Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Acest domeniu poate fi definit ca un ansamblu de metode si tehnici care permit fie introducerea
n patrimoniul genetic al unei celule a uneia sau mai multor gene noi, de interes, fie
modificarea expresiei unei/unor gene prezente, deja, n celul. Genele transferate sunt denumite
transgene.
Ingineria genetic mai este numit, uneori, i modificare genetic, transformare genetic
sau transgenez, iar produsele obinute poart numele de organisme modificate genetic
(OMG) sau organisme transgenice.
3.Virusul SV 40 (Virusul Simian 40), reprezint vectorul cel mai utilizat pentru clonarea genelor n celulele
mamiferelor. Acest virus a fost gsit n celulele renale provenite de la maimuele Rhesus i Cynomolgus i s-a
constatat c are potenial oncogen (au produs tumori maligne la hamsteri) i capacitate de transformare in
vitro a celulelor umane (produce modificri morfologice, imunologice, cromozomale i ale capacitii de
cretere a celulelor transformate).
4. Cosmidele sunt vectori hibrizi ntre fagi i plasmide. Ei combin caracteristicile plasmidelor i ale fagului n
vederea creterii probabilitii de a selecta plasmide recombinate ce conin ADN strin. n cosmide pot fi
integrate fragmente de ADN mai mari de trei ori (40 45 kilobaze) dect cele clonate de bacteriofagi.
Unitate de masur pentru marimea acizilor nucleici, genelor sau cromozomilor. 0 k. reprezint
1 000 de perechi de baze pentru ADN si 1 000 de baze pentru ARN. K. este echivalent cu 330
kilodaltoni (kDa). Simbol: kb.
5. Cromozom artificial de tip YAC, este un cromozom artificial de la Saccharomyces cerevisiae care conine
urmtoarele secvene:
- ARS (autonomously replicating sequences) care permite replicarea sa n timpul fazei S1 n celula gazd;
- TEL, care reprezint dou secvene telomerice, originare de la un cromozom de Saccharomyces cerevisiae
sau de la Tetrahymaena sp., necesare pentru a asigura individualitatea cromozomului i comportarea sa
normal pe parcursul diviziunilor celulare;
- o secven centromeric CEN, necesar pentru comportarea normal a cromozomului n timpul diviziunilor
celulare (Corneanu Mihaela, 2001).
Pasagerii
Reprezint fragmentele de ADN strin care conin genele de interes care se
introduc n vector pentru a obine ADN recombinant. Pasagerul poate fi izolat din
celulele n care se gsete sau poate fi sintetizat artificial.
Introducerea pasagerului n vector ridic unele probleme, cauzate de forma
circular a moleculei de ADN. Deschiderea moleculei de ADN, trebuie s se
deruleze n aa fel nct funcia sa esenial de autoreplicare s nu fie afectat.
Deci locul scindrii nu trebuie s se petreac n zona din molecul care controleaz
sinteza ADN. De asemenea se impune ca scindarea s fie fcut ntr-un singur loc
al moleculei, n aa fel nct s se realizeze conversia moleculei circulare ntr-o
molecul liniar.
ndeplinirea acestei condiii este asigurat de enzimele de restricie, care
fragmenteaz ADN in vitro, numai dup interaciunea cu o secven particular de
nucleotide n interiorul lanului molecular la ADN i permit scindarea n locuri
limitate a moleculelor de ADN.
Enzimele de restricie
Sunt enzime care determin depolimerizarea acizilor nucleici (adic
scindeaz hidrolitic legturile fosfodiesterice).
n funcie de acizii nucleici asupra crora acioneaz aceste enzime pot fi:
dezoxiribonucleazele care au rolul de a depolimeriza moleculele de ADN;
ribonucleazele care depolimerizeaz moleculele de ARN.