Nanoparticule de aur utilizate n

detecia i tratarea cancerului

Ciolovan Cristina
Facultatea de Inginerie Medical
Grupa 1436
 Cuprins

1. Introducere
2. Metode de sintez a nanoparticulelor de aur
3. Proprietile nanoparticulelor de aur
4. Biofuncionalizarea nanoparticulelor de aur
5.Nanoparticulele de aur n detecia, imagistica i tratamentul cancerului
6. Aplicaii biomedicale ale nanoparticulelor de aur
6.1. Nanoparticuelele de aur n aplicaii de biodetecie
6.2. Nanoparticulele de aur n imagistic
6.3. Nanoparticulele de aur n livrarea medicamentelor sau a diverselor molecule
6.4. Alte aplicaii biomedicale ale nanoparticulelor de aur
7. Concluzi
8. Referine bibliografice
 1. Introducere

Unul dintre domeniile care au revoluionat dezvoltarea tiinific i tehnic n ultimul

timp l reprezint nanotehnologia. La scara nano materialele au cu totul alte proprieti dect cele
la scara macro, iar secretul obinerii de astfel de materiale const n stpnirea modului de
asamblare a nanoclusterilor, ceea ce le ofera proprieti electronice, structurale i chimice
caracteristice.
Nanomaterialele (particulele cu diametru ntre 1-100 nm) pot fi formate din orice
substana incluznd metale, semiconductori, oxizi metalici (pigmeni metalici), polimeri organici.
Dezvoltarea nanomaterialelor a permis aparitia n domeniul biomedical a unor noi metode de
sesizare i diagnosticare rapid a diferitor maladii, noi metode de tratament, precum i a unor noi
materiale cu proprieti curative superioare.
Proprietile remarcabile, ct i uurina sintezei i funcionalizrii, au transformat
nanoparticulele de aur n adevarate crmizi pentru multe materiale i dispozitive
nanostructurate.
Nanoparticulele de aur permit dezvoltarea unor nanomateriale sofisticate, complexe ce
combin proprietile diferitelor materiale organice i anorganice care ulterior pot aciona ntr-o
manier sinergic ntr-un nano-sistem capabil s treac toate barierele corpului uman pentru a
repara esuturile deteriorate i a restabili funcia acestora. Aceste noi materiale au dat natere la
un nou domeniu nanomedicina axat n primul rnd pe dezvoltarea unor noi nano-sisteme care
permit simultan diagnosticul, imagistica i terapia , utile n special pentru tratamentul
personalizat al cancerului .
2. Metode de sintez a nanoparticulelor de aur

Nanoparticulele de aur pot fi sintetizate n diferite moduri, att prin procese in faz solid
ct si prin procese in faz de vapori sau n solutii.
Cea mai cunoscut metod de sintez a AuNPs sferice este metoda Turkevich care
presupune reducerea HAuCl4 cu citrat de sodiu n soluie apoas la temperatura de fierbere. n
funcie de aplicaia dorit, folosind aceast metod pot fi obinute nanoparticule de diferite
dimensiuni avnd diametrul cuprins ntre 10 i 150 nm, doar variind raportul celor doi reactani.
O alt medod de sinteza a AuNPs este metoda Brust-Schiffrin utilizat pentru a produce
AuNPs foarte mici n lichide organice sau strategii ce utilizeaz ageni de acoperire care sunt n
msur s controleze ratele de cretere ale diferitor semine pentru a obine nanoparticule de
metal anizotrope, cum ar fi bastonae, triunghiuri, stele sau flori.
Dei aceste metode ofer nanoparticule de nalt calitate, acestea folosesc unii ageni
chimici (de exemplu, citratul de sodiu sau borohidrura de sodiu), cunoscui pentru poteniale
riscuri biologice, ce prezint doar o stabilitate limitat a AuNPs n medii biologice i care mai
mult necesit purificarea i biocompatibilizarea AuNPs, pentru a fi utilizate n aplicaii
biologice/biomedicale.
Pentru evitarea tuturor acestor probleme se incearca folosirea unor material ecologice. De
exemplu, protocoalele de sintez care utilizeaz bacterii, ciuperci sau drojdii precum i
aminoacizi, vitamine, biopolimeri, plante vii sau extracte de plante sunt capabile nu numai s
reduc ionii metalici n forme i dimensiuni ale AuNPs bine definite dar ulterior acoper i
protejaz NPs formate, n timp ce le confer o suprafa funcionalizat, ntr-un singur pas. Prin
urmare, biosinteza AuNPs maximizeaz eficiena i sigurana reaciilor n timp ce reduce
riscurile pentru mediu.
3. Proprietile nanoparticulelor de aur

La scara nanometric, datorit ariei mari de suprafa sau a efectului cuantic, proprietile
fizice i chimice ale materialelor se modific drastic rezultnd unele proprieti unice. Aceste
caracteristici distinctive apar datorit oscilaiilor colective ale electronilor liberi n urma excitrii,
cunoscute sub numele de rezonane plasmonice de suprafa localizate (LSPR). Banda LSPR a
AuNPs este extrem de dependent de mrimea, chimia suprafeei i mediul local din jurul
AuNPs, fiind astfel o sond util pentru a monitoriza interaciunea nanoparticulelor cu probe
biologice. Aceste caracteristici unice pot fi reglate cu precizie pentru a interfera n mod specific
cu materia organic cu scopul de a facilita aplicarea acestora n domeniul biomedical.
O alt proprietate important a AuNPs este cmpul electromagnetic amplificat generat n
jurul suprafeei acestora. Acest cmp electromagnetic poate amplifica att fluorescena unei
molecule aflat n proximitatea unei nanoparticule ct i semnalul Raman al moleculelor de pe
suprafaa metalic. Cu alte cuvinte, nanoparticulele de aur absorb puternic radiaiile
electromagnetice cu diverse lungimi de und (radiaii din spectrul vizibil, infraroii). Prin
transformarea acestora n cldur suprafaa particulelor ajunge la temperaturi suficient de mari
(aproximativ 180C ) pentru a distruge diverse tipuri de celule (precum celule canceroase) sau
bacterii.

4. Biofuncionalizarea nanoparticulelor de aur

Biofuncionalizare nanoparticulelor de aur se poate face n nenumrate moduri prin care

se pot aduce funcii deosebit de importante nanosistemelor de livrare a compusului biologic
activ.
Eliberarea controlat de compui biologic acitivi din nanoparticule reprezint o aplicaie
interesant n domeniul medical datorit potenialului ridicat n livrarea de compui activi sau n
protocoalele de diagnosticare. Recent, nanoparticulele de aur au aprut ca un sistem promitor
pentru transportul i eliberarea produselor farmaceutice n diverse tipuri de celule.
Proprietile deosebite pe care acestea le dein le fac candidai ideali pentru utilizarea n
obinerea sistemelor de eliberare controlat de compui biologic activi. Miezul de aur este inert,
non-toxic, biocompatibil, motiv pentru care poate fi folosit cu succes n tratamentele clinice. De
asemenea, miezul de aur permite funcionalizarea cu diferite biomolecule (proteine, ADN, ARN,
lipide, carbohidrai etc.), fapt ce duce la creterea biodisponibilitii i implicit la un rspuns
terapeutic ateptat.
 Livrarea anumitor molecule, precum proteinele n interiorul celulei este limitat de
permeabilitatea sczut a acestora prin membrana celular. Prin funcionalizarea proteinei cu
nanoparticule de aur aceste obstacole sunt minimizate, proteinele ajungnd cu uurin n
interiorul celulei.

Un numr important de substane antitumorale au aplicaii clinice limitate datorit

caracterului hidrofob i a solubilitii sczute. Astfel, apar o serie de reacii adverse care duc la
scderea dramatic a raspunsului terapeutic.

Paclitaxelul (PTX) a atras atenia n sinteza sistemelor de eliberare controlat a

compuilor activi n tratamentele pentru cancer. Rolul farmaceutic al nanovehiculelor de
transport al substanelor active de interes clinic a fost descris cu succes prin obinerea unor
materiale prin funcionalizarea paclitaxelului cu micelii, lipozomi, lipide solide, dendrimeri,
nanohidrogeluri, nanoparticule de aur cu scopul de a elibera substane farmaceutice active cum ar
fi - Ciprofloxacinul sau Doxorubicinul. Astfel, PTX a fost funcionalizat cu nanoparticule de aur,
cu obinerea unor nanostructuri (PTX-AuNP) cu rol de transport al preparatelor farmaceutice.
Pentru mrirea activitii biologice i a biodisponibilitii, PTX-AuNP sunt tratate cu
tio-polietilenglicol (PEG-SH) (Figura 1).

Figura 1. Funcionalizarea AuNP cu

paclitaxel i tio-polietilenglicol

Noi metode de funcionalizare a nanoparticulelor de aur cu porfirina sunt propuse cu

scopul de a obine vehicule de transport a substanelor active (Dexorubicin) pentru
tratamentele anticancer.

Nanoparticulele de aur pot fi acoperite cu gelatin i ncrcate ulterior cu medicamente

pentru a ndeplini funcii terapeutice i imagistice multimodale

Celulele tumorale menin pH-ul n jurul valorii pH = 4,5, n timp ce esuturile sntoase
au pH-ul constant pH=7,5. Se observ faptul c n mediu acid, nanoparticulele de aur
biofuncionalizate cu Dexorubicin i profirin elibereaz substana activ cu un randament
superior mediului neutru. Astfel crete semnificativ importana acestora n practica medical,
deoarece, sistemele de eliberare controlat bazate pe nanoparticule de aur biofuncionalizate, pot
elibera Dexorubicina n esutul tumoral (pH acid), evitnd efectele toxice n esutul sntos (pH
normal)

O proprietate importanta a acestor sisteme de eliberare controlat o reprezint capacitatea

de biorecunoatere a moleculelor int, considerent ce duce la scderea semnificativ a toxicitii
datorit faptului c substana activ nu se supraconcentreaz n organism.

5. Nanoparticulele de aur n detecia, imagistica i tratamentul

cancerului

Cu scopul de a obine rezultate maxime n detecia i tratamentul cancerului cu efecte

secundare minime este esenial ca agenii terapeutici s ajung la locul tumorii i n interiorul
celulelor maligne. Medicina convenional, implic de obicei chimioterapia pentru tratarea
cancerului, dar, din pcate, agenii chimioterapeutici nu sunt specifici celulelor canceroase i prin
urmare, distrug att celulele maligne ct i cele normale i este extrem de toxic, avnd multe efecte
secundare nedorite. Nanomedicina, pe de alt parte, face uz de materiale nanostructurate capabile s
transporte i s elibereze medicamente chimioterapeutice specific numai la esutul canceros.

6. Aplicaii biomedicale ale nanoparticulelor de aur

Avnd n vedere versatilitatea AuNPs care ofer materiale complexe, acestea au

numeroase aplicaii n nanomedicin, cum ar fi livrarea specific a medicamentelor i genelor, n
genomic, biosenzoristic, biodetecie sau bioimagistic optic.
6.1. Nanoparticulele de aur n aplicaii de biodetecie

Cea mai simpl metod de detecie bazat pe nanotehnologie este detecia colorimetric.
Aceasta are la baz interaciunea/legarea dintre AuNPs funcionalizate i analii, interaciune care
induce agregarea AuNPs i modificarea vizual ulterioar a culorii de la rou la albastru.
Biodetecia bazat pe modificarea benzii LSPR este o metod bazat pe schimbarea
intensitii i poziiei spectrale a benzii LSPR indus de o variaie n mediul local al AuNPs, n
urma interaciunilor biospecifice. Acest metod este mai puin sensibil dect testele de
agregare, i avnd n vedere c orice molecul poate induce o schimbare n banda LSPR a
AuNPs, metoda este potrivit exclusiv pentru detecia analiilor cunoscui i numai atunci cnd
AuNPs sunt funcionalizate cu elemente de recunoatere molecular, cum ar fi anticorpii.

Pentru detecia i identificarea probelor necunoscute, spectroscopia Raman este cea mai
potrivit metoda, deoarece este o tehnic foarte specific, n msur s identifice specii
moleculare bazat pe amprenta lor unic de vibraie Raman. Semnalul Raman poate fi amplificat
drastic atunci cnd analiii sunt adsorbii pe suprafee metalice, efect cunoscut sub numele de
mprtiere Raman amplificat de suprafa. Pentru aplicaii de biodetecie eficiente este, prin
urmare, esenial substratul SERS. n soluie, AuNPs nanosferice agregate sau anizotrope
determin formarea de hot-spoturi ntre nanoparticulele interconectate care amplific substanial
semnalul Raman. La fel de important precum forma AuNPs este funcionalizarea i
biocompatibilitatea senzorilor care trebuie s permit adsorbia analiilor pentru un semnal SERS
eficient, stabil i reproductibil.

Inovatii

O echip de cercettori britanici propune un detector ce conine nanoparticule de aur

depuse pe o baz din material plastic ce permite analizarea vizual a serului sanguin prelevat de
la pacieni. Dac acest ser conine markerii biologici precum antigena prostatic specific (PSA)
pe baza creia se pun diagnosticele de cancer la prostat, nanoparticulele de aur reacioneaz,
colornd n albastru soluia transparent aflat n detector. n absena acestor markeri, particulele
se separ formnd mici bule roiatice. Acest prototip de detectare a bolilor este de aproximativ
10 ori mai sensibil dect instrumentele sau procedurile folosite pn n prezent, dar i de 10 ori
mai ieftin, putnd fi folosit i n rile srace.
O alta echip de cercettori, de data aceasta de la Technion-Israel Institute of Technology
din Haifa propune un senzor care poate detecta cancerul pulmonar prin testarea aerului expirat,
oferind un diagnostic nainte ca tumorile s poat fi detectate radiographic. Dispozitivul creat are
forma unei sgei, pe care sunt montai nou senzori formai din nanoparticule de aur n amestec
cu diferite substane organice, care reacioneaz la diveri compui organici volatili eliberai n
aer de tumorile canceroas. Acest aparat poate detecta cancerul pulmonar cu o acuratee de
minimum 86 la sut.

6.2. Nanoparticulele de aur n imagistic

Proprietile optice i electronice versatile ale AuNPs au permis imagistica celular cu o

varietate de tehnici, inclusiv mprtierea luminii n cmp ntunecat, tomografia coerent optic
(OCT), tomografia computerizat (CT), microscopia de for atomic (AFM), fluorescen,
microscopia electronic de transmisie i baleiaj (TEM, SEM) precum i spectroscopia SERS.
Unele dintre aceste tehnici utilizate n prezent permit chiar i imagistica la nivel unicelular.

6.3. Nanoparticulele de aur n livrarea medicamentelor sau a diverselor

molecule

n funcie de funcionalizarea suprafeei, tipul medicamentelor i de aplicaiile dorite,

AuNPs pot fi uor ncrcate cu un singur sau mai multe medicamente sau alte molecule fie prin
interaciuni de conjugare covalente sau necovalente. ncrcarea de medicamente pe suprafaa
AuNPs mbuntesc stabilitatea i biodistribuia acestora n medii biologice avnd n vedere c
sunt protejate n agentul de transport care le confer n plus o via mai lung n sistemele
biologice i posibilitatea de a fi livrate fie prin metode specifice sau pasive ctre locul de aciune.
AuNPs permit ncrcarea unei mari cantiti de medicament datorit ariei mari de suprafa i
chimiei versatile a suprafeei. Mai mult dect att, activitatea sporit a medicamentelor livrate de
AuNPs face posibil reducerea dozei de medicament administrat i implicit efectele secundare
ale acestuia.

Rana i colaboratorii, n anul 2012, descriu un experiment prin care administreaz

oarecilor diabetici nanoparticule de aur (AuNP) biofuncionalizate cu insulin, cu scopul de a
observa nivelul de glucoz din sngele circulant al
animalelor . Experimentul a demonstrat eficacitatea
nanoparticulelor n livrarea proteinei n interiorul
celulei (Figura2).

Figura 2. Biofuncionalizarea nanoparticulei de aur

(AuNP) cu insulin. Cantitatea de glucoz n sngele
circulant al oarecilor 1. AuNP fr insulin, 2.
AuNP funcionalizat cu insulin
 Venkatpurwar i colaboratorii n anul 2011, au studiat noi metode de funcionalizare a
nanoparticulelor de aur cu porfirina cu scopul de a obine vehicule de transport a substanelor
active (Dexorubicin) pentru tratamentele anticancer. Experimentul s-a bazat pe mimarea
sistemelor tampon fiziologice n cauz: acid (tampon acetat), respectiv neutru (tampon fosfat).
Eliberarea Dexorubicinei a fost analizat timp de 7 ore, exprimndu-se capacitatea de eliberare n
funcie de pH. Se observ faptul c n mediu acid, nanoparticulele de aur biofuncionalizate cu
Dexorubicin i profirin elibereaz substana activ cu un randament superior mediului neutru.
Astfel crete semnificativ importana acestora n practica medical, deoarece, sistemele de
eliberare controlat bazate pe nanoparticule de aur biofuncionalizate, pot elibera Dexorubicina
n esutul tumoral (pH acid), evitnd efectele toxice n esutul sntos (pH normal) (Figura 3).

Figura 3. Cinetica de eliberare a Dexorubicinei din nanoparticulele de aur biofuncionalizate n

tampon acetat (pH=4,5), respectiv tampon fosfat (pH=7,4)

n urma experimentelor in vitro, Venkatpurwar i colaboratorii au demonstrat eficacitatea

sistemelor de eliberare controlat bazate pe nanoparticule de aur.

Bao i colaboratorii, n anul 2013 au funcionalizat nanoparticulele de aur cu tiopronin

cu scopul de terapie a afeciunilor acute ale ficatului, precum cancerului. Nanomaterialul
tiopronin-nanoparticul de aur (TPN-AuNP) a fost supus analizelor in vitro, cu scopul de a se
observa cinetica de eliberare a substanei active. Din acest studiu reiese faptul c tiopronina
poate fi eliberat continuu din nanoparticulele de aur biofuncionalizate, crescnd cu mult
potenialul de utilizare clinic
(Figura 4).
 Figura 4. Cinetica de eliberare a toproninei din complexul TPN-AuNP

Kumar i colaboratorii, n anul 2013 prezint nanoparticulele de aur biofuncionalizate ce

sunt capabile s recunoasc celulele canceroase i s se ataeze receptorilor aflai pe suprafaa
membranei acestora. n acest mod este limitat intoxicarea pacientului cu substanele biologic
active i, implicit, este evitat distrugerea celulelor sntoase (Figura 5)

Figura 5. Ataarea nanoparticulelor biofuncionalizate pe receptorii celulelor canceroase

n anul 2014, Sun i colaboratorii au obinut un complex prin biofuncionalizarea

nanoparticulelor de aur cu doxorubicin prin intermediul polietilenglicolului. Doxorubicina este
capabil s formeze legturi chimice cu ADN-ul, ducnd la inhibarea sintezei de acizi nucleici,
fiind folosit n tratamentele diverselor maladii neoplazice. Astfel, a fost analizat efectul
nanoparticulelor de aur biofuncionalizate asupra oarecilor de laborator ce prezint tumori
maligne. Dup efectuarea chemoterapiei cu complexul (DOX-AuNPS) obinut prin grefarea
doxorubicinei pe nanoparticulele de aur, se observ dispariia celulelor canceroase (Figura 6).

.
Figura 6. Tratamentul oarecilor de laborator cu compelxul DOX-AuNPS

6.4. Alte aplicaii biomedicale ale nanoparticulelor de aur

n terapia fotodinamic (PDT) AuNPs sunt folosite pe scar larg drept ageni de
transport a fotosensibilizatorilor n zona de interes. Acolo, fotosensibilizatorului excitat poate
produce o specie de oxigen extrem de reactiv, cunoscut sub numele de oxigen singlet care
distruge celulele din apropiere.
AuNPs sunt, de asemenea, frecvent utilizate n terapia fototermic (PTT), datorit
interaciunii lor unice cu radiaia laser. AuNPs situate n interiorul sau n jurul celulelor int, n
urma iradierii cu laser absorb energia fotonic, care este transformat n energie termic i induc
astfel o cretere a temperaturii locale n jurul AuNPs i, prin urmare, deteriorarea acestora .
AuNPs pot fi aplicate pur i simplu ca ageni terapeutici sau antibacterieni eficieni.

Inovaii

Cercetatorii de la Institutul BMTI pentru Tehnologie Biomedicala propun o metod

inovatoare de tratare a tumorilor maligne: mai nti, nanoparticulelor de aur li se ataeaz
anticorpi specifici tumorii respective. Apoi, asupra tumorii se acioneaza cu un fascicul IR ce
face nanoparticulele de aur s ajung la o temperatur de aproximativ
100 .
7.Concluzii

Nanotehnologia i implicit nanomedicina reprezint un domeniu important n cercetarea

actual datorit avantajelor ce pot sunt aduse tratamentelor clinice i ndeosebi pacienilor.
Caracteristicile de suprafa ale nanoparticulelor de aur permit funcionalizarea uor, proprietate
ce mrete spectrul de utilizare a acestor materiale n ct mai multe tratamente clinice.
8. Referine bibliografice

1. Nanoparticule de aur acoperite cu gelatin i ncrcate cu medicamente pentru a

ndeplini funcii terapeutice i imagistice multimodale
Sorina-Maria Suran
2. Nanoparticule de aur biofuncionalizate noi trenduri n efectuarea tratamentelor clinice
Mast. Alexandru Rogobete, Conf. Dr. Ing. Gabriela Preda

3. Sinteza si caracterizarea nanosistemelor multifunctionale cu aur pentru aplicatii in medicina,

Anamaria Ioana Orza