1

INTRODUCERE
Organizarea celular la eucariote, adoptarea unei geometrii variabile i micrile
executate depind de CITOSCHELET - o reea intricat de proteine filamentoase care se
extinde n ntreaga citoplasm.
n celulele animale o funcie de o importan deosebit este meninerea volumului
celular n limite normale, n absena peretelui celular. Dei nu demult citoscheletul era
comparat, la scar, cu scheletul osos uman, astzi concepia include proprietile
dinamice ale citoscheletului, astfel nct comparaia se extinde la sistemul osteo-muscular
uman.
Interiorul unei celule se afl ntr-o continu micare iar elementele citoscheletului
reprezint suportul acestor micri: pentru schimbarea poziiei organitelor n celul,
segregarea cromosomial n timpul mitozei, separarea celulelor fiice prin apariia anului
de diviziune. Citoscheletul pare a fi o noutate la nivelul eucariotelor; lipsete la procariote
iar la eucariote joac un rol crucial. Celula eucariot este asemenea unei companii care
realizeaz o mare varietate de produse i care posed o nalt compartimentare i
specializare i n acelai timp interconexiuni deosebite prin sisteme de transport.
Citoscheletul controleaz att localizarea organitelor ct i translocarea acestora.
Citoscheletul este o reea format din trei tipuri de proteine filamentoase:
- filamente de actin
- microtubi
- filamente intermediare
Fiecare tip de filament este format din tipuri diferite de subuniti proteice: filamentele de
actin au la baz actina, microtubii au la baz tubulina iar filamentele intermediare sunt
formate de o familie de proteine fibroase.

2
MICROFILAMENTELE DE ACTIN
Actina exist n celul sub dou forme: actina G forma globular i actina F, forma
fibrilar organizat n microfilamente.
Actina este una din cele mai abundente proteine n celulele eucariote.
La psri i mamifere s-au descris 6 tipuri diferite de actin:
-

3 tipuri de -actine, fiecare din ele fiind caracteristic unui anumit tip de
muchi;
2 tipuri de actine nemusculare denumite -actin i -actin, gsindu-se n
aproape toate celulele nemusculare;
un tip de -actin, specific muchiului neted intestinal.

Actina globular este format dintr-un singur polipeptid cu greutate molecular de

45000 Da, de form globular, cu lungime de 6 nm i lime de 4 mn. Actina G are locuri
de cuplare pentru mai multe substane: pentru profilin (o protein care inhib
polimerizarea), pentru ioni cum sunt Ca sau Mg care controleaz polimerizarea, pentru
ATP (care furnizeaz energia pentru polimerizare) i pentru miozin (mai exact pentru
capul moleculei de miozin).
Actina fibrilar (actina F sau microfilamentele de actin) este format prin
polimerizarea actinei G, n prezena actinei G, datorit energiei determinate de hidroliza
ATP. Polimerizarea actinei G pentru a forma actina F are loc n dou etape:
1. faza iniial, denumit faza de lag, n care polimerizarea are loc cu o vitez
sczut
2. faza de cretere rapid, n care, prin energia furnizat de hidroliza ATP, monomerii
de actin G se adaug la filamentul de actin n cretere. Procesul de polimerizare
se oprete n momentul n care concentraia monomerilor din filament o egaleaz
pe cea a monomerilor din soluia rmas.
3. un filament de actin poate fi distrus prin procese inverse de depolimerizare.
Filamentele de actin interacioneaz cu cele de miozin n celulele musculare. n
celulele nemusculare filamentele de actin interacioneaz cu molecule izolate de
miozin. n celulele nemusculare, microfilamentele de actin intr n compoziia
specializrilor plasmalemei cum ar fi microvilii i stereocilii, sau particip la formarea
jonciunilor nemusculare.
Fenomenul de polimerizare este influenat de medicamente cum ar fi citochalazinele care
inhib procesul. Alte substane cum ar fi faloidina inhib depolimerizarea.

3
Miozina
Miozina reprezint una din proteinele asociate filamentelor de actin fie n
celulele musculare fie n cele nemusculare.

4
MICROTUBII
A doua categorie de structuri implicate n motilitatea celular i subcelular i
determinismul formei celulare este reprezentat de microtubi. Microtubii sunt polimeri
alctuii din subuniti de tubulin i care, alturi de filamentele intermediare umplu
citosolul cuprins ntre nucleu i citoplasm. Dei se completeaz morfologic, microtubii
i filamentele intermediare au funcii diferite n celul.
Microtubii sunt reponsabili de o multitudine de micri celulare, ca de exemplu,
micrile cililor i flagelilor, transportul vezicular intracelular, creterea la nivelul conului
de cretere neuronal, iar la unele protiste, de capturarea hranei din mediul extern.

Microtubi. Microscopie electronic

Toate micrile rezult din polimerizarea i depolimerizarea microtubilor i din

aciunea proteinelor motrice asociate microtubilor, kinezina i dineina.
n unele cazuri, microtubii au funcii pur structurale, jucnd un rol important n
determinismul plasticitii eritrocitare.
Microtubii sunt polimeri formai din subuniti globulare de tubulin. Aceste subuniti
sunt dispuse n forma unui cilindru de 24 nm diametru, de 2 ori mai mare dect cel al
filamentelor intermediare i de 3 ori mai mare dect cel al microfilamentelor. Avnd
lungimi variabile, microtubii sunt structuri mult mai rigide dect alte elemente
citoscheletale, datorit arhitecturii lor tubulare, mult mai complex dect a
microfilamentelor.
Tubulinele.
Microtubii sunt alctuii din subuniti dimerice de monomeri de -tubulin i tubulin.

Microtub. Schem.
Tubulinele dispuse n heterodimeri.
Tubulinele din heterodimerii adiaceni
sunt puin decalate, inducnd aparena
de spirale de monomeri i . Peretele
microtubilor are aspect de tabl de ah

Fiecare monomer tubulinic are form globular, cu un diametru de 4 nm.

Heterodimerul are o lungime de 8 nm. Fiecare heterodimer leag 2 molecule de GTP.
Primul situs de legare situat la nivelul -tubulinei, leag GTP ireversibil i nu l
hidrolizeaz n timp ce al doilea situs, situat pe -tubulin, leag GTP reversibil i l
poate hidroliza la GDP. Acest al doilea situs de cuplare al GTP este denumit situs de
schimb, deoarece GDP poate fi nlocuit de GTP. Hidroliza GTP legat la -tubulin este
legat de fenomenul de polimerizare, de adiie a subunitilor tubulinice la capetele
microtubilor.
Un microtub este compus din 13 protofilamente dar pot exista i variaii, la diferite specii,
ntre 11-15 protofilamente. Adesea, protofilamentele se asociaz n structuri de tip dublet
sau triplet, cum ar fi cazul cililor vibratili i flagelilor (dublete) sau centriolilor (triplete).
Un dublet de microtubi este format din microtubii A i B. Microtubul A este complet,
format din 13 protofilamente, n timp ce microtubul B const din 10 protofilamente care
formeaz un tub prin fuzionarea cu peretele tubului A. Un triplet de microtubi are n plus
10 protofilamente adugate la un microtub B dintr-un dublet.
Asamblarea i dezasamblarea microtubilor.
Microtubii se asambleaz prin procese de polimerizare ale dimerilor tubulinici .
Dup asamblare, stabilitatea microtubilor depinde de temperatur: la 4C, microtubii
depolimerizeaz n dimeri stabili iar la 37C, n prezena GTP, dimerii tubulinici
polimerizeaz. Asamblarea microtubilor este asemntoare cu cea a filamentelor de
actin.

6
Asamblarea microtubilor este dependent de concentraie: la concentraii ale
dimerilor de tubulin peste Cc se produce polimerizarea iar la concentraii ale dimerilor
sub Cc se produce depolimerizarea.
Centrii de organizare ai microtubilor (MTOC).(centrozomii)
Structura MTOC.
O analiz atent arat c reeaua de organizare a microtubilor este radiar, cu
punct de plecare perinuclear. Acest punct de plecare este reprezentat de centrozom,
denumit i centru de organizare al microtubilor (MTOC MicroTube Organizing
Center). MTOC apare pe electronofotografii ca un material amorf, electronodens situat n
citosol. Termenul de MTOC descrie structurile utilizate de celulele interfazice pentru a
organiza microtubii. n cele mai multe cazuri MTOC este un centrozom. n schimb, unele
celule epiteliale au MTOC care nu seamn cu centrozomii.
Rolul major al MTOC este de suport de nucleere pentru majoritatea microtubilor,
reprezentnd i un situs de control al asamblrii. La nivelul MTOC, microtubii se prezint
cu captul (-), ceea ce le permite creterea radiar ctre plasmalem. MTOC conin o
pereche de centrioli nglobai ntr-o substan amorf. Centrozomii sunt situai n centrul
MTOC dar nu iau contact direct cu capetele microtubilor citosolici.
Funciile microtubilor.
Implicarea n transportul vezicular dintre diverse compartimente
Microtubii sunt structuri dinamice implicate n transportul proteic i n
determinarea polaritii unor tipuri de celule. Microtubii au dispoziii diferite n celulele
epiteliale polarizate n interfaz.
O reea dens de microtubi scuri i dispui aleator este localizat ntre membrana
apical i aparatul Golgi. n fibroblaste, de exemplu, complexul Golgi este concentrat n
apropierea MTOC. n timpul mitozei, complexul Golgi se disperseaz n multiple
vezicule n citosol. Cnd microtubii citosolici se reorganizeaz, veziculele Golgi se
deplaseaz de-a lungul microtubilor ctre MTOC, unde se reagreg pentru a determina
complexe largi membranare. Microtubii sunt asociai i reticulului endoplasmatic.
Alt mnunchiuri de microtubi sunt dispuse longitudinal n axul apico-bazolateral.
Microtubii sunt orientai cu capetele (-) spre membrana apical i cu cele (+) spre
membrana bazolateral. Organizarea spaial neobinuit a microtubilor are implicaii
importante n transportul vezicular ghidat ntre compartimentele celulare membranare.
Filamentele intermediare.
Filamentele intermediare (FI) formeaz a treia component fibrilar a
citoscheletului celular.
Numele lor deriv din observaia c diametrul lor (de circa 10 nm) este
intermediar ntre al microfilamentelor (cca. 7 nm) i cel al microtubilor (24 nm). FI se
gsesc n aproape toate celulele eucariote, cu preponderen n celulele epiteliale i
neuroni, unde sunt de 10 ori mai abundente dect n alte tipuri celulare. Modul lor de
organizare ntr-o reea ce strbate ntreaga citoplasm, mod de organizare oarecum
asemntor celui al microtubilor sugereaz c funcia FI este de a fortifica structurarea
intracelular precum i a celulelor n esuturi. Rolul suportiv jucat de FI este evideniat n
cazurile extreme cum sunt ghearele sau firele de pr, vestigii ale celulelor epidermice. FI
sunt importante mai ales n vecintatea membranei, acolo unde particip la medierea
contactului intercelular sau celule-matrice extracelular (MEC).

7
Exist o serie de caracteristici fizice i biochimice care deosebesc FI de microtubi
i microfilamente:
FI sunt extrem de stabile; chiar la concentraii saline mari sau dup extracie cu
detergeni, filamentele rmn polimerizate; n consecin metodele de purificare, care
utilizeaz ca agent ureea, vor extrage FI dintre proteinele deja solubilizate.
ca i structur, FI sunt structuri fibrilare -helicale care vor asambla filamente.
din punct de vedere al asamblrii, FI nu pot cupla nucleotide, deci polimerizarea lor va
fi independent de ATP sau GTP.
Cu toate deosebirile prezentate, exist o serie de puncte comune care se vor
observa n termeni de structur i funcie n descrierea de mai jos.
Clasificarea filamentelor intermediare.
FI reprezint o superfamilie de proteine -helicale care, pe baza similitudinilor de
secven pot fi grupate n 5 clase (vezi tabelul alturat)
FI
TIPUL I
keratine acide
TIPUL II
keratine bazice
TIPUL III
Desmin
Protein fibrilar glial
acid
Vimentin
Periferin
TIPUL IV
NF-L
NF-M
NF-H
Internexin
Nestin

PM

Nr. polipeptide

40-57

>15

epitelii

53-67

>15

epitelii

53
50

1
1

57
57

1
1

62
102
110
66
240

1
1
1
1
1

TIPUL V
Laminina A
70
1
Laminina B
67
1
Laminina C
67
1
NF = neurofilamente;
L, H, M = low, medium, high, se refer la greutile moleculare
PM = pondere (greutate) molecular

Distribuie
tisular

muchi
celule gliale
astrocite
mezenchim
neuroni

Neuroni maturi din

SN
central
i
periferic
SNC n dezvoltare
celule neuro-epiteliale stem
n toate celulele