CAPITOLUL 1 INTRODUCERE

1.1. DEFINIIA, OBIECTUL DE STUDIU I IMPORTANA FIZIOLOGIEI VEGETALE Fiziologia vegetal este o ramur a tiinelor biologice care se ocup cu studiul proceselor vitale din plante. Termenul de fiziologie i are originea n limba greac, de la cuvintele physis = natur i logos = tiin. Viaa plantelor reprezint forma superioar de micare a materiei concretizat n organisme vii, plante i animale. Cunoaterea particularitilor proprii proceselor vitale din plante prezint o deosebit importan teoretic i practic. Din punct de vedere teoretic, fiziologia vegetal este o tiin biologic fundamental, care studiaz mecanismele ce controleaz modul de organizare i funcionare a organismelor vegetale. La nivelul societii umane, plantele prezint o importan deosebit deoarece, prin intermediul agriculturii, ofer sursa de hran i alte mijloace necesare traiului i posibilitatea crerii unui ambient favorabil, prin amenajarea de spaii verzi. La nivelul biosferei, n lanul trofic al ecosistemelor naturale, plantele constituie categoria productorilor, singurele organisme capabile s absoarb substane minerale i energia din mediul abiotic i s le transforme n forme organice, proprii materiei vii. Din punct de vedere practic, fiziologia vegetal este una din tiinele de baz n cultura plantelor. Ea sintetizeaz cunotinele pe baza crora sunt elucidate i controlate procesele vitale din plante, n scopul cerut de practic. nc de la nceputul acestui secol, K. A. Timiriazev spunea: "Omul de tiin studiaz viaa plantelor n scopul de a aciona pentru transformarea ei n conformitate cu cerinele i nevoile practicii". Astfel, fiziologia vegetal st la baza ramurilor practice ale tiinelor agricole cum sunt Fitotehnia, Legumicultura, Pomicultura, Viticultura, Floricultura i Arboricultura. Ea contribuie la utilizarea nsuirilor genetice favorabile, n special de productivitate i rezisten la stress n ameliorarea plantelor, la valorificarea nsuirilor pedologice i agrochimice ale solurilor n procesele de nutriie a plantelor de cultur etc. Pe drept cuvnt, fiziologia vegetal este considerat "mecanica fin a agriculturii raionale". n epoca actual, n conformitate cu dezvoltarea mijloacelor de investigaie, cunotinele despre procesele vitale din plante i mecanismele care le controleaz au evoluat enorm. Fiziologia vegetal este solicitat s rspund unor cerine ale societii umane la nivel global, n conformitate cu noile probleme globale ale omenirii. Se contureaz astfel noi ramuri ale acestei tiine. Fa de evoluia demografic, exploziv a planetei, se contureaz tot mai mult impactul activitii umane n producerea de hran. Aceasta a dus la apariia unei ramuri de baz a fiziologiei vegetale numit fiziologia recoltei, pe baza cunoaterii creterii i dezvoltrii plantelor, ct i a managementului produciei agricole. n cadrul cercetrii tiinifice agricole, chemat s satisfac cerinele de hran i alte produse agricole, un rol important revine fiziologiei. Fiziologia recoltei contribuie la creterea produciei n interrelaie cu tiinele agronomice i cu ameliorarea plantelor. Pentru agronomie stabilete necesarul de elemente nutritive, eficiena irigaiei, fertilizrii, erbicidrii, a tratamentelor hormonale etc. Pentru ameliorare, identific i analizeaz procesele care limiteaz producia agricol i sugereaz cile de stimulare a potenialului de producie i de toleran la stress. Prin intermediul fiziologiei, tiinele agronomice i ameliorarea se pot substitui reciproc. Astfel, ameliorarea preia controlul buruienilor prin crearea rezistenei genetice la erbicide, iar tiinele agronomice preiau controlul nfloririi i fructificrii, grbirea sau ntrzierea maturrii, 1

sporirea cantitii i calitii recoltei, anularea efectelor stressului, inducerea sterilitii mascule pentru producerea de hibrizi, prin tratamente hormonale (Boote i colab., 1994). Ultimele decenii au adus progrese remarcabile n acest sens, cum este mrirea indicelui de recolt pn la 50% la gru. Direciile importante care se impun sunt sporirea eficienei fotosintezei i a fixrii N2 atmosferic. O alt ramur modern a fiziologiei este ecofiziologia, care studiaz reacia plantelor la factorii de mediu. Plantele sunt supuse unei permanente presiuni din partea mediului, manifestat prin condiii nefavorabile i denumit stres. Zonarea diferitelor culturi n teritoriu depinde de gradul de favorabilitate al acestora. Aceast nsuire decurge din reacia ecofiziologic a plantelor fa de condiiile locale, care sunt consecina interaciunii dintre genotip i mediu. Testarea favorabilitii se face prin analiza diferiilor indici fiziologici fa de aciunea condiiilor locale de stress natural, climatic sau pedologic. Poluarea mediului de via, dezechilibrul ecologic provocat de activitatea uman n epoca modern, a dus la apariia unui nou tip de stres, cu efecte negative deosebite asupra produciei plantelor agricole. Fa de condiiile ecologice de stres este necesar cunoaterea modului de reacie a plantelor i gsirea mecanismelor genetice i fiziologice care s asigure potenialul productiv normal (Taylor i colab., 1991). Cercetrile de ecofiziologie ar putea duce la scurtarea ciclului vital al unor culturi agricole pentru a obine mai multe cicluri de cultur pe an, de exemplu trei cicluri la orez, n loc de unul sau dou. Cercetrile de ecofiziologie efectuate n ecosistemele forestiere i ierboase ale biosferei stau la baza unei ramuri a ecologiei denumit studiul productivitii ecosistemelor (Chifu i colab., 1998). 1.2. EVOLUIA CUNOTINELOR N DOMENIUL FIZIOLOGIEI VEGETALE Primele noiuni asupra particularitilor de via ale unor plante dateaz din cele mai vechi timpuri. n antichitate, Aristotel (384-322 .I.C.) elaboreaz cteva teorii despre viaa plantelor, pe care le preia din viaa animalelor. El presupune existena unui suflet al plantelor denumit entelechia i consider c plantele iau hrana din mediu sub form de substane organice. Theophrast (371-287 .I.C.), cel mai mare botanist al antichitii elaboreaz lucrarea "Despre istoria plantelor" n care citeaz cunotine despre nmulirea, germinarea, polenizarea, creterea i micrile plantelor. Plinius Secundus (23-79) elaboreaz lucrarea "Historia naturalis - historia mundi" n 37 de volume, dintre care volumele 12-27 se ocup de botanica i fiziologia plantelor. ntre altele, este artat rolul leguminoaselor n fertilitatea solului. Evul mediu se caracterizeaz printr-o stagnare a cunotiinelor n domeniul tiinelor naturii, datorat n special dogmatismului bisericesc. Aceast stagnare este nlturat n secolele al XV- lea i al XVI- lea de Renatere. Alturi de o renatere a artei i arhitecturii, n aceast etap apare o renatere n domeniul tiinei, manifestat prin apariia unei gndiri enciclopedice n tiinele naturii i societii: Fizic, Chimie, Biologie i Filozofie. n secolul al XVII-lea ncepe etapa Fiziologiei vegetale tiinifice. n 1600, J.B. van Helmont elaboreaz prima lucrare experimental de Fiziologie vegetal n care arat rolul apei i substanelor minerale n nutriia plantelor, contrazicnd astfel concepia lui Aristotel. n 1679, E. Mariotte descoper transpiraia plantelor. n aceast perioad M. Malpighi descoper rolul frunzei n nutriia plantei. n secolul al XVIII- lea apar alte descoperiri importante. n 1727, St. Hales, printele fiziologiei vegetale experimentale, elaboreaz prima lucrare monografic de fiziologie vegetal intitulat "Vegetable statics", n care descrie experiene de nutriie mineral i circulaia sevei.

n 1772, J. Priestley descoper fotosinteza, iar n 1779 J. Ingenhousz arat rolul luminii, al culorii verzi i al gazelor (CO2 i O2) n fotosintez. n 1791-1800, J. Senebier elaboreaz tratatul n cinci volume intitulat "Physiologie vgtale", n care descrie nutriia i chimismul plantelor. n secolul al XIX -lea, n 1804, Th. de Saussure, fondatorul fiziologiei moderne elaboreaz lucrarea "Recherches chimiques sur la vgtation" n care arat schimburile de gaze din fotosintez i respiraie, dnd definiia corect a acestor procese i elaboreaz bazele studiului de fiziologie a nutriiei minerale. J. Dutrochet, W. Pfeffer i H. de Vries efectueaz studii n domeniul regimului de ap al celulei i al plantei, descoperind osmoza, osmometrul i folosind plasmoliza n studiul celulei vegetale ca un osmometru biologic. J.B.D. Boussingault, J. von Liebig, J. Sachs, F. Knop, chimiti i agrochimiti, studiaz diferite probleme de nutriie mineral referitoare la sursa elementelor minerale, mecanismul absorbiei, cultivarea plantelor n soluii nutritive artificiale. S. Vinogradski (1856-1953) descoper bacteriile fixatoare de N i bacteriile nitrificatoare, punnd bazele microbiologiei solului. K.A. Timiriazev (1843-1920) studiaz procesul de fotosintez artnd rolul clorofilei n fixarea energei solare i rolul cosmic al plantelor. A. Mitscherlich (1874-1956) efectueaz experiene de nutriie n vase de vegetaie, n care controleaz apa i ngrmintele minerale. n secolul al XX-lea au loc importante descoperiri n fiziologia vegetal, datorate n special perfecionrii mijloacelor i tehnicilor de investigaie din Fizic, Chimie, Biochimie i Biologie. n 1920 W. W. Garner i A. H. Allard descoper fenomenul de fotoperiodism. n 1928, F. W. Went i N. Holodni descoper stimulatorii de cretere denumii n 1933 de F. Kgl auxine. Ulterior sunt descoperii stimulatorii de cretere gibereline i citochinine. n 1963-1964, Addicott i Wareing descoper un inhibitor vegetal, numit n 1967 acid abscisic. Sunt descoperii retardanii, utilizai n practic n dirijarea creterii i fructificrii. Se contureaz astfel o ramur a fiziologiei numit hormonologia. Prin utilizarea metodei trasorilor radioactivi, folosind C14 i prin perfecionarea mijloacelor de extracie i purificare a diferitelor substane chimice, se fac pai importani n studiul fotosintezei. n 1961, M. Calvin, D. Arnon i A. Benson obin premiul Nobel pentru Chimie pentru descrierea ciclului de reacii din faza de ntuneric a fotosintezei, denumit tipul fotosintetic C3. n 1966, pe baza cercetrilor efectuate de M. D. Hatch i C. R. Slack sunt descrise i alte tipuri fotosintetice, i anume tipul C4 i CAM. A.N. Bach, O. Warburg, A. Szent-Gyrgy i H.A. Krebs descriu chimismul respiraiei, iar H. Lundegardh, J. Sutcliffe, H. Jenny, D. A. Sabinin elucideaz mecanismul de absorbie a elementelor minerale n plante. Prin perfecionarea tehnicii de microscopie electronic se fac descoperiri importante n ultrastructura celulei. G. E. Palade descoper astfel prezena ribozomilor i structura ultramicroscopic a cloroplastelor. Apar alte noi ramuri ale fiziologiei, cum este fiziologia plantei bolnave, fiziologia rezistenei la stressul reprezentat de poluare etc. n Romnia, studiul fiziologiei vegetale a nceput dup nfiinarea universitilor din Iai (1860), Bucureti (1864) i Cluj (1872). Primii profesori de Botanic i Fiziologie au fost D. Brndza, A. Ftu i D. Grecescu. n 1907 ia natere prima Catedr de Anatomie i Fiziologie vegetal la Universitatea din Bucureti i este organizat primul laborator de Fiziologie vegetal din Romnia, unul dintre cele mai bine dotate din sud-estul Europei, condus de profesorul Em. C. Teodorescu, membru al Academiei de tiine din Paris i al Academiei Romne, ntemeietorul colii romneti de fiziologie vegetal. n cadrul acestui laborator este creat o adevrat coal din care provine I.C. Constantineanu, care n 1912 devine profesor de Fiziologie vegetal la Universitatea din Iai. n 1922 I. Grinescu devine profesor de Fiziologie vegetal la Universitatea din Cluj. Tradiia creat n acest mod la cele trei universiti din Romnia este continuat de academicienii N. Slgeanu de la Universitatea din Bucureti, E. Pop i t. Peterfi de la Universitatea din Cluj i de Elena Jeanrenaud de la Universitatea din Iai. Aceste prestigioase figuri de savani au creat importante coli n Fiziologia plantelor, n studiul fotosintezei la 3

Bucureti, studiul creterii, dezvoltrii i micrilor plantelor la Cluj i studiul regimului de ap la Iai. Au fost elaborate valoroase manuale de Fiziologie vegetal, aprute n diferite ediii. n anul 1948 Fiziologia vegetal este introdus ca disciplin independent n nvmntul agronomic din Romnia, fiind recunoscut caracterul aplicativ i rolul acestei ramuri a biologiei n practicarea agriculturii moderne. n cadrul institutelor agronomice, Fiziologia vegetal este predat de C. T. Popescu i H. Chirilei la Bucureti, I. Brbat la Cluj, Natalia Cojeneanu la Iai, I. Gr. Mihilescu la Craiova i M. Puca la Timioara. Ulterior, Fiziologia vegetal a fost preluat la institutele agronomice de un colectiv alctuit din N. Dorobanu i Ioana Molea la Bucureti, T. Suciu la Cluj, C. I. Milic i Viorica Teu la Iai, V. Baia la Timioara, Polixenia Nedelcu i Florica Popescu la Craiova. Acest colectiv s-a ocupat de editarea unui manual unic de Fiziologie vegetal, aprut n ediiile 1977 i 1982. 1.3. RAPORTUL FIZIOLOGIEI VEGETALE CU ALTE TIINE Fiziologia vegetal se afl n relaii strnse cu alte tiine prin obiectul cercetrilor, prin metodele utilizate , prin sistemele de interpretare i prin caracterul aplicativ. Prin obiectul de cercetare, Fiziologia vegetal se afl n relaii cu tiinele biologice cum sunt Morfologia i antomia plantelor, Sistematica, Ecologia i Geobotanica, existnd o strns interrelaie ntre structura i funcia plantelor, precum i ntre funciile organismelor vegetale i mediul lor natural de via. Prin metodele utilizate, Fiziologia vegetal se afl n relaii cu Biofizica i Biochimia; avnd la baz fenomene biofizice i biochimice, fiziologia folosete metode de investigaie proprii acestor discipline. Prin sistemele de interpretare, Fiziologia vegetal se afl n relaii cu Matematica i Statistica biologic. Prin caracterul aplicativ, Fiziologia vegetal se afl n relaii cu diferite discipline agronomice cum sunt Agrotehnica, Agrochimia, Fitotehnia, Legumicultura, Pomicultura etc, cu Genetica i Ameliorarea plantelor. 1.4. METODELE DE CERCETARE N FIZIOLOGIA VEGETAL Fiziologia plantelor folosete ca metode de cercetare observaia i experimentul. Experimentarea poate avea loc n laborator, ser, cas de vegetaie, teren experimental sau fitotron i poate utiliza metode clasice i metode moderne. Metodele moderne de cercetare sunt cromatografia pe hrtie, n strat subire sau n gaz, spectrocolorimetria, spectrofotometria, electroforeza, microscopia optic, florescent sau electronic, metoda trasorilor radioactivi, culturile "in vitro", prelucrarea analizelor prin sisteme electronice i redarea rezultatelor pe calculator. Desfurarea cercetrilor cuprinde o etap analitic, care const n defalcarea pe probleme i efectuarea determinrilor i o etap sintetic care const n analiza statistic, interpretarea i generalizarea rezultatelor. O deosebit importan are cunoaterea literaturii de specialitate n problema abordat n cercetare. "Este mai uor s descoperi un lucru, dect s afli dac a mai fost descoperit". Pentru satisfacerea acestui deziderat, Fiziologia vegetal beneficiaz de o serie de publicaii de specialitate proprii, editate la nivel internaional i naional. Cele mai prestigioase sunt lucrrile enciclopedice, de sintez Handbuch der Pflanzenphysiologie sau Encyclopedia of Plant Physiology, editat de W. Ruhland i aprut n 18 volume la editura Springer, Berlin-Heidelberg - New York i Annual Review of Plant Physiology, editat la Palo Alto, California, SUA. Reviste periodice de specialitate sunt Plant Physiology, editat n SUA, Physiologia Plantarum, editat n Danemarca, Photosintetica, editat n Cehia, Fiziologhiia Rastenii editat n Rusia etc.

Deosebit de importante sunt revistele de rezumate Field Crop Abstracts i Horticultural Abstracts editate de CAB INTERNATIONAL n Marea Britanie, care conin rezumatele tuturor lucrrilor de fiziologie a plantelor cultivate aprute n diferite reviste de specialitate pe plan mondial. Schimbul de informaii este facilitat de racordarea sistemelor de calculatoare din universiti la diferitele biblioteci de specialitate prin reeaua INTERNET.

CAPITOLUL 2 FIZIOLOGIA CELULEI VEGETALE

2.2. PROPRIETILE FIZICE I FIZIOLOGICE ALE MATERIEI VII CELULARE 2.2.2. Proprietile fiziologice Metabolismul reprezint totalitatea schimburilor de substan i energie dintre organismele vii i mediul lor de via, precum i transformrile intermediare din celula vie. Metabolismul este funcia esenial a vieii i cuprinde dou laturi: - anabolismul sau asimilaia, care const n absorbia de substane i energie i sinteza substanelor organice proprii; - catabolismul sau dezasimilaia, care const n degradarea substanelor organice asimilate i degajarea energiei. n primele faze de vegetaie, n timpul creterii, predomin anabolismul, care duce la acumularea substanelor organice n plante. La maturitate fiziologic, cele dou procese se echilibreaz, iar spre sfritul perioadei de vegetaie predomin catabolismul. Metabolismul este influenat de factori interni, cum este aciunea enzimelor, vitaminelor, hormonilor i de factori externi, cum sunt temperatura, lumina, apa, srurile minerale, CO2 etc. Creterea reprezint sporirea volumului i greutii esuturilor i organelor plantei pe baza nmulirii celulelor i a procesului de anabolism. Dezvoltarea const n apariia organelor de reproducere, fiind reprezentat de nflorirea plantelor, care se continu cu procesele de fructificare. n aceast faz a vegetaiei, n plant exist un echilibru ntre anabolism i catabolism. mbtrnirea i moartea. mbtrnirea sau senescena const n diminuarea activitii fiziologice i predominarea procesului de catabolism. Moartea const n ncetarea complet i ireversibil a activitii fiziologice. Sensibilitatea i excitabilitatea reprezint proprietatea materiei vii celulare de a percepe i de a reaciona la aciunea unor excitani interni sau externi. Micarea este proprietatea protoplasmei de a se deplasa sub forma unor cureni citoplasmatici, intracelular. Adaptarea constituie un ansamblu de modificri metabolice efectuate n corelaie cu factorii de mediu. 2.3. ABSORBIA DIFERITELOR SUBSTANE N CELULA VEGETAL ntre celula vegetal i mediul extern exist un permanent schimb de substane i energie. n cadrul acestui schimb, celula absoarbe din mediu ap, substane minerale i energie luminoas i cedeaz de asemenea ap, substane minerale i energie caloric. 2.3.1. Permeabilitatea membranelor. Tipuri de absorbie (transport) Permeabilitatea membranelor este nsuirea acestora de a fi strbtute de ap i de diferite alte substane. n funcie de gradul de permeabilitate, membranele pot fi: - permeabile, care permit trecerea n ntregime a unor soluii; - semipermeabile, care permit trecerea numai a solventului, nu i a substanei solvite din soluie; - impermeabile, care nu permit trecerea apei i a soluiilor. Permeabilitatea unei membrane depinde att de diametrul porilor si, ct i al particulelor care circul. n celula vegetal, membrana celular este permeabil, membranele plasmatice, plasmalema i tonoplastul sunt semipermeabile, iar cuticula i membranele celulelor de suber sunt impermeabile. Schimbul de substane dintre celul i mediul extern se realizeaz prin dou tipuri de transport:

Transportul pasiv este condiionat de permeabilitatea membranelor i se realizeaz prin fenomenele fizice de difuziune, imbibiie i osmoz, n conformitate cu gradientul de concentraie. El constituie aa-numita absorbie pasiv. Transportul activ se realizeaz mpotriva gradientului de concentraie pe baza unui consum de energie eliberat n respiraie, n conformitate cu necesitile metabolice ale celulei. El constituie aa-numita absorbie activ. 2.3.2. Absorbia apei 2.3.2.1. Difuziunea, imbibiia i osmoza Absorbia apei n celulele vegetale a fost explicat prin transportul pasiv, prin fenomenele fizice de difuziune, imbibiie i osmoz. Difuziunea este fenomenul de interptrundere omogen a dou substane miscibile, de concentraii diferite, puse n contact direct. Difuziunea se datorete energiei cinetice moleculare. Legile difuziunii se refer la sensul i viteza de difuziune. Sensul difuziunii este de la mediul cu o concentraie mai mare spre mediul cu o concentraie mai mic, pn la egalizarea concentraiei. Viteza de difuziune este invers proporional cu mrimea particulelor care difuzeaz. n plante difuziunea determin ptrunderea apei i substanelor minerale prin membrana celular, precum i ptrunderea gazelor CO2 i O2 n ostiolele stomatelor, camera substomatic i spaiile intercelulare din celulele mezofilului. Imbibiia este fenomenul de interptrundere a moleculelor de ap printre moleculele unei alte substane. n urma imbibiiei are loc creterea n volum i greutate a acesteia. Imbibiia se datorete energiei cinetice a moleculelor de ap, precum i proprietii diferiilor radicali chimici ai substanei, numii radicali hidrofili de a lega apa n mod reversibil. Dintre componentele celulare, substanele proteice ale protoplasmei prezint cel mai ridicat grad de imbibiie, datorat unui mare numr de radicali hidrofili liberi, cum sunt -NH2, - COOH, -OH. Glucidele complexe, amidonul i celuloza se mbib mai puin, avnd un numr mai redus de radicali hidrofili, iar lipidele nu se mbib deloc, deoarece conin numai radicali hidrofobi. Imbibiia are o importa deosebit n procesul de germinaie a seminelor stnd la baza absorbiei apei de ctre acestea. Seminele cu rezerve proteice se mbib mult mai mult (80-90%) dect seminele care conin rezerve glucide (20-30%). De asemenea, substanele pectice din tegumentul seminal se mbib foarte puternic. Osmoza este fenomenul de amestecare a dou soluii de concentraii diferite separate printr-o membran semipermeabil sau fenomenul de ptrundere a solventului unei soluii printro membran semipermeabil. Osmoza este un caz particular de difuziune. Ca i difuziunea, osmoza se realizeaz pn la egalizarea concentraiilor, dar contrar difuziunii, osmoza se efectueaz de la soluia mai diluat spre soluia mai concentrat, deoarece ptrunde numai apa. Osmoza se datorete unei fore numit for sau presiune osmotic. Valoarea acesteia depinde de diferena de concentraie dintre cele dou soluii. Osmoza poate fi pus n eviden cu ajutorul unui dispozitiv numit osmometrul Pfeffer. Osmometrul Pfeffer este alctuit dintr-un vas poros, n porii cruia se depune o membran semipermeabil, preparat pe cale chimic. Membrana semipermeabil este reprezentat de un precipitat de ferocianur de cupru i se obine din ferocianur de potasiu i sulfat de cupru. n vas se pune o soluie de zaharoz sau NaCl 20%, apoi se nchide vasul cu un dop de cauciuc prelungit cu un tub de sticl legat de un manometru cu mercur. Osmometrul se pune ntrun vas cu ap. Dup un timp se constat c nivelul mercurului din manometru se modific datorit mririi volumului soluiei din osmometru. Deoarece soluia extern este mai diluat, avnd un caracter hipotonic, apa intr n osmometru prin fenomenul de osmoz, numit endosmoz. n cazul n care soluia extern osmometrului este mai concentrat dect cea intern, avnd un caracter hipertonic, apa iese din osmometru prin fenomenul de osmoz, numit exosmoz. 7

2.3.2.2. Plasmoliza, deplasmoliza i turgescena Schimburile osmotice dintre celula vegetal i mediul extern sunt puse n eviden prin fenomenele de plasmoliz, deplasmoliz i turgescen. Plasmoliza este fenomenul de ieire a apei din celul n cazul cnd esutul este pus ntr-o soluie hipertonic. Ca urmare a ieirii apei prin exosmoz, citoplasma se desprinde de membrana celular, vacuola i micoreaz volumul, iar concentraia sucului vacuolar se mrete. Plasmoliza are loc n trei faze: - plasmoliza incipient, care const n desprinderea citoplasmei de membran numai la colurile acesteia; - plasmoliza concav, care const n desprinderea parial a citoplasmei de membran; - plasmoliz convex, care const n desprinderea total a citoplasmei de membran. Deplasmoliza este fenomenul invers plasmolizei, de intrare a apei n celulele plasmolizate, n cazul cnd esutul este pus ntr-o soluie hipotonic. Ca urmare a intrrii apei prin endosmoz, citoplasma se alipete de membrana celular, vacuola i mrete volumul, iar concentraia sucului vacuolar scade. Apa ptrunde n celul pn la starea de turgescen. Fenomenul de plasmoliz prezint o importan fiziologic deosebit, fiind utilizat ca un indiciu de viabilitate a celulei. Proprietatea de semipermeabilitate este caracteristic numai protoplasmei vii, prin moarte protoplasma devine permeabil. Turgescena este starea fiziologic normal, de hidratare optim a celulei. n celulele turgescente coninutul de ap este maxim. Turgescena se datorete elasticitii limitate a membranelor celulare, care la un moment dat se opune intrrii apei n celul, dei soluia extern este hipotonic. Starea de turgescen contribuie la susinerea mecanic a esuturilor la plantele ierboase. Forele care particip la absorbia apei de ctre celule sunt presiunea osmotic, presiunea membranei i fora de suciune a celulei. 2.3.2.3. Presiunea osmotic, presiunea de turgescen i fora de suciune Presiunea osmotic a celulei este numit i potenial osmotic i este dat de concentraia sucului vacuolar. Ea se datorete substanelor osmotic active din vacuol, cum sunt glucidele solubile, srurile minerale i favorizeaz ptrunderea apei n celule. Presiunea osmotic este influenat de factorii externi i interni. Factorii externi sunt: - umiditatea aerului i solului: cu ct aceasta este mai ridicat, presiunea osmotic este mai sczut; - temperatura: scderea temperaturii determin o mrire a presiunii osmotice a celulelor prin acumularea glucidelor osmotic active, ceea ce duce la scderea punctului de nghe al sucului vacuolar; creterea temperaturii determin o mrire a presiunii osmotice a celulelor prin evaporarea apei libere; - lumina: intensitatea luminoas ridicat mrete acumularea glucidelor solubile prin fotosintez; - salinitatea solului mrete presiunea osmotic a celulelor prin acumularea de sruri minerale i glucide solubile. Factorii interni sunt: - specia i potenialul de adaptare ecologic: presiunea osmotic este mic la plantele de ap, are valori medii la plantele mezofile i glicofile i valori foarte mari la plantele de deert i de srtur; - organul plantei: presiunea osmotic crete de la rdcin spre frunze; - esutul: n rdcin presiunea osmotic crete n sens centripet, de la perii absorbani spre cilindrul central; - vrsta plantelor: presiunea osmotic crete de la celulele tinere la celulele adulte. Presiunea de turgescen este denumit i presiunea membranei i reprezint presiunea cu care membrana apas asupra citoplasmei. Ea se afl n relaie invers cu presiunea osmotic a celulei, mrindu-se pe msura ptrunderii apei n celul. La celulele turgescente, valoarea

presiunii de turgescen este maxim, ea fiind egal ca mrime i de sens contrar cu presiunea osmotic a celulei. Fora de suciune este fora activ a celulei, care determin ptrunderea apei. Ea se modific n celule n funcie de gradul de aprovizionare cu ap, fiind o rezultant a aciunii presiunii osmotice i a presiunii de turgescen. La celulele mature fora de suciune (S) este considerat diferena dintre presiunea osmotic (PO) i presiunea de turgescen (PT): S = PO - PT La celulele plasmolizate, n care PT = 0, S = PO; n timpul deplasmolizei, S = PO - PT, iar la celulele turgescente, la care PO = PT, S = 0 Fora de suciune variaz cu vrsta celulelor, fiind mai ridicat la celulele tinere dect la cele adulte i prezint o dinamic diurn, fiind mai ridicat n timpul amiezii dect dimineaa i seara. Presiunea osmotic i fora de suciune a celulelor au o mare importan fiziologic, contribuind la absorbia apei de ctre rdcin i transportul ei ctre organele aeriene. Din punct de vedere practic, aceste fore constituie indici fiziologici care relev starea de hidratare a organelor plantei. Determinarea acestor indici reprezint baza fiziologic a aplicrii irigaiilor. 2.3.2.4. Aquaporinele Absorbia apei de ctre celul a fost mult timp explicat prin fenomene fizice. Cercetrile recente de biologie molecular au dus la descoperirea aquaporinelor. Acestea sunt proteine membranare integrale ce formeaz canale proteice pentru ap prin care are loc traversarea apei prin membranele celulare, n special plasmatice. Acest moment este foarte important pentru nelegerea absorbiei apei n celulele vegetale. Aquaporinele au o eficien foarte mare, permind transportul unor mari cantiti de ap. Descoperirea aquaporinelor explic permeabilitatea foarte ridicat a membranelor celulare. Canalele pentru ap au diametrul de 0,3 0,4 nm, n timp ce moleculele de ap au 0,28 nm n diametru. Prin natura lor proteic ele ofer o baz molecular pentru reglarea rapid i reversibil a transportului de ap transmembranar. n contrast cu ceea ce s-a crezut iniial, compoziia specific fosfolipo-proteic a membranelor plasmatice prezint o permeabilitate foarte ridicat pentru ap. Aquaporinele ofer o baz molecular pentru reglarea rapid i reversibil a transportului de ap transmembranar. Celula poate s-i regleze absorbia apei n diferite faze critice din ciclul ontogenetic sau ca rspuns la condiiile de stres abiotic sau biotic.

2.3.3. Absorbia substanelor solvite Ptrunderea substanelor solvite n celula vegetal se realizeaz printr-un transport pasiv i printr-un transport activ. 2.3.3.1. Transportul pasiv Transportul (absorbia) pasiv are loc prin fenomene fizice, n conformitate cu gradientul de concentraie (chimic) pentru substanele lipsite de sarcini electrice (moleculare) i cu gradientul de sarcin electric (electrochimic) pentru substanele ncrcate electric (ioni). Transportul pasiv este bidirecional i se desfoar prin fenomenele de difuziune simpl i difuziune facilitat. Difuziunea simpl. Intensitatea cu care substanele solvite difuzeaz de la o zon la alta depinde de diferena de concentraie. Dearece bariera de membran are un caracter lipidic (bistratul fosfolipidic), moleculele liposolubile trec mai rapid. Coeficientul de permeabilitate reflect n general solubilitatea n lipide a moleculelor ce difuzeaz. Difuziunea facilitat. Bistratul lipidic al membranelor celulare este impermeabil pentru substanele moleculare hidrosolubile (de exemplu zaharuri) i pentru cele ncrcate electric (ioni). S-a artat ns c ionii ptrund n celule mult mai rapid dect le permite difuziunea simpl prin bistratul lipidic. Explicaia a fost dat de stabilirea structurii membranelor citoplasmatice la microscopul electronic, sub forma modelului mozaicului fluid. Aceasta faciliteaz difuziunea prin membrane a substanelor solvite hidrosolubile i a ionilor ncrcai electric. Fenomenul a fost denumit difuziune facilitat. Cercetrile au artat c membranele celulare conin un mare numr de proteine care funcioneaz ca proteine de transport. Aceste proteine sunt de dou tipuri, i anume: - transportori sau crui, care leag substana de transportat pe o parte a membranei, o transport prin membran, o elibereaz pe partea opus, apoi revine la poziia iniial; se presupune c mecanismul de funcionare const ntr-o modificare de conformaie a proteinei; - proteinele de canal, care formeaz canale proteice umplute cu ap, iar difuzia prin canal depinde de gradul de hidratare a ionului. La celulele vegetale au fost descoperite n membrane numeroase canale pentru ionii K+, Cl , Ca2+, dar sunt sugerate i canale pentru ionii organici. Canalele proteice funcioneaz ca nite pori, care pot fi deschise sau nchise. Difuziunea substanelor poate avea loc numai cnd poarta este deschis. Deschiderea canalului poate fi determinat de prezena ionului sau ca rspuns la un potenial de membran de o anumit mrime. Cercetarea transportului pasiv al ionilor prin membrane a fost efectuat prin studii de electrofiziologie. Transportul ionilor prin membrane stabilete un curent electric. Curenii creai sunt de ordinal picoamperilor (pA = 10-12A) i pot fi msurai cu microelectrozi. Primele experiene au fost efectuate prin introducerea electrodului direct n celul. Rezultatele au msurat activitatea concomitant a mai multor canale din plasmalem i tonoplast. Metoda patch clamp permite studierea unui singur canal de ioni din membrana selectat. Microelectrodul este plasat n contact cu membrana unui protoplast izolat. Prin sucia uoar, mici zone de membran se ataeaz de vrful electrodului, apoi sunt introduce n soluii speciale. Cu un vrf al electrodului de 1,0 m diametru, poate fi desprins o zon cu un singur canal. Cu un circuit electric adecvat, poate fi nregistrat diferena de potenial prin aceast microzon.

2.3.3.2. Transportul activ Transportul (absorbia) activ() se realizeaz mportiva gradientului de concentraie (chimic) sau a gradientului de sarcin electric (electrochimic), fiind dependent de energia metabolic. Transportul activ este unidirecional, de la exterior la interiorul celulelor i determin absorbia unor molecule sau ioni n celule, chiar i atunci cnd concentraia acestora n mediu este foarte sczut. Transportul activ al substanelor se face prin proteine de transport, i anume transportori proteici i canale transmembranare. Transportul unui singur compus se numete uniport. Transportul a doi compui se numete cotransport; acestea poate fi : n acelai sens simport, n sens opus antiport. Energia pentru transportul activ provine din hidroliza ATP sintetizat n cloroplaste i mitocondrii sub aciunea enzimei ATP-az din membranele citoplasmatice.

11

CAPITOLUL 3 REGIMUL DE AP AL PLANTELOR 3.1. PREZENTA, STRILE, FORMELE I ROLUL APEI N PLANT 3.1.1. Coninutul de ap al plantelor Coninutul de ap al plantelor variaz n funcie de o serie de factori cum sunt: specia, organul, esutul, vrsta i starea fiziologic. Plantele de ap, alge sau plante superioare submerse, conin cele mai mari cantiti de ap, 95-98%, iar plantele de deert sau srtur conin cele mai mici cantiti de ap. Dintre organele plantei, fructele crnoase i frunzele conin 80-90%, tulpinile subterane bulbi, tuberculi, rizomi conin 70-80%, tulpinile 40-45%, iar seminele 6-17% ap. Dintre esuturi, coninutul cel mai ridicat de ap l au meristemele, parenchimurile i vasele liberiene, iar cel mai sczut, esuturile mecanice i protectoare. Organele tinere, n cretere activ, au un coninut mult mai ridicat de ap dect organele btrne sau aflate n starea de repaus (tabelul 1). Coninutul de ap din plante nregistreaz o dinamic diurn i sezonier. Tabelul 1 Coninutul de ap n diferite organe ale plantelor (%) (dup Peterfi i Slgeanu, 1972) Organul Fructe Specia Coninutul de ap (%) 94 95 94 95 94 95 92 93 94 95 87 91 92 93 74 80 40 45 12 14

tomate castravei salat Frunze varz ceap morcov Rdcini tuberizate ridiche Tuberculi cartof Tulpini lemnoase arbori Cariopse cereale

Dinamica diurn este evident n zilele de var, n care coninutul de ap este maxim n a doua jumtate a nopii i minim dup amiaz. Dinamica sezonier este evident n decursul anului. Coninutul de ap este maxim primvara i la nceputul verii. La plantele anuale, coninutul de ap este minim la sfritul verii, iar la plantele perene n timpul iernii. 3.1.2. Strile i formele de ap din plante n corpul plantelor apa se gsete n general n dou stri, lichid i gazoas. n timpul iernii, la temperaturi foarte sczute poate exista i n stare solid (ghea). A) Apa lichid reprezint componenta principal a tuturor celulelor, fiind prezent n cantitate maxim n vacuole i minim n organitele celulare. Ea se gsete sub form de ap liber i ap legat.

Apa liber este reinut cu fore slabe de coloizii plasmatici; este prezent n peretele celular, vacuole, citoplasm, vase conductoare i circul n plant, fiind mobil. Apa liber asigur turgescena celulelor i circulaia substanelor i particip n procesele metabolice. nghea la temperaturi de 0 -10C i este pierdut prin transpiraie la temperaturi normale. Apa legat este reinut cu fore puternice de coloizii plasmatici, nu este mobil, nu asigur turgescena celulelor i circulaia substanelor i nu particip n procesele metabolice. Apa legat nghea la temperaturi mai sczute de -10C i se evapor numai la temperatura de 100C. Raportul dintre apa legat i apa liber asigur supravieuirea plantelor la condiiile de stres, de exemplu nghe, secet, salinitate. n aceste condiii coninutul de ap liber scade, iar apa legat mrete rezistena biologic la deshidratare. Astfel, n timpul iernii apa legat reprezint 54% din apa total n ramurile plantelor lemnoase i 35% din apa total n frunzele aciculare de pin. B) Apa gazoas este apa care se elimin n procesul de transpiraie sub form de vapori n spaiile intercelulare i prin ostiolele stomatelor. 3.1.3. Rolul apei n viaa plantei Apa este un compus indispensabil vieii plantelor, avnd un rol fiziologic esenial. La nivel celular, apa reprezint mediul de dispersie al coloizilor plasmatici, mediul optim al reaciilor biochimice vitale. Prin imbibiia protoplasmei, a vacuolelor i a peretelui celular, apa asigur turgescena, starea fiziologic normal a celulelor. n plant apa joac un rol termoreglator: prin circulaia ei n organismul vegetal, apa micoreaz temperatura acestuia, iar prin procesul de transpiraie evit supranclzirea plantelor. n nutriia mineral a plantelor apa, asigur solubilizarea compuilor minerali, favorizeaz absorbia i transportul elementelor minerale. n fotosintez, apa controleaz difuzia CO2 i O2 prin micrile de nchidere i deschidere a stomatelor; fiind optic vid, este transparent pentru razele luminoase ale spectrului solar. De asemenea, ofer sursa de hidrogen necesar reducerii CO2 n biosinteza glucidelor. n procesele de metabolism, apa condiioneaz activitatea enzimatic. Apa ia parte la procesele anabolice de biosintez, prin reaciile de polimerizare i n procesele catabolice de degradare, prin reaciile de hidroliz a substanelor organice. n procesul de cretere, apa particip n special n elongaia celular, asigurnd realizarea volumului normal al esuturilor i organelor plantei. Ca factor climatic, apa deine i un important rol ecologic, i anume controleaz repartizarea vegetaiei pe glob. Fiind n contact permanent cu aerul atmosferic, n general deficitar n vapori de ap, plantele sufer permanent pierderea apei prin procesul de transpiraie. ndeplinirea rolului apei n organismul vegetal este posibil numai prin permanenta absorbie de ctre plante din mediu, n special din sol. Aceasta stabilete un flux permanent de ap de la sol, prin plant, n atmosfer, o continuitate sol-plant-atmosfer. Este confirmat astfel idea c plantele nu exist izolat, ci sunt integrate n mediul lor de via. Absorbia, transportul i eliminarea apei de ctre plant reprezint cele trei componente ale regimului de ap al plantelor.

13

3.2. ABSORBTIA APEI DE CTRE PLANTE 3.2.1. Rdcina ca organ de absorbie a apei Plantele prezint un organ specializat la funcia de absorbie a apei, care este rdcina. La plantele terestre rdcina absoarbe apa din sol, ndeplinind n acelai timp i funcia de fixare a plantei. Ramificarea rdcinii. Absorbia optim a apei din sol este favorizat de caracteristicile morfo-anatomice i fiziologice ale rdcinii. Mrirea suprafeei de absorbie, realizat prin mrirea suprafeei de contact cu particulele solului se face prin proprietatea rdcinii de a se ramifica. Astfel, rdcina principal, provenit din radicula embrionului se ramific n rdcini secundare, teriare etc. Raportul de dezvoltare dintre rdcina principal i rdcinile secundare d natere diferitelor tipuri morfologice de rdcini i reprezint un caracter de specie. Astfel, unele plante au rdcini pivotante, n care rdcina principal este puternic dezvoltat, iar rdcinile secundare sunt reduse, de exemplu inul, sfecla, trifoiul i lucerna. La graminee i la plantele perene prin bulbi sau bulbo-tuberculi rdcina principal dispare, fiind nlocuit de rdcini fasciculate adventive. Plantele lemnoase au rdcini rmuroase, ngroate, n care rdcina principal este egal ca mrime cu rdcinile secundare. Uneori, la plantele lemnoase exist o specializare a rdcinilor rmuroase n rdcini lungi, cu rol de fixare i rdcini scurte, cu rol de absorbie, de exemplu la pin. Morfologia rdcinii este determinat genetic. Potenialul de adncire n sol este de asemenea specific, fiind de 65 cm la mazre, 113 cm la gru, 190 cm la lupin i 10 m la mr. Rdcinile de lucern i via de vie ptrund foarte adnc n sol. Morfologia rdcinii este controlat i de gradul de aprovizionare cu ap din sol. ntr-un sol cu ap suficient ramificarea rdcinii este redus, superficial. Astfel, umiditatea ridicat din sol determin o adncire a rdcinilor de gru i lupin numai pn la 80 cm. Pinul i stejarul care triesc n turbrie i n luncile mltinoase i distribuie rdcinile n straturile superficiale ale solului. n zonele uscate, ramificarea rdcinii este puternic, spre sursa de ap. Se spune c rdcinile "alearg n sol dup ap". Apa din sol exercit un efect morfogenetic asupra rdcinii plantelor. Astfel, la plantele din zonele umede, volumul rdcinii este redus, poate ajunge numai 10 % din volumul plantei, pe cnd la plantele de deert, volumul rdcinii poate ajunge la 90 % din volumul plantei. La o aprovizionare optim cu ap, volumul rdcinii reprezint 50 % din volumul plantei. La prima vedere importana rdcinii pentru plant este minimalizat de faptul c aceasta are o localizare subteran, fiind jumtatea ascuns a plantei. Compactitatea solului constituie o barier fizic pentru asigurarea O2 necesar respiraiei aerobe, care induce modificri morfologice i metabolice n rdcini. La plantele de gru cultivate pe sol compact i afnat, compactitatea solului a redus adncimea rdcinii, intensitatea elongaiei axei seminale, lungimea celulelor corticale i raportul rdcin/tulpin, precum i absorbia NPK, dar a mrit diametrul rdcinii. Compactitatea solului mrete rezistena la fluxul de ap prin reducerea diametrului vaselor conductoare lemnoase, de exemplu la gru, de la 65 la 55 m. Perii absorbani. Dei este puternic ramificat, rdcina prezint o zon specializat la funcia de absorbie a apei care este vrful rdcinii. Acesta se extinde pe o lungime de 4-7 mm n zona apical a tuturor ramificaiilor rdcinii. Zonele vrfului rdcinii sunt: piloriza, vrful vegetativ, zona neted, zona perilor absorbani i zona aspr. Vrful rdcinii reprezint zona de cretere n care au loc cele trei etape de cretere celular: n zona meristematic are loc diviziunea, n zona neted - alungirea, iar n zona perilor absorbani are loc diferenierea celulelor rdcinii n rizoderm, scoar i cilindru central. Zona perilor absorbani reprezint zona rdcinii specializat la funcia de absorbie a apei. Perii absorbani sunt celule ale rizodermei puternic alungite, cu lungimea de 0,115 mm i diametrul de 10 . Perii sunt unicelulari, au o membran subire, alctuit din caloz i substane pectice, cu o mare capacitate de gelificare i aderen la sol i cu o mare permeabilitate. Citoplasma reprezint un strat periferic, subire n care se gsete nucleul cu poziia apical.

Coninutul celulei este ocupat de o vacuol mare, cu suc vacuolar concentrat, n care apa este absorbit prin fenomenul de endosmoz. La plantele ierboase numrul perilor absorbani este n general de 220-420/mm2. La plantele lemnoase numrul perilor absorbani poate fi de 730/mm 2 la frasin, 880/mm 2 la stejar i 1200/mm2 la arar. Lungimea perilor absorbani poate fi de 0,2 mm la rapi sau 2,3-3 mm la gru. S-a calculat c la secar lungimea total a perilor absorbani este de 10.000 km (Dittmer, cit. de Milic i colab., 1982). Perii absorbani mresc suprafaa rdcinii. Creterea perilor absorbani este influenat de coninutul de ap i elemente minerale din sol. Durata de via a perilor absorbani este scurt, de 2-3 zile, dar poate ajunge la 10 sptmni la grul de toamn. La unii arbori, de exemplu la pin, absorbia apei se face i n zona aspr, prin lenticele. Funcia de absorbie a apei n zona perilor absorbani este favorizat de structura anatomic a rdcinii din aceast zon, difereniat n parenchim absorbant la nivelul scoarei i n vase conductoare lemnoase la nivelul cilindrului central. Micorizele. La unele specii ierboase, dar mai ales lemnoase, perii absorbani au o via foarte scurt sau lipsesc. Absorbia apei este efectuat cu ajutorul hifelor unor ciuperci din sol. Acestea formeaz mpreun cu rdcinile structuri simbiotice numite micorize. n relaia simbiont, ciuperca absoarbe din sol apa i srurile minerale pe care le ofer plantei, de la care primete n schimb substane organice cu carbon. Dintre speciile fructifere, micorizele au fost puse n eviden la Prunus cerasifera, care formeaz micorize cu Glomus mosseae, la piersic care formeaz micorize cu G. fasciculatus i la cpun, care formeaz micorize cu G. macrocarpa . Micorizele au fost puse n eviden la diferite specii legumicole, de exemplu la ceap, micorize cu Glomus sp. i G. intraradices, la salat cu G. mosseae i G. fasciculatus, la tomate cu G. Fasciculatus, la castravei cu G. manihotis i la fasole cu Gigaspora margarita. 3.2.2. Apa din sol i accesibilitatea ei pentru plante Apa din sol se gsete sub mai multe forme care sunt reinute cu fore diferite de ctre particulele de sol. Aceaste forme sunt: - apa de constituie sau legat chimic, care intr n compoziia diferitelor substane ca ap de cristalizare; - apa higroscopic, care formeaz un strat monomolecular la suprafaa particulelor de sol, este reinut cu fore foarte mari, pn la 1000 atm. i nu poate fi ndeprtat dect prin uscare la 105C; - apa pelicular, care formeaz straturi succesive la suprafaa particulelor de sol; straturile interne sunt reinute cu fore mari, de 30-50 atm., iar cele externe cu fore mici, de 0,5-30 atm.; - apa capilar, care exist n spaiile capilare ale solului; este reinut cu fore mici, de pn la 1 atm., este mobil, avnd circulaie ascendent; - apa gravitaional care exist n spaiile largi ale solului; este foarte mobil, avnd circulaie descendent, sub aciunea gravitaiei. Formele accesibile de ap sunt reprezentate de apa capilar, straturile externe ale apei peliculare i apa gravitaional.

15

3.2.3. Mecanismul de absorbie radicular a apei Absorbia apei prin rdcin se efectueaz pe cale pasiv i pe cale activ. Absorbia pasiv este determinat de transpiraia frunzelor. Deficitul de ap din celulele mezofilului mrete fora de suciune a acestora. Astfel, apa este absorbit din vasele de lemn ale nervurilor, iar deficitul se transmite descendent n tulpin i rdcin, pn la perii absorbani. Intensitatea absorbiei pasive a apei este determinat de intensitatea transpiraiei. Plantele absorb apa pe cale pasiv n cea mai mare parte a perioadei de vegetaie, ct exist frunzele. O plant absoarbe prin endosmoz apa reinut cu fore de pn la 15 atm, dac soluia solului este hipotonic. Absorbia activ este determinat de activitatea metabolic a rdcinii. Apa este absorbit n rdcin prin fenomenul de osmoz atunci cnd concentraia soluiei solului este mai mic dect concentraia sucului vacuolar al celulelor rdcinii. Gradientul crescut al presiunii osmotice de la exterior spre interior asigur circulaia apei n parenchimul cortical numai n sens centripet. Absorbia activ a apei se face cu un consum ridicat de energie n celulele rdcinii, provenit din procesul de respiraie. n cilindrul central apa este mpins n vasele de lemn n sens ascendent. Prin absorbia activ plantele absorb din sol apa reinut cu fore mici, de 1-2 atm., ns acest mod de absorbie realizeaz numai 5% din cantitatea de ap absorbit prin rdcin. La plantele perene absorbia activ este deosebit de important primvara, nainte de formarea noilor frunze. 3.2.4. Influena diferiilor factori asupra absorbie apei din sol Absorbia apei din sol este influenat de factori externi i interni. Factorii externi. Temperatura solului. Absorbia apei ncepe la 0C la plantele cu sistem radicular superficial i la -5C la arbori; se intensific pn la 25-32C, apoi scade treptat, iar la 40C nceteaz. Solurile reci, dei bine aprovizionate cu ap, sunt "fiziologic uscate". La temperaturi sczute, absorbia apei este inhibat, nct la 5C se absoarbe numai 25% din apa absorbit la 25C. Acest fenomen se datorete scderii cu 50% a permeabilitii protoplasmei, scderii capacitii de imbibiie i mririi vscozitii acesteia, precum i reducerii mobilitii soluiei solului. Lumina stimuleaz absorbia apei prin rdcin intensificnd transpiraia, att prin creterea temperaturii, ct i prin deschiderea stomatelor. Prin fotosintez, lumina furnizeaz substanele organice, sursa de energie metabolic n respiraia rdcinii. Concentraia soluiei solului. Absorbia apei fiind n esen un fenomen de osmoz, depinde de raportul de concentraie cu soluia solului. O bun absorbie se realizeaz la o concentraie a soluiei solului de 1-5 i o presiune osmotic a acesteia de 0,1-2 atm. Plantele de srtur, numite halofite au o toleran ridicat la concentraia soluiei solului, datorat unui potenial osmotic ridicat, realizat n special prin ptrunderea diferiilor ioni minerali n vacuol. Dintre plantele de cultur, sfecla de zahr prezint o toleran mai mare fa de concentraia soluiei solului, datorat originii acestei specii n halofita Beta maritima. Dintre plantele floricole, crizantema prezint o toleran ridicat la concentraia soluiei solului. Aeraia solului. Absorbia apei este optim la o aeraie ce determin o concentraie de 16-18 % O2 n sol. Sub concentraia de 5% O2, pe un sol inundat sau compact, absorbia apei este inhibat deoarece respiraia rdcinilor devine anaerob. Alcoolul etilic intoxic rdcina, iar CO2 scade permeabilitatea rdcinii i intoxic planta. Fenomenul se ntlnete n zonele inundate sau n orae, pe solurile acoperite cu pavaj. n acest caz se produce un dezechilibru ntre absorbie i transpiraie, care duce la ofilirea plantelor. Durata maxim de rezisten la lipsa oxigenului provocat de inundaii este de 1-3 zile la unele cucurbitacee, 4-6 zile la fasole i cartof i 8-10 zile la gru i porumb.

Plantele hidrofile, de exemplu Juncus, Carex, Thypha i orezul rezist n exces de umiditate datorit unui parenchim aerifer. Chiparosul de balt (Taxodium distichum) formeaz pneumatofori, iar slciile formeaz rdcini adventive pe tulpini. Reacia soluiei solului (pH). n general, absorbia rdcinii este optim la pH neutru. Modificarea pH-ului, mai ales alcalin reduce permeabilitatea membranelor celulare, frnnd absorbia apei. Dintre plantele de cultur, valoarea pH-ului optim pentru absorbie este de 5 la cartof, 6 la trifoi, 6-7 la gru i 7-8 la lucern. Factorii interni. Intensitatea transpiraiei. Absorbia pasiv a apei este stimulat de mrirea intensitii transpiraiei. Dinamica diurn a absorbiei apei n timpul creterii. La plantele de trandafir cultivate n soluii nutritive absorbia apei prezint un maxim n timpul zilei (Brun i colab., 1996). Dinamica ontogenetic a absorbiei apei. La plantele de Gladiolus sp., absorbia apei este maxim la formarea inflorescenelor (Andria i colab., 1996). 3.2.5. Absorbia apei prin organele aeriene Plantele pot lua apa din mediu i prin organele aeriene, de exemplu tulpini, ramuri tinere i mai ales frunze tinere. Sursa de ap n acest caz este reprezentat de umiditatea atmosferic. Prin frunze apa este absorbit mai intens n condiii de secet, cnd plantele sunt ofilite. n acest mod se poate absorbi ns numai 5-10 % din cantitatea de ap necesar. Plantele tinere i cele de umbr pot lua prin frunze pn la 50 % din apa necesar. Absorbia apei prin frunze nu se efectueaz prin stomate, ci prin celulele epidermice i anume prin cuticula acestora. Viteza de absorbie depinde de valoarea forei de suciune a celulelor din mezofil i de gradul de permeabilitate a cuticulei. Frunzele cu cuticul subire i umectat absorb o mare cantitate de ap. Absorbia apei prin organele aeriene st la baza tehnologiei de irigaie prin aspersiune. Metoda asigur rehidratarea esuturilor plantei deshidratate n condii de secet.

17

3.3. CIRCULATIA APEI N PLANTE 3.3.1. Calea de circulaie a apei Apa circul n plante prin vasele lemnoase i prin esutul parenchimatic. Circulaia prin vasele lemnoase se efectueaz pe distane mari, pn la zeci de metri, prin esutul conductor lemnos al rdcinii, tulpinii, frunzei, florilor i fructelor. Vasele lemnoase sunt trahei i traheide. Traheele sunt celule prozenchimatice puse cap la cap, cu pereii laterali lignificai, ntre care au disprut pereii despritori. Ele sunt vase perfecte, adevrate conducte, ntlnite la angiosperme. Dup tipul ngrorii cu lignin, pot fi inelate, spiralate, reticulate i punctate. Traheidele sunt celule prozenchimatice, de asemenea cu pereii laterali lignificai, ntre care exist perei despritori. Ele sunt vase imperfecte, ntlnite la gimnosperme. La speciile lemnoase lemnul este alctuit din vase de lemn tnr, numit alburn, dispuse periferic i vase de lemn btrn numit duramen, dispuse central. Circulaia apei se face numai prin alburn deoarece vasele de lemn din duramen se astup cu anumite formaiuni numite tile. Excepie fac speciile care nu conin duramen, cum sunt teiul, plopul i mesteacnul. La frasin i salcm circulaia are loc prin unul sau dou inele periferice ale alburnului, pe cnd la stejar numrul inelelor care conduc apa este mai mare (8-10). La speciile care nu formeaz duramen, circulaia apei se face printr-un numr mai mare de inele. Mrimea vaselor lemnoase este variabil, de exemplu la arar acestea au 40-60 m diametru i 4 cm lungime, unele ajungnd la 30 cm, iar la stejar 300-500 m diametru i pn la 10 cm lungime. Datorit ramificrii extinse i a numrului mare de conexiuni laterale, esutul conductor lemons constituie un tot continuu, un sistem interconectat al circulaiei apei n plant. Circulaia apei prin vasele de lemn poate fi pus n eviden prin metoda decorticrii i prin metoda soluiilor colorate. Sensul de circulaie a apei n vasele lemnoase este ascendent. Viteza de circulaiei este mare, datorit ascensiunii pasive a apei. La angiospermele ierboase viteza de circulaie este de 0,7-1,7 m/or. La angiospermele lemnoase este de 4-40 m/or. Viteza de circulaie a apei este maxim n timpul zilei, corelat cu transpiraia i absorbia maxim a apei. Circulaia prin esutul parenchimatic se efectueaz pe distane mici, de civa mm, prin parenchimul cortical al rdcinii din zona perilor absorbani pn la cilindru central i prin mezofilul frunzei, de la nervuri pn la camera substomatic. Sensul circulaiei este lateral. Cercetrile mai vechi, biofizice, referitoare la circulaia apei prin esutul parenchimatic arat c circulaia apei se efectueaz datorit osmozei prin protoplasm i imbibiiei prin pereii celulelor vii ale rdcinii i frunzelor. Cercetrile moderne arat c circulaia apei prin celulele parenchimului se face pe trei ci: - prin peretele celular calea apoplastic; - de la celul la celul - prin plasmodesme calea simplastic; - prin membranele plasmatice calea transmembranar. Genetica molecular studiaz implicarea mecanismelor moleculare n activitatea plasmodesmelor, precum i realizarea cii transmembranare, prin intermediul aquaporinelor. 3.3.2. Forele care determin urcarea apei n plant Ascensiunea apei n plant se efectueaz cu ajutorul unor fore fiziologice, care sunt presiunea radicular i fora de aspiraie a frunzelor i a unor fore fizice, care sunt fora de coeziune a moleculelor de ap, forele de capilaritate i de imbibiie a vaselor lemnoase. Presiunea radicular este numit fora motrice inferioar. Ea reprezint fora activ a rdcinii capabil s pompeze continuu apa n corpul plantelor. Valoarea presiunii radiculare este n medie de 1 atm. la plantele ierboase i de 1-3 atm. la plantele lemnoase, de exemplu 1 atm. la ararul de zahr i 2,5 atm. la mesteacn. La castan presiunea radicular atinge 9 atm. Presiunea

radicular lipsete la conifere. La plantele lemnoase este deosebit de activ primvara i realizeaz urcarea apei la nlimi mari, de 15 - 20 m nainte de apariia frunzelor. Se consider c presiunea radicular i are originea n structura rdcinii i n absorbia activ a elementelor minerale din sol. Vasele lemnoase, localizate n cilindrul central sunt nconjurate de endoderm. Celulele endodermului au pereii parial ngroai cu suberint, o substan hidrofob ce constituie o barier n circulaia apei prin spaiul apoplastic; ca urmare apa circul radial numai prin membranele citoplasmatice ale celulelor endodermului. Absorbia i acumularea ionilor minerali n vasele lemnoase mrete potenialul osmotic al sucului de xilem i determin absorbia apei prin endosmoz. Pereii ngroai cu suberin ai celulelor endodermului mpiedic revenirea apei n scoar, ca urmare apa circul n rdcin numai n sens centripet. ntr-un anumit sens, rdcina poate fi comparat cu un osmometru, n care celulele endodermului constituie o membran selectiv permeabil, iar ionii minerali acumulai n xilem reprezint substana solvit ce confer un caracter hipertonic soluiei interne. Ct timp rdcina acumuleaz ioni n xilem, ea va funciona ca o pomp aspiro-respingtoare, ce va pompa apa n plant n sens ascendant. Presiunea radicular poate fi pus n eviden prin fenomenele de plns sau lcrimare a plantelor i de gutaie. Plnsul plantelor const n eliminarea apei sub form de picturi, din organele rnite. Valoarea presiunii radiculare, respectiv cantitatea de ap eliminat prin plns poate fi msurat prin secionarea tulpinii unei plante deasupra coletului i racordarea poriunii rmase la un manometru cu mercur. Seva de lcrimare este seva brut care conine ap, substane minerale, dar i substane organice, n special glucide, de exemplu 1,4-1,9 % la mesteacn, 1,2-3,2 % la ararul de zahr i 1,6-3,0% la Agave americana, aminoacizi, acizi organici, vitamine etc. Gutaia const n eliminarea apei sub form de picturi din organele ntregi, n special prin frunze, n condiiile n care atmosfera este saturat cu vapori de ap. Gutaia poate fi observat n vrful frunzelor la plante cultivate n ghivece, introduse sub un clopot de sticl. Att n cazul provocrii plnsului ct i al gutaiei, la plante este mpiedicat procesul de transpiraie. Durata de timp ct funcioneaz presiunea radicular variaz n funcie de specie. La plantele ierboase anuale presiunea radicular poate fi activ chiar pe toat durata perioadei de vegetaie, dar valoarea ei scade la sfritul acesteia. La Agave americana presiunea radicular funcioneaz pn la 7 sptmni, n timp ce la plantele lemnoase dureaz 3-5 sptmni de la pornirea n vegetaie. Cantitatea de sev ce se poate colecta prin lcrimare este 5 l/zi la mesteacn i 7,5 l/zi la Agave americana. Presiunea radicular prezint valori relative reduse, care sunt suficiente pentru ascensiunea sevei brute la plantele ierboase, dar insuficiente la plantele lemnoase; ea asigur numai 16% din ascensiunea necesar sevei la arbori. Fora de aspiraie a frunzelor este numit fora motrice superioar. Ea reprezint fora cu care frunzele aspir continuu apa provenit din sol n corpul plantelor. Valoarea forei de aspiraie a frunzelor este foarte ridicat, depind n general 15-20 atm. dar poate ajunge i pn la 900 atm. n aerul cu o umiditate relativ de 50 %. Fora de aspiraie a frunzelor este de 10,6 12,6 atm la salcm, 10,8-12,1 atm la platan, 15,2 - 15,4 atm la frasin i 18,1-20,4 atm la stejar. Fora de aspiraie a frunzelor poate fi msurat prin introducerea unei ramuri ntr-un tub de sticl racordat la un manometru cu mercur. Fora de aspiraie a frunzelor se datorete eliminrii continue a apei n procesul de transpiraie. Ea este o for pasiv determinat de deficitul de ap din atmosfer, care determin absorbia permanent a apei din vasele de lemn din nervuri spre celulele mezofilului. n acelai timp, ea prezint un caracter activ, n msura n care plantele controleaz procesul de transpiraie, pentru a realiza adaptarea la condiiile locale de mediu. Cele dou fore fiziologice se pot manifesta numai prin aciunea forelor fizice. Fora de coeziune a moleculelor de ap este fora care permite ridicarea apei sub forma unei coloane nentrerupte cu seciunea de 1 cm2 pn la nlimea de 10,33 m, dup care are loc ntreruperea coloanei datorit "vidului lui Torricelli". Aceast for are valoare de 1 atm. Coeziunea moleculelor de ap poate fi pus n eviden prin dispozitivul Askenasy. 19

ntr-o plnie de sticl se prepar o past de gips. Dup ce conul de gips s-a ntrit n tub se pune ap i se introduce cu baza ntr-un vas cu mercur. Dup un timp se constat ascensiunea mercurului n tubul de sticl, fenomen datorat coeziunii dintre moleculele de ap, dintre moleculele de ap i mercur i evaporrii continue a apei la suprafaa gipsului. Fora de capilaritate. Vasele lemnoase au un diametru foarte mic, de 30-300, fiind vase capilare. Aceast caracteristic permite ridicarea apei sub aciunea forei de o atmosfer pn la nlimi mult mai mari dect 10,33 m, datorit forei de coeziune a moleculelor de ap. n plant coloana de ap pornete din zona perilor absorbani ai rdcinii i se termin n frunz. Ea poate atinge nlimi de 120 m la Sequoia gigantea, 160 m la eucaliptul australian i 200 m la liane. Imbibiia. Pereii laterali ai vaselor lemnoase impregnai cu lignin se mbib puternic cu ap, permind meninerea nentrerupt a coloanei de ap din vasele de lemn. 3. 4. TRANSPIRATIA I GUTATIA Eliminarea apei de ctre plante se face prin procesele de transpiraie i gutaie. 3.4.1. Definiia i importana transpiraiei Transpiraia este procesul prin care plantele elimin apa sub form de vapori. Dei depinde de umiditatea atmosferic, respectiv de deficitul de vapori al atmosferei, transpiraia este un proces fiziologic complex, fiind legat de structura i funciile plantei. Transpiraia are un rol pozitiv n viaa plantei. Ea contribuie la manifestarea forei de aspiraie a frunzelor, care determin absorbia i circulaia apei i a srurilor minerale, regleaz temperatura corpului plantei, ferindu-l de supranclzire i previne creterea peste msur a turgescenei. n acelai timp transpiraia are i un rol negativ. n cazul unei secete prelungite provoac ofilirea i chiar moartea plantei; deregleaz deschiderea stomatelor, cu efecte negative asupra absorbiei CO2 n fotosintez. Timiriazev a numit transpiraia "un ru necesar". 3.4.2. Tipurile de transpiraie Transpiraia se efectueaz prin toate organele aeriene, n special prin frunze, ramuri sau tulpini. Frunzele transpir cel mai intens datorit unor particulariti morfo-funcionale. Ele au o suprafa foarte mare i un numr mare de stomate; mezofilul are o grosime redus i numeroase spaii intercelulare, care permit o permanent eliminare a apei sub form de vapori pe baza curentului permanent, ascendent de sev brut. La diferite organe, transpiraia poate fi de trei tipuri, i anume transpiraie lenticelar, cuticular i stomatal. Transpiraia lenticelar are loc prin ramurile i tulpinile suberificate ale arborilor i arbutilor i se efectueaz prin lenticele. Nu poate fi controlat de ctre plant, ci depinde numai de condiiile atmosferice. n condiii normale, transpiraia lenticilar atinge numai 10% din transpiraia total, dar n zilele de ari aceasta mpiedic creterea excesiv a temperaturii ramurilor. Cantitatea de ap transpirat prin ramuri i tulpini este deosebit de redus. Astfel, la Liriodendron tulipifera, n timpul iernii ramura transpir 2 g ap la 100 cm2 de ramur ntr-o sptmn, n timp ce n august frunzele transpir 80 g ap la 100 cm2 n acelai interval de timp. Transpiraia cuticular se efectueaz prin cuticula frunzelor. Are n general valori sczute, deoarece cuticula de pe peretele extern al epidermei este impregnat cu substane grase, hidrofobe, reprezentate de o reea de cutin mbibat ntr-un matrix de ceruri, care reduce evaporarea apei I protejeaz frunzele mpotriva ofilirii. Transpiraia cuticular este mai ridicat la organele tinere. Astfel, la frunzele tinere poate atinge 35-50% din transpiraia total, pe cnd la frunzele btrne atinge doar 3-5%. De asemenea, la plantele de umbr sau din zone umede transpiraia cuticular este mai intens dect la cele de soare sau de deert.

n general, transpiraia cuticular nu depete 10% din transpiraia total a plantei. O frunz de alun pierde prin cuticul 1 mg ap, n timp ce prin stomate pierde 81 mg. La mesteacn transpiraia cuticular atinge 3% din cea stomatal. Transpiraia stomatal este cea mai rspndit i se realizeaz prin stomate, n special n frunze. Stomatele sunt formaiuni epidermice alctuite din dou celule reniforme puse fa n fa ntre care exist o deschidere numit ostiol. Pereii interni, care delimiteaz ostiola sunt ngroai, iar cei externi, dinspre celulele epidermice sunt subiri. Spre deosebire de celulele epidermice care nu conin cloroplaste, celulele stomatice conin cloroplaste. Sub celulele stomatice se gsete o camer substomatic, care este n legtur cu spaiile intercelulare din mezofilul frunzei. La plantele din familia graminee, celulele stomatice au form de haltere. Transpiraia stomatal se desfoar n dou faze. n prima faz are loc procesul fiziologic de eliminare a apei din celulele mezofilului n spaiile intercelulare. n a doua faz au loc procesele fizice de difuziune a vaporilor de ap prin ostiole i evaporare la suprafaa frunzei, ca urmare a deficitului hidric din aerul atmosferic. Difuziunea vaporilor de ap prin ostiole este ns controlat de plant prin micrile de nchidere i deschidere a stomatelor. 3.4.3. Metode de studiere a transpiraiei stomatale Transpiraia stomatal poate fi studiat prin metode calitative i metode cantitative. Metodele calitative pun n eviden transpiraia pe cale direct i pe cale indirect. Metoda hrtiei simpatice (Stahl) apreciaz transpiraia pe cale direct, pe baza schimbrii culorii hrtiei simpatice aplicat pe frunze. Hrtia simpatic este o hrtie de filtru mbibat cu sruri de cobalt, care n stare uscat are culoare albastr, iar n stare umed are culoare roz. Metoda infiltraiei (Molisch) apreciaz transpiraia pe cale indirect, dup gradul de deschidere a stomatelor. Gradul de deschidere este determinat pe baza capacitii unor lichide cu tensiune superficial diferit, de exemplu alcoolul, benzolul i xilolul de a se infiltra prin ostiole. Metoda fixrii rapide (Lloyd) apreciaz transpiraia pe cale indirect, pe baza determinrii numrului de stomate i a gradului lor de deschidere la microscop, n preparate efectuate pe epiderm. Metoda cu colodiu este o variant a celei de mai sus prin care se determin numrul de stomate i gradul lor de deschidere la microscop, pe mulaje de colodiu ale epidermei. Metodele cantitative stabilesc indicatorii procesului de transpiraie, care sunt: intensitatea transpiraiei i coeficientul de transpiraie. Intensitatea transpiraiei reprezint cantitatea de ap eliminat n unitatea de timp de ctre unitatea de suprafa sau greutate a frunzei. Se exprim n mg/or*dm 2, g/or*m2 sau mg/or*g. Intesitatea transpiraiei poate fi determinat prin metode gravimetrice. Metoda curentului de aer determin cantitatea de vapori de ap eliminai de plant ntr-un curent de aer prin fixarea i cntrirea lor pe clorur de calciu. Metoda cntririi const n determinarea direct a cantitii de vapori de ap eliminat n transpiraie prin cntrire. Intesitatea transpiraiei variaz n raport cu specia, vrsta plantei i condiiile de mediu. Valorile medii sunt cuprinse ntre 10 - 250 g/or*m 2 n timpul zilei i 1-20 g/or*m 2 n timpul nopii. La diferite specii de arbori, intensitatea transpiraiei prezint urmtoarele valori, exprimate n g/or*m2: frasin -54, paltin de cmp -25, stejar i jugastru -24, tei -14, alun -8. Plantele cu frunze cztoare au intensitatea transpiraiei mai ridicat dect plantele sempervirescente. Coeficientul de transpiraie reprezint cantitatea de ap eliminat prin transpiraie pentru acumularea unui gram de substan uscat. Acest indicator msoar eficiena procesului de transpiraie. Valoarea sa la diferite specii lemnoase este de 170 la fag i duglas, 300 la pin, 314 la mesteacn i 344 la stejar. Valoarea coeficientului de transpiraie (Kt) la cteva specii cultivate este urmtoarea: Dughie Mei Sorg 293 310 322 Cartof Castravete Trifoi 610 713 797 21

Porumb Gru Varz

368 450 539

Dovleac In Pir

834 905 1086

ap\ consumat (ml) \ K = subst. uscat sintetizat (g) \ \ t

Din acest punct de vedere, plantele se clasific n trei categorii: - plante cu regim hidric economic (Kt < 550); - plante cu regim hidric moderat (Kt = 500-800); - plante risipitoare de ap (Kt > 800). 3.4.4. Mecanismul deschiderii i nchiderii stomatelor Celulele stomatice funcioneaz ca o valv hidraulic. Celulele stomatice de tip reniform au un perete ventral spre ostiol, ngroat i un perete dorsal spre celulele epidermice, subire. Celulele stomatice de tip graminaceu au form de haltere, cu pereii interni ngroai i ostiola alungit. Datorit inegalei ngrori a pereilor celulari, cnd celulele stomatice absorb apa i devin turgescente stomata se deschide, iar cnd acestea pierd apa i devin flasce, stomata se nchide. Fora mecanic pentru deschiderea stomatelor este absorbia osmotic a apei i creterea presiunii hidrostatice n celulele stomatice. nchiderea stomatelor are loc prin pierderea apei i scderea presiunii hidrostatice. Controlul deschiderii stomatelor este efectuat de metabolismul celulelor stomatice care determin modificri ale presiunii osmotice a acestora. Cercetri mai recente, au relevat rolul ionilor minerali i organici n deschiderea stomatelor Un rol deosebit l are K+, element abosrbit n celulele stomatice prin schimb ionic cu celulele anexe. Nivelul K+ este foarte ridicat n celulele stomatice deschise i foarte sczut n celulele stomatice nchise. Deci deschiderea stomatelor este controlat de acumularea K+ n celulele stomatice. Absorbia K+ are loc prin canalele de K+ din membranele plasmatice, ca rspuns la diferena de potenial electric (negativ n interior i pozitiv n exterior) creeat de eliberarea de protoni prin activitatea pompei H+ ATP az. Meninerea neutralitii electrice pe cele dou fee ale membranei plasmatice este realizat prin eliminarea de H+ sau prin absorbia de anioni minerali sau organici (Cl- i malat). S-a artat c n stomatele deschise coninutul ionului malat este de 6 ori mai ridicat dect n cele nchise. Corelat cu creterea concentraiei malatului, scade coninutul de amidon n celulele stomatice. Creterea concentraiei de ioni minerali i organici determin mrirea potenialului osmotic, absorbia apei i turgescena celulelor stomatice. Se presupune c nchiderea stomatelor are loc prin absorbia Ca 2+ n citosol ceea ce provoac o deschidere a canalelor pentru anionii Cl- i malat. Pierderea de anioni provoac deschiderea canalelor de K+ i difuzia acestuia n celulele anexe i epidermice. Sursa de ATP care activeaz pompa de protoni H+ ATP-az poate fi fotosinteza celulelor stomatice sau respiraia celular. Dei celulele stomatice conin cloroplaste, acestea sunt mici, puin abundente i cu mai puine tilacoide dect celulele mezofilului; ele i-au pierdut echipamentul enzimatic pentru fixarea carbonului n faza de ntuneric a fotosintezei. Ele sunt capabile ns de a produce ATP pin fotofosforilare n faza de lumin a fotosintezei. Deschiderea stomatelor la ntuneric este suportat de respiraie, sursa alternativ de energie. Celulele stomatice au un numr mare de mitocondrii i un nivel ridicat al respiraiei celulare, fiind capabile s produc suficient ATP. Deschiderea stomatelor poate fi controlat de aciunea unor factori externi, cum sunt concentraia CO2, lumina, apa i temperatura. S-a artat c o concentraie sczut de CO2 stimuleaz deschiderea, iar o concentraie ridicat favorizeaz nchiderea stomatelor; deoarece cuticula epidermei este impermeabil pentru CO2 atmosferic, reglarea deschiderii stomatelor este efectuat de concentraia CO2 din camera substomatic. Lumina prezint un efect indirect i un efect direct. Efectul indirect stimuleaz deschiderea prin consumul CO2 n fotosintez, iar nchiderea prin acumularea CO2 din respiraie, n special la ntuneric. Efectul direct este manifestat n special de lumina albastr, care favorizeaz

deschiderea stomatelor; coninutul ridicat de lumina albastr la intensiti luminoase sczute favorizeaz deschiderea nainte de rsritul i dup apusul soarelui. Rspunsul la lumina albastr favorizeaz deschiderea stomatelor pentru pregtirea fotosintezei active. Apa. Deoarece gradul de deschidere a stomatelor depinde de coninutul de ap al celulelor stomatice, starea de ap a plantei afecteaz deschiderea i nchiderea stomatelor. La o umiditate atmosferic redus, prin pierderea apei prin evaporare, celulele stomatice devin flasce, iar stomata se nchide - nchidere hidropasiv. Alteori, n condiii de stres hidric planta iniiaz un mecanism specific de nchidere a stomatelor, numit nchidere hidroactiv. Acest mecanism este controlat hormonal, de acidul abscisic. ABA sintetizat n rdcini n condiii de deficit hidric este eliberat n apoplast i transportat n curentul de transpiraie la celulele stomatice unde niiaz nchiderea stomatelor. Ulterior, prelungirea nchiderii stomatelor este favorizat de o sintez crescut de ABA, care este considerat un antitranspirant. Tempratura. Influeneaz deschiderea stomatelor n mod indirect, prin intermediul activitii metabolice, respectiv a balanei respiraieie/fotosintez i a coninutului de CO2 intracelular. Temperaturile nalte stimuleaz respiraia i reduc fotosinteza, iar concentraiile mai ridicate de CO2 induc nchiderea stomatelor. n zilele clduroase de var, valorile ridicate de temperatur produc nchiderea de amiaz datorat stresului hidric indus de temperatura ridicat i transpiraia excesiv. 3.4.5. Influena factorilor interni asupra transpiraiei Numrul de stomate pe suprafaa frunzelor este variabil, fiind n general de 10-600/mm2. La speciile lemnoase foioase este mai ridicat i anume la frasin -7-100/mm 2, la tei i mesteacn -100-150/mm2, la stejar - 350-500/mm 2, n timp ce la conifere este mai sczut i anume la molid -20-40/mm2. Numrul de stomate este diferit pe cele dou epiderme ale frunzei. n funcie de acest caracter, frunzele pot fi de trei categorii: - hipostomatice, la care stomatele sunt dispuse numai pe epiderma inferioar, de exemplu la majoritatea arborilor de foioase i a pomilor fructiferi; - epistomatice, la care stomatele sunt dispuse numai pe epiderma superioar, de exemplu la nufr; - amfistomatice, la care stomatele sunt dispuse pe ambele epiderme, de exemplu la majoritatea plantelor cultivate ierboase. Intensitatea transpiraiei se afl n relaie direct cu numrul stomatelor pn la o anumit densitate a acestora, de 700/mm 2, cnd distana dintre stomate depete de 10 ori diametrul unei stomate. Peste aceast densitate, intensitatea transpiraiei scade datorit fenomenului numit "efect de margine". ntre stomate apar zone de interferen laterale care mpiedic difuziunea vaporilor de ap n atmosfer. Densitatea stomatelor la cteva plante de cultur (nr./mm 2) (dup Gardner i colab., 1994) Specia Densitatea stomatelor Epiderma Epiderma superioar inferioar 33 14 52 68 25 23 40 288 141 226 51 161 85 156 23

Gru Porumb Ovz Fasole Varz Cartof Floarea soarelui

Tomate Ricin Lucern Mr

12 64 169 0

130 176 138 294

Poziia stomatelor. La majoritatea speciilor stomatele se gsesc la acelai nivel cu celulele epidermice. La unele specii xerofite stomatele se gsesc sub nivelul acestora, comunicnd cu exteriorul prin caviti numite cripte, de exemplu la leandru sau Ficus elastica. La higrofite din contr, stomatele se gsesc pe vrful unor ridicturi. Suprafaa foliar. Plantele i coreleaz suprafaa foliar cu gradul de aprovizionare cu ap din mediu. La higrofite suprafaa foliar este mare, iar transpiraia este intens; la xerofite suprafaa foliar este redus pn la epi, iar transpiraia este redus. Poziia frunzelor. n zonele umede frunzele au poziie orizontal, pentru a capta ct mai mult lumin i a intensifica transpiraia. n zonele aride frunzele au o poziie vertical, pentru a capta ct mai puin lumin i a reduce transpiraia. Concentraia sucului vacuolar. La plantele de srtur i deert, concentraia sucului vacuolar este mrit prin acumulare de sruri minerale, glucide solubile sau acizi organici, ceea ce reduce intensitatea transpiraiei. La plantele din zone umede concentraia sucului vacuolar este sczut, ceea ce mrete intensitatea transpiraiei. Prezena plastidelor i antocianilor mrete intensitatea transpiraiei, deoarece pigmenii verzi i galbeni din cloroplaste, ct i antocianii roii, albatrii i violacei absorb radiaiile spectrului de lumin, mrind temperatura frunzei. Sinteza unor uleiuri volatile sau parfumuri. Prin evaporarea n atmosfer, uleiurile volatile absorb o parte din radiaiile calorice, micoreaz intensitatea transpiraiei i evit supranclzirea plantelor, de exemplu la labiate i rozacee. Dinamica diurn a transpiraiei . n timpul zilei, transpiraia este de 10-12 mai intens dect noaptea, fiind favorizat de temperatura ridicat, lumina intens i umiditatea relativ a aerului. La plantele bine aprovizionate cu ap intensitatea transpiraiei crete de diminea, atingnd maximum la ora 13-14, dup care scade spre sear. n condiii de secet intensitatea transpiraiei prezint dou maxime i anume: dimineaa, la orele 9-10 i dup amiaza la orele 14 i un minim la orele 12-13, datorat nchiderii hidroactive a stomatelor. Dinamica sezonier este evident la plantele perene lemnoase, arbori i arbuti, transpiraia fiind mult mai redus iarna dect n timpul sezonului de vegetaie. Plantele cu frunze cztoare transpir iarna prin ramuri, muguri etc. Plantele sempervirescente transpir iarna i prin frunze, dar intensitatea transpiraiei este mult mai redus dect n timpul verii. Astfel la pin, frunzele transpir de 300 - 400 ori mai puin iarna dect vara. Transpiraia diferitelor specii lemnoase n timpul iernii este minim la lari, scoru, paltin de cmp i mlin, medie la stejar, tei i carpen i maxim la salba rioas. n timpul sezonului de vegataie procesul de transpiraie este maxim primvara, iar n a doua perioad a acestuia, n timpul verii i toamnei intensitatea transpiraiei scade. 3.4.5. Influena factorilor externi asupra transpiraiei Temperatura aerului. Procesul de transpiraie ncepe la 0C. La arborii i arbutii semperviresceni din zona temperat, transpiraia nu nceteaz nici la temperaturi sub 0C, dar este mult ncetinit. Transpiraia se intensific prin creterea temperaturii pn la 40 C. La stejar, prin ridicarea temperaturii de la 20C la 40 C transpiraia crete de 5 ori. Temperatura optim pentru plante este de 25C - 30C, cnd deficitul hidric creat nu este duntor plantei. ntre 3040C transpiraia este reglat prin nchiderea stomatelor pe cale fiziologic, iar ntre 40- 48C, transpiraia nceteaz datorit coagulrii protoplasmei. Frunzele moarte pierd apa prin evaporare. Temperatura acioneaz asupra transpiraiei prin creterea deficitului de vapori din atmosfer, a temperaturii frunzelor i a permeabilitii protoplasmei pentru ap.

Umiditatea relativ a aerului. Viteza de evaporare a apei din stomate la un moment dat este dat de formula:
V= 4 r K (Ff) P

n care:

V = viteza de evaporare, r = raza ostiolei K = coeficientul de difuziune, F = tensiunea vaporilor saturai, f = tensiunea vaporilor din aer la un moment dat, P = presiunea atmosferei; F - f = deficitul de saturaie n vapori de ap a aerului.

Intensitatea transpiraiei se afl n relaie direct cu deficitul hidric al aerului atmosferic. Prin scderea gradului de saturaie n vapori al aerului, crete deficitul hidric i respectiv intensitatea transpiraiei. n aerul saturat n vapori de ap, transpiraia este foarte redus sau chiar lipsete. Transpiraia decurge intens, fr efecte duntoare la umiditatea aerului de 60-80%, cnd deficitul nu depete 40-50%. Lumina influeneaz transpiraia n mod direct i indirect. Efectul direct se datorete energiei calorice, care intensific transpiraia. La lumin direct transpiraia crete de cteva ori, iar la lumin difuz numai cu 30-40%. Efectul indirect se datorete aciunii luminii asupra nchiderii i deschiderii stomatelor i asupra permeabilitii protoplasmei. Dintre diferite radiaii ale spectrului solar, radiaiile albastre, indigo i violet sporesc intensitatea transpiraiei de 1,5 ori fa de radiaiile roii i galbene. Presiunea atmosferic. Transpiraia se intensific prin scderea presiunii atmosferice. La plantele alpine, transpiraia este mai intens dect la plantele de es datorit valorilor sczute ale presiunii atmosferice. Curenii de aer. La intensitate moderat, vntul intensific transpiraia cu cca. 100%; Prin deplasarea vaporilor de ap, vntul mrete deficitul hidric n zona frunzelor. La intensitate mare a vntului , stomatele se nchid, iar transpiraia scade. Vntul rece mrete umiditatea n spaiile intercelulare i reduce transpiraia; vntul cald deshidrateaz puternic frunzele provocnd uscarea lor sau a plantei. Vntul influeneaz mai mult transpiraia stomatic dect pe cea cuticular. La mesteacn, mrirea vitezei vntului sporete transpiraia stomatelor cu 140%, iar pe cea cuticular numai cu 25%. 3.4.6. Gutaia Gutaia este procesul de eliminare a apei sub form de picturi. Ea se datorete dezechilibrului ce apare ntre absorbia intens a apei prin rdcini i transpiraia sczut. Absorbia radicular a apei este intensificat de temperatura ridicat a solului, iar transpiraia sczut este datorat umiditii atmosferice ridicate. Gutaia se efectueaz numai prin frunze, prin stomatele acvifere, numite hidatode i este rezultatul manifestrii presiunii radiculare. Gutaia poate fi observat la plantele floricole: Fuchsia, Primula, Tropaeolum, la plantele de apartament: Colocasia i Monstera, ct i la arbori : salcie i plop. Rolul gutaiei este important pentru plantele din zone umede, mai ales n perioadele de activitate fiziologic intens. Prin gutaie, plantele elimin excesul de ap din spaiile intercelulare ale frunzei i micoreaz presiunea hidrostatic din vasele de lemn, favoriznd absorbia apei i a srurilor minerale i ascensiunea sevei brute.

25

CAPITOLUL 4
NUTRIIA MINERAL A PLANTELOR Substanele organice complexe ce alctuiesc corpul plantelor i asigur buna desfurare a proceselor fiziologice din organismul vegetal sunt sintetizate pe baza substanelor minerale pe care plantele le absorb din mediul nconjurtor. Procesul de absorbie a substanelor minerale i de transport al acestora n corpul plantei n scopul sintezei substanelor organice proprii se numete nutriie mineral. Elementele minerale absolut indispensabile vieii plantelor sunt numite elemente eseniale. Dup Epstein (1972) un element mineral este considerat esenial dac: prin absena sa planta este incapabil s desfoare un ciclu de via normal, respectiv sa produc semine viabile; este component al unor constituieni sau metabolii eseniali (de exemplu, Mg este component al clorofilei, iar Cl este necesar n fotoliza apei). Pe baza acestor criterii s-a stabilit c la plantele superioare exist 17 elemente eseniale (tab. 1). n afara celor 17 elemente eseniale, unele plante prezint cerine nutritive speciale: Na, Si, Se i Co. Deoarece nu sunt cerute de toate plantele, aceste elemente minerale au fost denumite beneficiale. Rolul fiziologic al elementelor minerale poate fi: - rol plastic, participnd n compoziia unor substane organo minerale (de exemplu, P i Mg n fitin, P n fosfolipide, Ca n protopectin, N n proteine); - rol metabolic: intr n compoziia unor substane active, cum sunt enzimele i vitaminele (de exemplu Mo n nitratreductaz, Fe i S n nitritreductaz, S n vitamina B 1) sau a unor pigmeni (Mg i N n clorofil); particip la procesele de oxidoreducere prin modificri de valen (de exemplu Fe i Cu) sau n fotoliza apei (Cl, Mn), stimuleaz activitatea unor enzime (K, Ca i Zn); - rol n reglarea echilibrului osmotic, modificarea permeabilitii celulare i a proprietilor fizico-chimice ale coloizilor plasmatici (de exemplu K, Na, Ca, Mg), nchiderea i deschiderea stomatelor K i Cl.

4.1. METODE DE STUDIERE A NUTRIIEI MINERALE Pentru studiul nutriiei minerale a plantei se folosesc metode analitice, sintetice, agronomice i metoda trasorilor radioactivi. Tabelul 1 Elementele minerale eseniale din plantele superioare i concentraia lor necesar pentru creterea normal (dup Hopkins, 1995)
Elementul Simbolul chimic Form disponibil Concentraia (mmol/kg substan uscat) 60.000 40.000 30.000 1.000 250 125 80 60 30 3.0 2.0 2.0 1.0 0.3 0.1 0.05 0.001

Hidrogen Carbon Oxigen Azot Potasiu Calciu Magneziu Fosfor Sulf Clor Bor Fier Mangan Zinc Cupru Nichel Molibden

H C O N K Ca Mg P S Cl Br Fe Mn Zn Cu Ni Mo

Macroelemente H2O CO2 O2, CO2 NO -3, NH +4 K+ Ca2+ Mg 2+ HPO -4, HPO 2-4 SO 2-4 Microelemente ClBO 3-3 Fe2+, Fe3+ Mn2+ Zn2+ Cu2+ Ni2+ MoO 2-4

4.1.1. Metodele analitice permit stabilirea compoziiei chimice i proporia fiecrui element mineral n plant, fr a preciza rolul fiziologic al diferitelor elemente (tabelul 1). Analiza chimic a cenuii plantelor const n determinarea cantitativ i calitativ a elementelor chimice din cenu. Cenua se obine prin calcinarea materialului vegetal la 700C. Coninutul de cenu al plantelor este n medie de 5-10 % din substana uscat i variaz n funcie de faza de vegetaie, organ sau specie. Diferite cercetri demonstreaz c n timpul nfloririi, coninutul de cenu este maxim. Coninutul de cenu este maxim n frunze, i anume de 10-25%, cu excepia frunzelor de conifere la care este de 2-3 % i minim n esutul lemnos, de 0,28-1,38 %. Coninutul de cenu n alte organe este de 1-6% n semine, 3-7 % n tulpini subterane i rdcini tuberizate, 5-7 % n scoara tulpinilor lemnoase, 6-13% n rdcini i 8-13% n tulpinile ierboase. Compoziia cenuii din diferite organe variaz n funcie de specie. Analiza chimic a cenuii se face prin metode fotometrice, utilizate la determinarea K, Na i Ca, metode spectrocolorimetrice, utilizate la determinarea P i metode spectrofotometrice, n special spectrofotometrul cu absorbie atomic, utilizat la determinarea microelementelor. Prin analiza chimic a cenuii au fost gsite n corpul plantelor peste 60 de elemente chimice din tabelul lui Mendeleev. Dup proporia n care particip n alctuirea substanelor proprii organismului vegetal, aceste elemente au fost mprite n trei categorii, i anume macroelemente, microelemente i ultramicroelemente. Dintre cele 17 elemente eseniale, macroelementele se gsesc n concentraii de 30 60.000 mMol /kg substan uscat; acestea sunt H, C, O, N, K, Ca, Mg, P, S, iar microelementele n concentraii de 0,001 3,0 mMol/kg substan uscat; acestea sunt Cl, Br, Fe, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo. Ultramicroelemente sunt detectate n proporii infime i cuprind metale rare (Au, Ag), metale radioactive (U, Ra) i alte metale ca Pb, Hg, As. 27

Diagnoza foliar const n analiza chimic a frunzelor unor plante cultivate n diferite condiii, n scopul stabilirii necesarului n anumite elemente minerale, prin raportarea la plante cultivate n regim optim de nutriie. Deficienele nutriionale incipiente sau excesul de elemente minerale sunt imposibil de diagnosticat prin simptome vizibile, dei ele pot afecta serios cantitatea i calitatea recoltei. Ele pot fi diagnosticate rapid i economic prin analize chimice n frunze. Diagnoza foliar se face prin testarea esuturilor conductoare i prin analiza frunzei. Aceste determinri sunt considerate indici ai strii curente de nutriie a plantelor. Testarea esuturilor conductoare const n determinarea substanelor minerale neelaborate din seva brut n timpul procesului de transport spre frunz. Testele sunt efectuate pe extracte din peiol, ramuri sau tulpini. Analiza chimic a peiolului este indicat la mazre, morcov, castravei, tomate, ridiche, elin, sfecl de zahr, sfecl de mas, pepene galben, vi de vie. Starea de nutriie mineral a plantei la pornirea n vegetaie la via de vie poate fi testat prin analiza sevei brute, respectiv a lichidului recoltat din plns n urma tierii coardelor (tabelul 2). Tabelul 2 Testarea aprovizionrii cu elemente minerale la via de vie prin analiza chimic a sevei brute (dup Kozma i Mohacsy) Dup cantitatea de lichid recoltat n decurs de 24 de ore de la coard (4-5 muguri) 50ml Foarte bun 25 - 50 ml Bun 10-25 ml Mijlocie <10 ml Slab Dup cantitatea de substan uscat a lichidului rezultat din plnsul viei 3 g/l Foarte bun 2 - 3 g/l Bun 1 - 2 g/l Mijlocie < 1 g/l Slab Dup conintul n N total al lichidului rezultat din plnsul viei 100 mg/l Foarte bun 50 - 100 mg/l Bun 20 - 50 mg/l Mijlocie < 20 mg/l Slab Dup coninutul de P total al lichidului rezultat din plnsul viei 40 mg/l Foarte bun 20 - 40 mg/l Bun 10 - 20 mg/l Mijlocie <10 mg/l Slab Dup coninutul de K total al lichidului rezultat din plnsul viei 600 mg/l Foarte bun 400 - 600 mg/l Bun 200 - 400 mg/l Mijlocie < 200 mg/l Slab Analiza floral. Sanz i Montanes (1995) arat c analiza strii de nutriie a pomilor de piersic prin diagnoz foliar efectuat la 60 i 120 de zile de la nflorit este prea trzie pentru a corecta deficienele nutritive. Din aceast cauz ei propun diagnosticarea strii nutriionale a pomilor prin analiz floral. Valorile determinrilor sunt exprimate n procente din substana uscat i au ca referin urmtoarele date:

N - 2,91 - (+) 0,27 P - 0,39 - (+) 0,05 K - 1,70 - (+) 0,026

Ca - 0,87 - (+) 0,16 Mg - 0,23 - (+) 0,02

Analiza rdcinii este folosit pentru a diagnostica acumularea metalelor grele, toxice n plant. Rdcinile arborilor pot acumula cantiti mari (>1000 ppm) de Cu, Zn, Fe i Mn. Analiza formelor organice solubile de azot. La arborii maturi exist importante rezerve de azot n trunchi, care sunt reutilizate prin translocaie n tinerele organe de cretere. Rezerva de azot a plantei poate fi apreciat dup coninutul de aminoacizi i amide din sev, n momentul nfloririi. 4.1.2. Metoda sintetic, numit i fiziologic permite stabilirea rolului fiziologic al diferitelor elemente prin cultivarea plantelor n soluii nutritive. Soluiile nutritive pot fi complete i incomplete. Soluiile nutritive complete trebuie s conin toate elemente necesare creterii i dezvoltrii plantelor, i anume 6-8 macroelemente i 4-6 microelemente: N, P, K, Mg, Ca, S, Cl, Fe Cu, Zn, Mn, Mo, B i s fie echilibrate fiziologic. Concentraia total a soluiei trebuie s fie de 0,2%. Concentraia soluiei trebuie s fie mai mic n primele faze de vegetaie i s creasc la nflorire. Elementele minerale trebuie s existe sub forme predominante de ioni cu valen mic; ionii monovaleni trebuie s fie n raport de 10/1 fa de ionii bivaleni. Trebuie respectat pH-ul optim fiecrei specii i faze de vegetaie. Soluiile nutritive folosesc ap distilat i trebuiesc aerate; n lipsa oxigenului se creaz condiii de anoxie, care inhib respiraia rdcinii i reduc absorbia elementelor minerale. Vasul n care sunt crescute plantele trebuie confecionat din material opac pentru a mpiedica ptrunderea luminii i creterea algelor. Soluia nutritiv trebuie schimbat periodic (la circa 3 zile) pentru a contracara absorbia selectiv a ionilor i modificrile de pH. O variant a acestei metode este creterea pe medii inerte, nenutritive ca nisipul de cuar splat cu acid, vermicultitul sau perlitul i udarea lor prin aplicarea zilnic de soluie nutritiv proaspt. Procedeul favorizeaz aprovizionarea cu substane nutritive i aerarea rdcinii. Soluiile nutritive complete se prepar dup diferite reete folosite n cultura hidroponic (tabelul 3).
Tabelul 3 Compoziia soluiei nutritive Sachs (dup Hopkins, 1995) Sarea Formula Concentraia (mmol) Azotat de potasiu KNO3 9.9 Fosfat de calciu Ca3 (PO4)2 1.6 Sulfat de magneziu MgSO4, 7 H2O 2.0 Sulfat de calciu CaSO4 3.7 Clorura de sodiu NaCl 4.3 Sulfat feros FeSO4 urme

Soluiile nutritive incomplete conin toate elementele minerale din soluiile complete cu excepia unui anumit element. Se urmrete comportarea plantelor prin comparaie. Se constat c n soluiile complete plantele cresc i se dezvolt normal, pe cnd n soluiile incomplete plantele manifest diferite simptome: ncetinirea creterii, cloroza, ptarea frunzelor etc, care demonstreaz rolul fiziologic al elementului care lipsete n soluie. Cultura plantelor n soluii nutritive, numit sistem hidroponic a permis studiul unor aspecte ale nutriiei minerale la diferite specii, mai ales horticole. De asemenea, sistemul hidroponic constituie o tehnologie cu bune rezultate la plantele legumicole de ser, de exemplu tomate, castravei, varz, sfecl roie, ceap, morcov, mazre, fasole. 4.1.3. Metoda agronomic const n experiene n casa de vegetaie sau n cmp, care se bazeaz pe utilizarea diferitelor tipuri de ngrminte minerale. Metoda agronomic de cultivare a plantelor n vase de vegetaie a permis studiul influenei diferitelor tipuri i doze de fertilizare cu N, P, K asupra unor procese fiziologice. 29

Cultivarea plantelor n cmp se face pe parcele distribuite n blocuri randomizate. Variantele experimentale sunt organizate pe mai multe repetiii, ceea ce permite calculul statistic care demonstreaz valabilitatea rezultatelor obinute. 4.1.4. Metoda trasorilor (izotopilor) radioactivi permite studiul absorbiei, circulaiei i utilizrii unor izotopi radioactivi, innd cont c acetia sunt metabolizai n plant n mod identic cu cei stabili, dar pot fi analizai prin metode radiometrice. Aceste metode pot fi cantitative, dozimetrice i calitative, de exemplu metoda autoradiografiei, bazat pe proprietatea izotopilor radioactivi de a impresiona placa fotografic.
Utilizarea metodei trasorilor radioactivi a permis studiul unor particulariti ale nutriiei minerale cu P la porumb (Haraga, 1997), cu macro i microelemente la plante de tomate i castravei cultivate n ser (rdea i colab., 1986), la via de vie cultivat n cmp (rdea i colab., 1988) i la diferite specii pomicole: mr (Rominger, 1974), pr i gutui (Toma, 1976) i piersic (Drobot, 1977).

De asemenea, utilizarea P32 a permis elucidarea mecanismului de funcionare a micorizelor n procesul de absorbie a elementelor minerale la arbori (Harley, 1970) i stabilirea vitezei de circulaie a sevei brute la diferite specii. Pentru studiul absorbiei, circulaiei i utilizrii N este folosit ca trasor izotopul stabil N15. Acest izotop poate fi administrat ca N15 O-3 sau N15H+4 i analizat prin metode speciale. Cercetrile efectuate la porumb au studiat modul de utilizare a fertilizrii cu N15 n diferite organe n timpul creterii i fructificrii (Toma i colab., 1988), iar la orez ncorporarea N15 n aminoacizi i amide (Kamazawa i colab., 1987). 4.2. ABSORBIA I CIRCULAIA ELEMENTELOR MINERALE N PLANTE 4.2.1. Rdcina ca organ de absorbie Elementele minerale sunt absorbite prin rdcin la nivelul perilor absorbani, sub form de ioni. La plantele acvatice i la plantule absorbia elementelor minerale se face pe toat suprafaa rdcinii. Elementele minerale sunt absorbite din sol la nivelul rizodermei prin difuziune simpl n nivelul pereilor celulari, difuziune facilitat i transport activ n protoplasm. La plantele lemnoase absorbia se face cu ajutorul micorizelor. Micorizele influeneaz absorbia elementelor minerale prin stimularea sistemului radicular ca ntreg, manifestnd un efect morfogenetic prin structura micorizei nsi. La porumb i soia micorizele intensific absorbia N, P, K, Ca, Mg i Zn, n special pe soluri deficiente n P. Micorizele au fost evideniate i la plantele legumicole, de exemplu la ceap i morcov. Cercetri cu C14 la ceap arat c ciuperca micorizant Gigaspora margarita utilizeaz ca substrat respirator glucidele sintetizate de planta gazd, cea mai intens utilizat fiind glucoza.

4.2.2. Sursa de elemente minerale n absorbia radicular Pentru plantele cultivate, dar i pentru cele spontane sursa de elemente minerale pentru rdcin este solul. Acesta este un mediu complex, alctuit dintr-o faz solid i o faz lichid. Faza solid este format din sruri minerale provenite din roca mam i substane organice n diferite grade de descompunere, iar faza lichid este soluia apoas a solului; soluia solului conine elemente minerale dizolvate n concentraii foarte mici (10-3M). Din punct de vedere fizic faza solid este constituit din particule sau micele coloidale n suspensie n faza apoas. Acestea prezint o mare suprafa de contact cu soluia solului, dar i sarcini electrice negative de suprafa, ce favorizeaz interaciunea coloizilor cu elementele minerale. Sarcinile electrice negative ale particulelor coloidale se datoresc fixrii de Al i Si (Flegmann i George, 1975 ) i humusului, reziduu organic provenit din lignin i glucide imcomplet degradate ncrcate negativ datorit radicalilor - COOH i - OH. Coloizii din sol sunt puternic hidratai deoarece moleculele dipol ale apei sunt atrase prin polul pozitiv de sarcinile negative ale suprafeei, formnd pelicule de hidratare. Aceasta asigur stabilitatea suspensiei coloidale, i mpiedic micelele coloidale de a forma agregate. Datorit sarcinilor de suprafa electronegative, coloizii atrag cationii din soluia solului, constituind adevrate rezervoare de cationi. Cationii sunt reinuI cu fore diferite, conform seriei liotropice: Al3+ >H+>Ca2+>Mg2+> K+ = NH4+ > Na+. Absorbia cationilor este reversibil, un cation cu afinitate mai mare - H+ poate dizlocui un cation cu afinitate mai mic - Ca 2+. De asemenea, un cation cu afinitate mai mic, n cantitate mare poate dislocui un cation cu afinitate mai mare, prin aciunea de mas, realizndu-se astfel schimbul de ioni. Schimbabilitatea este indicat de seria liotropic, fiind maxim la Na + i minim la Al3+. Pe msur ce cationii din soluia solului sunt absorbii de rdcini, ei sunt nlocuii de ionii schimbabili din rezervorul coloidal, iar acetea de ionii provenii din roca mam. Datorit sarcinilor de suprafa electronegative, coloizii din sol nu atrag anionii, acetea nu pot fi reinui de particulele coloidale i pot fi uor levigai. Fenomenul are importan pentru agricultur; astfel, dozele de fertilizare cu NO3 trebuie s fie de obicei duble pentru a asigura o bun absorbie de ctre celulele rdcinii (Hopkins, 1995). Elementele minerale n stare ionic, cationi i anioni, provin din disociaia srurilor minerale solubile I sunt accesibile plantelor. n afara srurilor solubile, faza solid a solului mai conine i sruri minerale insolubile, iniial inaccesibile, dar care devin accesibile prin solubilizare sub aciunea unor acizi minerali (H2CO3) sau organici (acid malic, lactic). Acidul carbonic provine din reacia: CO2 + H2O H2CO3 iar acizii organici provin din respiraia rdcinilor. Reaciile de solubilizare sunt de tipul: insolubil insolubil CaCO3 + H2CO3 Ca(HCO3)2 solubil MgCO3 + H2CO3 Mg(HCO3)2 solubil

Tot prin aciunea CO2 are loc trecerea ionilor feroi i manganoi bivaleni n bicarbonai solubili: FeO + 2 CO2 + H2O Fe(HCO3)2 MnO+ 2CO2 + H2O Mn(HCO3)2 Bicarbonaii sunt instabili i trec n hidroxizi, care n reacie cu acizii din soluia solului formeaz sruri solubile. 4 Fe (HCO3)2 + O2 + 2H2O 4 Fe(OH)3 + 8 CO2 31

Fe(OH)3 + 3 HCl FeCl3 + 3 H2O La plantele din familia leguminoase, rdcinile elimin n rizosfer acidul 2 - cetoglutaric, care are o mare capacitate de solubilizare a fosfailor i silicailor greu solubili, pe care i fixeaz n forme chelatice. Micorizele prezint o importan deosebit n solubilizarea srurilor insolubile din sol. Prin activitatea micorizelor, srurile insolubile de P din sol sunt solubilizate, devenind asimilabile pentru plante. De asemenea, rdcinile au capacitatea de a solubiliza compuii cu Fe prin eliminarea unor siderofori, cum sunt acizii mugenic i avenic la monocotiledonate i formarea unor compui chelatici la dicotiledonate. 4.2.3. Influena factorilor interni asupra absorbiei srurilor minerale din sol. Controlul absorbiei substanelor minerale se poate realiza pe mai multe ci: Cantitatea de energie disponibil. Diminuarea intensitii procesului de respiraie sau utilizarea energiei biochimice nmagazinat n moleculele de ATP n alte procese pot conduce la diminuarea absorbiei active a ionilor i, corelat cu aceasta, a absorbiei apei. Numrul de transportori proteici din membran. n condiiile unei concentraii sczute a soluiei solului n ntr-un anumit element crete numrul de transportori proteici din membrane. Creterea presiunii de turgescen poate regla negativ (feedback) absorbia ionilor i a apei. Acumularea ionilor n vacuole favorizeaz creterea presiunii de turgescen, diminuarea forei de suciune i ca urmare a absorbiei ionilor. Reglarea absorbiei selective a ionilor se face printr-un mecanism feedback, care se realizeaz ntre intensitatea transportului i absorbia selectiv a ionilor. Concentraia intern a ionilor din celul genereaz un semnal feedbakc, care modific fluxul de ioni. Consumul de energie. Adenozin trifosfataza (ATP-aza) este implicat n transferul energiei biochimice necesare pentru transportul ionilor n celule. n plante exist mai multe ATPaze. Dintre acestea ATP-aza din mitocondrii este implicat n transportul ionilor n acest organit. Alt ATP-az este asociat cu plasmaleza i mediaz transportul cationilor. A treia ATP-az, asociatul cu tonoplastul, este implicat n transportul anionilor. 4.2.3. Influena factorilor externi asupra absorbiei srurilor minerale din sol Absorbia srurilor minerale din sol este influenat de aciunea factorilor externi: Temperatura solului. Absorbia ncepe la temperatura de 1-10C, este optim la 20-25C pentru plantele mezofile i 25-32C pentru plantele termofile, de origine tropical i subtropical i nceteaz la 35-45C. Temperatura sczut inhib mai puternic absorbia anionilor dect a cationilor. Experienele cu izotopi radioactivi au artat c la temperaturi joase (6C) plantele absorb de 3 ori mai muli cationi dect anioni i de 2 ori mai muli anioni de P dect NO-3. Temperatura sczut inhib absorbia i transportul activ al ionilor n rdcini, reducnd intensitatea respiraiei, care constituie sursa de energie pentru aceste procese i favorizeaz absorbia pasiv, bazat pe fenomenele fizice de difuziune i adsorbie. Scderea intensitii absorbiei elementelor minerale sub influena temperaturii se datorete inactivrii gradate a sistemelor enzimatice.

Umiditatea solului. n condiii normale, umiditatea solului favorizeaz absorbia prin solubilizarea srurilor i mobilizarea ionilor. n lipsa apei, soluia solului se concentreaz excesiv, iar activitatea microorganismelor cu rol n solubilizarea elementelor minerale este inhibat. n exces de umiditate, absorbia este inhibat prin inhibarea respiraiei rdcinilor. Aeraia solului stimuleaz absorbia elementelor minerale prin intermediul respiraiei. La rdcinile de fag, intensitatea absorbiei K+ prin micorize depinde de cantitatea de O2 din sol. Scderea gradului de aeraie din sol inhib activitatea microbian i perturb procesele de nitrificare, micornd cantitatea de ioni de N accesibili plantelor. De asemenea, scderea concentraiei O2 n sol inhib asimilaia ionilor minerali, n special cei de azot la nivelul rdcinii. S-a constatat c aeraia redus perturb procesul de sintez a proteinelor din rdcini. Reacia solului (pH-ul) modific permeabilitatea protoplasmei i absorbia elementelor minerale, precum i activitatea microbian din sol. Absorbia optim a ionilor minerali are loc la un pH cuprins ntre 5 i 8. Anionii sunt absorbii mai intens la un pH slab acid, iar cationii la un pH slab bazic. Dintre plantele de cultur, speciile sensibile la pH-ul acid sunt grul, orzul, sfecla de zahr, inul, trifoiul i bumbacul. Ele pot fi cultivate pe soluri acide numai n urma aplicrii unor amendamente calcaroase. Speciile rezistente sunt ovzul, secara i cartoful. Dintre plantele legumicole, sunt sensibile la pH-ul acid ceapa i morcovul, iar rezistente sunt ardeii i tomatele. Pomii fructiferi sunt foarte sensibili la pH-ul alcalin. La mr, apar simptome de cloroz, iar la pr creterea este inhibat. Speciile fructifere rezistente la pH acid sunt citricele i agriul. Concentraia soluiei solului. Valoarea optim a concentraiei soluiei solului este de 0,5 1,5 , iar cea maxim este de 5. Peste aceast valoare caracterul soluiei solului devinde hipertonic i toxic, datorit acumulrii unor ioni, n special cationi. Caracterul hipertonic al soluiei solului determin ieirea apei din rdcini i reducerea absorbiei elementelor minerale. Creterea presiunii osmotice a soluiei solului de la 0,2 la 4 atm. reduce viteza de absorbie radicular cu 5 % pentru ionii NO-3 i NH+4 i cu 32 % pentru ionul PO3-4. Dintre plantele de cultur, grul, sfecla, bumbacul, tomatele i pepenii verzi suport bine concentraii ridicate de sruri din sol, iar ovzul, inul i hrica sunt foarte sensibile. Plantele adaptate la concentraii ridicate ale soluiei solului se numesc halofile. Adaptarea acestora se face prin mrirea concentraiei sucului vacuolar prin acumularea de sruri. Reglarea concentraiei soluiei solului se face att natural prin ploi, ct i artificial prin irigaii, splare i drenaj. Textura solului este dat de compoziia granulometric. n funcie de aceast nsuire solurile pot fi: grele (argiloase), mijlocii i uoare. Plantele de cultur prefer n general solurile uoare, de exemplu secara, lupinul, salata, gulia, ridichea, spanacul i tomatele sau soluri mijlocii, de exemplu grul, porumbul, soia, sfecla de zahr, inul i cnepa. Pe soluri grele se poate cultiva varza, bobul i reventul. Antagonismul ionic. Un rol important n absorbia ionilor l are interaciunea dintre acetia, adic relaiile existente ntre ionii din soluia solului. Orice ion, chiar indispensabil, n stare pur n soluia solului este toxic, dar prin amestec cu ali ioni, efectul toxic se anuleaz, fiind nlocuit cu un efect de stimulare reciproc a absorbiei elementelor minerale, numit sinergism. Reacii de sinergism au loc ntre ionii de potasiu i cei de fier, ntre ionii de aluminiu i cationii monovaleni, precum i ntre azot i fosfor. n acelai timp, prezena anumitor elemente este antagonist absorbiei altora. Astfel, Na micoreaz n general absorbia K, dei manifest un efect stimulator asupra produciei la sfecla de zahr. Reacii de antagonism se constat ntre ionii de cupru i zinc, potasiu i calciu, potasiu i magneziu, fier i mangan, ntre anioni i ionii de potasiu i calciu, ntre aluminiu i calciu, aluminiu i potasiu, fosfor i zinc.

33

4.2.4. Absorbia extraradicular Plantele pot absorbi elementele minerale din soluii diluate i prin alte organe, n afara rdcinii. Acest mod de absorbie poart numele de absorbie extraradicular. Deoarece principalul organ de absorbie extraradicular este frunza, acest mod de absorbie este denumit i absorbie foliar. Absorbia foliar se realizeaz n urma fertilizrii plantelor cu ngrminte minerale aplicate sub form de stropiri foliare. ngrmintele foliare conin att macroelemente, ct i microelemente (N, P, K, S, Mg, Fe, Cu, Zn, Co, Mo) i sunt preparate dup diferite reete. Ele sunt eficiente n stimularea proceselor fiziologice i sporirea produciei. Sunt solubile n ap, iar concentraia n care se aplic depinde de sol, specie i faza de vegetaie. 4.2.5. Circulaia elementelor minerale n plante Ionii minerali absorbii n celulele rdcinii sunt utilizai n trei direcii: - o parte se acumuleaz n vacuola perilor absorbani, favoriznd meninerea unui potenial osmotic necesar absorbiei osmotice a apei; - o parte (cationul NH4+ i anionii NO3-, SO42-- sau PO43-) sunt utilizai n celulele rdcinii la sinteza unor substane organice, de exemplu aminoacizi, citochinine etc; - o parte, mai ales cationii sunt transportai din parenchimul cortical al rdcinii n cilindrul central, i anume n vasele de lemn i sunt antrenai odat cu seva brut n sens ascendent, spre centrele de utilizare metabolic din organele aeriene. Transportul elementelor minerale prin celulele parenchimului cortical se face n sens radial pe trei ci: - calea apoplastic, prin difuziune simpl n apoplast i pereii celulari, circulaia apoplastic fiind mpiedicat la nivelul endodermului de benzile lui Caspary impregnate cu suberin. ntre soluia din apoplast i soluia solului este un contact direct, iar schimbul dintre acestea se face prin difuziune. n cazul rdcinii, absorbia activ a substanelor prin plasmalem, n celul, determin diluarea soluiei din apoplast i, ca urmare, difuzia substanelor din soluia solului spre acesta. - calea simplastic, prin plasmodesme; - calea transmembranar prin membranele plasmatice care se realizeaz la nivelul protoplasmei celulare, att din parenchimul cortical, ct i din endoderm, pn la celulele parenchimului lemnos ce nsoete vasele lemnoase din cilindrul central. La nivelul endodermului, acest transport este favorizat de prezena celulelor de pasaj, cu pereii nengroai. Benzile lui Caspary au rolul de a menine sensul centripet al transportului, mpiedicnd ieirea ionilor din cilindrul central, conform gradientului de concentraie. Vasele de lemn din cilindrul central sunt elemente moarte, iar xilemul este considerat o parte din apoplast. Transportul ionilor din simplast n apoplast se face printr-un mecanism de absorbie activ. Deoarece concentraia ionilor din apoplastul cilindrului central este mai ridicat dect n scoara nconjurtoare, se presupune c acumularea mpotriva gradientului de concentraie se face prin procese de transport activ, transmembranar. Transportul elementelor minerale prin protoplasma celulelor parenchimului cortical al rdcinii se face n mod activ, iar prin membranele acestora n mod pasiv, prin fenomenele fizice de adsorbie, schimb ionic i difuziune. Ascensiunea elementelor minerale n curentul sevei brute prin vasele de lemn se efectueaz n mod pasiv datorit forei motrice superioare determinat de transpiraia frunzelor. Prin vasele de liber circul elementele minerale n curentul de reutilizare, de la organele btrne, spre organele tinere n perioadele cu cerine nutritive ridicate.

4.3. ROLUL FIZIOLOGIC AL MACROELEMENTELOR 4.3.1. Azotul Azotul este cel mai important element, absolut indispensabil vieii plantelor. Forma din sol. Azotul se gsete n sol n cea mai mare cantitate sub form de compui organici, provenii din resturile organice vegetale i animale. Compuii minerali reprezint numai 1% din totalul azotului din sol, dar sunt forma asimilabil de ctre plante. Azotul asimilabil se rennoiete continuu prin mineralizarea azotului organic. Mineralizarea este un proces de natur biologic, efectuat de microorganisme, n special bacterii, care cuprinde etapele de amonificare i nitrificare. n procesul de amonificare, efectuat de bacteriile amonificatoare, din substanele organice rezult NH3. Acesta, n parte se degaj, n parte se combin cu diferii acizi, formnd sruri de NH4+, de exemplu sulfai, carbonai, nitrai, iar restul este oxidat sub aciunea bacteriilor nitrificatoare. Oxidarea NH3 n nitrificare cuprinde dou faze. n prima faz acioneaz specii din genurile Nitrosomonas i Nitrosococcus, nitritbacterii care oxideaz NH3 la acid azotos. n a doua faz acioneaz specii din genul Nitrobacter, nitratbacterii care oxideaz acidul azotos la acid azotic. ntre compuii organici i cei minerali din sol exist un produs intermediar numit humus, ce deine cca. 2-5 %. Pe soluri uscate i acide procesul de nitrificare este greoi, ducnd la formarea humusului brut, ce conine puin azot asimilabil de ctre plante. Un substrat organic nestabilizat, cu o concentraie ridicat de NH+4 i condiii anaerobe, produce acizi grai volatili, cu efect toxic. Fiind un proces biologic, nitrificarea este favorizat de aerisire, umiditate i temperatur. Forma de absorbie a azotului de ctre plante este reprezentat n special de ionii NO-3 i + NH4 . Ea depinde de specie, vrsta plantei, fenofaz, pH-ul i concentraia soluiei solului. Principala form de absorbie este considerat NO-3. Absorbia NO-3 se face concomitent cu absorbia cationilor i anionilor. Deoarece absorbia anionilor este mai intens dect cea a cationilor, iar adsorbia NO-3 este compensat de eliminarea OH- de ctre rdcin, n urma absorbiei NO-3 are loc alcalinizarea soluiei solului. Absorbia NH4+ concomitent cu a altor cationi este compensat de eliminarea H+ de ctre rdcin, ceea ce determin acidifierea soluiei solului Dintre speciile lemnoase, coniferele, de exemplu pinul i molidul prefer un sol bogat n humus, cu o nitrificare sczut, absorbind azotul n forma NH4+. Foioasele prefer un sol cu o nitrificare ridicat, absorbind azotul n form NO3-. Plantele tinere absorb azotul sub form de NH4+, iar plantele mature sub form de NO3-. La pH neutru plantele absorb azotul n forma NH4+, iar la pH acid n forma NO3-. Prin creterea concentraiei soluiei solului, la pH neutru se intensific absorbia att a NO3-, ct i a NH4+, iar la pH alcalin se intensific absorbia NO3-, dar scade absorbia NH4+. N2 atmosferic din spaiile dintre particulele solului este absorbit de ctre microorganismele simbionte, de exemplu bacteria Rhizobium leguminosarum, care formeaz nodoziti cu plante din familia leguminoase (Fabaceae), de exemplu leguminoasele alimentare i furajere sau diferite specii lemnoase. Prezena n plante. Azotul absorbit n form mineral de NO3- i NH4+ este transformat n plante n substane organice. Particularitile procesului de asimilaie a celor dou forme de N la diferite plante de cultur au fost puse n eviden prin analiza componenei chimice a sucului din xilem, colectat din zona coletului. Din analiza rezultatelor se constat c NH4+ este asimilat n ntregime n rdcini i nu este translocat n organele aeriene. Aceast reacie se datorete caracterului toxic al ionului NH4+. La o nutrie abundent de NO3-, acest ion este asimilat n proporii diferite la nivelul rdcinii n diferite forme de N organic (aminoacizi, amide, ureide) n funcie de specie. Cantitatea de NO3- neasimilat n rdcini este translocat prin xilem n organele aeriene i asimilat la nivelul frunzei. Aceast reacie se datorete caracterului netoxic al ionului NO3- . La o nutriie moderat cu NO-3, acest ion este asimilat n rdcin. 35

Asimilarea NO3- presupune mai nti reducerea sa la NH4+ Acest proces cuprinde dou etape. Prima etap const n reducerea NO3- la NO2- catalizat de enzima nitratreductaz. Aceast enzim conine un atom de Mo i este localizat n citoplasm. Activitatea ei este indus de prezena NO3-, iar n frunze este intensificat de lumin. Sursa de e- n reacia de reducere este NADPH2: redus NO3- + NADPH2 NO2- + NADP+ oxidat

A doua etap const n reducerea NO2- la NH4+ catalizat de enzima nitritreductaz. Aceast enzim conine trei atomi de Fe. Sursa de e- n reacia de reducere este ferredoxina: NO2- + ferredoxina NH4+ + ferredoxin redus oxidat n frunze nitritreductaza este localizat n cloroplaste. Ferredoxina nu a fost detectat n rdcini, iar sursa de e- implicat n reducerea nitriilor n rdcini nu este cunoscut. Costul energetic de asimilaiei a NO3- este mult mai sczut n frunze dect n rdcini. Pentru conversia NO3- la acid glutamic este necesar echivalentul a 35-37 de fotoni n rdcini, fa de numai 20 fotoni n frunze. n timpul dezvoltrii ontogenetice la porumb, plantulele i plantele tinere asimileaz mai bine NH4+, iar cele mature NO3-. NH4+ absorbit din sol sau provenit din reducerea nitrailor este asimilat n forme de N organic, att n rdcini ct i n frunze. NH4+ intr n plante n combinaie cu cetoacizii provenii din respiraie, de exemplu acidul piruvic, acidul oxalilacetic i acidul alfa cetoglutaric i formeaz aminoacizi i amide. NH3 + acid piruvic-----------------> alanin NH3 + acid oxalilacetic----- -----> acid asparagic NH3 + acid alfa cetoglutaric-- -> acid glutamic NH3 + acid aspargic--------------> asparagin NH3 + acid glutamic--------------> glutamin Cercetri recente consider calea principal de asimilare a NH4+ la plantele superioare ca fiind sinteza acidului glutamic prin aminarea acidului alfa cetoglutaric, sub aciunea enzimei glutamatsintetaz i sinteza glutaminei, sub aciunea enzimei glutaminsintetaz. Procesul are loc pe baza energiei furnizat de ATP i participarea NADPH2 i a ferredoxinei n frunzele verzi ca ageni reductori. NH4+ + acid afla cetoglutaric + NADPH2 + ATP glutamat acid glutamic + NADP+ + ADP + P sintetaz acid glutamic + NH4+ + ATP glutamin glutamin + ADP + P sintetaz

Sinteza celorlali aminoacizi are loc prin reacii de transaminare, catalizate de enzimele aminotransferaze, conform modelului: alfa cetoacid + acid glutamic alfa aminoacid + acid alfa cetoglutaric Aceste reacii sunt reversibile i nu necesit consum de energie. Alturi de glutamin, asparagina servete ca donor de NH2. Deoarece asimilarea NH4+ utilizeaz cetoacizii din ciclul Krebs i energia, acest proces necesit o respiraie intens Pe baza aminoacizilor i amidelor se sintetizeaz substanele proteice, acizii nucleici, enzimele, clorofila, vitaminele, alcaloizii, glicosizii etc.

Fixarea simbiotic a N2 implic sinteza NH4+ din N2. Aceast reacie necesit o mare cantitate de energie i putere reductoare pentru a rupe legturile N N i a reduce N2 la NH4+. Cele mai importante organisme fixatoare de azot sunt bacteriile simbiotice din genul Rhizobium care formeaz nodoziti pe rdcinile leguminoaselor. Forma i structura nodozitilor variaz cu specia. Astfel, nodozitile sunt sferice la soia i ovoidale la lucern. Nodozitile au o regiune infectat cu bacterii, localizat n centru. n timpul dezvoltrii nodozitilor, bacteriile sufer modificri morfologice i fiziologice. Forma lor poate fi alungit, rsucit i chiar ramificat. Funcia fiziologic const n fixarea N2 i poate avea o durat scurt, de exemplu la soia sau lung, de exemplu la lucern. Reducerea N2 este catalizat de enzima nitrogenaz, format din dou proteine. Una dintre acestea conine Mo i Fe i catalizeaz reacia N2 NH4+. A doua conine Fe i servete ca reductor pentru proteina cu Mo i Fe. Sursa de e- necesar reducerii este NADPH2. Transferul electronilor are loc astfel: e- ferredoxin eeeNADPH2 sau protein protein flavodoxin cu Fe cu Mo i Fe N2

Nitrogenaza necesit condiii anaerobiotice, cu valori sczute de O2. Concentraia sczut de O2 este meninut cu ajutorul leghemoglobinei, o hemoprotein de culoare roie, asemntoarei hemoglobinei, care are o mare afinitate pentru O2. Bacteriile elimin NH4+ care este asimilat n compui organici ca aminoacizii, amidele (glutamina i asparagina) i ureidele (alantoina i acidul alantoic). Activitatea nitrogenazei necesit o intens putere reductoare i energie sub form de ATP, care sunt obinute pe baza glucidelor sintetizate n frunzele plantei n procesul de fotosintez. Aciuni specifice. Azotul intr n componena principalelor substane din celula vegetal, cum sunt proteinele structurale, avnd un rol plastic esenial. De asemenea, intr n structura unor compui ca enzimele, clorofila, vitaminele, hormonii, avnd un rol metabolic esenial. Azotul particip n fotosintez, respiraie, cretere, reproducere, fructificare, precum i n biosinteza unor compui secundari ca alcaloizi i glicosizi. n lipsa azotului, viaa plantelor nu e posibil. Simptome de caren i exces. Carena de azot perturb procesele de cretere vegetativ i nflorire, precum i formarea organelor de repaus (bulbi, tuberculi, tubero-bulbi etc). n frunze se produce cloroza, scderea coninutului de clorofil i a intensitii fotosintezei. La gru, insuficiena N micoreaz nfrirea, iar frunzele au o culoare verde deschis. La porumb, carena N determin culoarea verde-glbuie a frunzelor. nglbenirea limbului are loc de la vrf spre baz, de-a lungul nervurii mediane. Cloroza de N apare n faza de 7-8 frunze i ncepe cu frunzele btrne, de la baza tulpinii. La o caren pronunat de N, plantele nu formeaz tiulei. La sfecla de zahr, insuficiena N determin cloroza frunzelor, care se manifest mai nti la frunzele btrne, apoi se extinde la toate frunzele. Este perturbat morfogeneza foliar i a rdcinilor, este redus intensitatea fotosintezei i cantitatea de zahr din rdcini. La cartof, carena N determin o reducere a morfogenezei frunzelor i o perturbare a sintezei glucidelor. La inul de ulei, carena N a provocat degradarea ultrastructurii lamelare a cloroplastului i apariia unor formaiuni dense, vizibile la microscopul electronic, numite plastoglobuli (Vasilic i colab., 1997). La plantele legumicole, de exemplu tomatele, castraveii i varza, carena N determin cloroza frunzelor, reducerea suprafeei foliare i a creterii vegetative. La via de vie carena de N determin perturbarea creterii i lignificrii lstarilor i scderea produciei de struguri. Excesul de N are un efect negativ asupra plantelor, care se manifest att direct, ct i indirect. Efectul direct al excesului se datorete toxicitii unor compui anorganici cu N. Cel mai toxic compus este NH+4. Toxicitatea sa apare cnd intensitatea absorbiei depete intensitatea asimilaiei, ceea ce determin acumularea NH+4 n citoplasma celulelor peste limitele normale. 37

Toxicitatea NH+4 se manifest mai intens asupra rdcinii, dect asupra organelor aeriene, deoarece rdcinile sunt supuse unor concentraii mai ridicate, iar translocaia NH+4 spre organele aeriene este foarte redus. Efectul indirect al excesului de N se datorete perturbrii unor procese metabolice care determin perturbarea proceselor de cretere i fructificare. La gru excesul de N produce o nfrire exagerat, un consum de ap neeconomic i micoreaz rezistena plantelor la cdere. La porumb, excesul de N determin intensificarea morfogenezei foliare, iar frunzele au o culoare verde nchis. Are loc o diminuare a rezistenei la boli i alte condiii de stress. Efectul toxic al NH+4 se manifest prin inhibarea transportului NO-3 i a absorbiei Zn2+, ceea ce determin perturbarea creterii i fructificrii. La sfecla de zahr, excesul de N micoreaz rezistena plantelor la boli i secet, determin scderea coninutului de zahr i creterea coninutului de azot n rdcini. La cartof, excesul de N determin o cretere luxuriant a plantelor, prelungete perioada de vegetaie i ntrzie maturarea tuberculilor. La plantele legumicole, excesul de N prelungete creterea vegetativ i ntrzie procesul de fructificare, de asemenea micoreaz rezistena plantelor la boli i duntori. La sfecla roie, excesul de N a mrit coninutul de nitrai al rdcinii peste limitele admise n hrana copiilor. 4.3.2. Fosforul. Prezena n sol. Fosforul se gsete n sol sub form de sruri fosfatice, uor sau greu solubile i sub form organic. La arbori, rdcinile micorizante au capacitatea de a solubiliza compuii insolubili, n special pe solurile puternic acide. Forma de absorbie. Fosforul este absorbit din sol sub form de ioni PO43- sau H2PO4-. Prezena n plante. Spre deosebire de N i S, absorbii sub form oxidat de anioni NO3- i 2SO4 , i apoi redui n plante, P nu este redus. Sub forma ionului PO43-, fosforul intr n compoziia unor substane organice cu rol esenial, de exemplu acizi nucleici, fosfolipo-proteine, compui fosforilai ai glucidelor, NADP, enzime, de exemplu NADP-dehidrogenaz, decarboxilaz, vitamina B12, compui macroergici, de exemplu acizi adenozin mono,di i trifosforici (AMP, ADP, ATP). Aciuni specifice. Fosforul ndeplinete n plante un rol plastic, intrnd n componentele structurale ale protoplasmei, de exemplu nucleoproteine din nucleu i citoplasm i fosfolipoproteine din membranele citoplasmatice. De asemenea prezint un rol morfogenetic, organogen participnd n diviziunea celular sub forma acizilor nucleici, purttorii mesajului genetic. Fosforul prezint un rol energetic, favoriznd captarea energiei luminoase sub forma energiei chimice poteniale nmagazinat n NADPH2, ct i n compuii macroergici de tip ATP n timpul fotosintezei i eliberarea energiei chimice n timpul respiraiei. n fosforilarea fotosintetic: AMP + PO43- ADP + PO43- ATP La sinteza unei molecule de ATP este acumulat o cantitate de energie de 7600 cal. Energia acumulat n ATP este eliberat i utilizat n procesele metabolice din plant, cum sunt sinteza glucidelor, protidelor etc. ATP ADP + PO43- + 7600 cal. Fosforul prezint de asemenea un rol metabolic intrnd n structura unor enzime i participnd n biosinteza principalelor substane organice, de exemplu glucide, proteine, lipide etc. Fosforul stimuleaz nflorirea i fructificarea plantelor, scurteaz perioada de vegetaie, mrete rezistena la stress climatic, de exemplu ger i secet i biotic, de exemplu boli i duntori. La plantele tinere de orz, fosforul anorganic este ncorporat n mai puin de un minut n nucleotide i fosfolipide. La mazre, ncorporarea fosforului n ATP are loc dup 10 secunde, iar n nucleotide dup 30 de secunde. Aceasta este urmat de ncorporarea n hexozofosfai.

La gru, fosforul este al doilea element esenial, care se valorific ns eficient numai n prezena N. Rdcinile de gru fiind de dimensiuni reduse, valorific mai ales fosforul asimilabil din zona radicular. Necesarul de fosfor este maxim n fazele de nfrire i mpiere. La sfecla de zahr, fosforul favorizeaz creterea rdcinilor, asimilarea azotului i mrete coninutul de zahr. La cartof, fosforul este valorificat eficient numai n prezena N i K. La soia, fosforul este elementul cu cel mai ridicat indice de recolt, respectiv deine cea mai mare fraciune transferat din frunze n semine. Fertilizarea suplimentar cu P n faza reproductiv mrete numrul de boabe n pstaie. Simptomele de caren i exces. n lipsa P este perturbat procesul de morfogenez a diferitelor organe. Plantele rmn mici, iar frunzele se rsucesc. Frunzele sunt la nceput verzi, iar apoi se coloreaz n rou violet, sub form de pete, datorit blocrii transportului glucidelor solubile, care duce la sinteza glicosizilor antocianici. De asemenea, n lipsa P este perturbat nflorirea i fructificarea. La porumb, carena P ntrzie apariia paniculului i mtsirea, tiuleii au rnduri neregulate, iar boabele nu se matureaz. Insuficiena P blocheaz transportul asimilatelor din frunze, ceea ce determin formarea pigmenilor antocianici. Frunzele au o culoare verde-nchis, apoi se coloreaz n rou de la vrf spre baz. La sfecla de zahr, n lipsa P, frunzele de asemenea au culoare verde nchis, apoi marginea se coloreaz n rou. La cartof, carena P reduce morfogeneza i creterea tuberculilor i formeaz dungi brune pe frunzele inferioare, iar la fasole carena P a determinat modificri n coninutul nucleotidelor din rdcini i frunze. Excesul de P grbete nflorirea i fructificarea plantelor. La sfecla de zahr are loc ncetarea creterii rdcinilor i o maturizare tehnologic foarte rapid n detrimentul produciei de zahr. La plantele legumicole, excesul de P determin apariia unor boli fiziologice, manifestate prin scderea coninutului de Ca i sporirea coninutului de N,K i Mg (Takac i Peslova, 1995).

39

4.3.3. Potasiul Forma din sol. Potasiul se afl n sol sub form de sruri solubile, de exemplu cloruri, azotai, sulfai, ca ion K+. Forma de absorbie. Potasiul este absorbit sub form de cation K+. Prezena n plante. Potasiul este cationul predominant n plant. El se gsete sub forma ionului K+ liber, mai ales n zonele cu metabolism intens, de exemplu meristemele primare, cambiul, periciclul, embrionul seminelor, fructele n formare. Este un element foarte mobil, circulnd n plante de la organele btrne spre cele tinere. Este foarte rar ntlnit n combinaii organice, ca sruri ale acizilor organici, de exemplu acizii tartric, malic, oxalic. Aciuni specifice. Potasiul intensific absorbia apei i reduce transpiraia, mrind presiunea osmotic a sucului vacuolar, gradul de hidratare i permeabilitatea protoplasmei. K particip la deschiderea i nchiderea stomatelor. Creterea concentraiei K n celule stomatice (> de 300 mM) determin mrirea potenialului osmotic al acestora i absorbia apei prin endosmoz, urmat de deschiderea stomatei. Scderea concentraie K determin micorarea potenialului osmotic i ieirea apei prin exosmoz. Potasiul stimuleaz transportul sevei n xilem i transportul rapid al asimilatelor de la frunze, ceea ce menine o intensitate fotosintetic ridicat. Dei nu particip n structur, K activeaz 60 de enzime importante n metabolism. Potasiul determin radioactivitatea natural a plantelor ca izotop K40. Datorit potenialului energetic oferit de acesta, potasiul stimuleaz procesele fiziologice de fotosintez, respiraie, sinteza i acumularea glucidelor, lipidelor i proteinelor. Potasiul stimuleaz diviziunea celular, activitatea enzimelor i biosinteza clorofilei, contribuie la sporirea rezistenei plantelor la factorii de stress abiotic, de exemplu ger i secet i biotic, de exemplu boli i duntori, precum i rezistena fructelor la pstrare. K+ prezint o aciune antagonist cationilor Na+, Ca2+ i Mg2+, anulnd aciunea toxic a excesului acestora. La unele plante de cultur, de exemplu sfecla de zahr i bumbacul, K poate fi substituit parial de Na. Simptome de caren i exces. Insuficiena potasiului provoac dereglri profunde la plante. Creterea plantelor este redus, att prin blocarea diviziunii celulare, ct i prin scderea turgescenei; plantele rmn mici i pipernicite. Frunzele sufer cloroze i necroze, cunoscute sub numele de arsuri. nglbenirea frunzelor are loc mai nti pe margini i vrf i este urmat de brunificarea, rsucirea i cloroza acestora. Carena potasiului stimuleaz activitatea enzimelor hidrolizante, i anume amilaza, pectinaza, proteaza i inhib activitatea enzimelor cu rol n sinteza glucidelor i proteinelor. Astfel, n plante scade coninutul de amidon i protein i crete coninutul zaharurilor solubile, aminoacizilor i amidelor. Lipsa potasiului scade capacitatea de rezisten a plantelor la ger, secet i boli. 4.3.4. Calciul Calciul este un element necesar nutriiei plantelor. n funcie de afinitatea pentru calciu, plantele se mpart n plante calcifile, care prefer terenuri bogate n calciu, de exemplu Clematis sp., Rhododendron hirsutum i calcifobe, care prefer terenuri srace n calciu, de exemplu Hydrangea paniculata, Castanea vesca. Forma din sol. Calciul este prezent n sol sub form de sruri solubile, de exemplu azotat (calcit), clorur, ca ion Ca 2+ i sruri insolubile, de exemplu CaCO 3, fosfat de Ca (apatit), CaSO4 i CaSO4 2H2O. Forma de absorbie. Calciul este absorbit din sol sub form de cation Ca2+. Prezena n plante. Calciul este cel mai imobil dintre elementele eseniale. El se gsete n toate componentele celulei, att sub form de ioni liberi Ca 2+, ct i n combinaii organice i anorganice. Astfel, cel mai ridicat coninut de Ca se gsete n structura membranei, ca pectat de calciu, n lamela median; n protoplasm formeaz proteinate de Ca, iar n vacuol formeaz cristale de oxalat sau sulfat de calciu, cunoscute sub numele de incluziuni ergastice (rafide, ursini i macle).

Calciul se acumuleaz n esuturile btrne i n esutul lemnos al arborilor, fiind fixat de lignin. La plantele ierboase, cele mai mari cantiti de Ca sunt coninute de asemenea n esuturile conductoare din peiol i tulpin. Dintre plantele legumicole, coninutul cel mai sczut de Ca este ntlnit la castravei i salat (4,3 mg/g de substan uscat), iar cel mai ridicat la mazre (23,0 mg/g de substan uscat). Valori medii sunt nregistrate la spanac i rdcini de morcov (7,8), elina (9,2) i ceap (17,0 mg/g de substan uscat). Aciuni specifice. Calciul prezint efecte antagoniste potasiului i anume reduce absorbia apei i intensific transpiraia, mrete vscozitatea i reduce permeabilitatea protoplasmei. De asemenea, particip la diviziunea celular, att la sinteza cromozomilor, ct i la formarea nucleului. Calciul are rol n legarea acizilor nucleici de proteine n nucleoproteine, ct i n formarea lamelei mediane dintre celule, ca pectat de Ca. Calciul asigur structura, creterea n suprafa i funcionarea membranei celulare, dar i permeabilitatea i selectivitatea membranei plasmatice. Calciul anuleaz efectul toxic al cationilor monovaleni K+, Na+, NH4+ i bivaleni Cu2+, Mg2+, Mn2+ i Zn2+, prin antagonism ionic. De asemenea, regleaz echilibrul acido-bazic, neutraliznd excesul de acizi organici provenii din metabolism, care pot deveni toxici. Calciul favorizeaz creterea rdcinii, fiind considerat elementul indispensabil acestui proces. Calciul reduce respiraia i procesul de maturare a fructelor, favoriznd meninerea condiiilor de pstrare a acestora. Simptome de caren i exces. Insuficiena calciului provoac ncetinirea creterii rdcinii, a ramurilor tinere i uscarea vrfului vegetativ. Frunzele se brunific, apoi se necrozeaz. Celulele pierd cimentul celular, formnd mucilagii ntre ele. n frunze, carena calciului provoac reducerea esutului asimilator i mpiedic transportul asimilatelor prin blocarea amidonului n mezofil. La sfecla de zahr, carena Ca produce deformri ale rdcinii i necrozarea frunzelor. La cartof, carena Ca blocheaz amidonul n frunze sau produce necroze care reduc esutul asimilator, ceea ce determin scderea produciei de tuberculi. Excesul de calciu provoac mbtrnirea prematur a esuturilor, inhib absorbia unor elemente i provoac cloroza prin blocarea accesibilitii fierului. 4.3.5. Magneziul Forma din sol. Magneziul este prezent n sol sub form de sruri solubile, de exemplu cloruri, sulfai ca Mg2+ sau greu solubile, de exemplu MgCO3 i CaMg(CO3)2. Forma de absorbie. Magneziul este absorbit din sol sub forma cationului Mg2+. Prezena n plante. Ca i K, Mg este relativ mobil n plante. Magneziul intr n plante n compui organici eseniali, cum este clorofila, ce conine 10% din coninutul total de magneziu al plantelor i activeaz o serie de enzime ale respiraiei i hidrolizante, de exemplu fosfataza, carboxilaza, peptidaza. Aciuni specifice. Magneziul intensific absorbia apei i reduce transpiraia, ca i potasiul. Mg stimuleaz absorbia P. De asemenea, intensific fotosinteza prin participarea la biosinteza clorofilei i stimularea reaciilor fotosintetice, activarea RuDP- carboxilazei i sinteza ATP stimuleaz biosinteza glucidelor, proteinelor i acizilor nucleici, activnd exportul asimilatelor din cloroplaste i enzima ARN-polimeraz i particip n respiraie prin stimularea activitii diferitelor enzime. n reproducere, magneziul stimuleaz formarea i maturarea gameilor. Simptome de caren i exces. Insuficiena magneziului provoac la plante fenomenul de cloroz. La gru, orz i ovz, carena Mg determin apariia pe frunze a unor puncte galben-deschis, niruite pe lungimea frunzei, care ulterior se transform n necroze, iar frunzele se usuc. Simptomele apar mai nti la frunzele btrne. La porumb, insuficiena Mg produce tigrarea, respectiv formarea de dungi galbene ntre nervuri, paralele cu nervurile, care rmn verzi. La cartof, carena Mg blocheaz amidonul n frunze, acestea se nglbenesc, devin cenuii i se usuc, iar formarea tuberculilor este ncetinit. 41

Dintre plantele legumicole, la varz carena Mg provoac apariia de pete brune, apoi necroze, iar la fasole perturb structura cloroplastelor. La lalele alturi de cloroz, carena de magneziu provoac nmuierea esutului la locul de prindere a tijei de bulb. La mr, carena Mg provoac defolierea lstarilor, iar la via de vie decolorarea marginii frunzelor, care continu ntre nervuri, fiind urmat de necroze. Excesul de magneziu provoac o intoxicare, manifestat prin deformri ale celulelor i esuturilor. La crizanteme micoreaz absorbia elementelor minerale (Kato i Take, 1994) 4.3.6. Sulful Forma din sol. Sulful se gsete n sol n form mineral, de sulfai, sulfuri i H2S. Forma de absorbie. Sulful este absorbit din sol sub forma anionului SO42-. Sulfurile i H2S, pentru a fi absorbite sunt mai nti oxidate la sulfai. Prezena n plante. Sulful intr n plante n diferite combinaii organice. Ca i azotaii, sulfaii sunt redui n plante la sulfii i sulfuri, ce formeaz gruprile - SH i - S - S-. Aceste grupri se gsesc n aminoacizii cu sulf, de exemplu metionin, cistein, cistin i n glutation, ce intr n componena unor enzime, a vitaminelor B i H i a unor sulfo-proteine. Aciuni specifice. Prin participarea sa n structura aminoacizilor i a proteinelor, sulful are n plante un rol plastic, complementar azotului i un rol metabolic. n fotosintez stimuleaz sinteza clorofilei, n respiraie favorizeaz reaciile de oxido-reducere, iar n cretere stimuleaz diviziunea celular. Sulful are un rol deosebit n rezistena plantelor la stress, i anume formeaz fitoncidele care asigur rezistena la boli i menine acidul ascorbic n starea activ, redus. Simptome de caren. Carena S se aseamn cu cea a N. Creterea plantelor este perturbat. Dintre organele plantei sunt afectate mai mult organele aeriene, iar frunzele devin galbene, n parte slab colorate n rou. Carena S provoac o ncetinire a sintezei substanelor proteice i o sporire a coninutului de N solubil (nitric, aminic, amoniacal sau amidic). La gru, carena S provoac nglbenirea i mbtrnirea prematur a plantei. n boabe crete coninutul de acid asparagic i scade coninutul celorlali aminoacizi eseniali. La leguminoase, insuficiena S perturb formarea nodozitilor. 4.4. ROLUL FIZIOLOGIC AL MICROELEMENTELOR Microelementele sunt prezente n plante n cantiti foarte mici, dar rolul lor fiziologic este foarte important. Ele sunt prezente n sol sub form de cationi de Fe2+, Fe3+, Cu2+, Zn2+, Mn2+, Mo2+ i anionul BO3-. Cationii pot forma n sol complexe organice numite chelai care pot lega ionii minerali n forme insolubile, fcndu-i inaccesibili. n stare liber n soluia solului, microelementele se pot acumula n cantiti mari, devenind toxice pentru plante. Din aceast cauz forma optim de administrare i absorbie a elementelor minerale este cea obinut din fertilizarea extraradicular, prin stropiri foliare cu microelemente n concentraii echilibrate. 4.4.1. Fierul Forma din sol. Fierul se gsete n sol sub form de oxizi, de exemplu hematit i limonit i sruri feroase sau ferice ca Fe2+ i Fe3+. Forma de absorbie. Fierul este absorbit din sol ca ioni ferici Fe3+, mai puin feroi Fe2+. Capacitatea de a solubiliza Fe depinde de pH-ul din jurul rdcinii. Speciile care elimin OH alcalinizeaz mediul, fiind considerate ineficiente, de exemplu cerealele i ierburile. Speciile care acidific solul i secret substane reductoare solubilizeaz Fe, fiind considerate eficiente, de exemplu tomatele. Prezena n plante. Plantele au diferite mecanisme de a solubiliza i asimila Fe. Gramineele elimin fitosiderofori (purttori de Fe) care transport Fe3+ n rdcini. Fe3+ este redus n celule pentru a fi introdus n macromolecule organice sub aciunea nitratreductazei. La dicotiledonate, Fe3+ din rizosfer este chelatat i transportat n membran unde este redus cu participarea ATP-azei

Fierul intr n componena unor enzime ale respiraiei, de exemplu citocromi, citocromoxidaz, catalaz, peroxidaz i ale fotosintezei, de exemplu citocromi i ferredoxin. Aciuni specifice. n plante fierul particip la transferul de electroni n respiraie i fotosintez prin trecerea: -eFe2+ Fe3+ +eFierul catalizeaz biosinteza clorofilei i a pigmenilor carotenoizi i favorizeaz formarea ultrastructurii cloroplastelor, metabolismul N, transportul elementelor minerale n citoplasm. Simptome de caren. Insuficiena fierului este evident la plante prin diferite simptome: ncetarea creterii rdcinii i tulpinii sau fenomenul de cloroz a frunzelor, manifestat prin nglbenirea, apoi decolorarea total. Cloroza se manifest la frunzele tinere, deoarece Fe este un element imobil, nereutilizabil. La o caren puternic, frunzele devin aproape albe. Spre deosebire de cloroza de Mg, cloroza feric afecteaz att mezofilul, ct i nervurile. Carena Fe determin scderea coninutului unor acizi solubili i a clorofilei n plante; coninutul acestora poate servi ca indice de apreciere a gradului de aprovizionare cu Fe. 4.4.2. Cuprul Prezena n plante. Cuprul intr n componena unor enzime, de exemplu fenoloxidaza, polifenoloxidaza, lactaza i ascorbinoxidaza. 50 % din coninutul de Cu este localizat n cloroplaste, n componena plastocianinei. Aciuni specifice. Enzimele care conin cupru catalizeaz reaciile de oxido-reducere din procesul de fotosintez i respiraie, pe baza capacitii Cu de a trece reversibil din Cu monovalent n Cu bivalent prin transfer de electroni: -eCu+ Cu2+ +eCuprul stimuleaz biosinteza clorofilei, fotosinteza plantelor i intensific metabolismul energetic. Cu stimuleaz procesele de fructificare, avnd rol important n meninerea viabilitii polenului. De asemenea, mrete coninutul de acid ascorbic al plantelor i favorizeaz rezistena la condiiile de stress. Fenolazele cu Cu i lacaza favorizeaz procesul de lignificare prin oxidarea acidului para - cumaric, un precursor al biosintezei ligninei. La secara de toamn, aprovizionarea cu Cu a sporit coninutul de protein, iar la orz, coninutul de acizi nucleici din frunz. Simptome de caren i exces. Carena de cupru produce la plante arsuri sau cloroze pe frunzele tinere i mpiedic nflorirea i fructificarea. Carena de Cu a fost semnalat n special la cereale i pomi. La cereale, deficiena Cu se manifest prin rsucirea frunzelor, oprirea creterii tulpinii i perturbarea formrii spicului. La pomi, lstarii tineri au frunze cu margini arse sau clorozate, iar nflorirea i fructificarea nu au loc. Dup gradul de sensibilitate la Cu, plantele de cultur pot fi: - sensibile, de exemplu grul, orzul, ovzul, secara; - cu pretenii moderate, de exemplu inul, cnepa, bumbacul; - indiferente, de exemplu cartoful (Milic i colab., 1982). Excesul de cupru este toxic. 4.4.3. Zincul Prezena n plante. Zincul intr n componena unor enzime, de exemplu dehidrogenaza acidului glutamic, alcool-dehidrogenaza, dehidrogenaza acidului lactic, dipeptidaza, carboxipeptidaza i ARN-polimeraza. 43

Aciuni specifice. Enzimele care conin Zn particip n procesul de respiraie i de biosintez a clorofilei, a proteinelor i a acizilor nucleici. Asupra unor enzime cum sunt fosfataza alcalin i acid, Zn are o aciune similar Mg 2+ i 2+ Mn , activnd legarea lor de substrat. De asemenea, Zn activeaz enzimele respiraiei peroxidaza i catalaza. n funcie de sensibilitatea la carena Zn, plantele de cultur pot fi: - sensibile, de exemplu porumbul, floarea soarelui, fasolea, soia, via de vie; - cu pretenii moderate, de exemplu cartoful, sfecla de zahr, tomatele; - indiferente, de exemplu mazrea. Zn favorizeaz procesul de cretere prin stimularea biosintezei triptofanului, aminoacid considerat precursor al auxinei. De asemenea, sporete rezistena plantelor la stress prin mrirea vscozitii protoplasmei, pe baza creterii coninutului de ap legat. Simptome de caren i exces. n carena zincului, plantele lemnoase i ncetinesc creterea, frunzele rmn mici i sunt clorozate. La gru, carena Zn provoac pete cenuii pe frunze, urmate de cderea acestora. La porumb, frunzele tinere au culoare galben-alb, iar cele mature au baza frunzelor verde, iar restul limbului prezint linii clorotice paralele. La pomi, carena Zn provoac reducerea creterii lstarului i a frunzelor. La piersic, n frunze are loc cloroza, datorit inhibrii biosintezei clorofilei. La gutui, cloroza este nsoit de alungirea frunzelor. De asemenea, n lipsa Zn este perturbat procesul de nflorire. Carena Zn reduce activitatea enzimelor respiraiei, de exemplu catalaza, peroxidaza i citocromoxidaza. Corectarea carenei de Zn se poate face prin stropiri foliare sau administrarea n sol sub form de chelat. Excesul de zinc este toxic, se manifest prin cloroza plantelor. Porumbul este foarte rezistent, iar cartoful este foarte sensibil. 4.4.4. Manganul Prezena n plante. Manganul intr n plante n componena unor enzime, de exemplu dehidrogenaze i reductaze. Aciuni specifice. n plante Mn favorizeaz organizarea structurii lamelare a tilacoidelor din cloroplaste i activeaz numeroase enzime cu rol n metabolism, fotosintez i respiraie. Mn activeaz enzimele care particip n ciclul Krebs n procesele de fosforilare fotosintetic i fotoliz a apei. De asemenea, stimuleaz biosinteza clorofilei, activitatea enzimelor nitrit i nitratreductaz i a bacteriilor simbiotice, fixatoare de azot. Mn favorizeaz astfel reducerea nitrailor, precum i nmulirea i activitatea fiziologic de fixare a N2 n nodozitile leguminoaselor. Mn favorizeaz biosinteza vitaminei C la tomate i castravei i acumularea zahrului la sfecla de zahr i cpuni. Simptome de caren i exces. Carena Mn provoac la plante ncetinirea creterii i cloroza pe frunzele tinere, ntre nervuri. Ovzul prezint o sensibilitate ridicat la carena Mn, iar cloroza se manifest sub form de pete longitudinale cenuii, urmate de necroze i moartea frunzelor. Excesul de Mn provoac efecte toxice ce se manifest sub form de pete brune pe frunzele btrne i prin brunificarea rdcinilor. Cele mai sensibile specii sunt lucerna, varza, conopida, sfecla de zahr, tomatele i porumbul. 4.4.5. Molibdenul Prezena n plante. Molibdenul se acumuleaz n special n organele tinere, intrnd n componena enzimelor nitratreductaz i hidrogenaz. Aciuni specifice. Molibdenul stimuleaz biosinteza clorofilei, a proteinelor, fosfolipidelor i vitaminei C i intensific fotosinteza. De asemenea, stimuleaz activitatea enzimelor polifenoloxidaz, peroxidaz i ascorbinoxidaz n procesul de respiraie. Mo particip n procesul de reducere a nitrailor i stimuleaz formarea nodozitilor.

Simptome de caren. Carena Mo provoac perturbarea proceselor de cretere i nflorire. Frunzele sufer fenomenele de cloroz i necroz. Culoarea frunzelor devine verdecenuie sau galben clorotic, iar plantele par ofilite. La graminee, n lipsa Mo, frunzele sunt clorotice, se necrozeaz la vrf, iar boabele devin itave. Ovzul este cel mai sensibil la carena Mo. La leguminoase, frunzele sunt marmorate, deoarece nervurile rmn verzi. La tomate, frunzele prezint pete necrotice i nu se formeaz fructe, la salat frunzele sunt necrotice, cu esuturi subiri, iar la conopid frunzele au ntre nervuri pete galbene, cu margini de culoare verde-cenuie. Plantele pretenioase fa de Mo sunt bumbacul, secara, ovzul, sfecla de zahr, conopida i n special leguminoasele. 4.4.6. Borul
Prezena n plante. Borul este prezent n plante ca anion BO33-. Aciuni specifice. Borul stimuleaz diviziunea i elongaia celular i o serie de procese fiziologice, de exemplu morfogeneza membranei celulare i a vaselor conductoare, viabilitatea i germinabilitatea polenului, fotosinteza, metabolismul glucidelor i acizilor nucleici, nfloritul i legatul florilor. Necesarul de B este mai ridicat la dicotiledonate dect la monocotiledonate. Simptome de caren i exces. Carena B afecteaz esuturile meristematice i provoac o distrugere a rdcinilor i a vaselor de lemn i liber. Frunzele tinere sunt colorate n verde-nchis sau cenuiu, cu pete roietice pe margini. La sfecla de zahr, frunzele devin clorotice, iar rdcinile sufer de boala numit putregaiul inimii. La tomate, conopid, mr i citrice n lipsa B are loc deformarea pereilor celulari. Cele mai sensibile specii la carena B sunt sfecla de zahr, varza, conopida, trifoiul, lucerna, mrul i prul. Cerealele sunt puin pretenioase fa de B. Excesul de B este toxic. Frunzele se rsucesc i se necrozeaz, iar la plantele lemnoase are loc exfolierea scoarei.

45

CAPITOLUL 5 FOTOSINTEZA
5.1. DEFINIIA I IMPORTANA FOTOSINTEZEI Fotosinteza este procesul fiziologic prin care plantele verzi sintetizeaz substane organice din CO2, H2O i sruri minerale, n prezena luminii solare i a clorofilei, cednd n mediu O2. Termenul de fotosintez a fost dat de fiziologul Pfeffer (1877) de la cuvintele greceti photos = lumin i synthesis = sintez. Fotosinteza este calea biologic de captare a luminii solare prin care plantele verzi transform energia radiant solar n energie chimic potenial, nmagazinat n substane organice sintetizate: h CO2+ H2O + substane substane +O2 minerale clorofil organice Datorit fotosintezei, plantele verzi sunt considerate organisme cu nutriie autotrof (autos = singur, trophein = a se hrni), singurele capabile s-i sintetizeze hrana din substane minerale i energie luminoas solar. Importana fotosintezei este vital pentru evoluia i meninerea vieii pe Terra. Fotosinteza este singurul proces prin care se sintetizeaz substane organice asimilabile pentru toate organismele vii. n acelai timp, viaa de pe Pmnt este susinut de energia provenit de la soare, prin fotosintez. Studiul transformrilor energetice din sistemele biologice constituie o ramur a tiinei numit bioenergetica. nelegerea modului de transfer a fluxului energetic n organismele vii constituie un obiectiv central al biologiei moderne. n cadrul ecosistemelor naturale, unitile structurale i funcionale ale biosferei, plantele ocup nivelul trofic i energetic al productorilor, fiind singurele organisme capabile s asimileze substane i energie din mediul abiotic. n lanul trofic, ele ofer sursa de hran i energie tuturor categoriilor de consumatori, organisme heterotrofe (heteros = diferit), care consum substana i energia asimilate de plante. Substana i energia nglobate n organismele productorilor i consumatorilor revin n mediul abiotic prin activitatea descompuntorilor. Fotosinteza purific atmosfera terestr: prin consumul de CO2 i prin degajarea O2 se creaz condiii optime respiraiei aerobe. Calculele fcute de specialiti arat c pe glob este fixat anual n procesul de fotosintez o cantitate de 174 miliarde tone de CO2 (17,4 x 1010 t), din care 19 miliarde de tone (1,9 x 1010 t) de ctre plantele de uscat, iar restul de plantele de ap din mri, oceane i ruri. Prin asimilarea unei tone de carbon, plantele elibereaz n aerul atmosferic 2,7 tone de O2, astfel c anual plantele verzi elibereaz n mediul extern 460 miliarde de tone de O2 (4,6 x 1010 t), care reprezint unica surs natural de pe planet. Oxigenul eliberat de fotosintez rennoiete zilnic rezervele din atmosfera terestr, care se menin n limitele optime pentru respiraia plantelor i a animalelor. Pe drept cuvnt, jungla Amazonului, cel mai vast teritoriu de vegetaie de pe planet este considerat "plmnul de oxigen al Terrei". n momentul de fa, acumularea excesiv a CO2 n aerul atmosferic care determin "efectul de ser" , ce poate avea consecine ecologice catastrofale la nivel planetar, poate fi prevenit numai de fotosintez. De asemenea, fotosinteza are un rol cosmic, fiind singurul proces de captare a energiei unui corp extraterestru i transformarea sa n energie chimic, utilizabil n activitatea metabolic a tuturor organismelor vii. Conform legii transformrii i conservrii energiei, n fotosintez energia solar este transformat de ctre plante n energie chimic potenial, exprimat de obicei n echivalena
-

glucoz. ntr-o molecul gram de glucoz se mmagazineaz energia chimic de 674 Kcal. Determinrile calorimetrice au stabilit c un gram de glucoz deine o energie de 39 Kcal, iar unui atom de C din molecula glucozei i revine o energie de 112 Kcal. Deoarece pe Pmnt se acumuleaz anual 16,3 x 109t de carbon, totalul energetic anual captat de fotosintez de la soare este de 152 x 1015 kcal. Prin fotosinteza efectuat de plante omenirea utilizeaz energia solar actual nmagazinat n hran, pentru a-i satisface necesitile alimentare. Din acest motiv se consider c aplicarea primordial a fotosintezei este agricultura. De-a lungul istoriei planetei, prin intermediul plantelor, fotosinteza a determinat stocarea unei cantiti imense de enegie solar, sub forma combustibililor fosili, numii convenionali, depozitai n scoara terestr ca petrol, gaze, crbune. Rezervele de combustibil convenional sunt apreciate n prezent la 10.000-24.000 miliarde de tone. Prin folosirea combustibililor fosili omenirea utilizeaz energia solar fosil pentru a-i satisface necesitile energetice. Datorit crizei energetice provocate de consumul masiv de combustibili fosili, a aprut ideea exploatrii fotosintezei n scopuri energetice, respectiv utilizarea "energiei verzi", folosirea biomasei vegetale la prepararea diferiilor combustibili neconvenionali. Astfel, fotosinteza ofer unica posibilitate de utilizare intensiv de ctre omenire a energiei solare, oferit gratuit, cu atta generozitate de astrul ceresc, fr de care viaa nu ar fi posibil. 5.2. METODE DE STUDIERE A FOTOSINTEZEI Prin metode tradiionale, fotosinteza poate fi apreciat prin determinarea unei valori numit intensitatea fotosintezei. Aceast valoare poate fi exprimat att prin cantitatea de CO2 absorbit (cm3), prin cantitatea de O2 degajat, ct i prin cantitatea de substan organic asimilat (mg sau g) pe unitatea de suprafa foliar (cm2, dm2 sau m2), n unitatea de timp (ora, ziua sau anul). Determinarea CO2 absorbit poate fi efectuat prin metode cantitative, manometrice i titrimetrice. Determinarea O2 poate fi efectuat att prin metode cantitative, manometrice, ct i prin diferite metode calitative. Determinarea substanei organice asimilate poate fi efectuat prin metode cantitative, gravimetrice i prin metoda izotopilor radioactivi, folosind C14O2 Metodele moderne de studiere a fotosintezei studiaz: Schimbul de gaze in fotosintez prin sisteme electronice multicanal: - analizor de CO2 n infrarou, n camere de reacie ce conin un curent de aer din frunze; - analizor de O2, care conine un sistem special de electrozi ce creeaz un curent electric proporional cu concentraia O2 din camera de reacie. Semnalele sunt nregistrate i redate pe sisteme electronice adecvate. Con inutul de clorofil Metodele spectrofotometrice apreciaz coninutul de clorofil a pe baza capacitii de absorbie a luminii de ctre extractul acetonic sau alcoolic de pigmeni fotosintetici, n zona radiaiilor roii ale spectrului vizibil, n lungimea de und 663 nm. Metoda folosete spectrofotometre ce permit analize att n zona UV, ct i vizibil a spectrului, tip UV-Vis i prezint un sistem adecvat de nregistrare i redare computerizat. Absorbia luminii de ctre clorofil este exprimat n uniti de absorban i este proporional cu coninutul de clorofil. Metodele fluorometrice determin fluorescena clorofilei a, ca o msur a activitii fotosintetice a frunzelor. Fluorescena este proprietatea clorofilei de a emite instantaneu o radiaie luminoas cu o lungime de und mai mare dect cea absorbit. Emisia de fluorescen a frunzei ntregi este prea slab pentru a fi observat cu ochiul liber; extractul alcoolic de pigmeni prezint ns culoarea verde privit prin transparen i roie rubinie, privit prin reflexie. Absorbia maxim se afl n rou (685 nm) i se extinde spre zona infraroie a spectrului (spre 800 nm). Fluorescena clorofilei msoar absorbia luminii, cantitatea de conversie energetic, respectiv intensitatea reaciilor fotochimice din faza de lumin a fotosintezei, dup care se apreciaz intensitatea procesului de fotosintez.

Determinarea fluorescenei clorofilei se face cu aparate numite fluorometre, care permit msurarea fluorescenei n condiii de cmp. Fluorometrul folosete lmpi speciale, albastre i un filtru de excitaie albastru ( 470 nm) pentru a excita clorofila a. Lumina fluorescent emis de clorofila a trece printr-un filtru de emisie rou ( 685 nm) i este detectat de o foto diod de silicon. Semnalul este procesat printr-un circuit de modulare sincron care genereaz o ieire de voltaj proporional concentraiei de clorofil. Analiza simultan a concentraiei CO2 n camere de reacie i a fluorescenei clorofilei permite studiul interaciunii dintre fazele de lumin i ntuneric ale fotosintezei.

5.3. ORGANELE I ORGANITELE FOTOSINTEZEI 5.3.1. Frunza ca organ al fotosintezei. Dei fotosinteza are loc n toate organele verzi (tulpini ierboase, fructe tinere etc), principalul organ al fotosintezei este frunza. Limbul frunzei este lit, prezint o suprafa mare i o grosime mic, care permit captarea cu uurin a energiei luminoase i CO2 din atmosfer i accesul acestora la cloroplaste. Absorbia CO2 are loc prin stomate, iar prin intermediul fasciculelor conductoare din nervuri, frunza este permanent aprovizionat cu ap i sruri minerale din sol. Frunza prezint un parenchim asimilator numit mezofil, bogat n cloroplaste. Mezofilul poate avea diferite tipuri de structur: - bifacial, difereniat n parenchim palisadic spre faa superioar i parenchim lacunos spre faa inferioar - equifacial, care prezint parenchim palisadic spre ambele fee ale frunzei, de exemplu la garoaf; - omogen, nedifereniat n parenchim palisadic i lacunos, de exemplu la porumb. Schimbul de gaze (CO2 i O2) cu aerul atmosferic n timpul fotosintezei este realizat prin formaiunile epidermice numite stomate repartizate n mod diferit pe cele dou fee, n funcie de specie. Prin dispoziia lor pe tulpin, frunzele sunt adaptate pentru fixarea unei cantiti optime de lumin necesar fotosintezei. Astfel, dispoziia altern se realizeaz dup o linie dispus n spiral, iar dispoziia opus la dou noduri consecutive se realizeaz cruci. n mozaicul foliar, frunzele de vrste i mrimi diferite ajung toate la acelai nivel. Se nltur astfel posibilitatea umbririi reciproce a frunzelor. Prin micarea de cretere numit fototropism, frunzele se orienteaz spre sursa de lumin prin curbarea peiolului, care expune limbul frunzei perpendicular pe direcia razelor solare. Cloroplastele reprezint organitele fotosintezei. Ele au o arhitectur extrem de complex care le permite s ndeplineasc rolul unor "baterii solare miniaturizate, microuzine biosintetice" n care are loc fotosinteza. Studiul interrelaiei dintre structura i funciile cloroplastelor, din care rezult realizarea celui mai important i complex fenomen de pe Terra a fost posibil pe seama unor aprofundate cercetri de microscopie electronic, biofizic, biochimie i fiziologie. Cloroplastele sunt corpusculi sferici sau ovali, de culoare verde cu dimensiuni de 3-10 lungime i 0,5-4 grosime, vizibili la microscopul optic, fiind numite i gruncioare de clorofil. ntr-o celul cloroplastele pot fi n numr de 20-50, pn la 100. Cloroplastele se pot deplasa n celule n mod pasiv, odat cu curenii citoplasmatici sau n mod activ, n funcie de intensitatea luminii. Ultrastructura cloroplastelor a fost stabilit la microscopul electronic. 5.4. PIGMENII FOTOSINTETICI Pigmenii fotosintetici sau asimilatori sunt reprezentai de pigmenii verzi clorofilieni (clorofila a i b) i pigmenii galbeni sau carotenoizi (carotine i xantofile). Clorofila este pigmentul care d culoarea verde plantelor i prezint proprietatea unic de a capta lumina solar. Clorofila este considerat "adevratul Prometeu care fur focul din ceruri". 5.4.1. Plasarea n cloroplaste Pigmenii fotosintetici sunt plasai n cloroplaste la nivelul tilacoidelor granale, fiind dispui n lamelele fosfolipo-proteice ale acestora. Moleculele de clorofil au o form de zmeu, care este un dipol avnd un pol hidrofil (capul) i un pol hidrofob (coada). Polul hidrofil este plasat n stratul proteic al lamelei fosfolipoproteice, cu o nclinare de 45o. Polul hidrofob este situat n stratul fosfolipidic al lamelei. Pigmenii carotenoizi, hidrofobi sunt plasai n stratul fosfolipidic. Complexul dintre pigmenii fotosintetici i membranele fosfolipo-proteice ale granei formeaz uniti sferice cu diametrul de 90, numite cuantozomi (Calvin). Dup Park i Biggins

(1964) un cuantozom conine 160 molecule clorofil a + 70 molecule clorofil b + 48 molecule pigmeni galbeni, fosfolipide, sulfolipide, digliceride. Azotul proteic se uzeaz continuu, ceea ce determin un necesar permanent de N pentru cloroplaste. 5.4.2. Extragerea i separarea pigmenilor. Studiul pigmenilor fotosintetici poate fi efectuat numai prin extragerea i separarea acestora din frunze. Extragerea pigmenilor se face cu solveni organici: alcool etilic i metilic, eter, cloroform, aceton etc. Separarea lor din extractul sau soluia brut de pigmeni utilizeaz diferite metode care se bazeaz pe gradul difereniat de solubilitate n diferii solveni sau pe gradul diferit de adsorbie pe unele medii inerte (hrtie, pulberi etc). Metoda Sorby Krauss const n tratarea extractului alcoolic de pigmeni dintr-o eprubet cu benzin. Dup agitare, amestecul se separ n dou zone: n partea superioar se afl solventul benzin, ce conine pigmenii verzi i carotina, iar n partea inferioar solventul alcool ce conine xantofila. Metoda Timiriazev const n saponificarea clorofilelor dintr-un extract alcoolic cu o soluie de hidroxid, NaOH sau Ba(OH) 2, separarea clorofilelor saponificate prin filtrare, iar apoi separarea pigmenilor galbeni prin solubilizare difereniat n benzin i alcool. Benzina conine carotina, iar alcoolul conine xantofila. Metoda cromatografiei pe hrtie, pe coloan sau n strat subire const n antrenarea pigmenilor sub aciunea unui solvent organic i separarea lor pe baza adsoriei difereniate pe unele medii inerte. Aceste medii pot fi hrtia cromatografic n cromatografia pe hrtie, zaharoza, CaCO3, Al2O3, MgO i amidonul n cromatografia pe coloan i pulberi cu siliciu n cromatografia n strat subire. Pigmenii se separ pe baza diferenei de culoare. 5.4.3. Compoziia chimic a pigmenilor Formula chimic a clorofilei este urmtoarea: Clorofila a - C55H72O5N4Mg Clorofila b - C55H70O6N4Mg Din punct de vedere chimic clorofila are o structur porfirinic, asemntoare hemoglobinei din snge i citocromilor, enzime ale respiraiei. Ea este alctuit dintr-un nucleu porfirinic n centrul cruia se afl un atom de Mg2+. Acesta d fluorescena i culoarea verde clorofilei. Nucleul porfirinic prezint dou funcii acide -COOH, ca acid clorofilinic esterificate cu doi alcooli i anume metanolul i fitolul (C20H39OH). Molecula clorofilei a conine acid clorofilinic a, iar molecula clorofilei b conine acid clorofilinic b. Prin aceast structur, molecula clorofilei posed un pol hidrofil - nucleul porfirinic i un pol hidrofob - fitolul, caracter de o deosebit important n fixarea clorofilei n lamelele fosfolipoproteice ale granei cloroplastului. Formula chimic a carotinelor este C40H56. Carotinele sunt hidrocarburi nesaturate ce conin 11 legturi duble conjugate i dou legturi metilice, cu rol n absorbia radiaiilor solare. Cele mai importante carotine sunt alfa i beta carotenul. Xantofilele prezint o structur asemntoare, - C40H56O2. Cele mai importante xantofile sunt luteina, violaxantina i zeaxantina. Raportul pigmeni verzi/pigmeni galbeni = 4/1.

5.4.4. Proprietile fizice i chimice ale pigmenilor Proprietile pigmenilor fotosintetici pot fi studiate cu ajutorul extractului alcoolic sau soluiei de pigmeni. Proprietile fizice ale pigmenilor fotosintetici sunt: Culoarea. Clorofila a are culoare verde-albstrui, clorofila b verde-glbui, carotinele galben - portocaliu i xantofilele- galben-verzui. Solubilitatea. Pigmenii fotosintetici sunt solubili n solveni organici, dar sunt insolubili n ap. Fluorescena este proprietatea soluiei de pigmeni de a avea culoare verde privit n lumina direct, prin transparen i culoarea roie privit prin reflexie. Datorit fluorescenei clorofila transform radiaiile cu lungime de und mic n radiaii cu lungime de und mare. Fluorescena cloroplastelor din frunzele vii este mult mai redus dect cea a soluiei de pigmeni deoarece n stare vie numai o mic parte din pigmeni se gsesc n soluie, cea mai mare parte sunt adsorbii sau formeaz combinaii labile cu substane proteice. Absorbia selectiv a radiaiilor. Soluia de pigmeni fotosintetici absoarbe n mod selectiv radiaiile spectrului vizibil i anume radiaiile roii i albastre, indigo i violet. Nu sunt absorbite radiaiile verzi, galbene i portocalii, care reprezint culorile pigmenilor fotosintetici. Clorofila a prezint o absorbie maxim a radiaiilor n lungimile de und 672, 683, 700 i respectiv 435 nm. Clorofila b prezint o absorbie maxim a radiaiilor n lungimile de und 644 i respectiv 453 nm., iar pigmenii carotenoizi prezint o absorbie maxim a radiaiilor n lungimile de und 400480 nm. Spectrele de absobie ale clorofilei pot fi studiate la spectroscop sau la spectrofotometru. Proprietile chimice ale pigmenilor decurg din reacia acestora cu acizii i cu hidroxizii: Formarea feofitinei rezult din reacia clorofilei cu acizi organici sau minerali. Tratarea extractului alcoolic de pigmeni dintr-o eprubet cu o soluie diluat de HCl determin brunificarea soluiei. n reacie cu acidul, atomul de Mg2+ din molecula clorofilei este nlocuit cu doi atomi de H+, rezultnd feofitina, o substan de culoare brun. Saponificarea clorofilei rezult din reacia cu hidroxizii. Tratarea soluiei de clorofil cu NaOH determin desfacerea moleculei de clorofil n acizi clorofilinici a i b, alcool fitilic i metanol. Acizii clorofilinici formeaz cu atomul de Na sruri, prin reacia de saponificare. Clorofila saponificat i schimb solubilitatea n solveni organici, fiind solubil n alcool etilic. 5.5. MECANISMUL FOTOSINTEZEI Dei de la descoperirea fotosintezei au trecut mai bine de 200 de ani, mecanismul acestui proces a fost elucidat abia n ultimele decenii, pe baza utilizrii celor mai nalte descoperiri ale tiinei i tehnicii n domeniul chimiei, biochimiei, biofizicii, microscopiei electronice, n special prin utilizarea izotopilor radioactivi ai carbonului, hidrogenului i oxigenului. Cercetrile au dus la descoperirea a trei tipuri de mecanism al fotosintezei, i anume tipul fotosintetic C3, tipul fotosintetic C4 i tipul fotosintetic CAM. 5.5.1. Tipul fotosintetic C3 n acest tip fotosintetic, fotosinteza reprezint un ir de reacii ce alctuiesc un mecanism foarte complicat. O parte dintre aceste reacii se desfoar la lumin, iar alt parte la ntuneric. Din aceast cauz, fotosinteza cuprinde dou faze: faza de lumin i faza de ntuneric. Reaciile fazei de ntuneric au fost elucidate de ctre cercettorul american Calvin i colaboratorii si (1961). Reaciile fazei de lumin nu sunt ns pe deplin elucidate; ele au fost clarificate numai parial, necesitnd nc cercetri n viitor. Faza de lumin a fotosintezei (numit i faza Hill) este faza reaciilor fotochimice. Ea se realizeaz n grana cloroplastelor i cuprinde procesele de captare a energiei luminoase i transformarea ei n energie chimic, stocarea energiei n compui organici i fotoliza apei. Tot la lumin are loc ptrunderea CO2 n celulele fotosintetizante ale mezofilului frunzei.

Absorbia energiei luminoase i transformarea ei n energie chimic. n faza de lumin energia solar este transformat n energie chimic, planta verde fiind numit "cea mai bun main de conversie cuantic". Aceasta se realizeaz ntr-un proces complicat de transport de electroni i ioni de hidrogen la o anumit substan chimic de natur organic, numit nicotinamid-adenin-dinucleotid-fosfat aflat n stare oxidat (NADP+). Lanul transportului de electroni cuprinde ca element esenial molecula de clorofil a, singurul component fotosensibil i este declanat de aciunea cuantei de lumin h asupra acesteia. ntregul proces al transportului de electroni i hidrogen este puternic endergonic (nmagazinator de energie). Energia se nmagazineaz prin trecerea NADP+ din stare oxidat n stare redus NADPH2 i prin sinteza acidului adenozintrifosforic (ATP), un compus macroergic din acid adenozindifosforic (ADP) i un radical fosfat (P). Sinteza ATP n timpul procesului de fotosintez este numit fosforilare fotosintetic sau fotofosforilare. Dup Arnon (1954-1960) ecuaia acestei faze este: h 2ADP + 2P + 2NADP+ + 2 H2O 2ATP + 2NADPH2 + O2 Absorbia energiei luminoase i transformarea ei n energie chimic prin declanarea transportului de electroni energizani i fosforilarea fotosintetic se realizeaz cu participarea a dou sisteme fotosintetice (SF) numite sistemul fotosintetic I (SFI) i sistemul fotosintetic II (SFII). Sistemul fotosintetic este alctuit dintr-un complex de pigmeni asimilatori constituii ntrun centru de absorbie i un centru de reacie, ce formeaz aa numita unitate de fotosintez. Pigmenii fotosintetici sunt asociai cu proteine, necesare pentru stabilizarea fotosistemelor. Centrul de absorbie este format din molecule ce funcioneaz ca nite antene. Acestea au rol n captarea energiei luminoase i transferarea ei la centrul de reacie. Centrul de absorbie reprezint cca. 99% din pigmenii sistemului fotosintetic, numii pigmeni auxiliari, accesorii sau antene fotoreceptoare. El conine molecule de clorofil a, clorofil b i pigmeni carotenoizi care au proprietatea de a absorbi din spectrul vizibil radiaii cu lungimi de und mai mici de 680 nm, dar cu ncrctur energetic ridicat. Astfel se realizeaz mbuntirea aprovizionrii cloroplastului cu energie solar din zona spectral n care clorofila a are o absorbie slab. Pigmenii centrului de absorbie se leag strns ntre ei, astfel c energia absorbit poate fi uor transferat centrului de reacie. Eficiena transferului de energie este de 95% n cazul clorofilei a i b i de numai 40 - 45% n cazul pigmenilor carotenoizi. Centrul de reacie este reprezentat de clorofila a i anume pentru SFI specia de clorofil a cu absorbie maxim n lungimea de und 700 nm, numit i clorofil a 700 sau P700, iar n SFII specia de clorofila a cu absorbie maxim n lungimea de und 680 nm, numit i clorofil a 680 sau P680. Pigmenii centrului de reacie absorb astfel radiaiile cu cea mai mare lungime de und, dar cu cea mai sczut energie. La nivelul centrului de reacie are loc transformarea energiei luminoase n energie chimic. Aceast structur asigur o eficien ridicat n captarea i utilizarea energiei luminoase. n timp ce centrul de reacie este ocupat cu procesarea unui foton, ali fotoni sunt interceptai de pigmenii centrului de absorbie pentru a fi utilizai, astfel c pe msur ce centrul de reacie este liber, energia luminoas este imediat disponibil, iar centrul de reacie funcioneaz la intensitate optim. Sistemele fotosintetice (SFI i SFII) sunt rspndite inegal n membranele tilacoidelor granei. SFI este localizat n zona lateral a discurilor granale, care sunt n contact cu stroma, iar SFII n zona central a acestora. Coninutul SFI i SFII poate varia cu specia i condiiile de iluminare (Anderson i Andersson, 1988). Separarea spaial dintre cele dou fotosinteme presupune existena unor transportori mobili de e-, care sunt citocromii b i f, plastochinona, plastocianina i ferredoxina. Sub aciunea cuantei de lumin, pigmenii centrelor de reacie P700 i P680 emit electroni energizani e- i astfel molecula clorofilei se oxideaz primind sarcina + (clorofila a+) pentru un timp foarte scurt, de ordinul picosecundelor (10-12secunde). Dup aceasta, molecula clorofilei se
-

reduce imediat prin primirea unui electron normal e-. n centrul de reacie, alturii de pigmenii P700 i P680 trebuie s existe un acceptor i un donor primar de electroni. Sub aciunea luminii, cele dou sisteme fotosintetice funcioneaz ca adevrate pompe de electroni, emind continuu electroni energizani. Are loc astfel un flux continuu de e - ntre ap i NADPH+ prin cele dou sisteme. Din punct de vedere energetic, e- provin de la ap, reductor foarte slab (+ 0,82 V) i sunt transportai la ferredoxin, reductor foarte puternic (- 0,42 V), care reduce NADP + la NADPH2 (- 0,32 V). Acest potenial reductor ste folosit la reducerea carbonului (CO2). Din ntreaga energie folosit pentru a excita o pereche de e- (692 Kj) numai 218 Kj (cca. 1/3) sunt conservai n NADPH2, restul sunt stocai n ATP. Funcia clorofilei n unitatea fotosintetic este un fenomen cooperativ, i anume un mare numr de molecule, de ordinul sutelor coopereaz pentru conversia energiei unui singur foton, ntr-un electron energizant. Acest fenomen reprezint o reacie de adaptare a plantelor n vederea utilizrii ct mai eficiente a energiei solare i a obinerii unui randament fotosintetic ct mai ridicat. Funcionarea celor dou sisteme fotosintetice ce declaneaz transportul de electroni n reducerea NADP+ i fosforilarea fotosintetic este reprezentat de " schema n Z", conceput de Hill i Bendal (1960). Conform acestei scheme, n SFI sub aciunea cuantei de lumin h P700 cedeaz un electron energizant e- unui acceptor X cu structur necunoscut, presupus a fi clorofil sau chinon, care apoi l cedeaz unei substane numit ferredoxin (Fd), iar aceasta moleculei de NADP+, care se reduce. Ferredoxina reduce NADP+ prin intermediul enzimei ferredoxin NADP+ oxido-reductaz. Imediat, molecula de P+700 revine la starea normal prin acceptarea unui electron normal e- de la o substan numit plastocianina (PC). Lanul transferului de electroni apare astfel:

Reprezentarea schematic a transportului de electroni n fosforilarea ciclic i aciclic (schema n Z) la organismele care elimin O2 n fotosintez (conceptul lui Hill i Bendall, 1960). Sgeile indic direcia transpotului de electroni. Scala vertical arat valorile poteniale ale intermediarilor la un pH=7,0; PQ plastochinona; PC plastocianina; Fd ferredoxina; cit citocromi; Pacc. pigmeni accesorii; Mn2+ compui cu mangan cu rol de acceptori de electroni ai oxidrilului. n SFII, sub aciunea cuantei de lumin h asupra pigmenilor accesorii, energia absorbit de acetia este transferat la P680, care cedeaz un electron energizant e- unui acceptor primar, neidentificat Y. De la Y electronul e- trece de-a lungul unui lan de compui ce cuprinde plastochinona (PQ), citocromii b6 i f (cit b i f), plastocianina (PC) i P700. P680 i reface deficitul de electroni pe seama fotolizei apei. Electronii provenii din fotoliza apei sunt transportai la P680 cu ajutorul unei enzime ce conine Mn2+. Deoarece prin fotoliza apei se degaj O2, se consider c SFII particip la degajarea O2 fotosintetic. Prin degajarea unei molecule de O2 se produc 4 H+. Are loc astfel un flux continuu de e- ntre ap i NADP+ prin cele dou sisteme. Cercetri recente au artata c n sistemul fotosintetic II (SFII) acceptorul electronului energizant eliberat de P680, (Y) este feofitina, n timp ce n sistemul fotosintetic I (SFI), acceptorul electronului energizant eliberat de P700 (X), este probabil reprezentata de o alt specie de clorofil i de filochinon (dup Burzo i colab., 2004). Molecula de P680 aflat n faza de excitare revine la starea iniial prin primirea de electroni e- de la molecula de ap, care se descompune prin fotoliz, n lumenul tilacoidului. n SFI, e- eliberat de moleculele excitate de P700 sunt transportai succesiv la acceptori probabili, clorofila , filochinona i proteine cu Fe i S (T4) i ferredoxin (T5), care n prezena a 2H+ din stroma formeaz NADPH2. n procesul transferului de electroni energizani are loc i fosforilarea fotosintetic sau fotofosforilarea, prin care plantele nmagazineaz o parte din energia solar absorbit sub forma moleculei de ATP. Dup cum rezult din schema n Z, fotofosforilarea poate fi ciclic i acilic.
-

Fotofosforilarea ciclic se realizeaz cu participarea SFI, ce are ca centru de reacie P700. Sub aciunea cuantei de lumin, acesta declaneaz un circuit nchis de electroni: e - cedat de P700 acceptorului poate reveni la molecula de clorofil a 700 prin intermediul cit f- plastocianina. Energia absorbit se acumuleaz sub forma unei singure molecule de ATP, rezultnd fotofosforilarea ciclic. Fenomenul are loc fr participarea apei, fr degajarea O2 i fr reducerea NADP+. Fotofosforilarea aciclic se realizeaz cu participarea SFII i are ca centru de reacie P680. Sub aciunea cuantei de lumin, acesta cedeaz electronii energizani la clorofila a 700 din SFI prin intermediului lanului de transfer de electroni i primete electronii necesari revenirii la nivelul iniial din fotoliza apei. Energia absorbit se acumuleaz sub forma a dou molecule de ATP, rezultnd fotofosforilarea aciclic. Fenomenul are loc simultan cu degajarea unei molecule de O2 i particip la reducerea NADP+. Funcionarea celor dou tipuri de fosforilare reprezint o consecin a separrii spaiale a celor dou sisteme fotosintetice n structura discurilor granale. S-a artat c fotofosforilarea aciclic furnizeaz ATP necesar, alturi de NADPH2 la reducerea carbonului fotosintetic, n timp ce fotofosforilarea ciclic furnizeaz ATP necesar n special activitii metabolice a cloroplastului, de biosintez a proteinelor i de transport a metaboliilor prin membranele anvelopei. Din schema n Z rezult c transportul electronilor se bazeaz pe crearea n decursul lanului de reacii fotochimice a unei diferene de potenial electric. n membranele tilacoidale, n afara transportului de e- exist I un transport de H+. Acesta se realizeaz mpotriva gradientului electrochimic, prin pompe de H +. Pompele de H+ au rolul de a conserva o parte din energia transportului de e-. Protonii sunt pompai prin membranele tilacoidale de la stroma spre lumen. Revenirea H+ n stroma se face prin canale proteice, componente ale enzimei ATP-sintetaz. Aceast enzim este alctuit din dou componente polipeptidice. O component este hidrofob, inclus n structura membranei i formeaz un canal de H+ ce canalizeaz energia gradientului de H+ spre zona activ a enzimei. Cealalt component este hidrofil, orientat spre stroma I constituie partea activ, de sintez a ATP. Energia pompei de H+ este utilizat de asemenea la sinteza ATP. Fotoliza apei i degajarea O2 reprezint faza cea mai puin cunoscut i cea mai ipotetic din cadrul fotosintezei. Mult timp s-a considerat c oxigenul degajat n fotosintez provine din CO2. Abia n 1930 van Niel sugereaz ideea c O2 fotosintetic provine din ap, care se descompune sub aciunea energiei luminoase absorbite de clorofil printr-o reacie numit fotoliz. Aceast ipotez a fost confirmat n anul 1941 prin utilizarea izotopului radioactiv O18. De asemenea, prin utilizarea izotopului radioactiv H3 s-a artat c H+ din ap servete la reducerea CO2. Detaliile chimice ale eliberrii O2 sunt nc ipotetice. h H2O + + 2e- + 1/2 O2 2H h 2H2O 4H+ +4e- + O2 H+ se acumuleaz n lumenul tilacoidului Diferena de concentraie de H+ dintre lumenul tilacoidelor i stroma genereaz un flux de protoni fiind complexul H+ - ATP sintetaz. Energia rezultat din transportul protonilor prin acest complex, pompa de protoni este utilizat pentru fosforilarea ADP i sinteza ATP Separarea hidrogenului de oxigen din molecula apei i degajarea O2 este permis de structura lamelar a cloroplastului. Fotoliza apei are loc n lumenul tilacoidelor granale. Protonii (H+) rezultai sunt utilizai la sinteza ATP reducerea NADPH+. Producerea unei molecule de O2 n fotosintez necesit 8 fotoni, deci 4 fotoni n fiecare unitate de fotosintez. Pe de alt parte, s-a artat c la generarea unei molecule de O 2 i fixarea unei molecule de CO2 coopereaz 2400 de molecule de clorofil a. Deci n fiecare unitate de

fotosintez, 1200 de molecule de clorofil particip la captarea energiei a 4 fotoni, ceea ce reprezint 300 de molecule de clorofil/foton. Deci 300 de molecule de clorofil contribuie la transportul unui singur foton n fiecare unitate de fotosintez. Dintre acestea, numai o singur molecul de clorofil a n fiecare SF este capabil de transferul fotosintetic de electroni, celelalte servesc numai la captarea energiei i cedarea ei la P700. Absorbia CO2 n cloroplaste. Tot n faza de lumin, aerul ncrcat cu CO2 ptrunde prin ostiolele stomatelor care sunt deschise, trece n spaiile intercelulare i ajunge la pereii celulelor mezofilului. n mediul umed din peretele celular CO 2 este dizolvat n ap, apoi trece n acid carbonic (H2CO3) care disociaz astfel: H2CO3 + + HCO3- sau H2CO3 + + CO32-; ionii HCOH 2H 23 i CO3 ptrund n citoplasm pn la cloroplaste.

Faza de ntuneric a fotosintezei Numit i faza Blackman este faza reacilor enzimatice. Se realizeaz n stroma cloroplastelor i cuprinde un ir de reacii biochimice sau metabolice care au fost elucidate pe baza cercetrilor efectuate de Calvin i colab., prin utilizarea izotopului radioactiv C14. Pentru aceste cercetri, acest colectiv a primit premiul Nobel pentru Chimie n anul 1961. Materialul de cercetare utilizat a constat din alge verzi unicelulare (Chlorella, Scenedesmus) crescute n culturi mbogite cu CO2 n condiii constante de temperatur, lumin i pH. Suspensiile de alge tratate cu C14O2 au fost expuse la lumin perioade foarte scurte de timp, cuprinse ntre cteva secunde i un minut. Materialul vegetal a fost fixat rapid n alcool metilic la fierbere. Dup extragere i fracionare, produii fotosintezei au fost analizai prin cromatografie bidimensional pe hrtie, iar izotopul radioactiv a fost identificat n compui intermediari i finali prin autoradiografie. La plantele superioare, majoritatea experienelor au fost efectuate pe frunze de spanac. Cercetrile au demonstrat c reaciile fazei de ntuneric se desfoar ciclic, iar dup numele descoperitorului, acest ciclu a fost denumit ciclul lui Calvin. Reaciile biochimice ale ciclului Calvin sunt catalizate de enzime i se ncadreaz n trei grupe: 1. reacii de carboxilare, 2. reacii de reducere 3. reacii de regenerare. Reaciile de carboxilare constau n fixarea CO2 atmosferic pe un acceptor organic i ncorporarea acestuia ntr-o substan organic. Cercetrile au stabilit c acceptorul CO2 este o pentoz difosforilat, i anume ribulozo-1,5 difosfat sau 1,5-difosforibuloza (RuDP), care fixeaz o molecul de CO2 atmosferic sub aciunea enzimei ribulozo-1,5-difosfat carboxilaza (RuDP-carboxilaza sau Rubisco). Are o greutate molecular mare. Cuprinde 8 subuniti mari, cu greutatea molecular 56 KDa, sintetizate n cloroplast i 8 subuniti mici cu greutatea molecular 14 KDa, sintetizate n citoplasm, codificate de genomul din nucleu. Enzima are o afinitate foarte mare fata de CO 2 i asigur carboxilarea rapid chiar i la concentraii foarte sczute ale acestui gaz n atmosfer. S-a artat c activitatea RuDP-carboxilaza este controlat de lumin. Ea scade la zero n lipsa luminii, dar revine rapid la apariia iluminrii. Activitatea stimulatoare a luminii este catalizat de enzima Rubisco-activaz, care necesit energia sub form de ATP (Hopkins, 1995). Activitatea Rubisco mai este controlat i de CO2, Mg2+ i pH (Lorimer i Miziorko, 1980). Prin acceptarea CO2 se formeaz un compus instabil, cu 6 atomi de C, care este hidrolizat la 2 molecule de acid 3-fosfogliceric care reprezint primul compus stabil al fotosintezei. Formarea acidului 3-fosfogliceric este o reacie capital, deoarece efectueaz ncorporarea CO2 din aer ntr-o molecul organic din corpul plantei. Reaciile de reducere constau n reducerea carbonului cu ajutorul H+ i energiei acumulate n faza de lumin, nmagazinarea energiei n molecule organice i sinteza produilor primari ai fotosintezei. n aceast etap, acidul 3-fosfogliceric este redus la aldehida 3-fosfogliceric, cu ajutorul NADPH2 format n faza de lumin, care reprezint reductorul direct al CO 2 n fotosintez. Deoarece puterea reductoare a NADPH2 cu potenial electric E = - 0,35 V nu este suficient, reacia necesitnd E = 0,51 V, surplusul de energie este oferit de ATP, format de asemenea n faza de lumin. Aceast reacie reprezint momentul cel mai important de ncrcare cu energie a moleculei organice sintetizate. Aldehida 3-fosfogliceric este o trioz C3 fosforilat i reprezint cel mai simplu compus glucidic sintetizat n fotosintez. Ea st la baza sintezei tuturor produilor primari ai fotosintezei.

Astfel, prin izomerizare d dioxiacetonfosfat, care poate fi exportat sau poate forma prin condensare o hexoz difosforilat 1,6 - difosfofructoza. Prin defosforilarea acestuia se formeaz 6 fosfofructoza, iar prin izomerizarea acestuia se formeaz 6-fosfoglucoza. Prin defosforilare se obine glucoza i apoi amidonul. Pentru sinteza unei molecule de glucoz sunt necesare 6 molecule de CO2, 18 molecule de ATP i 12 molecule de NADPH2, deci raportul de consum energetic ATP/NADPH2 = 18/12 = 1,5. Concomitent are loc sinteza acizilor organici: piruvic, glicolic, malic, care apar la numai 5 secunde de expunere la lumin i a aminoacizilor alanin i acid asparagic, care apar dup 10 secunde. Dup 30 de secunde apar zaharoza, acidul citric i aminoacizii glicin, serin i acid glutamic. Reaciile de regenerare constau n refacerea acceptorului CO2. Aceste reacii au la baz formarea unor compui intermediari cu 4 atomi de C eritrozo1,6 fosfat i cu 7 atomi de C sedoheptulozo-1,7 difosfat, care dau natere la ribulozo-5 fosfat sau 5-fosforibulozei. Prin fosforilarea acesteia cu ATP fotosintetic are loc refacerea acceptorului 1,5 difosforibuloz. Deoarece primul compus glucidic sintetizat n fotosintez n timpul ciclului Calvin este o trioz, substan cu 3 atomi de C, acest ciclu a fost denumit i tipul fotosintetic C3. Tipul fotosintetic C3 este caracteristic pentru majoritatea plantelor n special din zona temperat. Dintre plantele de cultur acestui tip aparin grul, orzul, sfecla, cartoful, tutunul etc. 5.5.2. Fotorespiraia Mult timp s-a considerat c intensitatea respiraiei este constant la lumin i ntuneric. Cercetarea mecanismului fotosintezei a demonstrat c n afara procesului fotosintetic de fixare a CO2 plantele, desfoar i un proces de eliminare a CO 2, dependent de lumin i O2. Astfel respiraia la lumin msurat prin cantitatea de CO2 eliminat este de 3-5 ori mai intens dect respiraia la ntuneric. Acest proces a fost denumit fotorespiraie . Fotorespiraia a fost pus n eviden la o serie de plante de cultur, de exemplu gru, sfecl, spanac, tutun. S-a artat c fotorespiraia este intensificat n primul rnd de concentraia O 2, dar i de lumin i temperatur. Lumina are o influen cantitativ i calitativ. La floarea soarelui fotorespiraia este intensificat de mrirea intensitii luminii, deoarece CO2 degajat n fotorespiraie este parial utilizat n fotosintez. La Picea glauca fotorespiraia este mult mai intens la lumina albastr dect la lumina roie sau alb. Temperatura de 350C dubleaz intensitatea fotorespiraiei la tutun fa de temperatura de 250C. Temperatura ridicat stimuleaz funcia de oxigenaz a enzimei RuDP carboxilaz fa de funcia de carboxilaz. Mecanismul fotorespiraiei a fost elucidat prin utilizarea C14. Eliberarea CO2 n fotorespiraie este asociat cu metabolismul fotosintetic i aplic reoxidarea produilor asimilaI anterior n fotosintez (Bidwell, 1983). Fotorespiraia implic activitatea a 3 organite celulare, i anume cloroplastele, peroxizomii i mitocondriile. Acest mecanism are la baz natura bifuncional a enzimei ribulozo 1,5 - difosfat carboxilaz (Ru DP carboxilaz) care n cloroplaste, n fotosintez catalizeaz carboxilarea 1,5 difosforibulozei, ducnd la sinteza a dou molecule de acid 3-fosfogliceric, iar n fotorespiraie catalizeaz oxidarea 1,5-difosforibulozei, ducnd la sinteza unei molecule de acid 3-fosfogliceric i a unei molecule de acid 1-fosfoglicolic, care prin defosforilare d acidul glicolic. Din acest cauz, enzima a fost denumit RuDP carboxilaz/ oxigenaz. Acidul glicolic este preluat de peroxizomi, organite situate n imediata apropiere a cloroplastelor i oxidat la acid glioxilic i H2O2. H2O2 este descompus sub aciunea catalazei, iar acidul glioxilic este aminat i formeaz prin transaminare aminoacidul glicin. Din glicin, n mitocondrii se sintetizeaz aminoacidul serin, eliberndu-se o molecul de NH3 i una de CO2 serin, eliberndu-se o molecul de NH3 i una de CO2. Serina este utilizat n sinteza proteinelor sau se rentoarce n peroxizomi. Prin transaminare formeaz acidul hidroxipiruvic, care este redus la acid gliceric. Acesta revine n cloroplaste i reintr n ciclul lui Calvin. NH3 este utilizat la sinteza amidelor, iar CO2 se degaj. Se constat c
-

glicina este sursa de CO2 n fotorespiraie, iar eliberarea unei molecule de CO2 necesit captarea a dou molecule de O2. S-a artat c fotorespiraia este deosebit de evident la plantele de tipul fotosintetic C3. Intensitatea ridicat a fotorespiraiei determin o scdere a randamentului fotosintezei. Rolul fotorespiraiei la plante este nc neclar. Unele interpretri consider c n condiii naturale fotorespiraia este un proces de reciclare i transformare a unor produi nedorii (glicolatul i glioxilatul) n glucide i proteine. S-a artat c pentru fiecare dou molecule de acid glicolic formate prin oxigenare, din cei patru atomi de carbon, numai unul este pierdut ca CO 2, iar ceilali trei sunt returnai n cloroplaste, recuperndu-se astfel 75% din totalul compuilor cu C formai. Alte interpretri consider fotorespiraia ca un mecanism de protecie a aparatului fotosintetic mpotriva excesului de O2 care este un inhibitor al fotosintezei i al fotodistrugerii la intensitate luminoas i temperatur ridicat sau stress hidric. Referitor la productivitatea plantelor ns, pierderile datorate fotorespiraiei la plantele de tipul fotosintetic C3 ajung la 40-50% din carbonul fixat n fotosintez, n timp ce respiraia la ntuneric determin pierderi de maxim 20%. Prin cercetri experimentale s-a demonstrat c la diferite specii, de exemplu Arabidopsis thaliana, fotorespiraia nu este absolut indispensabil. Suprimarea funciei de oxigenaz a enzimei RuDP carboxilaz pe timp de 20 de generaii a determinat obinerea de plante viguroase i normale. Aceast descoperire deschide perspective practice foarte importante, de dirijare a productivitii plantelor cultivate. Sporirea randamentului fotosintetic i al productivitii ar putea fi obinut prin eliminarea sau reducerea fotorespiraiei, prin suprimarea pe cale genetic a activitii de oxigenaz, fr afectarea activitii de carboxilaz a enzimei RuDP carboxilaz.

5.5.3. Tipul fotosintetic C4 Cercetarea fotosintezei la diferite plante a artat o intens capacitate fotosintetic la unele specii de origine tropical i subtropical. Prin studiul mecanismului fotosintezei la aceste specii prin metoda izotopilor radioactivi cu C14, s-a constatat c modul de fixare a CO2 difer de modelul descris de Calvin. Primele rezultate au fost obinute n 1963 de Tarcevscki i Karpilov la porumb, iar n 1965- 1966 de Kortschak i colab. i respectiv de Hatch i Slack la trestia de zahr. Cercetrile demonstreaz c la aceste plante primul produs al fotosintezei nu este acidul fosfogliceric i respectiv aldehida fosfogliceric (produi C3), ci acizii malic i asparagic care conin 4 atomi de C (produi C4). Acidul fosfogliceric apare ulterior, ca produs intermediar ntre acetia i glucidele simple (glucoz i fructoz). Acceptorul CO2 nu este 1-5 difosfo- ribuloza, ci acidul fosfoenolpiruvic care fixeaz CO2 din atmosfer i l cedeaz ulterior 1-5 difosforibulozei din ciclul Calvin. Spre deosebire de ciclul Calvin, numit i ciclul acizilor tricarbonici (tipul fotosintetic C3), acest ciclu a fost denumit ciclul acizilor tetracarbonici (tipul fotosintetic C4). Aceste plante prezint deosebiri anatomice, citologice, biochimice, fiziologice i ecologice fa de cele aparinnd tipului fotosintetic C3. Din punct de vedere anatomic, celulele mezofilului sunt de dou tipuri i anume: celule normale de parenchim asimilator tipic i celule modificate, grupate n jurul fasciculelor conductoare, sub forma unei teci fasciculare sau endoderm fascicular. Din punct de vedere citologic, celulele normale ale mezofilului conin cloroplaste mari i puin amidon, de tip granal, pe cnd celulele tecii fasciculare conin numai cloroplaste de tip agranal sau amiloplaste. Din punct de vedere biochimic, reaciile biochimice ale tipului fotosintetic C4 decurg n 4 etape. Dintre acestea, primele dou au loc n celulele mezofilului, iar celelalte dou au loc n celulele tecii fasciculare. 1.n celulele mezofilului, n prima etap are loc fosforilarea acidului piruvic i formarea acidului fosfoenolpiruvic, catalizat de enzima fosfoenolpiruvatsintetaza. Aceast enzim este activat numai n prezena luminii. 2. n a doua etap are loc carboxilarea acidului fosfoenolpiruvic sub aciunea enzimei fosfoenolpiruvat carboxilaza (PEP carboxilaz) i formarea acidului oxalilacetic, un compus instabil care se transform rapid, prin aminare n acid malic sau asparagic, sau n srurile acestora. Formarea predominant a acidului malic sau asparagic, primii produi stabili n tipul fotosintetic C4 este n funcie de specie. Astfel, la trestia de zahr, porumb i sorg predomin sinteza acidului malic, iar la Amaranthus edulis i Atriplex spongiosa predomin sinteza acidului asparagic. 3. n celulele tecii fasciculare, n a treia etap are loc transcarboxilarea, transferul de CO 2 ntre acizii cu 4 atomi de C i 1,5 difosforibuloza (RuDP), acceptorul CO2 din ciclul lui Calvin. Reacia este catalizat de enzima transcarboxilaz. 4. n a patra etap are loc decarboxilarea acizilor cu 4 atomi de C i regenerarea acidului piruvic. Sistemul PEP fixeaz CO2 atmosferic numai pentru a-l ceda mai departe reaciilor din ciclul lui Calvin. Rezultatele experienelor efectuate la trestia de zahr arat c dup 1-2 secunde, C14 se gsete n proporie de 95% n acizii malic i asparagic, iar acidul 3-fosfogliceric apare n secundele imediat urmtoare, ca produs intermediar ntre compuii C4 i hexoze. Necesitatea energetic n aceaste reacii este de 5 molecule ATP i 2 molecule NADPH2 pentru fiecare molecul de CO2, fa de 3 molecule ATP i dou molecule NADPH2 n ciclul lui Calvin. Pentru fiecare molecul de CO2 asimilat se folosesc dou molecule de ATP pentru regenerarea acidului fosfoenolpiruvic. Cheltuiala suplimentar de energie este completat de o intensitate fotosintetic mai ridicat. Se constat o activitate enzimatic mult mai intens. Astfel, enzima fosfo-enolpiruvatcarboxilaza, ce catalizeaz fixarea CO2 pe acidul fosfoenolpiruvic, prezint o capacitate de fixare a CO2 mult mai mare dect cea a enzimei ribulozo 1,5 - difosfat carboxilaz la tipul fotosintetic C3. Ea reprezint o aa - numit pomp biochimic de CO2, pentru desfurarea ciclului lui Calvin.
-

Din punct de vedere fiziologic se constat o difereniere topografic, i anume: fixarea CO 2 atmosferic i formarea acidului malic i asparagic se realizeaz n celulele normale ale mezofilului, pe cnd desfurarea ciclului Calvin se realizeaz n celule tecii fasciculare. Folosindu-se C14 O2, s-a artat c concentraia CO2 n celulele tecii fasciculare poate atinge 60 M, de 10 ori mai ridicat dect la plantele de tip fotosintetic C 3 (Edwards i Walker, 1983). Concentraia ridicat de CO2 inhib fotorespiraia i favorizeaz realizarea unei intensiti fotosintetice ridicate. Temperatura optim pentru desfurarea reaciilor metabolice, n special a activitii enzimei fosfoenolpiruvat carboxilaz, este de 30 450C, fa de plantele de tip fotosintetic C3, la care temperatura optim este de 22 250C. Fa de plantele de tip fotosintetic C3 la care fotorespiraia este de 3-5 ori mai intens dect respiraia la ntuneric i reprezint 20-50% din fotosinteza real, la plantele de tip fotosintetic C 4 fotorespiraia este aproape nul, de circa 10 ori mai slab dect respiraia la ntuneric, iar fotosinteza real este mult mai ridicat. Transportul asimilatelor este de 3 ori mai intens, eficiena fotosintezei este de 5-6 ori mai mare, intensitatea creterii este dubl, iar producia de substan uscat crete de la 22,0 la 38,6 t/ha. Din punct de vedere ecologic plantele ce aparin tipului fotosintetic C4 provin din regiuni tropicale i subtropicale, fie calde i umede, fie deerturi aride. Aceast cale fotosintetic reprezint o adaptare ecologic la aciunea mediului extern; n condiii de stress, deficit sau exces de umiditate, care determin perturbarea deschiderii stomatelor i ptrunderea normal a CO2 n mezofil, plantele s-au adaptat prin a-i mri capacitatea de fixare i rezerv de CO2. n acelai timp, plantele folosesc excesul de lumin din aceste zone pentru sinteza suplimentar de ATP. Modelul fotosintezei descris la plantele de porumb i trestie de zahar a fost ntlnit la circa alte 1500 specii, din 18 familii de Angiosperme (15 dicotiledonate i 3 monocotiledonate) de origine tropical i subtropical (Raghavendra i DAS, 1978). Dintre plantele de cultur, la acest grup mai aparin meiul i sorgul, iar dintre plantele spontane din regiunile noastre, pirul gros (Cynodon dactylon), specii de lobod (Atriplex) sau tir (Amaranthus). Dintre plantele ornamentale la tipul fotosintetic C4 aparin Gomphrena globosa, Portulaca oleracea, Amaranthus caudatus i A. dubius. Lista de specii este completat cu numeroase monocotiledonate (Gramineae, Liliaceae, Cyperaceae) i dicotiledonate (Chenopodiaceae, Asteraceae i Amaranthaceae). Cunoaterea tipului fotosintetic C4 prezint o importan practic foarte mare, constituind n prezent una dintre cele mai importante direcii de cercetare n fotosintez. Astfel, eficena ridicat a fotosintezei poate fi utilizat n practic la obinerea unor forme cu productivitate mare. Pentru aceasta, se poate folosi potenialul genetic al speciilor spontane, n vederea obinerii unor hibrizi valoroi n cultur. Cile de obinere a unor plante cu productivitate ridicat sunt (Wittwer, 1973): - selecionarea soiurilor i varietilor cu eficien fotosintetic ridicat; - mrirea capacitii de absorbie a luminii; - administrarea unor substane care s inhibe fotorespiraia; - modificarea balanei fotosintez / fotorespiraie pe cale genetic, fizic i chimic. 5.5.4. Tipul fotosintetic al metabolismului acid de tip crassulacean (CAM) O serie de plante suculente, n special din familia Crassulaceae, dar i dintre Cactaceae i Liliaceae au proprietatea de a absorbi i fixa CO2 la ntuneric. Acceptorul CO2 este i n acest caz, acidul fosfoenolpiruvic, sub aciunea enzimei fosfoenolpiruvatcarboxilaza. n urma fixrii CO2 n timpul nopii, n celulele mezofilului se sintetizeaz acid malic, care produce scderea pH-ului n vacuole de la 6 la 4. La lumin, n timpul zilei, CO2 este cedat de ctre acidul malic 15 difosforibulozei i utilizat n ciclul lui Calvin pentru sinteza glucidelor. n vacuole pH-ul revine de la 4 la 6. Deoarece aceast cale fotosintetic se desfoar prin modificarea pH-ului vacuolar datorit creterii aciditii, a fost denumit metabolism acid de tip crassulacean (CAM).

Din punct de vedere biochimic, acest tip fotosintetic se aseamn cu tipul C4 prin natura acceptorului, dar se deosebete de aceasta prin faptul c reaciile chimice sunt separate temporar, ziua i noaptea, dei se desfoar n aceleai celule. Din punct de vedere ecologic, Ca i tipul C4, tipul metabolismului acid reprezint o adaptare la condiiile ecologice de insolaie puternic i umiditate sczut. n timpul zilei stomatele sunt nchise n vederea reducerii transpiraiei i se deschid numai noaptea. Plantele s-au adaptat la fixarea i stocarea CO2 n aceste condiii. Plantele au o capacitate remarcabil de a pstra apa, fiind suculente i prezint caractere de xeromorfism. Tipul fotosintetic CAM este ntlnit la 23 de familii de Angiosperme i o familie de ferigi, plante de origine tropical. Pentru diferite specii, tipul fotosintetic CAM apare ca reacie la condiiile de stress hidric, provocate de secet i salinitate (Herppich i Herppich, 1997), uneori avnd un caracter facultativ. La Sedum telephinum acest fenomen este nsoit de o sporire a potenialului de pstrare a apei (Borland, 1996). La Mesembryanthemum crystallinum, metabolismul CAM din frunze este provocat de stressul hidric din sol, perceput de ctre rdcin (Eastmond i Ross, 1997). Tratamentul cu citochinine mpiedic instalarea tipului fotosintetic CAM, inhib apariia enzimei fosfo-enolpiruvat carboxilaz i determin rezistena la stressul hidric prin scderea coninutului de ap din frunze i acumularea prolinei (Peters i colab., 1997). La Kalanchoe daigremontianum, tipul fotosintetic CAM poate fi considerat un mecanism de protecie i mpotriva aciunii toxice a unor poluani, de exemplu SO2 (Miszalski i colab., 1997). Se constat deci c modurile de asimilare fotosintetic a carbonului nu sunt identice la toate plantele. Acestea au fost mult mai inventive dect se poate nchipui n realizarea unor adaptri la condiiile nefavorabile, cum sunt concentraiile sczute de CO2, stressul de ap i temperatura ridicat. Strategiile fiziologice i biochimice pentru colectarea, concentrarea i fixarea CO 2 le egaleaz pe cele realizate n fixarea i transformarea energiei luminoase (Slgeanu i Atanasiu, 1981).

5.6. INFLUENA FACTORILOR EXTERNI ASUPRA FOTOSINTEZEI 5.6.1. Lumina Lumina solar reprezint sursa de energie pentru biosinteza substanelor organice n fotosintez. Soarele emite asupra Pmntului o cantitate enorm de energie evaluat la 9x1022 Kcal/sec. sau 3x1030 Kcal/an, energie ce s-ar obine din arderea a 11 milioane de miliarde tone de crbune. Rezerva energiei solare este practic nelimitat, innd seama de originea sa n reaciile nucleare din Soare. Din aceast energie, Pmntul primete a asea miliarda parte, din care pe scoara terestr ajunge numai 40%, datorit atmosferei care acioneaz ca un filtru. Radiaiile solare sunt unde electromagnetice cu diferite lungimi de und: radiaii vizibile, cu lungimea de und de 390-700nm, radiaii ultraviolete, cu lungimea de und <390nm i radiaii infraroii, cu lungimea de und >700nm. Dintre acestea, numai radiaiile vizibile sunt active fotosintetic, reprezentnd 45% din totalul radiaiilor ce ajung pe scoara terestr, restul sunt inactive. Dintre radiaiile care cad pe plante sunt absorbite 80%. Dintre acestea numai 1% sunt folosite n fotosintez. Plantele prezint adaptri pentru a absorbi o cantitate ct mai mare de radiaii, cum sunt micrile de cretere numite fototropisme, frunzele orientate perpendicular pe direcia razelor de lumin sau deplasarea cloroplastelor n interiorul celulei pentru a absorbi o cantitate ct mai mare de lumin. Radiaiile luminoase vizibile nu sunt uniforme, ci au culori diferite, ROGVAIV, care ntrun anumit amestec compun lumin alb. Nu toate culorile spectrului vizibil sunt absorbite i utilizate n reaciile fotochimice de ctre plante. Plantele absorb intens radiaiile roii, albastre, indigo i violet i nu absorb radiaiile verzi, portocalii i galbene. Aceste culori reprezint culorile pigmenilor fotosintetici, clorofila i pigmenii carotenoizi. Absorbia energiei solare din spectrul vizibil se face cu viteze foarte mari, apropiate de viteza luminii. Conform teoriei corpuscular-ondulatorii, lumina solar se propag sub form de unde electromagnetice, numite fotoni. Fiecare foton posed o cantitate de energie numit cuant, cu valoarea: E=h (erg), n care: h = constanta lui Planck (6,626 x 10-27erg/sec.), = frecvena c/, unde: c = viteza luminii (2,9979 x 1010 cm/sec.), = lungimea de und (cm) Conform legii transformrii i conservrii energiei, energia luminii solare absorbit de ctre plant este transformat n energie chimic potenial, acumulat n substan organic. Din cantitatea de energie luminoas solar care ajunge pe Pmnt plantele verzi utilizeaz n fotosintez numai 0,1-0,2%. Cercetrile presupun c teoretic, acest randament ar putea spori de 50-100 de ori, pn la utilizarea a 8-10% din lumina solar. Din cantitatea de lumin ajuns pe suprafaa frunzei, n fotosintez este utilizat numai 25%. Restul este neutilizat, fiind repartizat astfel: - 15% este reflectat de suprafaa frunzelor; - 10% traverseaz frunzele, fr a fi absorbit; - 70% este absorbit de frunze, dar este transformat n cldur, fiind consumat n procesul de transpiraie i eliberat n mediu. Coeficientul de utilizare a energiei luminoase n fotosintez variaz n funcie de specie avnd urmtoarele valori: (Slgeanu i Atanasiu, 1981): 2,1 % - sfecl; 2,6 % - secar de toamn; 3,0% - cartof 3,3% - ovz i gru de primvar 2,9 - 3,5 % orz;

Studiul coeficientului de utilizare a energiei solare n fotosintez prezint o importan deosebit n scopul sporirii intensitii fotosintezei, de care depinde sporirea recoltei agricole la plantele de cultur. Calculele statistice arat c randamentul energetic al unei producii de 5t boabe/ha la porumb este echivalat de producii de 36 t/ha la sfecla de zahr, 22 t/ha la cartof, 4,5 t/ha la floarea soarelui, 43 t/ha la mere, 72 t/ha la tomate, 75 t/ha la varz. Lumina exercit asupra fotosintezei o influen cantitativ i o influen calitativ. Influena cantitativ se refer la intensitatea luminii. n funcie de intensitatea luminii plantele se clasific n plante heliofile, adaptate la o intensitate luminoas ridicat (helios = soare) i plante ombrofile, adaptate la o intensitate luminoas sczut. Dintre plantele heliofile cultivate n zona temperat fac parte grul, porumbul, floarea soarelui i via de vie. La aceste plante, fotosinteza ncepe la o intensitate luminoas de 80-100 de luci. Intensitatea fotosintezei crete proporional cu intensitatea luminii pn la 50.000 de luci. Peste aceast valoare are loc o plafonare a fotosintezei pn la 100.000 de luci. La o intensitate luminoas mai mare de 100.000 de luci, intensitatea fotosintezei scade, iar la 140.000 de luci fotosinteza nceteaz . Intensitatea luminoas ridicat provoac la plante fenomenul de solarizaie. Acesta se datorete n primul rnd efectului caloric al luminii care provoac intensificarea transpiraiei urmat de deshidratare, nchiderea stomatelor i intensificarea respiraiei. Are loc fotooxidarea aparatului fotosintetic, degradarea structurii cloroplastelor i a clorofilei, inactivarea enzimelor proteosintetice, intensificarea activitii enzimelor hidrolizante n special n metabolismul glucidic. Fenomenul duce la ofilirea i uscarea plantelor. Fa de intensitatea luminii ntr-o zi nsorit de var de 100.000 de luci se constat c plantele heliofile pot valorifica 50% din lumina solar direct. La plantele heliofile punctul de compensaie, respectiv intensitatea luminii la care cantitatea de CO2 absorbit n fotosintez este egal cu cantitatea eliminat n respiraie are valoarea de 500-1000 de luci. Frunzele plantelor heliofile prezint caracteristici morfo-anatomice i fiziologice cum sunt grosimea mare, numrul mare de stomate, parenchimul palisadic bi- sau tri-stratificat, reeaua dens de nervuri, cloroplastele mici, cu cantitate de clorofil mai redus, raportul redus ntre pigmenii verzi i pigmenii galbeni. Plantele ombrofile sunt plantele din pduri, desiuri sau plantele ornamentale de apartament. La aceste plante, fotosinteza ncepe la o intensitate luminoas de 8-10 luci i crete proporional cu intensitatea luminii pn la valoare de 10.000 de luci. Peste aceast valoare are loc o plafonare a fotosintezei pn la 15.000 de luci, dup care intensitatea fotosintezei scade. Se constat c plantele ombrofile pot valorifica numai 10% din lumina solar direct. La plantele ombrofile punctul de compensaie este de 100-300 de luci. Frunzele au grosime mic, numr redus de stomate, parenchim palisadic unistratificat, reea rar de nervuri, cloroplaste mari cu o cantitate mare de clorofil, iar raportul dintre pigmenii verzi i cei galbeni este ridicat. Plantele heliofile sunt n general originare din zonele sudice. Din aceast categorie fac parte plantele de tip fotosintetic C4 i CAM. Plantele ombrofile sunt originare n general din zonele temperate i nordice. Cunoaterea intensitii luminii care asigur o fotosintez optim are o importan deosebit practic n stabilirea densitii culturilor, att n condiii de cmp ct i n spaii protejate. n coroana arborilor exist o adaptare a frunzelor la condiiile de iluminare, astfel c frunzele din centrul coroanei au un caracter ombrofil, iar cele de la exteriorul coroanei, expuse la lumin direct au un caracter heliofil. n livezile de mr, o umbrire de 60% a redus fotosinteza cu 12% i a micorat transportul asimilatelor, a sczut raportul rdcin/organe aeriene i a redus creterea vegetativ i fructificarea. Frunzele expuse la soare, la exteriorul coroanei, au prezentat parenchim palisadic bistratificat, iar frunzele din interiorul coroanei au avut o suprafa mai mare, dar o greutate i o
-

grosime mai mic. Umbra a redus diametrul i lungimea lstarului, precum i lumgimea internodurilor n interiorul coroanei (Chen i colab., 1997). n livezile de piersic, intensitatea luminii are rolul cel mai important n timpul coacerii fructelor, stimulnd creterea i calitatea acestora. cea mai eficient tehnic de a favoriza ptrunderea luminii este reprezentat de tierile de var (Marini, 1997). La via de vie experienele au stabilit punctul de compensaie de 200-2000 de luci, iar lumina de saturaie 200-40.000 luci, cnd eficiena utilizrii apei i concentraia CO2 intracelular sunt maxime (Shiroshi i colab., 1997). Creterea distanei ntre rnduri n cultur de la 1,25 la 3 m a sporit suprafaa foliar pe butuc i la hectar. Intensitatea fotosintezei a fost maxim la distana de 2,5 m, iar productivitatea frunzei a crescut de la 2,82 g/frunz la distana de 1,25 m la 5,32 g/frunz la distana de 2,5 m. Intensitatea fotosintezei a fost corelat pozitiv cu producia de struguri/butuc (Slavitcheva, 1997). Influena calitativ se refer la compoziia spectral a luminii. Randamentul fotosintezei difer n funcie de culoarea luminii monocromatice. S-a constatat c radiaiile roii, portocalii i galbene favorizeaz biosinteza glucidelor, iar radiaiile albastre, indigo i violet favorizeaz sinteza substanelor proteice. Folosirea luminii monocromatice, roie sau albastr poate fi util n spaiile protejate n dirijarea biosintezei substanelor organice la diferite specii horticole. Aceast metod a permis sporirea produciei la tomate castravei, ardei, salat, spanac i fasole. Astfel la salat plantele cutivate la lumin roie au format mai multe frunze dect la lumina albastr, dar mai puine dect la lumina albastr-roie (Yanagi, 1997). La castravei tratamentele cu lumina albastr, roie i de ambele culori aplicate timp de 2 ore au sporit densitatea stomatelor cu 54%, au dublat conductana acestora i intensitatea fotosintezei, au sporit suprafaa foliar, diametrul tulpinii i greutatea proaspt. 5.6.2. Bioxidul de carbon - CO2 Sursa de CO2 pentru plante o constituie aerul atmosferic. Concentraia CO2 n aer este n general constant, 0,03%. Totui ea sufer variaii diurne i sezoniere. Variaiile diurne sunt mici, datorate scderii prin consumul n fotosintez n timpul zilei i creterii prin degajare n respiraie n timpul nopii. Variaiile sezoniere sunt mult mai mari, cuprind oscilaii de pn la 10% i sunt datorate creterii primvara i toamna i scderii, ca urmare a fotosintezei intense n timpul verii. Concentraia CO2 este uniformizat de curenii de aer care se deplaseaz att pe orizontal ct i pe vertical. Meninerea constant a concentraiei CO2 rezult din echilibrul existent n natur ntre fenomenele care l produc i cele care l consum. Fenomenele productoare de CO2 sunt erupiile vulcanice, mofetele i activitile industriale care implic arderi de combustibil. Cea mai mare cantitate de CO2 este ns produs de respiraia plantelor i a animalelor, fiind de origine biogen. Astfel respiraia uman produce 1,5 milioane de tone de CO2 zilnic i 500 milioane de tone anual. Aceast valoare este depit de respiraia animalelor i mai ales a plantelor, care respir mai mult dect oamenii i animalele la un loc. Rezerva de CO2 pentru atmosfer este reprezentat de apa oceanului planetar. Aceasta conine concentraii de 80 de ori mai mari dect aerul atmosferic. CO2 din ap provine din respiraia animalelor i plantelor marine, din descompunerea acestora, din formarea calcarului din cochilii etc. Concentraia CO2 din sol este de 10 ori mai mare dect n aerul atmosferic, dar ea poate crete pn la valori de 100 - 200 de ori mai ridicate, n special pe solurile bogate n humus unde are loc o puternic respiraie a solului datorat respiraiei rdcinilor plantelor, dar n special a microorganismelor din sol. Principalul proces consumator de CO2 pe planet este fotosinteza. Se apreciaz c plantele consum anual 174 miliarde t de CO2, din care 19 miliarde t sunt consumate de plantele de uscat i 155 miliarde t de plante acvatice. Pe un hectar de plante cultivate se consum zilnic 150 pn la 1000 l CO 2 dintr-un volum de aer de 3-4 milioane m3. Pentru sinteza unui gram de glucoz frunzele consum CO 2 din 250 l

de aer, iar pentru a asigura necesarul caloric al unui om/zi sunt necesari 200.000 l de aer (Milic i colab., 1982). CO2 difuzeaz pn la cloroplastele din mezofil prin intermediul stomatelor. Stomatele ocup 1% din suprafaa frunzei. Difuzia CO2 se realizeaz pe baza legii lui Stephan pentru suprafee mici, dup care: Vdif = 2 r K (C1-C2)/d, n care: Vdif = viteza difuziunii, C1-C2 = gradientul de concentraie, K = constanta ce depinde de natura substanei, d = distana de difuziune, 2r = circumferina porului. S-a artat c viteza de difuziune a CO2 se afl n relaie direct cu diametrul porilor. La plantele de tipul fotosintetic C3 i C4, difuziune a CO2 prin stomate are loc n timpul zilei, pe cnd la tipul fotosintetic CAM n timpul nopii. n cercetri experimentale s-a artat c limita inferioar a concentraiei CO2 la care ncepe fotosinteza este de 0,008 - 0,011%. Concentraia CO2 de 0,03% din atmosfer este apropiat de valoarea de minim necesar fotosintezei. Prin mrirea concentraiei CO2 peste aceast valoare are loc o intensificare a fotosintezei. La concentraii mici de CO2, intensitatea fotosintezei crete proporional cu concentraia. Aceasta se explic prin participarea direct a CO2 n fotosintez dup legea maselor, conform creia n reaciile chimice viteza de reacie crete proporional cu concentraia substanei. Valorile optime ale CO2 pentru fotosintez sunt n medie de 0,2 -0,3 %. Plantele heliofile desfoar fotosinteza maxim la o concentraie de CO2 de 2-3%, iar cele ombrofile la o concentraie de 0,5-1%. La via de vie fotosinteza maxim are loc la o concentraie de 10% CO2. Peste aceste valori, intensitatea fotosintezei scade prin mrirea concentraiei CO2, iar valoarea de 3-10% este toxic. Aciunea toxic a excesului de CO2 se poate datora acidifierii citoplasmei i scderii pH-ului. Acest fenomen determin nchiderea stomatelor. La gru, excesul de CO2 a inhibat activitatea citocromului. Sporirea concentraiei CO2 n atmosfera mediului poate avea efecte de stimulare a fotosintezei, cu efecte de sporire a produciei la diferite plante de cultur. Acest lucru este posibil la culturile legumicole i floricole realizate n spaii protejate nchise, sere sau rsadnie. n sere, concentraia CO2 poate fi mrit prin arderea complet a gazului metan sau prin folosirea de butelii sau conducte cu CO2. n rsadnie se folosesc ngrminte organice care intensific "respiraia solului" mrind concentraia CO2 la nivelul plantulelor. Astfel, la salat, sporirea concentraiei CO2 la 1500 mol/mol a determinat mrirea numrului de frunze i a crescut greutatea uscat a frunzei, mrind de 3 ori coninutul de amidon foliar (Mitchell i colab., 1997). La culturile de crizanteme mbogirea atmosferei cu CO2 la 1000 i 2000 ppm a stimulat creterea tulpinii i frunzelor i a sporit numrul acestora comparativ cu martorul cultivat la o concentraie de 350 ppm. Tratamentul a sporit coninutul de glucide din plante i a prelungit viaa n vas a florilor tiate (Tanigawa i colab., 1995). Bunce (1997) a efectuat tratamente cu concentraia de CO2 de 360 i 700 cm3/m2 la unele plante de cultur: orz, bob, soia, mazre, vinete i tomate n condiii controlate. Rezultatele au demonstrat o intensificare a fotosintezei, care a stimulat intensitatea creterii plantelor.

5.6.3. Temperatura La majoritatea speciilor de plante fotosinteza ncepe la 00C. La cerealele de toamn, de exemplu la gru poate avea loc i la -50C, iar la conifere, de exemplu bradul i molidul, chiar la -70C (Slgeanu i Atanasiu, 1981). De la valorile termice de minim, intensitatea fotosintezei crete cu creterea temperaturii pn la valorile optime, curba evoluiei fotosintezei respect legea lui Van't Hoff, dup care o cretere a temperaturii cu 10 C provoac o cretere de 1,5-2 ori a vitezei reaciilor chimice, deci i a intensitii fotosintezei. Temperaturile optime pentru fotosintez sunt cuprinse ntre 20 C i 35 C, de exemplu 32C la cartof, 35C la tomate i 35 -37 C la castravei i alte cucurbitaceae - plante termofile. La castravei, la temperatura de 35C, intensitatea fotosintezei, activitatea RuDP carboxilazei, greutatea plantei i a fructelor sunt maxime. Valorile de optim ale temperaturii pentru fotosintez sunt influenate de intensitatea luminii. La o intensitate luminoas slab, temperatura optim scade, ajungnd la 100C, n timp ce la o intensitate luminoas ridicat temperatura optim crete. Peste valorile de 35 C intensitatea fotosintezei scade, iar la 45 C fotosinteza real devine nul deoarece respiraia depete valorile fotosintezei aparente. Efectul negativ al temperaturilor ridicate este la nceput reversibil, apoi devine ireversibil. n aceste condiii are loc vtmarea protoplasmei, degradarea cloroplastelor i inhibarea activitii enzimatice. Diferite rezultate experimentale la plantele de cultur demonstreaz c la leguminoasele fasole, mazre i bob, temperaturile de 30/25 C zi/noapte au redus intensitatea fotosintezei prin degradarea clorofilei, apreciat prin scderea fluorescenei acesteia (McDonald i Paulsen, 1997). La cpuni creterea temperaturii solului de la 20 la 30C a produs ofilirea plantelor datorit reducerii fotositezei i scderii substanei uscate (Jiang i Lenz, 1997). 5.6.4. Apa Apa este indispensabil procesului de fotosintez i manifest asupra acestuia o aciune indirect i o aciune direct. Aciune indirect const n participarea la nchiderea i deschiderea stomatelor i n hidratarea optim a celulelor din mezofilul frunzei prin asigurarea turgescenei celulelor stomatice. Prin aceast aciune, apa favorizeaz accesul CO2 la cloroplaste. Aciunea direct const n faptul c apa constituie sursa de H + eliberat prin fotoliz, necesar reducerii CO2 n procesul de sintez a glucidelor. Valorile optime ale coninutului de ap al frunzelor pentru fotosintez sunt de 87-92%, iar ale umiditii aerului de 70-90%. Peste aceste valori are loc mpiedicarea accesului CO2 la cloroplaste prin nchiderea hidropasiv a stomatelor, inundarea spaiilor intercelulare din mezofil, diminuarea respiraiei i a accesului srurilor minerale prin blocarea absorbiei O2. n lipsa apei, n timpul secetei atmosferice la umiditatea de 35-40% i a secetei solului are loc sderea intensitii fotosintezei, iar la coeficientul de ofilire ncetarea complet. Fotosinteza este unul dintre procesele cele mai sensibile la deshidratare. Toate deteriorrile provocate de deshidratare n celule se reflect n activitatea aparatului fotosintetic. La porumb, Moss i colab. (1961) au artat c n condiii de secet frunzele prezint o intensitate fotosintetic sczut, dei nu manifest semne vizibile de ofilire. La gru, n condiii de deficit hidric intensitatea fotosintezei este maxim la intensitate luminoas slab, pe cnd n condiii normale la intensitate luminoas puternic. Seceta reduce capacitatea plantelor de a utiliza intens lumina solar. La coninutul hidric de 40-50% n frunze, fotosinteza aparent este nul (Wardlaw 1969). La floarea soarelui, valorile intensitii fotosintezei (mg subst.usc./dm2/or) n funcie de gradul de hidratare sunt: - 5,2 mg subst.usc./dm2/or la suprasaturare cu ap - 6,5 mg subst.usc./dm2/or la turgescen normal - 8,8 mg subst.usc./dm2/or la deficit uor de ap

- 5,1 mg subst.usc./dm2/or la ofilire - 1,5 mg subst.usc./dm2/or la ofilire puternic La pomi, Schneider i Childers au constatat o scdere a intensitii fotosintezei cu pn la 50%, prin scderea umiditii din sol, la mr. La nuc, transpiraia intens a sczut intensitatea fotosintezei. Raportul dintre fotosintez i respiraie n timpul deshidratrii arat c pe msura stressului hidric, fotosinteza scade rapid, n timp ce respiraia continu, iar fotosinteza aparent devine negativ. Reducerea capacitii fotosintetice n funcie de creterea deficitului de ap variaz n funcie de specie, cele mai sensibile sunt plantele ombrofile. Plantele de cultur sunt mai tolerante, eficiena cea mai ridicat n folosirea apei o au plantele de tipul fotosintetic C4 i CAM. Mecanismul reducerii fotosintezei sub aciunea stressului hidric se datorete unor factori stomatici i unor factori nonstomatici. Fotosinteza este inhibat de stressul hidric prin nchiderea stomatelor. Conductana stomatelor reprezint viteza de difuziune a CO2 prin stomate. Modificarea conductanei stomatelor la stressul de ap moderat prezint un mers paralel cu modificarea fotosintezei la bumbac, tomate, porumb, gru, fasole, soia i mr. Factorii nonstomatici constau n degradarea structurii cloroplastelor, mrirea vscozitii protoplasmei, activitatea hidrolizant a enzimelor, de exemplu la bumbac, sau n distrugerea sistemului de tilacoide la floarea soarelui, n degradarea structurii granale i apariia de vacuole n strom. Deshidratarea a inhibat transportul fotosintetic de electroni i fotofosforilarea. La Beta vulgaris, deshidratarea de 29% i 61% a redus transportul fotosintetic la 32% i respectiv 85% fa de normal (Poljakoff - Mayber, 1997). La Beta vulgaris i Spinacia oleraceea reducerea NADP este afectat de pierderi de ap de 50-60% (Santarius, 1967). El-Sharkwy i Hesketh (1964) au artat c la bumbac i floarea soarelui semnele de ofilire apar naintea reducerii fotosintezei, datorit nchiderii stomatelor. 5.6.5. Nutriia mineral Elementele minerale particip direct i indirect n fotosintez. Azotul intr n componena clorofilei, n alctuirea proteinelor structurale i a enzimelor din cloroplaste, a NADP i n componena aminoacizilor, produi primari ai fotosintezei. Lipsa N a provocat micorarea intensitii fotosintezei la porumb, bumbac i fasole i a sczut coninutul de pigmeni fotosintetici la inul de ulei. La castravei i inul de ulei n lipsa azotului a avut loc degradarea ultrastructurii lamelare a cloroplastelor i apariia de plastoglobuli (Selga, 1983, Vasilic i colab., 1998). Fosforul particip n structura lamelar a cloroplastelor, n structura ATP i NADP, n fosforilarea compuilor intermediari ai fotosintezei. Lipsa P a provocat la floarea soarelui dezorganizarea structurii membranare a cloroplastelor (Fabian i Tiu, 1971). Cercetri efectuate cu C14 au artat c la floarea soarelui lipsa P inhib transportul asimilatelor. Potasiul prezint o funcie important n fotosintez, dei nu are rol structural. Prin caracterul su osmoregulator particip la deschiderea stomatelor favoriznd absorbia CO2. K prezint un important rol catalitic n formarea aparatului fotosintetic i n desfurarea fotofosforilrilor, intensific absorbia P, sinteza i transportul asimilatelor. n lipsa K la floarea soarelui i inul de ulei are loc degradarea structurii lamelare a cloroplastelor prin dilatri ale tilacoidelor. Magneziul particip n componena clorofilei. La fasole, deficiena de Mg a provocat nchiderea stomatelor, scderea coninutului de clorofil i reducerea intensitii fotosintezei (Fischer, 1997). Sulful particip n sinteza proteinelor din cloroplaste, a aminoacizilor cu sulf, produi ai fotosintezei i a glutationului cu rol n reaciile de oxido-reducere. S catalizez biosinteza clorofilei. n lipsa S frunzele sunt clorotice cu nervuri de culoare deschis.
-

Fierul catalizeaz biosinteza nucleilor pirolici din molecula clorofilei i particip n structura citocromilor i a ferredoxinei care efectueaz transferul de e- n faza de lumin a fotosintezei. Tiu i Djendov au artat c n lipsa Fe la floarea soarelui are loc distrugerea sistemului lamelar al cloroplastului, fragmentarea discurilor granale i apariia de vezicule. La piersic, deficiena Fe a micorat coninutul de clorofil, a determinat apariia fenomenului de cloroz i inhibarea reaciilor din sistemul fotosintetic II (SFII) (Neduncherzhia i colab., 1997). Manganul catalizeaz fotoliza apei ca i component al unei enzime, activeaz enzimele adenozintrifosfataz i carboxidismutaz. La tomate, lipsa Mn produce inhibarea fotofosforilrii. Cuprul intr n structura plastocianinei i a polifenoloxidazei, enzim oxido-reductoare ce catalizeaz transferul de e-. Zincul intr n structura anhidrazei carbonice, care favorizeaz difuziunea CO2 prin stomate (Everson, 1970). Borul stimuleaz fosforilrile i biosinteza clorofilei n frunze. Natriul particip n fotosinteza plantelor de tip fotosintetic C4 i CAM. 5.7. DINAMICA DIURN I SEZONIER A FOTOSINTEZEI Dinamica diurn. n regiunile temperate n timpul lunilor de primvar, ct i n timpul lunilor de var, dinamica diurn a fotosintezei se prezint sub forma unei curbe uniapicale. Fotosinteza ncepe dimineaa devreme, se intensific pn la orele amiezii dup care scade, iar seara nceteaz. n timpul lunilor de var, iunie i iulie, la orele amiezii are loc o scdere a fotosintezei datorat valorilor foarte ridicate ale intensitii luminii i temperaturii. Dinamica diurn a fotosintezei se prezint sub forma unei curbe biapicale, caracterizat prin dou maxime, n timpul dimineii i dup amiezii, ntre care se gsete un minim la orele amiezii. Aceeai dinamic a intensitii este nregistrat i n regiunile secetoase. Dinamica sezonier. n decursul perioadei de vegetaie fotosinteza ncepe primvara, devine maxim n frunzele mature n timpul verii i scade n intensitate spre toamn, datorit reducerii suprafeei foliare, a intensitii luminii i temperaturii.