BIOCHIMIE MEDICAL

Suport curs pentru studenii Facultilor de Medicin i

Asisten Medical

CUPRINS

1. Proteine
2. Enzime
3. Vitamine
4. Energetica biochimic
5. Metabolismul glucidic
6. Metabolismul lipidic
7. Metabolismul proteic
8. Metabolismul nucleotidelor purinice si pirimidinice
9. Metabolismul cromoproteinelor
9.1. Biosinteza hemoglobinei
9.2. Degradarea hemoglobinei (bilirubinogenez
Abrevieri folosite n text

1. PROTEINE

Proteinele sunt componeni de baz ai celulei, reprezentnd aproximativ 50%

din greutatea ei uscat. Proteinele se gsesc n toate compartimentele celulare, fiind
substane fundamentale din toate punctele de vedere pentru structura i funcia
celulei. Prin hidroliza proteinelor se obin compui cu greutate moleculara mica,
aminoacizi.
n organism proteinele ndeplinesc funcii multiple (plastic, energetic,
catalitic etc.) care le difereniaz de lipide sau glucide.
n alctuirea moleculelor proteice, aminoacizii se unesc prin legturi amidice
numite legturi peptidice, care se realizeaz prin eliminarea unei molecule de ap
ntre gruparea carboxil a unui aminoacid i gruparea amino a aminoacidului urmtor.

1.1.AMINOACIZII
Prin hidroliza proteinelor se formeaz 20 de -aminoacizi. Acetia sunt
compui cu greutate molecular mic care conin dou grupri funcionale, carboxil
i amino, legate de acelai atom de carbon ( C ).
Formula general a unui aminoacid este:

R CH COOH
NH2

la care corespund toi aminoacizii cu excepia prolinei si hidroxiprolinei. Dup

structura radicalului R, aminoacizii se clasific n funcie de natura radicalului R:

Tabel 1 - Clasificarea -aminoacizilor din structura proteinelor

Formula structural
R CH COOH
Numele uzual
Numele tiinific
NH2

I. Radical alifatic (acizi monoaminomonocarboxilici)

Glicina (Glicocol)
Gly (G)

Acid aminoacetic

Alanina
Ala (A)

Acid amino-propionic

Valina
Val (V)

Acid amino-izovalerianic

Leucina
Leu (L)

Acid -amino-izocaproic

Izoleucina
Ile (I)

Acid -amino--metilvalerianic

H CH COOH
NH2
CH3 CH COOH
NH2
CH3 CH CH COOH
CH3 NH2
CH CH2 CH COOH

CH3

NH2

CH3
CH3

CH2 CH CH COOH
CH3 NH2

II. Radical cu grupare acida (acizi monoaminodicarboxilici)

Acid aspartic
Acid amino-succinic
Asp (D)
HOOC CH2 CH COOH
NH2

Asparagina
Asn (N)

Acid glutamic
Glu (E)

-amida acidului
amino-succinic

H2N OC CH2 CH COOH

NH2

Acid -amino-glutaric
HOOC CH2 CH2 CH COOH
NH2

Glutamina
Gln (Q)

-amida acidului -aminoglutaric

H2N OC CH2 CH2 CH COOH

NH2

III. Radical cu grupare bazica (acizi diaminomonocarboxilici)

Arginina
Acid -amino--guanidinoNH CH2
Arg (R)
n-valerianic
HN C

(CH2)2 CH COOH
NH2

H2N

CH2
H2N

(CH2)3 CH COOH
NH2

Lizina
Lys (L)

Acid ,-diamino-carpoic

Hidroxilizina
Hyl

Acid --diamino-hidroxi-n-carpoic

CH2
H2N

Histidina
Hys (H)

Acid -amino-imidazolil-propionic

Acid -amino--hidroxi-nbutiric

HN

OH

NH2

NH2

CH2 CH COOH
OH

NH2

CH3 CH CH COOH
OH NH2

V. Radical cu grupare tiolic (Tioaminoacizi)

Cisteina
Acid -amino--mercaptoCys C
propionic
Cistina

(CH2)2 CH COOH

CH2 CH COOH

IV.Radical cu grupare hidroxil (Hidroxiaminoacid)

Serina
Acid -amino--hidroxiSer (S)
propionic
Treonina
Thr (T)

CH

CH2 CH COOH
SH

Acid --ditio-(-aminopropionic)

NH2
CH2 CH COOH
NH2

S CH2 CH COOH
NH2

Metionina
Met (M)

Acid -amino--metil-tion-butiric

CH2 CH2 CH COOH

S

NH2

CH3

VI. Radical aromatic (aminoacizi aromatici)

Histidina (grupa III) Acid -amino--imidazolil
clasificat n categoria aminopropionic
acizilor bazici (III)
Fenilalanina
Phe (F)

Acid -amino--fenilpropionic

CH2 CH COOH
NH2

Tirozina
Tyr (Y)

Acid -amino--(phidroxifenil) propionic

CH2 CH COOH

HO

NH2

Triptofan
Trp (W)

Acid -amino--(3)
indolil-propionic

CH2 CH COOH
NH2

VII. Iminoacizi
Prolina
Pro (P)

Acid pirolidin-2-carboxilic

Hidroxiprolina
Hyp

Acid 4-hidroxi-pirolidin-2carboxilic

N
H

COOH

HO
N
H

COOH

Dintre cei 20 de aminoacizi care intr n structura proteinelor animale opt

aminoacizi nu pot fi sintetizai n organism: provin din alimente aminoacizii
eseniali: Val, Phe, Leu, Ile, Thr, Trp, Met, Lys.
1.1.1. Proprieti fizice
a) Cu excepia glicinei, toi aminoacizii conin atomi de carbon asimetric,
motiv pentru care prezint activitate optic: la pH = 7 unii sunt dextrogiri (+), iar alii
sunt levogiri (-). Cu toate acestea ei aparin seriei L deoarece au configuraia
L- glicerinaldehidei.
CHO
HO C H
CH2 OH

L glicerinaldehida

COOH
H2N C H
R

L aminoacid

n organismele animalelor superioare apar i sunt metabolizai numai

L
aminoacizii, n timp ce D-aminoacizii se gsesc n peretele celular al unor
microorganisme sau n lanul polipeptidic din structura unor antibiotice (gramicidina,
actinomicina D).
Izomerii dextro i levo ai aminoacizilor formeaz perechi de enantiomeri
care au proprieti chimice asemntoare. Amestecul lor echimolecular se numete
amestec racemic i este lipsit de activitate optic. Sinteza enzimatic, fiind

stereospecific, conduce la unul sau cellalt enantiomer. Sinteza n laborator

conduce la amestecuri racemice de aminoacizi. Acest tip de amestec se
poate obine numai pe cale sintetic.
b) Aminoacizii sunt substane cristaline, solubile n ap, puin solubile n
solveni organici, cu puncte de topire de peste 200o C. n soluii apoase ei se gsesc
sub forma de ioni dipolari sau zwiterioni:
COO

+
H3N C H
R

Cnd un astfel de ion se dizolv n ap, el poate aciona fie ca un acid (donor
de protoni), fie ca o baz (acceptor de protoni):
Ca un acid: H3N+-CH(R)-COOH+ + H2N-CH(R)- COO+
+
Ca o baza:
H3N -CH(R)-COO + H
H3N+-CH(R)-COOH
Substanele care au astfel de proprieti se numesc amfotere sau amfolii.
Existenta ionului bipolar explic utilizarea soluiilor de aminoacizi drept soluii
tampon. Dac la soluia unui aminoacid se adaug un acid tare, protonii si vor fi
neutralizai de gruprile carboxil ale aminoacidului, iar dac se adaug o baza tare,
gruprile hidroxil vor fi neutralizate de gruprile NH3+, astfel nct pH-ul soluiei nu
se modific.
c) Toi aminoacizii izolai din proteine absorb slab radiaiile din
domeniul ultraviolet (220 nm). Triptofanul, tirozina i fenilalanina, datorit nucleului
aromatic, dau absorbie specific la 280 nm, proprietate ce st la baza unei metode de
dozare a proteinelor.
1.1.2. Proprieti chimice
Proprietile chimice ale aminoacizilor sunt datorate att celor doua grupri
funcionale ct i prezenei radicalului R. Unele din aceste reacii se petrec i n
organism, altele sunt utilizate n studiul proteinelor (identificarea aminoacizilor din
hidrolizatele proteice, stabilirea secvenei de aminoacizi n proteine, identificarea
aminoacizilor specifici pentru funcia proteinelor, modificarea chimic a resturilor de
aminoacizi din moleculele proteice n vederea modificrii activitii lor biologice),
precum i pentru sinteza lanurilor polipeptidice n laborator.
1- Reacia cu acidul azotos, din care rezulta hidroxiacizi (reacie utilizat
pentru dozarea aminoacizilor prin metoda van Slyke).
R CH COOH + HNO2

HCl

NH2

R CH COOH + H2O + N2
OH

2- Reacia de alchilare atomii de H de la gruparea amino pot fi nlocuii

cu radicali alchil (de obicei metil), cu formare de betaine (compui n care atomul de
azot este cuaternar)
R CH
NH2

COOH + 3 CH3I

R CH COO
+
N(CH3)3

Betaina glicocolului este un important donor de grupare metil n organism.

3- Reacia de acilare n prezenta acizilor carboxilici, a anhidridelor sau a
clorurilor acide gruparea amino poate fi acilat. De la glicocol, prin acilare la nivel
hepatic se obine acidul hipuric, compus ce reprezint forma de eliminare a acidului
benzoic din organism.
H2H-CH2-COOH + C6H5 CO~SCoA C6H5-CO-NH-CH2-COOH + CoA-SH
Acid hipuric
4- Reacia cu formaldehida gruparea amino poate reaciona reversibil cu
aldehidele, formnd compui denumii baze Schiff. Aceasta reacie s la baza
metodei de dozare a aminoacizilor prin metoda Srensen (formol titrarea). Bazele
Schiff apar i n organism sub forma de compui intermediari n unele procese
(transaminare, decarboxilare etc.).
R

CH
NH2

COOH + HCHO

CH

COOH + H2O

N CH2

5- Reacia cu ninhidrina ninhidrina este un agent oxidant care produce

decarboxilarea -aminoacizilor cu eliberare de CO2, NH3 i o aldehida cu un atom de
C mai puin. Ninhidrina redus reacioneaz cu amoniacul eliberat, formnd un
complex colorat n albastru, ce prezint absorbie specific la 570 nm; aceasta reacie
st la baza uneia din cele mai utilizate metode de dozare a aminoacizilor.
6- Reaciile specifice radicalului R sunt utilizate pentru identificarea
calitativ a aminoacizilor:
- reacia Sakaguchi specific pentru arginina care n prezena -naftolului
d o coloraie roie;
- reacia cu nitroprusiat specific cisteinei cu care d o coloraie roie;
- reacia Pauli (soluie alcalin de acid sulfanilic diazotat) reactivul d o
coloraie roie cu histidina i tirozina;
- reacia Ehrlich este specific pentru triptofan care d o coloraie albastr;
- reacia Folin Cioclteu (acid fosfomolibdowolframic) specific pentru
tirozina care d o culoare roie;
- reacia xantoproteic prin fierbere cu acid azotic concentrat, aminoacizii
ciclici dau o coloraie galben care trece n portocaliu la adugarea de baze.
1.2. PEPTIDE
Peptidele sunt compui rezultai din unirea a mai multor molecule de
aminoacizi prin legaturi peptidice (-HN-CO-) i pot fi obinute din proteine prin
hidroliz parial (chimic sau enzimatic).
n funcie de numrul de aminoacizi din molecul peptidele se mpart n:
oligopeptide conin pn la 10 aminoacizi n molecul;

polipeptide conin ntre 10 i 100 aminoacizi.

Polipeptidele care conin mai mult de 100 de resturi de aminoacizi n
molecul poart numele de proteine.
Nomenclatura peptidelor se face indicnd numele aminoacizilor n ordinea n
care se gsesc n molecul, ncepnd cu aminoacidul care conine gruparea aminoterminal liber. Denumirile aminoacizilor vor cpta terminaia il, cu excepia
ultimului care conine gruparea carboxil-terminal liber: de exemplu peptidul cu
secvena Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu-Cys se va citi Seril-Glicil-Tirozil-Alanil-LeucilCistein.
Proprietile peptidelor
Peptidele, n special cele cu greutate moleculara mic, sunt solubile n ap,
insolubile n alcool absolut i au caracter amfoter ca i aminoacizii din care sunt
constituite.
Gruprile amino-terminale precum i gruprile R laterale dau aceleai reacii
caracteristice ca i cele din aminoacizii liberi. O reacie caracteristic este reacia
biuretului, care const n tratarea peptidelor i proteinelor cu soluii alcaline de Cu 2+,
cu formarea unui complex colorat in violet; aceasta reacie este dat numai de
compuii care conin cel puin dou legturi peptidice n molecul.
Peptide biologice
1- Tripeptide. Glutationul (-glutamil-cisteinil-glicina) este prezent n toate
esuturile vii.
HOOC CH

CH2

NH2

CH2

CO

NH

CH CO
CH2

NH CH2 COOH

SH

Glutationul se gsete n organism n forma redus (GSH) i sub form

oxidat (GSSG). El ndeplinete un important rol fiziologic, fiind socotit un
important sistem oxidoreductor celular.
2 - Hormoni peptidici. Exist o serie de hormoni cu structur polipeptidic:
unii hormoni hipofizari, insulina, glucagonul, oxitocina, vasopresina i ACTH.
3 Peptide cu aciune antibacterian. Penicilinele, tirocidinele (A,B),
gramicidinele (A,B,C), bacitracinele i polimixinele au o structur polipeptidic.
Penicilinele sunt polipeptide atipice care conin acid 6-amino-penicilanic pe
molecula cruia sunt grefai diveri radicali. Cnd radicalul este C 6H5-CH2- compusul
se numete benzil-penicilina (penicilina G).

1.3. PROTEINE
Proteinele sunt biopolimeri macromoleculari care conin n molecul peste
100 de resturi de aminoacizi unii prin legturi peptidice. Numrul, natura i modul

10

de aranjare al aminoacizilor n molecul variaz de la o proteina la alta. Moleculele

proteice pot adopta diverse conformaii n spaiu, fiind descrise astfel mai multe
niveluri de organizare: primar, secundar, teriar i cuaternar.
1.3.1. Nivele de organizare structural
Structura primar
Structura primar reprezint numrul i ordinea aminoacizilor n molecul.
(CO

CH
R

NH) n

R1

;
+

H3N

CH
C
O

NH

O
CH
R2

R3
N
H

CH

C
O

CH .............CH
R4

COO

Structura secundar
Structura secundar reprezint cel de-al doilea nivel de organizare
structural a proteinelor, reprezentnd aranjarea spaial a moleculei proteice pe o
singur\ ax\. Acest lucru este posibil datorit legturilor de hidrogen formate ntre
resturile carboxil i amino aparinnd legturilor peptidice.
Cea mai mare contribuie la elucidarea structurii secundare a proteinelor au
avut-o lucrrile lui Pauling si Corey care au elaborat dou modele teoretice: modelul
helicoidal (spiralat) i modelul straturilor pliate, modele care explic destul de bine
proprietile fizico-chimice i biologice ale moleculelor proteice.
Structura sau modelul helicoidal rezult prin spiralarea catenei
polipeptidice n jurul unui cilindru imaginar.
n funcie de orientarea aminoacizilor, elicea poate fi de tip -dreapta, care are
sensul de rotaie al unui urub cu filetul spre dreapta i de tip -stnga cu sensul de
rotaie spre stnga. n ambele forme radicalii R ai aminoacizilor sunt proiectai spre
exteriorul elicei; n elicea dreapta radicalul R se afl n poziie trans fa de oxigen,
motiv pentru care aceasta forma este mai stabil.
Helixul de tip are forma unei scri n spiral. nalimea fiecrei trepte este
de 1,5 , iar o spir conine 3,6 resturi de aminoacizi, ceea ce face ca distana dintre
spire s fie de 5,6 .

11

Aceast
structur
este
meninut n spaiu datorit legturilor
de hidrogen n care sunt implicate
toate legturile peptidice. Legturile de
hidrogen sunt paralele cu axul elicei i
se realizeaz ntre gruparea carboxil a
unui aminoacid i gruparea amino a
celui de-al patrulea aminoacid.
Prezena anumitor aminoacizi
provoac
ndoirea
lanului
polipeptidic. Din aceast categorie fac
parte prolina i hidroxiprolina (din
cauza azotului iminic), aminoacizi care
conin grupri R ncrcate electric sau
cu volum mare (arginina, acidul
glutamic, lizina, leucina, izoleucina).
Configuraia de tip -helix
este ntlnit la multe proteine, dar nu
nglobeaz
totalitatea
lanului
polipeptidic. Astfel, n molecula de
paramiozina peste 90% din aminoacizi
sunt implicai n formarea -helixului,
n timp ce n alte proteine spiralarea nu
depete 50%.
Structura sau modelul straturilor pliate se bazeaz pe formarea
legaturilor de hidrogen intercatenare i poate apare n doua variante: modelul paralel
al straturilor pliate (caracteristic -keratinei) i modelul antiparalel (ce poate fi
ntlnit n cazul fibroinei din mtase).

n modelul paralel (a) toate lanurile polipeptidice sunt aezate paralel, cu

gruprile R orientate n acelai sens, n timp ce n straturile antiparalele (b) catenele

12

polipeptidice sunt aezate fa n fa. Spre deosebire de -helix, n structura de tip ,

legturile de hidrogen sunt aproape perpendiculare pe axa lanului polipeptidic.
Structura . Colagenul.
n afara celor dou modele caracteristice pentru structura secundar a proteinelor
descrise mai sus , mai exist o structur particular ntalnit n colagen, o proteina
fibrilar, insolubil i elastic prezent n esuturile animale (esut conjunctiv, tendoane,
ligamente, cartilagii, piele, oase etc.) i care reprezint aproximativ 25% din proteinele
corpului.
Structura secundara a colagenului este un triplu helix de dreapta format din trei
lanuri polipeptidice (fiecare fiind un helix de stnga) legate intre ele prin legaturi de
hidrogen.
Unitatea structural a colagenului este tropocolagenul care este format din trei
lanuri: dou lanuri 1 identice, iar al treilea, 2, fiind destul de asemntor cu celelalte
dou. Fiecare lan conine aproximativ 1000 de resturi de aminoacizi, dintre care 1/3 sunt
resturi de glicin; de asemenea exist un coninut ridicat de prolin, precum i o serie de
aminoacizi mai rari: hidroxiprolina i hidroxilizina.
Hidroxiprolina se formeaz dup ce lanul polipeptidic a fost sintetizat, prin
aciunea prolinhidroxilazei, enzim ce necesit O2, Fe2+, -cetoglutarat i acid ascorbic
(vitamina C). n scorbut, lipsa vitaminei C mpiedic hidroxilarea prolinei i colagenul
sintetizat n aceste condiii are o structura anormal, ceea ce duce la apariia leziunilor
cutanate i la fragilitate vascular.
ntre cele trei lanuri polipeptidice se stabilesc legturi de hidrogen ntre gruprile
>NH dintr-un lan i gruprile >C=O din alt lan i legturi van der Waals ntre resturile
nepolare ale aminoacizilor. Aceste legturi sunt orientate transversal fa de axa helixului.
Resturile de glicin ocup ntotdeauna al treilea loc n secvena aminoacizilor ncepnd din
poziia 13 a lanului polipeptidic.

13

Coninutul n iminoacid (prolina i hidroxiprolina) este important pentru

stabilirea termic a colagenului; colagenul animalelor cu snge cald, cel mai
bogat n prolin i hidroxiprolin, este i cel mai stabil termic.
Capetele lanurilor polipeptidice sunt nespiralate i datorit flexibilitii
pot forma legturi specifice ntlnite numai n aceste tipuri de proteine.
Ca i n cazul fibrinei, molecula de colagen este stabilizat prin legturi
ncruciate realizate intramolecular i intermolecular ntre resturile de lizin
situate n poriunile nespiralate ale moleculei de tropocolagen.
Numrul acestor legturi variaz cu funcia fiziologic i vrsta
colagenului. Astfel, colagenul din tendonul lui Achile, la obolanii maturi, are un
numr foarte mare de astfel de legturi, n timp ce n colagenul din coad care
este flexibil, numrul legturilor este mai mic.
O caracteristic interesant a structurii colagenului este faptul c ntre
capetele moleculelor de colagen se gsesc spaii libere care joac un rol
nsemnat n formarea osului, ntruct n aceste spaii se fixeaz calciu, sub form
de hidroxiapatit (fosfat bazic de calciu).
Elastina, constituentul major al pereilor vaselor sanguine i al
ligamentelor, are un coninut ridicat de glicin, prolin i acizi aminai cu
grupri nepolare (alanin, valin, leucin i izoleucin), dar conine foarte puin
hidroxiprolin i acizi aminai polari i nu conine deloc hidroxilizin. Elastina
matur conine multe legturi ncruciate ce o face aproape insolubil i din
acest motiv, foarte greu de analizat.
Structura teriar reprezint interaciunea spaial ntre segmente
care nu sunt vecine n lanul polipeptidic, avnd ca rezultat o structur
tridimensional, globular. Ea este caracteristic n special proteinelor globulare,
a cror catene macromoleculare sunt strnse sub forma unor cilindri elipsoidali
cu o lungime care nu depete de 2-6 ori diametrul lor. Este rezultatul
interaciunii dintre radicalii R ai resturilor de aminoacid din lanul polipeptidic.
Forele de atracie implicate n formarea structurii teriare sunt datorate
urmtoarelor tipuri de legturi:
a) Legturi de hidrogen care pot fi stabilite ntre gruparea fenolic a
tirozinei i o grupare carboxil de la acidul glutamic sau acidul aspartic, sau ntre
radicalul imidazolic al histidinei i gruparea hidroxilic a serinei.
b) Legturi ionice ntre grupele carboxil ale acizilor dicarboxilici i
grupele amino ale acizilor diaminai. Realizarea acestor legturi este posibil
atunci cnd distanele dintre atomi sunt cuprinse ntre 2 i 3,1 . Studii de
difracie a razelor X au evideniat c n realitate se formeaz un numr mai mic
de legturi ionice, datorit faptului c majoritatea gruprilor care ar putea realiza
aceste legturi intr n interaciune cu solventul. ntr-adevr, n soluie, gruprile
polare ale proteinelor sunt orientate spre exteriorul moleculei, ceea ce face ca
proteinele s fie solubile i s se comporte ca electroliii.
c) Legturi nepolare prin fore van der Waals care se stabilesc ntre
radicalii hidrocarbonai al alaninei, fenilalaninei, leucinei etc. Distanele dintre

14

atomii care particip la astfel de legturi sunt cuprinse ntre 3,1 i 4,1 . Aceste
legturi sunt cele mai importante pentru meninerea proteinei n structura
teriar. Resturile nepolare, hidrofobe se gsesc n interiorul ghemului rezultat
prin ncolcirea lanului polipeptidic avnd ca efect stabilizarea din punct de
vedere termodinamic a moleculei, mai mult dect n cazul n care aceste resturi
ar fi orientate spre mediul exterior. Din acest motiv lanurile peptidice introduse
n soluie apoas se ncoltcesc spontan aa fel nct resturile nepolare se
situeaz n interiorul ghemului, iar gruprile polare rmn pe suprafaa
moleculei.
d) Legturi disulfidice S-S-, covalente, pot contribuie la meninerea
structurii teriare a proteinelor globulare limitnd tendina de depliere a
moleculei, ns contribuia lor este mic, deoarece sunt puine.

Structura primar a unei proteine determin aranjarea moleculei proteice

n configuraii -helix sau -foi pliate, n funcie de interaciunile radicalilor R.
Prima protein a crei structur teriar a fost elucidat este mioglobina
(Kendrew i colab. 1957), o protein globular, prezent n cantiti mari n
muchi, avnd rolul de a depozita oxigenul la nivel tisular. 75% din lanul
polipeptidic (153 aminoacizi) din mioglobin cuprinde opt segmente elicoidale
(notate A...........H), coninnd ntre 7 (segmentul D) i 24 de resturi de
aminoacizi (segmentul H). Zonele elicoidale sunt ntrerupte de segmente
nespiralate, la nivelul crora lanul polipeptidic i schimb direcia. n patru
dintre aceste puncte se afl prolina, n celelalte plierea fiind determinat de ali
factori. n acest fel, molecula se aranjeaz ntr-o form compact cu
dimensiunile 45 x 35 x 25 . n interiorul moleculei se gsesc aminoacizi
nepolari cu excepia a dou resturi polare de histidin care particip la legarea
hemului, iar n exterior sunt plasate gruprile polare i cele cu ncrcare
electric.

15

n general, proteinele intracelulare, solubile, au form sferic sau elipsoidal

n funcie de raportul dintre aminoacizii cu radical R polar i aminoacizii cu radical R
nepolar. Cnd raportul are valori cuprinse ntre 0,9-1,4, proteina opteaz pentru
form alungit, iar cnd raportul este mic (0,3-0,6) proteina adopt forma sferic.
n cazul proteinelor membranare, nglobate n dublul strat lipidic, resturile de
aminoacizi sunt repartizate invers, radicalii hidrofobi se gsesc pe partea exterioar
care vine n contact cu moleculele lipidice membranare, iar resturile polare i
ncrcate electric, n interior, cptuind canalele ionice ce strbat membranele.
Structura cuaternar
Un numr mare de proteine sunt constituite din mai multe lanuri
polipeptidice, formnd oligomeri. Lanurile individuale se numesc protomeri sau
subuniti, fiecare avnd structur primar, secundar i teriar proprie. Subunitile
se asambleaz n structura cuaternar prin fore asemntoare celor din structura
teriar, cu deosebirea, c n acest caz, legturile se stabilesc ntre subuniti.
n general, proteinele cu greutate molecular mai mare de 50.000 sunt
formate din mai multe subuniti polipeptidice i sunt active sub form de oligomeri,
protomerii fiind inactivi. n multe proteine subunitile sunt identice: chimotripsina,
fosfataza alcalin (dou subuniti), aldolaza (trei subuniti), glutamat

16

dehidrogenaza (patru subuniti), catalaza (optsprezece subuniti), iar n altele,

subunitile sunt diferite: hemoglobina (dou lanuri i dou ), lactat
dehidrogenaza tetramer format din dou tipuri de subuniti notate H (heart) i M
(muscle).
Asamblarea subunitilor n structura cuaternar este posibil datorit
existenei unor zone complementare spaial si electric pe suprafeele subunitilor.
Interaciunile dintre subuniti prin suprafeele complementare sunt
caracterizate prin fenomenul de cooperare, adic primele contacte odat realizate,
favorizeaz formarea celorlalte.
Modificarea unui dintre protomeri (combinarea cu un compus oarecare) se
resimte la nivelul ntregii molecule oligomere, fiind deranjat structura cuaternar i
deci, funcia biologic a proteinei. Acest fenomen st la baza mecanismului de
reglare alosteric a activitii enzimelor.
Formarea proteinelor complexe confer proteinelor proprieti noi, fiecare
subunitate catalizeaz o etap dintr-o cale metabolic. Eficiena crete mult deoarece
intermediarii nu sunt pierdui n reacii colaterale, procesul desfurndu-se n flux
continuu. De exemplu, piruvat dehidrogenaza este format din patru subuniti: trei
subuniti catalitice (trei enzime distincte) i a patra este subunitate reglatoare.
O protein oligomer important este hemoglobina, responsabil de
transportul oxigenului la vertebrate. Structura hemoglobinei a fost elucidat de
Perutz prin difracia razelor X i spectre ORD (dispersia rotaiei optice).
Dou lanuri polipeptidice din hemoglobin sunt foarte asemntoare cu cel
al mioglobinei att n privina structurii primare ct i teriare. Lanul din
hemoglobin conine 141 resturi de aminoacizi, iar lanul conine 146 resturi de
aminoacizi.
ntre lanurile identice se realizeaz legturi polare ntre gruprile terminale
+
- NH3 i COO-, iar ntre lanurile diferite, legturi de hidrogen i Van der Waals pe
poriuni mai mari.

17

1.3.2. Proprietile proteinelor

Proteinele izolate din diverse surse sunt n general substane solide, amorfe,
care prin purificare avansat pot fi obinute n stare cristalizat.
Solubilitatea proteinelor depinde de forma moleculei, natura solventului,
structura chimic, temperatur, pH. Ea se datoreaz prezenei pe suprafaa moleculei
a gruprilor polare, hidrofile (-COOH, -NH2, -OH) ce se orienteaz spre ap cu care
interacioneaz electrostatic. n acest mod, molecula proteic se izoleaz de celelalte
molecule i se dizolv. Proteinele globulare, avnd molecule ovoidale, se asociaz
greu i de aceea sunt solubile.
Proteinele fibrilare au o suprafa mic de contact cu solventul i ca atare
sunt puin solubile sau chiar insolubile n ap.
Modificarea pH-ului mediului influeneaz solubilitatea proteinelor prin
modificare ncrcrii electrice. La pHi (pH izoelecteric), solubilitatea proteinelor este
minim deoarece numrul sarcinilor pozitive fiind egal cu numrul sarcinilor
negative, moleculele proteice nu mai interacioneaz cu moleculele polare ale apei.
Soluiile diluate de electrolii (sruri ale metalelor uoare, NaCl, MgCl 2,
Na2SO4, (NH4)2SO4) mresc solubilitatea proteinelor n timp ce soluiile concentrate
scad solubilitatea, pn la precipitare. Astfel, globulinele sunt greu solubile n ap
pur, uor solubile n soluii saline diluate i insolubile n soluii saline de
concentraie mare. Aceast comportare st la baza uneia dintre cele mai simple i
rspndite metode de separare a proteinelor plasmatice. Cel mai adesea se folosesc
soluii de sulfat de amoniu cu grad de saturare diferit: globulinele precipit cu soluii
semisaturate de (NH4)2SO4, iar albuminele, la concentraii mai mari de 75% saturaie.
Solvenii organici (eter, aceton, alcool), adugai la o soluie de protein,
mpiedic interaciunea moleculelor proteice cu moleculele apei i n consecin,
proteina va precipita.
Caracterul amfoter al proteinelor este dat de gruprile carboxil i amino
care nu sunt angajate n formarea legturilor peptidice. Ele vor imprima proteinei
caracter acid (cationi) sau bazic (anioni) n funcie de numrul gruprilor COOH i
NH2 libere provenite de la acid glutamic, acid aspartic, lizin, arginin i nucleului
imidazolic din histidin. Grupele carboxil i amino terminale au o contribuie mai
redus n determinarea caracterului amfoter cu ct lanul polipeptidic este mai lung.
La pH fiziologic toate gruprile acide sau bazice sunt complet ionizate.
Fiecare protein este caracterizat prin pH-ul izoelectric (pHi), care reprezint
valoare pH-ului la care ncrcarea electric a proteinei este nul, numrul gruprilor
ncrcate pozitiv fiind egal cu numrul gruprilor ncrcate negativ.
La pHi solubilitatea i mobilitatea n cmp electric a proteinei este minim.
La valori de pH mult diferite de pHi proteina va fi ncrcat (+) sau (-) i va migra n
cmp electric, proprietate ce st la baza metodelor electroforetice de separare a
proteinelor din amestecuri.

18

Proprieti optice proteinele ca i aminoacizii, prezint activitate

optic determinat de prezena atomilor de carbon asimetrici. La asimetria moleculei
prin carbon asimetric se adaug i asimetria creat de -helix. Puterea rotatorie a
proteinelor este o msur a strii de integritate sau degradare a moleculei.
Denaturarea proteinelor Conformaiile native ale proteinelor
globulare realizate prin interaciunile specifice dintre lanurile polipeptidice sunt
fragile, fiind uor deranjate de aciunea aa numiilor ageni denaturani. Aceti
ageni acioneaz prin ruperea legturilor necovalente din structurile secundar,
teriar i cuaternar, dar nu afecteaz legturile covalente, legturile peptidice rmn
intacte (nu se elibereaz aminoacizi).
Agenii denaturani sunt foarte diferii: temperatur ntre 50-60oC; valori
extreme de pH; ureea i guanidina n concentraii mari; ageni tensioactivi; solveni
organici.
Deranjarea structurii teriare a moleculelor proteice duce la modificarea
proprietilor biologice a acestora. Forma moleculei proteice este determinat att de
structura primar, ct i de factorii de mediu. ntr-adevr, aa cum arat White i
Anfinsen, tratarea ribonucleazei cu uree 8M n prezena unui agent reductor, mercaptoetanolul, cauzeaz deplierea complet a moleculei prin ruperea celor patru
legturi disulfidice dintre resturile de cistein i n consecin pierderea activitii
acestei enzime. ndeprtarea prin dializ a agenilor denaturani duce la refacerea
activitii enzimei, ceea ce indic revenirea proteinei la structura teriar iniial.

Prin denaturare, proteinele i pierd proprietile chimice i fiziologice

(hormonii devin inactivi, anticorpii pierd capacitatea de a precipita antigenii etc.); n
aceast stare, proteinele sunt mai uor atacate de enzime dect n stare nativ.
Hidroliza proteinelor. Sub aciunea acizilor sau bazelor la cald i a
enzimelor proteolitice, proteinele sunt hidrolizate prin ruperea legturilor peptidice pn
la stadiul de aminoacizi.
Reacii de culoare. Proteinele dau aceleai reacii de culoare ca i
aminoacizii din care sunt constituite i pot fi identificate printr-una din acestea.
Reacia xantoproteic. Prin tratarea unei soluii de protein cu acid azotic,
la rece sau la cald, apare o coloraie galben datorit formrii unor nitroderivai;

19

Reacia biuretului. Tratarea unei soluii de protein cu reactiv biuret (o

soluie alcalin de sulfat de cupru) se formeaz un complex de culoare violet

caracteristic. Reacia este utilizat n practic pentru dozarea proteinelor din snge.
Proprietile biochimice i imunologice. Proteinele ndeplinesc n organism
diferite roluri cum ar fi, rol catalitic, de rezerv, transportor, protector, structural etc.
1.3.3. Clasificarea proteinelor
Proteinele se clasific n general dup forma moleculelor i dup compoziia lor
chimic.
n clasificarea proteinelor dup forma molecular deosebim:
proteine globulare (sferoproteine) care au form aproape sferic (ovoidal)
i sunt, n general, solubile n ap, n soluii diluate de acizi, baze i sruri. Din aceast
clas fac parte albuminele, globulinele, histonele, protaminele i prolaminele;
proteine fibrilare (scleroproteine), caracterizate prin structur fibroas, de
forma unui elipsoid ntins cu raportul dintre axe de cel puin 1 : 100, sunt foarte greu
solubile n ap, au vscozitate mare i putere de difuzie mic. Aceste proprieti explic
prezena lor n esuturile de susinere. Din aceast clas fac parte colagenul, elastina,
fibrinogenul, miozina, actina, keratina etc.
Dup compoziia chimic, proteinele se pot clasifica n:
proteine simple (holoproteine), constituite din aminoacizi;
proteine conjugate (heteroproteine), conin pe lng aminoacizi i o
grupare prostetic. n funcie de natura acestei grupri, heteroproteinele se mpart n
fosfoproteine, glicoproteine, lipoproteine, metaloproteine, nucleoproteine i
cromoproteine.
1.3.3.1. Holoproteine
Albuminele (serumalbumina, lactalbumina, ovalbumina etc.) sunt solubile
n ap, coaguleaz la nclzire, au pHi mai mare dect 7 i pot fi precipitate cu o soluie
saturat de sulfat de amoniu. Greutatea molecular a albuminelor este cuprins ntre
35.000 i 75.000. Albuminele intr n constituia proteinelor plasmatice (55%),
participnd la transportul glucidelor, lipidelor, hormonilor, srurilor biliare,
medicamentelor i ionilor (HCO3-, NO3-, citrat, Ca2+, Mg2+, Zn2+ etc.). Datorit masei
moleculare mici i concentraiei mari, albuminele serice asigur 80% din presiunea
coloidosmotic a plasmei.
Globulinele sunt proteine globulare insolubile n ap, solubile n soluii de
NaCl 5%. Prin nclzire coaguleaz. Sunt rspndite att n regnul vegetal ct i animal.
Dintre globulinele de origine animal amintim globulinele din snge cu greutate
molecular de aproximativ 500.000. Din totalul proteinelor plasmatice, 35-45% sunt
globuline. Prin electroforez au fost separate trei fraciuni (, i ), iar prin
imunoelectroforez au fost puse n eviden peste 30 fraciuni proteice. Fiecare fraciune
ndeplinete un rol bine definit; toate particip la transportul glucidelor, -, -

20

globulinelelor, la transportul lipidelor, iar -globulinele au rol n imunitate, motiv pentru

care se numesc i imunoglobuline. Imunoglobulinele sau anticorpii apar n serul
sanguin sau n alte celule ca rspuns la ptrunderea n organism a unei proteine sau a
unei macromolecule provenit de la alt specie, compus care poart numele de antigen.
Structura de baz a anticorpilor a fost elucidat de Porter n 1960. Anticorpii
sunt formai din dou lanuri polipeptidice grele (H), cu greutate molecular 53.00075.000 i dou lanuri uoare (L), cu greutate molecular 23.000, unite prin legturi
disulfidice. Lanurile grele au o regiune flexibil care permite rotirea capetelor aminoterminale cu un unghi variabil, ceea ce permite legarea antigenului.
Prin digestia cu papain molecula de imunoglobulin (IgG) poate fi divizat n
trei fragmente active cu greutate molecular 50.000. Papaina cliveaz lanurile H n partea
constant (C). Dou dintre fragmentele obinute pot lega anticorpul i din acest motiv au
fost notate Fab (F de la fragment i ab de la antigen binding), iar al treilea fragment, care
leag complementul, Fc.
IgG (150.000)

Papaina

2 Fab (50.000) + Fc (50.000)

Fragmentul Fab este format dintr-un lan L i o poriune a captului N-terminal al

lanului H. Fragmentul Fc este format din cele dou capete C-terminale ale lanurilor H
(Poriunea lanului H incorporat n Fab este notat Fd).

21

Au fost descrise mai multe tipuri de lanuri L i H. La om au fost evideniate

numai dou tipuri majore la lan L, notate K i , difereniabile serologic sau prin analiza
secvenei aminoacizilor. La om aproximativ 70% din lanurile L din Ig sunt de tip K i
numai 30% de tip . O imunoglobulin conine fie dou lanuri uoare K, fie dou , dar
niciodat unul K i unul . Lanul H este unic pentru o clas de Ig, dar au fost identificate
cinci tipuri notate: , , , , . Fiecare tip de lan H se poate asocia cu lanuri L de tip K
sau genernd cele cinci clase de imunoglobuline: IgG (), IgA (), IgM (), IgD () i
IgE (). Pe lanurile polipeptidice ale Ig sunt ataate resturi glucidice (IgG conine dou
resturi monozaharidice i IgM trei resturi).
Scleroproteinele sunt proteine fibrilare, de consisten solid, ntlnite numai
n regnul animal, avnd rol de susinere i protecie, au un coninut mai sczut de azot fa
de alte proteine, dar au un coninut crescut de sulf. Scleroproteinele sunt total insolubile n
ap, n soluii acide i bazice i sunt stabile fa de aciunea enzimelor proteolitice.
Dup rolul pe care l ndeplinesc i dup esutul n care au fost identificate
scleroproteinele se mpart n:
Keratine se gsesc n epiderm, pr, unghii, pene, coarne etc. i au rol de
protecie. Au un coninut mare de sulf (2-5,7%) datorit proporiei mari de cistein. Graie

22

prezenei legturii disulfidice keratinele au o rezisten mecanic mare, elasticitate i

rezisten la aciunea enzimelor proteolitice i sunt insolubile.
Colagenele au coninut mare de glicocol, prolin, hidroxiprolin i
hidroxilizin, avnd o structur cu totul caracteristic, adaptat funciei esuturilor din care
fac parte: tendoane, ligamente, oase, cartilagii, piele. Ele reprezint 25% din proteinele
corpului omenesc.
Colagenele sunt insolubile n ap, dar prin fierbere ndelungat se transform n
gelatin solubil, n care o parte din legturile peptidice au fost hidrolizate. Colagenele
sunt rezistente la aciunea enzimelor proteolitice (cu excepia colagenazei), n timp de
gelatina poate fi hidrolizat cu pepsin i tripsin.
Elastinele se aseamn cu colagenul, ntlnindu-se alturi de acestea n
esutul conjunctiv, dar ele nu pot fi gelificate. Coninutul ridicat de glicocol, alanin i
valin imprim acestei proteine o elasticitate comparabil cu a cauciucului. Elastinele sunt
hidrolizate specific de elastaza pancreatic.
Fibrinogenul este o protein fibrilar format din ase lanuri polipeptidice
unite prin puni disulfidice. Din cauza dimensiunilor mari ale moleculei, n condiii
fiziologice, fibrinogenul trece n cantiti foarte mici prin peretele capilarelor n lichidul
interstiial. n inflamaii, din cauza alterrii permeabilitii capilarelor, trecere
fibrinogenului este mult facilitat.
Fibrinogenul este sintetizat n ficat i este degradat n macrofage i are timpul de
njumtire de 3-5 zile. Sub aciunea enzimatic a trombinei i a ionilor de calciu,
fibrinogenul se transform ntr-o protein fibrilar insolubil, denumit fibrin. Fibrina
formeaz o reea spaial n care sunt nglobate elementele figurate ale sngelui, formnd
cheagul sanguin.
Miozina se gsete n cantitate de 40-60% n miofibrele esutului muscular.
Miozina este insolubil n ap, dar solubil n soluii alcaline diluate. n structura miozinei
intr aminoacizi diaminici i dicarboxilici ceea ce explic prezena a numeroase grupri
polare ce i confer capacitatea de a fixa ioni metalici.
Prin combinare cu actina n proporie de 3/1, formeaz actomiozina.
Actina reprezint 15% din proteinele musculare. Att miozina ct i actina au
activitate ATP-azic i joac rol esenial n contracia muscular.
Tropomiozina reprezint 2,5% din totalul proteinelor musculare, avnd rol n
contracia muscular.
1.3.3.2. Heteroproteine
Fosfoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic
acidul fosforic legat prin legtur esteric de gruparea hidroxil a unui rest de serin din
molecula proteic. Acidul fosforic se gsete sub forma srii sale de Ca sau K.
NH CO CH NH CO
CH2 O_
O P O Ca2+
_
O

NH CO CH NH CO
_
CH2 O K+
O P O
_
O K+

23

Dintre fosfoproteine fac parte:

caseina , principala protein din lapte (80%).
ovovitelina prezent n glbenuul de ou alturi de lecitine. Ea furnizeaz
embrionului aminoacizii i fosforul necesar dezvoltrii.
Glicoproteinele formeaz o categorie de heteroproteine care au drept grupare
prostetic o component glucidic; partea proteic imprim caracterul ei chimic ntregii
molecule, ceea ce le deosebete de mucopolizaharide unde componenta glucidic
predomin i imprim moleculei caracter glucidic.
Lipoproteinele sunt complexe ale proteinelor cu lipidele. Dup rolul pe care l
ndeplinesc, lipoproteinele se mpart n dou categorii: lipoproteine de transport i
sistemele de membran.
Plasma uman conine patru clase principale de particule lipoproteice care difer
ntre ele prin densitate, constant de sedimentare i mrimea particulelor, prin tipurile de
proteine i proporia de lipide coninute. Sunt particule sferice de mrimi diferite, formate
dintr-un miez nepolar (trigliceride i esteri de colesterol) nvelit cu un strat de 2 nm
constituit din colesterol liber, fosfolipide i apoproteine. Aceste particule sunt solubile n
plasm i servesc la transportul lipidelor ntre diverse esuturi.
Metaloproteinele sunt combinaii complexe ale proteinelor cu ionii metalici:
Fe, Cu, Zn, Mg, Mn etc. i particip n organism fie n transportul acestor metale, fie n
cataliza enzimatic.
Feritina conine 20-25% fier trivalent (aproape cte un atom de Fe pentru
fiecare legtur peptidic) legat de o protein numit apoferitina. Feritina constituie
rezerva de fier pentru sinteza hemoglobinei i citocromilor. Se gsete n special n ficat i
splin.
Siderofilina (transferina) este un transportor al Fe
pentru sinteza
hemoproteinelor (fixeaz doi atomi de Fe/molecul). Ea este sczut n anemia feripriv;
Ceruloplasmina conine aproximativ 0,34% Cu (opt atomi/molecul). Este o
glicoprotein care migreaz cu fraciunea 2-globulinic, are o greutate molecular de
150.000. Ceruloplasmina nu transport ionii de cupru, dar are rol n absorbia Fe, putnd
oxida fierul bivalent la fier trivalent i funcioneaz ca o polifenoloxidaz. Concentraia
plasmatic de ceruloplasmin crete n inflamaii.
Hemocianinele sunt pigmeni respiratori din sngele molutelor. Ele conin
Cu i au greutate molecular de aproape 10 milioane.
Metaloproteinele cu Zn sunt n general enzime: alcool-dehidrogenaza,
carbonic-anhidraza, uricaza etc.
Cromoproteine
Cromoproteinele sunt proteine conjugate care au drept grupare prostetic, o
grupare cromofor. Dup natura acestei grupri, se disting dou mari clase de

24

cromoproteine: porfirinice care conin un nucleu tetrapirolic i neporfirinice, conin drept

grupare prostetic derivai de izoaloxazin sau carotene (vezi vit. B2 i A).
Dintre cromoproteinele neporfirinice deosebit de importante sunt flavoproteinele
care au drept grupare prostetic o flavin (derivat de izoaloxazin) i care ndeplinesc n
organism rol catalitic, precum i carotenoproteinele, a cror grupare prostetic este un
derivat terpenic (carotenii). Acestea din urm, sunt importante n procesul vederii.
Cromoproteinele porfirinice conin n molecul un nucleu substituit de

porfirin. Ele ndeplinesc diverse funcii biologice, cum ar fi: transportul de oxigen,
transportul de electroni, cataliza enzimatic.
Specificitatea de funcie a acestor proteine se datoreaz apoproteinei legate de
nucleul porfirinic. Sunt reprezentate de mioglobin, hemoglobin, citocromi, hemenzime.
Porfirinele sunt derivai de porfirin, un compus ciclic format din patru nuclee
pirolice unite prin grupri metinice (-CH=).

Prin substituirea atomilor de hidrogen din poziiile 1-8 cu diferii radicali se obin
porfirinele, care se denumesc i se clasific n funcie de aceti substitueni n:
etioporfirine, mezoporfirine, protoporfirine i coproporfirine. Dintre acestea cel mai des
ntlnite sunt protoporfirinele care conin patru grupri metilice, dou grupri vinil i dou
resturi de acid propionic. Datorit celor trei tipuri de substitueni din molecul, pot exista
15 forme izomere de protoporfirine. Cea mai nsemnat dintre ele este protoporfirina IX
(1,3,5,8-tetrametil-2,4-divinil-6,7-dipropionil-porfirina).
Porfirinele posed un sistem de duble legturi conjugate ce confer acestor
compui stabilitate, culoare roie-violet, absorbia caracteristic i fluorescen.
Reducerea gruprilor metinice duce la formarea de compui necolorai, numii
porfirinogeni. Prin intermediul azotului pirolic, porfirinele pot fixa ioni metalici cum sunt:
Fe, Mg, Zn, Cd, Co, Cu, Mn, V sub form de compleci chelatici. Un astfel de complex al
protoporfirinei IX cu Fe2+ se numete protohem sau hem, un complex similar cu Fe3+
poart numele de hemin sau hematin.

25

Protoporfirina IX

Hem

Fierul are ase poziii de coordinare care sunt ndreptate spre vrfurile
unui octoedru regulat. n hem, atomul de Fe se leag de inelele II i IV prin
legturi ionice, realizate prin ndeprtarea celor doi atomi de H de la azot sub
form de H + i de dou legturi coordinative cu atomii de azot din ciclurile I i
III. Celelalte dou poziii, 5 i 6, sunt perpendiculare pe planul determinat de
cele patru legturi ale fierului cu nucleele pirolice i sunt libere. Dac aceste
poziii sunt ocupate, compusul rezultat se numete hemocrom sau
hemocromogen.
Hemul este situat ntr-o cavitate a moleculei proteice. Cele dou resturi
propionat, ionizate la pH fiziologic, sunt orientate spre suprafa, iar restul
hemului n interiorul cavitii, nconjurat de aminoacizi nepolari, cu excepia a
dou resturi de histidin prin care se face legtura cu partea proteic. Un rest
de histidin situat n segmentul F (HisF 8 ) numit histidin proximal se fixeaz
pe poziia 5 de coordinare a Fe 2+. Cellalt rest HisE 7, numit histidin distal se
leag de hem prin intermediul unei molecule de ap (formele neoxigenate de
mioglobin i hemoglobin). Legtura este labil i se desface uor n procesul
de fixare a oxigenului, acesta nlocuind molecule de ap (formele oxigenate ale
mioglobinei i hemoglobinei).

26

Mioglobina este pigmentul

rou din muchi, similar hemoglobinei

ca structur i rol; diferena dintre ele
const n structura globinei. Globina
mioglobinei este alctuit dintr-un
singur lan polipeptidic, format din
150 aminoacizi, cu o greutate
molecular de aproximativ 17.200,
pliat sub forma unui ghem cu
dimensiunile 45/35/25 . Mioglobina
are o afinitate fa de oxigen de
aproximativ 6 ori mai mare dect
hemoglobina. Cantiti mari de
mioglobin se gsesc n muchiul
inimii i muchii pectorali ai psrilor
care efectueaz micri ritmice de
lung durat.
Hemoglobinele reprezint pigmentul rou al sngelui. Ele au
aceeai grupare prostetic (hemul), dar difer n privina prii proteice,
globina. Globina imprim specificitatea diferit a hemoglobinelor.
Structura hemoglobinei a fost elucidat de Perutz prin difracia
razelor X i spectre ORD (dispersia rotaiei optice). Lanurile i au o
structur asemntoare, aproximativ 70% din molecul formnd poriuni de
-helix ntrerupte de poriuni ndoite ca n molecula de mioglobin.
Conformaia tridimensional a lanurilor este asigurat prin legturi van der
Waals ce se stabilesc ntre resturile nepolare ale aminoacizilor. Legturile
polare sunt orientate spre mediul apos ceea ce explic solubilitatea
hemoglobinei. Catenele polipeptidice sunt orientate aa fel, nct, formeaz
ntre ele o cavitate n care este inclus molecula de hem. Legarea hemului de
globin se face prin intermediul a dou resturi de histidin.
Cele patru lanuri din Hb sunt asamblate ntr-un tetramer compact
(structur cuaternar), rezultnd o molecul cu dimensiunile 64/55/52 .
ntre lanurile identice se realizeaz legturi polare stabilite ntre grupele
terminale NH 3+ i COO - , iar ntre lanurile diferite ( i ) se stabilesc
legturi de hidrogen i Van der Waals pe poriuni mari ale acestor lanuri.
Citocromii sunt pigmeni respiratori care au drept grupare
prostetic tot hemul, dar poziiile 5 i 6 de coordinare ale Fe sunt ocupate de
resturi de aminoacizi din molecula proteic. Din acest motiv, citocromii nu
pot participa la transportul O 2, dar particip la transportul electronilor prin
modificarea reversibil a valenei atomului de fier:

27

Se cunosc mai multe grupe de citocromi notate a, b i c. n forma lor

redus, citocromii dau benzi de absorbie caracteristice (, i ) n spectrul
vizibil. Marea majoritate a citocromilor sunt puternic legai de membrana
mitocondrial i nu pot fi separai cu uurin.
Hemenzimele sunt reprezentate de catalaze i peroxidaze care
catalizeaz reacia de descompunere a apei oxigenate dup ecuaia:
AH 2 + H 2O 2

2 H2O + A

Cloroplastele sunt pigmeni fr funcie respiratorie care conin

drept grupare prostetic clorofila. Clorofila are o structur porfirinic avnd

n centrul ei ionul de Mg legat prin dou covalene de dou nuclee pirolice.
Nucleoproteine
Nucleoproteinele sunt o clas de heteroproteine care au drept grupare
prostetic un acid nucleic ataat la o histon sau o protamin. Ele se gsesc
n toate esuturile animale i vegetale i pot fi izolate cu uurin din drojdii
i unele esuturi ale cror celule au nuclee mari, cum este glanda timus.
Nucleoproteinele sunt constituenii principali ai nucleului celular (de
unde vine i numele lor), dar pot fi gsite i n citoplasm asociate cu
ribozomii. Virusurile sunt constituite aproape numai din nucleoproteine.

Nucleoproteine
Proteine simple
(Histone, protamine)

Acizi nucleici
(Polinucleotide)
Nucleaze
Mononucleotide
Mononucleotidaze

Nucleozide

Acid fosforic

Nucleozidaze

Baze azotate
(Purinice, pirimidinice)

Pentoze
(Riboz\, Deoxiriboz\)

28

Nucleoproteinele pot fi izolate din esuturi prin extracie (cu ap, soluii
alcaline diluate, soluii de clorur de sodiu i soluii tampon cu pH = 4,0-11,0),
urmat de precipitarea cu acizi, soluie saturat de sulfat de amoniu sau soluie
diluat de CaCl2.
Prin hidroliz acid sau bazic, nucleoproteinele se descompun n baze
azotate, pentoze, acid fosforic i proteine.
Nucleotide. Un nucleotid, unitatea structural a acizilor nucleici, este
format dintr-un nucleozid fosforilat la una din gruprile OH din riboz sau
deoxiriboz.
Baza azotat\ ^ pentoz\ ^ acid fosforic
Nucleozid
Nucleotid

De exemplu: Adenina + Riboza

Guanina + Riboza
Citozina + Riboza
Uracil + Riboza
Timina + d-Riboza

+
+
+
+
+

Acid fosforic Acid adenilic (AMP)

Acid fosforic Acid guanilic (GMP)
Acid fosforic Acid citidilic (CMP)
Acid fosforic Acid uridilic (UMP)
Acid fosforic Acid timidilic (TMP)

Exist dou tipuri generale de nucleotide: ribonucleotide, care conin

riboz i intr n structura acizilor ribonucleici i deoxiribonucleotide, care conin
deoxiriboz i intr n structura acizilor deoxiribonucleici.
Radicalul fosfat se ataeaz n poziia 5 sau 3 (notaia atomilor din ciclul
pentozei se face de la 1 la 5, acesta fiind ciclul secundar n molecula acestor
compui).
NH2

NH2
N

N
N

N
H

N
5'

O
H

CH2OH
H H
3'

OH

5'

H H
H

CH2OH
H H
3'

HO P OH
O

HO P OH
O

Acid adenilic
3'-AMP

Acid deoxiadenilic
3'-dAMP

29

NH2
HN

N
O

N
H

CH2OH

H H

OH

CH3
N

H H

CH2OH
H H

O
H
HO P OH
O

HO P OH
O

Acid timidilic
3'-dTMP

Acid citidilic
3'-CMP

Nucleozidele purinice i pirimidinice pot fi esterificate cu o singur

molecul de acid fosforic, formnd nucleozid-monofosfai (MP), cu dou molecule
de acid fosforic, nucleozid-difosfai (DP) i cu trei molecule de acid fosforic,
nucleozid-trifosfai (TP). De exemplu, adenina formeaz adenozin-5-monofosfat
(AMP), adenozin-5-difosfat (ADP) i adenozin-5-trifosfat (ATP).
NH2
N

H2C

OH

OH

P
O-

AMP
ADP
ATP

P
O-

O
O

P
O-

O-

30

Nucleozid-trifosfaii ndeplinesc n organism funcii importante.

Astfel, ATP poate transporta i ceda resturi de fosfat i pirofosfat n acele
reacii enzimatice care necesit energie. Cedarea energiei se face prin
hidroliza legturilor fosforice cu energie mare din molecula acestui compus,
legturile dintre gruprile fosforice sunt macroergice deoarece sunt legturi de
anhidrid. Refacerea moleculei de ATP se realizeaz prin refosforilarea ADPului n procesul de fosforilare oxidativ.
De asemenea, GPT, UTP i CTP pot furniza energie pentru unele ci
de biosintez (UTP n sinteza polizaharidelor, GTP n sinteza proteinelor, iar
CTP n sinteza lipidelor). n unele reacii de fosforilare particip IDP i ITP n
structura crora intr hipoxantina.

2. ENZIME
Organismele vii, mono- i pluricelulare sunt caracterizate prin unele
activiti ca: micare, producere de energie, lumin etc., activiti care au la baz
reacii chimice. Organismele vii sunt supuse primului principiu al termodinamicii,
adic legii conservrii masei i energiei. Energia pentru sinteza moleculelor
complexe din elemente sau molecule mai mici este furnizat prin degradarea
moleculelor complexe n intermediari i compui mai simpli. n consecin este
necesar cuplarea celor dou aspecte ale metabolismului (anabolism i catabolism)
printr-un transfer de energie. O reacie chimic de forma
A+ B
C+D
poate avea loc cnd o parte din moleculele A i B se gsesc ntr-o stare de energie
ridicat, stare activat (stare de tranziie) n care exist o mai mare probabilitate ca
legturilor din compuii A i B s se rup i s se formeze produii C i D. starea
de tranziie este o barier nalt de energie care delimiteaz reactanii de produii
de reacie. Viteza unei astfel de reacie este proporional cu moleculele aflate n
stare de tranziie (activat). Exist dou posibiliti de accelerare a reaciei
chimice:
creterea temperaturii ce favorizeaz agitaia molecular, creterea
numrului de molecule activate i accelerarea vitezei de reacie care n cele mai
multe reacii este aproximativ dubl pentru o cretere a temperaturii cu 10oC;
utilizarea catalizatorilor.
Catalizatorul se combin temporar cu reactanii determinnd scderea
energiei de activare. Cu ct energia de activare va fi mai mic cu att catalizatorul
va fi mai eficace. De exemplu, descompunerea apei oxigenate:
2 H2O2
2 H2 O + O 2

31

Necatalitic, are loc cu un consum de energie, G = 18 Kcal/mol; n

prezena catalizatorului de Pt coloidal, G = 13 Kcal/mol; iar n prezena
enzimei, catalaza, numai 2 kcal/mol.
O reacie chimic este endergonic (endoterm) dac variaia energiei
libere este pozitive, deci necesit un aport de energie i exergonic (exoterm)
cnd variaia energiei libere va fi negativ, deci va rezulta energie.
n timpul unei reacii, catalizatorul sufer o serie de modificri, dar odat
reacia terminat, acesta revine la starea iniial.
Enzimele sunt catalizatori proteici pentru reaciile chimice care se petrec
n sistemele biologice. n absena enzimelor, majoritatea reaciilor din celula vie
s-ar petrece cu viteze foarte mici.
Spre deosebire de catalizatorii neproteici (ioni metalici, H +, OH-) fiecare
enzim catalizeaz un numr mic de reacii, de cele mai multe ori, una singur.
Exist un numr foarte mare de enzime; pentru fiecare compus organic,
ct i pentru muli compui anorganici, exist mcar o enzim capabil s
reacioneze cu acesta i s catalizeze o anumit modificare chimic.
2.1 Nomenclatura i clasificarea enzimelor
Numele tiinific al unei enzime se formeaz astfel: Donor: Acceptor
reacia catalizat. De exemplu: enzima responsabil de oxidarea alcoolului etilic se
numete Alcool: NAD+-oxireductaz.
Pe lng denumirea tiinific, se utilizeaz acea denumire uzual, care
este n acord cu numele tiinific. Denumirea uzual este format din dou pri:
prima parte indic substratul sau substratelor asupra crora acioneaz enzima, iar
partea a doua indic reacia catalizat. De exemplu, alcool: NAD +-oxireductaza se
numete curent alcool-dehidrogenaza (ADH).
innd seama de reacia catalizat, enzimele se clasific n ase clase:
1.
Oxidoreductaze catalizeaz reaciile de oxido-reducere; n funcie
de acceptorul de electroni se pot distinge:
oxidaze transfer electronii de la un substrat direct la oxigen;
dehidrogenaze transfer electronii de la un substrat la alt substrat
(altul dect oxigenul);
oxigenaze ncorporeaz direct oxigenul n substrat;
peroxidaze transfer electronii de la substrat la H2O2 ca acceptor.
2. Transferaze catalizeaz transferul de grupri de pe un substrat
(donor) pe alt substrat (acceptor).
C1-transferaze transfer uniti de un atom de carbon ntre substrate
(exemplu: metil-transferaze);
amino-transferaze transfer gruparea amino de pe un aminoacid pe
un cetoacid (transaminazele);
kinaze transfer un radical fosfat din ATP pe un substrat;

32

fosforilaze transfer radicalul fosfat din fosfat anorganic (Pa) pe un

substrat.
3.
apei:

Hidrolaze catalizeaz scindarea legturilor chimice cu ajutorul

fosfataze ndeprteaz radicalul PO3H2- de pe un substrat;

fosfodiesteraze cliveaz legturile fosfatdiesterice, cum ar fi cele din

acizii nucleici;
proteaze scindeaz legturile peptidice din proteine.
4.
Liaze catalizeaz scindarea nehidrolitic a unei grupri de pe un
substrat cu formarea unei duble legturi sau fixeaz o grupare la o dubl legtur:
decarboxilaze ndeprteaz CO2 de pe substrat;
aldolaze formeaz aldehide n reacii de eliminare;
sintaze leag dou molecule fr implicarea ATP-ului.
5.
Izomeraze catalizeaz reaciile de interconversiune a izomerilor
optici, geometrici i de caten:
racemaze
i
epimeraze

catalizeaz
interconversiunea
stereoizomerilor L i D;
mutaze transfer grupri ntre atomii aceleiai molecule;
cis-trans-izomeraze interconversiunea izomerilor geometrici;
izomeraze care catalizeaz reacia aldoz
cetoz.
6.
Ligaze sau sintetaze unirea a doi compui utiliznd energia
eliberat prin hidroliza unei molecule de ATP.
2.2. Structura enzimelor
Specificitatea mare a unei enzime este strns legat de structura ei fizic i
chimic specific. Din punct de vedere chimic, o enzim este format dintr-o parte
proteic apoenzima i o parte neproteic coenzima sau cofactor.
Partea proteic este termolabil i este responsabil de specificitatea
enzimei, de aciune, dar mai ales de substrat, iar coenzima este termostabil i
dializabil.
Apoenzima. Enzimele simple i apoproteinele enzimelor complexe
sunt formate din catene lungi polipeptidice, avnd aceleai nivele de organizare
structural ca i alte proteine: primar, secundar, teriar i cuaternar.
Dei toate enzimele au structuri primare, secundare i teriare, structura
cuaternar nu este obligatorie.
Coenzime. Coenzima este partea neproteic, care particip efectiv la
reacia catalitic (se modific temporar n timpul reaciei). Frecvent, coenzimele
conin n structura lor vitamine din grupul B.
2.3. Izoenzime forme moleculare multiple ale aceleai enzime. Ele
catalizeaz aceeai reacie enzimatic, dar difer ntre ele n privina proprietilor
fizice, chimice i imunologice.

33

Interesul medical pentru izoenzime a fost stimulat prin descoperirea n

1957, n serul uman, a mai multor izoenzime LDH, a cror proporii relative se
modific semnificativ n anumite stri patologice.
Cele 5 izoenzime LDH difer ntre ele n ceea ce privete structura
cuaternar. Molecula activ de LDH este un tetramer (130.000) format din dou
tipuri de subuniti H i M luate cte patru (fiecare subunitate are 34.000).
Subunitatea H (heart) este caracteristic muchiului inimii i n general
esuturilor cu metabolism aerob, iar subunitatea M (muscle) este caracteristic
muchiului scheletic i n general organelor i esuturilor cu metabolism anaerob.
Excepie fac ficatul i eritrocitul.
Structura celor 5 izoenzime LDH este:
LDH1
- H4
LDH2
- H3M1
LDH3
- H2M2
LDH4
- HM3
LDH5
- M4
Sinteza celor dou tipuri este coordonat de dou gene diferite.
Ulterior au fost evideniate izoenzime i pentru alte enzime creatin-kinaza
CK1(BB); CK2(MB) i CK3 (MM), hexo-kinaza, fosfataza alcalin etc.
2.4. Specificitatea enzimelor
Dup specificitate de aciune enzimele pot fi grupate n: enzime cu
specificitate absolut, enzime cu specificitate relativ i enzime cu specificitate
optic sau stereochimic.
Specificitatea absolut. Unele enzime acioneaz numai asupra unui
singur substrat, cataliznd o singur reacie, de exemplu ureaza:
H2N C NH2 + H2O

ureaza

2 NH3 + CO2

Aceast enzim este total inactiv fa de compui foarte asemntori

structural tioureea H2N-CS-NH2. De asemenea, arginaza enzima care
catalizeaz hidroliza L-argininei la uree i ornitin nu poate cataliza hidroliza
esterul metilic al argininei sau scindarea agmatinei, amina rezultat prin
decarboxilarea argininei.
Specificitatea relativ. Multe enzime sunt specifice numai pentru
anumite tipuri de legturi chimice indiferent de structura moleculelor respective.

34

Din acest grup fac parte esterazele care fac posibil scindarea mono-, ditrigliceridelor i chiar ali esteri cu structur chimic mult mai complicat. De
exemplu, acetilcolinesteraza, specific pentru acetil-colin, poate scinda i ali
esteri ai colinei cu acizii propionic, butiric etc. Butiril-colina pare a fi substratul de
elecie, fiind hidrolizat mai rapid dect ali esteri ai colinei.
Enzimele proteolitice care hidrolizeaz legturile peptidice din proteine i
din ali compui neproteici, fac parte tot din acest grup.
Specificitatea optic. Enzimele catalizeaz transformarea numai a
unui stereoizomer; specificitatea optic este de obicei absolut, cellalt antipod
optic rmnnd neschimbat. Excepie fac racemazele care catalizeaz
interconversiunea antipozilor optici.
Enzimele care recunosc substrate cu izomeri geometrici au o specificitate
geometric.
Fumaraza, de exemplu, permite hidratarea acidului fumaric (izomer trans)
i nu a acidului maleic (izomer cis) cu formarea acidului malic ca produs final:
H
HOOC C

C COOH
H

Fumaraza
H2O

HOOC

CH CH2 COOH
OH

2.5. Centrul catalitic al enzimei

Structura binar a enzimelor este indispensabil aciunii catalitice. Luate
separat, att coenzima ct i apoenzima nu au activitate catalitic.
Centrul catalitic a fost conceput mult vreme ca un tipar rigid, preformat,
substratul potrivindu-se n enzim ca i cheia n broasc (lock and key) sau
template (modelul Fischer). Dei n acest model centrul activ este rigid, el se
mai folosete nc pentru explicarea unor proprieti enzimatice, cum ar fi legarea
ntr-o anumit ordine a substratelor sau curba de saturare cu substrat.

35

Un model mai perfecionat este cel imaginat de Koshland, numit induced

fit (fixare indus), modelul cu cel mai puternic suport experimental. Principala
caracteristic a acestui model este flexibilitatea centrului activ. n absena
substratului gruprile catalitice i de legare a substratului sunt deprtate unele de
altele, separate de mai multe resturi de aminoacizi. Apropierea substratului induce
o modificare conformaional a enzimei nct gruprile care particip la legarea
substratului sau la reacia catalitic se apropie spaial.

Situsul (centrul) activ dintr-o enzim poate fi pus n eviden prin tratarea
cu anumite substane ce au capacitatea de a se combina specific cu aminoacizii
centrului catalitic, inactivnd enzima.
2.6. Factori care influeneaz activitatea enzimatic
Influena concentraiei enzimei
Dac se utilizeaz concentraii crescnde de enzim cantitatea de substrat
transformat n unitatea de timp crete proporional cu concentraia enzimei.
Influena concentraiei substratului asupra vitezei de reacie
Dac se menine constant concentraia de enzim i se mrete
concentraia de substrat S, se constat o cretere rapid a vitezei de reacie pn la
o valoare limit (vmax). Dac [S] continu s creasc, curba capt o inflexiune i
pentru valori mari de S, viteza nu mai crete, curba tinde asimptotic ctre o valoare
maxim (vmax).

36

Crescnd n continuare concentraia substratului viteza reaciei rmne

constant deoarece nu mai exist enzim liber. Transformarea substratului n
produs (produi) de reacie are loc cu formarea, pentru scurt timp, a unui complex
enzim-substrat.
Ipoteza formrii complexului ES a fost emis prima dat de Michaelis.
Existena acestui complex a fost demonstrat practic prin analiza spectrelor de
absorbie n ultraviolet, vizibil, rezonan magnetic nuclear, fluorescen sau
prin dializ.
E + S

K1

K2

ES

K3

E ^ P (1)

Cantitatea de produs P format depinde direct de concentraia complexului

ES, care depinde de viteza de descompunere a compusului ES n E + S. Aplicnd
legea aciunii maselor pentru reaciile de echilibru se obine relaia:
Cnd toat enzima a fost
[E] [S]
fixat sub form de complex ES, se
K 2=
(2)
[ES]
atinge viteza maxim a reaciei.
KM = [S] (3) care a primit numele de constanta Michaelis, definit drept
concentraia substratului pentru care se atinge jumtate din viteza maxim.
Cnd numai jumtate din enzim este trecut n form [ES] i [E] =[ES] se
atinge jumtate din viteza maxim vmax i relaia (2) devine:
Influena temperaturii asupra activitii enzimatice
Viteza de reacie crete cu creterea temperaturii, dar n anumite limite.
Studiul vitezei iniiale a unei reacii enzimatice n funcie de temperatur
determin apariia a dou faze distincte care corespuns la dou fenomene diferite:

37

n zona de temperaturi mai mici (0 i 40 oC) viteza reaciei crete

cnd temperatura crete. Aceast cretere a vitezei cu temperatura se explic
printr-o cretere a concentraiei complexului activat (intermediar) atunci cnd se
furnizeaz mai mult energie sub form termic sistemului n reacie.
la o temperatur ce depete 45oC se asist la o denaturarea a
proteinei.
Temperatura optim pentru cele mai multe enzime este de 30oC 40oC.
Exist microorganisme termofile care triesc n ap la 70 oC 80oC i a cror
enzime sunt active la aceast temperatur. La 0 oC unele enzime i nceteaz reversibil
activitatea, aceast temperatur constituind temperatura de conservare pentru unele
enzime.
Influena pH-ului
Variaiile de pH pot avea efecte att la nivelul enzimei, ct i la nivelul
substratului. Astfel, se poate modifica gradul de ionizare a unor grupri funcionale de pe
enzim a cror sarcin pozitiv sau negativ este necesar fie formrii complexului
enzim-substrat, fie meninerii conformaiei tridimensionale native a protein-enzimei. De
asemenea, la nivelul substratului poate fi modificat gradul de ionizare mpiedicnd sau
favoriznd formarea complexului enzim-substrat. Valoarea pH-ului la care reacia
enzimatic se desfoar cu vitez maxim se numete pH optim.

pH-ul optim pentru cele mai multe enzime are valori cuprinse ntre 6 i 8.
Excepie fac enzimele digestive, pepsina (pH=1,5-2), arginaza (pH= 9,5-10).
Influena efectorilor asupra activitii enzimelor
Efectorii sunt substane care mresc sau scad aciunea catalitic a enzimelor.
Acetia pot fi activatori sau inhibitori.
Activatorii sunt compui de natur organic sau anorganic care n
concentraii mici mresc viteza unei reacii enzimatice atunci cnd se gsesc n mediul
de reacie.

38

O serie de ioni metalici, cum ar fi K, Cu, Fe, Mg, Mn, Co, Mo, au efecte pozitive
asupra unor reacii enzimatice. Fe, Mo, Cu particip n reaciile de oxido-reducere, Mg
este necesar n reaciile de transfer ale gruprii fosfat, iar Ca este necesar n reaciile
enzimatice ce intervin n coagularea sngelui.
Inhibitorii enzimatici sunt compui care diminueaz sau anihileaz activitatea
enzimelor. Ei au compoziie chimic i mod de aciune diferit. Printre substanele
capabile s se fixeze pe diferite grupri din proteine (hidroxil, sulfhidril, carboxil) i s
modifice proprietile catalitice, fie prin modificarea conformaiei, fie prin blocarea
centrului activ al enzimei, se gsesc ionii metalelor grele, sau compui cum sunt acidul
monoiodacetic sau acidul paraclormercuri-benzoic care reacioneaz cu gruprile -SH din
enzime.
- Inhibitorii competitivi sunt compui care prezint o analogie structural cu
substratul enzimei i pot intra n competiie cu acesta pentru a se fixa pe locul activ al
enzimei. Enzima se poate combina fie cu substratul, fie cu inhibitorul formnd
complexele ES i EI:
ES

E + P

E
EI

Este clar c enzima angajat n complexul EI nu poate funciona ca un

catalizator, numai complexul ES va permite formarea produilor de reacie.
Inhibiia depinde de concentraia substratului, inhibitorului, de afinitatea enzimei
pentru substrat i pentru inhibitor.
La adugarea de cantiti mari de substrat inhibitorul este deplasat din centrul
catalitic al enzimei, care va fi ocupat de substrat, iar viteza de reacie va reveni la valoare
maxim ca i n absena inhibitorului.
Inhibiia competitiv are numeroase aplicaii practice, n special n terapeutic.
Exemplul clasic este cel al sulfamidelor, analogi structurali ai acidului paraaminobenzoic:

H2N

COOH

acid para aminobenzoic

H2N

SO 2

NH2

sulfonamid\

Sulfamidele intr n competiie cu acidul p-aminobenzoic i inhib producerea de

acid folic necesar creterii bacteriilor.
Chimioterapia anticanceroas face apel la numeroi antimetabolii, n general
analogi structurali ai bazelor purinice sau pirimidinice, permind inhibiia biosintezei
acizilor nucleici i blocarea diviziunii celulare.
- Inhibitorii necompetitivi se fixeaz fie pe enzim (dar ntr-un loc diferit de
locul activ), fie pe complexul ES pentru a forma un complex ESI, fie pe amndou.

39

Locul activ ale enzimei i pierd capacitatea de a reaciona cu substratul datorit

unui fenomen de mpiedicare steric. Gradul de inhibiie depinde de concentraia
inhibitorului i de afinitatea enzimei pentru inhibitor. Exemple de inhibitori necompetitivi
sunt cianurile, care se combin cu unele metale necesare activitii enzimei (Fe 2+, Fe3+) cu
care formeaz complexe inactive asemntoare cu fero- sau fericianurile.
Unele metale grele (Hg, Pb, Cu, Ag) sunt inhibitori deoarece se combin cu
gruprile SH ale enzimei formnd mercaptide
Enzim-SH + Ag+
Enzim-S-Ag + H+
Agenii chelatani de tipul acidului etilendiaminotetraacetic (EDTA) leag Mg 2+
2+
sau Ca .
Efectori alosterici
Activitatea catalitic a enzimelor poate fi alterat i de compui care se fixeaz
pe enzim n locuri ndeprtate de centrul activ (loc alosteric). Aceti compui pot crete
activitatea catalitic i se numesc efectori pozitivi, sau pot reduce activitatea catalitic i
se numesc efectori negativi.
Enzimele alosterice au o structur cuaternar, oligomer, formate dintr-un numr
variabil de monomeri legai prin legturi necovalente.
n afara situsului catalitic unde se fixeaz substratul, aceste enzime posed unul
sau mai multe situsuri alosterice, care pot fi situate pe acelai lan polipeptidic unde se
afl i centrul activ dar n zone diferite.
- Activatorii alosterici se fixeaz la locul alosteric determinnd o modificare a
conformaiei enzimei, numit tranziie alosteric, care antreneaz o modificare a
conformaiei la nivelul situsului catalitic. Acest situs determin o conformaie mai
propice pentru fixarea substratului, crescnd afinitatea enzimei pentru substrat.
Legarea unui inhibitor alosteric produce o modificare conformaional care
mpiedic legarea substratului la locul activ (locul activ este deformat) i enzima este
inhibat.
2.7. Reglarea metabolismului
Reaciile catalizate de enzime au loc cu viteze anumite, determinate de
concentraia enzimei, a substratului, pH-ului, temperaturii etc. Aceste reacii nu sunt
independente unele de altele, ele sunt grupate i se succed formnd ci metabolice care
funcioneaz simultan i n mod coordonat calitativ i cantitativ.
Principalele mecanisme prin care se moduleaz activitatea enzimelor dintr-o cale
metabolic sunt reprezentate de: reglarea alosteric, transformarea pre-enzimelor inactive
n enzime active i sinteza de noi molecule de enzime.
Reglarea alosteric este mecanismul cel mai complex al coordonrii
metabolice. Enzimele implicate n aceast reglare sunt enzime alosterice.
n unele ci metabolice, unul din produii de reacie poate inhiba prima enzim
din calea respectiv:
X activator
alosteric

Activare

E1

E2

E3

Inhibi]ie

G inhibitor alosteric

40

Transformarea substratului A n produsul final G are loc printr-o succesiune de

reacii catalizate de diferite enzime. Acumularea de produs G n exces, n celule,
determinnd inhibiia enzimei E1 care catalizeaz transformarea substratului A n
produsul B, considerat etap limitant a succesiunii de reacii enzimatice.
Acest tip de inhibiie se numete inhibiie prin produs final, inhibiie feed-back
sau retroinhibiie
Reglarea covalent
Un grup mare de enzime i regleaz activitatea prin adiia sau ndeprtarea unei
grupri fosfat la un rezidiu de serin, treonin, tirozin. Fosforilarea se face pe baza ATPului, n prezena unei familii de enzime, denumite kinaze, iar defosforilarea se face n
prezena apei i a unor fosfataze.
Kinaz\

ATP

ADP

Enzim\
ser

Enzim\
ser O

OH

P
O

_
HPO4

fosfataze

H2O

Rspunsul la fosforilare este diferit funcie de enzima fosforilat. Astfel, n urma

fosforilrii, unele enzime se activeaz (glicogen fosforilaza), iar altele sunt inhibate
(glicogen sintetaza).
n metabolismul glicogenului, n momentul fosforilrii, sunt fosforilate simultan
dou enzime:
glicogen fosforilaza, care este activat i declaneaz scindarea
glicogenului;
glicogen sintetaza, care este inhibat i mpiedic reformarea glicogenului.
Transformarea pre-enzimelor n enzime active are loc printr-un proces de
proteoliz limitat catalizat fie de enzime proteolitice, fie de H+, ca de exemplu:
H^ sau pepsin\

pepsinogen
tripsinogen

tripsin\ sau enterokinaz\

chimotripsinogen

tripsin\

pepsin\
tripsin\
chimotripsin\

41

Transformarea pepsinogenului i tripsinogenului poate fi catalizat de nsi forma

activ a enzimei, printr-un proces de autocataliz.
Alte procese de transformare n forme active se ntlnesc la enzimele implicate n
coagularea sngelui i fibrinoliz.
protrombin\
plasminogen

Xa, Ca^^, fosfolipide

activatori

trombin\
plasmin\

Procesul de activare prin proteoliz limitat implic hidroliza unor legturi

peptidice, ndeprtarea unor peptide de clivare i demascarea centrului activ al enzimei.
Fenomenul se ntlnete i la unii hormoni proteici.
Reglarea sintezei de enzime reprezint un aspect particular al sintezei de
proteine i se afl sub controlul aparatului genetic al celulelor, realizndu-se prin procese
de inducie sau represie.
Inducia se refer la sinteza de novo a unei proteine ca rspuns la semnalul
transmis de o molecul de inductor care, de multe ori, este chiar substratul enzimei (de
exemplu lactoza induce sinteza de beta-galactozidaz).
Represia reprezint reprimarea sintezei de novo a unei proteine ca rspuns la
prezena din mediu a unui represor. De multe ori produii reaciei catalizate de o anumit
enzim acioneaz n calitate de represori limitnd sinteza respectivei enzime.
2.8. Importana biomedical a enzimelor rezid n utilizarea acestora n
diagnosticul unor boli i instituirea unei terapii corecte, precum i folosirea unora n scop
terapeutic.
Majoritatea proceselor enzimatice se petrec la nivel celular iar determinarea
enzimelor se face n unele lichide biologice (snge total, urin, lichid cefalorahidian,
plasm etc.).
Este important de cunoscut locul de producere al diverselor enzime, mecanismele
prin care ajung aceste enzime din celule n snge. Din acest punct de vedere se
deosebesc:
enzime secretate activ n plasm, mai ales de ficat, care acioneaz asupra
unor substrate din plasm ndeplinind aici un rol fiziologic. Astfel de enzime specifice
plasmei se numesc enzime plasmatice funcionale. Enzimele coagulrii,
pseudocolinesteraza, sunt enzime plasmatice. Lezarea organului care produce aceste
enzime determin scderea activitii enzimelor n plasm;
enzime ale secreiilor exocrine care pot difuza pasiv n snge, fr a avea rol
specific la acest nivel. Astfel de enzime sunt: amilaza, lipaza, tripsina pancreatic,
pepsinogenul gastric, precum i fosfataza alcalin biliar i fosfataza acid prostatic.

42

Enzimele din aceast categorie vor scdea n snge n cazul atrofiei organului care le
sintetizeaz sau vor crete cnd apar creteri ale permeabilitii membranei celulelor ce le
sintetizeaz;
enzimele celulare acioneaz exclusiv intracelular, se mai numesc i enzimele
plasmatice nefuncionale deoarece substratele i cofactorii lor specifici nu se gsesc n
plasm. Concentraia lor n spaiul intracelular este mult mai mare dect n plasm.
Ptrunderea enzimelor celulare n snge, n condiii patologice, are loc prin
creterea permeabilitii membranei celulare sub aciunea unor factori infecioi, toxici.
n leziunile distructive, att enzimele citoplasmatice ct i cele legate de
organitele celulare, trec n snge. O alt cale de ptrundere a enzimelor celulare n snge
o constituie blocarea cilor de eliminare normal a enzimelor (unele enzime hepatice,
pancreatice) sau o cretere a concentraiei de enzime ca urmare a unei inducii
enzimatice.
Scderea activitii enzimelor n plasm poate fi datorat scderii sintezei de
enzime, consumului unor medicamente (cortizon, morfin, atropin) sau unor erori
genetice.

3. VITAMINE
Vitaminele sunt substane organice cu greutate molecular mic, cu structuri
chimice, proprieti fizice, chimice i biologice diferite.
Ele sunt aduse din exterior i nu constituie pentru organism surs energetic
sau plastic, dar sunt absolut indispensabile pentru funcionarea normal a
organismului. Din acest motiv, organismul are nevoie de un aport zilnic de vitamine
(cteva mg/zi) asigurat de raia alimentar. Lipsa unor vitamine din alimentaie duce
la declanarea unor stri patologice specifice, numite avitaminoze, care, dac nu sunt
de lung durat, pot fi ndeprtate prin administrarea de vitamine.
Antivitaminele sunt substane cu structur chimic asemntoare cu a
vitaminelor dar cu aciune antagonist, deoarece avnd structur asemntoare cu
vitaminele adevrate, pot intra n competiie cu acestea din urm.
Clasificarea vitaminelor se bazeaz pe criterii de solubilitate:
vitamine liposolubile (solubile n grsimi) A, D, E, K;
vitamine hidrosolubile (solubile n ap) B 1, B2 B6, PP, biotina, acidul
pantotenic, acidul folic, B 12, vitamina C.

43

3.1. Vitaminele hidrosolubile

Vitaminele hidrosolubile aparin complexului vitaminic B (B 1, B2, B6, B12, PP,
acid pantotenic, acid folic) i vitamina C.
Fiind solubile n ap nu se acumuleaz n organism n concentraii toxice i se
elimin n principal pe cale renal.
Vitaminele hidrosolubile ndeplinesc n general rolul de coenzime.
3.1.1. Vitamina B 1 (tiamina, aneurina, vitamina anti beri-beri, vitamina
antinevritic)
Structural, este alctuit dintr-un nucleu pirimidinic i un nucleu tiazolic,
substituite i unite printr-o grupare metilenic.
6'
1' N

H3C

CH2

5'
4'

3'

CH3

NH2.HCl 2 S 5 CH2 CH2 OH

1

Tiamina
Absorbia tiaminei se realizeaz la nivelul intestinului subire, prin procese
active i pasive; absorbia activ presupune formarea TPP (tiamin-PP).
n organism tiamina se gsete liber (plasm, LCR) i esterificat ca TPP
(80%), form sub care se stocheaz pentru scurt timp i sub care este activ biologic.

Tiamin\

Tiamin
pirofosforilazkinaza
ATP

H3C
AMP

CH2

N
N

NH2

CH3
S

TPP

CH2 CH2 O

O
P
OH

O
O P OH
OH

Rol metabolic. Sub form de TPP particip n calitate de coenzim la

unele procese metabolice, decarboxilarea oxidativ a -ceto-acizilor (piruvic i
-cetoglutarat). De asemenea, TPP constituie coenzima transcetolazelor, enzime din
calea pentozo-fosforic.
Tulburri de aport vitaminic
Simptomele deficienei pot fi cauzate de malnutriie, defecte de absorbie,
pierderi vitaminice datorate terapiei cu diuretice, hemodializ, diaree.
Deficitul vitaminic poate conduce la boala numit beri-beri, ce se
caracterizeaz prin:
- simptome neurologice (somnolen, dureri de cap, nevrit periferic);
- simptome gastro-intestinale;
- simptome la nivelul aparatului locomotor.

44

Simptomele moderate ale deficienei tiaminice includ: confuzie mintal, ataxie

(inabilitatea de a realiza un control fin al funciilor motorii) i oftalmoplegie
(pierderea coordonrii micrii ochilor).
Aceste simptome se ntlnesc i n sindromul Wernicke-Korsakoff.
La animale, deficiena tiaminic conduce la pierderea coordonrii musculare,
ca retracia capului (opistotonus), caracteristic porumbeilor cu hipovitaminoz B 1.
Hipervitaminoza tiaminic nu apare n mod obinuit. Cu totul excepional pot
apare fenomene de intoleran (lein, dispnee, tahicardie).
3.1.2. Vitamina B2 (riboflavina)
Aparine clasei pigmenilor galbeni sau flavinelor naturale. Este constituit
dintr-un nucleu triciclic, derivat de izoaloxazin i o caten lateral de ribitol:
OH OH OH
8
H3C 7

H3C 6

CH2 CH CH CH CH2 OH
N

9
10

12
4 NH

n organism, riboflavina se gsete sub form liber (plasm, lapte, urin i

retin), ct i legat (FMN, FAD, enzime flavinice) n diferite esuturi ca rinichi, ficat,
inim, muchi.
Rol metabolic
Riboflavina intr n structura formelor sale coenzimatice, flavinmononucleotid
(FMN) i flavinadenindinucleotid (FAD). Transformarea sa n ester monofosforic
(FMN) are loc n toate celulele organismului, sub aciunea unei flavokinaze:
Riboflavin\

Flavokinaz\
ATP

ADP

FMN

Flavin-adeninpirofosforilaza
ATP

FAD

PPa

Prin unirea FMN cu acidul adenozin-5-P (AMP), sub influena flavin-adeninpirofosforilazei, se formeaz FAD-ul. Dup nomenclatura strict, FMN-ul nu este un
mononucleotid, iar FAD-ul nu este un dinucleotid, deoarece n loc de pentoz au un
alcool polihidroxilic, ribitolul, iar flavina nu este o baz azotat adevrat.

45

NH2
O
P

CH2
H C OH
H C OH
H C OH
H3C
H3C

O
O

OH

O
H

H
OH

H C H
N
N

CH2

OH

H
OH

O
NH

N
O

AMP

FMN
FAD

Flavinenzimele particip la reacii de oxidoreducere deoarece ciclul

izoaloxazinic poate suferi reduceri reversibile, prin fixarea temporar la N 1 i N10, a
doi atomi de hidrogen, cu mutarea dublei legturi. Hidrogenii sunt preluai de la
diferite substrate reduse (SH 2), cu care intr n reacie i care se oxideaz (S ox):
R

R
H3C
H3C

10

O
NH

N
O
FMN sau FAD

^2H^
^2e-2H^
-2e-

H3C
H3C

N
N
H

H
N

O
NH

FMNH2 sau FADH2

FMN i FAD se gsesc n celul sub form de combinaii cu proteinele,

constituind sisteme enzimatice de mare importan n oxidrile celulare
flavinenzimele (peste 60).
Riboflavina intervine i n mecanismul vederii (transform lungimile de und
mici n lungimi de und mai mari, perceptibile), n fiziologia glandelor lacrimale, n
mecanismul de producere a HCl n mucoasa gastric, n activitatea altor vitamine i
hormoni (conserv activitatea vitaminei B 1 i este legat de activitatea hormonilor
corticosuprarenali i a insulinei).
Tulburri de aport vitaminic
Hipovitaminoza se manifest prin apariia unor leziuni ale mucoasei
gastrice, buco-faringiene, leziuni cutanate.

46

La om, carena este cunoscut sub denumirea de pelagr fr pelagr, cu

simptomele: stomatit angular, leziuni umede la colurile gurii i nasului,
conjunctivit, cataract, blefarit, creterea n volum a limbii.
Hipervitaminoza. Megadozele administrate timp ndelungat determin:
crampe musculare, poliurie, utilizarea i metabolizarea defectuoas a altor vitamine,
datorit competiiei pentru compui de fosforilare.
3.1.3. Vitamina B6 (piridoxina, adermina, factor antidermatitic)
Vitamina B6 include trei compui naturali, derivai de piridin, care se
deosebesc prin natura radicalului din poziia 4:
CHO

CH2OH

OH
H3C

OH

CH2OH

H3C

1N

CH2NH2
CH2OH

OH
H3C

N
Piridoxal

Piridoxol

CH2OH
N
Piridoxamin\

Rolul metabolic
Piridoxalul i piridoxamina intervin n metabolism sub form fosforilat la
gruparea de alcool primar din poziia 5 (piridoxal-5-P, respectiv piridoxamin-5-P) care se
obin n reacia cu ATP.
CHO (CH2
OH
H3C

1N

CHO (CH2

NH2)
Piridoxal-kinaza

CH2OH

OH
H3C

ATP

NH2)

CH2 O PO3H2

ADP
Piridoxal fosfat

Piridoxal

Vitamina B6 intervine n multe reacii metabolice la care particip aminoacizii:

transaminare, decarboxilare (tirozina, arginina, acid glutamic), dezaminare (serina,
treonina), transsulfurare (transferul sulfului de la metionin la serin pentru sinteza
cisteinei), desulfurare (cistein i homocistein), activitatea kinureninei din calea de
Transaminare
degradare a triptofanului, n absorbia din intestin
i intrarea aminoacizilor n celul.
H

R
Treoninaldolaza

C
N
C

OH
H3C

COOH
Decarboxilaza
H
Enz

N
H

47

Tulburri de aport vitaminic

Ca semne ale deficienei se pot meniona: strile de nervozitate, insomnie,
tulburri de mers, afeciuni cutanate n jurul nasului, ochilor, gurii, limfocitopenie.
Carena vitaminei B6 favorizeaz apariia cariilor dentare, conduce la modificri
n metabolismul triptofanului, caracterizat printr-o excreie excesiv de acid xanturenic.
Medicamentul ISONIAZID (hidrazida acidului izonicotinic), uzual utilizat n
tratamentul tuberculozei, reacioneaz cu B 6 pentru a forma un derivat hidrazonic, care
inhib enzimele ce conin piridoxal-5-P. Pacienii tratai mult timp cu isoniazid dezvolt o
neutropenie periferic, care rspunde foarte bine la terapia cu B 6.
OH CH3
N

CO

NH

NH2 + O CH

N
CH2OH

Izoniazid

Vitamina B6

HOH

spontan

OH CH3
N

CO NH

CH

N
CH2OH

Piridoxal
hidrazona

De asemenea, penicilinamina (beta-dimetil-cisteina) uzual utilizat n tratamentul

pacienilor cu boala Wilson, cistinurie i artrit reumatoid, reacioneaz cu B 6, pentru a
forma un derivat tiazolidinic inactiv. Pacienii tratai cu penicilamin dezvolt ocazional
convulsii, care pot fi prevenite prin tratament cu vitamin B6.

48

3.1.4. Biotina (vitamina H)

Molecula biotinei este constituit din dou nuclee condensate, un nucleu
tetrahidro-imidazolic (A) i unul tetrahidro-tiofenic (B) la care este grefat o caten
lateral de acid n-valerianic. Se cunosc doi izomeri naturali, alfa i beta-biotina, izolai
din ficat i lapte, respectiv din glbenuul de ou:

1'

H N
4

H C
H2C

O
C
H N
N H
A
H C
CH3
C H
B
H2C
C H CH CH CH3
S
COOH
Alfa-biotina

O
2'
C 3'
N H
A 3
C H
B
C H (CH2)4 COOH
1S 2

Beta-biotina

n produsele naturale apare combinat cu lizina, compus numit biocitin:

Biotin\-CO-NH-(CH2)4-CH-COOH
NH2

Biocitinaza, enzim evideniat n plasm, ficat, pancreas, hidrolizeaz

compusul, elibernd biotin.
Enzimele care conin biotin au n centrul catalitic, resturi de lizin, prin
care se fixeaz vitamina. Cu avidina, glicoprotein termolabil din albuul de ou
crud, formeaz biotin-avidina, compus stabil, rezistent la aciunea enzimelor
proteolitice, nedisociabil prin dializ. Sub aceast form, vitamina nu se absoarbe
n tractul digestiv.
Rol metabolic
Biotina transport grupri CO 2 active,O n calitate de grupare prostetic a
unor sisteme enzimatice de OH
carboxilare (carboxilaze)
care catalizeaz fixarea CO 2
C
H
H
_
2^
N
N
pe diferite substrate.
de carboxilare,A CO 2 activat de ctre ATP, particip
O P OH
Mg n reaciile
^
HCO3 ^ ATP
sub
form de carboxi-biotin-enzim:
HC
CH
NH Enz.
ADP

_
O C O

H2C

C H (CH2)4 CO

Biotin-Enz.

Anhidrid\-Pcarbonic\

COO

O
C
O C N
NH
A
HC
CH
NH Enz.
B
H2C
C H (CH2)4 CO
S
O

Pa

CH3

C O
_
COO

CH2
COOH

Piruvat-carboxilaza

Biotin-enzima

49

Tulburri de aport vitaminic

Carena afecteaz aproape toate compartimentele metabolismului intermediar,
sinteza de novo a enzimelor, metabolismul glucidic, lipidic etc.
Hipovitaminoza se manifest prin tulburri nervoase, dermatit, oboseal
muscular, anemie, scderea apetitului.
Dup un consum mare de albu de ou crud, la obolani apare un sindrom deficitar
biotinic, numit boala albuului de ou, ce se manifest prin dermatit, alopecie n jurul
ochilor i paralizia membrelor posterioare.
3.1.5. Vitamina PP (niacina, factorul pelagro-preventiv)
Ca vitamin PP sunt desemnai doi compui, derivai de piridin, acidul nicotinic
(niacina) i amida acidului nicotinic (niacinamida):

n snge se gsete sub form de coenzim (80% n globulele roii) i sub form
de amid liber, n plasm.
Vitamina PP se sintetizeaz n organism din triptofan; din 60 mg triptofan rezult
1 mg acid nicotinic.
Rol metabolic
Nicotinamida acioneaz n organism sub forma a dou coenzime,
nicotinamidadenindinucleotid (NAD+) i nicotinamidadenindinucleotidfosfat (NADP+), n
reaciile de oxido-reducere.
NH2
CO NH2
+

CH2 O
H

OH

O
P
OH

OH

O
O

H2C

OH
H

OH

N
N

OH (PO3H2)

50

NAD+ (NADP+)
Acestea sunt formele oxidate ce pot fi reduse n NADH i NADPH, reducere ce
are loc la nucleul piridinic al nicotinamidei:
H
C
^

O
NH2

^2H^
2e

H
C

O
NH2

^2H^
2e

NAD^

NADH^H^

Aceste dou forme intervin n procesele de oxidoreducere celular, constituind

coenzima multor dehidrogenaze.
Spre deosebire de coenzimele flavinice (FMN i FAD), coenzimele piridinice
+
(NAD i NADP+) pot exista liber n celul; pot fi disociate de partea proteic. NAD +
particip n special n lanul transportorilor de H, iar NADPH n special n reaciile de
sinteze reductive (acizi grai, proteine etc.).
Tulburri de aport vitaminic
La om carena de vitamin PP se manifest prin pelagr (pella-agra piele aspr,
brun).
Pelagra se instaleaz cnd dieta este constituit n exclusivitate din porumb, srac
n triptofan i vitamin B6 (regim pelagrogen). Semne ale pelagrei oboseal, slbiciune,
indigestie, anorexie, urmat dup cteva luni de o dermatit (mai ales pe pielea expus la
soare), diaree i demen (boala celor trei D).
Dereglrile metabolice din pelagr sunt greu de definit deoarece carena de
vitamin PP poate fi indus de carena altor vitamine, n special B 6 n lipsa creia nu se
mai sintetizeaz vitamin PP din triptofan.
Pelagra poate nsoi i alte boli specifice unor defecte metabolice din
metabolismul triptofanului: boala Hartnup (defect de absorbie a triptofanului) sau
sindromul carcinoid (proliferarea malign a celulelor care sintetizeaz serotonina).
3.1.6. Acidul pantotenic (vitamina Bx, factor hepatic, factor antidermatitic al
ginilor)
Acidul pantotenic este format din acidul pantoic i -alanin.
O
H3C OH O
HO CH2 C CH C NH CH2 CH2 C OH
H3C
-alanin\

Acid pantoic
Acid pantotenic

51

Poate fi sintetizat de plante i microorganisme.

Se absoarbe la nivelul intestinului i imediat, tot n aceste celule, este fosforilat la
gruparea de alcool primar, formnd acidul 4-fosfopantotenic.
Formele active ale acidului pantotenic sunt 4-fosfopanteteina i coenzima A
(CoASH).
O

H3C OH O

CH2 C CH C NH CH2 CH2 C NH CH2 CH2 SH

4'-fosfopantetein\

H3C
Acid pantoic
O
O

CoASH

tioetanolamina

Acid pantotenic
_
O

NH2
N

O
O

-alanin\

CH2
O

P O
_
O
O

O H
P O

Adenina

Riboza
H
OH

Rol metabolic
CoA are rol deosebit n metabolismul glucidic, lipidic i proteic fiind
transportor de grupri acil R-CO-. Legtura dintre CoA i restul acil se realizeaz prin
intermediul gruprii SH rezultnd un tioester (R-CO~S-CoA) n care legtura tioesteric
este echivalent ca energie cu o legtur macroergic din ATP.
4-fosfopanteteina legat prin legtur fosfo-diesteric de un rest de serin
din proteina acil transportoare ACP-(Acyl Carrier Protein), din multienzim-complexul
numit acid gras-sintetaza care catalizeaz sinteza acizilor grai.
Tulburrile de aport vitaminic la om sunt cunoscute numai experimental
dup administrarea de antagoniti. Scderea concentraiei acidului pantotenic se

52

caracterizeaz prin; stare de oboseal, ameeli, hipotonie muscular, tulburri

gastrointestinale (gastrite), scderea rezistenei la infecii.
3.1.7. Acidul folic (acidul pteroilglutamic, vit.M, factorul U, factorul R,
coenzima C)
Acidul pteroilglutamic, derivaii nrudii i formele conjugate constituie grupul
acidul folic.
Este constituit dintr-un heterociclu numit pteridin, acid p-amino-benzoic i acid
glutamic:
N

H2N
N

N
N

COOH

O
HN

CH2

HN

CH (CH2)2 COOH

OH
Pirimidin\

Pirazin\
Pteridin\

Acid p-NH2benzoic (PABA)

Acid glutamic

Acid pteroic
Acid pteroilglutamic

Rol metabolic
Acidul tetrahidrofolic (FH4), forma activ a acidului folic servete la transferul i
utilizarea fragmentelor de un singur carbon n diferite stri de oxidare: -CH 3, -CH2-,
-CH=, -CHO, -CH=NH, care se pot fixa la N 5, N10 sau ca o punte metilenic ntre
N5 i N10.
H

H2N
N

N
5

N
OH

H
H
10
CH2 NH R
H

Metabolismul folatului este complex. Sursa de un atom de carbon este

serina, care transfer gruparea sa hidroximetil la FH 4 formnd N 5, N 10 -metilen-FH 4
din care se pot forma i alte forme active: N 5 -CH 3-FH 4, N 10-CH 3 -FH 4 , N 5,N 10 metenil-FH 4 , N 5-formil-FH 4 .
Coenzimele acidului folic particip la sinteza metioninei din homoserin
(N 5 -CH 3-FH 4), sinteza acidului timidilic din acid uridilic (N 5, N 10-metilen-FH 4), n
sinteza nucleului de purin (N 5 , N 10 -metenil-FH 4 i N 10-formil-FH 4 ) etc.
Tulburri de aport vitaminic
Deficiena de acid folic apare din cauza unui aport alimentar sczut, stres
(sarcin), tulburri de absorbie, deficit de enzime implicate n sistemul de transport sau
terapia cu unele medicamente.

53

Carena se manifest exclusiv prin perturbarea hematopoezei, simptomul fiind

anemia megaloblastic (cu eritrocite mari i rare).
Datorit relaiei strnse dintre activitatea metabolismului acidului folic i cea a
vitaminei B12, este destul de greu de a diferenia simptomele clinice dintre cele dou stri
de caren.
3.1.8 Vitamina B12 (cobalamina, ciancobalamina, factor antipernicios, factor
extrinsec Castle)
Vitamina B12 este un complex organo-metalic, cu inel corinic (tetrapirolic),
similar nucleului porfirinic, la care se adaug ionul de cobalt. Nucleul corinic are
substituite grupe CH3, acetamidice i propion-amidice. n centrul acestui macrociclu se
gsete ionul Co3+, cu numrul de coordinaie 6: 4 legturi se realizeaz cu atomii de N
pirolici, o legtur cu gruparea CN, iar a 6-a legtur se realizeaz cu cea de a doua
parte a moleculei. ntregul complex, fr gruparea CN, se numete cobalamin.
Radicalul R poate fi diferit, pentru a da variate forme ale vitaminei. De exemplu:
RCN n ciancobalamin (ciancobalamina se formeaz n procesul de purificare i
reprezint forma comercial a vitaminei); ROH n hidroxicobalamin; R5deoxiadenozil n 5-deoxiadenozilcobalamin; RCH3 n metilcobalamin.
NH2COCH2CH2 CH3 CH3
CH2CONH2
NH2COCH2
CH2CH2CONH2
CH3
CN
N
N
CH3
Co +
H

NH2COCH2
H
CH3

N
N

CH3
CH3

CH3

CH3
CH3 CH2CH2CONH2
H

CH2CH2CONHCH2

C
CH3

O HO
O
P

H
H O
H
CH2OH

Absorbia intestinal a vitaminei B12 este mediat prin receptori, n ileon,

necesitnd legarea vitaminei de o glicoprotein foarte specific, numit factor intrinsec,
secretat de celulele parietale ale mucoasei gastrice. Dup absorbie, vitamina se leag de
o protein plasmatic, transcobalamina II, n vederea transportului la esuturi.
n ficat, excesul de vitamin se depoziteaz sub form de 5-deoxiadenozilcobalamin (70%), OH-cobalamin (27%) sau metil-cobalamin (3%), fixate pe proteine
celulare.
Rol metabolic

54

Vitamina B12 ptrunde n celul, prin endocitoz, sub form de OH-cobalamin,

metilndu-se apoi la CH3-cobalamin. O cantitate important intr n mitocondrii i se
transform n 5-deoxiadenozil-cobalamin.
Cele dou forme coenzimatice, metabolic active, ale cobalaminei sunt implicate
n fucnionarea a dou sisteme enzimatice: metilmalonil-CoA-izomeraza i respectiv
homocistein-CH3-transferaza (sau metionin-sintaza), care catalizeaz urmtoarele reacii:
N5-CH3-FH4

Homocistein\

FH4

HomocisteinCH3-transferaza
(CH3-cobalamina)

Metionin\

Reac]ie de metilare
(citoplasm\)

OH-cobalamina

L-metilmalonil-CoA

5'-deoxiadenozilcobalamina)

Succinil-CoA

Reac]ie de rearanjament
intramolecular
(mitocondrie)

n absena cobalaminei, prima reacie se blocheaz, se acumuleaz N 5-CH3-FH4,

deturnnd folatul de la rolul su de transportor al grupelor de 1 C, constituind aa
numita capcan a folatului sau ipoteza capcanei metilului. Astfel, n primul caz,
homocisteina rmne nemetilat i se poate elimina prin urin (homocistinurie), iar n al
doilea caz, se poate acumula i elimina prin urin acidul L-metil-malonic (acidurie
metilmalonic).
Cobalamina i folatul sunt implicate n metilarea histonelor, n timpul replicrii
ADN-ului.
Tulburri de aport vitaminic
Sindromul tipic al carenei l constituie anemia pernicioas sau anemia Biermer,
caracterizat prin eritropoez megaloblastic, cu modificri ale leucopoezei i formrii de
trombocite.
Alterrile hematologice, caracteristice, pot fi nsoite de astenie, paloare, dispnee,
atrofia mucoaselor digestive, tulburri nervoase (scderea rspunsurilor reflexe i a
perceperii senzoriale, greutate n vorbire i mers), ct i tulburri gastro-intestinale.
Anemia rezult din perturbarea sintezei ADN, care afecteaz formarea nucleului
noilor eritrocite. n aceste cazuri globulele roii circulante sunt, n mare parte, forme
primitive i cu via scurt.

55

Carena de cobalamin este adesea corelat cu cea de folat i din aceast cauz
diferenierea celor dou este dificil.
3.1.9. Vitamina C (acidul ascorbic, factor antiscorbutic)
La nceput, a fost denumit acid hexuronic, avnd o structur asemntoare
monozaharidelor. Forma L este cea mai activ.
O

HO C

O C

HO C

O C

H C

H C

HO C

CH2OH
Forma redus\
(Acid ascorbic))

HO C

CH2OH
Forma oxidat\
(Acid dehidroascorbic)

Este sintetizat de toate plantele, de unele microorganisme i de majoritatea

animalelor, cu excepia omului, primatelor i cobaiului, care sunt tributare aportului
exogen.
n snge, durata de via a vitaminei C este de aproximativ 16 zile, la animalele
care o sintetizeaz.
Rol metabolic
Nu are rol coenzimatic tipic, dar este necesar pentru buna funcionare a
creierului, ficatului, glandelor endocrine, n hematopoez, hemoglobino-genez etc.,
participnd la numeroase reacii de oxido-reducere.
Principalele reacii la care particip vitamina C sunt: hidroxilarea prolinei i
lizinei pentru sinteza colagenului, hidroxilarea fenilalaninei, sinteza catecolaminelor,
hidroxilarea steroizilor, desaturarea acizilor grai, absorbia fierului, metabolizarea
xenobioticelor etc.
Tulburri de aport vitaminic
Carena vitaminei sau aportul alimentar redus poate conduce la tulburri gastrointestinale, boli infecioase, neoplazii, afeciuni metabolice caectizante i la apariia
scorbutului.
Apariia scorbutului este precedat de anemie, inapeten, scderea rezistenei la
efort, infecii, dureri articulare, uscciunea tegumentelor.
ntr-un stadiu mai avansat apar hemoragii subcutane, musculare, gingivale. Apar
leziuni ale esutului osos i cartilagiilor, ca urmare a perturbrii biosintezei colagenului.
Stocajul normal al vitaminei C este suficient pentru cel puin 3-4 luni naintea apariiei
semnelor de scorbut.

56

Nu sunt cunoscute efecte toxice, dar supradozarea poate conduce la litiaz renal,
datorit formrii oxalatului de Ca insolubil, ct i datorit efectului nefavorabil asupra
absorbiei vitaminei B1.
3.2. Vitamine liposolubile
Din punct de vedere chimic vitaminele liposolubile fac parte din clasa terpenelor,
compui polienici, constituii din resturi de izopren, unite cap la coad. Vitaminele
liposolubile se gsesc n mod obinuit asociate cu lipidele din alimentele naturale.
Absorbia lor se face n aceleai condiii ca i a lipidelor, adic n prezena
grsimilor, a bilei i a sucului pancreatic. Dup absorbie, vitaminele liposolubile sunt
transportate de chilomicroni pe cale limfatic n snge i apoi depozitate n ficat
(vitamina A, D, K), sau n esutul adipos (vitamina E) pentru diferite perioade de timp.
Supradozarea vitaminelor liposolubile conduce la instalarea unor stri toxice
(hipervitaminoz) mai ales n cazul vitaminelor A i D.
n snge vitaminele liposolubile sunt transportate de lipoproteine specifice,
nefiind solubile n plasm.
Nu sunt excretate n urin; n cea mai mare parte sunt eliminate pe cale biliar n
fecale.
3.2.1. Vitamina A (Retinol, axeroftol, vitamina antixeroftalmic, vitamina
liposolubil de cretere)
De fapt sunt dou vitamine, A1 i A2, care pot fi oxidate la aldehide sau acizi fr
pierderea activitii biologice.
16

H3C
2
3

17

19

CH3

CH3

20

CH3

H3C

CH2OH
1 6 7
9
11
13
15
10
12
8
14
5
CH3
4
18

CH3

CH3

CH3

CH2OH

CH3
3-dehidroretinol (Vitamina A2)

Retinol (Vitamina A1)

Vitamina A1 este un alcool polienic cu 20 atomi de carbon, cu duble legturi

conjugate, coninnd la un capt un ciclu de -ionon.
Vitamina A2 este 3-dehidroretinol, ce conine o legtur dubl suplimentar ntre
C3 i C4.
Gruparea de alcool primar din poziia 15 se poate oxida n organism reversibil la
aldehid (retinal) sau chiar la acid retinoic (-COOH), dar ireversibil.
15

CH2OH
Retinol

15

CHO
Retinal

15

COOH
Acid retinoic

57

n organism, vitamina A se formeaz n special la nivelul mucoasei intestinale i

mai puin n ficat, muchi i plmn, prin transformarea provitaminelor A (, i carotenii) prin oxidare la C15.

17
2

3
4

4'

18'

16

7
6

11

9
8

10

13
12

14

15

14'
15'

5 18

ionon\

caroten

12'
13' 11'

10'

5'

8'
9'

7'

6'
17'

3'

1' 2'
16'

ionon\

Ingerarea ndelungat de alimente bogate n caroten duce la depozitarea acestora

n esuturi, aprnd xantodermia nglbenirea pielii, n special a palmelor i tlpilor, cu
excepia sclerelor care, rmnnd albe, poate face diferena de icter.
Hipercarotenemia nu atrage i hipervitaminoz A.
Vitamina A se gsete n produsele de origine animal n cantitate mai mare dect
n cele vegetale: ficatul unor peti de ap dulce, glbenu de ou, lapte.
Depozitul de vitamin A din ficat poate asigura necesarul organismului pentru o
perioad lung de timp (chiar peste 1 an).
Rolurile vitaminei A
Vitamina A (retinol sau acid retinoic) este indispensabil vieii i creterii
normale (n privina staturii i greutii). n absena vitaminei, creterea animalelor mici
este oprit i cu timpul acestea mor.
Exercit aciune protectoare asupra epiteliilor, asupra mucoaselor,
mpiedicnd ptrunderea microorganismelor (aciune antiinfecioas).
Retinolul (-CH2OH) are rol n funcionarea aparatului genital i de
reproducere (spermatogenez). n acest caz acioneaz n calitate de hormon, printr-un
mecanism asemntor cu al hormonilor steroizi. Deficiena de vitamin A scade
gluconeogeneza (probabil ca rezultat al represiei de cortizol), scade sinteza de
glicoproteine membranare, mucopolizaharide i colesterol.
Acidul retinoic poate nlocui retinolul n creterea i diferenierea epiteliilor,
fiind considerat chiar mai activ, dar nu poate substitui retinolul sau retinalul n procesul
vederii.
Cel mai nsemnat rol al vitaminei A este n procesul vederii n care este
implicat direct 11-cis-retinal (-CHO) n calitate de grupare prostetic a tuturor
pigmenilor fotosensibili din retin.

58

Deficiena de vitamin A la copii i animale tinere afecteaz sistemul osos

(oprirea creterii oaselor, erupii dentare ntrziate, rdcini ru implantate, alterarea

emailului dentar) i apoi a esuturilor moi.
Oprirea diviziunii celulare i atrofia celulelor deja formate, ntrzierea
sever a creterii inclusiv a sistemului nervos.
Epiteliile, indiferent de originea lor, apar keratinizate, ceea ce conduce la
tulburri ale glandelor exocrine, lacrimale, piele, tractusul digestiv, respirator, urogenital
(se produce keratinizarea celulelor vaginale kolpokeratoz).
Carena poate fi nsoit de infecii spontane.
Carena vitaminic se manifest n principal la nivelul ochilor: scderea
capacitii de adaptare de la lumin la ntuneric (nictalopie) i hemeralopie scderea
acuitii vizuale i ngustarea spectrului vizual pentru albastru-galben, oboseal la citit.
Dac avitaminoza se accentueaz i este de lung durat apar leziuni ale epiteliului
conjunctiv xeroftalmie manifestat prin uscarea epiteliilor (xeroz), atrofia glandelor
lacrimale (cu scderea lacrimilor i deci umectarea insuficient) i lipsa de lizozim (factor
de protecie antimicrobian), corneea se opacifiaz, continund cu keratomalacie
(perforarea purulent a ochiului) proces care duce la cecitate (orbire).
Hipervitaminoza A
Dozele excesive de vitamin A produc fenomene de intoxicaie acut,
manifestat prin ameeli, cefalee, somnolen sau intoxicare cronic (anorexie, tegumente
usacte, buze uscate, ragade comisurale).
Megadozele de vitamin A produc reabsorbia oaselor prin stimularea
activitii proteolitice lizozomale, stimularea secreiei de parathormon (PTH) i efecte
teratogene la femeile gravide.
Consumul exagerat de caroteni produce icterul carotenic. Cnd se
depete capacitatea de fixare a proteinei de legare a retinolului (RBC) are efecte litice
asupra membranelor biologice. Lezarea membranelor eritrocitare de ctre retinol este
inhibat de vitamina E (tocoferol).
3.2.2. Vitamina D (colecalciferol, vitamina antirahitic)
Grupul vitaminelor D este reprezentat de cinci vitamine cu structur chimic i
aciune asemntoare notate de la 2 la 6.
Provitaminele D sunt derivai sterolici cu structura urmtoare:
ciclopentanoperhidrofenantren. Ele se difereniaz dup structura radicalului R.
CH3

CH CH

19

HO

12

1
9
10
2
8
B
A
3
5
7
4
6

CH3
CH CH
CH3
CH
3

18
11

CH

Ergosterol, provitamina D2
(ergocalciferol)

17
13 16
D
14 15

CH3

CH CH2 CH2 CH2

CH3
CH
CH3

7-dehidrocolesterol, provitamina D3,

(colecalciferol)

59

Precursorii nu prezint activitate vitaminic. Activitatea vitaminic se dobndete

prin activare, proces care cuprinde dou etape: activarea primar i activare secundar.

Provitamine D activarea primar\

(U.V.`n piele)

vitamine D 1-a activare secundar\

(ficat)
a 2 -a activare secundar\

25-OH-D

1,25-(OH)2-D

Activarea primar. Transformarea provitaminei n vitamina D se realizeaz

prin deschiderea inelului B ntre C9 i C10 cu apariia unei duble legturi ntre C10 i C19
sub aciunea razelor ultraviolete,
rezultnd o trien care constituie structura de baz ce
7-Dehidrocolesterol
confer activitate biologic comun (anhirahitic) iar catenele laterale le imprim
intensitatea activitii vitaminice.U.V. (piele)
R
Suprairadierea duce la compui toxici.
Deoarece prin expunere la soare se formeaz suficient vitamin D 3, aceasta este
CH2 dect ca o vitamin.
privit astzi mai mult ca un hormon
Colecalciferol
(Vitam
ina Dde
Activarea secundar const din dou
procese
3) hidroxilare succesive ce au
loc n ficat i rinichi.
HO
Prima hidroxilare a vitaminei D3 are loc n ficat, n poziia 25 a catenei
ficat
laterale, formndu-se 25-hidroxi-D3.

25

CH2

OH

25-OH-D3

HO

Rinichi

HO

CH2

HO

1,25-Dihidroxi-D3
(calcitriol)

25

OH
CH2

25
OH

HO

24,25-Dihidroxi-D3
(inactiv)

OH

60

Forma hidroxilat n poziia 25 sufer o nou hidroxilare la nivelul

rinichiului printr-un proces asemntor celor din sinteza sterolilor n glandele
suprarenale. Sistemul enzimatic este localizat n membrana intern a mitocondriei i
necesit pe lng NADPH, O2 i citocromul P450. Rezult 1,25-dihidroxi-colecalciferolul
sau 1,25-dihidroxi-D3 care este transportat de o protein specific la intestin unde
declaneaz procesele implicate n absorbia calciului.
Derivatul monohidroxilat (25-OH-D3) este de 4-5 ori mai activ dect vitamina
D3, n prevenirea rahitismului, iar 1,25-(OH)2-D3 este de 20-30 ori mai eficient dect D3
n transportul intestinal de Ca++ i respectiv, n prevenirea rahitismului, i de de zece ori
mai activ n meninerea concentraiei sanguine de fosfor la animalele cu regim srac n
fosfai.
La nivelul rinichiului alturi de 1,25-(OH)2-D3 se poate forma i 24,25-(OH)2-D3
mai puin activ n transportul intestinal al Ca++ i n procesul de mineralizare, dar capabil
s creasc Ca++ seric la obolanii cu depleie de fosfai dependent de vitamina D.
Rolul metabolic al vitaminei D
1,25-(OH)2-D3 sau calcitriolul (C) regleaz metabolismul fosfo-calcic prin
aciunile exercitate asupra esuturilor int: intestin, os, rinichi.
La nivelul intestinului calcitriolul (C) este transportat la locul de aciune
unde se fixeaz pe proteine receptoare citoplasmatice i apoi este translocat la nucleu
unde printr-un mecanism puin cunoscut induce sinteza unei proteine transportoare de

61

calciu (Calcium Binding Protein CBP) care favorizeaz absorbia de Ca ++ contra

gradientului de concentraie, mecanism de aciune similar aciunii unui hormon steroid.
La nivelul tubilor renali 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz sinteza CaBP renale i
deci reabsorbia, prentmpinnd excreia de Ca++. n condiii fiziologice sau n doze
terapeutice 1,25-(OH)2-D3 stimuleaz reabsorbia de fosfat, mai mult dect pe cea de Ca +
+
, diminund excreia, economisind fosfaii.
La nivelul osului aciunea 1,25-(OH)2-D3 este mai complicat i mai puin
clar. Vitamina asigur fixarea Ca++ i PO43- n spaiile libere dintre capetele nespiralate
ale moleculelor de colagen i stimuleaz sinteza unei proteine specifice care leag Ca ++,
osteocalcina. Calciul se fixeaz n faza mineral a osului, sub form de hidroxiapatit,
Ca10(PO4)6(OH)2, alturi de cantiti mici de citrat, Na+, Mg++ i CO32-.
Tulburri de aport vitaminic
Hipovitaminoza D
Formarea defectoas n piele a vitaminei D3, aportul alimentar sczut i/sau
defecte intestinale de absorbie a vitaminei pot duce la stri de hipovitaminoz D.
Hipovitaminozele D conduc la stri de boal care se manifest prin:
perturbri n metabolismul mineral (Ca++ i PO43-) i a secreiei de
parathormon (PTH);
defecte n mineralizarea osului.
n deficiena de vitamin D absorbia de Ca 2+ fiind perturbat apare
hipocalcemia, nsoit secundar i compensatoriu de creterea secreiei de PTH, iar PTH
determin mobilizarea Ca2+ din oase pentru normalizarea calcemiei. Se instaleaz o
hipofosfatemie accentuat mai ales n stadiile timpurii din cauza scderii absorbiei
intestinale i n principal eliminrilor renale (PTH scade pragul renal de eliminare pentru
fosfai).
Din punct de vedre biochimic hipovitaminoza D este caracterizat prin
hipocalcemie moderat sau normocalcemie, hipofosfatemie, activitate crescut a
fosfatazei alcaline, nivele crescute de parathormon i sczute de 25-(OH) 2-D3.
Glucocorticoizii inhib absorbia intestinal de calciu i mineralizarea osului.
Hipovitaminoza D la copii se numete rahitism iar la adult osteomalacie. Clinic,
rahitismul este caracterizat prin scderea rezistenei mecanice a oaselor (nmuierea
oaselor). La adult, rezerva de calciu fiind mai mare, hipovitaminoza se instaleaz mai
greu. Hipocalcemia dezvolt la adult osteoporoza (reducerea masei osoase pe unitate de
volum la un nivel situat sub cel necesar funciei normale). Osteoporoza apare la femei
postpartum ceea ce dovedete dependena hormonal a acesteia. Tratamentul cu estrogeni
previne instalarea osteoporozei (se pare c estrogenii protejeaz osul mpotriva agenilor
care determin resorbia osului, n special PTH). Sunt descrise boli genetice datorate unui
defect n sinteza renal de 1,25-(OH)2-D3 care produc rahitismul dependent de vitamina D
(tip I) i mai rar lipsei sau deficienei de receptor citoplasmatic pentru 1,25-(OH) 2-D3
rahitism vitamina D rezistent (tip II).
De asemenea, a fost descris rahitismul hipofosfatemic indus de iradierea cu
raze X.

62

Hipervitaminoza D

Dup ingestia cronic, oral, a unor doze mari de vitamin D pot apare intoxicaii
cu vitamin D caracterizate prin anorexie, vrsturi, diaree, astenie, mialgie, pierderi n
greutate, hipercalcemie, hipercalciurie. Patologic are loc calcifierea esuturilor moi i n
special la nivel renal (nefrocalcinoza), cornee, aort, plmni, inim.
Prin suprimarea administrrii de vitamin D, prin aplicarea unui regim srac n
Ca i fosfat n lichide, se produce o mobilizare lent a Ca din esuturile moi i revenirea
la normal a calcemiei. Atunci cnd nu este compromis grav, funcia renal se
normalizeaz.
3.2.3. Vitaminele E (tocoferolii, vitaminele antisterilitii, vitaminele de
reproducere)
Numele de tocoferol provine de la funcia biologic de a favoriza fertilitatea
(tokos natere; phesein a purta).
Vitaminele E sunt un grup de vitamine tocoferoli formai dintr-un nucleu de
croman substituit i o caten lateral ramificat fitil.
CH3

HO
H3C

6
7

5
8

3
1 2

CH3
CH3
CH3
CH3
(CH2)3 CH (CH2)3 CH (CH2)3 CH CH3

CH3
- Tocoferol

Sunt patru tocoferoli importani: , , , - care se difereniaz ntre ei prin

numrul de grupri metil din nucleul cromanic; proprietile vitaminice sunt
proporionale cu numrul grupelor CH3, deci -tocoferolul va fi cel mai activ biologic
avnd trei grupri metil, 5, 7, 8-trimetil tocol.
Absorbia vitaminelor E din alimentaie are loc la nivelul intestinului subire, n
aceleai condiii ca i celelalte vitamine liposolubile.
De la intestin, pe cale limfatic, tocoferolii trec n snge unde sunt vehiculai de
-lipoproteinele plasmatice, apoi sunt repartizai n toate organele, depozitele fcndu-se
n esutul adipos.
Intracelular, vitaminele E se acumuleaz n fosfolipidele membranare
citoplasmatice i mitocondriale i n reticulul endoplasmatic. Concentraia vitaminelor E
n aceste organite este n funcie de aportul vitaminic, de peroxidani, antioxidani, de
seleniu alimentar i de aportul de aminoacizi cu sulf.
n procesele metabolice, tocoferolii sunt transformai n compui chinonici,
hidrochinonici care se elimin prin bil, 80%, iar restul prin urin, sub form conjugatp
cu acidul glicuronic.

63

Rol biochimic. Vitamina E nu are o funcie biologic specific pentru a

explica numeroasele consecine care apar n carena de vitamin E la animalele de
experien (este vitamina n cutarea unei boli).
Aciunea antioxidant. Vitamina E este considerat cel mai eficace
antioxidant liposolubil natural. Substanele cele mai sensibile la peroxidare sunt lipidele
celulare i lipidele din membranele organitelor subcelulare, i dintre acestea n special,
lipidele nesaturate.
Sub aciunea oxigenului molecular, acizii polinesaturai formeaz peroxizi
lipidici prin peroxidare, proces autocatalitic, care se desfoar dup un mecanism
radicalic, prin reacii nlnuite:
Ini]iere:

R-H

(Cu, Fe, U.V.)

R. ^ H .

R. ^ O2

R-OO.

Propagare:

R-H ^ R-OO.

R-OOH ^ R.

~
ntrerupere:

AH ^R-OO.

R-OOH ^ A.

A este un radical stabil (de exemplu, provenit din tocoferol), capabil s inhibe
propagarea reaciilor radicalice n lan din peroxidarea lipidic.
Acizii gra[i polinesatura]iCH
din3fosofolipidele membranare
.O
O
_
Antioxidan]i
Fe,
Cu
- Tocoferol
(vitamina E)
CH
O2 3
HC
HC
O

CH3

Peroxizi lipidici

Radical tocoferil
pu]in reactiv

CH3

CH3
R

CH3
Tocoferil-chinon\
stabil\

Aciunea antioxidant a vitaminei E are o importan mare pentru viaa celulei,

Degradarea
acizilor
fosfolipidelealimentari
membranare
ntruct mpreun
cu vitamina
C gra[i
i alidin
antioxidani
ar fi implicai n protejarea
cilor respiratorii i mai ales a esutului pulmonar de aciunea nociv a aerului poluat (O 3,
N2O). Efectele nocive ale oxidanilor pot fi ilustrate prin schema urmtoare:
Distrugerea membranelor

Eritrocit
(fragilitate crescut\
[i hemoliz\)

Lizozomi
(permeabilitate
crescut\)

Reticul endoplasmatic
(dezintegrarea structurilor
necesare ac]iunii enzimelor
care metabolizeaz\
medicamente [i transport\
electronii)

Eliberarea enzimelor
hidrolitice
Inactivarea enzimelor
Perturb\ri tisulare
(distrofie)

64

Peroxidarea lipidelor se evideniaz chiar n prezena concentraiei fiziologice de

vitamin E. Organismul dispune de alt sistem antioxidant reprezentat de o enzim cu
seleniu, glutation peroxidaz, care catalizeaz reacia:
2 GSH + H2O2
G-S-S-G + 2 H2O
Aceast reacie explic relaia dintre vitamina E, seleniu i aminoacizii cu sulf.
Tocoferolii scad necesarul de seleniu (la animalele de experien) prevenind
pierderea seleniului sau transformndu-l ntr-o form biologic activ (forma selenit din
centrul activ al enzimei).
Tocoferolii reduc i cantitatea de GSH-peroxidaz necesar descompunerii
peroxizilor formai.
Pe de alt parte seleniul scade necesarul de vitamin E prin asigurarea funciei
normale a pancreasului i astfel a digestiei i absorbiei lipidelor, implicit a vitaminei E.
Vitamina E i seleniul au aciune sinergic n meninerea nivelului ridicat de CoQ
(component al lanului respirator).
Vitamina E are rol n hematopoez i stabilitatea eritrocitelor; prematurii i
sugarii alimentai artificial, dezvolt anemie, prin deficit alimentar.
Necesar depinde n principal de aportul de acizi grai polinesaturai din
diet. Se gsete n plante, dar i n ficat, lapte, glbenu de ou.
Tulburti de aport vitaminic
Hipovitaminoza E
Efectele carenei de vitamin E sau hipovitaminozei E se manifest gradat i
progresiv n funcie de perioada de deficit vitaminic.

65

Semnele deficienei de vitamin E la om se manifest paralel cu perturbrile

absorbiei de grsimi i constau n: slbiciune muscular, fragilitate eritrocitar,
fenomene care dispar prin administrarea vitaminei E.
Independent de gradul de alterare a lipidelor, la animale, s-au evideniat tulburri
ale aparatului genital i a capacitii de reproducere la ambele sexe.
Nu sunt dovezi care s ateste c vitamina E, la om, este necesar pentru
fertilitate. Totui, sunt unele date conform crora concentraia sanguin de tocoferoli
crete progresiv n sarcin pn la 50-100% sau chiar mai mult n ultima lun fa de
primul trimestru de sarcin. Aceasta constituie o condiie pentru evoluia i dezvoltarea
ftului.
Revenirea la valori normale se face n primele 2-5 luni de la natere i crete n
lapte. La femeile cu avort habitual, concentraia tocoferolului n snge este de 2-4 ori mai
sczut dect la femeile cu sarcin normal.
Hipervitaminoza E
Administrarea ndelungat i abuziv de vitamin E, la om, duce la involuia
ovarelor, tulburri nervoase i dureri ale membrelor inferioare.
Dozele de pn la 100 mg/zi nu sunt toxice.
3.2.4. Vitaminele K (Filochinona, vitamina coagulrii, vitamina antihemoragic,
factor protrombinic)
Grupul vitaminelor K sunt derivai de naftochinon care la C 3 conin sau nu un
radical variabil de atomi de carbon.
8

7
6

CH3

2
5

Vitamina K1 (filochinona) are la C3

un lan lateral de fitil (20 atomi de carbon):
CH3

CH3

CH2 CH C CH2 (CH2 CH2 CH CH2)3 H

Vitamina K2 (farnochinona) conine un radical difernesil (30 atomi de

carbon):
CH3
( CH2 CH C CH2) H
6

Vitamina K3 (menadiona) n care radicalul R este H. Este sintetic i este

solubil n ap spre deosebire de K1 i K2.
Vitaminele din tractusul gastro-intestinal sunt de natur exogen (diet) i
endogen sintetizate de flora intestinal; din acest motiv, organismul este permanent
aprovizionat cu vitamin K.
Absorbia vitaminelor K1 i K2 (naturale) se face mpreun cu lipidele, apoi
pe cale limfatic trec n snge i de aici n ficat. Vitaminele K sintetice fiind solubile
se absorb n absena srurilor biliare.
Cea mai mare cantitate a vitaminelor K naturale se depoziteaz temporar n
ficat; vitamina K3 nu se acumuleaz, excesul este eliminat pein glucurono- sau sulfoconjugare.
Medadiona (K3) pentru a putea s-i exercite funciile metabolice este
alchilat trecnd n vitamin K2.
Rolul metabolic al vitaminei K
Vitamina K este un component al sistemului microzomial de transport de
electroni cuplat cu -carboxilarea post transcripional a restului glutamil din unele
proteine din plasm, os (osteocalcina), rinichi, splin, inclusiv a proteinelor
precursoare pentru factorii coagulrii: protrombina (factorul II), proconvertina
(factorul VII), factorul Christmas (factorul IX), factorul Stuart (factorul X).
Proteinele coagulrii sunt sintetizate n ficat sub form de precursori inactivi
(zimogeni).
Vitamina K este esenial pentru sinteza protrombinei normale i factorilor
VII, IX, X. Pentru ca aceti factori s fie transformai n formele biologic active este
necesar carboxilarea posttranscripional a resturilor glutamil din precursori la acid
carboxi glutamic.
Vitamina K prin structura 1,4 naftochinonic joac rol de transportor de
hidrogen avnd rol de coenzim n procesul carboxilrii.
O

OH
CH3
R

^2H
- 2H

CH3
R

OH

Carboxilarea restului de acid glutamic la acid -carboxil-glutamic este

catalizat de vitamina K.

67

COO

CH2

CO2

CH2

Vitamina K

OOC

COO
CH

CH2
C CH NH

C CH NH

Gla

Glu

Acid -carboxi-glutamic

Acid glutamic

Resturile carboxil au o mare afinitate de chelatare a ionilor de Ca 2+ care

servesc la legarea fosfolipidelor cu protrombina, interaciune specific pentru
activarea protrombinei la trombin (factorul activ al coagulrii).
O

_
O

_
Ca2^ O

O
C

CH
CH2
C CH NH
O

Reaciile de carboxilare au loc n microzomii multor esuturi n prezena O 2,

CO2 i formei de hicrochinon a vitaminei K.
Antivitaminele K, dicumarolul i warfarina (derivai cumarinici) inhib
reacia de carboxilare a acidului glutamic i sunt folosii ca ageni anticoagulani
atunci cnd exist primejdia coagulrii sngelui la nivelul vaselor sanguine
(tromboze).
Tulburri de aport vitaminic
Carena de vitamin K se instaleaz cnd exist tulburri n absorbia de
lipide (deficit de bil), afeciuni intestinale, alterarea florei intestinale, afeciuni
hepatice, boli infecioase.
Carena de vitamin K duce la scderea protrombinei, prelungirea timpului
de coagulare i apariia de fenomene hemoragice spontane.
n perioada imediat postnatal, nou nscuii sunt predispui la hemoragii
deoarece se nasc fr rezerve de vitamin K, avnd intestinul steril.
Menadiona administrat n concentraie mare poate determina hemoliz i
deci poate agrava hiperbilirubinemia.

68

3.2.5. Acidul lipoic (acid tioctic) este un factor necesar unor sisteme
enzimatice (piruvat dehidrogenaza, -cetoglutarat dehidrogenaza). Este derivat din
acidul octanoic care prezint o punte disulfidic ntre C6 i C8.
H2C
S

CH2

C H (CH2)4

COOH

+H

CH2

-H

( L

S
S

CH2

SH
SH

(CH2)4

COOH

SH

SH

CH

Se gsete n dou forme, oxidat i redus, constituind un sistem redox,

participnd la reacii de oxidoreducere i transfer de grupri acil.

69

4. ENERGETICA BIOCHIMIC
Celula vie este considerat o main care transform continuu energia coninut n
structura moleculelor substanelor nutritive din mediu nconjurtor n energie chimic pe
care apoi o folosete n diverse scopuri cum ar fi procesele de biosintez, contracia
muscular, transportul prin membran, excitaie nervoas.
Utilizarea substanelor nutritive de ctre celul se face prin transformri metabolice,
transformri care au loc cu participarea unui numr mare de enzime.
Degradarea enzimatic a substanelor nutritive, cum sunt polizaharidele, lipidele i
proteinele, se petrece printr-un ir de reacii chimice care pot fi schematizate, n trei stadii
principale:
I. - n primul stadiu, macromoleculele substanelor nutritive sunt degradate pn la substana
simpl de baz din care sunt constituite. Astfel, polizaharidele sunt degradate la hexoze i
pentoze, lipidele n acizi grai i glicerol, iar proteinele la aminoacizii din care provin;
II n al doilea stadiu, produii formai n primul stadiu sunt transformai ntr-un numr mic
de produi intermediari, n principal ntr-un compus cu doi atomi de carbon, acetil-CoA;
III n al treilea stadiu aceti compui sunt metabolizai pe o cale comun la CO2 i H2O.
Proteine

Pentoze

Lipide

Polizaharide

Aminoacizi

Macromolecule

Hexoze

Glicerol
Acizi grasi

Glucoza

monomeri

Piruvat
II
Compus de
degradare
comun

Acetil-CoA

Ciclul
Krebs

III

NH3

H2O

CO2

Produs final
de metabolism

70

Biosinteza macromoleculelor de polizaharide, lipide i proteine specifice

celulei se realizeaz de asemenea n trei stadii, plecnd de la moleculele de precursor
din cel de al treilea stadiu care sunt convertii la moleculele de baz: aminoacizi,
hexoze, acizi grai i glicerol. n final, compuii simpli rezultai sunt asamblai n
macromolecule specifice organismului.
Aceste dou ci metabolice sunt strns legate ntre ele din punct de vedere
energetic, deoarece calea de degradare (catabolism) furnizeaz energia necesar cii
de biosintez (anabolism).
n calea catabolic, energia eliberat prin degradarea diverilor compui
organici nutritivi este recuperat n bun parte sub form de ATP (n special n stadiul
III, prin procesul de fosforilare oxidativ).
Calea anabolic sau de biosintez necesit energie pe care o obine prin
hidroliza legturii macroergice din ATP.
NH2
N

N
N

OH
H

OH

CH2 O P O~P
H

OH

OH
O ~P

OH

OH HO

Molecula de ATP cedeaz energia sa prin transferarea restului fosfat unei

molecule de acceptor specific care sub aceast form este capabil s ndeplineasc
unele funcii specifice celulei: de exemplu biosinteza macromoleculelor (lucru
chimic), transportul activ prin membran a unor ioni anorganici i substane nutritive
(lucru osmotic) i contracia muscular (lucru mecanic). n timpul acestor procese
ATP se desface n ADP i Pa. ADP este apoi refosforilat pe seama energiei produs n
transferul de electroni nchiznd astfel ciclul energetic al celulei.
Procesul de fosforilare oxidativ const n transportul electronilor de la
diferii intermediari metabolici (aa numitele substrate respiratorii) pn la O 2 i
captarea energiei eliberat n acest proces sub forma unor legturi bogate n energie, n
molecula de ATP.
Reacia de fosforilare oxidativ poate fi reprezentat prin ecuaia:
AH2 + B + ADP + Pa

A + BH2 + ATP + H2O

care reprezint suma a dou reacii ireversibile :

(1) AH2 + B

A + BH2 - reactii de oxido-reducere

71

(2) ADP + Pa ATP + H2O - reactie de fosforilare

Att transportul de electroni ct i reacia de fosforilare sunt prezente i
caracteristice celulelor aerobe, adic acele celule care utilizeaz drept ultim acceptor
de electroni oxigenul molecular.
Enzimele participante la acest proces sunt localizate n membrana intern a
mitocondriei, au structur complex i sunt greu de izolat i studiat.
Transportul de electroni este efectuat de trei clase principale de oxidoreductaze: dehidrogenaze piridinice, dehidrogenaze flavinice i citocromi.
Dehidrogenazele piridinice au drept coenzim NAD+ i NADP+ (formele
active ale vitaminei PP). Ele catalizeaz reacii de tipul:
Substrat redus + NAD+(NADP+)

Substrat oxidat + NADH+H+(NADPH+H+)

(vezi rolul metabolic al vitaminei PP, p. 61)

Participarea celor dou coenzime piridinice la transferul de electroni este
diferit. NAD+ particip n special la procesele de transport de electroni de la un
substrat la oxigen (n cile de degradare, de eliberare de energie), n timp ce NADP +
particip la transportul de electroni n reacii reductive din procesele de sintez.
Concentraia celular de NAD+ este mult mai mare dect a NADP +. Peste 60% din
NAD+ se gsete n mitocondrie i restul n citoplasm, n timp ce aproape tot NADP +
se gsete n citoplasm, acolo unde au loc procesele de sintez.
Dehidrogenazele flavinice conin drept grupare prostetic unul din cele
dou flavin-nucleotide FMN i FAD, formele active ale vitaminei B2.
Reaciile generale catalizate de flavin-enzime sunt:
Substrat redus + Enz.-FMN(Enz.-FAD)

Substrat oxidat + Enz.-FMNH2(Enz.-FADH2)

(vezi rolul metabolic al vitaminei B2, p. 57)

Citocromii sunt proteine transportoare de electroni care conin fier

porfirinic. Se gsesc numai n celulele animale. Gruparea prostetic a citocromilor

este hemul (asemntor hemului din hemoglobin).
Unii citocromi sunt localizai n membrana intern a mitocondriei i particip
la transferul electronilor de la diverse sisteme dehidrogenazice la oxigen. Ali
citocromi (ex. cit.P450) se gsesc n microzomi i sunt specializai n reaciile de
hidroxilare, implicate i n metabolismul medicamentelor (vezi structura
cromoproteinelor porfirinice, p.26-28).
Participarea citocromilor la transferul de electroni se realizeaz prin
modificarea reversibil a valenei fierului:
cit.Fe2+

_
-e
_
+e

cit.Fe3+

72

n mitocondriile animalelor superioare au fost identificai cinci citocromi (b,

c1, c, a i a3) care particip la transferul de electroni. Complexul cit.a+a3 se mai
numete i citocrom-oxidaza.
Ulterior au mai fost identificai i ali transportori de electroni, printre care
ubichinona sau CoQ, compus asemntor structural cu vitamina K.
Lanul transportatorilor de electroni poate fi prezentat ntr-o form simplificat
astfel:
SH2

NAD+
Piridine

FMNH2
Flavine

2 Fe3+
Citocromi

H2O

NADH

FMN

2 Fe2+

1/2O2

H+

2H+

H+

2H+

Substratele respiratorii provin n principal din ciclul Krebs, dar i din alte
reacii metabolice. O serie de substrate, cum ar fi izocitratul, -cetoglutaratul,
malatul, piruvatul, -hidroxi- butiratul, -hidroxi-acil CoA, prolina etc. cedeaz
electronii NAD+-ului.
Electronii provenii de la succinat, acil-CoA, -glicerol-fosfat sunt cedai CoQ
prin intermediul unor flavoproteine (enzime flavinice).

Izocitrat
a-cetoglutarat
Malat
-hidroxibutirat
-hidroxiacil-CoA

Piruvat

Succinat

FAD

FAD

NADH

FMN

CoQ
FAD

-glicerol-P

cit.b

cit.c

cit.a+a3

O2

FAD
Acil-CoA

Concomitent cu trecerea electronilor prin lanul respirator are loc scderea

energiei libere a sistemului. S-a stabilit c prin trecerea unei perechi de electroni de la
NADH la oxigen se elibereaz 52,5 Kcal, iar pentru sinteza unei molecule de ATP se
consum 7,3 Kcal, ceea ce nseamn c din energia eliberat pot fi sintetizate mai
multe molecule de ATP.
Experimental s-a dovedit c prin parcurgerea ntregului lan (NADH O2) se
sintetizeaz 3 molecule de ATP. Au fost identificate cele trei locuri n care diferena

73

de potenial ntre componenii lanului este mai mare de 0,2 V i scderea energiei
libere de 9 Kcal suficient pentru sinteza a trei molecule de ATP (3 x 7,3 = 21,9 Kcal)
ceea ce nseamn c 42% din energia eliberat a fost nmagazinat sub form de ATP.
Diferena de energie servete la termoreglare.

-0,4
NADH
-0,2

2e

Enz.-FMN
2e

0
+0,2
+0,4
+0,6
+0,8

ADP+Pa
_

ATP
CoQ

cit.b

ADP+Pa
2e

ATP
cit.c
cit.a

ADP+Pa
2e

ATP

CO
_
CN

O2
Direc]ia fluxului de electroni

Se nelege acum de ce prin oxidarea mitocondrial a substratelor care cedeaz

electronii NAD-ului se sintetizeaz trei molecule de ATP, iar prin oxidarea
substratelor care cedeaz electronii prin intermediul FAD-ului la CoQ (deci ocolete
primul loc de fosforilare) se sintetizeaz numai dou molecule de ATP.
Transportul de electroni i fosforilarea oxidativ poate fi inhibat de o serie de
compui cum ar fi monoxidul de carbon, cianura, hidrogenul sulfurat, unele
antibiotice (oligomicina), malatul etc. Inhalarea acidului cianhidric (HCN) sau
ingerarea cianurii de K (KCN) cauzeaz o rapid i puternic inhibare a lanului
respirator la etapa citocrom-oxidazei (cit.a+a3). Ionul CN- se fixeaz la Fe3+ din cit.a3
oprind respiraia mitocondrial i ca urmare celula moare rapid. Moartea prin cianur
survine rapid prin asfixie la SNC.
Dac intoxicaia cu CN- este diagnosticat rapid, se administreaz nitrii care
oxideaz oxihemoglobina la Met-hemoglobin, reacie ce implic trecerea Fe 2+ din
hemoglobin n Fe3+ din methemoglobin.
Methemoglobina concureaz cu cit.a+a3 (Fe3+) pentru ionul CN- formnd un
complex MetHb-CN. De asemenea, administrarea de tiosulfat (Na 2S2O3) produce
inactivarea ionului cian la ion sulfocian, netoxic.

74

5. METABOLISMUL GLUCIDIC
5.1. Digestia i absorbia glucidelor
Aproximativ 50% din caloriile preluate zilnic de organism sunt furnizate de
glucide: amidon (160 g), zaharoz (120 g), lactoz (30 g) glucoz i fructoz libere
(10 g) i urme de maltoz i trehaloz (dou molecule -glucoz unite prin legturi
(11).
Prin digestia glucidelor rezult trei monozaharide: glucoza, fructoza i
galactoza.
6

CH2OH

H H

CH2OH

HO H

HO OH
3

-Galactoza

CH2OH

CH2OH

H H
HO OH

HO H

OH

H OH

H H

-Glucoza

H H HO OH
4

OH

-Fructoza

HOH2C

OH

OH

H H HO CH2OH

H H

OH

CH2OH

OH

-Glucoza

OH

H OH

HOH2C

H OH

H OH

OH

OH
-Fructoza

-Galactoza

Amidonul este format din amiloz (20%) i amilopectin (80%).

CH2OH
O
OH

H 1

OH

CH2OH
O
O

OH

OH

CH2OH
O

CH2OH
O
O

OH

OH

OH

OH

75

Structura amilozei
O
H

CH2OH

OH
H O

HO

O
CH2OH
O

CH2OH
O
1

OH

OH

OH

OH

CH2
O

OH

OH

Structura amilopectinei
n amiloz, moleculele de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4)
glicozidice, formnd lanuri lungi, spiralate. Amilopectina are o structur ramificat,
n care unitile de -glucoz sunt unite prin legturi (1 4) i (1 6)
glicozidice.
Digestia glucidelor ncepe n cavitatea bucal i este completat n duoden.
Asupra amidonului pot aciona dou tipuri de enzime hidrolitice: -amilaza
i oligozaharidazele (dextrinaze) n care sunt incluse i dizaharidazele.
Amilaza salivar (n cavitatea bucal) i amilaza pancreatic (n intestinul
subire) hidrolizeaz amidonul ncepnd de la periferia moleculei spre centru,
scindnd numai legturile (1 4), cu excepia legturilor (1 6) i (1 4) din
vecintatea ramificaiilor.
Prin aciunea acestor amilaze, amiloza este transformat n maltoz i
cantiti mici de maltotrioz, iar amilopectina n maltoz i oligozaharide mici, de
aproximativ opt resturi de glucoz, cu una sau mai multe ramificaii (dextrine limit).
Oligozaharidazele completeaz hidroliza oligozaharidelor i dizaharidelor.
Aceste enzime, situate pe suprafaa celulelor epiteliale, ndeprteaz succesiv
unitile glicozidice din captul nereductor (captul C4 liber).
Legturile (1 6) din dextrine sunt scindate de amilo-1,6-glucozidaza.
Dizaharidele provenite direct din alimente, precum i cele rezultate prin
digestia amidonului sunt hidrolizate n intestinul subire sub aciunea dizaharidazelor.
Aceste enzime au specificitate diferit n funcie de structura dizaharidului i de
legtura glicozidic; -glucozidaza din intestinul subire este n exces i n consecin

76

zaharoza este rapid hidrolizat, n timp ce -galactozidaza, care acioneaz asupra

lactozei, este mai redus cantitativ.
Deficitul de oligozaharidaze sau dizaharidaze, n mucoasa intestinal,
determin trecerea glucidelor nedigerate n fecale.

Lactoz\

Intestin
sub]ire

Galactoz\
^
Glucoz\

L actaz\

Vena
port\

Galactoz\
^
Glucoz\

Intestin
sub]ire

Lactoz\

Lactoz\
Bacterii
CO2

}esut
H2O

H2
Compu[i
Co2, C2

Balonare, diaree,
deshidratare
a. Normal

b. Deficit de lactaz\

Prezena acestor compui osmotic activi determin scoaterea apei din

esuturi i trecerea ei n intestinul gros, cauznd diaree. La acestea se adaug
aciunea bacteriilor intestinale asupra glucidelor nedigerate rezultnd CO 2 +
H 2 (gaze) i compui cu doi sau trei atomi de C ce irit mucoasa intestinal
(acid lactic). Mucoasa intestinal poate deveni permeabil pentru dizaharide,
care se vor elimina prin urin. Defecte ereditare de lactaz, zaharaz i
dextrinaz au fost descrise la copiii cu intoleran la dizaharide. Un defect
generalizat n degradarea dizaharidelor poate fi cauzat i de o varietate de boli
intestinale, malnutriie sau de medicamente ce lezeaz mucoasa intestinului
subire.
O serie de polizaharide i ali polimeri coninui n diet sunt foarte
puin sau deloc hidrolizai n intestin. Aceti compui sunt desemnai drept
fibre, reprezentate de celuloz, hemiceluloz, lignin, pectine, gume i

77

mucilagii. Sunt abundente n cereale, fin integral de gru, amidon de

cartofi, vegetale (varz), unele fructe. Fibrele mresc peristaltismul intestinal
reducnd timpul de stagnare a coninutului intestinal.
Absorbia monozaharidelor se realizeaz prin sistemul port hepatic i
implic dou mecanisme: transportul activ (contra gradientului de
concentraie) i difuzia facilitat.
Sistemul de transport activ, dependent de Na + , este specific pentru
absorbia D-glucozei i D-galactozei (piranoze cu aceiai configuraie la C 2 ).
5.2. Metabolismul intermediar al glucidelor
n organismele vii, metabolismul glucidelor se realizeaz prin mai
multe ci:

Cile metabolice ale glucidelor

78

Glicoliza oxidarea glucozei sau glicogenului pn la piruvat

(prin calea Embden-Meyerhof) i lactat;
Glicogenogeneza sinteza glicogenului din glucoz;
Glicogenoliza degradarea glicogenului, rezultnd glucoz;
Ciclul acidului citric (ciclul Krebs sau ciclul acizilor
tricarboxilici) n care acetil-CoA (provenit din piruvat, acizi grai i
aminoacizi) este oxidat la CO 2 i H 2 O;
untul hexozomonofosfat (calea oxidativ direct, calea
oxidativ a fosfogluconatului sau ciclul pentozo-fosforic) este o cale
alternativ pentru calea Embden-Meyerhof, avnd ca funcie principal
sinteza unor intermediari cum ar fi NADPH i riboze;
Gluconeogeneza sinteza glucozei sau a glicogenului din
compui neglucidici aminoacizii glucogenici, lactatul, glicerolul i
propionatul. Cile implicate n gluconeogenez sunt n principal ciclul Krebs
i glicoliza.
Pe lng aceste ci principale n organism se desfoar i urmtoarele
ci
- Calea acizilor uronic prin care se sintetizeaz acidul glucuronic
utilizat pentru sinteza polizaharidelor complexe (mucopolizaharide) i pentru
reaciile de conjugare (detoxifiere);
- Sinteza mucopolizaharidelor (metabolismul aminozaharurilor);
- Metabolismul fructozei;
- Metabolismul galactozei.
Dup examinarea schemei generale de metabolizare a glucidelor se
evideniaz faptul c G6P joac un rol central, fiind punct de intersecie pentru toate
cile metabolice.
5.2.1. Glicoliza
Glicoliza este degradarea anaerob a glucozei la acid lactic. Acest proces se
poate petrece i n aerobioz, ns cantitatea de glucoz degradat n anaerobioz este
mult mai mare.
Caracteristic pentru calea glicolitic este generarea unei cantiti mici de
energie (2 ATP) i faptul c NADH este reoxidat prin cuplarea reaciilor de oxidoreducere, spre deosebire de degradarea glucozei la CO 2 i H2O cnd NADH este
reoxidat n lanul respirator cu formarea de energie.
Toate enzimele care catalizeaz reaciile acestui proces se gsesc n faza
solubil a celulei, n citoplasm.
Prin glicoliz este degradat glucoza alimentar, glucoza provenit din
glicogen, precum i din celelalte hexoze, galactoza, fructoza i manoza.

79

Procesul glicolitic se desfoar n dou faze. Prima faz este consumatoare

de energie, iar faza a doua, n care au loc reacii de oxido-reducere, este faza
generatoare de energie.
Procesul cuprinde un ansamblu de 11 etape principale.

1. - Glucoza Hexokinaza(HK)
Mg2+
ATP

CH2 O P
OH
H
HO

OH
H

ADP

1 ATP

OH
OH

Glucozo-6-fosfat
(G6P)

Prima etap a glicolizei este catalizat de hexokinaz (HK) cu formarea G 6P,

pe seama energiei furnizat de ATP n prezena Mg ++. HK este o enzim puin
specific, ea fiind capabil s fosforileze toate hexozele ( i glucoze, fructoza,
manoza, galactoza).
Glucoza poate fi fosforilat i de glucokinaz (GK), enzim specific pentru
glucoz, activ n celulele parenchimului hepatic.
HK este o enzim a crei aciune poate fi inhibat alosteric de ctre produsul
de reacie G6P.

2.

G6P

Fosfohexoizomeraza (PHI)

O H2C

O CH2OH
H HO
OH
H
OH H

Fructozo-6-fosfat
(F6P)

Numai anomerul - al G6P este activ pentru aceast reacie.

3.

F6P

Fosfo-fructokinaza (FFK)
Mg2+
ATP

ADP

O H2C

O CH2 O
H HO
OH
H
OH H

Fructozo-1,6-difosfat
(F1,6DP)

P
- 1 ATP

80

Fosfofructokinaza (FFK) - este exemplu de enzim inductibil a crei

activitate joac un rol major n reglarea glicolizei. Reacia este ireversibil n condiii
fiziologice.
FFK- este inhibat de citrat i de ATP i este activat de AMP i F2,6-DP.
CH2 O

C O
HO C H
4.

CH2 OH

CHO

Aldolaza

CH2 O

H C OH
CH2 O

C O

H C OH

H C OH

CH2 O

Glicerinaldehid-3-fosfat
(GA 3P)
(3%)

F1,6DP

Dihidroxiaceton-fosfat
(DHAP)
(97%)

Au fost descrise cteva aldolaze, toate coninnd cte patru subuniti.

Aldolaza A se gsete n cea mai mare parte dintre esuturi.
5.

GA 3 P

Trioz-P-izomeraza

DHAP

GA3P este produsul activ care se transform mai departe. Cu aceast reacie
de izomerizare se ncheie prima faz a glicolizei, faz consumatoare de energie
(-2 ATP).
6. Prima reacie a celei de a doua faze este reacia de oxidare a GA 3P la
acidul 1,3-difosfogliceric (1,3-DPG), reacie catalizat de GA 3PDH. n aceast
reacie are loc un proces de fosforilare cu Pa care urmeaz unui proces de oxidare.

H C OH
CH2 O

Gliceraldehid-3-Pdehidrogenaza (GA-3-PDH)

CHO

Pa

NAD^

GA 3P

O~ P
H C OH
CH2 O

NADH^H^

1,3-Difosfoglicerat
(1,3-DPG)

Enzima poate lega i arsenitul care, n felul acesta, poate decupla oxidarea de
fosforilare deoarece compusul rezultat cu arsen n loc de P nu este macroergic; nu se
sintetizeaz ATP.
7. Energia nmagazinat la C1 a acidului 1,3-DPG este transferat pe ADP cu
formarea ATP n reacia catalizat de fosfogliceratkinaz (PGK).
O

Fosfogliceratkinaz\ (PGK)

O~ P
H C OH
CH2 O
1,3-DPG

Mg2^
ADP

OH
H C OH
CH2 O

ATP

3-Fosfoglicerat
(3-PG)

81

8. Reacia fosfogliceratmutazei.
O

Fosfogliceratmutaz\ (PGM)

OH
H C OH
CH2 O
3-PG

OH
H C O P
CH2 OH
2-fosfoglicerat
(2-PG)

O
C

OH
; H C O~ P
CH2 O

2,3-fosfoglicerat
(2,3-DPG)

Se pare c n aceast reacie intermediar este 2,3-DPG, sintetizat printr-o

deviaie a cii principale. Acest produs se acumuleaz n eritrocite i intervine n
reglarea afinitii hemoglobinei pentru oxigen.
9. Reacia enolazei

Fosfoenolpiruvatul are energie deoarece P esterific a grupare enolic.

Enolaza este inhibat de NaF, proprietate utilizat pentru recoltarea sngelui
n vederea dozrii glicemiei (se oprete degradarea glucozei).
10. Energia din PEP este nmagazinat n ATP prin reacia cu ADP catalizat
de piruvatkinaz (PK).
Reacia este ireversibil deoarece se petrece cu pierdere nsemnat de
energie.

82

11. n condiii anaerobe, piruvatul este redus la lactat de ctre lactat-DH cu

hidrogenii de la NADH.
COOH
C

CH3
Piruvat

Lactat dehidrogenaza
(LDH)
NADH+H+

NAD+

COOH
H

OH

CH3
Lactat

Aceast ultim reacie asigur reoxidarea NADH i regenerarea NAD +

necesar reaciei GA3PDH. Deci n condiii fiziologice n celulele cu metabolism
anaerob, aceste dou reacii sunt cuplate prin sistemul NAD+/NADH.
n muchi, procesul glicolitic duce la lactat (n general n condiii de hipoxie)
dar i n eritrocit unde, dei exist aport de O 2, produsul final al procesului este tot
acid lactic deoarece eritrocitul nu conine enzimele necesare oxidrii piruvatului.
Eritrocitul este celula care i asigur energia necesar numai prin glicoliz.
Acidul lactic din muchi servete pentru resinteza glucozei prin
gluconeogenez dup ce el este transportat pe cale sanguin n ficat, esut capabil s
resintetizeze glucoza.
Dintre cele 11 reacii ale glicolizei, trei sunt ireversibile: reacia catalizat de
(1) HK, (3) FFK i (10) PK.
n celulele capabile de gluconeogenez, aceste reacii sunt catalizate de alte
enzime (piruvatcarboxilaza, PEP-carboxikinaza, F-1,6-DP-aza i G-6-P-aza).
Bilan energetic:
n reaciile (1) i (3) se consum 2 molecule de ATP, iar n reaciile (7) i (10)
din faza a doua a glicolizei se genereaz 4 molecule de ATP. Bilanul energetic al
procesului va fi: 4-2=2 moli ATP, dac se degradeaz glucoza i 41=3 moli ATP
dac se degradeaz glicogenul.
5.2.2. Degradarea aerob a glucozei la CO2 i H2O

83

n celulele cu metabolism aerob piruvatul format din glucoz, pe calea

Embden-Meyerhof, este oxidat la CO2 i H2O, cu eliberarea integral a energiei
coninut n molecula de glucoz.
Piruvatul este transferat n mitocondrie de un transportor special, implicnd
un mecanism simport, prin care este cotransportat un proton.
Pentru a intra n ciclul Krebs, piruvatul este decarboxilat oxidativ la acetilCoA, prin aciunea piruvat-DH (PDH), care asigur astfel legtura ntre calea
Embden-Meyerhof i ciclul Krebs.
_
COO
C

O
+ NAD+

PDH

+ CoASH

C ~S

CoA

+ NADH+H+ + CO2

CH3

CH3

Complexul PDH este localizat n matricea mitocondrial i este format din

trei enzime i cinci coenzime: TPP (vit.B 1), acid lipoic; CoA(acid pantotenic), FAD
(vit.B2) i NAD+ (vit.PP). Enzimele sunt: piruvat dehidrogenaza (E1),
transacetilaza (E2) i dihidrolipoil dehidrogenaza (E3).
O
CH3

_
COO

CO2
1
OH

E1-TPP

E1-TPP

CH CH3

E2-L

SH O
S C

CoASH

E2-L

CH3
3
E2-L

SH
SH

S
S
NAD+

E3-FADH2
5
E3-FAD

NADH+H+

CoA-S-C-CH3

Acetil-CoA se formeaz prin decarboxilarea acidului piruvic provenit din

glucoz, dar i prin degradarea acizilor grai sau unor aminoacizi.

84

ntr-o cale alternativ, piruvatul este carboxilat la acid oxalacetic, necesar

pentru iniierea ciclului Krebs, sub aciunea piruvat carboxilazei.
COOH
C

CH3
Piruvat

COOH
Piruvat carboxilaza
HCO3 ,
Biotina, Mg2+
ATP
ADP+Pa
_

CH2
COOH
Oxalacetat

Ciclul acizilor tricarboxilici

Cea mai mare parte a substratelor supuse oxidrii n procesul respiraiei
celulare provine din ciclul acizilor tricarboxilici (ciclul Krebs), etap metabolic
final, comun, n care moleculele simple provenite de la toate compartimentele
metabolice (glucidic, lipidic i protidic) sunt degradate la CO2 i ap.
Din punct de vedere energetic, respiraia celular este un proces nou care a
aprut n organismele superioare, odat cu dezvoltarea aerobiozei pe planet.
Respiraia celular a nlocuit glicoliza ntlnit la organismele inferioare, dar care
persist ca proces metabolic i la organismele superioare, alturi de respiraia
celular.
n esen, ciclul Krebs reprezint combinarea unei molecule de acetil-CoA cu
acidul oxalacetic formnd un compus cu 6 atomi de C, acidul citric. Urmeaz o serie
de reacii prin care cei doi atomi de C din restul acetil sunt eliminai ca CO 2, iar din
cele patru reacii de oxidoreducere, opt atomi de H vor parcurge lanul transportorilor
de H i vor genera o mare cantitate de energie (ATP).
Acidul oxalacetic este regenerat, de aceea este necesar o mic cantitate din
acest acid pentru a transforma o mare cantitate de acetil-CoA. Oxalacetatul poate fi
considerat a fi catalizator.
n acest ciclu sunt patru reacii de oxidoreducere n care se elibereaz cei opt
atomi de H care sunt preluai de lanul transportor de electroni i transportai la O 2,
generndu-se o cantitate de energie de 18-19 ori mai mare dect n glicoliz.
Reaciile ciclului Krebs
1.
Condensarea acetil-CoA cu acidul oxalacetic

85

Citrat-sintaza este capabil s catalizeze i reacia de condensare a

monofluoracetil-CoA cu acidul oxalacetic, cu formarea monofluorcitratului, compus
care este un inhibitor puternic al ciclului Krebs deoarece este inhibitor pentru enzima
care catalizeaz urmtoarea reacie aconitaza.
Citrat-sintaza este o enzim limitant; este inhibat de ATP i NADH.
Reacia aconitazei sau aconitat hidraza catalizeaz trecerea reversibil a citratului
n izocitrat prin intermediul acidului cisaconitic.

Dei izocitratul este ntr-o proporie mic, el este rapid oxidat mai departe n
ciclul Krebs.
2.
Reacia izocitrat dehidrogenazei (ICDH) catalizeaz dou procese
procesul de dehidrogenare a izocitratului i de decarboxilare a acestuia cu formarea
unui compus cu 5 atomi de carbon, acidul -cetoglutaric (-KG).
CH2 COOH
CH COOH
HO

CH COOH
Acid
izocitric

Izocitrat
dehidrogenaza (ICDH)
NAD+

CH2 COOH

CH2 COOH

CH COOH
O
C
COOH
NADH+H+
Acidul
oxal-succinic

CH2
C O
CO2

COOH
-cetoglutaric

3.
Reacia -cetoglutarat DH catalizeaz decarboxilarea oxidativ a
acidului -cetoglutaric cu transformarea lui ntr-un compus cu 4 atomi de carbon
succinil-CoA.

86

Reacia necesit acelai echipament enzimatic ca i decarboxilarea acidului

piruvic: CoASH, NAD, FAD, acidul lipoic, TPP.
4.
Reacia succinil-tiokinazei catalizeaz transferul energiei din legtura
tioesteric a succinil CoA pe un acceptor specific guanozin-difosfat (GDP).
Succinil CoA + Pa + GDP

acid succinic + GTP + CoASH

GPT este un compus cu energie mare ca i ATP. Deoarece ATP este compusul
care nmagazineaz energia, are loc n continuare o reacie catalizat de o
nucleoziddifosfat-kinaz care transfer energia din GTP pe ATP.
GTP + ADP
GDP + ATP
Acest tip de fosforilare n afara lanului respirator se numete fosforilare la
nivelul substratului.
5.
Reacia succin-dehidrogenazei catalizeaz dehidrogenarea
succinatului la fumarat. Enzima este dependent de FAD.
COOH
CH2
CH2
COOH

Succindehidrogenaza (Succ.DH)

COOH
CH
CH

FAD

FADH2

COOH
Acid fumaric

Acid succinic

6.
Reacia fumarazei catalizeaz adiionarea unei molecule de ap la
acidul fumaric cu formarea acidului malic.
COOH
CH

Fumaraza

Acid fumaric

CH2
CH OH

CH
COOH

COOH

H2O

COOH
Acid L-malic

87

7.
Reacia malat dehidrogenazei catalizeaz de dehidrogenare a Lmalatului n oxalacetat nchiznd astfel ciclul.
Malat dehidrogenaza este NAD dependent i se gsete sub dou forme:
MDH citoplasmatic i MDH mitocondrial ceea ce face posibil reoxidarea NADH
extramitocondrial n lanul respirator.
COOH

COOH

Malat dehidrogenaza
MDH

CH2
CH OH

NAD^

COOH

CH2
C

NADH^H^

COOH

Acid oxalacetic
Acid malic
Bilanul energetic al metabolismului oxidativ al glucozei
Piruvat

Glucoz\
(Glicogen)

I.

II. Piruvat

CO2 ^ H2O

I.1. Glucoz\

F1,6DP
F1,6DP

(Glicogen)
2. 2 GA3P

2.Ac.: 1,3-DPG(NAD) 2x3=6 ATP

2NAD+

3.
4.

-2 ATP
(-1 ATP)

2NADH+H+

2.Ac.: 1,3-DPG(NAD)
2PEP

2 Ac. 3PG
2 Piruvat
Total

+2ATP
+2 ATP
+ 8 ATP
(+9 ATP)

88

II. Piruvat

CO2 ^ H2O

1.

2 CH3CO-SCoA

+6 ATP

2 Oxal-succininat

+6 ATP

2 Succinil-CoA

+6 ATP

2 Acid succinic

+2 ATP

Acid fumaric

+4 ATP

2 Piruvat
2NAD+

2.

2NADH+H+

2 Izocitrat
2NAD+

3.

2NADH+H+

2 -KG
2NAD+

4.

2NADH+H+

2 Succinil-CoA
2 GDP
2 ATP

5.

2 ADP

2 Acid succinic
2 FAD

6.

2 GTP

2 FADH2

Acid malic

+6 ATP

2 Acid oxalacetic

2NAD+

2NADH+H+
Total

30 ATP

Total general:
Glucoz\
CO2 + H2O (calea malat)
Glicogen
CO2 + H2O
5.2.3. Metabolismul glicogenului

38 ATP
39 ATP

Glicogenoliza
Principala rezerv de glucide din organism este glicogenul depozitat n ficat
(1/3) i muchi (2/3). Glicogenul este un polimer nalt, asemntor amilopectinei dar
mai ramificat, realizat prin condensarea a numeroase molecule de -glucoz, unite n
principal prin legturi -14 glicozidice i legturi -16 glicozidice, la punctele
de ramificaie.
Glicogenul din ficat va fi degradat pentru reechilibrarea glicemiei, n timp ce
glicogenul din muchi, pentru obinerea de energie.
Degradarea glicogenului este catalizat de enzime specifice:
fosforilaza rupe fosforolitic (cu fosfat anorganic) legturile -(14)
glicozidice din lanurile laterale ale moleculei de glicogen cu eliberarea G1P.
CH2 OH
O

CH2 OH
O
O

CH2 OH
O
O

CH2
Fosfarilaza a
O

+
O

CH2 OH
O
O P

n
G1P

89

Enzima acioneaz pn cnd rmne un lan format numai din patru resturi
de glucoz pn la ramificaie.
n acest punct intervine enzima de deramifiere, care va transfera mai nti
un trizaharid din captul rmas pe un alt lan, iar
restul rmas legat prin legturi -(16) glicozidice este ndeprtat
hidrolitic, sub form de glucoz liber. Procesul este reluat prin aciunea fosforilazei.
Unii autori susin existena unei enzime cu funciie dubl: att de transferaz
ct i de 1,6-glicozidaz. Aceast enzim se mai numete i enzim de deramifiere.

Adrenalin\,
Glucagon

Prin aciunea celor dou enzime (fosforilaza i enzima de deramifiere) are loc
degradarea aproape total a glicogenului. O mic poriune din molecul (minim patru
Adenilat
ciclaz\
ciclazafragment ce va servi drept primer n
resturi de
glucoz) rmne Adenilat
nedegradat,
inactiv\
activ\
resinteza glicogenului.
G1P sub aciunea fosfoglucomutazei (PGM) trece reversibil n G6P.
n ficat i rinichi (nu i n muchi) exist o fosfataz specific G6P-aza, care
ATP
AMPcglucozei libere. Acesta va strbate
va ndeprta acidul fosforic
din G 6P cu formarea
peretele celular trecnd n snge pentru reechilibrarea glucozei sanguine. n muchi,
G6P intr direct n glicoliz pentru eliberarea de energie.
Protein-kinaza
Etapa limitant, reglatoare,
a glicogenolizei esteProtein-kinaza
reacia fosforilazei, enzim
inactiv\
activ\
controlat hormonal (adrenalin i glucagon), la nivelul ficatului. Fosforilaza se
4 ADP
gsete sub dou forme: fosforilaza a - activ i fosforilaza
b inactiv.
4 ATP
Activarea enzimei se realizeaz prin intermediul AMPc, al doilea mesager
care preia mesajul adus de hormon (primul mesager), c n snge a sczut glicemia.
Fosforilaza b
inactiv\

4 Pa
Glicogen + Pa

Fosforilaza a
activ\
4 H2O
n G1P

90

n acest proces nu se consum energie, deoarece fosforilarea glucozei se face

cu fosfat anorganic.

Glicogenogeneza
Glicogenul se sintetizeaz din glucoz, dar i din fructoz, galactoz i
manoz dup convertirea lor la glucoz. n sinteza glicogenului, glucoza este mai
nti fosforilat la G6P i apoi izomerizat la G1P. G1P reacioneaz cu UTP i sub
aciunea UDP-pirofosforilazei se formeaz UDP-glucoz.

91

UDP-G va transfera restul glicozil, sub aciunea glicogen sintazei, pe un rest

preformat de glicogen (minim patru resturi). Sub aciunea acestei enzime se
realizeaz o legtur -(14) glicozidic la captul nereductor al primerului de
glicogen. Pentru realizarea legturilor -(16) glicozidice, la ramificaii, se
detaeaz 6-7 resturi de glucoz dintr-un lan i sunt ataate n alt regiune a lanului
prin legtur 16. Enzima se numete enzim de ramificare. Cele dou lanuri vor fi
alungite prin aciunea glicogen sintazei i aa mai departe nct molecula de glicogen
care rezult are aspectul unei crengi din ce n ce mai ramificat.

Sinteza glicogenului este consumatoare de energie. Pentru ncorporarea unei

molecule de glucoz n glicogen se consum dou legturi macroergice: una la
formarea G6P (ATP) i alta la obinerea UDP-G (UTP)
2 ATP.

92

Sinteza glicogenului este reglat de aceiai hormoni care i regleaz i

degradarea (adrenalina i glucagonul). Prin intermediul protein kinazei intermediare,
glicogen sintaza este inactivat prin fosforilare.
Coordonarea celor dou procese implicate n metabolismul glicogenului este
asigurat n primul rnd prin faptul c ambele sunt sensibile la concentraia celular
de AMPc i n al doilea rnd, prin aceea c ambele ci sunt dependente de aceeai
enzim, protein kinaza.
Activitatea fosforilazei i inactivarea glicogen-sintazei se petrece n acelai
timp, ceea ce nseamn c procesele nu se petrec n acelai timp.

Insulina favorizeaz glicogenogeneza prin activarea glicogen sintazei, enzima limitant

a procesului.
Absena unor enzime din metabolismul glicogenului, determinat genetic, conduce la
maladii foarte grave, glicogenoze, caracterizate prin acumularea n esuturi de glicogen cu
structur normal sau anormal.
Aceste afeciuni se manifest n primele zile sau sptmni de via i n cele mai multe
cazuri subiecii nu ating vrsta adult.
5.3. Reglarea glicemiei
Glucoza din snge provine din:
a.
alimente dup digestie, glucoza, galactoza sau fructoza sunt absorbite i pe
calea venei porte ajung la ficat;
b.
gluconeogenez din aminoacizi, propionat, glicerol i lactat;
c.
din glicogen prin glicogenoliz.
n condiii fiziologice, concentraia glucozei n snge este de 4,5-5,5 mmol/L, adic
0,8-1 g/L.
n meninerea nivelului normal al glicemiei intervin mecanisme homeostatice; ficatul i
esuturile extrahepatice avnd un rol important.
Nivelul glicemiei este un parametru care determin utilizarea glucozei de ctre
esuturile extrahepatice.
Celulele esuturilor extrahepatice nu sunt liber-permeabile pentru glucoz, fapt ce
constituie principalul factor care regleaz ptrunderea glucozei n aceste celule. n schimb
membrana celulei hepatice este permeabil pentru glucoz.
Intrarea glucozei n celulele extrahepatice este dependent de insulin care activeaz
hexokinaza, responsabil de fosforilarea glucozei la G6P.

93

Activitatea hexokinazei este inhibat de produsul de reacie, G6P, care, n acest fel,
exercit un control feed-back asupra utilizrii glucozei de ctre esuturile extrahepatice.
Membarna celulei
musculare, adipocit
Glc

Glicogen
Glc

Stimulare a
activit\]ii HK
^
Insulina
^
Induc]ia
de novo

HK
(enzim\
_ G1P
constitutiv\)
G6P
_
Glicoliz\

GK (enzim\
inductibil\)

Glc

Glc

HK
(enzim\
constitutiv\)

Intrarea Mem
glucozei
n ficat nu este supus acestui control deoarece n ficat este
brana celulei
hepatice
activ glucokinaza care lucreaz la concentraii mai mari de glucoz (K M = 2.10-2M)
dect hexokinaza (KM = 1.10-5M). Mai mult, enzima nu este inhibat de G 6P i poate
fi indus de insulin.
La o concentraie normal a glucozei n snge (1 g), ficatul apare ca un
productor de glucoz, dar atunci cnd glicemia crete, producia de glucoz n ficat
scade i crete consumul de glucoz.
Cnd glicemia atinge o valoare ridicat, intervine rinichiul care i exercit
rolul reglator. Glucoza este continuu filtrat de ctre glomeruli i este reabsorbit la
nivelul tubilor renali. Procesul de reabsorbie este similar cu absorbia glucozei la
intestin, adic prin fosforilare. Procesul fiind enzimatic, consumator de ATP,
capacitatea de reabsorbie este limitat de concentraia enzimei din celulele tubulare
la 350 mg/min. Cnd concentraia glucozei n snge crete, filtratul glomerular
conine mai mult glucoz dect poate fi absorbit i ca urmare, excesul trece n
urin. Eliminarea glucozei prin urin, glicozuria, se produce atunci cnd glicemia
atinge valoarea de 9,5-10 mmoli/L (1,7-1,8 g/L). Aceast valoare a glicemiei se
numete prag renal de eliminare pentru glucoz i este dependent att de capacitatea
de reabsorbie ct i de viteza de filtrare glomerular. Glicozuria apare n diabetul
zaharat.
Sunt situaii cnd eliminarea glucozei prin urin se poate produce la valori
mai mici ale glicemiei. n acest caz este vorba fie de unele defecte nnscute n

94

mecanismul de reabsorbie, fie ca rezultat al unor afeciuni la nivelul tubilor renali

glicozuria renal (diabet renal).
O reducere a filtratului glomerular, n insuficiena cardiac sau n
deshidratare, permite reabsorbia unei cantiti mai mari de glucoz. n aceste situaii,
dei glicemia este mare, glicozuria este mic.
Reglarea hormonal a glicemiei
Ptrunderea glucozei n celule i eliberarea ei din glicogenul hepatic sunt
supuse aciunii hormonilor care pot avea aciune hipoglicemiant (insulina) sau
hiperglicemiant (adrenalina, glucagonul, hormonul corticotrop (ACTH), hormonul
de cretere).
Insulina este secretat de celulele din insulele Langerhans din
pancreas, stimulat de valoarea glicemiei (hiperglicemie), de unii aminoacizi
(leucina, arginina), ageni -adrenergici (adrenalina), factori intestinali (gastrina,
pancreozimina, secretina), hormoni hiperglicemiani (ACTH, glucagon, hormoni
steroizi, hormon de cretere). Aceti factori determin o cretere a secreiei de
insulin att prin hiperglicemia pe care o produc ct i prin aciunea direct asupra
celulelor din pancreas.
Prin creterea secreiei de insulin sau prin administrarea ei se produce
o scdere a glicemiei, creterea glicogenului hepatic, scderea coeficientului
respirator (numr moli CO2 format/ numr moli O2 consumat), scderea fosforului
anorganic din snge, scderea K seric, scderea concentraiei aminoacizilor liberi din
snge, creterea sintezei de NADPH.
La nivelul muchiului i esutului adipos, insulina favorizeaz
ptrunderea glucozei prin membrana celular, stimulnd toate cile de utilizare a
glucozei (sinteza glicogenului, untul HMP, deci creterea produciei de NADPH,
glicoliza, creterea sintezei de acizi grai).
Ptrunderea crescut a glucozei n esutul adipos, favorizat de insulin,
duce i la o producie accelerat de - glicerol-P ceea ce faciliteaz esterificarea
acizilor grai i depunerea de trigliceride n celulele adipoase; ca urmare, nivelul
Glucoz\
acizilor grai liberiGlucoz\
(AGL) din snge va scdea.
Efectul este GK
foarte important deoarece acumularea
G 6P-aza
de AGL favorizeaz
sinteza corpilor cetonici, stimularea gluconeogenezei i blocarea glicolizei.
G6P
Insulina
G6P produce scderea mobilizrii AGL i prin scderea
concentraiei AMPc n celulele +adipoase, compus care_stimuleaz lipoliza.
Scindarea legturii acid gras glicerol din poziia din trigliceride se
F6P
realizeaz prin intervenia
triglicerid-lipazei a crei
activitate
este controlat de
F6P
_
+
hormoni. AMPc, prin FFK
intermediul proteinkinazei,
lipaza inactiv n forma
INSULINA convertete
F1,6DP-aza
sa activ. La rndul ei, proteinkinaza activ scindeaz primul rest
de acid gras i
F1,6DP
F1,6DP
_
+
posibil i pe al doilea.
PEP
PK
Piruvat

_
PEP
PEP-carboxi
kinaza
Oxalacetat
Piruvat
carboxilaza
Piruvat

95

Insulina poate interveni la nivelul esutului adipos i prin aciunea direct

asupra unor enzime, printre care activarea hexokinazei care catalizeaz fosforilarea
glucozei.
n ficat, i exercit aciunea prin inducerea sintezei de enzime cu rol n
degradarea glucidelor (GK, FFK, PK) i represia simultan a enzimelor cu rol n
gluconeogenez (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxikinaza, F1,6DP-aza i G6P-aza).
Hormonul de cretere secretat de hipofiza anterioar are aciune
antagonist insulinei. Secreia acestui hormon este stimulat de hipoglicemie.
Mecanismul su de aciune const n scderea utilizrii periferice a glucozei i
stimularea gluconeogenezei.
Hormonii glucocorticoizi sunt secretai n urma stimulrii cu ACTH, a
crui secreie este declanat de hipoglicemie.
Adrenalina secretat de medulosuprarenal acioneaz prin activarea
glicogenolizei n ficat i muchi.
Glucagonul, produs de celulele din pancreas, are aciune asemntoare
cu a adrenalinei, la nivelul ficatului.
Adrenalina i glucagonul acioneaz prin intermediul sistemului adenilatciclaz AMPc asupra fosforilazei.
5.4. Tulburrile metabolismului glucidic
Orice dezechilibru n mecanismele de reglare a metabolismului glucidic
poate avea drept consecin instalarea unei hipo- sau hiperglicemii.
Scderea glucozei sanguine sub 0,70 g/L indic o hipoglicemie care
poate fi cauzat de:
a) foame, inaniie;

96

b)perturbarea secreiei hormonilor implicai n metabolismul glucozei;

secreie crescut de insulin (hiperinsulinemism) care duce la un
consum exagerat de glucoz la nivel celular;
secreie sczut de adrenalin i glucagon, n hipopituitarism (hipofiz);
defecte enzimatice G6P-az, fosforilaza hepatic, piruvat-carboxilaz,
PEP-carboxikinaz, F1,6DP-az;
boli hepatice severe;
administrarea unor medicamente propranolol, salicilai;
consum de alcool.
Creterea glicemiei peste 1,10 g/L este un indicator al unei stri de
hiperglicemie.
Exist o multitudine de sindroame hiperglicemice, dintre care importan
deosebit prezint diabetul zaharat, definit ca o maladie cauzat de lipsa total sau
relativ de insulin i care este caracterizat prin hiperglicemie, frecvent nsoit de
glicozurie.
Diabetul zaharat, considerat prin tradiie o maladie a metabolismului
glucidic, implic de fapt i tulburri ale metabolismului lipidic i proteic.
Exist dou tipuri majore de diabet:
I.
Diabetul insulino-dependent (tip I), denumit i diabet juvenil. Este
cauzat de incapacitatea organismului de a produce insulin din cauza lezrii celulelor
din pancreas. Se manifest de timpuriu, nainte de 40 de ani, cu simptome mai
severe;
II. Diabetul insulino-independent (tip II), diabetul adultului cauzat de
deficitul sau defecte ale receptorilor pentru insulin. Se manifest dup vrsta de 40
de ani, pacienii fiind de obicei hiperponderali i avnd n familie ascendeni
diabetici.
Modificrile metabolice n diabetul insulino-dependent
Deoarece producia de insulin este perturbat, nivelul insulinei este foarte
sczut comparativ cu al glucagonului, indiferent de nivelul glucozei din snge.
Modificrile sunt foarte asemntoare cu cele observate n inaniie, n ciuda
abundenei compuilor nutritivi.Acestea sunt:
1.
Captarea glucozei de ctre esuturi este perturbat dei ficatul
elibereaz glucoz;
2.
Glicoliza este diminuat prin scderea activitii enzimelor cheie hexokinaz, fosfofructo-kinaz i piruvat-kinaz dependente de insulin;
3.
Depozitele de glicogen sunt sczute din cauza inactivrii glicogen
sintazei n deficit de insulin. n mod fiziologic, raportul glucagon/insulin este mai
important dect nivelele fiecrui hormon n parte, deoarece metabolismul
glicogenului este puternic influenat de hormonul predominant. Cnd predomin
insulina (post prandial) este favorizat depunerea glicogenului, iar cnd glucagonul
este predominant (cnd glucoza scade n snge) este favorizat mobilizarea
glicogenului din depozite.

97

4.
Gluconeogeneza din aminoacizi este stimulat prin activitatea crescut
a enzimelor specifice (piruvat-carboxilaza, PEP-carboxi-kinaza, F1,6DP-aza, F6P-aza
induse de glucagon) rezultnd eliminare crescut de uree;
5.
Hidroliza trigliceridelor este stimulat (diabet slab);
6.
Degradarea acizilor grai prin -oxidare este activat;
7.
Sinteza acizilor grai i a trigliceridelor din glucoz pe calea acetil CoA
este reprimat (la animalele sntoase 1/3 din glucidele ingerate sunt transformate n
acizi grai i trigliceride i depozitate n esutul adipos);
8.
La nivel hepatic din excesul de acetil CoA se sintetizeaz n exces corpi
cetonici (cetonemie cetonurie acidoz prin scderea capacitii de tamponare);
9.
Proteinele organismului sunt degradate i aminoacizii sunt utilizai
drept combustibil;
10. Excesul de glucoz glicozileaz hemoglobina i posibil i alte proteine
eritrocitare.
Manifestrile clinice i paraclinice n diabetul netratat includ:
1. hiperglicemie;
2. glicozurie;
3. creterea acizilor grai liberi;
4. deshidratare i dereglarea balanei electrolitice (poliurie i polidipsie);
5. acidoz prin creterea nivelelor corpilor cetonici. Acetoacetatul, hidroxibutiratul sunt acizi ce conduc la modificarea echilibrului acido-bazic, cu
scderea pH-ului sanguin. Aceasta conduce la com i deces, dac nu este corectat
(vezi metabolismul corpilor cetonici, p. 124).
6. neuropatii, datorit acumulrii de sorbitol n celulele Schwann ce duce la
lezarea celulelor sistemului nervos;
7. retinopatii i orbire (cataract) acumulare de sorbitol n cristalin;
8. defecte renale.
Pentru diagnostic se practic proba de toleran la glucoz sau proba
hiperglicemiei provocate:
la subiectul sntos revenirea la valoarea normal a glucozei n snge
se realizeaz n aproximativ 2 ore i nu este nsoit de glicozurie;
la subiectul diabetic, revenirea la valoare iniial se realizeaz n 5-7
ore i este nsoit de glicozurie.

98

6. METABOLISMUL LIPIDIC
6.1. Digestia i absorbia lipidelor
Lipidele reprezint un grup eterogen de molecule organice insolubile
n ap, care pot fi separate prin extracie cu solveni organici. Lipidele sunt
alctuite din urmtoarele clase de compui: acizi grai liberi (neesterificai);
triacilgliceroli (trigliceride); fosfolipide; sfingolipide; glicolipide; steroizi.
Funciile pe care lipidele le ndeplinesc n organism sunt urmtoarele:
- reprezint sursa major de energie;
- procur componentele necesare formarii barierelor hidrofobe ce
separ coninutul apos al celulelor i structurilor celulare;
-prezint activitate reglatorie sau coenzimatic (hormoni steroizi,
vitamine).

99

Un adult consuma ntre 60-150 g de lipide zilnic din care 90% sunt
trigliceride, restul fiind colesterol liber, colesterol esterificat, fosfolipide i
acizi grai liberi.
Digestia lipidelor este un proces care consta n hidroliza (n
prezena unor enzime specifice fiecrei clase de lipide) i emulsionarea lor
adic meninerea n stare solubilizat a unor componente hidrofobe ntr-un
mediu apos (n prezena bilei i a srurilor biliare).
Hidroliza este realizat de enzime specifice. Astfel, lipazele
acioneaz asupra trigliceridelor, fosfolipazele (PL) asupra fosfatidelor,
colesterolesteraza asupra esterilor de colesterol. De exemplu:

Hidroliza lecitinei (fosfolipid) sub aciunea fosfolipazelor specifice

b. Emulsionarea nseamn solubilizarea componentelor hidrofobe.

Lipidele sunt prezente n mediul apos sub forma unor picturi i hidroliza enzimatic
se petrece la interfaa picturii lipid-ap. Agenii emulsionani interacioneaz
deopotriv cu aceste picturi i cu apa, aciune ce are ca urmare ruperea picturilor n
altele mai mici, stabilizarea acestora din urma i mpiedicarea reunirii lor. Ca urmare
are loc o mrire a suprafeei picturii astfel ca enzimele s poat aciona ct mai
eficient. Emulsionarea este realizat prin dou mecanisme: folosirea proprietilor
srurilor biliare care au rol detergent i amestecarea mecanic dat de peristaltism.
Digestia lipidelor ncepe n stomac i este catalizat de o lipaz (care se crede
c este de origine lingual) i de o lipaz gastric, care hidrolizeaz n special
trigliceridele ce conin acizi grai cu caten scurt i medie (prezente n special n
lapte). Viteza cu care are loc hidroliza este excesiv de mic deoarece lipidele sunt
neemulsionate i enzimele pot hidroliza doar trigliceridele situate la interfaa. De
aceea se poate spune c lipidele trec n intestin aproape intacte.
Digestia masiv a lipidelor are loc n intestin unde trigliceridele, esterii de
colesterol i fosfolipidele sunt degradate la produi primari.

100

Trigliceridele avnd molecule mari nu pot trece prin peretele celulelor

mucoasei intestinale. De aceea asupra lor acioneaz lipaza pancreatic care
hidrolizeaz preferenial acizii grai din poziia 1 i 3 rezultnd n principal 2monoacilglicerol i acizi grai liberi.
Hidroliza esterilor de colesterol este realizat de colesterolaza pancreatic
cnd se produc colesterol liber i acizi grai liberi.
Hidroliza fosfolipidelor este realizat de fosfolipaza A2 (prezent n
concentraie mare n sucul pancreatic), enzim activat n intestin de tripsin.
Fosfolipaza A2 ndeprteaz acidul gras din poziia 2 rezultnd lysofosfolipid i
bineneles acidul gras. Acidul gras rmas n poziia 1 poate fi ndeprtat de ctre
lysofosfolipase obinndu-se n final glicerilfosforilcolina i acid gras liber.
Absorbia lipidelor
Acizii grai liberi, colesterolul liber i 2-monoacilglicerolul sunt produii
primari de degradare in jejun. Acetia mpreun cu srurile biliare formeaz micelii
de lipide amfipatice care sunt orientate cu poriunea hidrofob n interior i cu
poriunea hidrofil spre exterior, fiind astfel solubile n mediul apos din lumenul
intestinal. Miceliile se apropie de marginea n perie a celulelor mucoasei intestinale
(care constituie locul primar de absorbie a lipidelor) i sunt absorbite.
n enterocite aceti produi sunt supui unui proces invers, de reconstituire a
produilor iniiali i anume trigliceride, colesterol esterificat, fosfatide, care mpreun
cu cantiti mici de proteine formeaz particule lipoproteice denumite chilomicroni.
Chilomicronii sunt secretai de enterocite i prin sistemul limfatic ajung n circulaia
sanguin; reprezint forma de distribuire a lipidelor exogene.
Resinteza trigliceridelor, a esterilor colesterolului i a fosfolipidelor se
realizeaz n dou trepte, activarea acizilor grai (despre care se va vorbi la
metabolismul acizilor grai) realizat de tiokinaze urmat de esterificarea realizat de
aciltransferaze specifice.

101

Trebuie notat c acizii grai cu lanuri mici i medii parcurg un traseu diferit
de cel al celorlalte lipide. Astfel ei sunt absorbii direct de mucoasa intestinal (nu
necesit formarea miceliilor pentru absorbie), i sunt distribuii prin sistemul portal
hepatic (nu prin cel limfatic). Acest considerent trebuie avut n vedere n dieta
persoanelor care prezint malabsorbie pentru alte tipuri de lipide.
6.2. Metabolismul acizilor grai
Acizii grai exist n organism n form liber (neesterificat) sau sub form
de esteri n molecule complexe cum sunt trigliceridele. Acizii grai au un numr par
de atomi de carbon, saturai sau nesaturai, cu 4-24 atomi de carbon.
Acizii grai liberi pot fi oxidai n multe esuturi (ficat, muchi) pentru a
furniza energie.
Trigliceridele reprezint forma de stocare a rezervelor energetice ale
organismului i de aceea funcia lor principal este aceea energogen. Aceste rezerve
se formeaz pe baza excesului de glucide care este convertit n acizi grai, ce sunt
ncorporai n trigliceride i depozitai n esutul adipos.

102

6.2.1. Biosinteza acizilor grai (acidul palmitic).

Acizii grai din organism provin din urmtoarele procese:
sinteza de novo a acidului palmitic;
elongarea acidului palmitic nou sintetizat sau a unor acizi grai endogeni;
biosinteza acizilor grai nesaturai.
Acizii grai ncorporai n trigliceride sunt sintetizai din acetil-CoA format
din glucoz.
Biosinteza acizilor grai este un proces de ncorporare a unitii acetil din
malonil-CoA ntr-un lan crescnd de acid gras, utiliznd ATP i NADPH.
Pentru a putea ajunge n citosol acetil-CoA trebuie s traverseze membrana
mitocondrial. Poriunea coenzima A din acetil-CoA nu poate traversa membrana
mitocondrial ci doar poriunea acetil este transferat (sub forma de citrat) n citosol.
Aici din citrat este refcut acetil-CoA care va pune la dispoziie gruparea acetil
pentru sinteza acizilor grai superiori.

Acid gras sintaza: a, b subuniti structurale;

1, 2 subuniti funcionale
Sinteza acestora are loc n prezena unui complex multienzimatic denumit
acid-gras sintetaz care este un dimer. Fiecare monomer prezint 7 proteine care
catalizeaz fiecare cte o etap (reacie) n procesul de sintez i un domeniu denumit

103

ACP (acyl carrier protein) care are rol n transportul unitii acil. Poriunea ACP a
monomerului cuprinde fosfopanteteina (una din formele coenzimatice ale acidului
pantotenic) de a crei grupare SH se fixeaz ca tioesteri acili intermediari. La celalalt
capt monomerul conine o grupare SH furnizat de un rest cisteinil din cetoacilsintetaza.
Complexul enzimatic este alctuit din cei doi monomeri structurali (a i b)
aezai fa n fa aa fel nct gruparea ACP-SH a unui monomer s conlucreze cu
gruparea Cis-SH a celuilalt, formnd dou subuniti funcionale (1 i 2), ntruct se
sintetizeaz concomitent dou molecule de acid palmitic.
Acizii cu caten mai lung de 16 atomi de carbon se sintetizeaz din acid
palmitic printr-un proces de elongare (ataarea fragmentelor de doi atomi de carbon,
provenii de la malonil-CoA).
Acizii grai nesaturai sunt sintetizai prin introducerea n molecula acidului
gras saturat corespunztor a dublelor legturi prin intervenia unor enzime specifice,
numite desaturaze.
n organism poate fi sintetizat pe aceast cale numai acidul oleic (cu o
singur dubl legtur), din acidul stearic (18 atomi de C).
Organismul are nevoie i de ali acizi grai nesaturai, cu dou, trei i patru
legturi. Acetia nu pot fi sintetizai din acidul gras saturat corespunztor deoarece
lipsesc desaturazele respective. Din acest motiv, grupul acizilor grai nesaturai cu
dou, trei i patru duble legturi, cunoscui drept acizi grai eseniali; trebuie adui
prin aport exogen.

Totui, dac n organism se introduce acidul linoleic se poate sintetiza acidul

arahidonic prin combinarea procesului de elongare cu procesul de desaturare.
6.2.2. Degradarea acizilor grai
acizii grai eliberai prin hidroliza trigliceridelor n esutul adipos trec n
plasm unde se fixeaz pe albumine, sunt transportate la esuturile capabile s-i
oxideze, ficat, rinichi, inim, muchi, plmn, creier, esut adipos (majoritatea
esuturilor au capacitatea de a oxida lanul lung de acid gras).
Catabolismul acizilor grai se desfoar n trei etape:

104

Activarea acizilor grai are loc n microzomi sau pe membrana extern a

mitocondriei i este catalizat de enzime specifice tiokinaze.

Transferul acil-CoA n mitocondrie se realizeaz prin transferul gruprii

acil pe carnitin n ficat i muchi. Acil-CoA cu lan lung de atomi de carbon

reacioneaz cu carnitina, avnd loc transferul gruprii acil pe gruparea OH a
carnitinei, sub activarea carnitil-acil-transferazei I prezent n membrana extern a
mitocondriei.

Complexul acil-carnitin este transferat n mitocondrie prin intervenia unei

translocaze. n mitocondrie, restul acil este trecut pe o CoA din mitocondrie cu
eliminarea carnitinei care, transferat n exterior de aceiai translocaz, va participa la
transferul altui rest acil.
-oxidarea

n mitocondrie, acil-CoA particip la procesul de -oxidare, un ansamblu de

patru reacii prin care se ndeprteaz fragmente de doi atomi de carbon sub form de
acetil-CoA.
1. Dehidrogenarea const n ndeprtarea a doi atomi de hidrogen de la C
i C, sub aciunea acil-CoA-DH, rezultnd o acil-CoA nesaturat; cei doi hidrogeni
sunt preluai de FAD i cedai lanului respirator cu generarea final a 2 ATP.

105

O
R CH2

CH2

C ~S

CoA

Acil-CoA
Acil-CoA
dehidrogenaza

FAD

R C
3

FADH2

C ~S

2 ATP

CoA

H
2-trans-enoil-CoA

2. Hidratarea. n reacia a doua are loc adiia unei molecule de ap la dubla

legtur, adiie mediat de enoil-CoAhidrataza (crotonaza), cu formarea -hidroxiacil-CoA.

3. Dehidrogenarea la C sub aciunea -hidroxi-acil-CoA-DH pentru a

forma -ceto-acil-CoA. n acest caz acceptorul de H este NAD+.
-hidroxiacil-CoA
dehidrogenaza

NAD+
NADH+H+

3 ATP

O
R CO

CH2

C ~S

CoA

-cetoacil-CoA

4. Scindarea tiolitic este realizat de -cetotiolaz cu participarea altei

molecule de CoA-SH. Ca rezultat, din lanul lung se desprinde un fragment de
doi atomi de carbon sub form de acetil-CoA, iar restul de acid gras rmas este

106

deja activat (acil-CoA cu doi atomi de carbon mai puin) care poate participa la
un nou proces de -oxidare.
Acil-CoA:
aciltransferaza
(tiolaza)

CoA
CH3

O
C ~S

O
C ~S

CoA

CoA

(n-2) atomi de carbon

Acil-CoA

Procesul continu pn tot lanul hidrocarbonat al acidului gras este

fragmentat n molecule de acetil-CoA. Acetil-CoA format este degradat la
CO 2 i H 2 O n ciclul Krebs.
Prin degradarea acizilor grai se formeaz o mare cantitate de energie.
Considernd acidul palmitic, cu 16 atomi de carbon, pentru degradarea sunt
necesare apte -oxidri, cu eliberarea a 7 x 5 = 35 moli ATP.
Din cei 16 atomi de carbon ai acidului palmitic rezult 8 moli de acetilCoA, care degradate n ciclul Krebs, vor genera 8 x 12 = 96 moli de ATP.
total 35 + 96 = 131 moli de ATP.
din care se scade un mol ATP consumat la activare (sau dou legturi macroergice
de ATP) ceea ce nseamn c prin degradarea acidului palmitic la CO 2 i H2O se
formeaz 130 moli ATP sau 129 legturi macroergice=656 KJ.
6.3. Metabolismul trigliceridelor
Trigliceridele sunt esteri ai acizilor grai cu glicerina. Ele reprezint
forma de depozitare a excesului energetic al organismului. Energia potenial a
trigliceridelor rezid n catenele bogate n hidrogen ale resturilor acil (R-CO-).
I. Sinteza trigliceridelor
Pentru sinteza trigliceridelor organismul utilizeaz glicerolul i acizii
grai superiori, care sunt mai nti activai la acil-CoA.
Biosintaza trigliceridelor (TG) are loc prin dou mecanisme:
Calea monogliceridelor, activ n celula intestinal:
Funcioneaz n enterocit i reprezint o cale de resintez a
trigliceridelor din produii de digestie, conform reaciei:

107

Aceste trigliceride mpreun cu colesterolul liber i esterificat,

fosfolipide i proteine sunt ncorporate n particule lipoproteice denumite
chilomicroni care trec n circulaie prin sistemul limfatic.
Calea glicerol fosfatului, activa in ficat si alte tesuturi, capabile de
sinteza:

Cu toate c majoritatea esuturilor sintetizeaz trigliceride, cele

sintetizate n ficat i n esutul adipos au mare importan n balana energetic
a organismului.
Acizii grai necesari sintezei trigliceridelor provin fie din sinteza de
novo din acetil-CoA (rezultat n urma oxidrii glucozei), fie din acizii grai
liberi circulani.
Trebuie notat c ficatul nu este un organ de depozitare a trigliceridelor
aa cum este esutul adipos. Trigliceridele sintetizate n ficat sunt exportate la
esuturile extrahepatice sub forma de lipoproteine de densitate foarte mic
(VLDL). Ajunse acolo trigliceride cuprinse n VLDL sunt hidrolizate (sub
aciunea lipoprotein lipazei) i acizii grai sunt reinui. Acetia din urma sunt
rencorporai n trigliceride i depozitai (n special n esutul adipos).
esutul adipos reprezint locul de stocare a excesului caloric sub form
de lipide.

108

Glicerol-fosfatul necesar sintezei provine din dihidroxiaceton-fosfatul

provenit din glucoz i din glicerolul eliberat prin hidroliza trigliceridelor.
Acest fapt evideniaz dependena sintezei trigliceridelor de nivelele glicemiei
i indirect al insulinemiei.
II. Degradarea trigliceridelor
Degradarea tisular a trigliceridelor are loc prin hidroliz cnd se pun
n libertate acizi grai i glicerol sub aciunea unei lipaze hormon-sensibile,
conform schemei:

Glicerolul rezultat difuzeaz n plasm i constituie un indicator al vitezei de

hidroliz a trigliceridelor.
Acizii grai rezultai sunt utilizai n principal ca surs de energie.
Trebuie notat faptul c n organism exist dou mari fluxuri plasmatice
de trigliceride:
- circulaia trigliceridelor exogene de la intestin n restul organismului
sub form de chilomicroni;
- circulaia trigliceridelor endogene de la ficat spre restul organismului
sub form de VLDL.
6.4. Metabolismul glicerolului. Sinteza fosfolipidelor
Glicerolul provine din hidroliza trigliceridelor fiind un produs al
metabolismului esutului adipos. El poate fi utilizat doar de esuturile ce posed
glicerol-kinaza care l poate fosforila i reintroduce n fluxul metabolic. De aceea el
difuzeaz din esutul adipos care nu conine aceast enzim i pe cale plasmatic
ajunge n ficat i rinichi (esuturi ce posed glicerol-kinaz) unde este fosforilat la
glicerol-3-fosfat.
Glicerolul este un punct de plecare spre sinteza de trigliceride i/sau
fosfogliceride.

109

CH2

OH

Glicerol
kinaza

CH OH
CH2 OH
Glicerol

Difosfatidil glicerol
(cardiolipina)

ATP

CH2

CH2

CH OH

ADP

O CO

O CO

CH O CO
CH2 O CO

R1

CH2 O

R2
P

Fosfatidil-inozitol

Acil-CoA

CH2 O P
Glicerol-3-fosfat

PPa

R1

CH O CO
CH2

Glicerol-3-fosfat
aciltransferaza

OH

CH O CO

Citidina

R1

CMP

R2

+
CH2 O P O CH2 CH N(CH
2
3)3
Lecitina (Fosfatidil-colina)
CH2

O CO

O CO

CH2 O P
1-Acilglicerol-3-fosfat
Acil-CoA
1 Acil glicerol-3-fosfat
aciltransferaza
CoA
CH2

O CO

R2

CH2 O CO

R3

R1
R2

CH2 O P
1,2 Diacil glicerol fosfat
(fosfatidat)
H2O
Fosfatidat
CDP-colina
fosfohidrolaza
Pi
CH2 O CO R1
CH O CO

R1

CH O CO

R1

CH OH

CH O CO

CDP-Diacilglicerol

O CO

CTP

R2

inozitol
CH2

CoA

CH2

R2

CH2 OH
Aciltransferaza

1,2 Diacilglicerol

R3-COOH

Trigliceride

Glicerofosfolipidele reprezint o clasa de lipide foarte importante ele fiind

componente principale ale membranelor biologice. Cea mai important caracteristic
a lor este caracterul amfipatic. Aceasta nseamn c fosfolipidele prezint o poriune
(un cap) hidrofil, care conine gruparea fosfat cu diferii substitueni ca serina,
etanolamina, colina i o poriune (o coad) hidrofob alctuit din lanurile a doi acizi
grai. Aceast configuraie este ideal deoarece partea hidrofob le permite asocierea
cu ali constitueni ai membranei celulare cum ar fi proteine, colesterol, glicolipide, n
timp ce parte hidrofil permite asocierea cu moleculele de ap asigurndu-se
solubilizarea lor.
6.5. Corpii cetonici
Prin corpi cetonici se neleg urmtorii trei compui aceto-acetatul, 3hidroxibutiratul i acetona:

110

Sinteza acetoacetatului (cetogeneza) are loc n mitocondriile hepatice din

acetil-CoA rezultat din -oxidarea acizilor grai.
Corpii cetonici reprezint o important surs de energie pentru esuturile
extrahepatice deoarece:
- sunt solubili deci nu necesit un sistem de transport (ncorporare n
lipoproteine, cuplare cu albumina);
- sunt sintetizai n ficat atunci cnd cantitatea de acetil-CoA prezent
depete posibilitile ficatului de a o metaboliza, pe alte ci;
- pot fi utilizai ca surs de energie n esuturi extrahepatice (muchi scheletic
i cardiac, cortex renal, creier).
Dei ficatul produce n mod constant corpi cetonici, cantiti semnificative
apar n special n perioadele de inaniie ndelungat. Ficatul ns nu poate reconverti
aceto-acetatul la acetoacetil-CoA deci nu poate folosi acest compus drept surs de
energie. esuturile extrahepatice pot ns obine energie prin conversia corpilor
cetonici la acetil-CoA via acetoacetil-CoA.
Cnd rata formrii corpilor cetonici depete rata metabolizrii lor, nivelele
acestora cresc n snge (cetonemia) i n urin (cetonuria). Aceti doi parametri sunt
de obicei ntlnii n inaniie i n diabetul zaharat (mellitus). Acidul aceto-acetic i
-hidroxibutiratul sunt eliminai ca sruri, ei epuiznd rezerva alcalin din snge i n
consecin, duc la scderea pH-ului. Pe de alta parte fiind substane osmotice
antreneaz pierderi mari de ap (poliurie) i deshidratarea organismului. Cuplarea
celor dou efecte duce la instalarea acidozei (cetoacidoza).
6.6. Metabolismul colesterolului
Colesterolul este sintetizat de aproape toate esuturile umane: ficat, cortexul
adrenalei, ovare, testicule, placent.
El prezint o serie de funcii eseniale n organism: este component al
membranelor celulare, precursor al acizilor biliari, al hormonilor steroizi, i al
vitaminei D.
Colesterolul se prezint sub dou forme: colesterolul liber i colesterolul
esterificat.
Biosinteza colesterolului
Toi atomii constitueni ai colesterolului provin din acetil-CoA. Sinteza sa are
loc n citoplasm i cuprinde mai multe etape:
a) formarea hidroxi, metil - glutaril CoA (HMG-CoA) din acetil-CoA;
b) transformarea (HMG-CoA) n izopren biologic activ
c) condensarea a 6 uniti izoprenice cu formarea squalen-ului (hidrocarbur
cu 30 atomi de carbon)
d) ciclizarea squalen-ului cu formarea colesterolului.

111

a. HMG-CoA, intermediar n sinteza steroizilor, se sintetizeaz la fel ca

precursorul sintezei corpilor cetonici dar n citoplasm. Acetil CoA necesar sintezei
provine din metabolizarea glucozei, a acizilor grai (n cea mai mare parte) i a unor
aminoacizi.

b. Transformarea HMG-CoA n acid mevalonic este etapa reglatorie a

procesului i reprezint prima etap specific a colesterologenezei i este un proces

dependent de NADPH.

112

c. Prin condensarea cap-coad a dou uniti izoprenice se obine geranil-PP

un compus C10, la care se adaug o nou molecul de izopren activ cu formare de
farnesil-pirofosfat (C15). Apoi dou molecule de farnesil prin condensare coad-coad
formeaz squalen-ul (C30).

113

Sub aciunea unui sistem enzimatic complex squalenul este

transformat n lanosterol. Acesta, prin pierderea a 3 grupri CH 3 (legturile
punctate) prin oxidare la COOH i decarboxilare, hidrogenarea unei duble legturi
si migrarea alteia, conduce la colesterol:
d.

Reglarea sintezei de colesterol are loc la nivelul HMG-CoA-reductazei, etapa

limitant a procesului.
Factorii reglatori sunt:

114

a. colesterolul alimetar. Cnd dieta este srac n colesterol, este activat

sinteza n ficat, intestin i suprarenale. O diet bogat n colesterol diminueaz
sinteza endogen;
b. valoarea caloric a dietei. O diet bogat n glucide sau lipide crete
sinteza hepatic de colesterol;
c. hormonii
- insulina stimuleaz sinteza de colesterol prin stimularea HMG-CoA-reductazei;
- glucagonul reduce sinteza de colesterol prin scderea activitii HMG-CoAreductazei.
n plasma uman colesterolul se gsete ntr-o concentraie de
120-220 mg/dL; crete cu vrsta i prezint variaii de la individ la individ. La adulii
tineri sntoi colesterolul plasmatic este de 175 mg/dL.
Degradarea colesterolului. Biosinteza acizilor biliari
Colesterolul din organism este utilizat astfel:
1. n cea mai mare parte este transformat la nivelul ficatului n acizi biliari;
2. n piele, este trecut n vitamin D3;
3. n glandele endocrine, la nivelul corpului galben din placent i capsulele
suprarenale, se sintetizeaz hormoni steroizi;
4. este utilizat pentru sinteza de membrane.
Colesterol nu poate fi degradat la CO 2 i H2O i de aceea inelul sterolic este
eliminat din organism ca atare sau mai corect foarte puin modificat. Calea principal
de excreie este bila care cuprinde att colesterolul ct i acizii biliari, catabolii ai
acestuia. inndu-se cont de cele spuse mai sus rezult c trecerea colesterolului prin
ficat este obligatorie n vederea eliminrii.
Bila contine colesterol n majoritate neesterificat care este meninut n soluie
apoas de ctre substane amfipatice cum sunt lecitina (fosfatidilcolina) i srurile
biliare.
Solubilitatea colesterolului depinde de un raport bine determinat ntre
colesterol-lecitina-sruri biliare. Modificarea acestui raport duce la cristalizarea
colesterolului n jurul unor nuclee de proteine i bilirubin formnd calculii biliari
(pietre) care pot bloca total sau parial fluxul bilei.
Calea urmat de colesterol pentru eliminare este urmtoarea: colesterolul
biliar mpreun cu cel rezultat din descuamarea intestinal i cel exogen se amestec
n intestin. Din acest amestec colesterolul biliar fiind n form micelar este absorbit
preferenial fa de cel exogen. Colesterolul neabsorbit se elimin prin fecale sub
forma a doi compui rezultai n urma aciunii bacteriilor intestinale i anume
colestanol i coprostanol.
Colesterolul absorbit ajunge n ficat unde este transformat n acizi biliari i
anume acidul colic i chenodezoxicolic.

115

nainte ca ei s prseasc ficatul, sunt conjugai cu glicolul sau cu taurina

rezultnd
acizii
glicocolic,
taurocolic,
glicochenodezoxicolic
i
taurochenodezoxicolic. Acetia sunt total ionizai la pH-ul fiziologic i se prezint
sub form de sruri. Srurile biliare au caracter detergent mai puternic dect acizii.
Acizi biliari i srurile biliare sunt secretai n caniculele biliare i dup un tranzit
prin vezica biliar sunt deversai mpreun cu bila n duoden.

116

n segmentul distal al ileonului acizi biliari sunt reabsorbii printr-un

mecanism activ i prin sistemul port ajung din nou la ficat unde refac circuitul
anterior, realizndu-se aa-numitul circuit enterohepatic al acizilor biliari. n intestin,
dup ce particip la emulsionarea lipidelor alimentare, acizii biliari formai sunt
supui aciunii bacteriilor rezultnd acizi biliari secundari, prin dehidroxilare n
poziia 7 i deconjugare, acidul dezoxicolic din acidul colic i acidul litocolic din
acidul chenodezoxicolic. Dup efectuarea a mai multor circuite enterohepatice ei sunt
total eliminai.
Trecerea colesterolului din ficat n bil este nsoit de secreia simultan a
fosfolipidelor i srurilor biliare. Dac acest fenomen cuplat este viciat i intr n bil
mai mult colesterol dect poate fi solubilizat de srurile i lecitina prezente, atunci
colesterolul precipit formnd calculii biliari i declannd litiaza biliar.

6.7. Lipoproteine plasmatice

Lipidele plasmatice (5-8 g/L) reprezint un amestec complex de fosfolipide
(PL) 35%, trigliceride (TG) 10-25%, colesterol liber (C) 7,5%, colesterol
esterificat (CE) 39% i acizi grai liberi (AGL) 2,5%.
Deoarece sunt insolubile n ap, lipidele sunt transportate sub forma unor
complexe lipoproteice, particule globulare cu greutate mare, cu miez nepolar
constituit din lipide neutre (TG i CE) nconjurat de o pelicul polar de PL care
stabilizeaz particula i asigur solubilitatea ei n ap. Pe lng fosfolipide, suprafaa
polar mai conine colesterol liber i cantiti mici de proteine specifice, numite
apolipoproteine sau apoproteine (A, B, C, E).

117

Deoarece particulele lipoproteice conin toate componentele lipidice n

proporii diferite i diferite apoproteine, aceste particule vor prezenta i proprieti
fizico-chimice diferite: mrimea particulei, densitate, mobilitate n cmp electric.
Lipoproteinele cu coninut ridicat de TG au densitatea mai mic i molecula
mai mare dect cele cu coninut mare de PL i proteine.
ncrcarea electric este conferit de partea proteic.
Pe baza acestor proprieti au fost perfectate dou metode de separare a
lipoproteinelor plasmatice: ultracentrifugarea i electroforeza.
Ultracentrifugarea se bazeaz pe viteza de sedimentare a particulelor n
cmp gravitaional ntr-o soluie de NaCl cu greutate specific 1,063 n funcie de
densitatea i mrimea particulei.
Electroforeza se bazeaz pe capacitatea de migrare n cmp electric n funcie
de ncrcarea electric i greutatea particulei.
Prin aceste metode s-au separat, din plasma subiecilor sntoi, patru clase de
lipoproteine:
- CM chilomicroni;
- LDL lipoproteine cu densitate joas sau -lipoproteine;
- VLDL lipoproteine cu densitate foarte joas sau pre--lipoproteine;
- HDL lipoproteine cu densitate nalt sau -lipoproteine;

118

Trigliceridele predomin n chilomicroni i VLDL n timp ce

colesterolul n LDL i HDL.
Apoproteinele reprezint aproape 60% din particulele HDL i mai puin de 1%
n chilomicroni.
Asamblarea lipidelor sub forma particulelor lipoproteice asigur pstrarea
lipidelor n soluie i un mecanism eficient pentru aprovizionarea esuturilor cu
lipide.
Metabolismul chilomicronilor (CM)
Chilomicronii sunt particulele lipoproteice cele mai mari
(75-1200 nm) sunt sintetizai n celulele mucoasei intestinale din
lipidele alimentare Apo B48 i secretate n limfa mesenteric. n
circulaie primesc de la particulele HDL, Apo C i Apo E.
n timpul circulaiei, trigliceridele din chilomicroni sunt hidrolizate de
lipoprotein-lipaze (LPL) din endoteliul capilarelor esuturilor extrahepatice (muchi
scheletic, muchi cardiac, esut adipos). Acizii grai eliberai prin aciunea LPL
activat de apo CII, servesc drept surs de energie pentru diverse celule, sau sunt
preluai de adipocite i stocai sub form de trigliceride. Particulele rmase sunt
chilomicroni remaneni sau deeuri, bogai n apo E dar lipsii de apo C care a fost
pierdut (preluat de HDL) aproape n ntregime. Deeurile de chilomicroni sunt
rapid captai de ficat fiind recunoscute de receptorii specifici prin combinaia apo B i
apo E. n celulele parenchimale sunt degradai.
Metabolismul fraciunii VLDL
Particulele VLDL ( 30-90 nm) sunt secretate de ficat pe
seama trigliceridelor sintetizate n celula hepatic. n circulaie
particulele VLDL sunt modificate prin degradarea trigliceridelor de
ctre lipoprotein-lipaz. Particulele devin mai dense, pierd
fosfolipidele, colesterolul i apo E, care sunt transferate pe HDL i
primesc n schimb colesterol esterificat. Prin aceste modificri,

119

particulele VLDL devin particule LDL, trecnd prin faza intermediar

de particule IDL (lipoproteine cu densitate intermediar).
n condiii patologice (hepatit, diabet necontrolat sau n
ingestia excesiv de alcool) cnd este deranjat raportul ntre sinteza
hepatic de trigliceride i secreia VLDL, apare ficatul gras.
Metabolismul fraciunii LDL
Particulele LDL (20 nm) rezultate prin metabolizarea VLDL
sunt bogate n colesterol i colesterol esterificat, n special cu acidul
oleic. Funcia primar a fraciunii LDL este de a furniza colesterol
celulelor periferice.
Colesterolul liber adus n celul particip la: sinteza de
membrane celulare; sinteza altor steroli; reglarea sintezei de
colesterol n celula respectiv prin inhibarea activitii HMGCoAreductazei.
Colesterolul n exces (care depete necesarul imediat al
celulei) este esterificat cu acizi grai de ctre ACAT (acilCoA:colesterol-acil transferaza) i stocat n celul pentru nevoile
viitoare. Activitatea ACAT crete cnd concentraia colesterolului
intracelular este crescut.
Particulele LDL ptrund n celul prin recunoaterea
combinaiei apo B i apo E de ctre receptori specifici.
Afinitatea receptorilor pentru LDL este foarte mare; se
consider c ei funcioneaz la capacitate maxim la o concentraie a
colesterolului-LDL de 25 mg/dL. Nivelul LDL-colesterolului plasmatic
este de 120 mg/dL; diferena dintre aceste dou valori reprezentnd
valoarea LDL-colesterolului preluat de ctre receptorii scavenger
de pe macrofage. Rezult aa numitele celule spumoase.
Fraciunea LDL este considerat fraciune de risc
aterogen.
Metabolismul fraciunii HDL
HDL ( 8-12 nm) sunt particule foarte heterogene n ceea ce
privete compoziia i originea.
Sunt sintetizate n ficat i intestin din nveliul excedentar din
chilomicroni i VLDL dup ce miezul lor nepolar de trigliceride a fost
degradat de ctre lipoprotein-lipaz.
HDL nascente au o form bidiscoidal (dou straturi
suprapuse formate din colesterol, fosfolipide (n special lecitin),
apo AI, apo E i apo C. Sunt rapid convertite la particule sferice prin
colectarea colesterolului de pe suprafaa celulelor esuturilor
periferice i de la alte particule lipoproteice, trecnd n particule
HDL3, sferice, apoi HDL2 care sunt captate de celulele hepatice i
degradate.

120

Fraciunea HDL ndeplinete un numr de funcii importante:

constituie rezerv circulant de apo CII care este transferat
pe chilomicroni i VLDL pentru activarea LPL;
- ndeprteaz colesterolul liber din esuturile extrahepatice i
l esterific n plasm cu LCAT (lecitin:colesterol-aciltransferaz), enzim ataat de particulele HDL.
-

transport colesterolul esterificat la ficat unde este

metabolizat la acizi biliari n celulele parenchimale.
Studii epidemiologice au evideniat c spre deosebire de LDL,
colesterolul din HDL este corelat negativ cu prevalena
aterosclerozei, HDL fiind considerat fraciunea cu rol
protector, antiaterogen. Aceasta deoarece ndeprteaz
colesterolul din esuturi i chiar din intima vascular i l cedeaz
-

121

ficatului care l transform n acizi biliari, principala form de

eliminare a colesterolului din organism.
Tulburrile metabolismului lipidic. Dislipidemii
Termenul general de dislipidemie semnific modificrile
calitative i cantitative ale lipidelor din plasm. Unii indivizi prezint
defecte nnscute n metabolismul lipoproteinelor plasmatice,
defecte ce conduc la hipo- sau hiperlipoproteinemii. Ali indivizi, cu
diverse afeciuni, cum ar fi diabet zaharat, hipotiroidism sau
ateroscleroz, prezint modele lipoproteice anormale, foarte
asemntoare cu una sau alta dintre afeciunile primare nnscute.
Numeroase cercetri au evideniat corelaia dintre creterea
concentraiei lipidelor serice i incidena bolilor coronare i a
aterosclerozei.
Pacienii cu boli coronare pot prezenta cel puin una din
urmtoarele anomalii:
1) creterea concentraiei VLDL (n principal trigliceride), cu
concentraii normale a LDL (n principal colesterol);
2) creterea concentraiei LDL (colesterol) cu VLDL normale
(trigliceride);
3) creterea ambelor fraciuni lipoproteice (colesterol +
trigliceride).
Exist o relaie invers ntre HDL i bolile coronare i se
consider c cele mai bune indicaii n aprecierea acestei situaii pot
fi obinute din valorile raportului LDL/HDL, innd seama de rolul
celor dou fraciuni.

7. METABOLISMUL PROTEIC
n organism are loc un permanent transfer proteic intertisular. La fondul
comun de aminoacizi contribuie att aminoacizii de origine alimentar, ct i cei
provenii din degradarea proteinelor tisulare. Fondul comun de aminoacizi va fi
utilizat pentru sinteza de proteine, pentru sinteza de produi specializai (serotonina,
adrenalina, tiroxina), sau pentru degradare n scopuri energetice.
Cantitatea minim de proteine necesar organismului este de aproximativ
30 g/zi. Cnd consumul de proteine este inadecvat, ficatul nu poate sintetiza
suficiente proteine plasmatice pentru meninerea balanei ntre fluide i esuturi,
favoriznd apariia edemelor.

122

Valoarea biologic a unei proteine alimentare depinde de compoziia sa n

aminoacizi. Valoarea este cu att mai mare cu ct coninutul n aminoacizi este mai
bogat, mai variat i mai apropiat de compoziia proteinelor proprii organismului.
Msura acestei valori este dat de coeficientul de utilizare a proteinelor care se
exprim prin raportul:
N ingerat N urinar
N ingerat
Coeficientul indic n ce msur o protein ingerat este ncorporat n
proteinele proprii. Atunci cnd, dup administrarea unei proteine, eliminarea urinar
de azot este crescut, nseamn c aminoacizii din proteina respectiv au fost n
principal degradai i nu ncorporai n proteinele proprii organismului.
Proteinele de origine vegetal, n special fina de porumb, care este lipsit de
triptofan, tirozin i lizin, au valoare biologic redus. Proteinele de origine animal
au valoare biologic ridicat.
Balana azotat nu poate fi meninut dac din alimentaie lipsesc urmtorii
aminoacizi: fenilalanina, valina, triptofanul, treonina, lizina, leucina, histidina,
arginina, izoleucina i metionina, aa numii aminoacizi eseniali. Arginina i
histidina sunt considerai aminoacizi semieseniali deoarece n perioada de cretere,
necesarul pentru arginin i histidin este crescut i sinteza endogen nu asigur
ntreaga cantitate necesar.
Cnd unul dintre aminoacizii eseniali lipsete, sinteza proteinelor n
componena crora intr aceti aminoacizi nu mai are loc, iar ceilali aminoacizi sunt
dezaminai i degradai; bilanul azotat devine negativ.
Valoarea biologic a unei proteine depinde i de digestibilitatea ei; proteinele
din plante, fiind protejate de un nveli de celuloz, sunt mai greu digestibile. Un caz
aparte l constituie albuul de ou crud i fasolea soia, care conin factorii antitriptici
ce se opun digestiei.
7.1.Digestia i absorbia proteinelor
n tubul digestiv, proteinele nu pot fi absorbite ca atare i de aceea sunt
supuse aciunii unor enzime numite peptidaze sau proteaze, care le scindeaz pn la
aminoacizi.
Dup specificitate, peptidazele se mpart n endopeptidaze i exopeptidaze.
Ele sunt capabile s scindeze legturile peptidice situate fie n mijlocul unui lan
polipeptidic (endopeptidaze), fie la capetele acestuia (exopeptidaze). La rndul lor,
exopeptidazele sunt aminopeptidaze i carboxipeptidaze dup cum detaeaz un
aminoacid din captul N-terminal sau C-terminal:
R1
H2N

CH

R5

R3
CO

Aminopeptidaza

NH

CH
R2

CO NH

CH

CO

Endopeptidaza

NH CH
R4

CO

NH CH

CO

OH

Carboxipeptidaza

123

Peptidazele digestive sunt elaborate sub form inactiv n scopul de a proteja

celulele i canalele secretoare de aciunea lor proteolitic. Aceti precursori
(proenzime sau zimogeni) devin activi n lumenul tubului digestiv. Activarea lor se
realizeaz prin hidroliza unor legturi peptidice care fie c detaeaz anumite peptide
sau aminoacizi, fie c modific plierea lanului polipeptidic, demascnd centrul activ
al enzimei. De multe ori acest proces se petrece autocatalitic.
Tripsinogen
Enteropeptidaza

Val-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys

Tripsina
Chimotripsinogen

Proelastaza
Elastaza
Procarboxipeptidaza

Chimotripsina
Carboxipeptidaza

Digestia proteinelor alimentare ncepe n stomac. Principala enzim

proteolitic gastric este pepsina.
Pepsina, o endopeptidaz, este secretat de celulele mucoasei
gastrice sub form de pepsinogen. Activarea are loc sub aciunea acidului
clorhidric din stomac, sau autocatalitic. Pepsina acioneaz optim la pH 1-2 i
prezint specificitate pentru legturile peptidice a cror grupare NH- provine
de la tirozin i fenilalanin.
Enzimele
pancreatice
(tripsina,
chimotripsina,
elastaza,
carboxipeptidaza) acioneaz asupra proteinelor neatacate de pepsina gastric
ct i asupra produilor de digestie ale acesteia. Sub aciunea combinat a
proteazelor pancreatice rezult di- sau oligopeptide.
Tripsina endopeptidaz pancreatic, rezult din tripsinogenul
activat de enterokinaz sau autocatalitic. Activarea implic detaarea unui
hexapeptid din captul N-terminal. Are pH optim la 7-8 i specificitate pentru
legturile peptidice a cror grupare carboxil provine de la un aminoacid bazic,
cum ar fi arginina.
Chimotripsina endopeptidaz pancreatic secretat sub forma
inactiv de chimotripsinogen i activat de tripsin care detaeaz patru
aminoacizi sub forma a dou dipeptide. Chimotripsina are specificitate pentru

124

legturile peptidice n care sunt implicate gruprile carboxil ale fenilalaninei,

tirozinei i triptofanului.
Absorbia aminoacizilor prin mucoasa intestinal este n parte o
difuzie pasiv, dar n cea mai mare msur este un transport intermediat de
proteinele transportoare specifice (translocaze). Translocazele seamn cu
enzimele: prezint fenomenul de saturare cu substrat, sunt specifice, sunt
susceptibile la aciunea unor inhibitori. Proteinele transportoare de aminoacizi
sunt determinate genetic i defecte genetice ale acestor proteine altereaz
capacitatea de absorbie a mucoasei intestinale pentru unul sau mai muli
aminoacizi. Erorile ereditare de absorbie a aminoacizilor determin tulburri
grave de nutriie i metabolism (boala Hartnup, cistinuria, glicinuria).
Peptidele mici absorbite, sunt rapid hidrolizate de ctre peptidazele
localizate chiar n celulele care fac absorbia, nct n circulaia portal sunt
eliberai numai aminoacizi.
7.2. Metabolismul aminoacizilor
Metabolismul aminoacizilor se desfoar n strns legtur cu ciclul
acizilor tricarboxilici. Astfel, scheletul de atomi de carbon pentru biosinteza
celor mai muli aminoacizi este furnizat de ciclul Krebs, care fiind un proces
amfibolic, va asigura i degradarea scheletului de carbon din aminoacizi.
7.2.1. Biosinteza aminoacizilor
Digestia proteinelor nu asigur ntreaga cantitate de aminoacizi
necesar organismului. n consecin, proporia de aminoacizi trebuie
reechilibrat prin sintez. Organismul uman nu poate realiza acest lucru
deoarece nu poate sintetiza toi cei 20 aminoacizi, nedispunnd de unele
enzime necesare. De exemplu aminoacizii aromatici (Phe, Trp) nu pot fi
sintetizai, iar alii, cum ar fi arginina poate fi sintetizat n ciclul ureei, dar nu
n cantiti suficiente.
Totui, un numr de 12 aminoacizi neeseniali pot fi sintetizai din
intermediari metabolici, iar trei (Cys, Tyr,Hys) se sintetizeaz din aminoacizi
eseniali.
n biosinteza aminoacizilor, un rol central l ocup glutamatdehidrogenaza, glutamin-sintetaza i transaminazele; prin aciunea lor
combinat, amoniacul anorganic este transformat n grupare amino din
aminoacizi.
7.2.2. Catabolismul aminoacizilor
Spre deosebire de acizii grai i glucoz, aminoacizii nu pot fi stocai n
organism. Surplusul de aminoacizi care depete necesarul pentru sinteza de
proteine i alte biomolecule, este supus degradrii.

125

7.2.2.1. Catabolismul gruprii amino

Animalele superioare, printre care i omul, , excret azotul proteic sub
form de uree, compus solubil n ap i netoxic. Prin catabolizarea
aminoacizilor, gruparea -amino eliberat sub form de ion NH 4 +, este
convertit la uree, iar scheletul de C rmas este transformat n acetil CoA,
piruvat sau alt intermediar din ciclul acizilor tricarboxilici. Aceti din urm
compui sunt utilizai drept surs de energie i pentru sinteza de acizi grai,
corpi cetonici i glucoz.
ndeprtarea gruprii -amino se realizeaz prin dou procese:
1. transaminarea, n care gruprile amino de la diveri aminoacizi sunt
colectate sub form de glutamat;
2. desaminarea oxidativ a glutamatului, prin care se elibereaz NH 4,
convertit ulterior n uree.

Transaminarea const n transferul gruprii amino de la un aminoacid la

un cetoacid fr formarea amoniacului liber; aminoacidul devine cetoacid, iar
cetoacidul (-KA) devine aminoacid.
Reacia general a acestui proces este:
R1 CH COO + R2 C COO
+
NH3

R1 C
O

COO- + R2 CH COO
+
NH3

126

Enzimele care catalizeaz transaminarea se numesc aminotransferaze i au

drept coenzim piridoxal-5-fosfatul (P-5-P), forma activ a vitaminei B6.
Transaminazele acioneaz reversibil i prezint specificitate pentru una sau
ambele perechi de aminoacid-cetoacid. Acceptor principal de grupri amino este
acidul -cetoglutaric, care se transform n acid glutamic. Ca donor de grupare amino
pot funciona majoritatea aminoacizilor, nct procesul de transaminare poate fi
ilustrat prin reacia:
R CH COO- +
+

COOC O

NH3

CH2

-AA

CH2

R C

COO

COO+

CH NH3

CH2

-KA

CH2

COO-

COO-

Transaminarea are
loc cu viteze diferite dup natura aminoacidului.
Glutamat Cel mai
-cetoglutarat
activ donor de grupare amino este acidul aspartic, dup care urmeaz alanina, valina,
leucina, izoleucina, tirozina, fenilalanina, metionina, triptofanul, arginina cisteina.
Glicocolul, serina, histidina reacioneaz mai greu, iar lizina, treonina i iminoacizii
(prolina i hidroxiprolina) nu particip la transaminare.
Dintre cele 13 aminotransferaze identificate, cele mai importante sunt:
aspartat transaminaza (AST sau GOT) care are afinitate pentru perechea
oxalacetat-glutamat:
COO

COO
CH2
C O

CH2
+

CH2
HC

COO

CH2
+

NH3

COOH
glutamat

oxalacetat

COO

COO
HC NH2

CH2
+

CH2
C O

COO

COOH
-cetoglutarat

aspartat

alanin transaminaza (ALT sau GPT), care catalizeaz selectiv reacia:

COO

COO
COO
C O
CH3
piruvat

COO

CH2
CH2
HC

NH3

COO
glutamat

CH NH2
CH3
alanin\

CH2
+

CH2
C O

COO
-cetoglutarat

127

Ambele transaminaze sunt eliberate n snge n urma lezrii esuturilor sau

prin moartea celulelor. n consecin dozarea activitii lor n plasm este utilizat n
diagnosticul bolilor de inim i ficat, cum ar fi infarctul miocardic i hepatita,
respectiv.
Prin transaminare se acumuleaz gruprile amino de la majoritatea
aminoacizilor pe acidul glutamic care, prin desaminare oxidativ va elibera NH 4+ i
acidul -cetoglutaric necesar unui nou proces de transaminare.
Dezaminarea oxidativ - pierderea gruprii amino sub form de
amoniac cu formarea unui cetoacid. Reacia este catalizat de D- sau Laminoacidoxidaze, active n ficatul i rinichiul animalelor superioare, a altor animale
i n microorganisme.
n acest proces, aminoacidul este dehidrogenat la iminoacid de ctre o
flavoprotein (Fp), apoi iminoacidul format, spontan, n prezena apei, pierde
amoniacul i trece n cetoacid.
Singura aminoacid-oxidaz cu activitate destul de mare este glutamat
dehidrogenaza (Glu-DH) distribuit n toate esuturile i n special n ficat. Enzima
din ficat este modificat alosteric de ATP, GTP, NADP + care o inhib i de ADP care
o activeaz. Poate lucra fie cu NAD+ fie cu NADP+.
L-glutamat-DH catalizeaz reacia:

-cetoglutarat

L-Glutamat
Glu-DH

H2O

NH4

NAD(P)+

NAD(P)H+H+

Reacia este reversibil i poate lucra fie spre formarea de amoniac din
glutamat (catabolism), fie fixarea lui pe alfa-cetoglutarat (biosinteza), funcie cu
importan n plante i bacterii, care sintetizeaz aminoacizi din glucoz i amoniac.

COO-

CH NH3

Gl-DH

CH2
CH2
COO Glutamat

NAD+(P)

NAD(P)++H+

COO-

COO-

NH

CH2

CH2
CH2

H2O

COO Iminoacid

+
NH4

CH2
COO -cetoglutarat

128

n lezarea funciei hepatice sau n ciroz cnd se dezvolt o comunicare

colateral ntre vena port i circulaia sistemic, sngele portal poate ocoli ficatul.
Amoniacul din intestin va trece n sngele sistemic unde va atinge nivele toxice..
La nivel renal, se fabric amoniac fie pentru meninerea echilibrului acidobazic, fie pentru conservarea cationilor. Aceast producie este crescut mult n
acidoz i sczut n alcaloz. Amoniacul se formeaz pe seama aminoacizilor
intracelulari, n particular glutamin, sub aciunea glutaminazei, conform reaciei:

O
C

H2O

NH2

NH3

(CH2)2

COOH
(CH2)2

+
CH NH3
_
COO

+
NH3
_
COO
glutamat
CH

glutamin\

Pe lng amoniacul format prin transaminare desaminare, cantiti

apreciabile de amoniac se formeaz sub aciunea bacteriilor intestinale, fie din
proteinele alimentare, fie din ureea prezent n fluidele secretate n tractul
gastrointestinal. Din intestin, amoniacul este absorbit de sngele venos portal care
conine cantiti mai mari de amoniac dect sngele sistemic.
Amoniacul produs constant n esuturi este continuu transformat n glutamat,
glutamin i uree, nct sngele care prsete ficatul este practic lipsit de amoniac
(10-20 g%). Acest lucru este esenial deoarece amoniacul este toxic pentru SNC.
Glutamin-sintetaza este o enzim mitocondrial prezent n cantiti mari n esutul
renal. Sinteza legturilor amidice se realizeaz cu consum de ATP, ceea ce face ca
echilibrul acestei reacii s fie deplasat spre sintez.
O
COO(CH2)2

CH NH3
-

COO
Glutamat

+ NH3

Glutamin-sintetaza
Mg++

ATP

ADP+Pa

NH2

(CH2)2

CH NH3
-

COO
Glutamin\

129

Acest mecanism este preponderent n creier. n ficat, calea principal de

ndeprtare a amoniacului este formarea ureei.
Glutamina se formeaz n creier i pe seama amoniacului din sngele
arterial. Cum sinteza glutaminei se realizeaz pe seama acidului glutamic
sintetizat prin transaminare din KG, atunci cnd concentraia amoniacului n
creier crete, cantitatea de glutamat necesar detoxifierii este insuficient i n
aceste condiii se sintetizeaz cantiti suplimentare de glutamat din cetoglutaratul format n ciclul Krebs, propriu creierului, ceea ce poate conduce
la scderea concentraiei intermediarilor din ciclu. Pentru reechilibrare, se
apeleaz la reacia de carboxilare a piruvatului la oxalacetat care, intrat n
ciclul Krebs va genera cantiti suplimentare de -cetoglutarat.
Calea principal de ndeprtare a amoniacului din organism este
convertirea acestuia la uree.
7.2.2.1.1. Ureogeneza
Un adult ce presteaz o activitate moderat consum zilnic aproximativ
300 g glucide, 100 g grsimi i 100 g proteine i excret 16,5 g azot; 95% azot
este eliminat la nivelul rinichiului, iar 5% prin materiile fecale.
Calea major de eliminare a azotului la om este ureea. Ureea este
sintetizat n ficat, trecut n snge i filtrat la rinichi.
Pentru sinteza unui mol de uree dintr-un mol de amoniac sunt necesari 3
moli de ATP (2 moli sunt trecui n ADP, iar un mol n AMP) i participarea a 5
enzime.
Etapele sintezei ureei:
1. Sinteza carbamoil-fosfatului
Condensarea amoniacului, bioxidului de carbon i fosfatului (din ATP)
cu formarea carbamoil-P este catalizat de carbamoil-P-sintetaz, prezent n
mitocondriile din ficatul tuturor animalelor ureolitice. n aceast reacie se
consum 2 moli de ATP pentru realizarea legturii amidice dintre NH 3 i CO 2 i
a legturii anhidridice mixte ntre gruparea carboxil i gruparea fosforic din
carbamoil-P. n plus este necesar prezena Mg ++ i a unui acid dicarboxilic, i
anume, N-acetilglutamic. Rolul exact al acestui aminoacid nu este cunoscut. Se
pare c prin legarea lui, se produc modificri comformaionale profunde n
molecula enzimei, prin care sunt demascate unele grupri sulfhidrilice i este
modificat afinitatea enzimei pentru ATP.
2. Sinteza citrulinei
Transferul restului carbamoil de pe carbamoil-P la ornitin, cu formarea
citrulinei este catalizat de ornitil-carbamoil-P-transferaza (OCT), o enzim

130

care se gsete n mitocondriile hepatice. Enzima este foarte specific pentru

ornitin i echilibrul este deplasat spre formarea citrulinei.
3. Sinteza argininosuccinatului catalizat de arginino-succinatsintetaza, utilizeaz energia furnizat de ATP, echilibrul reaciei fiind deplasat
spre sinteza argininosuccinatului.
4. Clivarea argininosuccinatului la arginin i fumarat.
Clivarea reversibil este catalizat de argininosuccinaz, o enzim
stereospecific identificat n mitocondriile de ficat i rinichi.
Fumaratul format poate fi convertit la oxalacetat prin aciunea
fumarazei i malatdehidrogenazei din ciclul Krebs, iar oxalacetatul prin
transaminare regenereaz aspartatul.
5. Clivarea argininei la ornitin i uree este reacia ce nchide ciclul
ureei regenernd ornitina, substratul pentru reacia 2.

Carbamoil-P-

CO2

1 sintetaza

+
+ NH
4

H2 N C

Mg ++
2ATP

O
O

P
O

2 ADP+Pa

NH3

CH2

carbamoil-P

(CH2 )2
CH
COO

OCT

Pa

NH3
-

Ornitin\
NH2
C

CH
COO

Argininosuccinat-sintetaza

CH2 NH
(CH2 )2

Mg ++
+

NH3

Citrulin\

COO -

NH

COO
CH

C NH CH
CH2 NH

CH2

(CH2 )2

COO

CH

ATP
AMP+PPa

COO

NH2

NH3

Argininosuccinat

COO -

NH2
CH2 NH
(CH2 )2
+

NH3

COO-

Arginin\

CH
-OOC

Fumarat

Aspartat

COO CH

CH2

CH

Arginino-

4 succinaza

NH

Arginaz\

NH2
C

NH2

H2 O
Ornitin\

Uree

131

Clivarea hidrolitic a restului de guanidin din arginin este catalizat de

arginaz, care este prezent n ficatul tuturor animalelor ureotelice. Cantiti foarte
mici de arginaz se ntlnesc i n alte esuturi rinichi, creier, glanda mamar, piele.
Arginaza nalt purificat (din ficat) este activat de Ca++ sau Mg++.
Ornitina i lisina sunt inhibitori competitivi pentru arginin.
Reglarea sintezei ureei

Sinteza carbamil-fosfatului asigur fluxul continuu de amoniac ntre

aminoacizi i uree. Cu toate c echilibrul reaciei Glu-DH este deplasat spre formarea
glutamatului, datorit faptului c ndeprtarea amoniacului se face prin carbamoil-P
i -cetoglutaratul rezultat este degradat de enzimele ciclului Krebs situate n
matricea mitocondrial, echilibrul este de fapt deplasat spre degradarea glutamatului.

132

Dintre cele 5 enzime care particip la acest proces, reacia arginazei este specific
acestei ci metabolice i deci specific animalelor ureotelice. Ea se gsete numai n ficat,
organ unde are loc sinteza ureei.
OCT este, de asemenea, o enzim strict hepatic i apariia ei n plasm va constitui
un indicator de lezare a parenchimului hepatic.
Cantiti mici de uree se pot forma i n creier i rinichi, dar fr semnificaie pentru
metabolismul amoniacului.
Anomalii genetice n ciclul ureei
Au fost descrise defecte pentru toate cele 5 enzime implicate n sinteza ureei:
1. Defectul de carbamil-fosfat-sintetaz, hiperamonemia tip I;
2. Defectul de OCT , hiperamonemia tip II;
3. Defectul de argininosuccinat-sintetaz , citrulinemie;
4. Defectul de argininosuccinaz, argininosuccinaturie;
5. Defectul de arginaz, hiperargininemie.
Oricare dintre aceste defecte se manifest prin simptome specifice intoxicaiei cu
amoniac a crui concentraie seric poate crete de la 10-20 g% la 500 g%.
Subiecii cu astfel de defecte genetice au o intoleran i o repulsie fa de
alimentele bogate n proteine.
Intoxicaia cu amoniac se manifest prin tremurturi ale membrelor, dificulti n
vorbire, tulburri de vedere, iar n cazuri severe, coma i moartea. Simptomele se instaleaz
atunci cnd nivelurile hepatice i cerebrale de amoniac sunt crescute. Intoxicaia cu amoniac
este considerat factor important n etiologia comei hepatice, motiv pentru care tratamentul,
n asemenea situaii, este orientat spre scderea amoniacului sanguin.
7.2.2.2. Catabolismul scheletului de carbon al aminoacizilor
n funcie de compuii ce pot fi sintetizai din produii finali ai cilor de degradare,
aminoacizii pot fi grupai n trei categorii:
1. aminoacizii glucogenici care sunt degradai la piruvat sau la intermediari din
ciclul Krebs, compui ce vor fi convertii la glucoz, via fosfoenolpiruvat
(alanina, arginina, acidul aspartic, cisteina, acidul glutamic, glicina, histidina,
Ala metionina, prolina, serina, treonina i valina);
hidroxiprolina,
Phe
2. aminoaciziGly
cetogenici care sunt catabolizai fie la
acetil-CoA, fie la acetoacetilLys
Cys
CoA, din care
cetonici (leucina);
Ser vor rezulta corpiIle
Trp
Glucoz\ 3. aminoaciziThr
glucogenici Leu
i cetogenici
care
pot
genera
Leu
Trp
Tyr att glucoz ct i corpi
cetonici (izoleucina, lisina, fenilalanina, triptofanul i tirozina).
Punctele
Krebs sunt acetil-CoA,
-cetoglutarat, succinil-CoA,
Acetoacetil-CoA
Fosfoenol
piruvat de intrare
Piruvatn ciclulAcetil-CoA
fumarat i oxalacetat:
Glucogenici
Asp
Asn
Phe
Tyr
Asp

Cetogenici

Oxalacetat

Gluco-, cetogenici

Citrat
Fumarat
Succinil-CoA
Ile

Met
Val

Alfa-Cetoglutarat

Glu
Gln
His
Pro
Arg

133

7.2.2.3. Metabolismul individual al unor aminoacizi

7.2.2.3.1. Metabolismul glicocolului
Glicocolul este un aminoacid neesenial care poate participa la numeroase
sinteze n organism:
- transformarea reversibil n serin prin intervenia serin, hidroximetiltransferazei, reacie la care particip n calitate de coenzim acidul folic
sub forma N5-N10-metilen-FH4. Reacia poate continua cu formarea final
a acidului piruvic;
- sinteza hemului, mpreun cu succinil-CoA;
- sinteza glutationului;
- sinteza creatinei;
- sinteza purinelor;
- sinteza hemului.
7.2.2.3.1.1. Creatinogeneza
Creatina se gsete n special n muchi i creier, att liber ct i fosforilat
(fosfocreatin). Sinteza ei se realizeaz cu participarea a trei aminoacizi, glicocolul,
arginina i metionina prin urmtoarele etape:
transamidinarea transferul gruprii amidinice din arginin pe glicocol
cu formarea glicociaminei (acid guanidin-acetic). Reacia are loc n rinichi dar nu n
ficat i muchi.
NH2
HN C
NH

CH2

+
NH3
CH2 COO

(CH2 )2
CH
COO

+
NH3
_

Arginin\

Glicocol

Arginin-glicintransamidinaza
(rinichi)

NH2
HN C
NH

Ornitin\

CH2

_
COO

Glicociamin\
(Guanidinacetat)

134

transmetilarea transferul gruprii metil de pe metionina activat (S-

adenozil-metionina, SAM) pe glicociamin. Reacia are loc n ficat concomitent cu

fosforilarea:
ADP

ATP
Guanidin acetatmetil-transferaza
(ficat)
S-Adenozilmetionin\

HN C

S-Adenozilhomocistein\

NH P
N

_
CH2 COO

CH3

creatin- P

NH C O
neenzimatic HN C
(mu[chi)
N H2C
Pa + H2O

CH3

creatinin\

n muchi, creatin-fosfatul previne depleia rapid de ATP, fiind un compus

macroergic ce asigur regenerarea ATP i creatinei atunci cnd muchiul este relaxat
i necesarul de ATP nu este prea mare. Fosforilarea creatinei este catalizat de
creatin-fosfo-kinaz (CPK), o enzim specific muscular, cu utilizare clinic n
detectarea afeciunilor musculare acute sau cronice.
Forma de excreie a creatinei este creatinina (anhidrida creatinei) care rezult
prin eliminarea neenzimatic a apei i fosfatului anorganic din creatin-fosfat.
Cantitatea de creatinin excretat prin urin n 24 de ore este constant pentru un
subiect dat, depinznd de masa muscular i nu de alimentaie.
Creterea creatinei n snge i eliminarea ei crescut prin urin se constat n
urmtoarele situaii:
- creterea produciei de creatin;
- distrugerea celulelor musculare;
- perturbarea captrii de ctre muchi a creatinei sintetizat n ficat.
Ultimele dou mecanisme se ntlnesc n miastenia grav, miotonia
congenital, miotonia atrofic, poliomielit, diverse miozite (inclusiv
dermatomiozite).
7.2.2.3.1.2. Biosinteza glutationului
Glutationul, un tripeptid cu grupare sulfhidric, este un important derivat al
aminoacizilor, avnd funcii fiziologice nsemnate.

135

_
OOC

O
CH
+

NH3

CH2

CH2 C

O
HN CH

C NH CH2

COO

CH2
SH

-Glutamil-cisteinil-Glicin\
Glutation (GSH)

Glutationul, prezent n celulele animale n concentraii nalte (aproximativ

5 mM) reprezint un important sistem redox, trecnd reversibil din forma redus
(GSH) n forma oxidat (GSSG), n care dou molecule de tripeptid se leag prin
legtur disulfidic.
-Glu-Cys-Gly
S
S
-Glu-Cys-Gly

GSSG este redus la GSH prin glutation-reductaz, o flavoprotein ce

utilizeaz NADPH ca surs de electroni. n cele mai multe celule raportul
GSH/GSSG este mai mare ca 500.
Glutationul ndeplinete unele funcii importante:
- Glutationul protejeaz proteinele celulare (enzime, hemoglobin) mpotriva
agenilor oxidani, jucnd rol cheie n degradarea peroxidului de hidrogen i
peroxizilor organici, compui toxici pentru organism.
Glutation peroxidaza (GSH-PX), enzima ce catalizeaz reacia, conine un
atom de seleniu. n centrul activ al enzimei se gsete un analog al cisteinei ce
conine seleniu n locul sulfului.
- Particip la transportul aminoacizilor n celule ;
- La nivelul ficatului GSH, compus nucleofil, particip la reacia de
conjugare prin care unele toxice electrofile (cum ar fi ageni cancerigeni)
sunt neutralizai prin aciunea unor glutation-S-transferaze conform
reaciei:
RH + GSH

GS-R + 2 H

Particip la biosinteza leucotrienelor.

Reacia de conjugare
Muli metabolii i medicamente hidrofobe sunt conjugate, n ficat, cu
glicocolul, fiind transformate n compui hidrosolubili care se pot elimina din
organism.

136

De exemplu, benzoatul, compus ce este utilizat pentru conservarea

alimentelor, n ficat se conjug cu glicocolul rezultnd acid hipuric.

Capacitatea ficatului de a converti benzoatul la acid hipuric este utlizat

pentru evaluarea funciei hepatice.
Acizii biliari n reacia cu glicina se transform n acizi biliari conjugai
(acizi biliari primari)caresub form de sruri biliare (ageni tensioactivi) intervin
n absorbia lipidelor.
7.2.2.3.3. Metabolismul metioninei
Metionina, aminoacid esenial, este metabolizat n organism pe calea
succinatului printr-o secven de reacii ce includ activarea metioninei la S-adenozil
metionin, urmat de formarea n faz intermediar a homocisteinei.
COO

Metionin-adenoziltransferaza

CH NH3
(CH2)2
S

ATP

CH3

Metionina

NH2
N
N

Pa+PPa

Hipermetioninuria

N
N
O

+
CH2 S

COO

CH2 CH2 CH
+
CH3
NH3

HO OH

S-Adenozilmetionin\
("metionin\ activat\";SAM)
COO

Transmetilaz\
Acceptor

Acceptor-CH3

CH

_
+
NH3

CH2
CH2
SH

Homocistein\

Succinil-CoA

137

Acceptorii de grupri metil din reacia 2 pot fi etanolamina pentru sinteza

colinei, noradrenalinei pentru sunteza adrenalinei, glicociamina pentru sinteza
creatinei etc.
Anomalii n metabolismul metioninei
Homocistinuria apare n cazul unor defecte motenite, din calea de
degradare a metioninei.
Zilnic se excret pn la 300 mg homocistein uneori nsoit de
S-adenozilmetionin i nivele crescute de metionin n plasm. Simptomele clinice
includ: tromboze, osteoporoz, dezlipire de retin i frecvent, ntrziere mintal.
Unele forme ale bolii rspund la tratamentul cu vitamina B6, altele nu.
Utilizarea unei diete srac n metionin i bogat n cistin, din primele luni
de via, previne instalarea modificrilor patologice.
7.2.2.3.4. Metabolismul fenilalaninei
Fenilalanina, aminoacid esenial, este convertit la tirozin prin aciunea
fenilalaninhidroxilazei, o oxidaz cu funcie mixt, prezent n ficat i absent n alte
esuturi.
NADPH+H+

NADP+
II
Tetrahidrobiopterin\
O2

Dihidrobiopterin\
I

CH2 CH COO

H2O

HO

CH2 CH COO

NH3
Fenilalanina

NH3
Fenilcetonuria
(PKU)

Tirozina

Reacia implic ncorporarea unui atom de oxigen n poziia para a

fenilalaninei, iar cel de al doilea atom de oxigen, n ap.
Agentul reductor este NADPH care cedeaz hidrogenii prin intermediul
tetrahidroxibiopterinei, compus asemntor acidului folic.
7.2.2.3.4.1. Anomalii n metabolismul fenilalaninei:
Fenilcetonuria prin defect de fenilalanin-hidroxilaz:
Fenilalanina ce nu poate fi hidroxilat la tirozin este desaminat la acid
fenilpiruvic i acesta prin reducere formeaz acid fenillactic, iar prin oxidare i

138

decarboxilare, acid fenilacetic. Acidul fenilacetic se elimin prin urin n principal

sub form conjugat cu glutamina.
Consecina major n fenilcetonurie este retardarea mintal.
Fenilcetonuria (PKU) este cea mai frecvent boal metabolic, avnd o
inciden de 1/10.000 nateri.
7.2.2.3.5. Metabolismul tirozinei
Degradarea tirozinei se face pe calea acetoacetil-CoA i acidului
fumaric.

OH

Alfa-KG

Glu
6

1
Tirozintransaminaz\

CH2
+
CH NH
3
COO

Ti rozi nemi a
ti p II

Tirozina

OH
7

O2
8

4
3CH2

vit.C,
Cu2+

Hidroxilaz\
(dioxigenaz\)

2CH O
1COO

p-hidroxifenil-piruvat

Fe2+

Al captonuri a
-OOC4 C5 H
+

7 COO

Fumarat
Glucoz\

4
OH

2 9 3
CH2 COO

Ti rozi nemi a
neonatal \

C 8
Fumaril-acetoacetat
C 8
7 CH2
7 CH2
Izomeraz\ 6
2 - 4 hidrolaz\
2 3
3
9
9
C CH2 COO
O C CH2 COO
5
- 4
COO
O
OOC
4

Maleilacetoacetat

6
H C

OH
7

Homogentizinc
(dihidroxifenilacetat)

O
Homogentizat
oxidaz\

CO2

Fumarilacetoacetat
2
8
9 3
CH3 C CH2 COOH
O

Acetilacetat

Ti rozi nemi a ti p I
Beta-cetotiolaz\
SCoA
CO
CHnosi
(ti rozi
s)
3

CoASH

CH3COO-

139

7.2.2.3.5.1.Anomalii n catabolismul tirozinei

- Alcaptonuria
Cea mai important etap n calea metabolic de degradare a
tirozinei
este
deschiderea
nucleului
aromatic
catalizat
de
homogentisinatoxidaza (reacia 3). Absenta ei conduce la acumularea
acidului homogentisinic n esuturi i eliminarea lui prin urin. Urina care
conine homogentisinat se nnegrete n prezena aerului prin transformare n
acid benzochinonacetic i polimerizarea acestuia la pigmentul brun
alcapton. Alcaptonuria a fost descris nc din 1649 i definit ca defect
enzimatic de Archibald Garrod n 1902.
Depunerea de alcapton n cartilagii duce la colorarea acestora n
brun (ocronoz) asociat clinic cu simptome de artroz.
Tirozina servete drept precursor pentru civa compui biologic activi:
catecolamine, melanine, hormoni tiroidieni.
L-Dopa

Tirozina

L-Dopa

Dopamina

Dopamina

Tiroxina

Norepinefrina

Melanina

Epinefrina

7.2.2.3.5.2.Biosinteza catecolaminelor
Celulele neuronale convertesc tirozina la norepinefrin i epinefrin prin
urmtoarea succesiune de reacii:
OH
1
CH2

+
CH NH3
_
COO
Tirozina

OH

Tirozinhidroxilaza

OH

Tetrahidrobiopterin\

CH2

Dihidrobiopterin\

DOPAdecarboxilaza
2
(PLP)
CO2

+
CH NH3
_
COO

OH

O2

CH OH

OH 4

CH2
NH2
Norepinefrina

OH
CH2
CH2
NH2
Dopamina

DOPA

Dopamin3 beta-oxidaza
(Cu2+ , O2 )

OH

Fenol-etanolaminaN-metil-transferaz\

S-Adenozilmetionina
S-Adenozilhomocisteina

OH
OH
CH OH
CH2 NH
Epinefrina

CH3

140

n medulosuprarenal, noradrenalina este metilat la azot cu

S-adenozilmetionin ca donor de grupri metil. Sinteza transmetilazei este
indus de glucocorticoizi i inhibat de epinefrin.
7.2.2.3.5.3.Sinteza melaninei are loc n melanocite pe calea DOPA,
reacia de hidroxilare fiind catalizat de o tirozin-hidroxilaz dependent de
cupru.Dopa este apoi oxidat la Dopa-chinon i n final prin polimerizare
trece n melanin.
- Albinismul reprezint un grup de sindroame clinice caracterizate
prin deficit de melanin, localizate la ochi i piele. Semnele clinice comune
pentru toate cele zece forme de albinism uman oculocutanat includ scderea
pigmentrii pielii i ochilor; diferenierea se bazeaz pe caracteristicile lor
clinice, biochimice, ultrastructurale sau genetice.
Enzima defectiv n albinism este tirozin-hidroxilaza din melatocite.
7.2.2.3.5.4.Biosinteza hormonilor tiroidieni
Glanda tiroid secret doi derivai derivai ai tirozinei: tiroxina sau
T 4 (3,3,5,5-tetraiodtironin) i T 3 (3,35-triiodtironin).
Hormonii se formeaz n celulele foliculare din glanda tiroid prin
iodurarea resturilor de tirozin din tiroglobulin.
Monoiodtirozina (MIT) i diiodtirozina (DIT) formai reacioneaz
pentru a forma T 3 i T 4 .
DIT

I
HO

CH2

MIT

CH
+
NH3

_
COO

HO

CH2

T3

CH COO
+
NH3

Tirozina
DIT

I
HO

CH2

I
DIT

CH
+
NH3

_
COO

I
HO

CH2

I
T4

CH COO
+
NH3

141

Tiroglobulina iodurat este pstrat n lumenul foliculilor tiroidieni

i hidrolizat pentru eliberarea T 3 i T 4 care trec n circulaie.
T 3 este forma activ fiind apt s se fixeze pe receptorii din nucleii
celulari. Aproximativ 2/3 din T 3 plasmatic rezult prin deiodurarea T 4 n
esuturile periferice.
7.2.2.3.6. Metabolismul triptofanului
Triptofanul se degradeaz pe calea kinurenin - acid antranilic, prin
care patru atomi de carbon sunt convertii la acetoacetil-CoA i doi, la
acetil-CoA. Calea este important deoarece servete att pentru degradare
ct i pentru convertirea triptofanului la nicotinamid.

O
CH2
N
H

CH COO
+
NH3

Triptofan oxigenaza
Fe
O2

COO

CH2 CH

NH3

NHCHO

N-Formil-kinurenina

Triptofan
O
Kinureninformilaza

C
NH2

_
HCOO

H2 O

COO

CH2 CH

Kinureninhidroxilaza
NADPH

NH3

O2

Kinurenina
O
C

COO

CH2 CH

NH2

NH3

OH

O2

OHC

NH2

Alanin\

H2O

OH

3-Hidroxi-antranilat

3-Hidroxi-kinurenin\

3-Hidroxi-antranilatoxidaza

COO

Kinureninaza
P5 P

_
COO

CH
C
HC
_
OOC
NH3

Vit.PP
(NAD^)
3%

2-Acroleil-3-aminofumarat

97%
CO2

Acetoacetil-CoA

142

Sub aciunea triptofan oxigenazei (triptofan-pirolaz) are loc clivarea

nucleului indolic prin oxidare rezultnd N-formil-kinurenina, care prin hidroliz
pierde radicalul formil i trece n kinurenin. Aceasta prin hidroxilare formeaz 3hidroxi-kinurenin.
Kinureninaza care ndeprteaz hidrolitic alanina din 3-hidroxi-kinurenin
este dependent de piridoxal-5-fosfat (P-5-P). n deficit de vitamina B 6, kinurenina
nu se mai degradeaz pe cale normal, ci este convertit la acid xanturenic, compus
identificat n urin.
O
C
NH2
OH

OH
CH2
CH
_
+ COO
NH3

+
NH4

COO

OH

Acid xanturenic

3-Hidroxi-kinurenin\

Triptofanul este precursor pentru NAD, serotonin i melatonin.

7.2.2.3.6.1.Biosinteza nicotinamidei (vitamina PP)
Biosinteza vitaminei PP este comun cu calea de degradare pn la acidul 2acroleil-3-amino fumaric. Mai departe 97% din compus se degradeaz la acetil-CoA i
numai 3% este convertit la acid nicotinic. Din 60 mg triptofan se sintetizeaz 1 mg acid
nicotinic.
Deficitul de vitamin B6 afecteaz biosinteza biosinteza vitaminei PP prin
blocarea aciunii kinureninazei, condiie ce favorizeaz pelagra.
7.2.2.3.6.2.Biosinteza serotoninei
Serotonina este sintetizat n neuroni, n glanda epifiz i n celulele
cromafine din tractul gastrointestinal.

CH2
N
H

CH

COOH

NH2

Triptofanhidroxilaza
O

NADPH+H+

Triptofan
HO

CO2

CH2
N
H

Serotonin\

HO

CH2
N
H

NADP+
CH2 NH2

CH
NH2

5-Hidroxi-triptofan

COOH

143

Triptofan-hidroxilaza este etapa limitant a sintezei necesitnd

tetrahidrobiopterin.
Decarboxilarea este realizat de aceeai enzim care decarboxileaz Dopa la
dopamin.
Serotonina este stocat n granule asociat cu ATP. Serotonina (enteramina
sau trombocitina) este vasoconstrictor i stimulator al musculaturii netede. Ea
particip la reglarea activitii nervoase superioare.
Catabolismul serotoninei duce la formarea de derivai indolici care sunt
excretai prin urin sub form de sulfo i glucuronoconjugai.

Serotonina

Monoaminoxidaz\ (MAO)
O2

HO
N
H

NH3

CH3

CH2 COOH

Acid 5-OH-indol-acetic

H3CO

CH2 COOH
N
H

Acid 5-Metoxi-indolacetic

7.2.2.3.6.3.Biosinteza melatoninei
Melatonina este un hormon produs de glanda epifiz care are efecte asupra
sistemului hipotalamus-hipofiz.
Se formeaz prin acetilarea la azot a serotoninei, urmat de metilarea la
gruparea OH din poziia 5.
HO

Trp
CO 2

HO

CH2 CH2 NH2

N
H
serotonin\

CH2
N
H

Acetil CoA
CoA

NH
C O
CH3

5-HO,N-acetiltriptamin\
SAM
SAH
H3CO

CH2
N
H

NH
C O
CH3

Melatonin\

144

7.2.2.3.6.4.Anomalii n metabolismul triptofanului

- Sindromul carcinoid (argenta carcinoma) este produs de o proliferare
benign sau malign a celulelor argentofine (care produc serotonin) din intestin i se
caracterizeaz prin producerea de cantiti mari de serotonin.
Sindromul este considerat ca o anomalie n metabolismul triptofanului
deoarece o cantitate mai mare de triptofan este metabolizat pe calea hidroxiindolului.
8. METABOLISMUL NUCLEOTIDELOR PURINICE SI PIRIMIDINICE
Nucleoproteinele sunt heteroproteine formate din acizi nucleici
(polinucleotide) ataai la histone sau protamine.
Nucleotidele sunt componeni eseniali ai celulei, fcnd parte din
componena multor biomolecule fundamentale i participnd la numeroase
procese metabolice. Astfel, nucleotidele intr n structura acizilor nucleici
ARN i ADN, n componena unor coenzime (NAD(P) + , FAD, CoASH),
particip ca donori de energie n reaciile metabolice (ATP), ca transportori de
intermediari n reaciile de biosintez (CDP, UDP) etc.
Fondul metabolic de nucleotide necesar celulei poate fi asigurat prin
dou procese: sinteza de novo a nucleotidelor i reutilizarea bazelor azotate
i a nucleotidelor ce rezult prin degradarea celular a acizilor nucleici.
8.1. Metabolismul purinnucleotidelor
8.1.1. Biosinteza purinnucleotidelor
8.1.1.1 Biosinteza de novo a purinnucleotidelor
Pentru biosinteza nucleului purinic, doi atomi de azot, N 3 i N 9 , provin
din gruparea amidic ai glutaminei, N 1 , din aspartat, azotul N 7 mpreun cu C 4
i C 5 , din glicin, C 2 i C 8 din formiat, sub form de N 10 -formil-FH 4 i
respectiv N 5 , N 10 -metenil-FH 4 , iar C 6 din CO 2.
CO2
C
N1 6 5 C

Aspartat

C
N10-Formil-FH

Glicin\
N
7

N
H

Glutamin\

8C

N5-N10-Metenil-FH4
N

145

Cile de sintez ale acizilor adenilic (AMP) i guanilic (GMP) sunt

comune de la riboz-5-P (R-5P) pn la acid inozinic.

O H2C
H

OH

H
H
OH
OH

PRPPPO H2C
sintetaza
O H
H
H
Mg2+
O
H
ATP
AMP
OH OH
1

R5P

Amidotransferaza

P P Gln

PO H2C
H

PPa Glu

OH

NH2
3
H
H
OH

5'-FosfoRibozil-Amino

PRPP
O

..........................

11

HN
N

AMP

ADP

ATP

GMP

GDP

GTP

R5P
Acid inozinic

n calea de sintez a nucleotidelor, mai multe etape pot fi inhibate specific

de unii ageni terapeutici: azaserina, un antagonist al glutaminei, diazonorleucina, 6mercaptopurinele i acidul micofenolic.
Reglarea sintezei purinnucleotidelor se exercit n principal la nivelul
primei reacii, catalizat de PRPP-fosforibozil-pirofosfat a crei activitate depinde
att de capacitatea de utilizare a ribozei-5P (R-5P) (ce depinde de concentraia R5P) ct i de concentraia purin-nucleotidelor care acioneaz ca reglatori alosterici.
Activitatea ei este reglat prin mecanism feed-back de ctre produii finali: AMP,
ADP, GMP i GDP.
Sinteza de novo a purinnucleotidelor are loc n ficat, organ care reprezint
furnizorul de baze purinice i nucleozide pentru esuturile ce nu au capacitatea de
sintez sau au numai calea de reutilizare a lor.
8.1.1.2. Reutilizarea purinelor (Purine Salvage Pathways) se petrece prin
dou mecanisme generale:
Mecanismul principal const n fosforilarea bazelor purinice libere, ce
necesit PRPP, proces realizat de dou enzime: prima, adeninfosforibozil-transferaza
(APRT), fosforileaz adenina cu PRPP pentru a forma AMP.
APRT

Adenina
PRPP

AMP
PPa

146

A doua enzim, hipoxantin-guanin-fosforibozil-transferaza (HGPRT), mult

mai activ, catalizeaz fosforilarea hipoxantinei i guaninei:

PPa

PRPP
Hipoxantina

IMP
HGPRT

Guanina

GMP
PPa

PRPP

Absena total sau aproape total a HGPRT determin sindromul LESCHNYHAN, care se manifest prin tulburri neurologice foarte grave, deficien
mental, agresivitate, hiperuricemie, tendin la automutilare.
Reutilizarea ribonucleozidelor este realizat la om numai de
adenozinkinaz, enzim ce nu este capabil s fosforileze guanozina i inozima.

Adenozina

Adenozin-kinaza
ATP

AMP

ADP

Spre deosebire de aceasta, deoxicitidinkinaza fosforileaz att deoxicitidina,

ct i deoxiadenozina i deoxiguanozina la dCMP, dAMP i dGMP.
8.1.1.3. Biosinteza deoxiribonucleotidelor se poate realiza prin reducerea
direct la C2 al ribozei. Reacia se petrece dup ce au fost sintetizai
nucleoziddifosfaii purinici sau pirimidinici, numai atunci cnd are loc sinteza de
ADN pentru diviziunea celular.

147

8.1.2. Catabolismul purinnucleotidelor

Produsul final al catabolismului purinnucleotidelor, n organismul uman, este
acidul uric. Peste 99% din acidul uric se formeaz din inozina i guanozina ce nu sunt
fosforilate de purinnucleotid fosforilaz din calea de reutilizare.
Guanina i hipoxantina ce rezult din nucleozidele respective prin pierderea
gruprii amino i a ribozei-1-P (R-1-P) sunt convertite la acid uric pe calea xantinei
prin reacii catalizate de guanaz i xantinoxidaz.
NH2
N

N
5'
HOH2C

Adenozindeaminaz\

NH3

HOH2C

N
H

Pa

R1P

Hipoxantina

Purinnucleotidfosforilaza
R1P

xantinoxidaza
(Mo,Fe)

O2

Inozina

Pa
O

HO OH

O
Purin-ribonucleotidfosforilaza
HN

1'

H2N

HN

HOH2C

HO OH
Adenozina

HN

O
HN
H2N

O
N

Guanaza

N
H

NH3

Guanina

HN
O

N
H

Xantina

HO OH
Guanozina

O mic cantitate de acid uric se formeaz prin degradarea acizilor

nucleici sub aciunea florei microbiene intestinale de unde este absorbit i trecut
n snge.
Primatele inferioare i alte animale posed o enzim, numit uricaz,
care hidrolizeaz acidul uric la alantoin, compus mult mai solubil.
Aciunea antioxidant a acidului uric la om se exercit prin trecerea
neenzimatic la alantoin. Se consider c uratul ar nlocui acidul ascorbic pe
care primatele i omul nu-l pot sintetiza, el fiind aproximativ la fel de eficace ca
i vitamina C.
Acidul uric este un acid destul de tare care la pH fiziologic se gsete
sub form de monourat de Na.

148

Acidul uric este foarte puin solubil la pH acid. Sarea sa de Na este mai
solubil (7 mg% dl ser la 37 0C). Concentraia plasmatic de acid uric este de
aproximativ 6 mg% dL.
La nivelul tubilor renali, acidul uric este iniial reabsorbit din filtratul
glomerular, fiind apoi eliminat prin secreie tubular.
Afeciunea caracteristic dereglrii metabolismului purinnucleotidelor
este guta, o maladie destul de rspndit, caracterizat prin hiperuricemie
7 mg % dL ser.
Creterea concentraiei de acid uric duce la depunerea de cristale de acid
uric n articulaii (artrita gutoas), n rinichi (nefrolitiaza uratic) i n alte
esuturi sub form de tofi.
Hiperuricemia poate fi cauzat de un consum exagerat de carne sau de o
tulburare genetic n sinteza ribonucleotidelor.
Guta metabolic primar. Cauza poate fi activitatea crescut a
PRPP-sintetazei, fie insuficiena mecanismelor de reglare a sintezei (datorit
rezistenei PRPP-amino transferazei la inhibiia feed-back), fie perturbrii
reutilizrii purinelor.
n unele cazuri, producia de urai este normal dar exist un defect
nnscut n mecanismele de secreie tubular a acidului uric guta primar
renal.
Guta metabolic secundar este asociat unor boli ca urmare a unui
metabolism intens al acizilor nucleici cum ar fi leucemii, iradierea cu raze X,
defect de glucoz-6-fosfataz (glicogenoza de tip I sau boala von Gierke).
Cele mai bune rezultate n tratarea gutei se obin prin administrarea
allopurinolului, inhibitor competitiv pentru xantin-oxidaz (XO).
O
HN

N
N

N
H

Allopurinol

149

8.2. Metabolismul pirimidinnucleotidelor

8.2.1. Biosinteza de novo a pirimidin nucleotidelor
Calea de sintez a pirimidinnucleotidelor se deosebete de a
purinnucleotidelor prin faptul c D-riboza se ataeaz dup ce inelul de
pirimidin a fost sintetizat.
Sinteza este iniiat prin
formarea
carbamoil-P-ului
din
glutamin, ATP i CO 2, reacie ce are
Gln
C
loc n citoplasm.
6
N1
C
Asp
O serie de compui ce pot
5
inhiba
sinteza
nucleotidelor
2
4
C
C
pirimidinice sunt utilizai ca ageni
3
N
terapeutici
n
tratamentul
CO2
neoplasmului, avnd n vedere
turnoverul ridicat al nucleotidelor n
esuturile canceroase.
Astfel, 5-fluoruracilul, analog structural al uracilului, reacioneaz direct
cu PRPP, formnd 5-fluoruridin-5-monofosfat (F-UMP) sau poate fi mai nti
convertit la fluoruridin i apoi fosforilat la F-UMP.
Reglarea biosintezei pirimidinnucleotidelor. Primele dou enzime
implicate n biosinteza pirimidinnucleotidelor sunt modulate alosteric de UTP,
nucleotide purinice, fosforibozil-pirofosfat (PRP) i CTP.
Calea de reutilizare a pirimidinnucleotidelor
Reutilizarea pirimidinelor libere este puin important n celulele
animale. n schimb au fost identificate enzime active ce pot converti pirimidinribonucleozidele la nucleotidele respective.
Deoarece produii de catabolism ai pirimidinelor sunt foarte solubili n ap,
n foarte puine situaii poate fi evideniat o hiperproducie de pirimidine.
Tulburri n biosinteza pirimidinnucleotidelor
Aciduria orotic ereditar tip I este determinat de deficiena a dou
enzime: orotidil-fosforibozil-transferaza i orotidil-decarboxilaza.
Aciduria orotic ereditar tip II este determinat numai de defectul de
orotidil-decarboxilaz
Manifestrile clinice constau ntr-o anemie sever, rezistent la vitamina B 12,
acid folic, vitamin B6 i vitamin C. Ca urmare a dublului blocaj are loc o acumulare
masiv de acid orotic care poate ajunge n urin pn la 1000 ori valoarea normal.
Ambele tipuri rspund la tratamentul oral cu uridin sau UMP i CMP.
8.2.2. Catabolismul pirimidinnucleotidelor are loc n principal n ficat,
rezultnd o serie de produi foarte solubili: CO2 i NH3, -alanin i acid aminoizobutiric (BAIB).

150

Excreia de acid BAIB crete n leucemie i dup iradierea cu raze X, datorit

distruciei de ADN.

9. METABOLISMUL CROMOPROTEINELOR
Cromoproteinele porfirinice sunt formate dintr-o protein i o grupare
prostetic, reprezentat de o structur porfirinic.
Porfirinele sunt compui ciclici, formai din patru nuclee pirolice unite
prin legturi metenil (-C). O proprietate caracteristic a porfirinelor este
formarea de complexe cu ionii metalici, care se leag de atomii de azot din
nucleele pirolice.
Printre porfirinele naturale care ndeplinesc funcii biologice importante
se numr: hemoglobina, mioglobina, citocromii, catalaza, peroxidazele,
triptofan-pirolaza, clorofila etc., hemoglobina fiind porfirina major din
organism.
9.1. Biosinteza hemoglobinei
_
_
Sinteza
hemoglobinei are loc n celuleleCOO
eritropoietice din mduva
COO
+
osoas, ficat i splin.H N
CH2
3
-ALA-sintaz\
CH
2 Biosinteza
hemului1se realizeaz din succinil-CoA
i glicocol.
+
; ntr-o
(P5P)
CH
CH
2
2
prim CH
reacie,
n mitocondrie,
2
_ are loc condensarea succinil-CoA cu glicocolul
COO
C concomitent
CH2 NH2 cu eliminarea
CO2
sub aciunea
-aminolevulinat-sintazei (ALA-sintaza)
C SCoA
HSCoA
CO2 i Oformarea acidului -aminolevulinic (ALA). Reacia
necesit vitamina B 6
O
pentru activarea glicinei (este posibil ca glicina sAcid-Am
se fixeze
la piridoxal-5-fosfat
inolevulinic
(ALA)
Glicocol
Succinil-CoA
(P-5-P) prin legtur de baz Schiff). Activitatea -ALA controleaz ntreaga
sintez. n continuare, prin condensarea a dou molecule de acid -amino_
levulinic (reacia 2), se formeaz un nucleu pirolic, porfobilinogen
COO (PBG).
_ de porfobilinogen (reacia_ 3) se formeaz un
Din_ patru molecule
COO
COO CH2
COO
tetrapirol linear care rmne legat de enzim.
(CH2se
)2 ciclizeaz, prin pierderea
CH2
CH
CH2
Tetrapirolul
linear
gruprii
amino la
2
2 ALA-dehidrataz\
C
uroporfirinogen
III,
n
care
aranjamentul
lanului
este
asimetric
(reacia
4).
+
O
C H2
C
C
2 H2enzime,
O
ReaciaC seOpetrece prin
cooperarea a dou
uroporfirinogen sintaza i
H CH
C
CH
cosintaza.
H
N
N
CH
CH2nucleele pirolice pentru a
2
Rolul
cosintazei este de a izomeriza unul din
H
se forma
formeaz
i mici cantiti de
NHuroporfirinogen
H III. n aceast reacie se NH
2
2
izomer simetric, uroporfirinogen I, biologic inactiv.
-ALA

4PBG

-ALA

Uroporfibilinogen
3
sintaz\
3NH3

Porfobilinogen (PBG)

A
H2N CH2

P
N
H

CH2

P
N
H

Tetrapirol liniar

CH2

P
N
H

CH2

P
N
H

151

A
Uroporfirinogen
M
Coproporfirinogensintaz\
C
6 oxidaza
^
A H2
4 cosintaz\
PN H
2 CO2 4 H2
P
NH3
H2C

P
N
CH
NNH H2N A
H
HNN
H
N
C H2 P
P
M

M
M Protoporfirinogen- M
7 oxidaza
Uroporfirinogen- M
5V decarboxilaza
P
6H

4 CO2

IX
P Protoporfirinogen
A
Uroporfirinogen III
M
V
M
8

Ferochelataz\
Fe2^

V
M

Hem

NHN HN
H
NH NHN
H
N
P
M

Coproporfirinogen III
M

Protoporfirina IX
P
M

N Fe2+ N
P

A - acid acetic
P - acid propionic
M - metil
V - vi

M
V

152

Succinil-CoA ^Glicocol
ALA-sintaza

Prin decarboxilarea resturilor de acid acetic din uroporfirinogen III se

ALA
ajunge la coproporfirinogen
III (reacia 5), apoi prin decarboxilarea i
ALA-dehidrataza
2
dehidrogenarea
a dou resturi de acid propionic (reacia 6) protoporfirinogenul
IX, sub aciunea porfirinogen-oxidazei (reacia 7) se formeaz protoporfirina IX
Porfobilinogen (PBG)
care fixeaz Fe 2 sub aciunea hem-sintetazei (ferochelatazei) (reacia 8) se
PBG^
3 Uroporfirinogen I - I Porfiria acut\ intermitent\, PAI (hepatic\)
ajunge
la hem. Ultimele dou reacii, formarea protoporfirineiurin\:
IX uroporfirinogen^
i a hemului,
sintaza
dureri abdominale, sim2
ptome neuropsihice
au loc n mitocondrie, ionul de Fe necesar activitii ferochelatazei este
Tetrapirol
transportat n plasm
deliniar
transferin, o protein care leag doi ioni ferici.
Reglarea sintezei hemoglobinei
4 Uroporfirinogen III- II Porfiria eritropoietic\ congenital\ (eritropoietic\) urin\: PBGf\r\ fotosensibilitateeste reglat n principal prin uroporfirinogen^
Activitatea -ALA-sintetazei
inhibiia feedcosintaza
back exercitat
de hem care
represeaz sinteza enzimei.
Uroporfirinog
en III
UroporfirinogenIII Porfiria cutanat\ tardiv\ (hepatic\)
9.1.1.Tulburrile
metabolismului hemului.
decarboxilaza
Fotosensibilitate

urin\: uroporfirin\^

Porfirii
PBGPorfiriile constituie un grup heterogen de afeciuni, caracterizate prin
III
excreia de Coproporfirinog
porfirine sauenprecursori
porfirinici. Unele dintre
porfirii sunt
urin\: uroporfirinogen^
IV Coproporfiria ereditar\ (hepatic\)
motenite,
altele dobndite.
PBG^
6 CoproporfirinogenFotosensibilitate,
dureri
abdom
inale,
Porfiriile
se
clasific
n
porfirii
eritropoietice,
hepatice,
eritropoietice
i
fecale:
coproporfirinogen^
oxidaza
deregl\ri neuropsihice
hepatice, n funcie de organul cel mai afectat.
entipuri
III
Au fostProtoporfirinog
descrise ase
de porfirii datorate defectelor enzimelor de la
urin\: PBG^
V
Porfiria
m
ixt\
(hepatic\)
etapa
3-8.
7 ProtoporfirinogenFotosensibilitate, dureri abdominale,
deregl\ri neuropsihice

oxidaza

uroporfirinogen^
fecale: protoporfirinogen^

Protoporfirina III (IX)

8

Ferochelataza
Fe2^

VI Protoporfiria (eritropoietic\)
Fotosensibilitate

Hem
Protein\
Hemoprotein\

fecale: protoporfirin\^
eritrocite: protoporfirin\^

153

9.2. Degradarea hemoglobinei (Bilirubinogenez)

Bilirubina se formeaz n organism prin desfacerea oxidativ a inelului
porfirinic din Hb i alte hemoproteine. Locul de formare al bilirubinei este
reprezentat de celulele sitemului reticuloendotelial din splin, ficat (celulele
Kupfer), ganglioni limfatici i macrofagele din diverse esuturi.
Sursa principal de bilirubin este Hb hematiilor mbtrnite.
Mecanismul enzimatic al formrii bilirubinei implic mai nti aciunea
unui sistem enzimatic microsomal hemoxigenaza microsomal, care n
prezena oxigenului molecular i a NADPH desface nucleul porfirinic din hem
cu eliberarea Fe, C sub form de CO i biliverdin. n activarea O 2 intervine
citocromul P 450 , iar pentru transferul H de pe NADPH intervine o flavoprotein.

154

Fe este preluat de feritin n vederea reutilizrii lui n resinteza

hemoproteinelor. Feritina poate stoca pn la 4.500 Fe 3+/molecul.
Biliverdina, compus colorat intens n verde, este n continuare redus
sub aciunea biliverdin-reductazei la bilirubin. Alturi de bilirubin se
formeaz i mici cantiti de compui mono- i dipirolici bilifuxina i
mezobilifuxina.
Viteza de formare a bilirubinei depinde de activitatea hemoxigenazei
microsomale, care este etapa limitant a procesului. Biliverdin-reductaza este
totdeauna n exces, de aceea nu se acumuleaz biliverdin (pigment verde).

Bilirubina format n celulele sitemului reticulo-endotelial este un

pigment galben, insolubil n ap. Fiind liposolubil, poate ptrunde cu uurin
prin membranele celulare de natur lipoproteic.
Bilirubina difuzeaz din celule n snge unde se fixeaz pe albumin,
formnd fracia plasmatic a bilirubinei cunoscut sub denumirea de bilirubin
indirect sau neconjugat.
Prin fixarea pe albuminele serice, bilirubina este reinut n lumenul
vaselor i transportat la ficat. Aici, datorit fenestraiilor largi ale capilarelor
sinusoidale, bilirubina este preluat de pe albumin de ctre celulele hepatice.
Procesul de captare este facilitat de existena unor proteine transportoare
ligandine proteina I i proteina Z. Datorit faptului c bilirubina este
liposolubil, ea ar putea difuza prin membrana hepatocitului i s se rentoarc n
plasm. Acest proces este blocat n momentul n care bilirubina este conjugat cu
acidul glicuronic. Conjugarea este catalizat de bilirubin-glucurono-transferaza,
enzim care particip la reacie sub form activ, localizat la nivelul

155

microzomilor din hepatocit. Acidul glucuronic, sintetizat din glucoz se

activeaz la acid UDP-glucuronic (UDPGA).

Formarea bilirubin-diglucuronidului poate avea loc i n regiunea

canalicular biliar a membranei hepatocitare printr-o UDP-glucuroniltransferaz similar.
O mic parte din bilirubin rmne sub form de monoglucuronid. Prin
conjugare bilirubina devine hidrosolubil, fapt ce favorizeaz eliminarea ei prin
bil i meninerea ei n soluie pe cile biliare intra- i extrahepatice.
Secreia bilei n canaliculele biliare este un proces biologic activ,
energodependent i saturabil. Preluarea bilirubinei conjugate se realizeaz tot
prin participarea unei proteine acceptoare specifice. Eliminarea bilirubinei n
bil, mai ales curgerea ei prin cile biliare, depinde i de fluxul apos al bilei.
Un adult sntos elimin zilnic prin bil 200 300 mg bilirubin (1,0-1,2
mg/dL ser). n poriunea final a ileonului i mai ales n colon are loc un proces
de hidroliz a bilirubinei conjugate sub aciunea unei -glicuronidaze bacteriene
i n acelai timp are loc o reducere a bilirubinei rezultnd o serie de compui
tetrapirolici incolori urobilinogeni (stercobilinogeni). Urobilinogenul este
forma de eliminare care n contact cu aerul este oxidat la urobilin
(stercobilin), colorat.

156

La nivelul colonului, o mic cantitate de urobilinogen se reabsoarbe, este

trecut n circulaie, ajunge la ficat i excretat n bil, proces dependent de
energie (circuit enterohepatic). O mic parte (0-4 mg/24h) scap n vena
suprahepatic i apare n urin, unde prin oxidare trece n urobilin. Cantitile
acestea de urobilinogen nu pot fi decelate cu reactiv Erlich.
n cazul formrii de bilirubin n exces (icter hemolitic) i a eliminrii
crescute de pigmeni biliari n intestin se formeaz cantiti mari de urobilinogen
care pot depi capacitatea de captare i excreie a hepatocitelor i n consecin,
apar n urin cantiti detectabile. Urobilinogenuria apare i n caz de afeciuni
hepatocelulare, cnd mecanismul activ de captare i transport a urobilinogenului
de ctre hepatocite este perturbat. Creteri ale eliminrilor urinare de
urobilinogen au loc i n cazuri de proliferare microbian intestinal, n unele
cazuri de constipaie, cnd prin stagnarea coninutului intestinal, crete
posibilitatea de absorbie a urobilinogenului din colon.
Cantitatea maxim de urobilinogen urinar se depisteaz ntre orele 14-16
probabil datorit faptului c dup masa de prnz se ajunge la concentraia cea
mai mare de bil n intestin.
Eliminarea urinar de urobilinogen se face prin filtrare glomerular i
secreie tubular. Se poate spune deci c urobilinogenuria depinde de cantitatea
absorbit n intestin, de funcia hepatic i de funcia renal.
Bilirubina direct i indirect
Msurarea bilirubinei directe i indirecte servete pentru stabilirea naturii
icterului.
- Icter prehepatic (icter hemolitic) - n unele boli sau n intoxicaii se
produce degradarea unor cantiti mai mari de eritrocite i deci eliberarea unei
cantiti mai mari de hemoglobin. Bilirubina indirect care se formeaz n
exces, transportat la ficat depete capacitatea de conjugare a celulei hepatice.
Rezultatul este creterea concentraiei de bilirubin n plasm, nsoit de

157

creterea produciei de urobilinogen, ce apare n cantiti mari n urin. Astfel de

situaii se ntlnesc i la nou-nscuii cu incompatibilitate de Rh. De obicei aceti
copii sunt prematuri i pe lng problemele hemolitice de cele mai multe ori
prezint i deficit de enzime necesare pentru glucuronoconjugare. Creterea
bilirubinei poate depi de 16-20 ori valoarea normal i este n principal
indirect.
- Icter hepatic. n bolile difuze ale ficatului, cum ar fi hepatitele i
cirozele, celulele hepatice pierd capacitatea de captare a bilirubinei din snge i
capacitatea de conjugare i de aceea nivelele bilirubinei sunt de obicei crescute,
cu creterea fraciunii indirecte, dar uneori poate crete i bilirubina direct
deoarece lezarea celulei hepatice permite totui trecerea glucuronidului n
circulaie. Urobilinogenul este crescut.
- Icter posthepatic (icter prin obstrucie) Blocarea cilor biliare
mpiedic bilirubina de a prsi celula hepatic. Consecina primar este
diminuarea formrii urobilinogenului i astfel absena lui n urin. Fecalele sunt
decolorate din cauza lipsei stercobilinei. Formarea continu a bilirubinei duce la
creterea bilirubinei totale n ser (la nceput, bilirubina direct, care apare i n
urin), ducnd la apariia unui pigment brun n urin. n snge se va gsi att
bilirubin direct ct i indirect.
Bilirubina care apare n urin este n cea mai mare parte direct, probabil
din cauza faptului c n urin se excret numai bilirubin conjugat, mai
solubil. De subliniat c bilirubina n urin apare atunci cnd exist o cretere a
bilirubinei directe n ser.
Dozarea bilirubinei totale este considerat util i n detectarea unui icter
latent, cnd valorile sunt cuprinse ntre 1,5-2 mg/dL ser.
Hiperbilirubinemia poate fi ntlnit i n alte stri de boal care implic
hemoliza, cum ar fi bolile infecioase, anemia pernicioas, sau hemoragiile.
Evoluia unui icter manifest poate fi urmrit prin dozri repetate ale
bilirubinei n ser:
- creterea concentraiei bilirubinei n ser este semn nefavorabil,
- scderea progresiv a bilirubinei serice indic o ameliorare a bolii
hepatice sau a obstruciei cilor biliare.

158

Abrevieri folosite in text

A = Adenin
-AA = Amino acid
ACAT = Acil-CoA: Colesterol-acil-transferaza
ACP = Proteina transportoare de acil (Acyl carrier protein)
ACTH = Corticotropin
ADN = Acizi deoxiribonulcleic
ADH = Alcool dehidrogenaz
ADP = Acid adenozin difosforic
AGL = Acizi grai liberi
Ala = Alanin
ALT (GPT) = Alanin transaminaz
AMP = Acid adenozin monofosforic
AMPC = Adenozin monofosfatul ciclic (35-AMP)
APRT = Adenozin-fosforibozil transferaz
Arg = Arginin

159

ARN = Acizi ribonulcleic

ARNm = ARN mesager
ARNr = ARN ribozomal
ARNt = ARN de transfer
AST (GOT ) = Aspartat transaminaz
Asn = Asparagin
Asp = Acid aspartic
ATP = Acid adenozin trifosforic
BAIB = Acid aminoizobutiric
C = Citozin
CBP = Proteina care leag calciul (Calcium binding protein )
CDP = Citidin difosfat
Cit. = Citocrom
CoA (CoASH) = Coenzima A
CoQ = Coenzima Q (ubichinon)
CPK (CK) = Creatin fosfo kinaz
CTP = Citidin trifosfat
Cys = Cistein
1,25-(OH)2-D3 = Calcitriol (1,25 dihidroxi D3)
DIT = Diiodotirozin
DOPA = Dihidroxifenilalanin
1,3 DPG = 1,3 Difosfoglicerat
DHAP = Dihidroxiaceton fosfat
F1,6 DP = Fructoz 1,6 difosfat
F1,6 DP-aza = Fructoz 1,6 difosfataz
F6P = Fructoz-6-fosfat
F6P-aza = Fructoza-6-fosfataz
FAD = Flavin adenin dinucleotidul
FADH2 = Flavin adenin dinucleotidul forma redus
FFK = Fosfo-fructo kinaz
FH4 = Acid tetrahidrofolic
FMN = Flavin adenin mononucleotid
G = Guanin
GA3P = Gliceraldehid-3 fosfat
GA3-PDH = Gliceraldehid-3 fosfat dihidrogenaz
G6P = Glocoza-6-fosfat
G6P aza = Glocoz-6-fosfataz
GDP = Guanozin difosfat
Glu-DH = Glutamat dehidrogenaz
Gln = Glutamin
Glu = Acid glutamic

160

Gla = Acid -carboxi glutamic

Gly = glicin
GK = glucokinaz
GOT (AST) = Glutamic oxalacetic transaminaz
GPT (ALT) = Glutamic piruvic transaminaz
GSH = Glutation (forma redus)
GSSG = Glutation (forma oxidat)
GSH -Px= Glutation peroxidaz
GTP = Guanozin trifosfat
Hb = Hemoglobin
HDL = Lipoproteine cu densitate mare
HGPRT = Hipoxantin-fosforibozil-transferaz
HK = Hexokinaz
HMG-CoA = Hidroxi-metil-glutaril-CoA
Hyl = Hidroxilizin
Hyp = Hidroxiprolin
Hys = Histidin
ICDH = Izocitrat dehidrogenaz
Ile = Izoleucin
IgA = Imunoglobulina A
IgD = Imunoglobulina D
IgE = Imunoglobulina E
IgG = Imunoglobulina G
IgM = Imunoglobulina M
-KA = Ceto acid
-KG = Acid ceto glutaric
-KGDH = Cetoglutarat dehidrogenaz
LCAT = Lecitin:Colesterol- acil-transferaza
Leu = Leucin
LDL = lipoproteine cu densitate scazut
LDH = Lactat dehidrogenaz
Lys = Lizin
MAO = Monoamin-oxidaz
MDH = Malat dehidrogenaz
Met = Metionin
MIT = Monoiod tirozin
N5-CH3-FH4 = N5-CH3-tetrahidrofolat
N5-formil-FH4 = N5-formil-FH4-tetrahidrofolat
N10-CH3-FH4 = N10-CH3-FH4 -tetrahidrofolat

161

N10-metenil-FH4 = N10-metenil-FH4 tetrahidrofolat

NAD (NAD+) = Nicotin adenin dinucleotid(forma oxidat)
NADH (NADH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid (forma redus)
NADP (NADP+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma oxidat)
NADPH (NADPH + H+) = Nicotin adenin dinucleotid fosfat (forma redus)
Pa = Fosfat anorganic
PDH = Piruvat dehidrogenaz
PEP = Fosfoenol piruvat
PEP-carboxikinaza = Fosfoenol piruvat-carboxikinaza
3-PG = Acid 3-fosfogliceric
PGK = Fosfoglicerat kinaz
PGM = Fosfogliceratmutaz
Phe = Fenilalanin
PHI = Fosfohexo-izomeraz
PK = Piruvat-kinaz
PKU = Fenilcetonurie
Pro = Prolin
PRPP= Fosforibozil-pirofosfat
PTH = Parathormon
OCT = Ornitin carbamoil-transferaz
QPRT = Chinoleat-fosforibozil-transferaz
RBP = Proteina de legare a retinolului(Retinol binding protein)
R-1-P = Riboz-1-fosfat
SAM = Sulf-adenozil-metionin
SAH = Sulf-adenozil-homocistein
Ser = Serin
SHMP = untul hexoz-monofosfatilor
SNC = Sistem nervos central
Succ.DH = Succinil dehidrogenaz
T = Timin
Thr = Treonin
Trp = Triptofan
TPP = Tiamin pirofosfat
Tyr = Tirozin
U = Uracil
UDP = Uridin difosfat
UDP-G = Uridin difosfat-glucoza
UTP = Uridin trifosfat

162

U.V. = Radiaii ultraviolete

Val = Valin
VLDL = lipoproteine cu densitate foarte scazut
XO = Xantin oxidaz