Sunteți pe pagina 1din 199

UNIVERSITATEA DE MEDICINA I FARMACIE GR. T.

POPA IAI

Corina Cianga

NOIUNI DE
IMUNOLOGIE
Manual pentru studenii Facultii de Medicin Dentar

Editura Gr.T. Popa, U.M.F. Iai


2013

Descrierea CIP a Bibliotecii Naionale a Romniei


Noiuni de imunologie / ed.: Corina Cianga - Iai:
Editura Gr. T. Popa, 2013
Bibliogr.
ISBN 978-606-544-160-6
I. Cianga, Corina (ed.)
612.017

Refereni tiinifici:
Norina Consuela FORNA Universitatea de Medicin i Farmacie
Gr. T. Popa Iai
Petru CIANGA Universitatea de Medicin i Farmacie Gr. T. Popa Iai

Coperta: Marius ATANASIU

Editura Gr. T. Popa


Universitatea de Medicin i Farmacie Iai
Str. Universitii nr. 16
Toate drepturile asupra acestei lucrri aparin autorilor i Editurii Gr.T. Popa" Iai.
Nici o parte din acest volum nu poate fi copiat sau transmis prin nici un mijloc, electronic
sau mecanic, inclusiv fotocopiere, fr permisiunea scris din partea au torilor sau a
editurii.
Tiparul executat la Tipografia Universitii de Medicin i Farmacie "Gr. T. Popa" Iai
str. Universitii nr. 16, cod. 700115, Tel. 0232 267798 int. 231, Fax 0232 211820

Prezenta apariie editorial reprezint o real provocare pentru medicina dentar


contemporan, ce trebuie abordat ntr-o viziune integrative - holistic, i nu ca o entitate
separat.
Sistemul imun, prin aprarea specific dobndit sau adaptativ, i pune amprenta
n mod decisiv asupra comportamentului organismului uman i implicit asupra
modificrilor la nivel oral. Cunoaterea mecanismelor imunologice implicate reprezint
rspunsul numeroaselor necunoscute legate de aspectele infecioase virale, precum i de
trenarea sau ameliorarea afeciunilor parodontale.
Deosebit de importante sunt condiiile i factorii ce influeneaz imunogenicitatea,
ecoul acestui statut influennd reacia ntregului organism la terapiile conservative sau
chirurgicale reconstructive. Comportamentul celular se materializeaz ntr-un real univers
de reacii i efecte, ce atrag rspunsuri intite la interveniile terapeutice.
Un capitol aparte n abordrile terapeutice din teritoriul oro-maxilo-facial revine
pacienilor cu diferite tipuri de imunodeficiene, n acest context abordarea patologiei orale
fiind n strict interconexiune cu statusul general.
Iniiativa autoarei acestui ghid imunologic este salutar, avnd un rol deosebit de
important n nelegerea mecanismelor fiziologice i patologice, condiie esenial a
succesului terapeutic

Prof. Univ. Dr. Norina Forna


Decan, Facultatea de Medicin Dentar

n procesul educaional specific pregtirii medicale, tiinele fundamentale ofer


perspectiva nelegerii structurii i funcionalitii organismului uman, de la nivel
molecular la integrare sistemic. n acest cadru general de cunoatere, Imunologia se
individualizeaz prin capacitatea de a penetra n organizarea sistemului imun, caracterizat
prin relaii de comunicare inter-celular care asigur, n status de normalitate, mecanismele
de aprare, i al cror dezechilibru explic mecanismele patogenice implicate n patologia
imunologic.
Dedicat studenilor la Facultatea de Medicin Dentar, manualul de fa constituie
un instrument de lucru util care faciliteaz accesul la informaia corespondent reperelor de
Imunologie, absolut necesare pentru formarea profilului general al unui viitor specialist n
acest domeniu. Astfel, n succesiunea capitolelor, sunt prezentate noiunile eseniale de
Imunologie i Imunopatologie - de la cele cu caracter general, la cele care particularizeaz
cavitatea oral. Nivelul de actualitate al textului dificil de susinut n contextul dinamicii
informaiei, alturi de construcia clar, dublat de o ilustrare adecvat, reflect competena
i experiena solid a autoarei, dezvoltat pe parcursul anilor n care a coordonat aceast
direcie de curs. Interesul cititorului este stimulat prin exemple clinice, care creeaz
conexiunea ntre pregtirea teoretic i practica clinic.
Am convingerea c aceast carte va fi apreciat de ctre beneficiarii direci
studeni, rezideni, masteranzi, doctoranzi ca suport real n demersul de nelegere i
aprofundare al Imunologie, recompensnd astfel efortul de necontestat al autoarei.

Prof. Dr. Irina-Draga Cruntu

Cuvnt nainte

Am redactat acest manual cu intenia de a veni n ajutorul studenilor mei, n sensul de a le


oferi un instrument util n nelegerea conceptelor i a noiunilor de baz ale imunologiei
fundamentale, nu ntotdeauna facil de accesat.
Am ncercat s prezint aceste noiuni ct mai simplu i mai clar posibil, dei, de multe ori,
acest lucru nu a fost uor, datorit complexitii lor. Am recurs la ajutorul figurilor i al
schemelor, considernd c ele vor completa textul i, n acelai timp, l vor face mai
atractiv i mai uor de parcurs i de neles.
Acolo unde a fost posibil, am ncercat s corelez noiunile i informaiile cu patologia,
contient c un viitor medic trebuie s neleag i s integreze aceste informaii n
contexte clinice.
Sper ca aceast lucrare s-i dovedeasc utilitatea i s devin un sprijin real pentru cei
crora le este adresat.
In efortul de a redacta acest manual, am beneficiat de sprijin, acordat cu generozitate de
colegi, crora doresc s le mulumesc:
Doamnei Profesor Dr. Luminia Smaranda Iancu, pentru sugestiile oferite n legtur cu
capitolul Infecia HIV.
Domnioarei Dr. Ingrid Elena Dumitriu, pentru permisiunea de a utiliza figuri i imagini
publicate n manualul de Imunologie pentru studenii Facultii de Medicin, 1999.
Domnului Conferentiar Dr. Tudor Petreu, pentru ajutorul extraordinar privind crearea de
imagini i figuri.
Doamnei Profesor Dr. Norina Consuela Forna i Doamnei Profesor Dr. Irina-Draga
Cruntu, pentru aprecierile acordate i pentru recomandrile clduroase pe care le-au fcut
lucrrii.
Domnului Profesor Dr. Petru Cianga, pentru ntregul sprijin oferit la realizarea acestui
manual.
Corina Cianga

CUPRINS:
Antigenicitate. Imunogenicitate.............................................................................................1
Hematopoieza.......................................................................................................................14
Sistemul imun...16
A.1. Sistemul imun nespecific. Bariere i componente celulare..........................................17
Bariere......................................................................................................................17
Fagocite i fagocitoz...............................................................................................19
Celulele NK. Citotoxicitatea nespecific.................................................................24
Celule NKT..............................................................................................................29
Eozinofile.................................................................................................................30
Bazofile....................................................................................................................31
Mastocite..................................................................................................................32
Celule dendritice.......................................................................................................32
A.2. Sistemul imun nespecific componente moleculare...................................................34
Sistemul complement...............................................................................................34
Proteine de faz acut. Reacia inflamatorie acut...................................................44
Interferonii................................................................................................................51
B. Sistemul imun specific.....................................................................................................53
Imunoglobulinele..................................................................................................................54
Receptorul pentru antigen al limfocitului T (TCR)..............................................................79
Complexul major de histocompatibilitate (MHC)................................................................85
Anatomia sistemului imun....................................................................................................99
Organe limfoide primare..........................................................................................99
Organele limfoide secundare..................................................................................107
Traficul limfocitar..................................................................................................112
Activarea limfocitelor T i B..............................................................................................114
Activarea limfocitului T.........................................................................................114
Proprieti ale limfocitelor T efector......................................................................118
Activarea limfocitului B.........................................................................................122
Rspunsul imun primar i RI secundar...................................................................124
Memoria imunologic............................................................................................130
Sistemul ABO.....................................................................................................................134
Sistemul Rh........................................................................................................................137

Citokine..............................................................................................................................139
Reglarea rspunsului imun.................................................................................................144
Hipersensibiliti (HS)........................................................................................................148
Imunodeficiene (ID)..........................................................................................................161
Imunodeficiene secundare Infecia HIV/SIDA..................................................167
Mecanisme de aprare la nivelul cavitii orale (Petru Cianga, Corina Cianga)...............173
Aspecte clinice i imunologice n parodontite i n caria dentar......................................177
Bibliografie.........................................................................................................................183

Index selectiv

Antigenicitate. Imunogenicitate
Termenul de antigen (antibody generating) a aprut pentru a defini o structur
recunoscut de un organism ca strin (non-self), capabil s declaneze reacii imune
specifice i s reacioneze cu produsele acestor reacii, de exemplu cu anticorpii.
Dei pare n contradicie cu noiunea de non-self, o structur proprie organismului
poate suferi modificri ce fac ca sistemul imun al gazdei s nu o mai recunoasc ca
structur proprie (self). Exemple de structuri self modificate (alterate): celule infectate
viral, celule transformate malign. Aceste structuri vor fi recunoscute ca non-self i prezena
lor va declana rspuns imun i generarea de efectori specifici, cum sunt anticorpii, celule
activate, celule efector, etc.
Reaciile pe care antigenele le pot induce cuprind:
- sinteza de anticorpi ce au capacitatea de a interaciona specific cu antigenele respective;
- activarea monoclonal sau policlonal a limfocitelor;
- instalarea memoriei imunologice;
- n unele situaii, antigenele pot induce un rspuns imun exagerat (reacii de
hipersensibilitate), sau pot anula rspunsul imun, fenomen numit toleran imunologic.
Tolerana imunologic este specific i reprezint absena unui rspuns imun fa de un
anumit antigen.
Plecnd de la observaia c exist structuri incapabile s induc rspunsuri imune,
dar capabile s interacioneze cu anticorpii specifici lor, prin convenie, pentru a defini
abilitatea unei structuri de a induce apariia reaciilor imune, se folosesc doi termeni diferii
din punct de vedere funcional. Acetia sunt:
- imunogenicitatea, definit ca proprietatea unei structuri de a induce dezvoltarea unui
rspuns imun i generarea de efectori (anticorpi, celule activate) i
- antigenicitatea, definit ca abilitatea unui compus de a interaciona cu produii unui
rspuns imun (anticorpii sau celulele activate).
n cele mai multe situaii, antigenele dein ambele proprieti, fiind capabile s
induc generarea de anticorpi specifici lor i s interacioneze cu acetia. In consecin,
orice imunogen este un antigen, dar antigenele nu sunt ntotdeauna imunogene.

*Trebuie menionat c, n vorbirea curent, termenii sunt interanjabili i, chiar n


acest material, termenul antigen va fi utilizat mai des pentru a defini o structur cu
proprieti de imunogen.

Condiii i factori care influeneaz imunogenicitatea


Pentru a fi un bun imunogen, n consecin, pentru ca n urma contactului dintre o
structur i un organism (sistem imun) s se dezvolte un rspuns imun, trebuie ndeplinite
o serie de condiii. Aceste condiii au fost clasificate n trei categorii:
I. condiii dependente de imunogen;
II. condiii dependente de organismul stimulat antigenic;
III. condiii i factori asociai cu calea de acces a imunogenului i modalitatea n
care se realizeaz interaciunea dintre acesta i sistemul imun al organismului.
I. Condiii dependente de imunogen
1. Caracterul de strin (non-self). Un organism normal nu dezvolt rspuns imun fa de
propriile structuri, fenomen numit toleran la self. De exemplu, dac unui iepure i se
administreaz propria sa albumin seric, el nu va dezvolta rspuns imun fa de aceast
molecul. Dac se administreaz albumina iepurelui unui cobai, acesta va recunoate
molecula ca pe o structur strin i va dezvolta un rspuns imun fa de ea, materializat
prin secreie de anticorpi specifici (anticorpi anti-albumin de iepure).
n consecin, prima cerin pe care o structur trebuie s o ndeplineasc pentru a fi
imunogen, este s fie non-self. n general, structurile proprii unui organism nu sunt
imunogenice pentru acel organism. Exist, totui, situaii n care un individ dezvolt
rspunsuri imune fa de structuri self. Reaciile se numesc reacii autoimune i, n funcie
de importana lor, ele pot duce la instalarea unor situaii patologice, numite generic, boli
autoimune (ex. lupus eritematos sistemic, anemia hemolitic autoimun, Miastenia gravis,
tiroidita Hashimoto, boala Basedow-Graves, etc).
Exist, de asemenea, situaii n care structuri non-self pentru un organism,
confruntate cu acel organism, nu induc rspunsuri imune, nefiind percepute ca imunogene,
din diverse motive.

Pentru a clasifica antigenele, din punctul de vedere al caracterului de self/non-self,


s-a apelat la terminologia utilizat n transplant. Au fost descrise mai multe tipuri de
antigene:
- antigene autologe (autoantigene, autogref, autotransplant). Definesc antigenele proprii
unui organism. Autogrefa sau autotransplantul reprezint transplantul efectuat unui individ,
cu propriul su esut sau organ. Fiind structur self, grefa este acceptat.
- antigene singeneice (gref singeneic sau isogref). Reprezint un transplant efectuat
ntre indivizi identici din punct de vedere genetic. n specia uman, indivizii identici
genetic sunt gemenii monozigoi. n laboratoare au fost create linii de animale identice
genetic, numite linii inbred. O populaie de oareci inbred poate fi obinut prin ncruciri
repetate frate-sor, timp de cel puin 20 de generaii. Transplantul ntre asemenea indivizi,
identici din punct de vedere genetic, este acceptat. Antigenele singeneice sunt, n
consecin, antigene ce provin dintr-un organism identic genetic cu cel n care au fost
introduse. Rezultatul va fi absena unui rspuns imun fa de acest tip de antigene.
- antigene allogeneice (allogref sau homogref). Allogrefa reprezint transplantul
efectuat ntre doi indivizi diferii genetic, din aceeai specie. Grefa este recunoscut ca
non-self i va fi respins (rejetat). Antigenele allogeneice sunt antigene ce provin de la un
membru al aceleiai specii, non-identic din punct de vedere genetic cu organismul ce vine
n contact cu antigenele respective.
- antigene xenogeneice (xenogref sau heterogref). Reprezint un transplant efectuat
ntre indivizi din specii diferite. Si acest tip de gref este rejetat. Antigenele xenogeneice
sunt structuri ce vor induce n organismul n care au fost introduse rspunsuri imune
specifice.
Structurile proprii pot suferi modificri (self denaturat), astfel nct nu mai sunt
recunoscute de componentele sistemului imun ca self. Ele vor induce dezvoltarea de
rspunsuri imune i generarea de efectori, responsabili de ndeprtarea lor (ex. celule
infectate viral, celule transformate malign).
Antigenele heterofile definesc un grup de antigene ce au drept caracteristic faptul
c sunt comune indivizilor ce aparin unor specii diferite, unele chiar ndeprtate pe scar
filogenetic. Un exemplu clasic este antigenul Forssman, identificat i descris de J.
Forssman, n 1911 i care s-a dovedit prezent n multe specii vegetale i animale (porumb,
Bacillus anthracis, crap, gin, oaie, cobai, etc). Antigenele heterofile sunt nrudite din
punct de vedere antigenic, au structuri similare, prezint n comun epitopi i, pe baza
prezenei acestor epitopi comuni, interacioneaz cu acelai anticorp specific, fenomen

numit reactivitate ncruciat. Un alt exemplu de asemenea antigene sunt cele ce aparin
sistemului Rhesus (Rh), grup de proteine ce se exprim pe hematiile speciei de maimue
Maccacus rhesus, la care au fost identificate n 1932 de ctre Diamond i Blackfan, dar i
pe eritrocitele indivizilor din specia uman n proporie de 85%, procentul referindu-se la
populaia caucazian (vezi Sistemul Rh).
2. Dimensiunea molecular. O alt condiie ce trebuie ndeplinit de ctre o structur
pentru a fi imunogenic este legat de o greutate molecular minim. Dei exist multe
excepii, este acceptat regula general conform creia structurile cu greutate molecular
mai mic de 5 kDa sunt non-imunogene, structurile cu greutate cuprins ntre 5 i 40 kDa
sunt slabe sau moderat imunogene, iar structurile cu greutate mai mare de 40 kDa sunt
foarte bune imunogene. Dintre excepii menionm insulina (1,5 kDa) sau glucagonul (3,8
kDa) care sunt foarte bune imunogene, dei au greuti moleculare mici i polimerii, cum
sunt dextranul (polimer de glucoz) sau gelatina (polimer ce conine mai multe tipuri de
aminoacizi cum sunt glicina, prolina, valina), slabe imunogene, dei au greuti moleculare
mari. n general, cu ct o molecul este mai mare, prezint un numr mai mare de epitopi
diferii, aspect ce amplific imunogenicitatea. Macromoleculele, aa cum sunt polimerii, au
un numr crescut de epitopi, dar acetia sunt de cele mai multe ori identici. Aceste
molecule sunt antigene cu epitopi monotoni repetitivi, structuri cu imunogenicitate sczut,
n ciuda greutii moleculare mari.
Exist molecule cu dimensiuni mici, care prin ele nsele nu sunt capabile s induc
declanarea unui rspuns imun, dar care reacioneaz cu anticorpii specifici lor, dac
acetia au fost generai anterior. Aceste molecule au fost denumite haptene (haptein=a
apuca, a prinde) i sunt caracterizate de antigenicitate, nu i de imunogenicitate. Haptenele
pot deveni imunogene n situaia n care in vitro sau in vivo sunt cuplate cu molecule mari,
de obicei de natur proteic (ele nsele bune imunogene), numite molecule purttoare sau
carrieri. La nivelul complexului hapten-carrier, haptena singur sau mpreun cu o
poriune nvecinat din molecula carrier-ului se va comporta ca un epitop (determinant
antigenic), inducnd un rspuns imun specific, deci dobndind proprieti imunogenice.
Haptenele sunt prezente n imunologia experimental, fiind uor de utilizat n
laborator, uor de analizat, descris i sintetizat, uor de manipulat i de cuplat. Utilizarea
lor a permis imunologilor s analizeze i s aprecieze, de exemplu, dimensiunea situsului
lor de combinare cu anticorpul specific i, indirect, dimensiunea paratopului (situsul de
legare a antigenului de la nivelul anticorpilor). De asemenea, ele au facilitat nelegerea

noiunilor de specificitate a anticorpilor i de reactivitate ncruciat, iar cu ajutorul lor a


putut fi analizat natura i afinitatea interaciunii dintre anticorp i antigenul specific.
Multe medicamente, ca de exemplu, unele antibiotice, analgezice, etc, se comport
ca haptene i, de multe ori, reaciile adverse asociate administrrii acestora se datoreaz
acestei proprieti. n organism, aceste molecule sau unii dintre metaboliii lor se cupleaz
cu proteine self (carrier) i induc dezvoltarea unui RI, materializat prin sinteza de anticorpi
specifici i activri celulare (de exemplu, reacia alergic a unor indivizi la penicilin).
3. Natura chimic. Este recunoscut c proteinele sunt cele mai eficiente imunogene,
alturi de glicoproteine i lipoproteine. Acest lucru se datoreaz importantei lor varieti
structurale, numrului crescut de epitopi diferii i capacitii lor de a fi uor de fagocitat i
de degradat intracelular. Teoretic, rspunsul imun fa de o protein este reprezentat de
suma specificitilor diferite de anticorpi sintetizai, caracteristice fiecrui epitop diferit de
la nivelul acestei molecule. Practic, numrul specificitilor de anticorpi sintetizai ca
rspuns fa de o protein este mult mai mic dect numrul de epitopi diferii, exprimai la
nivelul acesteia. Explicaiile acestui fenomen sunt prezentate n paragraful despre epitopi.
Glucidele, lipidele, acizii nucleici sunt considerate slabe imunogene, dar au fost
evideniate o multitudine de excepii cum sunt lipopolizaharidul bacterian (LPS), un
component al multor perei bacterieni, polizaharidele prezente la nivelul capsulei
pneumococului, endotoxinele de natur lipopolizaharidic ale unor bacterii Gram-negative,
structuri ce se caracterizeaz printr-o imunogenicitate crescut. Un exemplu elocvent de
glucide bune imunogene sunt cele ce formeaz sistemul ABO al grupelor sanguine.
Acizii nucleici, dei considerai structuri neimunogenice, se pot cupla cu carrieri i
induce rspunsuri imune, situaie evideniat la pacienii cu lupus eritematos sistemic, care
sintetizeaz auto-anticorpi fa de ADN-ul dublu catenar i fa de diverse alte proteine
self, constituente ale nucleilor celulari.
4. Complexitatea i conformaia molecular. Se consider c imunogenicitatea unei
structuri este proporional cu gradul su de complexitate molecular. Pentru c
majoritatea antigenelor este reprezentat de proteine, este important s nelegem
caracteristicile structurale ale acestor molecule. Toate cele patru structuri (nivele) de
organizare a unei proteine contribuie la imunogenicitatea sa.
Anticorpii pot recunoate variate caractere structurale cum sunt: structura
primar (secvena de aminoacizi), structura secundar (structura scheletului lanului

polipeptidic, cum ar fi de exemplu cea de tip alpha-helix sau foaia beta-pliat), structura
teriar (reprezentat de configuraia tridimensional a proteinei, dat de mpachetarea
lanurilor polipeptidice i solidarizarea lor prin puni disulfidice, legturi de hidrogen,
interaciuni hidrofobe, etc) i structura cuaternar, dat de juxtapoziia prilor separate
ale moleculei, dac aceasta este format din dou sau mai multe subuniti proteice (fig. 1).

Fig. 1. Structura proteinelor (www.google.com)

Studiile asupra imunogenicitii proteinelor au demonstrat c molecula nu este


recunoscut n totalitate de receptorii pentru antigen ai limfocitelor i nu particip ca un tot
la interaciunea cu un anticorp specific, ci anumite fragmente ale sale, care au fost numite
epitopi sau determinani antigenici.
Epitopii reprezint situsuri situate pe suprafaa sau n interiorul unui antigen, cu
care receptorii pentru antigen ai celulelor imunocompetente i, respectiv, anticorpii
interacioneaz specific. Ei au dimensiuni extrem de mici, fiind formai din 4-6 aminoacizi
sau 6-8 uniti monozaharidice. Numrul epitopilor variaz de la antigen la antigen i, n
general, este cu att mai mare cu ct molecula antigenic este mai mare i mai complex.
Numrul epitopilor diferii de la nivelul unui antigen confer valena antigenului. n
majoritatea cazurilor, antigenele naturale, n special cele proteice, sunt multivalente.
Epitopii pot fi descrii i clasificai din multe puncte de vedere. n funcie de poziia
aminoacizilor care particip la formarea lor (fig. 2), epitopii se clasific n:
- epitopi liniari (continui sau secveniali) reprezentai de succesiunea aminoacizilor n
structura primar a proteinei;

- epitopi conformaionali (discontinui); la formarea acestui tip de epitopi particip


aminoacizi care, n structura primar a proteinei, sunt plasai la distan unul de altul, dar
devin adiaceni spaial (vecini n spaiu), n structura teriar. Acest tip de epitopi exist
numai n structura teriar sau cuaternar, denaturarea proteinelor (reducerea la structura
primar) ducnd la dispariia lor.

Fig. 2. Epitopi liniari (1 i 2) i epitopi conformaionali (3 i 4)

Epitopii pot fi situai la suprafaa moleculei de antigen, fiind direct accesibili


limfocitelor cu receptori specifici (epitopi externi sau topografici), sau pot fi situai n
interiorul moleculei antigenice (interni), devenind accesibili celulelor imunocompetente,
numai dup procesarea antigenului (degradarea parial intracelular a acestuia).
Epitopii confer specificitatea moleculei antigenice i sunt imunoreactivi, adic
posed abilitatea de a reaciona cu anticorpii specifici lor. Capacitatea unei regiuni din
molecula de antigen de a servi drept determinant antigenic, inducnd dezvoltarea unui
rspuns imun specific reprezint imunopotena acelei regiuni, proprietate ce definete
noiunea de epitop. Epitopii nu sunt la fel de imunopoteni i ntre ei exist o competiie
antigenic, fiind clasificai n:
- epitopi dominani, acei epitopi care, n urma administrrii antigenului, vor induce un
rspuns imun eficient, manifestat prin sinteza anticorpilor specifici lor;
- epitopi subdominani, epitopi care se manifest n absena celor dominani, care, de
exemplu, au fost distrui experimental sau n situaia n care s-a indus tolerana
imunologic fa de acetia;
- epitopi criptici sau tcui, epitopi care, n cele mai multe situaii, nu se manifest. De
exemplu, epitopii situai n interiorul unui antigen ce nu poate fi degradat, astfel nct ei nu

sunt accesibili celulelor imunocompetente. Utilizarea direct pentru imunizare a


segmentului de molecul ce conine aceti epitopi duce la producerea de anticorpi cu
specificitate pentru ei, cu alte cuvinte ei devin imunopoteni.
Moleculelor le poate fi modificat artificial antigenicitatea prin alterarea epitopilor,
adugarea de grupri determinante sau ndeprtarea enzimatic a acestora. Identificarea
precis i cunoaterea imunopotenei epitopilor este important n vaccinare, unde sinteza
i administrarea fragmentelor imunopotente n locul microorganismelor omorte sau
atenuate, pe de o parte, evit manipularea, uneori periculoas, a bacteriilor i a virusurilor
i, pe de alt parte, scade costul de obinere a vaccinurilor.
Variaia antigenic reprezint un proces prin care o serie larg de microorganisme
ncearc s se sustrag rspunsurilor imune ale gazdei, prin modificri mai mici sau mai
importante la nivelul unor molecule imunogenice de suprafa. n acest fel, se explic
persistena n organism a multor parazii, cum sunt Tripanosoma, Plasmodium, Giardia, a
unor bacterii sau a unor virusuri (HIV).
Au fost identificate i descrise dou mecanisme de variaie antigenic. Prezentm
aceste mecanisme cu referire la virusurile gripale. Virionii sau particulele infectante ale
virusurilor gripale au la exterior un nveli bilipidic, numit anvelop, care i protejeaz n
mediul extracelular. Ea provine din membrana plasmatic a celulei infectate, n care
virionii s-au produs i pe care acetia o prsesc prin nmugurire. Dei este provenit din
membrana celulei parazitate, la nivelul anvelopei se exprim dou glicoproteine de natur
viral, numite hemaglutinina (HA) i neuraminidaza (NA) (fig. 3).

Fig. 3. Virus gripal (Biochemistry, sixth edition. WH Freeman and Company, 2007)

Hemaglutinina, sub form de trimeri, este responsabil de ataarea virusului la


membrana celulei gazd ce urmeaz a fi parazitat. Neuraminidaza cliveaz acidul Nacetilneuraminic (sialic) de la nivelul glicoproteinelor ce se sintetizeaz n celula infectat,
fie c sunt de origine viral, fie c sunt molecule membranare ale celulei gazd, fenomen
care pare s faciliteze nmugurirea virionilor la suprafaa celulei parazitate i desprinderea
lor. Sunt descrise trei tipuri majore de virus gripal, numite A, B i C. Tipul A este cel mai
rspndit i este responsabil de cele mai importante pandemii umane. Pe baza variaiilor la
nivelul moleculelor de hemaglutinin (13 tipuri diferite) i de neuraminidaz (9 tipuri
diferite) sunt descrise subtipurile de virus gripal A.
n timpul unei epidemii de grip, virusul poate suferi modificri la nivelul celor
dou molecule i aceste modificri se pot realiza prin cele dou mecanisme responsabile de
variaia antigenic, numite drift antigenic i shift antigenic.
- drift-ul antigenic reprezint mecanismul prin care se produc o serie de mutaii
punctiforme spontane ce apar gradat i induc modificri minore la nivelul celor dou
molecule;
- shift-ul antigenic presupune modificri majore la nivelul hemaglutininei i/sau
neuraminidazei, care duc la apariia brusc a unui alt subtip de virus, considerabil diferit de
cel din epidemia precedent.
5. Degradabilitatea. Pentru cele mai multe antigene, dezvoltarea rspunsurilor imune,
mediate de limfocitele T, necesit interaciunea dintre antigen i celulele prezentatoare de
antigen (APC). Aceste celule, mai nti, degradeaz enzimatic antigenul printr-un proces
numit procesarea antigenului. Peptidele scurte (epitopi) rezultate din procesarea
antigenului sunt, apoi, asociate unor molecule self, numite complex major de
histocompatibilitate (MHC), iar complexele formate din peptidele antigenice i
moleculele MHC sunt expuse pe membrana APC-urilor, pentru a fi prezentate celulelor T,
n vederea activrii acestora (vom detalia n capitolul privind generarea liganzilor pentru
limfocitele T). n consecin, gradul de degradabilitate a unei structuri influeneaz
capacitatea unui APC de a-l prezenta eficient limfocitelor T i, implicit, capacitatea sa de a
activa aceste celule.
n general, pentru a fi un bun imunogen, o structur trebuie s ndeplineasc aceste
caracteristici, dar caracterul de strin, natura chimic, dimensiunea i complexitatea
molecular par s fie cei mai importani factori.

Dei condiiile i factorii prezentai ar prea c limiteaz capacitatea multor


structuri de a fi bune imunogene, au fost descrise rspunsuri imune fa de toate familiile
cunoscute de compui biochimici - proteine, glucide, lipide, acizi nucleici - ca i fa de
medicamente, antibiotice, aditivi alimentari, substane cosmetice i peptide sintetice cu
dimensiuni mici, ceea ce demonstreaz c exist i alte elemente i ali factori care
influeneaz imunogenicitatea.
II. Condiii dependente de organismul stimulat antigenic
Dintre acestea, amintim:
1. Vrsta individului imunizat, care, practic, se asociaz cu gradul de maturitate
funcional a sistemului imun. Vrstele extreme se caracterizeaz printr-o capacitate mai
redus de rspuns, comparativ cu vrsta adult. Pn n jurul vrstei de 3 ani, sistemul
imun nu este n totalitate matur din punct de vedere funcional, iar peste 70 de ani, n
general, vorbim de o component mai degrab supresiv a rspunsului imun.
2. Specia organismului imunizat. n general, cu ct antigenul provine de la o specie mai
ndeprtat filogenetic de specia creia i aparine organismul imunizat, cu att acesta va
dezvolta reacii imune mai puternice. Exist i excepii, n sensul c specii diferite posed:
a) antigene identice (antigenul Rh de pe hematiile umane i ale maimuei Macaccus
rhesus);
b) antigene similare, ceea ce explic de ce aceste organisme nu dezvolt rspuns imun
fa de asemenea antigene (ex. insulina de cal este tolerat de om).
3. Unele situaii fiziologice particulare pot influena imunogenicitatea unei structuri.
Sarcina este o situaie fiziologic, caracterizat de un anumit grad de toleran
imunologic, necesar pentru meninerea unitii feto-placentare. Aceasta este o semiallogref (datorit prezenei antigenelor de origine patern) care trebuie tolerizat o
anumit perioad de timp. Fenomenele prin care se asigur aceast tolerizare sunt iniiate
la nivelul interfeei materno-fetale.
4. Situaii patologice:
a) imunodeficiene congenitale care afecteaz imunitatea specific (LyT i/sau LyB), dar i
pe cea nespecific, sau afecteaz capacitatea de procesare i prezentare a Ag-ului.

10

b) imunodeficiene dobndite, adesea consecin a altor afeciuni, cum ar fi neoplaziile,


infecia cu HIV (human immunodeficiency virus) sau consecina tratamentelor
imunosupresoare, ce pot determina o afectare global a sistemului imun.
III. Condiii dependente de modalitatea n care se realizeaz accesul Ag la organism
Sunt importante: calea de administrare, doza inoculat, persistena antigenului n
organism, intervalul dintre inoculri, asocierea cu adjuvani.
1. Calea de administrare poate influena imunogenicitatea unei structuri. Cile de
administrare care scad imunogenicitatea sunt calea digestiv (administrare oral) i cea
intravenoas (n general, aceste ci unteaz celulele prezentatoare de antigen, celule
eseniale pentru activarea limfocitelor T). Cile de administrare intradermic, subcutanat,
intramuscular, intraperitoneal sunt cele mai eficiente pentru inducerea unui rspuns
imun.
2. Doza de antigen utilizat. Pentru fiecare antigen se descrie o doz optim, doze mai mari
sau mai mici dect aceasta nu vor declana un rspuns imun, fie pentru c nu vor fi
capabile s activeze suficiente limfocite, fie c vor induce n aceste celule starea de
neresponsivitate (anergie). Fenomenul induce starea de toleran fa de acel antigen.
3. Adjuvanii sunt substane sau amestecuri de substane care au ca rol creterea
imunogenicitii unui antigen. Ei sunt adesea utilizai pentru a intensifica RI, atunci cnd
Ag-nul are o imunogenicitate sczut sau cnd sunt disponibile doar cantiti sczute de
Ag. Mecanismul lor precis de aciune nu este ns cunoscut; cele mai favorizate ipoteze
sunt:
- prelungirea persistenei antigenului;
- amplificarea semnalelor co-stimulatoare;
- inducerea formrii de granuloame;
- stimularea nespecific a proliferrii limfocitare.
Organismul uman este capabil s dezvolte rspuns imun fa de o extraordinar de
larg varietate de structuri antigenice (determinani antigenici) existente sau posibil s
apar la un moment dat. Totalitatea acestor structuri a fost evaluat la 1015-1018. Dei
fiecare dintre limfocitele T i B, componentele specifice ale SI, posed pe membranele lor
celulare receptori pentru antigen cu o unic specificitate (recunosc i interacioneaz cu
un singur epitop), colectiv, ntreaga populaie de limfocite este capabil s recunoasc i s
dezvolte rspuns imun fa de orice structur. Aceast diversitate este generat n cursul

11

maturrii limfocitelor T i B, este independent de antigen i constituie repertoriul


imunologic.
Specificitatea unui anticorp reprezint abilitatea acestuia de a reaciona numai cu
epitopul (antigenul) care i-a indus apariia (sinteza) (fig. 4).
Exist situaii n care un anticorp poate reaciona cu mai multe antigene (numr
restrns). Fenomenul se numete reactivitate ncruciat.

Fig. 4. Specificitatea anticorpilor


(http://en.wikibooks.org/wiki/Structural_Biochemistry/Protein_function/Epitope)

Reactivitatea ncruciat este fenomenul prin care un anticorp reacioneaz


specific cu antigenul fa de care a fost sintetizat, dar, reacioneaz i cu alte antigene
(numr limitat), datorit faptului c aceste antigene au n comun epitopul specific
anticorpului, sau prezint epitopi similari.
Fenomenul de reactivitate ncruciat are aplicaii clinice. De exemplu, diagnosticul
pacienilor infectai cu Treponema Pallidum, agentul etiologic al sifilisului, const n
evidenierea anticorpilor specifici n serul acestor pacieni. Identificarea acestor anticorpi
se face prin reacia specific antigen-anticorp, numai c, n locul spirochetei, se utilizeaz o
structur extras din muchiul cardiac bovin, numit cardiolipin, cu care, anticorpii antiTreponema reacioneaz, formnd complexe antigen-anticorp.
Diagnosticul mononucleozei infecioase se bazeaz pe identificarea anticorpilor
anti-virusul Epstein-Barr, agentul etiologic al afeciunii. Anticorpii specifici virusului,
datorit fenomenului de reactivitate ncruciat, reacioneaz i cu eritrocitele de oaie,
formnd complexe antigen-anticorp.

12

Un exemplu clasic de reactivitate ncruciat l reprezint sistemul ABO al


grupelor sanguine. (vezi sistemul ABO).
Reactivitatea ncruciat poate avea i repercusiuni patologice. Au fost identificate
o serie de virusuri i bacterii ce prezint epitopi identici sau similari cu structuri self ale
gazdei, fenomen ce se numete mimetism antigenic. Exist situaii n care anticorpii
sintetizai n cursul unui rspuns imun normal fa de aceti ageni infecioi, pot reaciona
i cu structurile self ale organismului (reacii autoimune), ducnd la alterarea esuturilor i
apariia unor stri patologice. Exemplul clasic l reprezint infecia cu Streptococcus
pyogenes, care induce anticorpi ce pot interaciona cu structuri proteice de la nivelul
glomerulilor renali, de la nivelul articulaiilor sau din esutul cardiac. Interaciunea dintre
anticorpi i aceste structuri self mediaz reacii inflamatorii i distrucii tisulare importante,
putnd conduce la stri patologice, ca glomerulonefrite post-streptococice, reumatism
articular acut, cu complicaia sa cea mai sever, cardita reumatic, ce se manifest prin
vicii valvulare, cum sunt stenoza mitral i insuficiena aortic, motive de invaliditate la
copii, adolesceni i adulii tineri.

13

Hematopoieza
Hematopoieza reprezint un proces continuu de generare a eritrocitelor i a
leucocitelor din organism, ce asigur, de-a lungul vieii unui individ, numrul adecvat de
celule. La specia uman, toate celulele hematopoietice provin din celulele stem
hematopoietice (HSCs hematopoietic stem cells). Acest tip de celule pot fi evideniate
n esuturile embrionare, ncepnd cu sptmnile 3-4 de gestaie. In sptmna a-5-a,
HSCs migreaz n ficatul fetal i hematopoieza hepatic va nlocui treptat pe cea
embrionar, proces ce ia sfrit n sptmna a-12-a de gestaie. Odat cu aceast vrst,
HSCs i unii dintre progenitorii lor ncep un proces de migrare din ficat ctre splin i
mduva osoas. Splina fetal produce celule sanguine tranzitoriu, ntre a treia i a aptea
lun de gestaie, n timp ce mduva oaselor lungi, ca tibia i femurul, i asum, progresiv,
rolul de principal situs al hematopoiezei, n a doua jumtate a perioadei de gestaie. La
natere, cel puin virtual, ntreaga hematopoiez se desfoar n mduva oaselor lungi, n
timp ce dup natere, activitatea oaselor lungi se reduce treptat, ajungnd ca la adult, s fie
nlocuit cu hematopoieza ce se desfoar n oasele scurte i late (stern, coaste, vertebre,
oasele pelvisului i cele ale craniului).
In situaiile n care mduva osoas a unui adult este afectat, ficatul i splina
redobndesc abilitatea de a susine hematopoieza, ce-i drept, la un nivel relativ sczut.
Celulele stem hematopoietice reprezint un procent extrem de mic, de numai 0,01%
din totalul celulelor din mduva osoas. Prezint o capacitate extraordinar de proliferare
i de difereniere ca rspuns la cererile organismului. Sunt considerate celule
multipotente, adic se pot diferenia n orice tip de celul hematopoietic (limfocite,
macrofage, celule dendritice, mastocite, eritrocite, etc) i self-regenerative (selfrenewing), adic, au abilitatea ca, n loc s se diferenieze, s genereze alte HSCs.
Diferenierea HSCs se poate realiza pe dou ci principale, conform unui model
propus de Mak i Saunders. Prima dintre ele este calea ce d natere unor progenitori
precoci, numii i progenitori multipoteni (multipotent progenitors MPPs). Cea de-a
doua cale este diferenierea n progenitori orientai ctre generarea de mastocite (mast
cell committed progenitors - MCPs), ce se vor diferenia n mastocite.
La rndul lor, progenitorii multipoteni pot da natere unor precursori cu un
potenial de difereniere mai limitat. Aceti precursori sunt precursorul NK/T, din care,
mai departe, pot lua natere limfocitele T, celulele NK, celulele NKT i celulele dendritice

14

timice, progenitorul comun limfoid, din care vor lua natere limfocitele B i celule
dendritice limfoide i progenitorul comun mieloid, din care se pot forma, mai departe,
granulocitele (neutrofile, eozinofile, bazofile), monocitele, megakariocitele, eritrocitele i
celulele dendritice mieloide.

15

Sistemul imun
Termenul latin immunis, nsemnnd scutit (de taxe, de serviciul militar, etc), a dat
natere cuvntului englezesc immunity (imunitate), care se refer la toate mecanismele
utilizate de un organism pentru a se proteja mpotriva unui numr extrem de mare de
entiti strine din mediul nconjurtor. Aceste entiti, numite antigene, prezint o larg
diversitate; ele pot fi microorganisme i produii lor (virusuri, bacterii, unii parazii),
alimente, substane chimice, medicamente, polenuri, pr de animale, praf, uneori celule
self denaturate (tumori), etc. Fiecare antigen este caracterizat de anumite particulariti n
ceea ce privete calea de ptrundere n organism, maniera de aciune, efectele pe care le
produce n organismul gazd. Mai mult, microorganismele au abilitatea de a-i modifica
unele structuri componente (vezi variaia antigenic), n ncercarea de a se sustrage
mecanismelor de recunoatere ale gazdei i i dezvolt continuu strategii de eludare a
mecanismelor de aprare. n faa tuturor acestor ameninri, numeroase, diferite i n
continu schimbare, vertebratele i-au dezvoltat un sistem extrem de complex i sofisticat
de recunoatere, supraveghere i aprare, care a fost denumit sistem imun (SI) i care
cuprinde totalitatea structurilor tisulare, a celulelor i a moleculelor care acioneaz n
vederea aprrii organismului. Confruntarea dintre cei mai muli patogeni i un organism
sntos nu este urmat de instalarea strii de boal i acest lucru se datoreaz capacitii SI
de a dezvolta rspunsuri imune, aciuni concertate i coordonate ale numeroaselor celule i
molecule ce funcioneaz n reele interconectate i extrem de complexe, potenndu-se i
completndu-se, n vederea recunoaterii, atacrii i distrugerii a tot ce este strin unui
organism. Totui, aceste confruntri pot avea i altfel de consecine i unele infecii
cronice, cum sunt, printre altele, hepatita B, hepatita C, infecia cu HIV (virusul
imunodeficienei umane dobndite), demonstreaz c sistemul imun i rspunsurile imune
pot fi depite n anumite situaii.
Sistemul imun prezint dou componente majore: sistemul imun nnscut sau
nespecific i SI dobndit, adaptativ sau specific. Ambele componente disting structurile
non-self de cele self, dar gradul de specificitate i mecanismele implicate n recunoaterea
entitilor strine sunt complet diferite. Sistemul imun nespecific cuprinde, la rndul lui,
dou componente:
1. o serie de bariere fizice, chimice i moleculare, care acioneaz ntr-o manier complet
nespecific;

16

2. o component celular alctuit din tipuri diferite de celule ce, cu ajutorul unor molecule
membranare (receptori), recunosc un numr limitat de molecule comune unei largi varieti
de patogeni (pattern-uri moleculare). Cu alte cuvinte, aceeai celul a gazdei poate
recunoate un numr mare de patogeni diferii.
O alt caracteristic important a SI nespecific este aceea c, n confruntri repetate
cu acelai antigen, rspunsurile imune nespecifice sunt la fel n ceea ce privete durata,
amplitudinea, eficiena. Altfel spus, componentele aprrii nespecifice nu posed
specificitate de recunoatere i interaciune i nici memorie imunologic, ceea ce le
deosebete fundamental de componentele sistemului imun specific, limfocitele T i B,
caracterizate de aceste trei proprieti. Aceste dou tipuri celulare exprim pe membranele
lor molecule nalt specializate, numite receptori pentru antigen, destinate recunoaterii
unui unic epitop de la nivelul unei structuri non-self. Recunoaterea precis a unui antigen
este urmat (eventual) de activarea limfocitelor ce au recunoscut specific acel particular
antigen i de generarea de efectori ce vor distruge acel antigen. Mai mult, rspunsurile
imune generate la confruntri repetate cu acelai antigen sunt, succesiv, mai rapide i mai
eficiente.

Sistemul imun nnscut (aprarea nespecific). Bariere i componente


celulare
Bariere
Barierele anatomice se refer la elementele structurale ale organismului care
acoper suprafaa acestuia sau tapeteaz orificiile i tracturile respirator, digestiv, genitourinar ce pot funciona ca pori de intrare pentru patogeni, fiind reprezentate de piele i
mucoase. Aceste elemente au ca scop mpiedicarea sau limitarea accesului patogenilor la
suprafeele organismului. Barierele fiziologice cuprind unele structuri (cili) sau substane
produse de organism (lacrimi, mucus, saliv, etc) pentru a completa aciunea fizic a
barierelor anatomice. Impreun, aceste bariere formeaz o prim linie de aprare care
acioneaz n dou maniere: mecanic i chimic.
Prima barier anatomic la vertebrate este pielea. Pielea intact este o barier
mecanic eficient, practic impenetrabil, datorit structurii epidermului, pluristratificat, cu
celule keratinizate, ce se descuameaz continuu, antrennd i eventualele bacterii ce s-au
depus la acest nivel. Maniera chimic este asigurat de secreia de acid lactic i acizi grai

17

de ctre glandele sebacee i sudoripare, ce confer pielii un pH acid, de 5,5, ce mpiedic


replicarea multor bacterii. Mai mult, la nivelul pielii triesc bacterii comensale ce intervin
i ele n aprare (vezi antagonismul bacterian).
Importana pielii n aprare nu se limiteaz, ns, numai la att. Keratinocitele s-au
dovedit a fi nu doar nite celule ce secret keratin i se descuameaz rapid, ci nite celule
capabile s secrete o serie de molecule solubile cu funcii de factori de cretere, cu aciuni
pro-inflamatorii, activatoare sau inhibitoare asupra altor tipuri celulare. Mai mult, la
nivelul pielii, au fost evideniate o serie de celule rezidente, componente ale SI nespecific
i specific, ceea ce face ca, n acest moment, pielea s fie vzut ca un organ limfoid
secundar, prezentnd esut limfoid asociat (SALT skin-associated lymphoid tissue) (vezi
Anatomia sistemului imun).
Pierderea integritii pielii (plgi) este asociat cu pierderea capacitii de protecie
fa de muli patogeni. In clinic, bolnavii cu arsuri extinse sunt tratai n secii speciale, n
care msurile de asepsie sunt extrem de riguroase, contactul cu personalul medical este ct
mai limitat posibil, iar antibioterapia este, frecvent, aplicat preventiv.
Suprafeele organismului cum sunt tracturile digestiv, respirator, uro-genital vin n
contact cu exteriorul i sunt tapetate de mucoase. Stratul continuu de celule ce formeaz
epiteliile mucoaselor i produsul lor de secreie, mucusul, substana vscoas care le
acoper, mpiedic aderarea microorganismelor i faciliteaz ndeprtarea acestora, dup
nglobarea n mucus, prin alte mecanisme cum sunt micrile cililor, tuse, strnut, micri
peristaltice, etc.
O serie de fluide ale organismului particip la aprare printr-o modalitate mecanic,
de splare (lacrimi, saliv, urin), dar i prin coninutul lor n substane bactericide: acidul
clorhidric din sucul gastric, spermina i zincul din lichidul seminal, lizozimul din lacrimi,
saliv i secreiile nazale. Dintre barierele fiziologice mai fac parte:
- temperatura fiziologic a organismului, de 36,7oC, mpiedic dezvoltarea multor
patogeni;
- presiunea parial a oxigenului, crescut la nivelul alveolelor pulmonare, mpiedic
dezvoltarea anaerobilor n aceste situsuri;
- balana hormonal. Nivele crescute de corticosteroizi scad capacitatea de aprare a unui
organism, diminund rspunsul inflamator. Acest aspect este evident la persoanele care
primesc terapie prelungit cu doze crescute de corticosteroizi pentru meninerea unei grefe
sau pentru boli autoimune i care prezint o susceptibilitate crescut la infecii;

18

- antagonismul bacterian. Flora normal, comensal sau saprofit, a organismului, este


reprezentat de miliarde de bacterii ce populeaz anumite situsuri cum sunt cavitatea
bucal, aparatul digestiv, pielea, vaginul, situsuri ce vin n contact cu mediul nconjurtor
i sunt poteniale pori de intrare pentru patogeni. Bacteriile saprofite intervin n aprarea
organismului pe care l colonizeaz, fa de germenii patogeni. Mecanismele utilizate
includ competiia pentru factorii nutritivi eseniali i secreia unor substane care fie ucid
patogenii, fie creeaz un mediu ce mpiedic dezvoltarea acestora. De exemplu, flora
comensal vaginal, prin metabolizarea glicogenului, elibereaz acid lactic. pH-ul acid,
asigurat prin aceast secreie de acid lactic, mpiedic dezvoltarea multor patogeni.
Distrugerea florei comensale permite exacerbarea microorganismelor oportuniste, cum este
Candida albicans, candidozele fiind o complicaie frecvent a antibioterapiei instituite pe
perioade prea lungi.

Fagocite i fagocitoz
Fagocitoza este un proces de internalizare i de distrugere intracelular a
structurilor particulate, cu diametrul mai mare de 0,5m. Este o form de internalizare,
termen general ce definete preluarea de ctre o celul a unui material din mediul
extracelular. Fagocitoza se adreseaz majoritii microorganismelor patogene, presupune
expansiunea membranei celulei efector n jurul antigenului cu formarea unei vacuole
numite fagozom i este realizat de ctre o serie de celule numite fagocite, reprezentate de
microfage (polimorfonucleare neutrofile - PMN) i monocite/macrofage. Aceste celule
sunt capabile i de alte forme de internalizare, aa cum sunt endocitoza mediat de
receptori, proces ce presupune internalizarea structurilor extracelulare dup legarea
acestora de receptori specifici de pe membrana efectorului i pinocitoza, proces de
internalizare a fluidelor din spaiul extracelular.
PMN-urile (fig. 5) provin din celula stem hematopoietic, ca i celelalte elemente
figurate ale sngelui, fac parte din grupul de celule albe sau leucocite, reprezentnd
majoritatea lor (60-70%).
Sunt celule circulante (nu se gsesc n esuturile normale), non-divizibile, cu via
scurt, de aproximativ 2-5 zile (1-2 zile dup ali autori). Sunt capabile s migreze n
esuturi, strbtnd membrana bazal a vaselor sanguine, fenomen activ numit diapedez.

19

Acest eveniment se produce sub influena unor molecule eliberate fie de bacterii, fie de
celulele self din situsul invadat, cu funcie de factori chemotactici.

Fig. 5. PMN (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Neutrofilele exprim pe membrane o serie de molecule, printre care receptori


pentru factori chemotactici (de ex. CXCR1 i CXCR2, receptori pentru IL-8), receptori
pentru componente ale sistemului complement (de ex. CR1, receptor pentru C3b, iC3b),
molecule de adeziune intercelular (de ex. LFA-1 leukocyte function associated-1),
receptori pentru componentele matricii extracelulare (de ex. receptori pentru laminin,
fibronectin, etc), receptori pentru fragmentul Fc al anticorpilor (FcR).
Citoplasma celulelor este bogat n lizozomi, granule (organite) bogate n enzime
(lizozim, mieloperoxidaz, catepsina G, proteine cationice, hidrolaze, etc). Neutrofilele
sunt componente ale SI nespecific, totui ele sunt legate de SI specific datorit rolului pe
care l exercit, acela de a elimina antigene opsonizate cu molecule de anticorpi. Acest fapt
se datoreaz expresiei receptorilor pentru fragmentul Fc al anticorpilor (FcR) pe membrana
celulelor (vezi Imunoglobulinele).
PMN sunt eseniale pentru controlul infeciilor, n special n primele stadii ale
rspunsului inflamator, fiind extrem de eficiente n ndeprtarea anumitor patogeni. Totui,
aciunea lor este limitat i, n unele cazuri, ele pot cauza distrucii ale esuturilor self. In
situaiile n care lezarea unui esut determin un rspuns inflamator prelungit sau extrem de
intens, enzimele eliberate de PMN n spaiul extracelular ucid celulele proprii din
vecintate i degradeaz matricea extracelular. Toate resturile microbilor i celulelor
ucise, mpreun cu lichidul interstiial formeaz puroiul, un semn clinic caracteristic
reaciei inflamatorii dezvoltate n cursul unei infecii bacteriene. Uneori, n ncercarea de a

20

dizolva particule cu dimensiuni prea mari ca s poat fi fagocitate, neutrofilele secret n


spaiul extracelular enzime ce pot cauza moartea unor celule self si pot produce astfel
leziuni tisulare, fenomen denumit fagocitoz frustrat.
Macrofagele sunt celule larg rspndite n organism, care, mpreun cu monocitele,
formeaz sistemul fagocitelor mononucleare, descris de I. Metchnicov n 1883.
Deriv din promonocii, precursori medulari ce ptrund n curentul sanguin i
devin monocite (fig. 6). Acestea rmn n circulaie un numr limitat de ore (la om
aproximativ 72 de ore), dup care migreaz n esuturi, unde se difereniaz n macrofage
rezidente (fig. 6). Celulele sunt ubicuitare, se gsesc rspndite n toate esuturile i
organele i, n funcie de localizare, pot avea denumiri diferite:
- histiocite n esutul conjunctiv;
- macrofage alveolare la nivel pulmonar;
- celule Kupffer n ficat;
- celule mesangiale n glomerulii renali;
- microglii n esutul nervos;
- osteoclaste n esutul osos, etc.

Fig. 6. Monocit (A) i macrofag (B) (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Macrofagele sunt celule cu via lung, triesc ntre 2 i 4 luni. Pot rmne fixe sau
pot patrula constant ntr-un anumit spaiu, ca urmare a expresiei unei serii de receptori
pentru componentele matricii extracelulare i pentru factori chemotactici, care le confer o
mare capacitate de migrare. Citoplasma este bogat n lizozomi care conin numeroase
enzime necesare uciderii i digestiei materialului fagocitat.

21

Spre deosebire de PMN-uri, macrofagele mai au o funcie esenial pentru


funcionarea sistemului imun. Ele sunt capabile s proceseze antigenul i s-l prezinte
limfocitului T, contribuind la activarea acestuia. Fac parte dintr-o categorie funcional de
celule, numite celule prezentatoare de antigen (APC), alturi de limfocitele B, celulele
dendritice, etc (fig. 7).

Fig. 7. Macrofag fagocit i APC (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Activarea unui macrofag reprezint un moment esenial n cursul unui rspuns imun
fa de un patogen, pentru c se materializeaz ntr-o sum de evenimente extrem de
importante. Capacitatea de migrare i de fagocitoz se amplific, celula ncepe s
sintetizeze i s secrete o serie de citokine, factori de cretere, factori chemotactici, enzime
hidrolitice, componente ale sistemului complement i ale celui de coagulare, metabolii
toxici ai O2. Aceste evenimente biologice nu au ca efect numai uciderea
microorganismelor, ci i recrutarea altor celule efector n situsul inflamator, activarea
limfocitelor T i dezvoltarea unui rspuns imun specific, asigurarea reparaiilor tisulare
prin recrutarea i stimularea funciilor fibroblastelor. Este evident rolul cheie al
macrofagelor, din moment ce ele fac legtura ntre SI nnscut i cel specific. Intervin n
activarea limfocitelor T i, la rndul lor, sunt stimulate, dar i controlate de citokine
secretate de limfocitele T efector (molecule solubile secretate de celule, care acioneaz
asupra celulelor, prin intermediul unor receptori dedicai. Vezi capitolul Citokine).

22

Etapele fagocitozei cuprind:


1. chemotaxia - reprezint migrarea fagocitelor spre sediul de infecie, sub influena unor
factori chemotactici, care pot fi eliberai, fie de bacteriile patogene, fie de celulele self
activate din sediul invadat. Un exemplu elocvent este NCF (neutrophil-chemotactic factor)
eliberat de mastocitul activat. Fagocitele exprim pe membrane receptori pentru factorii
chemotactici i migreaz n gradient de densitate.
2. aderarea bacteriei la suprafaa fagocitului este mediat de molecule exprimate pe
membranele celor dou celule implicate, care funcioneaz n sistem receptor-ligand
(PAMP i, respectiv PRR. Vezi subcapitolul Strategiile componentelor celulare ale
sistemului imun nespecific de recunoatere a structurilor non-self).
3. ingestia (fig. 7) ncepe cu polimerizarea unei proteine a scheletului celular, actina, ce,
mpreun cu miozina, vor iniia invaginarea membranei. Ca urmare, bacteria aderat se
scufund ctre citoplasma fagocitului, odat ce invaginarea membranei acestuia se
accentueaz. In final, fagocitul sintetizeaz noi poriuni de membran ce se vor nchide ca
un fermoar deasupra bacteriei, nglobnd-o n interiorul fagocitului, ntr-o vacuol
numit fagozom. In fagozom se vor deschide ulterior, prin fuziunea membranelor,
lizozomii din citoplasma fagocitului, formndu-se fagolizozomul.
4. uciderea materialului fagocitat se poate realiza prin dou mecanisme:
- mecanismele O2 dependente sunt reprezentate de o serie de metabolii toxici ai O2,
generai n cursul procesului de activare celular i fagocitoz (eveniment numit puseu
respirator), puternici ageni microbicizi, responsabili de uciderea patogenului: anion
superoxid (oxigen molecular care a mai captat un electron), O2 singlet (oxigen molecular
la care un electron a srit pe o orbit cu un nivel energetic mai nalt), hidrogen peroxid
(H2O2) i radicali hidroxil (OH-). Aceti produi sunt radicali, structuri instabile ce vor
interaciona, pentru stabilizare, cu proteinele microorganismului fagocitat, eveniment ce
modific proprietile proteinelor bacteriene. Ca urmare, ele nu-i mai pot exercita funciile
i bacteria este ucis.
Totodat, pe msur ce lizozomii fuzioneaz cu fagozomul, mieloperoxidaza
coninut n lizozomi produce din hidrogen peroxid i ioni de clor hipoclorit, extrem de
toxic pentru bacteriile ingerate.
- mecanisme O2 independente sunt reprezentate de o serie de molecule cu proprieti
bactericide sau bacteriostatice, secretate de fagocitele activate, aa cum sunt lizozimul i o
serie de enzime hidrolitice, a cror activitate nu necesit oxigen (funcioneaz n condiii
de anaerobioz). De asemenea, celulele activate pot produce un grup de peptide citotoxice,

23

numite defensine, peptide cationice bogate n reziduuri de cistein, capabile de a forma la


nivelul membranelor bacteriene canale permeabile pentru ioni, mecanism prin care pot
ucide variate tipuri bacteriene: Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Haemophilus influenzae.
5. digestia este ultima etap a fagocitozei i const n degradarea enzimatic a materialului
fagocitat. Responsabile de acest eveniment sunt alte enzime coninute n lizozomi, care se
activeaz pe msur ce pH-ul din fagolizozom scade, ca urmare a generrii metaboliilor
oxigenului.
Multe microorganisme fagocitate sunt ucise prin aceste mecanisme, dar exist i
situaii n care patogenii supravieuiesc n fagocite i, chiar prolifereaz. Aceti patogeni
intracelulari includ Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Neisseria
gonorrheae, Mycobacterium avium, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium leprae,
Brucella abortus, Candida Albicans. Strategiile dezvoltate de patogeni pentru a supravieui
n fagocite sunt diverse. Unii previn fuzionarea lizozomilor cu fagozomul, alii prezint
perei rezisteni la coninutul lizozomal, iar alii degradeaz peretele fagozomului i
prolifereaz n citoplasma fagocitului. Prin aceste mecanisme, patogenii nu numai c
supravieuiesc, dar se i sustrag atacului altor componente ale sistemului imun, inclusiv cel
specific. Fa de acest tip de patogeni, a fost dezvoltat un mecanism mediat de celule numit
hipersensibilitate ntrziat (delayed-type hypersensitivity DTH). (Vezi capitolul
Hipersensibiliti).

Celulele NK. Citotoxicitatea nespecific


Celulele NK (natural killer ucigae natural) fac parte din grupul limfocitelor mari
granulare (LGL), datorit taliei mari i faptului c citoplasma lor conine numeroase
granule ce conin perforine i granzime. Dei au fost numite limfocite, sunt componente ale
aprrii nespecifice, pentru c nu exprim receptori unici i specifici pentru un anumit
antigen i nu posed memorie imunologic. Provin din precursori medulari. Se gsesc n
numr mare n splin, ficat, uter, snge periferic i n esuturile limfoide asociate
mucoaselor (MALT mucosal associated lymphoid tissues). In numr moderat, celulele
NK au fost identificate n mduva hematogen, ganglioni limfatici i peritoneu. Pot fi rapid
recrutate n aproape orice esut n infecii sau inflamaii. n absena activrii, viaa unei
celule NK mature este de 7-10 zile.

24

Sunt celule ce ucid, intele lor fiind reprezentate de unele celule infectate viral i
unele celule tumorale. Exist autori ce susin intervenia NK n supravegherea
hematopoiezei, prin ndeprtarea celulelor anormale. Abilitatea acestor celule de a distinge
ntre celulele normale i cele alterate de virusuri sau de transformarea malign a
reprezentat mult timp o enigm. Numeroase experimente au evideniat c celulele NK
exprim, fie constitutiv, fie dup stimularea de ctre o serie de citokine (IFN/, IL-2, IL15), o larg serie de molecule, unele funcionnd ca receptori activatori, iar alii ca
inhibitori, iar echilibrul ntre semnalele activatorii i cele inhibitorii este responsabil de
activarea sau nu a celulei i de exercitarea sau nu a funciei sale citotoxice.
Receptorii activatori i inhibitori sunt proteine transmembranare, ale cror domenii
extracelulare sunt responsabile de interaciunea cu liganzii. Pe baza unor caracteristici
moleculare comune, aceste structuri au fost clasificate n cteva clase.
Clasa NCR (Natural Cytotoxicity Receptor) conine numai receptori activatori,
dintre care amintim NKp30, NKp44, NKp46, molecule exprimate exclusiv pe membrana
celulelor NK, responsabile pentru uciderea direct a multor celule infectate viral i celule
tumorale.
Clasele NKG2 (Natural Killer Group 2) i KIR (Killer Immunoglobulin-like
Receptor) includ membri cu ambele caracteristici, fiind fie activatori, fie inhibitori.
Exemple de receptori activatori din clasa NKG2 sunt CD94/NKG2C i NKG2D.
CD94/NKG2C interacioneaz cu molecula non-clasic HLA-E ce prezint n cup peptide
derivate din moleculele clasice HLA-A, HLA-B, HLA-C (vezi capitolul MHC). NKG2D
interacioneaz cu molecule nrudite cu moleculele HLA clas I (ex. MIC), a cror expresie
este indus la nivelul multor celule epiteliale de ocuri termice sau alte tipuri de stress
celular i este intensificat pe membranele celulelor infectate viral sau a celor tumorale,
fcnd din aceste celule inte pentru NK.
Dintre receptorii inhibitori aparinnd clasei NKG2 amintim CD94/NKG2A i
CD94/NKG2B, ce pot interaciona cu complexe formate din peptide derivate din
moleculele HLA I clasice i HLA-E, determinnd un semnal inhibitor ce contrabalanseaz
semnalul activator mediat de interaciunea dintre CD94/NKG2C i HLA-E. O funcie
particular a receptorului CD94/NKG2A se exercit la nivelul NK-urilor uterine materne,
pe care le blocheaz n timpul sarcinii, protejnd trofoblastul i ftul, structuri ce exprim
i antigene de origine patern, non-self pentru sistemul imun matern.
Receptorii KIR sunt, de asemenea, fie activatori, fie inhibitori. Un receptor KIR
activator este KIR2DS1, ce interacioneaz cu molecula clasic HLA-C, inducnd

25

activarea celulei. Receptorii KIR ce induc blocarea activrii NK sunt KIR3DL2,


KIR3DL1 i KIR2DL1, ce interacioneaz cu moleculele HLA-A, HLA-B i, respectiv,
HLA-C. Un alt receptor important este KIR2DL4 exprimat pe NK-urile uterine.
Interaciunea acestui receptor cu ligandul HLA-G, exprimat la nivelul placentei, induce
stimularea celulelor NK, care nu se manifest, ns, prin citotoxicitate, ci prin secreia de
citokine implicate, la acest nivel, n angiogenez, aspect important pentru succesul sarcinii.
Un alt receptor important pentru exercitarea funciei NK este CD16 (FcRIII), un
receptor destinat interaciunii cu fragmentul Fc al IgG (vezi ADCC Antibody-Dependent
Cellular Cytotoxicity).
Funcii ale celulelor NK
1. Citotoxicitatea natural. Modelul deficitului de self (self-deficit sau missing-self) (fig.
8).

Fig. 8. Citotoxicitatea NK. Modelul missing-self (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

Exercitarea de ctre celula NK a funciei de ucidere depinde de echilibrul dintre


semnalele contradictorii iniiate de cele dou tipuri de receptori membranari, activatori i
inhibitori. Receptorii activatori sunt stimulai fie de liganzi ce se exprim constitutiv la
nivelul celulelor sntoase, fie de liganzi a cror expresie este indus de infecii virale,
transformare malign sau alte tipuri de stress celular. De asemenea, unele molecule MHC
non-clasice sunt liganzi ai receptorilor activatori. Spre deosebire de receptorii activatori,
cei mai muli dintre inhibitori interacioneaz numai cu molecule MHC clas I clasice,
exprimate de gazd. Cnd o celul NK scaneaz suprafaa unei celule normale a gazdei

26

(majoritatea exprim molecule MHC clas I), semnalul dominant va fi inhibitor, celula NK
nu se activeaz iar inta este salvat.
Frecvent, celulele infectate viral sau cele tumorale i reduc expresia moleculelor
MHC clas I, situaie n care receptorii inhibitori ai NK nu sunt angajai n interaciunea cu
celula int, n numr suficient de mare, astfel nct semnalele inhibitorii sunt mai slabe
dect cele activatorii ce devin dominante. Celula NK este activat, iar celula int este
ucis.
Aciunea de ucidere a intei de ctre celula NK (mecanism asemntor cu cel al
limfocitului T citotoxic CTL vezi efectori T) ncepe cu formarea conjugatului efectorint. Cele dou celule vin n contact prin intermediul mai multor perechi de molecule
membranare complementare ce funcioneaz n sistem receptor ligand. Unele sunt
reprezentate de perechile pe care receptorii activatori i inhibitori le realizeaz cu liganzii
lor, altele, cunoscute sub numele generic de molecule de adeziune (ex. LFA-1 lymphocyte function-associated antigen-1, exprimat pe NK i ligandul su ICAM-1 intercellular adhesion molecule-1, exprimat pe int) au rol esenial n creterea afinitii de
legare i n prelungirea timpului de contact dintre efector i int, iar altele sunt implicate n
mod direct n medierea morii celulei int prin inducerea apoptozei, aa cum este sistemul
membranar Fas/Fas ligand (Fas/FasL).
Imediat dup formarea conjugatului, celula NK i polarizeaz organitele celulare,
inclusiv granulele citoplasmatice, ctre zona de contact cu inta. Urmeaz eliberarea n
spaiul dintre celule a unor molecule coninute n granulele NK, numite perforine sau
citolizine. Acestea se depun pe membrana intei i, n prezena ionilor de calciu,
polimerizeaz, formnd poliperforine, ce vor strbate membrana intei, crend pori,
comparabili cu complexele de atac membranar (MAC), generate prin activarea sistemului
complement (vezi Sistemul complement). Prin porii creai de poliperforine, n interiorul
intei ptrund alte molecule eliberate din granulele NK, granzimele. Acestea activeaz o
cascad enzimatic, cascada caspazelor, ce are ca efect moartea intei prin apoptoz (fig.
9). In urma activrii acestei cascade, n nucleul intei se activeaz o endonucleaz, care va
fragmenta ADN-ul, eveniment ce este urmat de distrugerea nucleului, apoi a ntregii celule,
rezultatul fiind generarea corpilor apoptotici ce vor fi, la rndul lor, ndeprtai, de obicei,
prin fagocitoz.
Retroinseria perforinelor n membrana proprie a efectorului pare s fie mpiedicat
de migrarea mai lent a altor molecule coninute n granulele NK, de exemplu, condroitin-

27

sulfatul A, un proteoglican rezistent la proteaze. Rolul acestei molecule este, ns,


controversat.
Activarea cascadei caspazelor n celula int i moartea acesteia prin apoptoz poate
fi indus i prin interaciunea dintre molecula FasL, exprimat pe NK i Fas, exprimat la
nivelul intei (fig. 9).

Fig. 9. Mecanismul de citotoxicitate extracelular (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

Fig. 10. ADCC Citotoxicitate dependent de anticorpi

Formarea conjugatului dintre celula NK i inta sa celular poate fi mediat i de


alte molecule. NK exprim pe membran cantiti mari de receptori Fc (FcRIII sau
CD16), ce interacioneaz cu fragmentele Fc ale imunoglobulinelor IgG, fiind capabil, n
aceast manier, s interacioneze cu inta opsonizat cu anticorpi aparinnd clasei IgG
(vezi Imunoglobulinele). Mecanismul se numeste ADCC (Antibody-Dependent Cellular
Cytotoxicity - citotoxicitate celular dependent de anticorp) (fig. 10) i nu este
caracteristic doar celulelor NK. Multe alte celule pot interaciona cu celule opsonizate cu

28

anticorpi in vederea internalizrii sau uciderii lor extracelulare: monocite, macrofage,


PMN, eozinofile.
2. Secreia de citokine.
Celulele NK joac roluri importante n reglarea rspunsurilor imune specifice i
nespecifice i n stabilirea de cooperri celulare, prin secreia de citokine, ca de exemplu
IFN- - interferon-gamma, dar i TNF (tumor necrosis factor), IL-1 (interleukina-1), IL-3,
IL-6. La rndul su, NK exprim o serie de receptori pentru citokine, cum sunt receptorii
pentru interferonii i , IL-2R, IL-12R, IL-15R.. Reprezint prima linie de aprare n
infeciile virale i n cele cu unele bacterii intracelulare. n cursul unei infecii virale,
nivelele de secreie ale citokinelor din familia interferonilor cresc rapid (vezi Interferonii),
ceea ce are drept urmare recrutarea rapid i activarea celulelor NK, responsabile de
uciderea celulelor infectate i de controlul replicrii virale, cel puin pn la generarea de
limfocite T citotoxice specfice, a cror formare necesit n jur de 7 zile.

Celule NKT
Celulele NKT sunt celule ale lineajului T ce combin caracteristici morfologice i
funcionale ale limfocitelor T i ale celulelor NK. Din punct de vedere morfologic, ele
seamn cu celulele T convenionale. Se gsesc n numr relativ sczut, fiind localizate n
sngele periferic, ficat, organele limfoide secundare, timus i mduva osoas.
Celula NKT exprim pe membran, pe lng unii markeri NK din grupurile NKG2
i KIR, multiple copii ale unui receptor asemntor TCR (T-cell receptor ). Spre
deosebire de diversitatea extraordinar a repertoriului receptorilor TCR exprimai de
limfocitele T (vezi receptorul pentru antigen al limfocitului T), moleculele TCR
exprimate de celulele NKT sunt foarte asemntoare, motiv pentru care, aceti receptori
sunt considerai semi-invariani, ceea ce face ca populaia de celule NKT s recunoasc un
numr relativ redus de antigene diferite. Din punct de vedere al co-receptorilor, celulele
NKT umane pot fi CD4+, CD8+ sau dublu negative (CD4-CD8-).
Antigenele recunoscute de celulele NKT sunt structuri de natur lipidic i
glicolipidic, prezentate n asociere cu moleculele CD1, exprimate pe membrana APCurilor profesioniste sau ne-profesioniste. Din punct de vedere structural, proteinele CD1

29

prezint omologie redus cu MHC clas I, coninnd n molecul 2-microglobulina (vezi


MHC), dar sunt non-polimorfice spre deosebire de proteinele MHC clasice.
Activarea acestor celule este urmat rapid de proliferare (expansiune clonal) i de
secreia de citokine, fr s fie necesar diferenierea lor n celule efector, aspect ce
demonstreaz c NKT-urile sunt componente importante n prima linie de aprare fa de
unele tipuri de bacterii sau fa de virusuri. Funcia principal a acestor celule pare s fie
mai degrab secreia de citokine, dect abilitatea de a ucide inte celulare, dei,
experimente realizate in vitro, au evideniat capacitatea NKT-urilor de a ucide prin aceleai
mecanisme ca i celulele NK, aceleai tipuri de inte celulare. Principalele citokine pe care
NKT-urile le secret foarte rapid (1-2 ore) dup activare sunt IL-4, IFN-, IL-2 i IL-10.

Eozinofile
Eozinofilele sunt celule din familia granulocitelor, alturi de PMN-uri i bazofile.
Reprezint mai puin de 4% din totalul leucocitelor, cea mai mare parte a lor (99%) fiind
cantonat n esuturile conjunctive. Sunt celule mari, cu nucleu bilobat i citoplasm bogat
n lizozomi, ce conin numeroase enzime. Dintre acestea amintim: MBP (proteina bazic
major), peroxidaza, proteine cationice, fosfataze, esteraze, sulfataze, etc. (fig. 11).

Fig. 11. Eozinofil (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Eozinofilele sunt capabile n anumite situaii s fagociteze i s digere o serie de


microorganisme (ex. Escherichia coli, Candida albicans) i complexe imune (complexe
antigen-anticorp), dar principalul lor mecanism de aciune este citotoxicitatea extracelular
nespecific; elibereaz din lizozomi mediatori citotoxici (MBP, peroxidaza, proteina
cationic, etc) ce se leag de membranele patogenilor i provoac permeabilizarea
acestora. Prin acest mecanism, eozinofilele ucid o serie de bacterii i parazii, unii cu

30

dimensiuni foarte mari (nematode), avnd rol esenial n aprarea anti-parazitar (fig. 12).
Pot media ADCC, ntruct exprim receptori Fc.

Fig. 12. Celule implicate n aprararea anti-parazitar (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed.
WH Freeman and Company, 2000)

Intervin,

de

asemenea,

ntr-o

serie

de

situaii

patologice,

cum

sunt

hipersensibilitile de tip I (vezi Hipersensibilitile).

Bazofile
Bazofilele (fig. 13) reprezint 1% din totalul leucocitelor. Sunt celule circulante i
au, probabil, un rol asemntor mastocitelor, fiind capabile s migreze n situsurile
inflamatorii, unde elibereaz substane ce moduleaz permeabilitatea vascular (vezi
Reacia inflamatorie).

Fig. 13. Bazofil (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

31

Mastocite
Mastocitele sunt celule predominant tisulare, populnd o larg varietate de esuturi,
inclusiv pielea, esuturile conjunctive ale multor organe i epiteliile mucoaselor tracturilor
digestiv, respirator i genito-urinar. Granulaiile lor, mai numeroase dect ale bazofilelor,
conin o serie de factori importani n activarea endoteliului i n iniierea i dezvoltarea
reaciei inflamatorii (vezi Reacia inflamatorie). Totodat intervin, prin coninutul
granulelor lor citoplasmatice, n aprarea anti-parazitar.

Celule dendritice
Celulele dendritice (DCs) reprezint o populaie de celule heterogene, cu o larg
rspndire n organism. Prezint, n general, forme neregulate, cu prelungiri citoplasmatice
lungi, ce seamn cu dendritele unui neuron. Sunt celule extrem de importante, ce
funcioneaz ca celule prezentatoare de antigen, fiind singurele capabile s activeze
limfocitele T naive.

Fig. 14. Celula dendritic APC profesionist (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

32

In condiii normale, n indivizii sntoi, celulele dendritice rmn ntr-un stadiu de


celul imatur i prezint n cupele MHC peptide self, neactivnd, n acest fel, limfocitele
T (vezi Reglarea RI). In situaia confruntrii cu patogeni, celulele dendritice internalizeaz
structurile non-self i se matureaz. Asociaz peptide antigenice moleculelor MHC self,
prezentndu-le limfocitelor T naive i activnd aceste celule, ceea ce va duce la iniierea i
dezvoltarea unui rspuns imun specific (fig. 14).
Strategiile componentelor celulare ale sistemului imun nespecific de
recunoatere a structurilor non-self.
1.- recunoaterea non-self-ului microbian se refer la recunoaterea de structuri moleculare
care sunt caracteristice doar microorganismelor (nu sunt produse de gazd);
2.- recunoaterea de structuri provenite din celulele self alterate;
3.- recunoaterea missing-self.
Celulele aprrii nespecifice recunosc la nivelul patogenilor o serie de molecule,
cunoscute sub numele generic de PAMPs (pathogen-associated molecular patterns), iar
receptorii implicai n interaciunea cu aceste structuri au fost denumii PRRs (patternrecognition receptors). La rndul lor, PRRs sunt clasificai n trei categorii:
1. PRRs care semnalizeaz prezena infeciei. Sunt prezeni fie pe membranele
celulelor, fie intracelular, iar interaciunea lor cu PAMPs duce la activarea unor ci de
semnalizare intracelulare pro-inflamatorii, ce au ca efect activarea unor gene i sinteza de:
a) proteine cu efect direct anti-microbial,
b) citokine i chemokine pro-inflamatorii,
c) produi care controleaz activarea rspunsurilor imune specifice.
Cei mai cunoscui receptori din aceast clas sunt receptorii toll-like (TLRs Tolllike receptors).
2. PRRs fagocitici sau endocitici (scavenger) care, dup legarea PAMPs, mediaz
preluarea patogenului de ctre celula efector.
3. PRRs secretai, cu funcii diferite:
- activeaz sistemul complement;
- opsonizeaz microbii (funcioneaz ca opsonine);
- funcioneaz ca molecule accesorii pentru recunoaterea PAMPs de ctre receptori
membranari ca TLRs.

33

Sistemul imun nespecific componente moleculare


1. Sistemul complement (SC)
In 1890, Jules Bordet de la Institutul Pasteur din Paris a observat c antiserul
obinut dup administrarea bacteriei Vibrio cholerae la oaie, are capacitatea de a liza in
vitro bacteriile respective. Inclzirea antiserului abolete aceast capacitate, iar serul
obinut de la o oaie neimunizat, adugat antiserului inactivat prin cldur, restabilete
acest potenial bacteriolitic. Bordet a intuit corect c activitatea bacteriolitic a antiserului
obinut dup imunizare se datoreaz unor factori diferii. O prim substan esenial este
reprezentat de anticorpii specifici, sintetizai de organismul imunizat cu Vibrio cholerae i
care sunt rezisteni la cldur, iar a doua substan, un component sensibil la cldur,
responsabil de activitatea litic i care se gsete inclusiv n serul animalelor neimunizate.
Bordet a numit acest al doilea component alexin, cuvnt de origine greac, care
nseamn a preveni, a prentmpina. Termenul care s-a impus, complement, a fost
utilizat prima dat de Paul Erlich i definea activitatea serului de completare a efectelor
mediate de anticorpi. Cercetrile ulterioare au evideniat c, de fapt, nu este vorba de o
substan, ci de un ntreg grup de factori proteici i glicoproteici.
Sistemul complement (SC) este unul dintre cele mai importante componente
umorale ale sistemului imun nespecific. Cuprinde aproximativ 30 de proteine, unele
solubile, altele exprimate pe membrane celulare, sintetizate n special de ficat, dar i de
monocitele circulante, macrofage, celulele epiteliale de la nivelul aparatelor digestiv i urogenital. Cele mai multe sunt zimogeni, adic pro-enzime, necesitnd clivaj proteolitic
pentru a deveni active. Funcioneaz n cascad enzimatic, adic fiecare produs care
rezult dintr-o reacie, va intra sau va cataliza urmtoarea reacie. Unele componente ale
sistemului complement au fost denumite cu litera C, urmat de o cifr, de la 1 la 9 (cifra
corespunde ordinii descoperirii lor), altele au fost denumite cu alte litere (factor B, factor
D, factor H, factor I, etc), iar unele au diverse denumiri, de ex. properdina, vitronectina,
etc. Complementul poate fi activat pe dou ci majore: calea alternativ, a crei iniiere
necesit prezena unei membrane non-self (ex. o bacterie) i calea clasic, a crei iniiere
presupune prezena complexelor imune, antigen-anticorp.
Activarea sistemului complement pe cale alternativ. Cel mai important
component al SC este C3. Se gsete n cea mai mare concentraie n ser, 1,2 mg/ml, i este
un heterodimer, alctuit din dou lanuri polipeptidice, numite i . La nivelul lanului

34

exist o legtur intern tioester, ntre un reziduu de glutamin i unul de cistein aflate n
vecintate (mai precis, ntre grupul carboxil, -COOH al glutaminei i grupul sulfhidril, -SH
al cisteinei).

Fig. 15. Hidroliza C3 i iniierea cii alternative de activare a sistemului complement - generarea
C3-convertazei cii alternative.

Aceast legtur este foarte sensibil, att la aciunea enzimelor, ct i la aciunea


apei. Hidroliza spontan a factorului C3, care se produce continuu, la un nivel sczut n
organism, duce la apariia unui component activ numit C3i sau C3(H2O), circuit care
poart numele de tick-over-ul lui C3 (n romnete, tick-over nsemn relanti, ceea ce
sugereaz un proces continuu, cu intensitate extrem de redus) ). C3i reprezint un situs de
legare pentru factorul B, cu care va forma complexul C3iB (fig. 15). Asupra acestui
complex acioneaz factorul D, o serin-proteaz activ constitutiv, ce cliveaz factorul B
din complex.
De regul, n cazul clivrilor moleculare ce se produc n cursul activrii
complementului, se obin dou fragmente, unul mai mare i unul mai mic. Prin convenie,
fragmentul mare se noteaz cu litera b, iar fragmentul mic cu a. Singura excepie este

35

componentul C2, fragmentul mare este C2a, iar fragmentul mic, C2b (Vezi Calea clasic
de activare a sistemului complement).
Aciunea factorului D asupra complexului C3iB cliveaz factorul B n dou
fragmente: unul mic, Ba i unul mare Bb, ce rmne legat de C3i. Complexul C3iBb este o
C3 convertaz, o enzim activ asupra componentului C3, pe care l cliveaz n dou
fragmente, C3a i C3b (fig. 15). Datorit faptului c C3 convertaza, C3iBb, se formeaz i
acioneaz n faz fluid, este foarte instabil, fiind rapid degradat de unele componente
ale SC, ce funcioneaz ca proteine de control, Factorul H i Factorul I. n aceast manier,
cantitatea de molecule C3 pe care convertaza le cliveaz este foarte mic. n consecin,
continuu, n organism, n urma acestor procese se produc mici cantiti de C3b. Legtura
tioester din molecula C3 rmne la nivelul fragmentului C3b, molecul instabil i avid
de electroni. Cea mai mare parte a fragmentelor C3b sunt inactivate de ap, altele, pentru a
satisface aviditatea legturii tioester pentru electroni, se vor lega pe membrane celulare, la
nivelul crora se exprim proteine i glucide, molecule ce prezint n structur grupri
electrono-donoare, amino- i, respectiv, HO-. Celulele pe membrana crora se pot depune
fragmentele C3b sunt fie self, fie non-self (ex., bacterii).

Fig. 16. Reglarea nivelului C3b.

Fragmentele C3b legate pe membranele self (fig. 16) sunt rapid inactivate de
acidul sialic, prezent n cantiti crescute la mamifere, eveniment ce are drept consecin
oprirea activrii complementului. Totodat, C3b, instabil n soluie, este rapid complexat
de factorul H. Complexul C3bH este degradat de factorul I, o proteaz ce cliveaz C3b din
complex, iniial, n dou componente, iC3b i C3f, i apoi, mai departe degradeaz iC3b n

36

C3c i C3dg. Astfel, dei C3b este generat continuu, nivelul su este meninut, prin aceste
mecanisme de reglare, la o valoare ce nu determin efecte negative (fig. 16).
Membranele bacteriilor, ale fungilor i anvelopele virale conin cantiti reduse de
acid sialic, astfel c legarea fragmentelor C3b la nivelul lor este urmat de persistena lor n
stare activ i de complexarea lor cu Factorul B, n prezena Mg2+. Factorul B din
complexul C3bB este clivat de Factorul D n dou fragmente, Ba i C3bBb, o enzim
numit C3 convertaza cii alternative care, la rndul ei, cliveaz noi molecule C3 n C3a i
C3b. Spre deosebire de C3iBb, produs n faz fluid i instabil, C3bBb se formeaz pe
membran (fig. 15). Dei perioada sa de njumtire nu este mai lung de 5 minute,
stabilizarea sa se produce prin ataarea unui alt component al SC, properdina (P), astfel
nct, perioada de njumtire crete la 30 de minute. n consecin, enzima va cliva o
mare cantitate de molecule C3 cu formarea unei mari cantiti de fragmente C3b, care,
datorit legturii tioester se vor lega pe membrana bacteriei, la nivelul creia au luat
natere (n 5 minute, mai mult de 2x106 molecule C3b se leag pe membrana antigenic),
unde vor genera noi C3 convertaze, ce vor cliva alte molecule C3, rezultnd noi fragmente
C3b. Unele fragmente C3b se vor lega de moleculele de C3 convertaz, formnd complexe
trimoleculare, C3bBbC3b, numite C5 convertaza cii alternative (fig. 17).

Fig. 17. Calea post-C3 i generarea MAC

37

C5 convertaza (fig. 17) acioneaz asupra componentului C5, clivndu-l n dou


fragmente, C5a i C5b. C5b se depune pe membran, unde va lega alte componente, C6,
C7, C8 i mai multe molecule C9. Complexul molecular C5b-C9(n) se numete complex
de atac membranar (MAC). Pe membrana bacterian se formeaz multe asemenea
complexe care au aspectul unor pori ce strbat membrana, ducnd la liza osmotic a intei
(mecanismul este asemntor cu aciunea perforinelor eliberate din granulele NK).
Activarea sistemului complement pe cale clasic. Spre deosebire de activarea pe
cale alternativ, ce necesit numai prezena unei membrane non-self, activarea
complementului pe cale clasic presupune prezena complexelor antigen-anticorp,
formate sau depuse pe membrane celulare. Nici anticorpii singuri i nici complexele imune
circulante nu pot activa complementul.

Fig. 18. Factorul C1 (C1qrs).

Primul component ce intr n reacie este C1, care este, de fapt, un complex
pentamolecular, Ca2+-dependent, format din trei tipuri de molecule: 1 molecul numit
C1q, 2 molecule identice numite C1r i dou molecule identice numite C1s (fig.). C1q
este alctuit la rndul su din 18 lanuri polipeptidice ce se asociaz cte 3 i formeaz 6
brae colagen-like. Aceast organizare confer moleculei aspectul unui buchet de lalele un trunchi comun din care pornesc 6 brae, fiecare terminat printr-un domeniu globular.
Domeniile globulare de la capetele braelor lui C1q reprezint situsurile cu care C1q
interacioneaz cu moleculele de anticorpi (fig. . 1), la nivelul domeniilor constante CH2
sau CH3 (vezi structura imunoglobulinelor). Printre cele 6 brae ale lui C1q, se gsesc cele
dou molecule C1r i cele dou molecule C1s. n stare de repaus, ntre braele lui C1q se
mai gsete o molecul, numit C1-Inh (C1 inhibitor). Pentru ca C1 s se activeze, cel

38

puin dou brae ale lui C1q trebuie s interacioneze cu anticorpii din complexe. n acest
fel, braele sufer o modificare a conformaiei ce permite lui C1-Inh s prseasc
complexul.
Totodat i moleculele C1r sufer modificri conformaionale ce au ca efect
convertirea lor n serin-proteaze active. Ele cliveaz C1s, genernd formele active ale
acestor enzime (fig. 19).

Fig. 19. Generarea C3 convertazei cii clasice

C1s acioneaz mai nti asupra lui C4, pe care l cliveaz n dou fragmente, unul
mic, C4a i unul mare, C4b. Legtura tioester, prezent n structura lor, determin
fragmentele C4b s se depun pe cea mai apropiat membran, adic acolo unde sunt
depuse sau formate complexele antigen-anticorp. C4b depus pe membran interacioneaz
cu C2, cu care formeaz complexul C4bC2. Asupra acestuia acioneaz tot C1s activat,
care cliveaz C2 ntr-un fragment mic, C2b i unul mare, C2a, ce rmne ataat de C4b,
formnd C3 convertaza cii clasice, C4bC2a. Aceasta este o enzim stabil i va cliva
cantiti importante de C3 n C3a i C3b. O singur convertaz genereaz peste 200 de
fragmente C3b. Acestea se depun pe membrana antigenului i unele dintre ele se leag la
C3 convertaz i formeaz un complex trimolecular, C4bC2aC3b, care este C5
convertaza cii clasice. Aceasta cliveaz C5 n C5a i C5b, care se depune pe membran,
leag C6, C7, C8 i mai multe molecule C9, formnd complexul de atac membranar
(MAC) i determinnd liza osmotic a intei (fig. 17).

39

Calea lectinelor a fost evideniat relativ recent i este o alt cale de activare a SC.
Lectinele sunt proteine ce leag carbohidrai de pe membranele bacteriene, iar calea de
activare iniiat de ele implic o serie de componente ale cii clasice, C4 i C2, dei este
independent de anticorpi, la fel ca i calea alternativ. Activarea este iniiat de proteina
ce leag manoza (MBL mannose-binding lectin), structur ce face parte dintr-o familie
de proteine numite colectine, sintetizate n ficat. MBL se leag de reziduurile de manoz de
la

nivelul

glicoproteinelor

glucidelor

exprimate

pe

membranele

anumitor

microorganisme, asociaz o serin-proteaz (MASP MBL activated serin protease), cu


care formeaz un complex activ ce are capacitatea de a cliva C4, apoi C2, evenimente ce
vor duce la generarea C3 convertazei, apoi a C5 convertazei i, mai departe, la formarea
complexului de atac membranar (MAC). MBL poate aciona ns i direct, ca opsonin.
Reglarea sistemului complement. Ca orice sistem biologic, activitatea SC este
strict controlat, cu att mai mult cu ct, fiind un sistem nespecific, el poate ataca i
distruge componentele celulare ale gazdei. Proprietatea componentelor SC, de a fi extrem
de labile i de fi rapid inactivate odat ce se ndeprteaz de inta celular, reprezint un
prim mecanism de control, valabil pentru toate cele trei ci de activare. n plus, sistemul
complement cuprinde, n afara componentelor ce particip la iniierea i funcionarea
cascadelor enzimatice, i o serie de componente ce funcioneaz ca factori de control.
Acetia au potenialul de a inactiva unii factori ai SC, aa cum este C1-Inh, care, avnd
capacitatea de a lega moleculele C1r i C1s, le disociaz de C1q, mpiedicnd clivarea C4
i C2.
Un moment important n funcionarea SC, indiferent de calea de activare, este
generarea C3 convertazelor i clivarea unor cantiti importante de C3 n C3a i C3b, n
cursul buclei de amplificare. C3b generat n exces ar putea s se depun i pe membranele
celulelor gazdei din vecintatea celei pe care s-au format convertazele (celula int). La
nivelul celulelor self sntoase, moleculele C3b ar putea funciona ca opsonine, mediind
fagocitarea acestora sau pot genera C3 convertaze, ceea ce va duce la amplificarea cascadei
enzimatice i generarea MAC. ndeprtarea fragmentelor C3b la o distan mai mare de 40
nm de int este urmat de hidroliza rapid a moleculelor, ceea ce mpiedic depunerea lor
pe membranele self din vecintate. Totui, dac acest eveniment se produce, intervin alte
mecanisme bazate pe aciunea unor molecule reglatoare. De exemplu, n calea clasic i
cea a lectinelor, formarea C3 convertazei este blocat de trei proteine reglatoare: una
solubil, numit C4-binding protein (C4BP) i dou membranare, numite CR1
(complement receptor type 1) i MCP (membrane cofactor protein). Fiecare dintre aceste

40

trei molecule prezint capacitatea de a lega C4b prevenind, astfel, interaciunea sa cu C2 i


formarea C3 convertazei. Dup ce C4b este legat de una dintre proteinele reglatoare, el va
fi clivat de factorul I n dou fragmente inactive, C4c, solubil i C4d, legat de membran.
Evenimente asemntoare previn formarea C3 convertazei din calea alternativ, C3bBb. n
aceast situaie, intervin CR1, MCP i factorul H. Odat ce aceti factori au legat C3b,
factorul I cliveaz C3 n dou fragmente, unul solubil, C3f i unul membranar, numit iC3b.
Asupra lui iC3b acioneaz din nou factorul I i se genereaz molecule inactive, una
solubil, C3c i una membranar, C3dg.
n cazul n care, totui C3 convertaza s-a format pe o membran sntoas, exist
mecanisme suplimentare de prevenire a activrii SC. Unele molecule reglatoare care pot
mpiedica generarea convertazelor, au i capacitatea de a le disocia (CR1, C4BP, Factorul
H). n plus, intervine o alt glicoprotein ancorat de membranele self, DAF (decayaccelerating factor), capabil s disocieze C3 convertaza. Imediat ce convertazele au fost
disociate, componentele ce rezult sunt degradate de factorul I.
n cursul activrii SC la nivelul unei inte celulare, unele complexe C5bC6C7 pot fi
eliberate i se pot depune pe membrane self, ducnd la liza acestor "martori inoceni".
Prevenirea acestui eveniment o realizeaz o protein solubil, proteina S care, legnd
complexul C5b67, previne tranziia sa ctre forma hidrofob necesar inseriei sale
ulterioare n membrana celulelor din vecintatea intei. Formarea MAC mai poate fi
blocat de ctre dou molecule membranare, numite HRF (homologous restriction factor)
i CD59. Ele leag C8 i previn asamblarea moleculelor C9.
Funciile sistemului complement (fig. 20)
Liza celular. Activarea complementului pe membrane celulare (hematii, celule
nucleate), membrane bacteriene sau la nivelul particulelor virale duce la formarea
complexelor de atac membranar (MAC), ce strpung membrana, conducnd la liza
osmotic a intelor.
SC este eficient fa de multe bacterii i virusuri. Cele mai multe bacterii Gramnegative sunt susceptibile la aciunea SC. Totui, unele dintre ele i-au dezvoltat
mecanisme de rezisten la liz. De exemplu, tulpini de Escherichia coli i Salmonella
prezint, la nivelul membranelor, cantiti crescute de LPS (lipopolizaharid), organizat sub
forma unor lanuri lungi, ce mpiedic inseria MAC. Unele tulpini de Neisseria rezistente

41

la complement prezint o serie de proteine membranare care interacioneaz cu MAC,


blocndu-i inseria n membran.
Bacteriile Gram-pozitive sunt, n general, rezistente la liza mediat de complement,
datorit mai multor strategii: strat de peptidoglicani, ce mpiedic inseria MAC n
membran, proteine membranare ce pot lega componente ale SC, ntrerupnd cascada
enzimatic, blocarea interaciunilor dintre C3b i receptorii pentru complement (CR1), de
pe fagocite, etc.
SC este relativ ineficient asupra celulelor nucleate, cum sunt cele tumorale, care pot
endocita MAC i-i pot reface stabilitatea osmotic.

Fig. 20. Funciile sistemului complement (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

Opsonizarea reprezint un fenomen de nvelire (acoperire) a intelor celulare cu


molecule ce se depun pe membranele lor i care au fost numite generic opsonine. Acest
fenomen mediaz i amplific, n acelai timp, fagocitoza structurilor non-self, ntruct
fagocitele exprim pe membranele lor receptori pentru aceste molecule. n cursul activrii
SC, se genereaz o serie de componente ce pot funciona ca opsonine, C3b, C4b, iC3b.
Fagocitele exprim receptori pentru complement (CR1, CR2, CR3 i CR4), care
interacioneaz cu opsoninele ce mbrac celula int i fagocitarea acesteia este mult
amplificat.
Neutralizarea viral. Mecanismele prin care SC intervine n aprarea anti-viral
includ liza particulei virale prin generarea MAC la nivelul anvelopei virale, opsonizarea i
medierea fagocitozei particulelor opsonizate, stimularea formrii de agregate din
particulele virale, care i pierd, astfel, capacitatea de a penetra celulele gazdei, etc.

42

Clearance-ul complexelor imune, adic ndeprtarea complexelor antigenanticorp, formate n cursul RI. Acest mecanism este extrem de important, deoarece,
complexele imune se pot depune pe membrane celulare, interacionnd cu receptori Fc sau
cu receptori pentru complement i pot media activarea SC i dezvoltarea de reacii
inflamatorii, asociate cu distrucii tisulare, aa cum se ntmpl n bolile autoimune, unde
capacitatea de clearance este depit.
Dei complexele imune circulante nu au capacitatea de a activa SC, totui ele pot
lega fragmente C3b. Acestea interacioneaz cu CR1 de pe membranele fagocitelor,
mediind internalizarea i degradarea intracelular a acestora. Un alt mecanism de clearance
este cel n care intervin eritrocitele. CR1 se exprim i pe membrana hematiilor, astfel nct
aceste celule pot lega complexe imune nvelite cu C3b (fig. 21). Hematiile nu
internalizeaz complexele, ci le transport n splin i ficat, unde acestea sunt distruse tot
prin fagocitoz.

Fig. 21. Implicarea sistemului complement n clearance-ul complexelor imune (adaptat dup Kuby
Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

43

Activarea celular i medierea reaciei inflamatorii. n cursul activrii


complementului, se genereaz o serie de molecule care vor funciona ca opsonine,
depunndu-se pe membranele patogenilor, pregtindu-i astfel pentru a fi fagocitai (vezi
Opsonizarea). Fragmentele mici, C3a i C5a (n mai mic msur C4a), ce se formeaz n
urma clivrilor moleculare din cursul activrii complementului, sunt molecule active. Ele
se numesc anafilatoxine i funcioneaz, pe de o parte, ca factori chemotactici, atrgnd
n focarul inflamator celule efectoare (leucocite) i, pe de alt parte, interacioneaz cu
receptori de la nivelul mastocitelor i bazofilelor circulante, activndu-le.

2. Proteinele de faz acut


Se numesc astfel, pentru c, n cursul unui proces inflamator acut, sinteza lor se
intensific i concentraia lor crete dramatic. Exemple: proteina C reactiv (CRP),
fibrinogenul, ceruloplasmina, serum-amiloid A, 1-antitripsina, 2-macroglobulina.
Sinteza lor este stimulat de unii produi bacterieni (endotoxine) sau de citokine proinflamatorii (IL-1, IL-6, TNF-) ce acioneaz asupra ficatului, sursa major a acestor
proteine. Prototipul acestei familii moleculare este proteina C reactiv, al crei nivel seric
crete de 1000 de ori nivelul bazal n cursul unui rspuns inflamator acut. Are capacitatea
de a se depune pe membranele multor patogeni, activeaz SC, mediind opsonizarea intei
cu C3b sau generarea MAC.
Reacia inflamatorie acut este un proces complex, iniiat de distrucii tisulare cauzate fie
de factori interni (endogeni), cum sunt necroza tisular sau fracturile osoase, fie de factori
externi (exogeni). Acetia includ lezri mecanice (ex. plgi), fizice (ex. arsuri), chimice
(ex. expunere la substane corozive), biologice (infecii produse de microorganisme) sau
imunologice (ex. reacii de hipersensibilitate). Indiferent de natura lor, aceti factori vor
declana o serie de evenimente ce funcioneaz ca o cascad, cunoscut sub numele de
reacie inflamatorie acut sau rspuns inflamator acut, al crui scop este s ofere o
protecie rapid i s limiteze distruciile tisulare.
Rspunsul inflamator acut cuprinde reacii sistemice i locale.
Rspunsul local se manifest prin semnele clinice descrise acum 2000 de ani de
Celsus i care sunt tumor (edem), rubor (roea), calor (temperatura crescut), dolor
(durere), la care s-a adugat ulterior impotena funcional (functio laesa) a ariei inflamate.

44

La cteva minute dup apariia unei lezri, procesul inflamator ncepe cu activarea
i creterea sintezei unui grup de molecule numite proteine de faz acut (vezi Proteine
de faz acut), care vor induce rspunsuri inflamatorii, localizate i sistemice. Rspunsul
inflamator localizat este generat, n parte, de activarea sistemelor complement, de
coagulare i cel al kininelor. Rspunsul inflamator sistemic include febra, creterea
produciei de celule albe, intensificarea secreiei de hidrocortizon i hormon
adrenocorticotrop (ACTH), amplificarea sintezei de proteine de faz acut (fig. 22).
Efectele sistemice se datoreaz n special unor citokine. Dintre acestea, cele mai
importante par s fie IL-1, IL-6 i TNF-, sintetizate n special de macrofagele din situsul
inflamator. Aceste citokine acioneaz direct la nivelul hepatocitelor (aciune la distan de
surs aciune endocrin), amplificnd sinteza de proteine de faz acut; de asemenea, IL1 acioneaz la nivelul centrului termoreglator hipotalamic, stimulnd termogeneza si
inducnd febra, motiv pentru care este numit factor pirogen endogen. TNF- acioneaz
asupra macrofagelor, ce vor secreta factori de stimulare a coloniilor (M-CSF, G-CSF i
GM-CSF), ce, la rndul lor, vor stimula hematopoieza i creterea temporar a numrului
de leucocite. Aceste citokine induc, de asemenea, modificri la nivelul vascularizaiei din
aria afectat, de obicei, stimulnd expresia unor molecule de adeziune, ce vor facilita
aderarea leucocitelor de celulele endoteliale i diapedeza lor.

Fig. 22. Rspuns inflamator efecte (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

45

Local, proteinele de faz acut, ca proteina C reactiv sau MBL (lectina ce


leag manoza) se leag de membranele bacteriilor din situsul inflamator i activeaz
sistemul complement, pe cale clasic i, respectiv, pe cea a lectinelor, ceea ce va conduce
la liza acestora, prin generarea complexelor de atac membranar (MAC). De asemenea,
proteinele de faz acut pot media i conduce la amplificarea fagocitrii patogenilor,
datorit abilitii lor de a funciona ca opsonine.
n cursul activrii sistemului complement se genereaz o serie de molecule, dintre
care unele pot funciona ca opsonine, amplificnd i mai mult fagocitoza patogenilor (C3b,
iC3b, C3dg, etc).
Anafilatoxinele C3a i C5a (n mai mic msur, i C4a) generate n cursul activrii
sistemului complement, pe de o parte, atrag n focarul inflamator celule din torentul
circulator, funcionnd ca factori chemotactici i, pe de alt parte, activeaz mastocitele
tisulare, prin interaciunea direct cu receptori exprimai pe membranele acestor celule (fig.
23). Mastocitul are un rol central n inflamaie i activarea sa se materializeaz prin
evenimente importante. Primul, n ordine temporal, este reprezentat de degranularea
mastocitar, adic eliberarea rapid a unor substane, cum sunt histamina, NCF
(neutrophil-chemotactic factor), ECF (eosinophilic chemotactic factor), PAF (plateletactivating factor), etc care, fiind stocate n granulele citoplasmatice, se numesc factori preformai.

Fig. 23. Reacie inflamatorie acut efecte locale (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

46

Histamina acioneaz asupra vascularizaiei locale, inducnd vasodilataie, creterea


permeabilitii capilare i contracia musculaturii netede, ceea ce va permite retracia
celulelor endoteliale i crearea de spaii prin care celulele efector din torentul circulator vor
putea ptrunde n esuturi, fenomen activ numit diapedez. Mai mult, unii mediatori
eliberai de mastocit (PAF) au efect direct de activare a endoteliului vascular din aria
inflamat, care va exprima molecule de adeziune ce vor permite interaciunea cu celulele
efector. n mod normal, endoteliul ce mrginete peretele vaselor nu exprim multe
molecule de adeziune, pentru a nu interaciona cu celulele din torentul circulator i pentru a
nu permite acestora s extravazeze i s se acumuleze n esuturile subjacente. n condiiile
formrii unui situs inflamator, sub aciunea unor factori eliberai n special de mastocit, dar
i de macrofage, endoteliul vaselor din zona afectat (venule post-capilare) se activeaz i
va exprima o serie de molecule de adeziune ce vor avea ca rol interaciunea cu celulele din
circulaie. Dintre aceste molecule de adeziune, amintim molecule din familia selectinelor,
E- i P-selectina, i molecule din familia imunoglobulinelor, cum sunt ICAM-1
(intercellular adhesion molecule-1), ICAM-2 (intercellular adhesion molecule-2) i
VCAM-1 (vascular cell adhesion molecule-1) (fig. 23, 24).
Un alt eveniment important este sinteza de ctre mastocitul activat de noi mediatori
ai inflamaiei. Metabolizarea acidului arahidonic pe calea ciclo-oxigenazei va duce la
sinteza de prostaglandine i tromboxani, iar pe calea lipo-oxigenazei, la sinteza de
leukotriene, factori vaso-activi, cu efecte mai puternice i mai de durat comparativ cu
histamina, ce vor amplifica statusul activator al endoteliului vaselor din aria inflamat. Pe
lng acest efect, unele leucotriene i pot exercita i efecte chemotactice.
Toate aceste modificri ce se produc la nivelul vascularizaiei din zona inflamat au
ca scop facilitarea recrutrii leucocitelor din circulaia sanguin, favorizarea extravazrii
lor n esutul inflamat i acumularea lor n aceast arie invadat de patogeni.
Mastocitul uman secret, de asemenea, i o serie de citokine (IL-3, IL-4, IL-5, IL-6,
TNF-), cu efecte variate, n funcie de tipurile celulare asupra crora acioneaz:
recruteaz n situsul inflamator neutrofile i eozinofile, activeaz monocitele i
macrofagele, etc.
Citokinele reprezint un termen generic care definete substanele solubile
secretate de ctre celule. Acestea joac un rol cheie n rspunsul inflamator, cele mai
importante fiind interleukina-1 (IL-1), IL-6 i factorul de necroz tumoral- (TNF-),
considerate cele mai importante citokine pro-inflamatorii. Sunt sintetizate de multe tipuri
celulare, printre care macrofagele activate, i induc, alturi de histamina mastocitar, la

47

nivelul celulelor endoteliale, expresia moleculelor de adeziune i creterea permeabilitii


capilare, modificri ce vor facilita diapedeza (extravazarea) neutrofilelor, a monocitelor, a
eozinofilelor i a limfocitelor i migrarea lor n esutul afectat, pentru a-i exercita funciile
efector. Tot ele induc coagularea i creterea permeabilitii capilare. Alte citokine, cum
sunt IL-8 i IFN-, au efect chemotactic pentru leucocite i, respectiv, intensific
fagocitoza. Toate aceste efecte duc la acumularea de fluide (edem) i de leucocite n aria
inflamatorie.
Majoritatea

celulelor

implicate

rspunsul

inflamator

sunt

fagocite.

Polimorfonuclearele neutrofile se acumuleaz primele n situsul inflamator. n stadiile


precoce ale rspunsului inflamator, producia de neutrofile din mduva osoas crete de
aproximativ 10 ori, comparativ cu producia normal de 1010celule/zi. Acestea sunt
descrcate n torentul circulator. Datorit vasodilataiei ce caracterizeaz vasele din focarul
inflamator, viteza de curgere a sngelui scade la acest nivel, eveniment ce permite PMNs
s se apropie de pereii vasculari (n mod normal, celulele circul prin centrul torentului
circulator), fenomen numit marginaie (fig. 24).

Fig. 24. Interaciunea PMN - celul endotelial i etapele diapedezei (adaptat dup Kuby
Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Datorit expresiei unor mucine membranare, neutrofilele interacioneaz cu


molecule de adeziune din familia selectinelor, exprimate pe endoteliul activat (E-selectina
i P-selectina) din focarul inflamator, interaciuni reversibile, ce duc la fenomenul de
rostogolire a PMN de-a lungul endoteliului, n direcia de curgere a sngelui (fig. 24).
Aceast ncetinire n micarea neutrofilelor asigur timpul necesar ca unele chemokine,
cum este IL-8, s induc la nivelul PMNs expresia unor alte molecule de adeziune, cum
este LFA-1 (leukocyte function associated-1) din familia integrinelor, care interacioneaz

48

cu liganzii si exprimai pe celula endotelial, ICAM-1 (intercellular adhesion molecule-1)


i ICAM-2. Interaciunea acestor perechi de molecule de adeziune este ireversibil i
oprete neutrofilele din fenomenul de rostogolire, fenomen numit arest dependent de
activare, atandu-le ferm de endoteliu.
Urmeaz apoi ptrunderea neutrofilelor n spaiile care se creeaz ntre celulele
endoteliale, prin ndeprtarea acestora. Ajunse la nivelul membranei bazale, PMNs secret
mici cantiti de enzime ce vor produce degradarea local a membranei bazale, permind
celulelor s o traverseze i s ptrund n esutul subendotelial.
Odat ajunse n esut, neutrofilele activate vor migra n gradient de densitate, pentru
c exprim receptori pentru factorii chemotactici eliberai n focar, fie de microorganisme,
fie de celule self activate. Migrarea lor este tot un proces activ, mediat de alte tipuri de
molecule de adeziune, exprimate pe membrana PMNs, ce interacioneaz cu componente
ale matricii extracelulare: colagen, laminin, fibronectin, vitronectin, etc.
Toate aceste procese se desfoar ntr-o perioad scurt de timp, astfel nct,
neutrofilele se acumuleaz n focarul inflamator n primele 30-60 de minute ale rspunsului
inflamator i ating un maximum dup 6 ore. Neutrofilele i exercit funcia de fagocitoz
a patogenilor, dar prezint i importante funcii secretorii. Elibereaz o serie de factori proinflamatori, dintre care foarte importani sunt MIP-1 i MIP-1 (macrophage
inflammatory proteins), chemokine ce atrag macrofagele n focarul inflamator. Sub
influena acestora, dup 5-6 ore, aria va fi infiltrat i cu celule mononucleare, monocite i
macrofage.

Fig. 25. Diapedeza limfocitului T (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Diapedeza pe care o efectueaz monocitele este, de asemenea, un proces activ,


mediat de molecule de adeziune, cum sunt VLA-4 (very late antigen-4), prezente pe

49

membrana monocitelor i ligandul su, VCAM-1, exprimat pe endoteliul activat (aceeai


pereche intervine i n medierea diapedezei limfocitelor) (fig. 25).
Macrofagele completeaz funcia fagocitar a PMNs, internaliznd i distrugnd
patogeni, dar i PMN-uri moarte (vezi fagocitoza). Mai mult dect polinuclearele
neutrofile, macrofagele mediaz procesarea i prezentarea antigenului limfocitelor T, care
vor dezvolta un rspuns imun specific antigenului. MIP-1, dar i alte chemokine, atrag n
focar i limfocite, care traverseaz peretele vascular ntr-o manier foarte asemntoare cu
cea a PMN, ce presupune mai muli pai, mediai fiecare de perechi particulare de
molecule de adeziune.
Dac lezarea tisular sau invazia microbian persist suficient de mult, aprarea va
include dezvoltarea rspunsului imun specific, adic sinteza de anticorpi specifici i
imunitate specific mediat celular. Prezena anticorpilor va duce la formarea complexelor
antigen-anticorp, care vor media activarea sistemului complement. De asemenea,
anticorpii vor funciona ca opsonine, mediind internalizarea patogenilor sau uciderea lor
prin mecanism de ucidere extracelular de ctre celulele fagocitice i, respectiv, de efectori
citotoxici, ce exprim receptori pentru fragmentul Fc al imunoglobulinelor. n cursul
acestor evenimente se vor elibera substane biologic active, care stimuleaz vasodilataia i
cresc permeabilitatea capilar sau funcioneaz ca substane chemotactice, atrgnd n
focar noi i noi fagocite i limfocite antigen-specifice. Limfocitele sunt capabile i ele s
distrug antigenul, dar mai important este funcia lor de secreie a citokinelor care
activeaz celelalte tipuri celulare ce particip la distrugerea i ndeprtarea agresorilor.
n timpul procesului inflamator, multe structuri self sunt distruse, resturile lor fiind
ndeprtate prin fagocitoz. Multe substane eliberate vor contribui la repararea leziunilor,
esutul distrus fiind nlocuit. Sub influena unor citokine secretate de macrofagele activate
i de endoteliul activat (TGF- transforming growth factor-), fibroblastele sunt atrase n
focar i activate. Ele vor sintetiza componente ale matricii extracelulare, contribuind la
repararea tisular. Totodat, TGF- se comport ca o citokin cu efecte inhibitoare,
acionnd la nivelul multor tipuri celulare din focarul inflamator i reducndu-le sau
inhibndu-le efectele.
Cnd agenii patogeni nu pot fi ndeprtai eficient se instaleaz inflamaia
cronic, aa cum se ntmpl n infeciile cronice (ex. tuberculoz) sau n situaiile
caracterizate de stimularea cronic a sistemului imun (ex. glomerulonefrit, boli de
colagen).

50

Interferonii
Sunt molecule solubile sintetizate de celule i care acioneaz asupra celulelor ce
exprim receptori specifici.
Se descriu dou tipuri de interferoni. Tipul I cuprinde dou grupe distincte. Primul
grup, numit interferon- (IFN-), este o familie de aproximativ 20 de polipeptide nrudite
structural, sintetizate n special de leucocite. Cel de-al doilea grup, numit interferon-
(IFN-) cuprinde produsul unei singure gene, sintetizat n special de fibroblati. Recent, la
specia uman, a mai fost descris IFN-. Dei diferite din punct de vedere structural, toate
aceste molecule de interferoni interacioneaz cu acelai receptor.
Multe tipuri celulare posed capacitatea de a sintetiza interferoni de tipul I, ca
rspuns la infecia viral. Eliberai n spaiul extracelular din celula parazitat de virus,
interferonii interacioneaz cu celulele din jurul celei infectate, la nivelul crora activeaz
nite mecanisme ce vor interfera cu replicarea viral, n acest fel, protejnd aceste celule i
fcndu-le non-infectabile. Aceste mecanisme includ:
- sinteza unei enzime (2-5-oligo-adenilat-sintetaza) care, activeaz o ribonucleaz ce va
degrada ARN-ul viral;
- activarea unei protein-kinaze specifice (PKR dsRNA-dependent protein kinase),
capabil s inactiveze sinteza proteic i, n felul acesta, s blocheze replicarea viral.
n plus, interferonii de tipul I stimuleaz potenialul litic al celulelor NK de a ucide
celulele infectate viral, eliminnd, n acest fel, sursele de virioni. Acest potenial
extraordinar al interferonilor este utilizat n clinic. IFN- este folosit ca terapie n
hepatitele C i B.
Pe lng activitatea anti-viral, interferonii de tipul I stimuleaz capacitatea de
prezentare a antigenului de ctre APC-uri, prin amplificarea expresiei moleculelor MHC I
i II i au efect antiproliferativ, motiv pentru care sunt utilizai n terapia unor neoplazii:
leucemia cu celule proase, leucemia mieloid cronic, mielom multiplu, sarcom Kaposi,
limfoame non-Hodgkin, limfomul cutanat cu celule T, etc. IFN- s-a dovedit eficient n
tratamentul

sclerozei

multiple,

boal

neurologic

autoimun,

caracterizat

de

demielinizarea nervilor din SNC, ceea ce are ca efect apariia de disfuncii neurologice ce
pot conduce la dizabiliti severe.
Tipul II de interferon sau tipul imun, este reprezentat de IFN-, sintetizat de
limfocitele T activate, de celulele NK i NKT. Ca funcii, menionm:

51

1. stimuleaz activarea fagocitelor, n special a monocitelor/macrofagelor;


2. amplific expresia moleculelor MHC clas II, potennd capacitatea celulelor
prezentatoare de antigen (APC) de a prezenta antigenul limfocitelor T (vezi Activarea
limfocitelor T);
3. au rol n diferenierea limfocitelor T efector (difereniere funcional);
4. acioneaz asupra limfocitelor B, stimulnd switch-ul (comutarea) de clas;
5. stimuleaz activitatea celulelor NK.
IFN- este utilizat n terapia unei boli numit boala cronic granulomatoas. Este o
imunodeficien rar, se transmite ereditar i se caracterizeaz prin incapacitatea
fagocitelor de a ucide bacteriile fagocitate, ca urmare a incapacitii lor de a genera radicali
de oxigen (anion superoxid, H2O2, etc), ageni microbicizi puternici (vezi Fagocitoza i
Imunodeficienele). Ca urmare, pacienii prezint infecii recurente severe cu bacterii cum
sunt Staphylococcus aureus, Klebsiella, Pseudomonas, etc sau cu fungi cum sunt
Aspergillus i Candida. Terapia cu IFN- reverseaz acest defect, incidena infeciilor i
severitatea lor fiind drastic reduse.

52

Sistemul imun specific (aprarea specific, dobndit sau


adaptativ)
Cuprinde componente mult mai specializate dect cele utilizate de aprarea
nespecific i completeaz, ntr-o manier sofisticat, protecia exercitat de aceasta din
urm. n termenii evoluiei, aprarea specific a aprut relativ trziu i este prezent numai
la vertebrate, fiind capabil de a recunoate selectiv i de a elimina specific structuri nonself. Componentele aprrii specifice au capacitatea de a distinge diferene subtile ale
antigenelor. De exemplu, dou proteine care difer ntre ele printr-un singur aminoacid
sunt recunoscute n mod difereniat i interacioneaz cu dou molecule (specificiti)
diferite de receptori pentru antigen/anticorpi. Ca urmare, sistemul imun specific genereaz
o larg diversitate de molecule implicate n recunoaterea miliardelor de structuri
antigenice diferite, repertoriul imunologic fiind evaluat la valori cuprinse ntre 1015 i
1018 (Mak). Confruntarea componentelor SI specific cu un antigen determin dezvoltarea
unui RI specific, caracterizat de generarea de celule i molecule efector, dar i de generarea
memoriei imunologice. Datorit acestei proprieti, la confruntri ulterioare cu acelai
antigen, SI specific va dezvolta, succesiv, rspunsuri imune a cror rapiditate, amplitudine
i eficien crete. Astfel se explic protecia pe care unele infecii virale o induc, protecie
ce se instaleaz dup primul contact i poate dura, n unele cazuri, toat viaa (rujeola,
varicela, oreion, etc).
Capacitatea de discriminare self/non-self, specificitatea de recunoatere i de
interaciune cu structurile non-self, diversitatea i memoria imunologic reprezint
proprieti eseniale ce difereniaz componentele SI specific de cele ale aprrii
nespecifice.
Componentele SI specific nu acioneaz individual i independent de cele ale SI
nespecific. Cele dou sisteme i poteneaz i i controleaz reciproc activarea, astfel
nct aciunea lor comun i orchestrat are ca finalitate contracararea i eliminarea unui
agresor.
Un individ se nate cu capacitatea de a dezvolta rspuns imun fa de orice structur
non-self, dar imunitatea specific este dobndit numai dup contactul cu acel invadator.
Acest contact iniial (imunizarea) declaneaz un lan de evenimente care conduc la
activarea unor anumite celule (limfocite cu receptori specifici acelui antigen) i la sinteza
unor molecule, dintre care unele, anticorpii, interacioneaz specific cu agentul
declanator (antigen). Totodat, unele limfocite generate n cursul RI se vor diferenia n

53

limfocite de memorie. Prin acest proces, individul dobndete capacitatea de a ine piept i
de a rezista la atacuri sau expuneri ulterioare la acelai antigen.

Imunoglobulinele
Una dintre funciile majore ale sistemului imun specific este producia unor
proteine solubile, care circul liber i contribuie ntr-o manier specific la imunitate i
protecia fa de structurile non-self. Ele au fost numite anticorpi i fac parte dintr-o clas
de proteine numite globuline, datorit structurii lor globulare.
Primele dovezi asupra faptului c anticorpii se regsesc ntr-o anumit particular
fraciune a serului au aparut n 1939, cnd Tiselius i Kabat au imunizat iepuri cu
Ovalbumina. Serul animalelor a fost mprit n dou i o jumtate a fost supus
electroforezei. Electroforeza proteinelor serului permite separarea acestora n 5 fracii
majore: albumine, 1-, 2-, - i -globuline. Diferenele de migrare ale proteinelor n
cmpul electric sunt datorate sarcinilor electrice distincte, mrimii i greutii moleculare
ale moleculelor, dar i unor caracteristici ale mediului de migrare, cum sunt temperatura i,
mai ales, pH-ul, proteinele fiind substane amfotere, astfel c, n funcie de pH-ul mediului,
se pot comporta ca baze sau acizi, ceea ce se reflect i asupra sarcinii lor electrice. ntr-un
tampon de migrare alcalin, de exemplu, proteinele vor avea caracter acid i o sarcin
electric negativ.
Benzile de migrare de la nivelul gelului au fost colorate, iar scanarea densitometric
a acestora a permis transformarea pattern-ului benzilor n grafice caracteristice, numite
electroforegrame, ceea ce permite cuantificarea fiecrei fracii proteice. Intensitatea
marcrii/grosimea benzii determin dimensiunea vrfului reprezentat n grafic, iar aceasta
reflect concentraia fraciei respective (fig. 26).
Cea de-a doua jumtate din serul animalelor imunizate a fost pus n contact cu
antigenul, ceea ce a condus la formarea unui precipitat. Serul restant a fost supus
electroforezei, constatndu-se scderea exclusiv a fractiei . Concluzia a fost c n aceast
particular fracie se regsesc moleculele specifice pentru antigen, care au fost denumite
imunogobuline, pentru a le distinge de alte proteine care s-ar ncadra n aceeai fracie
electroforetic.

54

Fig. 26. Conversia benzilor obinute prin electroforez n vrfuri caracteristice. A. electroforegram
normal; B. gammopatie monoclonal; C. gammopatie policlonal; D. inflamaie cronic.

Majoritatea imunoglobulinelor se regsete n fracia a serului (fig. 26A).


Gammopatiile policlonale sunt caracterizate de benzi largi, difuze i intens colorate la
nivelul fraciei , ceea ce reflect o cretere a cantitii de imunoglobuline aparinnd unor
diferite tipuri i specificiti (fig. 26C). Aceste molecule sunt secretate de plasmocite
diverse i reprezint, cel mai adesea, rezultatul stimulrii antigenice cronice de ctre
diveri patogeni (fig. 26D). Apariia unui vrf ascuit n regiunea -globulinelor din
electroforegram este sugestiv pentru prezena unei gammopatii monoclonale. O astfel de
protein apare ca o consecin a proliferrii necontrolate a unei singure clone de limfocite,
care s-au difereniat n celule secretante de anticorpi. n majoritatea cazurilor, stimulul nu
este unul antigenic, cel mai adesea fiind vorba de o afeciune malign B (fig. 26B).
Imunoglobulinele se gsesc sub dou forme, solubil i membranar.
Imunoglobulinele solubile, numite i anticorpi, sunt secretate de plasmocite, celule ce se
difereniaz din limfocitele B activate. Imunoglobulinele membranare se asociaz cu doi
heterodimeri, numii Ig-alpha/Ig-beta, pentru a forma receptorul pentru antigen (BCR)
al limfocitului B, implicat n recunoaterea specific a antigenelor (fig. 27). Forma
membranar a Ig confer specificitatea antigenic a limfocitelor B.

55

Fig. 27. BCR receptorul pentru antigen al limfocitului B (adaptat dup Kuby Immunology, fourth
ed. WH Freeman and Company, 2000)

Anticorpii produi ca rspuns fa de un antigen sunt heterogeni, adic sunt diferii


din punct de vedere al specificitii lor i acest lucru se datoreaz faptului c cele mai
multe antigene sunt proteine complexe, prezentnd numeroi epitopi diferii. Rspunsul
imun umoral const n secreia de anticorpi cu specificiti fa de muli dintre ei. Acest
lucru presupune c antigenul este recunoscut de mai multe limfocite B diferite, fiecare cu
receptori unici i specifici, destinai recunoaterii unui particular epitop din totalitatea celor
exprimai la nivelul antigenului. Fiecare dintre aceste limfocite B se activeaz, prolifereaz
i expansioneaz clonal i cele mai multe dintre celulele fiecrei clone se difereniaz n
plasmocite, celule efector ce vor secreta anticorpi cu o unic specificitate, aceea a
receptorului limfocitului B activat iniial. Luai, ns, mpreun, anticorpii secretai de
clonele diferite vor genera un rspuns umoral materializat printr-un ser policlonal (i,
astfel, heterogen) de anticorpi.
Din punct de vedere chimic, imunoglobulinele sunt glicoproteine, formate din patru
lanuri polipeptidice: dou, identice, cu greutate molecular mare ( 50 kDa), numite
lanuri grele (sau H de la heavy) i dou lanuri identice, cu greutate molecular mai mic
( 25 kDa), numite lanuri uoare (sau L de la light), solidarizate ntre ele prin legturi
disulfidice inter-lanuri.
Structura imunoglobulinelor a fost identificat n urma unei serii de experimente
realizate n anii 1950, 1960 de Rodney Porter i, respectiv, Gerald Edelman, recompensai
cu premiul Nobel n 1972.
Ei au supus molecula de anticorp digestiei cu papain (fig. 28), ceea ce a condus la
scindarea sa n dou fragmente identice, monovalente, cu greutate de aprox. 45 kDa, care

56

au fost numite Fab - antigen-binding fragment - pentru c pstrau capacitatea de a


interaciona cu antigenul i un fragment Fc - fragment cristalizabil, cu greutate de aprox.
50 kDa, denumit astfel, ntruct cristaliza n condiii de depozitare la rece.
Digestia cu pepsin (efectuat de Alfred Nisonoff) genereaz un fragment divalent,
F(ab)2, cu greutate de aprox. 100 kDa i mai multe peptide rezultate din digestia
fragmentului Fc (fig. 28).

Fig. 28. Digestia moleculei de imunoglobulin (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

De asemenea, Porter a redus molecula de anticorp cu mercaptoetanol i a alchilat-o,


tratament chimic care reduce ireversibil legturile disulfidice, dup care proba a fost
analizat prin cromatografie pe o coloan ce separ moleculele n funcie de mrimea lor.
n felul acesta, au fost identificate dou lanuri de 50 kDa i dou lanuri de 25 kDa,
denumite H i L (fig. 28). Rmnea de fcut legtura dintre rezultatele scindrii enzimatice
i lanurile obinute prin distrugerea legturilor disulfidice. Tot Porter este cel care a
imunizat capre, fie cu fragmente Fab umane, fie cu fragmente Fc. Anticorpii anti-Fab s-au
dovedit capabili s reacioneze att cu lanurile H ct i L, n timp ce anticorpii anti-Fc nu
recunoteau dect lanurile H. Aceast observaie a condus la concluzia c fragmentele Fab
constau dintr-o poriune de lan greu i lan uor, n timp ce fragmentul Fc conine doar
componente ale lanului greu.
n urma acestor rezultate, Edelman i Porter au propus modelul care a devenit att
de cunoscut, cel al moleculei alctuite din dou lanuri H identice i dou lanuri L
identice, unite prin legturi disulfidice.

57

Studii de secveniere
Iniial, procesul a fost dificil datorit faptului c nu existau cantiti suficiente de
protein perfect omogen, secvenierea devenind posibil atunci cnd au fost descoperite
mieloamele, malignitai ale plasmocitelor.
n mod normal, plasmocitele reprezint stadiul final de difereniere a efectorilor
generai n cursul unui rspuns imun, provenii din limfocitele B activate iniial de
antigenele specifice. Viaa acestor celule efector este relativ scurt, de ordinul
sptmnilor, iar funcia lor este aceea de a secreta anticorpi.
Spre deosebire de plasmocitul normal, un plasmocit malign este o celul care scap
mecanismelor de control i, ca urmare, se poate divide n continuare, n absena unei
stimulri antigenice. Anticorpii produi de aceste celule maligne sunt, din punct de vedere
structural, identici cu cei normali; sunt denumii ns proteine mielomatoase pentru a se
preciza sursa lor. La un pacient cu mielom, cca. 95% dintre anticorpii serici pot fi
reprezentai de proteina mielomatoas. n cazul multor pacieni, celulele mielomatoase
secret lanuri uoare n exces, care se elimin n urin. Ele au fost denumite proteine
Bence-Jones, dup medicul american care le-a evideniat.
Mielomul poate apare nu doar la om ci i la animale, de ex. la oareci, att n mod
spontan ct i indus prin injectarea de ulei mineral n cavitatea peritoneal. Clonele de
plasmocite maligne care se dezvolt sunt denumite plasmocitoame i sunt denumite MOPC
(mineral oil plasma cells).
Secvenierea lanurilor uoare
Compararea secvenelor de aminoacizi ale diferitelor proteine Bence-Jones (lanuri
uoare), provenite de la diveri pacieni cu mielom a demonstrat c exist diferene
importante ntre ele la nivelul jumtii situate ctre captul N-terminal (primii aproximativ
110 aa). Ca urmare, aceast regiune a fost denumit regiune variabil. n schimb,
poriunea situat ctre captul C-terminal a fost denumit regiune constant, avnd doar
dou tipuri de secvene de baz, ceea ce a condus la identificarea a dou tipuri de lanuri
uoare, numite k i . La om, aproximativ 60% dintre lanurile L sunt de tip k. O anumit
molecul de Ac nu poate conine ambele tipuri, fie ambele sunt de tip k, fie de tip .
Secvenierea lanurilor H
Pentru studiul lanurilor H, proteinele mielomatoase au fost reduse cu
mercaptoetanol i alchilate, iar apoi lanurile grele au fost separate prin filtrare pe gel ntr-o
soluie de denaturare. Cnd au fost comparate secvenele de aminoacizi, a aprut un pattern

58

similar cu cel al lanurilor L, n sensul c, partea N-terminal, format tot din primii
aproximativ 110 aa, prezenta o variaie important a secvenei, motiv pentru care a fost
denumit regiune variabil. Restul lanului prezenta 5 tipuri de secven de baz, ceea ce
a dus la descrierea celor 5 tipuri de regiuni constante ale lanurilor grele, numite , , ,
, . Fiecare din aceste tipuri de lanuri grele definete un izotip.
Izotipul unei molecule de anticorp este determinat de tipul lanului greu i de tipul
lanului uor care intr n componena acelei imunoglobuline, de ex. 2k2. Tipul de lan
greu ce intr n componena unei imunoglobuline determin clasa de imunoglobulin din
care molecula respectiv face parte. Se descriu cinci clase: IgM (lan ), IgG (lan ), IgD
(lan ), IgE (lan ), IgA (lan ). Existena unor diferene minore n secvenele de
aminoacizi ale lanurilor i , clasific aceste lanuri grele n subclase. n specia uman se
descriu dou subclase de lan (1 i 2) i patru subclase de lan (1, 2, 3 i 4).
n stare nativ (structur teriar), cele patru lanuri sunt organizate n domenii
globulare, fiecare dintre acestea coninnd aproximativ 110 aminoacizi i fiind stabilizate
prin legturi disulfidice intra-lanuri. Domeniile globulare sunt de dou feluri, variabile i
constante (fig. 29).

Fig. 29. Organizarea n domenii a lanurilor grele i uoare prototip IgG1

59

Fiecare lan uor este organizat n dou domenii, unul variabil (VL), spre captul
amino-terminal, format din primii 100-110 (108) aminoacizi i unul constant (CL), spre
captul C-terminal, format din cea de-a doua jumtate a moleculei, 100-110 aminoacizi.
Fiecare lan greu este organizat n patru sau cinci (depinde de izotip) domenii, unul variabil
(VH), primii 110 aminoacizi i trei sau patru, constante (CH1, CH2, CH3 CH4), fiecare
domeniu fiind alctuit din cte 110 aminoacizi. Lanurile , i prezint 4 domenii, unul
variabil i trei constante. Lanurile i prezint 5 domenii, unul variabil i patru
constante. La nivelul imunoglobulinelor din clasele IgG, IgA i IgD, ntre domeniile CH1 i
CH2 exist o regiune, bogat n cistein, reziduuri ntre care se constituie un numr variabil
(depinde de izotip) de legturi disulfidice ce solidarizeaz cele dou lanuri grele. Aceast
regiune a fost numit balama (hinge region) i ea asigur celor dou fragmente Fab un
grad de flexibilitate necesar modificrilor conformaionale pe care molecula le sufer
atunci cnd interacioneaz cu antigenul. Regiunea este, de asemenea, deosebit de bogat
n reziduuri de prolin, care confer acestei zone o conformaie polipeptidic extins, ceea
ce face aceast regiune n mod particular sensibil la atacul enzimelor i clivaj proteolitic.
Se explic, n acest fel, de ce papaina i pepsina, utilizate n studiile iniiale asupra
structurii imunoglobulinelor, degradeaz moleculele strict la nivelul acestei regiuni
(papaina scindeaz lanurile grele naintea legturilor disulfidice, spre captul aminoterminal, iar pepsina, napoia lor, spre captul carboxi-terminal (fig. 28). Izotipurile i
nu au o regiune balama, dar prezint un ntreg domeniu constant, suplimentar (CH2), care
pare s prezinte caracteristicile acestei regiuni.
Domeniul imunoglobulinic reprezint subunitatea structural de baz a
imunoglobulinelor, consecina organizrii lanurilor polipeptidice grele i uoare n
structur tridimensional. De fapt, aceast manier de organizare spaial este caracteristic
mai multor tipuri de proteine care, din acest motiv, au fost grupate ntr-o superfamilie,
numit superfamilia imunoglobulinelor (TCR, MHC, CD2, CD4, CD8, LFA-1, KIRs,
etc).
Studiul prin difracie cu raze X a lanurilor imunoglobulinelor cristalizate a artat c
un domeniu este o structur compact, alctuit, ca un sandwich, din 2 foi -pliate antiparalele (structur secundar), dispuse n dou straturi, solidarizate printr-o punte
disulfidic, intra-domeniu i stabilizate prin interaciuni hidrofobe. Foile -pliate sunt

60

reunite la capete prin bucle peptidice cu lungimi variabile, bogate n glicin, aminoacid
responsabil pentru flexibilitatea crescut a acestor structuri (fig. 30).
Acest prototip structural este numit modelul -barrel (butoi). Toate domeniile
imunoglobulinelor prezint aceast structur, cu mici diferene ntre domeniile variabile i
cele constante. Domeniul variabil este mai lung dect cel constant, coninnd n plus o
pereche de foi -pliate i bucla peptidic ce reunete capetele acestor foi suplimentare.
Aceast structur de baz contribuie la realizarea structurii cuaternare a
imunoglobulinelor, permind interaciuni non-covalente ntre domenii, prin intermediul
straturilor -pliate. Interaciunile se realizeaz fie ntre domenii identice (de exemplu,
CH2/CH2, CH3/CH3, CH4/CH4), fie ntre domenii diferite (de exemplu, VL/HL, CL/CH1).
Peptidul de legtur ntre domeniile variabile i cele constante urmtoare este mai
lung dect peptidele ce conecteaz domeniile constante ntre ele. El a fost numit peptid
switch i are rolul de a conferi flexibilitate, permind rotaia domeniilor variabile fa de
cele constante.

Fig. 30. Lanul uor organizat n dou domenii globulare

n momentul n care se combin un lan greu cu un lan uor pentru a forma o


pereche H-L (structura cuaternar), domeniile intr n contact unul cu altul: CH1 cu CL i
VH cu VL. Alturarea domeniilor VH i VL formeaz ntre straturile un an (un buzunar),
care este mult prelungit de buclele peptidice ce conecteaz straturile -pliate. Aceste bucle

61

mai lungi de la capetele NH-2-terminale ale domeniilor variabile formeaz situsul de


combinare cu antigenul al moleculei de anticorp sau paratopul (fig. 31).

Fig. 31. IgG1 (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Studiile comparative asupra variabilitii secvenei primilor 110 aminoacizi (cei


care formeaz domeniul variabil) au demonstrat c variabilitatea este extrem de mare la
nivelul a trei regiuni (cu aproximaie ntre aa 25-35, 50-55 i 90-100 exist mici variaii
ntre domeniile variabile i cele constante, dar i ntre imunoglobuline). Aceste trei regiuni
au fost numite hipervariabile (fig. 32).

Fig. 32. Diagrama Wu-Kabat. Regiuni hipervariabile (CDR) i regiuni cadru (FR)

62

Sunt, aadar, cte trei regiuni hipervariabile la nivelul domeniilor variabile ale
lanurilor grele i trei la nivelul domeniilor variabile ale lanurilor uoare. Formarea
paratopului, prin alturarea domeniului variabil al unui lan greu cu domeniul variabil al
unui lan uor, creeaz un spaiu caracterizat de 6 regiuni hipervariabile i aceste regiuni
realizeaz suprafaa complementar antigenului, motiv pentru care, regiunile hipervariabile
mai poart i numele de regiuni determinante ale complementaritii (CDRs). Ele sunt
delimitate de regiuni cu variabilitate mai redus, n numr de 4 pentru fiecare domeniu
variabil, numite regiuni cadru (framework regions FRs vezi Diagrama Wu-Kabat).
CDR-urile corespund buclelor peptidice ce reunesc foile -pliate, n timp ce regiunile
cadru corespund chiar foilor -pliate de la nivelul domeniilor variabile. Diferenele mai
mult sau mai puin subtile n ceea ce privete lungimea i secvena de aminoacizi a CDRurilor, particulare fiecrei molecule de anticorp, asigur marea variabilitate i diversitate a
imunoglobulinelor i, consecutiv, a repertoriului imunologic.
Clasele i subclasele de imunoglobuline i funciile lor biologice
Aa cum am menionat deja, pe baza diferenelor moleculare de la nivelul
fragmentelor Fc ale lanurilor H, care sunt responsabile de diferitele funcii biologice, s-au
descris 5 clase majore (izotipuri) de imunoglobuline, IgG, IgM, IgA, IgD, IgE. Funciile
efector pe care anticorpii le mediaz cuprind:
1. Opsonizarea. Imunoglobulinele interacioneaz cu antigenul prin intermediul
paratopului, n timp ce fragmentul Fc poate interaciona cu structuri proteice exprimate pe
membranele fagocitelor, numite generic receptori Fc (FcRs).

Fig. 33. Moleculele de anticorpi funcioneaz ca opsonine

63

n aceast manier, imunoglobulinele amplific fagocitoza a numeroase microorganisme


(fig. 33).
2. Activarea sistemului complement. Formarea complexelor antigen-anticorp pe
membranele celulelor sau depunerea lor n diverse esuturi este urmat de activarea
sistemului complement pe cale clasic i de producerea efectelor pe care acesta le mediaz:
opsonizare (C3b, iC3b, etc), activarea celulelor i medierea reaciei inflamatorii
(anafilatoxine, factori chemotactici), liza osmotic a intelor celulare.
3. ADCC (citotoxicitatea celular mediat de anticorp). Este una dintre manierele
utilizate de celulele NK, PMNs i eozinofile de a realiza conjugatul dintre celula efector i
int. Fragmentele Fab ale imunoglobulinelor interacioneaz cu structuri antigenice de pe
membranele intelor, iar fragmentele Fc cu receptorii Fc exprimai pe membranele
efectorilor (fig. 10).
4. Transcitoza reprezint fenomenul prin care anticorpii sunt transportai din esuturile
limfoide asociate mucoaselor la suprafaa acestora de la nivelul tracturilor digestiv,
respirator, urogenital. De asemenea, transcitoza cuprinde i transportul imunoglobulinelor
n secreia lactat. Nu toate clasele de imunoglobuline sunt transportate la fel, acest lucru
depinde de o serie de proprieti ale fragmentelor Fc, de abilitatea lor de a interaciona cu
receptorii Fc i de prezena i nivelul de expresie al acestora n diferite esuturi. La specia
uman, cantiti importante din aproape toate subclasele de IgG sunt transportate
transplacentar de la mam la ft, n cursul ultimului trimestru de sarcin, anticorpi ce
contribuie la protecia ftului, a nou-nscutului i a sugarului n primele 3-6 luni de via.
Acest transport de anticorpi pre-formai n timpul vieii intrauterine (imunitate pasiv) este
completat dup natere de aportul de anticorpi pre-formai materni din clasa IgA coninui
n colostru i lapte (imunitate pasiv), responsabili de protecia tractului digestiv la nounscut i sugar.
IgG este clasa major de imunoglobuline serice, reprezentnd aproximativ 70-75%
din totalul anticorpilor din ser, cu o concentraie de circa 1200 mg/dl (12 mg/ml) (prezint
variaii individuale cuprinse ntre 800 i 1600 mg/dl (8-16 mg/ml).
Prezint patru subclase, IgG1-IgG4, numerotarea corespunznd concentraiilor lor
serice, care prezint variaii individuale, cu medii avnd valori de aproximativ: IgG1
67%, IgG2 22%, IgG3 7% i IgG4 4% (fig. 34).

64

Este un anticorp de mare afinitate (afinitatea reprezint fora de legare a


anticorpului cu antigenul) i predomin n rspunsul imun secundar. Este capabil s
activeze complementul, s neutralizeze toxine bacteriene i este singura clas capabil s
traverseze placenta, conferind imunitate ftului.

Fig. 34. Subclase IgG (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company,
2000)

Funcioneaz ca opsonin, fagocitele i celulele NK exprimnd pe membrane


receptori pentru fragmentul Fc al IgG, receptori numii FcRI (CD64), FcRII (CD32) i
FcRIII (CD16). Micile diferene n lungimea regiunii balama, n poziia i numrul
legturilor disulfidice de la nivelul ei sau n secvena de aminoacizi de la nivelul
domeniilor

constante

influeneaz

proprietile

anticorpilor,

conferind

diverse

particulariti de aciune celor patru subclase. Astfel, IgG3 este cea mai eficient subclas
n activarea complementului, urmat de IgG1 i IgG2, n timp ce IgG4 nu are deloc aceast
capacitate. IgG2 nu pare capabil s traverseze placenta i are o afinitate extrem de sczut
de a interaciona cu receptorii Fc.
Receptorul Fc neonatal (FcRn) este un alt receptor capabil s interacioneze cu
fragmentele Fc ale IgG. A fost numit neonatal pentru c a fost identificat iniial la nivelul
intestinului obolanilor nou-nscui, unde mediaz transportul IgG din laptele matern n
circulaia puilor. La specia uman, secreia lactat nu conine IgG, dar FcRn a fost
identificat la nivelul trofoblastului, n ultimul trimestru de sarcin, el fiind implicat n
imunizarea pasiv a ftului, prin transportul activ al IgG din circulaia matern n cea
fetal. Studii ulterioare au evideniat prezena FcRn n multe tipuri celulare, din diverse
esuturi i a fost demonstrat intervenia sa n transportul IgG ntre diferite compartimente,
n protecia mpotriva catabolismul intracelular al IgG i, astfel, n meninerea
homeostaziei acestei clase de imunoglobuline.

65

IgM reprezint 5-10% din totalul anticorpilor din ser, cu o concentraie normal de
120-150 mg/dl (1,2-1,5 mg/ml). IgM este exprimat, sub form monomeric, ca receptor
pentru antigen, pe membrana limfocitelor B. Forma circulant se prezint sub form de
polimer (cel mai frecvent pentamer), solidarizarea monomerilor identici de IgM n
molecula de pentamer realizndu-se cu ajutorul unui lan polipeptidic, numit lan J i a
mai multor legturi disulfidice (fig. 35). Anticorpii IgM au afinitate sczut pentru
anticorp, compensat ns de aviditatea respectabil pe care o au pentamerii pentru
antigenele multivalente. Acest aspect este evident n reacia anticorpilor IgM (aglutinine)
cu hematiile purttoare de antigene glucidice din grupul ABO. Hematiile incubate cu
anticorpi se agreg, proces cunoscut sub numele de aglutinare. Acelai nivel de aglutinare
a hematiilor ar necesita de 100-1000 de ori mai multe molecule de IgG.

Fig. 35. IgM - pentamer

Este considerat clasa cea mai eficient n activarea sistemului complement,


ntruct cascada de activare pe cale clasic poate fi iniiat de o singur molecul IgM
legat de antigen. Pentru acelai efect, mai multe molecule IgG legate de patogen trebuie

66

s se gseasc la distane suficient de mici, pentru ca cel puin dou situsuri de legare a
C1q s poat fi accesate de acest component al complementului.
IgM se sintetizeaz predominant n rspunsul imun primar, fiind prima clas de
imunoglobuline pe care o produce un plasmocit difereniat din limfocitul B activat specific
de ctre antigen. Spre deosebire de IgM i IgD, celelalte trei clase de imunoglobuline sunt
generate n urma fenomenului de switch de clas, ce apare trziu n cursul rspunsului
imun primar sau, n unele situaii, abia n cursul rspunsului imun secundar. Detecia unor
nivele plasmatice crescute de IgM la un adult indic expunerea recent a individului la un
nou antigen. De asemenea, IgM este prima clas de imunoglobuline produs de nounscut, pe msur ce acesta ncepe s vin n contact cu antigene i, n consecin, s
dezvolte rspunsuri imune primare.
Datorit formei polimerizate sub care circul, IgM are o dimensiune mare i
difuzeaz greu n esuturi (se gsete n cantiti extrem de sczute n fluidele din spaiile
intercelulare). Totui, datorit lanului J din componena polimerilor, IgM poate
interaciona cu receptori exprimai la nivelul epiteliilor (poli-IgR), astfel nct, n secreiile
tracturilor respirator, digestiv, urogenital, etc., exist nivele sczute de IgM, clasa
dominant fiind IgA. De asemenea, dac permeabilitatea vascular crete n ariile
inflamatorii, IgM poate iei din torentul circulator i se poate acumula la nivelul acestor
situsuri.
IgA este prezent sub dou forme: seric i secretorie.
IgA seric reprezint 15-20% (unii autori consider intervalul normal 10-15%) din
totalul anticorpilor serici, prezint o concentraie normal de aproximativ 200 mg/dl (2
mg/ml) i este reprezentat de dou subclase, IgA1 i IgA2. La specia uman, peste 80%
din IgA seric exist n form monomeric, restul se prezint ca polimeri, n special dimeri
(dar i trimeri i tetrameri), formai prin solidarizarea unui numr variabil de molecule
identice de IgA cu ajutorul lanului polipeptidic J. IgA monomer poate funciona ca
opsonin, neutrofilele exprimnd pe membranele lor receptori pentru fragmentul Fc
(FcR).
IgA secretorie este imunoglobulina ce predomin n secreii (saliv, lacrimi,
colostru i lapte, secreii bronice, intestinale, genitourinare) fiind responsabil de protecia
mucoaselor. IgA secretorie este un dimer, la care se ataeaz un alt polipeptid, numit
componenta secretorie, cu rol de a proteja imunoglobulina de aciunea proteazelor din
secreii (fig. 36).

67

Componenta secretorie este un polipeptid de aproximativ 70 kDa, produs de


celulele epiteliale ale mucoaselor i exprimat la nivelul membranelor acestora, la polul
bazal, form ce este cunoscut sub numele de receptor poli-imunoglobulinic (poli-Ig
receptor).

Fig. 36. IgA secretorie

Fig. 37. Transportul IgA n secreii

68

Plasmocitele secretoare de IgA se gsesc n numr foarte mare, cantonate n


mucoase i submucoase, iar imunoglobulinele secretate de ele sunt eliberate n aceste spaii
sub form de dimeri. Acetia interacioneaz cu poli-IgRs (receptori poli imunoglobulinici)
i complexele formate sunt internalizate n celulele epiteliale, care le transport spre polul
apical (spre lumen). Inainte de eliberarea dimerilor n secreii, poli-IgR se cliveaz n dou
componente, dintre care una va rmne ataat de dimer i va constitui componenta
secretorie (fig. 37). Poli-IgRs este implicat i n transportul IgM n secreii.
IgA secretorie protejeaz mucoasele, mpiedicnd aderarea patogenilor la celulele
epiteliale, prin interaciunea cu antigenele de suprafa ale acestora. Agregatele formate din
dimerii de IgA i bacterii sau particule virale sunt nglobate n mucus i eliminate prin
micrile cililor, la nivelul epiteliul respirator, sau prin micrile peristaltice ale
intestinului. Importana IgA secretorii este demonstrat de cteva observaii interesante.
Astfel, zilnic, n organismul uman, sunt secretate cantiti cuprinse ntre 5 i 15 g de IgA
secretorie, cele mai mari concentraii de imunoglobuline. Acest lucru este posibil datorit
faptului c numrul plasmocitelor secretoare de IgA cantonate n mucoase este imens. De
exemplu, la nivelul jejunului, se gsesc mai mult de 2,5x1010 plasmocite secretoare de IgA.
Limfocitele B de memorie cantonate n esuturile limfoide asociate mucoaselor, la
nivelul plcilor Peyer i al amigdalelor produc, n urma activrii i a diferenierii n
plasmocite, aproape exclusiv IgA secretorie, datorit citokinelor pe care limfocitele B le
primesc de la celulele T helper, citokine ce par oarecum specifice acestor situsuri
particulare.
Datorit faptului c IgA secretorie acioneaz la nivelul suprafeelor mucoase, unde
componentele sistemul complement i neutrofilele nu sunt prezente, imunoglobulina este
un slab activator al complementului i o slab opsonin. Nu este nici un bun iniiator al
reaciei inflamatorii, dat fiind c dezvoltarea unei reacii inflamatorii la acest nivel ar cauza
distrucia epiteliului mucoaselor, ceea ce ar compromite o extraordinar de important
barier fizic.
IgD este monomer, reprezint mai puin de 1% (0,2%) din totalul anticorpilor,
concentraia sa seric fiind de 3-5 mg/dl (30-50g/ml). Este exprimat mpreun cu IgM,
pe membrana limfocitelor B naive (limfocite B mature, dar care nu au ntlnit antigenul
pentru care exprim receptor specific), unde funcioneaz ca receptor pentru antigen. Nu se
cunosc n totalitate funciile acestei clase de imunoglobuline, dar se tie c nu activeaz

69

sistemul complement, nu traverseaz placenta i nici barierele epiteliale, nu beneficiaz de


receptori Fc.
IgE reprezint 0,004% din totalul anticorpilor serici, avnd o concentraie de 0,030,05 mg/dl (0,3-0,5 g/ml). Forma circulant se gsete numai sub form de monomer.
Anticorpii din aceast clas nu pot traversa placenta i nu sunt capabili s activeze sistemul
complement.
Concentraia plasmatic a IgE crete n infeciile parazitare. Procesarea i
prezentarea antigenelor de ctre APC-uri determin un rspuns imun de tip Th2 (vezi
efectori T i citokine). Citokinele secretate de acest subtip de efectori, n special citokinele
IL-4 i IL-13, induc la nivelul limfocitelor B de memorie ce se genereaz n rspunsul
imun primar switch de clas la IgE. IgE funcioneaz ca opsonine, mediind citotoxicitatea
paraziilor de ctre eozinofile, ca urmare a faptului c aceste celule efector exprim un tip
de receptor Fc, de mare afinitate, numit FcRI. Acelai receptor a fost identificat i la
nivelul mastocitelor, al bazofilelor i al celulelor Langerhans. A mai fost descris un al
doilea tip de receptor, cu afinitate mai redus, numit FcRII sau CD23, exprimat pe
membrana limfocitelor B, a eozinofilelor i a celulelor Langerhans.

Fig. 38. IgE imunoglobulin homocitotropic

IgE este, de asemenea, asociat cu reaciile de hipersensibilitate imediat (atopia i


anafilaxia). IgE este homocitotropic, adic are afinitate pentru celulele speciei gazd n
care a fost produs. IgE secretate de plasmocite interacioneaz cu receptori de mare
afinitate, FcRI, exprimai pe mastocite i bazofile (fig. 38), eveniment care crete perioada
de njumtire a moleculelor de la 1-5 zile (forma liber, seric) la cteva sptmni sau

70

chiar luni (forma fixat pe membrane prin intermediul FcRI. Interaciunea IgE, fixate pe
celule prin intermediul FcRI, cu antigenele specifice determin activarea acestor celule i
declaneaz degranularea lor i eliberarea de substane biologic active ce mediaz reaciile
de hipersensibilitate de tip I (alergii) (vezi Hipersensibilitile).
Variaia imunoglobulinelor (fig. 39). Fiind glicoproteine, imunoglobulinele ndeplinesc
condiiile de a fi bune imunogene, iar administrarea lor unui individ din alt specie va
induce declaarea unui rspuns imun, manifestat prin secreie de anticorpi. Sistemul imun
al individului imunizat identific la nivelul moleculelor de imunoglobuline utilizate ca
antigene o serie de epitopi diferii care pot fi grupai n trei categorii: izotipici, allotipici i
idiotipici.
Variaia izotipic. Determinanii izotipici sunt localizai la nivelul domeniilor
constante i, mpreun, definesc, la specia uman, cele 5 tipuri diferite de lan greu (, , ,
, ) i cele dou tipuri diferite de lan uor (k i ). Toi indivizii speciei umane prezint
aceste tipuri de lanuri i, n consecin, cele cinci clase majore de imunoglobuline i
subclasele IgG i IgA.

Fig. 39. Localizarea determinanilor izotipici, allotipici i idiotipici

Variaia allotipic. Toi indivizii normali ai speciei umane prezint toate


izotipurile de imunoglobuline descrise mai sus, dar genele responsabile de codarea acestora
prezint, la nivelul populaiei umane, variante alelice. Discretele deosebiri n secvena de
aminoacizi, determinate de aceste alele, duc la formarea unor epitopi, numii determinani
allotipici, ce caracterizeaz unii indivizi. Au fost identificai determinani allotipici pentru
lanul (peste 25), pentru subclasa IgA2 (2) i pentru lanul k (3).

71

Variaia idiotipic. Domeniile variabile ale lanurilor grele i uoare prezint


secvene unice de aminoacizi, particulare unei molecule de imunoglobulin. Aceste
domenii formeaz, prin alturare, paratopul, destinat interaciunii cu antigenul. La nivelul
lor, studiile de imunizare cu imunoglobuline, au identificat o serie de epitopi. Fiecare din
aceti epitopi este numit idiotop. Ei pot fi localizai chiar n situsul de legare a antigenului
sau pot fi localizai nafara lui (fig. 40).

Fig. 40. Idiotopi localizai la nivelul paratopului

Acelai idiotop poate fi prezent la nivelul mai multor anticorpi cu specificiti


diferite (idiotop public) sau poate fi limitat strict la un anticorp cu o anumit specificitate
(idiotop privat). Totalitatea idiotopilor individuali de la nivelul unei molecule de
imunoglobulin formeaz idiotipul acelei molecule i reprezint specificitatea paratopului,
adic a situsului de legare a antigenului de la nivelul moleculei de imunglobulin.
Termenul idiotipic provine din limba greac, i nseamn individual. Anticorpii produi de
plasmocitele provenite din proliferarea aceluiai limfocit B activat de un antigen specific
au acelai idiotip, adic recunosc i interacioneaz cu acelai antigen, cel care a activat
iniial limfocitul B.
Reacia antigen-anticorp. Interaciunea anticorpului cu antigenul este necovalent i
reversibil. Forele implicate n aceast legtur sunt de mai multe feluri:
Fore electrostatice ce se stabilesc ntre grupuri ionice cu sarcini opuse (NH3+,
COO-). Fora este invers proporional cu ptratul distanei dintre sarcinile opuse.
Legturi de hidrogen: sunt relativ slabe, reversibile i se stabilesc ntre gruprile
hidrofile (-OH, -NH2, -COOH). Fora acestor legturi depinde de apropierea strns dintre
moleculele de anticorp i antigen.

72

Fore hidrofobe: apar atunci cnd dou suprafee hidrofobe interacioneaz cu


scopul excluderii apei.
Fore van der Waals: depind de interaciunea dintre norii electronici de la
suprafaa moleculelor. Fora acestei interaciuni este proporional cu 1/d7, unde d este
distana dintre anticorp i antigen, deci crete foarte mult pe msur ce moleculele de
anticorp i antigen se apropie.
Toate cele patru tipuri de fore depind de contactul apropiat dintre molecula de
anticorp i cea de antigen: cu ct ariile complementare dintre cele dou molecule sunt mai
mari, cu att fora de atracie dintre cele dou structuri va fi mai puternic.
Genetica imunoglobulinelor i generarea diversitii anticorpilor.Virtual, sistemul
imun trebuie s fie capabil s recunoasc orice patogen existent sau cu care s-ar putea
confrunta la un moment dat. Acest aspect implic generarea de milioane de anticorpi cu
specificiti diferite (repertoriul imunologic a fost stabilit la aproximativ 1015-1018 i
acelai aspect caracterizeaz i diversitatea receptorilor pentru antigen ai limfocitelor T
TCRs vezi Limfocitul T i TCR).
Dac ar fi respectat dogma genetic, o gen o protein, atunci numai genele
necesare codrii anticorpilor ar fi 1015-1018, iar cele necesare codrii TCR alte 1015-1018.
Ultimii 25-30 de ani au adus, ns, argumente experimentale de necontestat privind
strategia particular a codrii acestor proteine, n vederea asigurrii extraordinarei lor
diversiti. Descoperirea regiunilor variabile i constante ale imunglobulinelor a condus la
ipoteza, demonstrat ulterior, c aceste dou zone sunt codate de gene diferite (Dreyer i
Benett, 1965).
Evenimentele genetice necesare sintezei lanului uor al unei Ig. Un lan uor
este format din dou domenii, unul variabil i unul constant, fiecare dintre ele fiind alctuit
din aproximativ 108-110 aminoacizi. Primii 95 de aminoacizi din domeniul variabil
(ncepnd de la captul NH-2-terminal) sunt codai de o gen (segment genic) ce a fost
denumit V (variable), iar aminoacizii corespunztori poziiilor 96-108 (110), de o alt
gen (segment genic), numit J (joining), astfel nct, ntregul domeniu variabil este
practic codat de dou gene diferite. Domeniul constant este codat de o singur gen,
numit C (constant). n cursul diferenierii unui limfocit B, la nivelul genomului, o gen V
este adus n vecintatea unei gene J i, mpreun, n vecintatea unei gene C pentru a crea
mpreun o unitate, VJC, ce va coda un lan uor. Acest lucru este posibil datorit
capacitii genelor pentru imunoglobuline de a se "mica" i de a se rearanja aleatoriu n

73

genomul unui limfocit ce se difereniaz. (aspect evideniat de Susumu Tonegawa i


colaboratorii n 1976 - premiul Nobel n 1987). Acest mecanism unic de rearanjare
genic a fost numit recombinare VJC.

Fig. 41. Generarea unui lan uor k

Lanul uor k este codat de gene situate, la om, pe CRS 2. Analiza genetic a
evideniat c ntr-o celul stem (germ-line), la distan i separate de introni exist 40 de
segmente Vk diferite, fiecare putnd coda pentru primii 95 de aminoacizi dintr-un domeniu

74

variabil, 5 segmente Jk diferite, fiecare putnd coda aminoacizii 96-108 i o singur gen
Ck, ce codeaz restul moleculei.
n cursul diferenierii unui limfocit B, n stadiul pre-B al ontogeniei (vezi
Ontogenia limfocitului B), un segment genic Vk este ales aleatoriu i unit cu unul dintre
segmentele genice Jk. Procesul este, cel mai probabil, random i presupune prezena unor
secvene de recunoatere (secvene intronice numite RSS Recomination Signal Sequence
secvene semnal de recombinare). ntregul ADN dintre cele dou segmente alese este
ndoit, tiat i, ulterior, degradat. Din ADN-ul rearanjat (ce conine asocierea VkJk) se va
construi un transcript ARN primar, care, mai departe va suferi tieri ale tuturor secvenelor
intronice i exonice situate ntre gena VkJk i gena Ck. Recombinarea VJC are ca efect
formarea unui ARN matur ce va putea fi translat ntr-un lan uor de tip k (fig. 41).
Genele necesare codrii lanului uor sunt situate, la om, pe CRS 22. Exist n
germ-line aproximativ 40 de segmente V, 4 segmente funcionale J (sunt descrise i
pseudogene), fiecare fiind asociat cu cte o gen C distinct. Mecanismele de
recombinare sunt asemntoare celor ce intervin n codarea lanului k.
Evenimentele genetice necesare sintezei lanului greu al unei Ig. Lanul greu al unei
imunoglobuline este organizat n 4 sau 5 domenii, unul variabil (VH) i restul constante
(CH1, CH2, CH3 CH4). Genele pentru lanul greu sunt situate pe CRS 14 uman,
organizarea i recombinarea lor fiind diferite de cele ale genelor pentru lanul uor. Astfel,
domeniul variabil este codat de o unitate genic alctuit prin recombinarea a trei segmente
genice diferite, V (variable), D (diversity) i J (joining), n timp ce toate domeniile
constante ale lanului respectiv sunt codate de o singur gen, C (constant). n germ-lineul uman, exist 51 de gene VH, 27 de segmente genice DH, 6 segmente genice JH i
multiple gene ce pot coda domeniile constante, fiecare destinat unei clase sau subclase de
imunoglobulin. Genele C, flancate de introni, sunt situate n ordinea: C, C, C3, C1,
C1, C2, C4, C, C2.
n genomul fiecrui limfocit B aflat n cursul diferenierii, n stadiul pro-B precoce
(vezi Ontogenia limfocitului B), la ntmplare, un segment genic DH este unit cu un
segment JH, apoi unitatea DHJH este recombinat cu un segment VH. Unitatea VDJ este
transcris i unit cu primele dou gene constante, C i C. Acest transcript primar este,
apoi, supus unui proces de matisare alternativ (alternative splicing), care const n
formarea a dou molecule diferite de ARN matur, una (VDJC) ce, prin translaie, va da
natere unui lan greu de tip (fig. 42) i alta ce codeaz lanul greu de tip (VDJC). Un
limfocit B devenit matur va exprima ambele tipuri de lan greu, care se vor asocia cu lanul

75

uor i vor forma dou molecule de Ig diferite din punct de vedere al clasei (IgM i IgD),
dar cu aceeai specificitate antigenic (aceeai combinaie VDJ).

Fig. 42. Generarea unui lan greu

Dei, n celulele stem, exist multiple gene ce pot fi utilizate pentru codarea
lanurilor grele i uoare ale imunoglobulinelor, celulele ce se angajeaz pe lineajul B
folosesc, n realitate, cte un singur set de segmente genice, unul pentru lanul greu (VDJ)
i unul pentru unul din cele dou lanuri uoare (VkJk sau VJ). Acest lucru are ca

76

rezultat faptul c fiecare celul B produce imunoglobuline cu o unic specificitate


antigenic. Chiar dac, n fiecare limfocit B exist ambele seturi de cromozomi, de origine
matern i patern i, teoretic, la nivelul ambelor seturi s-ar putea forma exonii necesari
codrii mai multor imunogobuline, acest lucru nu este posibil, datorit unui fenomen numit
excluzie alelic, care permite codarea lanurilor de ctre exoni formai la nivelul unui
singur cromozom, fie matern, fie patern i care asigur, n aceast manier, faptul c
fiecare limfocit B este monospecific, n sensul c anticorpul pe care l sintetizeaz este
destinat recunoaterii unui singur particular epitop.
Prezena multiplelor segmente genice n germ-line i posibilitatea recombinrilor
random VJ i VDJ asigur, la nivelul populaiei de limfocite B un total de 200 de lanuri de
tip k diferite (40 segmente Vk x 5 segmente Jk), 160 de lanuri de tip diferite (40
segmente V x 4 segmente J) i 8262 de lanuri grele diferite (51 segmente VH x 27
segmente DH x 6 segmente JH). Mai mult, fiecare lan greu se poate asocia cu oricare lan
uor, k sau , astfel nct, se pot forma peste 1,65 x 106 molecule de imunoglobuline ce
conin lan uor de tip k (200 x 8262) i peste 1,32 x 106 molecule de imunoglobuline ce
conin lan uor de tip (160 x 8262). Iat cum un numr relativ redus de gene poate
genera un numr extrem de mare de anticorpi diferii. La aceste mecanisme se mai adaug
i altele, toate avnd ca unic scop asigurarea diversitii enorme a imunoglobulinelor.
Cu mici diferene, aceleai mecanisme sunt implicate i n asigurarea diversitii
TCR (T-cell receptor receptorul pentru antigen al limfocitului T).
Switch-ul sau comutarea de clas. Un limfocit B sintetizeaz imunoglobuline cu o
singur specificitate, dependent de rearanjrile VJ i VDJ pentru domeniile variabile ale
lanurilor uoare i, respectiv, grele. Aceste rearanjri au loc n cursul ontogeniei
limfocitelor B, n stadiile precoce de difereniere, deci n absena antigenelor. Ajuns la
maturitate, un limfocit B va sintetiza imunoglobuline cu aceeai specificitate antigenic,
aparinnd claselor M i D un semn distinctiv pentru limfocitele B naive. n cursul vieii,
dup contactul cu antigenul specific, limfocitul B va fi capabil s sintetizeze i alte clase de
imunoglobuline (IgG, IgA, IgE), toate, ns, avnd specificitatea neschimbat, proces
numit comutare (switch) de clas sau de izotip (vezi Activarea limfocitelor B i
Citokine). Fenomenul, unic limfocitelor B, se datoreaz faptului c domeniile constante ale
unui anumit lan greu sunt codate de o gen unic i pentru fiecare izotip exist cte o gen
distinct (fig. 43). Aceste gene CH pot fi utilizate sub aciunea unor factori precum
citokinele, n sensul c vor fi recombinate cu exonii VDJ, ducnd, n aceast manier, la
sinteza unor lanuri grele de tip IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1, IgA2, IgE.

77

Fig. 43. Succesiunea genelor care codeaz regiunea constant a lanurilor grele de pe cromozomul
14 uman

78

Receptorul pentru antigen al limfocitului T (TCR)


Descoperirea faptului c un antigen este recunoscut de un numr foarte redus de
limfocite T a condus, la sfritul anilor 70, la concluzia c limfocitele T, ca i limfocitele
B, posed receptori unici i specifici pentru un anumit antigen. Aceste structuri au fost
numite TCR (T-cell receptor). TCR este un heterodimer, compus din dou lanuri
glicoproteice, exprimate pe membranele limfocitelor T, niciodat secretate ca molecule
solubile. Exist dou tipuri de TCR, fiecare asociat cu linii celulare T distincte:
TCR-1, heterodimer , este primul care apare n ontogenie i este exprimat pe
membrana unui numr limitat de limfocite T (<10% din totalul imfocitelor T mature),
cantonate i concentrate n anumite zone ale organismului, cum sunt tracturile respirator,
intestinal, uro-genital i piele;
TCR-2, heterodimer , este exprimat de majoritatea limfocitelor T ( 95%) n
viaa adult.
Ca i receptorul pentru antigen al limfocitelor B (BCR), TCR este distribuit
clonal, adic fiecare clon de limfocite exprim un receptor unic i specific, diferit de al
altor clone. Un limfocit T exprim pe membrana sa ntre 10 000 i 30 000 de copii identice
ale unui singur TCR, fie , fie , niciodat ambele. Ca i limfocitele B, limfocitele T
recunosc antigenul ntr-o manier specific. Spre deosebire de limfocitele B ns care, prin
imunoglobulinele membranare, recunosc i interacioneaz cu antigenul liber, limfocitele
T recunosc antigenul pe suprafee celulare, ca peptide scurte i numai asociate cu
moleculele MHC self, fenomen numit restricie MHC.
Structura TCR (fig. 44). TCR este alctuit din dou lanuri glicoproteice,
(49 kDa) i (43kDa), fiecare dintre ele ancorat n membrana limfocitului. Regiunea
extracelular a ambelor lanuri este organizat n cte dou domenii globulare,
asemntoare domeniilor imunoglobulinelor (TCR este membru al superfamiliei
imunoglobulinelor). Fiecare domeniu variabil este alctuit din aproximativ 110 aminoacizi
i prezint o punte disulfidic ce nchide o bucl de aproximativ 65 de aminoacizi.
Domeniile constante au, n medie, 159 aa.
Lanul este organizat n dou domenii, 1 i 2. Domeniul 1, dinspre captul
N-terminal este variabil, iar domeniul 2 este constant. Lanul este organizat i el n
dou domenii: 1, variabil i 2, constant. mpreun, cele dou domenii variabile formeaz
situsul de legare a antigenului sau paratopul. La nivelul domeniilor variabile, ca i n

79

cazul imunglobulinelor, se descriu regiuni hipervariabile (CDRs regiuni determinante ale


complementaritii), cte patru pentru fiecare lan. Spre deosebire de molecula de
imunoglobulin, care este divalent, TCR este monovalent. Juxtamembranar, adic n
apropierea membranei limfocitului T n care sunt ancorate, lanurile i sunt unite
printr-o legtur disulfidic.

Fig. 44. TCR heterodimerul

Poriunile transmembranare ale celor dou lanuri conin reziduuri bazice (arginin,
lizin),

ncrcate

pozitiv,

necesare

interaciunii

cu

moleculele

CD3.

Cozile

intracitoplasmatice ale celor dou lanuri sunt scurte, ceea ce mpiedic transmiterea n
interiorul celulei a semnalelor ce iau natere n urma interaciunii TCR cu complexul
Ag/MHC. n consecin, pe membrana limfocitelor T, moleculele TCR sunt asociate stabil
cu un complex de molecule invariabile, numit CD3.
Genele i generarea diversitii TCR. TCR este o molecul responsabil de
recunoaterea specific a complexului peptid antigenic/MHC (complex Ag/MHC).
Diversitatea imens, necesar pentru recunoaterea antigenelor de ctre limfocitele T este
asigurat de aceleai mecanisme ce funcioneaz i n cazul imunoglobulinelor (cu cteva
excepii). Exonii ce codeaz lanurile TCR sunt formai prin recombinri somatice aleatorii
a mai multor gene. Lanurile (i ) sunt codate de asocierea a 4 segmente genice (VDJC)
iar lanurile (i ) sunt codate de asocierea a 3 segmente genice (VJC). La acest

80

mecanism de recombinare la ntmplare a mai multor gene se mai adaug i altele, la fel de
importante, care cresc i mai mult diversitatea acestor receptori, repertoriul imunologic
fiind comparabil cu cel al imunoglobulinelor 1015-1018 .
Spre deosebire de imunoglobuline, care prezint mai multe izotipuri de lan greu i
uor, receptorul pentru antigen al limfocitelor T nu prezint izotipuri, n consecin,
fenomenul de switch (comutare) de clas nu caracterizeaza aceste limfocite, iar poriunile
constante ale TCR nu mediaz funcii biologice, ca n cazul imunoglobulinelor. De altfel,
acest lucru este explicabil prin faptul c TCR nu e niciodat secretat i nu exist ca
molecul solubil.
Complexul CD3 (fig. 45). Acesta este alctuit din 6 lanuri, numite generic , , 2,
2, (sau , sau ) (lanurile i din alctuirea complexului CD3 nu sunt aceleai cu
cele din care este alctuit TCR). Lanurile , i prezint fiecare n regiunea
extracelular cte un domeniu globular asemntor imunoglobulinelor (sunt membri ai
superfamiliei imunoglobulinelor), cu o legtur disulfidic intradomeniu.

Fig. 45. TCR heterodimerul asociat complexului CD3

Lanurile i nu sunt organizate n domenii, prezint o poriune extracelular


foarte scurt (9 aa), sunt solidarizate juxtamembranar de o punte disulfidic i pot forma
homodimeri ( sau ), sau heterodimeri (). Cele dou lanuri prezint, n schimb, cozi
intracitoplasmatice foarte lungi (113 aa pentru lanul i 155 aa pentru lanul ), avnd rol

81

n transmiterea semnalului de activare n interiorul celulei. Lanurile i au importan


particular n transmiterea intracelular a semnalului de activare, cozile lor
intracitoplasmatice prezentnd secvene de aminoacizi ce formeaz motive de activare
(ITAM immunoreceptor tyrosine-based activation motif) la nivelul crora acioneaz
tirozin-kinaze.
Asocierea complexului CD3 cu TCR se realizeaz datorit faptului c n regiunile
transmembranare, lanurile CD3 conin aminoacizi cu sarcini negative (reziduuri de acid
aspartic), care interacioneaz cu cei cu sarcini pozitive de la nivelul lanurilor TCR.
Complexul CD3 este exprimat de timpuriu de ctre timocite i proteinele componente par
s fie eseniale pentru expresia pe membran a TCR. Indivizii deficieni n anumite lanuri
ale CD3 (n special i ) prezint nivele sczute de expresie a TCR.
Moleculele co-receptor CD4 i CD8. Limfocitele T se mpart n dou populaii
majore, n funcie de expresia a dou molecule membranare, numite CD4, respectiv CD8,
care vor determina clasa de molecule MHC cu care limfocitul va interaciona.
Limfocitele T CD4+, recunosc i reacioneaz cu complexe formate din peptidul
antigenic i molecule MHC clas II (complex Ag/MHC II). Cele mai multe limfocite T
CD4+, MHC II-restrictate, sunt limfocite T helper (Th), productoare de citokine i
reprezint 50-60% din totalul limfocitelor T.
Limfocitele T CD8+ recunosc i interacioneaz cu peptide antigenice asociate
numai moleculelor MHC clas I (complexe Ag/MHC I). Cele mai multe limfocite T CD8+,
MHC I-restrictate, sunt limfocite T citotoxice (CTL).

Fig. 46. Molecule co-receptor pentru TCR - CD4 (A) i CD8 (B)

82

Molecula CD4 este o glicoprotein de 55 kDa exprimat ca monomer. Este


membru al superfamiliei imunoglobulinelor, organizndu-i regiunea extracelular n 4
domenii globulare. Coada intracitoplasmatic este lung i conine 3 reziduuri de serin, ce
pot fi fosforilate (fig. 46A).
Molecula CD8 este o glicoprotein care se exprim pe membrana celular ca un
dimer alctuit din dou lanuri fie diferite (heterodimer ), fie identice (homodimer ),
solidarizate printr-o legtur disulfidic i avnd greuti moleculare de 30, respectiv, 38
kDa. Fiecare lan prezint cte un domeniu globular extracelular (sunt membri ai
superfamiliei

imunoglobulinelor),

regiune

transmembranar

coad

intracitoplasmatic cu reziduuri de aminoacizi ce pot fi fosforilate (fig. 46B).


Moleculele CD4 i CD8 prezint nite caracteristici i abiliti importante care au
fcut ca ele s fie considerate co-receptori. Pe de o parte, intervin n interaciunea dintre
TCR i complexele Ag/MHC, n sensul c domeniile lor extracelulare se leag de
domeniile constante ale moleculelor MHC. Molecula CD4 se leag de domeniul 2 al
MHC II, n timp ce molecula CD8 interacioneaz cu domeniul 3 al MHC I. Pe de alt
parte, cele dou glicoproteine intervin att n creterea forei de interaciune dintre
limfocitele T i APC-uri sau LyT/celule int, ct i n transmiterea semnalului de activare,
aceast funcie fiind mediat de regiunile lor citoplasmatice, ce se asociaz cu kinaze din
familia src (lck).
O caracteristic unic a moleculei CD4 este cea de interaciune cu HIV (virusul
imunodeficienei umane dobndite), fenomen ce mediaz parazitarea limfocitelor T helper,
dar i a macrofagelor, la nivelul crora CD4 se exprim n cantiti reduse (vezi Infecia
HIV).
Limfocitele T. Indivizii speciei umane prezint 5-10% limfocite T ce exprim
TCR. Aceste limfocite, numite limfocite T, apar n ontogenie naintea celor i
prezint nite particulariti care le individualizeaz i le difereniaz de limfocitele T.
Dei n numr mic, ele sunt cantonate i predomin n cteva situsuri din organism, cum
sunt pielea, epiteliile intestinal, uro-genital i cel pulmonar, adic n zonele de contact ale
organismului cu mediul extern, porile de intrare pe care patogenii le folosesc pentru a
penetra n interiorul organismului i, spre deosebire de limfocitele TCR+, acest tip de
limfocite T nu recircul (vezi Traficul limfocitar). Receptorul de tip 1 prezint o
variabilitate mult mai redus dect cea a TCR i cele mai multe limfocite T pozitive
pentru acest tip de receptor nu exprim co-receptorii CD4 i CD8 (un numr redus pot fi

83

CD8+), ceea ce a dus la speculaii privind faptul c aceste limfocite nu sunt MHCrestrictate i c au capacitatea de a recunoate Ag direct, neprocesat i neprezentat n
asociere cu proteinele MHC. Mai mult, numeroase studii au evideniat c acest tip de
receptor poate recunoate i antigene de alt natur dect cea proteic. Variabilitatea
redus a TCR se explic prin faptul c fiind cantonate i, oarecum, "sechestrate" n zone
bine definite ale organismului, aceste limfocite vin n contact cu un numr limitat i relativ
constant de patogeni, trebuind s recunoasc cteva pattern-uri comune ale acestora. n
infecii, numrul acestor celule crete foarte mult, ele, probabil, reprezentnd o prim linie
de recunoatere i de aciune fa de patogeni, fiind capabile s sintetizeze citokine sau
avnd posibilitatea s ucid prin citotoxicitate extracelular.

84

Complexul major de histocompatibilitate (MHC)


Iniial, complexul major de histocompatibilitate a fost identificat i descris ca fiind
o regiune genetic ce controleaz principala barier a transplantrii esuturilor.
Caracteristici ale antigenelor de histocompatibilitate:
1. sunt antigene de natur proteic, prezente pe membrana celulelor, care determin
compatibilitatea sau incompatibilitatea esuturilor transplantate;
2. sunt nalt imunogene, inducnd rspunsul imun al organismului gazd, care poate
rejeta esutul transplantat;
Complexul major de histocompatibilitate (MHC) reprezint o regiune genetic
situat, la om, pe braul scurt al cromozomului 6 i, totodat, produii proteici codai de
genele MHC (la om aceti produi se mai numesc molecule HLA-human leucocyte
antigens). Moleculele MHC joac un rol fundamental n dezvoltarea rspunsului imun de
ctre limfocitele T. Ele leag peptide provenite din antigene proteice i le prezint
limfocitelor T, n vederea activrii acestora (fenomenul de restricie MHC).
Genele MHC sunt mprite n dou clase:
Genele MHC clas I codeaz moleculele MHC clas I;
Genele MHC clas II codeaz moleculele MHC clas II;
Se mai descrie un set de gene de clas III sau complexul minor de
histocompatibilitate, ce cuprinde gene ce codeaz componente ale sistemului complement
(factor B, C2, C4), citokine (factorul de necroz tumoral - i - TNF- i TNF-), 21hidroxilazele A i B, etc.
Antigenele MHC clas I. Moleculele MHC de clas I sunt glicoproteine (conin 90%
proteine i 10% carbohidrai) i se gsesc exprimate pe membranele majoritii celulelor
nucleate. Nivelele de expresie ale moleculelor variaz de la un tip celular la altul. Astfel,
limfocitele par s exprime cantitatea cea mai mare, aproximativ 5 x 105 molecule per
celul, n timp ce hepatocitele, celulele musculare, fibroblastele sunt caracterizate de nivele
extrem de reduse de molecule MHC I. Cteva tipuri celulare, cum sunt neuronii sau
spermatogoniile n anumite stadii de difereniere, nu exprim deloc molecule MHC I.
Structur. MHC I este un heterodimer, alctuit din dou lanuri polipeptidice
diferite, asociate necovalent i numite generic i (fig. 47). Lanul , cu greutate
molecular mai mare (44 kDa), este inserat n membrana celular i prezint trei regiuni:

85

Fig. 47. MHC I structur

1. o regiune extracelular, organizat n trei domenii, numite 1, 2 i 3, fiecare


coninnd cte aproximativ 90 de aminoacizi. Domeniul 3, constant, este organizat
similar domeniilor imunoglobulinelor, motiv pentru care lanul este considerat membru al
superfamiliei imunoglobulinelor. Domeniile 1 i 2 nu au structura globular
caracteristic imunoglobulinelor i prezint variabilitate, avnd rol n asocierea peptidelor
antigenice;
2. o regiune transmembranar, hidrofob, alctuit din 40 de aminoacizi;
3. o scurt coad intracitoplasmatic, la captul C-terminal al moleculei.
Lanul din componena moleculei MHC I are o greutate molecular mic (12
kDa) i se numete 2-microglobulina (migreaz la electroforeza serului mpreun cu
globulinele). Gena ce codeaz aceast molecul nu este situat n aceeai regiune genetic
cu genele MHC, ci pe cromozomul 15 uman. 2-microglobulina este format din 96-99
aminoacizi, este nalt conservat i relativ invariabil la diferite specii (nu prezint
polimorfism), nu este ancorat n membrana celular, prezentnd numai o regiune
extracelular organizat ntr-un domeniu globular (este membru al superfamiliei
imunoglobulinelor), cu o legtur disulfidic intradomeniu. Rolul biologic al 2microglobulinei este controversat. Studii pe linii celulare crora li s-a blocat sinteza de 2microglobulin i care nu au mai exprimat nici lanul , au sugerat c 2-microglobulina
este esenial pentru transportul intracelular i pentru expresia membranar a moleculelor
MHC I.

86

Antigenele MHC clas II. Moleculele MHC clas II sunt exprimate mai ales pe
membrana celulelor ce pot funciona ca celule prezentatoare de antigen (APC):
monocite, macrofage, limfocite B, celule dendritice, celule endoteliale activate, dar i pe
membrana limfocitelor T umane activate (marker de activare T).
Structur (fig. 48). Molecula este alctuit din asocierea necovalent a dou
lanuri polipeptidice, numite i (este tot un heterodimer). Lanul are o greutate
molecular de 34 kDa, este ancorat n membrana celular, prezentnd trei regiuni:
1. o regiune extracelular, organizat n dou domenii numite 1 situat spre captul Nterminal, variabil i 2, constant; domeniul 2 prezint punte disulfidic intradomeniu i
este organizat asemntor domeniilor globulare ale imunoglobulinelor (este membru al
superfamiliei imunoglobulinelor);
2. o regiune transmembranar;
3. o coad citoplasmatic.

Fig. 48. MHC II - structur

Lanul are o greutate molecular de 29 kDa, prezint i el trei regiuni, fiind


ancorat n membrana celular:
1. o regiune extracelular, organizat n dou domenii numite 1 - variabil i 2 - constant.
Numai 2 este organizat similar domeniilor imunoglobulinelor (este membru al
superfamiliei imunoglobulinelor);

87

2. o regiune transmembranar;
3. o coad citoplasmatic.
Structura cristalografic a moleculelor MHC. In 1987, moleculele MHC I cristalizate
au fost analizate prin difracie cu raze X de ctre Pamela Bjorkman i colaboratorii si.
Rezultatele analizei au artat c numai 2-microglobulina i domeniul 3 au o structur
globular, asemntoare domeniilor imunoglobulinelor. Domeniile 1 i 2, situate spre
captul N-terminal al lanului , se dispun n aa fel nct, formeaz mpreun o cavitate
(cup), creia i se pot descrie un planeu format din 8 foi -pliate, antiparalele i 2 margini,
alctuite din 2 -helix-uri (fig. 49). Fiecare din cele dou domenii formeaz cte o
jumtate de planeu i o margine. Cupa MHC I reprezint situsul n care se asociaz
peptidele antigenice n vederea prezentrii lor limfocitelor T. Ea este nchis la capete i
poate lega peptide de 8-10 aminoacizi.

Fig. 49. Cupa MHC I

MHC II. Analiza moleculelor cristalizate a evideniat aceeai manier de


organizare. Domeniile variabile 1 i 1 formeaz mpreun un planeu alctuit din 8 foi
-pliate, antiparalele, pe care sunt dispuse 2 -helix-uri, ce reprezint marginile cupei.
Cupa MHC II este deschis la capete, putnd lega peptide antigenice mai lungi, de 13-18
aminoacizi.

88

Organizarea genelor MHC umane (locusul HLA)


La nivelul braului scurt al CRS 6 uman se gsete regiunea genic MHC. La rndul
ei, ea este mprit n trei regiuni care, n ordinea de citire a ADN, 53sunt:
1. regiunea ce conine genele pentru MHC clas II;
2. regiunea ce conine genele MHC clas III;
3. regiunea ce conine genele MHC clas I.
Regiunea genic MHC II conine mai multe subregiuni, din care, mai importante
sunt cele numite HLA-DP, HLA-DQ i HLA-DR (fig. 50).

Fig. 50. Organizarea genelor MHC II uman

Fiecare din primele dou subregiuni conine cel puin dou gene, una ce codeaz
lanul i una ce codeaz lanul , n timp ce subregiunea DR este particular. Ea conine
o gen pentru lanul i mai multe gene adiionale pentru lanul , ai cror produi se pot
combina cu lanul , rezultnd diferite molecule MHC II de tip DR. Au fost identificai
pn acum 9 loci, numii de la DRB1 la DRB9. DRB1 este cel mai polimorfic, prezentnd
peste 354 de alele la nivelul populaiei. Numai genele DRB1, DRB3, DRB4 i DRB5 sunt
funcionale, DRB9 este un fragment genic, iar genele DRB2, 6, 7 i 8 sunt pseudogene.
Toi indivizii umani par s prezinte n genomul lor DRB1 i DRB9, n timp ce celelalte
gene pot fi prezente sau nu. n ceea ce privete genele DRB3, 4 i 5, o observaie
interesant este aceea c prezena uneia dintre ele exclude prezena celorlalte dou.
Datorit acestei variaii structurale i funcionale, unii indivizi exprim lanuri codate de
dou gene diferite din subregiunea DR a fiecrui cromosom: un lan codat de gena DRB1
i, dac posed una din genele DRB3, 4 sau 5, lanul codat de aceasta. De aceea, o celul
poate exprima simultan dou molecule MHC II codate n aceast subregiune, de exemplu
HLA-DRA/DRB1 i HLA-DRA/DRB5.
Genele subregiunilor DP, DQ i DR codeaz aa numitele molecule MHC clasice.
Suplimentar, n aceast regiune mai exist subregiuni, cum sunt HLA-DM, HLA-DN,
HLA-DO, cunoscute ca gene non-clasice i care codeaz molecule ce intervin n reglarea

89

expresiei i funciei moleculelor MHC II clasice. Tot n regiunea MHC II se gsesc genele
TAP1 i TAP2 ce codeaz proteine din structura transportorului de peptide antigenice i
genele LMP2 i LMP7 ce codeaz proteine din structura proteazomului (vezi procesarea i
prezentarea antigenelor n Generarea liganzilor pentru limfocitele T).
Regiunea genic MHC III cuprinde gene pentru unele componente ale sistemului
complement (Factor B, C4, C2), gene pentru 21-hidroxilazele A i B, gene pentru citokine,
cum sunt TNF- i TNF-, gene ce codeaz proteine de oc termic (fig. 51).

Fig. 51. Genele MHC III uman

Regiunea genic MHC I cuprinde mai multe gene, din care mai importante sunt
HLA-B, HLA-C i HLA-A (n ordinea de citire 5-3 a ADN), numite clasice. Fiecare
codeaz lanul (gena pentru 2-microglobulin este situat pe CRS 15 uman). Se descriu
i alte gene, numite HLA-E, HLA-F, HLA-G, HLA-H (HFE), HLA-J i HLA-X. Acestea
sunt fie pseudogene, fie gene ce codeaz aa numitele molecule MHC non-clasice (fig.
52).

Fig. 52. Genele MHC I uman

Antigene MHC non-clasice i molecule MHC-like


Grupul moleculelor MHC non-clasice este reprezentat de proteine codate, la specia
uman, de genele MHC I numite -E, -F, -G, -H, -J i X i de genele MHC II numite DN,
DM, DO. Glicoproteinele au o structur strns nrudit cu cea a antigenelor MHC clasice,
dar prezint un polimorfism redus, sunt exprimate n cantitate mai mic i au un pattern de
distribuie tisular mult limitat. Unele dintre aceste molecule sunt prezente att n form

90

ancorat de membrane celulare, ct i n form solubil i nu au capacitatea de a lega


peptide, n timp ce altele prezint potenialul de a lega anumite subseturi de antigene nonself i de a le prezenta limfocitelor T sau . De exemplu, moleculele HLA-E i HLA-F
par s fie implicate n prezentarea antigenelor limfocitelor T, n timp ce HLA-G se
exprim aproape exclusiv la nivelul trofoblastului n anumite stadii de dezvoltare fetal,
intervenind n protecia ftului, care este o gref allogeneic pentru sistemul imun matern.
HLA-G interacioneaz cu receptorii inhibitori de la nivelul celulelor NK materne,
inhibnd potenialul litic al acestor celule. HLA-DM nu este exprimat pe membrana
celulelor, molecula intervenind n procesarea i prezentarea antigenelor exogene (vezi
Generarea liganzilor).
Moleculele denumite MHC-like sunt codate de gene situate n afara regiunii
genetice MHC, dar prezint o organizare structural asemntoare MHC. Proteinele CD1
sunt non-polimorfice, prezint omologie limitat cu moleculele MHC clas I, dar conin n
molecul lanul 2-microglobulina. Prezint un interes particular datorit capacitii lor de
a prezenta limfocitelor T antigene de natur lipidic sau glicolipidic. Cele mai multe
molecule sunt exprimate pe membranele celulelor prezentatoare de antigen, iar consecina
prezentrii antigenelor asociate proteinelor CD1 este activarea limfocitelor, secreia de
citokine de tip Th1 sau inducerea la nivelul intei a apoptozei mediate de perforine i
granzime sau de sistemul molecular Fas/Fas ligand. Au fost distribuite n dou grupe, pe
baza secvenei de aminoacizi i a distribuiei tisulare. Grupul 1 include moleculele CD1a, b
i c, exprimate ndeosebi pe APC-urile profesioniste. Grupul 2 include, la om, moleculele
CD1d1 i CD1d2, exprimate n special de celulele dendritice din intestin i, mai puin, de
celulele dendritice de la nivelul altor organe sau esuturi non-limfoide.
Proprietile MHC
Multigenia (poligenia) i polimorfismul MHC
Cele mai multe proteine umane sunt unice, fiind codate de gene unice. Genele
MHC sunt particulare din acest punct de vedere. Aa cum am vzut deja, exist mai multe
gene diferite i funcionale, dispuse n subregiuni distincte, ce codeaz pentru acelai tip de
lan MHC. Acest fenomen poart numele de multigenie i reprezint o surs de asigurare a
variabilitii MHC. O alt surs extrem de important de variabilitate este polimorfismul
MHC, care este generat de prezena n populaie a diferitelor variante alelice pentru acelai
locus MHC. Reamintim c alelele sunt variante ale unei gene ce difer la nivelul
secvenelor lor nucleotidice n procente reduse, cuprinse ntre 5 i 10%. Produii lor de

91

expresie prezint mici diferene structurale, dar ndeplinesc aceeai funcie. Sistemul HLA
posed un numr extrem de mare de alele diferite, pentru aproape fiecare dintre locii
descrii, fiind cel mai polimorfic sistem de gene din genomul vertebratelor. De exemplu,
pentru locusul HLA-A au fost identificate peste 1800 de alele, pentru locusul HLA-B
peste 2500 alele, iar pentru locusul HLA-C peste 1300 de alele. Toate variantele alelice
sunt dominante, astfel nct, la un individ heterozigot pentru un anumit locus, cele dou
alele se exprim co-dominant (spre deosebire de imunoglobuline i TCR, unde
funcioneaz excluzia alelic). Alte mecanisme cresc i mai mult variabilitatea MHC
(mutaii punctiforme, recombinri genice, conversii genice, etc). Rezultatul tuturor acestor
mecanisme l reprezint numrul enorm de combinaii posibile (>1010) de molecule pe care
le pot exprima diferii indivizi, ceea ce face s nu existe dou persoane identice, cu
excepia gemenilor monozigoi. De aceea, moleculele MHC funcioneaz ca un real buletin
molecular de identitate i reprezint cea mai important barier n efectuarea unui
transplant ntre membrii diferii ai aceleiai specii (allotransplant) sau ntre membrii unor
specii diferite (xenotransplant).
Genele din sistemul HLA sunt strns nlnuite (linkate) i transmise n bloc de la prini la
copii. Haplotipul MHC reprezint setul de alele prezente pe un cromozom 6. Copiii
motenesc de la prini cte un haplotip (unul matern i unul patern), fiind astfel
semiidentici cu fiecare dintre ei. n fratrie, exist probabilitatea teoretic ca fraii i surorile
s fie semiidentici (50%), identici (25%) sau diferii (25%).
Funciile MHC
I. Dei au fost identificate iniial datorit implicrii lor n respingerea grefelor (fa de ele
iau natere rspunsurile limfocitelor T i B ce duc la rejet), funcia primordial a
moleculelor MHC este aceea de a prezenta antigenele limfocitelor T n vederea
activrii acestora.

Generarea liganzilor pentru limfocitele T. Activarea limfocitelor T necesit


interaciunea dintre receptorul pentru antigen al celulei T (TCR) i un complex format
dintr-o molecul MHC self i un peptid antigenic (complex Ag/MHC).
Peptidele antigenice pot proveni fie din antigene endogene, fie din antigene
exogene. n interiorul celulelor exist dou compartimente majore separate de membrane.
- citoplasma, care comunic prin porii din membrana nuclear cu nucleul;

92

- sistemul vezicular, care include reticulul endoplasmatic, aparatul Golgi, endozomii,


lizozomii, etc. Acest sistem este n contact cu fluidul extracelular (ex. endozomii preiau
material extracelular i l introduc n sistemul vezicular).
Agenii infecioi se pot replica n unul din cele dou compartimente intracelulare:
virusurile i chiar unele bacterii se replic n citosol, n timp ce cea mai mare parte a
bacteriilor patogene i unii parazii eucarioi se replic n sistemul vezicular.
Pentru a dezvolta un rspuns imun eficient fa de microorganismele patogene este
necesar ca limfocitele T s detecteze prezena structurilor strine n ambele compartimente
intracelulare i, totodat, este necesar ca limfocitele T s poat discrimina ntre cele dou
compartimente. Aceast discriminare se realizeaz prin transportul la suprafaa celulelor a
peptidelor provenite din patogeni care se dezvolta n compartimente celulare diferite de
ctre cele dou clase distincte de molecule MHC (fig. 53).
1. Moleculele MHC clas I transport pe suprafaa celulelor peptide provenite din
patogeni prezeni n citosol; complexul peptid/MHC I exprimat pe membrana celular va fi
recunoscut de ctre limfocitul T CD8+.
2. Moleculele MHC clas II transport peptide derivate din patogeni prezeni n
sistemul vezicular; complexul peptid/MHC II de pe suprafaa celulei va fi recunoscut de un
limfocit T CD4+.

Fig. 53. Complexul Ag/MHC I este prezentat unui limfocit T CD8+, complexul Ag/MHC II este
prezentat unui limfocit T CD4+ (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

93

Generarea peptidelor presupune modificarea proteinei native, proces numit


procesarea antigenului, iar expunerea peptidelor pe suprafaa celular, n contextul
moleculelor MHC self se numete prezentarea antigenului. Moleculele MHC I asociaz
peptide derivate din antigene citoplasmatice, n special din virusuri. Cum virusurile pot
infecta orice celul nucleat, este limpede de ce MHC I se exprim pe toate celulele
nucleate. Moleculele MHC II asociaz peptide derivate din antigene exogene. Nu toate
tipurile celulare sunt capabile s internalizeze antigene exogene, s le proceseze i s le
prezinte limfocitelor T, ci numai o populaie funcional de celule, numite celule
prezentatoare de antigen (APC-uri). Astfel, se explic de ce expresia moleculelor MHC
II este restrns la aceast populaie funcional de celule.

Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+


Exemplul cel mai sugestiv de antigen endogen este un virus care a parazitat o
celul, n scopul de a-i folosi mainria de sintez, pentru a-i fabrica propriile proteine.
Odat cu proteinele proprii, celula infectat viral sintetizeaz i proteine virale.

Fig. 54. Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+ (antigen endogen/MHC I)

Sinteza proteinelor self i non-self, inclusiv a moleculelor MHC I i II se realizeaz


pe faa citosolic a reticulului endoplasmatic (RE), de unde sunt translocate n lumenul
RE (fig. 54). O parte din proteinele sintetizate sunt supuse unei degradri enzimatice n
citoplasm, de ctre un complex proteazic multicatalitic, numit proteazom. Microscopia

94

electronic a evideniat c proteazomul are o structur cilindric, fiind format din 28 de


subuniti, grupate n 4 inele. Nu se cunoate modul n care proteazomul degradeaz
proteinele citoplasmatice. Este posibil ca proteina s treac prin centrul structurii
cilindrice, dar nu exist dovezi directe n acest sens. Dup degradarea enzimatic de la
nivelul proteazomului, peptidele generate, sunt transportate activ n lumenul RE, de ctre
nite molecule transportoare, numite TAP-1 i TAP-2 (Transporters associated with
Antigen Processing), prezente ca heterodimer la nivelul membranei reticulului. Ajunse n
lumenul RE, peptidele sunt preluate de ctre moleculele MHC I care ateapt ntr-o form
parial pliat. n absena peptidelor, moleculele MHC I sunt instabile i suceptibile la
degradare n RE. Complexele formate prin asocierea moleculelor MHC I i peptide sunt
eliminate din RE ntr-o vezicul i transportate la suprafaa celulei, unde vor interaciona
cu limfocitele T CD8+.
n celulele normale, neinfectate, moleculele MHC I prezint n cup peptide
derivate din proteinele self, manier prin care celulele sunt supravegheate, iar modificrile
pe care le-ar putea suferi, de exemplu transformarea malign, imediat sesizate.

Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+


Liganzii pentru limfocitele T CD4+ sunt complexe formate din peptide derivate din
antigene exogene, generate n compartimentul vezicular intracitoplasmatic i molecule
MHC II self.
n unele cazuri, sursa peptidelor este reprezentat de bacterii sau parazii care
invadeaz celula i care se replic n veziculele intracelulare. n alte cazuri, structurile
strine sunt internalizate (de ex. fagocitate) i degradate n fagolizozomi, de ctre enzime,
rezultnd peptide (procesarea antigenului).
n paralel, lanurile i ale moleculelor MHC II nou sintetizate sunt translocate
n lumenul RE, unde sunt asociate i pliate. Pentru c exist riscul asocierii moleculelor
MHC II cu peptide derivate din antigene citoplasmatice (destinate asocierii cu MHC I),
cupele MHC II vor fi ocupate, temporar, de o molecul, numit lanul Ii (lanul
invariant) (fig. 55).
Complexele MHC II-lan Ii sunt preluate n vezicule transportoare. Veziculele
conin enzime, dar, iniial, acestea sunt inactive din cauza unui pH alcalin ce caracterizeaz
interiorul vezicular. Pe msur ce se deplaseaz n citoplasm, interiorul veziculelor devine

95

acid i enzimele coninute se activeaz. Substratul principal al acestor enzime l reprezint


lanul invariant, care va fi degradat n numeroase fragmente. Un fragment, numit CLIP
(class II associated invariant chain peptide) va rmne s ocupe mai departe cupa MHC II.

Fig. 55. In RE, cupa MHC II este ocupat de lanul Ii

Fig. 56. Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+ (antigen exogen/MHC II)

96

n drumul lor spre suprafaa celulei, veziculele ce conin complexele MHC II/CLIP
fuzioneaz cu veziculele ce conin peptidele generate prin procesarea antigenului exogen.
O molecul MHC II non-clasic, numit HLA-DM este responsabil de preluarea CLIP din
cupa MHC II clasic, lasnd-o liber pentru unul din peptidele antigenice generate n urma
procesrii materialului endocitat. Noul complex, format din peptid antigenic/MHC II este
exprimat pe membrana celulei i va fi recunoscut de un limfocit T CD4+ (fig. 56).
n celulele normale, neinfectate, moleculele MHC II leag peptide derivate din
proteine self. Moleculele care nu reuesc s lege peptide sunt rapid degradate n
compartimentul endozomal i, la rndul lor, pot fi preluate i prezentate de alte molecule
MHC II.
Dei sistemul MHC prezint o variabilitate enorm, totui interaciunea dintre
moleculele MHC i peptide nu este strict specific, aa cum este cea dintre imunoglobuline
sau TCR i antigen. Aceeai molecul MHC poate lega un set de peptide diferite, iar
variantele alelice ale aceleiai molecule pot lega un numr extrem de mare (uneori peste
2000) de peptide diferite. Ca urmare a acestui fapt, un numr enorm de peptide antigenice
poate fi prezentat simultan pe suprafaa unei celule i, n felul acesta, poate fi activat un
numr corespunztor de limfocite T diferite. n aceast manier, abilitatea de a prezenta
sau nu un anumit antigen se repercuteaz asupra rspunsului imun fa de acel antigen i,
n felul acesta, se poate explica de ce capacitatea de aprare fa de acelai patogen poate
diferi, chiar n mare msur, de la individ la individ. Rezultat al evoluiei i al presiunii
continue a mediului, polimorfismul caracteristic MHC crete ansa unei prezentri
eficiente pentru un particular antigen i, implicit, a unui rspuns imun eficient fa de acel
antigen. La nivelul speciei, polimorfismul nseamn c un larg spectru de alele MHC este
mprtiat n ntreaga populaie, ceea ce face ca mcar o fraciune din ea s fie capabil s
rspund eficient fa de un anumit patogen i s supravieuiasc (se asigur n primul rnd
supravieuirea speciei i nu a individului). n acest fel, orice mutaie sau modificare, mai
mult sau mai puin important, care ar putea aprea n diveri patogeni, cu cea mai mare
probabilitate, va fi recunoscut i prezentat eficient de anumite seturi de alele ale unor
indivizi ai speciei.
II. Moleculele MHC reprezint inte pentru rspunsul imun. Cele mai multe proteine
ale unei specii, fiind monomorfice (practic, sunt identice la toi indivizii speciei
respective), pot fi transferate ntre indivizii acelei specii, fr apariia unui rspuns imun,
ele fiind percepute ca "self" de primitori. Marea variabilitate a sistemului MHC a fcut ca

97

fiecare individ, prin setul particular de alele MHC pe care l exprim, s fie unic (cu
excepia gemenilor monozigoi), astfel nct, moleculele MHC au devenit principalele inte
moleculare fa de care se dezvolt rspunsurile imune ce conduc la rejet, n cazul
transplanturilor allo- i xenogeneice.
III. Moleculele MHC sunt implicate n fenomenul de reacie gref contra gazd (GVH
graft versus host). Acest tip de reacie apare la introducerea de celule imunocompetente
(limfocite, APC-uri) ntr-un recipient (primitor) histoincompatibil incapabil s le rejeteze
(ex. un recipient imunodeficient). n aceast situaie, celulele transplantate (limfocitele
coninute n gref) pot dezvolta rspunsuri fa de structuri ale gazdei.
MHC i predispoziia pentru diverse afeciuni. n ultimii ani, a devenit evident c
expresia unei anumite alele MHC (sau set de alele) poate reprezenta cel mai important
factor (dar nu singurul) ce se asociaz cu rezistena sau, din contr, cu susceptibilitatea la
diveri ageni infecioi (de exemplu, virusul hepatitei B, virusul T-limfotropic uman,
agenii etiologici ai malariei, leprei, tuberculozei, etc). A devenit, de asemenea, evident c
indivizii cu anumite alele prezint un risc crescut de a dezvolta anumite boli autoimune sau
inflamatorii. Unul dintre cele mai elocvente exemple n acest sens este cel al spondilitei
anchilozante, afeciune inflamatorie a articulaiilor, inclusiv a celor intervertebrale, care se
asociaz n aproximativ 90% din cazuri cu prezena alelei HLA-B27. Un numr relativ mic
de purttori ai acestei alele dezvolt, ns, boala, ceea ce demonstreaz intervenia i a altor
factori. Alte asocieri cunoscute sunt ntre diabetul zaharat de tip I (insulino-dependent) i
alelele HLA-DR3, DR4 sau DQ8. De exemplu, alela DQ8 este de cel puin 8 ori mai
frecvent la indivizii ce dezvolt aceast boal autoimun, comparativ cu populaia
sntoas.

98

Anatomia sistemului imun


Organele limfoide sunt esuturi organizate, la nivelul crora, limfocitele
interacioneaz cu celule non-limfoide. Acestea sunt importante fie n maturarea
limfocitelor, fie n iniierea i dezvoltarea rspunsurilor imune specifice. Organele limfoide
sunt reprezentate de organele limfoide primare sau centrale, unde se realizeaz generarea
limfocitelor i organele limfoide secundare sau periferice, unde sunt iniiate rspunsurile
imune.
Mduva osoas i timusul sunt organele limfoide primare. Ambele tipuri de
limfocite i au originea n mduva osoas, dar numai limfocitele B se matureaz la acest
nivel. Precursorii limfocitelor T exprim nivele crescute de CCR9, un receptor pentru
chemokine secretate de timus, i migreaz sub influena acestor factori chemotactici n
timus, unde are lor maturarea lor (T cell thymus-derived cell).

Organe limfoide primare


Timusul, ontogenia limfocitelor T i selecia repertoriului limfocitelor T
Timusul, situat retro-sternal, este organul limfoid primar necesar diferenierii
precursorilor hematopoietici n limfocite T. Sindromul DiGeorge, denumit de ctre unii
autori anomalia DiGeorge DGA (DiGeorge anomaly) este definit ca o monosomie
22q11, ce conduce la defecte ale procesului embriogenetic al unui subset de celule ale
crestei neurale destinate celei de a III-a pungi faringiene i celui de-al IV-lea arc branchial,
celule responsabile de formarea glandelor paratiroide, a arterelor din arcul aortic, a
cordului i a timusului. Reprezint o anomalie complex n care, printre altele, apare o
imunodeficien proporional cu nivelul de hipoplazie a timusului. Aplazia timic este
practic incompatibil cu viaa dar, n majoritatea situaiilor, este prezent doar o hipoplazie
a timusului, iar numrul de limfocite T exportate din timus variaz cu gradul de afectare a
organului. Nu este afectat numai numrul de limfocite, ci i funcionalitatea acestor. Astfel,
s-a constatat c celulele T ale unor pacieni cu DGA prezint o sensibilitate crescut la
apoptoz i nu rspund n mod corespunztor la stimuli.
Dei la mamifere funcioneaz toat viaa, producia de limfocite T diminu
semnificativ dup pubertate.

99

Diferenierea limfocitelor T este un proces complex, care se desfoar n stadii


succesive de dezvoltare i care depinde esenial de micromediul timic i de semnalele pe
care precursorii T le primesc de la o relativ larg varietate de celule, fie c sunt celule
epiteliale timice, corticale sau medulare, fie c sunt celule non-epiteliale, reprezentate de
macrofage sau celule dendritice interdigitate (IDC).
Structura timusului (fig. 57)
Timusul este un organ bilobat, fiecare din cei doi lobi fiind, la rndul su, organizat
ntr-o serie de lobuli. Stroma timic este format din fibroblaste mezenchimale timice i
celule epiteliale dendritice (prezint prelungiri citoplasmatice), ce alctuiesc o reea
tridimensional. Printre aceste celule se gsesc limfocitele T n dezvoltare (timocite).
Fiecare lobul este constituit dintr-o regiune cortical i una medular, separate prin aa
numita jonciune cortico-medular, populat cu celulele derivate din mduva
hematogen, cum sunt macrofagele santinel i celulele dendritice interdigitate
(funcioneaz ca APC-uri), acestea din urm fiind prezente i n medular.

Fig. 57. Structura unui lobul timic (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

n regiunea extern a cortexului se gsesc aa numitele celule doic, celule de


origine epitelial, care au capacitatea de a prelua ntre prelungirile lor un numr de pn la
50 de timocite, mpreun cu care formeaz complexe multicelulare. n regiunea medular

100

se gsesc n schimb corpusculii Hassal formai, cel mai probabil, din aglomerarea
celulelor epiteliale degenerate.
Celulele progenitoare limfoide ptrund n timus la nivelul sinusului subcapsular. La
scurt timp dup ce au sosit n timus aceti progenitori prolifereaz i genereaz timocitele,
precursori T ce exprim o serie de molecule caracteristice progenitorilor limfoizi, cum este
CD34, molecul de adeziune, receptori pentru factorii chemotactici eliberai de timus i
care intervin n traficul orientat al acestor celule ctre micromediul timic i molecule
implicate n proliferarea celular, cum este c-kit sau CD117. Cel puin pe membran, n
acest stadiu, nu sunt exprimate nici una dintre moleculele caracteristice limfocitelor T.
Celulele au fost denumite dublu negative (DN), deoarece nu exprim nici una dintre
moleculele co-receptor, CD4 sau CD8 (fig. 58). Prin intermediul interaciunii dintre c-kit
de pe membrana timocitelor i SCF (Stem Cell Factor), secretat de celulele epiteliale
timice corticale, timocitele primesc semnale de supravieuire eseniale, n absena crora
mor. Celulele ncep s sintetizeze i s exprime pe membran lanuri ale complexului CD3,
iar sub influena IL-7 i SCF, ncep s prolifereze rapid. Apoi i pierd expresia c-kit, se
opresc din proliferare i rmn n cortexul superficial, unde, ntr-o etap ulterioar, ncep
s-i rearanjeze genele n vederea sintezei lanurilor TCR pentru lanurile , i . 5-10%
dintre timocite ajung la rearanjri productive (care pot fi transcrise) ale genelor TCR i ,
astfel nct ele vor exprima TCR de tip 1. Nu exprim CD4 i foarte puine vor fi CD8+.
Unele clone par s fie supuse proceselor de selecie, dar nu se cunosc detaliile, apoi sunt
exportate n periferie, unde se vor cantona, n special, n piele i la nivelul epiteliilor
respirator, digestiv i uro-genital.
Timocitele care nu reuesc s ajung la rearanjri productive vor muri prin
apoptoz; cele care ajung la rearanjari productive (aproximativ 10%) vor ncepe s
sintetizeze aceste lanuri, pe care le exprim pe membran, asociate cu nite lanuri
surogat (lanuri pre-T) formnd, mpreun cu complexul CD3, receptorul pre-T (preTCR). Dezvoltarea ulterioar a timocitelor depinde n mod esenial de recepionarea unui
semnal prin intermediul acestui pre-TCR, care le permite, ntr-o prim instan, s
prolifereze. Apoi, proliferarea este stopat i vor ncepe rearanjrile genice pentru lanurile
. Rearanjrile neproductive conduc la moartea prin apoptoz a celulelor. Dac timocitele
reuesc s sintetizeze lanul , acesta va fi asociat cu lanul , dislocuind progresiv lanul
pT, ceea ce va conduce la formarea unui TCR complet i corect alctuit, deci funcional.
Totodat, celulele devin dublu pozitive (DP), deoarece ncep s exprime nivele sczute de
CD4 i CD8, expresia acestor molecule amplificndu-se constant. Timocitele DP

101

prolifereaz i traverseaz cortexul timusului, ajungnd la nivelul jonciunii corticomedulare.

Fig. 58. Etape n ontogenia limfocitelor T

n acest stadiu de difereniere, celulele T vor ncepe s sufere procese denumite de


selecie, rolul acestora fiind acela de a nltura att limfocitele care prezint un TCR
nefuncional, n sensul c nu sunt capabile s recunoasc moleculele MHC self, ct i
limfocitele care recunosc complexele MHC/peptide self.
Primul proces este selecia pozitiv, care presupune uciderea prin apoptoz a
timocitelor al cror TCR fie nu interacioneaz cu moleculele MHC self, fie prezint o

102

aviditate prea mare pentru MHC. Doar acele timocite DP care recunosc i leag cu o for
moderat moleculele MHC I sau II vor fi selectate pozitiv, adic supravieuiesc.
Procesul de selecie pozitiv asigur restricia MHC, adic, capacitatea TCR de a
recunoate i interaciona doar cu molecule MHC self. Cel de-al doilea proces este selecia
negativ i const n uciderea prin apoptoz a tuturor timocitelor care, prin TCR,
interacioneaz cu peptide self, asociate moleculelor MHC I sau II. Prin acest proces sunt
deletate clonele de timocite care recunosc structuri self, ceea ce asigur protecia
structurilor organismului mpotriva unui atac autoimun, cu alte cuvinte, este asigurat
tolerana central la self.
Nu se cunoate n totalitate mecanismul prin care o gam uria de peptide din
ntregul organism ajung ntr-un organ destul de izolat ca timusul, care nu are circulaie
limfatic. Foarte probabil, ele sunt transportate n timus de ctre celulele prezentatoare de
antigen de la nivelul jonciunii cortico-medulare i al medularei. Alte structuri, cum sunt
citokeratinele i mielina sunt exprimate la nivelul celulelor care formeaz stroma
organului. n plus, la nivelul medularei, a fost identificat un grup de celule epiteliale care
pot exprima, tranzitoriu, molecule specifice unor diverse esuturi.
Selecia pozitiv reprezint totodat i un moment crucial de evoluie a timocitelor,
n sensul c acestea se vor diferenia n celule simplu pozitive (SP). Maniera exact n care
se realizeaz inhibarea expresiei unuia dintre co-receptorii CD4 sau CD8 nu este cunoscut
i exist mai multe modele care ncearc s explice acest fenomen. Unii autori susin c
procesul de pierdere a moleculelor CD4 sau CD8 n cursul seleciei este unul aleatoriu.
Modelul numit instructiv susine c dac, de exemplu, TCR-ul leag un peptid prezentat
de o molecul MHC I, este angajat i co-receptorul CD8, care transmite un semnal
responsabil pentru inhibarea expresiei CD4, i limfocitul devine CD8+. Dac limfocitul T
interacioneaz cu un peptid asociat MHC II, atunci CD4 este implicat n interaciune,
expresia sa va fi meninut, n timp ce expresia CD8 va fi inhibat i limfocitul devine
CD4+.
Timocitele SP sunt reinute cteva zile n medular, unde primesc un semnal ce
induce o nou proliferare. Totodat, celulele ajung la deplina maturitate i vor fi exportate
n periferie ca limfocite T mature, MHC-restrictate i self-tolerante. Ele sunt limfocite
naive i se afl n stadiul Go al ciclului celular. Din timus vor pleca valuri succesive de
limfocite T, ntr-un ritm care este mult mai alert la vrste tinere, procesul meninndu-se
ns i la vrsta adult, cnd, la nivelul timusului pot fi identificate n continuare timocite
aflate n toate stadiile de dezvoltare.

103

Dezvoltarea ulterioar, n periferie, a limfocitelor T depinde de interaciunea cu


antigenele.

Mduva osoas, ontogenia limfocitelor B i selecia repertoriului


limfocitelor B
Primele experimente legate de producia de anticorpi la psri, au artat c sinteza
acestora este dependent de prezena unui organ limfo-epitelial, situat n vecintatea
cloacei, numit bursa lui Fabricius. ndeprtarea chirurgical a acestui organ previne
sinteza anticorpilor i, n consecin, celulele care se matureaz i se difereniaz n celule
secretoare de anticorpi au fost numite celule derivate din burs (B-derived) sau limfocite B.
La mamifere, diferenierea celulelor B are loc iniial n ficatul fetal, dup care mduva
osoas preia aceast funcie pentru tot restul vieii. De aceea, mduva osoas este
considerat organ limfoid primar pentru diferenierea limfocitelor B.

Fig. 59. Micromediul medular este esenial pentru ontogenia limfocitelor B

Limfocitele B iau natere din celula stem hematopoietic i fiecare etap din
ontogenia acestor celule se desfoar sub influena semnalelor pe care precursorii le
primesc din micromediul medular i n special de la celula stromal (fig. 59). Lineajul B
cuprinde mai multe stadii de dezvoltare (pro-B precoce, pro-B tardiv, pre-B, B imatur, B

104

matur), caracterizate de producerea unor fenomene care au ca efecte majore rearanjrile


genice pentru lanurile grele i uoare i sinteza acestora, asamblarea i expresia
receptorului pentru antigen (BCR) pe membrana celular (fig. 60). Prima clas de
imunoglobuline care apare pe membrana limfocitului B n ontogenie este IgM, iar stadiul
se numeste B imatur, etap n care limfocitele B sunt supuse procesului de selecie
negativ. Interaciunile dintre limfocitele B imature i structuri self, fenomen ce are loc
tot n mduva osoas, sunt urmate de inactivarea sau deleia limfocitelor potenial
autoreactive, mecanism major de meninere a toleranei (absena rspunsului imun
specific) la self. nainte, ns, de acest eveniment, limfocitele B autoreactive (spre
deosebire de Ly T) au posibilitatea s-i rearanjeze nc o dat genele pentru lanul ,
fenomen care se numete editarea receptorului. n acest fel, un limfocit B autoreactiv, prin
sinteza unui alt lan uor, poate s exprime n final, un BCR care nu mai recunoate
antigene self i, n consecin, nu mai trebuie s fie ndeprtat din lineaj prin apoptoz.
Dac editarea receptorului nu este eficient, celula va muri.

Fig. 60. Etape de dezvoltare a limfocitelor B

Limfocitele B, care nu recunosc structuri self i scap procesului de selecie


negativ, vor trece n urmtorul stadiu de difereniere, caracterizat de co-expresia IgD

105

alturi de IgM, stadiu numit B matur. IgM i IgD de pe membrana unei celule B au
aceeai specificitate antigenic, adic recunosc i interacioneaz cu acelai antigen.
Ca i n cazul limfocitelor T care pot fi mprite n dou populaii caracterizate de
expresia TCR 1 i, respectiv, TCR 2, limfocitele B pot fi de asemenea mprite n dou
populaii. Cele mai multe aparin populaiei numite B-2 i sunt majoritare (cele la care neam referit pn acum), dar au fost descrise i limfocitele B-1, o populaie nu foarte
numeroas de limfocite B, dar care prezint o serie de particulariti.
Apar n ontogenie n timpul vieii fetale, naintea limfocitelor B-2 i exprim o
molecul, CD5, marker uzual pentru lineajul T.
Receptorii pentru antigen ai acestui tip de limfocite B sunt n special de tip IgM
(puin sau deloc IgD) i prezint polispecificitate, putnd interaciona cu afiniti sczute
cu multe antigene diferite, avnd preferin n special pentru antigene self, antigene
comune bacteriene, imunoglobuline. Comparativ cu limfocitele B-2, celulele B-1 par s fie
mai frecvent implicate n rspunsurile fa de antigene de natur glucidic, iar receptorii lor
sufer n foarte mic msur fenomenele de comutare de clas sau maturaie de afinitate.
Aceste celule au fost identificate n ganglionii limfatici i splin n numr extrem de
redus, dar predomin n cavitile peritoneal i pleural.
Multe din cazurile de leucemie limfocitar cronic B i au originea n limfocitele
B-1.
Odat ce i-au completat maturarea, ambele tipuri celulare, limfocitele T i
limfocitele B ptrund n circulaia sanguin, de unde vor migra n organele limfoide
secundare.

106

Organe limfoide secundare


Patogenii pot ptrunde n organism pe multe ci i pot induce infecii n multe
situsuri diferite. Cei mai muli ageni infecioi ptrund n organism prin piele sau pe la
nivelul epiteliului tractului intestinal, al celui uro-genital sau al celui respirator.
Pentru o recunoatere optim a antigenului i pentru declanarea unui rspuns imun
eficient, majoritatea limfocitelor, a fagocitelor i a celorlalte celule accesorii se gsete
localizat i mai mult sau mai puin bine organizat n esuturi sau chiar organe bine
definite anatomic, la nivelul crora se produce i transportul i concentrarea antigenelor,
ceea ce faciliteaz contactul dintre ele i limfocitele specifice. Acestea sunt organele
limfoide secundare sau periferice, reprezentate de ganglionii limfatici, splina, esutul
limfoid asociat mucoaselor (MALT), sistemul imun cutanat (SALT). De asemenea, n
esutul conjunctiv i n toate organele, cu excepia sistemului nervos central, exist
agregate de limfocite, mai puin bine delimitate i caracterizate.
Sistemul limfatic. Celulele organismului sunt scldate permanent ntr-un lichid
interstiial bogat n nutrieni, care este de fapt plasm extravazat din torentul circulator.
90% din acest fluid se rentoarce n circulaia sanguin prin intermediul venulelor, n timp
ce 10% circul cu vitez redus printre componentele tisulare i poate ptrunde ntr-o reea
de vase subiri, numite capilare limfatice, situsuri unde este cunoscut sub numele de limf.
Celulele endoteliale care tapeteaz pereii capilarelor limfatice creaz pori ce permit
ptrunderea n vase, odat cu limfa, a leucocitelor, a bacteriilor sau a unor macromolecule
cu dimensiuni mari. Limfa este colectat n vase cu diametru ce crete progresiv i care, n
final, sunt conectate la dou trunchiuri limfatice mari, numite ductul limfatic drept i
ductul limfatic stng sau ductul toracic. Acest ntreg sistem de vase i ducte ce colecteaz
i dreneaz limfa de la nivelul ntregului organism este cunoscut sub numele de sistem
limfatic. Sistemul este conectat la circulaia sanguin datorit faptului c ductele toracice
dreneaz limfa n venele subclaviculare.
Ganglionii limfatici sunt structuri limfoide bine organizate, amplasate pe traseul
vaselor limfatice din ntregul organism, care colecteaz fluidul extracelular din esuturi i l
returneaz n snge.
Acest lichid se numete limf, iar vasele prin care circul se numesc vase
limfatice. Vasele limfatice aferente, care dreneaz fluidele tisulare, transport, de
asemenea, i antigene, majoritatea legate de celule accesorii, n ganglionii regionali. n

107

acest fel, sistemul limfatic reprezint un mecanism eficient de colectare a antigenelor, iar
ganglionii limfatici, situai pe traseul vaselor limfatice, scaneaz limfa pentru
identificarea antigenelor. Ganglionul limfatic este nconjurat de o capsul fibroas i este
organizat ntr-o arie cortical, spre exterior, i o arie medular. La rndul su, cortexul
este divizat ntr-o regiune numit cortexul superficial i una numit cortexul profund sau
paracortex (fig. 61).
Cortexul superficial, mai este numit zona B-dependent i conine majoritatea
limfocitelor B, organizate n foliculi limfatici, dar i alte tipuri celulare, dintre care
amintim celulele foliculare dendritice (FDC), cu rol n activarea celulelor B i selecia
acelora cu receptori de mare afinitate. n cursul dezvoltrii rspunsului imun, unii foliculi
prezint o zon central n care au loc proliferri intense ale limfocitelor B, numit centru
germinal. Aceti foliculi se numesc secundari, spre deosebire de foliculii fr centru
germinal, numii primari. Foliculii primari conin n special limfocite B mature naive
(limfocite B mature, dar care nu au venit niciodat n contact cu antigenul pentru care
exprim receptor), nestimulate antigenic. Centrii germinali se formeaz n urma stimulrii
antigenice a limfocitelor B i sunt zone de proliferare celular intens, de selecie a
plasmocitelor ce secret anticorpi de mare afinitate i de generare a limfocitelor B de
memorie.

Fig. 61. Ganglion limfatic - structur

108

Aria paracortical, numit i zona T-dependent, este populat n special de


limfocite T i de celule dendritice (DC). Majoritatea limfocitelor T sunt Ly T CD4+,
limfocitele T CD8+ fiind prezente n numr relativ redus. Limfocitele T naive ptrund n
ganglion fie prin limfaticele aferente, ce se deschid n sinusul subcapsular, fie pe la nivelul
unor venule tapetate cu celule endoteliale cuboidale, numite venule cu endoteliu nalt
(HEV-high endothelial venules). Celulele dendritice funcioneaz ca APC-uri, prelund
antigene proteice i prezentndu-le limfocitelor T CD4+, ce se vor activa.
n medular, se gsesc plasmocite, macrofage i celule dendritice, organizate sub
form de cordoane printre sinusoidele limfatice i vasculare. Dei limfocitele se gsesc n
apropiata vecintate a altor tipuri celulare, ele nu formeaz jonciuni intercelulare cu
acestea, meninndu-i capacitatea de a migra i recircula ntre limf, snge i esuturi,
fenomen numit trafic limfocitar.
Splina este un organ de aproximativ 150 de grame, situat n hipocondrul stng,
specializat n colectarea antigenelor din circulaia sanguin.

Fig. 62. PALS (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Artera splenic, ce asigur aportul sanguin al splinei, ptrunde n organ la nivelul


hilului i se divide n ramuri din ce n ce mai mici. La nivelul arteriolelor, esutul limfoid
se dispune ca nite manoane n jurul acestor vase, structuri numite teci limfoide
periarteriolare (PALS-periarteriolar lymphoid sheaths), care conin limfocite T i B,
dispuse n arii oarecum separate (fig. 62). n apropierea arteriolei se dispun limfocitele T,
majoritatea fiind Ly T CD4+(2/3), iar n jurul ariei T sunt dispuse limfocitele B,
organizate, ca i n ganglioni, n foliculi limfatici primari sau secundari, cu centru

109

germinal. Celulele foliculare dendritice (FDC) i macrofagele fagocitice sunt i ele


prezente n foliculii primari i n centrii germinali.
Tecile limfoide periarteriolare sunt nconjurate de o zon, numit marginal,
populat n special de macrofage, capabile s funcioneze ca APC-uri. esutul limfatic
splenic formeaz pulpa alb, ce se gsete rspndit n pulpa roie. Aceasta din urm
formeaz majoritatea esutului splenic, conine numeroase tipuri celulare (eritrocite,
trombocite, macrofage, granulocite, limfocite, plasmocite) i reprezint, pe de o parte, un
rezervor important de eritrocite, trombocite i granulocite i, pe de alt parte, sediul de
distrugere a eritrocitelor i a trombocitelor senescente.
Limfocitele i antigenele ptrund n splin prin sinusoidele vasculare, splina
neavnd circulaie limfatic i nici venule cu endoteliu nalt (HEV). Activarea limfocitelor
B se produce iniial n zona marginal, dup care Ly B activate migreaz la nivelul
foliculilor, unde vor forma centrul germinal.
Tesutul limfoid asociat mucoaselor (MALT) este situat la nivelul mucoaselor
tracturilor respirator superior (NALT nasopharynx-associated lymphoid tissue) i
inferior (BALT bronchial-associated lymphoid tissue), gastro-intestinal (GALTgutassociated lymphoid tissues) i uro-genital, fiind format din agregate de limfocite i celule
accesorii. GALT include amigdalele (inelul lui Waldayer), apendicele i plcile Peyer de
la nivelul intestinului subire.

Fig. 63. Celul M (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Plcile Peyer sunt cele mai bine organizate, limfocitele B formeaz foliculi, iar
limfocitele T ocup ariile dintre acestea. Colectarea antigenelor de la nivelul epiteliului
intestinal este realizat de nite celule epiteliale specializate, numite celule M (fig. 63).

110

Sistemul imun cutanat (SALT) cuprinde limfocitele i celulele accesorii de la


nivelul dermului i al epidermului (fig. 64).
Keratinocitele sunt celule epiteliale ce formeaz epidermul. Ele sunt capabile s
sintetizeze citokine pro-inflamatorii, pentru a induce o reacie inflamatorie local i, n
anumite situaii, pot exprima molecule MHC de clas II, funcionnd ca APC-uri. Printre
celulele epiteliale ale epidermului exist un tip de celule dendritice, numite celule
Langerhans, capabile s preia antigene, s le internalizeze i s le transporte n ganglionii
limfatici regionali, prezentndu-le Ly T CD4+. Epidermul conine i limfocite, dintre care
multe sunt Ly T CD8+ i exprim TCR, cu o diversitate limitat, probabil datorit
faptului c nu ntlnesc o varietate foarte mare de patogeni ce au capacitatea s penetreze
pielea. n derm exist multe macrofage, Ly T CD4+ i CD8+, multe dintre aceste limfocite
fiind celule activate sau de memorie.

Fig. 64. SALT (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Dei diferite n aparen, organele i esuturile limfoide secundare prezint n


comun aceeai arhitectur de baz de organizare i funcioneaz n scopul captrii i
colectrii antigenelor de la nivelul focarelor de infecie i prezentrii lor limfocitelor ce
circul continuu la acest nivel, ceea ce are drept rezultat montarea de rspunsuri imune
specifice.

111

Traficul limfocitar
Dup maturarea n organele limfoide primare, limfocitele T i B migreaz n
periferie ca limfocite naive. Cele mai multe dintre limfocitele B naive i limfocitele B
efector (plasmocite) rmn, de obicei, cantonate n organele limfoide secundare sau n
mduva hematopoietic. Avnd n vedere c plasmocitele secret anticorpi care acioneaz
la distan, nu este necesar migrarea lor n situsurile inflamatorii.
n schimb, limfocitele T, att cele naive, ct i limfocitele T efector i T-urile de
memorie circul continuu i intens n absena inflamaiei, spre deosebire de celelalte
leucocite care pot extravaza i pot migra n situsurile inflamatorii. Recircularea
limfocitelor, fenomen numit trafic limfocitar, presupune migrarea continu a limfocitelor
ntre snge, limf i organele limfoide secundare. Acest fenomen reprezint o strategie care
faciliteaz ntlnirea dintre limfocite i antigenele pentru care acestea exprim receptori
specifici. n felul acesta se asigur prezena limfocitului potrivit, la locul potrivit, n
momentul potrivit pentru a ntlni antigenul potrivit.
Limfocitele T pot intra n organele i esuturile limfoide secundare fie din circulaia
limfatic prin vasele limfatice aferente, fie direct din circulaia sanguin, pe la nivelul unor
venule postcapilare tapetate cu un endoteliu cuboidal, motiv pentru care se numesc venule
cu endoteliu nalt (HEV high endothelial venules) (excepie face splina, care nu are nici
circulaie limfatic, nici HEV-uri i unde, limfocitele ptrund prin artera splenic). Aceste
celule endoteliale prezint o serie de caracteristici particulare, de exemplu, exprim
constitutiv nivele crescute de molecule de adeziune ce faciliteaz extravazarea limfocitelor
(extravazare nseamn ieirea celulelor din torentul circulator i ptrunderea lor n
esuturi).
Multe dintre limfocitele care ptrund ntr-un ganglion nu se ntlnesc cu antigenul
specific i vor prsi ganglionul prin vasul limfatic eferent. Din circulaia limfatic,
limfocitele T ajung n cea sanguin prin ductul toracic, dup care sunt recirculate n alte
organe i esuturi limfoide secundare. Rata extrem de crescut de migrare face ca, n
medie, un limfocit s traverseze cel puin o dat pe zi fiecare ganglion din organism.
Limfocitele care ntlnesc antigenul specific vor interaciona cu acesta i se vor
activa (vezi Activarea limfocitelor). Anticorpii generai de plasmocitele ce se difereniaz
din limfocitele B activate difuzeaz prin medulara ganglionului i ies din ganglion via

112

limfaticul eferent, intrnd, ulterior i n circulaia sanguin pentru a asigura protecie


sistemic.
n cazul limfocitelor T activate n ganglion, att limfocitele efector ct i cele de
memorie care se genereaz n cursul rspunsului imun, prsesc ganglionul prin limfaticul
eferent i ptrund n circulaia sanguin, de unde vor migra n esuturile periferice
inflamatorii, unde i vor exercita funciile.
Pattern-urile de recirculare sunt diferite pentru diferitele subseturi de limfocite i
acest lucru este corelat cu variate molecule de adeziune exprimate, de pe de o parte, la
nivelul limfocitelor i, pe de alt parte, la nivelul HEV-urilor din variate esuturi.
Moleculele de adeziune exprimate numai pe HEV-urile din anumite situsuri particulare
sunt numite adresine, pentru c ele direcioneaz migrarea limfocitelor ce exprim
molecule complementare ctre aceste situsuri particulare (adrese), iar moleculele
complementare adresinelor sunt numite receptori homing.
Recircularea Ly T naive este diferit de recircularea Ly T efector sau a celor de
memorie. Limfocitele naive, datorit expresiei unor molecule de adeziune din familia
selectinelor, recircul n special prin ganglionii limfatici. Limfocitele T efector i cele de
memorie exprim preponderent molecule de adeziune ai cror liganzi se gsesc exprimai
la nivelul esuturilor periferice, ceea ce explic traficul orientat al acestor celule ctre
esuturile unde reacia inflamatorie a fost iniiat. Celulele endoteliale de la nivelul
venulelor postcapilare din aceste esuturi exprim molecule ce faciliteaz extravazarea
multor tipuri de leucocite importante pentru medierea reaciilor inflamatorii, inclusiv
limfocite T efector i de memorie, motiv pentru care, unii autori consider i numesc
situsurile inflamatorii ca esuturi limfoide teriare.
n situaiile n care reacia inflamatorie acut nu se dovedete eficient n eradicarea
antigenului, ea se cronicizeaz i celulele endoteliale ale venulelor postcapilare din ariile
afectate dobndesc caracteristici comune cu HEV, inducnd un trafic continuu i constant
al limfocitelor T prin aceste situsuri.

113

Activarea limfocitelor T i B
Interaciunea antigenelor cu receptorii antigen-specifici de pe membranele
limfocitelor T i B iniiaz o cascad de evenimente care vor duce la proliferare celular,
expansiune clonal i diferenierea celulelor n efectori i limfocite de memorie.
Consecinele activrii limfocitelor T sau B sunt complet diferite, din punct de vedere al
funciei efectorilor. n cazul limfocitelor B, efectorii sunt reprezentai de plasmocite, celule
responsabile de secreia anticorpilor. Efectorii T CD4+ sunt surse majore de citokine,
substane solubile cu efecte variate asupra diverselor tipuri celulare, n timp ce majoritatea
efectorilor T CD8+ sunt celule citotoxice, funcia lor fiind aceea de a ucide inte celulare.

Activarea limfocitului T
Este iniiat de interaciunea dintre complexul TCR/CD3 de pe membrana
limfocitului T i peptidul provenit din procesarea antigenului, prezentat n asociere cu o
molecul MHC self exprimat pe membrana celulei partener (APC n cazul unui Ly T
CD4+ i celula int n cazul unui limfocit T CD8+). Aceast interaciune i semnalele de
activare ce iau natere implic i alte variate molecule exprimate pe membranele celor
dou celule, numite molecule accesorii. Unele dintre ele faciliteaz un contact mai bun
ntre limfocite i celulele partener, amplificnd afinitatea de legare (de ex. molecule de
adeziune cum sunt perechea LFA-1ICAM-1). Altele intervin n activarea kinazelor
asociate secvenelor ITAM de la nivelul lanurilor CD3 (ex. CD45), altele funcioneaz ca
i co-receptori, intervenind att n recunoaterea moleculelor MHC, ct i n transducerea
semnalului de activare (CD4 i CD8).
Interaciunea dintre TCR/CD3 i Ag/MHC reprezint semnalul principal de
activare, dar el nu este suficient pentru activarea completa a limfocitului T naiv. Este
necesar un semnal co-stimulator, care nu depinde de antigen i este generat n urma
interaciunii dintre molecula CD28, exprimat pe membranele limfocitelor T naive i
activate i moleculele din familia B7 (fig. 65). Au fost descrise dou molecule nrudite,
B7-1 i B7-2. Ele sunt exprimate constitutiv pe membrana celulelor dendritice i se
exprim pe membranele macrofagelor activate i a limfocitelor B activate, motiv pentru
care aceste trei tipuri celulare sunt considerate APC-uri profesioniste. Semnalul costimulator intervine n stimularea secreiei de IL-2 i n proliferarea limfocitului T activat,

114

sinergiznd efectul interaciunii dintre TCR/CD3 i Ag/MHC, iar absena lui induce
anergie.
Semnalizarea prin CD28 este controlat de aciunea unui reglator negativ, molecula
CTLA-4 (Cytotoxic T Lymphocyte Associated molecule 4), prezent, dup activare, pe
ambele subpopulaii de limfocite T, Th i Tc. CTLA-4 se exprim relativ trziu pe
membran, dup 2-3 zile de la iniierea activrii limfocitului T i intr n competiie cu
molecula CD28 pentru legarea moleculelor B-7. ntruct are o afinitate mai mare, CTLA-4
are abilitatea de a dislocui CD28 din complexele cu B-7 i de a bloca semnalizarea
intracelular necesar meninerii strii de activare. Acest aspect este extrem de important
pentru controlul activrii limfocitelor T odat ce antigenul este ndeprtat i rspunsul
imun nu mai este necesar.

Fig. 65. Semnalele necesare activrii limfocitului T naiv i controlul prin CTLA-4

Recunoaterea antigenului de ctre limfocitul T genereaz rspunsuri biologice cu


rol cheie, att n imunitatea mediat celular, ct i n cea umoral. Primul contact dintre
limfocitul T naiv i antigenul specific va fi urmat de iniierea i dezvoltarea unui rspuns
primar.
La aproximativ 48 de ore de la contactul cu antigenul, limfocitul T intr n ciclul
celular i ncepe s prolifereze. Practic, interaciunea dintre limfocitul T i antigen iniiaz
o cascad de evenimente biochimice intracelulare, ce determin, pe de o parte, intrarea
celulei T resting (Go) n faza G1 i, pe de alt parte, transcripia genei pentru IL-2 i a

115

genei pentru lanul al receptorului pentru IL-2 (sunt gene care se activeaz precoce),
evenimente urmate de sinteza de IL-2 i de expresia pe membrana limfocitului a unui
receptor pentru IL-2 de mare afinitate, format din trei lanuri polipeptidice numite , i
(fig. 66).

Fig. 66. Receptorul pentru IL-2 (IL-2R) de mare afinitate

Semnalul co-stimulator intervine n amplificarea produciei de IL-2, prin


stabilizarea IL-2 mARN. Secreia IL-2 i interaciunea sa autocrin cu receptorii de mare
afinitate permite limfocitului naiv activat s depaeasc faza G1 i s nceap s
prolifereze.

Fig. 67. Activarea limfocitulul T este urmat de expansiune clonal i de generarea celulelor
efector i a limfocitelor de memorie (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

116

Limfocitul activat se va divide de 2-3 ori pe zi, timp de 4-5 zile, fenomen numit
expansiune clonal i va genera o clon numeroas de celule, care se vor diferenia n
celule efector, cea mai mare parte, i celule cu memorie (fig. 67).
n felul acesta se asigur un numr suficient de mare de limfocite specifice
antigenului care a declanat rspunsul imun. Celulele efector i exercit funciile. Dac
limfocitul activat este Ly T CD4+, efectorii generai se numesc helper, funcia lor major
fiind de a secreta citokine. Aceste celule au fost denumite Th0. n funcie de citokinele din
micromediul n care au fost generate, dar i de ali factori, celulele Th0 se vor diferenia
mai departe n efectori de mai multe tipuri (vezi efectorii Th1, Th2). Dac limfocitul T
activat este Ly T CD8+, efectorii se numesc citotoxici i au ca funcie major uciderea
Ag-specific a intelor celulare. O parte dintre celulele T expansionate clonal n urma
stimulrii antigenice se difereniaz n limfocite T de memorie, care par s aiba
capacitatea de a supravieui un timp ndelungat i care, la contactele ulterioare cu acelai
antigen, vor iniia rspunsuri secundare. Procesul diferenierii celulelor dintr-o clon n
efectori sau celule de memorie este dependent att de activarea indus de antigen, ct i de
ali factori, cum sunt citokinele i semnalele induse de moleculele accesorii. Populaia de
celule T de memorie este suficient de numeroas; sunt celule resting (Go) al cror trafic
limfocitar este diferit de cel al celulelor naive i par s fie mai uor i mai rapid de activat,
n sensul c nu mai au nevoie de semnalul co-stimulator, mediat de moleculele CD28/B7.
Unele limfocite T recunosc antigene de alt natur dect proteic, (ex. lipide,
glicolipide), dar aceste antigene nu sunt prezentate n asociere cu moleculele MHC clasice,
ci cu alte structuri membranare, de exemplu molecula CD1.
n general, activarea limfocitelor T este specific i depinde de specificitatea TCR
(activare monoclonal). Exist, ns, structuri capabile s stimuleze clone multiple de
limfocite T (activare policlonal), independent de specificitatea TCR. Aceste structuri se
numesc mitogeni sau activatori policlonali.
Unii mitogeni sunt lectine, structuri de origine vegetal (ex. fitohemaglutinina
PHA sau concanavalina A ConA), care activeaz limfocitele T independent de TCR;
altele, numite superantigene, sunt structuri de natur bacteriena (SAg exogene) sau viral
(SAg endogene), care interacioneaz cu toate limfocitele T CD4+ ce exprim TCR cu o
anumit particular secven V.
Acest tip de antigene nu sunt procesate i prezentate clasic n cupa MHC, ci se
leag pe suprafaa exterioar a moleculelor MHC II i a domeniului V al TCR (fig. 68),

117

mod particular de aciune ce le permite s activeze simultan un numr mare de clone


diferite de Ly T, uneori pn la 5% din ntreaga populaie de Ly T CD4+. Activarea unui
numr foarte mare de limfocite T i generarea de efectori duce la o secreie masiv de
citokine, urmat de instalarea unui oc toxic. Multe SAg sunt exotoxine ale bacteriilor
Gram+: enterotoxine stafilococice, toxina sindromului de oc toxic (TSST-1), exotoxine
streptococice.

Fig. 68. Superantigene

Proprieti ale limfocitelor T efector


Limfocitele T CD4+ efector se numesc limfocite T helper (Ly Th) iar funcia lor
major este de a secreta citokine.
Acestea sunt molecule solubile, grupate n familii, secretate de diverse tipuri
celulare, de obicei local, n cantiti reduse, care acioneaz fie local, n manier autocrin
sau paracrin, fie la distan, n manier endocrin.
Acioneaz asupra unor diverse tipuri celulare prin intermediul receptorilor pentru
citokine i, prin efectele pe care le produc, citokinele regleaz rspunsurile imune celulare,
umorale i reaciile inflamatorii. Ly Th secret citokine care acioneaz asupra multor
tipuri celulare, inclusiv asupra limfocitelor T i B. Din punctul de vedere al pattern-ului
(profilului) de secreie, limfocitele Th au fost mprite n dou subseturi majore, numite
Th1 i Th2. Ambele subseturi secret IL-3 i GM-CSF, n rest profilul citokinic este
complet diferit.

118

Celulele Th1, denumite i pro-inflamatorii, secret IL-2, IFN- i TNF-, citokine


care sunt responsabile de multe funcii mediate celular (de ex. activarea Ly T citotoxice),
dar i de producia de anticorpi de tip IgG, (subclasele capabile s activeze complementul).
Acest subset pare, de asemenea, s intervin n producerea reaciilor inflamatorii exagerate
i a distruciilor tisulare asociate (fig. 69).
Celulele Th2 secret IL-4, IL-5, IL-10, IL-13; stimuleaz activarea i diferenierea
eozinofilelor, ofer ajutor limfocitelor B, promovnd producia de anticorpi din clasele
IgM, IgE i IgG. Este subsetul implicat n reaciile alergice (fig. 69).

Fig. 69. Efectori T helper i pattern-ul lor de secreie (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed.
WH Freeman and Company, 2000)

Diferenele dintre citokinele secretate de cele dou seturi de celule Th determin


funciile biologice diferite ale acestora. IFN- activeaz macrofagele, le poteneaz
activitatea microbicid, le amplific expresia moleculelor MHC II i le stimuleaz secreia
de citokine. La rndul lor, prin secreia de IL-12, macrofagele stimuleaz diferenierea
celulelor Th n efectori de tip Th1. Tot IFN- stimuleaz switch-ul de clas de la IgM la
IgG, anticorpi care, funcionnd ca opsonine, amplific fagocitoza. IFN- i TNF-
mediaz reaciile inflamatorii, inclusiv a celei asociate cu hipersensibilitatea ntrziat. Prin

119

secreia de IL-2 i IFN-, setul Th1 intervine n diferenierea Ly T citotoxice din Ly T


CD8+ activate. Producia acestui pattern citokinic face ca acest subset s rspund la
infeciile virale i la cele cu patogeni intracelulari.
Prin secreia de IL-4 i IL-5, subsetul Th2 induce switch-ul de clas i producia de
IgE i stimuleaz capacitatea eozinofilelor de a ucide parazii, eventual opsonizai cu IgE.
Tot prin intermediul IgE, Th2 este implicat n medierea reaciilor alergice
(hipersensibilitate de tip I).
Numeroase studii au demonstrat c dezvoltarea unui rspuns imun i efectele
acestuia sunt critic influenate de pattern-ul citokinic caracteristic celor dou subseturi.
Profilul Th1 este crescut n rspunsul la patogeni intracelulari (imunitate mediat celular),
n timp ce profilul Th2 este dominant n infecii cu helmini i n alergii, fiind responsabil
de dezvoltarea imunitii umorale. Aceste moduri diferite de difereniere a limfocitelor T
CD4+ naive se datoreaz condiiilor din micromediul de stimulare a limfocitelor. Dintre
factorii cei mai importani implicai amintim:
a) citokinele produse devreme n cursul rspunsului imun. De exemplu, IFN- i IL-12
induc dominant efectori Th1, n timp ce IL-4 este esenial pentru generarea efectorilor Th2
(surse precoce de IL-4 sunt mastocitele, eozinofilele, bazofilele i NKT-urile).
b) natura APC-urilor; de exemplu, macrofagele i celulele dendritice, surse de IL-12,
induc generarea de efectori de tip Th1.
Mai mult, odat ce un subset de T-uri funcionale a fost generat, el va inhiba
apariia sau funcionalitatea celuilalt. De exemplu, IFN-, secretat de Th1, inhib generarea
Th2, n timp ce IL-4 i IL-10, produse de Th2, inhib generarea de efectori Th1.
Relativ recent au fost identificate celule efector care secret citokinele proinflamatorii IL-17 i IL-6; ele au fost numite Th17, datorit faptului c secreia acestei
citokine este restrictat acestui subset. La om, niveluri crescute de IL-17 au fost
identificate n sngele, n fluidul cerebro-spinal i n esuturile pacienilor cu boli
autoimune de tipul sclerozei multiple, artritei reumatoide sau bolii inflamatorii a tubului
digestiv (inflammatory bowel disease).
Limfocitele T CD8+ efector se numesc Ly T citotoxice (Ly Tc, CTL), iar funcia
lor major este uciderea celulelor infectate de microorganisme, virusuri i unele bacterii.
Mecanismul prin care CTL ucide este inducerea apoptozei la nivelul intei, iar cile
prin care activeaz apoptoza sunt:
- secreia de perforine i granzime; mecanismul este asemntor celui utilizat de celulele
NK, cu diferena c uciderea pe care o realizeaz T-ul citotoxic este specific intei (fig.

120

70). Realizarea conjugatului efector-int este mediat de recunoaterea de ctre Ly T


citotoxic prin intermediul TCR a complexului Ag/MHC I.
- apoptoza indus printr-o serie de sisteme moleculare membranare, dintre care cel mai
cunoscut este sistemul Fas/FasL. Interaciunea dintre molecula FasL, exprimat pe
membrana CTL i ligandul specific (Fas) de pe int, declaneaz o cascad de evenimente
intracelulare, care au drept consecin activarea, n nucleul intei, a unei endonucleaze,
responsabil de fragmentarea acizilor nucleici. Distrugerea materialului genetic, este
urmat de fragmentarea nucleului i apoi a ntregii celule int, cu formarea de corpi
apoptotici, ce vor fi ndeprtai prin fagocitoz (fig. 70).

Fig. 70. Mecanisme de ucidere extracelular (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

Funciile subpopulaiilor de limfocite T nu sunt exclusive. Exist limfocite T CD4+


care sunt citotoxice i ucid, dup cum limfocite T CD8+ ce secret citokine. De altfel, o
surs foarte important de IFN- este T-ul CD8+. Dei dificil de definit cu precizie, se pare
c exist celule T CD8+ ce intervin n reglarea rspunsului imun (vezi Reglarea RI).

121

Activarea limfocitului B
Dup exportarea lor din mduva hematogen, Ly B mature i naive populeaz
organele i esuturile limfoide secundare, unde pot avea ansa s ntlneasc antigenul
pentru care exprim receptori specifici. n absena activrii Ag-specifice, viaa Ly B naive
n periferie este scurt, ele murind prin apoptoz dup cteva sptmni.
Activarea Ag-specific a unui Ly B naiv necesit trei semnale de activare. Primul este
generat n urma interaciunii dintre receptorii pentru antigen i Ag. Majoritatea antigenelor
sunt multivalente i angajeaz mai multe molecule BCR (B cell receptor), legndu-le
ncruciat (fig. 71).

Fig. 71. Primul semnal de activare a Ly B

Receptorii pentru antigen sunt reprezentai de complexe moleculare formate din


imunoglobuline de membran (din clasele IgM i IgD, dar cu aceeai specificitate), la care
se asociaz cte doi heterodimeri Ig-/Ig-, membri ai superfamiliei imunoglobulinelor,
care funcioneaz n aceeai manier ca i complexul CD3 de la nivelul LyT (intervin n
transducerea semnalului de activare, cozile lor intracitoplasmatice prezentnd motivele de
activare ITAM i fiind asociate cu kinaze). Acest prim semnal declaneaz activarea unei
cascade enzimatice intracelulare ce are drept urmare activarea unor factori nucleari de
transcripie, responsabili de inducerea de modificri n expresia unor gene i de intrarea
celulei n ciclul celular, din G0 n G1. Amplificarea acestui semnal este esenial i este
realizat de un complex molecular, ce funcioneaz ca i co-receptor al BCR, format din
trei proteine: CD19, CD21 (CR2) i CD81 (TAPA-1).

122

Cel de-al doilea semnal de activare depinde de natura Ag.


Activarea Ly B se poate realiza pe dou ci diferite, n funcie de natura
antigenelor. Astfel, activarea Ly B de ctre majoritatea antigenelor proteice este posibil
numai n prezena semnalelor provenite de la limfocitele T helper, motiv pentru care aceste
antigene se numesc antigene T-dependente (nu pot induce singure activarea Ly B, ci
numai n prezena semnalelor furnizate de ctre T-urile helper antigen-specifice).
Rspunsul Ly B la acest tip de antigene necesit contactul direct cu Ly Th, nu simpla
expunere la citokinele pe care acesta le secret.
Recunoaterea Ag-ului de ctre limfocitul B cu receptor specific este urmat de
legarea acestuia de imunoglobulinele de membran (mIg). Complexele sunt internalizate,
procesate i peptidele antigenice generate sunt cuplate cu molecule MHC II i expuse pe
membrana Ly B. Interaciunea dintre BCR i Ag amplific expresia membranar a unor
molecule importante cum sunt MHC II i determin, de asemenea, meninerea expresiei
membranare a moleculei CD40.
n paralel, o serie de alte tipuri de APC-uri, cum sunt celulele dendritice prezint, n
paracortex, antigenul limfocitelor T CD4+ specifice, care se vor activa, vor prolifera i se
vor diferenia n celule T helper ce vor exprima CD40L. n acest moment, cele dou celule
partener, necesare formrii conjugatului T-B sunt activate, dar sunt localizate n zone
diferite ale ganglionului. Se pare c limfocitul B activat de antigen este atras i migreaz
spre paracortex datorit unor factori chemotactici.

Fig. 72. Semnale necesare activrii limfocitului B de ctre antigene T-dependente

123

La marginea foliculului primar, limfocitul B activat de Ag ntlnete limfocitul T


helper specific pentru acelai antigen i formarea conjugatului va determina generarea
semnalelor 2 i 3 de activare pentru limfocitul B (fig. 72).
Interaciunea dintre CD40L, exprimat pe T-ul helper, i molecula CD40 de pe
membrana Ly B furnizeaz cel de-al doilea semnal de activare necesar Ly B s
depeasc faza G1 i s nceap s prolifereze, iar citokinele eliberate de Ly T pentru care
Ly B exprim receptori (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10 IFN-, TGF-, etc) vor influena, pe de o
parte, proliferarea i, pe de alt parte, diferenierea Ly B proliferante n celule efector
(plasmocite) i Ly B de memorie (al treilea semnal).

Rspunsul imun primar i RI secundar


Dinamica i caracteristicile rspunsului imun umoral, manifestat prin secreie de
anticorpi, sunt extrem de diferite n funcie de natura limfocitelor B ce se activeaz.
Activarea unui Ly B naiv duce la dezvoltarea RI primar, iar activarea unui Ly B de
memorie este urmat de dezvoltarea RI secundar.
n general, RI imun primar are o perioad de laten mai mare (aproximativ 7-10
zile), necesar activrii Ly B naive specifice, expansiunii clonale a acestora i diferenierii
celulelor proliferante n plasmocite i celule B de memorie. Aceast faz este urmat de
creterea nivelului seric al anticorpilor pn la atingerea unui maxim (peak) ce se menine
o perioad variabil de timp (platou), dup care intr n declin (fig. 73).

Fig. 73. RI primar i RI secundar

124

n cursul RI primar, iniial, majoritatea anticorpilor secretai aparin clasei IgM,


dup care pot apare i anticorpi din alte clase, cum sunt IgG, IgA sau IgE, datorit
fenomenului de comutare de clas (switch de clas). n funcie de persistena Ag-nului, RI
primar poate dura de la cteva zile la cteva sptmni. Limfocitele B de memorie generate
n cursul RI primar redevin celule resting (G0), re-exprim receptori BCR cu alte izotipuri,
mai eficiente (IgG, IgA, IgE alturi de cantiti mici de IgM), iar durata lor de via este
variabil, unele dintre ele putnd persista, se pare, perioade foarte lungi. Capacitatea de a
dezvolta un RI secundar depinde de existena acestei populaii de limfocite B de memorie,
ca i de prezena limfocitelor T de memorie. RI secundar se dezvolt n urma activrii
specifice a limfocitelor B de memorie, are o perioad de laten mai scurt, comparativ cu
a RI primar, secreia de anticorpi atinge o magnitudine mai mare i dureaz mult mai mult.
Anticorpii secretai au o afinitate pentru Ag mai mare (maturaia de afinitate) i
majoritatea aparin altor izotipuri dect IgM (comutare de clas).
Situsurile in vivo n care se genereaz rspunsul imun umoral sunt organele i
esuturile limfoide secundare. n general, antigenele ptrund n aceste situsuri singure sau
asociate cu celule capabile s le transporte (celule Langerhans, celule dendritice, etc). ntrun ganglion limfatic antigenele sunt antrenate de limf, colectate i concentrate.
Limfocitele ptrund n ganglion fie prin limfaticele aferente, fie direct n paracortex pe la
nivelul HEV (high endothelial venules) (fig. 74).

Fig. 74. Diapedeza limfocitelor (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Activarea iniial a limfocitelor T i B specifice unui acelai antigen se produce, se


pare, n paracortex, regiune populat de Ly T, macrofage, DCs, celule ce funcioneaz ca
APC-uri profesioniste. Dup 1-2 zile de la confruntarea cu Ag, acesta este prezentat de

125

APC-uri Ly T CD4+ naive, care se vor activa, vor expansiona clonal i vor genera efectori,
numii Ly Th. n paralel, Ly B naive migreaz din cortexul superficial (zona Bdependent) n paracortex (marginea folicului primar) unde interacioneaz specific cu Ag,
l internalizeaz, l proceseaz i-l expun pe membran ca peptide antigenice asociate cu
molecule MHC II. Complexele Ag/MHC II sunt recunoscute de Ly Th generate deja, iar
formarea conjugatului T-B ofer Limfocitelor B semnalele necesare proliferrii
(interaciunea CD40L-CD40, citokine). Astfel, n aceste mici zone de proliferare din
paracortex se va diferenia un prim val de plasmocite, numite plasmocite cu via scurt,
care vor migra n medular i care vor secreta IgM. Anticorpii secretai ajung n circulaie
i vor interaciona cu antigenul formnd complexe Ag-Ac.
Dup cteva zile de la aceast rund de proliferare, se crede c un numr redus de
Ly B activate i cteva Ly Th migreaz n zona B-dependent, la nivelul foliculilor
primari. Celulele foliculare dendritice (FDC) de la acest nivel, nu exprim molecule MHC
II i nici nu prezint antigene limfocitelor T CD4+, n schimb, au prelungiri citoplasmatice
extrem de lungi la nivelul crora exprim receptori Fc i receptori pentru unele
componente ale complementului, prin intermediul crora leag complexe Ag-Ac, formate
din primii anticorpi secretai n zona T-dependent sau antigene opsonizate cu factori ai
complementului.
Reinerea acestor complexe pe prelungirile citoplasmatice ale FDC-urilor poate
dura foarte mult, uneori chiar luni de zile. De la nivelul acestor celule se elibereaz mici
particule formate din membrana acoperit de complexe antigen-anticorp, numite icozomi,
care vor fi legate de Ly B cu BCR specific i endocitate. Antigenele din icozomi, procesate
i expuse ca peptide n cupe MHC II vor fi recunoscute de Ly Th specifice n urma
formrii conjugatului T-B, ceea ce are drept rezultat activarea i proliferarea ambelor
celule din conjugat.
Aceast a doua rund de proliferare are loc n zona B-dependent, este responsabil
de formarea centrilor germinali (apar dup 7-10 zile de la expunerea iniial la antigen),
ceea ce transform foliculii primari n foliculi secundari i necesit interaciunea dintre
moleculele CD40 (Ly B) i CD40L (Ly T). Totodat, aceast interaciune, la care se
adaug i citokinele secretate de Ly T are ca efect comutarea de clas a Igs (switch de
clas), fenomen ce reprezint schimbarea izotipului imunoglobulinelor de la IgM la IgG
sau/i IgA sau/i IgE. Celulele B proliferante se numesc centroblaste, au dimensiuni
crescute, nu exprim imunoglobuline pe membran, iar zona unde sunt generate se
numete zona ntunecat (dark zone) (fig. 75). Dup ce se opresc din proliferare, celulele

126

devin centrocite, sunt mici, non-divizibile i re-exprim imunoglobuline membranare (cu


alte izotipuri dect Ly B activat iniial - switch de clas).

Fig. 75. Evenimente n centrul germinal (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman
and Company, 2000)

Totodat, n timpul rundelor repetate de proliferare ale Ly B din zona ntunecat, la


nivelul segmentelor genice ce codeaz domeniile variabile ale imunoglobulinelor se produc
extrem de frecvent mutaii punctiforme ntmpltoare, proces ce are drept consecin
faptul c imunoglobulinele pe care centrocitele le re-exprim vor avea afiniti diferite
pentru antigen.
Pe msur ce numrul lor crete, centrocitele migreaz din zona ntunecat spre o
regiune a centrului germinal bogat n FDC-uri, numit zona clar (light zone). Aici, ele

127

iau contact cu antigenele fixate i expuse pe prelungirile citoplasmatice ale FDC-urilor,


fiind selectate n funcie de abilitatea receptorilor lor de a interaciona cu aceste antigene.
Un centrocit ale crui imunoglobuline membranare leag eficient antigenul va primi un
semnal esenial pentru supravieuire. Acele centrocite ce nu pot lega antigenul, nu primesc
acest semnal, mor prin apoptoz i sunt fagocitate de un tip special de macrofage,
macrofage cu corpi tingibili. Mai mult, la nivelul FDC-urilor, cantitatea de antigen fiind
limitat, centrocitele trebuie s competiioneze, astfel nct numai acelea cu receptori de
mare afinitate vor lega eficient antigenul. Acest eveniment este crucial n selecia acelor
centrocite cu receptori de mare afinitate pentru Ag i st la baza procesului numit
maturaie de afinitate.
Totui, se pare c semnalul necesar supravieuirii, primit de centrocite, nu este
suficient. Sunt necesare, de asemenea, semnale provenite de la Ly Th, n urma crora
centrocitele selectate prolifereaz intens i se vor diferenia n plasmablati i celule B de
memorie.
Plasmablatii migreaz din foliculii secundari n medulara ganglionului, se
matureaz n plasmocite i pot rmne aici sau pot migra n mduva osoas sau pulpa roie
a splinei. Aceti efectori sunt plasmocite cu via lung, care secret anticorpi de mare
afinitate, perioade ndelungate (luni de zile), n absena re-expunerii la antigenul iniial.
Limfocitele B de memorie, generate i ele n zona clar a centrului germinal din
centrocitele selectate, seamn cu celulele naive n ceea ce privete dimensiunea i
morfologia, dar se deosebesc de limfocitele naive activate iniial, prin markeri de suprafa
diferii i prin faptul c au o via mult mai lung.
Celulele de memorie generate ntr-un ganglion limfatic pot rmne cantonate la
acest nivel sau pot intra n circulaie, patrulnd de-a lungul sistemului limfatic sau
localizndu-se n esuturile periferice (SALT, MALT) i supraveghindu-le.
Exist, ns, i antigene care prezint capacitatea de a activa singure limfocitele B.
Se numesc antigene T-independente i au fost mprite n dou tipuri.
Antigenele T-independente de tipul 1 (Ag TI-1) induc direct proliferarea
limfocitelor B. n concentraii mari, aceste molecule determin activarea i proliferarea
majoritii limfocitelor B, indiferent de specificitatea receptorului lor pentru antigen,
fenomen ce se numete activare policlonal. Datorit acestei caracteristici, Ag TI-1 mai
sunt numite i mitogeni ai limfocitelor B. La concentraii mai mici, aceste antigene induc
numai activarea limfocitelor B specifice. Acest tip de antigene nu induce maturaie de

128

afinitate, switch de clas i nici memorie imunologic, fenomene care necesit semnale de
la limfocitele T helper. Exemplu de Ag TI-1 este lipopolizaharidul bacterian (LPS),
constituent al multor perei bacterieni.
Antigenele T-independente de tipul 2 (Ag TI-2) prezint epitopi multipli, identici
i repetitivi i au capacitatea de a lega ncruciat (cross-linking) mai multe molecule BCR
de pe membrana limfocitului B, activndu-l (fig. 76). Exemplu de Ag TI-2: polizaharidele
din structura pereilor bacterieni (polizaharidul pneumococic), flagelina (Salmonella).
Rspunsul imun la antigene T-independente const n special n secreia de IgM i nu este
urmat de instalarea memoriei imunologice.

Fig. 76. Ag T independente tip-2

Rspunsul LyB fa de antigenele T-independente furnizeaz o protecie rapid i


specific mpotriva unor patogeni extracelulari care, prezentnd capsule polizaharidice,
rezist ingestiei de ctre fagocite i, n felul acesta, se sustrag i rspunsului specific din
partea LyT. Anticorpii sintetizai de ctre Ly B, chiar n absena semnalelor T, vor
opsoniza aceti patogeni, facilitnd fagocitoza i distrugerea lor.

129

Memoria imunologic
Reprezint capacitatea sistemului imun specific de a rspunde mai rapid i mai
eficient (optimizat) fa de antigene cu care a mai venit n contact. Acest lucru reflect
preexistena unei populaii de limfocite antigen-specifice, expansionat clonal. Persistena
memoriei imunologice timp ndelungat dup o infecie nu poate fi cauzat ntotdeauna de
expunerea repetat la agentul patogen. Exist doua explicaii (ipoteze) pentru persistena
memoriei imunologice:
1. Limfocitele induse de expunerea original la patogen au o via ndelungat i
persist ntr-o stare de repaus pn la urmtorul contact cu antigenul.
2. Limfocitele activate de expunerea original la antigen sunt re-stimulate repetitiv,
chiar n absena unor noi ntlniri cu antigenul. Acest lucru ar fi posibil prin persistena n
fiecare individ a unor mici cantiti de patogen, insuficiente pentru rspndirea infeciei,
dar suficiente pentru stimularea celulelor. n urma acestor stimulri, celulele vor exprima o
serie de molecule anti-apoptotice, necesare supravieuirii.
n cazul limfocitelor B, celulele cu memorie antigen-specifice difer de cele naive,
att cantitativ, ct i calitativ (tabelul 1).
Tabel 1. Prezentarea comparativ a unor proprieti ale limfocitelor B naive i ale celor de
memorie
Proprieti/markeri membranari
Ly B naive
Ly B de memorie
imunoglobuline

IgM, IgD

IgG, IgA, IgE

receptori pt. complement

expresie sczut

expresie crescut

durata de via

n general, cteva zile

pot avea via foarte lung


(luni, ani)

afinitatea BCR

relativ sczut

crescut

molecule de adeziune

ICAM-1 sczut

ICAM-1 crescut

Dup stimularea primar, celulele B, care rspund la un anumit antigen, cresc ca


frecven de aproximativ 10-100 de ori (expansiune clonal), iar plasmocitele ce se
difereniaz produc anticorpi cu afinitate mai mare dect afinitatea receptorilor pentru
antigen ai celulelor B stimulate iniial (specificitatea este aceeai). De altfel, afinitatea
anticorpilor sintetizai continu s creasc pe parcursul rspunsurilor imune secundare i
ulterioare (fenomenul se numete maturaie de afinitate).

130

Fig. 77. RI primar i RI secundar. Secreia de anticorpi

Re-expunerea la antigen la 7-10 zile de la stimularea primar, conduce la apariia


mai rapid a rspunsului imun (perioad de laten de 1-3 zile), o cretere mai rapid a
titrului anticorpilor i o persisten mai ndelungat a sintezei anticorpilor (fig. 77). n
consecin, caracteristicile rspunsului imun secundar sunt: latena mai scurt, titru mai
ridicat al anticorpilor i extinderea duratei intervalului n care se pot detecta anticorpii
produi.
n cursul rspunsului imun primar, secreia de anticorpi este dominat de IgM i
numai spre sfritul acestuia apar i alte izotipuri de imunoglobuline. Celulele B care sunt
generate n cursul rspunsului imun primar realizeaz, sub efectul citokinelor secretate de
Ly T CD4+, un fenomen de comutare de clas (switch de clas), adic i comut izotipul
de la IgM la alte izotipuri mai eficiente, IgG, IgA sau IgE. Dac Ly B naive exprim pe
membran, ca receptori pentru antigen, IgM i IgD, celulele B de memorie exprim
receptori de tip IgG, IgA sau IgE.
Rspunsul imun secundar se caracterizeaz prin producerea de mici cantiti de
IgM i de mari cantiti de IgG, IgA sau IgE. IgM sunt secretate de limfocitele naive care
s-au generat din mduva osoas n rstimp, specifice antigenului i care genereaz, prin
activare, rspuns imun primar.
Caracterizarea limfocitelor T de memorie este mai dificil, pentru c receptorul
pentru antigen al celulelor T nu sufer nici comutare de clas, nici maturaie de afinitate.
Ca i n cazul celulelor B, numrul limfocitelor T, ce reacioneaz specific cu un anumit

131

antigen, crete marcant dup imunizare, persistnd la un nivel semnificativ pentru tot restul
vieii individului.
Diferenele dintre rspunsurile imune T primar i secundar pot fi evideniate prin
fenomenul de rejet al grefei (fig. 78).

Fig. 78. RI primar i secundar T

Grefele de piele ntre animale allogeneice sunt acceptate iniial, dar apoi sunt
rejetate la 11-15 zile de la grefare, interval necesar pentru activarea limfocitelor T i
generarea de efectori specifici. n cazul n care, unui animal care a primit anterior o
allogref pe care a rejetat-o, i se face o nou gref provenit de la acelai donor, cea de-a
doua gref va fi rejetat mult mai rapid (6-8 zile).
De asemenea, au fost identificate i o serie de molecule membranare a cror
expresie poate face distincia ntre limfocitele T naive i cele de memorie. De exemplu,
limfocitele T exprim molecula CD45, implicat n activare, dar izoforma exprimat
depinde de statusul celulei. Astfel, celulele naive exprim izoforma CD45RA, molecul cu
greutate molecular mare, care nu se asociaz TCR, dar care intervine n semnalizarea
necesar activrii celulei, n timp ce limfocitele T de memorie exprim izoforma
CD45RO, cu o greutate molecular mai mic, ce se exprim asociat TCR-ului i
faciliteaz activarea mai rapid a celulei.
O serie de molecule ce funcioneaz ca receptori homing caracterizeaz preferenial
o anumit categorie de limfocite T, ceea ce explic de ce exist diferene ntre modalitile
n care fac trafic limfocitar limfocitele T naive, fa de cele de memorie. Limfocitele naive
sunt localizate la nivelul organelor limfoide secundare i recircul continuu la acest nivel,
n timp ce limfocitele de memorie sunt localizate i recircul, n special, n esuturile

132

periferice ale organismului ce constituie pori de intrare pentru patogeni, anticipnd, n


acest fel, un nou posibil atac.
De asemenea, limfocitele T de memorie i modific (intensific) expresia si
afinitatea unor molecule de adeziune, ceea ce le va permite o mai bun interaciune cu
celulele prezentatoare de antigen. Astfel, spre deosebire de limfocitele T naive, care
interacioneaz aproape exclusiv cu celulele dendritice (DCs dendritic cells)
prezentatoare de antigen, celulele de memorie interacioneaz cu antigene prezentate de
diverse tipuri de APC-uri, celule dendritice, limfocite B, macrofage, iar activarea lor se
poate produce la concentraii foarte sczute de antigen i, de cele mai multe ori, nu necesit
co-stimulare sau aceasta este minim. Toate aceste modificri mresc sensibilitatea
limfocitelor T de memorie fa de stimularea antigenic. De exemplu, activarea
limfocitelor CD8+ (citotoxice) naive necesit semnale de la limfocitele T helper specifice
pentru acelai antigen, n timp ce limfocitele Tc de memorie nu mai au nevoie de acest
ajutor pentru a se activa. De asemenea, odat activate, limfocitele T de memorie
prolifereaz mult mai rapid i pentru o mai lung perioad de timp, comparativ cu celulele
naive.
Cele mai multe limfocite T de memorie persist luni de zile i, frecvent, ani.
Lungimea vieii unei clone de limfocite T de memorie variaz n funcie de natura
antigenului care a iniiat rspunsul imun primar. Aceast variabilitate este demonstrat de
schemele de imunizare a vaccinurilor. Pentru unele afeciuni (poliomielita, de exemplu), o
singur administrare a antigenului confer protecie fa de aceast boal de-a lungul
ntregii viei. n contrast, pentru alte afeciuni de natur infecioas (de exemplu, tetanos),
este necesar administrarea de doze de vaccin la fiecare civa ani, pentru protecie.

133

Antigene T-independente. Sistemul ABO


Un sistem de grupe sanguine reprezint o manier de clasificare a sngelui n
funcie de prezena sau absena unor structuri antigenice care se exprim pe membrana
eritrocitelor. Aceste antigene sunt motenite; din punct de vedere chimic, ele pot fi
proteine, carbohidrai, glicoproteine sau glicolipide i se pot exprima i la nivelul altor
tipuri celulare din variate esuturi. Societatea Internaional de Transfuzii Sanguine
recunoate n prezent peste 30 de sisteme umane de grupe sanguine.
Sistemul ABO uman a fost descris pe baza unor antigene exprimate pe membrana
hematiilor i a unor anticorpi din ser. Ulterior, el a fost evideniat i la unele primate, ca
gorile i cimpanzei. Primele trei grupe, A, B i O au fost identificate i descrise de Karl
Landsteiner n 1900-1901, iar cea de-a patra grupa, AB, de Decastrello i Sturli n 1902
(tabelul 2).
Tabel 2. Sistemul ABO grupe sanguine

Ag (A/B) exprimat pe hematii


Ac (anti-A/anti-B) n ser

Grup O

Grup A

Grup B

Grup AB

niciunul

A i B

anti-A
i
anti-B

anti-B

anti-A

nici una dintre


specificiti

Sunt descrise dou antigene, numite A i B (se mai utilizeaz denumirea de


aglutinogene A i B), molecule de natur glucidic i dou tipuri de anticorpi (aglutinine
sau isohemaglutinine), cu specificiti pentru aceste antigene: anticorpi anti-A i anticorpi
anti-B. In funcie de prezena sau absena antigenelor i, respectiv, a anticorpilor, subiecii
umani au fost clasificai n patru grupe sau fenotipuri (tabel 2). Astfel:
Indivizii de grup sanguin O (I) se caracterizeaz prin absena antigenelor A i B de
pe hematii i prin prezena ambelor tipuri de anticorpi n ser.
Indivizii de grup A (II) prezint pe membrana hematiilor lor antigenul A, iar n ser,
anticorpi anti-B.
Indivizii de grup sanguin B (III) prezint antigenul B pe hematii i anticorpi anti-A
n ser.
Indivizii de grup AB (IV) au pe hematii ambele antigene, A i B, iar n ser, nu au
nici una dintre cele dou tipuri de aglutinine.

134

O transfuzie de snge incompatibil n sistemul ABO duce imediat la aglutinarea i


distrugerea hematiilor transfuzate, uneori cu consecine fatale. De exemplu, administrarea
de snge, de la un individ A la un individ B, este urmat rapid de interaciunea dintre
anticorpii anti-A din serul primitorului cu hematiile A+ ale donatorului. Acest fenomen,
care apare imediat dup administrarea sngelui incompatibil, demonstreaz c, n serul
primitorului, anticorpii anti-A exist deja. Acest lucru este valabil pentru toi indivizii
umani din grupele sanguine O, A i B (excepie fac indivizii AB, care nu au aglutinine).
Cum se explic existena acestor anticorpi, cunoscut fiind faptul c sinteza anticorpilor este
indus de contactul cu antigenul specific i se produce la un interval de 10-14 zile de la
primul contact cu acel antigen?
Antigenele A i B sunt glucide cu structur extrem de simpl, foarte rspndite n
natur i, de fapt, anticorpii anti-A i anti-B sunt indui de expunerea natural la antigene
similare prezente n mediul nconjurtor, cum sunt structuri din alimente, antigene virale
sau antigene de la nivelul microorganismelor ce formeaz flora comensal digestiv,
structuri ce prezint epitopi ce s-au dovedit comuni cu cei ai antigenelor A i/sau B
exprimate pe membrana hematiilor umane.
Rspunsul imun fa de acest tip de antigene T-independente este reprezentat de
secreie de anticorpi din clasa IgM, acest tip de antigene neinducnd fenomenul de switch
de clas. Datorit fenomenului de reactivitate ncruciat, anticorpii reacioneaz i cu
antigenele A i B. Aceast expunere natural i continu explic de ce ei sunt sintetizai
continuu, ntreaga via. n mod normal, n urma expunerii la un antigen, sinteza
anticorpilor se menine un interval de timp, dup care, antigenul fiind ndeprtat, producia
de anticorpi nu se mai justific i se oprete treptat, iar anticorpii rmai liberi sunt
metabolizai, dup anumite perioade de timp (de obicei, zile sau sptmni).
Genele implicate n sistemul ABO se gsesc situate pe CRS 9 uman ntr-o regiune
numit locusul ABO, ce conine trei forme alelice majore: A, B i O. Alelele nu codeaz
antigenele sistemului ABO, acestea fiind de natur glucidic, ci nite molecule proteice cu
rol de transferaze, implicate n sinteza antigenelor.
Indivizii de grup O exprim pe membrana hematiilor lor o structur fr proprieti
imunogene, numit substana H. Aceast molecul este o secven glucidic ancorat de
proteine i de ceramide din membrana celular i este format prin niruirea unor
carbohidrai: -D-galactoz, -D-glucozamin, -D-galactoz i -L-fucoz (fig. 79). Se
formeaz prin aciunea unei fucozil-transferaze, codat de o gen situat pe CRS 19
uman, ntr-o regiune numit locusul H.

135

Fig. 79. Antigenele A i B se genereaz prin adugarea la oligozaharidul stem (substana H) a unei
N-acetil galactozamine i, respectiv, a unei galactozamine

La indivizii de grup A, o galactozamin-transferaz, codat de alela A, adaug la


substana H o grupare terminal, N-acetil-galactozamina, formnd antigenul A. La
indivizii de grup B, o galactoz-transferaz, codat de alela B, adaug la substana H o
galactoz, formnd antigenul B (fig. 79). n cazul alelei O, exonul 6 conine o deleie care
se asociaz cu sinteza unei proteine fr activitate enzimatic, care nu mai opereaz asupra
substanei H i aceasta se exprim ca atare pe hematiile celor din grupul O. Din acest
motiv, gena O este considerat gen mut, comparativ cu alelele A i B, considerate
dominante fa de gena O i co-dominante ntre ele (vezi tabel 3).
Tabel 3.

Genotip

Fenotip

AA sau AO

BB sau BO

AB

AB

OO

136

Antigene T-dependente. Sistemul Rh


Antigenele Rh sunt un grup de proteine, codate de mai multe gene, dintre care RhD
pare s fie responsabil n cea mai mare msur de imunogenicitatea complexului, expresia
ei, de fapt, clasificnd indivizii n pozitivi sau negativi. Spre deosebire de sistemul sanguin
ABO, antigenele Rh sunt de natur proteic (antigene T-dependente), iar indivizii nu
prezint n mod spontan anticorpi anti-Rh. Acetia se sintetizeaz numai n urma
contactului dintre antigen i sistemul imun (mai precis, celulele cu receptori specifici) al
unui organism Rh-negativ. Cunoaterea acestui sistem molecular este extrem de important
datorit faptului c incompatibilitatea Rh poate produce o serie de efecte severe, cum sunt
accidentele post-transfuzionale i boala hemolitic a nou-nscutului.
O prim transfuzie de snge cu hematii Rh+ la un individ Rh- este urmat de
imunizarea primitorului. Sistemul imun al acestuia recunoate antigenul RhD ca pe o
structur non-self i limfocitele cu receptori specifici se vor activa, vor prolifera i se vor
diferenia n efectori, pe de o parte, plasmocite responsabile de sinteza anticorpilor anti-Rh
(n special din clasa IgM, ca n orice rspuns primar) i, pe de alt parte, limfocite de
memorie. Anticorpii interacioneaz cu hematiile transfuzate, Rh+ i vor iniia clearance-ul
acestora. Limfocitele de memorie, care au suferit deja fenomenul de switch de clas
persist luni sau chiar ani. Dac, dup un timp, individul Rh-, dar imunizat, primete din
nou hematii Rh+, acestea vor fi recunoscute de celulele cu memorie i anticorpii anti-Rh
sintetizai n cursul rspunsului imun secundar (din clasa IgG), vor interaciona cu
antigenele, ceea ce va duce la liza eritrocitelor transfuzate (dup aproximativ 5-10 zile de
la primirea sngelui incompatibil), fenomen ce se poate asocia cu stare general alterat,
greuri, vrsturi, febr, frison, hemoglobinurie, manifestri clinice ale unui accident posttransfuzional.
Boala hemolitic a nou-nscutului poate afecta copii Rh+, nscui de mame Rh-.
Boala nu se manifest la prima sarcin, dar aceast prim sarcin incompatibil poate fi
responsabil de imunizarea mamei. Acest eveniment poate fi cauzat, mai rar, de mici
cantiti de snge fetal ce ajunge n circulaia matern n cursul sarcinii sau, mai frecvent,
n timpul naterii, cnd desprinderea placentei de peretele uterin se nsoete de o
hemoragie mai important, ce permite unei cantiti crescute de hematii fetale s ajung n
circulaia matern. Hematiile fetale Rh+ vor declana un rspuns imun primar, caracterizat
de sintez de anticorpi specifici i de generarea de limfocite de memorie. O a doua sarcin

137

incompatibil la o mam imunizat este grevat de pericolul ca anticorpii anti-Rh generai


n rspunsul imun secundar, de izotip IgG, s traverseze placenta i s interacioneze cu
hematiile fetale, producnd distrugerea lor i declanarea bolii. Manifestrile clinice sunt
diferite, n funcie de severitatea bolii. Copilul prezint icter, datorit faptului c nu poate
conjuga bilirubina eliberat n cantiti crescute din hematiile lizate. Liber, bilirubina
poate produce encefalopatie. Severitatea manifestrilor clinice poate merge pn la
insuficien cardiac congestiv. n cazurile severe, tratamentul pacientului const n
administrarea de snge (exsanguino-transfuzie) pentru ndeprtarea bilirubinei i expunerea
la nivele sczute de ultraviolete (UV), manevr terapeutic ce are ca scop distrugerea
bilirubinei libere i prevenirea afectrii creierului.
Prevenirea bolii hemolitice a nou-nscutului se poate realiza administrnd mamei
Rh-, la nceputul sarcinii, dar i n primele 24-48 de ore dup prima natere, anticorpi antiRh (preparatul denumit Rhogam). n felul acesta, hematiile fetale, ptrunse n circulaia
matern vor fi rapid lizate i nu vor mai determina imunizarea mamei. In cazul unei mame
deja imunizate (care prezint anticorpi), acesteia i se poate administra antigen,
consumndu-i-se anticorpii prin formare de complexe antigen-anticorp. Complexele imune
vor fi distruse prin diverse mecanisme, n special, fagocitoz.

138

Citokine
n cursul dezvoltrii unui rspuns imun, se stabilesc multiple i complexe conexiuni
intercelulare, datorit necesitii celulelor de a comunica unele cu altele. Aceste
comunicri se pot realiza prin interaciuni directe ntre celule, mediate de molecule
membranare ce interacioneaza n sistem receptor-ligand, sau pot fi mediate de o serie de
molecule solubile ce funcioneaz ca mesageri inter-celulari. Aceste molecule solubile,
numite citokine, sunt peptide sau glicoproteine cu greuti moleculare reduse, avnd
structuri i funcii extrem de diverse.
Au fost descrise, pn n prezent, peste 100 de citokine. Ele sunt secretate, n
special, dar nu exclusiv, de leucocite i intervin ntr-o serie de procese extrem de diverse,
cum sunt iniierea, dezvoltarea, reglarea i inhibarea rspunsurilor imune nespecifice i
specifice, medierea reaciei inflamatorii i repararea tisular, hematopoieza, etc,
intervenind direct sau indirect n stimularea sau inhibarea generrii i diferenierii celulare,
activrilor celulare, generrii de efectori sau exercitrii funciilor acestora. Aceast reglare
este posibil datorit semnalelor intracelulare diferite, pe care citokinele le iniiaz n urma
interaciunii cu receptorii corespunztori, semnale care, n ultim instan, influeneaz
expresia unor variate gene n celulele int.

Fig. 80. Aciuni ale citokinelor (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

139

O anumit citokin poate interaciona:


- cu receptori specifici exprimai pe membrana aceleiai celule ce o secret, aciune ce se
numete autocrin;
- cu receptori exprimai pe membranele unor celule diferite aflate n vecintatea celei care
o sintetizeaz, aciune numit paracrin;
- cu receptori exprimai pe membranele unor celule localizate la distan fa de celula ce o
produce, aciune numit endocrin (fig. 80).
Citokinele prezint o serie de proprieti ce le permit s regleze activitile celulare
ntr-o manier coordonat i interactiv: pleiotropismul, redundana, sinergismul,
antagonismul i efectul n cascad. Pleiotropismul reprezint proprietatea unei citokine de
a exercita efecte biologice diferite la nivelul a diferite inte celulare. Redundana se refer
la situaia n care mai multe citokine diferite pot media acelai efect biologic la nivelul unei
celule, ceea ce asigur prezervarea unei funcii celulare, chiar n absena uneia dintre
citokinele implicate n medierea sa. Multe dintre citokine pot funciona redundant, dei pot
fi extrem de diverse din punct de vedere structural. Sinergismul apare cnd efectul
combinat a dou citokine asupra unei funcii celulare este mai intens dect suma efectelor
exercitate de fiecare citokin n parte, iar antagonismul se refer la situaiile n care o
citokin fie inhib efectele unei alte citokine la nivelul unei inte celulare, fie are efect
contrar. De asemenea, citokinele pot influena secreia i funciile altor citokine. Efectul n
cascad apare cnd aciunea unei citokine asupra unei celule determin secreia altor
citokine, care, la rndul lor, acioneaz asupra altor celule, determinnd secreia de
citokine.
Pe baza unor analogii structurale, citokinele au fost grupate n familii. Se descriu:
familia hematopoietinelor, a interferonilor, a chemokinelor i familia TNF (tumor necrosis
factor).
Receptorii pentru citokine sunt molecule exprimate la nivelul celulelor, prin
intermediul crora citokinele i exercit funciile. Dei sunt destul de diveri din punct de
vedere structural, receptorii pentru citokine au fost, la rndul lor, grupai n familii:
- familia receptorilor ce sunt membri ai superfamiliei imunoglobulinelor;
- familia receptorilor pentru citokine de clas I, cunoscut i ca familia receptorilor pentru
hematopoietine;
- familia receptorilor pentru citokine de clas II, cunoscut i ca familia receptorilor pentru
interferon;
- familia receptorilor TNF

140

- familia receptorilor pentru chemokine


n general, receptorii sunt prezeni pe membrana celulelor ca dimeri sau, mai rar, ca
trimeri. Lanurile polipeptidice care intr n componena lor au funcii diferite. Astfel, o
subunitate este destinat interaciunii cu citokina specific, iar celelalte subuniti sunt
responsabile de transmiterea semnalului n interiorul celulei. Dei acest pattern de
organizare este destul de frecvent ntlnit, el nu este valabil pentru toi receptorii.
O caracteristic important a receptorilor din clasa I este aceea c mai muli
membri prezint n comun aceleai subuniti implicate n transmiterea semnalului, aspect
ce explic redundana i antagonismul ce caracterizeaz citokinele corespunztoare. Din
acest motiv, aceste molecule au fost grupate n subfamilii, n funcie de subunitatea pe care
o au n comun:
- subfamilia GM-CSF ce cuprinde receptorii pentru IL-3, IL-5 i GM-CSF (granulocyte
and monocyte-colony stimulating factor);
- subfamilia IL-6 ce include receptorii pentru IL-6, IL-11, IL-12, LIF (leukemia inhibitory
factor), oncostatin M (OSM) i CNTF (ciliary neurotrophic factor).
- subfamilia IL-2 cuprinde receptorii pentru IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, i IL-15. Receptorii
pentru IL-2 i IL-15 sunt heterotrimeri, fiind alctuii din trei lanuri. Lanul este destinat
interaciunii cu citokina specific, n timp ce lanurile i sunt responsabile de
transmiterea semnalului. Tot lanul funcioneaz ca subunitate transmitioare i la
nivelul celorlali membri ai acestei subfamilii, care sunt heterodimeri.
Expresia lanului este esenial, absena sa, ce se poate datora unui defect al genei
ce l codeaz, localizat la nivelul CRS X, conduce la o pierdere a funciilor tuturor
citokinelor mediate de subfamilia receptorilor IL-2 i instalarea XSCID, o imunodeficien
sever combinat X-nlnuit.
Au fost identificate i descrise o serie de situaii patologice asociate citokinelor.
ocul septic bacterian poate apare la cteva ore dup infecia cu o serie de bacterii
gram-negative, cum sunt E coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa,
Enterobacter aerogenes, Neisseria meningitidis, etc, fiind determinat de o supraproducie
de citokine cum sunt IL-1 i TNF-. ocul este frecvent fatal i se manifest n special prin
hipotensiune sever, febr, diaree i coagulare intravascular diseminat. Boala pare s fie
declanat de endotoxinele bacteriene ce stimuleaz macrofagele care, n urma activrii,
secret cantiti excesive de citokine pro-inflamatorii. Studii experimentale ce utilizeaz,
pe modele animale, blocarea aciunii IL-1 i a TNF- cu anticorpi monoclonali specifici,

141

au demonstrat eficiena acestei terapii i, indirect, importana acestor dou citokine n


patogenia bolii.
ocul toxic bacterian este o entitate clinic indus de o serie de produi bacterieni,
cum sunt o serie de toxine, ce se comport ca superantigene (vezi activarea Ly T). Spre
deosebire de antigenele convenionale, aceste structuri nu sunt prezentate ca peptide
asociate cupelor MHC II, ci se leag de moleculele MHC II aparent nafara cupei i de
moleculele TCR cu un particular domeniu V, manier prin care sunt capabile s activeze
un numr extrem de mare de limfocite T CD4+. Comparativ cu antigenele convenionale,
fa de care mai puin de 0,01% din Ly T rspund, un superantigen poate induce activarea a
5-25% dintre Ly T. Activarea limfocitelor T CD4+ este urmat de secreia unor cantiti
excesive de citokine. De exemplu, toxina sindromului de oc toxic (TSST1) din
Staphyloccocus aureus induce secreia unor cantiti extrem de mari de IL-1 i TNF, ce
induc, ca i n ocul septic, reacii sistemice: febr, coagulare intravascular diseminat,
oc.
O serie de neoplazii au fost asociate cu secreia anormal de citokine. De exemplu,
nivele crecute de IL-6 sunt secretate de unele celule de mielom sau de plasmocitom, de
cancere de col uterin sau de vezic urinar sau chiar de tumori benigne, cum este mixomul
cardiac. Mai mult, o serie de celule mielomatoase par s utilizeze IL-6 ntr-o manier
autocrin, ntreinndu-i n acest fel o rat crescut de proliferare, aspect demonstrat de
faptul c aceste celule, cultivate in vitro n prezena anticorpilor monoclonali anti-IL-6, i
pierd capacitatea proliferativ.
Boala Chagas este indus de un protozoar numit Trypanosoma cruzi, care, printrun mecanism nc neclar, induce supresia limfocitelor T prin inhibarea, aproape total, a
expresiei lanului din componena receptorului de mare afinitate pentru IL-2. n
consecin, limfocitele T nu pot fi activate fa de nici un antigen i se instaleaz o stare
extrem de grav, caracterizat de imunodeficien sever.
Utilizarea terapeutic a citokinelor i a receptorilor pentru citokine. O serie de
citokine i-au dovedit, deja, utilitatea ca ageni terapeutici. Printre acetia, cei mai
cunoscui sunt interferonii i factorii de stimulare a coloniilor (GM-CSF). Exist, ns
numeroase dificulti care fac ca citokinele s fie greu acceptate n terapie:
- dificultatea stabilirii dozelor de administrare, avnd n vedere c ele acioneaz, cel mai
frecvent, local, n doze foarte mici, de ordinul picogramelor;

142

- timpul lor de njumtire foarte scurt (pentru unele citokine, de ordinul minutelor), ce
necesit o administrare extrem de frecvent sau chiar continu;
- riscul real ca aceste molecule s exercite i efecte neateptate sau s induc efecte
secundare nedorite. De exemplu, utilizarea IL-2 recombinant poate induce efecte
secundare ca febr, frisoane, diaree sau efecte mult mai severe ca anemie, trombocitopenie,
oc, insuficien respiratorie i chiar com.
n ciuda acestor dificulti, se depun n continuare eforturi pentru obinerea de
produi ct mai eficieni i cu ct mai puine efecte secundare, cu aplicaii n domeniul
neoplaziilor, al transplantului de organ, al bolilor infecioase i n alergii.

143

Reglarea rspunsului imun


Ca orice sistem biologic, sistemul imun este supus continuu reglrii de ctre o larg
varietate de factori. Mai mult, sistemul imun i-a dezvoltat mecanisme proprii, al cror rol
principal este s inhibe activarea i funciile efector ale limfocitelor, n momentul n care
rspunsul imun nu mai este justificat (ex. antigenul a fost ndeprtat). Importana
fiziologic a acestor mecanisme inhibitorii const n meninerea toleranei la self i n
mpiedicarea efectelor, eventual nocive, ale activrii necontrolate a limfocitelor.
Unul dintre mecanismele cheie de control i reglare a rspunsului limfocitelor la
antigene este reprezentat de inducerea toleranei, starea de ne-responsivitate a unui
limfocit fa de antigenul specific. n general, ea apare cnd, n urma interaciunii dintre
antigen i limfocitul specific, iau natere mai degrab semnale inhibitorii dect semnale
de activare celular. Consecina o reprezint celulele tolerante sau tolerizate. Tolerana
poate fi indus n oricare moment al ontogeniei. Se descrie o toleran indus n stadiile
precoce ale dezvoltrii limfocitare, numit toleran central i o toleran indus n
limfocitele mature, numit toleran periferic. Inactivarea limfocitar poate avea dou
consecine: deleia, fenomen prin care, expunerea la antigen duce la eliminarea celulei
prin apoptoz i anergia, fenomen prin care, expunerea la antigen duce la un status celular
de inactivare sau non-responsivitate.
Dezvoltarea unui rspuns imun normal fa de un antigen non-self este i el strict
controlat de o serie de factori. Dintre cei mai importani factori de control amintim: natura
i cantitatea antigenului, calea de ptrundere a acestuia n organism, natura i eficiena
celulelor prezentatoare de antigen, expresia moleculelor MHC, pattern-ul de citokine
sintetizate, vrsta, factori neurologici i endocrini, expunerea la radiaii sau diverse terapii
(ex. droguri imunosupresoare).
1. Reglarea de ctre antigen. Antigenul reprezint primul semnal de activare. Sunt
importante:
1.1. Natura chimic a Ag.
a) antigenele ce conin peptide induc simultan RI umorale i celulare, datorit
posibilitii de a fi prezentate n cupele MHC. Astfel, multe virusuri i bacterii induc
ambele tipuri de imunitate, lsnd memorie imunologic de lung durat.

144

b) bacteriile ncapsulate prezint ca principale antigene polizaharide capsulare; ele


determin rspunsuri imune dominate de IgM, puin IgG, nu induc imunitate celular i
nici memorie de lung durat.
c) antigenele lipidice au capaciti reduse de stimulare.
1.2. Cantitatea de Ag. Pentru fiecare antigen se descriu doze optime, la care se dezvolt
RI. Doze mai mici sau mai mari dect cele optime induc mai degrab toleran.
1.3. Calea de intrare a Ag-nului. Administrarea Ag-nului pe cale intravenoas sau oral
induce, mai probabil, absena specific a RI (toleran imunologic), dect un RI eficient.
2. Reglarea de ctre celulele prezentatoare de antigen
APC-urile sunt celule eseniale inducerii RI, pentru c ele prezint limfocitelor T,
ntr-o manier MHC-restrictat, peptide generate n urma procesrii antigenelor. Mai mult,
ele furnizeaz limfocitelor i semnale co-stimulatorii (molecule membranare i factori
solubili), fr de care limfocitele nu se activeaz, ci devin non-responsive sau anergice.
Dintre APC-urile profesioniste amintim celulele dendritice, macrofagele i limfocitele B,
cu meniunea c celulele dendritice sunt singurele capabile s activeze limfocitele T naive.
n prezena unui antigen i a unui semnal de pericol (danger signals = molecule
eliberate de celule apoptotice ale gazdei sau de patogeni, care interacioneaz cu celule ale
sistemului imun nespecific i induc reacii inflamatorii), celulele dendritice imature se
matureaz i i amplific expresia membranar a moleculelor MHC, contribuind prin
prezentarea antigenului la activarea limfocitelor T naive. n absena patogenilor, singurele
antigene cu care celulele dendritice se confrunt sunt antigenele self provenite de la nivelul
esuturilor sau internalizate ca i corpi apoptotici provenii din turn-overul celular
fiziologic. n aceste situaii, semnalele de pericol nu sunt prezente i celulele dendritice nu
se matureaz. n consecin, dei exprim pe membran complexe Ag self/MHC, ele nu
induc activarea limfocitelor T autoreactive, ci tolerizarea lor, fie prin deleie, fie prin
anergizare.
3. Reglarea RI de ctre anticorpi
Anticorpii secretai fa de un antigen pot exercita control prin feedback, inhibnd
rspunsurile imune ulterioare fa de acelai Ag. Reglarea prin feed-back de ctre anticorpi
se realizeaz prin mai multe mecanisme:
a. anticorpii elimin i neutralizeaz antigenul, ndeprtnd, astfel, stimului iniiator
al RI;

145

b. legndu-se la epitopii de la nivelul antigenelor, ei pot bloca accesul limfocitelor


B, limitnd activarea acestora (anticorpi blocani);
c. anticorpii de tip IgG pot inhiba direct activarea Ly B prin legarea la receptorii
FcRIIB de pe celulele B (fig. 81).

Fig. 81. Reglarea activrii limfocitului B

4. Reglarea RI de ctre limfocitele T


Au fost evideniate i descrise subpopulaii de limfocite T (denumite generic
limfocite T reglatorii), implicate n controlul activrii i funcionrii limfocitelor T
convenionale.
Limfocitele T CD4+ reglatorii cuprind, la rndul lor, o serie de subseturi de limfocite T
CD4+ ce difer n funcie de moleculele exprimate pe membran, precursorii din care se
difereniaz, mecanismele supresoare utilizate i efectele pe care le induc.
Celulele Treg reprezint subsetul cel mai bine studiat. Exprim niveluri crescute de
molecule CD4 i CD25 (IL-2R) i reprezint, la om, aproximativ 10% din totalul
limfocitelor T CD4+ periferice. Cele mai multe se dezvolt n timus, ca i limfocitele T
convenionale i muli imunologici numesc aceste celule Treg naturale (nTreg). n
periferie, aceste celule interacioneaz cu celule dendritice tolerogenice i devin anergice,
dobndind abilitatea de a bloca proliferarea limfocitelor T convenionale (inclusiv a
limfocitelor auto-reactive) fa de orice antigen i de a inhiba producia de IL-2. Efectele
supresive ale acestor celule nu sunt mediate de citokine, ci presupun contact direct cu
limfocitele T convenionale.

146

Exist o serie de dovezi legate de existena unei populaii minore de limfocite Treg
induse (iTreg); ele provin din populaia Th0 ce interacioneaz cu celule dendritice mature
n prezena unor concentraii locale mari de citokine supresoare, aa cum este, TGF- i par
s-i exercite efectele asupra limfocitelor T efector prin intermediul secreiei de TGF-.
Ambele subseturi Treg exprim un factor de transcripie numit Foxp3, ce pare
esenial att pentru dezvoltarea, ct i pentru funcionarea lor. De asemenea, ambele tipuri
de celule exprim molecula CTLA-4, ce intervine n limitarea activrii limfocitelor T
convenionale. CTLA-4 competiioneaz cu molecula CD28 pentru legarea membrilor
familiei B-7, blocnd, n acest fel, recepionarea semnalului 2 de activare.
Th3 i Tr1 reprezint alte subseturi de T-uri reglatoare care pot supresa limfocitele T
activate ntr-o manier nespecific, n special prin intermediul citokinelor imunosupresive,
TGF- i IL-10.
Limfocite T CD8+ reglatoare. Dei muli imunologi susin existena unor subpopulaii de
limfocite T CD8+ reglatoare, ele s-au dovedit dificil de definit. Unele dintre aceste celule
par s induc blocarea proliferrii limfocitelor T naive sau efector, prin intermediul IL-10,
altele par, mai degrab, s acioneze asupra celulelor prezentatoare de antigen, cum sunt
celulele dendritice imature care nu vor induce activarea limfocitelor T CD4+ cu care
interacioneaz, ci anergie sau vor stimula diferenierea acestor celule n celule reglatoare
de tip Th3 sau Tr1.

147

Hipersensibiliti (HS)
Reaciile de hipersensibilitate reprezint rspunsuri imune exagerate sau
inadecvate, care se nsoesc de inflamaie asociat frecvent cu leziuni locale sau sistemice
ale esuturilor self. Coombs i Gell au clasificat reaciile de hipersensibilitate n funcie de
mecanismul lor patogenic n 4 tipuri:
Hipersensibilitatea (HS) de tip I (imediat sau anafilactic);
Hipersensibilitatea (HS) de tip II (hipersensibilitate citotoxic mediat de
anticorpi);
Hipersensibilitatea (HS) de tip III (mediat de complexe imune);
Hipersensibilitatea (HS) de tip IV (de tip ntrziat, mediat celular) (fig. 82).

Hipersensibilitate tip I
(imediat/anafilactic)

Hipersensibilitate tip II
(citotoxic mediat de
anticorpi)

Hipersensibilitate tip III


(mediat de complexe
imune)

Hipersensibilitate tip
IV (mediat celular)

Fig. 82. Cele patru tipuri de HS (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Primele trei tipuri sunt mediate de anticorpi, HS de tip IV este mediat de celule
(limfocite T i macrofage). Reaciile sunt declanate de antigene variate, care difer de la
individ la individ i nu se manifest la primul contact cu antigenul, ci apar la contacte
ulterioare cu acelai antigen. Primul contact induce sensibilizarea organismului,
manifestat prin dezvoltarea unui RI primar activarea limfocitelor T i B specifice,
generarea de efectori anticorpi specifici, limfocite T efector - i generarea de limfocite T
i B de memorie specifice. Contactul ulterior cu acel particular antigen induce rspuns
imun secundar i reprezint faza efector a reaciei de hipersensibilitate, ce se manifest
clinic.

148

Hipersensibilitatea de tip I (imediat sau anafilactic). Este cunoscut i sub


denumirea de alergie (termenul semnific o reactivitate modificat a organismului gazd la
contactul cu unele antigene, numite alergene) i este mediat de IgE. Cei mai muli dintre
indivizii umani dezvolt rspunsuri imune caracterizate de secreia de IgE numai fa de
infecii cu parazii. Exist, ns, persoane care au o predispoziie ereditar, numit atopie,
de a secreta IgE fa de antigene obinuite din mediul nconjurtor (fa de care cei mai
muli dintre indivizii umani secret IgM, IgG sau IgA, anticorpi ce ndeprteaz eficient
aceste antigene, fr a cauza alte efecte). Frecvent, aceast predispoziie caracterizeaz mai
muli membri ai unei familii i se asociaz cu nivele circulante de IgE i numr de
eozinofile circulante mai mari dect valorile normale (valorile normale ale IgE seric sunt
cuprinse ntre 0,3-0,5 g/ml, dup unii autori ntre 0,1-0,4g/ml), aspecte ce explic
susceptibilitatea crescut a atopicilor de a dezvolta reacii de hipersensibilitate de tip I.
Cele mai multe reacii alergice apar la nivelul barierelor anatomice reprezentate de
piele i mucoase. Contactul iniial cu alergenul duce la producerea de IgE. Se pare c
modul de prezentare a acestor antigene de ctre celulele dendritice la nivelul organelor
limfoide secundare stimuleaz generarea de efectori de tip Th2, care secret IL-4, citokin
sub influena creia, limfocitele B, difereniate n plasmocite, secret IgE (switch de clas).
Multe dintre celulele efector generate prsesc organele limfoide secundare i migreaz,
datorit fenomenului de trafic limfocitar, napoi, la nivelul porilor de intrare ale
antigenelor. n aceste situsuri, limfocitele efector de tip Th2 secret cantiti crescute de
IL-4, IL-5 i IL-13, ceea ce explic prezena n aceste esuturi a plasmocitelor secretoare de
IgE specifice pentru alergen.
O parte din aceti anticorpi interacioneaz cu antigenele, contribuind la
ndeprtarea lor, o parte se fixeaz pe suprafaa mastocitelor localizate la acest nivel, prin
interaciunea cu receptorii de mare afinitate FcRI (anticorpii de izotip IgE sunt anticorpi
homocitotropici, cu tropism pentru celulele gazdei n care au fost secretai), iar o parte
ptrund n circulaia sanguin via sistemul limfatic. Unii dintre anticorpii circulani
interacioneaz cu bazofilele, care sunt FcRI+ , iar alii cu mastocite localizate n alte
esuturi, la distan.
n felul acesta, dei semiviaa plasmatic a IgE libere este de 1-5 zile, mastocitele
sensibilizate cu IgE pot persista n organism sptmni sau chiar luni de zile. Invelite cu
IgE alergen-specifice, mastocitele i bazofilele sunt descrise ca adevrate bombe, gata s
fie declanate de un nou contact cu antigenul specific.

149

Mastocitele sunt localizate n esuturile conjunctive, n particular n vecintatea


vaselor sanguine i limfatice. Unele esuturi, cum sunt pielea i epiteliul mucoaselor
gastro-intestinale i respiratorii conin o concentraie extrem de mare de mastocite. De
exemplu, la nivelul pielii se gsesc aproximativ 10 000 mastocite/mm3. Bazofilele sunt
granulocite circulante, reprezentnd 0,5-1% din totalul leucocitelor. Ca i mastocitele,
bazofilele prezint n citoplasm granule ce conin mediatori activi farmacologic.
Un nou contact cu alergenul specific este urmat de dezvoltarea unui rspuns imun
secundar i manifestarea stadiului efector al reaciei de hipersensibilitate (fig. 83).

Fig. 83. Legarea ncruciat a IgE fixate pe membrana mastocitului de ctre alergen induce
activarea celulei (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Stadiul efector se desfoar n dou etape sau faze.


Faza precoce se datoreaz legrii ncruciate a IgE fixate pe membranele
mastocitelor din esutul int i activarea lor. Prima manifestare a activrii mastocitelor este
degranularea rapid i eliberarea mediatorilor preformai: histamina, factori chemotactici
(pentru eozinofile - ECF, pentru neutrofile NCF), proteaze neutre, molecule responsabile
de apariia primelor simptome, care vor fi susinute, mai departe, pentru cteva ore, de
mediatorii

nou

sintetizai

din

acidul

arahidonic

(prostaglandine,

leukotriene,

tromboxani, factor de activare plachetar - PAF). mpreun, mediatorii induc apariia


simptomelor specifice, iar factorii chemotactici pregtesc dezvoltarea urmtoarei faze, cea
tardiv, inducnd expresia unor noi molecule de adeziune la nivelul endoteliului vaselor
locale.
Histamina, leukotrienele i PAF interacioneaz cu receptorii specifici exprimai la
nivelul musculaturii netede din pereii vasculari, inducnd vasodilataie i creterea
permeabilitii, ceea ce faciliteaz extravazarea plasmei i acumularea de celule i proteine,
cum sunt componentele sistemului complemnent, n esutul int. Aciunea histaminei

150

asupra terminaiilor nervoase senzitive cauzeaz senzaia de prurit (urticarie) i strnut


(rinita alergic). Tot ea induce secreia crescut de mucus n bronhiole, caracteristic a
astmului bronic.
Faza tardiv se instaleaz dup 4-6 ore de la iniierea reaciei i se datoreaz
acumulrii n esutul int de noi celule: eozinofile, bazofile sensibilizate, monocite i
neutrofile. Aceste celule, activate, au capacitatea de a secreta prostaglandine, leucotriene,
PAF i variate citokine, molecule ce direct sau indirect cauzeaz distrucii tisulare i induc
apariia simptomelor clinice.
Manifestri clinice ale HS de tip I:
A. Reacii la alergene inhalate:
Rinita i conjunctivita alergic (febra fnului) este indus de alergene aeropurtate
ce interacioneaz cu mastocitele sensibilizate localizate n mucoasa cilor aeriene
superioare, n mucoasa epiteliului nazal i n esutul conjunctiv asociat globului ocular.
Mediatorii eliberai determin vasodilataie i creterea permeabilitii capilare, procese ce
au ca manifestri clinice hipersecreia nazal i ocular, prurit ocular, strnut, tuse.
Astmul bronic este o alt manifestare clinic a unei reacii de hipersensibilitate de
tip I.
Se descriu astmul alergic extrinsec, indus de alergene aeropurtate, cum sunt
praful, polenul, fumul sau de antigene ptrunse n circulaie, cum sunt produii unor
insecte, antigene virale i astmul intrinsec, indus de exerciii fizice sau de frig, aparent
independent de o stimulare alergenic.
Reaciile se dezvolt n tractul respirator inferior, ceea ce are ca efect important
bronhoconstricia produs ca urmare a contraciei musculaturii netede a bronhiilor,
determinat de mediatorii mastocitari, la care se adaug o ngustare suplimentar a
lumenului, datorat edemului cilor aeriene i hipersecreiei de mucus. Astmul este vzut
de muli clinicieni ca o afeciune inflamatorie, iar rspunsul astmatic poate fi divizat n
dou faze. Rspunsul precoce sau imediat apare dup cteva minute de la expunerea la
alergen i se datoreaz degranulrii mastocitelor i eliberrii mediatorilor primari, ale cror
efecte sunt bronhoconstricia, vasodilataia i hipersecreia de mucus. Rspunsul tardiv se
instaleaz dup cteva ore i este determinat de mediatori nou sintetizai, inclusiv citokine
ca IL-4, IL-5, TNF- de ctre celule recrutate n esuturile bronice, n particular de
eozinofile. Eozinofilele i neutrofilele sunt capabile s produc distrucii tisulare, datorit
eliberrii de enzime, radicali de oxigen i citokine, evenimente ce duc la ocluzia lumenului

151

bronhiilor cu mucus, proteine, debriuri celulare; descuamarea exagerat a epiteliului


bronic, subierea membranei bazale, edem i hipertrofierea musculaturii netede bronice.
B. Reacii la alergene alimentare sunt induse de alergene ce se gsesc n alimente, cele
mai implicate fiind unele proteine din ou, lapte, carne, alune, fructe de mare. Manifestrile
clinice pot fi foarte variate. Unele alergene induc un tip de urticarie ce se manifest la
nivelul buzelor, limbii sau gtului i care poate evolua dramatic cu edem sever al limbii sau
al faringelui. Altele induc manifestri la nivelul stomacului sau/i al intestinului: grea,
vrsturi, diaree, dureri abdominale, crampe. Uneori, datorit creterii permeabilitii
mucoasei intestinale, alergenul poate ptrunde n circulaie, de unde poate fi transportat n
tot organismul, de exemplu la piele, ceea ce explic urticaria sau n pulmon, ceea ce
explic atacurile astmatice declanate de ingestia unor alimente.
C. Reacii alergice sistemice. Reacia anafilactic (ocul anafilactic) este, de multe ori,
rapid fatal i apare, mai frecvent, la ptrunderea alergenului n circulaie: administrarea de
medicamente la care organismul este sensibilizat (penicilin, insulin), nepturi de insecte
(venin de albin, de viespe, pianjen), dar poate fi determinat i de alimente cum sunt
alunele sau fructele de mare. Manifestrile clinice constau n vasodilataie generalizat,
datorit activrii mastocitelor din esutul conjunctiv asociat vaselor, urmat de
hipotensiune dramatic, edem masiv i colaps, constricia cilor aeriene, inclusiv a
bronhiolelor, i edem glotic, responsabile de moartea prin asfixie. Terapia de elecie este
administrarea rapid de epinefrin (adrenalin), care contracareaz efectul histaminei i al
leucotrienelor, relaxnd musculatura neted, reducnd permeabilitatea vascular,
mbuntind activitatea cardiac, necesar prevenirii colapsului. Tot adrenalina blocheaz
i degranularea altor mastocite.

Hipersensibilitatea de tip II (hipersensibilitate citotoxic mediat de


anticorpi) este mediat de anticorpi de tip IgG i IgM produi fa de antigene prezente
pe suprafee celulare. Unele celule pot fi celule circulante (hematii, leucocite, trombocite),
altele sunt celule localizate n diverse esuturi. Unele antigene sunt non-self, dar altele pot
fi structuri self, situaii n care acest tip de hipersensibilitate reprezint o manifestare
asociat unei boli autoimune. Anticorpii interacioneaz cu antigenele fa de care au fost
produi i determin distrucia celulelor n mai multe maniere:

activarea sistemului complement i formarea complexelor de atac membranar (MAC),


urmat de liza intelor celulare pe membrana crora s-au format complexele Ag-Ac;

152

Ac depui pe membranele celulare, care pot funciona ca opsonine, mediind fagocitarea


acestora de ctre fagocitele care exprim receptori Fc;

Ac depui pe membranele celulare, care pot determina generarea de opsonine prin


activarea sistemului complement (C3b), iar celulele pot fi fagocitate de fagocite ce exprim
receptori pentru complement;

Ac depui pe membranele celulare, care mediaz fenomenul ADCC (citotoxicitatea


celular mediat de anticorpi). n acest proces, receptorii Fc exprimai de celulele
citotoxice interacioneaz cu fragmentele Fc ale anticorpilor din complexele Ag-Ac
formate pe membranele celulelor int, stimulnd uciderea lor.
Manifestri clinice ale HS de tip II
1. Reaciile post-transfuzionale. Transfuziile de snge incompatibil n sistemul
ABO sau Rh sunt urmate de interaciunea anticorpilor din serul primitorului cu antigenele
de pe membranele hematiilor transfuzate i activarea complementului, evenimente urmate
de liza acestora i eliberarea de hemoglobin. Aceasta este filtrat la nivelul rinichiului,
rezultnd hemoglobinuria. Acumularea hemoglobinei n rinichi poate cauza necroza
tubular, de aceea forarea filtrrii cu ajutorul diureticelor este extrem de necesar.
Simptomele unui accident post-transfuzional sunt cele ale unei afeciuni sistemice i
includ: febr, frisoane, grea, coagulare intravascular, dureri lombare.
2. Boala hemolitic a nou-nscutului. Se produce n situaia particular a
incompatibilitii materno-fetale n sistemul Rh.
Imunizarea mamei se poate produce la prima sarcin incompatibil, mai rar nainte
de natere, mai frecvent n timpul naterii, cnd desprinderea placentei de peretele uterin
poate permite unei cantiti crescute de hematii fetale s ptrund n circulaia matern.
Contactul dintre limfocitele materne i hematiile fetale Rh+ determin dezvoltarea unui RI
primar, materializat prin secreie de anticorpi i de generarea limfocitelor de memorie. n
cazul unei sarcini incompatibile ulterioare, hematiile fetale vor induce rapid declanarea
unui RI secundar, cu secreie de anticorpi de tip IgG, ce traverseaz placenta i
interacioneaz cu hematiile fetale, determinnd liza acestora (fig. 84).
Boala poate fi prevenit prin administrarea de anticorpi anti-Rh (ex. Rhogam)
mamei devreme n timpul primei sarcini i n primele 24-48 de ore de la prima natere.
Acetia interacioneaz cu hematiile fetale ce se gsesc eventual n circulaia matern,
determin liza lor, ndeprtnd astfel stimulul antigenic.

153

Fig. 84. Boala hemolitic a noului nscut (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH
Freeman and Company, 2000)

3. Miastenia gravis se caracterizeaz prin producerea de anticorpi fa de receptorii


pentru acetilcolin de la nivelul plcii neuromusculare (fig. 85). Aceti anticorpi blocheaz
legarea acetilcolinei la receptorul ei, mpiedicnd transmiterea impulsului nervos la
muchi. Manifestarea clinic const n scderea extrem a forei contraciei musculare.

Fig. 85. Miastenia gravis (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company,
2000)

154

4. Boala Graves (Graves - Basedow) este indus de autoanticorpi cu specificitate


pentru receptorul pentru TSH (Thyroid Stimulating Hormone) de la nivelul celulelor
foliculilor tiroidieni, celule responsabile de secreia hormonilor tiroidieni. Legarea
anticorpilor la receptorii pentru TSH de pe celulele tiroidiene stimuleaz producia n exces
a hormonilor tiroidieni; inhibiia prin feed-back nu mai funcioneaz i se dezvolt o stare
de hipertiroidie (fig. 86).

Fig. 86. Boala Graves (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company,
2000)

Hipersensibilitatea de tip III (hipersensibilitatea mediat de complexe


imune) este mediat de complexe imune formate n urma interaciunii dintre antigene
solubile i anticorpii produi fa de acestea (IgM i IgG).
n mod normal, complexele imune (CI) care se formeaz n cursul unui RI sunt
eliminate eficient de sistemul fagocitelor, dar, n anumite situaii, aceste complexe persist
i, eventual, se depun n diferite organe i esuturi, activeaz sistemul complement i celule
efector, ceea ce va determina dezvoltarea unei reacii inflamatorii locale sau sistemice,
nsoit de distrucii tisulare, responsabile de manifestrile clinice.
Au fost descrise trei situaii n care complexele imune se produc n exces i nu pot
fi eliminate eficient:
1. boli determinate de infecii persistente duc la formare cronic de CI;

155

2. boli autoimune; HS III este frecvent o complicaie a bolilor autoimune, n care


producerea continu de autoanticorpi fa de antigene self genereaz continuu CI (lupus
eritematos sistemic, artrita reumatoid);
3. afeciuni determinate de antigene inhalate. CI se pot forma n urma expunerii cronice la
antigene extrinseci (ex. boala cresctorilor de psri, plmnul fermierului).

Fig. 87. HS tip III (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company, 2000)

Mecanismele HS III. Complexele imune pot declana reacia inflamatorie n mai


multe moduri:

interacioneaz cu sistemul complement i duc la generarea de anafilatoxine, C3a i C5a;


acestea stimuleaz mastocitele i bazofilele i exercit efecte chemotactice asupra altor
celule efector (fig. 87). Mediatorii eliberai din granulaiile celulelor i cei nou secretai de
aceste celule activate vor interveni n dezvoltarea unei reacii inflamatorii acute la locul de
depunere a complexelor Ag-Ac;

stimuleaz macrofagele s elibereze citokine, n special TNF- i IL-1, cu rol important


n medierea reaciilor inflamatorii;

interacioneaz direct cu plachetele (prin intermediul receptorilor Fc CD32) i


declaneaz eliberarea mediatorilor inflamaiei. Severitatea reaciei poate merge pn la
necroz tisular.
Manifestri clinice:
1. Reacii intrapulmonare la antigene extrinseci inhalate:
a) plmnul fermierului. Reacia apare la 6-8 ore de la expunerea la antigene din
Actinomyces termophilae prin inhalarea sporilor bacterieni prezeni n fn.

156

b) n boala cresctorilor de psri, reacia este declanat de proteine din


dejeciile uscate ale psrilor.
2. Boala serului (manifestare sistemic a HS de tip III) poate fi indus prin administrarea
unor cantiti mari de antigen i reprezint o complicaie a seroterapiei. Administrarea de
doze mari de anticorpi produi de alte specii la un individ uman induce producerea de
anticorpi fa de imunoglobulinele administrate; se formeaz complexe imune circulante
care, avnd dimensiuni mici, sunt dificil de ndeprtat prin fagocitoz i se depun n pereii
vaselor i n esuturi, determinnd reacii inflamatorii i distrucii tisulare importante.
Tipic, dup zile sau sptmni de la expunerea la antigen, apar simptome ca febr,
fatigabilitate, vasculite generalizate manifestate prin erupii cutanate, nsoite de edeme i
roea, limfadenopatii, artrit i, uneori, glomerulonefrit.
Ali factori care pot determina persistena CI:

defecte ale receptorilor pentru C3b (CR1) de pe membranele eritrocitelor, care reprezint
cel mai important sistem de ndeprtare (clearance) a CI din circulaie;

dimensiunile CI: complexele imune cu dimensiuni mari sunt rapid ndeprtate de


macrofage; cele cu dimensiuni mici sunt ndeprtate mai greu;

defecte ale sistemului fagocitic mononuclear.


Hipersensibilitatea de tip IV (hipersensibilitate mediat celular sau
ntrziat - DTH delayed type hypersensitivity). Este practic un rspuns
mediat de Ly T CD4+. Antigenele activeaz Ly T CD4+ sensibilizate de un contact
anterior i sunt generate celule efector de tip Th1, numite Ly T DTH, dei i Ly T citotoxice
pot fi implicate adeseori. Citokinele particulare secretate de efectorii Th1 au ca efecte
importante acumularea i activarea macrofagelor. Celulele activate secret cantiti
excesive de enzime litice pe care le elibereaz n spaiul extracelular, ceea ce are ca efect
distrucii tisulare localizate. Aceste reacii necesit 48-72 de ore pentru a deveni evidente
clinic, iar particularitatea const n recrutarea i activarea macrofagelor i nu a PMN n
situsurile inflamatorii.
Manifestri clinice ale HS IV:
1. HS de contact (dermatita de contact) const n apariia unei reacii
eczematoase la locul de contact cu antigenul. Poate fi indus de metale (Ni, Cr), cosmetice,
vopsea de pr, substane de natur vegetal (pentadecacatecolul, un ulei secretat de
frunzele de oetar poison ivy), care se comport ca haptene, penetreaz epidermul i se

157

cupleaz cu proteine proprii organismului (carrieri). Principalele APC-uri sunt celulele


Langerhans din piele. Dermatita de contact se dezvolt n dou faze:
a. Faza de sensibilizare necesit 10-14 zile, timp necesar dezvoltrii unui RI
primar; haptena ptrunde n organism prin piele, se cupleaz cu proteine, ce funcioneaz
ca i carrieri, complexul este preluat de celulele Langerhans, care migreaz din epiderm,
sub form de celule cu vl, prin limfaticele aferente, n aria paracortical a ganglionilor
limfatici regionali, unde antigenele sunt prezentate MHC-restrictat limfocitelor T CD4+
specifice. Acestea se vor activa, vor prolifera i vor genera efectori i celule T de memorie,
care vor migra ctre poarta de intrare a antigenului.
b. Faza de stimulare (fig. 88) se declaneaz la contactul ulterior cu acelai
antigen; haptena, ptruns n epiderm, se cupleaz cu carrieri, se formeaz conjugatul
hapten-carrier; acesta este preluat de celulele Langerhans, care l transport din epiderm
n derm, unde l prezint limfocitelor T CD4+ de memorie (Ly TDTH).

Fig. 88. Dermatita de contact (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

Activarea acestora duce la secreie de citokine, dintre care IFN- induce expresia
ICAM-1 i MHC II la nivelul keratinocitelor i al celulelor endoteliale din capilarele
dermice. Keratinocitele se activeaz i elibereaz citokine pro-inflamatorii (IL-1, IL-6,
GM-CSF) care duc la recrutarea local de noi celule T CD4+ i macrofage. Enzimele litice

158

eliberate din macrofage induc distrucii tisulare, ceea ce explic reacia eczematoas local
(eritem, pustule).
2. Intradermoreacia la tuberculin (reacia Mantoux).
Testarea intradermic cu tuberculin (antigen derivat din Mycobacterium
tuberculosis) a unui individ sensibilizat (care posed celule T de memorie, generate la un
contact anterior cu antigenul) determin activarea Ly TDTH. Acestea secret citokine proinflamatorii (ex. TNF- i TNF-) care, la rndul lor, vor induce activarea endoteliului i
stimularea expresiei unor molecule de adeziune, implicate n recrutarea de leucocite, n
principal monocite, la sediul reaciei. Infiltratul inflamator este dominat de macrofage care
sunt principalele celule efector. La 48-72 de ore, reacia atinge un maximum i se
manifest prin eritem i edem la locul administrrii antigenului.
3. Hipersensibilitatea granulomatoas. Reprezint cea mai important forma
clinic de HS IV.
Exist o varietate de patogeni intracelulari care nu pot fi distrui n fagolizozomii
celulelor

care

i-au

fagocitat.

Exemple:

bacterii

(Mycobacterium

tuberculosis,

Mycobacterium leprae, Listeria monocytogenes), fungi (Pneumocystis carinii, Candida


albicans, Cryptococcus neoformans), paraziti (Leishmania sp.), virusuri (Herpex simplex,
Variola, Rujeola). Ei nu pot fi distrui dect prin distrugerea celulelor pe care le
paraziteaz, iar responsabile de acest efect sunt macrofagele care se activeaz i, neputnd
fagocita, elibereaz enzimele litice ce distrug aceste inte celulare, dar care, inevitabil,
determin i distrugeri semnificative ale esuturilor sntoase, pre pe care organismul l
pltete pentru eliminarea eficient a acestui tip de patogeni.
n cazul agentului etiologic al tuberculozei, rspunsul imun are drept consecin
formarea unui granulom cu celule epitelioide i celule gigante multinucleate caracteristice
(fig. 89).
Celulele epitelioide sunt celule mari, derivate din macrofage activate, sub efectul
stimulrii cronice cu citokine (de ex. TNF). Aceste celule sunt, la rndul lor, surs
important de TNF, mediator important al inflamaiei.
Celulele gigante apar prin fuziunea celulelor epitelioide, au sute de nuclei
distribuii la periferie i se mai numesc celule Langhans. Un granulom tipic prezint n
centru celule gigante i, caracteristic tuberculozei, o zon de necroz. Urmeaz celulele
epitelioide i macrofagele activate, nconjurate de o coroan de Ly TDTH dispuse la
periferie. n unele cazuri, la periferie poate exista i o zon de fibroz. Reacia are rolul de
a izola agentul patogen, mpiedicnd diseminarea acestuia.

159

Fig. 89. Granulom

Rolul protectiv al acestui tip de reacie este demonstrat la pacienii cu SIDA, la care
distrugerea limfocitelor T CD4+ de ctre virus are ca efect imposibilitatea dezvoltrii unui
rspuns de acest tip. Ca urmare, aceti pacieni dezvolt infecii extrem de periculoase cu
patogeni intracelulari, ce ntr-un individ normal (cu capacitate de a dezvolta rspuns de tip
ntrziat) nu sunt capabili s induc stare de boal.

160

Imunodeficiene (ID)
Imunodeficienele apar atunci cnd una sau mai multe din componentele sistemului
imun sunt absente sau funcioneaz deficitar. ID se clasific n:

1. ID primare (ereditare) rezult prin defecte intrinseci ale componentelor sistemului


imun i frecvent sunt congenitale (determinate genetic) (fig. 90);

Fig. 90. Imunodeficiente primare (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and
Company, 2000)

2. ID secundare (dobndite) sunt induse de factori extrinseci (iradiere, malnutriie,


medicaie imunosupresoare, infecii, cum este de exemplu, infecia cu HIV).
Consecinele deficienelor primare depind de numrul i tipul componentelor
sistemului imun implicate. In general, ele determin o susceptibilitate crescut la infecii.
Pacienii cu deficiene ale imunoglobulinelor, ale fagocitelor sau ale sistemului
complement fac infecii recurente (repetate) cu bacterii piogene ca Haemophilus
influenzae, Streptococcus pneumoniae i Staphylococcus aureus. Pacienii care au defecte
ale imunitii mediate celular (limfocite T) dezvolt infecii extrem de grave (chiar letale)
cu microorganisme care la persoanele normale nu determin mbolnviri i sunt numite
oportuniti (patogeni intracelulari). De asemenea, pacienii imunodeficieni sunt

161

susceptibili la dezvoltarea de tumori, mai ales n cazul defectelor limfocitelor T, ceea ce


demonstreaz rolul esenial al acestor celule n aprarea anti-tumoral.
Defectele pot afecta orice component al sistemului imun i orice stadiu de
difereniere a celulelor sistemului imun, cu consecine mai mult sau mai puin importante.
Astfel, defectele aprute devreme n dezvoltarea hematopoietic afecteaz ntregul sistem
imun. In aceast categorie intr disgenezia reticular, situaie caracterizat de defecte ale
celulei stem, care duc la blocaj n maturarea tuturor leucocitelor. Celulele sistemului imun
nu se dezvolt, iar susceptibilitatea crescut la infecii cu diveri patogeni, face ca pacienii
s nu supravieuiasc, n absena unor terapii agresive.

ID primare:
A. defecte ale SI specific:
1. defecte ale limfocitelor B. Exemple:
Agamaglobulinemia X-linkat (nlnuit) sau agamaglobulinemia congenital
Bruton. Afeciunea se caracterizeaz prin incapacitatea copiilor de sex masculin de a
produce imunoglobuline (exist n ser cantiti extrem de mici de IgG, dar celelalte clase
sunt absente). n primele 6-9 luni de via, copiii sunt protejai de anticorpii materni: IgG,
ce ptrund transplacentar n circulaia ftului i IgA, transmise prin colostru i lapte, dup
natere, dar apoi apar infecii recurente. Defectul intereseaz o tirozin-kinaz, Btk
(Brutons tyrosine kinase), responsabil, pe de o parte, de maturarea celulelor pre-B, dar,
pe de alt parte, i de semnalizarea intracelular i de activarea celulelor B mature. La
aceti pacieni, exist foarte puine celule B mature n snge i n organele limfoide
secundare. Maturarea i funciile limfocitelor T nu sunt afectate.
Deficiene ale unor clase de Ig. Deficiena selectiv de IgA este cea mai frecvent
ID ereditar (1:700 de indivizi la rasa alb). Manifestrile clinice sunt variate. Unii pacieni
sunt perfect normali, alii prezint ocazional infecii respiratorii i diaree. Defectul l
reprezint un blocaj n diferenierea limfocitelor B cu receptori de tip IgA n plasmocite.
Se descriu deficiene ale unor subclase de IgG: IgG2 i IgG4. Si aceste deficiene se
datoreaz unor defecte de difereniere final a limfocitelor n plasmocite.
Sindromul hiper-IgM X-linkat se caracterizeaz prin deficien de IgG, IgA, IgE
i prin niveluri extrem de crescute (frecvent de 10 ori nivelul normal) de IgM. Pacienii
prezint n periferie i n organele limfoide secundare numeroase plasmocite ce secret
IgM i, frecvent, prezint, de asemenea, autoanticorpi cu specificiti pentru molecule

162

exprimate pe neutrofile, trombocite i eritrocite. Numrul de limfocite B ce exprim IgM i


IgD nu pare afectat, n schimb limfocitele cu receptori aparinnd celorlalte trei clase de
imunoglobuline (IgG, IgA i IgE) sunt absente. Copiii afectai prezint infecii recurente
severe, n special, respiratorii, cauzate de patogeni oportuniti, cum este Pneumocistis
carinii.
Defectul nu intereseaz celulele B, ci molecula CD40L, ce se exprim, n mod
normal, pe membrana limfocitelor Th activate. Interaciunea dintre CD40L i molecula
CD40 exprimat pe limfocitele B iniiaz cel de-al doilea semnal, necesar activrii
limfocitelor B fa de antigene T-dependente. Tot de aceast interaciune depinde i
fenomenul de switch de clas i generarea limfocitelor B de memorie. Defectul CD40L are
ca i consecine blocarea activrii limfocitelor B fa de antigenele T-dependente, absena
switch-ului de clas, ceea ce explic absena IgG, IgA i IgE i imposibilitatea generrii
celulelor de memorie.
Rspunsul celulelor B fa de antigenele T-independente nu este afectat i se
manifest prin producie de IgM.
2. defecte ale limfocitelor T. Pacienii deficieni n limfocite T sunt susceptibili la infecii
cu patogeni oportuniti. Datorit faptului c funcia limfocitelor B este, n cea mai mare
parte, dependent de celulele T, defectele acestora vor produce imunodeficiene combinate,
att ale imunitii celulare, ct i ale celei umorale.
Exemple:
Sindromul DiGeorge, numit de asemenea, sindromul velo-cardio-facial sau
sindromul caracterizat de deleia 22q11.2 a fost descris n 1968 de Angelo DiGeorge,
endocrinolog pediatru. Se asociaz cu defecte congenitale ale organelor ce deriv din
arcurile faringeale 3 i 4 (timus, glande paratiroide, cord, etc). Imunodeficiena este
variabil, n raport cu gradul de afectare a timusului i se manifest printr-o susceptibilitate
crescut fa de infecii. Copiii cu acest sindrom prezint un facies caracteristic:
hipertelorism (ochi ndeprtai), urechi jos implantate, scurtarea filtrului nazal. De
asemenea, apar anomalii ale cordului i ale aortei.
ID combinat sever (SCID severe combined immunodeficiency). Reprezint,
de fapt, o familie de boli, ale cror cauze variaz. Pot fi autosomal recesive i se manifest
numai la homozigoi sau pot fi X-linkate, manifestndu-se, n special, la biei. Se

163

datoreaz unor defecte n dezvoltarea lineajului limfoid i pot afecta fie numai limfocitele
T, fie ambele tipuri de limfocite, T i B.
Clinic, SCID se caracterizeaz printr-un numr redus de limfocite circulante i prin
dificulti de dezvoltare a rspunsurilor imune mediate de limfocitele T. Timusul nu se
dezvolt, nu este populat cu celule precursoare ale LyT i nu va funciona ca organ limfoid
primar, iar puinele limfocite T circulante nu pot prolifera ca rspuns la antigene. SCID se
asociaz cu infecii recurente severe, frecvent fatale, n primii ani de via. Defectele B nu
sunt evidente n primele luni de via, nou-nscuii fiind protejai de anticorpii materni.
Pacienii dezvolt leziuni la nivelul pielii i a mucoaselor, diaree cronic, pneumonii,
frecvent determinate de oportuniti. Viaa unui asemenea pacient poate fi prelungit numai
prin meninerea sa n condiii deosebite de sterilitate.
Studiile privind cauzele SCID au evideniat mai multe defecte diferite. Un defect
mai frecvent este cel reprezentat de mutaii ce se produc la nivelul genei ce codeaz lanul
c ( comun) ce intr n alctuirea mai multor receptori pentru citokine: IL-2, IL-4, IL-7,
IL-9, IL-15.
Un alt defect intereseaz gena ce codeaz o enzim, numit ADA (adenozin
deaminaza), ce este implicat n catabolismul purinelor (catalizeaz conversia adenozinei
n inozin). Enzima este extrem de activ n special la nivelul limfocitelor i deficiena sa
duce la acumularea de produi toxici pentru celule.
Jak-3 kinaza, o enzim implicat n semnalizarea iniiat de interaciunea IL-2/IL2R n limfocitul T, poate fi afectat de mutaii la nivelul genei codante i reprezint o
cauz de SCID.
Alte defecte cunoscute ce conduc la instalarea SCID sau a simptomelor SCID-like
intereseaz:
- molecula ZAP-70, implicat n semnalizarea necesar activrii celulelor T;
- enzima numit PNP (purine nucleoside phosphorylase);
- enzimele RAG-1 sau RAG-2 (recombination-activating proteins), implicate n rearanjarea
genelor necesare generrii receptorilor pentru antigen ai limfocitelor T i B;
- transcrierea genelor ce codeaz moleculele MHC clas II;
- moleculele TAP, vitale pentru prezentarea antigenelor asociate MHC I.
Ataxia-telangiectazia, cunoscut i sub numele de Sindromul Louis-Bar este o
afeciune ereditar rar, neurodegenerativ, extrem de sever, ce se caracterizeaz prin
ataxie progresiv (dificulti n meninerea echilibrului i micri necoordonate),

164

malformaii vasculare (telangiectazii) la nivelul globilor oculari i al pielii, inciden


crescut a infeciilor i a tumorilor i deficien T variabil ca intensitate, ce se poate
asocia cu deficiena uneia sau a mai multor clase de imunoglobuline.
Cauza acestei afeciuni este reprezentat de mutaii produse la nivelul genei ce
codeaz o serin/treonin kinaz, numit ATM (ataxia telangiectazia mutated), a crei funcie
se manifest n situaia n care apar leziuni ale ADN-ului. Ea fosforileaz o serie de
proteine eseniale pentru arestul ciclului celular, repararea ADN-ului sau apoptoza celulei
n care repararea nu se produce. O serie de proteine int ale acestei enzime funcioneaz ca
gene supresoare de tumori, aa cum este p53.
B. defecte ale aprrii nespecifice:
1. defecte ale sistemului complement. La om au fost evideniate deficiene genetice
homozigote pentru aproape toate proteinele componente ale acestui sistem. Aceste
deficiene au ca i consecine afectarea imunitii umorale i persistena complexelor
imune. Tipuri:
- deficiena componentelor cii clasice (C1q, C1r, C1s, C4, C2) determin o
susceptibilitate crescut fa de bolile mediate de complexe imune circulante, cum sunt
lupusul eritematos sistemic, glomerulonefrita, vasculite.
- deficienele n C3, factor H sau factor I se manifest prin infecii bacteriene, recurente,
extrem de severe i, uneori, prin afeciuni mediate de complexe imune.
- deficienele n componentele cii post-C3 (C5, C6, C7 i C8) sau deficiena n factor D
determin susceptibilitate crescut la infecii cu Neisseria gonorrhoeae i Neisseria
meningitidis.
- deficiena n C1 inhibitor (C1Inh) determin o afeciune numit angioedem ereditar,
care se manifest prin episoade recurente de edem cu diferite localizri: intestin (manifestat
prin crampe, vrsturi), ci aeriene superioare. Defectul duce la activarea necontrolat a
cii clasice, cu clivarea continu de C2 i generarea continu de C2a, dar i a altor
molecule vaso-active, cu rol pro-inflamator (induc creterea permeabilitii vasculare, cu
exudarea plasmei).
- deficiene n molecule de control asociate membranelor celulare, cum sunt DAF (decayaccelerating factor) i HRP (homologous restriction factor). Aceste molecule se asociaz
membranelor celulare prin intermediul unor ancore de glicozil fosfatidilinozitol
membranar; defectele acestor ancore duc la absena asocierii DAF i HRP la membranele
celulare, iar eritrocitele sunt lizate necontrolat de ctre sistemul complement, ceea ce

165

conduce la apariia unei situaii patologice numit hemoglobinuria paroxistic nocturn.


Liza crescut a eritrocitelor conduce, mai departe, la instalarea unei anemii hemolitice
cronice.
2. defecte ale fagocitelor:
- boala granulomatoas cronic. Au fost descrise dou forme distincte, una Xlinkat (70% din cazuri) i una autozomal recesiv. Boala se datoreaz unor defecte ale
sistemului NADPH-oxidazei; fagocitele sunt incapabile s formeze metabolii toxici ai
oxigenului, dup ingestia microorganismelor. Patogenii ingerai supravieuiesc n interiorul
fagocitelor, ceea ce iniiaz o reacie mediat celular, ce va duce la formarea
granuloamelor. Celulele mononucleare afectate nu funcioneaz eficient nici ca celule
prezentatoare de antigen, ceea ce compromite ntr-o oarecare msur i activarea
limfocitelor T.
- deficiene n adeziunea leucocitelor (LAD leukocyte adhesion deficiency) se
datoreaz defectelor integrinelor , importante n adeziunea i diapedeza leucocitelor.
Pacienii dezvolt infecii mai mult sau mai puin severe cu bacterii Gram-pozitive, bacterii
Gram-negative, fungi.
- boala Chediak-Higashi, afeciune rar, autozomal recesiv, se caracterizeaz prin
infecii bacteriene recurente, albinism oculo-cutanat parial (absena melaninei din piele,
iris) i infiltrarea important a organelor cu celule limfoide. Pacienii prezint fagocite cu
granule mari n citoplasm, dar care nu pot distruge materialul internalizat prin fagocitoz.
Se datoreaz unui defect ce apare la nivelul unei gene ce codeaz o protein numit LYST
(lysosomal trafficking regulator). Proteina controleaz traficul proteinelor ctre lizozomi i
blocarea funciei ei duce la blocarea fuziunii lizozomilor cu fagozomii i la imposibilitatea
uciderii microorganismelor internalizate.
- sindromul leucocitelor lenee se caracterizeaz printr-un rspuns anormal al
neutrofilelor la stimulii chemotactici.

166

Imunodeficiene secundare Infecia HIV/SIDA


n 1981 au fost descrise primele cazuri de SIDA (sindromul imunodeficientei
umane dobndite), sindrom care interesa indivizi tineri i care se caracteriza printr-o
susceptibilitate crescut la infecii cu patogeni oportuniti (ex. pneumonie cu Pneumocystis
carinii) sau prin asocierea unor forme agresive de tumori (ex. sarcom Kaposi), manifestri
nsoite de o scdere important a numrului de Ly T CD4+. n 1983, agentul responsabil a
fost identificat (independent, de 2 grupuri conduse de Luc Montagnier i Robert Gallo) i
numit virusul imunodeficienei umane dobndite (HIV human immunodeficiency virus),
un retrovirus din familia lentivirusurilor, cu potenial citopatic (de obicei, ucide celula pe
care o infecteaz). Au fost identificate dou tipuri nrudite: HIV-1, care determin cea mai
mare parte a mbolnvirilor din ntreaga lume i HIV-2, prezent aproape exclusiv n vestul
Africii, mai puin patogenic pentru om.
Ci de transmitere a HIV:
- cale parenteral (utilizare de snge sau derivate de snge infectat; utilizare de
instrumentar contaminat; utilizarea n comun a acelor de sering n grupurile
consumatorilor de droguri);
- cale sexual (act sexual neprotejat, n cupluri homo-sau heterosexuale, n care unul din
parteneri este infectat);
- transmitere mam-ft, fie trans-placentar, fie, dup natere, prin lapte.
Structura i genele HIV (fig. 91)
Particula infectant (virionul) este alctuit din dou molecule identice de ARN,
plasate n interiorul unei capside format din proteine virale, nconjurat de o anvelop cu
structura bilipidic derivat din membranele celulelor gazdei, motiv pentru care la acest
nivel sunt exprimate o serie de molecule de adeziune (LFA-1, ICAM-1, CD44), dar i
componenete ale sistemului complement ce funcioneaz ca i proteine de control (DAF,
MIRL, MCP). La nivelul anvelopei sunt exprimate, de asemenea, proteine codate de
genomul viral, dintre care cele mai importante sunt gp120 i gp41, provenite dintr-un
precursor comun, gp160, implicate n medierea intrrii virusului n intele celulare.
ntre anvelopa viral i capsid exist un strat sferic numit matrice, compus n
special dintr-o protein structural viral, numit p17. La acest nivel se mai gsesc i alte

167

proteine, cum sunt Vif, Vpr, Vpu i Nef. Capsida HIV este compus din copii multiple ale
unei alte proteine structurale, numit p24.

Fig. 91. Structura HIV (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman and Company,
2000)

Organizarea genomului HIV este, n mare parte, similar celorlalte retrovirusuri i


include mai multe elemente:
- cnd genomul HIV este integrat n genomul celulei parazitate, este ncadrat la capetele 5
i 3de secvene numite LTR (long terminal repeats), care intervin n promovarea
transcripiei genomului viral de ctre ARN polimerazele nucleare i n translaia mARN
viral la nivelul ribozomilor;
- gena gag codeaz proteinele structurale ale matricii i ale capsidei virale;
- gena env codeaz glicoproteinele anvelopei gp120 i gp41, necesare pentru infectarea
celulelor;
- gena pol codeaz enzimele virale eseniale, revers-transcriptaza, integraza i proteaza;
- gene reglatoare - tat i rev;
- gene accesorii - vpr, vif, nef i vpu.
Ciclul de via al HIV. Primul pas al infeciei const n ataarea virionului de
celula int i ptrunderea n interiorul acesteia. HIV infecteaz predominant limfocitele T
CD4+, dar i alte celule CD4+, cum sunt macrofagele, celulele Langerhans, celulele
dendritice, preferin ce se datoreaz legrii cu mare afinitate a gp120 de moleculele CD4.
Interaciunea nu este ns suficient pentru ca virusul s penetreze membrana intei. Este
necesar interaciunea virusului cu alte molecule exprimate normal pe membranele celulare
i care funcioneaz ca receptori pentru chemokine. Acestea sunt CXCR4, exprimat de Ly

168

T CD4+ i de celulele dendritice i CCR5 de pe membrana macrofagelor, a celulelor


dendritice i a limfocitelor T CD4+.
Dup ce virionul a intrat n celul, proteazele gazdei ndeprteaz capsida viral,
enzimele virale se activeaz i ncepe ciclul reproductiv al HIV. Revers-transcriptaza
transcrie ARN-ul viral n ADN complementar (cADN), iar integraza mediaz integrarea
ADN-ului proviral n genomul celulei parazitate. Forma de ADN integrat a HIV se
numete provirus i acesta poate rmne inactiv transcripional luni sau ani, perioad n
care se produc cantiti foarte mici sau nu se produc deloc proteine virale sau virioni (fig.
92). Virusul poate rmne latent un timp ndelungat n celule.

Fig. 92. HIV ciclu de via

Replicarea HIV apare odat cu activarea celulelor parazitate. Activarea Ly T


iniiaz i transcripia genomului viral, iar ADN polimerazele celulei infectate mediaz
transcripia ADN proviral n ARN viral. Genomul viral nou sintetizat i proteinele
structurale sunt supuse unor procese de maturare prin clivaj mediat de proteaza viral i
apoi sunt asamblate n particule virale (virioni), care nmuguresc pe suprafaa celulei
infectate i apoi se desprind, putnd infecta alte celule (fig. 92). HIV se replic foarte rapid

169

i acumuleaz multiple mutaii pe parcursul infeciei la acelai individ. Apar astfel,


numeroase variante antigenice de HIV n acelai individ, numite cvasispecii. Acestea au
roluri importante n eludarea RI i n rezistena la tratament.
Patogenia infeciei HIV. Evoluia clinic tipic a infeciei HIV cuprinde 3 faze:
infecia primar, perioada de laten clinic i stadiul simptomatic, sindromul SIDA.
Aceste faze se desfaoar pe o perioad variabil ntre 8-10 ani. Infecia HIV are drept
rezultat final alterarea att a imunitii specifice, ct i a celei nespecifice, cea mai
important fiind funcionarea deficitar a imunitii mediate celular.
Infecia primar (2-6 sptmni). Ptrunderea HIV n organism poate fi
asimptomatic sau nsoit de simptome nespecifice: febr, cefalee, mialgii, limfadenopatie
generalizat, etc. Lipsa de specificitate a manifestrilor clinice face dificil diagnosticul
clinic. Diagnosticul serologic este i el dificil, deoarece anticorpii anti-gp120, anti-gp24
pot fi detectai abia dup 3-8 sptmni de la expunere, fenomen numit seroconversie. n
aceast perioad, diagnosticul se bazeaz pe detectarea antigenului p24 sau a genomului
viral (prin reacia de amplificare genic - PCR) fie n fluidele organismului, fie n celulele
infectate i prin cultivarea virusului. n aceast perioad, cnd nu exist nc suspiciunea
clinic de infecie, pacientul prezint cel mai mare risc de contaminare a altor persoane.
Dup intrarea n organism, virusul este transportat de ctre celulele deja parazitate
n organele limfoide secundare (ganglioni, MALT, splin) unde se replic intens i este
diseminat n tot sistemul limfatic. n aceast perioad, poate fi detectat n snge i n LCR
i induce scderea marcat a Ly T CD4+. Viremia acut induce RI. Relativ precoce sunt
activate Ly T CD8+ specifice i sunt generate CTLs i abia apoi apar anticorpii anti-HIV.
Rspunsul CTL pare s fie cel mai important n controlul viremiei, reuind s determine
scderea dramatic a nivelului seric al virusului i creterea numrului Ly T CD4+, fr
ns, s se mai ating numrul normal al acestora (800/mm3 fa de valoarea normal de
1000-1200/mm3). Dei RI fa de HIV se instaleaz relativ precoce i reuete s
controleze viremia iniial, eliminarea sa nu este complet, el persistnd n organele
limfoide secundare, sedii importante de replicare continu a virusului i de infectare
permanent a noi celule. Spre deosebire de limfocitele T CD4+, macrofagele i celulele
dendritice sunt relativ rezistente la distrugerea de ctre virus, de aceea ele reprezint un
rezervor important de virusuri.
Faza de laten clinic poate dura n medie 10 ani. n aceast faz, virusul
extracelular este absent din fluidele corporale i din Ly T CD4+ din sngele periferic.
Totui infecia progreseaz, cu creterea numrului de celule infectate. Clinic, bolnavii

170

prezint limfadenopatie generalizat, dar SI este competent fa de majoritatea agenilor


infecioi. Spre finalul acestei faze, unii bolnavi pot dezvolta un grup de simptome, numite
ARC (AIDS related complex): febr, transpiraii nocturne, scdere ponderal, diaree,
limfadenopatie generalizat, erupii cutanate. Caracteristic perioadei de laten este
scderea progresiv a numrului de Ly T CD4+. Mecanismele responsabile de depleia
celulelor T CD4+ sunt controversate; se descriu mecanisme directe i indirecte. Se pare c
virusul poate ucide celula parazitat direct, prin liz osmotic sau prin interferarea cu
sinteza proteic. Mecanismele indirecte se refer la Ly T citotoxice ce ucid celulele
infectate. In ciuda unei rate crescute de distrucie a limfocitelor T CD4+, numrul acestora
rmne, mult timp, relativ crescut, datorit capacitii enorme a mduvei hematopoietice de
a produce noi celule.
Stadiul simptomatic SIDA. Cnd numrul de limfocite T CD4+ scade sub un nivel
critic (<200/mm3) apare creterea dramatic a replicrii virale i a viremiei. Se intensific
progresiv susceptibilitatea la infecii i neoplazii, manifestri clinice caracteristice SIDA:
infecii cu patogeni oportuniti (candidoze, pneumonie cu Pneumocystis carinii, infecii cu
virus citomegalic, Mycobacterium tuberculosis, herpes zoster), neoplazii ca sarcomul
Kaposi - tumor indus de herpesvirusul uman 8 - sau limfoame i degenerarea SNC
(encefalopatia progresiv din SIDA, demena). Cnd numrul de limfocite T CD4+ scade
sub 50/mm3, moartea este iminent n absena unui tratament anti-viral.
Excepii:
- non-progresorii de lung durat: persoane infectate, cu viremie absent sau
redus, nivele normale circulante de Ly T CD4+, CTL i seroconversie prezente i la care
boala nu progreseaz;
- indivizii rezisteni la infecie: posibil datorit unor defecte genetice ale
receptorilor pentru chemokine;
- seronegativii expui: prezint CTL i Ly Th1 specifice HIV, dovada contactului
cu virusul.
Tratamentul intete blocarea ciclului de via viral n cteva puncte cheie. Se
utilizeaz medicamente care interfer cu revers-transcripia ARN-ului viral n ADNc
(analogi de nucleozide - zidovudina), inhibitori de proteaz, ce blocheaz maturarea
proteinelor virale i formarea virionilor i blocani ai integrrii genomului viral n genomul
celulei parazitate (inhibitori ai integrazei virale) (fig. 93).

171

Fig. 93. Tinte pentru terapia anti-HIV (adaptat dup Kuby Immunology, fourth ed. WH Freeman
and Company, 2000)

172

Mecanisme de aprare la nivelul cavitii orale (Petru Cianga)


Sistemul imun de la nivelul cavitii orale este o parte important a sistemului
limfoid asociat mucoaselor (MALT), prezentnd att asemnri cu acesta, dar i o serie de
particulariti. Efectorii generai n cursul rspunsurilor imune dezvoltate la acest nivel
provin, pe de o parte, de la nivelul sistemului imun local, reprezentat de glandele salivare
majore i minore, dar i din periferie, transportai prin intermediul lichidului crevicular.
Dinii reprezint diferena cea mai evident dintre cavitatea bucal i esuturile
restului aparatului digestiv, iar jonciunile pe care acetia le formeaz prin inseria n gingie
permit accesul multor molecule serice i celule ale SI la nivelul suprafeei mucoase.

Aprarea nespecific - molecule


Cavitatea bucal reprezint un situs confruntat continuu cu un numr foarte mare de
antigene. Unele sunt aduse n organism prin alimentaie, altele sunt reprezentate de cele
peste 500 de specii bacteriene, ce au ca habitat aceast localizare anatomic. Principalele
bariere ce intervin n protecie la acest nivel, avnd ca scop prevenirea penetrrii de ctre
antigene n esuturile subjacente i, mai departe, n organism sunt mucoasa oral i
secreia fiziologic de mucus.
Epiteliul mucoasei orale este asemntor pielii, fiind alctuit din keratinocite ce
ader unele de altele prin desmozomi (complexe ce conin desmogleine i desmocoline).
Este acoperit de mucus, substan relativ vscoas, ce funcioneaz ca barier eficient n
protecia celulelor epiteliale, n sensul c numeroase microrganisme sunt imobile n acest
gel i nu pot adera de epiteliu. Mai mult, secreia continu de saliv i ndeprtarea ei
inhib, suplimentar, ataarea antigenelor.
Mucusul conine o larg varietate de molecule, printre care mucinele, ale cror
particularitile structurale i funcionale i asigur consistena de gel i elasticitatea
necesar pentru a funciona ca barier, dar i ca filtru cu permisivitate selectiv.
La nivelul mucoasei, a epiteliului de acoperire i n saliv au fost descrise o serie de
componente moleculare i celulare ale sistemului imun.
Componentele moleculare ale SI nespecific coninute n saliv sunt reprezentate
de mucine, lizozim, lactoferin, peroxidaz i de o serie de peptide cu activitate
antimicrobian, cum sunt histatinele, -defensinele, inhibitorii de proteaze.

173

Mucinele intervin n protecia anti-bacterian prin legarea patogenilor complexai


cu anticorpi. Se pare c IgG interacioneaz cu mucinele prin intermediul unei molecule
evideniate n mucus, numit FcBP (IgG Fc binding protein), iar IgA prin intermediul
componentei secretorii.
De asemenea, la nivelul cavitii orale au fost identificate dou mucine particulare,
numite mucinele salivare MG1 i MG2, secretate de glandele submandibular, sublingual
i de glandele salivare minore. Aceste glicoproteine intervin n protecie, pe de o parte, prin
cptuirea suprafeelor mucoasei i a dinilor i, pe de alt parte, prin abilitatea de a
controla i de a modula aderarea i dezvoltarea florei microbiene locale.
Lizozimul este o enzim antimicrobian secretat n special de glandele salivare
mucoase, cu potenial de interaciune i de distrugere a membranelor multor bacterii.
Lactoferina este o protein secretat de glandele salivare seroase, a crei capacitate
de a lega fierul, element esenial pentru creterea bacteriilor, reprezint un mecanism
eficient anti-bacterian. In vitro i pe modele animale, s-a demonstrat c lactoferina
ntervine

inhibarea

aderrii

unor

microorganisme

(Actinobacillus

actinomycetemcomitans) la epiteliul mucoasei i c blocheaz intrarea HIV n celulele


int, prin interaciunea cu moleculele CXCR4 i CCR5.
Peroxidaza salivar, hidrogenul peroxid i ionii tiocianat reprezint un alt
sistem antimicrobian de la nivelul cavitii orale. Enzima catalizeaz reacia de peroxidare
a ionilor de halogen (Cl-, Br-, I-) i tiocianat (SCN-), ceea ce genereaz produi cu potenial
antimicrobian. n absena ionilor, peroxidaza transform H2O2 n ap i oxigen, activitate
ce previne acumularea produilor toxici generai prin reaciile de reducere a oxigenului.
Histatinele sunt o familie de 12 proteine cationice secretate de glandele salivare. In
vitro, sunt internalizate de ctre patogeni i, la nivelul mitocondriilor, inhib respiraia
celular i genereaz specii de oxigen reactive, care conduc la moartea celular. Histatinele
inhib creterea S. mutans, hemaglutinarea B. gingivalis, blocndu-i colonizarea i coagregarea dintre P. gingivalis i S. mitis.
Cistatinele salivare umane (numite SN, SA, S i D) sunt membri ai superfamiliei
cistatinelor, molecule ce prezint potenialul de a inhiba cistein-proteinazele. De exemplu,
SN inhib in vitro catepsinele lizozomale umane B, H i L, implicate n distruciile tisulare
din parodontite, n timp ce cistatina S intervine n meninerea echilibrului mineral al
dinilor; leag hidroxiapatita i este component major al smalului. Cistatinele SN i SA
inhib cistein-proteinaze aduse n organism prin alimentaie, de exemplu, papaina, de
origine vegetal, manier prin care proteinele salivare sunt protejate de degradare.

174

SLPI (secretory leukocyte protease inhibitor) este o protein secretat de


parotide i glanda submandibular, identificat n secreia lactat, n secreiile genitale i n
saliv, ce funcioneaz ca inhibitor de serin-proteaze. In vitro, la concentraii comparabile
cu cele salivare, SLPI blocheaz infectarea de ctre HIV a celulelor int, macrofage i
limfocite T, ceea ce explic, cel puin parial, rata sczut a transmiterii virusului pe cale
oral, aspect evident la copiii nscui din mame infectate, hrnii la sn.
Peptidele antimicrobiene endogene. La om, principalele peptide sunt defensinele
i cathelicidinele. Au fost descrise peste 100 de molecule diferite aparinnd la trei tipuri
de defensine. -defensinele (18 reziduuri de aa) cu structur circular, -defensinele
alctuite din 29-35 de reziduuri de aa i -defensinele, formate din peste 45 de reziduuri de
aa.
-defensinele sunt sintetizate, n special, de neutrofile, n timp ce multe epitelii
umane produc constitutiv -defensine. Sinteza acestor molecule poate fi indus de semnale
asociate reaciilor inflamatorii.
Defensinele intervin n protecie, exercitnd o serie de efecte anti-bacteriene, antivirale i anti-fungice, dar prezentnd i potenial citotoxic asupra celulelor normale sau
tumorale. Au fost identificate defensine ce funcioneaz, in vitro, ca factori chemotactici
pentru monocite, limfocite T i celule dendritice imature, sau defensine care stimuleaz
producia de interleukin-8 (IL-8), factor chemotactic, n special, pentru neutrofile.
Zona gingival care nconjoar dinii conine un numr mare de neutrofile i de
compui eliberai din acestea. Concentraia defensinelor neutrofilice, la acest nivel, este
considerabil i probabil este implicat n controlul proliferrii multor microorganisme.
Importana neutrofilelelor la acest nivel este susinut, pe de o parte, de impactul sever al
neutropeniei asupra integritii mucoaselor oral i gastrointestinal i, pe de alt parte, de
severitatea formelor de parodontit la pacienii cu deficiene congenitale sau dobndite ce
intereseaz aceste celule.

Aprarea specific - molecule


Componentele moleculare ale sistemului imun specific din saliv sunt reprezentate
de imunoglobuline solubile ce aparin claselor (izotipurilor) IgA, IgG i IgM.
n saliv, predomin IgA. Sunt prezente ambele subclase, IgA1 i IgA2, ntr-un
raport de aproximativ 55:45.

175

Peste 80% din molecule sunt secretate la nivelul glandelor parotide,


submandibulare i sublinguale, restul la nivelul glandelor salivare minore. In saliv, IgA se
gsete sub form de dimeri, asociai cu componenta secretorie (IgA-secretorie (IgA-s).
S-IgA nu funcioneaz ca opsonin i nu activeaz sistemul complement. Cel mai
probabil, aceste molecule intervin n aprarea local prin neutralizarea unor virusuri i a
unor toxine bacteriene, prin blocarea aderenei i, posibil, i a creterii unor
microorganisme la nivelul epiteliului i al dinilor, prin inhibarea accesului antigenelor la
esuturile subjacente. De asemenea, IgA interacioneaz i coopereaz cu factori ai aprrii
nespecifice, ca mucinele, lizozimul, lactoferina, etc.
In saliv sunt prezeni i monomeri de IgA, (aproximativ 20% din totalul IgA
salivar), imunoglobuline G (IgG) i imunoglobuline M (IgM). Cea mai mare parte dintre
aceti anticorpi provine din circulaia sistemic, fiind prezeni n lichidul crevicular, restul
fiind secretai de plasmocitele localizate la nivelul mucoasei orale.

Sistemul imun al cavitii orale componenta celular


O larg varietate de celule, localizate n cavitatea oral, intervine n protecia
tisular. Keratinocitele orale exprim receptori Toll-like, fiind capabile s interacioneze cu
multe microorganisme i s produc citokine ce contribuie la dezvoltarea reaciilor
inflamatorii. Printre keratinocite sunt localizate numeroase celule Langerhans, importante
celule prezentatoare de antigen (APC antigen-presenting cells), dar i celule ale aprrii
specifice, cum sunt limfocitele T. n mucoas i submucoas sunt localizate macrofage,
mastocite, celule NK, limfocite T i plasmocite, celule ce alctuiesc mpreun agregate de
esut limfoid localizat, n special, n jurul ductelor glandelor salivare minore de la nivelul
mucoasei bucale.
La toate acestea se adaug celule ce provin din circulaia sistemic, mucoasa bucal
fiind extrem de bine vascularizat. n situsurile inflamatorii de la nivelul cavitii bucale se
pot acumula numeroase neutrofile, monocite i macrofage, celule NK, limfocite T, dar i
fibroblaste, atunci cnd e nevoie de reparare tisular.
n plus, exist esut limfoid localizat n vecintatea cavitii orale, reprezentat de
amigdale (inelul lui Waldayer) i de ganglionii limfatici regionali, situsuri majore de
activare specific i de generare a rspunsurilor imune.

176

Aspecte clinice i imunologice n parodontite i n caria dentar


Parodontite
Parodontitele sunt o familie de boli inflamatorii nrudite, care afecteaz osul
alveolar, ligamentele periodontale i esuturile moi din jurul dintelui, reprezentnd cauza
major a pierderii dinilor la adult. Dei au etiologie bacterian, numeroi factori ai gazdei
par s fie implicai n susceptibilitatea la aceste tipuri de infecii, n iniierea i n evoluia
lor. Unele forme de parodontite sunt manifestri ale unor anormaliti n funcionarea SI
sau ale unor boli sistemice (ex. diabetul zaharat).
Caracteristici ale parodontitelor
Semnul precoce al parodontitei este inflamaia acut a gingiei din jurul coletului
dinilor. n acest stadiu, boala este numit gingivit i este cauzat de acumularea plcii
microbiene pe suprafaa dinilor, la nivelul marginii gingivale. Prezena microorganismelor
din compoziia plcii bacteriene determin dezvoltarea unei reacii inflamatorii acute,
caracterizat de activarea SC i acumularea unui infiltrat celular dominat de neutrofile.
Boala, n acest stadiu, are caracter reversibil i poate fi urmat de vindecare i cicatrizare.
Cnd procesul inflamator se extinde de la suprafaa tisular ctre regiunile mai
profunde, afectnd osul alveolar i ligamentele periodontale, boala se numete parodontit.
Toate formele de parodontite sunt infecii, cauzate de anumite specii bacteriene,
majoritatea gram-negative, anaerobe, cum sunt Actinobacillus actinomycetemcomitans,
Porphyromonas gingivalis, Bacteroides forsythus, etc.
Bacteriile patogene colonizeaz, cresc i se extind de-a lungul interfeei dintre
suprafaa rdcinilor dintelui i esuturile implicate n ataarea acestora n osul alveolar.
Bacteriile i produii lor iniiaz i menin un proces inflamator cronic i distructiv.
Infiltratul dominat de neutrofile, caracteristic inflamaiei acute din gingivit, este nlocuit
de un infiltrat dominat de limfocite (n special Ly T CD4+), de macrofage (ce
funcioneaz, probabil ca APC-uri, dar care sunt i celule efector ce elibereaz enzime
litice) i de rare plasmocite. Ulterior, plasmocitele se acumuleaz n numr mare n situsul
inflamator, n special plasmocite ce secret IgA. n paralel, antul dento-gingival se
adncete, colagenul implicat n ataarea dintelui se degradeaz i vor apare pungile
parodontale. n leziunile avansate, infiltratul celular este polimorf, se produce distrucia

177

colagenului aparatului ligamentar, apar leziuni ulcerative la nivelul pungilor parodontale,


modificri degenerative ale keratinocitelor, toate cu progresie ctre apexul dintelui.
Caracteristic pentru leziunea avansat este apariia fenomenului de osteoliz i resorbia
osului alveolar.
Semnele ce permit diagnosticul parodontitelor includ prezena plcii bacteriene,
semne de inflamaie acut sau cronic a esuturilor gingivale, sngerri spontane sau
provocate, formarea pungilor parodontale, apariia unui exudat n jurul coletului dentar,
detaarea esuturilor gingivale de pe rdcinile dinilor, mobilitate a dinilor. Fenomenele
distructive din parodontite nu evolueaz ntr-un ritm constant, progresia este, de obicei,
episodic, cu perioade de exacerbare i perioade de repaus. Boala este, n general,
nedureroas, cel puin pn n stadiile avansate.
Tipuri clinice de parodontite
Au fost descrise mai multe forme de parodontite, care difer ntre ele prin etiologie,
istoria natural, progresie i rspunsul la terapie. Academia American de Parodontologie
recunoate urmtoarele forme de parodontite:
1. Parodontita adultului
Reprezint forma cea mai frecvent, apare dup vrsta de 35 de ani, este frecvent
generalizat, afectnd mai muli dini, n special molarii i incisivii. Pattern-ul de distrucie
este n general bilateral, simetric. Tesuturile gingivale prezint semne de inflamaie cronic
i pot fi subiate i fibrotice. Pungile parodontale sunt situsuri active, ocupate de o
microflor complex.
2. Parodontita cu debut precoce:
A). P. prepuberal. Poate evolua n forma localizat sau generalizat. Forma
generalizat este extrem de distructiv i rapid progresiv. Distrugerea osului alveolar
apare i se produce foarte rapid, astfel nct, pierderea dentiiei primare poate apare n
primii 2-3 ani de via. Biopsia esuturilor gingivale evideniaz absena PMN-urilor i un
infiltrat dens de limfocite, n care predomin plasmocitele. Forma generalizat se asociaz
la copiii mici cu sindromul LAD (leukocytes adhesion deficiency syndrome). Forma
localizat se asociaz frecvent cu deficiene n chemotaxia PMN-urilor.
B). P. juvenil. Se descriu o form localizat i una generalizat. Debuteaz
frecvent n perioada peri-puberal. Leziunile pot progresa rapid imediat dup debut, dar
distrucia tisular poate s nu apar. Muli pacieni prezint titruri serice crescute de
anticorpi specifici pentru determinani antigenici ai A. Actinomycetemcomitans, sugernd

178

c aceast bacterie este agentul etiologic. Aproximativ 75% dintre pacieni prezint
anormaliti n chemotaxia PMN-urilor.
C). P. rapid progresiv. Debuteaz frecvent n jurul vrstei de 20 de ani, dei s-au
descris i cazuri cu debut n perioada pubertate-35 de ani. Progresia bolii poate fi extrem de
rapid, distrucia osului alveolar producndu-se n 2-3 luni i interesnd 30-40% din acesta.
n timpul perioadei de progresie, gingia prezint semne de inflamaie acut, exudat n
pungile parodontale i se poate asocia cu semne generale: stare de ru, scdere ponderal,
inapeten. Dup episoade de progresie, boala poate deveni inaparent. Porphyromonas
gingivalis pare s fie implicat n aceast form de parodontit i muli pacieni prezint
deficiene n chemotaxia PMN i a monocitelor.
3. Parodontita asociat unor boli sistemice
Multe afeciuni sistemice par s predispun indivizii la diverse forme de
parodontite. Printre ele amintim: diabetul zaharat insulino-dependent, forme variate de
neutropenie, imunodeficiene primare i secundare (infecia HIV).
4. Parodontita ulcero-necrotic
Este o form rar de parodontit, precedat de gingivit acut ulcero-necrotic.
5. Parodontita refractar
Se descrie un procent mic de pacieni ale cror parodontite nu rspund la terapie.
Aspecte imunologice n parodontite
Studiile imunologice efectuate pn n prezent au evideniat o serie de mecanisme
implicate n patogenia i n evoluia parodontitelor.
Cei mai muli dintre pacienii cu parodontite juvenile i rapid progresive monteaz
n prezena plcii bacteriene un rspuns imun umoral, manifestat prin secreie de IgG, n
special IgG2, o subclas considerat relativ ineficient n opsonizare i n potenarea
fagocitozei bacteriilor de ctre PMN. Acest rspuns imun ineficient ar putea fi explicat de
apariia unui dezechilibru n balana Th1/Th2, n favoarea rspunsului mediat de efectori
de tip Th2, care, prin citokinele pe care le secret (IL-4, IL-5, IL-10, IL-13), inhib
imunitatea celular, favoriznd-o pe cea umoral, ineficient fa de bacteriile gramnegative implicate n etiologia parodontitelor.
Unii autori au evideniat capacitatea unor bacterii anaerobe de a induce apoptoza n
efectorii SI, mecanism prin care aceste microorganisme se sustrag RI.
Pare evident, n acest moment, asocierea aproape specific a anaerobilor gramnegativi cu infeciile orale cronice. Profilul citokinic, mai degrab inhibitor, indus de

179

aceste microorganisme, ar putea reprezenta un adevarat avantaj selectiv, permindu-le


acestora s evite dezvoltarea unei aprri eficiente. n acest fel, ei pot supravieui n
situsurile inflamatorii perioade ndelungate. Rspunsurile inflamatorii asociate infeciilor
cu aceste bacterii sunt cronice, trenante i local distructive. n bolile parodontale,
inflamaia cronic se nsoete de efecte secundare nedorite, cum sunt afectarea osului
alveolar, a ligamentului parodontal i a esuturilor moi adiacente.

Caria dentar
Este una dintre cele mai frecvente afeciuni, interesnd aproape 95% din populaia
uman din rile dezvoltate. Poate fi definit ca o distrucie localizat a esutului dintelui
indus

de

bacterii.

Dizolvarea

cristalelor

de

hidroxiapatit

precede

pierderea

componentelor organice ale smalului i ale dentinei. Demineralizarea pare s fie cauzat
de acizii ce rezult din fermentaia bacterian a carbohidrailor din alimentaie. Suprafaa
dintelui este afectat diferit: sunt mai frecvent afectate ariile ce nu pot fi curate eficient
cum sunt fisurile i spaiile dintre dini. Leziunea cauzat de carie este ireversibil.
Ageni etiologici. n populaia uman, asocierea cea mai important a cariei este cu
streptococii orali (ex. Streptococcus mutans), dar i diferii lactobacili sau specii de
Actinomyces par s fie implicai n etiologia cariei.
Mecanisme de aprare anti-carie. Cavitatea bucal reprezint unul dintre sediile
cele mai ncrcate cu bacterii, iar reaciile de aprare i de control ale gazdei cuprind
ntreaga activitate antimicrobian nespecific i specific.
Lactoferina, lizozimul, peroxidaza salivar, diferite glicoproteine cu rol aglutinant
(aglutinine), leucotaxina salivar sunt prezente n cantiti constante n saliv, asigurnd
mijloacele aprrii nespecifice. Unii din aceti factori, chiar dac nu au memorie
imunologic i nu sunt subiectul stimulrii specifice pot aciona mpreun cu
imunoglobulinele salivare, susinndu-se reciproc n activitatea antimicrobian.
Aprarea antibacterian specific este asigurat de activitatea sistemului imun
oral reprezentat n cea mai mare parte de anticorpii salivari provenii din esutul limfoid
asociat mucoaselor, reprezentai de imunoglobulina A secretorie (IgA-s) i de anticorpii
serici prezeni n lichidul crevicular, provenii prin transudare din ser (IgM, IgG i IgA).
Majoritatea studiilor au demonstrat c patogenicitatea bacteriilor cariogene (S.
mutans, S. sobrinus) este controlat de anticorpii salivari, ntre care IgA este izotipul

180

major. La nivelul coletului, pe lng saliv exist lichidul sau fluidul crevicular care
conine IgG, IgA, IgM i componente ale sistemului complement care provin din circulaie
i a cror concentraie crete n cazul unei inflamaii gingivale sau parodontale. IgAsecretorie (IgA-s) se prezint numai sub form dimeric, ca produs al plasmocitelor din
glandele salivare.
Sistemul imun oral are un rol bine definit n asigurarea rezistenei gazdei la carie,
pacienii cu o aprare specific deficitar sau chiar absent, reprezentnd un grup cu risc
cariogen major. Chiar dac maladia carioas este de natur infecioas, este dificil de
stabilit cu exactitate rolul factorilor antibacterieni n aprarea gazdei, deoarece intervin i o
serie de ali parametri, cum sunt compoziia polimicrobian i metabolismul diferit al plcii
bacteriene n funcie de vrst, capacitatea tampon a mediului salivar, tipul i frecvena
aportului de zahr, proprietile fizico-chimice ale suprafeei dure dentare.
Rezultatele a numeroase studii susin faptul c protecia imun anti-cariogen, prin
anularea sau blocarea factorilor de virulen, are drept consecin inhibarea colonizrii
suprafeelor dentare cu microorganisme cariogene. Formarea plcii bacteriene reprezint
un fenomen ordonat, cu o strict etapizare, ce depinde n mare msura de capacitatea
componentelor ei odontopatogene de a adera pe suprafeele existente la acest nivel.
Adeziunea microbian la pelicula dobndit (succesiunea primar) i la coloniile
bacteriene organizate anterior (succesiunea secundar) se gsete sub controlul unor factori
i a unor mecanisme independente sau dependente de glucoz.
Streptococii mutans ader pe diferite substraturi biologice cu ajutorul unor structuri
de suprafa celular, cum sunt adezinele. n serotipul C al Streptococului mutans, au fost
identificate i purificate 2 proteine de la nivelul peretelui bacterian. Cel mai mare dintre
aceste antigene, a putut fi separat n 2 componente antigenice i a fost denumit AgI/II (B
sau PL). Cel mai mic a fost denumit 3 sau A. IgA-s, prin interaciunea cu antigenele
membranare bacteriene, blocheaz capacitatea acestora de a adera la placa bacterian,
inhibnd, n acest fel, una din etapele cheie n apariia cariei dentare. De asemenea, s-a
demonstrat c interaciunea IgA-s cu molecule exprimate pe membrana patogenilor induce
modificri importante n proprietile fizico-chimice ale microorganismelor. De exemplu,
creterea hidrofiliei bacteriene amplific posibilitatea ca celulele bacteriene s aglutineze
sau s formeze conglomerate sub aciunea mucusului salivar, agregate care sunt mult mai
rapid eliminate din cavitatea bucal.
n ceea ce privete faza acumulrii microorganismelor n placa bacterian,
dependena de glucoz i zaharoz i activitatea lor metabolic, n special producerea de

181

acid, menionm c IgA salivar s-a dovedit activ i eficient n inhibarea funciilor unor
enzime, cum este glicozil-transferaza, prin blocarea poriunii catalitice sau a aceleia care
leag glucanii. Anticorpii pot, de asemenea, provoca modificri conformaionale la nivelul
enzimelor, ceea ce duce, n final, la scderea sintezei de glucan. Reducerea cantitativ a
acestui produs - substratul odonto-patogen al plcii bacteriene - va inhiba activitatea
cariogen bacterian.
Formarea unei plci bacteriene groase i impermeabile cu coninut bogat n
glucan - favorizeaz adeziunea cu predilecie a S. mutans prin fenomenul de succesiune
secundar. Aceast afinitate specific pentru substratul glucanic se explic prin sinteza de
ctre acest tip de microorganism a unei proteine ce leag glucanii (GBP glucan-binding
protein). Anticorpii salivari anti-GBP s-au dovedit eficieni n a asigura, suplimentar, un
mediu carioprotectiv.
n ceea ce privete mecanismele protective exercitate de anticorpii serici, s-a
demonstrat c IgG pot funciona ca opsonine, facilitnd fagocitoza bacterian. De
asemenea, complexele imune formate cu participarea IgG pot activa sistemul complement,
ceea ce duce la liza intelor celulare i la medierea unei reacii inflamatorii eficiente. Se
presupune c acest mecanism se manifest n special n zonele cervicale ale dinilor, acolo
unde suprafeele dentare sunt scldate de fluidul crevicular, n care anticorpii serici sunt
prezeni n cantiti semnificative.
Recent, n canaliculele dentinare au fost puse n eviden IgG serice ce provin din
capilarele pulpare. Teoretic, producerea IgG sau a altor anticorpi serici specifici fa de
unii factori de virulen bacterieni (AgI/II, GTF) pot constitui o barier n calea invaziei
bacteriene n canaliculele dentinare, modulnd rezistena esuturilor gazdei la atacul
cariogen.
Anticorpii serici exercit multiple aciuni protective care pot fi sintetizate astfel:
- inhib aderena bacterian prin:
- blocarea moleculelor de adeziune;
- aglutinarea bacteriilor;
- inhib funcionarea enzimele bacteriene;
- mediaz bacterioliza;
- opsonizeaz bacterii;
- intervin n inducerea inflamaiei la nivelul esuturilor gingivale.

182

Bibliografie:
Ahlfors E, Jonsson R, Czerkinsky C. Experimental T cell-mediated inflammatory
reactions in the murine oral mucosa. II. Immunohistochemical characterization of resident
and infiltrating cells. Clin Exp Immunol 1996; 104(2): 297-305.
Baron AC, Gansky SA, Ryder MI, Featherstone JD. Cysteine protease inhibitory activity
and levels of salivary cystatins in whole saliva of periodontally diseased patients. J
Periodontal Res 1999; 34(8): 437-444.
Berg Jeremy M., John L. Tymoczko, Lubert Stryer. Biochemistry, sixth edition. WH
Freeman and Company, 2007.
Biesbrock AR, Reddy MS, Levine MJ. Interaction of a salivary mucin-secretory
immunoglobulin A complex with mucosal pathogens Infect Immun 1991; 59(10): 34923497.
Bobek LA, Levine MJ. Cystatins - inhibitors of cysteine proteinases. Crit Rev Oral Biol
Med 1992; 3(4): 307-332.
Carasevici Eugen, Ingrid Dumitriu, Corina Cianga, Petru Cianga, Florin Zugun-Eloae.
Imunologie Curs pentru studenii anului II Medicin. Iai: UMF Gr.T.Popa, 1999.
Challacombe SJ, Shirlaw PJ. Immunology of Diseases of the Oral Cavity. In: Mestecky
J, Lamm ME, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR, Mayer L, editors. Mucossal
Immunology 3rd ed. London: Elsevier Academic Press 2005: 1517-1546.
Chapel Helen, Mansel Haeney, Siraj Misbach, Neil Snowden. Essentials of Clinical
Immunology, 5th Edition. Blackwell Publishing Ltd, 2006.
Chertov O, Michiel DF, Xu L, Wang JM, Tani K, Murphy WJ, Longo DL, Taub DD,
Oppenheim JJ. Identification of defensin-1, defensin-2, and CAP37/azurocidin as T-cell
chemoattractant proteins released from interleukin-8-stimulated neutrophils. J Biol Chem
1996; 271(6): 2935-2940.
Coico Richard, Geoffrey Sunshine. Immunology. A short Course, 6th Edition. John Wiley
& Sons Inc, 2009.
Cone RA. Mucus. In: Mestecky J, Lamm ME, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR,
Mayer L, editors. Mucossal Immunology 3rd ed. London: Elsevier Academic Press 2005:
49-72.
Eriksson K, Ahlfors E, George-Chandy A, Kaiserlian D, Czerkinsky C. Antigen
presentation in the murine oral epithelium. Immunology 1996; 88(1): 147-152.

183

Farquhar C, VanCott TC, Mbori-Ngacha DA, Horani L, Bosire RK, Kreiss JK,
Richardson BA, John-Stewart GC. Salivary secretory leukocyte protease inhibitor is
associated with reduced transmission of human immunodeficiency virus type 1 through
breast milk. J Infect Dis 2002; 186(8): 1173-1176.
Goldsby Richard A, Kindt Thomas J, Osborne Barbara A. Kuby Immunology, 5th
Edition. WH Freeman and Company, 2002.
Goldsby Richard A, Kindt Thomas J, Osborne Barbara A. Kuby Immunology, 4th
Edition. WH Freeman and Company, 2000.
Golub Edward S. Immunology: a synthesis. Sinauer Associates, Inc.,1987.
Janeway Charles A, Travers Paul, Walport Mark, Capra J. Donald. Immunobiology, 6th
Edition: Elsevier Science Ltd/Garland Publishing, 2004.
Lehrer RI, Bevins CL, Ganz T. Defensins and Other Antimicrobial Peptides and Proteins.
In: Mestecky J, Lamm ME, Strober W, Bienenstock J, McGhee JR, Mayer L, editors.
Mucossal Immunology 3rd ed. London: Elsevier Academic Press 2005: 95-110.
Liu L, Roberts AA, Ganz T. By IL-1 signaling, monocyte-derived cells dramatically
enhance the epidermal antimicrobial response to lipopolysaccharide. J Immunol 2003;
170(1): 575-580.
MacKay BJ, Denepitiya L, Iacono VJ, Krost SB, Pollock JJ. Growth-inhibitory and
bactericidal effects of human parotid salivary histidine-rich polypeptides on Streptococcus
mutans. Infect Immun 1984; 44(3): 695-701.
Mak Tak W, Saunders Mary E. Primer to the Immune Response. Elsevier Inc, 2011.
Mak Tak W, Saunders Mary E. The Immune Response. Basic and Clinical Principles.
Elsevier Inc, 2006.
McKay MS, Olson E, Hesla MA, Panyutich A, Ganz T, Perkins S, Rossomando EF.
Immunomagnetic recovery of human neutrophil defensins from the human gingival
crevice. Oral Microbiol Immunol 1999; 14(3): 190-193.
Murakami Y, Amano A, Takagaki M, Shizukuishi S, Tsunemitsu A, Aimoto S.
Purification and characterization from human parotid secretion of a peptide which inhibits
hemagglutination of Bacteroides gingivalis 381. FEMS Microbiol Lett 1990; 60(3): 275279.
Murakami Y, Nagata H, Amano A, Takagaki M, Shizukuishi S, Tsunemitsu A, Aimoto
S. Inhibitory effects of human salivary histatins and lysozyme on coaggregation between
Porphyromonas gingivalis and Streptococcus mitis. Infect Immun 1991; 59(9): 3284-3286.

184

Nair PN, Schroeder HE. Duct-associated lymphoid tissue (DALT) of minor salivary
glands and mucosal immunity. Immunology 1986; 57(2): 171-180.
Paul William E. Fundamental Immunology, 5th Edition. Lippincott Williams & Wilkins,
2003.
Roitt Ivan, Brostoff Jonathan, Male David. Immunology 3rd Edition. Mosby-Year Book
Europe Limited, 1993.
Roitt Ivan. Essential Immunology, 7th Edition. Blackwell Scientific Publication, 1991.
Shugars DC, Sauls DL, Weinberg JB. Secretory leukocyte protease inhibitor blocks
infectivity of primary monocytes and mononuclear cells with both monocytotropic and
lymphocytotropic strains of human immunodeficiency virus type I. Oral Dis 1997; 3 Suppl
1: S70-S72.
Shugars DC, Wahl SM. The role of the oral environment in HIV-1 transmission. J Am
Dent Assoc 1998; 129(7): 851-858.
Soukka T, Tenovuo J, Rundegren J. Agglutination of Streptococcus mutans serotype C
cells but inhibition of Porphyromonas gingivalis autoaggregation by human lactoferrin.
Arch Oral Biol 1993; 38(3): 227-232.
Territo MC, Ganz T, Selsted ME, Lehrer R. Monocyte-chemotactic activity of defensins
from human neutrophils. J Clin Invest 1989; 84(6): 2017-2020.
Van Wetering S, Mannesse-Lazeroms SP, Van Sterkenburg MA, Daha MR, Dijkman JH,
Hiemstra PS. Effect of defensins on interleukin-8 synthesis in airway epithelial cells. Am J
Physiol 1997; 272(5 Pt1): L888-L896.
Yang D, Chen Q, Chertov O, Oppenheim JJ. Human neutrophil defensins selectively
chemoattract naive T and immature dendritic cells. J Leukoc Biol 2000; 68(1): 9-14.

185

Index selectiv

A
ABO, 6, 13, 71, 147, 148, 151, 167
Actinobacillus actinomycetemcomitans, 190, 194
ADCC, 27, 30, 33, 69, 167
Adjuvanii, 12
adresine, 122
afinitate, 69, 70, 71, 75, 76, 116, 124, 125, 136, 140, 143, 156, 163, 184, 199
Ag TI-1, 140
Ag TI-2, 141
Agamaglobulinemia X-linkat, 177
alergene, 163, 165, 166
anafilatoxine, 48, 68, 171
anemia hemolitic autoimun, 3
anergia, 158
anergie, 12, 124, 161
angioedem ereditar, 181
anomalia DiGeorge, 106
anticorpi, 1, 2, 5, 6, 8, 13, 14, 21, 30, 37, 42, 43, 54, 57, 58, 59, 60, 62, 68, 69, 71, 76, 77, 78, 83, 111, 116, 121, 128, 129,
135, 136, 138, 140, 142, 143, 147, 148, 151, 152, 156, 160, 162, 163, 167, 168, 169, 172, 190, 192, 196, 199
antigen, 1, 2, 7, 8, 10, 12, 13, 17, 18, 23, 26, 28, 31, 32, 34, 37, 41, 43, 46, 54, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 68, 70, 71, 72, 75,
78, 83, 85, 87, 93, 97, 99, 100, 101, 103, 104, 110, 112, 113, 123, 125, 126, 133, 134, 135, 137, 138, 139, 140, 142,
143, 144, 145, 148, 151, 152, 156, 158, 159, 160, 161, 162, 171, 173, 174, 180, 181, 192
antigene allogeneice, 3
antigene autologe, 3
antigene singeneice, 3
antigene T-dependente, 134, 135, 151, 178
antigene T-independente, 140, 141, 148
antigene xenogeneice, 3
Antigenele heterofile, 4
apoptoza, 131, 180, 197
ARC, 187
Astmul bronic, 165
Ataxia-telangiectazia, 180
atopie, 163

B
B7-1, 124
B7-2, 124
bacterii comensale, 19
Bacteroides forsythus, 194
Bazofil, 34
BCR, 59, 60, 85, 112, 133, 134, 136, 138, 141, 142
boala Basedow-Graves, 3
Boala Chagas, 156
boala Chediak-Higashi, 181
boala granulomatoas cronic, 181
Boala Graves, 169, 170
Boala hemolitic a nou-nscutului, 151, 168
Boala serului, 171
boli autoimune, 2, 20, 105, 130, 167, 170
bursa lui Fabricius, 111

C
C1, 42, 44, 181
C2, 39, 43, 44, 91, 96, 180, 181
C3, 38, 39, 40, 41, 43, 44, 45, 180
C5, 40, 41, 43, 44, 180
cardiolipin, 13
carrieri, 5, 6, 172, 173

186

CD1, 31, 97, 127


CD16, 27, 30, 70
CD19, 134
CD2, 65
CD21, 134
CD23, 75
CD25, 160
CD28, 123, 124, 127, 161
CD3, 86, 87, 88, 108, 123, 133
CD32, 70, 171
CD4, 31, 65, 88, 89, 90, 100, 102, 103, 104, 108, 109, 110, 117, 118, 119, 123, 126, 127, 128, 130, 131, 134, 137, 138,
143, 156, 160, 161, 172, 173, 174, 175, 183, 184, 186, 187, 194
CD40, 134, 135, 137, 138, 178
CD40L, 134, 135, 137, 138, 178
CD44, 183
CD45, 123, 144
CD45RA, 144
CD45RO, 145
CD8, 31, 65, 88, 89, 90, 99, 100, 101, 102, 108, 109, 110, 117, 119, 123, 126, 129, 130, 131, 145, 161, 186
CD81, 134
celule dendritice, 15, 16, 93, 107, 117, 119, 137, 145, 161, 191
celule doic, 108
celule Langerhans, 119, 137, 192
celule Langhans, 174
celule NK, 26, 193
celulele foliculare dendritice, 116
celulele prezentatoare de antigen, 10
celulele stem hematopoietice, 15
Celulele Th1, 128
Celulele Th2, 129
centroblaste, 138
centrocite, 138, 140
centru germinal, 116, 118
chemokine, 36, 53, 54, 106, 155, 185, 187
Cistatinele salivare, 191
citokine, 23, 26, 27, 30, 31, 32, 36, 48, 49, 51, 52, 55, 74, 75, 88, 90, 91, 96, 97, 119, 123, 126, 127, 128, 129, 130, 131,
137, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 161, 165, 166, 171, 173, 174, 179, 192
CLIP, 102, 103
complex Ag/MHC, 86, 88, 99
complex de atac membranar, 41
complex major de histocompatibilitate, 10
complexe imune, 32, 47, 162, 170, 172, 180
componenta secretorie, 72, 74, 192
comutarea de clas, 83, 138
corpusculii Hassal, 108
CR1, 21, 44, 45, 46, 47, 172
CRP, 48
CTLA-4, 124, 161

D
DAF, 45, 181, 183
defensinele, 190, 191
deleia, 112, 158, 178
dermatita de contact, 172
determinant antigenic, 5, 8
Diagrama Wu-Kabat, 67
diapedeza, 49, 52, 181
diapedez, 21, 51
drift antigenic, 10

E
Eozinofil, 32
epitopi, 4, 5, 7, 8, 10, 13, 14, 60, 76, 77, 141, 148
eritrocite, 15, 118, 178
E-selectina, 53

187

excluzie alelic, 83
expansiune clonal, 32, 123, 126, 142

F
factori chemotactici, 21, 23, 24, 48, 50, 68, 106, 134, 164, 191
factorul B, 38, 39
Fagocitoza, 20, 56
fagocitoz, 20, 22, 23, 24, 29, 47, 53, 55, 131, 152, 172, 181
fagozom, 20, 24
Fas, 29, 97, 131
FasL, 29, 131
FcRn, 70
FDC, 116, 118, 138, 139
foliculi limfatici, 116, 118
Foxp3, 161
fragmentul Fc, 21, 27, 54, 62, 68, 70

G
ganglionii limfatici, 114, 115, 116, 119, 122, 193
gingivit, 194, 196
GM-CSF, 49, 128, 155, 157, 173
gp120, 183, 184, 186
gp160, 183
granulom, 174, 175
granzime, 26, 97, 131

H
haplotip, 98
haptene, 4, 5, 172
hemaglutinina, 9
hematopoieza, 15, 49, 153
hemoglobinuria paroxistic nocturn, 181
HEV, 117, 118, 121, 122, 137
hipersensibilitate imediat, 76
hipersensibilitate ntrziat, 25
Hipersensibilitatea granulomatoas, 174
histamina, 50, 51, 52, 164
Histatinele, 190
HIV, 9, 11, 17, 89, 176, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 190, 191, 196, 203
HLA, 26, 27, 91, 95, 96, 97, 98, 103, 105
HLA-G, 27, 96, 97
HRP, 181
HS de tip I, 165
HS de tip II, 167
HS III, 170, 171
HS IV, 172, 174

I
ICAM-1, 29, 51, 53, 123, 142, 173, 183
icozomi, 138
idiotop, 77
IFN-, 56
IFN-, 56
IFN-, 31, 32, 56, 128, 129, 135
IgA, 63, 64, 68, 69, 72, 73, 74, 76, 83, 136, 138, 142, 143, 144, 163, 177, 178, 190, 192, 195, 198, 199
Ig-alpha/Ig-beta, 59
IgA-secretorie, 192, 198
IgD, 63, 64, 68, 72, 74, 81, 113, 133, 142, 143, 178
IgE, 63, 68, 75, 76, 83, 129, 130, 136, 138, 142, 143, 144, 163, 164, 178
IgG, 27, 30, 63, 64, 68, 69, 70, 71, 76, 83, 128, 129, 136, 138, 142, 143, 144, 151, 152, 159, 160, 163, 167, 168, 170, 177,
178, 190, 192, 196, 198, 199

188

IgM, 63, 68, 70, 71, 72, 74, 75, 81, 112, 113, 129, 133, 136, 138, 141, 142, 143, 144, 148, 151, 159, 163, 167, 170, 178,
192, 198
IL-1, 31, 48, 49, 52, 155, 156, 171, 173, 202
IL-10, 32, 129, 130, 135, 161, 197
IL-12, 129, 130, 155
IL-13, 75, 129, 163, 197
IL-17, 130
IL-2, 26, 32, 124, 125, 128, 129, 135, 155, 156, 157, 161, 179
IL-3, 31, 51, 128, 155
IL-4, 32, 51, 75, 129, 130, 135, 155, 163, 166, 179, 197
IL-6, 31, 48, 49, 51, 52, 130, 155, 156, 173
IL-8, 21, 52, 53, 191
Imunodeficiente, 176
imunodeficiene congenitale, 11
imunogen, 2, 10
imunoglobuline, 59, 63, 67, 68, 69, 70, 72, 74, 75, 76, 77, 79, 81, 82, 83, 87, 98, 104, 112, 113, 133, 138, 139, 142, 143,
177, 178, 180, 192
ITAM, 88, 123, 133
izotip, 63, 64, 83, 152, 163

K
keratinocite, 189, 192
KIR, 26, 27, 31

L
Lactoferina, 190, 197
LAD, 181, 195
lanul Ii, 102, 103
leucocite, 20, 48, 49, 52, 55, 121, 122, 153, 167, 174
leukotriene, 51, 165
LFA-1, 21, 28, 53, 65, 123, 183
limfocit B, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 112
limfocite, 12, 15, 26, 31, 54, 55, 57, 59, 60, 75, 83, 85, 87, 88, 90, 93, 104, 105, 106, 107, 111, 113, 115, 116, 117, 118,
119, 121, 122, 123, 124, 126, 127, 128, 131, 136, 142, 145, 151, 152, 156, 160, 161, 162, 176, 178, 179, 187, 191,
193, 194, 195
limfocite naive, 111
limfocite T citotoxice, 88
limfocite T helper, 88
limfocite T, 90
limfocitele B-1, 113, 114
limfocitele T, 10, 12, 16, 18, 24, 31, 34, 35, 56, 85, 87, 89, 91, 96, 99, 100, 101, 102, 103, 107, 114, 117, 118, 119, 121,
127, 134, 141, 144, 145, 156, 159, 160, 161, 179, 184, 187, 193
Lizozimul, 190
lizozomi, 21, 23, 25, 32, 33, 182
LPS, 5, 45, 141
lupus eritematos sistemic, 3, 6, 170
Ly TDTH, 173, 174, 175

M
Macaccus rhesus, 11
macrofage, 15, 20, 22, 30, 37, 51, 53, 93, 107, 117, 118, 119, 137, 140, 145, 162, 172, 174, 191, 193, 194
macrofage cu corpi tingibili, 140
macrofagele santinel, 107
mduva osoas, 15, 31, 52, 106, 111, 112, 140, 144
MALT, 26, 115, 118, 140, 186, 189
mastocite, 15, 76, 164, 167, 193
maturaie de afinitate, 114, 140, 141, 143, 144
MBL, 43, 50
memorie, 18, 26, 58, 74, 75, 116, 119, 121, 122, 123, 126, 135, 136, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 151, 152, 159, 162,
168, 173, 174, 178, 197
MHC, 10, 27, 28, 31, 35, 56, 65, 85, 86, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 110,
111, 119, 123, 127, 129, 131, 134, 137, 138, 156, 158, 159, 173, 180
Miastenia gravis, 3, 169
mimetism antigenic, 14

189

mitogeni, 127, 141


Mucinele, 190
mucoase, 18, 19, 74, 163, 189, 190

N
neuraminidaza, 9
NKT, 16, 31, 32, 56, 130

O
opsonine, 36, 44, 46, 47, 50, 54, 68, 75, 129, 167, 199
opsonizare, 68, 196
Organele limfoide, 106

P
PAF, 50, 51, 165
PALS, 117
PAMPs, 35, 36
paracortex, 116, 134, 137
paratopul, 66, 77, 86
Parodontitele, 194
perforine, 26, 29, 97, 131
Peroxidaza salivar, 190
piele, 18, 85, 108, 115, 144, 163, 166, 172, 173, 181
placa bacterian, 199
plcile Peyer, 118
plmnul fermierului, 170, 171
plasmocite, 59, 60, 62, 74, 76, 117, 118, 121, 123, 135, 136, 137, 140, 151, 163, 177, 178, 193, 194
PMN, 20, 21, 22, 23, 30, 32, 52, 53, 54, 172, 195, 196
poli-IgR, 72, 74
polimorfismul MHC, 98
polimorfonucleare neutrofile, 20
Porphyromonas gingivalis, 194, 196, 203
procesarea antigenului, 8, 10, 100, 102, 103, 123
prostaglandine, 51, 165
proteazom, 101
provirus, 185
PRRs, 35, 36
P-selectina, 51, 53

R
rspuns imun, 1, 2, 3, 4, 8, 11, 12, 14, 23, 35, 54, 57, 62, 75, 76, 99, 104, 115, 130, 144, 152, 153, 158, 162, 164, 196
rspunsul imun, 1, 5, 69, 72, 75, 91, 104, 124, 126, 137, 145, 152, 158, 174
reacia Mantoux, 174
reacie gref contra gazd, 105
reacii autoimune, 2, 14
reactivitate ncruciat, 4, 5, 13, 148
rearanjare genic, 79
receptori homing, 122, 145
receptorul pre-T, 108
repertoriul imunologic, 12, 57, 78, 87
restricia MHC, 110
Rhogam, 152, 168
RI primar, 135, 136, 143, 144, 162, 168, 173
RI secundar, 135, 136, 143, 168

S
SALT, 19, 115, 119, 120, 140
SCID, 179
secvene semnal de recombinare, 81
selecia negativ, 110
selecia pozitiv, 110

190

seroconversie, 186, 187


shift antigenic, 10
SIDA, 175, 183, 186, 187
Sindromul DiGeorge, 106, 178
sistemul ABO, 13
sistemul complement, 36, 44, 50, 74, 75, 170, 171, 181, 192, 199
Sistemul complement, 29, 37
sistemul imun, 1, 2, 11, 17, 27, 57, 78, 97, 115, 151, 158
Sistemul imun nespecific, 17, 37
Sistemul Rh, 4, 151
SLPI, 191
oareci inbred, 3
ocul anafilactic, 166
ocul septic bacterian, 155
ocul toxic bacterian, 156
specificitate, 5, 8, 12, 17, 18, 60, 77, 81, 82, 83, 113, 133, 169, 186
Splina, 15, 117
Streptococului mutans, 198
superantigene, 127, 156
switch de clas, 72, 75, 136, 138, 141, 143, 148, 151, 163, 178

T
TAP-1, 101
TAP-2, 101
TCR, 31, 65, 78, 83, 85, 86, 87, 88, 89, 98, 99, 104, 108, 110, 113, 123, 127, 131, 144, 156
TGF-, 55, 135, 161
Th1, 97, 126, 128, 129, 130, 172, 187, 196
Th2, 75, 126, 128, 130, 163, 196
Th3, 161
Timusul, 106, 107, 179
tiroidita Hashimoto, 3
TNF, 31, 48, 49, 51, 52, 91, 96, 128, 129, 154, 155, 156, 166, 171, 174
toleran imunologic, 1, 11, 159
toleran la self, 2
Tr1, 161
trafic limfocitar, 117, 121, 127, 145, 163
Treg, 160, 161
tromboxani, 51, 165

V
Variaia allotipic, 77
Variaia antigenic, 8
Variaia idiotipic, 77
Variaia izotipic, 76
VCAM-1, 51, 54

2-microglobulina, 32, 97

191