Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
lNTRODUCERE
implicarea mlcroorganlsmele↑ n patolo91a u育 lan益 ;lnterFelara dintre acestea,i gazdb pttcum,i modalI通 Ile de
trata祀 ゛preVen,e ainた cr‖ or pe care aceste mlcroor9anisme le produc La nivel globalテ bo‖ le infecl10ase
cauzeazё mai mult de 20% dln numarul tOtal de decese ln ultimele decell‖ boH ca tuberculozaす malarial
hepauta,hOlera,denga au Юapな rut ca infecli ma10re,i progresiv au fost ideη tincal nOl agen,lnfec,0,i Ca:
HIV,virusul hepaltel C,E col1 0 157,ooronavi「 usul asociat sind「 omulul acut respirator sever(SARS),viFuSul
Microbiolo9ia ca,Iinlゑ a evOluat din anu1 1600 cand a fOsi lnventat mlcroscopul de catre Hans l
Zaccha洒 as Janssen panが n Jlele noastЮ cand se ttentttca nol agenl lnfec,o事 ,i nOi bOII
Termenul de・ celじ │ゑ "a fostlntrodus in anu1 1665 de Robett Hooke care a publicat↑ n Micro9「 aphia pFimele
observa,ip‖ Vind cele mai rnici forme de vialう .ln anu1 1674 Anton van Leeuwenhoek ullizand prOpnul
mlcroscop cu magnludinea de 200澪 300x a fost pnmul care a obselvat,l a deSCns micrObil
T00na 9eneralei spOntane conform cう rela mic「 oorganlsmele se pot dezvolta din lnatene lnenぅ
Carolus Linnaeus(1735)a dezVOnat metOdele de clas面 care bactettand゛ nOmenclatuぬ dublう i genul
§i special deschizand calea clasllcar‖ taxonomice fゑ cuttt de Otloヽ luller 100 de ani rnai tarziu`
Edward」 enner(1798)a prOdus l teStat p百 mul vaccin,cel↑ mpotnva vanOlei ln anu1 1840 Fnednch
Henle a pus bazele teoriei microbiene privind etiolo9ia bo‖ lor umanei teo「 ie ce a fost conttrmatう in anl1 1870,
1880 de Robert Koch,l Louis Pasteur」 oseph Lister(1860)a intrOdus u‖ │lzarea dezinfectanIlo「 ↑
n chirurgle
pentFu inSt「 umentar,1 00hipament urmand ca Louls Pasteur(1861)sh demOnstreze prezenla ubiCuttaぬ a
microo的 anismelo「 ,i necesitatea dezvolth「 ‖bhnic‖or aseptloo in laborator dar sitn practica medicaltt Pionier
al imunolo91ei,Pasteur a introdus termenul deま vaccin"§ i a realizat vaccinul↑ mpot百 va rablei(1885)、 in dOua
publica,limponante din ani1 1882,11884 Roben Koch anuniう deSCOpenrea agentulul elologlc al tuberculozel,
bol‖ o「 , cunoscute astazi sub denumirea de Posttllatele lui Koch Acesta a demonstrat prin uti‖ zarea tehnicll
cultu‖ i micFOblene pure ch un anumlt microorganism produce o boal益 spec flcう ,i ctt microorganismul oblnut
in cultura puぬ inoculat unui animal sう nう tos este responsabil de repЮ ducerea acelea,l boli,i pOate l reizolat
de la acesta ln 1884 Hans Chnsuan Gram introduce colora,a Cram ujllzatう Oi aStう Zl pentru diferen,erea
bactenllor↑ n Gram po21lVe,I Gram negattve in anul 1895 Bordet descoperう Complementul,│↑ n1903W‖ 9ht
agent antimicroblan impotriva spirochetei resporlsabilう de producerea sifllisulul urmat llnd de Alexander
Enders,Weller,i Robbins si reu,eascゑ cu tlvarea pollovirusunlor pe cultu羹 celulare A fost deschish calea
produciei de Cultun celulare la nivelindustnai necesara prOduclei de Vacdnu輌 virale hllicrobiolo91a modernh a
fost focusatb pe studiul metabo‖ smuluii biochimlei 1 9eneticil moleculare, cu lntroducerea tehnolo91ei de
§
recombinare ADN siteraple1 9enelCe.S‐ a dezvoltat lehnica detectう ‖lin sange a substantelo「 acJve lmpotnva
patogenilor,serolo9ia・ in anu1 1986 a fost aprobat pentFu uZ uman p‖ mじ i vaccin reaHzat p‖ n tehnlca in9inenel
9enetice
Plante si Animale ttrnst Haeckel a obseⅣ at cu autorul microscopului mici creatun verzi care se rniscau dar
care nu puteau l incluse in categona animalelor Bazandu_se pe observarile lui Haeckel,in 1866 o oouう
cate9oae denuml五 Prolsta a iost adゑ u9atう la cele douう dela existente in 9「 upul Prolstelor el a lnclus un
permis observarea celulelor゛ demonStrarea diた renle10r malore intre celulele cu nucleu゛ celeね ri nudeu
pentru cdubtt fatt nudeu゛ termenul de eucanote(eucan01quc)壺 ie ulllZat pentru cdulde cu nudeu ln
anu1 1938 Copeland su9ereaztt ca prOca「 lotele sunt unice sl「 eprezint首 o clasa diferlta de celelalte protlste ln
Procariote La interval scun de tirnp tottn 1969 Whittaker propune adう ugarea la clasincare a unei nol categoril.
Fungi rezultand asfe1 0 dadicare cu 5 regnutt Dね ren,le dntre regnun au fost cde strudurdei metabdlce
in anu1 1970,Can wOese a studlat ARN… ul‖ bozomal(ARNr)pentru diFettte ipun de Organlsme
Jat comparand
ARNr este o parte a百 bozomlor si esle prezentin orice celula El a extras ARNr,II‐ a secve含
secvenle aね dfentdOr Organも me pentru cdulde euca百 o撼 acestea au lost dmibre dar in cazul procanOle10r
existau douう 9rupun diね ‖te in 1978,clasincarea cupttndea trel Domenili Bactena,Archaea,i Eukarya
Aceasta ctaSicare are la baztt diね rentele blochimice,l genelCe(ARNr)ale tuturor celulelor existente pe 91ob
Celulele din Domenille Bacterla I Archaea sunt proca百 ote, cele dln Elomeniul Eukarya sunt eucattote
§
Ciasificarea ltli Woese in trei domen‖ este llna general acceptath astう zi Cercetう rile anterloare au permis
O bactene este cOnsideratO ca apalinand unei specil dach are anumite caractens‖ ci u‖ ‖
zate la
delnirea speciei FeSpeCtive Spec‖ le sunt denunlite prin sistemul binominal dezvoltat de Llnnaeus PFlmLll
nume este numele Cenulul cう rula驚 aparlne miCrOorganismul oi cel de‐ al dolea este un eplet specilo,
ex Staphプ ocOCCus auЮ usi Staphメ oooCCus se refeぬ la bactetti rotunde(cOd)Cu diSpunere↑ n grame2,auttus
se referう la faptul ch bacteria este un palo9en oportunlst cu anumite caraclere Variantele ln lnterlorul unei
specil poartう nulnele de tulpinl oi Sul‐ t desemnate de lltere ce tlrmeazう epitettll,de exemplu E oo1 0157:H7
in cadrul speclei de E coli existう de la tulpinl nepatogene, E co‖ K 12 panう la cele FOarle periculoase E
0157:H7pentru or9anismul uman DIね rentele dintre cele douO specii sunt date de achizl,a unor 9ene de la
lldetodele claslce de idenllcare bactenani pe baza metodelo「 blochlmlce,i Structurale sunt,i astう Zi
valab‖ e.Stud‖ le de biolo9ie mOlecularゑ au permis exanllinarea componentelor celulare ca proteine sau ADN
Mう 百
illea proteinelor poate F examinatう uilizand electroforeza↑n gel,prezenia sau absenla prOtelnelor poate輌
detectath prn teste de lden‖ lcare serolo9icう Detectarea prezentel unul an19en baCtettan se poate face p‖ n
O noua metodう de clasrlcare bacte‖ anう are la bazう oompara,a intre con,nutul in baze C+C,,lut
iind faptul ca in structura ADN― ulul lntri bazele punnlce,i pl‖ midinlce,A,G,T,C、 Deoarece conlnutul rn
G+C diferう pentru rtllte specii bacteriene el este considerat un criteriu de clasificare Nivelul de slnlllarltate in
structura ADN‐ ului bactenatt se face p‖ n secven,erea acidului nucleic,urmatl de compararea acestula cu al
a1lor rnlcroorganisme Compararea dmllanね li secvenlelor Se poate face,lp‖ n tehnica de hib‖ dizare a
acidului nudeic ln acesl oaz ADN‐ ul de la doua specll difettte poate l oomparat lniral ADN‐ ul este extras de
la fiecare specie,dublLll Strat este separat tlnul de cel益 lalt prin procesul denumit denaturare,ulterior cele douう
catene dlfe“ te de la cele speci sunt puse in contact P‖ n procesul denum‖ hibndlzaFel daCh exista secvenle
comune se formeazう le9う tu‖ intre perech‖ e de baze Hibndizarea poate l par,alう dacぅ numal anumite
secvente sunt COmune sau lolalう cand secvenlele Sunt simllare↑ n total‖ ate
in lanl)in oOnd呻 │le in care nu exlsth o canltate suicienttt de ADN,este precedatё de mul‖ p‖ carea bactenan贔
pe un mediu de ctllttlra
Clasificarea bacteriilor
Firmicuies
% G+C scazut
MICR00RGANISMELE
mare de pro9eni responsablll de apan,a inた clel・ Macroparazl,│(Viermi,anrOpode)chiar dacゑ unil dintre el au
dimenduni mic「 osooplce au un stadlu lnfec,os reprOduclv↑ ntr‐ o9azdう pe care progenil o pう ぬsesc pentru a‐ 匈
conlnua ddul de vlaltt in alta gazdう
sunt organttme eucanote unicelulare sau mulicelulare cu structurう slrnp10 ce apar,n Fegnulul projste,helmin,i
au O StFuCtura eucanottt mulucelulaぬ sunt clasttcate ca metazoare゛ apar'n regnului anlmal Difereniele↑ ntre
10
Virusu‖ le nu sunt celule Ⅲnu sunt vレ ibile la microscopul opuc,sunt para洒 」ob119atoHu intracelulan
PnOnii sunt panicule infec,oaSe proteice asociate cu apa画 Ja bol‖ Or degenerajve subacute
adi10naH p‖ nt卜 un proces autocatal‖ lc Proteinele p‖ onice existう ,↑ n mod normal,in absolut toate celulele
nnamiた relori panicipand la structtlra membranelor celulare. Forma normalう a protelnelor prlonice este
cunoscutう in lletttuぬ sub denum「 ea de proteina p‖ onica celularう (P,Pc),dar rOlul sau izlolo91C nu este blne
stab‖ I Forma infecIOastt a aceste structun este notatう PrPsc(presCuttarea sc pro宙 ne de la termenul
onた O a olloo Din mo‖ ve mai mult sau mal puln cunOscute,se pare cう
"SCFaple"ce deine,te boala p‖
moleculele proteice pnOnice normale(P「 PC)au Capacitatea de a se plia oi de a polime‖ za(Sub acrunea
foldazelor celulare)i generand structun anormale,amiloldlce care se acumuleazi maslv in sistemui nervos
central in cursul lnfeclbl p綺 o面 ce se produce conversa und canltal man de prOtdnう PrPc(pttn mOdicう ‖
Celule procariote
Pe baza analizdrii secvenlelor unitatii 165 ARN ribozomal s-au a evidentiat doud grupuri diferite de
umana sunt Eubacterrile. Diferentele intre cele doui grupuri constau in faptul ci Archaebacteriile nu produc
peptidoglican, supravietuiesc in condilii extreme de mediu, sol. ap6, (temperaturd ridicati, concentra{ie
crescuta de sare, pH scdzut) sau in relafie de simbiozd la nivelul tractului digestiv al animalelor gi prezintd un
. comensalism (bacterii saprofite condifionat patogene sau oportuniste, intre aceste bacterii si gazd6
Celula procariot6
t.
flaget
L
'l
:t'
incluzie
membrana nucleoid
citoplasmatici
Celula eucarioti
reticul
endoplasmic
ribozomi
i
membrana
lizozom
citoplasmaticd
,
4
Tab.1.1,Caractenslci cOmparattve ale celulelor proca‖ ote{Eubacte百 り,i eucattote
*Formele
L ceiule lipsite de perete bacterian, care provin din bacterii cu perete pe care l-au pierdut in condifii naturale sau
de laborator sub actiunea unui factor inductor. Sunt caracterizate de un pleomorfism accentuat (datorita existentei in
interior a unor fo(e axiale necunoscute) imbracand forme sferice, aiungiie, fllamentoase, ramificate.
*-S:
coeficient de sedimentare (unitati Svedberg)
Exon- secvenla de deoxinucleotide din regiunea iniragenica a ADN-ului eucariotic care va fi exprimata in ARNm (secven{a
codificaioare)
lntron - secvenla din ADN-ul eucarioteior care nu esie exprimata in molecula de ARN matur; nu sunt purtitori de mesaj
genetic; sunt indepartali in procesul de formare a ARNm prin procesele de imbinare altemativl si amestecare a exonilor
CAPITOLT,IL 2. BACTERIILE
2.1. CLASIFICARE
liber, observarea lor facdndu-se numai la microscop. l\,licroscopul fotonic permite vizualizarea formei,
dimensiunii , grupirii celulelor, mobilititii, capsulei (cAnd existd), incluziilor intracitoplasmatice. Utilizarea
microscopul electronic permite cercetarea fini a structurii celulei bacteriene.
CLASIFICAREA BACTERJANA
Mycobacterium tuberculosis),
. mucoid M (caracterisiicd a tulpinilor cu capsu16);
t-5
d) in funcfie de necesitatile metabolice gi de complexitatea structurali bacteriile sunt:
Myeoplasme;
gazdS:
ce implici forme intra gi extra celulare {necesarul de ATP este asigurat de celula
Chlamydii.
2.2,MORFOLOG:A BACTERIANA
Staphyloooccus aureus diametrul(9)estei O,8‐ l μlr in imp ce pentru Bacillus anthracls lungimea este de 10
μm S1 9rosimea de l‐ 2 μm Cea rnal mica bactene Myooplasma are acelea,l dimensiunl cu ale celui mai mare
輌ruS(POXurusuり in Culu綺 降 mtt vecn dmenttunea bactenanh este mtt rnare de“ t cea normJa pe耐 「u
crestere semnttcattvう a supttfetd de contact intre cdub bactenanぅ ぃmedul e対 enor favOnzand asfel
determmな apanfa fOrmdOr bactenene diぉ ntt Bacte由 le‖ pdte de peЮ te sunt caracte‖ zate de unが oomOttSm
accentuati ex Mycoplasma,formele L
in cuttunle btttrane aspectul bacteパ │lor se modlicゑ attt ca formh cat§ i ca dimendune apう rand
16
Tab.2.2.1. Clasificarea bacteriand in funclie de formd
Bacterii/forma Exemple
rotundl Staphylococcusaureus
Coci (bacterii sferice) ovalard Streptococcus pyogenes
lanceolatd Streptococcus pneumoniae
reniforma Neisseria meninqrtidis
Cocobacili (forme intermediare intre coci gi Haemophilus influenzae
bacili) trruueila (runqtfiie Iuill, qtu$[ile u,JutIr]
Bacili (bacterii cilindrice, bastonage drepte capete drepte Bacillus cereus
sau u$or incurbate) capete rotunjite Bacillus subtilis,
Clostridium tetani (lungime B prm, grosime 0,4-0,6 pm)-
corpul deformat de prezenfa sporului dispus terminal
dAnd aspectul de racheta de tenis
Vibrioni (bacterii cilindrice curbate, formd de Vibrio cholerae (lungime 2 pm. grosime 0,5 pm)
vrrqulS)
Spirili, Spirochete(baCte‖ l in formな de corp rigid genul Spirillum
spiralう )
corp flexibil , subtire genurile:
Treponema (lungime 10-15 pm grdiameirul0,4-0,5 pm,
corpul are 10-15 spire regulate, rlgide, cu capete drepte)
Leptospira (lungime 12pm gi diametrul 0.06prrn, corpul
are 10-12 spire nedeformabile, mici,regulate cu capete
risucrte)
Borellia (lungimea 20-30pm sidiametrul 1pm, corpulare
10-20 spire neregulate si deformabile,eu capetele drepte)
Actinomicete (bacterii care in stadiul de Actinomyces israelii
cultun tinere formeaza filamente lungi, Nocardia asteroides
ramiflcaie asemdndtoare miceliilor)
Dispunere bacteriand
Bacteriile se muliiplica pnn diviziune binara. Dupa diviziune la unele specii are loc separarea
completd a ceiulelor fiice rezultdnd celule izolate sau celulele fiice rdmAn ata$ate unele de altele rezulidnd
grupuri caracteristice. Speciile bacteriene, funclie de familia si genul din care fac pa(e si in funclie de
orientarea in spa{iu a planurilor succesive cje diviziune determina un anumit tip de aranjament {grdmezi,
lanluri, in diplo). Exista tendinla celulelor fiice de a rimAne unite timp de una sau mai multe generalii
T ab "2 "2.2., Fi9.2.2.1 .
17
Tab.2.?.2. Clasificarea bacteriilor in funclie de dispunerea celulelor dup6 diviziune
FYpmnlc
Planuri de diviziune
b4‐ Vibrio‐ forma de virgulら ,b5‐ Fusobacteriu聡 ― fuziform,b6-Bacillus anthracls‐ spor localizat central nu
deformeaza diametrul bacterleii b7 ‐Clostrldium tetani ‐spor terminal deformeaza dlametrul bacterieli ci
Spirochetei cl― Borrella‐ splre relaxate,c2‐ Treponema,c3‐ Leplospl「 a‐ splre stranse
Cl c2
警 ず攀
‐
al a3 a4
●
︽︾
∫
趾
彫 ざ
一
麟占
c3
Lυ
b3 b4 b5 b6 b7
2.3.ULTRASTRUCTURA BACTERIANA
Componentele de suprafatt ale Celulel baclenene medlazO contactul dintre celule§ i medlul
inconlurう tor,i pOt avea fJnc,i bio109iCe plmare care inte由 3ぬ ぐipOpollzahandele LPZ)sau nu(lagelり Cu
patogenlatea Structural口 funC'Onal e漁 sぬ ∞mponente prezente↑ n mod oo「 mtt b once cdub bactenanぅ
PERETELE BACTER:AN
Peretele bacterlan reprezinth o structurO in general ri91dう ,ce reprezlnta 20‐ 40%din 9reutatea uscath
a celulel
pnn legarea alternantゑ in laniun pollzahandice paralele a 2 zaharun aminate,N aceJl glucozamina,i acldul N
acell muramic Fiecare molecula de acid N ace‖ l muramic are subsJtuit un tetrapepid alcitul dln D(dextrO)§ │
peptidlce prin gruparea terminalう 一C00H a unui tetrapeptid§ l gruparea… NH2 termlnalう libera a tetrapeptidului
vedn Rezul餞 o structura bdimendonda sub fOrna unor stratuH care incottOaぬ ↑
ntttaga cdub bacteHa食 う
Groslmea pepjdo91iCanul頓 l este in func,e de numう 「ul de stratun care se dispun concentHc,i Se leagう intre
numttrului acestora
Caracterul Gram pozitiv sau Granl negativ al bacter‖ lor relecth deosebiri structurale ale peretelul dar
depinde ,i de starea flzlolo91Cう Oi de inlegritatea structuralb a celulel. Tehnica Cralll imp‖ cう tratarnentul
de Kぐ u9ol)§ l ultenOri extractta Cu un soivent o℃ anlo(alC001 acetonゑ )Celulele Cram pozl‖ ve,care rezistう
etapei de decolorare§ l reln cOmplexul insolubil(cnstal vlolet‐ lod)Sunt colorate↑n vlolet,iar cele Cram
19
Bacterii Cram negativel au un perete subrre(5‐ 10 nm)Cu un COnunut de 5‐ 10%pepido91ican
tetrapepjdlc ata,atla aCidul N acell muramic(M)00n,ne aminoacizil:L… alanina,(L… ala),D‐ 91utamat(D‐ 91u),
acid Diaminopimelic(DAP)§ :DⅢ alanina(D‐ ala)Punlle pepidice se formeazう intre 9ruparea‐ NH2a DAP de
agmetnc,stratul intern conlne fOsfoliplde prezente de obicei↑ n membranele bactenene:in imp ce stratul
extern este format din llpopol磁 aha“ de LPZ(molecule amipate)Ea conlne po薔 ne(prOteine care formeazё
poH ce favoHzeaztt diftlJa moleculelor hidrofle mal mlci de 700da pnn membranゑ ),proteine structurale,
Lipoproteinele fac le9う tura intre membrana externう 01 peptidoglican la nivelul locur‖ or de adeziune
bacterl‖ e Gram negative spre deoseblre de exotoxlne care sunt eliberale in exterlor de catre bacterille Cram
pozitive cat si Cram negative Ca structura LPZ este alcさ tult dln 3 unitati distinctei lipidul A un fost)lipld
responsa勧 l de efectul to対 c(are o∞ mponentう dizaha減 dica difosね tata cu adJ gra゛ ata,al care ancoreazう
structura↑ n rnembttna externう ),un miez(oore SOlubll in apa)poliZahandic alcぅ tuit din 5 zaharu‖ legate pnn
mai mult de 25 unila,repellVe de 3 panう la 5 zaharun Lipidul A se elibeЮ aza numal dupう plerderea
inte9‖ 機,i celulel,i reprezintう un sumulatOr puternic alぬ spunsuluiimun、 Cand bacte‖ lle suntlizate ca urmare
a unulぬ spuns imun eficient din partea or9anisnlului,apaЮ febra,i exiSti posibi1latea ca atunci cand O
caplltate mare de endoto気 na este diminata ln dttula,e Sb apう ra,oCul septtc cu comが iCa,1に acestuia
La bactenile cram negative actiunea‖ zozimului asupra pepldogiicanulul este posibllう numal dupう
sfence mar9inite de membrana citoplasmalca゛ i restud ale membranel externe)Llzozlmul cllveazう legbtunle
91iCOZldiCe G… M゛ hidrOIヒ eaza murelna celulelor alate in faza stavOnaFゑ de Cre,teЮ Penidlina ttpledica
formarea pun,lor interpepttdice deoarece lnhlbh reac」 a de transpepudare(fOrmarea le9う tun10r pepttdi∞
ce prezintd pe suprafala acizi teichoicr (polimeri de ribitol gi glicerol fosfat legafi fosfodiesteric) sub forma de
orotuziifibrilare, Fi9.2.3.1.3b. La bacteriile Gram pozitive conectarea lanturilor vecine se face prin intermediul
punlilor de glicina, Fig.2.3.1.2. Asamblarea legiturilor interpeptidice este inhibati de beta lactamaze in acelasi
fel ca gi pentru legaturtie inter peptidice la bacteriile Gram negative. Absenta ME la bacteriile Gram pozitive le
face mult mai sensibile la acliunea penicrlinelor. Exista dorid categorii de aeizi ierchoici: acizi lipoteichoici sau
membranari (au un acid gras in skuctura), care traverseaza peptidoglicanul gi sunt legati de glicolipidele din
membi'ana citcplasrnatica, cel6lali capat ramanand liber la suprafata celuier gi acizi ieiclioici parietali. lega!i
Acizii teichoici sunt esenfiali pentru viabilitatea bacterianS, sunt factori de virulent6 deoarece au
proprietali chimiotactic negative faiS de fagocite in timp ce acizii lipoteichoici sunt structuri antigenice de
suprafa{a ce permii diferenlierea serotipurilor, favorizeaza aderenta bacteriand si eliberati in mediu determina
indepartarea peptidoglicanului sub ac{iunea lizozimuiui in mediul izotonic sau hipertonic poate
preveni liza rezultdnd protoplastii la bacteriile Gram pozitive (sfere mirginite de membrana citoplasmatica)"
a) b)
輔轟 燻 譲 庶
う‘
ile Cram pozllVe,lD1 legatu」 le interpeptidice
Fig.2.3,1,2,a)Structura pep‖ dOgliCanuluila bacte‖
formate din puntide 91icina formate intre L“ lis,iD"alal M i acid N acell muramlc,Gi N ace哺 1 91ucoZ aminal
31anina(D‐ ala)
L… alaninal(L‐ ala),D‐ 91utamat(D‐ 91u),L4izina(Llis),D‐
T T 鞭ふ 亀
輔燻 黒 鑢 鳳
a)
antigen sornatic 0
lipid A
↓ proteina
porina transmembranara
d選 謬鴇 ぅ
う4
●‘
b)
鵬
p∬ 風dd
peptidoglican
proteini
membrana transmembranard
citoplasmatici
Componentele peretelui celulaF Sunt deterrnlnan,malon ai vlrulenぃ │la cele douう Ipun de bacte轟 │
Pep‖ do91icanul§ I LPZ acJveazゑ calea alternalvtt a Corllplementulul deternlinand inlamaJa,i inducerea
「ら
spunsululimun LPZ(structun an19enice ce conferう individualitate biochimicら ,i Serolo91ch)CreSC nivelul
virulenゃ l baCtenene pttn chimlotaclsmul negaiv falё de fa9odte Addul teichoic゛ po‖ Zahandul spedic o
funCIOneazё ca adezine la bacte‖ ile Cram poziive,i FeSpeC‖ v Gram nega‖ ve Vatta」 l in structura
Peretele celular asi9u「 さfortta§ l integntatea bactenanら ,prOtec,a fatt de liZa osmoucぅ in mediHe
hipotonice si↑ mpOtnVa fagocilozel,are rol in diviziunea bactenana(panlcipう la formarea septului transvers)La
acest nivel sunt prezente structu‖ le an19enice de suprafath:pollZahande de suprafalう l aclzl leicholci la
Membrana externa este O banerさ selec,vう ce permtte difuzla‖ mitath a substanlelor hidЮ fobe,i eSte
impermeabilう pentru macromolecule Ea conlne prOtelne cu ttncll de transpon molecular Adezinele prezente
in membratta exteFnh aSigura atacul sau aderenta la suprafele speCttCe sau leSutun
Spalul penplasmlc conlne pe langう un volum de apa semnifcatv,proteine degrada‖ ve(DN… aza,
osmoice celulare.La nlvelul spaJului pe‖ plasma‖ c are loc de9Fadarea enzimalcう a nutnen,10r,i transpo威 ul
Singer§ I Nicolson de organizare a membranelo「 blolo9ice este cel al mozaiculu1 luid,↑ n care membranele
sunt structutt bidimensionale de proteine globulare§ │‖ pldei cu dist‖ bule Onentatぅ ,stab‖ izate de moleculele
Vizualizath la microscopul electЮ nlo membrana ciloplasmaica ar0 0 structuぬ tnplu stra1lcatう
Fosfolipidele formeazう un strat dublu(cu COmponenЮ le hidrofobe o‖ entate spre mte‖ Or,iar capetele hidrolle
fHamentoase actine‐ like ce as19urゑ forma bacterianう dar parllclpa OI la fOFmarea septului de
diviziune Transpeidaza, enzimtt ce catallzeazう formarea le9う tunlor cOvalente pep‖ dice intre laniu‖ le
dizahandice paralele din structura pepldoglicanulul este localizatう pe suprafala inteFnう a membrane
citoplasmatice Actlvitalea acestel enzime este inhlbattt de penic‖ ina care se leagう de aceasta, asfel incat
enガ ma mtt este numita§ i prottina care leaga penidlina(PBP Penidllln Bindng Protein)
schimbunle intre celula bacte‖ anう si mediul extern)p‖ n druziune pasiva cat,ip‖ n procese acive spec面 ce,
Difuzia paslvh este reallzatう lent, nespecifici farう oonsum de energie,panゑ la echllib「 ul osmotlc al
flecarei mOlecule Acest up de d11し zie este caracterisjc pentru molecule hidrofobe micl,apa:molecule lineare
i cele solubile in mediul llpldic al membranel,molecule mai mici decat 911cerolul Moleculele nlai man decat
§
glicerolul necesltO sisteme speclfce de transport(prOteine integrate ale membranei plasmalce,care au
unde le elibereazう ).Exista trel modalitう ,de transport pttn intermedlul moleculelor purtう lor difuzia fadlltathi
in
transloca」 a de grup§ i transpottul actv.Spre deoseblre de difuzia pasiva in cazul dluziei facillate inteⅣ
moleculele membranare care u,ureaZう difuzia in cazul translocalel de 9rup mOlecula de transportat este
modttcati chirnic Pnn transpo晨 ul aclv substantele pOt i COncentrate de 1000 de on↑ n intenorul celulel,fatt de
mediui externi procesul se face impotttva gradientului de concentrale,COnsunlh energle stocatう in ATP
Membrana dtottasmaた うpermite lelrea unOr anbni,darreune cal。 聞i esen」 測i care au accesin g
din celulう .Sistemele de transporl pentru lonil cu importantう nutttiVう sunt sisteme de inlux,lar cele pentru
Membrana citoplasmatc cont‖ bule la forlnarea septului de divizlunel este sediul aclvita,i enzlmatce
MEZ020MII
Sunt stttCtu‖ fOrmate p鵬 n invaginarea membranel cltoplasmauce de care rう lnan lega, Mal
dezvolta,la bacte‖ ile Gram po21ve,l prezenl ocaZ10nalla bacte‖ │le Crarll negalve,suntin contact dヤ ect cu
materlalui nuclear favorizand distrlbtlirea in mod egal a nnaterialului nuclear intre cele doua celulo lice si au rol
CiTOPLASMA
Citoplasma celulelor bactenene este tln slslem ooloidal format din 30)も apal dlferite tipuri de
molecule,iioni
o macromolecule proteine(enZime),ADN,ARNm,ARNt
sau vitaminei
2,Cu・ 2,MO■ 2,NI・ 2,znム 2,S04 ,P04
・ loni,l oofaCtOni K・ ,NH4‐ ,Ca 2.Fe‐ IM9・ 2,Mn‐ ,Co・
Vizualizatゑ la mlc「 oscOpul electronic cltoplasma preanth 2 zone:o matnce amO百 a care 00o,ne
RIBOZOM:│
Ribozomll princlpalele elemente ale citoplasmel, sunt organlte rlbonucleoproteice, care la
microscopul electronic au formi sfe‖ cう :cu diametrul de aproximalv 20 nm,10mう ‖me care deplnde de
este mlc in celulele alate↑ n repausi dar cre§ teわ arte nnult in celulele lzlologic acuve(in medie 20000
∞ ncen4重 べidね niけ de u9・ 2,Ore,terea oon∞ n嫌 摯藝 蜂曇ぬr favonzeaztt asodetta)ぬ r scttdetta conceni総 Jd
lor produce disoderea Din punct de vedere biochlmic百 bozomii conln 65‐ 70%ARN‖ bozomal(ARN→ §130‐
25
unitう 」 面bozOmale)Blodnteza proteicう lmp‖ Cう 1瀬
,al transcnerea infOrma,e19eneJce pe ARNm,care va
transpona aceastё informaJe de la genom la n市 eml nbOzomlor,sub forma unei copil oOmplementare Sinteza
ARNm este catalizatう de transcnptaza(ARN polimeraza ADN‐ dependenth).TFaduCerea mesalului geneic are
al proteinelor
loc la nivelul ribozomlor de cゑ tre ARNt care transporltt aminoacizll la locul de sintezら
P。 linbOzOm‖ sintellzeazゑ ooncomitent mai multe molecule proteice pe aceea§ i nloleculう de ARNm.
lNCLUZllLE
la sttr,lul pe活 oadel de cre,tere
lncluziile suntお rma,uni Structurale lnerte ce apar in citoplasmゑ
geJce pot
bacteriene SeⅣ esc ca ar‖ de stocare pentru diferite substratuFl nutritive Carbonul sl rezervele ene「
vedere structural§ ifunC'Onal COrespunde cromozomului si moleculele de ADN extracromozom a(p asm dele)
membrana c1loplasmaicう p‖ nl,2 mezozomi in re91unea masei nucleare nu exista ttbozoml Matenalul
‐
ul cromozomial este o「 gan zat int「 o
nuclear con,ne 60%ADN,30%ARN oou sintelzat,10%proteine.ADNⅢ
lde 2.5 nm
singuぬ molecul恐 dublu helicoldaほ ,clcular inchisう ,avand lungimea de 1000-1400 nm,i dlamet間
CI「 culantatea este o condtte a existenlei Sale Sub aceastう formう l molecula de ADN este reztttenta la
pentru a menlne confOFma,a ADN‐ ului,IADN‐ ul nu formeazう nucloozomi Replicarea ADN… ului se face pnntr_
un mecanism semloonseⅣ aiv(leCare moleculう nou formata oon,ne un lant pOlinuclooJd c din molecula
lani polinude01dお nou format)Nudeoldul deune lnforma,a genetlCう necesarう procese or
parentalう ゛un
metabolice ce as19uぬ cre,terea,i mu1lplicaFea baCtenan首 ,crOmoZOmul conlne infOrmara geneich necesarう
gena,o secvenia llnlara de deoXI‖ bonucleo‖ de transcttse int卜 o singura molecul壺 de ARN
PLASMIDELE
fa!6 de cromozomul bacterian, ce contin informalie geneticd neesenliald viabilitilii bacteriane. Prezente atfit la
bacteriile Gram pozitive cat gi la cele Gram negative, ele se aflS numai in stare autonoml in celula bacteriand"
exoioxine, sintezei de bactenocine (toxine sau enzime produse de anumite bacterii ce sunt letale penhu alte
bacterii).
TRANSPOZONI
Transpozonii sunt fragmente de ADN care migreazi u$or de la un loc la altul, in interiorul sau intre
ADN-ul bacterian, plasmidian sau cel bacteriofagic. Nu sunt capabili de replicare independenta 9r se replici ca
parte integrantd a recipientului ADN. in structura ADN*ului recipient pot fi localizafi mai mulli transpozoni.
Genele conlinute de transpozoni pot fi responsabile de aparilia rezisten{ei la antibiotice, de secretia de enzime
sau toxine. Transpozonii pot produce mutatii esenliale in structura genei in care se insera sau pot altera
expresia genelor vecine.
GLICOCALIXUL
mucos (slime laye$. Multe bacterii contin in afara peretelui bacterian sau membranei externe un strat
poiizaharidic cu o compozitie varrati ce poartd denumirea de capsuld (exceptie in cazul B.anihracis la care
capsuia este formaia dintr-un polimer de acid D glutamic). Prezenla capsulei conferd o consistenld gelatinoasd
Capsula gi stratul mucos nu sunt necesare pentru cregterea bacteriani, dar sunt foarte importante
pentru supravieluirea in organismul gazdi, sunt factori de virulenli deoarece impiedici fagocitarea bacteriei,
27
favorizand invazivitatea acesteia. Ea reprezinti o barieri protectoare fafi de bacteriofagi qi moiecule toxice
hidrofobe, are specificitate antigenicd (ex. antigen K pentru S. pneumoniae existd 90 serotipuri antigenice
capsulare). Capsula favorizeaza aderen{a bacteriand (adezine) ia suprafe}ele tisulare ale gazdei 9i favorizezi
colorrizarea suprafefelor inerte (ex. Streptococcus mutans implicat in aparilia pl6cii dentare).
ldentificarea specificl a unei bacterii cu capsuld se poate face prin reaclia de umflare a capsulei ' in
aceasta reactie se folosesc seruri impotriva antigenului polizaharidic capsular qi in prezen{a anticorpilor
omologi capsula se umfli. Coloraliile uzuale folosite pentru evidenfierea capsulei sunt cele cu albastru de
metilen, tuq de China, cu vizualizarea acesteia ca unui halou necolorat in iurui bacteriei, Fig.2'3.2.1. Existd
Fig.2.3.2.1" Fenomenul de umflare a capsulei repreztnti evidenlierea capsulei sub forma unui halou
necolorat cu drmensiuni mai mari decAt dimensiunile obignuite ale capsulei in jilrul bacteriei apdrut in urma
re
うん
FLACELl!
Flage‖ sunt proteine structurale nlamentoase,semi羹 gide atasate de supra惚 枠 bactenana ca碑
aslgurtt motilitatea acestora Dlametru1 lagel‖ or este de aproximativ 20 nm Filamentu1 lagelar este rotit de un
aparat aflat ↑
n lnteriorul membranei plasmatice ce permlte ↑
notul bacterlel in medlu1 luld Flageitll este
energlzat de potenlalul Chemlosmolc stabil識 pe mernbrana bacteHantt Elementele structurale ale logelului
Corpusculul bazalも rrFleaZtt o structuぬ 「otalvtt alctttuitう dll cel puln 9 p10teine diた nte ce alctttuiesc
…
discul P este locallzat in spa,ul penplasmici
Filamentul extern este alchiuit dintr‐ o protelnう nunη ltな flage‖ na cu greutatea moleculara de
40 kDa、 掲
4oleculele de flagellnう se sintetizeazう sub formう de monomeri ↑
n celulう , apoi strう bat axul
oorpusculじ lui bazal §i se dispun dupう o slrnetric helicall pentru a lorma fllamentul extern CFeSterea
FUNCTilLE FLAGELILOR
Ca rdspuns la mediul extern, bacteriile pot migra spre, sau de la locul respectiv, dup5 cum
substantele eliberate pot fi nutritive sau distrug6toare pentru acesie bacterii (chemotaxie) sau in funcfie de
sursa de 0z (aerotaxie). Pentru anumiti patogeni motilitatea este determinantd a virulenlei (ex. Vibrio cholerae,
vibrionii inoata aparent in mucoasa intestinala pentru a evita eliminarea prin migcarile peristaltice intestinale, in
cazul Escherichia coli uropatogen ffagelir favorizeazd miscarea dinspre ureki spre vezica urinard). Flagelii
sunt structuri antigenice (antigenul H) gi sunt vulnerabili la actiunea moleculelor de anticorpi care pot aglutina
29
Fig.2.3.2.2.Structura flagelului bacterian
↑
↑↑
disc L
disc P
一
disc S
disc M
b) Cl d)
f 諜 、
FIMBRll(PILI)
Pi‖ i sunt micr011amente protelnice extinse prin§ l dincolo de peretele bacterlan,prezente mal ales la
bacten‖ e Gram negatVe in generalぬ teVa sute de lmbni Sunt dispuse uniform pe mtreaga suprafatう
Pill sunt mai SCurII mal H9iZl'i rnai mici in
bactenanゑ si pOt tt vizua‖ zate numal la mlcroscopul electronic′
este alcう tult dintr‐ un singur fel de mOnomer
diamettt decat lagelll,fう rふ rol↑ n niobilitate. Fiecare tip de p‖
proteic lp‖ na)care se autOasamtteaza sub forma unor structun tubulare,dispuse hdicOd課
`UneOn ⅢIli Sufeぬ
al
se prOduce in vananle blochlmice difettte)」
たnorrenul vanaloi an19enice/d‖ i an19enic(aceia゛ structuぬ
vanaje de faza(o structuぬ dath este sau nu este produsゑ )Cd mJ frettent vanaua an19enlca este rezulatul
pOate avea ca efect rezも tenta bactenanら la
acumull‖ i mutall1lor punctlfo「 me in gena COdlflCatoare゛
fagocitoZう
in funcle de rOlu1lor pot i clasttcate ca adezlne Sau leclne(se leaga specttc la receptonl celulan al
in coniugarea bactenanb)
30
Pilil F sau sexuali rrlediaza transferut ADN p‖ n coniugare intre bacte薔 i↑ nFudile,I sunt COdfica,
suntimpllcaJ in aderenta bacte咸 │lor ia supttfete.Ei sunt determinan」 malo百 al virulenlei baCte‖ ene deoarece
structurl antigenice asξ sl incat anticorp‖ secretori lgA vor bloca oolonizarea bacterian慈 :in timp ce anlco「 pll
SPOR‖ BACTERIENl(ENDOSPORII)
spOni bactettenl reprezintう forma de rezlsteniう §i cOnseⅣ are a unor specll bacte‖ ene(BaCillus,
Clostndium),ei pOt rezista pe sol zecl de aniin cond弾 lde uscう clune゛ lipSう a luminH solare
P‖ n comparare cu celulele bactenene alate in stare vegetalv首 ,sponi sunt structun lnac‖ ve,
UV.Tab 23 2 2
Sporul este o structurう deshldratatう ,↑ nconiurath de un lnve‖ §protector caЮ con,ne O cOple
completう a cromozomului,Hbozoml:o ooncentra,e minimぅ de prote ne esen,aleい 。 COnCentra,e creSCutう de
calciu dipicolinat
Sporii se formeazё in cursul procesului de sporulare ca structuri endocelulare ce sullt e‖ berate prin
Eviden゛ erea Sporului se poate face cu alutOrul coloralei Cram ,i verde malachit ln
microscopia fOtOnicl este folositi colora,a Cray,i CO10rara Moeller ln microscopla cu contrast de
PROCESUL DE SPORULARE
‐stadiu1 0‐ procesul incepe la sttrsltul fazel de cFe,tere exponen,ala cand in celula vegeta,vi are loc
Юpllcarea cromozomului:
‐ stadiu1 1‐ cei 2 cro銅 ozomise a,eaZう intr‐ o singura structuぬ croma‖ niana llamentoasう axlalな :
31
‐stadiu1 2‐ apan,a septumi spO餡 l in apro口 erea unui pd tt celu博 │,p“ n invagittarea membrane
septtllli spottt sunt se:盪 ra,o Parte din dloplas興 な 事 un crOmoZOrn,seね Fmeazふ 2 oompattimente,
‐ stadiu1 4‐ se formeazう peretele celular p‖ mordial al presporulul,i COnexul:la s伯 「ltul acestui stadiu
‐ stadlu1 6‐ maturizarea spo「 ului prln deshldratare,acumulare de acld diplcollnic,i Ca+2 i mOd1lcう rl
jve intrう ↑
n
vegetauvゑ )pttn dlstrugerea stratului protector de catre enzime spec1lCe Apa,i subStanlele nut‖
distrugerea acestula nind posib‖ ふnurnal pnn au10clavare cu vapon sub presiune(30 minule la 121° C)
exosporium
perete sporal
つ´
Tab.2.3.2.2.Caracteristicl,e comparative ale LInei Celule afiatl↑ n staFe Vegetativう ,ia
endosporilor
peptidoglican
chimice, radia[ii
coloran!i