Virusuri

virusuri = particule infecioase cu dimensiuni foarte mici (20300 nm), alctuite dintr-un singur acid nucleic ARNsau ADN
protejat de un nveli.
NU au- enzime productoare de energie
- capacitate de biosintez
- nu cresc
- nu se divid- nu se nmulesc sunt replicate de o celul
gazd pe care o paraziteaz
AU doar flux informaional
observarea i/sau aprecierea dimensiunii particulei virale prin
microscopie elecronic
ultrafiltrare
ultracentrifugare

Anatomia funcional a virusurilor

Genomul viral
- reprezentat de o molecul ARN sau ADN
- deine informaia necesar replicrii
- ADN are cel mai frecvent o structur bicatenar (monocatenar la
parvovirusuri), liniar (circular la papovavirusuri i hepadnavirusuri)
- Numrul genelor funcie de mrimea virusului
- ARN are cel mai frecvent o structur monocatenar (bicatenar la
reovirusuri), cu
polaritate pozitiv (funcioneaz ca ARNm) (picornaviridae,
togaviridae)sau
polaritate negativ (are asociat o ARN-polimeraz) (rhabdoviridae,
myxoviridae)
constituit la unele virusuri din mai multe segmente
(ortomixovirusuri, reovirusuri).

Capsida viral
- constituit din molecule proteice repetitive codificate de
genomul viral
- -dup gruparea unitilor structurale
helical, n jurul spiralei de acid nucleic (orto-i paramixovirusuri, rabdovirusuri);
cubic, icosaedric pe electronomicrografii format din
capsomere
* pentone (n fiecare vrf al icosaedrului),
* hexone (pe feele i muchiile icosaedrului);
complex (poxvirusuri)- electronomicrografii nucleu
flancat de 2 corpi laterali, nconjurat de o membran fin,
anvelop lipoproteic format din tubuli

Funciile capsidei virale

protejeaz acidul nucleic viral
confer forma caracteristic virusului
fixeaz virusul la receptorii specifici de pe suprafaa
celulelor
conine determinani antigenici fa de care gazda
reacioneaz prin rspuns imun

Anvelopa (peplos)

- prezent la virusuri cu simetrie helical i la unele

-

virusuri cu simetrie icosaedric

deriv din sistemul membranar al celulei gazd
(membrana citoplasmtic, membrana nuclear, reticul
endoplasmatic);
include glicoproteine codificate de genomul viral
(peplomere) cu rol de

liganzi la receptori celulari (ex.hemaglutinine)

receptori pentru Fc i C3b (la herpesvirusuri)
enzime (ex neuraminidaza)

Replicarea virusurilor
- proces desfurat numai n celula vie parazitat
- genomul viral subordoneaz metabolismul energetic i de
biosintez al celulei pentru sinteza proteinelor virale i
replicarea acidului nucleic viral
- metabolismul celular
poate fi subordonat total sau
poate continua paralel cu sinteza componentelor virale
- replicarea parcurge mai multe etape:
I- adsorbia
- replicarea genomului viral
II- penetrarea n celul
- biosinteza proteinelor tardive
III - decapsidarea
V - morfogeneza i eliberarea
IV- sinteza componentelor virale
virusurilor
biosinteza proteinelor precoce

I. Adsorbia

-liganzi virali - structuri virale de suprafa (capsidale sau peplomere) se

ataeaz la receptori de pe suprafaa celulei.
II. Penetrarea

ptrunderea virusului n celul prin

- translocarea direct a membranei celulare
(ex picornavirusuri, papovavirusuri)
- endocitoz (majoritatea virusurilor nude)
- fuzionarea peplosului cu membrana citoplasmatic (majoritatea
virusurilor nvelite).
III. Decapsidarea

pierderea nveliului proteic viral

migrarea acidului nuclei viral

- n nucleu, la virusurile ADN (excepie poxvirusurile)
- n citoplasm, la virusurile ARN (excepie v.gripale).
IV. Sinteza componentelor virale

Biosinteza proteinelor precoce

transcripia ARN mesager
- la v.ADN d.c. transcrierea unei catene cu participarea ARN-polimerazei
celulare
- la v.ADN m.c. se sintetizeaz o caten ADN complementar care este
transcris n ARNm
- la v.ARN(+) genomul viral funcioneaz ca ARNm
- la v.ARN(-) genomul este transcris n ARNm de ARN-polimeraza viral
- la v.ARN d.c., una din catene este transcris de ctre ARN-polimeraza
viral
ataarea ARNm la ribozomii celulei gazd
- sinteza proteinelor precoce implicate n replicarea acidului nucleic viral.
Replicarea acidului nucleic viral
virusuri ADN
- replicare identic cu a ADN bacterian;
- la virusurile mici (parvovirusuri, papovavirusuri) intervine ADNpolimeraza celular;
- la virusurile mari (v.herpetice, adenovirusuri, poxvirusuri) particip
ADN-polimeraza viral.

 virusuri ARN
- la virusuri m.c.(+) este sintetizat o caten ARN (-) cu ajutorul unei
polimeraze virale (proteine precoce) pe care sunt transcrise mai multe
catene ARN (+) genomice
- la virusuri m.c.(-) polimeraza viral produce o caten ARN (+) pe care
sunt transcrise mai multe catere ARN (-)
- la virusuri ARN d.c. are loc sinteza de catene (+) care funcioneaz ca
tipar pentru noi catene (-), restaurnd caracterul b.c. al genomului viral.
Sinteza proteinelor tardive
sunt proteine structurale
la unele virusuri (picornavirusuri, parvovirusuri, retrovirusuri) sunt
sintetizate ca precursori macromoleculari, clivai apoi n proteine structurale
de ctre proteaze virale.
V. Morfogeneza i eliberarea virusurilor
asamblarea nucleocapsidelor virale;
la virusuri cu simetrie icosaedric este posibil morfogeneza de capside goale
(exces de proteine structurale);
componente virale acumulate n exces pot genera incluzii intracelulare
(intracitoplasmatice sau intranucleare).

VCM: incluzii ochi de bufni

Virusul rabic - corpusculii Babe - Negri

(IC acidofile)

eliberarea
la virusurile nude are loc, cel mai frecvent, prin liza celulei
la virusurile nvelite prin nmugurire n zone ale membranei celulare
(citoplasmatice, nucleare, reticul endoplasmatic) unde au fost implantate
glicoproteine virale, cu eliberare prin exocitoz sau prin liz.
Replicarea particular a unor virusuri
Retrovirusuri
- genomul viral de tip ARN (+) este transcris ntr-o caten ADN cu participarea
unei reverstranscriptaze
- o polimeraz celular determin sinteza unui pregenom ADN d.c. care se
integreaz n genomul celulei gazd
- sub efectul unor stimuli, o ARN-polimeraz celular transcrie una din catene n
ARN m.c. (+) care funcioneaz att ca ARNm ct i ca genom viral.
Virusul hepatitei B
- genomul viral este reprezentat de ADN parial d.c.
- o ADN-polimeraz viral completeaz dublul helix
- replicarea genomului viral are loc cu sinteza unui pregenom ARN care servete
ca tipar pentru sinteza ADN parial d.c. cu participarea unei
reverstranscriptaze.

Replicarea HIV

Virusuri defective
necesit prezena unui virus ajuttor pentru
realizarea ciclului replicativ intracelular
- parvovirusuri din genul Dependovirus realizeaz
coinfecii cu adenovirusuri;
- virusul hepatitei delta realizeaz coinfecii sau
suprainfecii cu virusul hepatitei B care i ofer
AgHBs.

Genetica viral
variabilitatea genetic poate fi consecina unor
mutaii sau recombinri genetice.
mutaie
- poate s apar prin substituirea unei baze azotate ntrun codon sau prin deleie;
- mutani cu modificri fenotipice:
mutani condiionat letali
* mutani reci (sunt replicai optim la 250C);
* mutani calzi (tolereaz temperaturi peste 370C);
* mutani cu scimbarea spectrului de gazd (mai puin viruleni
pentru gazda natural);

mutani antigenici;
mutani rezisteni la ageni terapeuti antivirali.

recombinare
- schimb de material genetic ntre dou genome (o
celul coinfectat de dou tulpini) care prezint
omologie structural
recombinare clasic (n special la v.ADN);
reasortare genomic (la v.ARN cu genom segmentat).

Interaciuni non-genetice ntre virusuri

Interferena viral = inhibarea replicrii unui virus
printr-un alt virus.
Interferen omolog = este mediat de particule
virale defective care interfer cu replicarea virusului
omolog complet.
Interferen heterolog = infecia cu un virus previne
suprainfecia cu alte virusuri prin
- competiie pentru receptori
- inhibarea penetrrii
- inhibarea mecanismelor de sintez intracelular.

Relaia virus celula gazd

Celule permisive = realizeaz integral toate etapele ciclului
replicativ.
Celule semipermisive = replic cantiti mici de virus.
Celule nepermisive = replic virusul pn la un anumit stadiu.
Infecia celulelor permisive i semipermisive este productiv,
difereniat n
- citocid
- persistent
- transformant
Infecia celulelor nepermisive este non-productiv i poate fi
de tip
- letal
- latent
-transformant
- abortiv
- lent

Taxonomia viral

Familie include n denumire sufixul -viridae;

Subfamilie include n denumire sufixul -virinae;
Gen include n denumire sufixul -virus.
Criterii de clasificare
Proprietile genomului
Replicarea
Proprietile virionului
Structura antigenic
Tropismul celular, tisular i de gazd

Bacteriofagi

- virusuri care paraziteaz bacteriile

- au o structur analog virusurilor animale
- fagii T, cei mai cunoscui, sunt constituii din

cap nucleocapsida cu simetrie icosaedric avnd

n centru ADN d.c.

coada cu simetrie helical, include un canal axial
rigid i un manon contractil;
plac bazal hexagonal , la fiecare vrf cu cte un
croet i o fibr
ciclul de replicare n celula bacterian este
asemntor cu cel descris la virusurile de interes
medical.

Relaia fag celula bacterian

Fag virulent = determin infecie de tip litic (fag
vegetativ).
Fag temperat = se integreaz n genomul bacterian i
se replic sincron cu acesta (profag).
Bacterie lizogen = celul n care profagul poate
evolua n fag vegetativ sub efectul unor factori din
mediu (inducie fagic).

Aplicaii medicale ale bacteriofagilor

lizotiparea (subdivizarea unei specii bacteriene n
lizotipuri)
identificarea unei specii
depistarea unor bacterii patogene n ape de suprafa.

Simetrie binara

Bacteriofagi - ME

Chimioterapice antivirale
I analogi nucleozidici
II amine sintetice
III ali compui
I analogi nucleozidici
inhibitori ai polimerazei virale Aciclovir (1983) - herpesvirusuri
- Famciclovir

- Ganciclovir CMV
Inhibitor al timidinkinazei virale Idoxuridina (1963) topic n keratita
herpetic
Inhibitori ai reverstranscriptazei - didanozina
- stavudina
- zalcitabina
- zidovudina (azidotimidina, AZT)

II amine sintetice, peptide sintetice

- Amantadina blocheaz decapsidarea VGA+ eliberarea
- Rimantadina- derivat de amantadina mai puin toxic
- Peptide sintetice inhibitori ai proteazelor virale indinavir
- saquinavir
- ritonavir
- n asociere cu inhibitorii reverstranscriptazei
tratamentul infeciei cu HIV
III ali compui foscarnet derivat de pirofosfat
- inhib ADN-polimeraza virusurilor
herpetice+ reverstranscriptaza HIV
- asociere sinergic cu aciclovir,
ganciclovir, AZT
- ribavirin inhib replicarea unor virusuri ARN VRS,
gripal A,B, virus Lassa (arenavirus)
sau ADN (virusuri herpetice)

Prionii
Proteine infecioase, lipsite de secvene nucleotidice capabile s
codifice descendenii
Sunt izomorfe (izomeri) ale unei proteine normale codificat de o gen
identic la mai multe specii i localizat la om pe braul scurt al
cromozomului 20
Proteina prionic normal PrPc este ancorat n membrana extern a
celulelor tuturor mamiferelor i psrilor, inclusiv la om. Funcia
necunoscut.
Izomorfa patogen PrPsc fixat pe membrana celular determin
leziunile din bolile prionice
Bolile prionice ereditare prin linia germinativ
- altele se transmit i orizontal intra sau interspecific,
asemntor infeciilor

Boli prionice
Animale - Scrapie
infecioas
- Encefalopatia transmisibil a nurcilor
- Encefalopatia spongiform bovin
BSE boala vacii nebune
Umane
Kuru
Creutzfeld Jacob (CJD)
iatrogen
sporadic
familial
Sdr. Gerstmann Straussler Scheincker (GSS)
Insomnia fatal familial
Boala Alzheimer

infecioas
infecioas

infecioas
infecioas
necunoscut
mutaie PrPc
mutaie PrP c
mutaie PrPc
mutaie PrPc

Boala Kuru populaia Fore din Noua Guinee

- 1957-1966 cea mai frecvent cauz de deces la femei
- a disprut dup renunarea la ritualul canibalic de a
mnca creierul rudelor moarte
Boala Creutzfeld- Jacob
- Forma infecioas iatrogen transplant de esuturi de la donatori
infectai- cornee, duramater, timpan
- intervenii chirurgicale cu
instrumentar contaminat
- terapie cu hormoni hipofizari
- obiceiuri alimentare evreii din Liban, Israel creier
i ochi de oaie inciden crescut a bolii
- Forma ereditar mutaie a codonului 178 aspartat-asparagin

Evreii din Libia, Tunisia mutaie a codon 200 de la glutamat la

lizin
CJD sporadic necunoscut
Sindromul Gerstmann Straussler- Scheincker
- Toate cazurile sunt ereditare cu variaii ale simptomatologiei funcie
de codonii mutaiei
-ataxie mutaii de la prolin la leucin, 102 i 105
- Demen alanin la valin, 117
Boala Alzheimer
- Cunoscut ca ereditar
- 198 - substituia fenilalaninei prin serin
- 217 glutamin prin arginin
Insomnia fatal familial
- Descris la 3 familii italiene cu mutaii n codon 168

Istoric
- 80 ani controverse privind etiologia bolii scrapie
- 1988 Stanley B. Prusiner descoper prionii
- 1992 descoperit gena care codific prionii
Au fost mai multe ipoteze
- 1910 ipoteza infeciei cu un protozoar
- Ipoteza unui virus filtrabil 1946 1500 oi vaccinate cu un extract
formolat de esut limfoid ovin
- Ipoteza bolii ereditare receptivitatea la transmiterea bolii de 100%
la capre, la oi 0-80 dup ras
S.B. Prusiner ambele ipoteze infecioas/boal genetic
Teste biologice pentru infectivitatea prionilor
Scrapie reprodus experimental la diferite animale prin injecie de
extracte cerebrale de la oi bolnave dup o perioad de incubaie
lung oarecii dup 1 an, hamsterii aurii sirieni cu 50% mai
receptivi

n creierul de hamster mbogit pentru infeciozitatea scrapie Prusiner

a descoperit particule n form de bastonae purttoare de
infeciozitate
- Prioni d-50nm
- ultrastructur neregulat similar amiloizilor, total diferit de
structura virusurilor
- proteazele le distrug infectivitatea
- rezisten extrem la UV cu 254 nm care inactiveaz acizii
nucleici
Contribuia geneticii moleculare
- Descoperirea genei PrPc i a mutaiilor punctiforme din diferiii codoni
Rezist la ageni inactivatori ai infeciozitii
- 1340C 18-30 min, unele tulpini scrapie rezist 90 min
- Deeuri solide autoclavate 2 ore

Rezistena explic transmiterea la vite epidemia de BSE

Calea de transmitere fina de oase cu resturi de la oile bolnave de
scrapie
La om consum de carne infectat chiar prelucrat termic
Patogenia
- Apariia PrPsc n organism origine endogen mutaii n codonii
genei care codific PrPc
- origine exogen
PrPc se fixeaz pe o gam mai larg de celule dar, leziuni apar acolo
unde realizeaz concentraii maxime
- creier ntotdeauna
- scrapie - i mduva spinrii + ochi
Leziunile - plci de amiloid
- degenerescen spongiform
- glioz
- pieredere neuroni
- n absena inflamaiei i rspunsuns imun

Simptomatologia declin subacut sau cronic al funciei cognitive

demen
i/sau motorii (ataxia)
Debut 40-70 ani
Diagnostic de laborator
- Intravitam imposibil
- Postmortem examen histopatologic al creierului
Concluzie
Prionii difer de toate microorganismele
Bolile determinate sunt pseudoinfecii
Utilizm termenii caracteristici bolilor infecioase doar pentru c
informaiile provin din protocoale experimentale ale virologiei.