Tipuri de biomarkeri si rolul lor

predictiv in raspunsul la
imunoterapie
Prof. Dr. Nitipir Cornelia
Spitalul Universitar de Urgenta Elias
Definitii utile

Cercetarea translationala= aplicarea descoperirilor si tehnologiilor

utilizate in cercetarea preclinica in situatii clinice, facilitand identificarea
a noi tinte si strategii terapeutice
Definitii utile
• Biomarkerii= caracteristici ale corpului uman pe care le poti masura
(Ex: Tensiunea arteriala= biomarker)
• Utilitatea in dezvoltarea si cercetarea unui medicament nou: in
procesul de dezvoltare, 1 din 10 medicamente depasesc faza
preclinica
Definitii utile
Utilizarea biomarkerilor in cercetare:
• Personalizarea terapiilor
• Accelerarea disponibilitatii tratamentului
• Scaderea costurilor

Cei mai utili biomarkeri:

• Prezic raspunsul
• Informeaza asupra toxicitatilor
• Informeaza asupra rezistentelor
Descoperirea si dezvoltarea unui medicament

Figure available at:

https://www.researchga
te.net/figure/Drug-
discovery-and-
development-From-
gene-to-drug-The-four-
key-steps-of-cancer-
drug_fig4_221968843
Tipuri de biomarkeri

Picture available at:

https://en.wikipedia.org/wiki/Cancer_b
iomarker
Biomarkeri prognostici
• Masurat inaintea tratamentului
• Caracteristici moleculare sau histopatologice ale tumorii care dau
informatii despre parcursul bolii pe termen lung
• Utili pentru a selecta pacientii care au nevoie de supraveghere mai
intensa sau tratament adjuvant

Ex: in cancer mamar: T, N, G

Biomarkeri predictivi
• Masurati inaintea tratamentului
• Caracteristici moleculare sau histopatologice ale tumorii care dau
informatii despre probabilitatea de raspuns la un anumit tip de
tratament
• Daca biomarkerul nu este prezent- nu vor exista diferente de
supravietuire intre pacientii tratati sau netratati
Ex: expresia Her2 si tratamentul cu trastuzumab in cancer mamar
Ex: expresia ER si hormonoterapia in cancerul mamar
 6 ‘hallmarks of cancer’ clasice

La care se adauga 2 noi trasaturi tipice, nou studiate:

Deregulated metabolism
Evading the immune system
Table at:
https://en.wikipedia.o
rg/wiki/The_Hallmarks
_of_Cancer
Scaparea tumorii de detectia de catre sistemul
imun si initierea proceselor imune impotriva sa
• Prin pierderea antigenelor de suprafata
• Prin pierderea capacitatii de prezentare a antigenului
• Immune editing: Sistemul imun reuseste initial sa distruga toate
celulele neoplazice care sunt imunogene, remanand doar cele cu
imungenicitate redusa
• Celule T anticancer:
Ly T cytotoxic CD8+
Ly T helper
Toleranta imuna
= aspect fiziologic al sistemului imun
• Balanta fina:
• daca este inhibata→ boli autoimune
• daca este prea pronuntata→ toleranta fata de agresori- Ex: celula
neoplazica

At! Celula neoplazica provine dintr-o celula self! → Provocare mare

pentru sistemul imun
Reglarea tolerantei imune
• Toleranta centrala: eliminarea Ly T self reactive in timpul maturatiei-
timus
• Celula epiteliala timica exprima antigene self→ le expune catre Ly T
tinere→ daca acestea le recunosc→ sunt distruse (selectie negativa)

• Toleranta periferica: detectia Ly T self reactive de catre T reg

Reglarea tolerantei imune

Figure at
https://www.astro.org/Patient-Care-
and-Research/Research/Professional-
Development/Research-
Primers/Central-vs-Peripheral-
Tolarance
Potentiale tinte de pe suprafata celulei
neoplazice
Antigene tumorale- categorii:
• Antigene supraexprimate Ras, TP53, telomeraza sau antigene
oncofetale – Ly T este fie foarte tolerant, fie ataca agresiv inclusive
tesuturile normale (toxicitate)
• Antigene de diferentiere Gp100, Melan-A, tirozinaza- target bun in
melanom, dar sunt exprimate si in multiple celule normale
• Antigene virale- EBV , HPV
Potentiale tinte de pe suprafata celulei
neoplazice
• Cele mai importante = neoantigenele, generate prin activitatea
mutationala crescuta a celulei neoplazice
• Specifice tumorii→ ideale pentru un raspuns antitumoral tintit
• Nu vor fi luate in considerare in cadrul tolerantei centrale
• Ly T care sunt antrenate in recunoasterea lor sunt totusi expuse la
distrugere de catre T reg
Checkpointul imun- prima posibilitate de
scapare imuna
• Ly T recunoaste antigenele tumorale prin intermediul receptorilor
celulelor T (TCR- T Cell Receptor)
• Activitatea lor este reglata prin multipli receptori co-stimulatori si co-
inhibitori = Immune checkpoints
• Familii de receptori din cadrul immune checkpoints: CTLA4, PD-1,
LAG3, TIM3
Celula neoplazica exprima adesea liganzi pentru acesti receptori care
fie blocheaza activitatea stimulatorie, fie induce activitate inhibitorie:
Cel mai des intalnit: PD-L1
Rolul T reg- alternativa de scapare imuna
• T reg – decide prin mecanisme complexe daca activitatea celulei T
citotoxice este benefica sau detrimentala
• Cea mai mare specificitate antigenica
• Verifica calitatea prezentarii de antigen
• In vederea coordonarii activitatii foloseste cytokine : IL-10, TGF-beta
Mecanisme metabolice de scapare imuna
• Micromediul tumoral este cel care sustine toate aceste procese
→trebuie sa contina substratele necesare- energetice si nu numai
• Indol amine 2,3 deoxigenaza-IDO si araginaza sunt 2 enzyme
catabolice care prin activitatea lor aduc celulei T subtratul necesar
mentinerii functiei
• Fara IDO→ nu le mai formeaza l-triptofan→ supresie a Ly CD8+
→creste efectul supresor al
T reg
• Fara araginaza→ - arginina→ nu pot prolifera celulele T si nu pot
produce citokine
Calea PD-PD-L1

Picture from the article: Daniel S. Chen, Bryan A. Irving and F. Stephen Hodi
Molecular Pathways: Next-Generation Immunotherapy—Inhibiting
Programmed Death-Ligand 1 and Programmed Death, Clinical Cancer
Research, December 2012
Volume 18, Issue 24
Biomarkeri relevanti in imunoterapie
1. Biomarkeri prognostici:

• raportul CD4/CD8 – fara semnificatie clinica

• procentul de Ly tumorale infiltrante TIL (tumour infiltrating ly)
→ Se doreste standardizarea raportarii TIL: immunoscore strategy
Biomarkeri relevanti in imunoterapie
2. Biomarkeri predictivi:
Avand in vedere descoperirea importantei checkpointului imun→
depistarea pacientilor care vor raspunde la inhibarea sa (in primul rand
pentru a evita toxicitati la pacientii care nu vor raspunde)

• Singurul biomarker validat = PD-L1 de pe suprafata celulei tumorale

(prezice raspunsul la unii dintre anticorpii PD-1/PD-L1)
• Nu exista biomarker pentru inhibitorii de CTLA4
• Biomarker important in curs de studiere: Tumour mutational load:
TML
Efectul blocantilor de checkpoint imun

Picture at:
https://gut.bmj.com/content/67/11/2
056
PD-L1 ca biomarker predictiv

• Primul biomarker pe baza caruia s-a schimbat fata terapiei oncologice

• Indicatie: in tratamentul de linia 1 in cancerul pulmonar fara celula
mica metastatic cu PD-L1 > 50% pe suprafata celulei tumorale
Beneficiu in functie de PD-L1 NSCLC-
Pembrolizumab
Dar…Aceeasi indicatie, molecula cu acelasi
mecanism- nivolumab, prag diferit de includere
Nivolumab –PD-L1>1%- nici un beneficiu fata de chimio in prima linie:
Concluzie:

!Pragul la care consideram un biomarker predictiv

este esential
Heterogenicitatea testarii PD-L1 pentru
fiecare terapie
Heterogenicitatea testarii PD-L1 pentru
fiecare terapie
• Sunt folositi anticorpi diferiti
• Unii determina PD-L1 pe celula tumorala, altii pe celula imuna, altii pe
ambele
• Cut-off uri diferite

Deci: Este firesc ca in cazul fiecarei metode sa obtinem rezultate diferite

si sa nu putem sa le suprapunem
PD-L1 caracteristici ca biomarker
• Fara consecventa in a prezice raspunsul in multe alte localizari in afara
de neoplasmul pulmonar
• 5 metode validate de testare PD-L1 – ar trebui doar una
• Multi opiniaza ca testarea PD-L1 este relevanta doar in front line
setting- tesutul tumoral nu a fost expus la alte tratamente
 PD-L1- caracteristici ca biomarker
• Heterogenitatea testarii se poate manifesta in cadrul aceleiasi localizari pentru decizia terapeutica
• Exemplu: carcinomul urotelial metastatic:
Concluzie: tratamente
diferite cu principiu
identic, administrate dupa
determinari diferite ale
biomarkerilor…
TMB- tumour mutational burden
• Care este ratiunea in a masura acest biomarker?
Multe mutatii→ multe neoantigene→ creste imunogenicitatea direct
proportional (sunt sanse mai mari ca celula neoplazica sa fie recunoscuta
ca non-self)
• In ce se masoara?
In nr de mutatii pe exom sau nr de mutatii per megabase (cel mai utilizat)
• Cum se masoara?
Prin NGS si apoi comparare cu o baza de date mare- momentan
disponibile: Illumina (Olanda), Foundation, Memorial-Sloan Kettering –
IMPAKT(cea mai rafinata baza de date – se secventiaza si genomul celului
normale- identifica mutatiile somatice)
TMB relevant ca biomarker in prezicerea
raspunsului la multe localizari
Instabilitatea microsatelitara-MSI
• Care este ratiunea de a masura acest biomarker?
Pacientii cu dMMR (deficient mismatch repair) au celule tumorale
caracterizate de acumulare de multiple mutatii→ ca si la precedentul
biomarker (multe mutatii=multe antigene= imunogenicitate)
Tehnici de a determina: imunohistochimie pentru: MLH1, MSH2,
MSH6, PMS2/ Next generation sequencing (NGS)/ masurarea efectiva a
lungimii microsatelitilor tumorali prin PCR si comparatea acestora cu
microsateliti ai unor tumori normale.
Cele 3 tehnici pot fi utilizate in cancerul colo-rectal
In restul cancerelor se prefera evitarea tehnicilor de masurare PCR
Instabilitatea microsatelitara-MSI
• Primul biomarker tissue agnostic- istorie in oncologie
Instabilitatea microsatelitara-MSI – biomarker
esential in cancer colo-rectal -2020
Instabilitatea microsatelitara-MSI – a schimbat
prima linie in cancer colo rectal metastatic
Concluzie
• Desi eficienta predictiva a biomarkerilor in imunoterapie este
evidenta, rafinarea si standardizarea metodelor de evaluare a
acestora este un process complex, in curs
• Cu mici exceptii nu este suficient determinarea unui singur biomarker
pentru decizia unui tratament, atat in prima linie, cat si in liniile
ulterioare
• Exista numerosi alti biomarkeri in imunoterapia cancerului care pot
ajuta la obtinerea raspunsurilor la intrebarile actuale
Va multumesc!