Procesarea si

prezentarea
antigenului
 Celulele prezentatoare de antigen

Limfocitele T nu pot recunoaste antigene native

Limfocitele T recunosc fragmente de antigene procesate si prezentate de celulele prezentatoare de antigen

 Limfocitele T nu recunosc antigene (Ag) native

B B
B B B BB
YY B B
Y Y Y Y
YYY Y

Y
Y
Y

Y
Y
Y
Legare directa prin intermediul
imunoglobulinelor de suprafata Proliferare si producere
(BCR – B cell receptor) de anticorpi specifici
(raspuns imun umoral)
T T
Y Y
Nu se declanseaza raspuns
Receptorul pentru Ag al imun celular.
limfocitului T nu leaga direct Limfocitele T nu prolifereaza.
Ag-ul (TCR – T cell receptor) Nu se produc citokine.
 Pentru a putea fi recunoscute de limfocitele T
antigenele trebuie sa fie procesate
T
Y
TCR
Peptide antigenice prezentate
de celule prin intermediul
Ag solubil, Peptide moleculelor MHC
nativ Ag nativ solubile
atasat de derivate din Ag Peptide
suprafata antigenice la
celulara suprafata
celulara

PROCESAREA
ANTIGENULUI
Nu se Nu se Nu se
Nu se
genereaza genereaza genereaza
genereaza
Raspuns
raspuns raspuns raspuns
celular T celular T celular T
raspuns celular T!!!
celular T
Pentru a putea fi recunoscute de limfocitele T
antigenele trebuie
v sa fie procesate
Procesarea are loc
-in citosol (antigenele endogene) sau
-in veziculele caii endocitice (antigenele exogene)

Activarea limfocitelor T necesita interactiunea

dintre receptorul pentru antigen al celulei T (TCR)
si un complex format dintr-o molecula MHC self si
un peptid antigenic (complex Ag/MHC).
Peptidele antigenice pot proveni fie din antigene
endogene, fie din antigene exogene.
In interiorul celulelor exista doua compartimente
majore separate de membrane.
- citoplasma, care comunica cu nucleul prin porii
din membrana nucleara
- sistemul vezicular, care include reticulul
endoplasmatic, aparatul Golgi, endozomii,
lizozomii, etc. Acest sistem este in contact cu
fluidul extracelular (ex. endozomii preiau material
extracelular si il introduc in sistemul vezicular).
 Celulele prezentatoare de antigen
APC (Antigen Presenting Cells)

Dat fiind faptul ca majoritatea celulelor din organism

au pe suprafata fie molecule MHC I, fie MHC II, care
pot prezenta peptide limfocitelor T, toate ar trebui
denumite celule prezentatoare de antigen.

Prin conventie, insa, aceasta denumire revine doar

celulelor care exprima molecule MHC de clasa II si
prezinta antigenul limfocitului T CD4+ (APC profesionale),
in timp ce acele celule care prezinta un antigen in cupa
MHC I limfocitelor T CD8+ sunt denumite celule tinta.
 Celulele prezentatoare de antigen
APC (Antigen Presenting Cells)
Celulele prezentatoare de antigen profesionale

Exprima molecule MHC de clasa II

Prezinta antigene exogene

Limfocitului T “helper” CD4+

Limfocitele B
Macrofagele
Celule dendritice
 Celulele prezentatoare de antigen
Celulele prezentatoare de antigen
APC (Antigen Presenting Cells)
Celulele “tinta”

Exprima molecule MHC de clasa I

Prezinta antigene endogene

limfocitului T “citotoxic” CD8+

Majoritatea celulelor nucleate +

trombocitele
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T
Procesarea are loc
-in citosol (antigenele endogene) sau
-in veziculele caii endocitice (antigenele exogene)

Agentii infectiosi se pot replica in unul din cele doua compartimente

intracelulare:
-virusurile si chiar unele bacterii se replica in citoplasma
-cea mai mare parte a bacteriilor patogene si unii paraziti eucarioti se
replica in sistemul vezicular.
Pentru a dezvolta un raspuns imun eficient fata de microorganismele
patogene este necesar ca limfocitele T sa detecteze prezenta
structurilor straine in ambele compartimente intracelulare si, totodata,
este necesar ca limfocitele T sa poata discrimina intre cele doua
compartimente.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T

Generarea peptidelor presupune modificarea proteinei

native, proces numit procesarea antigenului, iar
expunerea peptidelor pe suprafata celulara, in contextul
moleculelor MHC self se numeste prezentarea
antigenului.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T

Moleculele MHC clasa I transporta pe suprafata

celulelor peptide provenite din patogeni
endogeni, prezenti in citosol; complexul
peptid/MHC I exprimat pe membrana celulara va
fi recunoscut de catre limfocitul T CD8+ (limfocit
citotoxic – CTL = cytotoxic T lymphocyte).

Moleculele MHC clasa II transporta peptide

derivate din patogeni exogeni, ajunsi in
sistemul vezicular; complexul peptid/MHC II
de pe suprafata celulei va fi recunoscut de un
limfocit T CD4+ (limfocit helper).
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T

Moleculele MHC clasa I transporta pe suprafata

celulelor peptide provenite din patogeni
endogeni, prezenti in citosol; complexul
peptid/MHC I exprimat pe membrana celulara va
fi recunoscut de catre limfocitul T CD8+ (limfocit
citotoxic – CTL = cytotoxic T lymphocyte).

Moleculele MHC clasa II transporta peptide

derivate din patogeni exogeni, ajunsi in
sistemul vezicular; complexul peptid/MHC II
de pe suprafata celulei va fi recunoscut de un
limfocit T CD4+ (limfocit helper).
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
PRELUARE
Antigenele/ patogenii sunt deja in interiorul celulei
(virusuri, proteine virale sintetizate in celula gazda,
bacterii intracelulare)
DEGRADARE
Antigenele sintetizate in citopasma sunt degradate
proteolitic in interiorul unei structuri denumite
PROTEAZOM
FORMAREA COMPLEXULUI Ag-MHC
Incarcarea peptidelor antigenice in cupa MHC I
PREZENTARE
Complexele Ag-MHC sunt transportate la suprafata
pentru a fi recunoscute de limfocitele T CD8+
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
PRELUARE
Antigenele/ patogenii sunt deja in interiorul celulei (virusuri,
proteine virale sintetizate in celula gazda, bacterii
intracelulare)
Antigenele endogene pot proveni de
la virusuri care paraziteaza o celula,
folosindu-i astfel “masinaria de
sinteza”, pentru a-si fabrica propriile
proteine. Odata cu proteinele
proprii, celula infectata viral
sintetizeaza si proteine virale.
Sinteza proteinelor self si non-self,
inclusiv a moleculelor MHC I si II se
realizeaza pe fata citosolica a
reticulului endoplasmatic (RE), de
unde sunt translocate in lumenul RE.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Degradarea antigenului
DEGRADAREA
Proteinele citoplasmatice sunt degradate prin intermediul unui complex
proteazic multicatalitic, denumit proteazom. La nivelul acestui compex
proteazic proteinele sunt degradate, iar peptidele rezultate sunt eliberate in
citoplasma.

Proteazomul are o structura cilindrica, fiind format din 28 de subunitati,

grupate in 4 inele. Nu se cunoaste modul in care proteazomul degradeaza
proteinele citoplasmatice. Este posibil ca proteina sa treaca prin centrul
structurii cilindrice, dar nu exista dovezi directe in acest sens.
Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC

Reticul endoplasmic

MHC clasa I

Peptidele antigenice
produse in citoplasma
vor trebui transportate
in lumenul reticulului
CITOSOL endoplasmic (RE)
pentru a fi incarcate in
cupa MHC I
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC
Lumenul RE
Lumen of ER
Peptide

Membrana RE
ER membrane
TTA
APP-1 A P-2 2
-1 P-1 TAP T AP-
TA -2 T
Citosol
Cytosol Peptid
Peptide
Antigene peptidice
degradate in
proteazom

Dupa degradarea enzimatica de la nivelul proteazomului,

peptidele generate, sunt transportate activ in lumenul RE, de
catre niste molecule transportoare, numite TAP-1 si TAP-2
(Transporters associated with Antigen Processing), prezente
ca heterodimer la nivelul membranei reticulului.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC
Lumenul RE
Lumen of ER
Peptid
Peptide

Membrana RE
ER membrane
TA
P-1 -1 TATP AP-2
P A-P2T
TA TAP-1 -2
Citosol
Cytosol Peptide

Dupa degradarea enzimatica de la nivelul proteazomului,

peptidele generate, sunt transportate activ in lumenul RE, de
catre niste molecule transportoare, numite TAP-1 si TAP-2
(Transporters associated with Antigen Processing), prezente
ca heterodimer la nivelul membranei reticulului.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC
Lumenul RE
Lumen of ER
Peptide

Membrana RE
ER membrane
TTA
APP-1 A P-2 2
-1 P-1 TAP T AP-
TA -2 T
Citosol
Cytosol Peptid
Peptide

Dupa degradarea enzimatica de la nivelul proteazomului,

peptidele generate, sunt transportate activ in lumenul RE, de
catre niste molecule transportoare, numite TAP-1 si TAP-2
(Transporters associated with Antigen Processing), prezente
ca heterodimer la nivelul membranei reticulului.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC
Lumenul RE
Lumen of ER
Peptid
Peptide

Membrana RE
ER membrane
TA
P-1 -1 TATP AP-2
P A-P2T
TA TAP-1 -2
Citosol
Cytosol Peptide

Dupa degradarea enzimatica de la nivelul proteazomului,

peptidele generate, sunt transportate activ in lumenul RE, de
catre niste molecule transportoare, numite TAP-1 si TAP-2
(Transporters associated with Antigen Processing), prezente
ca heterodimer la nivelul membranei reticulului.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Formarea complexului Ag-MHC
RE

Peptide
Peptid

TA - 2
P-1 1P-1 TATPAP-2TAP
PA-
TAT -2
Peptide

Peptidele
citoplasmatice
Calnexina sunt incarcate in cupa
se leaga de MHC I, iar complexul
lantul  al moleculei devine compact, stabil
2-microglobulina
de MHC clasa I, se leaga Tapasina, calreticulina,
pentru o stabiliza, si stabilizeaza TAP 1 si 2 participa la
pana la legarea 2- molecula de MHC formarea si stabilizarea
microglobulinei de clasa I complexului
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD8+
Prezentarea la suprafata celulara
Complexul Ag-MHC I este exportat la
suprafata membranara pentru a fi prezentat limfocitelor T CD8+

Complexul MHC care are cupa goala este

trimis in lizozomi pentru a fi degradat
Ajunse in lumenul RE, peptidele sunt preluate de catre moleculele MHC I care
asteapta intr-o forma partial pliata. In absenta peptidelor, moleculele MHC I sunt
instabile si suceptibile la degradare in RE. Complexele formate prin asocierea
moleculelor MHC I si peptide sunt eliminate din RE intr-o vezicula si transportate la
suprafata celulei, unde vor interactiona cu limfocitele T CD8+.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
PRELUARE
Preluarea antigenului in interiorul veziculelor
citoplasmatice: mediata de imunoglobuline
membranare (limfocitele B), fagocitoza
(macrofage), pinocitoza (celule dendritice)

DEGRADARE
Antigenele exogene sunt degradate in
interiorul endozomilor si lizozomilor prin
intermediul enzimelor proteolitice

FORMAREA COMPLEXULUI Ag-MHC II

Incarcarea peptidelor antigenice in cupa MHC II

PREZENTARE
Complexele Ag-MHC II sunt transportate la suprafata
pentru a fi recunoscute de limfocitele T CD4+
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
Preluarea antigenului
Preluarea
antigenului mediata
de imunoglobuline
membranare Fagocitoza
Y
Y
Y
Pinocitoza

Fagocitoza mediata Y Fagocitoza mediata

de receptorii de receptori Fc
pentru
complement
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
Degradarea antigenului
Suprafata celulara
Endozomi
Preluare

Cresterea
aciditatii
(scaderea pH-lui)
Scaderea pH-lui
duce la activarea Enzimele proteolitice
enzimelor (proteazele) degradeaza
proteolitice: antigenele in peptide de
catepsina B, D si L cca 24 aminoacizi
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
Lantul invariant
RE

Este necesar ca proteinele self
nou-sintetizate sa fie impiedicate
sa se lege in cupa moleculelor
imature de MHC II.
Pentru ca exista riscul asocierii moleculelor MHC II
cu peptide self sau cu cele derivate din antigene
citoplasmatice (destinate asocierii cu MHC I),
cupele MHC II vor fi ocupate, temporar, de o
molecula, numita lantul Ii (lantul invariant).
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
Formarea complexului MHC II-Ag
Suprafata celulara
Endozomi
Preluare

Complexele MHC II-lant Ii sunt preluate in vezicule transportoare (complex

Golgi). In drumul lor spre suprafata celulei, veziculele ce contin complexele
MHC II-lant Ii fuzioneaza cu veziculele ce contin peptidele generate prin
procesarea antigenului exogen.
 Generarea liganzilor pentru limfocitele T CD4+
Formarea complexului MHC II-Ag
Suprafata celulara
Endozomi
Preluare

Peptidul care se potriveste cel mai bine va inlocui lantul Ii din cupa MHC II.
Noul complex, format din peptid antigenic/MHC II este exprimat pe membrana
celulei si va fi recunoscut de un limfocit T CD4+. Moleculele MHC II care nu
reusesc sa lege peptide sunt rapid degradate in compartimentul endozomal.
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T

TCR Antigenele astfel prezentate sunt

recunoscute prin intermediul receptorului
CD8
TCR al limfocitelor T CD8+

Complex
Ag-MHC I

Celula infectata viral proceseaza antigenul

derivat din peptide virale endogene si il
prezinta la suprafata celulara in cupa MHC
de clasa I
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T

Recunoasterea
complexului peptid endogen-MHC de clasa I
de catre celula T CD8+ duce la uciderea
celulei tinta (ex. infectata viral)
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T
CD4
TCR Antigenele astfel prezentate sunt
recunoscute prin intermediul receptorului
Complex TCR al limfocitelor T CD4+
Ag-MHC II

Macrofagele (APC profesionale) preiau

antigenele exogene prin fagocitoza, le
proceseaza si le prezinta la suprafata
celulara in cupa MHC de clasa II
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T

Recunoasterea
complexului peptid exogen-MHC de clasa II
de catre celula T CD4+ de tip helper 1 (Th1)
duce la secretia unui set particular (Th1) de
citokine responsabile de activarea
macrofagelor si uciderea patogenului
extracelular
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T
CD4
TCR Antigenele astfel prezentate sunt
Complex recunoscute prin intermediul receptorului
Ag-MHC II TCR al limfocitelor T CD4+

Limfocitele B (APC profesionale)

preiau antigenele exogene prin
intermediul imunoglobulinelor de
suprafata, le proceseaza si le
prezinta la suprafata celulara in
cupa MHC de clasa II
 Consecintele biologice ale
recunoasterii
complexului peptid-MHC de
catre celula T

Recunoasterea
complexului peptid exogen-MHC de clasa II
de catre celula T CD4+ de tip helper 2 (Th2)
duce la secretia unui set particular (Th2) de
citokine responsabile de activarea
limfocitelor B care secreta anticorpi ce
elimina patogenul extracelular
 Concluziile cursului
Limfocitele T nu pot recunoaste antigene native

Limfocitele T recunosc fragmente de antigene procesate si prezentate de celulele prezentatoare de antigen

Procesarea are loc

-in citosol (antigenele endogene) sau
-in veziculele caii endocitice (antigenele exogene)

Prezentarea
-peptidelor derivate din antigene endogene limfocitelor T CD8+ are loc in cupa MHC I
-peptidelor derivate din antigene exogene limfocitelor T CD4+ are loc in cupa MHC II
 Concluziile cursului

Recunoasterea complexului peptid endogen-MHC de clasa I de catre celula T

CD8+ duce la uciderea celulei tinta (ex. infectata viral)

Recunoasterea complexului peptid exogen-MHC de clasa II de catre celula T

CD4+ de tip helper 1 (Th1) duce la secretia unui set particular (Th1) de citokine
responsabile de activarea macrofagelor si uciderea patogenului extracelular

Recunoasterea complexului peptid exogen-MHC de clasa II de catre celula T

CD4+ de tip helper 2 (Th2) duce la secretia unui set particular (Th2) de citokine
responsabile de activarea limfocitelor B care secreta anticorpi ce elimina
patogenul extracelular