Utilizarea

hidrogelurilor de
polimeri sintetici
pentru prepararea
constructiilor de
tesuturi 3D fara
structuri (schele)
 Hidrogelurile sunt retele polimerice, alcatuite din
polimeri hidrofili, ce absorb si retin o mare
cantitate de apa.
Acest domeniu se dezvolta continuu si exploziv
datorita aplicatiilor multiple si importante pe care
hidrogelurile le au in special in medicina si farmacie
domeniul biosenzorilor
eliberarii controlate a medicamentelor
regenerarii tesuturilor
Acest studiu evalueaz utilizarea hidrogelurilor de
polimeri sintetici folosite la fabricarea lentilelor de
contact moi.
 Culturile de esuturi
Scaffoldless (fara schele) 3D
pot fi superioare culturilor de
esuturi 3D preparate prin
imobilizarea celulelor n
matrici extracelulare, cum ar fi
alginai, agar sau chitosan. Scafold este un
concept central n
ingineria tisular, care
furnizeaz structur
suport pentru aderarea
i creterea celulelor.
Avantajele tesuturi scaffoldless
includ:
evitarea raspunsul imun la schele
degradarea de schele in vivo
evitarea reactivitatii ncruci ate la schele n
timpul testelor in vitro.
 Exist cel puin patru metode
comune folosite pentru a
prepara aceste culturi de
esuturi sferice 3D fr a fi
nevoie de alte scheme sau
matrici.

Cu toate acestea, aceste

metode sunt adesea *utilizarea forei centrifuge
consumatoare de timp, iar pentru a produce pelete de
rezultatele sunt slab celule
reproductibile

*plasarea suspensiilor de
celule pe suprafeele *tehnica picaturii agatate
hidrofile

*cultivarea celulelor de la
densitate mare
Utilizarea hidrogelurilor de polimeri sintetici pot depi
limitrile asociate cu cele descrise anterior i s
simplifice fabricarea de tesuturi 3D.

Primul pas logic este de a evalua dac hidrogelurile

polimeri sintetici utilizai pentru prepararea lentilelor de
contact moi au calitile necesare pentru a ghida celule
(de exemplu, condrocite), pentru a forma structuri
tisulare cum ar fi 3D.
Aceast proprietate a fost evaluata prin plasarea
condrocitelor de bovine sau celulelor din dentina porcina,
in lentile de contact moi disponibile pe piata i
observarea dac acestea pot ghida celule pentru a forma
structuri 3D.
Metode-culturi de celule
Condrocitele bovine au fost
recoltate de la cartilajul
femural de la o vac de 2 ani
i celule din pulpa dentara a
unei porcine de 3-4 luni,
femela rasaYorkshire.

Celulele au fost izolate din Tubul de centrifugare a fost

esuturile respective n termen plasat ntr-o baie de ap
de 4 ore de la recoltarea agitator timp de 2 ore i se
tesuturilor. menine la 37 C.

Pentru a izola celulele, 5 ml soluie care conine 10

esuturile au fost tiate n mg colagenaz tip 2 a fost
buci mici i spalate de dou adugat la piesele splate ntr-
ori. un tub de centrifug de 50 ml.
Celulele disociate, mpreun cu fragmentele de esut par ial
disociate rmase au fost centrifugate pentru a ndeprta
colagenaza i splate de dou ori.

Celulele splate mpreun cu fragmentele de esut au fost

apoi plasate n flacoane de cultur de celule cu un continut
ridicat de glucoza.

Baloanele de culturi celulare au fost men inute la 37 C n

atmosfer umed coninnd 5% CO2. Celulele au fost lsate
s creasc ntr-un monostrat timp de 15 zile.
Inducerea de celule 3D auto-asamblate cu ajutorul
lentilelor de contact moi din comert sau a suprafetelor
de hidrogel de agaroza 2%

Hidrogel de agaroz
2% a fost preparat Soluia limpede de
prin amestecarea a 2 agaroz a fost apoi
g de agaroz n 100 turnata n ase
ml de solutie de godeuri i lasata s
salina tamponata se formeze un
apoi amestecul a hidrogel.
fost adus la fierbere.

Odat plasate n
Lentilele de contact plci, lentilele de
au fost scoase din contact si-au
ambalajul lor steril meninut forma
i plasate fiecare in concav i au fost n
cate un godeu (12 in msur s dein
total). pn la 200 l fara
a se deforma.
Pe partea de sus a lentilelor de contact a fost pusa
solutia de hidrogel de agaroza 2%.

Celulele au fost lsate s se coaguleze timp de 3 ore i

apoi 3 ml de mediu complet a fost adugat in fiecare
godeu pentru a mentine lentilele de contact umede.

n 24 de ore, celulele s-au coagulat complet i au

format un singur esut 3D.
 Atat condrocitele cat si
celulele pulpei dentare se
Prin urmare, acest studiu a
auto-asambleaza atunci
demonstrat c
cnd sunt plasate n
hidrogelurile de polimeri
contact, fie cu lentile de
sintetici pot oferi o
contact ,fie cu suprafeele
alternativ la agaroz sau
de hidrogel de agaroz
alginat.
2% si formeaza singure
matrici celulare.
 Acest scurt raport a Cu toate acestea, studiul
descris o metod de demonstreaz c
agregare de celule Este important de
remarcat faptul c studiul polimerii comerciali
producatoare de matrice, testati sunt
cum ar fi condrocite propus nu dovedete n
nici un fel dac se biocompatibili i
folosind hidrogeluri de permisivi pentru
polimeri sintetici. utilizarea in acest mod a
polimerilor investigati agregarea celulelor.
Polimerii au fost folositi Hidrogelurile sunt
doar ca "containere" non- este mai bun dect pelete
centrifugate sau folosind materiale inerte, prin
aderente pentru agregarea natura, cu excepia
celulelor. plci de aderen foarte
sczute care pot veni n cazului n care sunt
toate tipurile i formele. funciuni sau modificate
chimic.