Embriogeneza somatic

Definire
n funcie de modul de obinere (sexuat, somatic sau vegetativ), embrionii pot fi de
mai multe tipuri:
- somatici sau adventivi, obinui prin regenerarea in vitro a celulelor sporofitului diploid
- partenogenetici, rezultai din ovule nefecundate
- androgenetici (n), rezultai din grunciori de polen
- ginogenetici (n), rezultai din gametofitul femel
Embriogeneza somatic parcurge, n urma unor mitoze succesive, aceleai faze (stadii)
ca i embriogeneza zigotic, n cazul dicotiledonatelor acestea fiind:
- stadiul globular (ncepe formarea esuturilor)
- stadiul de inim (apar cele dou cotiledoane)
- stadiul de torpil (cotiledoanele se alungesc, se formeaz axul principal)
- stadiul cotiledonar (cotiledoane complet formate, apar meristemele primare la
extremitile hipocotilului (apical-caulinar ntre cotiledoane i apical-radicular n partea
opus cotiledoanelor)
- stadiul de maturare (sinteza substanelor de rezerv, deshidratarea i intrarea n stare de
laten a embrionului) avnd ca finalitate smna.

Etapele embriogenezei somatice

a1. Recoltarea i fragmentarea embrionilor imaturi din ovule
a2. Prelevarea de explante din alte organe ale plantelor (ex. frunze)
b. Iniierea culturii de embrioni in vitro
c. Criostocarea (facultiv)
d. Multiplicarea embrionilor tineri n culturi cu suspensii de celule
e. Maturarea embrionilor
f. Germinarea embrionilor somatici pe mediu solid
g. Aclimatizarea plantulelor n ser
h. Transferul plantelor n pepinier/ locul de plantare definitiv

Deosebirile embriogenezei somatice, fa de cea zigotic sunt:

- iniierea embriogenezei are loc artificial
- suspensorul (formaiune ce are rolul de a mpinge embrionul n mediul nutritiv al
macroprotalului) lipsete, fiind nlocuit de ctre mediul de cultur
- obinerea unei embriogeneze somatice recurente la nivelul hipocotilului
- absena latenei embrionului

Factorii care influeneaz embriogeneza somatic:

1. Alegerea tipului de explant (inocul), n funcie de specie, organ, vrst, faza de
vegetaie, condiiile de vegetaie, numrul de repicri (pasaje) de la prima inoculare (n
 general, se aleg explante prelevate din meristeme nedifereniate sau organe imature:
scutelum embrionar imatur, zona periferic sau bazal a meristemelor florale).
2. Mediile de cultur bogate n azot sub form redus (azotat de amoniu) ce faciliteaz o
bun inducere a embriogenezei i o bun maturare a embrionilor.
3. Regulatorii de cretere (auxinele n primele etape, pentru stimularea rizogenezei,
citochininele ulterior, pentru stimularea caulogenezei).
4. Condiiile de cultur specifice (to, u%, O2).
5. Tipul mediului de cultur (lichid, solid).

Avantajele embriogenezei somatice:

1. Obinerea unui numr foarte mare de copii ale unui organism valoros ntr-un timp
foarte scurt. Embrionii somatici obinui pot fi transformai n semine artificiale prin
ncapsularea lor n materiale specifice, degradabile n sol, putnd fi apoi uor de pstrat
(n bnci de gene), transportat, semnat mecanizat.
2. Plantele rezultate din embrionii somatici sunt identice din punct de vedere genetic cu
planta donatoare.
3. Plantele primei generaii obinute din embrioni somatici sunt libere de ageni
fitopatogeni, uniforme, viguroase i cu nsuiri calitative deosebite.
4. Embrionii somatici pot reprezenta un tip de biomas necesar obinerii unor produi
secundari valoroi.
5. Utilizarea embrionilor somatici n mutagenez, pentru mbuntirea calitii
produselor agricole.
6. Permite obinerea formelor haploide (n) sau a liniilor izogene homozigote
(monohaploizi din diploizi, dihaploizi din tetraploizi, trihaploizi din hexaploizi).
Dezavantajele embriogenezei somatice:
- latena embrionilor somatici nu este controlat nc suficient, respectnd
specificul donatorului
- procentul embrionilor somatici rezultai in vitrodintr-un explant (inocul) este
destul de redus (< 50%).

Terminologie
ACID ABSCISIC hormon vegetal cu rol n laten i senescen.
ANDROGENEZ formarea de embrioni haploizi (n) n cazul cultivrii in vitro a
unui gruncior de polen (dezvoltarea de plante din gametofitul mascul)
CALUS esut vegetal ce se formeaz n mod natural (in vivo), la nivelul suprafeelor
tiate sau vtmate, asigurndu-le cicatrizarea. n cazul culturilor in vitro, reprezint o
aglomerare de celule cu cretere neorganizat i nelimitat, cnd poate fi cultivat
indefinit, prin transplantri (repicri) repetate i din care se pot regenera organe sau chiar
plante ntregi.
CAULOGENEZ procesul de difereniere i dezvoltare a tulpinii.
EMBRIOGENEZ dezvoltarea embrionului dintr-o celul ou. Embriogeneza somatic
in vitro presupune regenerarea unui embrion somatic (sau adventiv) din celule ale
sporofitului (2n) (fragmente de embrioni, cotiledoane, scutelum, hipocotil, rdcinie,
mugurai, frunze) prin organizarea celulelor i esuturilor din calus n formaiuni similare
embrionului rezultat din nmulirea sexuat (zigotic).
FRIABILITATE tendina celulelor de a se separa unele de altele.
GINOGENEZ - dezvoltarea unui individ haploid (n) din celulele gametofitului femel.
HAPLOID organism care prezint n celulele somatice acelai numr de cromozomi
care exist n mod normal n gamei (n= x); avnd cte un cromozom din fiecare pereche,
manifest n fenotip toate genele (dominante i recesive). Haploizii sunt homozigoi i
sterili, pentru refacerea fertilitii necesitnd refacerea strii diploide (ex. colchicinizare).
HIBRID SOMATIC hibrid (celul mononucleat) rezultat din contopirea celulelor
somatice, provenite din prini diferii d.p.v. genetic.
INCUBARE proces de cretere, difereniere etc., desfurat n intervalul de timp de la
inoculare (introducerea explantului n mediul de cultur) pn la sfritul perioadei de
cultivare in vitro.
LINIE CELULAR cultur derivat dintr-o singur celul.
LINIE IZOGEN grup de plante cu acelai genotip (pure genetic), homozigote pentru
toate perechile de gene, obinute prin dublarea numrului de cromozomi ai plantelor
haploide.
PASAJ sau SUBCULTUR transferul celulelor, cu sau fr diluarea sau subdivizarea
lor, dintr-un vas (mediu) de cultur n altul.
POLIPLOID organism cu mai multe seturi de cromozomi (ex. tetraploid = 4 seturi
haploide, hexaploid = 6 seturi haploide).
SUSPENSIE CELULAR cultur n care celulele sau agregatele celulare cresc i se
multiplic suspendate n mediu lichid.
SUSPENSOR organ filiform format de zigotul n diviziune, orientat ctre micropil i
care, n timpul creterii embrionului, l mpinge pe acesta n masa albumenului sau
endospermului secundar, din care se va hrni.
ZIGOT celul diploid, rezultat din fecundarea gameilor de sex opus, haploizi.