Electroforeza proteinelor Proteinele sunt componente esentiale ale materiei vii.

Electoforeza este o metoda eficace pentru studiul proteinelor serice. Ef consta in crearea unui camp elecric intr-o solutie ce contine particule coloidale incarcate electirc ce detrmina migrarea acestora spre anod sua catod in functie de sarcina lor elecrica. Migrarea are loc in functie de proprietatile fizico chimice a proteinelor plasmatice Caracter amfoter- comportamentul ca acizi sau baze in functie de pH-ul mediului. Ef proteinelor pe hartie de filtru Principiul metodei : Sub influenta curentului electric aplicat la capetele unei benzi inbibate in ser , particulele de proteine plasmatice se deplaseaza spre anod cu viteze de migrare diferite specifice fiecarei fractiuni proteice , separandu-se. Materiale necesare - cuva pt EF - hartie de filtru - solutie tampon pH 8.6 - solutie coloranta - solutie eluanta - fotocolorimetru cu cuve - bai de colorare si de spalare Hartia de filtru Wathmann - porii au aceleasi dimensiuni - grosime uniforma pe toata suprafata - curata , fara cute - sa nu absoarba proteine Solutia tampon- veronal acid si veronal sodic Solutia coloranta- verde lumina Solutia de spalare- solutie de acid acetic - indeparteaza colorantul de pe hartia de filtru raman colorate numai fractiunile proteice Solutia eluanta- pentur dizolvarea colorantului fixat pe proteine Tehnica de lucru -se aseaza cuva pe o masa orizontala - se toarna in fiecare jgheab solutia tampon - se intind foarte bine benzile pe suport - se pune capacul -se conecteaza sursa - se lasa benzile 30 minute - se aplica serul de cercetat - se asigura etansietatea cuvei - timpul de migrare poate fi scurt sau lung - la sfarsitul migrari ise scoate benzile se lasa 2 ore pe masa apoi se introduc in etuva la 110 grade timp de jumatate de ora pentru fixarea fractiunilor proteice -evaluarea cantitativa se face prin elutie- se decupeaza benzile cu foarfeca , se taie marunt, se introduc in 5 eprubete se agita si se citeste la spectrofotometru. Se foloseste ser proaspat nehemolizat NU plasma deoarece fibrinogenul migreaza cu globulinele suprapunandu-se dand imposibilitate de citire. Adsorbtie- fixarea moleculelor de lichid pe suprafataunui corp solid Absorbtie corpul solid incorporeaza prin difuziune din afara orice substanta 1.Zona albuminei- scaderea hipoalbuminemie se gaseste in cazul deficitului de sinteza hepatica, in insuficientele hepatice - cresc hiperalbuminemii- f rar nu se produc in general 2.Zona alfa 1 globulinelor- Alfa1 antitripsina creste in reactii inflamatorii, alfa1fetoproteina este la gravide, dar daca apare in alte cazuri este patologica si este marker tumaral 3. zona alfa2 globulinelor- cresc in infectii acute, reumatism articular acut si scad in pancreatite acute severe, anemie hemolitica

4. betaglobulinele cresc in anemia feripriva, ciroza biliara, scad in boli autoimune, afectiuni hepatice, infectii acute si cronice 5. gama globulinelescad in agamaglobulinemii