Biotehnologii de producere a drojdiilor furajere utiliznd diferite substraturi
Drojdiile furajere ob inute pe solu ii bisulfitice i prehidrolizate lemnoase
Celuloza reprezint principalul component chimic al plantelor superioare, ea putndu-se obine prin solubilizarea substanelor care o nsoesc cum sunt: lignina, hemiceluloza, grsimile, taninurile etc. Lemnul n funcie de esen (moale sau tare conine: !"-!#$ celuloz, %&- '&$ hemiceluloz, ()- '($ lignin *i (- +$ substane e,tracti-e neazotate. .n procesul de obinere a celulozei, lignina este principala substan care trebuie eliminat, proces numit delignificare sau dezincrustare. /elignificarea se realizeaz prin fierbere la temperatur *i presiune ridicat, n prezena unor substane chimice specifice. .n urma ndeprtrii ligninei 01 pasta de celuloz. 2liberarea celulozei de ncrustare are la baz proprietatea unor substane de a reaciona mai repede cu lignina dect cu polizaharidele. 3nul din procesele de baz folosite la fabricarea celulozei l constituie procedeul bisulfit. .n urma obinerii celulozei prin acest procedeu se obin cantiti mari de ape reziduale estimate la +- (" m ' 4 t de celuloz. Soluia sulfitic rezidual (poart *i denumirea de leie, se separ n timpul procesului tehnologic al fabricrii celulozei, n urma splrii materialului lemnos rezultat din fierberea lemnului. Le*iile bisulfitice reziduale sunt lichide brune sau galben- brune, cu un coninut de ("- (&$ 53, din care substanele organice dizol-ate din lemn reprezint 6 +"$. /ensitatea le*iilor este cuprins ntre (,"!"- (,"#" g4 cm ' . 3tilizarea soluiilor bisulfitice ca substrat de culti-are a dro7diilor a urmrit: -alorificarea substanelor organice dizol-ate din lemn n urma fierberii acestuia, care sunt n cantiti foarte mari (aproape egale cu ale celulozei fabricate. reducerea cantitii substanelor noci-e *i poluante de-ersate n cursurile de ap, care ucid flora *i fauna rurilor. Compoziia soluiilor sulfitice reziduale depinde de: sortimentul de celuloz fabricat, specia de lemn utilizat, tehnologia de fabricaie utilizat etc. 5ubstana organic este reprezentat n principal de lignosulfonai *i glucide (din care monoglucidele- arabinoz, xiloz, manoz, glucoz, galactoz reprezint circa +"- +&$. Calitatea mediului de cultur este influenat pe de o parte de compu*ii chimici care influeneaz poziti- dez-oltarea celulelor de dro7die, iar pe de alt parte de substanele care inhib dez-oltarea dro7diilor: 58 % liber, sulfiii acizi, furfurolul, srurile de Cu *i 9s. 58 % liber este principalul component nedorit din le*iile bisulfitice, care se poate ndeprta prin insuflarea unui -olum de aer de 6 & m ' 4 h4 m ' le*ie. :regtirea le*iilor reziduale pentru culti-area dro7diilor necesit urmtoarele operaiuni: omogenizarea soluiilor; diluarea soluiilor cu o concentraie prea mare de substane inhibitoare; in-ertirea oligozaharidelor n molecule mici, asimilabile; ndeprtarea compu*ilor -olatili duntori; neutralizarea soluiilor cu lapte de -ar *i amoniac; adugarea unor substane nutriti-e: surse de < asimilabil, macro *i microelemente, -itamine etc. Genuri i specii de drojdii folosite n cultur pe leii bisulfitice genul Candida (Candida robusta, Candida tropicalis, Candida utilis, Candida arboreea; genul Trichosporon (Trichosporon cutaneum, Tr. pullulans; genul Torulopsis (Torulopsis candida, T. Holmii, T. Formata; genul Cryptococcus genul Hansenula Candida robusta are coninutul cel mai mare n protein brut, iar Candida arboreea are randamentul cel mai bun de utilizare a zaharurilor. La fabricarea dro7diilor fura7ere se pot folosi *i amestecuri de %-' specii, care permit obinerea unei biomase cu un coninut proteic ridicat *i cu un randament bun de transformare a substratului. Fluxul tehnologic al cultirii drojdiilor pe soluii bisulfitice /ro7diile se culti- n sistem discontinuu submers, n fermentatoare o,igenate cu aer sterilizat comprimat, la un p= de !,&- &,! *i temperatur de '"-'& " C. .n timpul aerrii se produce o spum abundent care se poate elimina prin di-erse metode fizice *i chimice. 5epararea dro7diilor din mediul de cultur se realizeaz cu a7utorul unor separatoare centrifugale de mare turaie obinndu-se o >crem? de dro7die. 9ceasta este supus unor splri *i centrifugri repetate 01 o past de dro7die cu un coninut de dro7die de (%- ('$, care este pompat apoi spre instalaia de e-aporare (concentrare care realizeaz concentrarea pastei de dro7die la %'- %&$. 9ceast instalaie cuprinde un pre!nclzitor (la #" " C, un plasmolizor (rupe peretele celular al dro7diilor *i un e"aporizator (are loc e-aporarea apei. .naintea prenclzitorului se poate monta o instalaie de iradiere cu radiaii ultra-iolete n scopul transformrii ergosterolului *i a cre*terii coninutului dro7diilor n -itamina /. /e aici, pasta de dro7die este pompat ctre instalaia de uscare prin atomizare sau cu a7utorul usctoarelor cu -aluri. @odul de uscare infleneaz att umiditatea ct *i culoarea, gustul *i aspectul dro7diilor. Cele mai bune rezultate se obin n cazul folosirii instalaiei de uscare prin atomizare: un disc rotati- la o turaie ridicat ()- #""" rot.4 min pul-erizeaz pasta de dro7die concentrat n picturi microscopice spre pereii atomizorului care este strbtut de un curent de aer cald cu temperatura de '"" " C la intrarea n atomizor, respecti- de ("" " C la ie*irea din atomizor. 9cesta determin e-aporarea rapid a apei *i transformarea dro7diilor ntr-o pulbere de culoare glbui- maronie cu miros plcut. /ro7dia uscat cade n partea inferioar a atomizorului, apoi ntr-o baterie de cicloane n care se sedimenteaz pulberile *i se rce*te dro7dia. /e aici cu a7utorul unor transportoare , dro7dia a7unge n silozuri *i la instalaia de nscuire. :rodusul finit are A"- A'$ 53 ceea ce i asigur o bun conser-abilitate. Drojdiile ob inute din prehidrolizate lemnoase :rehidrolizatele de lemn au un coninut ridicat n zaharuri *i n furfurol, constituind o materie prim a-anta7oas pentru cultura dro7diilor fura7ere *i obinerea furfurolului. /ro7diile din prehidrolizatele lemnoase se fabric dup o tehnologie asemntoare cu a dro7diilor din le*iile bisulfitice. :rincipalele dro7dii *i amestecuri de dro7dii culti-ate pe prehidrolizatele lemnoase sunt: candida scotti, Candida arboreea, Candida robusta, C. arboreea B C. robusta, C. Cropicalis B C. Dobusta. .nainte de introducerea n fermentator, prehidrolizatele sunt diluate pentru reducerea concentraiei substanelor inhibitoare *i se trateaz cu sruri nutriti-e necesare dez-oltrii dro7diilor. 5uspensia de dro7dii se separ prin flotare, iar apoi n urma unei centrifugri n dou trepte a7unge la concentraia de !&"- &"" g.4 l. :asta de dro7die este supus apoi e-aporrii *i uscrii prin atomizare. Ca medii de cultur pentru dro7dii pot fi folosite *i apele de splare a plcilor fibrolemnoase fabricate din rumegu* (:.E.L. *i din de*euri pro-enite de la industrializarea lemnului. Eabricarea dro7diilor prin procedeul #e$ino utilizeaz medii care conin: leii bisulfitice reziduale, glucide din industria alimentar *i acidul acetic. Eermentaia are loc la '+ " C *i p= de !,# timp de '-& ore. @icroorganismul folosit pentru culti-are este microciuperca #ecilomyces "ariotti care poate fi separat prin filtrare *i apoi este deshidratat prin presare mecanic. /ro7diile fura7ere obinute din soluii bisulfitice *i prehidrolizate lemnoase se caracterizeaz printr-o -aloare nutriti- ridicat *i o to,icitate sczut putnd fi folosite cu bune rezultate n hrana porcinelor, psrilor *i -ieilor. Drojdiile furajere ob inute pe melas! borhot de melas i borhot de la fabricile de bere /ro7diile fura7ere care se culti- pe melas *i borhot de melas sunt cele din specia Torula utilis *i Candida lipolitica. @ediile nutriti-e sunt reprezentate de melas cu &"$ zahr sau pe amestec de melas *i borhoturi de melas n sistem continuu de fermentare, la temperatura de '"- '& " C *i p= !,&- &,%. Elu,ul de fabricaie este asemntor cu cel descris anterior, dro7dia fiind deshidratat prin atomizare sau pe -aluri. /in ! tone de melas cu &"$ zahr01 o ton de dro7die. /ro7dia fura7er de la fabricile de bere se obine n timpul fermentaiei primare a mustului de bere rezultat din cultura pe orz a dro7diei %accharomyces carlbergensis. /ro7dia se separ din tancurile de fermentare prin sedimentare, iar apoi este deshidratat prin uscare pe -aluri. Drojdia furajer ob inut pe "# parafine .n petrol se gsesc toate tipurile de hidrocarburi, printre care *i hidrocarburi saturate de tipul alcanilor cu caten linear, numii n- parafine. 3tiliznd ca substrat n- parafine cu puritate de peste A&$, dro7diile le pot metaboliza n ntregime, 01 ( Fg de biomas dintr-un Fg de n-parafine consumate. /ro7diile fura7ere fabricate prin aceast tehnologie au un coninut de substane aromatice situat sub pragul de to,icitate pentru animale. :entru cultura dro7diilor cel mai mult se folosesc n-parafine cu un coninut ntre (! *i %% atomi de carbon (lichide, dar se pot utiliza *i parafine solide n urma dizol-rii acestora ntr-un sol-ent adec-at. /ro7diile culti-ate pe hidrocarburi aparin genului Candida: Candida guilliermondii, C. intermedia, C. lipolytica, C. tropicalis, C. rugosa, genurilor #ichia *i &ebaryomyces. /ro7dia fura7er se obine din n- parafine prin culti-area microorganismelor pe medii sterilizate, reprezentate de n- parafine *i sruri minerale, n sistem discontinuu submers, n fermentatoare de mare capacitate alimentate cu aer sterilizat comprimat la temperatura de '" " C *i p= de !,&- &. .n bioreactoare se asigur o,igenarea continu a mediului de cultur prin agitare *i rcirea acestuia pentru eliminarea cldurii produs de biotransformarea n- alcanilor. :rodusul de fermentaie este concentrat prin centrifugare *i dezhidratat prin atomizare pn la A%- A'$ 5.3. Giomasa proteic obinut are o compoziie *i o calitate asemntoare cu cea produs pe mediile glucidice tradiionale. .nc din anul (A#) la Le-Hra (Erana se culti-au dro7dii pe motorin la o capacitate de circa %".""" t4 an. .n 5coia la Irangemuth pentru obinerea dro7diilor fura7ere se folosesc n- parafine purificate. .n Domnia la Curtea de 9rge* a fost construit uzina Doniprot cu o capacitate de )".""" t4 an. Drojdia furajer ob inut pe metanol @etanolul reprezint unul din cele mai importante substane folosite pentru producerea dro7diilor fura7ere datorit a-anta7elor pe care le prezint: este disponibil n cantiti mari; se dilueaz u*or n mediul apos de culti-are; prezint un pericol de manipulare redus comparati- cu metanul de la care pro-ine; permite obinerea unei biomase proteice de dro7dii cu o to,icitate redus; randamentul de transformare al metanolului n biomas este de %:(. /ro7diile capabile s utilizeze metanolul ca surs de carbon *i energie sunt cele aparintoare genurilor: Candida, Criptococcus, Hansenula, 'hodotorula, Torulopsis i #ichia. 5ubstratul format din metanol, amoniac, sruri minerale *i o,igen este transformat n biomas, C8 % , ap *i cldur. Culti-area dro7diilor se face n flu, continuu, rata de alimentare cu mediu proaspt fiind egal cu rata de e-acuare a biomasei. /ro7diile culti-ate pe metanol au un coninut ridicat n protein brut (cu un coninut ridicat n lizin, leucin *i acid glutamic *i sczut n metionin, au un coninut sczut n celuloz brut *i un coeficient de digestibilitate de peste A"$. .n ara noastr, procedeul de obinere a biomasei proteice de dro7dii din metanol a fost stabilit la Jnstitutul de Cercetri Chimico- Earmaceutice Gucure*ti. :rocedeul a fost pus n aplicare la staia pilot de la Curtea de 9rge* unde dro7dii metilotrofe au fost culti-ate n flu, continuu. Drojdiile furajere cultiate pe etanol 2tanolul (alcoolul etilic folosit ca substrat prezint o serie de a-anta7e cum sunt: este disponibil n cantitate mare sub form pur; nu este to,ic; este u*or de depozitat *i transportat; este u*or solubil n ap; nu este inhibitor pentru ma7oritatea microorganismelor; elibereaz mai puin cldur dect alte substane hidrocarbonate /eza-anta7e: cost relati- ridicat de producie ; este u*or -olatil ; poate fi u*or contaminat, fiind folosit de multe specii de microorganisme ca surs de carbon. Obinerea proteinelor din drojdii pe etanol se realizeaz n condiii aseptice *i n concentraii limitate de substrat (&-("$ etanol, la o rat de cre*tere nalt care s asigure un randament *i un coninut proteic ma,im n produsul finit. 5oluiile apoase ale componentelor mediului de cultur sunt sterilizate la (%"- ('" " C iar apoi sunt introduse n fermentator. Cemperatura de culti-are a dro7diilor este de '"- '& " C iar p=-ul de ',&- &,& (preferabil !. Giomasa se recolteaz prin centrifugare *i este uscat apoi prin atomizare. .n 5.3.9. 9merican 8il CompanK a contruit o staie de obinere a dro7diilor din etanol cu o capacitate de #,& t4an n =utchinson @inesota utiliznd dro7dia Corula. @itsubishi :etroleum CompanK din Laponia a crescut o tulpin de Cadida pe etanol, staia pilot a-nd capacitatea de ("" t4an. .n Cehia la Mo7etin N (.""" t4 an. Costul ridicat al etanolului scade economicitatea acestui proces, soluia constnd n obinerea unor cantiti mari de etanol din resurse noi care s scad preul de producie al acestuia. Drojdiile furajere ob inute pe alte substraturi .n Erana nc din (A#A se folosea lactoza din zerul de la fabricile de brnzeturi ()""" t4 an, sau amidonul nehidrolizat din manioc (Candida tropicalis. .n 3.D.5.5. au fost folosite n cantiti mari turba i subprodusele celulozice din agricultur. .n Domnia la J.G.<.9.- Galote*ti a fost culti-at dro7dia Candida utilis pe substrat bazat pe fin de porumb 01 procedeul protamid (%,&$ protein brut caracterizat printr-un coninut de %-' ori mai ridicat n aminoacizi eseniali dect al proteinei din porumbul boabe. 5tudiile care au loc n Jnstitutele de Cercetri Giotehnologice -or contribui la identificarea *i utilizarea unor noi tipuri de dro7dii, capabile s -alorifice o gam larg de substraturi n -ederea producerii biomasei proteice folosite n hrana animalelor. $tilizarea drojdiilor furajere n hrana animalelor .n hrana "acilor de lapte, dro7dia fura7er are un efect bun asupra produciei *i a coninutului n grsime a laptelui. 5ub form uscat se poate da la -aci (-% Fg4 zi. La "iei s-au obinut rezultate bune prin adaosul a ("" g dro7die uscat4 zi. La oile de reproducie se pot da pn la '"" g4 zi. 9daosul de dro7die fura7er n hrana tineretului porcin determin cre*terea sporului zilnic *i o mai bun -alorificare a hranei, reprezentnd pentru aceast categorie unul dintre cele mai -aloroase nutreuri. .n nutreurile combinate pentru purcei (n perioada de alptare *i (nrcai, dro7dia fura7er poate reprezenta (- %$, respecti- %- !$. La purcei de )* + luni se pot da &"- ("" g dro7die uscat4 zi. Tineretul porcin de reproducie ,-.* .. $g/ (-%$ din nutreul combinat. .n hrana scroafelor gestante influeneaz poziti- numrul purceilor la ftare. .n nutreul combinat pentru scroafe gestante, (n lactaie *i "ieri poate reprezenta '- &$ din structura nutreului combinat. :orcinele supuse ngr*rii pot primi '-)$ din structura nutreului combinat. La ginile outoare, utilizarea dro7diei fura7ere a dat de asemenea rezultate bune. .n nutreurile combinate destinate ginilor outoare dro7dia fura7er poate reprezenta '- &$ iar la puii de carne %$ (starter, %- !$ (groOer *i '-& $ (finisher. /atorit coninutului ridicat n acizi nucleici, consumul mare de dro7dii animale determin apariia gutei (depunerea urailor la ni-elul articulaiilor.