Scopul principal al biochimiei

De a determina modul cum interacioneaz variatele molecule din organismele vii pentru a constitui, menine, perpetua viaa

Ce mncam?
PROTEINE
Nesarul zilnic = 0,8-1 g / kilogram corp Proteine animale
Carne, peste, oua, produse lactate

Proteine vegetale
Soia Ciuperci Mazare Fasole Alune, nuci, migdale

Soia = aliment complet, conine 40% proteine (carnea 15-20%), 12-55 lipide (carnea 2-4%), glucide i sruri minerale Ciupercile sunt considerate un hibrid ntre proteina vegetal i cea animal deoarece se apropie ca structur de carne datori t coninutului de glicogen (zahrul de rezerv specific crnii).

Ce mncam?
GLUCIDE (Carbohidrati)
Dieta unui adult normal (70 Kg) trebuie sa contina cuprinde 400g de glucide digerabile din care 60% amidon, 30% zaharoza si 10% lactoza
Mai sunt necesari si hidrati de carbon nedigerabili (fibre alimentare) care provin din legume, fructe, tarte cu rol foarte important n formarea bolului fecal normal si asigurarea unui tranzit intestinal normal. GLUCIDE animale

GLUCIDE vegetale

Ce mncam?
LIPIDE (Grasimi)
Ofera de 2 ori mai multe calorii decat glucidele si proteinele! LIPIDE animale

LIPIDE vegetale

Nuci, avocado, ulei de masline, rapita, porumb, soia

De ce mncam?
Pentru a produce energie !
Necesarul energetic / zi = 2500 kcal

Prin metabolizarea unui gram de: glucoza => 3.81 kcal palmitat (C16) => 9.30 kcal alcool etilic (1.4 ml) => 7 kcal proteina ( 350Aa) => 4 kcal (net) (depinde de nr.compozitia in aminoacizi; rinichiul consuma o cantitate mare de energie pentru eliminarea ureei)

Nu mncam tot timpul!

Trebuie sa depozitam energie !

Formele de depozitare a energiei

Asigur energia necesar pentru: esut / Forma de depozitare esut adipos / Trigliceride Muchi /Glicogen Ficat / Glicogen Muchi / Proteine Rezerva (g) 9000-15000 350 80 6000 Post 34 zile 14 ore 3.5 ore 15 zile Plimbare 11 zile 5 ore 70 min. 5 zile Maraton 3 zile 70 min. 18 min. 4 min. 1.3 zile

Snge / Glucoza extracelular 20

40 min. 15 min.

Domeniile principale ale biochimiei

Structura i funcia biologic a compuilor chimici ce alctuiesc organismele vii. Relaia structur-funcie. Totalitatea transformrilor chimice din organismele vii (metabolism) Mecanismul stocrii i transmiterii informaiei genetice

Biochimie Metabolic
PROGRAMA ANALITIC

Introducere in metabolism. Sinteza ATP

Metabolism glucidic Metabolism lipidic Metabolism aminoacizi & proteine Metabolism nucleotide & acizi nucleici Metabolism integrat

METABOLISM
Definiie Ci metabolice Ci anabolice & catabolice Comparaie anabolism catabolism Caracteristicile catabolismului Localizarea intracelular a cilor metabolice Echivaleni reductori & Compui macroergici Sinteza ATP Lanul transportor de electroni & Fosforilarea oxidativ Transportul NADH citoplasmatic n mitocondrie Homeostazia metabolic Metabolismul glucidic prezentare schematic

Metabolism - Definiie
Metabolism = totalitatea transformrilor chimice & energetice

Arderile din celule se efectueaz astfel nct s fie posibil nmagazinarea energiei rezultate sub forma de ATP
Prin arderea unui mol de glucoza (180g) conform reactiei:
C6H12O6 + 6O2 --> 6CO2 + 6H2O => 686 kcal/mol, eliberat sub form de caldur! In celula arderea glucozei este cuplat cu sinteza ATP, conform reaciei generale: C6H12O6 + 6O2 + 36H3PO4 + 36ADP --> 6CO2 + 6H2O + 36ATP Numai 38% din energia eliberat va fi nmagazinat sub forma legturilor macroergice din ATP, restul energiei se elibereaz sub form de cldur!

Cale metabolic - Definiie

Cale metabolic = succesiune liniar, ramificat sau ciclic de reacii chimice
Glicoliza

Sinteza nucleotidelor

Ci catabolice & anabolice

Cile catabolice = procese oxidative, de degradare prin care din moleculele mari, complexe => compui simpli (CO2, H2O,NH3) energie (ATP, NADPH).

Cile anabolice = procese reductive, de biosintez prin care din compui simpli + compui cu structur complex => (cu grad nalt de organizare). energie (ATP, NADPH)

Catabolismul si Anabolismul sunt interdependente

Compui organici bogai n energie -Glucide -Lipide -Proteine Macromolecule intracelulare
-Proteine -Polizaharide -Lipide -Acizi nucleici

Catabolism

Energie chimic ATP, NADPH

Anabolism

Produi finali sraci n energie -CO2 -H2O -NH3

Molecule precursor -Aminoacizi -Monozaharide -Acizi grai -Baze azotate

Produi redui

ANABOLISM

Precursori oxidai

NADP+

ATP

NADPH

Compui redui
bogai n energie

CATABOLISM

Produi oxidai
sraci n energie

NAD+

ADP + Pi

NADH

H2O

Lan respirator cuplat cu Fosforforilarea oxidativ

O2

ATP

ADP + Pi

CATABOLISM - Caracteristici
Macromolecule (molecule complexe) Unitati structurale de baza

Stadiul I

Stadiul II

Produs unic de degradare

Stadiul III

Compartimentalizarea intracelular a cilor metabolice

Citosol
Glicoliza Calea pentozo-fosfat Sinteza acizilor grai Sinteza & catabolismul glicogenului

Mitocondrie
Ciclul Krebs Fosforilarea oxidativ -Oxidarea acizilor grai Sinteza & catabolismul corpilor cetonici

Citosol & mitocondrie

Gluconeogeneza Ciclului ureogenetic

Compui macroergici & Echivaleni reductori

Procese endergonice Sinteze chimice Contracie muscular Excitaie nervoas Transport activ

Reacii exergonice

Compui macroergici Echivaleni reductori

Compui macroergici = compui care conn legturi macroergice (prin hidroliza crora rezult 7,3kcal/mol, pentru exemple vezi tabelul urmtor)

Echivaleni reductori = compui rezultai prin dehidrogenarea intermediarilor metabolici NADH, FADH2 (surs de H i electroni n lanul respirator), NADPH (sursa de H n cile de sintez)

Compui macroergici - Definiie

Denumirea compuilor
Fosfoenolpiruvat (PEP) Carbamoilfosfat 1,3-Difosfoglicerat (1,3DPG) Creatinfosfat AcilCoA (SuccinilCoA) ATPADP + Pi Glucozo-1-fosfat Fructozo-6-fosfat Glucozo-6-fosfat Glicerol-3-fosfat
G0st (kcal/mol)

14,8 12,3 11,8 10,3 7,5 (8)

Compui macroergici, care prin hidroliza pot furniza energia (i fosfatul) necesar sintezei ATP

G0st > 7,3kcal/mol

7,3
5,0 3,8 3,3 2,2

Moneda de schimb G0st < 7,3kcal/mol

Compui care se pot obine utiliznd ATP ca surs de energie i fosfat

Compui macroergici- Structuri

Anhidride fosforice:
ADP, ATP alte nucleotide di- i trifosforilate

O O P O O OH OH

P O O

P O O

Anhidride carboxifosforice:
Carbamoilfosfat 1,3bisfosfoglicerat O O
-

C O

P O
-

O H2N C O

P O O
-

O CH OH

CH2 O P O O
-

10

Compui macroergici - Structuri

Esteri enolici ai acidului fosforic: fosfoenolpiruvat (PEP)
CH2 C O COOH O
-

P O O
-

Tioesteri carboxilici: acetilCoA Fosfoamide: creatinfosfat

O CH3 C

CoA
O
-

HN C

NH

P O

O N CH 3 CH 2 COOH

Ciclul ATP-ADP

11

Sinteza ATP
Reacia catalizat de adenilat kinaz (AK): 2ADP ATP + AMP Reacia catalizat de creatin fosfokinaz (CPK): Fosfocreatina + ADP Creatina + ATP Fosforilarea oxidativ la nivel de substrat: 1,3-Difosfoglicerat + ADP Fosfoenolpiruvat + ADP Succinil-CoA + GDP 3-Fosfoglicerat + ATP Piruvat + ATP Succinat + GTP

Fosforilarea oxidativ cuplat cu lanul respirator

Lanul transportor de electroni

Definiie
Lanul respirator reprezint, pentru celulele aerobe, calea final, comun, prin care electronii provenii din diferite substrate sunt transferai oxigenului. Este format dintr-o serie de componente localizate n membrana intern mitocondrial (n ordinea cresctoare a potenialului lor redox), majoritatea grupate sub form de complexe, care catalizeaz reacii de tipul: Aredus + Boxidat Aoxidat + Bredus Sisteme redox NAD+/NADH FP/FPH2 CoQ/QoQH2 Citb Fe3+/Citb Fe2+ Potenial standard -0,32 V -0,10 V -0,09 V +0,04 V +0,22 V +0,26 V
3)

CitC1 Fe3+/CitC1 Fe2+ CitC Fe3+/CitC Fe2+ Cit(a+a3) O2 /O2Fe3+/Cit(a+a Fe2+

+0,29 V +0,82 V

12

Sursele de electroni (i protoni)

NADH provenit din NAD+ asociat dehidrogenazelor:
Izocitrat, -cetoglutarat, i malat dehidrogenaza din ciclul Krebs Piruvat dehidrogenaza L-3-Hidroxiacil CoA dehidrogenaza (din -oxidarea acizilor grai) Diverse alte dehidrogenaze NAD+ dependente Succinat dehidrogenaza din ciclul Krebs Dehidrogenaza din untul -glicerol fosfat AcilCoA dehidrogenaza din -oxidarea acizilor grai Diverse alte dehidrogenaze FAD dependente

FADH2 derivat din FAD asociat dehidrogenazelor:

Transportul NADH din citosol n mitocondrie

Suveica glicerol 3-fosfat
-GlicerolfosfatDH cit. NAD+ dependent -GlicerolfosfatDH mit. FAD dependent

NADHcitosolic

FADH2mitocondrial

13

Transportul NADH din citosol n mitocondrie

Suveica malat - aspartat
NADHcitosolic NADHmitocondrial

NADH citosolic NADH mitocondrial

Lanul respirator
Componentele complexelor & Reaciile catalizate
Complexul I = NADH-CoQ reductaza = Flavoproteina FMN dependenta + proteine cu centrii Fe - S
NADH + CoQox NAD+ + CoQred ; Go= -69,5 Kcal/mol sinteza 1 ATP

Complexul II = Succinat CoQ reductaza

= Flavoproteina FAD dependenta + proteine cu centrii Fe S + Citb560 FADH2 + CoQox FAD + CoQred ; Go= -2,9 Kcal/mol

Complexul III = CoQ-CitC reductaza

= Citb + Citc1 + proteina cu centrii Fe-S CoQred + CitCox CoQox + CitCred ; Go= -37,7Kcal/mol sinteza 1 ATP

Complexul IV = CitC oxidaza = Cit(a + a3) + Cu

CitCred + 1/2O2 CitCox + O2-; Go= -112 Kcal/mol sinteza 1 ATP O2- + 2H+ H2O

14

Flavoproteine
Au ca grupare prostetic FAD sau FMN Transfer att e- ct i H+

Proteine cu Fe i S

Atomii de Fe i S sunt complexai de 4 cisteine din protein. Transfer doar cte un eFe2+ Fe3+ Nu transfer H+.

15

Citocromi cu Fe

Au hem ca grupare prostetic Transfer cte un eFe2+ Fe3+ Nu transfer H+

Citocromi cu Cu
Un atom de Cu este legat de hem Transfer cte un eCu+ Cu2+

16

Coenzima Q
Micromolecul organic liposolubil Cel mai abundent transportor de e- din membrana intern Se deplaseaz liber prin membran transportnd ectre ali transportori Transfer att e- ct i H+.

Lanul transportor de electroni

Pe lng cele 4 complexe, lanul respirator posed alte 2 componente: coenzima Q (CoQ) i citocromul c. n mitocondria intact transportul de electroni este cuplat cu formarea ATP din ADP i Pi (fosforilare oxidativ cuplat cu lanul respirator). n mitocondria lezat, respiraia poate avea loc fr a fi cuplat cu sinteza ATP => energia liber este eliberat sub form de cldur.

17

Lanul transportor de electroni

Forma lung a lanului transportor

Forma scurt a lanului transportor

ETF:Q oxidoreductaza = Flavoproteina care transfer electroni : CoQ oxidoreductaza = a 3-a poart de intrare n lanul transportor, important n catabolismul (beta oxidare) acizilor grai.

Lant respirator cuplat cu fosforilarea oxidativa Bilant energetic

Pornind de la NADH => 3ATP

(forma lunga a lantului respirator)

Pornind de la FADH2 => 2 ATP

(forma scurta a lantului respirator)

18

Fosforilarea cuplat cu lanul respirator

Complexele I, III si IV funcioneaz ca pompe de protoni care determin acumularea H+ n spaiul intermembranar => realizarea unui gradient de pH (pH) i a unui gradient electrochimic () care mpreuna formeaz fora proton motrice care impinge H+ n matrice prin subunitatea F0 a ATP-sintetazei => activarea enzimei i sinteza ATP

ATP- Sintetaza Localizare & Structur

19

Decuplani sintetici ai fosforilrii

Dinitrofenol protonat

Dinitrofenol deprotonat

Decuplani fiziologici ai fosforilrii

20

Metabolismul glucidic
Glicogenosinteza

Glicogenoliza

21

10/3/2010

METABOLISM GLUCIDIC
Schema general Digestia i absorbia glucidelor Transportul glucozei din snge n celule Glicogenoliza Glicogenosinteza Glicoliza Gluconeogeneza Decarboxilarea oxidativ a acidului piruvic Metabolismul fructozei i galactozei Calea pentozofosfailor Metabolismul acidului glucuronic

Metabolism glucidic Schema general

Glicogenosinteza

Glicogenoliza

10/3/2010

Catabolism glucidic Definiie & Etape

Definiie Totalitatea reaciilor ce au ca scop degradarea glucidelor n vederea eliberrii i stocrii energiei sub form de ATP Etape Polizaharide
(Dizaharide)

Etapa I

Glicogenoliz & Digestie

Monozaharide Etapa II
Glicoliz & Decarboxilare oxidativ

CH3-CO-CoA
Ciclul Krebs

Etapa III

Lan resp. & Fosf. ox.

3NADH + FADH2 H2 O ATP

2CO2

Digestia i absorbia glucidelor

Raia zilnic conine glucide: digerabile ( 400g)
60% amidon (glicogen) 30% zaharoz 10% lactoz

nedigerabile

Prin digestie glucidele digerabile sunt transformate n monozaharide absorbabile: glucoza (Glc), fructoza (Fru) galactoza (Gal)

10/3/2010

Amidon - Structur
Amidonul = polizaharid de origine vegetal , format din amiloz i amilopectin
Legaturi glicozidice a1-4

20%

Legatura glicozidica a1-6

80%

Glicogen - Structur
Glicogen = Amilopectina animal

10/3/2010

Dizaharide - Structur
Zaharoza = dizaharid format din -glucoz i -fructoz legate prin legatur 1,2-diglicozidic Lactoza = dizaharid format din -galactoz i -glucoz legate prin legatur 1,4-monoglicozidic

Digestia i absorbia glucidelor

Glucide nedigerabile

Flora microbiana

Gaze: CO2, H2O, H2, CH4, acetat, propionat, butirat

10/3/2010

Digestia glucidelor Prezentare schematic

(pH-ul acid inactiveaz amilaza salivar)

Glc, Fru si Gal sunt preluate de ctre celulele epiteliale absorbtive ale intestinului subtire fie prin transport activ Na+dependent, fie prin difuzie facilitat. Din celulele epiteliale sunt apoi transportate, de ctre transportori specifici (GLUT), n sange i apoi n celulele ficatului i ale esuturilor periferice.

Aciunea a-amilazei

10/3/2010

Aciunea dizaharidazelor

Zaharaza

Fermentaia glucidelor nedigerabile sub aciunea florei microbiene

Glucide nedigerabile

Piruvat Formiat CO2 CH4 Succinat

Absorbie

CO2

H2

Acetat

Butirat

Propionat

Flatulena

Diaree osmotic, pH<5,5

10/3/2010

Absorbia Glc (Gal)

= Transport activ, consumator de ATP
Lumen intestinal
Sistem
Epiteliu intestinal

Capilare
Difuzie facilitat

simport

Glc Na+ Membrana apicala (absorbtiv)

Glc Na+ K+

Glc

ATP

ATP-aza

ADP + Pi

Membrana bazala

Na+

K+

Izoformele transportorului glucozei GLUT 1-5

Transportor GLUT 1 Distribuia n esuturi
Eritrocite Bariera hemato-encefalic Bariera hemato-retinian Bariera hemato-placentar Bariera hemato-testicular Ficat Rinichi Celule -pancreatice Membrana bazal a celulelor mucoasei intestinale Neuroni esut adipos Muchi scheletic Muchiul inimii Membrana absorbtiv a celulelor mucoasei intestinale Spermatozoizi

Comentarii
Se gsete n tipurile de celule cu funcie de barier; Are afinitate mare pentru glucoz

GLUT 2

Are afinitate mic pentru glucoz; Poate fi utilizat ca senzor al gucozei n pancreas

GLUT 3 GLUT 4 GLUT 5

Este transportorul major n sistemul nervos central; Are afinitate mare pentru glucoz n prezenta insulinei crete numrul transportorilor expui pe membran! Are afinitate mare pentru glucoz. Este transportor al fructozei

10/3/2010

Efectul insulinei asupra GLUT 4

Deficiena de lactaz
=> Intolerana la lactoz

10/3/2010

Metabolismul glicogenului - Localizare

tisular: ficat, muchi celular: citosol (granule)

Glicogenoliza
Definiie Localizare Reacii Reglare

10/3/2010

Glicogenoliza - Definiie
Cale liniar de catabolism prin care: glicogen (Glc)n+m nGlc-1P + mGlc cu scopul: meninerii glicemiei (hepatocite) producerii materialului energetic (miocite)

Glicogenoliza Prezentare schematic

Glicogen = (Glc)n+m
(ficat i muchi)

Glicogenfosforilaza (leg. 1-4)

Enzima de deramificare (leg. 1-6)

nGlc-1P

mGlc
Ficat

nGlc-6P
Muschi

Glc

Snge

necesara meninerii glicemiei normale

ATP
necesar contraciei

10

10/3/2010

Glicogenoliza- Enzime implicate

Glicogen fosforilaza
fosforolizeaz legturile glicozidice a1-4 ncepnd cu captul nereductor al unei ramificaii pn cnd rmn numai 4 glucoze

Enzima de deramificare - activitatea glucotransferazic

transfer un fragment format din 3 glucoze la captul nereductor al altei ramificaii

- activitatea glucozidazic
hidrolizeaz legtura glicozidic a-1-6

Actiunea enzimelor implicate in glicogenoliza

11

10/3/2010

Soarta glucozo-1P
Glucozo-1P Glucozo-6P
Mutaza

Glucozo-6P Glc Snge Piruvat

Glc6P-aza (hepatic)

Glucozo-6P

Glicoliza (muscular)

ATP

Glicogenosinteza
Definiie Localizare Reacii Reglare

12

10/3/2010

Glicogenosinteza - Definiie
Cale de anabolism prin care din
Miezul de glicogen(Glicogenina) cu puine ramificaii scurte
Glicogen cu multiple ramificaii lungi

nUDP-Glc

Scop: depozitarea excesului de glucoz

Glicogenosinteza - Etape
I. Transformarea Glc n UDP-Glc
GK Mutaza Pirofosforilaza

Glc ATP

Glc-6P

Glc-1P UTP

UDP-Glc

13

10/3/2010

Glicogenosinteza - Etape
II. Sinteza propriuzis
Alungirea ramificaiilor prin formarea de noi legturi glicozidice 1-4 sub aciunea glicogen sintetazei Formarea de noi ramificaii prin realizarea legturilor 1-6 sub aciunea enzimei de ramificare

Aciunea glicogen sintetazei

14

10/3/2010

Aciunea enzimei de ramificare

Glicogenosinteza

15

10/3/2010

Metabolismul glicogenului - Reglare

Enzime reglatoare
Glicogen fosforilaza activare:
prin fosforilare (iniiat de adrenalin, glucagon) cu efectori allosterici: AMP (numai n miocite)

inhibiie:
prin defosforilare (iniiat de insulin) cu efectori allosterici: glucoza, ATP (numai n hepatocite)

Glicogen sintetaza activare:

prin defosforilare (iniiat de insulina) cu efectori allosterici: glucozo-6P

inhibiie:
prin fosforilare (iniiat de adrenalin, glucagon) cu efectori allosterici: glicogen

Reglare prin fosforilare / defosforilare

16

10/3/2010

Activarea glicogenolizei musculare

Glicogenoliza muscular este iniiat prin contracie muscular, impuls nervos, legarea adrenalinei de receptorul specific

- AMP rezultat prin hidroliza ATP n timpul contraciei activeaz glicogen fosforilaza b - Impulsul nervos care iniiaz contracia elibereaz Ca2+ din reticulul sarcoplasmic; Ca2+ se leag de calmodulin care va activea fosforilaz kinaza - Fosforilaz kinaza este activat i prin fosforilare iniiat de adrenalin prin activarea protein kinazei A

Reglarea glicogen sintetazei

+ Glicogen -

17

10/3/2010

Reglarea protein fosfatazei

Subunitate catalitica Subunitate reglatoare

C
G
Glicogen Ser-OH Protein kinaza A + Glucagon

HO-Thr Insulina + Protein kinaza

C
P-O-Thr

HO-Thr

Ser-O-P Inhibitor -OH Inactiv

G
Activa

Ser-OH

C
Putin activa Inhibitor Protein kinaza A O- P Activ Fosforilarea Thr previne fosforilarea Ser si asocierea cu inhibitorul specific

C
Inactiva

Inhibitor

O- P

Glicogenoze = Acumulare de glicogen

Glucoza Enzima de ramificare -1-4 Glucozidaza lizozomala Glicogenoza II POMPE
Aparitia in ficat, muschi scheletici, miocard, SNC a vacuolelor anormale cu glicogen normal => Cardiomegalie severa cu deces timpuriu Valori normale ale glicemiei

Glicogen

Glicogenoza IV ANDERSON
Depozitare glicogen cu ramificatii scurte in splina, ficat, intestin Ciroza => deces inainte de 10 ani Valori normale ale glicemiei

Glucoza

Glicogenoza V McARDLE
Acumulare in muschi a glicogenului normal => In eforturi musculare apar crampe, dureri. La batranete apare mioglobinuria Nu apare acid lactic in sange dupa efort!

Glicogenfosforilaza

Glicogenoza VI HERS
Acumulare in ficat a glicogenului normal => hepatomegalie, hipoglicemie; nu creste glicemia dupa administrare de glucagon!

Dextrine limita Enzima de deramificare Glucozo-1P Mutaza Glucozo-6P

Glicogenoza III FARBES / CORI

Acumulare in ficat, muschi striat a glicogenului anormal => hepatomegalie, cardiomegalie moderata

Glucoza

Glucozo 6-fosfataza Glucogenoza I von GIERKE Hipoglicemie severa

18

Calea pentozofosfat
Definiie Localizare Etape

Reacii
Reglare

Calea pentozofosfat
Definiie
Cale de transformare a glucozo-6-fosfatului cu scopul de a obine NADPH necesar pentru - sinteza acizilor grai, colesterolului, hormonilor steroizi - neutralizarea speciilor reactive ale oxigenului (ROS) - sinteza NO (sub aciunea NO sintetazei din endoteliul vascular) - sinteza O2.- (sub aciunea NAPH oxidazei din fagolizozomi), precursor al ClO- i a OH., speciile reactive implicate in distrugerea bacteriilor fagocitate Ribozo-5-fosfat necesar pentru - sinteza nucleotidelor & coenzimelor nucleotidice

Localizare Ficat
Corticosuprarenale Glande sexuale Glanda mamar n timpul lactaiei

Calea pentozofosfat - Etape

I. Etapa oxidativ ireversibil !
Glc-6P + 2 NADP+ + H2O Ribulozo-5P + 2 NADPH + CO2

II. Etapa de interconversie a monozaharidelor fosforilate - reversibil !

Ribozo-5P
Ribulozo-5P C5 C5

Fru-6P + GA3P
C6 C3 Intermediari glicolitici

Xilulozo-5P
C5

Reaciile fiind reversibile permite sinteza ribozo- 5P pornind de la Fru-6P i GA3P!

Calea pentozofosfat Etapa I

Glucozo-6-fosfat + 2NADP+ + H2O Ribulozo-5-fosfat + 2NADH + 2H+ + CO2

Calea pentozofosfat Etapa II

Izomerizarea & epimerizarea ribulozo-5P

Calea pentozofosfat Etapa II

Transformarea Rib5P i Xil5P n Fru6P i GA3P

=> Din 3 pentoze fosforilate rezult 2 Fru6P i 1 GA3P

Reaciile catalizate de transcetolaz

Reacia catalizat de transaldolaz

Calea pentozofosfat - Reglare

Se realizeaz la nivelul glucozo 6-fosfat dehidrogenazei!

Soarta glucozo-6-fosfatului depinde de necesitile celulei

Soarta Glc6P depinde de necesarul de NADPH, ribozo-5-fosfat i ATP. => Calea pentozo fosfailor poate opera n 4 moduri diferite.
Modul 1: Este necesar mai mult ribozo-5-fosfat dect NADPH
Exemplu: Celulele care se divid rapid au nevoie mai ales de precursori ai nucleotidelor pentru sinteza ADN Utilizeaz fructozo-6-fosfatul i gliceraldehid-3-fosfatul din glicoliz care intra in etapa 2 a caii pentozo fosfatilor => ribozo-5-fosfat

Glicoliza

=> Etapa 1 a cii pentozo fosfailor este neutilizat!

Modul 2: Necesarul de NADPH i ribozo 5-fosfat este echilibrat

Etapa 1 a cii pentozo fosfailor

Pentozofosfat izomeraza

Reacia general :
Glucozo 6-fosfat + 2 NADP+ + H2O = Ribozo 5-fosfat + 2 NADPH + 2 H+ + CO2

Modul 3: Este necesar mai mult NADPH dect ribozo 5-fosfat Glucozo 6-fosfatul este complet oxidat la CO2. Sunt necesare 3 seturi de reacii
Exemplu: esutul adipos unde este necesar o cantitate mare de NADPH pentru sinteza acizilor grai Regenerarea glucozo 6-P din pentoz

Suma reaciilor:
Glucozo 6-fosfat + 12 NADP+ + 7 H2O = 6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi

Modul 4: Este necesar att NADPH ct i ATP Glucozo 6-fosfatul este convertit in piruvat
Se genereaz NADPH, NADH i ATP 5 din cei 6 atomi ai glucozo 6-P sunt transformai n piruvat

Reacia general:
3 Glucozo 6-fosfat + 6 NADP+ + 5 NAD+ + 5 Pi + 8 ADP = 5 piruvat + 3 CO2 + 6 NADPH + 5 NADH + 8 ATP + 2 H2O + 8 H+

Procentul de glucoz metabolizat prin calea pentozo fosfailor depinde de esut

Scopul principal al cii este producerea NADPH pentru sintez => este dominant n esuturile care sintetizeaz acizi grai si/sau steroizi din acetil-CoA Ficat: 5-10% esut adipos: 30 50% Eritrocite: 10% (NADPH este necesar pentru reducerea glutationului) Glanda tiroid, rinichi, creier: 3 5% Muchi: activitate foarte scazut

Rolul NADPH n descompunerea ROS

Specii reactive ale oxigenului (ROS)

Deficiena de glucozo-6-fosfat dehidrogenaz conduce la anemie hemolitic dar i la rezistena la infecia cu Plasmodium falciparum (parazitul malariei)!

Metabolismul Gal, Fru si Man

Metabolismul Galactozei (Gal)

Galactitol
Aldozo reductaza NADPH Galacto kinaza Deficiena => Galactozemie & Galactozurie i acumulare de galactitol dac galactoza este prezent n diet Deficiena => Galactozemia clasic Acumulare de Gal-1P & galactitol n nervi, cristalin, ficat , rinichi => alterare hepatic, retardare mintal, cataract

Gal + ATP

Gal-1P + ADP

Gal-1P + UDP-Glc
Epimeraza

Transferaza

UDP-Gal + Glc-1P

UDP-Gal

UDP-Glc

Glicogen

Lactoza

UDP-GlcUA

Glicoproteine Glicozaminoglicani Glicolipide

Conjugare

Sinteza lactozei
Localizare: glanda mamar n timpul lactaiei

UDP-Gal + Glc
Proteina B (-lactalbumin)

Gal transferaza

Gal1-4-Glc
Lactoza

UDP

Proteina A Proteina B (Gal transferaz) (-lactalbumin) Proteina A (Gal transferaz)

Gal transferaz cu specificitate pentru substrat modificat!

UDP-Gal + GlcNAc

N-Acetillactozamin

Prolactina = activator, respectiv progesterona = inhibitor al sintezei proteinei B

Sinteza lactozei
Aparat Golgi

Glucoza

Glucoza

Glucoza UDP-Glucoza Glucozo 6-fosfat

UDP-Galactoza

UDP-Galactoza -La

PPi LACTOZA

GT

Glucozo 1-fosfat UTP

Metabolismul Fructozei (Fru)

Deficiena => Fructozurie esenial => Eliminare Fru n urin Benign & Asimptomatic
Fructo kinaza

Fru + ATP

Fru-1P + ADP
Deficiena => Intolerana ereditar la fructoz => Acumularea intracelular a Fru-1P => Hipoglicemie, vom, icter, hepatomegalie, hiperuricemie

Aldolaza B

Fru-1P

Gliceraldehida + DHAP
Triozokinaza

Gliceraldehida + ATP

GA3P

=> DHAP si GA3P = intermediari glicolitici

10

Calea poliol = surs de fructoz

Glc
Aldozo reductaza NADPH NADP+

Sorbitol

Sorbitol DH NAD+ NADH

Fru

Cristalin & Neuroni

Ficat & Vezicule seminale

Glc (diabet) => intensificarea cii poliol => acumularea sorbitolului n cristalin i neuroni => cataracta i neuropatia periferic

Calea uronic - Sinteza GlcUA

Localizare: hepatocite (reticul endoplasmic)
Glicozaminoglicani

UDP- Glc

UDP-Glc DH

Forma activa a glucozei 2 NAD+

UDP-Glucuronat
(GlcUA)
Forma activa a acidului glucuronic

2NADH

Conjugare

Conjugarea bilirubinei & steroizilor inactivi

COO OH HO OH R COOH (ex. Bilirubina) HO OH
-

COOO CO R OH O UDP HO OH

COOO OH OH

(ex. Steroizi inactivi)

11

Calea uronic- Soarta UDP-GlcUA

Deficiena =>Pentozuria esenial (clinic asimptomatic)

=> eliminare urinar de xiluloz

12

10/26/2010

Decarboxilarea oxidativ a piruvatului

Definiie Localizare Reglare

Decarboxilarea oxidativ a piruvatului

Definiie
Transformarea piruvatului n acetil CoA prin oxidare i decarboxilare, conform reaciei:

E1- TPP E2- LS2 E3- FAD

Localizare
Matricea mitocondrial

10/26/2010

Piruvat dehidrogenaza (PyDH)

Piruvat dehidrogenaza
= complex format din 3 enzime: piruvat decarboxilaza tiamin-dependent, notat E1-TPP; dihidrolipoil transacetilaza -lipoil-dependent, notat E2-LS2; dihidrolipoil dehidrogenaza FAD-dependent, notat E3-FAD. Catalizeaz decarboxilarea oxidativ a piruvatului, conform reaciei :

CH3COCOO + NAD + CoA

CH3CO CoA + NADH + H + CO2

Acidul lipoic (LS2), ataat de E2 = bra flexibil care penduleaz ntre TPP-E1 i FAD-E3 cu scopul de a prelua i transmite electroni i grupri acil

Reglarea piruvat dehidrogenazei

Prin fosforilare/defosforilare Prin retroinhibiie cu NADH i Acetil-CoA
Ca2+

Acetil-CoA NADH

CoA NAD+ Piruvat

Acetil-CoA NADH ATP

10/26/2010

Ciclul Krebs
Definiie Localizare Reacii Bilan energetic Reglare Cale amfibolic Reacii anaplerotice

Ciclul Krebs - Definiie & Localizare

Definiie Cale ciclic de catabolism prin care: CH3-CO-CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O=> 2CO2 + 3 (NADH + H+) + FADH2 + GTP Scop
producerea energiei stocate sub form de GTP, NADH, FADH2

Localizare - n toate esuturile formate din celule care conin mitocondrii (n

prezenta oxigenului) - n matricea mitocondrial (excepie SDH localizat n membr. intern)

10/26/2010

Ciclul Krebs Proveniena acetil-CoA

Glucoza

Acizi grai

Etanol

CH3-CO-CoA

Corpi cetonici

Aminoacizi

Ciclul Krebs - Proveniena oxalacetatului

Piruvat DH

Acetil-CoA + Piruvat carboxilaza

Biotina

Piruvat + CO2

Oxaloacetat

10/26/2010

Ciclul Krebs - Reacii

Ciclul Krebs - Reacii

10/26/2010

Ciclul Krebs Bilan energetic

3 NADH 3 x 3 = 9 ATP 1 FADH2 1 x 2 = 2 ATP 1 GTP 1 ATP TOTAL = 12 ATP
n lanul respirator cuplat cu fosforilarea oxidativ

Ciclul Krebs - Reglare

Enzime reglatoare: citrat sintetaza, izocitrat DH, -cetoglutarat DH

Inhibitori = produii finali ATP, NADH Activatori = ADP, NAD+, Ca2+

10/26/2010

Ciclul Krebs - Cale amfibolic

Intermediarii ciclului Krebs sunt surse pentru sinteza unor compui cu importante roluri biologice => este o cale amfibolic

Sinteza pirimidine

Sinteza purine

Ciclul Krebs Reacii anaplerotice

Reacii anaplerotice = reaciile prin care se reaprovizioneaz ciclul cu intermediari

Glicoliza
Definiie
Localizare Etape Reacii Bilan energetic Reglare

Glicoliza - Definiie & Localizare

Definiie

Cale de catabolism prin care: Glucoza 2Piruvat (aerobioz) sau 2Lactat (anaerobioz) cu scopul producerii ATP
Este activ numai dac nivelul energetic al celulei este sczut => [ATP] inhib enzimele reglatoare (retroinhibiie) Localizare n
toate celulele (n cele fr mitocondrii produsul final = lactat) citosol

Glicoliza - Etape
Glucoza
1. Etapa consumatoare de ATP 2ATP 2ADP Dihidroxiacetonfosfat

Glicerinaldehid-3-fosfat 2ADP 2ATP

2. Etapa producatoare de ATP LDH Acid piruvic Acid lactic n absena mitocondriilor i/sau a O2

n prezena mitocondriilor i a O2

Glicoliza Etapa consumatoare de ATP

Glucoza + 2ATP => 2Trioze fosforilate + 2ADP + 2Pi

Glicoliza Etapa productoare de ATP

2Trioze fosforilate + 4ADP + 2NAD+ => 2Piruvat + 4ATP + 2NADH
2Piruvat + 2NADH => 2Lactat + 2NAD+(anaerobioza)

Soarta piruvatului
n

absena mitocondriilor i/sau a O2

prezena mitocondriilor i a O2
Piruvat dehidrogenaza (mitocondrie)

CH3-CO-COOH
Piruvat

AcetilCoA + CO2

NAD+ CoA

NADH + H+

Bilanul energetic
Bilanul energetic al glicolizei
4 ATP sintetizai 2 ATP consumai = 2 ATP/ Glucoz

Bilanul oxidrii complete a glucozei

Glucoza Glicoliz 2 Piruvat 2 AcetilCoA
PyDH

2 Piruvat + 2NADH + 2 ATP

citosol

2 AcetilCoA + 2 NADH

mitocondrie

2FADH2

Ciclul Krebs

2 [2CO2 + 3NADH + 1 FADH2 + GTP]

Lan respirator Fosforilare oxidativ

8 NADH + 4 FADH2

(8 x 3) + (4 x 2) = 32 ATP

Total = 2 ATP + 2 GTP + 32 ATP = 36 ATP

Glicoliza - Reglare
Enzime reglatoare = allosterice Hexokinaza (HK) Fosfofructokinaza1 (PFK1) Piruvat kinaza (PK)
Modaliti de reglare Inducie:
Insulina creterea concentraiei GK i a PK (ficat)

Modificare covalent: Modificare allosteric:

Adrenalina i glucagonul (n ficat) iniiaz fosforilarea PK (hepatic) i a PFK2 => inhibiia acestor enzime ex. ATP = inhibitor (retroinhibiie)

Reglarea hexokinazei

Acizi grasi (ficat, tesut adipos)

KM Hexokinazei = 10 M => afinitate mare pt. glucoz KM Glucokinazei = 10 mM => afinitate mic pt. glucoz

=> La concentraie normal a glucozei (5mM) este funcional numai HK!

Reglarea fosfofructokinazei
[ATP] [ATP]

n muchi ATP moduleaz afinitatea PFK1 pentru fructozo-6-fosfat (F6P):

[ATP] K0,5 pt. F6P => PFK1 activ chiar i [F6P]

[ATP] K0,5 pt. F6P => PFK1 activ numai cnd [F6P]

Reglarea concentraiei Fructozo 2,6-bisfosfat

Fructozo 2,6-bisfosfatul este sintetizat & hidrolizat de fosfofructokinaza2 (PFK2), enzim bifuncional reglat prin fosforilare / defosforilare

Insulina activeaz fosfoprotein fosfataza => se activeaz centrul kinazic al PFK2 Glucagonul activeaz protein kinaza A => se activeaz centrul fosfatazic al PFK2

Reglarea piruvat kinazei

Inhibitori allosterici: ATP, acetilCoA, alanina, acizi grasi cu catena lung Activatori allosterici: Fructozo-1,6-bisfosfat (activare n avans). PK hepatic (L) este inactivat prin fosforilare indus de glucagon => se previne consumarea glucozei prin glicoliz atunci cnd [Glc] este scazut

untul 2,3-bisfosfoglicerat (2,3-DPG)

Localizare: exclusiv n eritrocite Scop: producerea 2,3DPG = reglator al afinitii Hb pentru O2

Patologie
Deficiena PK eritocitare => [ATP]
=> activitatea ATP-azei Na+/K+ dependente
=> hemoliz => Anemia hemolitic

Gluconeogeneza
Definiie Localizare Reacii ireversibile Bilan energetic Reglare

Gluconeogeneza Definiie & Localizare

Definiie
Cale de anabolism prin care Compui neglucidici Lactat, Ala, glicerol Glucoz

folosind ca surs de energie ATP rezultat prin catabolismul acizilor grai

Localizare - Ficat (Rinichi)

- Citosol + Mitocondrii

Gluconeogeneza Reacii ireversibile

Piruvat
Piruvat carboxilaza (biotina) (mitocondrie)

Oxalacetat

PEP carboxikinaza (citosol sau mitocondrie)

PEP

Fructozo1,6 bisfosfat

Fructozo 1,6 bis fosfataza

Fructozo 6-fosfat + Pi

Glucozo 6-fosfat

Glucozo 6 fosfataza

Glucoza + Pi

Restul reaciilor sunt comune cu ale glicolizei!

Ci alternative de la piruvat la PEP

Reaciile gluconeogenezei pornind de la alanin

Alanin + -Cetoglutarat Piruvat + Glutamat Piruvat + HCO3- + ATP Oxaloacetat + ADP + Pi Oxaloacetat + GTP Fosfoenolpiruvat + CO2 + GDP Fosfoenolpiruvat + H2O 2-Fosfoglicerat 2-Fosfoglicerat 3-Fosfoglicerat 3-Fosfoglicerat + ATP 1,3-Bisfosfoglicerat + ADP 1,3-Bisfoglicerat + NADH + H+ Gliceraldehid 3-fosfat + NAD+ + Pi Gliceraldehid 3-fosfat Dihidroxiaceton fosfat Gliceraldehid 3-fosfat + Dihidroxiaceton fosfat Fructozo 1,6-bisfosfat Fructozo 1,6-bisfosfat Fructozo 6-fosfat + Pi Fructozo 6-fosfat Glucozo 6-fosfat Glucozo 6-fosfat + H2O Glucoza + Pi

Transformarea glicerolului n dihidroxiaceton fosfat

Aminoacizi glucoformatori
Alanina Cisteina Glicina Serina Treonina Triptofan Izoleucina Metionina Treonina Valina Succinil-CoA

Piruvat

Arginina Glutamat Glutamina Histidina Prolina

Fenilalanina Tirozina -Cetoglutarat

Fumarat

Asparagina Aspartat

Oxaloacetat

-Cetoglutaratul, succinil-CoA i fumaratul pot fi convertiti n oxaloacetat (vezi ciclul Krebs)

10

Gluconeogeneza Bilan & Reglare

BILAN ENERGETIC
2Piruvat + 4ATP + 2GTP + 2NADH + 6H2O Glucoz + 4ADP + 2GDP + 6Pi + 2NAD+

REGLARE
Inducie: glucagonul intensific sinteza PEPCK i a F1,6-bisfosfatazei
Modificare covalent: fosforilarea iniiat de adrenalin, glucagon i hormonii glucocorticoizi determin inactivarea PFK2 i astfel reducerea concentraiei F2,6-BP => activarea F1,6-bis-fosfatazei Modificare allosteric: ex. ATP = activator

Reglarea glicolizei & gluconeogenezei

11

Ciclul Cori

12

10/15/2010

GLICOPROTEINE Definiie dpdv

- structural - funcional Heteroglicani Clasificare funcie de tipul legturii oligozaharid-protein Glicoproteine O-glicozidice Glicoproteine N-glicozidice Sinteza glicoproteinelor O-glicozidice Sinteza & Catabolismul glicoproteinelor N-glicozidice

GLICOPROTEINE
Definiie dpdv structural = proteide care au ca i grupare prostetic heteroglicani (1-85%). Definiie dpdv al rolului biologic = proteide care, n funcie de localizarea lor, ndeplinesc diferite roluri biologice Membran
canale pentru ioni antigene de grup sanguin (ABO) receptori hormonali markeri implicai n interaciunea celul-celul, virus-celul, bacterie celul. enzime (proteaze, nucleaze, glicozidaze) Urin, lapte: antigene de grup sanguin; Plasm: transportori (transferina, factor intrinsec), hormoni (foliculostimulator, luteinizant), proteide implicate n aprare (imunoglobuline, complement, interferon), coagulare (trombina, fibrinogen), enzime (colinesteraza) Secreii mucoase din tractul respirator, genito-urinar, gastrointestinal: ageni protectori, lubrifiani (mucine)

Intracelular

Lichide biologice

Matrice rol structural (colagen, elastin, fibronectin). extracelulara

10/15/2010

HETEROGLICANI
Definiie dpdv structural
= oligozaharide liniare sau ramificate formate din 2-15 monozaharide de tip diferit (heteroglicani): Hexoze: Gal, Man Hexoze aminate N-acilate: GlcNAc, GalNAc 6-Deoxihexoze: Fuc (6-deoxiGal sau CH3-Ara) Pentoze: Xil, Ara Acizi sialici (N-Acil neuraminici): acidul N-acetil neuraminic (NANA) legate prin legturi glicozidice formate ntre gruparea OH glicozidic ( sau ) cu gruparea OH din poziia 2,3,4 sau 6.

Definiie dpdv al rolului biologic

= grupri prostetice ale glicoproteinelor

10/15/2010

Componentele heteroglicanilor
Hexoze
CH2 OH HO CH2 OH

CH3
HO

O
OH
OH HO

O
OH OH OH

O
OH
OH

a -Gal

OH

a -Man

a - Fuc

OH

Hexoze aminate N-acetilate

CH2 OH

O
OH HO OH NH-CO- CH3

CH2 OH HO

O
OH
OH NH-CO- CH3

GlcNAc

GalNAc

Componentele heteroglicanilor
Pentoze
HOH2 C

O
HO OH OH

HOH2 C

O
OH OH OH

Ara
Acizi sialici
COOH C O CH2 HCOH H3C CO NHCH HOCH (HCOH)2 CH2OH forma aciclica

Xil

H H3 C CO HN

O
R
OH H

COOH OH

unde R = (HCOH)2 CH2OH

forma ciclica

Acid N-acetil neuraminic (NANA)

10/15/2010

GLICOPROTEINE
Clasificare
funcie de tipul legturii oligozaharid - protein A. Cu legatur O-glicozidic Legtura este format ntre:

OH-ul glicozidic al GalNAc i OH-ul Ser sau Thr (din secvenele Asn-X-Ser, Asn-X-Thr) OH-ul glicozidic al Gal i OH-ul HO-Lys (colagen)

B. Cu legatur N-glicozidic Legtura este format ntre:

OH-ul glicozidic al GlcNAc i NH2 amidic al Asn.

Glicoproteine O-glicozidice

10/15/2010

Glicoproteine O-glicozidice

Glicoproteine O-glicozidice
Excepia de la regul!
Legatura Lys-O-Gal

10/15/2010

Glicoproteine N-glicozidice

Glicoproteine N-Glicozidice

Clasificare dup compoziia heteroglicanului

Simple: miez + ramificaii formate numai din manoze; Mixte: miez + o ramificaie format numai din manoze + o ramificaie complex format din diferite monozaharide; Complexe: miez + ramificaii complexe formate din diferite monozaharide.

Man NH CH CH2 CO NH GlcNAc GlcNAc Man Man Man Man Man

IgM

Simpl

CO

Miez
NH Man CH2 CO NH GlcNAc GlcNAc Man Man GlcNAc Gal GlcNAc

Complex CH
CO

IgG

10/15/2010

Glicoproteine N-Glicozidice
A se observa varietatea legturilor dintre oze i miezul comun diferitelor tipuri de heteroglicani din glicoproteinele N-glicozidice (simple, hibride i complexe)!

Glicoproteine O-Glicozidice
Antigenele de grup sanguin ABO

10/15/2010

GLICOPROTEINE O-glicozidice
Sinteza

UDP-Gal CMP-SA

GDP-Fuc

Glicoprotein

Oligozaharidul se constituie pe protein, legndu-se succesiv ozele componente (provenite din formele active UDP-GalNAc, UDP-Gal, CMP-SA, GDP-Fuc)

GLICOPROTEINE N-glicozidice
Sinteza
Etapa I. Sinteza proteinei ncepnd cu peptida semnal (vezi traducere) Etapa II. Constituirea pe dolicol fosfat a heteroglicanului de tip simplu Etapa III. Translocarea dolicol fosfat-heteroglicanului i legarea a 4 Man i 3 Glc Etapa IV. Tansferul heteroglicanului pe protein, procesarea final i exportul n aparatul Golgi

10/15/2010

Etapa IV. n lumenul reticulului endoplasmic Transferul, pe proteina n curs de sintez, a heteroglicanului i procesarea parial a acestuia => heteroglican simplu ataat de protein

Etapa V. n aparatul Golgi Procesarea final a heteroglicanului => heteroglican de tip complex ataat de proteina matur. Secreia glicoproteinei.

GLICOPROTEINE
Structura dolicolului

Unitate repetitiv = izopren n=17-21

10/15/2010

Marcarea, prin fosforilare, a Man din glicoproteinele direcionate ctre lizozomi

Fosforilarea defectuoas => Boala celulelor I

GLICOPROTEINE N-glicozidice
Defecte enzimatice

=> Afectarea embriogenezei

10

10/15/2010

Glicoproteine - Catabolism
Localizare: lizozomi Enzime: hidrolaze specifice => desprinderea succesiv a ozelor, ncepnd cu extremitile nereductoare Deficiena ereditar a unor enzime => Boli = Oligozaharidoze

Defecte enzimatice ale enzimelor implicate n catabolismul heteroglicanului

Boala Aspartilglicozaminuria b-Manozidoza a-Manozidoza GM1 Gangliozidoza GM2 Gangliosidoza (boala SandhoffJatzkewitz) Sialidoza (Mucolipidoza I) Enzima deficitar
Aspartilglicozaminidaza b-Manozidaza a-Manozidaza b-Galactozidaza

Simptome/Comentarii
Retard mental progresiv, retard al limbajului expresiv i al dezvoltrii motorii, modificarea trasturilor feei Afectare neurologic Retard al limbajului expresiv Retardare mental, hepatosplenomegalie, pierderea auzului, retard al limbajului expresiv Identificat cu boala de depozitare a glicosfingolipidelor Identificat cu boala de depozitare a glicosfingolipidelor Ascita congenital, hepatosplenomegalie, modificare a trasaturilor fetei, intarziere a dezvoltarii mentale si motorii Deteriorare mentala i motorie progresiv, ntarziere a dezvoltarii, modificare a trasturilor feei, Infecii pulmonare repetate

b-N-acetilhexozaminidaza A i B

Neuraminidaza (sialidaza)

Fucozidoza

a-Fucozidaza

11

10/15/2010

GLICOZAMINOGLICANI
Definiie dpdv structural
= heteropolizaharide liniare cu formula general:

(Acid uronic-hexozamin N-acetilat)n

excepie keratan sulfatul care n loc de acid uronic conine Gal - acidul uronic:
glucuronic (GlcUA) iduronic (IdUA) sulfatat n poziia 2

- hexozamina N-acetilat:
glucozamina N-acetilat (GlcNAc) sulfatat n poziia 4 sau 6, galactozamina N-acetilat (GalNAc) sulfatat n poziia 4 sau 6 N-sulfono glucozamin

GLICOZAMINOGLICANI
Roluri biologice
anticoagulant (heparina) limpezirea plasmei (heparina) alturi de proteoglicani formeaz soluii coloidale vscoase / geluri = ciment intercelular maleabil, flexibil cu proprieti lubrifiante, antioc

10/15/2010

GLICOZAMINOGLICANI
Distribuie
esut conjunctiv din piele, tendoane, cartilaje, matrice osoas, vase de snge, cornee Lichid sinovial Umoare vitroas Secreii mucoase

GLICOZAMINOGLICANI
Caracteristici fizico-chimice
Posed numeroase sarcini negative (-COO-, -OSO3-, NHSO3- ) => fixeaz cationi (Na+, K+, Ca+2) care se nconjoar de numeroase molecule de H2O => gel Se asociaz (cu excepia acidului hialuronic), prin legturi ionice i covalente, cu proteine miez => proteoglicani

10/15/2010

GLICOZAMINOGLICANI (GAG = Mucopolizaharide)

H COOH O H OH H H CH2OH O H H O HO H H H HNCOCH3

Acid hialuronic
Unitate repetitiv: acid glucuronic + N-acetilglucozamin Caracteristici: nesulfatat, nelegat covalent de proteine, formeaz agregate cu proteoglicani (condroitin i keratan sulfai) Distribuie: lichid sinovial, umoare vitroas, esut conjuctiv lax Rol: lubrifiant, asigur elasticitatea, compresibilitatea cartilajelor

OH

GlcUA

1,3

GlcNAc

COOH O H OH H H

SO H O

CH2OH O H H H H H HNCOCH3

Condroitin 4 sau 6 sulfat

Unitate repetitiv: acid glucoronic + N-acetilgalactozamin-4 / 6-sulfat Caracteristici: legat covalent de proteine care formeaz agregate Distribuie: cartilaje, tendoane, ligamente, aort, schelet, etc. Rol: asigur elasticitatea, compresibilitatea cartilajelor

OH

GlcUA

1,3

GalNAc

GLICOZAMINOGLICANI
H H O COOH OH H H SO H O CH2OH O H H H H H HNCOCH3

Dermatan sulfat
Unitate repetitiv: acid iduronic (glucuronic) + N-acetilgalactozamin4-sulfat Caracteristici: legat covalent de proteine Distribuie: piele, perei vasculari, sclerotic, valvele inimii Rol: asigur elasticitatea i rezistena

OH

IdUA

1,3

GalNAc

Heparin
H H O COOH OH H H OS CH2O S O H H H OH H H HN S
Unitate repetitiv: acid iduronic-2-sulfat + N-sulfo (acetil)-glucozamin6 sau 3-sulfat Caracteristici: nelegat covalent de proteine Distribuie: mastocite din piele, ficat, plmni Rol: anticoagulant (poteneaz efectul antitrombinei III), agent de clarificare a plasmei (elibereaz LPL din pereii vasculari)

IdUA

1,4

GlcN

10/15/2010

GLICOZAMINOGLICANI
H COOH O H H OH H H OH O CH2O S O H H OH H H H HNCOCH3

Heparan sulfat
Unitate repetitiv: acid glucuronic + N-acetil (sulfat)-glucozamin-6-sulfat Caracteristici: legat covalent de proteine Distribuie: ubiquitar, att n spaiul extracelular ct i n membranele celulelor esutului conjunctiv Rol: asigur elasticitatea i rezistena

GlcUA

1,4

GlcNAc

HO H

CH2OH O H H H

H O H

CH2O S O H O OH H H H HNCOCH3

Keratan sulfat I i II
Unitate repetitiv: galactoz (6-sulfat) + N-acetil-glucozamin-6-sulfat Caracteristici: conine i Man, Fuc, NANA, GalNAc legat covalent de proteine Distribuie: cornee (I), cartilaje, schelet (II) Rol: asigur transparena corneei, elasticitatea i rezistena

OH

Gal

1,4

GlcNAc

PROTEOGLICANI - Structura
Sunt alctuii din proteina miez de care se ataeaz prin legturi O- sau N-glicozidice, mai multi glicozaminoglicani (85-95%) identici / diferii.

Legtura O-glicozidic

10/15/2010

Agregan - Structura

AGREGAN

Agregat de proteoglicani

10/15/2010

Proteoglicani - Distribuie
esut conjunctiv din: piele, tendoane, ligamente, matrice osoas, vase de snge, cornee Lichid sinovial Secreii mucoase

Proteoglicani - Caracteristici fizico-chimice

Datorit glicozaminoglicanilor posed numeroase sarcini negative (-COO-, -OSO3-, -NHSO3- ) => fixeaz cationi (Na+, K+, Ca+2) care se nconjoar de numeroase molecule de H2O => gel Formeaz soluii coloidale vscoase sau geluri = ciment intercelular maleabil, flexibil, cu proprieti lubrifiante, antioc Se asociaz cu fibrele de colagen, elastin, fibronectin (din spaiul extracelular) => reele care fiuncioneaz ca nite site moleculare

10/15/2010

Proteoglicani Rol biologic

Componente structurale ale matricei celulare (ciment intercelular maleabil, flexibil, cu proprieti lubrifiante, antioc)

Acioneaz ca site moleculare => mpiedic deplasarea moleculelor mari, controleaz deplasarea apei & electroliilor
Asigur compresibilitatea cartilajelor, transparena corneei Ca i componente ale membranelor celulare sunt receptori, respectiv sunt implicate n interaciunea celul-celul Ca i componente ale membranei bazale determin ionselectivitatea glomelurilor renali

Proteoglicanii asigur compresibilitatea cartilajelor

Compresie

Relaxare

10/15/2010

Proteoglicani - Biosinteza
Localizare
reticolul endoplasmic i aparatul Golgi din celulele esutului conjunctiv (fibroblaste, condroblaste, osteoblaste), mastocite;

Etapele sintezei heparinei

sinteza proteinei miez; ataarea secvenei Xil-Gal-Gal; formarea heteropolizaharidului primar: (GlcUA-GlcNAc)n sub aciunea glicozil transferazei i a glucuronoziltransferazei, folosind UDP-derivaii GlcNAc i GlcUA; deacilare parial (50%) a GlcNAc;

N-sulfatare sub aciunea sulfotransferazelor specifice (donor PAPS) i deacilare (50%) a GlcNAc;
epimerizare a 90% din GlcUA; O-sulfatare a IdUA (n poz. 2 ); O-sulfatare a GlcN (n poz. 6). Reglarea se realizeaz la nivelul sintezei hexozaminelor.

Proteoglicani -Degradare
Localizare: lizozomi Etape (ex. degradarea heparan sulfatului)
desfacerea legturii dintre proteina miez i glicozaminoglicani sub aciunea proteoglicanazelor; degradarea proteinei miez sub aciunea proteazelor degradarea glicozaminoglicanilor sub aciunea enzimelor lizozomale:
exoglicozidaze endoglicozidaze arilsulfataze (vezi schema).

10/15/2010

Proteoglicani Sinteza & degradare

Modificri patologice
Mucopolizaharidoze = boli lizozomale
Deficiena unor enzime implicate n degradarea glicozaminoglicanilor determin acumularea intralizozomala a acestora trasaturi infiltrate ale fetei, tegumente ingrosate, opacifierea corneei, hepatosplenocardiomegalie, retard mental, deficit somatic (nanism), displazie osoasa, hernii, osteoartropatie cu anchiloza in flexie, tulburri cardio-pulmonare, pierderea auzului

Metastazarea celulelor tumorale este determinat de

lipsa heparansulfatului (implicat n adeziunea celular) din membrana celulelor tumorale; sinteza crescut de acid hialuronic care faciliteaz migrarea celulelor tumorale

10/15/2010

Deficienele enzimelor din degradarea GAG =>

Sindrom Harler (MPS I) Acumulare dermatan sulfat si heparan sulfat in tesuturi si urina Macrocefalie & Facies dismorf Opacifiere cornee Retard somatic & mental Contractura articulatiilor in flexie

Mucopolizaharidoze
Sindrom Hunter (MPS II) Acumulare dermatan sulfat si heparan sulfat in tesuturi si urina Tablou clinic asemanator MPS I dar fara opacifierea corneei

Sindrom Sanfilipo (MPS III) Afectare severa a sistemului nervos Retard mental Dismorfism moderat Sindrom Sly(MPS VII) Acumulare dermatan sulfat si heparan sulfat in tesuturi si urina Tablou clinic foarte variat

Mucopolizaharidoze Tablou clinic

Hernie ombilical Hepatosplenomegalie

Macrocefalie Facies dismorf

Opacifierea corneei

Mna n ghear

10

10/15/2010

Modificri fiziologice asociate mbtrnirii

Ridarea pielii, datorit modificrii raportului dintre glicozaminoglicanii din piele; Dezvoltarea plcii ateromatoase (dermatan sulfatul sintetizat de celulele musculare netede leag lipoproteinele plasmatice, ex. LDL); Osteoartrita, datorit reducerii nivelului condroitin sulfatului, respectiv creterii nivelului keratan sulfatului i a acidului hialuronic din cartilaje;

11