Diagnosticul bacteriologic al

TB
 Examenul microscopic

Se practica pe frotiu din proba

clinica respectiva si identifica
micobacteriile punand in evidenta
proprietatea de acid alcoolo-
rezistenta
Frotiul se prepara steril (ansa
bacteriologica), se usuca la aer(
la temperatura camerei sau pe o
platina incalzitoare),nu se usuca
la flacara
Fixarea : se tine lama cu pensa si
se trece partea opusa frotiului
prin flacara becului de gaz de 3
ori
 Coloratia ZIEHL-NEELSEN
Pentru evidentierea
BAAR este coloratia de
referinta
Se mai poate face cu
substante fluorescente:
cu auramina-rhodamina
Colorarea cu fuxina la
cald pentru a permite
intrarea colorantului in
interiorul micobacteriilor,
si astfel se coloreaza in
rosu
 Coloratia ZIEHL-NEELSEN
Decolorarea cu acid
alcool (alcool 70 si acid
sulfuric) pana la
disparitia macroscopica
a coloratiei rosii
Se decoloreaza toate
structurile cu exceptia
micobacteriilor care
raman colorate in rosu
Pt contrast recolorare cu
albastru de metilen
 Examenul microscopic
Ex se face la microscopul optic cu obiectiv cu
imersie 100x
Micobacteriile apar ca niste bastonase subtiri,
rosii, usor incurbate, +/_granulare, izolate sau
grupate in perechi sau grupuri, pe fond
albastru
Se numara BAAR de pe 100 de campuri
microscopice
Rezultatele se exprima cantitativ in functie de
densitatea bacililor pe lama
Sensibilitatea e relativ mica fiind necesara
prezenta a cp 10000 bacili/ml pt un rezultat
pozitiv
Exprimarea semicantitativa a rezultatelor ex mo
al sputei pt prezenta BAAR- obiectiv imersie
1000x
 Cultura micobacteriilor
Este metoda de referinta pentru diagnosticul TB
Permite identificarea tulpinei de micobacterie si
ulterior testarea sensibilitatii acesteia la
medicamentele antituberculoase
Probele clinice contaminate(sputa) trebuie
decontaminate cu antiseptice obisnuite si omogenizate
Ulterior se centrifugheaza si se neutralizeaza cu un
acid slab
Produsul astfel preparat sau direct daca e sterila proba
se inoculeaza pe mediile de cultura
 MEDIUL LWENSTEIN
JENSEN
Cultura pe medii solide reprezinta
standardul de referinta pt izolarea MTB
Perioada de crestere a MTB este de 4-6
saptamani
Cultura pe medii lichide cu detectie
radioactva /fluorescenta permite
detectarea lor in 1-2 saptamani
,dar e mai scumpa si mai putin disponibila
MEDIUL LWENSTEIN
JENSEN
 Cultura micobacteriilor
Coloniile MTB pe medii
solide sunt rorunde,
galben- palide,
conopidiforme, cu
suprafata rugoasa,
izolate sau confluente in
functie de densitatea
bacililor din inoculul
initial
Identificarea speciei se
face prin teste bichimice
Exprimarea rezultatelor
se face semicantitativ in
functie de densitatea
coloniilor
 REFERINTE

http://images.google.ro/imgres?imgurl=http://telmeds.org/AVIM/Abac
terio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/El_medio_de_cultivo_se_ll
ama_Lowenstein_Jensen.JPG&imgrefurl=http://telmeds.org/AVIM/A
bacterio/mycobacterias%2520y%2520nocardia/mycobacterias_nocardi
a.htm&h=600&w=900&sz=171&hl=ro&start=15&um=1&tbnid=4P7B
wIflgWEkmM:&tbnh=97&tbnw=146&prev=/images%3Fq%3DLowen
stein%2BJENSEN%26svnum%3D10%26um%3D1%26hl%3Dro%26l
r%3Dlang_ro%26sa%3DG

Tuberculoza- curs pentru studenti, 2004- Institutul de Pneumologie

Marius Nasta Programul National de Control al Tuberculozei

http://faculty.plattsburgh.edu/jose.deondarza/Bio406/Handouts/notes_
09.htm