Proiectul „Genomul

uman”

Referat întocmit pentru disciplina:

Științe
Elev: Bădescu Florentina
Clasa: a XII-a C
Profesor coordonator: Boldea Daniela
Data: 11.09.2022
 Cuprins

1. Ce reprezintă „Proiectul 《Genomul uman》” ?

„Este o carte de istorie – o narațiune despre călătoria speciei noastre în timp. Este un manual
al magazinului, cu un model incredibil de detaliat pentru construirea fiecărei celule umane. Și
este un manual de transformare a medicinei, cu idei care vor oferi furnizorilor de servicii
medicale imense noi puteri de a trata, preveni și vindeca boala.”

Francis Collins, februarie 2001

2. Genomul uman și secvențierea ADN-ului.

A. Ce este ADN-ul?
B. Secvențierea ADN.
C. Metodele pentru determinarea secvenței nucleotidice :
1. Tehnica de sinteză enzimatică (Sanger).
2. Tehnica de degradare chimică (Maxam-Gilbert).
D. Cromozomul artificial bacterian (BAC).

3. Cartografierea genetică.
4. Concluzie generală.
5. Bibliografie.
 1. Ce reprezintă „Proiectul《Genomul uman》” ?

Proiectul genomului uman (HGP) a fost programul genom¹= [ génome, franceză]

de cercetare colaborativ internațional al cărui totalitatea genelor prezente în
obiectiv a fost cartografierea și înțelegerea completă cromozomii unui organism
(sau în setul haploid de
a tuturor genelor ființelor umane.
cromozomi), care conține
Totalitatea genelor noastre sunt cunoscute sub informația genetică necesară
numele de „genomul¹ nostru”. Peste 2.800 de formării organismului.
savanți care au luat parte la consorțiul de cercetare² consorțiu de cercetare²=
au împărțit dreptul de autori ai acestui studiu de înțelegere încheiată între mai
amploare care a revelat din tainele geneticii ființei multe societăți de cercetare
umane. pentru efectuarea în comun a
unor operații avantajoase.
Cercetătorii HGP intenționau prin
hărți de linkage³=
descifrarea genomului uman să atingă trei obiective
reprezentarea grafică a
majore:
legăturilor genetice rezultată
1. determinarea ordinii sau „secvenței” tuturor din cartografierea acestora.
bazelor din ADN-ul genomului nostru;
Legătura genetică (linkage
2. realizarea de hărți care arată locațiile genelor
pentru secțiunile majore ale tuturor genetic) este tendința
cromozomilor noștri; secvențelor de ADN care
3. producerea unor hărți de linkage³, prin care sunt apropiate pe un
trăsăturile moștenite (precum cele pentru cromozom de a fi moștenite
bolile genetice) pot fi urmărite de-a lungul împreună.
generațiilor.

• O hartă de linkage nu arată distanțele fizice

dintre gene, ci mai degrabă pozițiile relative, ce
sunt determinate de cât de des sunt moștenite
împreună.
 Principalele obiective ale proiectului genomului uman au fost articulate pentru
prima dată în 1988 de un comitet special al Academiei Naționale de Științe a
SUA, iar ulterior au fost adoptate printr-o serie detaliată de planuri pe cinci ani,
scrise în comun de Institutele Naționale de Sănătate (NIH) și Departamentul
de Energie (DOE). Cele două agenții guvernamentale au oficializat un acord
prin semnarea unui Memorandum de Înțelegere pentru „coordonarea
activităților de cercetare și tehnice legate de genomul uman”.

James Watson a fost numit să conducă Office of Human Genome Research

care a devenit ulterior Centrul Național de Cercetare a Genomului Uman.

În 1990, a fost publicat un plan de cercetare comun- „Înțelegerea eredității

noastre: Proiectul genomului uman”. S-au stabilit obiective specifice pentru
primii cinci ani (1991-1995) din ceea ce a fost proiectat pentru a fi un efort de
cercetare de 15 ani.

HGP a dezvăluit că există probabil aproximativ 20.500 de gene umane și

a oferit lumii o resursă de informații detaliate despre structura, organizarea și
funcția setului complet de gene umane. Aceste informații pot fi gândite ca setul
de bază al „instrucțiunilor” ereditare pentru dezvoltarea și funcționarea unei
ființe umane.

James Watson- este un genetician, biolog și zoolog american. A studiat la Universitatea

din Chicago și Universitatea Indiana, apoi a lucrat în Cavendish Laboratory al Universității
din Cambridge (Anglia). Aici a descoperit, în 1953, în colaborare cu Francis Crick,
structura ADN. Premiul Nobel pentru Fiziologie sau Medicină a fost acordat
în 1962 lui Francis Crick, James Watson și Maurice Wilkins „pentru descoperirile lor
privind structura moleculară a acizilor nucleici și semnificația sa pentru transferul de
informație în materia vie”.
 2. Genomul uman și secvențierea ADN-ului

A. Ce este ADN-ul?

ADN-ul este un acid nucleic (acid

dezoxiribonucleic), o polinucleotidă, iar în
structura acestuia se repetă un număr limitat
de macromolecule numite nucleotide.
Nucleotida, este unitatea de bază a ADN-
ului si este formata din 3 componente: o
glucidă (pentoză), un rest de acid fosforic și
o bază azotată. Zaharul specific ADN-ului se
numește dezoxiriboză. Bazele azotate sunt
de două feluri: purinice (adenina și guanina)
și pirimidinice (citozina și timina).
Zaharurile și grupările fosfat compun
catenele, iar bazele azotate se aranjează
complementar (fie C-G fie A-T) prin punți
de hidrogen, unind cele doua catene într-un fig. 1- ADN
dublu helix.

B. Secvențierea ADN

Secvențiere înseamnă determinarea ordinii exacte a perechilor de baze într-un

segment de ADN. Cromozomii umani variază ca mărime de la aproximativ
50.000.000 la 300.000.000 perechi de baze.

Metodele pentru determinarea secvenței nucleotidice a unor fragmente de

ADN au fost descoperite independent de Allan Maxam și Walter Gilbert de
 2.1

la Universitatea Harvard în 1976–1977 (tehnica de degradare chimică)

și Frederick Sanger de la Universitatea Cambridge în 1970 (tehnica de sinteză
enzimatică).

Secvențierea ADN-ului permite stabilirea structurii genei precum și secvența

de amino-acizi a proteinei codificată de genă (în cazul în care ea nu a fost
identificată). De asemenea secvențierea ADN-ului poate determina tipul de
mutație care a produs o boală genetică.

Metoda primară folosită de HGP pentru a produce versiunea finalizată a

codului genetic uman a fost secvențierea pe bază de hartă sau pe baza de
BAC. BAC este acronimul pentru „cromozomul artificial bacterian”.

ADN-ul uman este fragmentat în bucăți care sunt relativ mari, dar totuși
gestionabile ca mărime (între 150.000 și 200.000 de perechi de baze).
Fragmentele sunt clonate în bacterii, care stochează și reproduc ADN-ul uman,
astfel încât să poată fi preparat în cantități suficient de mari pentru secvențiere.
Dacă este ales cu grijă pentru a reduce suprapunerea, este nevoie de
aproximativ 20.000 de clone BAC diferite pentru a conține cele 3 miliarde de
perechi de baze ale genomului uman.

C. Metodele pentru determinarea secvenței nucleotidice .

1. Tehnica de sinteză enzimatică (Sanger).

Metoda Sanger este o așa-numită metodă enzimatică , deoarece necesită

utilizarea unei enzime ; principiul tehnicii dezvoltate de Frederick Sanger se
bazează pe utilizarea nucleotidelor modificate pentru a opri reacția de
sinteză în poziții specifice.
 2.2

Nucleotidele deoxi trifosfat sunt molecule

artificiale corespunzătoare nucleotidelor
naturale, dar diferă în absența grupării
hidroxil pe carbonul 2 'și 3' al
moleculei. Dideoxinucleotidele , datorită
structurii lor, împiedică ca un alt nucleotid să
se lege de ele, deoarece nu poate
forma legături fosfodiesterice¹ . fig.2 – Frederick Sanger

2. Tehnica de degradare chimică(Maxam-

Gilbert).
Secvențierea Maxam-Gilbert a fost prima
metodă adoptată pe scară largă pentru
secvențierea ADN-ului.
Această metodă a luat naștere din studii
privind interacțiunile ADN-proteină
(amprentă), structura acizilor nucleici și
modificări epigenetice², și se bazează pe
modificări chimice ale acidului
dezoxiribonucleic și tăierea consecventă în
poziții specifice.
A devenit imediat populară și aleasă
frecvent în defavoarea secvențierii
Sanger, deoarece ADN-ul purificat putea fi
utilizat direct, fără a trece printr-un singur
intermediar.
Legătură
fosfodiesterică¹= legătură
covalentă care se formează între
două grupe hidroxil ale unui acid
fosforic și alte două molecule.
Epigenétic², -ă I. adj. (bot.) născut
pe fața superioară a unui alt organ.
II. s. f. studiu al proceselor prin
care genele își realizează efectele
fenotipice.
Fenotip (din Greacă feno- „arată”
și tip „tip”) este termenul folosit
în genetică pentru caracteristicile
observabile compozite
sau trăsături a unui organism.
 2.3

Acest tip de secvențiere, astăzi, nu mai este folosit decât în anumite domenii
din genetică, datorită complexității tehnice și utilizării extinse a substanțelor
toxice, precum și a faptului că s-a dovedit destul de dificil să dezvolți un kit de
laborator gata de utilizat.

fig.3 – Walter Gilbert

D. Cromozomul artificial bacterian

(BAC). fig.4- Allan Maxam

Un cromozom artificial bacterian (BAC) Episom¹, s. m. / episome, s. m. /

este un vector bacterian conceput pentru episome. [Cjr. epi = pe; soma, -
cartografierea și analiza genomilor atos = Corp.] Molecula circulară
complecși pe baza factorului F , de ADN care se poate replica în
un episom¹ prezent în mod natural în mod autonom (forma liberă) sau

anumite tulpini de Escherichia coli² . integrată într-un cromozom celular

Cea mai remarcabilă calitate a BAC-urilor,
comparativ cu alte sisteme de clonare
existente, este stabilitatea genetică ridicată a
fragmentelor inserate.
(forma integrată).
Escherichia coli²= bacterie a
tubului digestiv al omului, făcând
parte
din familia enterobacteriaceelor.
 2.4

Numeroase bănci BAC au fost deja citate în literatura științifică și constituie un

nou instrument în biologia moleculară . Sectorul biologiei plantelor pare
deosebit de preocupat de acest tip de vector și mulți genomi ai plantelor sunt
acum clonați. Este la fel pentru mamifere și păsări.
 3. Cartografierea genetică

Cartografierea genelor descrie metodele Locus¹ (loci plural ) este o

utilizate pentru a identifica locusul¹ unei gene poziție specifică, fixă pe
un cromozom în care se află o
și distanțele dintre gene. Cartografierea
anumită genă sau un marker
genelor poate descrie, de asemenea, distanțele
genetic.
dintre diferitele site-uri din cadrul unei gene.
Alele²= două sau mai multe
forme alternative ale aceleiași
Prima cartografiere a fost făcută pe Drosophila
gene care se află în aceeași
Melanogaster (musculița de oțet) de către
poziție pe fiecare cromozom
geneticianul Thomas Hunt Morgan, în 1913. omolog ( locusul genei).
Aceasta a fost prima lucrare de succes de
cartografiere a genelor și oferă dovezi
importante pentru teoria moștenirii
cromozomilor Boveri -Sutton . Harta arată
pozițiile relative ale caracteristicilor alelice pe
al doilea cromozom Drosophila. Distanța
dintre gene (unități de hartă) este egală cu
procentul de evenimente de încrucișare care
au loc între diferite alele².

fig.5- Drosophila
Melanogaster
 3.1

Esența oricărei cartografieri a genomului este de a plasa o colecție de

markeri moleculari pe pozițiile lor de pe genom. Markerii moleculari vin
sub toate formele.
Există două tipuri distincte de „hărți” utilizate în domeniul cartografierii
genomului: hărți genetice și hărți fizice.
În timp ce ambele hărți sunt o colecție de markeri genetici și loci
genetici, distanțele hărților genetice se bazează pe informațiile legate de
legături genetice, în timp ce hărțile fizice folosesc distanțe fizice reale
măsurate de obicei în număr de perechi de baze.
Chiar dacă harta fizică ar putea fi o reprezentare mai „corectă” a
genomului, hărțile genetice oferă adesea perspective asupra naturii
diferitelor regiuni ale cromozomului.

Cercetătorii încep o hartă genetică prin colectarea de mostre de sânge,

salivă sau țesut de la membrii familiei care poartă o boală sau o trăsătură
proeminentă și de la membrii familiei care nu o au.
Cea mai frecventă probă folosită în cartografierea genelor, în special în
testele genomice personale este saliva.
Oamenii de știință izolează apoi ADN-ul din probe și îl examinează
îndeaproape, căutând modele unice între ADN-ul membrilor familiei care
sunt purtători de boală și ADN-ul celor care nu suferă de afecțiunea
respectivă.
Aceste modele moleculare unice din ADN sunt denumite markeri.
 4.Concluzie generală.

Proiectul genomului uman a fost unul dintre cele mai bune idei de proiect
desfășurate de către oamenii de știință, aducând beneficii întregii omenirii, de la
un simplu test de paternitate până la abilitatea de a depista și urmări boli
ereditare în arborele nostru genealogic.
 5. Bibliografie

https://en.m.wikipedia.org/wiki/Genetic_linkage
https://sanatatea.tv/wp-content/uploads/2022/04/genom.png
https://agmp.ro/istoria-proiectului-genomului-uman/
https://e-dermatologie.md/chestiute/uploads/2017/01/PGU.jpg
https://agmp.ro/istoria-proiectului-genomului-uman/
https://dexonline.ro/definitie/genom
https://ro.m.wikipedia.org/wiki/James_D._Watson
https://agmp.ro/despre-genomul-uman-si-secventierea-adn-ului-pe-scurt/
https://ro.m.wikipedia.org/wiki/Secven%C8%9Bierea_ADN
https://en.m.wikipedia.org/wiki/Maxam%E2%80%93Gilbert_sequencing
https://koaha.org/wiki/Sequenziamento_del_DNA
https://dexonline.ro/definitie/epigenetic/definitii
https://wikicro.icu/wiki/Phenotype
https://wikicro.icu/wiki/DNA_sequencing
https://ro.m.wikipedia.org/wiki/Leg%C4%83tur%C4%83_fosfodiesteric%C4%83
https://www.theguardian.com/science/2013/nov/20/frederick-sanger
https://www.historyofinformation.com/detail.php?entryid=1176
https://wikimili.com/en/Allan_Maxam
https://ro.frwiki.wiki/wiki/Chromosome_artificiel_bact%C3%A9rien
https://www.dictio.ro/medical/episom
https://m.sfatulmedicului.ro/dictionar-medical/escherichia-coli_5762
https://hmn.wiki/ro/Locus_(genetics)
https://hmn.wiki/ro/Genome_mapping
https://koaha.org/wiki/Allele