EXPERIENE PE PREPARAT NEUROMUSCULAR

Pregtirea preparatului neuromuscular in vitro

Broasca imobilizat, eviscerat, tiat n dou va fi jupuit. Dup splarea plasnetei se
taie longitudinal bontul coloanei vertebrale i se prepar nervul sciatic pn la trecerea sa
prin gaura obturat. Se taie apoi centura pelvian, avnd grij ca nervul sciatic s nu fie
lezat. ntre timp pentru mpiedicarea uscrii nervului udm preparatul cu soluie Ringer.
Dup tierea centurii pelviene se desface musculatura coapsei cu ajutorul degetelor pe
partea dorsal pn ce apare nervul ntre muchi. Continum apoi prepararea nervului cu
foarfeca pn ce ajungem la articulaia genunchiului, secionm transversal muschii
coapsei deasupra articulaiei, secionm i osul femurului lsnd un bont de 2 cm.
Introducem apoi un fir de a sub tendonul lui Achile, pe care l legm i l secionm
dedesubtul ligaturii i preparm muchiul pn la captul superior, apoi secionm tibia.
Preparatul neuromuscular este deci alctuit din bontul coloanei vertebrale, nervul sciatic,
bontul osului femur, articulaia genunchiului i muchiul gastrocnemian.
Pregtirea preparatului neuromuscular in situ
Se imobilizeaz broasca prin distrugerea mduvei spinrii. Se culc animalul pe abdomen
i se face o incizie pe pielea gambei, se caut tendonul lui Achile i se introduce un fir de
a sub tendon. Se leag tendonul i se taie sub ligatur. Se face apoi o incizie pe pielea
coapsei, se caut nervul sciatic i se intoduce sub nerv o pereche de electrozi.
Excitarea preparatului se face cu curent electric (impulsuri rectangulare de curent, cu
intensitate i durat reglabil). Excitarea se poate face pe dou ci:
- excitarea direct: se aeaz o pereche de electrozi pe suprafaa muchiului,
- excitarea indirect: se aeaz o pereche de electrozi sub nervul sciatic.
Descriei fenomenele implicate n cazul stimulrii indirecte (direcia propagrii
potenialului de aciune, funcionarea jonciunii neuromusculare, rspunsul celulei
musculare, mecanisme intracelulare de semnalizare).
Rspunsul muchiului dat la excitarea electric unic (indiferent de calea stimulrii:
direct sau indirect) este o secus muscular cu form caracteristic. Ea se compune din
perioada de laten cu o durat de 0,005 - 0,01 sec (5 - 10 msec), care ncepe din
momentul aplicrii excitantului i se sfrete la nceputul contraciei.
Explicai fenomenele care contribuie la perioada de laten.
Contracia este nregistrat ca o pant ascendent cu o durat de aprox. 0,04 sec (40
msec). Ea este urmat de poriunea descendent, produs de relaxarea muchiului. Acest
segment are durat de aprox. 0,05 sec (50 msec). Secusa muscular a unui muchi de
broasc la o temperatur de 20C are o durat total de 0,1 sec (100 msec). Durata

secusei depinde de temperatura la care se lucreaz, de starea actual a muchiului (n

cazul oboselii durata secusei este mai mare) i de dezvoltarea filogenetic a animalului.

Secusa muscular.
Determinarea pragului de excitaie: se numete prag de excitaie intensitatea minim a
curentului, care produce o secus muscular.
Dup obinerea pragului de excitaie mrind treptat intensitatea curentului, obinem
rspunsuri din ce n ce mai ample, pn la atingerea unei valori maxime, dup care
amplitudinea curbelor rmne constant. Fenomenul poate fi explicat n felul urmtor:
fibrele care alctuiesc muchiul (respectiv nervul) au praguri de excitaie diferite. n cazul
unui curent slab am atins pragul numai la cteva fibre musculare, ca atare rspunsul va fi
slab. Mrind intensitatea curentului, atingem pragul la mai multe fibre, iar la o intensitate
dat toat fibrele se vor contracta simultan i secusa muscular va fi de amplitudine
maximal. Legea totul sau nimic care i-a dovedit valabilitatea pentru miocard, nu mai
este valabil la muchiul scheletic integral, fiind valabil la muchi numai pentru o
singur fibr muscular.

Determinarea pragului de excitaie.

Fenomenul de superpoziie: aplicnd dou excitani succesivi n cazul cnd intervalul
este mare, obinem dou secuse musculare. Dac scdem intervalul astfel ca aceasta s fie
mai mic de 0,1 sec, muchiul nc nu va fi complet relaxat dup primul excitant i ncepe

o secus nou, care se suprapune peste prima i vom nregistra o secus dublat cu un
aspect caracteristic.

Fenomenul de superpoziie.
Explicai, de ce contracia a doua are amplitudine mai mare.
Explicai de ce nu se poate obine superpoziie la miocard.
Tetanos incomplet i complet: excitnd preparatul neuromuscular cu stimuli repetai, cu
o frecven mare, nregistrm o contracie care nu mai este urmat de relaxarea
muchiului. Aceast form de contracie este denumit contracie tetanic sau tetanos
complet. Ea este forma obinuit, natural a contraciei musculare. n mod normal, n
organism micrile sunt nite contracii tetanice ale unitilor motorii.
Dac excitm preparatul cu o frecven nu prea mare, obinem un tetanos incomplet,
forma de contracie la care muchiul prezint i tendine de relaxare, dar relaxarea
complet nu poate s aib loc, fiindc urmeaz contracia urmtoare. Frecvena excitrii
pentru obinerea unui tetanos complet depinde de starea de excitabilitate a preparatului,
de temperatura la care este efectuat experiena i de intensitatea curentului aplicat.
Amplitudinea contraciei tetanice creste cu frecvena stimulrii (pn la o valoare
optim).

Tetanos incomplet i complet.

Studiul oboselii musculare: nregistrm o secus muscular, dup care stimulm
preparatul cu o frecven subtetanic. Dup un timp observm scderea amplitudinii
secuselor i alungirea duratei. Scderea amplitudinii se datoreaz relaxrii incomplete, iar
urmtoarea contracie pornete de la o stare semicontractat a muchiului.

Studiul oboselii musculare.

Explicai fenomenele observate.