Uneori TEM și SEM sunt combinate
într-un singur instrument, microscopul electronic cu transmisie de scanare (STEM).
In imaginea 1 sunt prezentate niște imagini obținute prin microscopie electronică de
transmisie și microscopie electronică cu baleaj:

Imag. 1 – Imagini obținute cu TEM și SEM [https://microbeonline.com/difference-electron-

microscopy-between-sem-tem]

În TEM, electronii din pistolul de electroni trec printr-o lentilă de condensator înainte de a
întâlni specimenul, aproape de obiectiv. Cea mai mare parte a măririi probei este realizată de
sistemul de obiective. Imaginea este vizualizată printr-o fereastră de la baza coloanei și
fotografiată folosind un film sau, mai recent, o cameră CCD, prin ridicarea ecranului
fluorescent cu balamale.
TEM este un instrument foarte puternic pentru știința materialelor. Un fascicul de energie
mare de electroni este luminat printr-un eșantion foarte subțire în care se pot observa
interacțiunile dintre electroni și atomi. În plus, poate fi efectuată și analiza chimică. Rezoluția
înaltă permite analiza calității, formei și dimensiunii, precum și a densității.
TEM folosește electroni în loc de lumină pentru a dezvălui cele mai fine detalii ale
structurilor interne, chiar și până la atomi individuali.
TEM oferă cea mai puternică mărire și, ca atare, are o gamă largă de aplicații, care toate
ajută la furnizarea de informații atât asupra structurii elementului, cât și a compusului. Cu

Pagină 4 din 8
toate acestea, în ciuda avantajelor măririi și versatilității, există anumite dezavantaje care
trebuie luate în considerare. În imaginea 2 este prezentat un microscop electronic de
transmisie:

imag 2 – microscop de transmisie electronica

[http://chem.ubbcluj.ro/~diudea/proiecte/capacitati/ro/achizitii.html]

SEM scanează un fascicul de electroni focalizat pe o suprafață pentru a crea o imagine

care poate fi utilizată pentru a obține informații despre topografia și compoziția suprafeței.
Funcționează pentru a produce imagini prin scanarea eșantionului cu un fascicul de energie
mare de electroni. Pe măsură ce electronii interacționează cu proba, aceștia produc apoi
electroni secundari, electroni retrasi și raze X caracteristice.
Există o serie de beneficii asociate utilizării SEM. Cu toate acestea, în funcție de
informațiile solicitate sau de tipul eșantionului, există și unele dezavantaje ale acestei metode
de imagistică. Înainte de a decide să utilizăm SEM, trebuie să luăm în considerare tipul de
eșantion și informațiile solicitate [ https://www.atascientific.com.au/comparing-sem-tem-
understanding-the-pros-and-cons].
În SEM, electronii de la pistolul de electroni sunt focalizați într-un punct fin la suprafața
specimenului cu ajutorul sistemului de lentile. Acest punct este scanat pe specimenul sub
controlul curenților din bobinele de scanare situate în lentila finală. Electronii secundari de
joasă tensiune sunt emiți de pe suprafața specimenului și sunt atrași de detector. Detectorul
transmite semnalele către o consolă electronică, iar imaginea apare pe ecranul computerului.

Pagină 5 din 8
 În figura 1 sunt prezentate schematic structura unui microscop electronic de transimisie si
structura unui microscop electronic cu baleaj:

Fig 1 – Structura TEM și SEM

[https://commons.wikimedia.org/wiki/File:OSC_Microbio_02_03_ElMicSchem.jpg]

În articolul “Difference between Scanning Electron Microscopy (SEM) and

Transmission Electron Microscopy (TEM)“ de pe site-ul www.microbeonline.com , Acharya
Tankeshwar mai jos este prezentat un tabel cu diferențele dintre TEM și SEM:

Proprietăți Microscopie electronică cu Microscopie electronica de

baleaj ( SEM)
Sursa de lumina SEM se bazează pe electroni
împrăștiați, adică electroni
emiși de la suprafața unui
specimen.
Scop SEM oferă imagini detaliate
ale suprafețelor celulelor. El
se concentrează pe suprafața
eșantionului și compoziția
acestuia, astfel încât el arată
doar morfologia probelor.
transmisie ( TEM)
Electronii sunt folosiți ca
„sursă de lumină”. TEM se
bazează pe electronii
transmiși și funcționează pe
aceleași principii de bază ca
și microscopul optic
TEM este utilizat pentru
vizualizarea epruvetelor
subțiri (secțiuni de țesut,
molecule etc.). TEM poate
arăta multe caracteristici ale
eșantionului, cum ar fi
compoziția internă,
morfologia, cristalizarea etc

Proprietăți Microscopie electronică cu Microscopie electronica de

Pagină 6 din 8

Prepararea probelor
baleaj ( SEM)
Proba este acoperită cu un
strat subțire dintr-un metal
greu, cum ar fi aurul sau
paladiul.
transmisie ( TEM)
Proba trebuie tăiată subțire
(70-90 nm) deoarece
electronii nu pot pătrunde
foarte departe în materiale

Rezoluția SEM poate analiza obiecte TEM are o rezoluție mult

Mărirea
Procesarea eșantionului
Formarea imaginii
Poza 3D
Aplicatii curente
cât mai aproape de 20 nm mai mare decât SEM. Poate
analiza obiecte de aproape 1
nm adică până la niveluri
atomice .
Puterea de mărire a SEM Puterea de mărire a TEM
este de până la 50.000X. este de până la 2 milioane de
ori
SEM permite analizarea unei Cu TEM doar o cantitate
cantități mari de eșantion mică de eșantion poate fi
simultan analizată simultan
Electronii secundari sau Electronii transmisi au lovit
retrospectivi care decurg din un ecran fluorescent dând
interacțiunea fasciculului de naștere unei „imagini de
electroni și epruvetele umbră” a specimenului, cu
metalice sunt colectați, iar părțile sale diferite afișate în
imaginea rezultată este întuneric variat în funcție de
afișată pe ecranul densitatea lor. Imaginea
computerului poate fi studiată direct de
către operator sau
fotografiată cu o cameră foto
SEM oferă o imagine TEM oferă o imagine în
tridimensională bidimensională.
Studierea topografiei și Pentru a vizualiza interiorul
compoziției atomice a celulelor (în secțiuni subțiri),
epruvetelor, controlul structura moleculelor de
procesului și, de exemplu, proteine (contrastată de
distribuția suprafeței imuno- umbrire metalică),
etichetelor organizarea moleculelor în
virusuri și filamente cito-
scheletice (pregătite prin
tehnica de colorare negativă)
și dispunerea moleculelor de
proteine în celule membrane
(prin congelare-fractură).

Tabel nr 1 – Diferențe dintre microscopia electronică cu baleaj si microscopia electronică de

transmisie

Pagină 7 din 8
 4. Concluzii

Deși ambele tipuri de microscoape electronice includ mijloace de imagini electronice,

există unele diferențe cheie între cele două. În cazul microscopiei electronice cu baleaj,
imagistica detaliată, tridimensională și topografică, precum și informațiile versatile pe care le
oferă acestea, reprezintă un motiv mare pentru care SEM este atât de eficient. Pe de altă parte,
TEM folosește electroni energetici pentru a furniza informații morfologice, compoziționale și
cristaline bidimensionale pe probe. Ambele microscoape electronice sunt importante în
aplicațiile lor.

5. Bibliografie

1. https://www.testandmeasurementtips.com/the-difference-between-scanning-electron-
microscopes-and-tunneling-scanning-electron-microscopes-faq
2. https://www.umassmed.edu/cemf/whatisem
3. www.va.gov/DIAGNOSTICEM/
What_Is_Electron_Microscopy_and_How_Does_It_Work.asp
4. https://microbeonline.com/difference-electron-microscopy-between-sem-tem
5. https://www.atascientific.com.au/comparing-sem-tem-understanding-the-pros-and-
cons
6. https://commons.wikimedia.org/wiki/File:OSC_Microbio_02_03_ElMicSchem.jpg
7. Acharya Tankeshwar “Difference between Scanning Electron Microscopy (SEM) and
Transmission Electron Microscopy (TEM)“, Microbeonline, 14.12.2019

Pagină 8 din 8