Reacia cu acidul azotos:

Ac.reacie poate fi utlizat i pentru dozarea cantitativ a aminoacizilor,prin

msurarea volumului de azot eliberat:un mol elibereaz 22,4 l de N2.Ac reacie st la
baza metodei Van Slyke,utilizat pentru determinarea azotului aminic.
Reactivi: NaNO2 10%; HCl 2M; aminoacizi de testat: Gly, Tyr
Reacia cu ninhidrin:
Ninhidrina este un puternic agent antio-xidant,care reactioneaza cu toti l-
aminoacizii,in domeniul de pH 4-8,cu formarea unor compusi colorati in albastru
violet(purpura lui Ruhemann).Sub actiunea oxidanta a ninhidrinei are loc dezaminarea
si decarboxilarea aminoacidului,cu producerea unei grupari carbonil la l-atomul de
carbon si eliberearea de CO2 si de NH3.Aminoacidul este dezaminat oxidativ,trecand
prin starile intermediare de acid l-iminic si de acid l-cetonic,in timp ce ninhidrina este
redusa la hidrindantina,care condenseaza cu amoniacul eliberat cu formarea
complexului colorat,denumit Purpura lui Ruhemann.

Reactia xantoproteica:
Aminoacizii care contin in structura lor un radical aril,prin incalzire cu acid azotic
concentrat,formeaza nitroderivati de culoare galbena.Sarurile acestor derivati,formate
prin aditie de amoniac sunt portocalii.
Reactivi si solutii: aminoacizi( glicina,tirozina,solutie 0,1%); fenol( solutie 0,1%); Acid
azotic concentrat; NH4OH concentrat.
Reactia Millon:
Aminoacizii care contin un radical hidroxibenzenic reactioneaza cu reactivul Millon
formand un complex de culoare rosie.Numai tirozina si derivatii ei dau o reactie
pozitiva.Reactivul Millon original este o solutie de azotat mercuric 50%,in acid
azotic.In aceasta metoda este utilizat un reactiv Millon modificat: sulfat mercuric in
acid sulfuric.
Solutii:aminoacizi ( glicina,tirozina,solutie 0,1%);reactiv Millon ( Hg SO4 15%) in acid
sulfuric 15%; fenol o,1%; azotit de sodiu,solutie 1%.
Reactia cu nitroprusiat:
In prezenta amoniacului ,gruparile SH ale tioaminoacizi reactioneaza cu nitroprusiatul
de sodiu Na Fe(CN)5 N0 si formeaza un complex colorat in rosu.
Solutii:Sol de nitroprusiat de sodiu 2%,proaspat preparata;solutie de amoniac;solutie
de testare 0,1%(cisteina,cistina,metionina)

Dozarea proteinelor serice cu reactiv Weichselbaum
Compuii cu legturi peptidice reacioneaz cu ionii de Cu2+ n mediu alcalin,
rezultnd un compus de culoare albastru-violet a crui intensitate este direct
proporional cu numrul de legturi peptidice.
Metoda poate fi folosit pentru determinarea concentraiei proteinelor din serul
sanguin. Reactivi:soluie de NaOH 10%;reactiv Weichselbaum: tartrat dublu de Na +
Na OH + sulfat de cupru cristalizat CuSO4 x 5 H2O;soluie standard proteic cu
concentraia cunoscut (10 mg/ml) de albumin seric bovin (BSA);proba de analizat
reprezentat de ser sanguin diluat corespunztor.

Dozarea proteinelor prin metoda biuretului:
Reacia este utilizat pentru determinarea cantitativ a proteinelor. Asemntor
compusului numit biuret, peptidele i proteinele conin grupri CO-NH- care
reacionaez cu o soluie alcalin de sulfat Cu (II) i determin apariia unei coloraii
albastru-violet.
Intensitatea culorii este o msur a numrului de legturi peptidice prezente ntr-o
protein.
carbonil legate printr-un atom de C sau N dau reactie pozitiva.
Metoda este utilizata pt. determinarea unor cantitati mari de proteine (1-20 mg).
Reactivi:Reactiv biuret; soluie standard proteic cu concentraia cunoscut (5 mg/ml)
de albumin seric bovin (BSA);proba de analizat reprezentat extract proteic total.
Incubare 10/ 37C . Citire la spectrofotometru n cuva cu drum optic de 1 cm la
lungimea de und 54 0 nm . Citirea se face fata de A.D


Glucoza
Fructoza
Pellucid cu caracter reducator - glucoza

Echilibrul intre forma piranozica si cea cu lant deschis
este directionat catre aceasta din urma pentru a se
produce reactia de oxidare.

Dozarea zaharurilor reducatoare din extractul de
portocala cu o-toludina
In prezenta acidului acetic, la cald, zaharurile reducatoare
formeaza cu o-toluidina un complex colorat care prezinta un maxim de absorbtie la
630 nm.
Metoda poate fi folosit pentru determinarea concentraiei glucozei din serul sanguin.
Reactivi:Reactiv o-toluidina; Solutie standrad de glucoza 100 mg%;proba de analizat
reprezentat de extract de portocala diluat corespunztor.Incubare 10/ baie de apa la
fierbere . Citire la spectrofotometru n cuva cu drum optic de 1 cm la lungimea de
und 630 nm fata de blanc .
Reactia glucozei cu o-toluidina

Dozarea lactozei din lapte
Lactoza dizaharid cu caracter reducator, 4-6% din laptele de vac i 2-3% din laptele
uman .
Concentraia lactozei poate fi determinat prin orice metod caracteristic pentru
zaharuri reductoare, dup deproteinizarea laptelui.

n cazul acestui experiment, se realizeaz deproteinizarea laptelui cu o soluie de
wolframat de sodiu, dozarea efectiv realizndu-se prin metoda Nelson. n cazul
acestei metode, ionii de Cu (II) sunt redui la ioni de Cu (I), care la rndul lor reduc
acidul fosfomolibdenic la un produs de reacie albastru.
Reactivi:reactiv alcalin de cupru; reactiv fosfomolibdenic;soluie 10% de wolframat de
sodiu;soluie M/3 de H2SO4;soluie stoc de lactoz 1%.Densitile optice fiind
proporionale cu concentraiile este valabil relaia:
D.O.proba 1/ D.O.proba 2 = C1/C2 , unde C1 este concentraia lactozei din 0,01 ml
lapte, iar C2 este concentraia lactozei din standard (0,6 mg).
Concentraia lactozei din lapte, exprim n g/100 ml este dat de relaia:
(D.O.proba 1/ D.O.proba 2) X ( 0,6/1000) X (100/0,01)

Dozarea lipidelor serice totale
Metoda Zolner-Kirsch care sta la baza acestei determinari,consta in reactia de culoare
pe care o dau dublele legaturi din straturile lipoizolor plasmatici cu reactivul unic
vanilina acid-fosforic( reactia sulfofosfo vaniliniei).Rezulta un compus roz care se
determina spectrofotometric la 530nm.
Reactivi:acid sulfuric concentrat,reactiv de culoare,solutie standard pt lipide ( triolina
in cloroform cu concentratie 760 mg %) coresp la 1000mg lipide/100ml.
Standardul se pstreaz la congelator ,deoarece cloroformul se evapora rapid ceea ce
determina concentratia solutiei standard. Concentratie de 760 mg % triolina produce o
reactie de culoare de aceeasi intensitate ca si cea data de lipidele serice in
concentratie de 1000mg%.Astfel,valoarea standardului luat in calcul va fi de 1000
mg% in loc de 760mg %,cat este concentratia de triolina din solutia considerata
standard.

Dozarea vitaminei E din uleiul de msline
Vitamina E se oxideaz n prezena clorurii ferice,iar ionii feroi rezultai reacioneaz
cu orto-fenantrolina rezultnd un compus rou cu absorban maxim la 510nm.
Reactivi:sol de orto-fenantrolina 0,12 %,in alcool etilic absolut;n-Heptan;solutie de
cloruca ferica anhidra 0,12% in alcool etilic absolut;acetat de vitamina E standard
1000ug/ml in n-heptan.

Dozarea activitatii glutamat piruvat transaminazei ( GPT)
Enzima glutamat piruvat transaminazei are denumirea tiiific L-alanin:2 oxoglutarat
aminotransferaza i catalizeaza reactia:
Alanina+ 2 oxoglutarat=-= piruvat+glutamat
i se gsete alaturi de GOT in toate tesuturile procariotelor si eucariotelor.Aceste
enzime au o deosebita imp in organism facand legatura dintre metabolismul
glucidelor,lipidelor( prin intermediul cetoacizilor) si metabolismul proteic( prin
intermediul aminoacizilor).