INTRODUCERE Originea citricelor este din Orient, dintr-un areal cuprins ntre China de Sud, Indochina i Penisula Malacca

i partea oriental a peninsulei indiene. Cele mai vechi specii de citrice, atestate documentar, sunt grapefruitul i kumquatul, scrierile datnd din anii 2205-2197 .Hr. n China. Chitru (Citrus medica) a ajuns prima n zona mediteranean, unde israelienii o foloseau n scop religios. Romanii i grecii cultivau chitrul, lmiul i limetta. Portocalul amar a fost introdus n zona mediteranean de ctre arabi, iar cel dulce, de genovezi sau de portughezi. Ultima specie care a ajuns n bazinul mediteranean a fost mandarinul, la nceputul secolului al XIX-lea. Arbuti fructiferi originari din sud - estul Europei i Extremul Orient asiatic, citricele s-au rspndit peste tot n lume unde au gsit condiii favorabile. Acestea sunt plante cu frunze persistente, ce vegeteaz continuu, pe aceeiai plant putnd s existe att flori ct i fructe n diferite stadii de dezvoltare. Cu toate c nfloresc tot timpul anului, nflorirea cea mai important are loc primavara. Citricele sunt foarte rspndite, iar producia este n continu cretere n ultimii ani, suprafaa cultivat pe plan mondial, ajunge la peste 7 milioane hectare. Producia mondial de fructe citrice este n continu cretere, datorit dezvoltrii cererii pentru acest gen de fructe i a perfecionrii tehnicii de industrializare a sucurilor naturale i a extraciei uleiurilor eterice. Pe plan mondial, producia anual de fructe citrice se estimeaz la circa 40 milioane tone - ponderea important fiind deinut de portocale i mandarine. Principalele ri productoare sunt S.U.A. (cu peste 50% din producia mondial), Spania, Italia, Israel, Grecia, Cipru, Turcia. ara noastr se aprovizioneaz cu fructele citricelor din bazinul mediteranean (Grecia, Liban, Cipru, Turcia, Italia). Fructele citricelor se recolteaz la maturitate deplin sau n prg. Pulpa acestor fructe este mprit n felii cu membrane exterioare i este compus din papile suculente, cu un coninut bogat n zaharuri, uleiuri eterice, acizi organici, vitamine i sruri minerale. Exist o mare varietate de portocali cu mari diferene, fundamentale pentru calitatea i gustul fructului, care variaz de la dulce la acru.

Portocalul are origine n India, Pakistan, Vietnam, Sud- Estul Chinei i a fost adus de arabi n Occident. Se cultiv n S.U.A. (Florida i California), n cea mai mare parte din rile mediteraneene, n ri precum Brazilia, Costa Rica, Belize, Cuba, Pakistan, China, India, Iran, Egipt, Turcia i Africa de Sud (Tabel 1). Crete n general n regiuni umede. ngheul prelungit sub 0C, afecteaz fructul i calitatea acestuia. Tabel nr. 1. Potrivit FAOSTAT, principalele ri productoare de portocale (tone), n 2005, au fost: ri Brazilia Statele Unite ale Americii Mexic India Italia China Spania Iran Egipt Indonezia Producie de portocale (tone) 17.804.600 8.266.270 3.969.810 3.100.000 2.533.535 2.412.000 2.149.900 1.900.000 1.789.000 1.311.703

I. CLASIFICAREA CITRICELOR

Citricele fac parte din familia Rutaceae, subfamilia Aurantioideae, grupul Citreae, care cuprinde cel puin 13 genuri din care trei sunt mai importante din punct de vedere productiv i ornamental:

Poncirus: cuprinde plante cu frunze crtoare, originare din China, de talie joas, cu frunze trifoliate, flori albe i mici, necomestibile. Fortunella: cuprinde plante arbustive originare din China meridional, plantele nu depesc 3-4 m nlime, au frunze persistente, cu peiol aripat i flori albe. Fructul este o bac, de culoare portocalie, comestibil chiar i ntreg. Sunt specii rezistente chiar i la frig, mai ales altoite.

Citrus: cuprinde specii originare din China, arhipeleagul Malaeziei i India. Plantele sunt de talie mic sau mare cu frunze ntregi, persistente. Ramurile prezint spini mai mari sau mai mici. Rdcinile nu prezint periori absorbani iar trunchiul este drept i cu scoar verzuie.

SPECII DE CITRICE Lmiul (Citrus Limon) este originar din India, astzi se cultiv n zonele calde din America de Nord, America de Sud, Europa, Asia, Africa. Lmiul este un hibrid natural ntre chitru i limett. nflorirea principal se realizeaz n principal primavra, iar fructele obinute se maturizeaz iarna. Culoarea fructelor este n general galben, dar sunt i soiuri care pot fi dungate cu alb sau cu verde sau chiar cu tent portocalie. La maturitate, fructele se coloreaz caracteristic soiului dar rmn bine prinse de pom. Dac nu se recolteaz, fructele nverzesc din nou, pot chiar s mai creasc i s nu se desprind de pom, 2 ani. Portocalul (Citrus Senensis) este un arbore fructifer originar din Extremul Orient, aceast specie a fost introdus n Europa de ctre arabi. Este cea mai rspndit dintre citrice pe plan mondial, avnd arealul de cultur de la Ecuator pn la paralelele de 40 latitudine nordic i sudic. Este un arbore de mrime mijlocie, dar n condiii optime poate ajunge la 13 m nlime, are coroan mare, rotund sau piramidal, cu frunze ovale de 7-10 cm cu margine dreapt i ramuri care uneori au spini mari de 10 cm. Florile sunt de mrime mijlocie, de culoare alb i sunt hemafrodite, parfumate. Fructul are culoare portocalie sau portocalie roiatic. Majoritatea portocalelor sunt consumate ca fructe proaspete, suc

proaspt stors, suc pasteurizat i suc reconstituit din concentrat, cel puin 85% din portocalele produse de productori, fiind procesate n suc. Mandarinul (Citrus Reticula) este originar din China i a fost adus n Europa de portughezi. Crete sub form de arbore mic, cu frunze mici i flori albe. Fructele sunt mici sau mijlocii, cu coaj portocalie, subire. Limetta (Citrus Aurantifolia) este o specie de origine asiatic, nu suport temperaturi sub 12-13C. Pomul este de talie mic-mijlocie, ajungnd la nlimea de 3-5 m i prezint spini pe ramuri. Frunzele sunt ovale, de culoare verde deschis. Florile sunt grupate n inflorescene, cu flori albe, mici i parfumate. Fructele sunt uor ovale, de culoare verzuie sau verde-glbui, mai rar galben-verzui. Coaja este subire, iar pulpa are gust acid. Limetta este folosit pentru supraaltoirea citricelor de baz. Chitrul (Citrus medica) este o specie veche de citrice, originar din India i Birmania care a ajuns n Europa n sec. al III .Hr. Crete arbustiv sau ca pom de talie mijlocie, formeaz ramuri spinoase i coroan neregulat i este mai pretenios la temperatur dect lmiul. Frunzele au culoarea roiatic la apariie i apoi devin verde nchis. Florile sunt mari i au n faza de boboc culoarea roie-violacee, iar apoi devin de culoare alb. Fructele sunt mari cu coaj groas i numeroase semine. Uleiurile eseniale de chitru se folosesc pentru prepararea unui lichior foarte apreciat n Corsica, numit cedratine. Se cunosc dou grupe de soiuri, n funcie de gust: acid i dulce. Grapefruitul (Citrus Paradisi) este originar din insulele Barbados, avnd astzi o arie mare de rspndire. Este o specie viguroas, ce poate ajunge la 12m nlime. Florile sunt mari, albe i foarte parfumate. Primele fructe se formeaz dup 4-7 ani de la plantarea pomului i se poate ajunge pn la 700 fructe pe an. Fructul are un gust dulce-acrioramrui. Chlementinul, este o ncruciare dintre mandarine i portocalele amare. pomul este de talie mic cu frunze lanceolate i de culoare verde intens. Florile sunt solitare sau prinse n inflorescente i sunt foarte parfumate. Clementinele se maturizeaz naintea mandarinelor i sunt mai rezistente la temperaturi sczute.

II. COMPOZIIA CHIMIC A CITRICELOR

Sub denumirea de citrice sunt cunoscute mai multe plante pomicole subtropicale cu frunze persistente, cum sunt: lmiul, portocalul, mandarinul, grepfruitul i o serie de hibrizi ntre aceste specii. Din punct de vedere botanic, aceste fructe sunt considerate bace cu structur hesperoid. Fructele acestor plante sunt foarte bogate n: vitamina A, B, C, D, E, acizi organici, sruri de calciu. Citricele sunt principala surs de nutrieni importani: vitamina C, acidul folic, fibre dietetice i alte componente bioactive, cum ar fi carotenoizii i flavonoidele, responsabile pentru prevenirea cancerului i a bolilor degenerative. Tabel nr. 2. Valoarea nutritiv a citricelor
Citrice (100g) Grapefruit galben (Citrus Paradisi) Grapefruit rou Mandarina (Citrus Reticulata) Lmia fr coaj (Citrus Limon) Lmia verde (Citrus Aurantifolia) Portocala (Citrus Sinensis) 86.75 47 0.94 53.2 40 14 10 2.9:1 88.26 30 0.70 29.1 33 18 6 1.8:1 88.98 29 1.10 53.0 26 16 8 1.6:1 Ap (%) 90.48 91.38 87.60 Energie (Kcal) 33 30 44 Proteine (g) 0.69 0.55 0.63 Vitamina C (mg) 33.3 38.1 30.8 Ca (mg) 12 11 14 P (mg) 8 9 10 Mg (mg) 9 8 12 Proporia Ca:P 1.5:1 1.2:1 1.4:1

Portocala este una din cele mai abundente surse de vitamina C, totui, conine i cantiti considerabile de zahr, carotenoide, flavonoide, uleiuri eseniale i unele minerale. Substanele active din portocal sunt: hesperidina, pectina; acizii (ascorbic, citric); alcaloizii (betadina); zaharurile (fructoz, galactoz); vitaminele B1, B2, B6 i C i minerale din fruct (fier, calciu, magneziu, fosfor, potasiu, sodiu, zinc). Grepfruitul este o surs excelent de vitamina C, fibre, vitamina A, potasiu, folai i vitamina B5, conine i substane fitochimice: limonoide i licopen.

Dintre substanele fitochimice, flavonoidele sunt, larg, cuprinse n citrice. Cele mai abundente substane flavonoide din citrice sunt flavonele (hesperidina, naringina, neohesperidina). n conformitate cu structurile lor moleculare, flavonoidele sunt mprite n ase clase: flavone, flavanone, flavonoli, izoflavone, antocianidine i flavanoli (catechine) (Fig. 1).

Flavonoli

Flavone

Flavanone

Catechine

Antocianidine

Izoflavone

Fig. 1. Structurile moleculare ale flavonoidelor. Structura de baz este format din inelele sudate A i C, cu inelul fenil (B) ataat, de inelul C, prin prima i a doua poziie;

Flavanonele din citrice sunt prezente sub form de glicozide sau aglicone. Cele mai importante flavanone sub form aglicon sunt naringina i hesperidina. Dintre formele glicozidice, dou tipuri sunt clasificate: neohesperidozidele i rutinozidele. Neohesperidozidele (flavanone, naringina, neohesperidina i neoeriocitrina) sunt formate dintr-o flavanon cu neohesperidoza (ramnozil--1,2 glucoz) i au un gust amar, n timp

ce rutinozidele (flavanone, hesperidina, narirutina i didimina) sunt formate dintr-o flavanon i un rest de dizaharid (de exemplu: rutinoza (ramnozil--1,6 glucoz) i sunt fr gust. Flavanonele sunt prezente, de obicei, sub form diglicozidic, care confer gustul tipic al fructelelor citricelor. 7-O-glicozilflavanonele sunt cele mai abundente flavonoide din toate fructele citricelor (de exemplu, coaja de lmie este bogat n flavonoide glicozidice). Dintre flavanonele neohesperidozide, sunt prezente naringina, neohesperidina i neoeriocitrina, n bergamot, grapefruit i sucuri de portocale amare. Dintre flavanonele rutinozide, sunt prezente hesperidina, narirutina i didimina, n bergamot, portocal, mandarine i sucuri de lmie. Flavonoizii sunt un grup de pigmeni coninuti n plante, responsabili pentru coloraia florilor i fructelor. Seminele i coaja citricelor sunt foarte bogate n compui fenolici, precum acizii fenolici i flavonoidele. Seminele de lmie conin, n principal eriocitrin i hesperidin, n timp ce coaja este bogat n neoeriocitrin, naringin i neohesperidin. Seminele de bergamot sunt cea mai important surs de flavanone glicozilate, naringina i neohesperidina; lmia este bogat n eriocitrin i hesperidin. Antocianinele constituie compui de colorare ai florilor i fructelor, dar uneori, i ai frunzelor, bobocilor i rdcinilor. Antocianinele se gsesc n epicarp, dar coloreaz i mezocarpul portocalei. Coninutul n antocianine este dependent de nivelul de maturare al fructelor. Uleiurile volatile numite i uleiuri eterice sau uleiuri eseniale sunt amestecuri complexe de hidrocarburi alifatice i aromatice, aldehide i alcooli, acizi, esteri i ali constitueni, predominnd ns compuii din clasa terpenoidelor. Uleiurile volatile sunt produi vegetali secundari, aflai n diferite organe ale plantelor. Se acumuleaz n flori, frunze i fructe, mai puin n rdcini, scoar i lemn i pot fi uor extrase prin antrenare cu vapori de ap. Cei mai numeroi i importani compui ai uleiurilor eterice sunt terpenii i derivaii lor, cum ar fi: linalolul n florile de portocal, citralul n coaja de portocale. Compoziia uleiurilor eseniale, proporia n care diferii terpeni se gsesc, depinde de natura speciei, de faza de dezvoltare a plantei respective, de organele plantelor i de factorii pedoclimatici i agrotehnici.

III. ROLUL FIZIOLOGIC AL CITRICELOR Citricele cu fructe comestibile sunt considerate alimente de baz pentru persoanele care sunt predispuse s fac sau au forme incipiente de cancer al tractului digestiv, cancer de sn, de ovar, de uter sau prostat. Din punct de vedere caloric, citricele au un numr sczut de kilocalorii, cu un maxim de 50 kcal/100g fruct. De aceea, ele sunt larg folosite n dietele de slbit. n afara aportului caloric sczut, ele stimuleaz i saietatea prin coninutul lor crescut n fibre (pectina). Efectele benefice ale fructelor citricelor dietetice pot fi atribuite, n special, nu numai vitaminei C, acidului folic, fibrelor alimentare i carotenoizilor, dar, si activitii antioxidante a flavonoidelor acestora. Studiile efectuate n vitro i n vivo au artat c flavonoidele din citrice au un rol important n prevenirea bolilor degenerative i infecioase. Flavonoidele sunt un grup de compui polifenolici, larg distribuit, numite substane nutraceutice'', cu proprieti anticancerigene, antiaterogene, antimicrobiene i antiinflamatoare. Efectele protectoare ale flavonoizilor din citrice consta n reducerea riscului bolilor cardiovasculare prin trei mecanisme majore: ameliorarea vasodilataiei coronariene, reducerea capacitii de coagulare a trombocitelor si prevenirea oxidrii lipoproteinei cu densitate joas (LDL). Flavonele (diosmina, apigenina, luteolina), arat activitate biologic mai intens, chiar dac se ntlnesc n concentraii mult mai mici. Diosmina i rutina au demonstrat proprieti venotonice. Sunt incluse n numeroase produse farmaceutice. Apigenina i glucozidele lor au aciune antiinflamatoare bun, fr efecte adverse.

Grapefruitul ntrete sistemul imunitar. Datorit coninutului ridicat de vitamina C, grapefruitul reduce simptomele rcelii i severitatea acestora, previne afeciunile inflamatorii. Vitamina C apar organismul de aciunea nociv a radicalilor liberi, reducnd severitatea unor afeciuni inflamatorii precum osteoartrita, astmul i artrita reumatoid. Lupta mpotriva cancerului. Culoarea roz sau roie a grapefruitului este dat de licopen, un carotenoid cu aciune antitumorala. Dintre carotenoizi, licopenul are cea mai mare

capacitate de a lupta impotriva distrugerilor celulare cauzate de aciunea radicalilor liberi. Dintre citrice, sucul de grapefruit este cel mai bogat n antioxidani. Antioxidanii sunt substanele care apr organismul de aciunea duntoare a radicalilor liberi, care cauzeaz boli arteriale (arteroscleroza), cancer. Scade nivelul colesterolului "ru" (LDL). Previne formarea pietrelor la rinichi. Ofer protecie mpotriva cancerului pulmonar i de colon. Se folosete ca adjuvant n curele de slbire. Lmia lupt mpotriva cancerului. Lmile conin flavonoide cu aciune antioxidant i proprieti anticancerigene, care au capacitatea de a stopa diviziunea celulelor canceroase i au un efect antibiotic. Ofer protecie mpotriva cancerului bucal, pulmonar, mamar, stomacal, la colon i de piele. Uureaz simptomele osteoartritei i ale artritei reumatoide. Previne apariia aterosclerozei. Deoarece este recunoscut faptul c radicalii liberi distrug vasele sanguine i influeneaz nivelul colesterolului din snge, favoriznd depunerea acestuia pe pereii arterelor, vitamina C are rolul att de a preveni apariia arterosclerozei, ct i de a-i ncetini dezvoltarea. ntrete sistemul imunitar. Coaja i fructul lmiei au proprieti antiinflamatoare, venotonice, protectoare vasculare i purificatoare remarcabile. Portocala reduce hipertensiunea arterial i colesterolul. Cea mai important substan activ este hesperidina care are un rol semnificativ n reducerea hipertensiunii arteriale, a colesterolului "ru" i are proprieti antiinflamatorii. Ea este prezent n coaja de portocal i n pielia care nvelete miezul. ntrete sistemul imunitar. Previne osteoporoza. Are proprieti anticancerigene. Protejeaz inima de bolile cardiovasculare datorit coninutul ridicat de folai, potasiu (care reduce hipertensiunea arterial i tulburrile de ritm cardiac) i vitamina C. Are efecte pozitive n bolile: Alzheimer, Parkinson, diabet, scleroz multipl, artrit, astm, diabet, holer, gingivit, funcionarea optim a plmnilor, cataract, ajut la prevenirea obezitaii. Fructele portocalei sunt bogate n fibre, reducnd astfel nivelul colesterolului i prevenind apariia aterosclerozei. mpiedic formarea pietrelor la rinichi. Previne apariia ulcerului i a cancerului stomacal. Are grij de sanatatea sistemului respirator. Ofer protecie mpotriva artritei reumatoide.

Aciunea cea mai reprezentativ a uleiurilor vegetale, n afara celei de a fi un aromatizant natural deosebit, este cea antiseptic. Uleiurile volatile pot avea i o aciune antiviral, decongestiv, cicatrizant, stimulatoare asupra circulaiei i respiraiei. Vitamina C ajut sistemul imunitar s lupte mpotriva invadatorilor strini i a celulelor tumorale. Ca i antioxidant, rolul principal al vitaminei C este de a neutraliza radicalii liberi. Vitamina C susine sistemul cardiovascular prin facilitarea metabolismului grsimilor i protejarea esuturilor mpotriva daunelor radicalilor liberi i ajut sistemul nervos prin transformarea anumitor aminoacizi n neurotransmitori. Aceast vitamin contribuie la meninerea oaselor sntoase, la prevenirea bolilor parodontale i la vindecarea rnilor. Vitamina C este folosit ca aspirin natural, prin controlul inflamaiei i durerii. Vitamina C ajut organismul s absoarb fier i s descompun histamina, componenta inflamatorie din multe reacii alergice. IV. DETERMINAREA PRINCIPIILOR ACTIVE DIN CITRICE IV.1. DETERMINAREA PRINCIPIILOR ACTIVE DIN LMI Lmia are multe componente chimice naturale importante, inclusiv acid citric, acid ascorbic, minerale i flavonoide. Hesperidina, principala flavanon din lmi i alte specii Citrus, influeneaz permeabilitatea vascular, mrete rezistena capilar i are proprieti analgezice i antiinflamatoare. Diosmina este un flavonoid important n citrice. Aceasta flavon are importante aplicaii farmacologice, fiind ingredientul activ n anumite medicamente care sunt utilizate n tratamentul mai multor boli ale sistemului circulator. Acesta mbuntete tonusul muscular i rezistena vascular la procesele inflamatorii, motiv pentru care, este folosit mpotriva bolilor, cum ar fi insuficiena venoas cronic i artrita reumatic. Acesta posed proprieti antihemoroidale, antioxidante, de antiperoxidare a lipidelor i protejeaz mpotriva radicalilor liberi. Flavona eriocitrin este abundent n lmi i lmi verzi. Aceasta se obine din coaja citricelor i este folosit n numeroase complexe de multivitamine, cu activitate antioxidant, n meninerea integritii capilarelor i circulaiei periferice. Eriocitrina are cea mai mare activitate antioxidant dintre toate flavonoidele glicozidice, prezente n fructele lmilor. Extracia, identificarea i cuantificarea flavonoidelor

Pentru a extrage flavonoidele din diferite materiale de plante, acestea au fost mai nti uscate la 50C, ntr-un cuptor, la mas constant. Materialul vegetal uscat a fost fin mcinat i extras, timp de 30 de minute cu dimetilsulfoxid (DMSO), ntr-un raport de 6 mg substanta uscat/ml. Extractele corespunztoare au fost filtrate printr-o membran de nailon, de 0.45 m, nainte de analiza ntr-un cromatograf de lichide, Hewlett-Packard, modelul HP1050 (SUA), cuplat la o pomp cuaternar i injector automat, cu o detector cu reea de diode. Separarea cromatografic n faz invers a fost efectuat cu o coloan analitic C18 -Bondapak (Waters Associates, Milford, MA, S.U.A.), cu o dimensiune medie a particulelor de 5 m (250 x 4 mm), la 350C, elund ntr-un gradient izocratic, de ap/metanol/acetonitril/acid acetic (15:2:2:1), la un debit constant de 1ml/min. Modificrile n absorban s-au nregistrat ntr-un detector UV- Vizibil, cu retea de diode, la 280 nm. Aceti compui au fost cuantificati prin HPLC i rspunsul obinut a fost comparat cu standardele externe corespunztoare. Principalele flavanone i flavone studiate au fost colectate cu un colector de fracii (Pharmacia LKB Biotecnology, Uppsala, Suedia) la ieirea din coloana HPLC i identitile lor au fost confirmate prin comparaie cu spectrele lor de rezonan magnetic nuclear (RMN 1H Germania), n hexadeutero-DMSO. Nivelurile flavonoidelor din frunze, tulpini i flori de lmi Studiul HPLC al diferitelor extracte din lmi, a relevat prezena unui compus principal (compusul 2), cu un timp de retenie, care a coincis cu cel al flavanonei rutinozidice, hesperidina (RT = 15.5 min) i a doi compui minori (compuii 1 i 3), cu timpii de retenie de 4,6 min. i respectiv, 21,5 min., care coincid cu cele ale flavanonei eriocitrin i a flavonei diosmin (fig. 2). i RMN
13

C) (200 MHz) (Bruker,

Fig.2. Structurile chimice ale flavanonelor, eriocitrin, hesperidin i a flavonei diosmin. Spectrele de absorbie a acestor compui obinute cu un detector cu retea de diode in UV/Viz, au artat un maxim la 280 nm pentru compuii 1 i 2, i dou maxime, la 280 i 350 nm pentru compusul 3. Aceste date sunt n concordan cu compuii care au structur de flavanone corespunztoare eriocitrinei i hesperidinei (compuii 1 i 2) i structura flavonei corespunztoare diosminei (compusul 3). Cantitile obinute din frunze tinere, tulpini tinere i flori, pentru trei soiuri de lmie sunt prezentate n Tabelul 3. Tabel 3. Nivelurile hesperidinei, diosminei i eriocitrinei n frunze tinere, tulpini tinere i flori de lmi; Soiuri de lmi Lisbon Eureka Fino- 49 Frunze tinere Tulpini tinere Flori Frunze tinere Tulpini tinere Flori Frunze tinere Tulpini tinere Flori Flavonoide (g/100g substan uscat) Hesperidin Diosmin Eriocitrina 6.981.83 1.790.09 0.370.11 7.000.86 0.500.05 0.170.02 5.530.05 0.340.03 0.060.01 9.232.16 1.910.45 0.510.20 6.941.00 0.600.12 0.180.03 5.950.60 0.370.04 0.080.01 4.993.35 1.610.76 0.290.11 5.462.34 0.440.13 0.150.04 5.230.62 0.330.04 0.070.01

Hesperidina este flavanona principal, n toate organele analizate, ale soiurilor de lmi. Nivelurile acestei flavanone n florile tuturor soiurilor analizate au fost similare (5 g/100 g

substan uscat) n timp ce nivelurile de diosmin i eriocitrin au fost mai mici, dei, similare n toate cele trei soiuri (aproximativ 0,3g/100g substan uscat i respectiv 0,07g/100g substan uscat). Un studiu al nivelurilor flavonoidelor, din tulpini tinere i frunze tinere ale celor trei soiuri, au artat c nivelurile hesperidinei n tulpini au fost similare sau puin mai mici dect cele n frunze, n timp ce nivelurile diosminei i eriocitrinei au fost mai mici n tulpini dect n frunze. Cele mai ridicate niveluri de diosmin (1,91 g/100g sustan uscat) i eriocitrin (0.51g/100g substan uscat) s-au gsit n frunzele din soiul Eureka. Aceste rezultate sunt n concordant cu rezultatele obinute de ctre ali autori, care au demonstrat, existena flavanonelor i flavonelor n lmi. Rezultatele arat potenialul lmiei n furnizarea flavonoidelor de interes farmaceutic, din fructe imature czute (necomestibile) sau din produse secundare de prelucrare industrial. Determinarea limonoidelor din lamai Lmile (Citrus aurantifolia) sunt populare pentru aroma lor atractiv i unic, precum i pentru coninutul de vitamina C, flavonoide i alti compui biologic activi. O alt clas mare de substane fitochimice gsite n lmi sunt: limonoidele, flavonoidele, compuii fenolici acizi, cumarinele, alcaloizii i fitosterolii. Majoritatea limonoidelor sunt prezente n familiile Rutaceae i Maleaceae sub forma agliconelor i glucozidelor. Majoritatea agliconelor sunt amare la gust, n timp ce glucozidele sunt fr gust, fr miros i solubile n ap. Au fost identificate aproximativ 56 limonoide n citrice: limonina, nomilina, glucozida limoninei (LG) i glucozida acidului diacetil nomilinic.

Fig. 3. Structurile compuilor izolai din seminele de lmi: limonina, acid limonexic, acid izolimonexic, glucozida -sitosterolului i glucozida limoninei. Limonina, nomilina i glucozida limoninei au fost testate pentru capacitatea lor de a inhiba proliferarea celulelor canceroase mamare, umane, cu receptori negativi, de estrogen 435 MDA-MB, prin ncorporarea [3H] timidinei. Dintre compuii testai, nomilina a fost cea mai eficient, cu valoarea IC50 de 0,4 g/ml, urmat de limonin (12,5g/ml) i de glucozida limoninei (75g/ml). Glucozida -sitosterolului (SG) este utilizat n prevenirea obezitii datorit capacitii sale de reducere a absorbiei colesterolului n sistemul digestiv i capacitii de a reduce cantitatea de colesterol produs de ficat. n studiul efectuat, au fost purificai cinci compui din seminele de lmi, folosind tehnici cromatografice: TLC, HPLC i MS. Compuii purificai au fost testai pe celule pancreatice canceroase, umane pentru efectele de citotoxicitate i au fost investigate posibilele mecanisme de apoptoz. Materialul vegetal (fructele de lmi) a fost recoltat la sfritul lunii martie din 2006, dintro livad agricol din Bijapur (Karnataka, India). Seminele au fost separate manual i uscate la umbr, la t< 25C. Seminele uscate care aveau umiditatea mai mic de 8%, au

fost mcinate cu ajutorul unui blender. Seminele de lmi, mcinate (2.459 kg) au fost extrase ntr-un extractor Soxhlet, cu hexan, timp de 8 ore pentru eliminarea materiei grase. Proba mcinat, degresat a fost extras, succesiv, timp de 8 ore, cu patru solveni polari diferii: acetat de etil, aceton, metanol, metanol:ap (8:2) la 60-70C. Extractele au fost filtrate i concentrate sub vid, separat, pentru a obine concentrate vscoase. Randamentele acestor extracte au fost de 11.0 g/kg semine, pentru acetat de etil, 15.9 g/kg semine pentru aceton, 61.2 g/kg semine pentru metanol i 44.4 g/kg semine pentru metanol:ap. Aceste extrase au fost supuse analizei HPLC pentru determinarea compoziiei chimice.

Fig. 4: Cromatogramele HPLC ale compuilor izolai (1-5) din seminele de lmi. Aproximativ 37 aglicone limonoide i 19 glicozide limonoide au fost izolate din citrice i hibrizii lor. Studiile au artat c apoptoza este cauza major pentru inhibarea proliferrii

celulelor de cancer de colon de ctre limonoidele din citrice. P-53 este o protein care produce moartea i care are un rol vital n apariia cancerului. Mutaia genei P-53 a fost raportat n forme de cancer: de colon, pulmonar, esofagian, de sn, ficat, creier, esuturi reticuloendoteliale, i hemopoietice. Ali compui naturali care au demonstrat inducerea apoptozei mediate a genei P-53 sunt curcumina, resveratrolul, antocianii i capsaicina. Rezultatele studiului demonstreaz faptul c compuii bioactivi din lmi pot inhiba n mod eficient proliferarea celulelor canceroase pancreatice, umane prin intermediul apoptozei (moartea programat a celulelor). Rezultatele studiului indic beneficiile poteniale ale substanelor fitochimice din lmi n prevenirea cancerului pancreatic. Cu toate acestea, sunt necesare, studii suplimentare pe animale pentru a confirma aceste rezultate. Determinarea vitaminei C din citrice Scopul acestui studiu este de a evalua coninutul de vitamina C, din unele fructe exotice precum portocala, lmia, grapefruitul i kiwi. Vitamina C a fost determinat prin utilizarea unei reacii de oxidare-reducere. Pregtirea materiei biologice: pulpele fructelor citricelor (fructe de lmi, portocale, grapefruit i kiwi) au fost cntrite, apoi au fost stoarse pentru a obine sucul pentru titrare; au fost filtrate, trecute n soluie apoas i diluate la volum ntr-un balon cotat de 100 ml. n scopul evalurii coninutului de vitamina C din fructele citricelor, s-a folosit o titrare redox, care implic o metod iodometric. Ca solutie de titrare, s-a folosit soluia de iod. Iodura de potasiu trebuie adugat n exces pentru a menine iodul dizolvat. Iodul este combinat cu iodura pentru a forma triiodura, conform reaciei:

Triiodura oxideaz vitamina C la acid dehidroascorbic:

acid ascorbic

acid

dehidroascorbic Punctul final este indicat prin reacia iodului cu suspensia de amidon, care produce un complex albastru-nchis. Cnd toat vitamina C a fost oxidat, excesul de triiodur (n echilibru cu iod) reacioneaz cu amidonul, pentru a forma culoarea de albastru-nchis. Rezultatele obinute din studiul fructelor proaspete sunt prezentate n tabelul nr. 4. Tabel nr. 4. Coninutul de vitamina C din fructele exotice proaspete analizate; Fructe exotice proaspete Lmie Grapefruit Kiwi (verde) Portocal Vitamina C, mg/100g Date din literatur 65 50-100 98-190 50-100 Date experimentale 51.78 48.01 242.05 56.02

Cantitile experimentale de vitamina C, au fost diferite n comparaie cu valorile datelor din literatur. n general, aceste fructe exotice sunt bogate n acid ascorbic, i sunt studiate pentru importana lor asupra sntii organismului. Separarea principiilor active din cojile de lmie prin antrenarea cu vapori de ap Principiul metodei Antrenarea cu vapori de ap este un procedeu de distilare, o operaiune de purificare a unor substane ce nu pot fi distilate fr descompunere la presiune atmosferic sau pentru a realiza separarea substanelor dintr-un amestec, din care o substan este antrenabil cu vapori de ap, celelalte fiind neantrenabile (rmn n balonul din care se efectueaz operaia). Cazul cel mai important n practic al unei asemenea distilri l constituie distilarea cu vapori de ap, prin care substane insolubile n ap, sunt distilate prin introducerea vaporilor de ap n amestec, reuind s distile chiar i substane cu temperatura de fierbere mult peste 100oC. Aparatura (fig.5) folosit pentru efectuarea distilrii cu vapori de apa se compune din:
-

generator de vapori; dispozitiv de antrenare cu vapori de ap;

balon cu fundul rotund n care se introduce substana de antrenat i dispozitivul de antrenare; refrigerent Liebig (descendent), care condenseaz amestecul de vapori de ap i substan care se antreneaz; vasul de colectare al distilantului;

Fig 5. Antrenare vapori ap Mod de lucru Amestecul care urmeaz s fie supus distilrii cu vapori de ap (30 g de coji de lmie si 20 ml de ap), se introduce n balonul de antrenare, prevzut cu dispozitivul de antrenare, prin intermediul cruia se realizeaz legtura cu generatorul (cu ajutorul unui tub de cauciuc). Se ncepe nclzirea generatorului, cu tubul de siguran scos de la locul su. Numai dup ce apa a ajuns la fierbere i vaporii ies abundent prin orificiul tubului de siguran, acesta se fixeaz (ct mai aproape de fundul generatorului) cu ajutorul dopului, n lcaul su, astfel c din acest moment, vaporii ncep s treac n balon prin tubul lateral al generatorului. Se procedeaz astfel pentru a evita o eventuala aciune oxidant a amestecului de vapori de ap i aer atmosferic asupra substanei organice, care urmeaz s fie antrenat. Coninutul balonului se nclzete i el la nceput, pentru ca vaporii ce vin de la generator s nu se condenseze n lichidul rece din balon, mrind inutil volumul i prelungind drumul de antrenare. Dup ce distilatul ncepe s treac n refrigerent, nclzirea balonului de antrenare se oprete. Distilarea se continu pn cnd distilatul nu mai curge sub form de emulsie, sau nu mai antreneaz particule de substan, semn c vaporii de ap nu mai antreneaz nimic. Un control riguros al sfritului antrenrii trebuie efectuat cu ajutorul unui test, care identific produsul antrenat n lichidul condensat din refrigerent. Dup terminarea antrenrii, oprirea funcionrii instalaiei se face prin scoaterea tubului de siguran al generatorului, numai dup aceea se oprete i nclzirea. Procednd invers, are loc absorbia lichidului din balon n generatorul de vapori.

Interpretarea rezultatelor In urma efectuarii analizelor pentru determinarea flavonelor din lmie, s-au obtinut urmtoarele rezultate: Reactiv Culoare NaOH 30% precipitat NaOH 10% galben MgCl2 galben verzui FeCl3 verde kaki CuSO4 verde fosforescent H2SO4 galben rosiatic Saruri de diazoniu precipitat portocaliu

portocaliu portocaliu

IV.2. DETERMINAREA PRINCIPIILOR ACTIVE DIN PORTOCALA n acest studiu au fost utilizate 4 soiuri de portocale (Citrus Cinensis): Alanya, Finike W. Navel i Shamouti, cultivate n regiunea vest- mediteraneean din Turcia. Probele au fost obinute din provincia Antaliei, Turcia, n timpul sezonului de recoltare din 2003, i stocate ntr-un frigider pn ce au fost realizate analizele de laborator. Pentru fiecare soi de portocal, au fost selectate, aleatoriu, 50 de probe din pomi de portocali. Toate analizele au fost realizate la temperatura camerei, la 20-21C, timp de 2 zile, n perioada testelor de laborator. Pentru a determina compoziia mineral, probele au fost calcinate cu o soluie de acid azotic i acid percloric pe o plit fierbinte, la 200C, apoi a fost msurat absorbana extractului la un spectrofotometru de absorbie atomic. Concentraia de substane minerale a fost calculat cu o curb etalon pentru fiecare element. Coninutul de fosfor din extract, a fost analizat prin determinarea absorbanei culorii galbene, obinut din reacia Barton, utiliznd un spectrofotometru, la lungimea de und de 430 nm, i s-au comparat rezultatele cu curba etalon.

Proprietile nutritive ale sucului proaspt stors din cele 4 soiuri de portocale, sunt redate n tabelul nr. 5. Tabel nr.5: Proprietile nutritive a patru soiuri de portocale; Proprieti nutritive/Soiuri Materie uscat (g/100 ml) Alanya 11.000.03 Finike 12.820.02 W. Navel 12.480.01 Shamouti 12.200.02

Materie uscat solubil in ap 10.90.1 (Bx) Vitamina C (mg/100ml) pH Aciditatea titrabil (g/100 ml) Zahr reductor (g/100 ml) Zaharoz (g/100 ml) Zn (mg/l) Fe (mg/l) Cu (mg/l) K (mg/l) Mg (mg/l) Mn (mg/l) Na (mg/l) Ca (mg/l) P (mg/l) 51.511.05 3.190.03 1.3750.008

12.40.1 46.260.56 3.640.14 0.8410.013

12.10.1 38.690.21 3.620.03 0.6870.002

11.80.1 34.270.76 3.840.26 0.8750.009

4.020.04 4.160.04 1,700.12 0.860.06 0.540.01 136410 102.41.5 0.020.01 7.71.7 94.75.6 150.12.4

6.120.17 4.240.11 3..16008 1.400.14 2.770.07 110731 99.11.2 0.110.01 7.31.3 93.313.5 125.22.7

5.780.11 4.470.12 2.340.29 0.720.04 0.560.01 125518 96.60.1 0.050.03 12.70.9 53.74.4 157.51.7

6.090.04 3.330.1 1.720.31 0.700.05 1.370.01 10112 84.01.7 0.050.01 5.71.7 88.01.7 174.27.2

S-a descoperit faptul c, probele de portocalele sunt o surs de vitamina C, zaharuri i unele minerale precum K, Mg, Ca i P. Soiurile de fructe Finike i W. Navel conin cea mai mare cantitate de substan uscat i de zaharuri totale. Sucul din soiul Alanya conine cea mai mare cantitate de vitamina C, are cea mai mare aciditate liber i cel mai sczut pH. Sucul din acest soi prezint cel mai mic raport de zahr redus la zaharoz. n alte soiuri, cantitatea de zahr reductor a fost mai mare dect cantitatea de zaharoz. Cele mai mari cantiti de microelemente au fost gsite n sucul de soi Finike. Potasiul, a fost elementul major, prezent n probe, cu o variaie ntre 1011-1364 mg/kg n soiurile investigate. n general, cele mai multe dintre proprietile chimice ale soiului Shamouti au avut valori mai sczute dect proprietile chimice din alte soiuri.
V. UTILIZRILE CITRICELOR

Citricele dein un loc unic n regatul plantelor si ocup o poziie solitar n dieta omului. Citricele au un rol important n prelucrarea produselor alimentare. Fructele citricelor sunt consumate la nivel global sub form de fruct proaspt sau prelucrate sub forma de suc.

Cojile de citrice reprezint un material potenial pentru industria farmaceutic i alimentar deoarece acestea conin flavonoide, care sunt compui bioactivi importanti. Uleiurile volatile constituie o clas de principii active deosebit de valoroase pentru industria de parfum, cosmetic, farmaceutic i alimentar. Florile, lstarii tineri i epicarpul fructelor se folosesc pentru extragerea uleiurilor eseniale utilizate:

n industria alimentar, pentru a da arom buturilor i alimentelor; n cosmetic i farmaceutic pentru prepararea medicamentelor i spunurilor, parfumurilor i altor produse cosmetice, precum i pentru produse de curare;

D-limonenul este un component major al uleiului extras din cojile de lmie i portocal. Acesta este considerat ca fiind unul dintre cele mai pure surse de terpene monociclice, este folosit pentru solvenii industriali i ca element pentru sinteza altor substane chimice. Granulele pulpei citricelor sunt rezultatul conversiei cojilor i pulpei, care s-au eliminat odat ce sucul a fost extras, acestea fiind utilizate pentru creterea animalelor. Specia Citrus aurantium produce portocale amare utilizate pentru fabricarea buturilor, marmeladelor i prjiturilor. CONCLUZII Fructele citricelor sunt alimente atractive i nutritive, datorit culorii, formei, gustului unic i mirosului, mineralelor mbogite, vitaminelor i altor componente benefice. Recent fructele de citrice au fost studiate pentru diferitele beneficii pentru sntate. Acestea includ boli cardiovasculare, obezitate i cancer. Cercetrile efectuate au artat c este important s se consume citrice pentru prevenirea mbolnavirilor de diabet i a bolilor cardiovasculare. S-a dovedit faptul c soiurile de portocale sunt surse de vitamina C, zaharuri i unele minerale (K, Mg, Ca, P).