LUCRAREA DE LABORATOR N 3

TEMA: ULTRASTRUCTURA BACTERIILOR. METODELE COMPUSE DE

COLORARE NEISSER, BURRI-HINSS. STUDIEREA BACTERIILOR VII.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1 Elementele de structur nepermanente ale celulei bacteriene.
2 Granulaiile de volutin. Compoziia chimic i funciile biologice. Metodele de
evideniere. Importana practic.
3 Coloraia Loeffler i Neisser. Mecanismul i tehnica de colorare.
4 Capsula bacteriilor. Compoziia chimic i funciile biologice.
5 Metoda negativ Burri-Hinss de evideniere a capsulei. Mecanismul,
componentele i tehnica de colorare.
6 Cilii. Clasificarea bacteriilor dup amplasarea i numrul cililor. Com-poziia
chimic i funciile biologice.
7 Metoda direct de evideniere a cililor. Coloraia Loeffler, mecanismul i
tehnica de colorare.
8 Studierea bacteriilor vii. Metodele indirecte de evideniere a cililor. Pregtirea
preparatelor pictura suspendat i ntre lam i lamel.
9 Microscopul cu fond negru. Principiul microscopiei.
10 Microscopul cu contrast de faz. Principiul microscopiei.
11.Fimbriile (pilii) i importana lor.
DEMONSTRARE
1 Tehnica de colorare prin metodele Neisser, Loeffler, Burri-Hinss.
2 Tehnica de pregtire a preparatelor pictura suspendat i ntre lam i lamel.
3 Frotiuri din culturi bacteriene, ce conin granulaii de volutin, colorate prin metodele Neisser
i Loeffler.
4 Frotiuri din bacterii capsulate.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1 De pregtit frotiu din cultur de corinebacterii, de colorat cu albastru de metilen alcalin. De
studiat la microscop i de desenat.
2 De pregtit frotiu din cultur de bacterii capsulate. De colorat prin metoda Burri-Hinss.
3 De pregtit preparatul ntre lam i lamel i de studiat mobilitatea bacteriilor pe fond
negru.
4 De examinat la microscop frotiuri colorate Loeffler pentru evidenierea cililor.
5 Desenai i completai:

5.1 Coloraia Loeffler pentru evidenierea granulaiilor de volutin este o

metod:
a) simpl
b) complex

5.2 Metoda de coloraie Neisser pentru evidenierea granulaiilor de volutin

include urmtoarele etape:

1. Albastru de metilen acetat____min

soluie Lugol
____min

2. Vezuvin_____min

5.3 Coloraia Burri-Hinss are drept scop ______________________ i include

urmtoarele etape:

1. Tu de China (sau congorot

2. Fucsin Pfaiffer ___min

+ acid clorhidric 0,1%)

5.4

Dup amplasarea cililor deosebim urmtoarele tipuri de bacterii:

Monotriche

Lofotriche

Amfitriche

Peritriche

LUCRAREA DE LABORATOR N 4
TEMA: MORFOLOGIA I ULTRASTRUCTURA
ACTINOMICETELOR, SPIROCHETELOR, RICKETTSIILOR,
MICOPLASMELOR, CHLAMIDIILOR, CIUPERCILOR, VIRUSURILOR.
METODELE MICROSCOPICE DE STUDIERE.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1. Morfologia i ultrastructura spirochetelor. Clasificarea. Metodele de studiere.
Speciile patogene i diferenierea lor.
1. Morfologia i ultrastructura micoplasmelor. Metodele de studiere. Speciile
patogene.
1 Morfologia i ultrastructura actinomicetelor. Metodele de studiere. Speciile
patogene.
1. Morfologia i ultrastructura ciupercilor. Particularitile morfologice ale
genurilor Aspergillus, Penicillium, Mucor, ciupercilor levuriforme. Candida.
Metodele de studiere.
1. Morfologia i ultrastructura rickettsiilor. Metodele de studiere. Speciile
patogene.
1. Morfologia i ultrastructura chlamidiilor. Metodele de studiere. Speciile
patogene.
1. Virusurile. Natura. Particularitile morfobiologice. Noiune de viroizi i prioni.
DEMONSTRARE
1 Micropreparate cu spirochete (Treponema, Borrelia, Leptospira), colorate prin
metoda Romanovski-Giemsa.
1. Micropreparate cu rickettsii colorate Romanovski-Giemsa.
1. Cutii Petri cu ciuperci Candida pe mediul Sabouraud i cu fungi filamentoi pe
medii uzuale.
1. Microscoape cu contrast de faz, cu fond negru, luminiscent.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1 De pregtit frotiu din cultur de candide, de colorat cu fucsin apoas, de studiat
la microscop i de desenat.
1. De studiat la microscop frotiuri cu treponeme, borelii i leptospire. De desenat.
1. De studiat frotiuri din rickettsii, colorate Romanovski-Giemsa i de desenat.
1. De studiat ciuperci de mucegai crescute pe medii de cultur.

Desenai:

Treponema

Leptospira

Rickettsia

Mycoplasma

Aspergillus

Mucor

Borrelia

Candida

Penicillium

LUCRAREA DE LABORATOR N 5
TEMA: ACIUNEA FACTORILOR MEDIULUI AMBIANT ASUPRA
MICROBILOR. STERILIZAREA. METABOLISMUL MICROBIAN

NTREBRI PENTRU CONTROL

1 Aciunea factorilor fizici asupra microorganismelor (cldura, frigul, desicarea,
presiunea osmotic, ultrasunetul, radiaiile).
2 Aciunea substanelor chimice asupra microorganismelor (fenolul, crezolul,
coloranii, oxidanii, srurile metalelor grele, formaldehida).
3 Noiune de sterilizare, obiect steril i nesteril. Noiuni de aseptic i antiseptic.
4 Metodele fizice de sterilizare (prin cldur: arderea, flambarea, fierberea, vapori
sub presiune, vapori flueni, cldura uscat, tindalizarea). Noiune de
pasteurizare. Sterilizarea prin radiaii i ultrasunet.
5 Metoda chimic de sterilizare. Noiune de dezinfecie. Substane chimice
utilizate ca dezinfectante.
6 Metoda mecanic de sterilizare. Tipurile de filtre i exploatarea lor.
7 Controlul eficienei sterilizrii.
8 Metabolismul microbian. Particularitile.
9 Enzimele bacteriene. Clasificarea. Rolul n fiziologia microbian.
10 Nutriia bacteriilor. Tipul de nutriie i mecanismele transportului nutrienilor n
celula bacterian.
11 Clasificarea microorganismelor dup sursele de energie i carbon. Noiune de
microorganisme saprofite i parazite.
DEMONSTRARE
1 Aparatura: sterilizatoare pentru seringi, autoclave, cuptorul Pasteur, filtre Seitz,
Chamberland, din asbest i nitroceluloz.
2 Vesela: cutii, pipete, eprubete, flacoane pn i dup sterilizare.
3 Activitatea zaharolitic: tip oxidativ, tip fermentativ.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1 De pregtit cutii Petri i pipete pentru sterilizare.
2 De studiat construcia i principiul de lucru a sterilizatoarelor.
3 De completat tabelul:

Denumirea
sterilizatorului,
dezinfectantului

Obiectele pentru
sterilizare sau
dezinfecie

Regimul
de sterilizare sau
dezinfecie

Controlul
eficienei
sterilizrii

LUCRAREA DE LABORATOR N 6
TEMA: PRINCIPIILE DE CULTIVARE A MICROORGANISMELOR.
MEDIILE DE CULTUR.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1
1.
1.
2.
3.
4.
5.

Creterea i multiplicarea bacteriilor.

Cultivarea bacteriilor. Condiiile (principiile) necesare pentru cultivare.
Mediile de cultur i cerinele fa de ele.
Clasificarea mediilor de cultur.
Mediile uzuale. Componena. Tehnica de preparare i sterilizare.
Mediile complexe, clasificarea lor. Destinaia, componena, sterilizarea.
Temperatura optim de dezvoltare a microorganismelor. Clasificarea bacteriilor
n funcie de temperatura optim de cultivare.
6. Dinamica multiplicrii bacteriilor n cultura continu i discontinu. Importana
practic.
1. Noiuni de specie, cultur pur i mixt, tulpin i clon.
1. Manifestarea creterii i multiplicrii bacteriilor n medii lichide i solide.
Colonia. Tipurile de colonii i caracteristica lor. Caracterele de cultur ale
microorganismelor.
DEMONSTRARE
1. Extract apos de carne, pepton, agar-agar, NaCl, glucide.
2.Medii simple (uzuale): geloz, BP, (sterile i cu cretere).
3.Medii complexe: geloz-snge, bulion biliat, ser coagulat, Hiss, Endo, Levine,
Ploskirev, Olkeniki, Muller, Kauffmann, cu selenit, Kitt-Tarozzi, (sterile i cu
cretere).
4.Cutii cu diverse forme de colonii pe medii de cultur solide.

LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI

1.De efectuat studiul coloniilor pe diferite medii i de completat tabelul:
Criteriul de apreciere
N1
1.Dimensiunile
2.Transparena
3.Pigmentogeneza
4.Suprafaa
5.Culoarea
6.Marginile
7.Structura
8.Consistena
9.Tipul coloniei

Coloniile
N2

studiate
N3

LUCRAREA DE LABORATOR N 7
TEMA:

METODA BACTERIOLOGIC N DIAGNOSTICUL BOLILOR

INFECIOASE.
NTREBRI PENTRU CONTROL

1 Metoda bacteriologic n diagnosticul bolilor infecioase. Esena.

1. Materiale de examinare (prelevate) de la pacieni i din mediul ambiant (ap,
sol, aer, produse alimentare, lavaje, etc.) Regulile de recoltare i ambalare,
condiiile de transportare n laborator. Pregtirea probelor pentru investigaii de
laborator.
1. Etapele metodei bacteriologice pentru culturile aerobe.
1. Izolarea bacteriilor aerobe n cultur pur (prin epuizare, prin metoda diluiilor).
Condiii de cultivare. Aparataj.
1. Metodele speciale de izolare a bacteriilor n cultur pur din prelevate:
a) izolarea bacteriilor sporulate;
b) izolarea bacteriilor acido-rezistente;
c) izolarea bacteriilor din asociaii cu numr minim de microorganisme
patogene;
d) izolarea bacteriilor cu virulen nalt i pretenioase la cultivare.
6 Studiul caracterelor de cultur a microorganismelor izolate (aerobe).
Acumularea culturii pure.
7 Identificarea culturii pure de microorganisme aerobe n baza caracterelor
morfologice, tinctoriale, de cultur, enzimatice, etc. Evaluarea
rezultatelor, formularea i eliberarea rspunsului.
8.Metodele de creare a condiiilor de anaerobioz, mediile speciale
pentru cultivarea microorganismelor anaerobe.
9 .Etapele metodei bacteriologice pentru culturile anaerobe.
10. Izolarea bacteriilor anaerobe n cultur pur (prin metodele Zeissler i
Weinberg). Condiii de cultivare. Aparataj.
11Studiul caracterelor de cultur a microorganismelor izolate (anaerobe)
i acumularea culturii pure.
12. Particularitile de identificare a culturii de microorganisme anaerobe.
Evaluarea rezultatelor, formularea i eliberarea rspunsului.
DEMONSTRAREA
1 Schema Izolarea culturilor pure de microbi aerobi.

1. Creterea bacteriilor n medii lichide (pelicul, sediment, opalescen).

i pe geloza nclinat (depozit).
1. Medii Hiss cu diverse variante de fermentare a glucidelor.
1. Bulion peptonat pentru evidenierea indolului i hidrogenului sulfurat.
1. Rondele, comprimate i plute cu glucide, creion-ferment pentru studierea rapid
a caracterelor zaharolitice.
1. Truse pentru determinarea activitii biochimice a bacteriilor.
1. Schema Izolarea culturilor pure de microbi anaerobi.
1. Anaerostate, exicatoare, cutii dup Fortner.
1. Medii Kitt-Tarozzi.
1. Cultiri n cutii cu geloz-snge Zeissler i n tuburile Weinberg.
1. Medii Hiss lichide cu glucide fermentate.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1 De verificat puritatea culturii coloniei selectate (frotiu Gram).
1. De rensmnat restul coloniei pe geloz nclinat pentru acumularea culturii
pure.
1. De pe geloza nclinat de repicat cultura pur n bulion peptonat pentru
determinarea indolului i hidrogenului sulfurat.
1. De nsmnat cultura pur din geloza nclinat n mediile Hiss pentru studierea
caracterelor zaharolitice.
1. De analizat rezultatele identificrii.
De identificat cultura pur prin urmtoarele teste:

IZOLAREA CULTURILOR PURE DE BACTERII AEROBE

Materialul de examinat:

a) de la bolnav_________
___________________
___________________
b) de la cadavru ________
___________________
___________________
d) din mediul ambiant_____
___________________

RIF

Gram

Gram
Fagoidentificarea

Fagotipia

Seroidentificarea:

Identificarea biochimic:
Modificri:

Analiza rezultatelor i formularea

rspunsului:_______________________________________

Antibiograma

ETAPELE DE IZOLARE A CULTURILOR PURE DE MICROBI ANAEROBI

CLOSTRIDIENI
Materialul de examinat:
a)de la bolnav _____________
__________________________
__________________________
Gram
Aujeszky

RIF

b)de la cadavru _____________

__________________________
c din mediul ambiant _______
_________________________

Gram

Aujeszky

Analiza rezultatelor i formularea rspunsului :_______________________

LUCRAREA DE LABORATOR N 8

TEMA: ANTAGONISMUL MICROBIAN. ANTIBIOTICELE..

NTREBRI PENTRU CONTROL
1

Flora normal a organismului uman. Rolul ei n fiziologia i patologia

uman. Relaiile dintre microorganisme n biocenoze.
1. Antagonismul microbian. Tipurile. Mecanismele. Metodele de studiere.
Importana practic.
1. Antibioticele. Noiune. Clasificarea dup spectrul de aciune i producent.
1. Mecanismul de aciune al antibioticelor. Clasificarea.
1. Metodele de obinere a antibioticelor. Cerinele fa de antibiotice.
1. Rezistena microbilor la antibiotice. Tipurile. Mecanismele rezistenei
germenilor microbieni la antibiotice. Combaterea rezistenei.
1. Metodele de determinare a sensibilitii microbilor la antibiotice:
difuzimetric (rondelelor), diluiilor succesive (n medii lichide i solide),
metodele rapide.
1. Noiune de Concentraie Minim de Inhibiie (CMI), Concentraie Minim
Bactericid (CMBC).
1. Determinarea concentraiei antibioticelor n umorile organismului (snge,
sput, urin etc.). Importana practic.
1. Grupele principale de antibiotice, utilizate n medicina practic.
1. Reaciile adverse ale organismului la administrarea de antibiotice.
DEMONSTRARE
1 Antagonismul bacterian.
1. Antibiograma bacteriilor - metoda difuzimetric.
1. Sensibilitatea bacteriilor la antibiotice - metoda diluiilor succesive n medii
lichide.
1. Metoda de apreciere a CMI a penicilinei n serul sangvin.
1. Truse cu rondele.

1 DETERMINAREA SENSIBILITII MICROORGANISMELOR LA

ANTIBIOTICE
Metoda difuzimetric
Etapele:_______________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
Metoda diluiilor succesive
Etapele:____________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
___________________________
Interpretarea:
4.2

DETERMINAREA CONCENTRAIEI ANTIBIOTICULUI N UMORILE

ORGANISMULUI

Etapele:
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________

Interpretarea:________________________________________________
LUCRAREA DE LABORATOR N 9
TEMA: BACTERIOFAGUL. GENETICA MICROORGANISMELOR
NTREBRI PENTRU CONTROL
1. Bacteriofagul. Natura. Caracterele morfobiologice.
2. Etapele interaciunii bacteriofagului virulent cu celula bacterian. Fagii
moderai. Profagul. Lizogenia. Caracterele culturilor lizogene.
3.Metodele de izolare a bacteriofagului din materialul de examinat
(direct, de mbogire cu nsmnare i fr nsmnare).
4. Metodele de evideniere a bacteriofagului: Otto, Furt, Fisher.
5.Titrarea bacteriofagului n medii lichide dup Appelman.
6.Aplicarea practic a bacteriofagului. Fagoidentificarea i fagotipajul
microbilor.
7.Genetica microorganismelor. Bazele materiale ale ereditii. Avantajele
bacteriilor i virusurulor ca model pentru studierea problemelor geneticii.
11.Mutaiile - spontane, induse. Factorii mutageni.
12.Transferul de material genetic (transformarea, transducia, conjugarea).
DEMONSTRARE
1. Probele Otto, Furt, Fisher.
2. Citirea rezultatelor titrrii bacteriofagului prin metoda Appelman.
3. Citirea rezultatelor fagoidentificrii i fagotipajului.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1. De efectuat fagotipajul culturii de stafilococ.
2. De efectuat fagoidentificarea culturii de salmonele.
4 De completat i de desenat:

METODELE DE EVIDENIERE A BACTERIOFAGULUI:

1. OTTO

Etapele:

2. FURT

_______________________
_______________________
_______________________
_______________________

Etapele:

_______________________
_______________________
_______________________
_______________________

TITRAREA BACTERIOFAGULUI
METODA APPELMAN

FAGOIDENTIFICAREA CULTURILOR BACTERIENE:

Etapele:
_________________________
_________________________
_________________________
_________________________

Interpretarea:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
____

FAGOTIPAJUL (lizotipia) CULTURILOR BACTERIENE:

Etapele :
________________________
________________________
________________________
________________________
______________________
Interpretarea:
________________________________________________________________
________________________________________________________________
____
4. De studiat i de nregistrat bacteriofagii utilizai pentru:
a)profilaxie i tratament_______________________________________
___________________________________________________________
___________________________________________________________
b)diagnostic_________________________________________________
___________________________________________________________

LUCRAREA DE LABORATOR N 11
TEMA: PROCESUL INFECIOS. FACTORII NESPECIFICI DE
REZISTEN. FAGOCITOZA. METODA BIOLOGIC DE DIAGNOSTIC.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1 Noiune de infecie, proces infecios i boal infecioas. Particularitile bolii
infecioase.
1. Rolul microorganismului n procesul infecios. Patogenitatea i virulena.
Unitile de virulen. Aprecierea.
1. Factorii patogenitii: structurali, enzimele de patogenitate, toxinele.
1. Toxinele microbiene i caracteristica lor. Obinerea.
1. Ptrunderea i rspndirea microbilor i virusurilor n macroorganism.
1. Dinamica evolurii bolii infecioase.
1. Criteriile de apreciere a rolului etiologic al agentului cauzal
1. Formele infeciei. Persistena microorganismelor.
1. Rolul mediului ambiant i social n infecie.
1. Infecia experimental i importana ei practic.
1. Rolul macroorganismului n procesul infecios. Rezistena nespecific a
macroorganismului. Factorii nespecifici: de barier, celulari, umorali
(complement, lizozim, lizine, interferon, etc.). Rolul florei normale (indigene) n
rezistena nespecific.
1. Celulele fagocitare. Fagocitoza. Determinarea activitii fagociilor i a indicelui
fagocitar. Rolul fagocitozei n imunitate.
DEMONSTRAREA
1 Metodele de infectare a oarecilor albi.
1. Necropsia cadavrului oarecelui infectat.
1. Determinarea plasmocoagulazei, lecitinazei i hemolizinei.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1. De studiat enzimele de patogenitate ale stafilococilor
plasmocoagulaza, lecitinaza, hemolizinele i de desenat:

patogeni:

Lecitinaza

Hemolizina

Completai tabelul:
Proprietile
1.

Natura chimic

2.

Eliminarea n mediul
extracelular

3.

Termorezistena

4.

Toxicitatea

5.

Tropism

6.

inta de atac

7.

Manifestri clinice:
a) specifice
b) generale
Imunogenitate

8.
9.

Transformare n
anatoxin

10 Neutralizarea cu ser
imun
11 Aciune pirogen

Exotoxine

Endotoxine

LUCRAREA DE LABORATOR N 12
TEMA: IMUNITATEA. RSPUNSUL IMUN. METODA IMUNOLOGIC DE
DIAGNOSTIC. REACIA DE AGLUTINARE. .

NTREBRI PENTRU CONTROL

1. Noiune de imunitate. Tipurile de imunitate. Imunitatea ereditar i dobndit,
umoral i celular.
1 Sistemul imun. Organele centrale i periferice ale sistemului imun. Celulele
imunocompetente. Complexul MHC.
1. Antigenele i caracteristica lor. Antigene complete i incomplete. Izoantigene.
Autoantigene. Celulele prezentatoare de antigen (CPA).
1. Structura antigenic a celulei bacteriene i a virusurilor.
1. Anticorpii (imunoglobulinele), structura lor. Clasele de imunoglobuline.
Funciile lor biologice. Anticorpii complei i incomplei.
1. Rspunsul imun. Consecinele rspunsului imun. Elementele implicate n
rspunsul imun.
2. Rspuns imun de tip umoral i de tip celular. Rspuns imun primar i
secundar.
3. Interaciunea dintre T i B limfocite i macrofagi (CPA) n rspunsul imun.
1. Memoria imunologic. Tolerana imunologic. Paralizia imunologic.
1. Particularitile imunitii n infeciile bacteriene, virale. Imunitatea
antitoxic, antitumoral i de transplant.
1. Metoda imunologic de diagnostic. Reaciile de imunitate (celulare i
serologice). Serodiagnostica i seroidentificarea. Esena. Mecanismul
reaciilor antigen-anticorp in vitro.
1. Reacia de aglutinare. Componentele. Serurile aglutinante neadsorbante i
adsorbante. Diagnosticurile. Obinerea lor.
1. Reacia de aglutinare (RA) desfurat (n tuburi). Tehnica efecturii.
Evaluarea i interpretarea rezultatelor.
1. RA pe lam. Componentele, tehnica efecturii, evaluarea i interpretarea
rezultatelor.
DEMONSTRAREA
1 Preparate biologice, utilizate n RA.

1. Reacia de aglutinare n tuburi, pe lam.

LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1 De efectuat
reacia de aglutinare desfurat cu serul bolnavului i
diagnosticurile (antigenele) tifoparatifoidice.
1. De efectuat reacia de aglutinare pe lam cu cultura pur obinut i cu serurile
adsorbante de diagnostic. De citit i de interpretat rezultatele reaciei.
1. De citit i de interpretat rezultatele reaciei de aglutinare.
4.De studiat preparatele biologice utilizate n reaciile de aglutinare.

STRUCTURA ANTIGENIC A CELULEI BACTERIENE

Legend:
O - antigen somatic cu fracii termostabile;
H - antigen flagelar, termolabil
K (Vi) - antigen capsular, de virulen
F - antigen fimbrial.
Schema reaciei de aglutinare n tuburi

LUCRAREA DE LABORATOR N 13
TEMA: REACIILE IMUNITII: REACIILE DE AGLUTINARE
INDIRECT, REACIA COOMBS, REACIILE DE LIZ IMUN. REACIA
DE FIXARE A COMPLEMENTULUI.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1 Reaciile de aglutinare indirect. Reacia de hemaglutinare indirect (RHAI).
Componentele. Evaluarea i interpretarea rezultatelor.
1. Reaciile de inhibare a hemaglutinrii (RIHA) i a hemadsorbiei (RIHAds).
Componentele. Evaluarea i interpretarea rezultatelor.
1. Reacia de coaglutinare (RCoA). Componentele. Avantajele.
1. Reacia antiglobulinic Coombs
direct i indirect. Principiul.
Componentele. Tehnica efecturii. Citirea i interpretarea rezultatelor.
1. Lizinele i proprietile lor. Reaciile de liz imun.
1. Complementul. Natura. Proprietile. Cile de activare. Obinerea i
conservarea lui.
1. Reacia de bacterioliz (RB). Componentele. Tehnica efecturii reaciei in
vivo i in vitro. Citirea i interpretarea reaciei.
1. Reacia de hemoliz (RH). Componentele i obinerea lor. Efectuarea, citirea
i interpretarea reaciei. Utilizarea.
1. Titrarea complementului, serului hemolitic i a antigenului i determinarea
dozelor de lucru.
1. Reacia de fixare a complementului (RFC). Componentele reaciei i
pregtirea prealabil a lor. Mecanismul i tehnica efecturii reaciei de fixare a
complementului. Lectura i interpretarea rezultatelor RFC.
DEMONSTRAREA
1 Preparate biologice, utilizate n RHAI, RIHA, RIHAds, reacia Coombs.
1. Reacia de hemaglutinare indirect, reacia de inhibare a hemaglutinrii.
3 Reacia de coaglutinare.
4 Reacia de hemoliz.
5 Reacia de titrare a complementului.
6 Reacia de fixare a complementului.
7 Preparatele biologice, utilizate n reacia de fixare a complementului.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI

1 De citit i de interpretat rezultatele RHAI, RIHA.

1. De studiat preparatele biologice utilizate n reaciile de aglutinare indirect i
RFC.
3. De desenat schemele:
3.1.

RHAI:

3.2.

Reacia Coombs
direct

RIHA:

Reacia Coombs
indirect

4 De efectuat titrarea complementului. De citit rezultatele, de apreciat titrul i de

calculat doza de lucru.
4. De citit rezultatele reaciei de determinare a titrului complementului n serul
bolnavului i de interpretat rezultatul.
6. De efectuat reacia de fixare a complementului cu serul bolnavului. De citit i
de
IV interpretat reacia.
7. De desenat schema RFC varianta pozitiv i negativ:

LUCRAREA DE LABORATOR N 14
TEMA: REACIILE IMUNITII: REACIILE DE PRECIPITARE,
REACIA DE NEUTRALIZARE, REACIA DE IMUNOFLUORESCEN,
ANALIZA RADIOIMUN, REACIA IMUNOENZIMATIC, REACIA DE
IMOBILIZARE.
NTREBRI PENTRU CONTROL
1 Reacia de precipitare (RP). Componentele i obinerea lor. Cerinele fa de
componentele reaciei. Titrul serului precipitant.
1. Tehnica efecturii RP inelar. Mecanismul i aplicarea practic.
1. Reacia de precipitare n gel. Mecanismul i aplicarea practic.
1. Contraimunoelectroforeza. Tehnica efecturii i aplicarea practic.
1. Reacia de neutralizare (RN) a toxinelor i virusurilor (in vivo, in vitro).
Destinaia. Componentele. Tehnica efecturii, citirea i interpretarea rezultatelor.
1. Reacia de imunofluorescen Coons (RIF direct i indirect). Componentele.
Tehnica. Interpretarea reaciei.
1. Reacia imunoenzimatic (RIE, ELISA) direct i indirect. Citirea i
interpretarea rezultatelor. Aplicarea practic.
1. Analiza radio-imun (ARI). Importana practic.
1. Reacia de imobilizare a bacteriilor (RIB). Componentele. Tehnica reaciei.
Citirea i interpretarea.
1. Reacia opsono-fagocitar (ROF). Componentele. Tehnica reaciei. Citirea i
interpretarea. Determinarea indicelui opsono-fagocitar (IOF).
DEMONSTRAREA
1 Reacia de precipitare n gel.
1. Determinrii toxigenezei bacteriilor in vitro.
1. Microscopia luminiscent.
1. Truse pentru RIE.
1. Preparate biologice: seruri precipitante, fluorescente etc.
1. Tabele i scheme ale reaciilor studiate.
LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI
1. De pregtit micropreparate pentru RIF. De studiat la microscopul luminiscent.
2.De efectuat reacia de precipitare inelar cu scopul identificrii
precipitinogenului necunoscut. De completat tabelul:

Ingrediente
Ser antiS. typhi
Ser antiS. flexneri
Ser normal
Sol. NaCl
0,9 %
Antigen de
cercetat
Rezultatele

Tubul 1
0,1

Tubul 2
-

Tubul 3
-

Tubul 4
-

0,1

0,1
-

0,1

0,1

0,1

0,1

3. De desenat i completat:
3.1.

Reacia de precipitare n gel:

RN a toxinei in vitro

3.2.

RP Ouchterlony

De desenat schemele reaciilor:

RIF direct

RIF indirect

RIE direct

RIE indirect

4.De determinat indicele opsono-fagocitar (IOF) conform tabelului.

Cantitatea de microbi fagocitai
de un leucocit :
0
1-20
21-40
41 i mai mult

Aprecierea fagocitozei

Numrul de leucocite

Calcularea IOF

0
+
++
+++

Concluzie___________________________________________________

LUCRAREA DE LABORATOR N 15
TEMA: IMUNOPROFILAXIA I IMUNOTERAPIA BOLILOR
INFECIOASE. VACCINURILE. SERURILE IMUNE. ALERGENII. METODA
ALERGIC DE DIAGNOSTIC. STASUL IMUN AL ORGANISMULUI UMAN
NTREBRI PENTRU CONTROL
1
Reaciile imunologice celulare, utilizarea lor. Determinarea celulelor
limfocitare
(T -, B- limfocite, NK, K).
1.
Hipersensibilitatea de tip imediat i de tip tardiv. Factorii i mecanismele
implicate.
1.
Alergenii microbieni. Probele cutano-alergice. Metodele de efectuare,
lectura i interpretarea rezultatelor. Importana practic.
2
Imunitatea artificial dobndit activ i pasiv.
1.
Vaccinurile i clasificarea lor. Noiune de vaccinoprofilaxie i
vaccinoterapie.
Calendarul vaccinrilor.
1.
Vaccinurile vii, inactivate, chimice i anatoxinele. Metodele de obinere.
Metodele de administrare n organism. Avantaje i dezavantaje.
1.
Autovaccinurile. Etapele de obinere. Utilizarea practic.
1.
Vaccinurile asociate i deponente. Vaccinurile de perspectiv.
1.
Serurile imune, utilizate n profilaxia i terapia bolilor infecioase.
Clasificarea dup modul de obinere si utilizarea practic.
1.
Serurile antitoxice. Obinerea i determinarea activitii (UI, UA).
1.
Serurile antibacteriene i antivirale (imunoglobulinele). Obinerea i
aplicarea practic.
1.
Metodele de administrare n organism a serurilor omologe si
heterologe. Reaciile adverse. Combaterea lor.
1.
Stasul imun al organismului uman. Imunodeficienele primare si secundare.
Bolile autoimune. Imunomodulatorii.
DEMONSTRAREA
1. Standarduri optice (500 mln, 1 mlrd. celule bacteriene/ml).
1. Preparate biologice: seruri curative i profilactice, vaccinuri vii, inactivate,
chimice, anatoxine, alergeni.

LUCRUL DE SINESTTTOR AL STUDENTULUI

1. De pregtit vaccin stafilococic inactivat:
de verificat puritatea culturii;
de pregtit suspensia bacterian de baz;
de inactivat cultura n baia de ap 30 min, 60C;
de controlat sterilitatea prin nsmnare n BP;
de standardizat (standardul optic de 500 mln.c.b./ml);
de repartizat vaccinul n fiole i de sudat;
de etichetat.
2 De studiat preparatele biologice, utilizate n profilaxia i tratamentul
bolilor infecioase i de completat tabelul:

Tipul serurilor
I. Seruri
antitoxice
II. Imunoglobuline
III. Globuline
normale

Tabelul N 2
Denumirea
Sursa de obinere
1.
2.
3.
1.
2.
3.
1.
2.

Modul de
Administrare