Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
IERIMA
IMUNOLOGIE
ŞI
IMUNOPATOLOGIE
ABREVIERI ....................................................................................................... 20
Capitolul 1
IMUNITATEA – NOŢIUNI GENERALE ..................................................... 24
1.1. Istoric ........................................................................................................... 24
1.2. Imunitatea nespecifică ................................................................................. 29
1.3. Imunitatea dobândită ................................................................................... 31
Capitolul 2
RĂSPUNSUL IMUN .......................................................................................... 34
2.1. Răspunsul imun umoral ............................................................................... 34
2.2. Răspunsul imun celular ............................................................................... 35
2.3. Etapele răspunsului imun ............................................................................
36
2.4. Dinamica răspunsului imun primar 36
2.5. Dinamica răspunsului imun SECUNDAR 37
2.6. Proprietăţile fundamentale ale răspunsului imun .........................................
37
Capitolul 3
ANTIGENELE ...................................................................................................
..............................................................................................................................38
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
3.1.
Imunogenitate – antigenitate .......................................................................
39
3.2.
Condiţiile ca o moleculă să fie antigenică (imunogenă, nu tolerogenă) .......
39
3.2.1. Condiţiile dependente de molecula de antigen 40
3.2.2. Condiţiile dependente de organism 48
3.3. Clasificarea antigenelor ...............................................................................
48
3.3.1. Antigene TD şi TI ..........................................................................
49
3.3.2. Xenoantigenele, aloantigenele, antigene de organ şi
de stadiu evolutiv ............................................................................. 50
3.4. Antigenele MHC ......................................................................................... 51
3.4.1. Antigenele MHC de clasa I ............................................................ 51
3.4.2. Antigenele MHC de clasa II ........................................................... 54
3.4.3. Antigenele MHCde clasa III .......................................................... 55
3.5. Antigenele tumorale .................................................................................... 55
3.6. Alte antigene ............................................................................................... 56
3.6.1. Antigene virale................................................................................ 56
3.6.2. Antigenele bacteriene ..................................................................... 58
3.6.3. Antigenele parazitare ..................................................................... 59
3.6.4. Antigenele celulare ........................................................................ 60
3.7. Superantigenele ........................................................................................... 61
3.8. Imunizarea...................................................................................................
62
Capitolul 4
MODALITĂŢILE DE APĂRARE A ORGANISMULUI ..............................
..............................................................................................................................64
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
4.1. Rezistenţa naturală ...................................................................................... 64
4.1.1. Factori pasivi (tisulari) .................................................................. 65
4.1.2. Factorii umorali ............................................................................. 65
4.1.3. Factori celulari ............................................................................... 74
4.1.3.1. Polimorfonuclearele neutrofile ...................................... 75
4.1.3.2. Eozinofilele ................................................................... 77
4.1.3.3. Bazofilele şi mastocitele ................................................ 78
4.1.3.4. Trombocitele (plachetele) .............................................. 78
4.1.3.5. Monocite /macrofage ..................................................... 78
4.1.3.6. Celulele NK ................................................................... 84
4.2. Toleranţa imunologică ................................................................................ 85
4.2.1. Toleranţa naturală .......................................................................... 85
4.2.2. Toleranţa dobândită ....................................................................... 85
4.3. Imunitatea dobândită ...................................................................................
86
4.3.1. Imunitatea activă ........................................................................... 86
4.3.2. Imunitatea pasivă ........................................................................... 87
4.3.3. Imunitate de protecţie .................................................................... 87
4.3.4. Imunitatea antitumorală ................................................................. 87
Capitolul 5
IMUNOGLOBULINELE ŞI RĂSPUNSUL IMUNUMORAL .......................
.............................................................................................................................. 89
5.1. Structura imunoglobulinelor ....................................................................... 90
5.2. Studiul prin digestie enzimatică a imunoglobu-linelor ................................ 91
5.3. Domeniul imunoglobulinic ......................................................................... 95
5.4. Structura lanţurilor grele (H) ....................................................................... 96
5.5. Regiunea balama ......................................................................................... 96
5.6. Structura lanţurilor uşoare ........................................................................... 97
5.7. Molecule accesorii ...................................................................................... 99
5.8. Situsul de legare a antigenului ....................................................................100
5.9. Antigenicitatea imunoglobulinelor:izotipuri,alotipuri, idiotipuri.................101
5.10. Funcţiile imunoglobulinelor 102
5.11. Clasele şi subclasele de imunoglobuline ...................................................
103
5.11.1. Imunoglobulina G ........................................................................103
5.11.1.1. Receptorii Fc 105
5.11.2. Imunoglobulina M .......................................................................105
5.11.3. Imunoglobulina A ........................................................................106
5.11.4. Imunoglobulina D ........................................................................109
5.11.5. Imunoglobulina E ........................................................................110
5.12. Situsul combinativ. Afinitate şi aviditate ..................................................
110
5.12.1. Domenii ......................................................................................
110
5.12.2. Situsul combinativ (structură, funcţiona-litate) ..........................
111
5.12.2.1. Structură ......................................................................111
5.12.2.2. Funcţionalitate ............................................................112
5.12.3. Afinitate şi aviditate ...................................................................112
5.12.3.1. Afinitatea ....................................................................112
5.12.3.2. Aviditatea ....................................................................113
5.12.3.3. Factori care influenţează afinitatea şi
aviditatea la nivel molecular .........................................113
5.13. Biosinteza şi catabolismul imunoglobulinelor .........................................
114
5.13.1. Biosinteza imunoglobulinelor .....................................................
114
5.13.1.1. Sinteza independentă a lanţurilor H şi L .....................
115
5.13.1.2. Asamblarea intracitoplasmatică a lanţu-rilor H şi L ....
115
5.13.1.3. Polimerizarea sau dimerizarea ....................................
115
5.13.1.4. Cuplarea componentei glucidice .................................
115
5.13.1.5. Rolul nucleotidelor ciclice...........................................
115
5.13.1.6. Rolul concentraţiei imunoglobulinelor în tumori, în
determinarea ratei de sinteză a imunoglobulinelor .......
......................................................................................115
5.13.2. Catabolismul imunoglobulinelor ................................................
116
5.13.2.1. Rata de catabolizare a imunoglobulinelor ...................
116
5.13.2.2. Sediul de catabolizare a imunoglobu-linelor ...............
116
5.13.2.3. Mecanismul de catabolizare a imuno-globulinelor ......
116
5.14. Diversitatea anticorpilor ..........................................................................117
5.14.1. Variaţia allotipică .......................................................................117
5.14.2. Variaţia idiotipică .......................................................................118
5.15. Utilizarea anticorpilor ..............................................................................119
5.16. Anticorpi monoclonali .............................................................................120
5.16.1. Crearea anticorpilor monoclonali (AcMo) ..................................
120
5.16.2. Utilizarea anticorpilor monoclonali ............................................121
5.17. Imunoglobulinele de membrană ...............................................................123
5.18. Dinamica răspunsului imun umoral .........................................................123
5.18.1. Imunitatea umorală sistemică .....................................................
123
5.18.2. Imunitatea umorală locală ..........................................................
124
5.18.2.1. Înglobarea şi prezentarea antigenului ..........................
125
5.18.2.2. Sinteza secvenţială a imunoglobulinelor IgA secretorii.
125
5.18.2.3. Modularea adaptivă a sintezei de IgA secretorii .........
125
5.19. Teorii asupra formării anticorpilor ...........................................................
125
5.19.1. Teoriile “instructive” 126
5.19.2. Teoriile “selective” 126
5.20. Genetica imunoglobulinelor şi generarea diversităţii anticorpilor ............
127
5.20.1. Cromozomi, exoni, introni şi rearanjarea genelor
pentru imunoglobuline ..............................................................................
127
Capitolul 6
COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE (MHC) ............
.............................................................................................................................134
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
6.1. Caracteristici ale antigenelor dehistocompa-tibilitate ................................135
6.2. Distribuţia moleculelor MHC .................................................................... 139
6.3. Structura moleculelor MHC ....................................................................... 140
6.3.1. MHC I .......................................................................................... 140
6.3.1.1. Rol biologic. 141
6.3.1.2. Restricţia dehistocompatibilitate ...................................142
6.3.1.3. Modul de apariţie a complexului MHC
de clasa I – peptidă antigenică ......................................
......................................................................................142
6.3.2. MHC II ......................................................................................... 143
6.3.2.1. Rol biologic. 144
6.3.2.2. Restricţia de histocompatibilitate .................................144
6.3.2.3. Modul de apariţie a complexului MHC
de clasa II – peptidă antigenică .....................................
......................................................................................145
6.4. Funcţiile MHC ...........................................................................................
145
6.4.1 Generarea liganzilor celulelor T .....................................................
.............................................................................................................................146
6.4.1.1. Generarea liganzilor pentru MHC de clasă I 149
6.4.1.2. Generarea liganzilor pentru MHC de clasă II 153
6.5. Nomenclatura moleculelor HLA calasa I (1995) ....................................... 156
6.6. Nomenclatura moleculelor HLA clasa II(1995) .........................................158
6.7. Sistemul HLA-Teste grilă .......................................................................... 160
6.8. Răspunsuri teste ......................................................................................... 164
Capitolul 7
COMPLEMENTUL 166
7.1. Calea Clasică ............................................................................................. 167
7.1.1. Activarea sistemului complement ................................................167
7.1.2. Proteine reglatoare ....................................................................... 167
7.2. Calea alternativă și Calea de Amplificare .................................................. 168
7.2.1. Activarea ...................................................................................... 168
7.2.2.
Reglarea ....................................................................................... 169
7.2.3. Reglarea ....................................................................................... 169
7.3. Activarea ................................................................................................... 170
7.4. Receptorii pentru complement(CR) ........................................................... 170
7.4.1. CR1(CR35) sau receptorul pentru C3b 170
7.4.2. CR2(CD) sau receptorulpentru C3d .............................................171
7.4.3. CR3 (CD11 b/CD18) sau receptorul pentru C3bi .........................
171
7.4.4. CR4 (CD11/CD18) ....................................................................... 171
7.4.5. CR3aR, C4a, C5a, C1q, HR..........................................................171
7.5. Rolul biologic al complementului ..............................................................
171
7.5.1. Reacția inflamatorie .....................................................................
171
7.5.2. Apărarea anti-infecțioasă (prin liza microorganismelor) ..............172
7.5.3. Apărarea anti infecțioasă (prin fenomenul aderentei imune la
opsonizare) ..................................................................................... 172
7.5.4. Metabolismul complexelor imune ................................................ 172
7.5.5. Reglarea răspunsului imun............................................................ 173
7.6. Metode de studiu ale complementului ....................................................... 173
7.6.1. Dozarea activității hemolitice a complementului ..........................173
7.6.2. Dozarea produșilor de degradare .................................................. 173
7.6.3. Dozarea componentelor sistemului complement ..........................174
7.7. Variații ale complementului ....................................................................... 174
7.7.1. Defecte congenitale ...................................................................... 174
7.7.2. Deficinețe dobândite ..................................................................... 175
7.8. Imunitatea umorală - teste grilă Error! Bookmark not defined.
7.9. Răspunsuri teste grilă Error! Bookmark not defined.
Capitolul 8
ORGANELE CU ROL ÎN IMUNITATE ........................................................
.............................................................................................................................177
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
8.1. Organele Sușă(stem) ..................................................................................
177
8.1.1. Sistemul hematopoietic și celulele stem .......................................
177
8.1.2.
Mezodermul embrionar și ficatul fetal ..........................................
177
8.1.3. Mă
duva osoasă 178
8.2. Organele limfoide 178
8.2.1 Organele limfoide primare .............................................................. 178
8.2.1.1. Timusul ......................................................................... 178
8.2.1.2. Măduva osoasă ............................................................. 181
8.2.2. Organele limfoide secundare(periferice) ......................................181
8.2.2.1. Ganglionii limfatici ....................................................... 182
8.2.2.2. Splina ............................................................................ 184
8.2.2.3. Amigdalele ................................................................... 184
8.2.2.4. Plăcile Peyer ................................................................. 184
8.2.2.5. Apendicele .................................................................... 184
Capitolul 9
CELULELE IMPLICATE ÎN RĂSPUNSUL IMUN .....................................
............................................................................................................................. 186
9.1. Limfocitele ................................................................................................
189
9.1.1. Clasa limfocitelor B (LB) .............................................................
192
9.1.2. Limfocitele T (LT) .......................................................................
193
9.1.2.1. Limfocitele T helper/inductoare (LTh) .........................
194
9.1.2.2. Limfocitele T citotoxice (LTc sau LTC)........................
195
9.1.2.3. Limfocitele T supresoare (LTs) ....................................
195
9.1.2.4. Limfocitele T amplificatoare (LTa) ..............................
196
9.1.2.5. Limfocitele T de hipersensibilitate în-târziată (LTd) ....
196
9.1.3. Celulele celei de „a treia clase” .................................................... 196
9.1.3.1. Celulele NK .................................................................. 196
9.1.3.2. Celulele LAK ............................................................... 197
9.2. Celulele prezentatoare de antigen (APC) ...................................................
197
9.2.1. Macrofagele ................................................................................. 197
9.2.2. Celulele dendritice ....................................................................... 198
9.2.3. Astrocitele .................................................................................... 198
9.2.4. Celulele Langerhans ..................................................................... 199
Capitolul 10
STRUCTURI MOLECULARE DE MEMBRANĂ
CU ROL IMUNOLOGIC ................................................................................ 200
10.1. Markerii CD – clasele de diferenţiere ......................................................
200
10.1.1. Receptorul pentru antigen al celulei T ........................................
202
10.1.1.1. Alţi markeri T .............................................................
203
10.1.1.2. Structura TCR ....................................................
204
10.1.1.3. Structura TCR ....................................................
207
10.1.2. Receptorul pentru antigen al celulelor B (BCR) .........................
207
10.1.2.1. Alţi markeri ai celulelor B ..........................................
208
10.1.3. Receptorii FC, receptorii pentru complement, receptorul poli-Ig,
receptorii pentru citokine................................................................ 209
10.1.3.1. Receptorii Fc .............................................................. 209
10.1.3.2. Receptorii pentru complement ................................... 210
10.1.3.3. Receptorul poli-Ig ....................................................... 211
10.1.3.4. Receptorii pentru citokine .......................................... 211
10.1.4. Moleculele de adeziune celulară .................................................
211
10.1.4.1. Integrinele ................................................................... 213
10.1.4.2. Selectinele .................................................................. 214
10.1.4.3. Superfamilia de imunoglobuline ................................. 214
10.1.4.4. Familia cadherine ....................................................... 215
10.1.4.5. Molecule similare mucinelor ...................................... 215
10.1.4.6. Alte CAM ................................................................... 215
10.1.4.7. Molecule de adeziune solubile .................................... 216
Capitolul 11
MEDIATORII MOLECULARI AI RĂSPUNSULUI IMUN ........................
............................................................................................................................217
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
11.1.1. Interleukinele (IL) ...................................................................... 219
11.1.2. Factorii de necroză tumorală (TNF) ........................................... 223
11.1.3. Interferonii .................................................................................. 223
11.1.4. Prostaglandinele (PG) ................................................................. 224
11.1.5. Factori de stimulare ai coloniilor celulare (CSF) ........................ 225
11.1.6. Factorii de transformare a creşterii (TGF) .................................. 225
11.1.7. Chemokine ................................................................................. 225
11.2. Hormonii timici ....................................................................................... 226
11.2.1. Fragmente timice cu rol endocrin ...............................................
226
11.2.2. Activitatea biologică in vitro ......................................................226
11.2.3. Utilizare clinică a hormonilor timici ...........................................
227
Capitolul 12
DEZVOLTAREA ŞI ACTIVAREA LIMFOCITELOR T ...........................
............................................................................................................................229
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
12.1. Limfocitele T ................................................................................ 232
12.2. Activarea limfocitelor T ........................................................................... 232
12.2.1. Moleculele accesorii ................................................................... 233
12.2.2. Moleculele co-receptor: CD4 şi CD8 .........................................
233
12.2.3. Moleculele costimulatorii ........................................................... 234
12.2.4. Integrine implicate în adeziunea limfocitelor T la alte celule .....
237
12.2.5. Evenimente biochimice şi moleculare intracelulare din activarea
limfocitelor T .................................................................................
........................................................................................................238
12.2.6. Activarea factorilor transcripţionali ai limfocitelor T .................
239
Capitolul 13
DEZVOLTAREA ŞI ACTIVAREA LIMFOCITELOR B ............................
............................................................................................................................ 242
13.1. Receptorul pentru antigen al limfocitelor B (BCR) .................................
246
13.2. Evenimentele biochimice intracelulare ale activării limfocitelor B .........
248
13.3. Producerea anticorpilor de către limfocitele B..........................................
248
13.4. Răspunsul limfocitelor B la antigene T-dependente .................................
249
13.5. Rolul citokinelor secretate de celulele T helper în activarea
limfocitelor B ...........................................................................................
............................................................................................................................249
13.6. Reacţiile din centrul germinal: maturarea de afinitate şi
generarea celulelor B cu memorie ............................................................
............................................................................................................................250
13.7. Răspunsul limfocitelor B la antigene T-independente .............................
251
Capitolul 14
RĂSPUNSUL IMUN CELULAR ....................................................................
............................................................................................................................252
Şef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
14.1. Faza premergătoare răspunsului imun cellular .........................................
252
14.2. Antigenele 252
14.3. Etapele răspunsului imun celular 253
14.4. Reglarea răspunsului imun celular ...........................................................
254
14.5. Studiul imunității celulare ........................................................................
254
Capitolul 15
RĂSPUNSUL IMUN UMORAL .....................................................................
............................................................................................................................256
Şef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
15.1. Antigenele ............................................................................................... 256
15.2. Răspunsul imun primar și răspunsulimunsecundar .................................. 257
15.3. Aspecte celulare ...................................................................................... 260
15.4. Reglarea imunității umorale .................................................................... 261
15.5. Explorarea și implicația imunitățiiumorale .............................................. 263
Capitolul 16
FAZELE RĂSPUNSULUI IMUN ŞI COOPERAREA
DINTRE CELULELE IMPLICATE .............................................................. 266
16.1. Faza de recunoaştere a antigenului ..........................................................
266
16.1.1. Intrarea limfocitelor în organele limfoide secundare
şi recircularea lor ........................................................................... 267
16.1.2. Prezentarea antigenului de către APC profesioniste ...................
268
16.2. Fazade activare ........................................................................................ 268
16.3. Faza efectoare ......................................................................................... 269
Capitolul 17
RĂSPUNSUL IMUNÎN ACŢIUNE ................................................................ 271
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
17.1. Imunitatea antitumorală ........................................................................... 271
17.2. Imunitatea antiinfecţioasă ........................................................................ 271
17.2.1. Imunitatea naturală ..................................................................... 271
17.2.2. Imunitatea indusă ....................................................................... 272
17.2.3. Imunitatea antibacteriană ........................................................... 274
17.2.4. Imunitatea antivirală ................................................................... 275
17.2.4.1. Antigene virale ........................................................... 276
17.2.4.2. Imunitatea umoralăîn viroze ....................................... 277
17.2.4.3. Imunitatea celular-mediată antivirală..........................278
17.2.4.4. Citotoxicitatea naturală şi virusurile ........................... 279
17.2.4.5. Autoimunitatea şi virusurile........................................ 279
17.2.4.6. Imunosupresia virală .................................................. 279
17.2.4.7. Imunotoleranţa şi virusurile ........................................ 280
17.2.4.8. Imunopotenţarea virală ............................................... 280
17.2.5. Imunitatea antiparazitară ............................................................
280
17.2.5.1. Antigene parazitare ..................................................... 280
17.2.5.2. Imunitatea umorală antiparazitară .............................. 281
17.2.5.3. Imunitatea mediată celular în parazitoze .................... 282
17.2.5.4. Aspecte imunopatologice în parazitoze ...................... 282
17.2.6. Imunitatea în micoze .................................................................. 283
17.2.6.1. Imunitatea protectoare ................................................ 283
17.2.6.2. Imunopatologie ........................................................... 283
17.3. Răspunsul imunitar- Inflamația – Teste grilă . Error! Bookmark not
defined.
17.4. Raspunsuri corecte – Teste grilă ................. Error! Bookmark not
defined.
Capitolul 18
PROPRIETĂŢILE LIMFOCITELOR EFECTOR .......................................
............................................................................................................................. 284
18.1. Citotoxicitatea mediată de celulele T 285
18.2. Activarea macrofagelor de ătre limfocitele T H1 CD4+ 286
18.3. Imunitate celulară – Teste grilă Error! Bookmark not defined.
18.4. Rultate teste grilă Error! Bookmark not defined.
Capitolul 19
TOLERANŢA LA SELF ŞI AUTOIMUNITATEA ......................................
............................................................................................................................. 287
19.1. Noțiuni despre toleranță și autoimunitate – Teste grilă Error! Bookmark not
defined.
19.2. Rezultate teste grilă - Noțiuni despre toleranță și autoimunitate .........Error!
Bookmark not defined.
Capitolul 20
REACŢIILE DE HIPERSENSIBILITATE ...................................................
.............................................................................................................................292
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
20.1. Aspecte particulare Ale imunităţii ........................................................... 361
20.1.1. Imunitatea gestaţională ............................................................... 361
20.1.1.1. Sarcina fiziologică ...................................................... 361
20.1.1.2. Sarcina patologică ...................................................... 362
20.1.2. Relaţii imuno-neuro-endocrine ................................................... 363
20.1.2.1. Aspecte fundamentale ................................................ 363
20.1.2.2. Intervenţia relaţiilor imuno-neuro-endocrine
în patologie.................................................................... 363
20.2. Reacția imună imediată ........................................................................... 364
20.2.1. Date experimentale ..................................................................... 365
20.2.2. Analfilaxia generalizată activă (Richet și poitier, 1902) ............. 366
20.2.3. Anafilaxia generalizată pasivă .................................................... 366
20.2.4. Anafilaxia pe organ izolat (fenomenul Schutz- Dale) ................ 366
20.2.5. Anafilaxia cutanata pasiva ......................................................... 366
20.3. Anticorpi anafilactici: Reaginele .............................................................
367
20.4. Bazofilele si Mastocitele .........................................................................
368
20.5. Mediatorii reactiei anafilactice ................................................................
369
20.5.1. Eliberarea mediatorilor preformati din granule ..........................
369
20.5.2. Sinteza de mediatori de neoformatie din membrana celulara .....
370
20.5.3. Sinteza de citokine .....................................................................
371
20.6. Reglarea Raspunsului imun imediat ........................................................
371
20.7. Aspecte clinice si biologice......................................................................372
20.8. Rezumat ................................................................................................... 373
20.9. Anexa 10 .................................................................................................. 373
20.10. Reacția imună citotoxică ........................................................................375
20.10.1. Mecanisme fundamentale ale lizei celulare ..............................
376
20.10.1.1. Apoptoza .................................................................. 376
20.11. Hipersensibilitatea întârziată ..................................................................
376
20.11.1. Tipuri de hipersensibilitate .......................................................377
20.11.1.1. Hipersensibilitatea de tip Jones-Mote .......................
377
20.11.1.2. Hipersensibilitatea de contact ...................................377
20.11.1.3. Hipersensibilitatea de tip tuberculinic .......................
379
20.11.1.4. Hipersensibilitatea granulomatoasă ..........................380
20.12. Metode de studiu ................................................................................... 381
20.13. Patologia umană .................................................................................... 382
20.13.1. Eczema de contact ....................................................................382
20.13.2. Maladiile infecțioase cu hipersensibilitate întârziată ................
382
20.14. Imunoglobulina e: rol în alergie și atopie – Teste grilă . Error! Bookmark
not defined.
20.15. Rezultate teste grilă .................................. Error! Bookmark not
defined.
Capitolul 21
IMUNODEFICIENŢE .....................................................................................
.............................................................................................................................386
Şef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
21.1. ID ereditare pot fi clasificate: ..................................................................
387
21.1.1. Defecte ale limfocitelor B 387
21.1.2. Defecte ale limfocitelor T 388
21.1.3. Defecte ale sistemului complement ............................................
389
21.1.4. Defectele fagocitelor................................................................... 390
21.2. ID secundare – infecţia HIV/SIDA ..........................................................
390
21.2.1. Organizarea genomului HIV ......................................................391
21.2.2. Ciclul de viaţă al HIV.................................................................. 391
21.2.3. Patogenia infecţiei HIV .............................................................. 392
21.2.4. Boala clinică aparentă (SIDA) ....................................................
395
21.3. Deficitele imunitare primitive ..................................................................
395
21.3.1. Modalitatea de abordare în caz de suspiciune de DIP .................
396
21.3.1.1. Situații evocatorii pentru DIP .....................................
396
21.3.1.2. Conduita de urmărit în caz de suspiciune de DIP .......
396
21.3.1.3. Bilanț de realizat pentru a aprecia caracteristicile unui
deficit imunitar aparent primitiv ...................................
......................................................................................398
21.3.2. Complicații esențiale observate în cursul DIP ............................
399
21.3.2.1. Infecții ........................................................................
400
21.3.2.2. Manifestări neoplazice și limfoproliferative ...............
400
21.3.2.3. Compicații osteoarticulare 401
21.3.2.4. Manifestări autoimune 402
21.3.3. Clasificarea și descrierea DIP .....................................................
402
21.3.3.1. DIP umorale ...............................................................
404
21.3.3.1.1. Agamaglobulinemie congenitală
legată de X sau boala Bruton ....................
..................................................................404
21.3.3.1.2. Deficite imunitare cu hiper-IgM .............
404
21.3.3.1.3. Deficite imunitare de tip comun variabil
(DICV) (sau hipogamaglobulinemia cu
expresie variabilă) 404
21.3.3.1.4. Deficit selectiv de IgA 405
21.3.3.1.5. Deficit selectiv de IgG ...........................
405
21.3.3.1.6. Alte deficite umorale ..............................
405
21.3.3.2. DIP combinate severe (DICS) ....................................
405
21.3.3.2.1. DICS T- B+ ............................................
406
21.3.3.2.2. DICS T- B- .............................................
406
21.3.3.2.3. Defict de purin nucleozid fosforilaza .....
406
21.3.3.2.4. Defecte în expresia moleculelor
limfocitare ................................................ 406
21.3.3.3. Deficite imunitare predominante celular......................
407
21.3.3.4. Alte DIP ...................................................................... 407
21.3.4. Anomaliile celulelor fagocitare .................................................. 409
21.3.4.1. Anomaliile de mobilitate granulocitară .......................
409
21.3.4.2. Anomalie a bactericidății granulocitare ...................... 409
21.3.5. Deficitele sistemului complement .............................................. 409
21.3.5.1. Deficite ereditare ale complementului ........................
410
21.3.5.2. Consecințe clinice ....................................................... 411
21.3.5.3. Diagnostic biologic ..................................................... 411
21.3.6. Tratamentul DIP ......................................................................... 412
21.3.6.1. Tratamentul DIP umorale ........................................... 412
21.3.6.2. Tratamentul DIP celulare și combinate .......................
412
21.3.6.3. Tratamentul anomaliilorcelulelor fagocitare ............... 413
21.3.6.4. Tratamentul deficitului de complement ......................
413
Capitolul 22
PRINCIPII DE IMUNOTERAPIE 414
22.1. Imunterapia antigen specifică 414
22.1.1. Imunostimularea ......................................................................... 414
22.1.2. Imunosupresia ............................................................................ 415
22.2. Imunoterapia independentă de antigen .....................................................
416
22.2.1. Imunostimularea ......................................................................... 416
22.2.2. Imunosupresia ............................................................................ 416
Capitolul 23
CRIOGLOBULINEMIILE Error! Bookmark not defined.
23.1. Introducere – Definiție Error! Bookmark not defined
23.2. Tabloul clinic ............. Error! Bookmark not defined
23.3. Tabloul biologic ........ Error! Bookmark not defined
23.4. Fiziopatologie ............ Error! Bookmark not defined
23.5. Evoluție și tratament ... Error! Bookmark not defined
Capitolul 24
SINDROMUL DE HIPERPERMEABILITATE
CAPILARĂ IDIOPATICĂ ................................ Error! Bookmark not defined.
24.1. Date clinice ................................ Error! Bookmark not defined.
24.1.1. Faza prodromică ............ Error! Bookmark not defined.
24.1.2. Faza acută ...................... Error! Bookmark not defined.
Error! Bookmark not defined.
24.1.3. Complicații ....................
Error! Bookmark not defined.
24.1.4. Examene complementare
Error! Bookmark not defined.
24.2. Ipoteze fiziopatologice ...............
Error! Bookmark not defined.
24.3. Tratament ................................... Error! Bookmark not defined.
24.4. Prognostic ...................................
Capitolul 25
EVALUAREA ALERGOLOGICĂ ÎN PNEUMONITELE DE
HIPERSENSIBILITATE ................................... Error! Bookmark not defined.
Conf.univ.dr. Florin-Dan POPESCU
Universitatea „Carol Davila” Facultatea de Medicină și Farmacie Bucureşti
25.1. Factorii de risc .............................................. Error! Bookmark notdefined.
25.2. Criteriile de diagnostic ................................. Error! Bookmark notdefined.
25.3. Forme clinice ............................................... Error! Bookmark notdefined.
25.4. Evaluarea alergologică Error! Bookmark not defined
25.6. Evoluţia PH ............... Error! Bookmark not defined
25.7. Prognosticul PH ......... Error! Bookmark not defined
25.8. Bibliografie ................ Error! Bookmark not defined
IMUNOPATOLOGIA ECZEMEI DE CONTACT ........ Error! Bookmark
not
defined.
26.1. Caracteristicile histologice ale eczemei de contact . . . Error! Bookmark not
defined.
26.2. Reactivitatea chimică a haptenelor și modificarea proteinelor ............Error!
Bookmark not defined.
Error! Bookmark not defined Error! Bookmark not defined Error!
Bookmark not defined Error! Bookmark not defined
Capitolul 27
IMUNOPATOLOGIA PSORIAZISULUI ........ Error! Bookmark not
defined.
27.1. Introducere: evoluția conceptelor patogenice Error! Bookmark not
defined.
27.2. Genetica psoriazisului ................................ Error! Bookmark not
defined.
27.3. Imunopatologia psoriazisului: interacțiune celulă T/keratinocit .........Error!
Bookmark not defined.
27.3.1. Care este anomalia de proliferare a keratinocitului în cursul
psoriazisului? .................................... Error! Bookmark not
defined.
27.3.2. Care este natura exactă a limfocitelor T implicate în psoriazis?
Error! Bookmark not defined.
27.4. Modele de interacțiune celulă T/keratinocit ... Error! Bookmark not
defined.
27.4.1. Este psoriazisul rezultatul unei interacțiuni patologice
între celule T și keratinocit? .............. Error! Bookmark not
defined.
27.4.2. Keratinocitele (MHC I sau II) sunt implicate în
activarea celulelor T? ........................ Error! Bookmark not
defined.
27.4.3. Celulele prezentatoare de antigen (APC) sunt implicate? .....Error!
Bookmark not defined.
27.4.4. Toate aceste căi sunt necesare pentru a declanșa un psoriazis? .
Error!
Bookmark not defined.
Capitolul 28
IMUNOPATOLOGIA DERMATOZELOR BULOASE AUTOIMUNE .
Error! Bookmark not defined.
28.1. Pemfigusul Error! Bookmark not defined.
28.2. Dermatoze de joncțiune Error! Bookmark not defined.
Capitolul 29
IMUNOLOGIA TOXIDERMIILOR ................. Error! Bookmark not
defined.
29.1. Diferite tipuri de toxidermii “alergice” Error! Bookmark not defined.
29.2. Toxidermia şi imunitate celulară Error! Bookmark not defined.
Capitolul 30
LUPUS ERITEMATOS SISTEMIC ................ Error! Bookmark not
defined.
30.1. Fiziopatologie ............................................ Error! Bookmark not
defined.
30.2. Diagnostic .................................................. Error! Bookmark not
defined.
30.2. Tratament ..................................................... Error! Bookmark not
...............................................................................defined.
Capitolul 31
SCLERODERMII SISTEMICE ....................... Error! Bookmark not
defined.
31.1. Fiziopatologie .................. Error! Bookmark not defined.
31.2. Criterii, clasificare ........... Error! Bookmark not defined.
31.3. Clinica ............................. Error! Bookmark not defined.
Error! Bookmark not defined.
31.4. Biologie ...........................
Error! Bookmark not defined.
31.5. Sclerodermii “secundare” Error! Bookmark not defined.
31.6. Prognostic, evoluție ......... Error! Bookmark not defined.
31.7. Tratament
Capitolul 32 ........................
SINDROMUL IMUNODEFICIENŢEI DOBÂNDIT: SIDA . Error! Bookmark
not defined.
Capitolul 33
TRANSPLANTUL DE ORGANE: FENOMENUL RESPINGERII .......Error!
Bookmark not defined.
33.1. Reacția gazdă versus grefă Error! Bookmark not defined.
Capitolul 34
IMUNOGLOBULINE POLIVALENTE PE CALE INTRAVENOASĂ .
Error! Bookmark not defined.
Sef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
34.1. Indicații principale ...................................... Error! Bookmark not
defined.
34.1.1. Deficite imunitare primitive Error! Bookmark not defined.
34.1.2. Deficite imunitare secundare Error! Bookmark not defined.
34.1.2.1. Mielomul multiplu ......... Error! Bookmark not
defined.
34.1.2.2. Leucemia limfoidă cronică Error! Bookmark not
defined.
34.1.2.3. Boala SIDA la copil ...... Error! Bookmark not
defined.
34.1.3. Alogrefa de maduvă ...................... Error! Bookmark not
defined.
34.1.4. Purpura trombocitopenică idiopatică Error! Bookmark not
defined.
34.1.5. Sindromul Kawasaki Error! Bookmark not defined.
34.1.6. Poliradiculonevrita acută Error! Bookmark not defined.
34.2. Indicațiile în afara autorizației de punere pe piață ..... Error! Bookmark not
defined.
34.3. Risc viral Error! Bookmark not defined.
34.4. Profil de toleranță Error! Bookmark not defined.
34.4.1. Efecte legate de perfuzie Error! Bookmark not defined.
34.4.2. Complicații hematologice Error! Bookmark not defined.
34.4.2.1. Anemia hemolitică autoimună ........ Error! Bookmark
not
defined.
34.4.2.2. Neutropenie ..................... Error! Bookmark not
defined.
34.4.2.3. Creșterea vâscozității
plasmatice și sanguine Error! Error! Bookmark not defined
Bookmark not defined. Error! Bookmark not defined
34.4.3. Complicații neurologice Error! Bookmark not defined
34.4.4. Complicații renale ............... Error! Bookmark not defined
34.4.5. Complicații cutanate .
34.4.6. In practică .................
Capitolul 35
VACCINĂRI
Capitolul 36
MECANISMELE ŞI EXPRESIA CLINICĂ A
RESPINGERII / REJETULUI GREFEI ŞI A
BOLII GREFONULUI ÎMPOTRIVA GAZDEI Error! Bookmark not defined.
Capitolul 37
LUCRĂRI PRACTICE ..................................... Error! Bookmark not
defined.
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
37.1. Reacţia antigen-anticorp ............................ Error! Bookmark not defined.
37.1.1. Definitie ........................................ Error! Bookmark not defined.
37.1.2. Caracteristici principale ................ Error! Bookmark not defined.
37.1.3. Forte intermoleculare cu rol in reactia Ag-Ac . Error! Bookmark
37.1.4. Cinetica reactiei Ag-Ac ..... not defined.
37.1.5. Clasificare reactiilor Ag-Ac Error! Bookmark not defined
37.2. Tehnici in imunologie .................... Error! Bookmark not defined
37.2.1. Precipitarea ....................... Error! Bookmark not defined
Error! Bookmark not defined
37.2.2 Aglutinarea ......................... Error! Bookmark not defined
37.2.3. Reactii care utilizeaza complementul Error! Bookmark not defined.
37.2.4. Reactii cu reactivi marcati (Ag sau Ac marcati) Error! Bookmark
not defined.
37.2.5. Testul Western blot ...................... Error! Bookmark not
defined.
37.3. Exploatarea imunitatii .................................... Error! Bookmark not defined.
37.3.1 Exploatari imunologice in vivo......... Error! Bookmark not defined.
37.3.2. Exploatarea imunitatii umorale ..... Error! Bookmark not defined.
37.3.3. Exploatarea imunitatii celulare (Notiuni teoretice si
practice privind flow citometria – citometria in flux) ..................Error!
Bookmark not defined.
37.3.4. Explorarea genetic a imunitatii ..... Error! Bookmark not defined.
AA: Aminoacid
Ac: Anticorp
AcMo: Anticorp monoclonal
ADCC: Citotoxicitate celulară dependentă de anticorpi (Antibody dependent cell-
mediated cytotoxicty)
ADP: Adenozin difosfat
AFP: Alfa fetoproteină
Ag: Antigen
APC: Celulă prezentatoare de antigen (antigen presenting cell)
2-m: 2-microglobulina
BCR: Receptorul pentru antigen al limfocitului B
C': Sistemul complement
C: Regiunea constantă a imunoglobulinei
CAM: Moleculă de adeziune celulară (cell adhesion molecules)
CD: Clasă de diferenţiere
CDF: Celule dentritice foliculare
CDR: Regiune determinantă a complementarităţii
CI: Complexe imune
CIC: Complexe imune circulante
CL: Celule langerhans
CLIP: Peptid al lanţului invariabil asociat MHC de clasa II
CMV: Virusul citomegalic
CR: Receptor de complement (complement receptor)
CRP: Proteina C reactivă (C-reactive protein)
CSF: Factorul de stimulare a coloniilor (colony stimulating factor)
DAg: Diacil glicerol fosfat
DAF: Factor de accelerare a degradării
DC: Celule dendritice (dendritic cell)
EC: Celule endoteliate
ECF: Factorul chemotactic pentru eozinofile (eosinophil chemotactic factor)
EGF: Factorul de creştere a epiteliului (epidermal growth factor)
ELAM: Molecula de adeziune andetelio-leucocitară
Fab: Fragment (antigen binding) variabil al imunoglobulinelor
Fb: Fibroplast
Fc: Fragment constant, cristalizabil, al imunoglobulinelor
FcR: Receptor celular pentru fragmentul Fc al imunoglobulinelor
FDC: Celule dendritice foliculare
FR: Regiunea cadru (“framework”)
Gly-CAM: Molecule de adeziune celulară dependente de glicozilare (glycosylation-
dependent cell adhesion molecule)
G DP: Guonozin difosfat
GM CSF: Factor de creştere granulocitar-monocitar
H: Lanţul greu al imunoglobulinelor
HAV: Virusul hepatitei A
HBV: Virusul hepatitei B
HEV: Venule endoteliate postcapilare
HLA: Antigene leucocitare umane (de histocompatibilitate)
HRF: Factor omolog de restricţie
HSP: Proteina de şoc termic
ICAM: Moleculă de adeziune intercelulară
IFN: Interferon
Ig: Imunoglobulină
Ii: Lanţ invariabil
IL: Interleukine
IL-R: Receptor pentru interleukină
IP3: Inozitol triofosfat
KB: Secvenţă a lanţului uşor K al Ig
KD: Kilodalton
L: Lanţul uşor al imunoglobulinelor
LB: Limfocit B
LAK: Celule ucigaşe activate de limfocite
LCA: Antigen leucocitar comun (leukocite common antigen)
LPS: Lipopolizaharid
LT: Limfocite T
MAC: Complexul de atac al membranei (membrane attack complex)
MAP-Cam1 Moleculă de adeziune celulară de tipul adresinelor mucoasei (mucosal
addressin cell adhesion molecule1)
MAP-kinaze Proteinkinaze activate de mitogen
MAF: Factor de activare al macrofagului (macrophage achvahing factor)
MC: Mastocit
M-CSF: Factorul de stimulare a coloniilor de monocite
MG-CSF: Factorul de stimulare a coloniilor de macrofage şi granulocite
MHC: Complexul major de histocompatibilitate (major histocomptatibility
complex)
mIg: Imunoglobulină membranată
MIRL: Inhibitor de membrană a lizei reactive (membrane inhibitor of reactive
MRF: lysis)
Factor de restricţie omolog (homologous restriction factor)
NCF: Factorul chemotactic pentru neutrofile (neutrophil chemotactic factor)
N CAM: Neural cell adhesin molecule
NGF: Factorul de creştere neurală (neural growth factor)
NF-ATc: Factor nuclear de activare al limfocitelor T (nuclear factor of activate T
NO: cells)Oxid nitric
PG: Prostaglandine
PMN: Leucocite polimorfonucleare
PTK: Protein tirozin kinază
PTP: Protein tirozin fosfatază
PLC: Fosfolipaza Cy1
PIP2: Fosfatidil inozitol difosfat
P: Trombocite-plachete
NK: Celulă spontan ucigaşă (natural killer)
SAM: Factor de armare specific al macrofagului (specific macrophage arming
factor)
SOD: Superoxid
Tc: Limfocit T citotoxic
TCR: Receptorul de antigen al limfocitelor T (T-cell receptor)
TD: Toxina dermatitei exfolitive
TGF: Factorul de creştere transformant (transforming growth factor)
Th: Limfocit T helper
TNF: Factorul de necroză tumorală (tumour necrosis factor)
Ts: Limfocit T supresor
TSST-I: Toxina sindromului de şoc toxic
Tx: Tromboxan
V: Regiune variabilă a imunoglobulinei
VCAM: Molecula de adeziune vasculară
V-CAM1: Vascular cell adhesion molecule1
VEC: Celulele endoteliului venulelor postcapilare
VGF: Factor de creştere vasculară
VLA: Antigen de activare (integrină) care apare târziu (very late antigen)
vWf: Factor von Willebrand
Capitolul 1
IMUNITATEA – NOŢIUNI GENERALE
1.1. Istoric
3.3.1. Antigene TD şi TI
Tabelul 3.I.
Criteriile de clasificare ale antigenelor (V.Cristea 1999)
1 În raport cu capacitatea de - Ag complete
a induce reacţii imune şi - Ag incomplete (haptene)
de a reacţiona cu anticorpii
(sau TCR) in vitro:
2 În raport cu modul de - Natural (există ca atare)
formare: - Sintetice (obţinute în laborator)
3 În raport cu originea: - Animale (proteine, glicoproteine,
lipoproteine,
fosfolipide, acizi graşi)
- Vegetale (proteine, glicoproteine)
- Bacteriene, virale (proteine,
4 În funcţie de sursa Ag: - glicoproteine,
Externă (exogene)
- Internă (endogenă, din interiorul organismului prin
denaturarea sau îmbătrânirea propriilor structuri)
5 În raport cu gradul de - Autoantigene (proprii ale individului)
înrudire genetică: - Ag singene (izologe) comune indivizilor din aceeaşi
specie care sunt genetic identici – fraţi gemeni,
univitelini
- Aloantigene (omologe) comune indivizilor din
aceeaşi specie care sunt genetic diferiţi
- Xenoantigene aparţinând unor specii diferite
6 În funcţie de intensitatea - Slab imunogeni (lipidele, acizii nucleici)
răspunsului imun: - Puternic imunogeni (proteine, glico sau
7 În funcţie de necesitatea lipoproteine)
- TD (T dependente) – pentru producerea Ac au
participării LT: nevoie de cooperarea cu LT helper
- TI (T independente) – pentru producerea Ac nu este
necesară cooperarea cu LT helper:
De tip 1 acţionează ca mitogeni (activatori
policlonali), lecitine (PWM), LPS bacteriene
(endotoxine)
De tip 2 produc activarea LB prin legarea
încrucişată a BCR: polizaharide bacteriene,
levan, dextran, galactan -> IgM
8 În funcţie de forma sub - Ag solubile (libere)
care apar: - Ag celulare
Xenoantigenele. Cu cât cele două specii sunt mai puţin înrudite, mai
îndepărtate pe scara evoluţiei, cu atât reacţia imună este mai puternică. Multe proteine
ale mamiferelor sunt asemănătoare, deoarece aparţin unui nivel evolutiv mai recent,
dar se deosebesc foarte mult de cele ale bacteriilor.
Antigenele diferite ale unei specii faţă de alta sunt denumite xenoantigene
(izoantigene), iar indivizii speciei respective sunt xenogenici faţă de altă specie
(şoarecii sunt xenogenici faţă de om). Specificitatea de specie se referă la antigenele
comune în cadrul aceleaşi specii (cele de pe suprafaţa celulară a leucocitelor,
eritrocitelor, a muşchilor striaţi, etc.)
Aloantigenele – sunt caracteristice numai anumitor grupe de indivizi care
aparţin aceleiaşi specii. Antigenele respective se numesc aloantigene, iar persoanele
sunt alogenice. Astfel de Ag se întâlnesc la nivelul celulelor sistemului limfatic, pe
lanţurile grele ale imunoglobulinelor, pe hematii, la diferite tulpini de bacterii sau
unele virusuri.
Antigenele organ-specifice. Unele antigene sunt caracteristice pentru
anumite organe, indiferent de specia animalului de provenienţă. Ficatul şi cristalinul,
spre exemplu, posedă antigene specifice, care sunt prezente pe ficatul sau cristalinul
altui individ şi nu se regăsesc în alte organe ale aceluiaşi individ.
Antigenele dependente de stadiu evolutiv, sau de dezvoltare ontogenică, se
raportează în principal la celulele organismului care aparţin sistemului limfatic. Lt sau
LB aflate în stadiile imature de dezvoltare exprimă unele antigene de membrană care
dispar când ajung la maturitate, sau există antigene caracteristice celulelor mature,
imunocompetente (CD3, respectiv mIgD) care sunt absente în cele imature. Unele
antigene, denumite oncofetale, sunt prezente în timpul dezvoltării fetale (intrauterine)
dar ulterior dispar. Reapariţia lor la adulţi se poate produce în unele forme de cancer:
alfa fetoproteina (AFP) în cancere de ficat, antigenul carcioembrionar (ACE) în
cancere de colon.
După originea lor antigenele naturale pot fi clasificate în mai multe categorii:
3.8. Imunizarea
Rezumat
Antigenele corespund tuturor substanțelor capabile să declanșeze un răspuns
imun specific celular sau umoral. Structura recunoscută sau epitopul cuprinde o parte
poliozidică rigidă de 5 sau 6 oze sau o parte peptidică continuă sau discontinuă de 15
aminoacizi care pot veni în contact cu paratopul anticorpului. Antigenul complet
cuprinde una/mai multe porțiuni purtătoare care se pot cupla cu moleculele MHC și
una/mai multe specificități recunoscute de TCR sau de lg. Imunizarea permite
producerea de imunoseruri specifice policlonale, pornind de la un limfocit B specific
fuzionat cu o celulă imortalizată și amplificat prin cultura in vitro
Capitolul 4
MODALITĂŢILE DE APĂRARE
A ORGANISMULUI
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
Factorii care asigură rezistenţa naturală sunt pasivi şi activi. Factorii pasivi
sunt cei tisulari – barierele naturale în calea invaziei microbiene – iar cei activi pot fi
umorali sau celulari.
Factorii umorali sunt factori activi care asigură rezistenţa naturală şi sunt
prezenţi în sânge, limfă, lichid articular, lichid cefalorahidian, diverse secreţii (lapte,
salivă, lacrimi). Cei mai bine caracterizaţi şi mai importanţi factori umorali sunt:
lizozimul, properdina, sistemul complement, lizina, spermina.
Lizozimul este o enzimă care degradează pereţii microbieni prin scindarea
legăturilor glicozidice, ceea ce duce la permeabilizarea membranei şi distrugerea
agentului patogen prin şoc osmotic. Enzima este produsă de celulele fagocitare,
macrofagele şi neutrofilele, prezente în aproape toate ţesuturile şi fluidele
organismului, cu excepţia urnii, transpiraţiei, umorii apoase. Lizozimul protejează
mucoasele nazală, bucală, conjunctivală şi corneea împotriva bacteriilor.
C= O
SH C=O
OH O
Suprafaţă bacteriană
R=NH2 sau OH
Nivelul C3b este controlat în două moduri: C3b este instabil în soluţie şi
factorul B este uşor înlocuit cu factorul H, complexul C3bH este susceptibil la
degradare prin factorul I (factor inactivator al C3b), care clivează C3b în fragmentul
inactiv biologic iC3b şi C3f şi apoi C3c şi C3dg. Factorul I este o serin protează
prezentă şi activă în mod normal în plasmă. Dacă C3b se depune pe suprafaţa
celulelor autologe este rapid inactivat prin acţiunea factorilor H şi I
Spre deosebire de aceasta, depozitarea C3b pe suprafeţele microbiene (de
pe care lipsesc proteinele reglatoare), duce la legarea factorului B şi formarea
convertazei active C3bBb. Bacteriile fixează pe suprafaţa lor formată din
carbohidraţi convertaza C3, stabilizând-o şi în acest mod protejând fragmentul C3b
de intervenţia factorului H. Properdina acţionează ulterior pe convertaza legată la
suprafaţa bacteriei, stabilizând-o şi mai mult.
Calea alternă furnizează şi un mecanism intrinsec de amplificare pentru
sistemul complement, prin faptul că fragmentele C3b generate şi depuse pe
suprafaţa bacteriană formează noi convertaze C3.Cum C3b poate fi generat şi pe
cale clasică, se poate produce activarea căii alterne, care va amplifica şi calea
clasică.Unele dintre moleculele C3b generate de convertaza C3 a căii aeriene se
leagă la C3 convertaza depusă pe suprafaţa bacteriană, rezultând complexul
C3bBbC3b. Acest complex reprezintă C5 convertaza căii alterne, având funcţia
de a cliva C5. Din acest moment, calea alternă şi cea clasică converg (calea post
C3). Convertaza C5 clivează factorul C5 în două fragmente: C5a (eliberat în
plasmă) şi C5b. C5b este legat slab la C3b şi duce la ataşarea rapidă, neenzimatică,
a C6 şi C7 la C5b. Complexul C5bC6C7 este slab legat pe membrana bacteriei, dar
are afinitate pentru lanţul peptidic al C8. Lanţul al C8 se inseră în
membrana bacteriei şi generează modificarea conformaţiei C9,
care se transformă într-o moleculă amfipatică capabilă să se insereze
în bistratul lipidic. În continuare, C9 polimerizează şi se formează o
structură anulară, numită MAC (membrane attack complex) care
permite pătrunderea în celulă a apei şi electroliţilor. Datorită presiunii
coloid osmotice intracelulare mari apare un influx net de sodiu şi apă
care duce frecvent la liza osmotică a celulei.
Există mai multe tipuri de receptori pentru complement, dintre care unii
(CR1, CR2, CR3, CR4) reacţionează cu fragmente mari (C3b) şi stimulează
fagocitoza patogenilor opsonizaţi, iar alţii sunt specifici pentru fragmentele mici
(C5a, C3a, C4a) cu rol în procesul inflamator.
Receptorii pentru complement de pe suprafaţa eritrocitelor umane au rol în
îndepărtarea complexelor imune care conţin C3b, C4b pe suprafaţa eritrocitelor şi
transportul lor la nivelul ficatului şi splinei unde sunt îndepărtate de către fagocite.
Sistemul complement are multiple efecte biologice, dintre care cele mai
importante sunt: opsonizarea (se augmentează fagocitoza acestuia de către celulele
fagocitare), chemotacismul (eliberarea unor componente în cursul activării ce atrag
celulele fagocitare), liza agentului patogen (se realizează distrugerea sa).
4.1.3.2. Eozinofilele
lizozomale nucleu
Fig.4.VI. Chemotaxia
Bacterie opsonizată
cu Ig
Fig. 4.VII. Aderenţa
lizozom
Fig.4.VIII. Ingestia
Mecanisme oxigen-dependente:
Evenimentele metabolice din timpul fagocitozei se însoţesc de un puseu al
metabolismului respirator al celulei, care duce la producerea unor metaboliţi
toxici ai oxigenului. În primul rând apare o creştere dramatică a activităţii
şuntului hexoz-monofosfaţilor, prin care se generează NADPH (nicotinamid
adenin dinucleotid fosfat). NADPH-ul este utilizat pentru reducerea oxigenului
molecular legat de un tip unic de citocrom din membrana plasmatică (cyt b 558).
Oxigenul este consumat şi convertit în anion superoxid (oxigen molecular care
a captat un electron în plus), O2 singlet, peroxid de hidrogen (H 2O2) şi radicali
hidroxil (OH). Toţi aceşti compuşi sunt agenţi microbicizi puternici.
Combinaţia peroxid, mieloperoxidază şi compuşi halogenaţi (ioni de clor)
constituie un sistem de halogenare foarte puternic, capabil să distrugă atât
bacterii cât şi virusuri.
Macrofagele secretă substanţe cu rol în apărare cum sunt citokinele
chemotactice (chimiotactice), care atrag alte celule inflamatorii mai ales PMN,
responsabile de efectele sistemice ale inflamaţiei (IL-1, TNF, IL-6, IFN- ), şi
alte produse biologice active: componente ale sistemului complement, diverşi
factori ai coagulării (IX, X, V, VII), lipaze, eritropoietină, etc.
Macrofagele au şi o funcţie imună foarte importantă, cu rol în apărarea specifică
a organismului, care se corelează nemijlocit cu cea fagocitară. Spre deosebire de
neutrofile, digestia antigenului se realizează cu menajarea epitopilor, care apoi
pot să fie prezentaţi pe suprafaţa membranei, macrofagele funcţionând ca celule
prezentatoare de antigen (APC- antigen-presenting cells). Î afară de rolul APC,
macrofagele produc mediatori (citokine) cu rol în stimularea proliferării şi
diferenţierii limfocitelor, precum şi molecule costimulatoare.
Macrofagele activate pot exercita un efect citotoxic direct sau prin intermediul
anticorpilor asupra celulelor străine sau tumorale.
4.1.3.6. Celulele NK
Este o stare caracterizată prin lipsa unei reacţii specifice a ţesutului limfoid
faţă de un antigen, când acesta este administrat în anumite doze, într-un anumit ritm
şi/sau pe o anumită cale de inoculare. Această stare este se asociază cu păstrarea
capacităţii organismului de a răspunde imun la toate antigenele, în afara celui care a
indus-o. Prima descriere a sa a fost făcută de Paul Ehrlich în anul 1900.
Există mai multe tipuri de toleranţă imunologică
PFc'
carbohidrat
Fig.5.IV. Structura monomerului de imunoglobulină. (E. Carasevici)
Lanţul J (joining chain) este constituit din 137 de aminoacizi (215 kDa) şi
are rol în polimerizarea moleculelor de imunoglobuline: IgA formează dimeri (şi
uneori tetrameri), iar IgM pentameri (şi uneori hexameri). Lanţul J este produs de
aceeaşi celulă b care sintetizează imunoglobulinele şi conţine multe cisteine (minim
6). Genomul uman şi cel murin conţin o singură genă pentru lanţul J, genă care nu
este înlănţuită cu nici unul din locii genelor pentru imunoglobuline. Secvenţa de
aminoacizi a lanţului J nu este semnificativ înrudită cu cea a domeniului
imunoglobulinic. Oricum, se pare că lanţul J are o structură tip - barrel.
Fig.5.VII. Structura dimerului de IgA
Tabelul 5.I.
Antigenicitatea imunoglobulinelor umane
Localizare
Denumire Lanţul Domeniu Localizare Altă denumire
Izotipică Lanţuri Domenii (1-4), (1-2) , , , Clasă, subclasă
grele constante Tip, subtip
Lanţuri Domenii şi (1-4)
uşoare constante
Alotipică Lanţuri Domenii C1,C2,C3,C4; G1m-G4m; A2m
grele constante C2 Km(1-4)
Lanţuri Domenii C
uşoare constante
Idiotipică Lanţuri Ambele Idiotip (anti-
grele domenii HV şi LV CDR2, anti-
Lanţuri variabile CDR3)
uşoare
Fiecare antigen poate avea mai mulţi epitopi (un mozaic de epitopi), care vor
provoca sinteza unor anticorpi diferiţi, iar aceştia vor induce formarea de diverşi Ac
anti-idiotipici, dând naştere unei adevărate cascade idiotipice.
Interacţiunile dintre anticorpii anti-idiotip-idiotip vor crea o reţea de
comunicaţie moleculară cu rol important în reglarea răspunsului imun, după teoria
elaborată de N. Jerne în 1974.
Ac-2, anti-idiotip, reacţionează cu diferiţi idiotipi ai Ac-1 (segvenţionali sau
conformaţionali); dintre aceştia unii nu împiedică legarea Ac-1 de Ag deoarece
recunosc o asociere VH-VL distinctă de paratop. Alţii inhibă interacţiunea dintre epitop
şi paratop prin legarea de secvenţele de AA care participă direct la formarea
paratopului, sau de secvenţele aflate în imediata vecinătate a paratopului. Cei care nu
inhibă legarea Ag-ului nu au nici un efect. Ceilalţi pot fi folosiţi ca antagonişti (prin
inhibarea legării) ai unor mediatori (hormoni, medicamente, neurotransmiţători, etc.).
Anticorpii care mimează epitopul antigenului, se comportă ca o imagine internă a
antigenului” şi pot fi utilizaţi în vaccinare sau ca agonişti ai mediatorilor.
solubile
precipitare, dacă Ac şi Ag sunt cel puţin bivalenţi şi solubili
aglutinare, atunci când Ag sunt particule mari (eritrocite, bacterii)
neutralizare, în cazul toxinelor şi al virusurilor .
Funcţia efectoare reprezintă porţiunea de manipulare a anticorpului şi este
dependentă de izotipul imunoglobulinei.
După legarea Ag, la nivelul C H2 (CH3 în cazul IgM şi IgE) devin accesibile
zonele de legare ale fracţiunii C1q a complementului, ducând la activarea în
cascadă a acestuia, pe calea clasică, având ca efect final liza celulelor străine.
Prin intermediul domeniului CH3, fragmentul Fc se leagă de receptorii Fc (FcR)
situaţi pe leucocite (neutrofile, eozinofile, monocite, celule NK), precum şi pe
trombocite şi macrofage (citoadeziune). Au fost evidenţiate 3 tipuri de receptori
pentru IgG (FcR): FcRI (CD64), FcRII (CD32), FcR III (CD16) şi două
pentru IgE: FcRI şi FcRII (CD32). Prin legarea Ac de Fc R este favorizată
opsonizarea, fagocitoza microbilor şi degranularea neutrofilelor. Un rol
important îl constituie implicarea în ADCC (citotoxicitatea celulară dependentă
de anticorpi) realizată prin legarea Ac de Fc R de pe celulele NK, macrofage
sau neutrofile. Fixarea de FcR intervine în transportul şi catabolismul IgG,
precum şi în transferul transplacentar, de la mamă la făt, a IgG. Prin
intermediul FcRI şi FcRII, IgE se leagă de bazofile şi mastocite, intervin în
degranularea acestor celule şi eliberarea unor factori implicaţi în inflamaţi, în
citotoxicitatea antiparazitară şi hipersensibilitatea imediată. Au mai fost
descrişi receptori pentru Fc al IgM (pe celulele NK, unele limfocite B şi unele
fagocite activate), IgA (pe monocite, neutrofile) şi IgD (unele limfocite T).
5.11.1. Imunoglobulina G
Imunoglobulinele reprezintă circa 20% din totalul proteinelor serice. IgG ste
imunoglobulina majoritară în ser, reprezentând aproximativ 70-75% din totalul
anticorpilor din ser, cu o concentraţie de 1250 mg/100 ml, cu
variaţii individuale normale între 800 – 2000 mg/100 ml.
Imunoglobulinele G apar mai târziu în cursul răspunsului imun primar, după
IgM, dar sunt produse rapid, ca anticorp principal, în răspunsul secundar. IgG este
singura care poate traversa bariera placentară şi de aceea exercită protecţia
antiinfecţioasă la făt şi apărarea la nou-născut. Este formată din 2 lanţuri grele şi 2
lanţuri uşoare identice: sau . Ca la toate imunoglobulinele, conţine glucide (sau
glicoproteine), care la IgG sunt în cantitate de 2-3% şi sunt fixate pe domeniul C H2.
La om există 4 tipuri de lanţuri grele , cu diferenţe structurale şi funcţionale minore
între ele, denumite 1, 2, 3, 4, care formează subclaselel IgG1, IgG2, IgG3 şi
IgG4.
Fig.5.VIII. Modelul structural al IgG1. Domeniile variabile ale celor două catene
(VH şi VL) formează situsul de legare a antigenului. Cercurile negre indică poziţia
grupărilor glucidice. HR = regiunea balama.
Proprietăţile biochimice şi chimice:
Cele mai multe subclase ale IgG au o greutate moleculară de 150 kDa (IgG3 are o
greutatea de 170 kDa);
În ser majoritatea IgG este dată de IgG1;
Imunoglobulinele G prezintă o mare afinitate pentru legarea antigenului;
IgG difuzează mai rapid decât alte clase de imunoglobuline în spaţiile
extravasculare şi are afinitate mare pentru antigenul specific. Din aceste motive
imunitatea antitoxică este realizată exclusiv de IgG (neutralizarea toxinelor
bacteriene);
La om IgG este singura imunoglobulină care poate traversa bariera placentară;
IgG constituie anticorpul produs majoritar în răspunsul imun secundar;
Moleculele de IgG pot activa complementul pe cale clasică. Situsul de legare a
componentului C1q este plasat în domeniul CH2 şi conţine trei reziduuri cu sarcini
electrice la suprafaţa proteinei (318-acid glutamic), 320 – lizină, 322- lizină).
Complexele formate din bacterii şi molecule de IgG declanşează activarea căii
clasice atunci când cel puţin două regiuni Fc complexate cu antigenul, leagă C1q.
Timpul de înjumătăţire al IgG este de aproximativ 21 de zile;
IgG este principala imunoglobulină opsonizantă implicată în fagocitoză;
neutrofilele au receptori pentru fragmentele Fc ale IgG1 şi IgG3.
5.11.1.1. Receptorii Fc
5.11.2. Imunoglobulina M
5.11.3. Imunoglobulina A
Unitatea de bază a structurii IgA este monomerul, alcătuit din două catene
grele (H) cu specificitate de clasă (izotipică) a şi două catene uşoare (L) de tip l sau k.
Unitatea monomerică (l)2 sau (a-k)2 are o tendinţă constantă de a produce
structuri moleculare polimerice, formate din 2, 3, 4 sau 5 monomeri (10S, 13S, 15S,
respectiv 17-18S), care în ser se găsesc în concentraţii descrescânde.
La microscopul electronic, molecula de IgA monomeră are aspectul literei Y.
Complexele dimerice au forma a două litere Y, aşezate una în prelungirea celeilalte.
Cele două fragmente Fc formează un lanţ lung şi rigid.
IgA se găseşte atât în plasma sanguină, cât şi în secreţiile externe: salivară,
lacrimală, gastrică vaginală, intestinală, biliară, pancreatică, lactată.
Pe baza unor diferenţe de structură moleculară (numărul punţilor S-S,
secvenţa aminoacizilor în regiunea balama) au fost descrise două subclase de IgA:
IgA1 şi IgA2. Ele diferă prin 22 de aminoacizi, în primul rând datorită deleţiei a 13
aminoacizi din regiunea balama a IgA2, dar care se găsesc la IgA1. Această diferenţă
structurală conferă rezistenţă moleculei de IgA 2 la acţiunea unor proteaze bacteriene,
care clivează specific IgA1 în regiunea balama.
În funcţie de localizare se disting două forme: IgA serică şi IgA secretorie.
1. IgA serică, cu o concentraţie de aproximativ 200 mg/dl, reprezintă 15-
20% din anticorpii serici.
IgA serică este monomeră, are greutatea moleculară de 160 kDa. Sub formă
polimerizată, mai ales dimerică, se găseşte în secreţii sero-mucoase: salivă, mucus
bronşic, mucus intestinal, colostru şi lapte, lacrimi şi joacă un rol principal în apărarea
mucoaselor prin: neutralizarea unor toxine, aglutinarea
microorganismelor (bacterii, ciuperci) şi modificarea aderenţei anumitor germeni,
împiedicând astfel penetrarea lor în sânge, prin epiteliul mucoaselor.
Fig.5.IX. Structura IgA1 umană. Sunt indicate poziţiile punţilor disulfurice inter- şi
intracatenare, precum şi poziţia ipotetică a catenelor polizaharidice. O punte
disulfurică suplimentară stabilizează domeniul C a 2 şi o alta leagă lanţul J în
polimerul de IgA.
Structura: la om peste 80% din IgA serică există ca monomer. Restul se află
sub formă de dimer. În forma polimerică, unităţile de monomer sunt reunite prin
legături disulfidice şi prin lanţul J.
5.12.1. Domenii
hv c sg hv C Sg
VH hv-hipervariabilitate; c-zone cu puncte invariante; sg-zone cu subgrupe de
aminoacizi
hv c sg hv C Sg
VL
5.12.2.1. Structură
Situsul combinativ cuprinde regiunea fragmentelor Fab la nivelul lanţurilor
VH şi VL vecine. El ocupă 1% din întreg edificiul molecular al imunoglobulinei. Prin
difracţie cu raze X, s-a stabilit că situsul poate îmbrăca forme diferite, în funcţie de
specie. La om situsul se prezintă ca o regiune plată (25x20 Å), prevăzută cu o
invaginare superficială, din care sunt proiectate în afară grupările terminale ale
aminoacizilor din domeniile cooperante de pe VL şi VH.
5.12.2.2. Funcţionalitate
După clivarea enzimatică in vitro a moleculei imunoglobulinice IgG, s-a
constatat că punerea în contact, separat, a lanţurilor H sau L cu antigenul
corespondent, este urmată de o legare labilă, slabă a acestuia. Dacă antigenul este
supus contactului cu amestecul de lanţuri H şi L provenite din aceeaşi
imunoglobulină, legarea este stabilă, similară celei din situaţia folosirii moleculei
iniţiale de IgG (neclivată enzimatic). Aceasta demonstrează indirect, necesitatea
cooperării lanţurilor H şi L, în regiunile variabile ale acestora, la efectuarea cuplării
specifice cu antigenul.
În cursul legării antigenului (haptenei), punctelor “calde” (zonelor
hipervariabile)le revine rolul principal, de “prindere în chingă” a epitopilor. Zonele cu
puncte invariabile joacă rolul de “pivot”, asigurând plierea spaţială a VL şi VH aflate
faţă în faţă, în cadrul aceluiaşi fragment Fab.
Zonele cu subgrupe de aminoacizi acţionează în calitate de catalizatori, în
sensul că ele asigură desfăşurarea optimă, plenară, a fenomenului de legare specifică a
antigenului.
5.12.3.1. Afinitatea
Afinitatea poate fi definită prin constanta de legare a unui situs combinativ
imuglobulinic cu antigenul corespondent (epitopii haptenei). Fenomenul este, până la
un punct, reversibil, apoi, în timp, legătura devine stabilă. În faza reversibilă există un
echilibru între formarea de complexe anticorp/antigen şi numărul de situsuri
combinative imuglobulinice, epitopi ai antigenului, care nu au intrat încă în relaţie
specifică.
Afinitatea depinde de clasa imunoglobulinică. Astfel legătura specifică IgG-
antigen este mult mai stabilă şi mai puternică decât legătura specifică IgM- antigen.
Afinitatea mai depinde însă şi de caracterul stimulării antigenice. Astfel dacă
stimularea se face cu un imunogen puternic şi în doze mari, celulele limfoide B, prin
receptorul BCR, se diferenţiază pentru sinteza finală a unor anticorpi cu afinitate mai
slabă. Dacă stimularea antigenică se efectuează cu doze reduse, apar anticorpi cu
afinitate mare. În acest mod este explicat de ce după aplicarea unei vaccinări, prin
scăderea treptată a concentraţiei de antigen vaccinat din ţesuturi, cu cât trece mai mult
timp de la momentul aplicării imunizării active, cu atât apar anticorpi cu afinitate mai
puternică.
Metoda de măsurare a afinităţii anticorpilor este dializa la echilibru. Metoda
se bazează pe proprietatea haptenelor mici, monovalente (care nu dau reacţii de
precipitare cu anticorpii specifici), de a traversa membrana de dializă, impermeabilă
pentru anticorpi, ca şi pentru complexele haptenă-anticorpi.
Soluţia concentrată de anticorpi se repartizează într-un sac de dializă şi se
imersează într-un volum cunoscut de soluţie tampon, la pH 7,4, ce conţine o
concentraţie cunoscută a haptenei. Haptena liberă difuzează prin membrană, în
compartimentul cu anticorpi şi se combină parţial cu aceştia. La echilibru, se măsoară
concentraţia haptenei libere la exterior, egală cu concentraţia haptenei libere din
interior. Concentraţia totală a haptenei în sacul de dializă este mai mare, deoarece o
proporţie a moleculelor sale este legată de anticorpi.
Diferenţa dintre concentraţia iniţială şi cea finală a haptenei, în
compartimentul exterior, măsoară afinitatea ei de legare cu anticorpii specifici, în
condiţiile unui exces de molecule haptenice, care favorizează disocierea complexelor
antigen-anticorp.
5.12.3.2. Aviditatea
Aviditatea reprezintă energia de combinare specifică a moleculei de
imunoglobulină cu epitopii antigenului corespondent. Este uşor de înţeles că
aviditatea depinde de numărul de situsuri combinative per moleculă
imunoglobulinică, deci de valenţă. De aceea moleculele IgM sunt mai avide, ele fiind
pentavalente, comparativ cu moleculele IgG care sunt bivalente.
Factorii extrinseci sunt reprezentaţi atât de allotip (linia genetică) cât şi de timpul
constituţional – metabolic.
G ).
4m
Markerii lanţurilor grele sunt desemnaţi Am; există doar două alele la acest locus:
Am1 şi Am2.
Markerii lanţului uşor sunt desemnaţi Km. Acest locus are trei alele şi markerii
Km diferă doar prin aminoacizii din poziţiile 153 şi 191. Iniţial markerii au fost
numiţi Inv, după sursa antiserului utilizat pentru identificarea unuia din produşii
genelor alele.
Şi lanţul greu prezintă variaţie alelică, desemnată prin markerul Mm.
Tabelul 5.III.
Diferenţele dintre caracterele anticorpilor monoclonali şi cei policlonali,
convenţionali
Anticorpi monoclonali Anticorpi policlonali
Monospecifici Polispecifici
Omogeni (clasă, subclasă de Ig) Hetrogeni (clasă, subclasă de Ig)
Titruri înalte (1:1.000.000) Titruri mult mai joase (mx. 1:1.000-1:10.000)
Specificitate riguroasă (prin Au mulţi Ac contaminaţi greu de îndepărtat
selecţionare)
Sunt “nemuritori”, cantităţi nelimitate Cantităţi limitate, depind de viaţa animalului
imunizat
Constanţi Inconstanţi, variabili de la un animal imunizat la
altul
Concentraţii mari de Ig specifice (1-10 Concentraţii mici de Ig specifice (0,5-1% din
mg/ml) totalul Ig)
Se pot produce cu Ag nepurificate Sunt necesare Ag foarte purificate (altfel apar Ac
(molecule, celule) contaminaţi faţă de diferitele impurităţi – ale Ag)
Toate clasele de imunoglobuline pot să existe atât sub formă membranară cât
şi secretată, dar în procentaje diferite, mergând de la 10% din total în cazul IgM şi
IgD până la sub 1% pentru IgG, sau la limita decelabilităţii la IgA şi IgE.
Spre deosebire de anticorpii solubili, lanţurile H posedă în partea C-
terminală, o secvenţă de AA suplimentari sau o coadă, foarte scurtă. Ei sunt formaţi
dintr-o regiune extracelulară, una transmembranară hidrofobă şi una
intracitoplasmatică.
Proteinele membranare cu rol de receptori transmit informaţia primită, în
urma fixării ligandului specific, în interiorul celulei. Intracelular există o cascadă de
complexe moleculare de semnalizare care transmit mesajul mai departe în interiorul
citoplasmei, deseori până în nucleu, permiţând intrarea în funcţie a mecanismelor de
răspuns, specific pentru fiecare tip de celulă. În cazul celulelor B, legarea Ag a BCR
iniţiază diviziunea repetată a celulelor (expansiunea clonală) şi diferenţierea
acestora în plasmocite, celule care secretă anticorpii, proces cunoscut sub denumirea
de activarea limfocitelor B.
Simpla legare a Ag de imunoglobulinele transmem-branare nu este suficientă
pentru activare, pentru că porţiunea intracitoplasmatică a acestuia este prea scurtă
pentru a interacţiona cu proteinele necesare pentru semnalizarea intracelulară.
Receptorul complet al limfocitelor B cuprinde în plus două molecule identice
dispuse de o parte şi de alta a mIg. Fiecare moleculă este heterodimeră, fiind formată
din 2 lanţuri polipeptidice invariabile (Ig şi Ig) legate între ele printr-o legătură
disulfidică (CD79). În absenţa acestor molecule nici imunoglobulinele de membrană
nu pot fi exprimate pe suprafaţa limfocitelor B.
Sistemul imun trebuie să fie capabil să recunoască virtual orice patogen deja
existent sau posibil să apară la un moment dat, fapt care depinde de specificitatea
anticorpilor.
Un limfocit poate sintetiza anticorpi cu o singură, anumită, specificitate, el
fiind preprogramat pentru aceasta. Evenimentele responsabile de generarea din
plasmocite a anticorpilor cu o specificitate determinată survin înainte de intrarea
antigenului în organism.
Generarea anticorpilor a avut două explicaţii:
genele pentru întreg “repertoriul” anticorpilor sunt prezente în ADN-ul liniei
germinale şi sunt moştenite de fiecare membru al speciei
câteva gene importante pentru sinteza anticorpilor sunt transmise prin intermediul
ADN-ului liniei germinale, iar cea mai mare parte a procesului de generare a
diversităţii are loc în celulele somatice, prin reorganizare somatică a genelor din
linia germinală.
Descoperirea regiunilor variabile şi constante a imunoglobulinelor a
determinat apariţia ipotezei două gene un lanţ polipeptidic. Genele din linia
germinală se reorganizează în celule somatice pentru a forma o genă completă pentru
regiunea variabilă. În continuare se produce asocierea genelor pentru regiunea
variabilă cu o genă pentru regiunea constantă, cu apariţia unui exon final, care conţine
mesajul genetic pentru unul din lanţurile imunoglobulinei.
Prin procesul de recombinare somatică (rearanjarea şi deleţia ADN-ului),
urmat de îmbinarea ARN-ului, sunt generate foarte multe linii de plasmocite variate,
care conţin informaţia genetică pentru diferite lanţuri H şi L. La generarea diversităţii
mai contribuie şi rata mare a mutaţiilor somatice ale genelor pentru lanţurile , şi H.
Un proces similar de aranjare a ADN-ului conferă receptorului celulei T specificitatea
de legare a epitopilor.
5' 3'
Secvenţă leader Exon pentru regiunea Exon pentru regiunea
variabilă constantă.
Organizarea genelor pentru lanţul uşor.
Codificarea lanţului uşor imunoglobulinic este asigurată de trei gene. Pentru
lanţul uman organizarea este:
Domeniul variabil este codificat la nivelul a două segmente genice:
- primul - V (segment variabil) – codează primii 95 de aminoacizi ai regiunii
variabile. Pe cromozomul 2 există mai mult de 200 de gene V . Fiecare segment
genic V este precedat de o secvenţă leader, care este transcrisă şi translată, dar este
excizată din proteină înainte ca molecula de anticorp să fie secretată de celula
producătoare. Această secvenţă leader este necesară pentru transportul moleculei de
imunoglobulină în reticulul endoplasmatic.
- o a doua genă, segment de joncţiune (J ), codifică restul de 13 aminoacizi
(96108) ai regiunii variabile. Acest segment J nu are nici o legătură cu lanţul J
prezent la IgM şi IgA. Există 5 segmente genice J la nivelul acestui locus.
Secvenţa de aminoacizi a regiunii constante este codată de o a treia genă C.
Pentru lanţul există o singură genă C care conţine informaţia genetică necesară
producerii aminoacizilor 109-214.
Generarea variabilităţii lanţurilor este realizată prin recombinarea somatică
a ADN-ului şi îmbinarea ARN-ului. În cursul procesului de diferenţiere a
precursorilor celulelor B în limfocite mature, deleţia ADN-ului aduce una din genele
V lângă o genă J. Acest complex V1J1, ca şi restul genelor J sunt separate de gena
pentru regiunea constantă C, printr-o secvenţă (intron) de ADN. Gena formată prin
alăturarea V1J1 codează una din numeroasele variante posibile de regiuni ale lanţului
. ADN-ul celulelor B este transcris în ARN nuclear, care este prelucrat pentru a
forma mARN-ul, în care sunt reunite V1J1 cu C, urmând translaţia în lanţul .
Organizarea genelor pentru lanţul greu
Deşi organizat similar cu lanţurile uşoare, genele pentru lanţul greu sunt mai
complex structurate, în patru grupuri distincte de segmente genice. Pentru
exemplificare se va folosi lanţul greu al IgM.
Genele pentru lanţul H trebuie să codeze 3 sau 4 domenii constante şi
regiunea balama. Regiunea genelor constante pentru lanţul H trebuie să codeze toate
cele 5 clase de imunoglobuline, şi cele 4, respectiv 2, subclase pentru IgG şi IgA.
Exonul pentru regiunea variabilă a lanţului greu este format din 3 segmente genice.
Segmentul adiţional din regiunea ADN variabilă este denumit D (diversitate).
Regiunea DH este responsabilă de producerea regiunii CDR3 a lanţului H şi codează
doar 2-3 aminoacizi. Rearanjarea genelor reuneşte iniţial un segment genic D H cu un
JH şi apoi se produce alăturarea segmentului genic V H la DJ, cu formarea exonului
VDJ. Există peste 200 de segmente genice V pentru lanţul greu, cel puţin 20 D şi 6J.
Acest număr foarte mare de gene şi combinaţii posibile stă la baza diversităţii regiunii
variabile a lanţului H.
Prin recombinarea somatică a ADN-ului şi îmbinarea ARN-ului se generează
diversitatea lanţurilor grele. În timpul diferenţierii precursorilor limfocitelor B în
celule mature, deleţia ADN-ului aduce una din genele variabile V, o genă D şi o genă
J împreună. Complexul VDJ şi genele J rămase sunt la distanţă de genele pentru
regiunea constantă, fiind separate printr-un segment de ADN. ADN-ul plasmocitului
este transcris în ARN nuclear, care este procesat pentru a forma mARN. În timpul
acestui proces este selectată gena C şi este îmbinată cu exonul VDJ. Rezultă o genă
completă care este translată în lanţ .
Procesul de recombinare a segmentelor genice se supune cu stricteţe regulii
distanţierului 12/23. Fiecare segment genic este flancat de secvenţe necodate de ADN
numite secvenţe semnal de recombinare *RSS), care arată direcţia de îmbinare a
segmentelor genice. Fiecare RSS constă dintr-o secvenţă înalt conservată, formată din
3 segmente: un heptamer (are 7 perechi de baze), un distanţier care conţine 12 sau 23
nucleotide (corespund unei , respectiv a două turnante a elicii ADN-ului) şi un
nonamer (are 9 perechi de baze). Alăturarea segmentelor genice este posibilă doar
când sunt flancate de RSS cu distanţieri de lungimi diferite.
În cazul genelor pentru lanţul uşor , secvenţele semnal de recombinare
plasate peste 3' de segmente genice V au un distanţier din 12 nucleotide, în timp ce
RSS aflate 5' de segmentele genice J au un distanţier din 23 de nucleotide, acest fapt
permite recombinarea VJ.
Genele pentru lanţul uşor respectă aceeaşi organizare, cu deosebirea că
distanţierii sunt inverşi dispuşi (cel cu 12 nucleotide precede segmentele genice J, iar
cel din 23 de nucleotide succede segmentele genice V).
Recombinarea genelor pentru lanţul greu este mai complexă datorită
intervenţiei a trei segmente genice, V, D, J. Distanţierii care flanchează segmentele
genice V şi J au câte 23 de nucleotide, iar segmentele genice D sunt flancate la
ambele capete de RSS cu distanţieri din 12 nucleotide. Pentru respectarea regulii
distanţierului 12/23 se pot recombina doar segmente D-J şi V-DJ.
Recombinările VJ şi VDJ
Mecanismul recombinărilor segmentelor genice ale lanţului greu, prezintă în
plus faţă de cel a lanţului uşor, două rearanjarări (D-J şi apoi V-DJ) pentru formarea
exonului complet al regiunii variabile a lanţului greu, în rest cele două mecanisme
fiind similare.
Recombinarea presupune formarea unei bucle a ADN-ului cuprins între cele
două segmente genice care urmează să se alăture, urmată de excizia ADN.
Segmentele semnal de recombinare RSS, care flanchează segmentele genice care se
vor rearanja, se alătură, acest proces fiind mediat de proteine care recunosc lungimea
distanţierilor din RSS. Apoi, ADN-ul este clivat şi se produce reunirea segmentelor
genice. Clivarea şi reunirea catenelor de ADN sunt realizate de endonucleaze şi
ligaze. Joncţiunea segmentelor genice este imprecisă, constituind una din sursele
generării diversităţii anticorpilor. Heptamerii se unesc rezultând o piesă circulară de
ADN (conţine exonii şi intronii cuprinşi între cele două segmente genice care s-au
recombinat), care este pierdută din genom.
În limfocitele pre-B de la şoarece au fost identificate două gene cu rol în
procesul de recombinare a genelor pentru imunoglobuline gene activatoare ale
recombinării (RAG-1, RAG-2) care codează proteine ce recunosc secvenţele semnal
de recombinare. Aceste procese sunt active doar în stadiile precoce ale maturării
celulelor B (şi T), astfel fiind asigurată specificitatea limfocitelor.
Genele pentru receptorul celulei T pentru antigen (TCR) sunt organizate
similar celor pentru imunoglobuline. În cursul maturării în timus, genele pentru TCR
se recombină printr-un mecanism similar celui de la imunoglobuline.
Proliferările tumorale.
Erorile survenite în rearanjarea genelor pentru imunoglobuline contribuie la
generarea unor tumori maligne ale limfocitului B.
Limfocitul folicular este cea mai frecventă tumoră malignă derivată din
celulele B, prezintă translocaţia unei proto-oncogene, bcl-2, de pe cromozomul 2 în
regiunea genelor pentru lanţul H al cromozomului 14. Această proximitate dintre bcl-
2 şi regiunea activă a genelor pentru lanţul H al imunoglobulinelor duce la creşterea
expresiei proto-oncogenei, care contribuie la transformarea malignă a limfocitelor B.
Limfocitul Burkitt – celulele maligne ale acestei tumori derivate din limfocite
B, prezintă o translocaţie a unei porţiuni din cromozomul 8 (care conţine o proto-
oncogenă c-myc) la nivelul cromozomului 14, în imediata vecinătate a regiunii genice
pentru lanţul H. Proto-oncogena c-myc este activată în urma translocaţiei în
vecinătatea regiunii genelor pentru lanţul greu.
Capitolul 6
COMPLEXUL MAJOR DE
HISTOCOMPATIBILITATE (MHC)
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
B C A
DP DQ DR
Gene clasa I
REGIUNEA DQ
REGIUNEA DP DQAREGIUNEA
2 DR
DQB2
DPB1 HLA-DMBDQ3 DR DRA DQB1
DPB2 DPBA2 DP3 A1 TAP1 DQA1
KE3 DN
A
Gene clasa II
Bf
21A
HSP-70
C4B Fig.6.II. Organizarea2schematică
1 a genelor HLA
TNF
21B C4A C2
Pe lângă genele clasice există gene neclasice DM, DN, DO, gene care
controlează anumite etape ale procesării Ag-ului în APC (transportorul de peptide
SPRE CENTROMER
TAP-1, TAP-2)
Gene clasa III în strânsă asociere cu genele LMP-2 şi LMP-7 (care codifică
componente ale proteasomilor – un complex de enzime proteolitice), precum şi
pseudogene.
Regiunea MHC de clasa III, care este situată între regiunile MHC-I şi II,
cuprinde alte gene care codifică proteine cu funcţii imune:
Proteine ale sistemului complement: C2, Bf (factor B), C4A, C4B
Gena 21 – steroid hidroxilazei – implicată în sinteza hormonilor steroizi;
Genele pentru două citokine - TNF şi TNF
Două proteine de şoc caloric HSP70.2, HSP70.1, care au funcţie de “capişon”,
se asociază cu moleculele celulare alterate de stress, căldură, oxidare şi le
asigură transportul şi eliminarea.
HLA este un complex multigenic, multialelic (polimorf), strâns legat şi cu
o exprimare codominantă.
Caracterul poligenic este cauzat de faptul că există 3 gene pentru HLA de clasa I şi
3 perechi de gene şi pentru clasa II, care codifică proteine cu specificităţi
diferite în privinţa legării peptidelor.
Codominanţa: din fiecare halotip se exprimă câte o alelă pentru fiecare locus. De
obicei persoana este heterozigotă pentru fiecare locus. De exemplu: HLA- A5
A32. În cazul homozigoţilor (gemeni univitelini) genotipul celor trei loci va fi
identic.
Polimorfismul - pentru fiecare genă există alele multiple. Genele MHC sunt cele
mai polimorfe gene cunoscute din organism. La capacitatea sistemului imun de a
fi apt să răspundă la o multitudine de agenţi patogeni contribuie faptul că genele
MHC sunt poligenice şi polimorfe, deci pot lega o gamă largă de peptide.
Transcomplementarea – fenomen prin care apar molecule HLA hibride, cele 2
lanţuri şi , fiind codificate de gene din halotipuri diferite.
Legarea: toate genele HLA se transmit în bloc de la părinţi la copii, ca o singură
unitate denumită haplotip; descendenţii vor avea deci o jumătate de haplotip de la
mamă şi una de la tată.
Dezechilibre de legare se referă la legarea mai strânsă între alela unui locus şi
alela altui locus. Aceste fenomene sunt frecvente în anumite populaţii A1-B8-
DR3 sau A3-B7-DR2.
Tabelul 6.I.
Denumirea MHC la diferite specii animale (V. Cristea)
Specia animală Simbolul Semnificaţia simbolului
Om HLA Human leucocyte antigen
Şoarece H-2 Histocompatibility-2
Cobai GPLA Guineea pig leucocyte antigen
Iepure RLA Rabbit leuxoxyte antigen
Câine DLA Dog leucocyte antigen
Şobolan RTI Rat transplantation I
Oaie OLA Ovine leucocyte antigen
Cimpanzeu ChLA Chimpazee leucocyte antigen
6.3.1. MHC I
endozom
lizozom nucleu
anticorpi.
Pentru producerea unui răspuns adecvat faţă de microorganismele
infecţioase este necesar atât ca celulele T să detecteze prezenţa materialului străin în
ambele compartimente celulare, dar şi ca limfocitele T să poată discrimina în cele
două compartimente. Această discriminare se realizează prin transportul la suprafaţa
celulelor a peptidelor provenite din patogeni care se dezvoltă în compartimente
celulare diferite de către doua clase distincte de molecule MHC: Moleculele MHC
I transportă pe suprafaţa celulelor peptide provenite din patogeni prezenţi în citosol;
complexul peptidic – MHC I exprimat pe suprafaţa celulară va fi recunoscut de către
limfocitele T CD8+;
Moleculele MHC II transportă peptide derivate din patogeni prezenţi în sistemul
vezicular la suprafaţa celulei; complexul peptid-MHC II va fi recunoscut de
celulele T CD4+.
Generarea peptidelor presupune modificarea proteinei native, proces
denumit procesarea antigenului, iar expunerea peptidelor de către moleculele MHC
pe suprafaţa celulară este numită prezentarea antigenului.
Moleculele MHC de clasă I leagă peptide care au în general 8-10 aminoacizi.
MHC de clasă II prezintă în cupă peptide de minim 13 aminoacizi sau mai lungi;
aceste peptide stau în cupa MHC II într-o conformaţie elongată şi pot să depăşească
marginile cupei MHC II, care sunt deschise la ambele capete.
Datorită faptului că virusurile pot infecta orice celulă nucleată, MHC I este
prezent pe suprafaţa tuturor celulelor nucleate, deşi nivelul expresiei acestor
molecule diferă cu tipul celular. Absenţa MHC I de pe suprafaţa eritrocitelor face din
citoplasma acestor celule un sediu în care agenţii infecţioşi nu pot fi detectaţi de
către limfocitele T. Este posibil ca tocmai absenţa MHC I de pe suprafaţa
eritrocitelor să permită supravieţuirea speciilor de Plasmodium în aceste situsuri
privilegiate.
Principala funcţie a limfocitelor T CD4 + este să activeze alte celule ale
sistemului imun. În mod normal, doar celulele care participă în răspunsul imun
exprimă pe suprafaţa moleculele MHC de clasă II. Astfel moleculele MHC II sunt
prezente pe suprafaţa limfocitelor B, a macrofagelor şi a altor celule prezentatoare de
antigen, dar lipsesc de pe suprafaţa majorităţii celulelor tisulare. Celulele T CD4 +
helper care recunosc peptide legate de moleculele de MHC II de pe suprafaţa
limfocitelor B, activează celulele B să producă anticorpi. Celulele T CD4 +
inflamatorii care recunosc peptide legate de MHC II de pe macrofage, activează
macrofagele să distrugă patogenii conţinuţi în vezicule. Moleculele MHC II sunt
exprimate şi pe celule prezentatoare de antigen specializate din ţesuturile limfatice,
unde are loc activarea celulelor T CD4 + naïve şi diferenţierea lor în limfocite T
helper sau inflamatorii. Multe alte tipuri de celule pot fi induse să exprime MHC II
sub acţiunea unor molecule biologic active numite citokine, care sunt eliberate în
cursul răspunsului imun. Acest fapt poate avea implicaţii atât în răspunsul imun.
Acest fapt poate avea implicaţii atât în răspunsul imun normal cât şi în
autoimunitate.
Fig.6.VI. Reprezentarea schematicã a asocierii moleculelor MHC II cu peptidul
antigenic (dupã Cresswell, 1994).
CELULĂ
Veziculă
exportată
CITOSOL din RE
MHC I: peptid
calreticulină
tapasină
peptide
Rezumat
Antigenele HLA I și clasa a II-a, total diferite sunt codate de gene localizate
pe brațul scurt al cromozomului 6 uman.
MHC clasa I ,format din HLA-A,HLA-B și HLA-C nu cuprinde decât o
singură genă pentru fiecare moleculă de mai sus, care produce lanțul asociat cu o 2-
156
microglobulină. ”Buzunarul” format de domeniile α 1 și α 2, purtătoare ale
polimorfismului, acceptă un peptid endogen de 9 AA, provenit din proteinele proprii
sau de la un virus intracelular. Prin intermediul TCR, limfocitele T citotoxice CD8+
recunosc numai peptidele antigenice prezente de la HLA clasa I (restricție HLA).
Molecula accesorie CD8 este necesară pentru recunoașterea parții constante a
domeniului α3 a HLA I. Astfel limfocitele T citotoxice pot supraveghea toate celulele
din organism, HLA calasa I fiind cvasiubicuitare. MHC calasa a II-
а, cu HLA-DR,HLA-DQ și HLA-DP posedă o genă A și o genă B pentru formarea
heterodimerilor α/β ai moleculei HLA-II. În ''buzunarul'' format de domeniile α1, β1
purtătoare ale polimorfismului se leagă un peptid exogen cu 12-20 AA, provenit
dintr-o proteină endocitată. HLA clasa a II-a nu sunt prezente cu câteva excepții decât
pe celulele prezentatoare de antigen. Rolul lor este de a permite răspunsul imun
determinat de limfocitele T helper CD4+. Prin intermediul TCR, limfocitele T helper
CD4+ recunosc numai peptidele antigenice prezentate de HLA calsa II (restricție
HLA). Molecula accesorie D4 completează reacția de recunoaștere a parții
monomorfe a regiunii β2 a MHC clasa a II-a.
În domeniul transfuziei sau grefei de organ, HLA clasa I sau a II-a pot
interveni în mod egal în fenomenul de rejet. Legătura dintre HLA și diferite boli poate
fi datorată unei asocieri care necesită un studiu intrafamilial sau o legătură care
traduce un risc relativ între subiecții bolnavi și subiecții normali din aceeași populație.
Genele HLA clasa II(HLA-D) sunt divizate în subregiuni: DR, DQ, DO,
DM, DN, DP.
Gena este urmată de litera A sau B după lanțul α sau β sintetizat, apoi de un
număr în cazul lanțurilor diferite:
*subregiunea DR= DRA unică și DRB1, DRB3, DRB4 și DRB5; *subregiunea DQ=
DQA1, DQB1;
*subregiunea Dp= DPA, DPB1 (s-au exclus pseudogenele).
1 BD 16 B
2 A 17 B
3 BD 18 ABD
4 BCDE 19 E
5 AE 20 B
6 ABCE 21 BCE
7 C 22 D
8 ACD 23 BC
9 ABD 24 ACE
1 BE 25 ACE
1 E 26 ABCD
1 D 27 E
B
1 BDE 28 ABD
13 BCD 29 BC
14 D
5
166
Capitolul 7
COMPLEMENTUL
7.2.1. Activarea
Calea alternativă constituie una dintre primele linii de apărare a organismului
contra unui agent patogen, înaintea constituirii răspunsului imun. Această cale poate
fi activată de către diferite microorganisme precum și de numeroase substanțe
neimune, precum:
* bacterii Gram+ sau – (ex streptococcus pneoumonie)
* virusuri (ex celule infectate sau transformate de către virusuri)
* fungi (ex candida albicans)
* paraziți (ex schistosoma mansoni, Trypanosoma cruzi)
* diverse substanțe: lipopolizaharide bacteriene(LPS), endotoxine bacteriene,
zymosan, insulina, fibre de azbest, hemoblogină, prafuri, unele substanțe de
contrast utilizate în radiologie, responsabile de reacția anafilactoidă.
Calea altenă poate fi activată în complexele imune care cuprind lgG sau lgA.
Substanțele căii aleterntive și de amplificare cuprind:
* C3.În plasmă prin proteoliză spontană a C3 sunt formate în permanență mici
cantități de C3b. Moleculele de C3b se fixează de suprafețele acceptoare în
particular de peretele microorganismelor sau de celulele infectate și alterate.
Câteva bacterii a căror structură este bogată în acid sialic pot evita acțiunea
sistemului complement. La rândul său C3b acționează asupra factorului B.
* Factorul B. Element al căii de amplificare, factorul B este clivat în Ba și Bb.
Complexul C3bBb format în prezența ionilor de Mg2, constituie C3-convertaza
alternativă care clivează noile molecule de C3 în C3b. Acest clivaj accelerat de C3
dă naștere la C5-convertază(C3bBb)
* Factorul D. Factor prezent sub formă activă în ser înainte de activarea C, clivează
factorul B ceea ce facilitează formarea complexului C3bBb.
Ansamblul factorilor activatori ai căii clasice și alternative realizează o bluclă
de amplificare care permite transformarea numeroaselor molecule de C3 în C3b
astfel încât C3b să acopere (opsoniezeze) peretele bacterian.
Există două tipuri de suprafețe:
7.2.2. Reglarea
Factorii plasmatici:
* factorul P sau properdina crește durata de viață pentru C3b și stabilizează
complexele C3bBb și respectiv(C3bBb)n
* factorul H sau beta-1H globulina disociază complexele menționate mai sus și
acționează ca un cofactor al factorului I
* factorul I sau inactivatorul C3b a fost descris și în calea clasică pentru acțiunea sa
asupra C4b și respectiv asupra C3b. Factorul I intervine în calea alternativă prin
inactivarea C3b în C3bi și a C3bi în Cdg, împreună cu cofactorul H și CR1.
Factorii celulari:
* CR1. Acest receptor pentru complement este prezent pe numeroase celule și poate
fixa C3b împiedicând acțiunea factorului B și facilitând acțiunea factorului I.
* DAF este o substanță membranară care inactivează C3bBb asemănător inactivării
C4b2a în cadrul căii calsice.
* gp 45-70 este o proteină cu rol inhibitor asupra C3- convertazei
7.2.3. Reglarea
Factorii plasmatici
* Proteina S sau vibronectina. Proteina S inhibă inserția la nivel plasmatic a
complexelor de atac ale membranei și se leagă de complexul C5b7, pe care îl
inactivează.
Factorii celulari:
* proteina membranară HRF (homologus restriction factor) sau CD59 (protecnina),
proteina HRF inhibă activitatea litică a complementului împiedicând
polimerizarea C9 și protejând astfel celulele self. Bacteriile nu au această proteină
și nu sunt protejate. Pentru unele teste in vitro așa cum este testul
limfocitotoxicitate este necesară utilizarea complementului unei alte specii (ex
iepure) pentru că proteinele nu sunt protectoate decât pentru C9 omolog astfel
încât DAF,CD14 și respectiv LAF3 sunt fixate la pătura bilipidică printr-o punte
fosfatidil- inozitol glican(PIG)
* CR1, DAF, gp 45-70 au fost deja descrise la nivelul căii alternative.
Câteva bacterii sunt rezistente la acțiunea sistemului complement spre ex.
Slamonela minnesota are capacitatea de a îndepărta C9 iar Neisseria împiedică
inserția complementului la nivel mebranar.
7.3. Activarea
Funcțiile complementului
În patologie actiunea complementului se întâlneste în:
* unele cazuri de reacție analfilactoidă. O activare masivă a complementului prin
diferite substanțe cum ar fi produsele de contrast pentru radiografii conduc la
reacții anafilactoide generalizate. Alegerea substanțelor de sinteză pentru perfuzii
trebuie să fie foarte selectivă .
* unele procese litice. Hemolizele intravasculare provin de la anticorpii care au fixat
complementul (hemolizinele). Ele pot fi intratisulare și fac să intervină
macrofagele, în principal celulele Kuppfer.
* afecțiunile în care sunt implicate complexele imune. Complexele imune împreună
cu complementul , depuse în țesut, participă în leziunile vasculare prin reacții de
hipersensibilitate de tip II. Fenomenul lui Arthus asociat unor pneumopatii
profesionale face să intervină precipitinele care fixează complementul.
* fenomenele de respingere a alorgrefelor sau a heterogrefelor care fac să intervină
anticorpii naturali sau dobandiți în complementul care stă la originea coagularii
intravascule și necroza organelor grefate.
Rezumat
După expunerea de până acum, este tentant să comparăm două sisteme
complexe și echilibrate cum sunt complementul și coagularea:
Amblele cuprind o mulțime de factori, majoritatea inactivi, la starea de răspuns care
constau dintr-o cascadă de reacții enzimatice pentru sosirea factorului final C9 sau
fibrinogenul
Ambele sunt compuse din două căi de activare care se finalizează cu o cale
terminală comună.
Ambele sunt constituite din activatori și dintr-un număr aproape echivalent de
inhibitori. În fine o hemeostazie perfectă este necesară în cele două cazuri. Pentru
complement este vorba despre creșterea în caz de introducere a microorganismelor
printr-o inflamație locală, intraclinica și invers, nedeclanșarea ușoară sau creșterea
înceată ceea ce va da o stare inflamatorie cronică ca urmare a unui șoc cronic
anaflactic. Pentru homeostazie este necesar a acoperi o rană, sursa unei hemoragii
și nu de a crea o tromboză intravasculară.
Această comparație nu este întru totul științifică. Unii autori fără îndoială în
mod abuziv au vrut să facă unul din cele două sisteme o copie a celuilalt. Totuși
interacțiunile unuia cu celălalt există: C1inh este inhibitor întâi pentru complement
prin C1 și pentru sistemul de contact al coagularii. Majoritatea factorilor celor două
sisteme sunt sintetizate în ficat sau mai puțin degradate în monocite/macrofage sub
formă inactivă.
Capitolul 8
ORGANELE CU ROL ÎN IMUNITATE
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
8.2.1.1. Timusul
Timusul este un organ limfoepitelial situat în treimea superioară a
mediastinului anterior deasupra inimii şi vaselor mari. Este format din doi lobi, uniţi
între ei printr-un istm, înconjuraţi fiecare de o capsulă de ţesut conjunctiv care
pătrunde şi în interiorul lor subdivizându-i într-o serie de lobuli. În interior timusul
este populat cu promocite, celule precursoare ale limfocitelor T, derivate din
celule “stem” limfoide medulare (celule matcă sau celule suşă), care suferă un
proces de maturare transformându-se în limfocite mature cu competenţă funcţională
şi migrează apoi în organele limfoide secundare. Ele vor purta numele de limfocite
T (LT), dezvoltarea lor făcându-se sub influenţa unor hormoni timici (timozine sau
timopoietine). În timus producţia de limfocite este continuă şi se realizează în
absenţa oricărui stimul antigenic.
Din punct de vedere histologic se pot deosebi în fiecare lobul două zone
distincte:
Una periferică, închisă la culoare, cu densitate celulară mare: zona corticală sau
cortexul timic
Una centrală, cu densitate celulară mai redusă: zona medulară.
genelor
CD3-, CD4-,CD8- TCR,TCR
CD3-,CD4+,CD8+ TCR
CD3S,CD4+,CD8+,TCRS negativă
CD3+ CD3+
CD4+ CD4-
CD8- CD8+
TCR+ TCR+
Fig.8.I. Prezentarea schematică a diferenţierii limfocitare T intratimice. CD3 S şi
TCRS pentru densitate slabă, + pentru densitate puternică
Celulele dendritice interdigitate (IDC) sunt similare celor din organele
limfoide secundare, unde constituie principala categorie de APC, având un rol
important în activarea limfocitelor T helper. Ele prezintă pe membrană numeroase
antigene MHC II, şi antigene prorpii. În zona medulară pot fi evidenţiate rozete,
formate dintr-o celulă dendritică (sau macrofag) centrală, înconjuratăs de 10-15
timocite. Aici se produce în principal selecţia negativă a timocitelor. Selecţia
negativă reprezintă alegerea limfocitelor T care prezintă toleranţă faţă de self, nu
reacţionează cu peptidele (epitopii) proprii asociate moleculelor MHC proprii.
Inducerea toleranţei este rolul celulelor prezentatoare de antigen, care au capacitatea
de a prezenta limfocitelor antigenele solubile în contextul MHC. Prin procesul de
selecţie negativă, limfocitele autoreactive sunt fie deletate, fie li se induce o stare de
lipsă de răspuns (de anergie). Deleţia clonelor autoreactive se produce în urma unui
proces de apoptoză sau moarte programată prin inducerea la nivelul ADN-ului din
nucleu a programului de moarte a celulei.
Ca urmare a selecţiilor (pozitivă şi negativă) din timus sunt eliminate 95%
din clonele limfocitare T, şi doar restul de 1-5% vor fi exportate în circulaţie în
organele limfoide secundare. Diferenţierea intratimică implică şi alte procese:
exprimarea TCR şi a altor molecule, care sunt implicate atât în procesele de selecţie,
cât şi în funcţiile caracteristice limfocitelor imunocompetente mature, adică
funcţiile efectoare şi/sau capacitatea de a secreta limfokine.
PRECURSOR
INCOMPETENT
(NEFUNCŢIONAL)
CELULĂ VIRGINĂ
ÎN ORGANUL
LIMFOID PRIMAR
CIRCULAŢIE
ECUNDARĂ
CIRCULAŢIE
PRIMARĂ
ORGAN LIMFOID
SECUNDAR
ANTIGEN
8.2.2.2. Splina
Este organul limfoid cel mai voluminos şi al doilea ca importanţă. Prezintă la
periferie o capsulă conjunctivă care trimite în profunzime ramificaţii trabeculare ce
ajung până în hil. Parenchimul este constituit din două părţi: pulpa albă şi pulpa roşie.
În pulpa albă, zonă limfoidă, se găsesc două arii – una timoindependentă populată cu
LB şi una timodependentă în care se găsesc concentrate LT. Pe lângă limfocite în
pulpa albă se găsesc macrofage, celule dendritice, plasmocite.
Pulpa roşie este formată din sinusuri venoase, pulate cu macrofage, în
principal. În ea are loc distrugerea eritrocitelor îmbătrânite şi este un rezervor de
hematii, care intră în circulaţie prin contracţia splinei.
Splina nu are o circulaţie limfatică, elementele figurate ajung aici numai pe
cale sanguină. În splină se adună şi se distrug celulele moarte (în special hematii dar şi
antigene bacteriene), şi este sediul de depozitare a rezervelor de fier.
Splenectomia este compatibilă cu viaţa omului cât şi cu apărarea imună, prin
preluarea atribuţiilor splenice de către alte organe sau structuri limfocitare.
8.2.2.3. Amigdalele
Sunt localizate în loza amigdaliană şi reprezintă principalul organ al inelului
limfatic Waldeyer. Sunt acoperite de o capsulă fibroasă care trimite spre interior o
multitudine de fibre conjunctive ce pătrund în parenchim şi formează zone de
aglomerări ale foliculilor limfoizi.
Amigdalele participă la menţinerea unui echilibru al populaţiilor bacteriene
din microbiogeneza bucofaringiană şi conferă protecţie căilor respiratorii
superioare.De aceea ablaţia lor chirurgicală trebuie bine motivată
8.2.2.5. Apendicele
Apendicele este un organ limfoid destul de voluminos, anexat tubului
digestiv. Este alcătuit din aglomerări limfoide sub formă de pliuri în care predomină
LB şi plasmicitele. Foliculii sunt mai dezvoltaţi, atunci când organul este expus unor
stimuli antigenici puternici.
Organul limfoid
Caracteristici
Primar Secundar
Momentul dezvoltării Timpuriu Târziu
embriogenetice
Locul de provenienţă al celulelor Celula suşă Din celule instruite în
organele primare
Când se realizează popularea cu Timpuriu, perinatal După naştere
elemente limfoide precursoare
sau mature
Proliferarea celulară se realizează În absenţa În prezenţa stimulului
stimului antigenic
Activitatea hormonală Prezentă Absentă
Starea organului în raport cu Involuează pe măsura Nu involuează
vârsta subiectului înaintării în vârstă
Circulaţia limfocitelor la nivelul Într-un singur sens, În dublu sens
organului celulele nu mai revin în
organ
Extirparea organului Reacţii defavorabile Reacţii nesemnificative.
Capitolul 9
CELULELE IMPLICATE ÎN RĂSPUNSUL IMUN
Clasificarea limfocitelor
Clasificarea limfocitelor s-a realizat pe baza studiului funcțiilor lor și, în
același timp pe baza identificării markerilor celulari.
* Funcțiile limfocitelor. Studiul acestora a demonstrat că pe lângă limfocitele B,
există și o mare varietate funcțională de limfocite T ajutătoare (helper), supresoare,
citotoxice sau responsabile cu imunitatea întârziată. Funcționalitatea diversă este
dificil de studiat în practica curentă, mai ales că o celulă poate avea mai multe
funcții.
* Markerii cromozomiali, intracelulari și membranari ai limfocitelor.
Determinarea acestora este o metodă extrem de performantă. Rearanjarea genelor
TCR și lg este caracteristică liniei T și, respectiv liniei B. Anumite enzime cum ar
fi TdT(terminal desoxylnucleotidyl transferase) apar în anumite stadii de evoluție
ale limfocitelor T și B. Una dintre tehnicile de cercetare curentă, citometria în flux
utilizează anticorpii monoconali obținuți în urma imunizării șoarecilor cu limfocite
umane normale sau patologice. Acești anticorpi recunosc o preoteină membranară
și permit identificarea:
unei linii celulare de către un marker specifc sau de către mai mulți markeri.
unui stadiu de diferențiere, când markerul apare într-o anumită fază de evoluție
a celulei.
unei stări de activare, când markerul corespunde unei proteine membranare noi
apărute după activare.
Tabelul de mai jos prezintă principalele celule incluse sub termenul de
limfocite conform formulei sanguine standard.
9.1. Limfocitele
Tabelul 9.I.
Caracterele comparative ale limfocitelor B şi T.
Limfocite B Limfocite T
Maturare Măduva osoasă Timus
Receptor Ag BCR-Ig de membrană (IgM, TCR:
D, G, A,E) -
-
Ag recunoscut Native solubile Prelucrate– peptide legate de
moleculele MHC
Epitopi Conformaţionali Secvenţiali
Secvenţiali de suprafaţă
Imunitate Umorală Celulară
Markeri CD19-32 CD3
CD40 CD4
CD8
9.1.3.1. Celulele NK
Celulele NK (natural killer) reprezintă circa 15% din totalul limfocitelor
sanguine. Ele derivă din măduva osoasă şi au origine comună (acelaşi progenitor), ca
şi celulele T. In vitro, sunt neaderente şi nefagocitare, ceea ce le aseamănă cu
limfocitele. Din punct de vedere morfologic, celulele NK sunt mari, granulare (LGL,
large granular lymphocytes), având citoplasmă mai bogată decât celelalte limfocite,
cu granulaţii azurofile.
Celulele NK nu au nici unul din receptorii de antigen caracteristici
limfocitelor T sau B şi de aceea au fost denumite celule “nule”.
Celulele NK acţionează asupra celulelor ţintă pe care le distruge în prezenţa
anticorpilor, fără intervenţia complementului, sau îşi exercită efectul citotoxic direct,
în absenţa anticorpilor specifici şi a complentului.
Celulele NK ucid, fără restricţie MHC, celulele tumorale, celulele infectate
viral, bacterian, sau bacterii izolate, fungi, paraziţi, deşi nu au receptori specifici
pentru antigen. Distrugerea celulelor se poate realiza prin:
Citotoxicitatea celulară dependentă de anticorpi – ADCC necesită prezenţa
anticorpilor specifici legaţi de celula ţintă. Anticorpii formează o punte între celula
ţintă şi NK, datorită faptului că ultimele posedă receptori pentru porţiunea Fc IgG.
Citotoxicitatea directă. Principalele etape ale procesului litic sunt:
Recunoaşterea şi “legarea” ţintei
Activarea mecanismelor litice
Lansarea loviturii litice
Desprinderea de pe celulele ţintă
Funcţia NK este stimulată de interferon şi deprimată de corticosteroizi. Acest
tip de celule apare la om la câteva luni după naştere şi scade la bătrâneţe.
Prin secreţia unor citokine, celulele NK reglează hematopoieza şi asigură
protecţia timpurie a organismului deoarece în ontogenie ele se dezvoltă înaintea LT.
9.2.1. Macrofagele
Sistemul fagocitar mononuclear este constituit din monocite circulante şi
varietăţi multiple de macrofage sau histiocite tisulare cu viaţă lungă (supravieţuiesc
luni sau ani). După părăsirea măduvei osoase, monocitele trec rapid din circulaţie şi se
fixează în ţesuturi unde îşi schimbă morfologia devenind macrofage.
Tabelul.9.III.
Denumirea macrofagelor după localizarea lor în ţesuturi
Ţesutul sau organul Denumirea
Ţesut limfatic, pleural, peritoneal, pericardic, placentă Macrofage
Plămân Macrofage alveolare
Ficat Celule Kupffer
Piele Celule Langerhans
Creier Celule microgliale
Vase sangvine şi vase limfatice Celule endoteliale
Sânge Monocite
Ţesut conjunctiv Histocite
Cartilaje Condroclaste
Ţesut osos Osteoclaste
Acestea sunt celule mari (20-25 m), cu citoplasma bogată în organite foarte
dezvoltate, mai ales lizozomi (granulaţii azurofile), care conţin enzime hidrolitice
capabile să digere fragmentele străine ingerate.
Sunt celule de primă importanţă ale sistemului imunitar; recunosc,
fagocietează şi prelucrează intracitoplasmatic structurile non-self pe care le prezintă
apoi sub formă adecvată limfocitelor T (intervin în faza de recunoaştere şi ca efectori
ai imunităţii mediate celular în distrugerea unor agenţi microbieni).
9.2.3. Astrocitele
Sistemul nervos central este bine izolat prin bariera hematoencefalică, din
care cauză accesul limfocitelor este blocat. La acest nivel au loc o serie de reacţii
imune, astrocitele având rolul unui pivot între LT şi neuroni. Au activitate fagocitară,
secretorie şi funcţia de prezentare a antigenului către LT.
Markeri pan-B, sau markeri de lineaj, sunt reprezentaţi de CD19 şi CD20, antigene
exprimate pe membranele celulelor B aflate în toate stadiile de diferenţiere.
Co-receptori. Pe lângă receptorul antigen specific (BCR), există o serie de
molecule integrale care joacă un rol important în răspunsurile funcţionale ale LB la
recunoaşterea antigenului. Aceste molecule accesorii sunt receptori pentru alte
molecule (liganzi), prezente pe suprafaţa unor celule diferite. Ele pot avea funcţia
de transducere a semnalului de activare a LB, având rolul de co- receptori, sau
intervin în cooperarea dintre LB şi LT, interacţiune absolut necesară în producerea
anticorpilor faţă de antigenele TD.
CD19 şi CD21 (CR2) se cuplează simultan cu BCR, formând un complex
multimeric, şi cu proteinele de semnalizare intracelulară. Au un rol important în
transducerea semnalului activator care stimulează proliferarea susţinută şi
diferenţierea LB naive;
CD45R (o izoformă celular restrânsă a markerului CD45) particpă la
semnalizarea BCR;
CD40 intervine în proliferarea Ag-dependetă a LB naïve în repaus şi
creşte exprimarea moleculelor membranare din familia B7 favorizând cooperarea LTh
cu LB;
Familia B7 (B7-1 şi B7-2) reprezintă cele mai importante molecule în
interacţiunea LTh cu LB şi în activarea acestor celule;
Prezenţa moleculelor MHC de clasă II crează posibilitatea funcţionării
acestor limfocite ca APC şi intervin în cooperarea LB-LT.
Molecule de adeziune celulară facilitează interacţiunile LB-LT prin menţinerea şi
stabilizarea legăturii dintre aceste două tipuri de celule: LFA-1, LFA-3 (CD58),
ICAM-1 (CD45), V-CAM (CD106).
Pe lângă BCR, pe membrana celulelor B există un mare număr de molecule
integrale, dintre care unele sunt markeri specifici pentru această populaţie, iar altele
sunt nespecifice, deoarece apr şi la nivelul altor populaţii sau subpopulaţii limfocitare,
ori pe alte tipuri de celule – monocite, macrofage, granulocite, epiteliale, etc.
10.1.3.1. Receptorii Fc
Receptorii Fc, se găsesc pe suprafaţa membranei plasmatice a trombocitelor,
granulocitelor – neutrofilelor, eozinofilelor sau bazofilelor, dar mai ales pe cea a
monocitelor/macrofagelor, celulelor NK, LB şi pe unele LT activate. Ei au funcţii
multiple, fiind implicaţi în fagocitoză, transport transmembranar, degranulare,
eliberarea de metaboliţi toxici ai oxigenului, ADCC. Există diverse forme moleculare
de receptori Fc, care diferă între ei în funcţie de structură, afinitate şi de clasa de Ig pe
care o leagă.
Tabelul 10.V.
Moleculele de adeziune celulară (CAM)
Molecula Distribuţie
Familia Ligand
(sinonime) celulară
Integrine
1 (VLA) VLA-1,-2,-3, -4,-5, Lt activate, LB, Mo Proteine sle matricei
6 (CD29/CD49 extracelulare (colagen,
a,b,c,d,e,f,) laminină, fibronectină)
VCAM-1
2 (Leu-CAM) LFA-1 Mo ICAM-1,-2,-3
(CD11a/CD18) (CD54,CD102,CD50)
CR3 Mo, Gran, NK ICAM-1 (CD54), iC3b,
(CD11a/CD18) Mo/Mac, NK, DC factor X
CR4 iC3b
(CD11a/CD18)
3 (citoadezine) CD61/CD41 P, megacariocite Matrice extracelulară
(fibrinogen, factor
Willebrand,
trombosporină,
P, megacariote, vitronectină)
CD61/CD51 Mac Matrice extracelulară
(vitronectină)
Selectine (LEC-CAM)
E-selectina CD26E (ELAM-1, C.End., N, Mo, CD15s (sialil LewisX)
adresină) Tmem
L-selectina CD62L (LAM-1, Leu, T, B, Mo, NK, HEV, CD34, Gly-CAM
LECAM) C.End
P-selectina CD62P P., C.End CD15 (LewisX)
Superfamilia imunoglobulinelor
CD2 LFA-2 LT, NK LFA-3 (adeziune
intercelulară)
CD45 ICAM-1 Largă, Ev (activat) LFA-1 (adeziune
intercelulară)
CD102 ICAM-2 Ev., Mo, subset LFA-1 (adeziune
limfocite intercelulară)
CD50 ICAM-3 APC, LT, LB, Gran LFA-1 (adeziune
intercelulară)
CD58 LFA-3 Largă CD2 (adeziune
intercelulară)
CD106 VCAM-1 C.End VLA-4 (adeziune
vasculară)
CD56 N-CAM, NKH1 NK CD56
CD31 PECAM-1 P., C.End, T, Mo, VLA-4 (adeziune
Gran. trombocitară, endotelială)
Cadherine
E-caderine Largă, având rol în E-caderine
N-caderine interacţiuni celulă-celulă N-caderine
P-caderine (în dezvoltarea ţesuturilor, P-caderine
LCAM neimplicate în reacţiile LCAM
Uvomorulina imune) Uvomorulina
Adresine vasculare asemănătoare mucinelor
CD34 C.End L-selectină
Gly-CAM HAV L-selectină
MAdCAM-1 Venele MALT L-selectină, VLA-4
Alte molecule
CD44 HERMES, H-CAM HEV, Leu Matrice extracelulară (ac.
Hialuronic)
CD15 LewisX Mo, N, Eo, Ba, NK P-selectină
CD15s Sialil LewisX Mo, N, Eo E-selectină
C.End = celule endoteliate, T mem = celule cu memorie, Ev = endoteliu vascular, HEV = endoteliu
vascular, HEV = endoteliu venelor ganglionare , DC= celule dendritice, Leu = leucocite.
10.1.4.1. Integrinele
Integrinele sunt formate dintr-un lanţ , care conţine situsuri de legare pentru
cationi (Ca2+) şi un lanţ mai mic . Integrinele se leagă de CAM de pe alte celule
şi/sau de matricea extracelulară. Au un rol important în răspunsul imun, în organizarea
tisulară şi migrarea celulelor în cursul dezvoltării. Cea mai cunoscută clasificare a
integrinelor este după natura lanţului (1-7) şi cuprinde trei subfamilii imunologic
importante.
Subfamilia 1 integrinelor este reprezentată de moleculele VLA (very
late activation), adică antigene de activare foarte târzie, deoarece au fost descoperite
pe LT la 2-4 săptămâni după stimularea lor in vitro. VLA pot fi exprimate constitutiv
de către LT în repaus (VLA-4,-5,-6), iar exprimarea altora poate fi indusă rapid în
cursul activării. 1 integrinele sunt heterodimeri formaţi din lanţul 1 (CD29),
acelaşi la toate moleculele, şi din diferite lanţuri . Majoritatea lor sunt exprimate pe
suprafaţa leucocitelor, sau a altor tipuri de celule, şi mediază ataşarea acestora de
moleculele matricei extracelulare: colagen, laminină, fibronectină. VLA-4
interacţionează de asemenea cu VCAM-1 (Cd106) molecula de adeziune a endoteliilor
vasculare, exprimată în zonele inflamatorii, fiind totodată principala moleculă de
domiciliere, de orientare spre plăcile Peyer.
Subfamilia 2-integrinelor, numite şi Leu-CAM, are trei reprezentanţi:
LFA-1, CR3, CR4, molecule integrale heterodimerice formate din lanţul 2 (CD18) şi
diferite tipuri de lanţuri (Cd11a, CD11b, CD11c). Au rol important în fagocitoză,
ataşarea de celule endoteliate şi de matricea extracelulară şi în extravazarea
leucocitelor.
Subfamilia 3-integrinelor sau a citoadezinelor are doi membri,
heterodimeri diferiţi prin lanţurile (CD41 sau CD51) lanţul 3 (CD61) fiind comun.
CD41/CD61 este un marker trombocitar şi un receptor pentru o serie de molecule
implicate în coagulare. În absenţa lui dispare aderenţa şi agrearea 214
trombocitelor, ceea ce duce la diateză hemoragică. CD51/CD61 există pe
limfoblaşti, monocite şi celule epiteliale, având funcţii de receptor pentru aceleaşi
molecule, şi pentru unele componente ale matricei extracelulare.
10.1.4.2. Selectinele
Aceste molecule sunt cunoscute şi sub denumirea de adresine sau LEC-
CAM, datoritã faptului că au rol în orientarea limfocitelor spre ariile lor de la
nivelul organelor limfoide secundare (homing receptor), şi se leagă selectiv de
carbohidraţi.
Se cunosc: selectine P (de la “platelet” – trombocite sau plachete sangvine)
sau CD62P, selectine E (endoteliate) şi selectine L (leucocitare). Sunt glicoproteine
transmembranare care mediază adeziunea rapidă, de mică afinitate, a leucocitelor la
celulele endoteliate, facilitând fenomenul de “rostogolire” pe suprafaţa peretelui
vascular capilar, până la stabilirea unor legături ferme prin integrine care să permită
migrarea lor prin membrana capilarelor în ţesuturile din zona inflamatorie.
E-selectina (CD26E, ELAM-1, LECAM-2) este exprimată pe celulele
endoteliate activate de citokine (IL-1, THF, IFN) din zonele de inflamaţie şi se
leagă de glicani (CD15s sau sialil-LewisX) de pe granulocite, monocite, limfocite T
cu memorie.
L-selectina (CD26L, LAM-1, LECAM-1) intervine în aderenţa tuturor
leucocitelor, inclusiv a limfocitelor T, B, şi celulelor NK, la endoteliul venelor post-
capilare, prin legarea sa la o serie de proteoglicani (GlyCAM-1, CD34). Este una
din principalele molecule de domiciliere (homing)
P-selectina (CD62P) este stocată în granule secretorii ale trombocitelor,
megacariocitelor şi celulelor endoteliale, dar prin stimularea acestor celule este
redistribuită la suprafaţă, unde se leagă de aceiaşi glicani ca şi E-selectina, şi de alte
glicoproteine de pe monocite si neutrofile.
11.1. Citokinele
Citokinele constituie un ansamblu heterogen de molecule (aproximativ 100
de tipuri), cu greutatea moleculară între 15 şi 30 kDa, de natură glicoproteică sau
proteică, care sunt secretate de o celulă şi se leagă de receptorii membranali specifici,
de mare afinitate prezenţi pe suprafaţa altei celule sau chiar pe celula care le-a
secretat. Ele sunt recunoscute ca fiind mediatori ai imunităţii, inflamaţiei, proliferării
şi diferenţierii unor linii celulare.
Citokinele secretate de limfocite sint cunoscute sub denumirea de limfokine,
iar cele produse de monocite de monokine. La acestea se adaugă prostagladinele
(PG) şi interferonii (IFN).
Noţiunea de interleukine (IL) semnifică rolul acestor molecule ca mesageri
interleucocitari, deşi unele citokine sunt produse de alte tipuri de celule.
Interleukinele sunt numerotate (Il-1, IL-2,etc) pe măsură ce se reuşeşte stabilirea
structurii lor şi producerea lor prin inginerie genetică (interleukine recombinate).
Citokinele se prezeintă sub formă de monomeri (IL-1, IL-2), dimeri (IL-5)
sau trimeri (TNF). Ca mesageri solubili, ca semnale ale sistemului imun şi neimun,
ele sunt caracterizate prin unele caractere comune:
Tabelul 11.I.
Clasificarea celor mai cunoscute citokine
Interleukine Interleukina -1,2,…18
(IL-1, IL-2…IL-18)
Familia factorilor de necroză Factorul de necroză tumorală- (TNF-)(caşectina)
tumorală (THF-,) Factorul de necroză tumorală- : Limfotoxina- (LT-)
Limfotoxina- (LT-)
Factorii hematopoietici Eritropoietina (EPO)
(hematopoietine sau factori de Multi-CSF (IL-3)
stimulare a coloniilor) F.stimulare coloniilor granulocitare (G-CSF)
F.stimulare coloniilor macrofagice (M-CSF) F.stimulare
coloniilor mixte (GM-CSF) Oncostatin M (OSM)
F, inhibitor al leucemiei (LIF)
F.steel, ligandul c-kit sau F. celulelor stem (SCF)
Trombopoietina
Interferoni Interferoni- (IFN- sau de tip
1
Familia factorilor de Interferon- IFN-
F. de transformare ), imun sau
a creşterii- de tip
(TGF- ) 2
transformare a creşterii F. de transformare a creşterii- (TGF-1,2,3) Inhibin,
activin
Alţi factori de creştere Epiderm (EGF, HB-EGF)
Celule endoteliate (ECGF)
TGF-
Fibroblaşti (FGF-,, FGF-1 la –7)
Keratinocite (KGF)
Derivaţi dintrombocite (PDGF-A,B)
Nervi (NGF-)
Hepatocite (HGF)
Insulin-like I,II (IGF-I,II)
Familia intercrinelor IL-8/NAP-1 (neutrofil activating protein)
(chemokine sau SIS “small F. de transformare a creşterii melanomului
induced secreted) Subfam. (mGSA/GRO/NAP-3)
(CXC) Proteina 10 inductibilă de IFN- (IP-10)
Prot.bazice plachetare (PBP, PF-4, TG, CTAP3, NAP-
2)
Factorul plachetar 4 (PF-4)
Factorul derivat din celule stromale (SCDF) Atractantul
neutrofilelor derivat epitelial
Prot. Chemotactică monocitară (MCP-1,2,3/MCAF)
Prot. Inflamatorie monocitară 1, 1 (MIP-1 )
RANTES
Subfam.(CC) I-309
Neclasificaţi
Factorul de inhibiţie a migrării macrofagelor (MIF) Prot.
2 de activare a genelor imune (ACT-2) Eotaxin
Efectele sunt redundante, acţiunile unor citokine diferite, asupra aceluiaşi tip de
celulă, au efecte asemănătoare.
Se fixează pe receptori specifici de mare afinitate.
Au efecte pleiotrope, o citokină acţionează asupra mai multor tipuri de celule şi
induce activităţi biologice multiple, datorită interpretării diferite a semnalului
de către fiecare tip de celuă.
Sunt active în concentraţii infinitezimale – nanomoli (10-9 M/L0 sau picomoli (10-
12
M/L), iar secreţia lor este de scurtă durată.
Acţiunea lor se exercită fie asupra celulei care le-a produs – autocrină – fie din
imediata ei vecinătate – paracrină – sau la disatnţă – endocrină.
Citokinele induc sinteza şi eliberarea altor citokine, realizând o reacţie în
cascadă, sau în avalanşă
Unele (IL-1, TGF-) sunt sintetizate sub formă de precursori de către
celulele ce vor fi activate prin mecanisme complexe, iar altele (M-CSF, TNF ,
TGF) sunt sintetizate ca molecule funcţionale, exprimate transmembranar.
Funcţiile citokinelor sunt: induc creşterea (proliferarea şi/sau diferenţierea) celulelor
hematopoietice; au efecte proinflamatorii sau antiinflamatorii; pot avea funcţii
imunoreglatoare, mixte imunoreglatoare şi hematopoietice; au rol în atragerea altor
celule.
În cadrul citokinelor sunt cuprinse următoarele familii principale:
o Interleukine: Il-1 (IL- şi IL-), IL-2, …, IL-18
o Interferonii
o Factorii de necroză tumorală THF şi TNF
o Factori de stimulare a coloniilor celulare hematopoietice: M-CSF, G-CSF, CM-
CSF
o Alţi factori de creştere celulară: TGF, EGF factor de creştere epidermal, NGF
factor de creştere al neuronului.
11.1.3. Interferonii
Pe baza structurii şi activităţii lor au fost descrise mai multe clase de PG;
PGA, C, D, E, F, H, I, iar în cadrul acestor clase există molecule cu una sau două
duble legături notate ca molecule de tip 1 sau 2.
Din punct de vedere chimic PG sunt acizi graşi nesaturaţi, hidrolizabili şi
polioxigenaţi, care conţin un inel ciclopentan şi au un schelet de bază alcătuit din acid
prostanoic. Acesta sub influenţa fosfolioazelor, se transformă în acid arahidonic care
este un precursor al tuturor moleculelor de prostaglandine. Sub influenţa
lipooxigenazelor, are loc formarea de leucotriene (LT), substanţe cu implicaţii majore
în desfăşurarea proceselor inflamatorii. O sursă importantă de PG o constituie
macrofagele.
11.1.5. Factori de stimulare ai coloniilor celulare (CSF)
M-CSF
Acţionează asupra celulelor mieloide din măduvă, stimulând proliferarea şi
diferenţierea lor în monocite şi macrofage mature, creşte capacitatea
citotoxică a macrofagelor prin amplificarea producţiei de IL-1.
G-CSF
Stimulează proliferarea şi diferenţierea celulelor mieloide spre seria
granulocitară neutrofilă
Creşte exprimarea moleculelor de adeziune şi a receptorilor pentru
fragmentul C3b al C' în paralel cu stimularea PMN mature
11.1.7. Chemokine
Din preparatele extrase din zona timică, cele mai bine studiate, din punct de
vedere ale structurilor chimice şi a activităţilor biologice, sunt: timozina fracţiunea 5
(TF5), timulina, timopoietina şi derivaţii sintetici ai acestora.
12.1. Limfocitele T
Limfocitele B sunt generate pe tot parcursul vieţii, deşi în cantităţi care cresc
progresiv cu vârsta, asigurându-se astfel un aport continuu de noi celule B, capabile să
producă anticorpi faţă de o mare varietate de patogeni, care sunt astfel recunoscuţi şi
eliminaţi.
La om, precursorii limfocitelor B (celulele pro-B) se găsesc printre insulele de
celule hematopoietice din ficat fetal până în săptămâna 8-9 de gestaţie. Apoi ficatul
fetal încetează să mai producă celule B şi această funcţie este preluată de măduva
osoasă.
Viaţa unei celule B poate fi divizată în 4 mari faze:
Generarea receptorilor celulelor B în măduva hematopoietică: în timpul
dezvoltării limfocitelor B din celulele progenitoare din măduva hematopoietică se
produce rearanjarea genelor pentru imonoglobuline şi expresia unui receptor cu o
specificitate unică pentru antigen. Această etapă este independentă de antigen, şi
depepndentă de interacţiunea cu celulele stromale din măduva osoasă.
Inducerea toleranţei la antigenele self din măduva hematopoietică: limfocitele
B imature care exprimă receptori de suprafaţă interacţionează cu antigenele self
prezente în micromediul medular, celulele B cu receptori care recunosc antigenul
sunt tolerizate.Primele două faze se desfăşoară în măduva hematopoietică şi apoi
celulele sunt exportate în periferie, alăturându-se pool- ului de limfocite periferice.
Activarea limfocitelor B de către antigen în organele limfatice periferice:
contactul celulelor B cu antigenul în organele limfatice periferice duce la activarea
limfocitelor B.
Exercitarea funcţiei efector a limfocitelor B activate: celulele B activate prin
contactul cu antigenul proliferează şi se diferenţiază în efectori în organele
limfatice periferice; o parte din AFC rămân în organele limfatice periferice, dar
mai frecvent migrează în măduva hematopoietică.
Măduva hematopoietică reprezintă un micromediu esenţial pentru dezvoltarea
limfocitelor B. Diferenţierea celulei stem din măduva hematopoietică într-o celulă B
imatură poate fi subdivitată în patru etape:
Stadiul de celulă pro-B precoce: celulele pro-B apar înainte de începerea
rearanjării genelor pentru imunoglobuline şi sunt identificate prin markeri de
suprafaţă caracteristici limfocitelor B. Toate stadiile ulterioare de maturare sunt
definite prin etapele rearanjării genelor pentru imunoglobuline, modificările
markerilor de suprafaţă, dependenţa de factorii de creştere şi localizarea în
interiorul stromei medulare.
Stadiul de celuă pro-B tardivă: rearanjarea segmentelor genice D şi J pentru lanţul
greu duce la trecerea celulei în stadiul pro-B tardiv.
Stadiul de celulă pre-B: rearanjarea V-DJ a segmentelor genice ale lanţului greu
duce la apariţia celulelor pre-B. Celulele pre-B exprimă nivele mari de lanţ în
citoplasmă, cât şi nivele scăzute de lanţ pe suprafaţă.
Stadiul de celulă B imatură: în final are loc rearanjarea genelor pentru lanţul uşor,
urmată de expresia moleculelor complete de IgM pe suprafaţa celulei, numită
acum limfocit B imatur.
Celulele B mature dar naïve diferă de limfocitele imature prin faptul că
exprimă concomitent şi IgM şi IgD.Toate stadiile de dezvoltare ale limfocitelor B se
desfă,soară în măduva hematopoietică şi sunt dependente de celulele stromale:
celulele stem prelevate din măduva hematopoietică şi menţinute în cultură nu reuşesc
să se diferenţieze în limfocite B decât dacă în cultură sunt prezente şi celule stromale.
Celulele stromale contribuie la dezvoltarea limfocitelor B: în stadiile precoce,
precursorii limfocitelor B trebuie să vină în contact direct cu celulele stromale; în
stadiile mai avansate, dezvoltarea celulelor B este dependentă de factori de creştere
secretaţi de celule stromale.
Progenitorii celuleor limfoide şi celulele pro-B precoce interacţionează prin
intermediul moleculei CD44 exprimată pe suprafaţa lor cu acidul hialuronic de pe
suprafaţa celulelor stromale. Această interacţiune promovează interac,tiunea unei
tirozin-kinaze, numită c-kit exprimată de celulele pro-B precoce, cu SCF de pe
celulele stromale. Legarea c-kit de SCF duce la activarea kinazei care induce
diviziunea celulelor pro-B.
Celulele pro-B tardive necesită pentru creştere şi maturare atât prezenţa SCF
pe suprafaţa celulelor stromale, cât şi IL-7 solubilă. În stadiul pro-B tardiv celula
începe să se exprime receptorii pentru IL-7, care este un factor de creştere secretat de
celulele stromale. Celulele pre-B continuă să fie dependente de IL-7, dar datorită
faptului că încetează să mai exprime c-kit, îşi pierd dependenţa de SCF şi se desprind
de pe suprafaţa celulelor stromale.
Unul din markerii cei mai precoce ai celulelor B în dezvoltare este reprezentat
de o izoformă a tirozin-fosfatazei CD45 (CD45R). CD45 are rol în semnalizarea prin
receptorii pentru antigen ai limfocitelor B şi T, poate modula activitatea unor tirozin-
kinaze dar rolul exact al său în dezvoltarea limfocitelor B nu este cunoscut.
Tabelul 13.I.
Markeri exprimaţi în diferite stadii ale maturării limfocitelor B
Celulă Pro-B Pro-B Celulă B Celulă B
Markeri Pre-B
stem precoce tardiv imatură matură
CD34 + + - - - -
CD45R + + + + + +
MHC II - + + + + +
CD10 - + + - - -
CD19 + + + + + +
CD38 + + + + - -
CD20 + + + +
CD40 + + + +
CD21 - - - +
Lanţ - + - -
IgM - - + +
IgD - - - +
14.2. Antigenele
Teste funcționale
Testele permit exploatarea acestor celule după cum urmează:
Limfocitele T
Testul de transformare limfoblastică prin fitohemaglutină (PHA),PWM(pokeweed
mitogen), concanavalina A(ConA) sau antigene; Cultură celulară cu dozaj de
citokine;
Cultură limfocitară mixtă: răspuns la antigenul MHC;
Macrofagele
Mișcarea la traversarea unui filtru permite explorarea mobilității macrofagelor și
puterii chemotactice a substanței; limfocitele din sindromul Chediak-Higashi au o
defermibilitate insuficientă care nu le permite migrarea prin porii filtrelor;
Aderența la diferite substanțe;
Puterea oxidativă: reducerea tetrazoliumului, a ferocitocromului C;
Putere bactericidă;
Fagocitoză.
Celulele Nk
Citotoxicitatea nespecifică față de celulele eritroleucemice 4562.
Capitolul 15
RĂSPUNSUL IMUN UMORAL
Şef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
15.1. Antigenele
Natura antigenelor
Natura antigenelor față de care se dezvoltă un răspuns imun umoral
cuprinde: poliozide, proteine, substanțe sintetice, rareori lipide și acizi nucleici sau
anticorpi (în cazul produselor autoimune). Unele antigene, alergenii, determină un
răspuns secundar cu anticorpi lgE. Poliozidele repetitive au proprietatea de a
declanșa un răspuns imun umoral timoindependent unde intervin doar leucocitele B
în locul celor 3 celule din imunitatea umorală timodependentă.
Calea intravenoasă
După o primă administrare intravenoasă la un subiect indemn, un antigen
molecular parcurge trei etape succesive:
Descreșterea rapidă datorată difuziei antigenului în spațiile extravasculare;
Dispariția lentă datorată catabolismului propriu al antigenului
Descresterea rapidă după 8-10 zile ca urmare a eliminării formațiunilor imune,
complexele imune rapid fagocitate.
În cazul antigenelor particulate- celule, bacterii, virusuri sau al antigenelor sub
formă de agregate, eliminarea este mult mai rapidă prin procesul de fagocitoză
care antrenează o imunizare mai precoce.
Antigenul se localizează în principal în ficat (50-80% din doza totală
injectată) și apoi în plămâni, ganglioni și țesutul osos.
Calea subcutanată:
Antigenul rămâne în parte la locul de inoculare. Adăugarea unui adjuvant
menține antigenul în acest loc și favorizează formarea unui granulom inflamator.În
următoarele ore antigenul migrează în sinusurile subcapsulare ale ganglionilor de
drenaj apoi în zona medulară și în final ajunge în 24 de ore în regiunea corticală la
periferia foliculilor primari. În interiorul organelor limfoide, antigenul se regăseste
în celulele fagocitare. În prezența anticorpilor preformați și a complementului unele
antigene se localizează la suprafața celulelor dendritice intrafoliculare din centrii
germinativi. Contactul cu antigenul antrenează importante modificări histologice ale
organelor limfoide:
Centrii germinativi se dezvoltă în foliculi și persistă mai multe săptămâni. În
paralel apar atât imunoblaști și plasmocite, cât și limfocitele de momorie;
După 3-4 zile se pot detecta limfocite cu anticorpi membranari apoi celule care
sintetizează anticorpi serici.
Calea respiratorie
Antigenele rezistente la sucurile digestive penetrează în mod preferențial
mucoasa prin celulele M și se localizează în ganglionii mezenterici. Fola digestivă
antrenează dezvoltarea țesutului limfoid la nivel intestinal care rămâne atrofic la
animalele aerice și condiționează existența unui răspuns imun cu predominența lgA-
secretorii dar și a lg A serice. La nivelul căii respiratorii, antigenele traversează
mucoasa bronșică și se pot regăsi în circulația generală.
Latența:
Reprezintă perioada scursă de la contactul cu antigenul până la apariția primilor
anticorpi;
Natura anticorpilor
Examinarea claselor de anticorpi produși arată că primii anticorpi care
apar sunt de tip lgM, anticorpii din clasa lgG apar câteva zile mai târziu iar nivelul
lor crește pe masură ce nivelul lgM scade.
În următoarele 2-3 săptămâni în ser predomină anticorpii de tip lgG
În următoarele luni, eventualii anticorpi care persistă sunt de tip lgG
Afinitatea anticorpilor:
Este heterogenă și de intensitate medie
Răspunsul imun primar crește exponențial, timp de câteva zile trece
printr-un vârf între a 4-a și 10-a zi de la producerea primilor anticorpi și scade lent
devenind slab după câteva săptămâni, o cantitate redusă de anticorpi antigen
specifici persistă în lunile care urmează.
Memoria imună
Modificările calitative și cantitative ale răspunsului imun secundar se
datorează dezvoltării memoriei imune. Memoria imună se stabilește din timpul
răspunsului primar și este specifică (următorul contact cu antigenul antrenează un
răspuns de tip secundar).
Heterogenitatea anticorpilor
În cursul imunizărilor succesive, anticorpii sunt heterogeni în cea mai mare
parte. În urma variațiilor situsurilor de legare, se produc modificări ale specificității
și afinității anticorpilor. În cursul răspunsului imun, mai multe clase și subcalse
(izotipuri) coexistă sau se succed. Izotipul anticorpilor condiționează caracteristicile
reacției imune:
Intervenția limfocitelor Th
Pentru majoritatea antigenelor (mai ales proteice) activarea și etapele
următoare ale răspunsului imun umoral necesită prezența limfocitelor Th CD4+.
Aceasta face să intervină:
TCR-ul
APC cu peptide antigenice și MHC II
Molecula CD4;
Moleculele de aderență.
Limfocitele B pot fi direct activate în cazul antigenelor timoindependente de
origine polizaharidică cu epitopi repetitivi. Acesta se realizează prin formarea
unor punți între receptorii de suprafață a membranei celulare. În lipsa
interleukinelor produse de limfocitele T, activarea limfocitelor B este limitată la
sinteza de lgM fără pasajul spre Ig G
Competiția antigenică:
Administrarea injectabilă a unui antigen Y timp de 24-48 de ore, apoi un antigen
X, antrenează un răspuns mai slab față de antigenul Y;
Competiția antigenică are loc la nivelul limfocitelor
Reglarea idiotipică:
Injecția de anticorpi arată că poate induce supresia sau cresterea producției de
anticorpi cu idiotipul corespondent;
Experiențele recente arată că în cazul unui răspuns umoral, anticorpii anti- idiotip
apar spontan și intervin în scăderea nivelului de anticorpi.
Teste cantitative
Numărarea limfocitelor B. Valori normale=1000-4000 /3
Prin citometria de flux se poate determina procentajul de limfocite B, grație
markerilor pe care îi posedă : CD19,CD20, lg de membrană HLA-DR (normal 9-
20%) și se obține cifra absolută a limfocitelor B (200-400/ 3)
Dozarea imunoglobulinelor și detectarea lg monoclonale sau anormale
O apreciere indirectă a lg în zona pentru cea mai mare parte a lgG sau β pentru
lgM și lgA
Permite decelarea unei imunoglobuline monoclonale dacă are o concentrație mare
(4g\l)
Imunoelectroforeza proteinelor serice duce la o apareciere semnificativă pentru
lgG lgA și lgM (normal, crestere, scadere) prin raportarea la serul uman normal
care permite evidențierea unei imunoglobuline monoclonale ca o cantitate de
1g \l
imunofixația: este o tehnică mai sensibilă pentru evidențierea imunoglobulinei
monoclonale; permite identificarea unui lanț de lgM; ea poate să înlocuiască
imunoelectroforeza
dozarea prin imunonefelometrie a lgG, lgA, lgM și prin radioimunologie sau
imunoenzimologie a lgE (eventual a sublaselor lgG1, lgG2, lgG3, și lgG4)
Teste calitative
testul de transformare limfoblastică (PWM) sau cu lipopolizaharide bacteriene
(LPS) cercetează peste tot răspunsul limfocitelor B pentru PWM, răspunsul
depinde de limfocitele T sau B care va permite aprecierea influenței celor două
tipui de limfocite
Implicații în patologie
În patologia infecțioasă:
Imunitatea umorală poate fi transferată de la subiecții imuni prin intermediul
serului sau a α-globulinelor
Utilizarea α-globulinelor nespecifice care nu pot aduce decât anticorpi naturali
sau anticorpi tardivi nu se justifică în hipo sau agama-globulemie;
Noțiunile de reglare a imunității umorale servesc drept bază în strategiile ei de
vaccinare
Diagnosticul numeroaselor afecțiuni bacteriene sau virale pe baza detectării
anticorpilor în ser pentru a determina dacă anticorpii din ser corespund unei
afecțiuni recente sau mai vechi, se efectuează două prelevări la interval de 1015
zile; o creștere semnificativă a titrului de anticorpi este relevantă pentru o
infecție în evolutie: determinarea nivelului seric al claselor lgM- infecție recentă
sau lgG infecție veche, permite tranșarea primei evaluări.
În imunopatologie:
Aglutininele naturale ale grupei sanguine AB0 aparțin în principal clasei IgM dar
și IgG pentru subiecții cu grupa 0
Anticorpii anti-Rh din clasa lgG- injectarea de lgG anti-Rh permite prevenirea
apariției anticorpilor corespondenți după o sarcină Rh + la o femeie Rh – ;
pentru a obține rezultate administrarea trebuie făcută în cele 3 zile după nastere.
Desensibilizarea permite modificarea în mod empiric a producției de anticorpi lgE
spcifici.
Rezumat
Introducerea antigenului pentru prima oară în organism determină un
răspuns imun celular și un răspuns imun umoral. Pornind de la un număr limitat de
limfocite T și B preexistente care pot recunoaște antigenele, răspunsul imun induce
în decurs de 5-14 zile la producerea de limfocite T citotoxice și anticorpi. Acest
răspuns determină diferite reacții imune capabile să elimine surplusul de antigen și
microorganismele care îl exprimă.
Răspunsul imun celular necesită prezența celulelor prezentatoare de antigen
(APC), a celulelor Th1 care recrutează alte celule mononucleate nespecifice.
Citokinele cele mai importante ale răspunsului imun sunt: IL-2 și IFN
În cazul răspunsului imun umoral există diferențe semnificative între
răspunsul primar sau secundar:
Răspunsul primar nu apare decât după a 6-a sau a 14-a zi și se caracterizează prin
producerea de lgM;
Răspunsul secundar, grație limfocitelor de memorie este spontan, rapid și în
general specific
Celulele din sistemul imun care răspund în cursul fazei de inducţie sunt
limfocitele T şi B antigen specifice. Limfocitele B, celule ale imunităţii umorale,
exprimă pe suprafaţă mIg (sau sIg) care leagă moleculele străine, proteine,
polizaharide, lipide sau alţi compuşi chimici aflaţi sub formă liberă extracelulară
sau asociată cu celulele. Limfocitele T, responsabile de imunitatea celulară, exprimă
receptori care recunosc doar scurte secvenţe peptidice din antigenele proteice. LT au
proprietatea de a recunoaşte şi răspunde numai la peptidele antigenice care sunt
prezente pe suprafaţa altor celule.
Pentru activarea limfocitelor sunt necesare două semnale stimulatoare:
primul generat de unirea cu antigenul specific, al doilea numit co-stimulator este
furnizat de celulele accesorii şi celulele helper. Primul semnal duce la anergia
limfocitului pe când stimularea cu o combinaţie de două semnale are ca rezultat
activarea. Celulele precursoare specifice pentru u Ag self vor fi eliminate sau
inactivate, deoarece atunci când ele apr, nu există celule specifice cu care să
coopereze. În absenţa semnalului 1 se extind celulele precursoare pentru Ag străine.
Ele vor putea ulterior interacţiona cu alte celule, pentru a genera un răspuns imun
puternic faţă de moleculele străine, stunci când vor fi confruntate cu antigenul non-
self.
Agenţii patogeni, sau produsele lor, din zonele periferice sunt transportaţi
prin limfă în ganglionii limfatici. Patogenii care intră direct în sânge vor fi reţinuţi
în splină, iar cei din mucoase în plăcile Peyer sau în amigdale. Toate aceste organe
conţin APC specializate atât în captarea antigenului cât şi în activarea LT, fiind
numite APC profesionale sau profesioniste: celulele dendritice, macrofagele,
limfocitele B.
LT naïve circulante părăsesc sângele şi ajung în venulele endoteliate
superioare a organelor limfoide. După traversarea peretelui vaselor, ele intră în
cortexul ganglionului unde pot să se mişte liber, să aibă loc întâlnirea cu APC şi
“trecerea în revistă” a epitopilor expuşi de acestea.
Primele etape, ce conduc de la limfocite naïve recirculante la LT Ag-
specifice activate, implică interacţiuni Ag nespecifice cu alte celule. Interacţiuni
similare conduc la generarea celulelor T efectoare, care migrează în ţesuturile
periferice şi joacă un rol important în ataşarea de celulele ţintă şi distrugerea
acestora.
Spre deosebire de limfocitele T, LB naïve şi activate se localizează doar în
organele limfoide secundare şi măduva oaselor; ele nu migrează la locul inflamaţiei
deoarece produsul lor, anticorpii, acţionează la distanţă, deci nu este nevoie să
ajungă la acel nivel. Celulele B cu memorie au tendinţa de a domicilia în centrii
germinativi ai foliculilor limfatici, fenomen mediat de VLA-4, locul unde Ag este
reţinut pe o perioadă lungă.
a) Clasificare
După localizare: nucleocapsidale sau capsidale (antigenele de tip ale
anterovirusuri); de înveliş (antigenele hemaglutinat şi neuraminidazic ale
virusului gripal); “solubile” – eliberate în mediul culturii celulare în timpul
multiplicării virusului din produsul patologic inoculat în cultură.
După imunogenitate: puternic imunogene, slab imunogene
După specificitate: de grup (arbovirusuri), de tip (polivirusuri), de subtip sau
de variantă antigenică (virusuri gripale)
Antigenele virale, exprimate pe suprafaţa unei celule infectate cu un virus
oncogen (retrovirusuri de tip C)
a) Date clinico-experimentale
Nu rareori, se constată lipsa paralelismului între titrul anticorpilor antivirali
sistemici şi evoluţia clinică a unor viroze.
În cursul unor viroze experimentale sau naturale, se constată post-mortem
hipertrofia zonelor timoependente din splină şi ganglioni limfatici.
În infecţiile virale experimentale, efectuate la animale imunosupresate,
generalizarea infecţiei şi moartea animalului se instalează în scurt timp.
c) Variaţia antigenică
În cursul desfăşurării ciclului de multiplicare a parazitului apar numeroase
modificări ale epitopilor antigenici, ceea ce conferă parazitului capacitatea de a
scăpa de sub controlul imun protector al anticorpilor specifici IgG sistemici.
d) Mimarea şi mascarea
Unii paraziţi (protozoare, helminţi) sunt capabili să mimeze diverse antigene
self din organismul gazdei umane, ceea ce duce uneori la asocierea în procese
autoimune pe linie umorală.
Paraziţii (helminţi) pot fixa pe peretele celular antigene de
histocompatibilitate self umane, ceea ce induce un fenomen de “ecranare”,
astfel încât antigenele specifice parazitului nu mai sunt recunoscute de către
sistemul imun al gazdei.
a) Stări de hipersensibilitate
Hipersensibilitate imediată tip I (atopică) – fie prin mecanism alergic
adevărat sau prin mecanism pseudoalergic, pot apărea manifestări de tip
histaminic în unele helmintiaze, infecţii cu protozoare.
Hipersensibilitatea imediată de tip II sau tip III :
unele protozoare incorportează antigene eritrocitare, ceea ce poate fi
urmat de declanşarea unui conflict imun cu intervenţia anticorpilor litici
anti-eritrocitari, care determină liza parazitului prin antrenarea
complementului activat.
În malarie, tripanosomiază, onco-cercoză, poate fi implicată hiperse-
nsibilitatea imediată tip III, prin complexe imune, depozitate în teritoriile
de localizare a parazitului.
Hipersensibilitate tardivă (tip IV) – în unele infecţii parazitare, cu helminţi,
protozoare, granuloamele tisulare, având la bază imunitatea mediată celular,
pot sugera, prin intensitatea mai pronunţată a fenomenelor inflamatorii şi prin
aflux exagerat de limfocite T şi macrofage, instalarea unei stări de
hipersensibilitate de tip IV.
b) Imunosupresia
S-a dovedit că unii paraziţi, implicaţi în patologia omului, secretă factori
imunosupresivi umorali (Trypanosoma, Toxoplasma). Reflectarea clinică a acestui
fenomen este rezistenţa scăzută faţă de alte infecţii.
17.2.6.2. Imunopatologie
Hipersensibilitatea imediată de tip I (atopică) este implicată în alergizările
pe cale respiratorie, cu pulberi. Şi unele pseudoalergii, cauzate de degranularea
directă mastocitară (IgE idependentă), pot avea la bază intervenţia fungilor
patogeni.
Hipersensibilitatea imediată de tip III, în asociere cu cea de tip IV (tardivă)
stau la baza alveolitelor alergice extrinseci. În micozele viscerale aspectul tabloului
celular, dominat de influxul masiv de macrofage şi limfocite T, sugerează
“amplificarea” răspunsului imun mediat celular, prin implicarea hipersensibilităţii
tardive tip IV.
Imunodeficienţa şi imunosupresia se leagă de două situaţii: micozele
oportunistice generalizate, de tip candidian, survenite pe un teren imunodeficient;
efectele imunosupresive, datorate eliberării de către fungii patogeni de factori
solubili.
Capitolul 18
PROPRIETĂŢILE LIMFOCITELOR EFECTOR
Capitolul 20
REACŢIILE DE HIPERSENSIBILITATE
Asist.univ.dr. Augustin IERIMA
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
Exemple:
Reacţii la alergene inhalate
Rinita şi conjunctivita alergică (febra fânului): indusă de activarea mastocitelor
din submucoasa epiteliului nazal.
Astmul bronşic:
Extrinsec: (asociat cu atopia = predispoziţia genetică pentru sinteza unor
nivele crescute de IgE specifică pentru alergeni din mediul extern)
Intrinsec (non atopic)
Ocupaţional
Reacţii la alergene alimentare
Reacţii determinate de administrarea alergenului pe cale sistemică (şocul
anafilactic)
Reacţii determinate de administrarea locală la nivelul pielii a unor mici cantităţi
de alergen
Figura 20.V.
Figura 20.VI.
3. Complexe imune circulante, noțiunea de antigen in situ sau antigen
plantat
Din 1960 până în 1980, diverse modele experimentale au încercat să explice
conceptul de boală prin complexe imune circulante.
Antigenul in situ
Injectarea unui extract de membrană bazală glomerulară asociată cu adjuvant
Freud la animal, induce o glomerulonefrită autoimună prin anticorpi antimembrană
glomerulară. La nivelul membranei bazale se fixează liniar anticorpii și
complementul. Interesul major pentru studiul glomerulonefritei experimentale
autoimune este că această afectiune are un echivalent în patologia umană. Sindormul
Goodpasture este caracterizat prin manifestări renale (hematurie și glomerulonefrtită)
și pulmonare (hemoptizie) din cauza unui autoantigen la nivelul membranei
glomerulare și alveolare. Caracterul liniar al depozitelor permite diferentierea
glomerunefritelor autoimune cu depozite granulare de imunoglobuline și complement.
Acest caracter a fost totuși contrazis de glomerulonefrita Heymann care se manifestă
ca o glomerulonefrită autoimună cu antigen repartizat neuniform la nivelul celulelor
epiteliale glomerulare. Acest antigen este comun cu cel de la nivelul marginii în perie
a tubului proximal.
Antigenul plantat
Afinitatea unui antigen pentru o structură particulară a organismului duce la o
afectare preferențială a unui anumit organ în caz de imunizare față de acel antigen. În
boala serică și glomerulonefrită la șoareci B/W s-a obiectivat fixarea pe membrana
bazală glomerulară a albuminei bovine respectiv a acidului dezoxiribonucleic.
In același mod, diverse antigene microbiene, substante chimice sau
medicamentoase se pot fixa pe unele structuri ale organismului și pot activa un
răspuns imun caracterizat prin stimularea fagocitozei și uneori liza celulei purtătoare
printr-o hipersensibilizare prin complexe imune formate local.
Figura 20.VIII.
Tipul Mecanisme imune
Mecanisme patogenice
hipersensibilităţii patologice
Tipul I Anticorpi IgE Mastocitele şi mediatorii lor
(hipersensibilitatea (amine vasoactive, mediatori
imediată) lipidici, citokine)
Tipul II Anticorpi IgM, IgG faţă Activarea complementului,
(hipersensibilitatea deantigene tisulare sau de pe recrutarea şi activarea
mediată de anticorpi) suprafeţele celulare leucocitelor (neutrofile),
macrofagelor, anomalii
funcţionale ale receptorului
Tipul III Complexe imune ale Activarea complementului,
(hipersensibilitatea antigenelor circulante cu recrutarea şi activarea
mediată prin complexe IgM sau IgG leucocitelor
imune)
Tipul IV 1. Celulele T CD4 (reacţii 1. macrofagele activate,
(hipersensibilitatea de hipersensibilitate citokinele
mediată de celule T) întârziată) 2. Liza celulelor ţintă
2. Limfocitele T CD8
citotoxice (citoliza mediată
de celule T)
Școul anafilactic, realizat inițial la câine, a fost reprodus și la alte specii (de
exemplu la iepure, cobai și sobolan) și a fost observat și la om. Fenomenul cuprinde 3
faze:
Injectarea inițială a unei substanțe străine: toxine diluate la doze netoxice sau alte
proteine ce pot determina o stimulare antigenică
Un interval liber de aproximativ 3 săptămâni necesar producției de anticorpi și
fixării lor;
Injectarea declanșată, pe cale intravenoasă, a unei doze mici, notoxice din același
antigen.
Acidentul survine la câteva secunde sau minute și se caracterizează printr-o
simpatologie variabilă în funcție de specie :
La câine, se manifestă prin șoc cu colaps cardio-vascular. Debutează prin tulburări
digestive (vărsături, diaree), urmate de semne cutanate (eritem, pruit) și tulburări
circulatorii (tahicardie, prăbușire tensională). Moartea survine prin colaps cardio-
vascular ireversibi. Daca animalul supraviețuiește, devine refractar la reinjectarea
aceluiași antigen, în orele următoare.
La cobai, predomină modificările respiratorii de tipul astmului experimental, datorat
bronhospasmului și edemului peretelui bronșic.
La om, se manifestă printr-o combinație de modificări respiratorii și șoc cu colaps
cardio-vascular, care variază în funcție de individ.
Organele cele mai utilizate pentru studiul anafilaxiei sunt uterul și intestinul,
provenite de la animale imunizate în prealabil. Adăugarea antigenului pe organul
izolat, perfuzat cu ser fiziologic, produce o contracție nerepetitivă. Lavajul vaselor cu
ser fiziologic nu împiedică reacția, deoarece anticorpii responsabili de producerea sa
sunt fixați deja pe mastocite.
20.8. Rezumat
20.9. Anexa 10
A Factori Genetici
Acestia sunt suspectanți prin diferențierea de prelevanță a atopiei în
populatia generală și între frații născuti din părinți cu 2,1,0 manifestări atopice.
Prelevanța atopiei în populația generală :20%
Prelevanța atopiei pentru fiecare copil după descendenți:
-2 părinti alergici 75%
-1 părinte alergic 50%
-0 părinti alergici 15%
2 Genele TCR
Sunt de asemena bune candidate pentru recunoasterea specificității față de
fiecare alergen fiind în prezent cunoscute o serie de asocieri între un anumit lanț α și
V β și un anumit alergen
B.Factori de mediu
Concordanta între germenii monozigoți atopici nu este decât de 20%. Aceasta
sugerează rolul factorilor dobândiți în mod special al factorilor de mediu.
Expunerea la alergen
Este clar că expunerea la alergen este indispensabilă pentru apariția alergiei.
Tuaregii cu viața nomadă nu prezintă atopii și aceasta nu datorită eredității ci modului
lor de viață. Dacă unii dintre ei se stabilesc într-un loc se semnaleaza că sunt
susceptibili la praful de casă.
Eliminarea principalelor alergene în copilarie (lapte de vacă, ouă, făină,
arahide etc)
Aceasta întârzie apariția eczemei atopice fără a o putea evita
Poluarea
Este singura la originea iritației mucoaselor și a hiperreactivității bronșice
componente ale astmului bornșic
Luna de naștere
Copiii născuți între februarie și aprilie când există polen de mesteacăn vor fi
mai frecvent mai alergici la acesta față de cei născuți în afara acestei perioade.
Cunoștințele despre rolul mediului în patogenia alergiei sunt încă rudimentare .
20.10.1.1. Apoptoza
Acest mecanism al morții celulare a fost descris mult mai recent decât
necroza , vechea descriere anatomo-patologică a corpilor tangibili din ganglioni nu a
fost legată de mecanismul de apoptoză decât în jurul anilor 70. Expresia de moarte
celulară programată a fost conferită apoptozei datorită intervenției unei serii de gene
normale ale celulei în acest proces. La ființele cele mai elementare există gene de
proliferare (oncogene) capabile de a activa și multiplica celulele și genele de moarte
celulară, induc oprirea activării. Acesta este un sistem de adaptare indispensabil atat
dezvolării cât și supraviețuirii unei ființe vii. La Dictyostelium discoideum situată
între procariote și eucariote au putut fi puse în evidență atât genle de prolifrare cât și
cele de inactivare. În cazul în care mediul încojurător este favorabil, acest
microorganism unicelular se dezvoltă și se multiplică sub acțiunea oncogenelor, în
mediu defavorabil ia o formă pluricelulară și intră în faza de latență sub acțiunea
antioncogenelor. Apoptopza celulelor umane poate fi indusă prin două căi cunoscute
ce converg către caspaze inductoare ale morții celulare.
Calea BMP
Această cale indirectă implică intervenția unei substanțe BMP care
acționează pe un receptor membranar specific . Un al doilea mesager citoplasmatic
Smad acționează asupra nucleului. Acesta din urmă sintetizează proteina Fal
ligand(Fas L) care se exprimă pe suprafața celulară și interacționează cu proteina Fas
a aceleiași celule .
Au fost descrise patru tipuri de hipersensibilitate, dintre care ultimele trei sunt
importante în patologia umană.
Antigenele utilizate
În experimentele pe animal se plasează pe piele diferite antigene, care
penetrează ușor în epidermă și se leagă solid de celule. Cel mai frecvent se utilizează:
DNCB (dinitroclorbenzen); DNFB (dinitrofluorbenzen); Oxazolina; Clorura de
picryl.ϒ
Faza de sensibilizare
Hipersensibilitatea întârziată de contact poate fi produsă cu ajutorul
diferitelor molecule de tip haptenic aplicate la suprafața pielii animalului de
experiență sau prin injectarea lor intradermică. Aceste haptene neimunogenice trebuie
să se lege prin lianți (ne)covalenți cu substanțele normale ale individului. Substanța
cea mai utilizată este dinitroclorbenzenul (DNCB), care difuzează ușor, fixându-se pe
resturile NH2 ale lizinei diferitelor proteine din piele și care este foarte alergizant,
imunizarea necesitând zeci de ore(minim de 5 ore). Un rol important în sensibilizare îl
joacă două celule ale pielii:
1. Keratinocitul:
este ( în general) celula pe care se fixează haptena sensibilizantă;
această fixare duce la secreția de: IL-1, IL-6 și TNF(care activează celula
următoare);
2. Celula Langherhans:
este o celulă dendritică localizată la nivelul stratului epidermic;
are prelungiri lungi între keratinocite;
în microscopia electronică se poate observa un organit specific acestei celule
(granula lui Kirbek), a cărui funcție este necunoscută;
derivă din celulele dendritice ale măduvei osoase (0,2% din leucocitele
sanguine);
exprimă antigenele timocitelor corticale CD1, antigenele MHC II și diferiții
receptori pentru Fc ai IgG, IgE și complementului (Fc ϒ , FcƐ , și R II, CR1,
CR2 și CR3);
la șoareci, celulele Langherhans sensibilizate cu DNCB își pierd prelungirile,
devenind celule deformate, care se detașează de epidermă și se regăsesc în
regiunea paracorticală a ganglionului limfatic de drenaj. Celulele deformate
au un aspect de stea, fiind cunoscute sub numele de celule interdigitate.
Prezența peptidului antigenic pe MHC II permite recunoașterea limfocitelor
T CD4+ specifice; acestea se multiplică și formează celulele memoriei sau
migrează spre diferite locuri ale dermului.
Faza de descoperire
Reacția de hipersensibilitate de contact survine după ce animalul a fost
sensibilizat în prealabil. O injecție ulterioară intradermică sau aplicarea prin patch (cu
DNCB) declanșează:
infiltrare dermică și epidermică, edem epidermic și eritem după 48- 72 ore, care va
persista câteva zile. Absența reacției se datorează unui deficit imun celular.
Sensibilizarea prealabilă cu DNCB poate declanșa un șoc anafilactic IgE;
Primele modificări apar începând cu a 6-a până la a 8-a oră după contactul cu
alergenul; limfocitele TCD4 specifice se mobilizează și înconjoară vasele
sanguine, glandele sudoripare, glandele sebacee, foliculii piloși și infiltrează
epidermul;
Infiltratul celular se accentuează progresiv și ajunge maxim spre a 72-a oră;
Infiltratul conține celule T CD4+, T CD8+, celule Langherhans, macrofage și
bazofile
Ordinea de apariție a fenomenelor este următoarea: Celulele Langherhans
activează limfocitele T CD4+ cu memorie; Acestea produc diferite citochine: IL-2,
IL-3, IFN și GM-CSF; Celelalte celule sunt recrutate și activează o reacție
inflamatorie în care predomină celulele mononucleare.
Faza de regresie
Începând cu a 72- oră, se dezvoltă un mecanism de atenuare a fenomenelor
(prostaglandina E2 inhibă producerea de diferite citokine). Reacția imună imediată,
care se datorează IgE, prezintă o fază întârziată care survine la 6- 24 ore mai târziu,
urmată de recrutarea diferitelor celule (neutrofile și macrofage) și antrenarea
ulterioară a celulelor Th2 și formarea de plasmocite. În acest tip de manifestare nu
există( în același timp) limfocite Th1, ca în hipersensibilitatea de tip întârziat.
Concluzii
Reacția imună celulară face să intervină limfocitele Th1, limfocitele Tc,
macrofagele, care duc la infiltrări maximale între a 24- ași a 72-a oră sau foarte
întârziate ( a treia- a patra săptămână). Pot fi individualizate trei tipuri principale:
Eczema de contact: alergenul penetrează prin piele și conduce la o sensibilizare
secundară prin intermediul celulelor dendritice ale pielii, care migrează până la
ganglionul de drenaj; după reintroducerea antigenului, limfocitele T CD4+ specifice
duc la apariția eczeme cutanate cu infiltrare celulară și un edem epidermic la maxim
24- 72 ore, după care apare o fază derezoluție și uneori o rezistență;
Hipersensibilitatea la tuberculină: antigenul este introdus subcutan și conduce în
cazul unui subiect sensibilizat la o mobilizare a limfocitelor T sensibilizate; la
producerea unui infiltrat cu diferite limfocite, macrofage, celule dendritice, cu un
maxim la 72 ore și care apoi se resoarbe progresiv;
Hipersensibilitatea granulomatoasă: apare la microorganisme sau particule, care se
reabsorb dificil și este o formă mai severă de hipersensibilitate întârziată, în care
procesul apare la 3-4 săptămâni după introducerea antigenului cauzal, iar
infiltrarea cuprinde limfocite și, în particular, celule epitelioide și celule gigante.
Capitolul 21
IMUNODEFICIENŢE
Şef lucrări univ.dr. Ginel BACIU
Universitatea „Dunărea de Jos” Facultatea de Medicină și Farmacie Galați
Tipuri:
a) agamaglobulinemia X-linkată: - se caracteri-zează prin incapacitatea
copiilor de sex masculin de a produce imunoglobuline. În primele 6-12 luni de viaţă
copiii sunt protejaţi de IgG de la mamă, dar apoi survin infecţii recurente cu piogeni.
Gena responsabilă de producerea X-LA este situată pe braţul lung al cromozomului
X. Gena deficientă în X-LA codifică o proteină tirozin-kinază. Indivizii cu acest
defect genic au nivele normale de celule pre-B în măduva hematogenă, dar maturarea
lor este blocată.
b) deficienţa izolată în IgA – unii pacienţi sunt perfect normali, alţii
prezintă infecţii respiratorii ocazionale şi diaree. Defectul care induce producerea unei
cantităţi scăzute de IgA este reprezentat de un blocaj în diferenţierea finală a
limfocitelor B, ce exprimă la suprafaţă IgA, în plasmocite. Frecvent deficienţa de IgA
se asociază cu deficienţe ale unor subclase de IgG.
c) deficienţe ale unor subclase de IgG – nivelul total al IgG în ser este
normal, dar concentraţia uneia sau mai multor subclase este sub normal. Se datorează
unor defecte ale diferenţierii finale a limfocitelor T.
d) sindromul hiper-IgM X-linkat – pacienţii sunt deficienţi în IgG şi IgA,
dar produc cantităţi mari de IgM policlonal (şi IgD).
e) imunodeficienţa variabil comună – se manifestă prin
hipogamaglobulinemie dobândită, apărută în decada 2-3 de viaţă, ambele sexe fiind
afectate cu aceeaşi frecvenţă.
f) hipogamaglobulinemia tranzitorie a copiilor- se datorează unei
întârzieri în declanşarea sintezei imunoglobulinelor proprii la copii. La copiii la care
această sinteză se declanşează mai tarziu apare un deficit tranzitor de anticorpi, care
predispune la infecţii respiratorii.
asupra celulelor în care virusul se replică, cât şi prin efect represor asupra replicării
virale, mediat de citochine. Celulele NK lizează celulele infectate prin mecanismul
ADCC.
Răspunsul imun primar, humoral şi celular represează replicarea virală după
infecţie. Deşi foarte energic, răspunsul imun primar nu elimină complet virusul şi nici
celulele infectate. Organismul nu se sterilizează deoarece anticorpii specifici anti-
HIV, produşi în timpul infecţiei primare, nu au activitate neutralizantă optimă.
Anticorpii răspunsului imun primar, în esenţă, nu au efect protector, deoarece
răspunsul imun este neadecvat, fie cantitativ, fie calitativ. O proporţie importantă a
virionilor nu este neutralizată, păstrându-şi infecţiozitatea. Rămân de asemenea, multe
celule infectate cu virus, în special în ganglionii limfatici, atât limfocite cât şi celule
foliculare dendritice.
Anticorpii neutralizanţi se detectează mai târziu, după trecerea de la faza
acută a infecţiei, la faza cronică. Probabil că anticorpii neutralizanţi sunt specifici faţă
de epitopii care nu sunt expuşi pe virionii asamblaţi în cursul infecţiei primare sau
anticorpii răspunsului imun secundar suferă fenomenul maturării de afinitate şi se
leagă mai eficient de epitopi.
Pe măsură ce infecţia progresează, anticorpii neutralizanţi sunt înlocuiţi cu
anticorpi stimulatori (enhancing) ai infecţiei. Anticorpii stimulatori favorizează
infecţia celulelor, prin intermediul receptorului pentu C 3 sau pentru Fc. Ineficienţa
anticorpilor este explicată prin aceea că una din glicoproteinele de înveliş al virionilor
este foarte glicozilată (circa 24 de situsuri de glicozilare), pe o secvenţă de 481
aminoacizi. Grupările glucidice maschează epitopii antigenici şi împiedică
neutralizarea virusului.
În infecţia primară diagnosticul se pune prin detectarea antigenului p24,
detectarea genomului viral prin PCR sau RT-PCR în fluidele sau celulele infectate,
cultivarea virusului.
La scurt timp de la intrarea în organism, HIV este transportat în organele
limfatice secundare regionale unde se replică intens şi este larg diseminat în tot
sistemul limfatic. Viremia acută se asociază cu inducerea unui răspuns imun. Sunt
activate limfocitele T CD8+ citotoxice şi apoi se produce seroconversia.
Deşi răspunsul imun HIV specific mediat celular şi umoral se instalează
precoce după infecţia cu HIV şi reuşeşte să controleze viremia iniţială, eliminarea
HIV nu este completă.
Faza latentă clinică poate dura în medie 10 ani. Virusul extracelular este
practic absent din fluidele corporale şi din limfocitele T CD4 + din sângele periferic,
infecţia progresează continuu, cu creşterea numărului de celule infectate. Bolnavii pot
prezenta limfadenopatie generalizată, dar sistemul imun este competent faţă de
majoritatea agenţilor infecţioşi.
Caracteristica perioadei de latenţă clinică este scăderea progresivă a
limfocitelor T CD4+. Mecanismele prin care apare deleţia celulelor T CD4 + sunt
directe şi indirecte.
Imunodeficienţa gravă este consecinţa directă a scăderii dramatice a
numărului de limfocite TCD4 circulante, de la circa 1000 la 100/γl. Dacă în stadiul
preclinic, proporţia limfocitelor producătoare de virus este de 1/40, în stadiile
avansate, proporţia este 1/10.
Cauza principală a scăderii numărului de limfocite TCD 4 este liza consecutivă
infecţiei cu HIV. Proteinele virale sintetizate în celulă au efect toxic. Legarea HIV de
membrană şi penetrarea în celulă, este asociată cu creşterea volumului celular. Celula
pierde controlul influxului ionilor şi al apei. Aceste modificări s-au reprodus in vitro
cu glicoproteina 120 de HIV. Efectul toxic al glicoproteinelor virale este reversat de
antagoniştii canalelor de Ca2+, utilizaţi în clinică pentru a atenua anomaliile
neurologice consecutive infecţiei cu HIV.
La pacienţii infectaţi cu HIV, o proporţie semnificativă de limfocite, după
stimularea cu antigenele virale, în loc să se activeze şi să se dividă, se sinucid prin
apoptoză, adică prin activarea programului genetic al morţii.
O altă cauză a imunodeficienţei o constituie anergia limfocitelor. Cele două
glicoproteine (120 şi 41)rezultă prin clivajul enzimatic al proteinei precursoare 160.
Clivajul proteinei 160 este esenţial pentru infecţiozitatea virală. Glicoproteina 120
asociată necovalent cu gp 41pe suprafaţa învelişului viral, este uşor eliberată de pe
suprafaţa celulei şi a învelişului. Glicoproteina 120 sintetizată în exces, se găseşte
liberă(“solubilă”) în sânge şi se leagă de receptorul CD 4, producând perturbări ale
reactivităţii imunitare, prin blocarea reactivităţii limfocitelor. Afinitatea interacţiunii
gp 120 cu CD4 este conferită de resturile sale glucidice. Starea de anergie poate fi
reversată sub acţiunea stimulatoare a IL-2. Complexele imune gp 120-anti gp 120 s-
au identificat pe suprafaţa limfocitelor, la pacienţii infectaţi cu HIV.
HIV-1 infectează limfocitele TCD4, dar şi monocitele, macrofagele, celulele
dendritice, celulele Langerhans, celulele trofoblastice placentare, neuronii.
Scăderea amplă a numărului de limfocite TCD 4, detectabilă în testul
transformării blastice cu mitogene, anulează funcţia lor reglatoare asupra funcţiei
imunitare. Limfocitele viabile asigură persistenţa infecţiei. Diminuarea sintezei IL- 2
încetineşte proliferarea şi diferenţierea limfocitelor Tc. In absenţa celulelor Tc
activate, multiplicarea virală este necontrolată. Consecutiv scăderii sintezei IL-2,
diminuă activitatea macrofagelor şi a celulelor NK.
La organismele infectate cu HIV, numărul limfocitelor B este normal, iar
concentraţia imunoglobulinelor este de circa 10 ori mai mare decât la persoanele
sănătoase. Explicaţia creşterii titrului anticorpilor este că, în absenţa limfocitelor
TCD4, celulele Ts nu-şi îndeplinesc rolul fiziologic de a supresa activarea limfocitelor
B, diferenţierea lor şi sinteza Ig. Limfocitele B se activează nespecific, policlonal. Se
sintetizează anticorpi la un titru crescut, dar nu au specificitate anti- HIV şi nu sunt
protectori nici faţă de alţi agenţi patogeni sau potenţial patogeni.
Dată fiind specificitatea interacţiunii gp 120 cu receptorul limfocitar CD 4, s-a
încercat utilizarea CD solubil ca agent imunoterapeutic. Tulpinile virale de laborator
4
2. Familia
Antecedentele familiale sunt de o egală importanță deoarece, în formele
sporadice, sunt un element important în diagnosticul unui DIP. Studiul arborelui
genealogic completat de un bilanț imunologic simplu al celorlalți membri ai familiei,
permite uneori identificarea DIP.
3. Examenul clinic
Examenul clinic este foarte util deoarece are ca obiectiv căutarea semnelor
clinice de orientare. Unele din aceste modificări sunt evocatorii, în special hipoplazia
organelor limfoide secundare (amigdale, ganglioni) care este asociată cu creșterea
agamaglobulinemiei congenitale. În același cadru aplazia timică este asociată cu
deficitele imune combinate severe, în special cu sindromul Di-George.
Tabelul 21.II.
Principalele manifestări clinice asociate cu DIP
21.3.2.1. Infecții
Infecțiile sunt complicațiile curente în cursul DIP. În DIP umorale (limfocite
B) și în deficitele de complement, este vorba în special de infecții bacteriene cu
germeni incapsulați (S. pneumoniae, H. influenzae, P. Aeruginosa) și micoplasme. De
asemenea se întâlnesc ifecții virale (enterovirus) și parazitare (giardia). În cadrul
deficitelor imunității celulare (limfocite T), se întâlnesc infecții oportuniste
micobacteriene, virale , parazitare sau fungice. În cadrul deficitelor de fagocitoză, se
regăsesc mai ales infecții cronice cu Staphylococcus aureus și Klebsiella
pneumoniae. Aceste infecții sunt cel mai des bronhopulmonare sau sinusale, uneori
osteoarticulare, cutanate sau meningeale.
Aceste manifestări sunt foarte diferite, ceea ce subliniază foarte bine relațiile
complexe care există între bolile autoimune și DIP, unele din mecanismele celulare
fiind comune.
Tabelul 21.IV.
Clasificarea principalelor deficite imunitare primitive
DIP umorale
Agamaglobulinemie:
- legata de X*
- altele
Deficit cu hiper-IgM:
- legat de X*
- altele
Hipogamaglobulinemie cu expresie variabilă Deficit selectiv de IgA
21.3.3.2.1. DICS T- B+
Formele cele mai frecvente sunt cele legate de X, consecința mutațiilor-
delețiilor genei lanțului al receptorului de IL-2 (numit common gamma chain sau C-
gamma) care este comun receptorilor de Il-2, 4, 7, 9 și 15. Această anomalie
împiedică blaștii limfoizi și NK în a avea o maturare normală.
Alte forme mult mai rare au fost descrise, respectiv formele legate de
mutațiile genei Jak3 (Janus kinaza 3) care este o enzimă fixată de lanțul al
receptorului IL-2, permițând transducția semnalului. Alte forme autosomal recesive,
legate de mutațiile receptorului IL-7 (lant ), au fost de asemenea descrise
21.3.3.2.2. DICS T- B-
Alimfocitoza autosomal recesivă (20% din DICS) este legată de mutațiile
genelor RAG1 și RAG2 (recombination activating gene) care codează enzimele
esențiale pentru rearanjamentul genetic al genelor pentru Ig și receptorii antigenici ai
limfocitelor T. Această anomalie determină o absență a recombinarii V(D)J, ceea ce
împiedică producția de limfocite T și B mature.
Deficitul de adenozin dezaminaza (ADA) reprezintă 15% din DICS. Acest
deficit este determinat de mutațiile-delețiile genei responsabile de ADA, care este o
enzima celulară importantă. Acest deficit va determina o acumulare de metaboliți ai
căii purinelor și a derivaților metilati toxici pentru limfocitele B și T. Se asociază cu
unele complicații scheletice “pseudorahitice” și cu semne neurologice (distonie,
cecitate corticală).
a. Infecții
Se întâlnesc în general infecții cu Neisseria (meningite cu meningococ și
infecții generalizate cu gonococ) în deficitele componentelor complexului terminal
(C5, C6,C7, C8). Există în ,mod cert și o predispoziție personală pentru astfel de
infecții deoarece în deficitele de C6, 25% din purtători sunt indemi de orice infecție.
Infecțiile cu germeni incapsulați și cele fungice au fost descrise mai ales în
cadrul deficitelor complete de C3, deficitele de MBL și în deficitele de CR3
(CD11/CD18).
b. Boli autoimune
Acestea se observă mai ales în deficitele căii clasice a complementului (C1q,
C2, C4). În 50% din cazuri este vorba de sindroame lupice, care se manifestă înainte
de 30 de ani, uneori încă din copilărie. Aceste manifestări sunt dominate de lezini
cutanate, deseori discoide și extrem de fotosensibile, deseori asociate cu Ac anti-
Ro/SS-A. În deficitele parțiale de C2 și C4, sunt mai puține complicații clinice.
Deficitul heterozigot de C2 (C2Q0) se observă la 5% din caucazienii cu lupus. În
același grup, 50% dintre pacienți au un deficit heterozigot de C4 (cel putin o alelă
nulă) și 12% au un deficit homozigot de C4A. De asemenea, un deficit homozigot de
C4A crește de la 10 până la 20 de ori riscul de dezvoltare a unui lupus sistemic, în
condițiile în care un deficit heterozigot nu crește decât de la 2 până la 4 ori acest risc.
Deficitele parțiale de C2 și C4 au fost descrise și în sindromul Gougerot-Sjogren,
sclerodermie, miastenie, diabet insulinodependent, boala Basedow și hepatitele
cronice autoimune.
c. Edemul angioneurotic ereditar
Se definește prin apariția edemenlor cutanate sau mucoase declanșate de un
traumatism (chiar și minim) sau de factori de stres neobișnuit. Edemele cutanate sunt
albe și moi, apar rapid, sunt precedate uneori de eriteme și persistă 2-3 zile. Riscul
major este legat de edemele mucoaselor care se manifestă cu dureri abdominale, cu
greață, vărsături, diaree, luând aspectul unui abdomen chirurgical. Când edemul
atinge sfera ORL, există o disfagie și o disfonie, având riscul de hipoxie mortală, mai
ales după traumatismele sau intervențiile faringolaringiene. Această afecțiune trebuie
să fie bine cunoscută deoarece necesită un tratament prealabil și o supraveghere
riguroasa.
22.1.1. Imunostimularea
Activitatea antigen-dependentă a imunităţii prin mijloace terapeutice
comportă trei paliere distincte, cu adresabilitate diferită în imunopatologie: imunizare
activă, imunitate pasivă, imunitate “adoptivă”
Imunizarea activă
Vaccinarea – asigură protecţia imună activă faţă de un germen patogen,
omolog din punct de vedere antigenic celui din vaccin. Vaccinurile se împart în
inactivate (exotoxine tratate in vitro cu formol – vaccinul antiholeric, vaccinul
sntitifoparatifoidic, etc.) şi vii (atenuate – vaccinul atituberculos BCG, vaccinul
antidizenteric; prin identitate antigenică – vaccinul antivariolic). Vaccinurile vii
prezintă numeroase avantaje: inducerea imunităţii protectoare pe linie umorală şi
celulară; persistenţa mai îndelungată a efectului imunoprotector; realizarea
imunoprotecţiei locale intestinale prin IgA secretorii specifice antigenului după
vaccin. Preparatele polimicrobiene ca şi autovaccinurile reprezină mijloace utile de
imunizare activă, inclusiv în infecţii cutanate cu caracter recidivant.
Hiposensibilizarea- se adresează formelor de hipersensibilitate imediată de
tip I, inclusiv unor atopii cutanate. În cadrul procesului de sensibilizare prin fixarea
reaginelor IgE specifice pe mastocite, urmată de impactul alergen-IgE- mastocit, cu
degranulare mastocitară, administrarea de alergene omologe celor care au produs
sensibilizarea, în anumite doze şi după o schemă strict individualizată, poate conduce
la suprimarea sau ameliorarea fenomenelor atopice. Mecanismul hiposensibilizării
recunoaşte următoarele verigi cardinale:
Alergenul introdus terapeutic induce în organism sinteza de anticorpi
specifici IgG1 şi IgG2.
Anticorpii IgG induşi exercită un efect de “feed-back” negativ asupra
producţiei de IgE omologe.
Sinteza preferenţială a anticorpilor IgG1 şi IgG2 în urma adiministrării de
alergen ar genera apariţia de limfocite Th1, care inhibă producţia de reagine IgE
direcţionate către acelaşi antigen.
22.1.2. Imunosupresia
Supresia activă – cu implicarea antigenului se poate efectua astfeL;
Administrarea la mamele Rh negative, în timpul sau imediat după naşterea
primului copil Rh-pozitiv, a anticorpilor anti-Rh pentru provenirea izoimunizării
produşilor de concepţie Rh-pozitivi ulteriori.
În unele boli autoimune, s-a indicat introducerea parentală de
autoantigene, care ar produce o stare de imunotoleranţă, diminuându-se violenţa
conflictului autoimun.
Administrarea de anticorpi monoclonali, orintaţi către receptorul pentru
antigen de pe limfocitul T şi/sau către receptorul pentru antigen, de natură
imunoglobulinică, de pe limfocitul B, rezultând temperarea fenomenelor de
autoagresiune.
Tratamentul cu anticorpi monoclonal direcţionat spre receptorul HLA din
clasa a II-a, prezent în membrana limfocitului T, având ca rezultat inhibiţia directă a
receptorului pentru antigen, cu care cooperează.
Injectarea de imunoglobuline normale, în cantităţi mari, suprimă răspunsul
în autoanticorpi endogeni, în unele boli de autoagresiune.
Supresia pasivă – plasmafereza, constad din primenirea continuă a
sângelui, atât cu celule limfocitare, cât şi cu plasmă proaspătă, de la un individ
sănătos poate duce la îndepărtarea unor autoanticorpi IgM şi a unor limfocite T
efectorii autoimune, a unor complexe imune ciruculante, în afecţiuni cu
imunopatologie mixtă: autoimunitate umoral-celulară, asociată cu hipersensibilitate
imediată tip III.
22.2.1. Imunostimularea
Imunitatea nespecifică se impune în stări de imunodeficienţă primară şi mai
ales secundară (cancer, viroze latente de tip herpetic, infecţia cu virus HIV, hepatite
virale).
Administrarea de imunoadjuvanţi, bilogici (interferon, BCG,
Corynebacterium parvum) sau sintetici (levamisol) în imunoterapia cancerului;
isoprinosina (metisoprinolul) ca imunoadjuvant în virozele latente cu imunodeficienţă
secundară (herpes, zona zoster).
Introducerea parentală de citokine preparate concentrate şi purificate
precum IL-1, IL-2 şi-au dovedit potenţialul imunostimulator în cancerele
experimentale.
Anticorpii monoclonali pot acţona ca activatori ai imunoreactivităţii prin:
blocarea serică a moleculei-ligand sau a receptorului însuşi, în relaţia de tip inhibitor a
acestora pe suprafaţa celulei limfocitare; eliminarea moleculei “ţintă”, prin legătura
specifică in vitro; stimularea receptorulu, prin funcţionarea monoclonalului ca
“surogat”.
Tratamentul activ cu complex receptor celulă T/CD3 + care introdus în
organism imunostimulează prin semnale particulare ale acestui complex în
recunoaşterea antigenului, în cursul iniţierii răspunsului imun protector.
Administrarea susţinută prin perfuzie, de celule NK autologe, preincubate
in vitro (activate) cu IL-2 recombinat (celulele LAK)
22.2.2. Imunosupresia
Introducerea de citostatice cu rol de temperare a unei imunităţi patologice
prin hipertonus nu a intrat în practica imunoterapiei supresive. În cursul
chimioterapiei tumorilor, sunt inerent afectate, în măsură mai mare sau mai mică şi
celulele implicate în imunitate, ceea ce crează premiza accentuării statusului
imunosupresiv al bolnavului de cancer. Concluzia este individualizarea strictă a
schemelor de chimioterapie autitumorală.
Anticorpul monoclonal direcţionat către receptorul CD4 determină efecte
imunosupresive nete , fiind o cale de imunoterapie de speranţă în unele boli
autoimune.
Pentru prevenirea sau amânarea producerii reacţiei de rejecţie a grefei, se
poate folosi administrarea anticorpilor monoclonali anti-receptor IL-2, care
blochează temporar exprimarea acestui receptor la nivelul treptei a II-a a “cascadei
citokinice”
Ciclosporina A prelungeşte viaţa transplantului de cord, rinichi sau ficat,
poate fi utilizată în prevenirea reacţiei “grefă-contra-grefă”. Substanţa acţio- nează
la nivelul limfocitelor CD4+, blocând activarea acestora.
Corticosteroizii sunt puternici imuno-supresivi. Ei se utilizează pe scară
largă în tratamentul bolilor autoimune ca imunosupresivi şi antiinflamatorii. Hormonii
glucocorticoizi produc a deleţie rapidă de limfocite în torentul circulator, inhibă
producţia de IL-1 macrofagică, diminând concomitent sinteza de anticorpi (cu
precădere IgG).
GLOSAR