Cultura de calus la vita de vie

Persoiu Dragos Nicolae

Grupa 6401

Calusul este esutul vegetal care se formeaz n mod natural la nivelul

suprafeelor tiate sau rnite cicatrizndu-le, dar se poate forma i la baza butailor,
constituind zona de genez a rdcinilor adventive.
Calusul tnr este o mas de esut care conine celule nedifereniate care se
divid activ. Calusul primar este cel care se dezvolt dintr-un organ al unei plante,
iar cel subdivizat i repicat reprezint calusul secundar. Se mai distinge un calus de
tip regenerativ (embriogen) care d natere ntotdeauna la neoplantule, i unul
neregenerativ (neembriogen), din care se difereniaz rdcini i uneori mugurai,
dar niciodat neoplantule. n timp ce calusul regenerativ este dens optic, translucid
sau opac, de culoare alb-lptoas, glbuie sau galben - verde, prezentnd zone
compacte cu celule nedifereniate, calusul neregenerativ este constituit dintr-o
mas cristalin, transparent, de culoare alb, brunie sau verde, cu o consisten
mai lax, mai friabil, desfcndu-se uor n pachete de celule. Regiunile friabile
prezint celule mari, mult vacuolizate. Aceste regiuni genereaz rdcini i mai rar
mugurai, dar niciodat plante. Potrivit lui NABORS (Cachi-Cosma,1987), cea
mai ridicat capacitate regenerativ, meninut timp ndelungat, o prezint calusul
regenerativ. Tot el a observat c acest tip de calus tinde s devin neregenerativ;
dup producerea acestei reversibiliti funcionale, procesul este definitiv, cele
dou tipuri de calus, diferite funcional, nefiind interconvertibile. De altfel, cele
dou forme de calus necesit hormoni diferii, n doze variate, att pentru
impulsionarea i susinerea creterii ct i pentru difereniere. De regul, calusul
regenerativ are o cretere mai lent, spre deosebire de cel neregenerativ.
S-a constatat c se genereaz mai mult calus din inoculii cultivai la
ntuneric dect din cei crescui la lumin, mediul optim pentru formarea calusului
embriogen fiind particular fiecrei specii. Creterea calusului se consider a fi
nedefinit, el putnd fi nmulit i cultivat la infinit, n condiiile repicrii periodice.
Dac subcultivarea nu are loc n timp util, are loc mbtrnirea culturii, ea i

schimb culoarea din glbui, galbenverzui ori verde, la cenuiu sau galben-brun;
uneori calusul poate cpta o culoare roiatic sau viinie datorit formrii i
acumulrii pigmenilor antocianici n sucul vacuolar.
Pentru inducerea calusului poate fi utilizat orice organ (rdcini, frunze,
flori, etc.) sau esut. n cazul n care inducerea este dificil, ori dac este nevoie de
calus juvenil, se folosesc embrioni imaturi, semine tinere ori pri ale acestora
(Pierik, 1997).
Utilizarea esutului calusal este variat. Asupra acestui tip de material
biologic se pot aplica cu succes diferii ageni stresani obinndu-se astfel linii
rezistente sau tolerante la condiii de mediu extreme. Calusul poate fi utilizat i ca
instrument de cercetare n diferite experimente de fiziologie, n studiul problemelor
de morfogenez, n urmrirea unor modificri ultrastructurale, (sub aciunea unor
anumii factori, administrai exogen sau n dependen de natura inoculilor din care
a provenit calusul), n analize de ordin biochimic, etc. Astfel, calusul poate fi
utilizat ca indicator al reaciei celulei vegetale la o serie de substane sau condiii
de cultur permind efectuarea unor experiene de fiziologie privind influena
unor regulatori de cretere, reacia la pesticide, noxe ori ioni grei, respiraia,
morfogeneza, testarea viabilitii celulare, a biogenezei unor produi primari sau
secundari de metabolism, cercetri de enzimologie, etc.
Inconvenientul acestui tip de cultur l constituie instabilitatea genetic a
celulelor calusale care se pot poliploidiza n anumite condiii (natura i
concentraia hormonilor prezeni, ocuri extreme, anaerobioza), avnd loc
modificri sub aciune a factorilor stresani i a agenilor mutageni. Acest neajuns
poate fi n schimb valorificat n sensul selectrii liniilor cu caliti speciale. La
dicotiledonate inducerea calusului este realizat cu mai mult uurin dect la
monocotiledonate sau la gimnosperme.