LP. 6.

HETEROZIDE FENOLICE CU NUCLEU

AROMATIC DE TIP: C6, C6-C1, C6-C3

1
 HETEROZIDE = GLICOZIDE
• Definitie: substante de origine vegetala care prin hidroliza pun in libertate 1/mai multe oze
(glicon) si o parte neglucidica (aglicon)

• Clasificare in fct. de natura agliconului:

 fenolice  sterolice
- tip C6: arbutozida - cardiotonice
- saponozide sterolice
- tip C6-C1: salicozida
 triterpenice
- tip C6-C3: deriv. ac. polifenolcarb.  diterpenice
- tip C6-C3-O: cumarine  cianogenetice
- tip C6-C3-C6: flavonoide, antocianidine  tioheterozide (glucosinolate)
- taninuri
- antracenozide

• Rol fiziologic: solubilizare – transport compusi lipofili, detoxifiere; protectie agenti patogeni,
procese oxidative

• Rol terapeutic:
- actiunea farmacodinamica – aglicon
2
- absorbtie, biodisponibilitatea, eliminarea – glicon
 Glicozide cu nucleu aromatic de tip C6 (fenoli simpli) -
glicozide ale hidrochinonei

• Exemple:
arbutozida, metil-arbutozida, acetil-arbutozida
• Acţiuni:
Intern - antiseptice urinare
extern - inhibă sinteza melaninei

• Raspandire: Ericaceae, Saxifragaceae, Rosaceae

Produs vegetal/specie Familia Arbutozida % (g/g)

Vitis idaeae folium (Vaccinium vitis-idaea) Ericaceae 5-7

Uva-ursi folium (Arctostaphylos uva-ursi) Ericaceae 5 - 12
Bergeniae folium (Bergenia crassifolia) Saxifragaceae 15 - 20
Pyri communi folium (Pyrus communis ) Rosaceae 2
Myrtilli folium (Vaccinium myrtillus) Ericaceae 0,5
Callunae herba (Calluna vulgaris) Ericaceae 0,5
Viburni cortex (Viburnum prunifolium) Adoxaceae 0,5

Obs: frunzele de badan (Bergenia) şi cele de păr (Pyrus) nu pot fi utilizate în scopuri terapeutice, dat. conţinutului
ridicat în tanin care determină la folosire mai îndelungată apariţia unor iritaţii gastro-intestinale 3
1. Uvae-ursi folium, Ph. Eur. 6
frunzele de strugurii ursului, Arctostaphylos uva-ursi
(Arbutus uva-ursi), fam. Ericaceae.
Compoziţie: Arb (5-12%), Me-Arb, 15-20% taninuri, flavonoide,
deriv polifenolici, triterpene, etc.
Indicaţii:
- antiseptic urinar
- antibacterian (E coli, Staf. aureus, Bacillus subtilis)
- astringent
- diuretic
- în stări inflamatorii ale tractului urinar (cistite, uretrite, pielite)

Infuzie, Macerat: 3g p.v./150 ml H2O la rece; x 3/zi, max 2 sapt.

4
2. Vitis idaeae folium
frunzele de merişor sau coacăz de munte, Vaccinium vitis-idaea, fam.
Ericaceae.
Compozitie: Arb, Me-Arb, Cafeoil-Arb, taninuri, flavo.
Indicaţii: diuretic, antiseptic, depurativ, antigutos, antimicrobian
(activ pe stafilococ) şi antiinflamator al căilor urinare
Obs: fructele de la Vaccinium macrocarpon, Vaccinium oxycoccus,
datorita proantocianidinelor sunt folosite pt prevenirea si tratam.
infectiilor tractului urinar (inhiba aderarea bacteriilor la mucoasa
urinara)

3. Myrtilli folium
frunzele de afin, Vaccinium myrtillus, fam. Ericaceae.
fructele (fructus recens/siccus – Ph. Eur. 6)
Compoziţie: 1-7% taninuri, deriv polifenolici, flavo, triterpene, Arb,
fructele-antociani, taninuri
Indicaţii:
Frz - astringent, antiseptic, antiinflamator, usor dezinfectant urinar,
antidiabetic (efect hipoglicemiant),
Frc - astringent, vasoprotector (oftalmo), antiaterosclerotic 5
6
 Compuşii aromatici (fenolici) de tip C6- C1

Sunt compuşi heterozidici derivaţi de:

saligenol acid salicilic vanilal monotropitozida

CH2OH COOH CHO

OH OH

OMe
OH

salicozida populozida
CH2OH CH2OH
O Glc O C6H11O4 OCO
Salicilat de metil  monotropitozida,....
Vanilal (vanilina)  vanilozida, coniferozida

• Raspandire: Ericaceae, Rosaceae, Betulaceae, Salicaceae...

Obs: enzimele (glicozidaze, esteraze) ce degradeaza glicozidele sunt localizate in celule
diferite, dupa deteriorarea/ moartea tesutului glicozidele sunt descompuse  salicilat de
metil (miros caracteristic), acid salicilic (fara miros)
7
1. Populi gemmae
= muguri foliari ai plopului, Populus
nigra/ tremula/ pyramidalis, fam. Salicaceae
Compoziţie: populozida, salicozida, flavone
(crizol), ac polifen-carbox, taninuri, rezine, ul
volatil
Indicatii:
- AI
- analgezic
- uşor A-piretic
- A-sept
- capilaroprotector
- cicatrizant
- diuretic
Int  infuzii, tincturi: reumatism, artralgii;
Ext  Unguentum populi: Ahemoroidal
8
2. Salicis cortex, Ph.Eur.6
= scoarţa de pe ramurile tinere de salcie, Salix
alba/ purpurea/ caprea, fam. Salicaceae
Compoziţie: salicozida 3-7%, populozida,
flavone, taninuri, ac polifen-carbox
Indicatii:
- retardarea comp active (ac salicilic)
- hidroliza intestinala (ne afectare gastrica)
- AI
- Analg
- A-piretic
- A-agreg plachetar
- sedativ – artralgii, viroze, dureri uşoare
Precautii: astm, ulcer

9
3. Spirea/ Ulmariae herba, Ph. Eur. 6
= partea aeriană înflorită de la creţuşcă, Filipendula/ Spiraea
ulmariae, fam. Rosaceae
Compoziţie: monotropitozida, flavone, tanin, ul vol (aldeh,
salicilatde metil , vanilina)
Indicatii:
- AI
- Analg
- uşor A-piretic
- diuretic
- stomahic, dispepsii
- artralgii
- elim ac. uric
- cistitaInfuzie, tinct, extr fluid

10
4. Gaultheriae folium,
=frunzele de gaulteria/ winter-green, Gaultheria
procumbens, fam. Ericaceae (paduri conifere Am N)
Compoziţie: monotropitozida (gaulterina)  salicilat
de metil, tanin, ul vol
Indicatii: revulsiv, Ainflam., Asept.
Ext, int: reumatism, mialgii, nevralgii, igiena bucala,
cosmetice; Asept- bronsic (inhal), aromatiz

5. Vanillae fructus, capsule imature fermentate,

uscate de vanilie, Vanilla planifolia,
fam. Orchidaceae
Compoziţie: vanilal, aldehide, esteri 
mirosul specific
Indicatii: aromatizant, corector de gust

11
 Compuşii aromatici de tip C6- C3
derivati fenil-propanici ai acizilor polifenol-carboxilici

acid clorogenic O cinarina

acid cafeic
HO COOH
O O COOH
COOH
HO O
O
OH
HO OH HO O
HO OH
OH OH
OH
OH
OH

echinacozida
acid rozmarinic

12
 1. Cynarae folium, FR X,
Frunzele de anghinare, Cynara scolymus, cardunculus,
fam. Asteraceae
Compozitie: -ac clorogenic (ac.3-cafeoil–chinic),
cinarina (ac. 1,5 dicafeoil-chinic)
-lactone sescviterpenice (cinaropicrina) → gustul amar
-flavonoide (cinarozida; agliconi: luteol, apigenol,
cvercetol)
Indicatii:
- coleretic, colagog, hepatoprotector, regenerare
hepatica
- ↓cant. colesterol hepatic, sanguin, elim biliara a
colest, HDL/LDL (profilax ateroscleroza), Aoxidant
- tonic amar→ stim. apetit, stomahic
- diuretic (flavo)
Utiliz: infuzie, tinctura, extracte standardizate in ac
cafeoil-chinici
30 min inainte/ 1-2 h dupa masa

13
2. Rosmarini folium, Ph.Eur.6
(si R. aetheroleum)
Frunze de rosmarin, Rosmarinus officinalis, fam. Lamiaceae
Compozitie: ac. cafeic, ac.clorogenic, ac. rosmarinic
-flavonoide (luteol), ul. vol. (camfor, cineol), princ. amare
Indicatii:
- coleretic,colagog, stomahic, A-spastic
- Aox, hepato-protector, AI, A-bact, A-vir,
-  circulatia (coronare, cerebral, microcirc - Intern),
revulsive (Extern)
Util: infuzii, tincturi, bai locale, unguent
•Oral – tulb. digestive: crampe biliare, balonari, digestie
lenta, eructatii
- angina pectorala, vertij, cefalee
•Loc – igiena bucala, nas infundat, reumatism
CI: sarcina, alaptare (emenagog, abortiv)
Precautii: fotosensibilitate

14
3. Echinaceae radix, herba, Ph.Eur.6
Radacina de la Echinacea pallida, angustifolia si
purpurea (si partea aeriana), fam. Asteraceae,
orig Am.N
Compozitie: deriv ac. cafeic (echinacozida,
cinarina), poliuronide, alcamide, alchine, alchene,
ul vol
Indicatii: imunostim. (stim. fagocitoza), inh.
patrunderea ag patog in org (inh. hialuronidaza)
AI, Abact, Avir
Util:
- profilax, trat.- infectii CRS, ORL, urogenital,
dermic (ag patog rezistenti)
- rani purulente, dermatoze suprainfectate
infuzie, preparate (extracte, suc proaspat):
Echinacin, Imunopret, Imunogrip

CI: afectiuni autoimune

15
 C6
Propr.fiz:
• solide, cristalizate, incolore
• usor solubile in apa si in
alcool
• agliconii = cristale aciculare,
incolore, sublimabile si
antrenabile cu vapori de apa;
solubili in eter, alcool, apa
Propr.chim.:
• Au caracter reducator
(compusii cu grupari -OH
fenolice libere)
Extractia:
• Cu apa, la cald, mediu acid
C6-C1
Propr.fiz:
• solide, incolore
• solubile in apa si in alcool
• agliconii = subst solide,
cristalizate, incolore,
sublimabile si antrenabile cu
vapori de apa; solubili in alcool
si solventi apolari; unii agliconi
sunt solubile si in apa (dat.
gruparilor –OH fenolice)
Propr.chim.:
• Au caracter reducator (fenoli)
• Se oxideaza cu usurinta (se
brunifica)
• au caracter acid
Extractia:
• Prin refluxare cu apa sau
metanol 50%
C6-C3
Propr.fiz:
• cristale aciculare, incolore
sau slab galbui
• solubile in apa si alcool
Propr.chim.:
•Au caracter puternic
reducator (se oxideaza cu
usurinta)
Extractia:
• Cu apa sau alcool de
diferite concentratii, prin
refluxare sau extractive
continua la aparatul Soxhlet
16
 Dozarea polifenolilor totali
Metoda Folin-Ciocâlteu

 denumită și metoda de echivalență a acidului galic (GAE)

 analiza colorimetrică in vitro a antioxidanților fenolici și polifenolici

Principiul metodei: determinarea continutului de polifenoli totali din surse vegetale prin
masurarea densitatii optice a unui extract care prin complexare cu reactivul Folin-
Ciocâlteu absoarbe in domeniul vizibil la lungimea de unda 750 nm

Această metodă se bazează pe reacțiile de transfer de electroni între reactivul Folin-

Ciocalteu și compușii fenolici, când rezultă un complex colorat albastru care poate fi
cuantificat spectrofotometric.
Standard: acidul galic (0,1 - 1 mg / ml)

Tehnica: reactivul Folin-Ciocalteu (diluat 1:10; 2,5 ml) se amesteca cu extract din p.v. (0,5
ml) și Na2C03 7,5% (2 ml). Amestecul se incubeaza timp de 2 ore la întuneric la
temperatura camerei. Ulterior, se masoara absorbanta la 750 nm.

Obs: Conținutul total de fenoli se exprimă ca echivalenți ai acidului galic (mg GAE / g
probă).
17
PARTEA PRACTICĂ nr 5
A) Determinarea derivaților fenolici C6 Compuși vegetali Reacția fenolilor cu
p.v. analizate: FeCl3
– Vitis idaeae folium Hidrochinona Albastru trecător –
– Myrtilli folium galben-brun
Etalon: Salicozida, Roșu
– hidrochinona populozida

1. Reacția de oxidare cu FeCl3 Salicilat de metil Roșu-violet

2. Reacția de reducere a AgNO3 – Reacția Tollens
Acid salicilic Violet
B) Determinarea derivaților fenolici C6-C1
p.v. analizate: Acidul cafeic, acid Verde
– Salicis cortex clorogenic
– Populi gemmae Flavone Verde
1. Reacția de oxidare cu FeCl3
Taninuri Albastru verzui
2. Reacția de reducere a acidului fosfomolibdenic
(catehice)
C) Determinarea derivaților fenolici C6-C3 albastru negricios
p.v. analizate: (galice)

– Cynarae folium
– Echinaceae herba
1. Reacția de oxidare cu FeCl3
18
2. Reacția cu reactivul Arnow
A) Determinarea derivaților fenolici C6

1. Reacția de oxidare cu FeCl3

Principiul reacției: datorită proprietăților reducătoare ale hidrochinonei în prezența FeCl3,

aceasta se oxidează formând benzochinona și produșii de cuplare chinhidrone colorați în
galben-brun
Reactivi: soluție FeCl3 10g/L, acett de Pb 100g/L, Ha2CO3, HCl 1N
Probe:
Extractul vegetal: 0,5g p.v. se extrage la cald cu 15 ml apă timp de 5 minute; se
filtrează; se filtrează și la ½ din volumul filtratului se adaugă HCl 1N (pentru hidroliză) în
cantitate egală cu soluția extractivă și se fierb 30 de minute (sol. hidrolizată); cealaltă ½ de
soluție (sol. nehidrolizată) se va folosi ca atare
Etalonul: 1 g de hidrochinonă se dizolvă în 50 ml apă la rece
Tehnica: 0,5 ml soluție de analizat se tratează cu 1-2 picături soluție FeCl3
Evaluare: se obține o colorație galben-brună; colorația albastră trecătoare în cazul
hidrochinonei pure

19
Solutia extractivă
hidrochinonă
nepurificată

FeCl3 FeCl3

20
 Nu se formează
decât tranzitor
complex cu Fe

partial
Complex verde
cu Fe

Complex 21
Rezorcina nu formeaza chinone, dat pozitiei meta violet cu Fe
A) Determinarea derivaților fenolici C6

2. Reacția de reducere a AgNO3 – Reacția Tollens

Principiul reacției: datorită proprietăților reducătoare ale hidrochinonei în prezența reactivului
Tollens (hidroxidul di amino argentic), aceasta se oxidează , reducând ionul de Ag la Ag metalic
cu formarea oglinzii de argint
Reactivi: reactiv Tollens
Probe: se folosesc cele preparate pt metoda A1.
Tehnica: 0,5 ml soluție de analizat se tratează cu 5 picături reactiv Tollens, prin încălzire la
flacără
Evaluare: pe pereții eprubetei se depune oglinda de Ag metalic

22
B) Determinarea derivaților fenolici C6-C1
1. Reacția de oxidare cu FeCl3
Principiul reacției: datorită proprietăților reducătoare ale compușilor fenolici în prezența
FeCl3, formând colorații specifice
Reactivi: soluție FeCl3 10g/L, acetat de Pb 100g/L, Na2CO3, HCl 1N
Probe:
Extractul vegetal: 0,5g p.v. se extrage la cald cu 15 ml apă timp de 5 minute; se
filtrează; se adaugă 5ml acetat de Pb (pentru pp taninurilor) și se menține pe baia de apă 5-10
minute, se filtrează, după care se adaugă 1 g Na2CO3 (pentru îndepărtarea ionilor de Pb); se
filtrează
Etalon:
1 g de acid salicilic se dizolvă în 50 ml apă la rece
1 g de acid acetil salicilic se dizolvă în 50 ml apă la rece; la ½ din soluție se adaugă 1ml HCl
Tehnica: 0,5 ml soluție de analizat se tratează cu 1-2 picături soluție FeCl3
Evaluare: se obține colorații
Rosu – salicozidă, populozida
Violet – acid salicilic
Brun – acid acetil salicilic, rosu – după hidroliza

23
1 2

Solutia extractiva
3 FeCl3
purificată

24
B) Determinarea derivaților fenolici C6-C1
2. Reacția de reducere a acidului fosfomolibdenic
Principiul reacției: datorită proprietăților reducătoare ale compușilor fenolici în prezența
unei soluții slab acide ale unui molibdat – acidul fosfomolibdenic, se obțin soluții coloidale
albastre datorită atomilor de Mo cu stări de valență diferite
Reactivi: soluție acidul fosfomolibdenic 10g/L, acetat de Pb 100g/L, Na2CO3, HCl 1N
Probe: se folosesc cele preparate pt metoda B1
Tehnica: 1 ml soluție de analizat se tratează cu 0,5 ml acid fosfomolibdenic
Evaluare: se obțin colorații albastre

25
26
B) Determinarea derivaților fenolici C6-C3
1. Reacția de oxidare cu FeCl3
Principiul reacției: datorită proprietăților reducătoare ale compușilor fenolici în prezența
FeCl3, formând colorații specifice
Reactivi: soluție FeCl3 10g/L,
Probe:
Extractul vegetal: 0,5g p.v. se extrage la cald cu 15 ml apă timp de 5 minute; se
filtrează;
Tehnica: 0,5 ml soluție de analizat se tratează cu 1-2 picături soluție FeCl3
Evaluare: se obțin colorații verzui

27
C) Determinarea derivaților fenolici C6-C3
2. Reacția cu reactivul Arnow
Principiul reacției: datorita capacitatii de substitutie a nucleului aromatic cu acidul azotos, p-
nitroderivatii, care tautomerizeaza spontan obtinandu-se oximele de culoare rosie solubine in
solutii alcaline
Reactivi: reactiv Arnow, HCl 1N, NaOH 1N; acetat de Pb 100g/L, Na2CO3,
Probe:
Extractul vegetal:se folosesc cele preparate pt metoda C1
Tehnica: 1 ml soluție de analizat se tratează cu 1 ml HCl, 1 ml reactiv Arnow, 1 ml NaOH
Evaluare: se obține o colorație roșie sau roșie-violetă

Obs: Reactiv Arnow - 10 g azotit de sodiu şi 10 g molibdat de sodiu se dizolvă în 100 ml apă.

28
 Metode de identificare a heterozidelor - 1

Cromatografie în strat subțire – tip C6 – Uva ursi folium

•Condiții experimentale:
– FS: silicagel
– FM: acid formic: apă: acetat de etil = 10:10:80 (v/v/v)
– Proba: soluție extractivă metanolică
– Soluție de referință : soluție metanolică 2,5 mg/mL arbutozidă, 2,5 mg/mL acid
galic și 2,5 mg/mL hidrochinonă (amestec)
– Reactivi de relevare: soluție metanolică 10 g/L diclorochinonclorimidă și
soluție 20 g/L carbonat de calciu; examinare în vizibil

29
 Metode de identificare a heterozidelor - 2

Cromatografie în strat subțire – tip C6 – C1 – identificarea

salicozidei și a saligenolului
•Condiții experimentale:
– FS: silicagel GF254
– FM: acetat de etil: metanol: apă = 10:13,5:10 (v/v/v) (solvent 1); formiat de
etil: acid formic: apă = 80:10:10 (solvent 2); cloroform: metanol = 85:15
(solvent 3); hexan: acetat de etil = 90:10 (solvent 4)
– Proba: soluție extractivă metanolică
– Soluție de referință : soluții metanolice 10 mg/mL salicozidă, saligenol
– Reactivi de relevare: p-nitro-anilina-diazotată (reactiv 1), acid sulfanilic
diazotat (reactiv 2) și acid fosfomolibdenic (reactiv 3)

30
 Metode de identificare a heterozidelor - 3

Cromatografie în strat subțire – tip C6 – C3 – Cynarae folium

•Condiții experimentale:
– FS: silicagel (5-40 μm sau 2-10 μm)
– FM: acid formic anhidru: acid acetic glacial: apă: acetat de etil = 11:11:27:100
(v/v/v/v)
– Proba: soluție extractivă etanolică
– Soluție de referință : soluție metanolică luteolin-7-glucozidă 0,5 mg/mL și acid
clorogenic 0,5 mg/mL (amestec)
– Reactivi de relevare: soluție metanolică de difenilboriloxietilamină 10 g/L și
soluție etanolică de polietilenglicol 400 50 g/L, pulverizate succesiv pe
cromatoplaca încălzită; examinare în lumină UV (366 nm)

31