corelate cu originea etnic i geografic a populaiei investigate.

Polimorfismele ADNmt sunt

intens exploatate n prezent n domeniile paleoantropologiei, criminalisticii i medicinii
legale.
Existena mutaiilor avantajoase este susinut de argumente circumstaniale. Se
consider c variantele care, realiznd o cuplare strns a respiraiei cu fosforilarea oxidativ,
reduc producia de cldur i o cresc pe cea de ATP, sunt favorabile vieii la tropice. Invers,
mutaiile care relaxeaz cuplarea, intensificnd astfel termogeneza, ar fi avantajoase n
regiunile arctice. Este foarte probabil ca selecia natural s fi operat reinnd, atunci cnd
populaiile au migrat ntre ecuator i pol, mutaiile optime pentru anumite condiii climaterice
i eliminndu-le pe cele inadecvate. Variantele prezumate a conferi avantaj selectiv nu au fost
nc identificate.
Mutaiile detrimentale conduc la apariia unor manifestri clinice a cror severitate
difer n funcie de gradul heteroplasmiei, tipul celulelor care le poart i gena afectat.
n cazul mutaiilor heteroplasmice, relaia dintre proporia moleculelor ADN mutante
i declinul produciei de energie este una direct. Totui, efectele fenotipice ale mutaiilor se
fac resimite numai atunci cnd eficiena global a fosforilrii oxidative scade sub un anumit
nivel, denumit prag energetic, a crui valoare variaz de la un esut la altul. Cel mai sensibil la
deficitul energetic este sistemul nervos; urmeaz, n ordine, muchii scheletici, inima i
rinichiul, glandele endocrine i ficatul.
Mai puin evident este ns modul n care alterrile diferitelor gene mitocondriale se
coreleaz cu severitatea i mai mult dect att chiar cu trsturile fenotipului patologic pe
care l imprim. Este un fapt bine stabilit c exist mai multe mutaii care se fac rspunztoare
de apariia unui acelai fenotip i c o aceeai mutaie poate imprima fenotipuri semnificativ
diferite. Aceast disociere ntre genotip i fenotip se explic prin naltul polimorfism al
ADNmt, precum i prin intervenia unor factori modificatori epigenetici.
O meniune special i se cuvine depleiei mitocondriale. Depleia este termenul utilizat
pentru a desemna reducerea drastic (uneori cu 98%) a cantitii de ADNmt. Depleia se
produce, de regul, ntr-un singur organ (specificitate de esut), cruia i deterioreaz profund
i ireversibil capacitatea funcional. Literatura conine exemple de depleii ale ADNmt din
muchi, rinichi, ficat i creier. Marea lor majoritate determin tulburri clinice de o gravitate
extrem, instalate n primele sptmni de la natere i compatibile cu o supravieuire de
numai cteva luni. Cauzele depleiei par a fi mutaiile unor gene autosomale, un exemplu
constituindu-l gena factorului de transcriere NRF1. Acest factor regleaz transcrierea genelor
nucleare care codific proteinele mitocondriale. Prezena depleiei ADNmt la mai muli
membri ai unei fratrii, indiferent de sexul lor, precum i absena semnelor la prini, indic
natura recesiv a mutaiei cauzatoare.
4.TRANSMITEREA LA DESCENDENI A MUTAIILOR ADNmt.
Mutaiile produse n genele mitocondriale se transmit exclusiv pe linie matern.
Exceptnd cteva specii de Drosophila i de roztoare, spermatozoizii nu contribuie cu
citoplasma lor (n care se afl un numr de numai 25-30 de mitocondrii) la formarea zigotului.
Potrivit unor observaii recente, celor cteva mitocondrii ale spermatozoizilor ptrunse
ocazional n ovul n momentul fertilizrii, li se ataeaz molecule de ubiquitin care le
marcheaz n vederea distruciei. Rezult c toate cele aproximativ 200.000 de mitocondrii
prezente n citoplasma zigotului aparin ovulului i, ca atare, celulele viitorului organism vor
fi echipate numai cu mitocondrii materne. Consecina poate fi exprimat astfel: mamele i
transmit genotipul mitocondrial copiilor de ambele sexe, dar numai fiicele lor vor fi acelea
care l vor transmite generaiei urmtoare . n cazul n care femeia purttoare a unei mutaii
mitocondriale are numai descendeni de sex masculin, mutaia se va elimina din populaie
deoarece brbaii nu pot asigura propagarea ei n succesiunea generaiilor.

PRINCIPALELE TIPURI DE BOLI MITOCONDRIALE

MANIFESTRILE CLINICE ALE AFECIUNILOR MITOCONDRIALE
Principalele elemente care sugereaz implicarea alterrii funciilor mitocondriilor n
etiopatogenia unei boli sunt:
caracterul necoerent al asocierii semnelor i simptomelor clinice;
debutul cel mai adesea precoce i evoluia rapid progresiv;
afectarea concomitent a cel puin trei organe care nu au n comun nici originea
embriologic i nici funciile biologice;
modificrile recurente survenite n tabloul clinic cu ocazia unor infecii
(ameliorri, agravri);
prezena n tabloul clinic al bolilor comune a unor combinaii de trsturi atipice,
inexplicabile.
Perturbrile procesului fosforilrii oxidative antreneaz virtual disfuncii ale
oricrui organ sau esut. Ele pot afecta esuturile individual sau n diferite combinaii. n plus,
mutaii diferite ale ADNmt pot produce manifestri clinice similare, iar o aceeai mutaie
poate imprima fenotipuri morbide variate. Studii efectuate pe familii n care s-au decelat
mutaii heteroplasmice ale ADNmt demonstreaz c, pe msura creterii proporiei de ADNmt
mutant, are loc o reducere a produciei de energie, iar cnd este atins un anumit prag, variabil
n funcie de esut, criza energetic determin declanarea manifestrilor patologice. Valoarea
pragului depinde de mai muli factori: declinul produciei de energie; creterea produciei
speciilor reactive de oxigen; iniierea apoptozei care, depletnd esuturile, compromite
funcionalitatea acestora. Diferena ntre celulele normale i cele defective n ce privete
funcia mitocondrial este minim, instalarea bolii producndu-se atunci cnd proporia de
ADNmt mutant atinge 85%.
Semnele de debut pot aprea n orice moment al ontogeniei din perioada antenatal,
pn la vrsta adult iar spectrul simptomelor de debut ale bolilor mitocondriale este foarte
larg (tabelul 1).
Tabelul 1. Diversitatea simptomelor bolilor mitocondriale i relaia cu vrsta de debut.
ORGAN

PERIOADA
NEONATAL
(0- 1 LUN)

COPILRIE
(O LUN-2 ANI)

ADOLESCEN,
VRSTA ADULT

SNC

Hipotonie
Acidoz lactic
Com acidocetozc

Mioclonie
Ataxie cerebeloas
Spasticitate
Retard psihomotor
Leucodistrofie
Atrofie cortical
Neuropatie periferic

Musculatura
striat

Miopatie
Atrofie muscular

Retard psihomotor
Ataxie cerebeloas
Mioclonie
Pseudoaccidente
vasculare cerebrale
Encefalomiopatie
necrozant
subacut
Miopatie
Atrofie muscular
Slbiciune muscular
Hipotonie
Mialgie
Intoleran la efort

Miopatie progresiv
Slbiciune muscular
Mialgie
Intoleran la efort
Mioglobinurii recurente

Mioglobinurii recurente
Hepatomegalie
Disfuncie hepatocelular
Inim
Cardiomiopatie
Cardiomiopatie
Cardiomiopatie
hipertrofic
hipertrofic
concentric
hipertrofic sau dilatativ
Bloc cardiac
Rinichi
Tubulopatie proximalTubulopatie proximal
(sindromToni-Debre- (sindromT DF)
Fanconi)
Aparat
Vom, diaree
digestiv
Atrofie a vilozitilor
intestinale
Insuficien pancreatic
exocrin
Sistem
Hipostatur
Diabet
endocrin
Hipoglicemie
Hipoparartiroidie
Hiperaldosteronism
Sistem
Anemie sideroblastic
hematopoietic
Neutropenie,
trombopenie
Analizatorul
Surditate neurosenzorial Surditate neurosenzorial
auditiv
Analizatorul
Atrofie optic
Oftalmoplegie extern
vizual
Oftalmoplegie extern
progresiv
progresiv
Ptoz palpebral
Retinit pigmentar
Atrofie optic Leber
Ptoz palpebral
Retinit pigmentar
Cataract
Cataract
Piele
Pigmentaie anormal a
regiunilor expuse la
soare.
Pr uscat i friabil
Tricotiodistrofie
Ficat

Insuficien hepatic

Dup un interval relativ scurt de timp, semnelor iniiale li se adaug invariabil cele
ale afectrii neuromusculare. n general, semnele prezente la debut persist i se agraveaz
gradual. Uneori ns, ele pot regresa, chiar pn la dispariie, o dat cu dezvoltarea unei
simptomatologii care exprim suferina altor organe. Astfel, diareea, pancitopenia sau
insuficiena hepatic se pot remite atunci cnd n prim-planul manifestrilor clinice se
plaseaz semnele deficitului neuromuscular. De notat c, urmare a acumulrii de ADNmt
mutant i a segregrii replicative, n fenotipul unui bolnav se pot nregistra variaii importante,
mergnd de la nrutirea dramatic a manifestrilor clinice pn la completa conversie a
afeciunii Un exemplu l constituie sindromul Pearson (produs de deleii ale ADNmt din
celulele sanguine), caracterizat prin anemie sideroblastic i insuficien pancreatic exocrin.
Bolnavii care supravieuiesc pn n a doua decad a vieii dezvolt adesea sindromul KearnsSayre (produs de acumularea de deleii ale ADNmt n muchi i alte esuturi), n ale crui
simptome nu se includ anemia i deficitul enzimelor pancreatice.
Principalele tipuri de boli mitocondriale, mutaiile ADNmt care le determin i codul OMIM
la care pot fi obinute informaii comlete i actualizate sunt prezentate n tabelul 2.

Tabelul 2 Boli cauzate de defecte ale funciei mitocondriale i de mutaii ale ADNmt.
Boala
Mutaii
Oftalmoplegia extern cronic progresiv (CPEO)
Deleii
Sindromul Kearns-Sayre (KSS)
Deleii
Miopatii oculare
Rearanjri
Cardiomiopatii ereditare
Miopatie, encefalomiopatie, acidoz lactic, accidente
ARNt leuAG 3243
cerebrale vasculare (myopathy, encephalomipathy, lactic
acidosis, stroke MELAS)
Epilepsia mioclonic cu fibre musculare roii n lambouri ARNt lysAG 8344
(Myoclonic epilepsy and ragged red fibers MERFF)
Boala Leigh i slbiciunea muscular neurogenic, ataxia i TG 8993; TC 8993
retinita pigmentar (neurogenic muscle weakness, ataxia
and retinitis pigmentosa - NARP)
Neuropatia optic ereditar Leber (Leber hereditary optic Multiple
neuropthy LHON)
Ototoxicitatea aminoglicozidic (aminoglycoside
AG 1555
ototoxicity)
Encefalomiopatia progresiv
Boala Alzheimer cu debut tardiv, boala Parkinson
ARNt gluAG 4336
Se accept c exist cinci categorii majore de afeciuni, definite molecular,
determinate de mutaii ale ADNmt (citopatii mitocondriale).
Oftalmoplegia extern cronic progresiv (cpeo) i sindromul Kearns-Sayre (KSS).
- CPEO se caracterizeaz prin ptoz palpebral, oftalmoplegie, tulburri miopatice la nivelul
musculaturii membrelor. La examenul histologic al fragmentelor de muchi scheletici
recoltate prin biopsie se observ aspectul care definete cele mai multe dintre
encefalomiopatiile mitocondriale: fibre musculare roii n lambouri. Acest aspect este creat
prin proliferarea anormal a mitocondriilor, consecutiv defectelor biochimice severe ale
fosforilrii oxidative.
Sindromul Kearns-Sayre (KSS) se caracterizeaz prin hipostatur, ntrzierea
dezvoltrii pubertare, oftalmoplegie extern, ptoz palpebral, semne de hiperparatiroidie,
surditate, ataxie cerebeloas, blocuri cardiace i retinopatie pigmentar atipic. Afeciunea
debuteaz naintea vrstei de 20 de ani. Ambele sindroame sunt consecina unei deleii unice
mari (8 kb) a ADNmt.
Sindromul MELAS (Mitochondrial myopathy, Encephalopathy, Lactic acidosis,
Stroke-like episodes) este o boal multisistemic n care, pe lng semnele cardinale
desemnate prin acronimul MELAS exist o ampl varietate de anomalii clinice, dintre care
cele mai frecvente sunt: hipostatura, surditatea, convulsiile generalizate, episoadele de vom.
Consecutiv ictusurilor cerebrale se instaleaz hemiplegii, hemianopsii, amauroz central. La
peste 80% dintre pacieni se detecteaz mutaii punctiforme n gena ARNt Leu(UUR) n poziiile
nucletidice 3243 i 3271.
Epilepsia mioclonic cu fibre musculare roii n lambouri (myoclonic epilepsy
with ragged-red fibers MERFF) se definete prin mioclonie intens, ataxie progresiv,
slbiciune muscular, crize de convulsii generalizate, surditate, demen, acidoz lactic,
ictusuri cerebrale recurente. Mutaia care determin MERFF este o tranziie AG la situsurile
8344 sau 8356 din gena pentru ARNtLYS.
Neuropatie, ataxie, retinit pigmentar (NARP)/boala Leigh cu transmitere
matern. Sindromul NARP include: ntrziere a creterii postnatale, detres respiratorie cu

crize de apnee, slbiciune la nivelul muchilor proximali ai membrelor, neuropatii senzoriale

cu amauroz i surditate, ataxie, convulsii, retinit pigmentar. La bolnavii cu NARP se
detecteaz o mutaie punctiform n poziia 8993 a genei care codific subunitatea 6 a ATP
sintetazei. Cnd proporia celulelor mutante este foarte nalt, se constituie fenotipul
encefalopatiei necrozante subacute, cunoscut sub numele de boala Leigh
Neuropatia optic ereditar Leber (LHON). Boala debuteaz dramatic prin semne
de nevrit retrobulbar acut sau subacut nedureroas. Pierderea vederii se instaleaz brusc i
este, n 50% din cazuri, unilateral; afectarea celuilalt ochi este ns obligatorie i se produce
n interval de aproximativ o lun. 70% dintre bolnavi sunt brbai, ceea ce a condus la ipoteza,
neconfirmat ns, a interveniei adiionale a unei gene de pe cromozomul X. Vrsta medie de
debut este de 23 de ani. Aspectul de papilit este prezent de la nceputul bolii; atrofia optic
nu reprezint, totui, niciodat un semn precoce; dezvoltarea ei este progresiv i devine
complet doar la dou treimi dintre bolnavi. n unele cazuri, tabloul clinic include, pe lng
manifestrile oftalmologice, diferite alte tulburri: neuropatii periferice, distonie, mielopatie
demielinizant, defecte de conducere cardiac. Mutaiile 3460 i 11778 (de la nivelul genelor
ND1 i ND4 imprim un caracter de gravitate, n timp ce forma indus de mutaia 14484 este
mai blnd, compatibil chiar cu redobndirea parial a vederii.
Tabelul 3 prezint sinoptic trsturile clinice ale celor mai frecvente sindroame clinice
produse de mutaiile ADNmt iar n tabelul 4 simptomele prezente n diferite citopatii
mitocondriale sunt grupate pe organe i sisteme.
Tabelul 3. Boli mitocondriale mai frecvent ntlnite.
Boala
Trsturi clinice
Trsturi adiionale
Oftalmoplegia extern
Oftalmoplegie extern
Miopatie proximal moderat
cronic progresiv
Ptoz bilateral
Sindromul Kearns Sayre
Debut prin oftalmoplegie extern Surditate bilateral
progresiv naintea vrstei de 20 Miopatie
de ani
Disfagie
Retinit pigmentar
Diabet
Ataxie cerebeloas, blocuri
zaharat,Hipoparatiroidism
cardiace
Demen
MELAS
Ictusuri cerebrale naintea vrstei Diabet zaharat
de 40 de ani
Cardiomiopatie (iniial
Convulsii i/sau demen
hipertrofic, ulterior
Fibre musculare roii n lambouri dilatativ)
i/sau acidoz lactic
Surditate bilateral
Retinopatie pigmentar
Ataxie cerebeloas
Epilepsie mioclonic
Mioclonii
Demen
cu fibre musculare roii
Convulsii
Atrofie optic, surditate
n lambouri
Ataxie cerebeloas
bilateral
(MERF)
Miopatie
Neuropatie periferic,
spasticitate
Lipoame multiple
Neuropatia optic ereditar Pierderea bilateral a vederii,
Distonie
Leber (LHON)
nevrit retrobulbar nedureroas Sindroame de preexcitare
Raportul brbai : femei 4:1
cardiac
Vrsta medie de debut 23 de
ani
Neuropatie, ataxie i
Neuropatie periferc cu debut n Calcificri ale ganglionilor
retinit pigmentar
adolescen sau la adult
bazali
(NARP)
Ataxie
Electroretinogram anormal

Sindromul Leigh

Miopatia infantil i
acidoza lactic
(forme letale i neletale)
Sindromul Pearson

Retinopatie pigmentar
Neuropatie sesorimotorie
Encefalopatie subacut
Calcificri n ganglionii bazali
Semne ale afectrii cerebelului i Istoric matern de afeciuni
ale trunchiului cerebral
neurologice sau de sindrom
Leigh
Hipotonie n primul an de via Forma fatal poate fi asociat
Dificulti n alimentaie i
cu cardiomiopatie i/sau cu
respiraie
sindrom Toni-Debre-Fanconi
Anemie sideroblastic
Defecte tubulare renale
Pancitopenie
Insuficien pancreatic exocrin

Tabelul 4. Tulburri asociate cu citopatiile mitocondriale.

Organ/sistem
Simptome asociate
Creier
ntrzieri ale dezvoltrii, retard mental, tulburri neuropsihice,
demen, crize comiiale, mioclonii, tulburri ale motilitii (distonie,
diskinezie, coree), paralizie cerebral atipic, migrene, ictusuri
cerebrale.
Nervi
Slbiciune, durere neuropatic, absena reflexelor, probleme
gastrointestinale (reflux gastroesofagian, golire gastric ntrziat,
constipaie, pseudo-obstrucie), lipotimii, transpiraie absent sau
excesiv cu afectare a termoreglrii.
Muchi scheletici,
Slbiciune, hipotonie, crampe, dureri musculare
Muchi oculari
Ptoz, strabism dobndit, oftalmoplegie
extrinseci
Rinichi
Tubulopatie proximal cu pierderi de proteine, magneziu, fosfor,
calciu etc
Inim
Defecte de conducere (blocuri), cardiomiopatii
Ficat
Hipoglicemie, insuficien hepatic
Analizator vizual
Reducerea sau pierderea vederii (retinit pigmentar, atrofie optic)
Analizato auditiv
Deficit al auzului, surditate
Pancreas
Diabet i insuficiena secreiei exocrine
Sistemice
Falimentul creterii, hipostatur, oboseal, probleme respiratorii
Unele dintre trsturile fenotipice imprimate de diferitele mutaii ale ADNmt sunt
comune mai multor entiti nosologice incluse n categoria citopatiilor mitocondriale.
Suprapunerea semnelor clinice este redat n tabelul 5, iar n tabelul 6 sunt prezentate
manifestrile sistemice ale citopatiilor mitocondriale.

Tabelul 5. Trsturi clinice asociate cu citopatiile mitocondriale.

Trstura clinic
CPEO/
MELAS
MERRF
KSS
Oftalmoplegie
+

Degenerarea retinian
+

Retinita pigmentar

NARP

LHON

Atrofia optic
Blocuri cardiace
Mioclonii
Ataxia
Slbiciune
Crize comiiale
Demen
Hipostatur
Episoade de vom
Cecitate cortical
Hemiparez, hemianopsie
Surditate sensorineural
Neuropatie
Acidoz lactic
Fibre musculare roii n
lambouri
Istoric familial pozitiv

+
+

+
+

+
+

+
+
+
+
+
+
+
+

+
+

+
+
+
+
+
+

+
+

+
+
+
+
+

+
+

Tabelul 6. Manifestri sistemice ale bolilor mitocondriale.

Metabolice
Acidoza lactic, coma cetoacidozic
Hepatice
Hepatopatie, insuficien funcional
Cardiace
Cardiomiopatie, defecte de conducere
Renale
Tubulopatii proximale i distale, glomerulopatii
Intestinale
Diaree, atrofie viloas, sindrom pseudoobstructiv
Pancreatice
Disfuncie a acinilor
Endocrine
Hipertiroidie, diabet zaharat, hipostatur
Oftalmologice
Cataract, retinopatie pigmentar
Cel mai adesea, manifestrile clinice iniiale ale citopatiilor mitocondriale exprim
suferina unui singur organ. Nici una dintre manifestrile de debut nu este de natur s
orienteze asupra implicrii n patogenia bolii a unui defect mitocondrial. Asocierea ulterioar
a semnelor afectrii altor aparate i sisteme impune efectuarea unor examene paraclinice ale
cror rezultate pot documenta posibila disfuncie mitocondrial (tabelul 7). Testul decisiv de
diagnostic l constituie ns analiza molecular a ADNmt.
Tabelul 7. Rezultate posibile ale explorrilor paraclinice n citopatiile mitocondriale.
Histologie
Fibre musculare roii n lambouri
Histochimie
Proliferarea excesiv a mitocondriilor i deficienele citocrom c
oxidazei
Microscopie
Anomalii morfologice ale mitocondriilor
electronic
Electromiografie
Poteniale miopatice
Audiogram
Surditate senzorial
Electrocardiogram
Defecte de conducere
Biochimie
Raport molar lactat/piruvat crescut (>20) n ser i n LCR;
hiperlactatemie < 3 mm/l sau < 1,5 mm/l n LCR ; acidoz
metabolic (bicarbonai plasmatici crescui).
Polarografia permite stabilirea consumului de oxigen.

Neuroimagistic
(TC,RMN)
Analiza ADNn i
ADNmt

Hiperglicemia indic prezena unui diabet asociat.

Calcificri n ganglionii bazali, atrofie difuz i/sau focal a
cortexului i cerebelului
Mutaii, deleii, duplicaii n celulele sanguine sau din fibrele
muchilor scheletici. Pot fi evideniate mutaii n genomul nuclear
sau n cel mitocondrial

2. TRATAMENTUL BOLILOR MITOCONDRIALE

Tratamentele convenionale conduc uneori la ameliorarea temporar a
simptomatologiei clinice a bolilor mitocondriale i la restaurarea, cel puin parial, a
parametrilor biochimici alterai. Aceste tratamente comport administrarea agenilor
antioxidani (ascorbat, alfa-tocoferol, menadion, glutation, acid lipoic, seleniu), a unor
cofactori ai enzimelor lanului respirator (riboflavina), a vitaminelor complexului B (tiamin,
niacin, B6, B12, biotin, acid pantotenic), a L-carnitinei (o substan alimentar necesar
transportului acizilor grai prin membranele mitocondriale) i a coenzimei Q10, aceasta din
urm participnd la generarea de energie i acionnd ca antioxidant cu rol de protecie a
celulelor mpotriva injuriei produse de speciile reactive de oxigen. Trebuie specificat c
tratamentele convenionale nu reuesc s stabilizeze boala i, cu att mai puin, s o vindece.
La unii pacieni severitatea simptomelor poate s decline iar progresia bolii poate fi ntrziat.
Se impune ns ca tratamentul s fie condus de un specialist n boli metabolice deoarece
administrarea fr prescripie a medicaiei se poate solda cu ntrzierea sau eecul stabilirii
unui diagnostic corect.
Elaborarea unor strategii alternative reprezint o cerin obligatorie; aceste strategii nu
pot fi altele dect cele ale terapiei genice.
Pn n prezent au fost imaginate trei abordri diferite care vizeaz suplinirea sau
corectarea prin metodele geneticii moleculare a defectelor structurale ale ADNmt:
nlocuirea genelor mitocondriale mutante cu gene normale inserate n genomul
nuclear. Procedura presupune convertirea prin mutagenez dirijat a codonilor
eretici n cuvinte ale codului universal. Gena este apoi amplasat ntr-un vector i
transfectat prin intermediul acestuia n genomul nuclear. Produsul proteic
sintetizat n citoplas este cuplat cu o secven de sortare care l introduce n
mitocondrii unde va funciona compensnd deficitul creat de mutaia patologic;
introducerea n mitocondrii a unei proteine cuplate cu secvena de ADNmt care
codific lanuri polipeptidice sau molecule de ARNt i ARNr. Importul n
mitocondrii este asigurat prin ataarea semnalului de sortare. Prin aceast tehnic
s-a reuit transferul n mitocondrii al unor segmente de ADN cu lungimi cuprinse
ntre 0,3 i 3 Kb;
eliminarea moleculelor ADNmt mutante prin blocarea specific a replicrii: se
utilizeaz oligonucleotide antisens care, fixndu-se pe secvena alterat, fac
imposibil replicarea moleculei n care se afl mutaia, fr a afecta replicarea
moleculelor normale.
n laboratoarele de cercetare aceste strategii i-au dovedit eficiena. Introducerea lor n
practic este ns condiionat de rezolvarea multiplelor probleme de ordin tehnic cu care se
confrunt, n general, terapia genic.
C. MUTAIILE ADNmt I SENESCENA

Capacitatea generrii ATP prin procesele fosforilrii oxidative declin n paralel cu

naintarea n vrst. Deficitul de ATP este evident n toate esuturile senescente alctuite din
celule difereniate terminal (postmitotice). Declinul produciei de ATP se coreleaz att cu
instalarea i progresiunea semnelor senescenei, ct i cu acumularea de alterri mutaionale
ale ADNmt.
n celulele sistemului nervos central ale indivizilor vrstnici a fost decelat o deleie de
5 Kb. Cea mai nalt proporie de molecule ADNmt deletate se nregistreaaz n substana
neagr, nucleul caudat i putamen. La vrsta de 85 de ani aceast mutaie este detectat n
peste 10% din neuronii nucleilor bazali; ea afecteaz i alte zone ale encefalului, dar lipsete
din neuronii cerebelului. n fibrele muchilor scheletici, pe lng deleia de 5 Kb, la
persoanele vrstnice se deceleaz i o deleie de 3 Kb. Dup vrsta de 35 de ani, n fibrele
miocardice ncep s se acumuleze mutaii reprezentate cu precdere de deleia unui segment
cu o lungime de 3,6 Kb.
Incriminate n producerea mutaiilor ADNmt sunt speciile reactive de oxigen. Nivelul
crescut al 8-hidroxiguanozinei n ADNmt este consecina stresului oxidativ la care este expus
permanent genomul mitocondriilor. Proporia de 100-300 ori mai nalt a moleculelor cu
deleii n ganglionii bazali ai btrnilor se explic prin faptul c aceste formaiuni sunt foarte
bogate n fibre dopaminergice; dezaminarea oxidativ a dopaminei de ctre
monoaminooxidaz produce o mare cantitate de radicali liberi. n boala coronarian,
alternana ischemie-reperfuzie stimuleaz producerea speciilor reactive de oxigen.
Prin intermediul mutaiilor pe care le determin, radicalii liberi se constituie n cauza
major a deteriorrii progresive a mecanismelor mitocondriale implicate n metabolismul
energetic. Acumularea n exces a mutaiilor mitocondriale i dezechilibrul subsecvent ntre
necesarul de energie al celulelor i posibilitatea asigurrii acestuia se afl la originea bolilor
degenerative ale vrstei a treia.
D. MUTAIILE ADNmt N BOLILE DEGENERATIVE
n neuronii dopaminergici din regiunea nigrostriat i din muchii scheletici ai
pacienilor cu boala Parkinson au fost identificate deficiene ale complexului I i leziuni
oxidative, prezente i n cibrizii realizai din celulele patologice. Cibrizii sunt celule himerice,
formate prin fuzionare. Nucleii acestor celule provin de la indivizi aparent sntoi, iar
citoplasma de la bolnavi cu afeciuni mitocondriale. Raportul ADNmt mutant/ADNmt
normal este, n medie, de 10 ori mai nalt la bolnavi comparativ cu martorii sntoi.
Rspunztoare de perturbarea metabolismului energetic este considerat a fi deleia de 5 Kb a
ADNmt, evideniabil mai ales n neuronii nucleilor bazali.
Scleroza lateral amiotrofic este consecina degenerrii motoneuronilor somatici din
trunchiul cerebral i mduva spinrii. Aproximativ 10% dintre bolnavi sunt purttori ai unor
mutaii autosomal dominante cu penetran nalt, exprimate dup vrsta de 60 de ani.
Mutaiile intereseaz gena nuclear codificatoare a uneia dintre formele superoxid dismutazei.
n lipsa SOD, anionul superoxid rmne activ perioade mai lungi de timp i i exercit
efectul toxic asupra ADNmt, provocndu-i leziuni ce se vor traduce prin deficit energetic.
n boala Alzheimer mutaiile ADNmt sunt detectabile n neuronii cortexului cerebral n
care se nregistreaz i reduceri importante ale activitii piruvat dehidrogenazei i a
complexului I. Aceste observaii certific participarea la patogenia bolii a perturbrii
mecanismelor mitocondriale ale generrii de energie.
Un alt esut ale crui funcii sunt frecvent alterate ca urmare a acumulrii defectelor
mitocondriale este miocardul. n fibrele musculare cardiace ale bolnavilor cu cardiomiopatie
dilatativ analizele moleculare relev prezena moleculelor ADNmt cu deleii de dimensiuni
variate. Majoritatea cazurilor de cardiomiopatie dilatativ sunt familiale. S-a sugerat c de
producerea deleiilor multiple ale ADNmt se face rspunztoare mutaia unei gene nucleare cu
rol n meninerea integritii genomului mitocondrial.

Diabetul zaharat insulino-independent (DZII) se dezvolt la vrste avansate i

manifest trsturile unei boli degenerative. La unii dintre bolnavii cu DZII au fost detectate
mutaii ale ADNmt n celulele insulelor Langerhans i n fibrele musculare scheletice. S-a
demonstrat c agenii diabetogeni interleukina , interferonul , factorul de necroz
tumoral tip alfa, aloxanul, streptozotocina acioneaz asupra mitocondriilor din celulele
insulare, stimulnd producerea speciilor reactive de oxigen sau determinnd alchilarea ADN.
Rupturile induse prin aceste mecanisme n moleculele ADNmt antreneaz moartea celulelor
beta, urmat de instalarea insuficienei de insulin.
La bolnavii cu sindrom Kearns-Sayre i la cei cu oftalmoplegie extern cronic
progresiv incidena diabetului zaharat este de cteva ori mai nalt dect n populaia
general, iar sindromul MELAS se asociaz uneori cu DZII. Rezult, aadar, c celulele
insulare, mari consumatoare de energie, se situeaz printre elementele cele mai afectate de
prezena mutaiilor constitutive sau dobndite ale ADNmt.
E. MUTAIILE MITOCONDRIALE I TUMORIGENEZA
Exist un consens n a se considera c ADNmt este implicat n tumorigenez datorit
att vulnerabilitii sale la stresul oxidativ, ct i mutabilitii nalte pe care o manifest.
Speciilor reactive de oxigen li se atribuie roluri n iniierea i n promovarea cancerului,
precum i n reducerea produciei de ATP mitocondrial. Aberaii mitocondriale au fost notate
n majoritatea tumorilor maligne (cancere de vezic urinar, sn, colon, rinichi, ficat, plmn,
stomac, ale capului i gtului, limfoame i leucemii). Mutaiile ADNmt detectate n cancere
sunt similare celor rspunztoare de producerea bolilor mitocondriale, Recent s-a raportat
prezena a 12 mutaii somatice homoplasmice n apte din zece linii celulare stabilite din
tumori colorectale. De altfel, n cele mai multe cancere mutaiile sunt homoplasmice, ceea ce
sugereaz c fixarea anumitor alterri ale ADNmt poate dota celulele maligne cu avantaj
selectiv. Creterea cantitii de transcripte ale ADNmt, precum i creterea expresiei
subunitilor codificate de ADNmt din alctuirea complexelor LR sunt interpretate ca
reflectnd rspunsul mitocondrilor la cerinele nalte de energie ale celulelor canceroase. Este
cunoscut c celulele maligne au, de regul, o capacitate considerabil mai mare dect cea a
corespondentelor lor normale de a realiza glicoliza aerob, fapt ce justific aseriunea c o
importan crucial n procesul tumorigenezei ar avea-o existena unei forme de interaciune
mitocondrie-celul, nc neprecizat.